Микробиологический анализ на основе мономолекулярных пленок антител и сканирующей зондовой микроскопии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Будашов, Игорь Анатольевич

• Будашов, Игорь Анатольевич
• кандидат биологических наук
• 1998

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Будашов, Игорь Анатольевич

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Атомно-силовая микроскопия (АСМ)

1.1.1 АСМ-исследование микробиологических объектов

1.1.1.1 Бактерии и клеточные структуры бактерий

1.1.1.2 Вирусы

1.1.1.3 Другие клетки и клеточные структуры

1.1.2 Техника подготовки образцов для АСМ

1.1.2.1 Иммобилизация и подготовка объектов для АСМ

1.1.2.2 Модификация игл

1.1.3 АСМ-исследование различных свойств микробиологических объектов (механических, иммунных, биохимических, меж- и внутримолекулярных сил)

1.1.4 Манипулирование микрообъектами с помощью зонда

1.2 Ленгмюровская технология 57 ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Использованные материалы

2.2 Методы исследования 70 2.2.1 Формирование и перенесение ленгмюровских пленок

2.2.1.1 Формирование и перенесение ленгмюровских пленок амфи-фильных полиэлектролитов (АПЭ)

2.2.1.2 Формирование и перенесение ленгмюровских пленок АТ без АПЭ

2.2.1.3 Формирование и перенесение ленгмюровских пленок АТ с АПЭ

2.2.2 Простая адсорбция АТ

2.2.3 Снятие тс-А изотерм

2.2.4 Измерение иммунологической активности АТ (ИФА)

2.2.5 Изотермы адсорбции

2.2.6 Адсорбция микроорганизмов

2.2.6.1 Простая

2.2.6.2 Иммуноадсорбция

2.2.7 Гравиметрический анализ на основе кварцевых пьезоэлектрических резонаторов

2.2.8 Атомно-силовая микроскопия (АСМ) 76 ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 Ленгмюровские пленки АПЭ

3.2 Ленгмюровские пленки чистых АТ и АТ с АПЭ

3.3 АСМ-анализ микробиологических объектов

3.3.1 АСМ-анализ микробиологических объектов, неспецифически адсорбированных на подложки

3.3.2 АСМ-анализ риккетсий и бактерий, специфически адсорбированных на подложки

3.3.3 АСМ-анализ вирусов, специфически адсорбированных на подложки, и программа анализа изображений 133 ВЫВОДЫ 139 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Список сокращений.

АГ — антиген

АПЭ — амфифильные полиэлектролиты АСМ — атомно-силовая микроскопия AT — антитела

JIБ-пленки — ленгмюровские пленки (пленки Ленгмюра-Блоджетт) МАК-ЛМА — сополимер метакриловой кислоты и лаурилметакрилата

(мольное соотношение 1:9, степень полимеризации 100-300) o.e. — оптические единицы

ПВП — поли-4-винилпиридиний, алкилированный в 90 % звеньев лаурил-бромидом

ПЭИ-Л70 — полиэтиленимин линейный, модифицированный в 70%

мономерных звеньев лаурилбромидом ПЭИ-Р12 — полиэтиленимин разветвленный, модифицированный в 12%

мономерных звеньев цетилбромидом и в 88% этилбромидом ПЭМ — просвечивающая электронная микроскопия СЗМ — сканирующая зондовая микроскопия СЭМ — сканирующая электронная микроскопия ФБ — фосфатный буфер ЦФБ — цитрат-фосфатный буфер HBsAg — поверхностный антиген вируса гепатита В OD — оптическая плотность

СШф — оптическая плотность фона ОБаг — оптическая плотность антигена

тс0 — поверхностное давление в ленгмюровской ванне сразу после нанесения на поверхность водной субфазы полимера ли — поверхностное давление в ленгмюровской ванне после инкубации (15 мин) раствора антител с нанесенным на поверхность водной субфазы полимером лн — поверхностное давление в ленгмюровской ванне после сжатия барьера (давление нанесения ленгмюровской пленки на подложку)

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Микробиологический анализ на основе мономолекулярных пленок антител и сканирующей зондовой микроскопии»

ВВЕДЕНИЕ

Сканирующая зондовая микроскопия (СЗМ) — новый класс методов, основанных на измерении свойств поверхности в нанометровом и субнанометровом диапазоне. Микроскопия осуществляется сверхтонкими зондами, которыми сканируют поверхность образца, используя прецизионные пьезокерамические сканеры. В зависимости от типа зонда и измеряемых им свойств выделяют такие классы СЗМ [1]: 1) Туннельная микроскопия; 2) Атомно-силовая микроскопия; 3) Микроскопия ион-селективным электродом; 4) Микроскопия термопарой; 5) Оптическая абсорбционная микроскопия; 6) Магнитно-силовая микроскопия; 7) Электростатическая силовая микроскопия; 8) Акустическая микроскопия; 9) Оптическая микроскопия ближнего поля; 10) Криогенная микроскопия. Разработанные первыми сканирующий тунельный микроскоп (СТМ) [2,3] и атомно-силовой микроскоп (АСМ) [4,5] являются в настоящее время основными и наиболее широко применяемыми в науке и технике. Самый универсальный из СЗМ — АСМ позволяет получать топографические образы поверхности с атомарным разрешением на проводящих и непроводящих поверхностях в различных средах: воздух, любые газы, водные растворы, органические растворители, вакуум. Очень привлекательными для биологии являются возможности АСМ исследовать нативные препараты в водных буферах и с помощью химически модифицированных зондов изучать механические, иммунные,

биохимические свойства и даже измерять силы взаимодействия между отдельными молекулами и между частями молекулы.

Аналитическое применение АСМ для анализа вирусов, бактерий и отдельных биомолекул может быть отнесено к новому поколению биосенсоров. Высокочувствительный анализ химических соединений с использованием биосенсоров основан на преобразовании результатов специфического биомолекулярного взаимодействия в изменение физических свойств соответствующего детектора [6,7]. В последние годы было разработано и описано множество биосенсорных систем и устройств, включая моно и мультиферментные электроды и полевые транзисторы, амперометрические датчики на основе лиганд-рецепторных взаимодействий, датчики, использующие изменение свойств проникающей затухающей волны на границе двух оптических сред, термодатчики, клеточные и тканевые электроды, био- и хемолюминесцентные системы, молекулярные детекторы на основе нуклеиновых кислот [6,8,9]. Как правило, детекторы в биосенсорах измеряют экстенсивные свойства системы, связанные с наличием достаточного числа молекул, определяющих величину сигнала детектора. Обычно, для измерения требуется несколько тысяч соответствующих биомолекул (сенсорных элементов). Более того, сигнал используемых детекторов, чаще всего, неспецифичен, т.е. определяется не только специфическими молекулярными свойствами сенсорных биомолекул. Очевидно, что эти факты накладывают определенные ограничения на чувствительность и специфичность анализа с использованием биосенсоров.

Можно выделить два пути увеличения чувствительности и специфичности анализа с применением биосенсоров. Первый путь — это поиск и разработка молекулярных систем усиления результатов специфического биомолекулярного взаимодействия с последующей передачей сигнала на детектор. Кинетические принципы функционирования такого рода систем описаны в обзоре [10]. Наиболее яркими примерами молекулярных систем усиления в области биосенсоров являются: 1) субстратное усиление сигнала, предложенное ЗсИеПег [11], 2) биосенсорные системы на основе жидких кристаллов нуклеиновых кислот, разрабатываемые в лаборатории Ю.М.Евдокимова [12], 3) биосенсоры на основе живых клеток и тканей, использующие каскадные механизмы усиления гормонального сигнала, описанные в работах [7,9,13]. Второй путь — это путь использования систем регистрации сигнала, генерируемого отдельной клеткой или молекулой. Такого рода биосенсоры могут обеспечить исключительно высокую чувствительность [7]. Однако интерпретация сигнала может быть затруднена из-за низкой специфичности отклика. В этом случае осуществляют предварительное фракционирование сложной смеси. Так в работе [7] описано сопряжение высокоэффективного разделения методом капиллярного электрофореза с чувствительной детекцией отдельных составляющих смеси с использованием отдельных клеток. Аналитическим откликом клетки служила интенсивность флуоресценции красителя, пропорциональная концентрации внутриклеточного кальция. В качестве других параметров, измеряемых при том или ином воздействии на единичные клетки, обычно используют величину

трансмембранного тока и величину рН в непосредственной близости от клетки. Но, в любом случае, измеряемый сигнал интегрируется по всей клетке с пространственным разрешением 0,2-0,5 мкм. Собственно такое низкое разрешение и обуславливает низкую специфичность отклика единичных клеток и не позволяет интерпретировать сигнал на уровне изменения свойств отдельных биомакромолекул.

Использование методов сканирующей зондовой микроскопии (СЗМ) открывает новые возможности на пути увеличения специфичности и чувствительности биосенсорных систем. СЗМ и, в частности, сканирующая туннельная микроскопия (СТМ), атомно-силовая микроскопия (АСМ) обеспечивают регистрацию сигналов, связанных со свойствами поверхности исследуемого объекта, с разрешением менее, чем один нанометр. Это позволяет осуществлять измерение не только интегрального отклика от отдельных клеток или молекул, но и его пространственное распределение. Более того, современные СЗМ зонды позволяют одновременно получать сигналы в нескольких режимах: СТМ, АСМ, сил трения, оптический ближнего поля, что создает многомерный образ исследуемого объекта [1416]. Аналитический отклик системы в данном случае представляет собой многомерный образ отдельной клетки или молекулы, сформировавшийся в ответ на воздействие аналита. Специфичность такого отклика задается не только способностью используемых клеток или молекул реагировать на заданный аналит, но и характером собственно многомерного СЗМ образа. Таким образом, детекторы на основе СЗМ могут обеспечить новый дополнительный уровень селекции специфического сигнала.

Специфичность анализа микробиологических объектов в традиционных методах достигается использованием специфических AT. ACM предъявляет особые требования к поверхностям, покрытым AT. Они должны обладать не только высокими функциональными качествами, но и соответствовать критериям пригодности для исследования с помощью ACM: 1) поверхность должна быть достаточно ровной (по сравнению с зондовой иглой); 2) AT должны быть достаточно крепко связаны с поверхностью, так, чтобы зондовая игла не отрывала ни их, ни комплекс АТ-АГ при сканировании; 3) вся конструкция должна быть достаточно жесткой, чтобы получать четкие изображения.

Ранее в нашей лаборатории был исследован ряд амфифильных полиэлектролитов, позволяющих получать ленгмюровские пленки ферментов и фермент-медиаторных комплексов с высокой поверхностной концентрацией и сохранением их функциональных свойств [17-24]. Такие белковые пленки, имеющие твердую и достаточно крепко связанную с поверхностью полимерную матрицу, оказались удобны для исследования с помощью АСМ.

В данной работе была исследована следующая схема анализа с использованием АСМ:

1) Создание пленки, содержащей функциональные специфические антитела (AT), на поверхности, пригодной для АСМ.

2) Иммуносорбция анализируемого микробиологического объекта на специфическую подложку.

3) Получение АСМ-изображений поверхности.

4) Анализ изображений и распознавание образов микробиологических объектов.

Цель работы заключалась в разработке новой технологии формирования ЛБ-пленок AT с использованием амфифильных полиэлектролитов (АПЭ), и, на основе полученных аффинных покрытий, продемонстрировать возможность анализа методами АСМ вирусов, риккетсий и бактерий, модулирующих возбудителей особоопасных инфекций. При этом были поставлены следующие задачи:

1) разработать и оптимизировать методику получения ленгмюровских пленок AT с АПЭ на твердых подложках, пригодных для АСМ;

2) методом АСМ исследовать структурные особенности полученных пленок;

3) проверить возможность АСМ получать изображения модельных микробиологических объектов;

4) получить АСМ-изображения микробиологических объектов, специфически сорбированных на аффинные подложки;

5) осуществить распознавание полученных образов микробиологических объектов на АСМ-изображениях.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Будашов, Игорь Анатольевич

ВЫВОДЫ

1) Разработана базовая технология формирования аффинных покрытий на основе ленгмюровских пленок AT с АПЭ.

2) Методом АСМ исследованы структурные особенности ленгмюровских пленок AT на основе АПЭ.

3) Показана возможность специфической идентификации бактерий и риккетсий методом АСМ на аффинных пленках.

4) Показана возможность анализа вирусов, специфически сорбированных на полимер-антительные пленки, с использованием разработанной программы анализа изображений.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Будашов, Игорь Анатольевич, 1998 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Евдокимов М.В., Солонцов И.Л. - Микроскопия сканирующего зондирования в биологии. - Успехи соврем, биологии, 1992, т. 112, с.462-474.

2. Binnig G., Rohrer Н., Gerber Ch., Weibel E. - Surface study by scanning tunneling microscopy. - Phys. Rev. Lett., 1982, v.49, pp.57-60.

3. Бинниг Г., Popep Г. - Сканирующая туннельная микроскопия — от рождения к юности. - Успехи физ. наук, 1988, т. 154, №2, с.261-278.

4. Binnig G., Quate C.F., Gerber Ch. - Atomic force microscope. - Phys. Rev. Lett., 1986, v.56, pp.930-933.

5. Binnig G., Gerber Ch., Stoll E., Albrecht T.R., Quate C.F. - Atomic resolution with atomic force microscope. - Eur. Phys. Lett., 1987, v.3, pp.1281-1286.

6. Methods in Enzymology. Ed.-in-chief S.P. Colowick, N.O. Kaplan. Vol. 137: Immobilized enzymes and cells. Ed. by K. Mosbach. - San Diego etc.: Academic Press, Inc, 1988.

7. Schear J.B., Fishman H.A., Allbritton N.L., Gariagan D., Zare R.N., Scheller R.H. - Single cells as biosensors for chemical separations. - Science, 1995, v.267, pp.74-77.

8. Advances in Biosensors, v.l, ed. by Turner A.P.F. - London: JAI Press, 1991.

9. Uchiyama S., Reclmitz G.A. - Biosensors using flowers as catalytic material. - Anal. Lett., 1987, v.20, pp.451-470.

10. Курочкин И.Н., Попов Б.Н., Чернов С.Ф. - Физико-химические и физические принципы функционирования биосенсоров. - Биол. мембраны, 1990, т.7, №10, с.1068-1080.

11. Scheller F.W., Renneberg R., Schubert F. - Coupled enzyme reactions in enzyme electrodes using sequence, amplification, competition, and antiinter-ference principles. - In: Methods in Enzymology. Ed.-in-chief S.P. Colowick, N.O. Kaplan. Vol. 137: Immobilized enzymes and cells. Ed. by K. Mosbach. - San Diego etc.: Academic Press, Inc, 1988. - Pp.29-43.

12. Yevdokimov Y.M., Skuridin S.G., Chernuha B.F. - The background for creating biosensors based on nucleic acid molecules. - In: Edvances in Biosensors. Vol. 3: Biosensors: A Russian Perspective. Ed.: A.P.F. Turner, Yu.M. Yevdokimov. - Greenwich, London: JAI Press Inc., 1995. - Pp. 143164.

13. Pizzikoni V.B., Page D.L. - Imaging and characterization of macromolecular interface structures for whole cell biosensrs. - In: "Synthetic Microstrructures in Biologycal Reseach", ed. by Schnur J.M., Peckerar M. New York; London: Plenum Press, 1992. Pp.207-232.

14. Guckenberger R., Heim M., Cevc G., Knapp H., Wiegrabe W., Hillebrand A. - STM of insulators and biological specimens, based on lateral conductivity of ultrathin water films. - Science, 1994, v.266, pp. 1538-1540.

15. Hess H.F., Betzig E., Harris T.D., Pfeiffer L.N., West K.W. - Near-field spectroscopy of the quantum constituents of a luminescent system. -Science, 1994, v.264, pp. 1740-1745.

16. Magonov S.N., Whangbo M.-H. - Surface analysis with STM and AFM: experimental and theoretical aspects of image analysis. - Weinheim; New York; Basel; Cambridge; Tokyo: VCH, 1996.

17. Бармин A.B., Еременко A.B., Соколовский A.A., Чернов С.Ф., Курочкин И.Н. - Кинетический анализ мономолекулярных пленок глкжозооксидазы. - Биол. мембраны, 1993, т.Ю, №4, с.438-446.

18. Бармин А.В., Еременко А.В., Москвитина Т.А., Курочкин И.Н. -Ленгмюровские пленки моноаминоксидазы с амфифильными полиэлектролитами. Изучение каталитических свойств фермента. - Биол. мембраны, 1993, т.Ю, №6, с.647-654.

19. Бармин А.В., Еременко А.В., Курочкин И.Н. - Ленгмюровские пленки ферроценкарбоновой кислоты и глкжозооксидазы на основе амфи-фильных полиэлектролитов. - Биол. мембраны, 1994, т.11, №6, с.639-646.

20. Barmin A.V., Eremenko A.V., Sokolovskij A.A., Chernov S.F. - New catalytic properties of glucose oxidase in monomolecular films. - Biotechnol. Appl. Biochem., 1993, v. 18, pp.369-376.

21. Barmin A.V., Eremenko A.V., Kurochkin I.N., Moskvitina T.A. - New catalytic properties of monoamine oxidase immobilized in Langmuir-Blodgett films with amphiphilic polyelectrolytes. - Biotechnol. and Bioengineering, 1994, v.44, pp.849-853.

22. Barmin A.Y., Eremenko A.V., Kurochkin I.N., Sokolovskij A.A. - Cyclic voltammetry of ferrocenecarboxylic acid monomolecular films and their reaction with glucose oxidase. - Electroanalysis, 1994, v.6, pp.107-112.

23. Eremenko A.V., Kurochkin I.N., Chernov S.F., Barmin A.V., Yaroslavov A.A., Moskvitina T.A. - Monomolecular enzyme films stabilized by amphiphilic polyelectrolytes for biosensor devices. - Thin Solid Films, 1995, v.260, pp.212-216.

24. Kurochkin I.N. - Amphiphilic polyelectrolytes as the basis of the new generation of biosensors. - Advances in Biosensors, 1995, v.3, pp.77-109.

25. Магонов C.H. - Сканирующая силовая микроскопия полимеров и родственных материалов. - Высокомолек. соед., Б, 1996, т.38, с. 143182.

26. Яминский И.В. - Сканирующая зондовая микроскопия. Методы и аппаратура. - Рос. хим. журн., 1996, т.40, №1, с.111-120.

27. Solver. Сканирующий зондовый микроскоп: Руководство пользователя P4-SPM-MDT. - Москва-Зеленоград: NT-MDT, Гос. НИИ физических проблем им. Ф.И. Лукина, сентябрь 1996.

28. Putman C.A.J., van der Werf K.O., de Grooth B.G., van Hulst N.F., Greve J., Hansma P.K. - A new imaging mode in atomic force microscopy based on the error signal. - Proc. SPIE, 1992, v. 1639, pp. 198-204.

29. Ascoli C., Dinelli F., Frediani C., Petracchi D., Salerno M., Labardi M., Allegrini M., Fuso F. - Normal and lateral forces in scanning force microscopy. - J. Vac. Sci. Technol. B, 1994, v.12, №3, pp.1642-1645.

30. Burnham N.A., Colton R.J. - Measuring the nanomechanical properties and surface forces of materials using an atomic force microscope. - J. Vac. Sci. Technol. A, 1989, v.7, №4, pp.2906-2913.

31. Weisenhorn A.L., Hansma P.K., Albrecht T.R., Quate C.F. - Forces in atomic microscopy in air and water. - Appl. Phys. Lett., 1989, v.54, pp.2651-2653.

32. Weisenhorn A.L., Maivald P., Butt H.-J., Hansma P.K. - Measuring adhesion, attraction, and repulsion between surfaces in liquids with an atomic-force microscope. - Phys. Rev. B., 1992, v.45, №19, pp. 1122611232.

33. Baselt D.R., Baldeschwieler J. D. - Imaging spectroscopy with the atomic force microscope. - I. Appl. Phys., 1994, v.76, pp.33-38.

34. Radmacher M., Fritz M., Cleveland J.P., Walters D.R., Hansma P.K. -Imaging adhesion forces and elasticity of lysozyme adsorbed on mica by atomic force microscopy. - Langmuir, 1994, v.10, pp.3809-3814.

35. Hansma P.K., Cleveland J.P., Radmacher M., Walters D.A., Hillner P.E., Bezanilla M., Fritz M., Vie D., Hansma H.G., Prater C.B., Massie J., Fukunaga L., Gurley J., Elings V. - Tapping mode atomic force microscopy in liquids. - Appl. Phys. Lett., 1994, v.64, №13, pp.1738-1740.

36. Putman C.AJ., van der Werf K.O., de Grooth B.G., van Hulst N.F., Greve J. - Viscoelasticity of living cells allows high resolution imaging by tapping mode atomic force microscopy. - Biophys J., 1994, v.67, №4, pp.1749-1753.

37. Florin E.L., Radmacher M., Fleck B., Gaub H.E. - Atomic force microscope with magnetic force modulation. - Rev. Sci. Instrum., 1993, v.65, pp.639-643.

38. Xu S., Arnsdorf M.F. - Electrostatic force microscope for probing surface charges in aqueous solutions. - Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1995, v.92, №22, pp. 10384-10388.

39. Anselmetti D., Dreier M., Luthi R., Richmond T., Meyer E., Frommer J., Guntherodt H.-J. - Biological materials studied with dynamic force microscopy. - J. Vac. Sci. Technol. B, 1994, v.12, №3, pp.1500-1503.

40. Radmacher M., Tillmann R.W., Gaub H.E. - Imaging viscoelasticity by force modulation with the atomic force microscope. - Biophys J., 1993, v.64, pp.735-742.

41. Baselt D.R., Clark S.M., Youngquist M.G., Spenc C.F., Baldeschwieler J.D. - Digital signal processor control of scanned probe microscopes. - Rev. Sci. Instrum., 1993, v.64, pp.1874-1882.

42. Burnham N.A., Colton R.J., Pollock H.M. - Interpretation of force curves in force microscopy. - Nanotechnology, 1993, v.4, pp.64.

43. Maivald P., Buff H.-J., Gould S.A.C., Prater C.B., Drake B., Gurley J.A., Elings V.B., Hansma P.K. - Using force modulation to image surface elasticities with the atomic force microscope. - Nanotechnology, 1991, v.2, pp.103-110.

44. Radmacher M., Tillmann R.W., Fritz M., Gaub H.E. - From molecules to cells: imaging soft samples with the atomic force microscope. - Science, 1992, v.257, pp.1900-1905.

45. Radmacher M., Fritz M., Kacher C.M., Cleveland J.P., Hansma P.K. -Mesuring the viscoelastic properties of human platelets with the atomic force microscope. - Biophys. J., 1996, v.70, №1, pp.556-567.

46. Fritz M., Radmacher M., Petersen N., Gaub H.E. - Visualization and identification of intracellular structures by force modulation microscopy and drug induced degradation. - J. Vac. Sci. Technol. B, 1994, v. 12, №3, pp.1526-1529.

47. Vesenka J., Mosher C., Schaus S., Ambrosio L., Henderson E. -BioTechniques, 1995, v. 19, pp.240-246.

48. Anselmetti D., Baratoff A., Guntherodt H.-J., Gerber Ch., Michel B., Rohrer H. - Combined scanning tunneling and force microscopy. - J. Vac. Sci. Technol. B, 1994, v.12, №3, pp.1677-1680.

49. Mou J., Yang J., Shao Z. - An optical detection low temperature atomic force microscope at ambient pressure for biological research. - Rev. Sci. lustrum., 1993, v.64, pp. 1483-1488.

50. Wiegraebe W., Knapp H.F., Eberhart H., Gatz R., Hartmann T., Heim M., Lorek C., Guckenberger R. - A multifunctional scanning force microscopy for biological aplications. - Rev. Sci. Instrum., 1995, v.66, №8, pp.41244129.

51. Butt H.-J., Wolff E.K., Gould S.A.C., Northern D.B., Peterson C.M., Hansma P.K. - Imaging cells with the atomic force microscope. - J. Struct. Biol., 1990, v.105, pp.54-61.

52. Gould S.A.C., Drake B., Prater C.B., Weisenhorn A.L., Manne S., Hansma H.G., Hansma P.K., Massie J., Longmire M., Elings V., Northern B.D.,

Mukergee В., Peterson C.M., Stoeckenius W., Albrecht T.R., Quate C.F. -From atoms to integrated circuit chips, blood cells, and bacteria with the atomic force microscope. - J. Vac. Sci. Technol. A, 1990, v.8, pp.369-373.

53. Shibata-Seki Т., Watanabe W., Masai J. - Imaging of cells with atomic force microscopy operated at a "tapping". - J. Vac. Sci. Technol., 1994, v.12B, №3, ppl530-1534.

54. Яминский И.В., Пышкина O.A., Сергеев В.Г., Семенов А.Э., Филонов А.С. - Визуализация энтеробактерий с помощью атомно-силовой микроскопии. - Поверхность, 1998, № 2, с.76-78.

55. Bremer P.J., Geesey G.G., Drake В. - Atomic force microscopy examination of the topography of a hydrated bacterial biofikn on a copper surface. - Current Microbiology, 1992, v.24, pp.223-230.

56. Garcia A.A., Pettigrew W.C., Graham J. - BCG cell imaging using scanning probe microscopy. - Scanning. Microsc., 1993, v.7, pp.577-584.

57. Яминский И.В., Демин B.B., Бондаренко B.M. - Различия в клеточной поверхности гибридных бактерий Escherichia coli К12, наследующих rfb аЗ,4 ген Shigella flexneri, выявляемые с помощью атомно-силовой микроскопии. - Журн. микробиол., 1997, № 6, с. 15-18.

58. Kasas S., Fellay В., Cargnello R. - Observation of the action of penicillin on Bacillus subtilis using atomic force microscopy: technique for the preparation of bacteria. - Surface & Interface Analysis, 1994, v.21, №6-7, pp.400-401.

59. Beveridge T.J. - Bacterial S-layers. - Curr. Opin. Struct. Biol., 1994, v.4, pp.204-212.

60. Messner P., Sleytr U.B. - Crystalline bacterial cell surface layers. - Adv. Microbial Physiol., 1992, v.33, pp.213-275.

61. Baumeister W., Wildhaber I., Phipps B.M. - Principles of organization in eubacterial and archaebacterial surface proteins. - Can. J. Microbiol., 1989, v.35, pp.215-227.

62. Horber J.K.H., Haberle W., Ohnesorge F., Binnig G., Liebich H.G., Czerny C., Mahnel H., Mayr A. - Investigation of living cells in the nanometer regime with the scanning force microscope. - Scan. Microsc., 1992, v.6, pp.919-930.

63. Worcester D.L., Miller R.G., Bryant P.J. - Atomic force microscopy of purple membranes. - J. Microscopy, 1988, v.152, pp.817-821.

64. Worcester D.L., Kim H.S., Miller R.G., Bryant P.J. - Imaging baterio-rhodopsin lattices in purple membranes with atomic force microscopy. - J. Vac. Sci. Technol. A, 1990, v.8, pp.403-405.

65. Butt H.-J., Downing K.H., Hansma P.K. - Imaging the membrane protein bacteriorhodopsin with the atomic force microscope. - Biophys. J., 1990, v.58, pp.1473-1480.

66. Butt H.-J., Prater C.B., Hansma P.K. - Imaging purple membranes dry and in water with the atomic force microscope. - J. Vac. Sci. Technol. B, 1991, v.9, pp.1193-1196.

67. Muller D.L., Schabert F.A., Buldt G., Engel A. - Imaging purple membranes in aqueous solutions at sub-nanometer resolution by atomic force microscopy. - Biophys. J., 1995, v.68, №5, pp.1681-1686.

68. Schabert F.A., Rabe J.P. - Vertical dimention of hydrated biological samples in tapping mode scanning force microscopy. - Biophys. J., 1996, v.70, № 3, pp.1514-1520.

69. Yamada H., Hirata Y., Hara M., Miyake J. - Atomic force microscopy studies of photosynthetic protein membrane Langmuir-Blodgett films. - Thin Solid Films, 1994, v.243, №1-2, pp.455-458.

70. Yamada H., Hirata Y., Hara M., Miyake J. - Force modulation imaging of protein membranes. - J. Vac. Sei. Technol. A, 1995, v. 13, №3, pp.17421745.

71. Lai R., Kim H., Garavito R.M., Arnsdorf M.F. - Imaging of reconstituted biological channels at molecular resolution by atomic force microscopy. -Am. J. Physiol., 1993, v.265, №3, pp.C851-C856.

72. Schabert F.A., Engel A. - Reproducible acquisition of E. coli porin surface topographs by atomic force microscopy. - Biophys. J., 1994, v.67, pp.23942403.

73. Schabert F.A., Herrn C., Engel A. - Native Escherichia coli OmpF porin surfaces probed by atomic force microscopy. - Science, 1995, v.268, №5207, pp.92-94.

74. Baumeister W., Barth M., Hegerl R., Guckenberger R., Hahn R.M., Saxton W.O. - Three-dimensional structure of the regular surface layer (HPI layer) of Deinococcus radiodurans. - J. Mol. Biol., 1986, v.187, pp.241-253.

75. Wiegrabe W., Nonnenmacher M., Guckenberger R., Wolter O. - Atomic force microscopy of a hydrated bacterial surface protein. - J. Microscopy, 1991, v.163, pp.79-84.

76. Karrasch S., Dolder M., Schabert F., Ramsden J., Engel A. - Covalent binding of biological samples to solid supports for scanning probe microscopy in buffer solution. - Biophys. J., 1993, v.65, pp.2437-2446.

77. Firtel M., Southam G., Harauz G., Beveridge TJ. - The characterization of the cell wall of the sheathed methanogen Methanospirillum hungatei GP1 as an S layer. - J. Bacterid, 1993, v. 175, pp.7550-7560.

78. Southam G., Beveridge T.J. - Immunochemical analysis of the archaeobacterium Methanospirillum hungatei strain GP1. - J. Bacteriol., 1991, v. 173, pp.6213-6222.

79. Southam G., Beveridge T.J. - Characterization of a novel phenol soluble group of polypeptides which convey rigidity to the sheath of Methanospirillum hungatei strain GPL - J. Bacteriol., 1992, v.174, pp.935946.

80. Sprott G.D., Beveridge T.J., Patel G.B., Ferrante G. - Sheath disassembly in Methanospirillum hungatei GP1. - Can. J. Microbiol., 1986, v.34, pp.847854.

81. Firtel M., Southam G., Harauz G., Beveridge T.J. - The organization and arrangement of the multilayered plug of Methanospirillum hungatei. - J. Struct. Biol., 1994, v.112, pp.160-171.

82. Mulhern P.J., Hubbard T., Arnold C.S., Blackford B.L., Jericho M.H. - A scanning force microscopy with a fiber-optic-interferometer displacement sensor. - Rev. Sci. Instrum., 1991, v.62, pp.1280-1284.

83. Mulhern P.J., Blackford B.L., Jericho M.H., Southam G., Beveridge T.J. -AFM and STM studies of the interaction of antibodies with the S-layer

sheath of the archaeobacterium Methanospirillum hungatei. - Ultramicros-copy, 1992, v.42-44, pp. 1214-1221.

84. Yang J., Tamm L.K., Tillack T.W., Shao Z. - New approach for atomic force microscopy of membrane proteins: the imaging of cholera toxin. - J. Molec. Biol., 1993, v.229, pp.286-290.

85. Yang J., Mou J., Shao Z. - Structure and stability of pertussis toxin studies by in situ atomic force microscopy. - FEBS Lett., 1994, v.338, pp.89-92.

86. Mclntre T.M., Penner R.M., Brant D.A. - Observations of a circular, triple-helical polysaccharide using noncontact atomic force microscopy. -Macromolecules, 1995, v.28, №18, pp.6375-6377.

87. Gunning A.P., McMaster T.J., Morris Y.J. - Carbohydr. Polym., 1993, v.21, pp.47-51.

88. Gunning A.P., Kirby A.R., Morris V.J., Wells B., Brooker B.E. - Polym. Bull., 1995, v.34, pp.615-619.

89. Kirby A.R., Gunning A.P., Morris V.J., Ridout M.J. - Observation of the helical structure of the bacterial polysaccharide acetan by atomic force microscopy. - Biophys. J., 1995, v.68, №1, pp.360-363.

90. Xu W., Mulhern P.J., Blackford B.L., Jericho M.H., Templeton I. - A new atomic force microscopy technique for the measurement of the elastic properties of biological materials. - Scanning Microsc., 1994, v.8, pp.499-506.

91. Xu W., Mulhern P.J., Blackford B.L., Jericho M.H., Firtel M., Beveridge T.J. - A method for determining the elastic properties of biological material with an AFM. - Biophys. J., 1995.

92. Steven A.C., Couture E., Aebi U., Showe M.K. - Structure of T4 polyheads. - J. Mol. Biol., 1976, v.106, pp. 187-221.

93. Stemmer A., Hefti A., Aebi U., Engel A. - Scanning tunneling and transmission electron microscopy on identical areas of biological specimens. -Ultramicroscopy, 1989, v.30, pp.263-280.

94. Droz E., Taborelli M., Wells T.N.C., Descouts P. - Preparation of isolated biomolecules for SFM observations: T4 bacteriophage as a test sample. -Biophys. J., 1993, v.65, №3, pp.1180-1187.

95. Kolbe W.F., Ogletree D.F., Salmeron M.B. - Atomic force microscopy of T4 bacteriophages on silicon substrates. - Ultramicroscopy, 1992, v.42-44, pp.1113-1117.

96. Ikai A., Ikai K., Yoshimura K., Tomitori M., Nishikawa O., Kokawa R., Kobayashi M., Yamamoto M. - Scanning tunneling microscopy / atomic force microscopy studies of bacteriophage T4 and its tail fibres. - J. Vac. Sci. Technol. B, 1994, v.12B, pp.1478-1481.

97. Bushell G.R., Watson G.S., Holt S.A., Myhra S. - Imaging and nano-dissection of tobacco mosaic virus by atomic force microscopy. - J. Microsc., 1995, v.180, pp.174-181.

98. Zenliausern F., Adrian M., Emch R., Taborelli M., Jobin M., Descouts P. -Scanning force microscopy of tobacco mosaic virus as a test specimen. -Ultramicroscopy, 1992, v.42-44, pp.1168-1172.

99. Thundat T., Zheng X.-Y., Sharp S.L., Allison D.P., Warmack R.J., Joy D.C., Ferrell T.L. - Calibration of atomic force microscope tips using biomolecules. - Scan. Microsc., 1992, v.6, №4 pp.903-910.

100. Roberts C.J., Williams P.M., Davies M.C., Jackson D. E., Tendler S.J.B. -Atomic force microscopy and scanning tunnelling microscopy: refining techniques for studying biomolecules. - TIBTECH, 1994, v.12, pp.127-132.

101. Gad M., Ikai A. - Method for immobilizing microbial cells on gel surface for dynamic AFM studies. - Biophys. J., 1995, v.69, pp.2226-2233.

102. Pereira R.S., Parizotto N.A., Baranauskas V. - Observation of baker's yeast strains used in biotransformation by atomic force microscopy. - Appl. Biochem. Biotech., 1996, v.59, pp.135-143.

103. Zhang P.C., Bai C.L., Huang Y.M., Zhao H., Fang Y., Wang N.X., Li Q. -Atomic force microscopy study of fine structures of the entire surface of red blood cells. - Scanning. Microsc., 1995, v.9, pp.981-988.

104. Eppell S.J., Simmons S.R., Albrecht R.M., Marchant R.E. - Cell-surface receptors and proteins on platelet membranes imaged by scanning force microscopy using immunogold contrast enhancement. - Biophys. J., 1995, v.68, pp.671-680.

105. Fritz M., Radmacher M., Gaub H.E. - In vitro activation of human platelets triggered and probed by atomic force microscopy. - Experimental cell research, 1993, v.205, pp.187-190.

106. Fritz M., Radmacher M., Gaub H.E. - Granula motion and membran spreading during activation of human platelets imaged by atomic force microscopy. - Biophys. J., 1994, v.66, pp.1328-1334.

107. Le Grimellec C., Lesneewska E., Cachia C., Schreiber J.P., de Fornel F. -Imaging of the membrane surface of MDCK cell by atomic force microscope. - Biophys. J., 1994, v.67, №1, pp.36-41.

108. Spudich A., Braunstein D. - Large secretory structures at the cell surface imaged with scanning force microscopy. - Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1995, v.92, pp.6976-6980.

109. Braet F., Kalle W.H.J., De Zanger R.B., De Grooth B.G., Raap A.K., Tanke H.J., Wisse E. - Comparative atomic force and scanning electron microscopy: an investigation on fenestrated endothelial cells in vitro. - J. Microsc., 1996, v.181, №1, pp.10-17.

110. Henderson E., Haydon P.G., Sakaguchi D.S. - Actin filament dynamics in living glial cells imaged by atomic force microscopy. - Science, 1992, v.257, pp. 1944-1946.

111. Kreusel K.M., Adair J.R., Beeley N.R.A., Davies M.C., Jackson D.E., Roberts C.J., Tendler S.J.B., Williams P.M. - Conformational differences in two mutant hinge IgG4 antibodies observed by scanning tunneling microscopy. - J. Vac. Sci. Technol. B, 1994, v. 12, pp. 1517-1520.

112. Umemura K., Arakawa H., Ikai A. - Imaging of neurons by atomic force microscopy. - J. Vac. Sci. Technol. B, 1994, v.12, №3, pp.1470-1473.

113. Haydon P.G., Henderson E., Staley E.F. - Neuron, 1994, v. 13, pp. 12751280.

114. Lai R., Yu L. - Atomic force microscopy of cloned nicotinic acetylcholine receptor expressed in Xenopus oocytes. - Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993, v.90, pp.7280-7284.

115. Bonfigho A., Parodi M.T., Tonini G.P. - Subcellular details of early events of differentiation induced by retinoic acid in human neuroblastoma cells detected by atomic force microscope. - Exp. Cell Res., 1995, v.216, pp.73-79.

116. Paul J. K., Nettikadan S.R., Ganjeizadeh M., Yamaguchi M., Takeyasu K. -Molecular imaging of Na+,K+-ATPase in purified kidney membranes. -FEBS Lett., 1994, v.346, №2-3, pp.289-294.

117. Apell H.J., Colchero J., Linder A., Marti O., Mlynek J. - Na+,K+-ATPase in crystalline form investigated by scanning force microscopy. -Ultramicroscopy, 1992, v.42, pp.1133-1140.

118. Godie K.N., Pante N., Engel A., Aebi U. - Exploring native nuclear pore complex structure and conformation by scanning force microscopy in physiological buffers. - J. Vac. Sci. Technol. B, 1994, v.12, №3, pp.14821485.

119. Oberleithner H., Brinckmann E., Schwab A., Krohne G. - Imaging nuclear pores of aldosterone sensitive kidney cells by atomic force microscopy. -Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1994, v.91, pp.9784-9788.

120. Bustamante J.O., Liepins A., Prendergast R.A., Hanover J.A., Oberleithner H. - Patch clamp and atomic force microscopy demonstrate TATA-binding protein (TBP) interactions with the nuclear pore complex. - J. Membr. Biol., 1995, v.146, №3, pp.263-272.

121. Hoh J.H., Sosinsky G.E., Revel J.-P., Hasma P.K. - Structure of the extracellular surface of the gap junction by atomic force microscopy. -Biophys. J., 1993, v.65, pp.149-163.

122. Kaufmann J.-M., Guilbault G.G. - Enzyme electrode biosensors: theory and applications. In: Bioanalytical Applications of Enzymes. Vol.36. Suelter C.H., ed. New York: Wiley, 1992, pp.63-113.

123. Okusa H., Kurihara K., Kunitake T. - Chemical modification of molecularly smooth mica surface and protein attachment. - Langmuir, 1994, v. 10, №10, pp.3577-3581.

124. Legget G.J., Davies M.C., Jackson D.E., Roberts C.J., Tendier S.J.B., Willams P.M. - Studies of covalently immobilized protein molecules by scanning tunneling microscopy: the role of water in image contrast formation. - J. Phys. Chem., 1993, v.97, pp.8852-8854.

125. Allen S., Chen X., Davies J., Davies M.C., Dawkes A.C., Edwards J.C., Roberts C.J., Sefton J., Tendier S.J.B., Williams P.M. - Detection of antigen-antibody binding events with the atomic force microscope. -Biochemistry, 1997, v.36, pp.7457-7463.

126. MullerW., Ringsdorf H., Rump E., Wildburg G., Zhang X., Angermaier L., Knoll W., Liley M., Spinke J. - Attempts to mimic docking processes of the immune system: recognition-induced formation of protein multilayers. -Science, 1993, v.262, pp. 1706-1708.

127. Davies J., Roberts C.J., Tendier S.J.B. - A STM comparison of passive antibody adsorption and biotinylated antibody linkage to streptavidin on microtiter wells. - J. Immunol. Methods, 1994, v.167, №1-2, pp.263-269.

128. Karrasch S., Heins S., Aebi U., Engel A. - Exploring inter mediate filament structure with the scanning force microscope: Comparison with transmission electron microscope data. - J. Vac. Sei. Technol., 1994, v. 12, №3, pp. 14741477.

129. Matsuda T., Sugawara T. - Photochemical protein fixation on polymer surfaces via derivatized phenyl azido group. - Langmuir, 1995, v.ll, №6, pp.2272-2276.

130. Gombotz W.R., Hoffman A.S. - Gas-discharge techniques for biomaterial modification. - In: CRC Critical Reviews in Biocompatibility. D.F. Williams, editor. CRC Press, Boca Raton, FL., 1987, v.4, pp.1-42.

131. Droz E., Taborelli M., Descouts P., Wells T.N.C. - Influence of surface treetment and protein modification on IgG adsorption observed by scanning force microscope. - Biophys. J., 1994, v.67, pp.1316-1323.

132. Frediani C., Allegrini M., Ascoli C., Connolly P., Labardi M., Moores G., Arnaud P.E. - Nanotechnology, 1994, v.5, pp.95-100.

133. Mazzola L.T., Fodor S.P.A. - Imaging biomolecule arrays by atomic force microscopy. - Biophys. J., 1995, v.68, pp.1653-1660.

134. Wagner P., Kernen P., Hegner M., Ungewickell E., Semenza G. - Covalent anchoring of proteins onto gold-directed NHS-terminated self-assembled monolayers in aqueous buffers: SFM images of clathrin cages and triskelia. -FEBS Lett., 1994, v.356, pp.267-271.

135. Wagner P., Hegner M., Gunthrodt H.-J., Semenza G. - Formation and in situ modification of monolayers on template- stripped gold surfaces. -Langmuir, 1995, v.ll, pp.3867-3875.

136. Rief M., Oesterhelt F., Heymann B., Gaub H.E. - Singl molecule force spectroscopy on polysaccharides by atomic force microscopy. - Science, 1997, v.ll5, pp. 1295-1297.

137. Ludwig M., Dettman W., Gaub H.E. - Atomic force microscope imaging contrast based on molecular recognition. - Biophys. J., 1997, v.72, pp.445448.

138. Braet F., De Zanger R.B., Wisse E. - Drying cells for SEM, AFM and TEM by hexamethyldisilazane: a study on hepatic endothelial cells. - J. Microsc.,1997, v.186, №1, pp.84-87.

139. Kasas S., Ikai A. - A method for anchoring round shaped cells for atomic force microscope imaging. - Biophys. J., 1995, v.68, №5, pp.1678-1680.

140. Egger M., Heyn S.P., Gaub H.E. - Two-dimensional recognition pattern of lipid-anchored Fab' fragments. - Biophys. J., 1990, v.57, pp.669-673.

141. Heyn S.P., Egger M., Gaub H.E. - Lipid and lipid-protein monolayers spread from a vesicle suspension — a microfluorescence film balance study. -J. Phys. Chem., 1990, v.94/12, pp.5073-5078.

142. Egger M., Ohnesorge F., Weisenhorn A.L., Heyn S.P., Drake B., Prater C.B., Gold S.A.C., Hansma P.K., Gaub H.E. - Wet lipid-protein membranes imaged at submolecular resolution by atomic force microscopy. -J. Struct. Biol., 1990, v.103, №1, pp.89-94.

143. Weisenhorn A.L., Drake B., Prater C.B., Gold S.A.C., Hansma P.K., Ohnesorge F., Egger M., Heyn S.P., Gaub H.E. - Immobilized proteins in buffer imaged at molecular resolution by atomic force microscopy. -Biophys. J., 1990, v.58, pp.1251-1258.

144. Florin E.L., Moy V.T., Gaub H.E. - Adhesion forces between individual ligand-receptor pairs. - Science, 1994, v.264, pp.415-417.

145. Damrner U., Hegner M., Anselmetti D., Wagner P., Dreier M., Huber W., Gunthrodt H.-J. - Specific antigen/antibody interactions measured by force microscopy. - Biophys. J., 1996, v.70, pp.2437-2441.

146. Radmacher M., Fritz M., Cleveland J.P., Walters D.A., Hansma P.K. -Imaging adhesion forces and elasticity of lysozyme adsorbed on mica with the atomic force microscope. - Langmuir, 1994, v. 10, pp.3809-3814.

147. Radmacher M., Fritz M., Allersma M.W., Schmidt C.F., Hansma P.K. -Proc. SPIE - Int. Soc. Opt. Eng.,1995, v.2384, pp.136-143.

148. Berger C.E.H., van der Werf K.O., Kooyman R.P.H., de Grooth B.G., Greve J. - Functional group imaging by adhesion AFM applied to lipid monolayers. - Langmuir, 1995, v.ll, №11, pp.4188-4192.

149. Ludwig M., Moy V.T., Rief M., Florin E.-L., Gaub H.E. - Microsc., Microanal., Microstruct., 1994, v.5, pp.321-328.

150. Lee G.U., Kidwell D.A., Colton R.J. - Sensing discrete streptavidin-biotin interactions with atomic force microscopy. - Langmuir, 1994, v. 10, pp.354357.

151. Chilkoti A., Boland T., Ratner B.D., Stayton R.S. - The relation between ligand-binding thermodynamics and protein-ligand interaction forces measured by atomic force microscopy. - Biophys. J., 1995, v.69, pp.21252130.

152. Lee G.U., Chrisey L.A., Colton R.J. - Direct measurement of the forces between complementary strands of DNA. - Science, 1994, v.266, pp.771773.

153. Moy V.T., Florin E.-L., Rief M., Lehmann H., Ludwig M., Gaub H.E., Dornmair K. - Proc. SPIE - Int. Soc. Opt. Eng.,1995, v.2384, pp.2-12.

154. Boland T., Ratner B.D. - Direct measurement of hydrogen bonding in DNA nucleotide bases by atomic force microscopy. - Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 1995, v.92, №12, pp.5297-5301.

155. Jaschke M., Butt H.-J., Manne S., Gaub H.E., Hasemann O., Krimphove F., Wolff E.K. - The atomic force microscope as a tool to study and manipulate local surface properties. - Biosensors & Bioelectronics, 1996, v.ll, №6/7, pp.601-612.

156. Langmuir-Blodgett films. / Ed. by G. Roberts. - New York, London: Plenum Press, 1990.

157. Advanced Materials. Special issue "Thin organic films". 1991, v.3, №1.

158. Carr P.W., Bowers L.D. Immobilized enzymes in analytical and clinical chemistry. New York: Wiley Interscience Publishers, 1980.

159. Langmuir I. - The constitution and fundamental properties of solids and liquids. Part 2: Liquids - J. Amer. Chem. Soc., 1917, v.39, pp. 1848-1906.

160. Langmuir I. - Oil lenses on water and the nature of monomolecular expanded films - I. Chem. Phys., 1933, v.l, pp.756-776.

161. Blodgett K.B. Monomolecular films of fatty acids on glass - J. Amer. Chem. Soc., 1934, v.56, p.495.

162. Blodgett K.B. Films built by depositing successive monomolecular layers on a solid surface - J. Amer. Chem. Soc., 1935, v.57, pp.1007-1022.

163. Langmuir I., Blodgett K.B. Ueber einige neue Methoden zur Untersuchung von monomolekularen Filmen - Kolloid Z., 1935, v.73, pp.257-263.

164. Blodgett K.B., Langmuir I. - Built-up films of barium stearate and their optical properties - Phys. Rev., 1937, v.51, pp.964-982.

165. Langmuir I., Waugh D.F. - Pressure-soluble and pressure-displaceable components of monolayers of native and denaturated proteins - J. Amer. Chem. Soc., 1940, v.62, pp.2771-2793.

166. Gaines G.L. Insoluble monolayers at liquid-gas interfaces. New York: Wiley-Interscience Publishers, 1966.

167. Kuhn H. - Energieuebertragung in monomolekularen Schichten -Naturwissenschaften, 1967, v.54, pp.429-435.

168. Kuhn H. Functionalized monolayer assembly manipulation. - Thin Solid Films, 1983, v.99, pp.1-16.

169. Petty M.C. - Molecular engineering using the LB techniques. - In: Polymer surfaces and interfaces. Feast W.J., Munro H.S., ed., Chichester: John Wiley & Sons, 1987, pp.163-187.

170. Fuchs H., Ohst H., Prass W. - Ultrathin organic films: molecular architectures for advanced optical, electronic and bio-related systems. -Adv.Mater., 1991, v.3, pp.10-18.

171. Heckl W.M., Loesche M., Moehwald H. - Langmuir-Blodgett film containing proteins of the photosynthetic process. - Thin Solid Films, 1985, v.133, pp.73-81.

172. Fromlierz P. - Energy transfer to cytochrome c in an artificial lamellar system. - FEBS Lett., 1970, v.ll, pp.205-208.

173. Fromherz P. - Electron microscopic studies of lipid protein films. - Nature (London), 1971, v.231, pp.267-268.

174. Fromherz P. - A new technique for investigating lipid protein films. -Biochim.Biophys.Acta, 1971, v.225, pp.382-387.

175. Miyahara Y., Moriizumi T., Shiokawa S., Matsuoka H., Karube I., Suzuki S. - Micro urea sensor using semiconductor and enzyme-immobilizing technologies - J.Chem.Soc.Jpn., 1983, pp.823-830.

176. Arisawa S., Arise T., Yamamoto R. - Concentration of enzymes adsorbed onto Langmuir films and characteristics of urea sensor. - Thin Solid Films 1992, v.207, pp. 128-133.

177. Miyauchi S., Arisawa S., Arise T., Yamamoto R. - Study on the concentration of an enzyme immobilized by Langmuir- Blodgett films. Thin Solid Films, 1989, v. 180, pp.293-298.

178. Takatsu I., Moriizumi T. - Solid state biosensors using thin-film electrodes. -Sens.Actuators, 1987, v.ll, pp.309-317.

179. Onoue Y., Moriizumi T. - Langmuir-Blodgett films of glucose oxidase with different ranges of glucose detection concentrations. - Trans. Inst. Electr. Eng. Jpn. A., 1987, v.107, pp.97-99.

180. Moriizumi T. - Langmuir-Blodgett films as chemical sensors. - Thin Solid Films, 1988, v.160, pp.413-429.

181. Sriyudthsak M., Yamagishi H., Moriizumi T. - Enzyme-immobilized Langmuir-Blodgett film for a biosensor. - Thin Solid Films, 1988, v. 160, pp.463-469.

182. Tsuzuki H., Watanabe T.,Okawa Y., Yoshida S., Yano S., Koumoto K., Komiyama M., Nihei Y. - A novel glucose sensor with a glucose oxidase

monolayer immobilized by the Langmuir-Blodgett technique. - Chem. Lett, 1988, pp. 1265-1268.

183. Anzai J., Lee S., Osa T. - Enzyme-immobilized Langmuir-Blodgett membranes for biosensor application. Use of highly branched polyethyleneimine as a spacer for immobilizing of alpha-chymotrypsin and urease. - Makromol. Chem., Rapid Commun., 1989, v. 10, pp. 167-170.

184. Anzai J., Lee S., Osa T. - Enzyme sensors based on an ion-sensitive field effect transistor coated with LB membranes. Use of PEI as a spacer for immobilizing alpha-chymotrypsin. - Chem. Pharm. Bull., 1989, v.37, pp.3320-3322.

185. Anzai J., Lee S., Osa T. - Reactive Langmuir-Blodgett membrane for biosensor applications. Use of succinimidyl behenoate-based membranes as support for covalently immobilizing chymotrypsin. -Bull. Chem. Soc. Jpn., 1989, v.62, pp.3018-3020.

186. Okahata Y., Tsuruta T., Ijiro K., Ariga K. - Preparations of Langmuir-Blodgett films of enzyme-lipid complexes: a glucose sensor membrane. - Thin Solid Films, 1989, v. 180, pp.65-72.

187. Li J.R., Cai M., Chen T.F., Jiang L. - Enzyme electrodes with conductive polymer membranes and LB films. - Thin Solid Films, 1989, v.180, pp.205-210.

188. Зайцев С.Ю., Калабина Н.А., Зубов В.П. - Биосенсор на основе ленгмюровских пленок глюкозоксидазы. - Ж. анал. химии, 1990, т.45, pp. 1452-1455.

189. Nakagawa Т., Kakimoto М., Miwa Т., Aizawa М. - New method for fabricating Langmuir-Blodgett films of water-soluble proteins with retained enzyme activity. - Thin Solid Films, 1991, v.202, pp. 151-156.

190. Aizawa M., Owaku K., Matsuzawa M., Shinohara H., Ikariyama Y. -Molecular film technology for biosensors. - J. Membrane Sci., 1977, v. 2, pp. 125-128.

191. Katsube Т., Нага M. - High sensitiv biosensor with a junction FET. -In: Transducers'87 Tech. Dig., 4th Int. Conf. on Solid State Sensors and Actuators, 1987, Institute of Electrical Engineers of Japan, Tokyo, 1987, pp.816-819.

192. Turko I.V., Yurkevich I.S., Chashin V.L. - Langmuir-Blodgett films of immunoglobulin G for immunosensors. - Thin Solid Films, 1991, v.205, pp. 113-116.

193. Rothen A. Films of protein in biological processes - Advan.Protein Chern., 1947, v.3, pp. 123-137.

194. Cheesman D.F., Davies,J.T. Physicochemical and biological aspects of proteins at interfaces. - Advan.Protein Chem., 1954, v.9, pp.439-501.

195. Ishii Т., Muramatsu M. Spreadability of ovalbumin monolayers at air-water interface. - Bull.Chem.Soc.Jpn., 1971, v.44, pp.679-681.

196. MacRitchie F. Collapse of protein monolayers. - J. Colloid. Sci., 1963, v.18, pp.555-561.

197. Tatsuma Т., Tsuzuki H., Okawa J., Joshida S., Watanabe T. -Bifunktional Langmuir-Blodgett film for enzyme immobilization and amperometric biosensor sensitisation - Thin Solid Films, 1991, v.202, pp. 145-150.

198. Mumby S., Rabolt J.F., Swalen J.D. - Structural characterization of a polymer monolayer on a solid surface. - Thin Solid Films, 1985, v.133, pp.161-164.

199. Furuno Т., Sasabe H., Ulmer K. - Binding of ferritin molecules to a charged polypeptide layer of poly-l-benzyl-L-histidine. - Thin Solid Films, 1989, v.180, pp.23-26.

200. Пшежецкий B.C., Лукьянова А.П., Кабанов B.A. Исследование гидролиза я-нитрофениловых эфиров на полиэтиленимине -синтетическом высокомолекулярном катализаторе - аналоге альфа-химотрипсина - Биоорган, химия, 1975, т.1, с.950-957.

201. Leatherbarrow R.J. - ENZFITTER. Cambridge: Elsevier-Biosoft, 1987.

202. Зайцев C.B., Курочкин И.Н. Варфоломеев С.Д. - Современные проблемы биокинетики. - М: Изд-во моек, ун-та, 1987, с. 198.

203. Филонов А.С., Яминский И.В. - Полный програмный пакет управления и обработки данных для сканирующей зондовой

микроскопии "Фемтоскан-001". - M: Центр перспективных технологий, 1997, с. 10. 204.Варфоломеев С.Д., Зайцев C.B. - Кинетические методы в биохимических исследованиях. Ред. Березин И.В. - Изд-во московского ун-та, 1982. С.344.