Морфологические характеристики инфекции, вызываемой штаммом ЕР-2 вируса оспы коров у куриных эмбрионов и мышей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.06, кандидат биологических наук Виноградов, Илья Викторович

• Виноградов, Илья Викторович
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Виноградов, Илья Викторович

ОГЛАВЛЕНИЕ.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

I. ВВЕДЕНИЕ.

II. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Общая характеристика поксвирусов.

2. Репликативный цикл ортопоксвирусов.

3. Морфофункциональные изменения в зараженных ортопоксвирусами клетках.

4. Особенности взаимодействия ортопоксвирусов с клетками in vitro.

5. Репликация ортопоксвирусов на хорион-аллантоисной оболочке и в печени куриных эмбрионов (in ovo).

6. Характеристика поксвирусной инфекции у животных и человека.

7. Особенности инфекции, вызываемой вирусом оспы коров, у людей и животных.

8. Особенности течения инфекции, вызываемой вирусом оспы коров, у мышей.

III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

1. Материалы.

2. Заражение клеточных культур.

3. Заражение куриных эмбрионов.

4. Заражение мышей.

5. Определение биологической концентрации вируса в органах и тканях инфицированных мышей.

6. Светооптические исследования.

7. Электронно-микроскопические исследования.

IV. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

1. Ультраструктурные параметры репликации штамма ЕР-2 ВОК.

2. Особенности репликации штамма ЕР-2 ВОК в клеточных культурах.

3. Особенности инфекции штамма ЕР-2 ВОК на ХАО КЭ.

4. Особенности репликации штамма ЕР-2 ВОК в органах куриных эмбрионов.

5. Исследование инфекции, вызываемой штаммом ЕР-2 ВОК и штаммом К-1 вируса эктромелии при интраперитонеальном заражении мышей.

5.1. Светооптическое изучение органов мышей.

5.2. Ультраструктурное изучение органов мышей.

6. Исследование интраназальной инфекции, вызываемой штаммом ЕР-2 ВОК у молодых мышей линии BALB/C.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Морфологические характеристики инфекции, вызываемой штаммом ЕР-2 вируса оспы коров у куриных эмбрионов и мышей»

Актуальность проблемы. Одной из наиболее значимых проблем вирусологии является исследование биологических свойств возбудителей неизвестных и вновь возникающих инфекций, в том числе новых природных изолятов известных вирусов. К разряду таких инфекций относятся и ортопоксвирусные. Опасность заражения людей ортопоксвирусами сохраняется по сей день, несмотря на то, что в 1980 году Всемирная Организация Здравоохранения подписала свидетельство о глобальной ликвидации натуральной оспы на земном шаре. Периодически публикуются сообщения о вспышках заболеваний у людей, вызванных вирусами осповакцины, оспы обезьян, оспы буйволов и оспы коров в различных странах (Онищенко и др., 2001; Damaso et al., 2000; Маренникова и Щелкунов, 1998; Baxby et al., 1994). Вирус натуральной оспы, представитель рода Ортопоксвирусов, рассматривается зарубежными и отечественными экспертами в качестве одного из наиболее вероятных объектов применения в биотеррористических акциях (Онищенко и др., 2000; Henderson, 1999). Существование природного резервуара вируса оспы коров в популяциях диких грызунов и прекращение оспопрививания обуславливают рост количества заболеваний оспой коров, особенно среди не прошедшего вакцинацию населения. Опубликованные данные свидетельствуют, что чаще всего люди заражаются от кошек и диких грызунов (Stewart et al., 2000; Hawranek et al., 2003; Schupp et al., 2001; Lawn et al., 2003; Feuerstein et al., 2000).

Вирус оспы коров у человека обычно вызывает местное поражение покровных тканей с благоприятным прогнозом и выздоровлением (Stolz et al., 1996; Lawn et al., 2003; Schupp et al., 2001), однако возможны осложнения (Маренникова и Щелкунов, 1998; Baxby et al, 1994), особенно у невакцинированных и людей с подавленным иммунитетом. Потенциально наиболее опасными для человека являются природные малоизученные и неизученные изоляты вируса оспы коров (ВОК). Между тем, биологические свойства природных изолятов изучены недостаточно, публикации, посвященные их исследованию, единичны (Baxby and Ghaboosi, 1977; Колосова и др., 2003), а работы, посвященные изучению экспериментальной инфекции у животных, в реферируемой литературе отсутствуют.

Адекватные представления о размножении вируса и особенностях патологических изменений в инфицированном организме необходимы не только для понимания механизмов развития вирусной инфекции, но и для разработки экспериментальных моделей животных для испытаний противовирусных препаратов. Опубликованные экспериментальные исследования инфекции, вызванной ВОК, выполнены с использованием прототипного штамма Брайтон. На основе полученных результатов создана модель для испытания препаратов против ортопоксвирусов при аэрозольном и интраназальном заражении мышей (Bray et al., 2000; Bray et al., 2002; Martinez et al., 2000; Ferrier et al., 2002). Между тем, опубликованные результаты о характере патологических изменений внутренних органов и особенностях репродукции ВОК могут не соответствовать таковым при инфекции природными изолятами. Штамм Брайтон используется в вирусологической практике с 1937 г. (Downie, 1939), и его биологические свойства могли измениться в ходе пассажей.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования являлось изучение инфекции, вызываемой штаммом ЕР-2 ВОК в различных биологических системах микроскопическими и вирусологическими методами.

В процессе исследования решали следующие задачи: - исследование морфологических особенностей репликации штамма ЕР-2 ВОК в культурах клеток Vero, CV-1 и ФЭК; в клетках хорионаллантоисной оболочки и печени куриных эмбрионов; клетках органов мышей;

- изучение морфологии оспин, вызываемых штаммом ЕР-2 ВОК на хорион-аллантоисной оболочке куриных эмбрионов (ХАО КЭ);

- идентификация клеток-мишеней, поддерживающих репродукцию штамма ЕР-2 ВОК у куриных эмбрионов и мышей;

- изучение динамики изменений внутренних органов мышей при интраперитонеальном и интраназальном заражении разными дозами штамма ЕР-2 ВОК.

Научная новизна и практическая значимость работы. Впервые описаны ультраструктурные параметры репликации природного изолята ВОК в культурах клеток, клетках куриных эмбрионов и мышей. Определен спектр клеток-мишеней для штамма ЕР-2 ВОК у куриных эмбрионов и мышей при интраназальном и интраперитонеальном заражении. Впервые показано размножение ВОК в адипоцитах, поперечно-полосатых мышечных клетках, миосателлитах, ретикулярных и шванновских клетках мышей. Показана неспособность штамма ЕР-2 ВОК размножаться в клетках макрофагального ряда мышей, в отличие от вируса эктромелии.

Впервые для природного изолята ВОК приведена детальная морфологическая характеристика оспины на ХАО КЭ. Впервые изучено развитие инфекции у мышей, зараженных интраперитонеально и интраназально природным изолятом ЕР-2 ВОК, и выявлена зависимость исхода инфекции от возраста мышей. Впервые дана патогистологическая характеристика изменений внутренних органов мышей в динамике инфекции. Показан локальный характер размножения изолята ЕР-2 ВОК в органах мышей при интраперитонеальном и интраназальном заражении.

Полученные результаты могут быть использованы при разработке учебно-методических материалов по вирусологии и патоморфологии, а также служить основой для разработки экспериментальных моделей для изучения эффективности препаратов против ортопоксвирусов.

Положения, выносимые на защиту.

1. Причиной гибели молодых мышей, зараженных высокими дозами штамма ЕР-2 вируса оспы коров, является перитонит, вызванный массивным размножением вируса в тканях, граничащих с перитонеальной полостью.

2. Генерализация инфекции отсутствует при интраназальном и интраперитонеальном заражении мышей штаммом ЕР-2 вируса оспы коров.

3. Неспособность штамма ЕР-2 инфицировать макрофаги и продуцировать необходимое количество внеклеточного «одетого» вируса может быть причиной, препятствующей генерализации инфекции.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Вирусология», Виноградов, Илья Викторович

VI. ВЫВОДЫ

1. Ультраструктурные характеристики сборки и созревания вирионов штамма ЕР-2 вируса оспы коров в клетках культур (Vero, CV-1, ФЭК), куриных эмбрионов и мышей аналогичны описанным для других ортопоксвирусов. Особенностью штамма ЕР-2 является формирование крайне малого числа зрелых «одетых» вирионов.

2. У куриных эмбрионов штамм ЕР-2 вируса оспы коров размножается в клетках эпителия хориона, фибробластах мезенхимы, а также в эндотелиоцитах и гепатоцитах печени. Оспины, индуцированные на ХАО штаммом ЕР-2, характеризуются накоплением дочернего вируса в клетках, пролиферацией эпителия хориона, незначительной воспалительно-клеточной инфильтрацией и нарушением кровотока.

3. Исход инфекции у беспородных белых мышей, зараженных интраперитонеально штаммом ЕР-2 вируса оспы коров, зависит от возраста животных (при заражении равной дозой мыши массой 7-9 г болеют и погибают, а у мышей массой 10-14 г визуальные признаки заболевания отсутствуют). Инфекция у мышей, зараженных интраназально и интраперитонеально, носит локальный характер.

4. У мышей штамм ЕР-2 вируса оспы коров размножается в фибробластах, эндотелиальных, адвентициальных, и гладкомышечных клетках. При интраперитонеальном заражении вирус также размножается в миосателлитах, мезотелиальных, жировых и поперечно-полосатых мышечных клетках. При интраназальном заражении размножение вируса регистрируется в мерцательных, вставочных, базальных, бокаловидных, поддерживающих клетках воздухоносных путей и в шванновских клетках нервов.

Область патологических изменений, вызванных размножением штаммом ЕР-2 ВОК, определяется местом аппликации вирусной суспензии (перитонеальная полость и прилегающие ткани при интраперитонеальном введении; эпителий и подлежащая соединительная ткань носовой полости, трахеи и бронхов при интраназальном введении).

V. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Штамм ЕР-2 ВОК в различных клетках клеточных культур, куриных эмбрионов и мышей имеет идентичные параметры морфогенеза и вызывает сходные цитопатологические изменения. Особенностью репродукции штамма ЕР-2 в различных биологических системах является образование крайне небольшого количества «одетого» зрелого вируса и формирование 3-х вариантов включений А-типа.

Штамм ЕР-2 ВОК на ХАО КЭ, в условиях несформировавшегося иммунитета, вызывает формирование оспины, сопровождающееся интенсивной пролиферацией эпителия хориона, нарушением кровотока и незначительной воспалительно-клеточной инфильтрацией. Подобные изменения на ХАО описаны в оспинах, индуцированных прототипным штаммом Брайтон ВОК (Palumbo et al., 1989; Chua et al., 1990; Fredrickson et al., 1992). Штамм ЕР-2 ВОК у КЭ на ХАО размножался в эпителиоцитах хориона и фибробластах мезенхимы; в печени - в гепатоцитах, эндотелиоцитах и фибробластоидных клетках.

Тяжелое заболевание с летальным исходом развивалось только у молодых мышей (7-9 г), и/п зараженных высокими дозами штамма ЕР-2 ВОК; при этом причиной гибели было развитие выраженных патологических изменений в перитонеальной полости (перитонит). У мышей массой 10-14 г размножение штамма ЕР-2 ВОК было выявлено вирусологически, однако животные выздоравливали или вовсе не болели. Основные патологические изменения в зараженных тканях мышей характеризовались некрозами, вакуолизацией клеток, появлением вирус-специфических включений А-типа и нарушением кровотока. Воспалительная инфильтрация зон размножения вируса была умеренной.

При изучении и/п и и/н инфекции у мышей была обнаружена способность штамма ЕР-2 ВОК реплицироваться в фибробластах, эндотелиальных, адвентициальных, и гладкомышечных клетках. При и/п заражении вирус также размножался в миосателлитах, мезотелиальных, жировых и поперечно-полосатых мышечных клетках. При и/н заражении размножение вируса регистрировали в мерцательных, вставочных, базальных и бокаловидных клетках (респираторная зона носа, эпителий трахеи и бронхов), базальных и поддерживающих клетках (обонятельная зона носа), шванновских клетках нервов. При этом вирус размножался непосредственно по месту и/п и и/н введения или в участках, прямо контактировавших с ним, формируя ограниченные очаги. В клетках органов, удаленных от места аппликации, репродукция вируса отсутствовала. Таким образом, инфекция, вызываемая и/п и и/н введением штамма ЕР-2 ВОК мышам, носила локальный характер. Штамм Брайтон, и/н веденный мышам линии BALB/C, вызывал тяжелую генерализованную инфекцию, с гибелью животных (Martinez et al., 2000; Ferrier et al., 2002).

Из опубликованной литературы известно, что нарушение развития локальной воспалительной реакции на инфицированные клетки характерно для летальных вирусных инфекций (Salazar-Mather et al, 2000; Ryabchikova et al, 1999). Анализ полученных результатов позволяет полагать, что у молодых s мышей массой 7-9 г при высоких дозах (101 и 10 БОЕ/О, 1мл) воспалительная реакция в зонах репродукции вируса была недостаточна для подавления инфекции. У молодых мышей при меньших дозах (10 и 105 БОЕ/О, 1мл) и при всех дозах у мышей массой 10-14 г защитные механизмы организма были способны справиться с заболеванием, и животные выздоравливали.

Анализ полученных данных позволяет предположить, что локальный характер репродукции штамма ЕР-2 ВОК может быть отчасти обусловлен формированием очень малого числа внеклеточных «одетых» вирионов, ответственных за диссеминацию ортопоксвирусной инфекции (Blasco and Moss, 1992).

Другим фактором, обеспечивающим генерализацию вирусной инфекции, является заражение макрофагальных клеток (Lancaster et al., 1966). В частности, показано, что утрата способности размножаться в макрофагах приводит к резкому снижению вирулентности вируса эктромелии (Kochneva et al., 1994). Проведенное исследование показало неспособность штамма ЕР-2 ВОК размножаться в клетках макрофагального ряда (тканевые, альвеолярные и перитонеальные макрофаги, клетки Купффера). Очевидно, это свойство штамма ЕР-2 ВОК может в значительной мере определять локальный характер инфекции.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Виноградов, Илья Викторович, 2004 год

1. Быковский А.Ф., Ершов Ф.И., Кармышева В.Я., Блюмкин В.Н., Миронова JI.J1. Атлас вирусной цитопатологии. М: Медицина, 1975. - С. 21-23, 27.

2. Леннет Э., Шмидт Н. Лабораторная диагностика вирусных и риккетсиозных заболеваний. М: Медицина, 1974. - С. 92-93.

3. Мальцева Н.Н. Экспресс-диагностика заболеваний, вызываемых ортопокс-и некоторыми герпес вирусами. Дисс. докт. М., 1980.

4. Маренникова С.С., Щелкунов С.Н. Патогенные для человека ортопоксвирусы. М: КМК Scientific Press Ltd, 1998. 386с.

5. Маренникова С.С., Шелухина Э.М. Возможный источник «белых диких» (whitepox) поксвирусов. // Вопр. Вирусол. 1978. - № 3. - С. 327-328.

6. Мосс В. Репликация поксвирусов. / Вирусология (Под ред. Филдс Б. И Найп Д). Т. 3. - М: Мир, - 1989. - С. 246-275.

7. Ю.Оншценко Г.Г., Марков В.И., Устюшин В.Н., Борисевич С.В., Кузнецова

8. Г.И. Логинова С.Я., Бережной A.M., Васильев Н.Г., Максимов В.А., Махлай А.А. Выделение и идентификация вируса осповакцины, вызвавшего ятрогенную вакцинацию у детей в г. Владивосток. // Журн. Микробиол. 2001. - № 2. - С. 40-45.

9. П.Онищенко Г. Г., Сандахчиев Л. С., Нетесов С. В., Щелкунов С. В.• Биотерроризм как национальная и глобальная угроза // Журн. Микробиол. 2000. - № 6. - С. 83-85.

10. Рябчикова Е.И., Стрельцов В.В., Петров B.C. Субмикроскопические изменения хорион-аллантоисной оболочки куриных эмбрионов при заражении их вирусом осповакцины. // Вопр. Вирусол. 1990. - № 6. - С. 506-509.

11. Сафронов П.Ф. Секвенирование и анализ организации генома вируса оспы коров штамм GRI-90. Дисс. Канд. Кольцово, 2004.

12. Слепушкин А.Н. Семейство Poxviridae. В «Общая и частная вирусология».- Т. 2. М: Медицина, - 1982. - С. 340-374.

13. Стенко М.И. Кровь. / Справочник по клиническим лабораторным методам исследования (Под ред. Кост Е.А.). М: Медицина, - 1975 - С. 43.

14. Стрельцов В.В. Ультраструктурный анализ оспинообразования на ХАО РКЭ для генетически различных вариантов вируса осповакцины. Тез. конф. Вторая отраслевая конференция-конкурс молодых ученых 25-27• апреля 1990 года. Кольцово. 1990. - С. 41-42.

15. Струков А.И., Серов В.В. Патологическая анатомия. М: Медицина, -1985. - С. 447-449.

16. Шелухина Э.М. Биология и экология ортопоксвирусов, патогенных для человека. Дисс. докт. М., 1980.

17. Шелухина Э.М., Маренникова С.С. Генерализованная оспа обезьян у крольчат и белых мышей при пероральном заражении. // Вопр. Вирусол. -1975.-№6.-С. 703-705.

18. Уикли Б. Электронная микроскопия для начинающих. М: «Мир». - 1975. - С. 287-288.

19. Alcami A., Smith G.L. Vaccinia, cowpox, and camelpox viruses encode soluble gamma interferon receptors with novel broad species specificity. // J. Virol. -1995. Vol. 69(8). - P. 4633-4639.

20. Ali A.N., Turner P.C., Brooks M.A., Moyer R.W. The SPI-1 gene of rabbitpox virus determines host range and is required for hemorrhagic pock formation. // Virology. 1994. - Vol. 202(1). - P. 305-314.

21. Amano H., Tagaya I. Isolation of cowpox virus clones deficient in production of type A inclusions: relationship to the production of diffusible LS antigen. // J. Gen. Virol. 1981. - Vol. 54(1). - P. 203-207.

22. Baxby D. Variability in the characteristics of pocks produced on the chick chorioallantois by white pock mutants of cowpox and other poxviruses. // J. Hyg. Camb. 1969. - Vol. 67. - P. 637-647.

23. Baxby D. Laboratory characteristics of British and Dutch strains of cowpox virus. // Zbl. Vet. Med. Bd. 1975. - Vol. 22(6). - P. 480-487.

24. Baxby D., Bennett M., Getty B. Human cowpox 1969-1993: a review based on 54 cases. // Br. J. Dermatol. 1994. - Vol. 131(5). - P. 598-607.

25. Baxby D., Ghaboosi B. Laboratory characteristics of poxviruses isolated from captive elephants in Germany // J. Gen. Virol. 1977. - Vol. 37. - P. 407-414.

26. Begon M., Hazel S.M., Baxby D., Bown K., Cavanagh R., Chantrey J., Jones Т., Bennett M. Transmission dynamics of a zoonotic pathogen within andbetween wildlife host species. // Proc. R. Soc. Lond. B. 1999. - Vol. 266. - P. 1939-1945.

27. Begon M., Hazel S.M., Telfer S., Bown K., Carslake D., Cavanagh R., Chanrtey L., Jones Т., Bennett M. Rodents, cowpox virus and islands: densities, numbers and thresholds. // J. Anim. Ecol. 2003. - Vol. 72. - P. 343-355.

28. Bennett M. Cowpox in cats. // In. Pract. 1989. - Vol. 11(6). - P. 244-247.

29. Bennett M., Gaskell C.J., Baxby D., Gaskell R.M., Kelly D.F. Feline cowpox virus infection. // J. Smal. Anim. Pract. 1990. - Vol. 31. - P. 167-173.

30. Bennett M., Gaskell R.M., Gaskell C.J., Baxby D., Kelly D.F. Studies on poxvirus infection in cats. // Arch. Virol. 1989. - Vol. 104(1-2). - P. 19-33.

31. Betakova Т., Wolffe E.J., Moss B. The vaccinia virus A14.5L gene encodes a hydrophobic 53-amino-acid virion membrane protein that enhances virulence in mice and is conserved among vertebrate poxviruses. // J. Virol. 2000. - Vol. 74(9). - P. 4085-4092.

32. Biel S.S., Gelderblom H.R. Diagnostic electron microscopy is still a timely and rewarding method. // J. Clin. Virol. 1999. - Vol. 13(1-2). - P. 105-119.

33. Biel S.S., Gelderblom H.R. Electron microscopy of viruses. / In: Virus culture -a practical approach. (Ed. Cann A.J.) Oxford University Press. - 1999. - P. 111-147.

34. Blackford S., Roberts D.L., Thomas P.D. Cowpox infection causing a generalized eruption in a patient with atopic dermatitis. // Br. J. Dermatol. -1993. Vol. 129(5). - P. 628-629.

35. Blasco R., Moss B. Role of cell-associated enveloped vaccinia virus in cell-to-cell spread. // J. Virol. 1992. - Vol. 66(7). - P. 4170-4179.

36. Boulanger D., Smith Т., Skinner M.A. Morphogenesis and release of fowlpox virus. //J. Gen. Virol. 2000. - Vol. 81. - P. 675-687.

37. Bray M., Martinez M., Smee D.F., Kefauver D., Thompson E., Huggins J.W. Cidofovir protects mice against lethal aerosol or intranasal cowpox virus challenge. //J. Infect. Dis. 2000. - Vol. 181. - P. 10-19.

38. Bray M., Martinez M., Kefauver D., West M., Roy C. Treatment of aerosolized cowpox virus infection in mice with aerosolized cidofovir. // Antivir. Res. -2002. Vol. 54. - P. 129-142.

39. Brooks M.A., Ali A.N., Turner P.C., Moyer R.W. A rabbitpox virus serpin gene controls host range by inhibiting apoptosis in restrictive cells. // J. Virol. 1995. -Vol. 69(12).-P. 7688-7698.

40. Buller R.M.L., Chakrabarti S., Moss В., Fredrickson T. Cell proliferative response to vaccinia virus is mediated by VGF. // Virology. 1988. - Vol. 164. -P. 182-192.

41. Buller R.M.L., Palumbo G.J. Poxvirus pathogenesis. // Microbiol. Rev. 1991. -Vol. 55(1).-P. 80-122.

42. Buller R.M.L., Wallace G.D. Ectromelia (mousepox) virus. // Dev. Vet. Virol. -1988.-Vol. 6.-P. 63-82.

43. Carfi A., Smith C.A., Smolak P.J., McCrew J., Wiley D.C. Structure of a soluble secreted chemokine inhibitor vCCI (p35) from cowpox virus. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - Vol. 96(22). - P. 12379-12383.

44. Chantrey J., Meyer H., Baxby D., Begon M., Bown K.J., Hazel S.M., Jones Т., Mantgomery W.I., Bennett M. Cowpox: reservoir hosts and geographic range. // Epidemiol. Infect. 1999. - Vol. 122(3). - P. 455-460.

45. Chua T.P., Smith C.E., Reith R.W., Williamson J.D. Inflammatory responses and the generation of chemoattractant activity in cowpox virus-infected tissues. // Immunology. 1990. - Vol. 69. - P. 202-208.

46. Chung C.S., Hsiao J.C., Chang Y.S., Chang W. A27L protein mediates vaccinia virus interaction with cell surface heparan sulfate. // J. Virol. 1998. - Vol. 72(2).-P. 1577-1578.

47. Cudmore S., Reckmann I., Griffiths G., Way M. Vaccinia virus: a model system for actin-membrane interactions. // J. Cell. Sci. 1996. - Vol. 109(7). -P. 1739-1747.

48. Cuff S., Ruby J. Evasion of apoptosis by DNA viruses. // Immunol, and Cel. Biol. 1996. - Vol. 74. - P. 527-537.

49. Dales S., Kajioka R. The cycle of multiplication of vaccinia virus in Earle's strain L cells. 1. Uptake and penetration. // Virology. 1964. - Vol. 24. - P. 278294.

50. Dales S. and Mosbach E. H. Vaccinia as a model for membrane biogenesis. // Virology. 1968. - Vol. 35(4). - P. 564-583.

51. Damaso C.R.A., Esposito J.J., Condit R.C., Moussatche N. An emergent poxviruse from humans and cattle in Rio de Janeiro State: Contagalo vims may derive from Brazilian smallpox vaccine. // Virology. 2000. - Vol. 277. - P. 439-449.

52. Dick E.J., Kittell C.L., Meyer H., Farrar P.L., Ropp S.L., Esposito J.J., Buller R.M.L., Neubauer H., Kang Y.H., McKee A.E. Mousepox outbreak in a laboratory mouse colony. // Lab. Anim. Sci. 1996. - Vol. 46(6). - P. 602-611.

53. Domber E., Holowczak J.A. Vaccinia virus proteins on the plasma membranes of infected cells. IV. Studies employing L cells infected with ultraviolet-irradiated vaccinia virions. // Virology. 1986. - Vol. 152(2). - P. 331-342.

54. Doms R. W., Blumenthal R., Moss B. Fusion of intra- and extracellular forms of vaccinia virus with the cell membrane. // J. Virol. 1990. - Vol. 64(10). - P. 4884-4892.

55. Downie A.W. A study of the lesions produced experimentally by cowpox virus. // J. Path. Bacteriol. 1939. - Vol. 48(2). - P. 361-379. (Цит. по Маренникова и Щелкунов, 1998).

56. Fenner F. Adventures with poxviruses of vertebrates. // FEMS Microbiol. Rev. -2000.-Vol. 24.-P. 123-133.

57. Fenner F. Poxviruses / In: Fields Virology, Third Edition. (Ed.: Fields B.N. et al.). Philadelphia: Lippincott-Raven Publishers. - 1996. - P. 2675-2699.

58. Feore S.M., Bennett M., Chantrey J., Jones Т., Baxby D., Begon M. The effect of cowpox virus infection on fecundity in bank voles and wood mice. // Proc. R. Soc. Lond. B. 1997. - Vol. 264. - P. 1457-1461.

59. Ferrier A., Crance J.M., Garin D. P43 a model for cowpox virus pathogenesis and immunity based on intranasal infection of BALB/C mice. / Abstract of papers. XIV Annual poxvirus workshop. New York. - 2002. - P. 137.

60. Feuerstein-Kadgien В., Korn K. Cowpox infection. // N. Engl. J. Med. 2003. -Vol. 348(5).-P. 415.

61. Feuerstein В., Jurgens M., Schnetz E., Fartasch M., Simon J.M. Cowpox/catpox infection two case reports. // Der. Hautarzd. - 2000. - Vol. 51(11). - P. 852856.

62. Fonseca F.G.D., Silva R.L.A., Marques J.T., Ferreira P.C.P., Kroon E.G. The genome of cowpox virus contains a gene related to those encoding the epidermal growth factor alpha and vaccinia growth factor. // Virus Genes. -1999,- Vol. 18(2).-P. 151-160.

63. Fonseca F.G., Lanna M.C.S., Campos M.A.S., Kitajima E.W., Peres J.N., Golgher R.R., Ferreira P.C.P., Kroon E.G. Morphological and molecular characterisation of the poxvirus BeAn 58058. // Arch. Virol. 1998. - Vol. 143. -P. 1171-1186.

64. Fredrickson T.N., Sechler J.M., Palumbo G.J., Albert J., Khairallah L.H., Buller R.M. Acute inflammatory response to cowpox virus infection of the chorioallantoic membrane of the chick embryo. // Virology. 1992. - Vol. 187(2).-P. 693-704.

65. Gaskell R.M., Gaskell C.J., Evans R.J., Dennis P.E., Bennett A.M., Udall N.D., Voyle C., Hill T.J. Natural and experimental pox virus infection in the domestic cat. //Vet. Rec. 1983. - Vol. 112(8). - P. 164-170.

66. Gillet G., Brun G. Viral inhibition of apoptosis. // Trend. Microbiol. 1996. -Vol. 4(8). - P. 312-317.

67. Griffiths G., Roos N., Schleich S., Locker J.K. Structure and assembly of intracellular mature vaccinia virus: thin-section analyses. // J. Virol. 2001a. -Vol. 75(22).-P. 11056-11070.

68. Griffiths G., Wepf R., Wendt Т., Locker J.K., Cyrklaff M., Roos N. Structure and assembly of intracellular mature vaccinia virus: isolated-particle analyses. // J. Virol. 20016. - Vol. 75(22). - P. 11034-11055.

69. Grimley P.M., Rosenblum E.N., Mims S J., Moss B. Interruption by rifampin of an early stage in vaccinia virus morphogenesis: accumulation of membranes which are precursors of virus envelopes. // J. Virol. 1970. - Vol. 6(4). - P. 519533.

70. Haig D.M. Subversion and piracy: DNA viruses and immune evasion. // Res. Vet. Sci. 2001. - Vol. 70. - P. 205-219.

71. Haig D.M. Poxvirus interference with the host cytokine response. // Vet. Immunol, and Immunopath. 1998. - Vol. 63. - P. 149-156.

72. Hanson D., Diven D.G. Molluscum contagiosum. // Dermatol. Online. J. -2003.-Vol. 9(2). P. 2.

73. Hawranek Т., Tritscher M, Muss W.H., Jecel J., Nowotny N., Kolodziejek J., Emberger M., Schaeppi H., Hintner H. Feline Orthopoxvirus infection transmitted from cat to human. // J. Am. Acad. Dermatol. 2003. - Vol. 49(3). -P. 513-518.

74. Hazel S.M., Bennett M., Chantrey J., Bown K., Cavanagh R., Jones T.R., Baxby D., Begon M. A longitudinal study of on endemic disease in its wildlife reservoir: cowpox and wild rodents. // Epidemiol Infect. 2000. - Vol. 124(3). -P. 551-562.

75. Hazelton P.R., Gelderblom H.R. Electron microscopy for rapid diagnosis of emerging infectious agents. // Emerg. Infect. Dis. 2003. - Vol. 9(3). - P. 294303.

76. Helbert D. Smallpox and alastrim. Use of the chick embryo to distinguish between the viruses of variola major and variola minor. // Lancet. 1957. - Vol. 272. - P. 1012-1014.

77. Henderson D.A. The looming threat of bioterrorism // Science. 1999. - Vol. 283. - P. 1279-1282.

78. Herrera E., Lorenzo M.M., Blasco R., Isaacs S.N. Functional analysis of vaccinia virus B5R protein: essential role in virus envelopment is independent of a large portion of the extracellular domain. // J. Virol. 1998. - Vol. 72(1). -P. 294-302.

79. Hinrichs V., Van den Poel H., Van den Ingh T.S. Necrotizing pneumonia in a cat caused by an orthopox virus. // J. Сотр. Pathol. 1999. - Vol. 121(2). - P. 191-196.

80. Hiramatsu Y., Uno F., Yoshida M., Hatano Y., Nii S. Poxvirus virions: their surface ultrastructure and interaction with the surface membrane of host cells. // J. Electron. Microsc. 1999. - Vol. 48(6). - P. 937-946.

81. Hoare C.M., Bennett M. Cowpox in the cat. // Vet. Annu. 1985. - Vol. 25. - P. 348-351.

82. Hsiao J.C., Chung C.S., Chang W. Vaccinia virus envelope D8L protein binds to cell surface chondroitin sulfate and mediates the adsorption of intracellular mature virions to cells. //J. Virol. 1999. - Vol. 73(10). - P. 8750-8761.

83. Jackson D.C., Ada G.L., Tha Hla R. Cytotoxic T cells recognize very early, minor changes in ectromelia virus-infected target cells. // Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci. 1976. - Vol. 54. - P. 349-363. (Цит. no Buller and Palumbo, 1991).

84. Jacoby R.O., Bhatt P.N., Mousepox in inbred mice innately resistant or susceptible to lethal infection with ectomelia virus. I. Clinical responses. II. Pathogenesis. // Lab. Anim. Sci. 1987. - Vol. 37. - P. 9-22.

85. Janeczko R.A., Rodriguez J.F., Esteban M. Studies on the mechanism of entry of vaccinia virus in animal cells. // Arch. Virol. 1987. - Vol. 92. - P. 135-150.

86. Kajioka R., Siminovitch L., Dales S. The cycle of multiplication of vaccinia virus in Earless strain L cells. 2. Initiation of DNA synthesis and morphogenesis. // Virology. 1964. - Vol. 24. - P. 295-309.

87. Karupian G., Buller R.M.L., Rooijen N.V., Duarte C.J., Chen J. Different roles for CD4+ and CD8+ T lymphocytes and Macrophage subsets in the control of a generalized virus infection. // J. Virol. 1996. - Vol. 70(12). - P. 8301-8309.

88. Kit S., Dubbs D.R. Biochemistry of vaccinia-infected mouse fibroblasts (strain L-M). I. Effects on nucleic acid and protein synthesis. // Virology. -1962. Vol. 18.-P. 274-285.

89. Kochneva G.V., Urmanov I.H., Ryabchikova E.I., Streltsov V.V., Serpintsky O.I. Fine mechanisms of ectromelia virus thymidine kinase-negative mutants avirulence. // Virus Res. 1994. - Vol. 34(1). - P. 49-61.

90. Lancaster M.C., Boulter E.A., Westwood J.C., Randies J. Experimental respiratory infection with poxviruses, II: pathological studies. // Br. J. Exp. Pathol. 1966. - Vol. 47(5). - P. 466-471.

91. Lawn S.D., Planche Т., Riley P., Holwill S., Silman N., Bewley K., Rice P., Wansbrough-Jones M.H. A black necrotic ulcer. // The Lancet. 2003. - Vol. 361.-P. 1518.

92. Loeb W.F., Bannerman R.M., Rininger B.F., Johnson A.J. Hematologic Diseases. / In: Pathology of Laboratory Animals. (Ed. Benirschke K. et al.). -Vol. 1. New York: Springer-Verlag. - 1978. - P. 912-920.

93. Marchal J. Infectious ectromelia. A hitherto undescribed virus disease of mice. //J. Path. Bacteriol. 1930. - Vol. 33. - P. 713-728.

94. Marennikova S.S., Maltseva N.N., Korneeva V.I., Garanina N. Outbreak of pox disease among carnivora (felidae) and edentata. // J. Infect. Dis. 1977. -Vol. 135(3).-P. 358-366.

95. Martland M.F., Poulton G.J., Done R.A. Three cases of cowpox infection of domestic cats. // Vet. Rec. 1985. - Vol. 117(10). - P. 231-233.

96. Mazzone H.M., Wray G. and Engler W.F. The High voltage electron microscope in virology. // Adv. Virus. Res. 1985. - Vol. 30. - P. 43-82.

97. Meyer H., Neubauer H., Pfeffer M. Amplification of "Variola virus-specific" sequences in German Cowpox Virus Isolates. // J. Vet. Med. 2002. -Vol. 49. - P. 17-19.

98. Miller C.G., Shchelkunov S.N., Kotwal G.J. The cowpox virus-encoded homolog of the vaccinia virus complement control protein is an inflammation modulatory protein. // Virology. 1997. - Vol. 229(1). - P. 126-33.

99. Morgan С. Vaccinia virus reexamined: development and release. // Virology. 1976. - Vol. 73(1). - P. 43-58.

100. Moss B. Poxviridae: The viruses and their replication / In: Fields Virology. Third Edition. (Ed.: Fields B.N. et al.). Philadelphia: Lippincott-Raven Publishers. - 1996a. - P. 2637-2659.

101. Moss B. Genetically engineered poxviruses for recombinant gene expression, vaccination, and safety. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 19966. -Vol. 93.-P. 11341-11348.

102. Mullbacher A., Ron Tha Hla, Museteanu C., Simon M.M. Perforin is essential for control of ectromelia virus but not related poxviruses in mice. // J. Virol. 1999. - Vol. 73(2). - P. 1665-1667.

103. Muller G., Wlliamson J.D. Poxviridae. / In: Animal virus structure. Perspectives in Medical Virology. (Ed. Nermut M.V. and Steven A.C.). Vol. 3. - Amsterdam-New York-Oxford: Elsevier. - 1987. - P. 421-433.

104. Natuk R.J., Holowczak J.A. Vaccinia virus proteins on the plasma membrane of infected cells. III. Infection of peritoneal macrophages. // Virology. 1985. - Vol. 147(2). - P. 354-372.

105. Characterization of vaccinia virus intracellular cores: implications for viral uncoating and core structure. // J. Virol. 2000. - Vol. 74(8). - P. 3525-3536.

106. Payne L.G. The existence of an envelope on extracellular cowpox virus and its antigenic relationship to the vaccinia envelope. // Arch. Virol. 1986. - Vol. 90(1-2).-P. 125-133.

107. Payne L.G. Characterization of vaccinia virus glycoproteins by monoclonalmantibody preparations. // Virology. 1992. - Vol. 187. - P. 251-260.

108. Pogo B.G.T., Dales S. Biogenesis of poxviruses: further evidence for inhibition of host and virus DNA synthesis by a component of the invading inoculum particle. // Virology. 1974. - Vol. 58. - P. 377-386.

109. Ray C.A., Pickup D.J. The mode of death of pig kidney cells infected with cowpox virus is governed by the expression of the crmA gene. // Virology. -1996. Vol. 217(1). - P. 384-391.

110. Rayne B.J., Lewis H.B., Murchison Т.Е., Hart E.A. Hematology of1.boratory Animal. / In: Handbook of Laboratory Animal Science. (Ed. Melby E.C. and Altman Jr.N.H). Vol. 3. - Cleveland: CRC Press. - 1976. - P. 381461.

111. Reith R.W., Williamson J.D. Pathogenesis of vaccinia and cowpox infections. / Abstract of papers. Xlth Poxvirus and Iridovirus meeting. Toledo, ^ Spain. - 1996. - P. 98. (Цит. по Маренникова и Щелкунов, 1998).

112. Renatus M., Zhou О., Stennicke H.R., Snipas S.J., Turk D., Bankston L.A., Liddington R.C., Salvesen G.S. Crystal structure of the apoptotic suppressor GrmA in its cleaved form. // Structur. Fold. 2000. - Vol. 8(7). - P. 789-797.

113. Risco C., Carrascosa J.L. Visualization of viral assembly in the infected cell. // Histol. Histopethol. 1999. - Vol. 14. - P. 905-926.

114. Ryabchikova E.I., Kolesnikova L.V., Netesov S.V. Animal pathology of filoviral infections. // Curr. Top. Microbiol. Immunol. 1999. - Vol. 235. - P. 143-171.

115. Salazar-Mather T.P., Hamilton T.A., Biron C.A. A chemokine-to-cytokine-to-chemokine cascade critical in antiviral defense. // J. Clin. Invest. 2000. -Vol. 105(7).-P. 985-993.

116. Sanderson C.M., Hollinshead M., Smith G.L. The vaccinia virus A27L protein is needed for the microtubule-dependent transport of intracellular mature virus particles. // J. Gen. Virol. 2000. - Vol. 81. - P. 47-58.

117. Sanderson C.M., Way M., Smith G.L. Virus-induced cell motility. // J. Virol. 1998. - Vol. 72(2). - P. 1235-1243.

118. Saraiva M., Alcami A. CrmE, a novel soluble tumor necrosis factor receptor encoded by poxviruses. // J. Virol. 2001. - Vol. 75(1). - P. 226-233.

119. Schmelz M., Sodeik В., Ericsson M., Wolffe E.J., Shida H., Hiller G., Griffiths G. Assembly of vaccinia virus: the second wrapping cisterna is derived from the trans Golgi network. // J. Virol. 1994. - Vol. 68(1). - P. 130147.

120. Schupp P., Pfeffer M., Meyer H., Burck G., Kolmel K., Neumann C. Cowpox virus in a 12-year-old boy: rapid identification by an orthopoxvirus-specific polymerase chain reaction. // Br. J. Dermatol. 2001. - Vol. 145. - P. 146-150.

121. Smee D.F., Bailey K.W., Wong M.H., Sidwell R.W. Intranasal treatment of cowpox virus respiratory infection in mice with cidofovir. // Antivir. Res. -2000.-Vol. 47.-P. 171-177.

122. Smee D.F., Bailey K.W., Wong M.H., Sidwell R.W. Effects of cidofovir on the pathogenesis of as lethal vaccinia virus respiratory infection in mice. // Antivir. Res. 2001. - Vol. 52. - P. 55-62.

123. Smee D.F., Bailey K.W., Sidwell R.W. Treatment of lethal cowpox virus respiratory infection in mice with 2-amino-7-(l,3-dihydroxy-2-propoxy)methyl.purine and its orally active diacetate ester prodrug. // Antivir. Res. 2002a. - Vol. 54. - P. 113-120.

124. Smee D.F., Sidwell R.W. A review of compounds exhibiting anti-orthopoxvirus activity in animal models. // Antivir. Res. 2003. - Vol. 57. - P. 41-52.

125. Smee D.F., Sidwell R.W., Kefauver D., Bray M., Huggins J.W. Characterization of wild-type and cidofovir-resistant strains of camelpox, cowpox, monkeypox, and vaccinia viruses. // Antimicrobial. Agent. Chemother.- 20026. V. 46(5). - P. 1329-1335.

126. Smith G.L., Vanderplasschen A. Extracellular enveloped vaccinia virus. Entry, egress, and evasion. // Adv. Exp. Med. Biol. 1998. - Vol. 440. - P. 395414.

127. Smith V.P., Bryant N.A., Alcami A. Ectromelia, vaccinia and cowpoxviruses encode secreted interleukin-18-binding proteins. // J. Gen. Virol.- 2000. Vol. 81(5). - P. 1223-1230.

128. Sodeik В., Krijnse-Locker J. Assembly of vaccinia virus revisited: de novo membrane synthesis or acquisition from the host? // TRENDS Microbiol. -2002.-Vol. 10(1).-P. 15-24.

129. Soekawa M., Moriguchi R., Morita C., Kitamura Т., Tanaka Y. Electron-microscopical observation on the development of vaccinia, cowpox and monkeypox viruses in pig skin. // Zbl. Bakt. Hyg., I. Abt. Orig. A. 1977. -Vol. 237(4). - P. 425-443.

130. Spehner D., Gillard S., Drillien R., Kirn A. A cowpox virus gene required for multiplication in Chines hamster ovary cells. // J. Virol. 1988. - Vol. 62.• P. 1297-1304.

131. Stagles M.J., Watson A.A., Boyd J.F., More I.A., McSeveney D. The histopathology and electron microscopy of a human monkeypox lesion. // Trans. Roy. Soc. Trop. Med. Hyg. 1985. - Vol. 79. - P. 192-202.

132. Stannard L.M., Marais D., Kow D., Dumbell K.R. Evidence for incomplete replication of a penguin poxvirus in cells of mammalian origin. // J. Gen. Virol.• 1998.-Vol. 79.-P. 1637-1646.

133. Stern W., Dales S. Biogenesis of vaccinia: isolation and characterization of a surface component that elicits antibody suppressing infectivity and cell-cell fusion. // Virology. 1976a. - Vol. 75. - P. 232-241.

134. Stern W., Dales S. Biogenesis of vaccinia: relationship of the envelope to virus assembly. // Virology. 19766. - Vol. 75. - P. 242-255.

135. Stern R.J., Thompson J.P., Moyer R.W. Attenuation of B5R mutants ofrabbitpox virus in vivo is related to impaired growth and not an enhanced host inflammatory response. // Virology. 1997. - Vol. 233. - P. 118-129.

136. Stewart K.J., Telfer S., Bown K.J., White M.I. Cowpox infection: not yet consigned to history. // British. J. Plast. Surg. 2000. - Vol. 53(4). - P. 348-350.

137. Stolz N., Gotz A., Thomas P., Ruzicka Т., Suss R., Landthaler M., Mahnel H., Czerny C.P. Characteristic but unfamiliar the cowpox infection, transmitted by a domestic cat. // Dermatology. - 1996. - Vol. 193(2). - P. 140* 143.

138. Sutton J.S., Burnett J.W. Ultrastructural changes in dermal and epidermal cells of skin infected with molluscum contagiosum virus. // J. Ultrastruct. Res. -1969.-Vol. 26.-P. 177-196.

139. Telfer S., Bennett M., Bown K., Cavanagh R., Crespin L., Hazel S., Jones Т., Begon M. The effects of cowpox virus on survival in natural rodent populations: increases and decreases. // J. Anim. Ecol. 2002. - Vol. 71. - P. 558-568.

140. Tsutsui K., Uxo F., Akatsuka K., Nii S. Electron microscopic study on vaccinia virus release. // Arch. Virol. 1983. - Vol. 75. - P. 213-218.

141. Turner P.C., Moyer R.W. Poxvirus immune modulators: functional insights from animal models. // Virus Res. 2002. Vol. 88. - P. 35-53.

142. Vafai A., Rouhandeh H. Analysis of Yaba tumor poxvirus-induced proteins in infected cells by two-dimensional gel electrophoresis. // Virology. 1982. -Vol. 120. - P. 65-76.

143. Van den Broek M.F., Muller U., Huang S., Aguet. M., Zinkernagel R. M. Antiviral defense in mice lacking both alpha/beta and gamma interferon receptors. // J. Virol. 1995. - Vol. 69(8). - P. 4792-4796.

144. Vanderplasschen A., Hollishead M., Smith G.L. Intracellular and extracellular vaccinia virions enter cells by different mechanisms. // J. Gen. Virol. 1998. - Vol. 79. - P. 877-887.

145. Virus Taxonomy. / Seventh report of the international committee on taxonomy of viruses. (Ed. Van Regenmortel et al.). San Diego et al.:• Academic press. 2000. - P. 137-157.

146. Verlinde J.D. Koepokken bij de mens. // Tschr. Diergeneesk. 1951. - Bd. 76(9). - S. 334-342.

147. Vestey J.P., Yirrell D.L., Aldridge R.D. Cowpox/catpox infection. // Br. J. Dermatol. 1991. - Vol. 124(1). - P. 74-78.

148. Wallace G.D., Buller R.M.L. Kinetics of ectromelia virus (mousepox) 9 transmission and clinical response in C57BL/6J, BALB/cByJ and AKR/J inbredmice. 11 Lab. Anim. Sci. 1985. - Vol. 35. - P. 41-46.

149. Wesrwood J.C.N., Harris W.J., Zwartouw H.T., Titmuss D.H.J., Appleyard G. Studies on the structure of vaccinia virus. // J. Gen. Virol. 1964. - Vol. 34. -P. 67-78.

150. Wienecke R., Wolff H., Schaller M., Meyer H., Plewig G. Cowpox virus infection in an 11-year-old girl. // J. Am. Acad. Dermatol. 2000. - Vol. 42(5 pt2.. P. 892-894.

151. Wolfs T.F.W., Wagenaar J.A., Niesters H.G.M., Osterhaus D.M.E. Rat-to-human transmission of cowpox infection. // Emerg. Infect. Dis. 2002. - Vol. 8(12). - P. 1495-1496.

152. Zaucha G.M., Jahrling P.B., Geisbert T.W., Swearengen J.R., Hensley L. The pathology of experimental aerosolized monkeypox virus infection in cynomolgus monkeys (Macaca fascicular is). 11 Lab. Invest. 2001. - Vol. 81.1. P. 1581-1600.Ф