Механизмы гибели опухолевых клеток при действии новых углеводных производных индолокарбазолов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат биологических наук Татарский, Виктор Вячеславович

• Татарский, Виктор Вячеславович
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Татарский, Виктор Вячеславович

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ:.

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ.

Глава 5. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизмы гибели опухолевых клеток при действии новых углеводных производных индолокарбазолов»

Актуальность проблемы

Исследование эффективности низкомолекулярных химических соединений как прототипов противоопухолевых лекарств - актуальная проблема, решение которой требует объединения усилий биологов, химиков, фармакологов, специалистов по экспериментальной терапии и клиницистов. Несмотря на значительные достижения биоорганической и медицинской химии, развитие молекулярно-биологических методов и их применение к задачам практической медицины, потребность в новых соединениях с высоким терапевтическим потенциалом остается высокой. Создание противоопухолевых лекарств сегодня включает труд тысяч специалистов на протяжении, как правило, не менее 10 лет, объединяя академических исследователей, фармацевтическую индустрию и клинический сектор.

Поиск и изучение механизмов действия новых и уже открытых химических соединений проводится с использованием постоянно расширяющегося набора соединений. Важно, чтобы поиск эффективных соединений включал группы веществ, зарекомендовавших себя как активные соединения. Так, индолокарбазолы и их производные - интенсивно исследуемый класс противоопухолевых химических соединений. В частности, большое значение имеют производные, содержащие углеводные остатки, присоединенные к фармакофору. Среди таких производных впервые были обнаружены соединения, удовлетворяющие требованиям предклинических тестов и успешно преодолевшие 1-П фазы клинических испытаний (N6506, эдотекарин, мидостаурин, СЕР-701, энцестаурин). Следовательно, индолокарбазолы и их углеводсодержащие производные перспективны для дальнейшей оптимизации химической структуры.

Новые соединения требуют детального исследования молекулярных механизмов их действия. Требуется выявление внутриклеточных мишеней и изучение механизмов взаимодействия новых веществ с этими биомолекулами. Взаимодействие с мишенью (мишенями) - важнейший первоначальный акт, результатом которого станут индукция гибели клеток и активация механизмов их выживания. Из понимания характера взаимодействия с мишенью следует дальнейший анализ механизмов цитотоксичности. Новые производные соединений известного химического класса могут по-иному взаимодействовать с мишенями, чем исходное соединение (прототип) - в этом, вероятно, и заключается причина большей или меньшей эффективности производных. Поэтому в диссертационной работе взаимодействию новых производных индолокарбазолов с внутриклеточными мишенями уделено наибольшее внимание.

Современные представления о механизмах гибели опухолевых клеток включают многообразие процессов, существенных для реализации этого феномена. Такая сложность вызвана, в частности, недостаточной определенностью представлений о мишенях цитотоксичности. В настоящей диссертации мы обосновываем представление о связи цитотоксичности с концентрацией химического соединения: при минимальных концентрациях происходит "насыщение" мишени, аффинность к которой у исследуемого соединения наибольшая. В этой ситуации ответ клетки будет обусловлен одними механизмами, а при увеличении концентрации токсина и его взаимодействиями с менее аффинными мишенями -другими механизмами или их совокупностью. Следовательно, выяснение механизмов гибели клеток не может ограничиваться простыми констатациями "апоптоз", "некроз" и др. -требуется детальное исследование сложного феномена цитотоксичности в зависимости от ряда экспериментальных условий. В свою очередь, эти условия моделируют клинические ситуации, когда дозировка лекарственного препарата варьирует от состояния пациента, предшествующей терапии и др.

Таким образом, установление механизмов гибели опухолевых клеток при действии индолокарбазолов и их углеводсодержащих производных необходимо для направленного поиска производных, обладающих приемлемыми противоопухолевыми свойствами и меньшей общерезорбтивной токсичностью. Этот прикладной аспект диссертации базируется на фундаментальном характере исследований механизмов гибели клеток эукариот в ответ на токсический стресс. Обе стороны исследования важны для достижения прогресса в решении актуальной проблемы - установления механизмов гибели опухолевых клеток и выбора новых соединений-кандидатов для предклинических исследований.

Новизна исследования Впервые проведен скрининг библиотеки новых патентоспособных химических соединений-производных индолокарбазола с углеводными заместителями при атоме азота индольного кольца. Выявлено лидерное производное, содержащее остаток ¿-арабипозы (условное название ЛХС-1006), с высокой цитотоксичностью для линий опухолевых клеток человека и противоопухолевой активностью на моделях перевивиых опухолей. Впервые определены внутриклеточные мишени нового производного индолокарбазолов ЛХС-1006, взаимодействие с которыми существенно для проявления цитотоксичности. Такими мишенями являются ДНК и комплекс ДНК-ЛХС-1006-топоизомераза I, а также циклинзависимая протеинкиназа СЭК2.

Впервые определены типы клеточной гибели, вызываемой новым производным индолокарбазолов ЛХС-1006. Установлено, что типы гибели определяются концентрацией нового соединения и зависят от взаимодействия с конкретной внутриклеточной мишенью.

Впервые получены точные количественные данные о константах комплексообразования ЛХС-1006 с ДНК, установлен тип связывания - интеркаляция. Аффинность нового соединения к ДНК превышает таковую для ранее описанных производных индолокарбазолов.

Цель исследования

Целью работы является получение новых знаний о молекулярных механизмах клеточной гибели, вызываемой углеводсодержащими производными индолокарбазолов -соединениями нового класса противоопухолевых препаратов.

Задачи:

I. Из химической библиотеки новых углеводсодержащих производных индолокарбазолов выбрать наиболее активное (лидерное), т.е. вызывающее гибель опухолевых клеток в суб-микромолярных концентрациях.

II. Получить количественные данные о взаимодействии лидерного производного с внутриклеточными мишенями, важными для цитотоксичности: ДНК, топоизомераза I, СОК1.

III. Изучить механизмы цитотоксичности нового лидерного производного индолокарбазолов.

Научно-практическая значимость исследования:

Изучение механизмов цитотоксического действия нового производного индолокарбазолов позволит обосновать эффективность этого класса соединений для лечения онкологических заболеваний.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Татарский, Виктор Вячеславович

Выводы

1. Среди новых углеводных производных индолокарбазолов выявлены наиболее цитотоксические и выбран 12-(альфа-£-арабинопиранозил)-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дион (ЛХС-1006) как лидерное производное-прототип нового класса противоопухолевых соединений.

2. Внутриклеточной мишеныо, важной для противоопухолевого действия ЛХС-1006, является двухцепочечная ДНК. Количественный расчет констант связывания ЛХС-1006 с ДНК показал, что соединение образует 2 типа комплексов с высокой и низкой константой.

3. Следствиями взаимодействия ЛХС-1006 с ДНК являются нарушение конформации дуплекса, снижение активности топоизомеразы 1 и р53-зависимая трансактивация генной транскрипции.

4. Механизмы гибели клеток при действии ЛХС-1006 включают ингибирование пролиферации, остановку клеточного цикла и активацию программированной клеточной гибели (апоптоз). Эти механизмы проявляются в зависимости от концентрации, лидерного соединения и его взаимодействия с конкретными внутриклеточными мишенями.

5. Отличительной особенностью гибели клеток при действии ЛХС-1006 является фенотип вакуолизации цитоплазмы, связанный с быстрым расширением лизосомального компартмента в результате активности вакуолярной АТФазы. Данный фенотип отличается от ранее описанных и не зависит от трансляции, повреждения плазматической мембраны, нарушения структуры эндоплазматического ретикулума и митохондрий.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Татарский, Виктор Вячеславович, 2010 год

1. Prasad S. h ap. Intermediate filament proteins during carcinogenesis and apoptosis (Review) // Int. J. Oncol. 1999. № 14. C. 563-570.

2. Zou H. h Ap. An APAF-1.cytochrome c multimeric complex is a functional apoptosome that activates procaspase-9 //J. Biol. Chem. 1999. № 274. C. 11549-11556.

3. Rane S.G. h ap. Loss of Cdk4 expression causes insulin-deficient diabetes and Cdk4 activation results in beta-islet cell hyperplasia // Nat. Genet. 1999. № 22. C. 44-52.

4. Shimizu S., Narita M., Tsujimoto Y. Bcl-2 family proteins regulate the release of apoptogenic cytochrome c by the mitochondrial channel VDAC // Nature. 1999. № 399. C. 483-487.

5. Luo G. h Ap. Disruption of mRad50 causes embryonic stem cell lethality, abnormal embryonic development, and sensitivity to ionizing radiation // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1999. № 96. C. 7376-7381.

6. Gille H., Downward J. Multiple ras effector pathways contribute to G(l) cell cycle progression // J. Biol. Chem. 1999. № 274. C. 22033-22040.

7. Yoshinari T. h ap. Mode of action of a new indolocarbazole anticancer agent, J-10708 8, targeting topoisomerase I // Cancer Res. 1999. № 59. C. 4271-4275.

8. Sionov R.V., Haupt Y. The cellular response to p53: the decision between life and death // Oncogene. 1999. № 18. C. 6145-6157.

9. Orlov S.N. h ap. Purinergic modulation of Na(+),K(+),C1(-) cotransport and MAP kinases is limited to CI 1-MDCK cells resembling intercalated cells from collecting ducts // J. Membr. Biol.1999. № 172. C. 225-234.

10. Khosravi R. h AP- Rapid ATM-dependent phosphorylation of MDM2 precedes p53 accumulation in response to DNA damage // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1999. № 96. C. 14973-14977.

11. Antonsson B. h ap. Bax oligomerization is required for channel-forming activity in liposomes and to trigger cytochrome c release from mitochondria // Biochem. J. 2000. № 345 Pt 2. C. 271-278.

12. Wang X.K. Calpain and caspase: can you tell the difference? // Trends Neurosci. 2000. № 23. C. 20-26.

13. Bailly C. Topoisomerase T poisons and suppressors as anticancer drugs // Curr. Med. Chem.2000. № 7. C. 39-58.

14. Tenjo T. h zip. Prognostic significance of p27(kip 1) protein expression and spontaneous apoptosis in patients with colorectal adenocarcinomas // Oncology. 2000. № 58. C. 45-51.

15. Chehab N.H. h zip. Chk2/hCdsl functions as a DNA damage checkpoint in G(l) by stabilizing p53 // Genes Dev. 2000. № 14. C. 278-288.

16. Bodmer J.L. h Ap. TRAIL receptor-2 signals apoptosis through FADD and caspase-8 // Nat. Cell Biol. 2000. № 2. C. 241-243.

17. Latres E. h np. Limited overlapping roles of P15(INK4b) and P18(INK4c) cell cycle inhibitors in proliferation and tumorigenesis // EMBO J. 2000. № 19. C. 3496-3506.

18. Melchionna R. h zip. Threonine 68 is required for radiation-induced phosphorylation and activation of Cdsl // Nat. Cell Biol. 2000. № 2. C. 762-765.

19. Nakanishi M. h ap. Identification and characterization of human Wee 1B, a new member of the Weel family of Cdk-inhibitory kinases // Genes Cells. 2000. № 5. C. 839-847.

20. Prudhomme M. Recent developments of rebeccamycin analogues as topoisomerase 1 inhibitors and antitumor agents // Curr. Med. Chem. 2000. № 7. C. 1189-1212.

21. Tong X. h flp. Cleavage of ATM during radiation-induced apoptosis: caspase-3-like apoptotic protease as a candidate // Int. J. Radiat. Biol. 2000. № 76. C. 1387-1395.

22. Schmelzle T., Hall M.N. TOR, a central controller of cell growth // Cell. 2000. № 103. C. 253-262.

23. Teter S.A. h zip. Degradation of lipid vesicles in the yeast vacuole requires function of Cvtl7, a putative lipase//J. Biol. Chem. 2001. № 276. C. 2083-2087.

24. Sperandio S., de Belle I., Bredesen D.E. An alternative, nonapoptotic form of programmed cell death//Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2000. № 97. C. 14376-14381.

25. Matsumura H. h AP- Necrotic death pathway in Fas receptor signaling // J. Cell Biol. 2000. № 151. C. 1247-1256.

26. Jeffrey P.D., Tong L., Pavletich N.P. Structural basis of inhibition of CDK-cyclin complexes by INK4 inhibitors//Genes Dev. 2000. № 14. C. 3115-3125.

27. Stewart M.J., Steenkamp V. The biochemistry and toxicity of atractyloside: a review // Ther Drug Monit. 2000. № 22. C. 641-649.

28. Kihara A. h ap. Two distinct Vps34 phosphatidylinositol 3-kinase complexes function in autophagy and carboxypeptidase Y sorting in Saccharomyces cerevisiae // J. Cell Biol. 2001. № 152. C. 519-530.

29. Urasaki Y. h ,ap. Use of camptothecin-resistant mammalian cell lines to evaluate the role of topoisomerase I in the antiproliferative activity of the indolocarbazole, NB-506, and its topoisomerase I binding site // Cancer Res. 2001. № 61. C. 504-508.

30. Propper D.J. h ,ap. Phase I and pharmacokinetic study of PKC412, an inhibitor of protein kinase C// J. Clin. Oncol. 2001. № 19. C. 1485-1492.

31. Zhu J. h ap. Targeted disruption of the Nijmegen breakage syndrome gene NBS1 leads to early embryonic lethality in mice // Curr. Biol. 2001. № 11. C. 105-109.

32. Los M.'h Ap. Caspases: more than just killers? // Trends Immunol. 2001. № 22. C. 31-34.

33. Makiniemi M. h aP- BRCT domain-containing protein TopBPl functions in DNA replication and damage response //J. Biol. Chem. 2001. № 276. C. 30399-30406.

34. Pathan N. h ap. TUCAN, an antiapoptotic caspase-associated recruitment domain family protein overexpressed in cancer//J. Biol. Chem. 2001. № 276. C. 32220-32229.

35. Kannan K. h zip. DNA microarray analysis of genes involved in p53 mediated apoptosis: activation of Apaf-I // Oncogene. 2001. № 20. C. 3449-3455.

36. Guo K. h Ap. Hypoxia induces the expression of the pro-apoptotic gene BNIP3 // Cell Death Differ. 2001. № 8. C. 367-376.

37. Cain K. h flp. Physiological concentrations of K+ inhibit cytochrome c-dependent formation of the apoptosome // J. Biol. Chem. 2001. № 276. C. 41985-41990.

38. Burma S. h ap. ATM phosphorylates histone H2AX in response to DNA double-strand breaks // J. Biol. Chem. 2001. № 276. C. 42462-42467.

39. Reimertz C. h ,ap. Ca(2+)-induced inhibition of apoptosis in human SH-SY5Y neuroblastoma cells: degradation of apoptotic protease activating factor-1 (APAF-1) // J. Neurochem. 2001. № 78. C. 1256-1266.

40. Sherr C.J. The INK4a/ARF network in tumour suppression // Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2001. № 2. C. 731-737.

41. Hirabayashi M. h np. VCP/p97 in abnormal protein aggregates, cytoplasmic vacuoles, and cell death, phenotypes relevant to neurodegeneration // Cell Death Differ. 2001. № 8. C. 977

42. Cortez D. h ap. ATRand ATRIP: partners in checkpoint signaling // Science. 2001. № 294. C. 1713-1716.

43. Jin S., Levine A.J. The p53 functional circuit//J. Cell. Sci. 2001. № 114. C. 4139-4140.

44. Pastorino J.G., ShulgaN., Hoek J.B. Mitochondrial binding of hexokinase II inhibits Bax-induced cytochrome c release and apoptosis // J. Biol. Chem. 2002. № 277. C. 7610-7618.

45. Talloczy Z. h ap- Regulation of starvation- and virus-induccd autophagy by the eIF2alpha kinase signaling pathway // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2002. № 99. C. 190-195.

46. Ermak G., Davies K.J.A. Calcium and oxidative stress: from cell signaling to cell death // Mol. Immunol. 2002. № 38. C. 713-721.

47. Budd R.C. Death receptors couple to both cell proliferation and apoptosis // J. Clin. Invest. 2002. № 109. C. 437-441.

48. Hirai I., Wang H. A role of the C-terminal region of human Rad9 (hRad9) in nuclear transport of the hRad9 checkpoint complex // J. Biol. Chem. 2002. № 277. C. 25722-25727.

49. Levis M. h ap. A FLT3-targeted tyrosine kinase inhibitor is cytotoxic to leukemia cells in vitro and in vivo // Blood. 2002. № 99. C. 3885-3891.

50. Karran L., Dyer M.J. Proteolytic cleavage of molccules involved in cell death or survival pathways: a role in the control of apoptosis? // Crit. Rev. Eukaryot. Gene Expr. 2001. № 11. C. 269-277.

51. Cole K.K., Perez-Polo J.R. Poly(ADP-ribose) polymerase inhibition prevents both apoptotic-like delayed neuronal death and necrosis after H(2)0(2) injury // J. Neurochem. 2002. №82. C. 19-29.

52. Leise W., Mueller P.R. Multiple Cdkl inhibitory kinases regulate the cell cycle during development//Dev. Biol. 2002. № 249. C. 156-173.

53. Symington L.S. Role ofRAD52 epistasis group genes in homologous recombination and double-strand break repair// Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2002. № 66. C. 630-670, table of contents.

54. Gartel A.L., Tyner A.L. The role of the eye 1 in-dependent kinase inhibitor p2l in apoptosis // Mol. Cancer Ther. 2002. № 1. C. 639-649.

55. Bakkenist C.J., Kastan M.B. DNA damage activates ATM through intermolecular autophosphorylation and dimer dissociation // Nature. 2003. № 421. C. 499-506.

56. Mihara M. h zip. p53 has a direct apoptogenic role at the mitochondria // Mol. Cell. 2003. № 1 l.C. 577-590.

57. Liang J., Slingerland J.M. Multiple roles of the PI3K/PKB (Akt) pathway in cell cycle progression // Cell Cycle. 2003. № 2. C. 339-345.

58. Wang C., Klionsky D.J. The molecular mechanism of autophagy // Mol. Med. 2003. № 9. C. 65-76.

59. Haupt S. h ap. Apoptosis the p53 network//J. Cell. Sci. 2003. № 116. C. 4077-4085.

60. Pagano M. h AP- Cyclin A is required at two points in the human cell cycle // EMBO J. 1992. № 1 l.C. 961-971.

61. Berthet C. h pp. Cdk2 knockout mice are viable // Curr. Biol. 2003. № 13. C. 1775-1785.

62. Busino L. h ap. Degradation of Cdc25A by beta-TrCP during S phase and in response to DNA damage //Nature. 2003. № 426. C. 87-91.

63. Zou L., Liu D., Elledge S.J. Replication protein A-mediated recruitment and activation of Radl7 complexes // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2003. № 100. C. 13827-13832.

64. Reggiori F. h zip. The Atgl-Atgl3 complex regulates Atg9 and Atg23 retrieval transport from the pre-autophagosomal structure // Dev. Cell. 2004. № 6. C. 79-90.

65. Eder J.P. h ap. A phase I trial of daily oral 4'- N -benzoyl-staurosporine in combination with protracted continuous infusion 5-fluorouracil in patients with advanced solid malignancies // Invest New Drugs. 2004. № 22. C. 139-150.

66. Murray A.W. Recycling the cell cycle: cyclins revisited // Cell. 2004. № 116. C. 221-234.

67. Huang Y., Lu M., Wu H. Antagonizing XIAP-mediated caspase-3 inhibition. Achilles' heel of cancers? // Cancer Cell. 2004. № 5. c. 1-2.

68. Monnerat C. h zip. Phase I study of PKC412 (N-benzoyl-staurosporine), a novel oral protein kinase C inhibitor, combined with gemcitabine and cisplatin in patients with non-small-cell lung cancer//Ann. Oncol. 2004. № 15. C. 316-323.

69. Pichierri P., Rosselli F. The DNA crosslink-induced S-phase checkpoint depends on ATR-CHK1 and ATR-NBS1-FANCD2 pathways // EMBO J. 2004. № 23. C. 1178-1187.

70. Levine B., Klionsky D.J. Development by self-digestion: molecular mechanisms and biological functions of autophagy// Dev. Cell. 2004. № 6. C. 463-477.

71. Gozuacik D., Kimchi A. Autophagy as a cell death and tumor suppressor mechanism // Oncogene. 2004. № 23. C. 2891-2906.

72. Mimnaugh E.G. h ap. Simultaneous inhibition of hsp 90 and the proteasome promotes protein ubiquitination, causes endoplasmic reticulum-derived cytosolic vacuolization, and enhances antitumor activity // Mol. Cancer Ther. 2004. № 3. C. 551-566.

73. Ricci J. h MP■ Disruption of mitochondrial function during apoptosis is mediated by caspase cleavage of the p75 subunit of complex 1 of the electron transport chain // Cell. 2004. № 117. C. 773-786.

74. Sperandio S. h zip. Paraptosis: mediation by MAP kinases and inhibition by AIP-1/Alix // Cell Death Differ. 2004. № 11. C. 1066-1075.

75. Zhu W., Chen Y., Dutta A. Rereplication by depletion of geminin is seen regardless of p53 status and activates a G2/M checkpoint // Mol. Cell. Biol. 2004. № 24. C. 7140-7150.

76. Green D.R., Kroemer G. The pathophysiology of mitochondrial cell death // Science. 2004. № 305. C. 626-629.

77. Okada H., Mak T.W. Pathways of apoptotic and non-apoptotic death in tumour cells // Nat. Rev. Cancer. 2004. № 4. C. 592-603.

78. Zindy F. h ap. Cyclin A is required in S phase in normal epithelial cells // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. № 182. C. 1144-1154.

79. Stone R.M. h flp. Patients with acute myeloid leukemia and an activating mutation in FLT3 respond to a small-molecule FLT3 tyrosine kinase inhibitor, PKC412 // Blood. 2005. № 105. C. 54-60.

80. Lisby M. h ap. Choreography of the DNA damage response: spatiotemporal relationships among checkpoint and repair proteins // Cell. 2004. № 118. C. 699-713.

81. Zalk R. h ap- Oligomeric states of the voltage-dependent anion channel and cytochrome c release from mitochondria// Biochem. J. 2005. № 386. C. 73-83.

82. Prudhomme M. Biological targets of antitumor indolocarbazoles bearing a sugar moiety // Curr Med Chem Anticancer Agents. 2004. № 4. C. 509-521.

83. Chen L. h Ap. Differential targeting of prosurvival Bcl-2 proteins by their BH3-only ligands allows complementary apoptotic function // Mol. Cell. 2005. № 17. C. 393-403.

84. Kuwana T. h ap. BH3 domains of BH3-only proteins differentially regulate Bax-mediated mitochondrial membrane permeabilization both directly and indirectly // Mol. Cell. 2005. № 17. C. 525-535.

85. Watanabe N. h zip. Cyclin-dependent kinase (CDK) phosphorylation destabilizes somatic Weel via multiple pathways//Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2005. № 102. C. 11663-11668.

86. Fan T. h ap. Caspase family proteases and apoptosis // Acta Biochim. Biophys. Sin. (Shanghai). 2005. № 37. C. 719-727.

87. Yu X. h ap. A structure of the human apoptosome at 12.8 A resolution provides insights into this cell death platform//Structure. 2005. № 13. C. 1725-1735.

88. Palmbos P.L., Daley J.M., Wilson T.E. Mutations of the Yku80 C terminus and Xrs2 FHA domain specifically block yeast nonhomologous end joining// Mol. Cell. Biol. 2005. № 25. C. 10782-10790.

89. Jazayeri A. h ap. ATM- and cell cycle-dependent regulation of ATR in response to DNA double-strand breaks //Nat. Cell Biol. 2006. № 8. C. 37-45.

90. Dupre A., Boyer-Chatenet L., Gautier J. Two-step activation of ATM by DNA and the Mrel 1-Rad50-Nbsl complex //Nat. Struct. Mol. Biol. 2006. № 13. C. 451-457.

91. Shiromizu T. h .up. Regulation of mitotic function of Chkl through phosphorylation at novel sites by cyclin-dependent kinase 1 (Cdkl) // Genes Cells. 2006. № 11. C. 477-485.

92. Kim J., Minter-Dykhouse K., Chen J. Signaling networks controlled by the MRN complex and MDC1 during early DNA damage responses // Mol. Carcinog. 2006. № 45. C. 403-408.

93. Chandra D. h ap. Intracellular nucleotides act as critical prosurvival factors by binding to cytochrome C and inhibiting apoptosome // Cell. 2006. № 125. C. 1333-1346.

94. Genovese C. h ap. Cell cycle control and beyond: emerging roles for the retinoblastoma gene family // Oncogene. 2006. № 25. C. 5201-5209.

95. Mimnaugh E.G. h ap. Endoplasmic reticulum vacuolization and valosin-containing protein relocalization result from simultaneous hsp90 inhibition by geldanamycin and proteasome inhibition by velcade // Mol. Cancer Res. 2006. № 4. C. 667-681.

96. Martinon F., Tschopp J. Inflammatory caspases and inflammasomes: master switches of inflammation // Cell Death Differ. 2007. № 14. C. 10-22.

97. Engelberg-Kulka H. h .up. Bacterial programmed cell death and multicellular behavior in bacteria// PLoS Genet. 2006. № 2. C. el35.

98. Marti A. h Ap- Expression and activity of cell cycle regulators during proliferation and programmed cell death in the mammary gland // Cell Death Differ. 1995. № 2. C. 277-283.

99. Robertson M.J. h AP- Phase II study of enzastaurin, a protein kinase C beta inhibitor, in patients with relapsed or refractory diffuse large B-cell lymphoma // J. Clin. Oncol. 2007. № 25. C. 1741-1746.

100. Baines C.P. h Ap. Voltage-dependent anion channels are dispensable for mitochondrial-dependent cell death // Nat. Cell Biol. 2007. № 9. C. 550-555.

101. Matsuoka S. h ap- ATM and ATR substrate analysis reveals extensive protein networks responsive to DNA damage // Science. 2007. № 316. C. 1160-1166.

102. Alemayehu A., Fridrichova 1. The MRE11/RAD50/NBS1 complex destabilization in Lynch-syndrome patients // Eur. J. Hum. Genet. 2007. № 15. C. 922-929.

103. Karki P. h Ap. Intracellular K(+) inhibits apoptosis by suppressing the Apaf-1 apoptosome formation and subsequent downstream pathways but not cytochrome c release // Cell Death Differ. 2007. № 14. C. 2068-2075.

104. Morschhauser F. h ap- A phase II study of enzastaurin, a protein kinase C beta inhibitor, in patients with relapsed or refractory mantle cell lymphoma // Ann. Oncol. 2008. № 19. C. 247253.

105. Danial N.N. BCL-2 family proteins: critical checkpoints of apoptotic cell death // Clin. Cancer Res. 2007. № 13. C. 7254-7263.

106. Youle R.J., Strasser A. The BCL-2 protein family: opposing activities that mediate celL death //Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2008. № 9. C. 47-59.

107. Jiang J. h ap. Interplay between bax, reactive oxygen species production, and cardiolipin oxidation during apoptosis // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2008. № 368. C. 145-150.

108. Oh Y. h ap- Enzastaurin, an oral serine/threonine kinase inhibitor, as second- or third-line therapy of non-small-cell lung cancer // J. Clin. Oncol. 2008. № 26. C. 1135-1141.

109. Chipuk J.E., Green D.R. How do BCL-2 proteins induce mitochondrial outer membrane permeabilization? // Trends Cell Biol. 2008. № 18. C. 157-164.

110. Wei Y., Fan T., Yu M. Inhibitor of apoptosis proteins and apoptosis // Acta Biochim. Biophys. Sin. (Shanghai). 2008. № 40. C. 278-288.

111. Buis J. h ap- Mrel 1 nuclease activity has essential roles in DNA repair and genomic stability distinct from ATM activation // Cell. 2008. № 135. C. 85-96.

112. Aressy B., Ducommun B. Cell cycle control by the CDC25 phosphatases // Anticancer Agents Med Chem. 2008. № 8. C. 818-824.

113. Waltes R. h ap- Human RAD50 deficiency in a Nijmegen breakage syndrome-like disorder // Am. J. Hum. Genet. 2009. № 84. C. 605-616.

114. Kreisl T.N. h AP- A phase I trial of enzastaurin in patients with recurrent gliomas // Clin. Cancer Res. 2009. № 15. C. 3617-3623.

115. Lapenna S., Giordano A. Cell cycle kinases as therapeutic targets for cancer // Nat Rev Drug Discov. 2009. № 8. C. 547-566.

116. KurokawaM., Kornbluth S. Caspases and kinases in a death grip // Cell. 2009. № 138. C. 838-854.

117. Clarke P.G. Developmental cell death: morphological diversity and multiple mechanisms // Anat. Embryol. 1990. № 181. C. 195-213.

118. Bush J.A. h Ap. Production and biological activity of rebeccamycin, a novel antitumor agent // J. Antibiot. 1987. № 40. C. 668-678.

119. Kerr J.F., Wyllie A.H., Currie A.R. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wideranging implications in tissue kinetics // Br. J. Cancer. 1972. № 26. C. 239-257.

120. Daksis J.I. h ap- Myc induces cyclin D1 expression in the absence of de novo protein synthesis and links mitogen-stimulated signal transduction to the cell cycle // Oncogene. 1994. № 9. C. 3635-3645.

121. Albanese C. h ap- Transforming p21ras mutants and c-Ets-2 activate the cyclin D1 promoter through distinguishable regions //J. Biol. Chem. 1995. № 270. C. 23589-23597.

122. Mueller P.R. h AP- Mytl: a membrane-associated inhibitory kinase that phosphorylates Cdc2 on both threonine-14 and tyrosine-15 // Science. 1995. № 270. C. 86-90.

123. Steiner P. n Ap. Identification of a Myc-dependent step during the formation of active G1 cyclin-cdk complexes//EMBO J. 1995. № 14. C. 4814-4826.

124. Reynisdottir I. h AP- Kip/Cip and Ink4 Cdk inhibitors cooperate to induce cell cycle arrest in response to TGF-beta//Genes Dev. 1995. № 9. C. 1831-1845.

125. Deng C. h Ap. Mice lacking p21C!Pl/WAFl undergo normal development, but are defective in G1 checkpoint control // Cell. 1995. № 82. C. 675-684.

126. Hirai H. h ap. Novel INK4 proteins, pi 9 and pi 8, are specific inhibitors of the cyclin D-dependent kinases CDK4 and CDK6 // Mol. Cell. Biol. 1995. № 15. C. 2672-2681.

127. Gottlieb T.M., Jackson S.P. Protein kinases and DNA damage //Trends Biochem. Sci. 1994. № 19. C. 500-503.

128. Nourse J. h ,ap. InterIeukin-2-mediated elimination of the p27Kipl cyclin-dependent kinase inhibitor prevented by rapamycin // Nature. 1994. № 372. C. 570-573.

129. Hannon G.J., Beach D. pl5INK4B is a potential effector ofTGF-beta-induced cell cycle arrest//Nature. 1994. № 371. C. 257-261.

130. Bates S. h ap- CDK6 (PLST1RE) and CDK4 (PSK-J3) are a distinct subset of the cyclin-dependent kinases that associate with cyclin D1 // Oncogene. 1994. № 9. C. 71-79.

131. Fesquet D. h ap. The M015 gene encodes the catalytic subunit of a protein kinase that activates cdc2 and other cyclin-dependent kinases (CDKs) through phosphorylation ofThrl61 and its homologues//EMBO J. 1993. № 12. C. 3111-3121.

132. Solomon M.J., Harper J.W., Shuttleworth J. CAK, the p34cdc2 activating kinase, contains aprotein identical or closely related to p40M015 // EMBO J. 1993. № 12. C. 3133-3142.

133. Oltvai Z.N., Milliman C.L., Korsmeyer S.J. Bcl-2 heterodimerizes in vivo with a conserved homolog, Bax, that accelerates programmed cell death // Cell. 1993. № 74. C. 609-619.

134. Orth K. h ap. The CED-3/lCE-like protease Mch2 is activated during apoptosis and cleaves the death substrate lamin Alii. Biol. Chem. 1996. № 271. C. 16443-16446.

135. Boulton S.J., Jackson S.P. Saccharomyces cerevisiae Ku70 potentiates illegitimate DNA double-strand break repair and serves as a barrier to error-prone DNA repair pathways // EMBO J. 1996. № 15. C. 5093-5103.

136. Pereira E.R. h ap. Structure-activity relationships in a series of substituted indolocarbazoles: topoisomerase I and protein kinase C inhibition and antitumoral and antimicrobial properties//J. Med. Chem. 1996. № 39. C. 4471-4477.

137. Sherr C.J. Cancer cell cycles//Science. 1996. №274. C. 1672-1677.

138. Vanags D.M. h ap. Protease involvement in fodrin cleavage and phosphatidylserine exposure in apoptosis//J. Biol. Chem. 1996. №271. C. 31075-31085.

139. Westwick J.K. h ap. Rac regulation of transformation, gene expression, and actin organization by multiple, PAK-independent pathways // Mol. Cell. Biol. 1997. № 17. C. 13241335.

140. Yan Y. h ap. Ablation of the CDK inhibitor p57Kip2 results in increased apoptosis and delayed differentiation during mouse development // Genes Dev. 1997. № 11. C. 973-983.

141. Antonsson B. h ap. Inhibition of Bax channel-forming activity by Bcl-2 // Science. 1997. № 277. C. 370-372.

142. Sheridan J.P. h ap. Control of TRAIL-induced apoptosis by a family of signaling and decoy receptors // Science. 1997. № 277. C. 818-821.

143. Zindy F. h ap. Expression of the pl6INK4a tumor suppressor versus other INK4 family members during mouse development and aging // Oncogene. 1997. № 15. C. 203-211.

144. Kothakota S. h %p. Caspase-3-generated fragment of gelsolin: effector of morphological change in apoptosis // Science. 1997. № 278. C. 294-298.

145. Brancolini C. h ap. Dismantling cell-cell contacts during apoptosis is coupled to a caspase-dependent proteolytic cleavage of beta-catenin // J. Cell Biol. 1997. № 139. C. 759-771.

146. Siliciano J.D. h DNA damage induces phosphorylation of the amino terminus of p53 // Genes Dev. 1997. № 11. C. 3471-3481.

147. Enari M. h ap- A caspase-activated DNase that degrades DNA during apoptosis, and its inhibitor ICAD//Nature. 1998. №391. C. 43:50.

148. Schneider P. h up. TRAIL receptors 1 (DR4) and 2 (DR5) signal FADD-dependent apoptosis and activate NF-kappaB // Immunity. 1997. № 7. C. 831-836.

149. Phelps D.E. h ap- Coupled transcriptional and translational control of cyclin-dependent kinase inhibitor pi8INK4c expression during myogenesis//Mol. Cell. Biol. 1998. № 18. C. 2334-2343.

150. Brandeis M. h ,ap. Cyclin B2-null mice develop normally and are fertile whereas cyclin Bl-null mice die in utero // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1998. № 95. C. 4344-4349.

151. Jiirgensmeier J.M. h ap. Bax directly induces release of cytochrome c from isolated mitochondria // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1998. № 95. C. 4997-5002.

152. Flygare J. h zip. Proteolytic cleavage of HsRad51 during apoptosis // FEBS Lett. 1998. № 427. C. 247-251.

153. Luo X. h ap. Bid, a BcI2 interacting protein, mediates cytochrome c release from mitochondria in response to activation of cell surface death receptors // Cell. 1998. № 94. C. 481490.

154. Li H. h zip. Cleavage of BID by caspase 8 mediates the mitochondrial damage in the Faspathway of apoptosis// Cell. 1998. № 94. C. 491-501.

155. Schmeiser К. и др. Specific cleavage of gamma catenin by caspases during apoptosis // FEBS Lett. 1998. № 433. C. 51-57.

156. Marzo I. и др. Bax and adenine nucleotide translocator cooperate in the mitochondrial control of apoptosis // Science. 1998. № 281. C. 2027-2031.

157. Esk.es R. и др. Bax-induced cytochrome С release from mitochondria is independent of the permeability transition pore but highly dependent on Mg2+ ions // J. Cell Biol. 1998. № 143. C. 217-224.

158. Bennett M. и др. Cell surface trafficking of Fas: a rapid mechanism of p53-mediated apoptosis // Science. 1998. № 282. C. 290-293.

159. Jeggo P.A. Identification of genes involved in repair of DNA double-strand breaks in mammalian cells // Radiat. Res. 1998. № 150. C. S80-91.

160. Gescher A. Analogs of staurosporine: potential anticancer drugs? // Gen. Pharmacol. 1998. №31. C. 721-728.

161. Miiller M. и др. p53 activates the CD95 (APO-l/Fas) gene in response to DNA damage by anticancer drugs // J. Exp. Med. 1998. № 188. C. 2033-2045.

162. Zhao J.H., Reiske H., Guan J.L. Regulation of the cell cycle by focal adhesion kinase // J. Cell Biol. 1998. № 143. C. 1997-2008.

163. Krammer P.H. CD95(APO-l/Fas)-mediated apoptosis: live and let die // Adv. Immunol. 1999. №71. C. 163-210.

164. Alice in caspase land. A phylogenetic analysis of caspases from worm to man Электронный ресурс. URL: http://www.nature.com/cdd/journal/v9/n4/full/4400989a.html (вызвано: 18.02.2010).

165. DTP Primary Anti-cancer Drug Screening Activities Электронный ресурс. URL: http://dtp.nci.nih.gov/branches/btb/hfa.html (вызвано: 02.03.2010).

166. Bashir Т., Pagano M. Cdkl: the dominant sibling of Cdk2 // Nat Cell Biol. 2005. № 7. C. 779-781.

167. Benson F.E., Baumann P., West S.C. Synergistic actions of Rad51 and Rad52 in recombination and DNA repair //Nature. 1998. № 391. C. 401-404.

168. Birk А. и др. Cytoplasmic vacuolization responses to cytopathic bovine viral diarrhoea virus // Virus Research. 2008. № 132. C. 76-85.

169. Brana M. h zip. Intercalators as Anticancer Drugs // Current Pharmaceutical Design. 2001. №7. C. 1745-1780.

170. Carini R. h zip. Alteration of Na+ homeostasis as a critical step in the development of irreversible hepatocyte injury after adenosine triphosphate depletion // Hepatology. 1995. № 21. C. 1089-1098.

171. Clarke P., Clarke S. Nineteenth century research on naturally occurring cell death and related phenomena// Anat Embryol. 1996. № 193.

172. Giaccia A.J., Kastan M.B. The complexity of p53 modulation: emerging patterns from divergent signals // Genes & Development. 1998. № 12. C. 2973-2983.

173. Ishitani R. h zip. Overexpression of Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase Is Involved in Low K+-Induced Apoptosis but Not Necrosis of Cultured Cerebellar Granule Cells // Molecular Pharmacology. 1997. № 51. C. 542-550.

174. Kastan M.B., Bartek J. Cell-cycle checkpoints and cancer // Nature. 2004. № 432. C. 316323.

175. Kroemer G. h zip. Classification of cell death: recommendations of the Nomenclature , Committee on Cell Death 2009 // Cell Death Differ. 2008. № 16. C. 3-11.

176. Krokan H., Wist E., Krokan R.H. Aphidicolin inhibits DNA synthesis by DNA polymerase {alpha} and isolated nuclei by a similar mechanism // Nucl. Acids Res. 1981. № 9. C. 4709-. 4719.

177. Lee J., Paull T.T. Direct Activation of the ATM Protein Kinase by the Mrel 1/Rad50/Nbsl Complex // Science. 2004. № 304. C. 93-96.

178. Luthi A.U., Martin S J. The CASBAH: a searchable database of caspase substrates // Cell Death Differ. 2007. № 14. C. 641-650.

179. Malumbres M., Barbacid M. Mammalian cyclin-dependent kinases // Trends in Biochemical Sciences. 2005. № 30. C. 630-641.

180. Malumbres M. h ap- Mammalian Cells Cycle without the D-Type Cyclin-Dependent Kinases Cdk4 and Cdk6 // Cell. 2004. № 118. C. 493-504.

181. Martin A. Cell cycle inhibition and tumor suppression by p21Cipl and p27Kipl are independent of Cdk2 // Cancer Cell. 2005. № 7. C. 591-598.

182. Morissette G., Lodge R., Marceau F. Intense pseudotransport of a cationic drug mediated by vacuolar ATPase: Procainamide-induced autophagic cell vacuolization // Toxicology and Applied Pharmacology. 2008. № 228. C. 364-377.

183. Murphy M. Delayed early embryonic lethality following disruption of the murine cyclin A2 gene//Nature Genet. 1997. № 15. C. 83-86.

184. Oppenheim R.W. h Ap. Programmed Cell Death of Developing Mammalian Neurons after Genetic Deletion of Caspases//J. Neurosci. 2001. № 21. C. 4752-4760.

185. Padanilam B.J. Cell death induced by acute renal injury: a perspective on the contributions of apoptosis and necrosis // Am J Physiol Renal Physiol. 2003. № 284. C. F608-627.

186. Ribes-Zamora A. m Ap. Distinct faces of the Ku heterodimer mediate DNA repair and telomeric functions //Nat Struct Mol Biol. 2007. № 14. C. 301-307.

187. Santamaría D. h Ap. Cdkl is sufficient to drive the mammalian cell cycle // Nature. 2007. № 448. C. 811-815.

188. Setiembre C. h ap- Systemic inflammation and neurodegeneration in a mouse model of multiple sulfatase deficiency // Proceedings of the National Academy of Sciences. 2007. № 104. C. 4506-4511.

189. Shen Z.Y. h Ap. Specific interactions between the human Rad51 and Rad52 proteins. // J. Biol. Chem. 1996. № 271. C. 148-152.

190. Shiloh Y. ATM and related protein kinases: safeguarding genome integrity // Nat Rev Cancer. 2003. № 3. C. 155-168.

191. Shiloh Y. The ATM-mediated DNA-damage response: taking shape // Trends in Biochemical Sciences. 2006. № 31. C. 402-410.

192. Tinel A. The PIDDosome, a Protein Complex Implicated in Activation of Caspase-2 in; Response to Genotoxic Stress // Science. 2004. № 304. C. 843-846.

193. Tsutsui T. h Ap. Targeted Disruption of CDK4 Delays Cell Cycle Entry with Enhanced p27Kipl Activity // Mol. Cell. Biol. 1999. № 19. C. 7011-7019.

194. Vande Velde C. h Ap. BNIP3 and Genetic Control of Necrosis-Like Cell Death through the Mitochondrial Permeability Transition Pore // Mol. Cell. Biol. 2000. № 20. C. 5454-5468.

195. Vogt C. Untersuchungen tiber die Entwicklungsgeschichte der Geburtshelferkroete (Alytes obstetricans). Solothurn: Jent und Gassmann, 1842.

196. Yeh W. h Ap. FADD: Essential for Embryo Development and Signaling from Some, But Not All, Inducers of Apoptosis // Science. 1998. № 279. C. 1954-1958.