Механизмы действия фенозана калия в сверхмалых дозах на плазматические мембраны IN VITRO тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.02, кандидат наук Часовская, Татьяна Евгеньевна

• Часовская, Татьяна Евгеньевна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Часовская, Татьяна Евгеньевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Действие биологически активных веществ в сверхмалых дозах -перспективная область исследований

1.1.1. Основные закономерности действия биологически активных веществ в сверхмалых дозах

1.1.2. Роль рецепторных взаимодействий в механизме действия биологически активных веществ в сверхмалых дозах

1.2. Особенности структуры жидкой воды, наноассоциатных комплексов БАВ и их роль в механизме действия биологически активных веществ в сверхмалых дозах

1.2.1. Структура жидкой воды

1.2.2. Роль воды в эффектах сверхмалых доз биологически активных веществ

1.3. Биологические мембраны как мишень действия сверхнизких концентраций активных веществ

1.3.1. Состав и структура биомембран

1.3.2. Система регуляции пероксидного окисления липидов в биологических мембранах

1.3.3. Влияние различных биологически активных веществ на регуляторные системы, сосредоточенные в биомембранах

1.4. Фенозан калия - вещество, проявляющее активность в сверхнизких

концентрациях

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Методика приготовления растворов фенозана калия

2.2. Выделение плазматических мембран из клеток печени мышей

2.3. Определение концентрации белка в мембранах

2.4. Экстракция липидов из плазматических мембран

2.5. Приготовление липосом из липидов методом озвучивания

2.6. Применение метода спиновых зондов для изучения структурно-динамического состояния глубоколежащих областей липидов плазматических мембран и липосом

2.6.1. Измерение вязкостных характеристик различных областей липидного бислоя мембран при постоянной температуре

2.6.2. Определение положения термоиндуцированных структурных переходов в липидном бислое мембран и расчет эффективной энергии их активации

2.7. Определение размеров липосом методом динамического лазерного светорассеяния

2.8. Определение размеров и формы липосом методом атомно-силовой микроскопии

2.9. Применение метода дифференциальной сканирующей калориметрии для исследования термодинамических характеристик плазматических мембран

2.10. Статистические методы обработки данных

Глава 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ И ОБСУЖДЕНИЕ

РЕЗУЛЬТАТОВ

3.1. Влияние фенозана калия на структурное состояние липидов плазматических мембран клеток печени мышей in vitro

3.1.1. Влияние фенозана калия на состояние глубоколежащих областей (-20-22 А) липидного бислоя плазматических мембран в диапазоне концентраций 10"5-10"20 М при температуре 293 К

3.1.2. Влияние фенозана калия в диапазоне концентраций Ю'5-Ю-20 М на анизотропию вращения зонда С\в в плазматических мембранах клеток печени мышей

3.1.3. Температурные зависимости времени вращательной корреляции xci зонда Ci6 и термоиндуцированные структурные переходы в глубоколежащих областях плазматических мембран в контроле и под

действием фенозана калия в концентрациях 10"6 М, 10'13 М и 10"18 М в диапазоне температур 285-315 К

3.1.4. Влияние фенозана калия на структуру поверхностных областей (~8 А) липидного бислоя плазматических мембран в диапазоне концентраций Ю"5-10'20 М при температуре 293 К

3.1.5. Температурные зависимости параметра упорядоченности Б зонда С5 и термоиндуцированные структурные переходы в поверхностных областях плазматических мембран в контроле и под действием фенозана калия в концентрациях 10"6 М, 10"7 М, 10"12 М, 10"14 М и 10'15 М в диапазоне температур 285-315 К

3.2. Влияние фенозана калия на термоиндуцированные структурные переходы в плазматических мембранах и их энтальпию, изученные методом дифференциальной сканирующей калориметрии

3.3. Влияние фенозана калия на структурно-динамические характеристики липосом, приготовленных из липидных экстрактов плазматических мембран клеток печени мышей

3.3.1. Изменение микровязкости глубоколежащих областей липидов липосом (-20-22 А) под действием фенозана калия в диапазоне

5

концентраций 10 -10 М при температуре 293 К

3.3.2. Температурные зависимости микровязкости глубоколежащих слоев липосом в контроле и при действии фенозана калия в концентрациях 10'6 М; 10'12 М и 10'18 М

3.3.3. Изменение жесткости поверхностных областей (~8 А) липосом под действием фенозана калия в диапазоне концентраций 10"5-10"20 М при температуре 293 К

3.3.4. Температурные зависимости параметра упорядоченности приповерхностных областей липосом в контроле и при действии фенозана калия в концентрациях 10'6 М, 10"12 М и 10-14М

3.4. Влияние фенозана калия в концентрациях 10"4-10"19 М на гидродинамический диаметр липосом, приготовленных из суммарных липидов плазматических мембран

3.5. Изменения формы и размеров липосом, приготовленных из суммарных липидов плазматических мембран, под действием различных концентраций

фенозана калия, изученные методом атомно-силовой микроскопии

Глава 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ACM - атомно-силовая микроскопия

а-ТФ - альфа-токоферол, витамин Е

БАВ - биологически активное вещество

ДРС - динамическое рассеяние света

ДСК - дифференциальная сканирующая калориметрия

Зонд С5 - 5-доксилстеариновая кислота

Зонд Ci6 - 16-доксилстеариновая кислота

РЖ - инфракрасный диапазон

ПК-С - протеинкиназа С

ПМ - плазматические мембраны

ПОЛ - пероксидное окисление липидов

СМД - сверхмалая доза

ТРГ - тиреотропин-рилизинг гормон, тиролиберин

ФК - фенозан калия, 3-3,5-дитретбутил-4-гидрокснфенил пропионат калия ФЛ - фосфолипид

ЭПР - электронный парамагнитный резонанс ЭР - эндоплазматический ретикулум

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизмы действия фенозана калия в сверхмалых дозах на плазматические мембраны IN VITRO»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы

Действие биологически активных веществ (БАВ) в сверхмалых дозах (СМД, концентрациях ниже 10"13 М), впервые было открыто в 1980х годах. Однако, до сих пор не создано единой теории, объясняющей это явление. Эффекты СМД были обнаружены в экспериментах с веществами различной химической природы и биологического действия: гормонами, антиоксидантами, противоопухолевыми агентами, иммуномодуляторами и др. [1-8]. Уровень биологической организации систем, в которых наблюдалось действие СМД БАВ in vivo и in vitro, также весьма разнообразен - от макромолекул и клеточных структур, до целых организмов и популяций [1-8]. Однако возникновение эффекта при действии вещества в концентрациях ниже 10"13 М не удается объяснить с точки зрения классических представлений о лиганд-рецепторном взаимодействии, связать с какой-то определенной структурой вещества или ступенью биологической организации системы. До сих пор не создано единой теории, способной объяснить подобные явления. Тем не менее, накопленные за десятилетия экспериментальные данные позволили выявить ряд общих закономерностей, характерных для различных БАВ, проявляющих активность в СМД [2]. В первую очередь, это полимодальность зависимости доза-эффект, как правило, содержащей несколько максимумов, разделенных интервалами концентраций, при действии которых эффекта не наблюдается. Другой закономерностью является то, что при уменьшении концентрации некоторых БАВ происходит «расслоение» их свойств, когда сохраняется влияние, но исчезает побочное действие. Поразительным является тот факт, что многие БАВ в СМД могут оказывать существенное влияние на системы, в которых уже присутствует данное вещество в гораздо более высоких концентрациях. Также характерно то, что добавление БАВ с СМД может изменять чувствительность биологической системы к другим агентам.

Наличие общих закономерностей, возможно, связано с общностью критических мишеней БАВ. В качестве последних могут выступать плазматические мембраны (ПМ), поскольку в них сосредоточены важнейшие регуляторные системы, отвечающие за функционирование клетки. Это, во-первых, системы вторичных посредников (циклических нуклеотидов и фосфоинозитидного цикла), обладающие свойствами каскадного усиления сигнала при проведении его в клетку [9-12]. Во-вторых, это система регуляции пероксидного окисления липидов (ПОЛ) [13-15]. Важно отметить, что в силу своей общей локализации данные регуляторные системы влияют друг на друга [15-18], поэтому вещества, модифицирующие состояние одной из этих систем, могут индуцировать изменения и в других.

Ранее на основании подробных исследований на различных биологических мембранах было зафиксировано влияние СМД таких БАВ, как природный антиоксидант а-токоферол, пептид тиролиберин и форболовые эфиры, на основные параметры системы пероксидного окисления липидов (структура мембран, продукты окисления) [19-21], активность ключевых ферментов регуляторных систем, сосредоточенных в мембранах [22-24], и сделаны определённые заключения о механизмах действия этих агентов в СМД [15, 2528]. Все эти вещества природного происхождения, поэтому возникает вопрос о том, насколько выводы, сделанные для природных БАВ, справедливы для синтетических агентов.

Для ответа на него, с нашей точки зрения, в качестве исследуемого БАВ может быть выбран синтетический фенольный антиоксидант фенозан калия (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил пропионат калия). Он способен существенным образом модифицировать процессы ПОЛ в мембранах [29, 30] и является суперактиватором ключевого фермента фосфоинозитидного цикла, протеинкиназы-С [31]. Различными авторами было показано, что ФК проявляет активность в СМД на целом ряде моделей как in vitro, так и in vivo [30, 32-37].

Следует отметить, что, несмотря на неоднократно высказываемые предположения о том, что именно биологические мембраны являются мишенью

действия БАВ в СМД, по-прежнему не ясно, какая компонента мембраны -белковая или липидная, изменяется в первую очередь. Многие авторы полагают, что для реализации эффекта СМД в исследуемой системе должны присутствовать суперафинные рецепторы данного вещества. Тем не менее, в литературе отсутствуют исследования о влиянии БАВ в СМД на липосомы, хотя для ответа на вопрос о «рецепторном» механизме эффекта СМД такие эксперименты являются ключевыми. Несомненно, проверка данной гипотезы весьма актуальна, а изучение влияния ФК в широком диапазоне концентраций на свойства липидной и белковой компонент ПМ, как в составе мембраны, так и отдельно от белков в виде липосом, приготовленных из суммарных липидов ПМ, даст возможность продвинуться дальше в понимании фундаментальных механизмов эффекта СМД.

Поэтому целью данной работы являлось выявление и сопоставление закономерностей влияния ФК в интервале концентраций 10"5-10-20 М на:

1) структуру различных липидных регионов ПМ клеток печени в экспериментах in vitro;

2) структурно-динамическое состояние, размеры и форму липосом, приготовленных из суммарных липидов данных мембран;

3) термодинамические характеристики белков в составе изучаемых мембран in vitro.

В задачи работы входило: 1) Изучение влияния ФК в концентрациях 10"5-10"20 М на микровязкость глубоколежащих областей (-20-22 А) и параметр упорядоченности поверхностных областей (-8 А) липидного бислоя ПМ и липосом, приготовленных из суммарных липидов ПМ, методом электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) с использованием в качестве парамагнитных зондов стабильных свободных радикалов 16- и 5-доксилстеариновых кислот, соответственно (Qe и С5), нитроксильные

фрагменты которых локализуются в указанных липидных областях, при постоянной температуре 283 К. Получение зависимостей доза-эффект.

2) Исследование влияния концентраций ФК, оказавших наибольший эффект на структурно-динамические параметры липидов, на положение, ширину и эффективную энергию активации термоиндуцированных структурных переходов в различных областях липидного бислоя мембран и липосом в диапазоне температур 285-315 К методом ЭПР.

3) Изучение действия ФК в концентрациях Ю*5-10"20 М на размеры и форму липосом, приготовленных из липидных экстрактов ПМ, методами динамического светорассеяния (ДРС) и атомно-силовой микроскопии (АСМ).

4) Определение изменений термодинамических характеристик суммарных белков, входящих в состав ПМ, индуцированных ФК в концентрациях, которым соответствовали максимумы и отсутствие влияния на липидную компоненту мембран методом дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК).

5) Выяснение роли физико-химических характеристик водных растворов ФК (размеров «наноассоциатов», удельной электропроводности растворов) в механизме обнаруженных эффектов сверхмалых концентраций ФК на структуру ПМ.

Научная новизна

В данной работе впервые показано, что синтетический АО ФК в широком диапазоне концентраций, включающем сверхмалые дозы (10"13-10'19 М), существенно модифицирует структурно-динамические параметры различных липидных регионов ПМ, выделенных из печени мышей, в экспериментах in vitro. При этом зависимость эффекта от дозы вводимого вещества имеет бимодальный характер с максимумами в интервале «физиологических» концентраций (10"5-10-7 М) и СМД, разделенными «мертвыми зонами», где эффект отсутствует. Принципиально дозовые зависимости для ФК не

отличаются от таковых, полученных для веществ природного происхождения, в частности а-токоферола [27]. Однако, в отличие от природного антиоксиданта, максимумы эффектов ФК в СМД в поверхностных и глубоколежащих областях липидов ПМ наблюдаются при действии разных концентраций препарата: (10"12-10' М) — в поверхностных; - в глубоколежащих.

Впервые обнаружено, что ФК в концентрациях, вызывающих максимальные изменения в параметрах микровязкости и упорядоченности липидной компоненты, индуцирует появление дополнительного термоиндуцированного структурного перехода липидов в области физиологических температур (40-42 °С).

Впервые показано, что эффект СМД сохраняется при полном отсутствии белков в системе, а именно, все закономерности, полученные на ПМ (характер дозовых зависимостей, положения максимумов на кривых, количество и положения температурных переходов) и липосомах, приготовленных из липидных экстрактов ПМ, полностью совпадают. Эти результаты позволяют полагать, что первичной мишенью действия ФК в СМД являются именно липиды и механизм этого феномена не связан с рецепторным взаимодействием.

Впервые установлено, что каждый из наблюдаемых максимумов на кривых доза-эффект обусловлен своим особым механизмом взаимодействия: максимумы на дозовых зависимостях в интервале относительно высоких концентраций ФК (10"5-10"7 М) обусловлены ограничением при упаковке углеводородных цепей липидов вблизи молекулы за счет его неспецифического встраивания в мембрану и взаимодействия с окружающими молекулами фосфолипидов (ФЛ); в области СМД - физико-химическими свойствами «наноассоциатов», образованных из молекул ФК и воды.

Основные научные положения, выносимые на защиту

1) ФК способен модифицировать структурно-динамическое состояние гидрофильных и гидрофобных липидных регионов ПМ как в «терапевтических» дозах (10'5-10"7 М), так и в СМД (10"13-10*15 М, 10'18-10'19

М, соответственно). Концентрационная зависимость эффекта имеет бимодальный характер, свойственный веществам, проявляющим активность в СМД.

2) ФК в широком диапазоне концентраций, включающем СМД, способен оказывать влияние на температуры и энтальпии переходов в белках ПМ.

(л 1Я

Наибольшее воздействие наблюдается для доз 10" Ми Ю-10 М, что соответствует наибольшим изменениям в микровязкости глубоколежащих областей липидов ПМ (-20-22 А).

3) ФК способен модифицировать структурно-динамическое состояние гидрофильных и гидрофобных липидных регионов липосом, приготовленных из суммарных липидов ПМ, подобно влиянию на мембраны. Эффекты СМД ФК (10"13-10'15 М, 10",8-10'19 М) сохраняются в отсутствии белковой фракции, следовательно, первичной мишенью действия препарата являются липиды.

4) Изменения, индуцируемые в липосомах ФК в концентрациях и 10"13-10"15 М приводят к увеличению их гидродинамического диаметра и изменению формы от шарообразной к палочкообразной.

5) Корреляция между структурно-динамическими изменениями, индуцированными СМД ФК в ПМ и липосомах, и дозовыми зависимостями физико-химических свойств разбавленных водных растворов ФК позволяет сделать вывод о ключевой роли «наноассоциатов», состоящих из молекул ФК и воды, в механизме действия СМД.

Личный вклад автора Работа была выполнена в Институте Биохимической Физики имени Н.М. Эмануэля РАН. Личный вклад автора состоял в проведении биофизических исследований, обработке и анализе полученных данных, формулировании положений и выводов, подготовке статей к опубликованию и участии в конференциях. Все изложенные в диссертации новые результаты получены

автором лично или при ее непосредственном участии в подготовке и проведении экспериментов.

Научно-прикладное значение работы

Данная работа является составной частью комплекса научных исследований проблемы действия БАВ в сверхмалых дозах. Полученные в работе выводы и используемые методологические подходы могут быть применены в её решении. В частности, изменение структурно-динамических характеристик биологических мембран может быть использовано в качестве чувствительной модели для скрининга БАВ, действующих в ультранизких концентрациях; снижения терапевтических доз препаратов, активных в СМД, при сохранении их эффективности и уменьшении вероятности побочных эффектов. Результаты о влиянии ФК в СМД на структуру и форму липосом могут быть полезны для разработки методов стабилизации липидных оболочек лекарственных препаратов.

Апробация диссертационной работы

Материалы работы докладывались в России на: ежегодных молодежных конференциях ИБХФ РАН - ВУЗы «Биохимическая физика», Москва, ноябрь 2007-2010; Ежегодной конференции МФТИ, Долгопрудный, 2007; VII Международной конференции «Биооксидант», Москва, октябрь 2010; I международной конференции МФТИ БФК «Северный», Москва, май 2011; Всероссийской конференции с международным участием «Спектроскопия и томография электронного парамагнитного резонанса в химии и биологии», Москва, октябрь 2011; Всероссийской молодежной конференции «Успехи химической физики», Черноголовка, июнь 2011; VI Международном конгрессе «Слабые и сверхслабые поля и излучения в биологии и медицине», Санкт-Петербург, июль 2012;

Результаты были представлены на зарубежных конференциях: 50-th International Conference on the Bioscience of Lipid, Regensburg, Germany, August

2009; FEBS Advanced Course "Lipid Signaling and Disease", Ortona, Italy, September 2009; Issfal Conference. Maastricht, The Netherlands, May 2010; 8-th Euro Fed Lipid Congress, Munich, October 2010; 9-th Euro Fed Lipid Congress, Rotterdam 2011; 52-nd International Conference on the Bioscience of Lipids, Warsaw, Poland, August 2011; VI Conference on the Physics, Chemistry and Biology of Water, Vermont, USA, October 2011; International Workshop «Lipids: from Lipidomics to Disease and Green Energy», Spetses, Greece, August 2012; 10-th Euro Fed Lipid Congress, Cracow, Poland, September 2012.

Публикации в рецензируемых журналах

Основные положения диссертационной работы опубликованы в 16 печатных работах, из которых 4 статьи в рецензируемых научных журналах, входящих в перечень Высшей аттестационной комиссии, 12 публикаций в сборниках научных трудов и тезисов докладов на российских и международных конференциях.

Объем и структура диссертации

Диссертация состоит из введения, 4 глав, основных выводов и списка литературы. Работа изложена на 160 страницах, иллюстрирована 42 рисунками и 10 таблицами. Библиография включает список из 257 работ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Действие биологически активных веществ в сверхмалых дозах -перспективная область исследований

Одним из наиболее удивительных открытий последних десятилетий является обнаружение активности различных веществ в сверхмалых дозах (СМД) при воздействии на биообъекты. Эффекты СМД обнаружены для биологически активных веществ (БАВ) разнообразной химической природы (гормонов, иммуномодуляторов, противоопухолевых агентов, антиоксидантов, регуляторов роста растений и т.д.) как in vivo, так и in vitro на системах различной степени сложности организации - от клеточных структур, тканей, органов до целых организмов и популяций [1-8, 38]. Под сверхмалыми дозами при этом подразумеваются концентрации вещества, высокая активность которых не может быть объяснена с точки зрения общепринятых классических представлений и требует поиска новых теорий.

Следует сказать, что до настоящего времени не существует чёткого количественного определения границы СМД. В литературе можно отметить несколько различных подходов к формулировке данного термина. Духович Ф.С. с соавт. [39] предлагают рассматривать в качестве сверхмалых доз концентрации 10'11 М и ниже на основе данных о количестве клеточных рецепторов. При таких концентрациях активное вещество связывается с менее чем 1% имеющихся рецепторов, что, согласно классическим представлениям, является нижней границей для проявления физиологического ответа. В качестве обоснования данной концентрации, как количественной границы СМД, авторы провели расчёты, используя уравнение Смолуховского, и показали, что при концентрациях вещества менее 10"11 М вступает в силу статистическое ограничение на доставку лиганда к биомишени. Например, при концентрации вещества 10'15 М следует ожидать всего лишь 1 столкновение в течение 56 часов.

Другой подход к определению границы СМД предложен Бурлаковой Е.Б. [40]. Она полагает, что при введении биологически активного вещества в

1 "У 1 ^

организм в дозах 10 - 10" М в его каждой клетке будет содержаться по крайней 1-10 молекул. С точки зрения автора это минимальное количество вещества, способное вызывать клеточную реакцию, объяснимую с помощью существующих теорий, поэтому она предлагает рассматривать в качестве СМД концентрации 10"12 М и ниже.

К близким выводам приходят исследователи, которые оценивают границу СМД исходя из представлений о сродстве клеточных рецепторов к лигандам, характеризующемся, константой диссоциации (К0) лиганд-рецепторного комплекса. Для большинства известных рецепторов значение К0 составляет не менее 10"12 М [41]. Однако, существуют так называемые супераффинные рецепторы, образующие комплексы с более низкими значениями К0. Примерами таких рецепторов являются некоторые опиоидные пептиды (К0 порядка 10"14 М) [42] и брадикинин [38]. Таким образом, действие Б АД в концентрациях более 10"14 М еще можно объяснить на основе законов традиционной лиганд-рецепторной кинетики. Однако во многих экспериментах эффективными оказываются концентрации порядка 10"18-10"19 М, когда наличие молекул вещества в экспериментальном объеме носит вероятностный характер [8,40].

Суммируя результаты, полученные различными авторами, можно прийти к выводу, что граница СМД зависит от условий эксперимента и объекта исследований, поскольку для каждого вещества она определяется сродством к биомишени. Дополнительные трудности в экспериментах, связанных с оценкой эффективности сверхнизких концентраций БАВ, обусловлены также тем, что в настоящее время нет методов, которыми можно контролировать конечную концентрацию ниже 10'14 М [43].

Первые научные данные о действии БАВ в СМД были получены в середине 80-х годов группой исследователей, изучавшей влияние антиоксидантов на электрическую активность изолированного нейрона

виноградной улитки [44]. Эффект достигал максимума при 10"15 М, снижаясь до контрольного уровня при 10"17 М. В последующих экспериментах эффекты СМД БАВ были обнаружены на системах различного уровня организации (целостном организме, органах и тканях, культурах клеток, мембранах и биомакромолекулах) и для различных веществ: противоопухолевых и антиметастатических агентов [45-48], радиозащитных препаратов [49], ингибиторов и стимуляторов роста растений [50, 51], нейротропных препаратов разных классов [39, 52-54], гормонов [8, 55, 56], иммуномодуляторов [57], антиоксидантов [49], фуллеренов [58, 59]. За последние годы круг веществ, проявляющих эффект в СМД, расширился за счёт широкого класса препаратов природного происхождения. Таким свойством обладают некоторые растительные масла [60, 61]. Весьма интересным и важным фактом является обнаружение эффекта СМД у большого класса веществ природного происхождения, называемых авторами мембранотропными гомеостатическими тканеспецифическими биорегуляторами (МГТБ), которые были выделены из различных тканей позвоночных животных и растений [62]. МГТБ отличаются, прежде всего, способностью влиять на основные биологические процессы: адгезию, дифференцировку, апоптоз, миграцию и пролиферацию клеток, причем биологическая активность характеризуется наличием тканевой, но отсутствием видовой специфичности и проявляется наиболее ярко в сверхмалых дозах (СМД), соответствующих 10"8-10'15 мг/мл [63-65].

Таким образом, действие сверхмалых концентраций наблюдается для множества разнообразных БАВ и на различных биологических объектах. При этом удивительным является тот факт, что активность СМД не удается связать с какой-либо определенной структурой вещества или ступенью биологической организации системы. По-видимому, в основе феномена СМД лежат принципиально новые взаимодействия и ранее неизвестные механизмы.

1.1.1. Основные закономерности действия биологически активных веществ в сверхмалых дозах

Каждому из веществ, проявляющих активность в СМД, может соответствовать своя специфическая мишень, присущие только ему физиологические механизмы действия и особенности метаболизма. Однако при введении данных веществ в сверхнизких концентрациях наблюдается ряд общих закономерностей, которые касаются как формальных признаков (дозовые зависимости), так и показателей биологической активности [1, 56]:

1) Полимодальная зависимость «доза-эффект» в широком диапазоне концентраций. Максимумы активности наблюдаются в определенных интервалах доз, разделенных «мертвой зоной», где эффект отсутствует;

2) Воздействие СМД БАВ приводит к изменению чувствительности биообъектов к другим агентам, как эндогенным, так и экзогенным;

3) Влияние вещества на рецептор в концентрациях на порядки более низких, чем константа диссоциации лиганд-рецепторного комплекса;

4) Проявление эффекта СМД, когда в организме уже присутствует то же вещество в «физиологических» концентрациях;

5) Зависимость «знака» эффекта от начальных характеристик объекта;

6) Модификация влияния БАВ на биосистему по мере уменьшения концентрации - при действии вещества в СМД часто сохраняется активность, но исчезают побочные эффекты, характерные для высоких концентраций.

Рассмотрим данные закономерности более подробно. Полимодальные зависимости «доза-эффект» для различных веществ по форме можно разделить на несколько типов [56]: колоколообразные, с противоположными эффектами СМД и высоких концентраций, с несколькими максимумами и минимумами, с насыщением.

В экспериментах наиболее часто встречаются первые три типа дозовых зависимостей. Так, зависимости колоколообразного типа с максимумом в области концентраций 10"14-10"17 М были обнаружены при действии фактора

активации тромбоцитов на производство фактора некроза опухолей моноцитами человека [66], влиянии энкефалинов на активность человеческих естественных киллеров [67], модулировании респираторного взрыва нейтрофилов человека и макрофагов мыши опиоидными пептидами [68, 69], хемотаксисе нейтрофилов человека, вызванном фактором роста опухолей ТвР-Р1 [70], действии адриамицина на активность АТФ-азы [71], влиянии антиоксидантов на электрическую активность изолированного нейрона виноградной улитки [44]. В работе [19] было установлено, что форболовый эфир ингибирует процесс ПОЛ в мембранах эндоплазматического ретикулума в широком диапазоне концентраций с максимумом на дозовой зависимости в области 10'9-10'13 М.

Второй тип дозовой зависимости - с противоположными эффектами при малых и больших концентрациях наблюдался в экспериментах с Р-эндорфином, в частности, при воздействии данного пептида на активность человеческих естественных киллеров [72], а также на процессы образование антител у мышей [73] и человека [74]. Зависимости данного типа обнаружены также при изучении влияния морфина и эндорфина на потенциал действия нейронов мыши [75]. Кроме того, при исследовании нейропротекторного действия циклогексимида выяснилось, что введение его в дозе 10'5 М снижает жизнеспособность нейронов мозжечка крысы после воздействия токсичной дозы глутамата, в то время как СМД циклогексимида (10' М), напротив, увеличивает выживаемость нейронов [76]. В опытах [77] по изучению действия бруфена на активность простагландинсинтазы было обнаружено увеличение скорости образования продуктов с участием этого фермента при концентрациях бруфена Ю'п-10'14 М, тогда как в концентрации 10"6 М этот препарат проявлял ингибирующее действие.

Дозовая зависимость с несколькими максимумами довольно часто наблюдается в экспериментах с СМД. Например, при действии ацетилхолина, гибридного препарата ихфана, перспективного для терапии болезни Альцгеймера, транквилизатора феназепама и пероксида водорода на пероксидное окисление липидов в клеточных мембранах головного мозга

мышей и активность ацетилхолинэстеразы [30, 78]; пероксидов на рост клеток табака [79]; а-токоферола (а-ТФ [26, 27]) и тиротропин-рилизинг-гормона [25, 80]) на вязкостные характеристики биологических мембран; опиоидных пептидов на антителопродукцию лимфоцитов [81]; рилизинг-фактора гормона роста на уровень пролактина и секрецию гормона роста [82]. Дозовые зависимости с несколькими максимумами также наблюдаются при действии многочисленных природных МГТБ растительного и животного происхождения [63-65], фуллеренов [58, 59], эфирных масел растительного происхождения [60, 61], полидана [52].

Иногда в экспериментах с СМД встречается зависимость с насыщением при возрастающей концентрации действующего вещества, которая обычно наблюдается в опытах с «физиологическими» дозами. Такие зависимости (когда эффект, появляющийся при СМД, сохраняется при больших концентрациях) были получены, при действии пептида, активирующего аденилатциклазу, на внутриклеточную концентрацию Са2+ и секрецию инсулина в Р-клетках островков Лангерганса поджелудочной железы крысы [83]; при изучении действия гербицида из класса гидропероксидов на растительную культуру клеток [79]; в экспериментах по изучению воздействия метэнкефалина на пролиферацию лимфоцитов из лимфатических узлов мыши [84].

Следующей характерной особенностью влияния БАВ в СМД является изменение чувствительности биообъектов к действию различных агентов при наличии в системе сверхнизких концентраций вещества. Данный эффект проявляется, как правило, в повышении активности вводимых препаратов выше аддитивной, когда один из них применяется в СМД. Так, синергизм наблюдался для противоопухолевых агентов [45, 46] и гербицидов [2].

Наиболее удивительно, что многие эндогенные регуляторы оказываются активными в СМД при суммарной концентрации этих же веществ в плазме крови и цереброспинальной жидкости, на порядки превышающей вводимую дозу. Так, Р-эндорфин и динорфин вызывают респираторный взрыв нейтрофилов и активизируют иммунные клетки человека при введении в

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Часовская, Татьяна Евгеньевна, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1.Бурлакова Е.Б., Кондратов A.A., Мальцева E.JI. Сверхслабые воздействия химических соединений и физических факторов на биосистемы // Биофизика. -2004. - Т. 49. - № 3. - С. 551-564.

2. Бурлакова Е.Б. Эффект сверхмалых доз // Вестник РАН. - 1994. - Т. 64. - № 5.-С. 425-431.

3. Лебедева Н.Е., Горбатова E.H., Головкина Т.В., Бурлакова Е.Б. Метод скрининга веществ, действующих в сверхмалых концентрациях // Радиационная Биология Радиоэкология. - 2003. - Т. 43. - № 3. - С. 282-286.

4. Милевская И.А. Применение стимуляторов роста в сверхмалых (гомеопатических) дозах в сельском хозяйстве // Экологическая безопасность в АПК.-2008-№ 1.-С. 81.

5. Генераленко Н.Ю., Крюкова Л.Ю., Пушкин И.А. Эффекты малых и сверхмалых доз биологически активных веществ // Научные и образовательные проблемы гражданской защиты. - 2010. - № 3. - С. 6-7.

6. Захаров С.М., Иванов Д.Е., Емельянова Н.В., Ларин И.Н., Чупис В.Н., Губина Т.И. Особенности влияния растворов малых и сверхмалых концентраций солей меди и свинца на выживаемость дафний // Теоретическая и прикладная экология. - 2009. - № 3. - С. 43-47.

7. Терехова С.Ф., Греченко Т.Н. Регуляция функционального состояния нейрона сверхмалыми дозами различных биологически активных веществ. Неспецифический эффект // Радиационная биология Радиоэкология. - 2003. - Т. 43.-№3.-С. 315-319.

8. Ашмарин И.П., Каразеева Е.П., Лелекова Т.В. . К вопросу о развитии проблемы эффективности сверхмалых доз биологически активных соединений // Российский химический журнал. - 1999. - Т. XLIII. - № 5. -С. 21-28.

9. Yoshimasa Т., D.R. Sibley, M. Bouvier, R.J. Lefcowitz, M.G. Caron. Cross-talk between cellular signalling pathways suggested by phorbol-ester-induced adenylate cyclase phosphorylation // Nature. - 1987. - V. 327 - P. 67-70.

10. Bouvier M. Cross-talk between second messengers // Annals of the New York Academy of Sciences. - 1990. - V. 594. - P. 120-129.

11. Taylor C.W., Merritt J.E. Evidence that muscarinic cholinergic receptors selectively interact with either the cyclic AMP or the inositol phosphate second // Trends in Pharmacological Sciences. - 1986. - V. 7. - P. 238-242.

12. Молочкина E.M., Боровок H.B., Каткова Г.Д., Бурлакова Е.Б. Внутриклеточная сигнализация. - М.: Наука, 1991. - 320 с.

13. Владимиров И.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах - М.: Наука, Наука, 1972. - 252 с.

14. Козлов Ю.П., Данилов B.C., Каган В.Е., Ситковский М.В. О роли продуктов переокисления липидов в процессах лучевого поражения и злокачественном росте // Свободнорадикальное окисление липидов в биологических мембранах - М.: Изд. МГУ, 1972. - С. 118-134.

15. Мальцева Е.Л., Пальмина Н.П. Изменение вязкостных характеристик липидов мозга мышей под действием форболовых эфиров с использованием доксильных зондов // Биологические мембраны. - 1992. - Т. 9. - № 10-11. - С. 1023-1025.

16. Пальмина Н.П., Мальцева Е.Л., Бурлакова Е.Б. Протеинкиназа С -перокси-липидзависимый фермент // Химическая физика. - 1995. - Т. 14. - № 11.-С. 47-60.

17. Mal'tseva E.L. The role of lipid peroxidation products in the regulation of protein kinase С activity in vitro // Advances in experimental medicine and biology. -1997. - V. 400(A). - P.339-342.

18. Мальцева Е.Л., Курнакова H.B., Бурлакова Е.Б., Пальмина Н.П. Кинетическая кооперативность при ингибировании активности протеинкиназы С диеновыми конъюгатами из фосфолипидов и арахидоновой кислоты in vitro // Биохимия. - 1990. - Т. 55. - № 3. - С. 471-480.

19. Пынзарь Е.И., Богданова Н.Г., Пальмина Н.П. Влияние форболовых эфиров на спонтанное перекисное окисление липидов в мембранах эндоплазматического ретикулума in vitro // Биологические мембраны. - 1995. -Т. 12. -№ 3. - С. 279-287.

20. Бурлакова Е.Б., Крашаков С.А., Храпова Н.Г. Роль токоферолов в пероксидном окислении липидов биомембран // Биологические мембраны. -1998.-Т. 15.-№2.-С. 137-167.

21. Пальмина Н.П., Кледова Л.В., Панкова Т.В., Мальцева Е.Л., Белов В.В., Жерновков В.Е. Действие биологически активных веществ в сверхнизких концентрациях на физико-химические свойства мембран in vitro // Вопросы биохимической, медицинской и фармаколо-гической химии. - 2004. -№ 4. - С. 31-37.

22. Пальмина Н.П., Кледова Л.В., Панкова Т.В., Гаинцева В.Д. К вопросу о "рецепторном" механизме действия биологически активных веществ в сверхнизких концентрациях // Радиационная биология Радиоэкология. - 2003. -Т. 43.-№3.-С. 310-314.

23. Пальмина Н.П., Мальцева Е.Л., Курнакова Н.В., Бурлакова Е.Б. Влияние а-токоферола в широком спектре концентраций на активность ПК-С. Связь с пролиферацией и опухолевым ростом // Биохимия. - 1994. - Т. 59. - № 2.-С. 193-210.

24. Пальмина Н.П., Пынзарь Е.И., Курнакова Н.В. Форболовый эфир в концентрации 10-18 - 10-7 М ингибирует перекисное окисление липидов в плазматических мембранах мозгамкрыс посредством активации ПК-С // Биологические мембраны. - 1997. - Т. 14. - № 4. - С. 376-384.

25. Жерновков В.Е., Пальмина Н.П. Сравнительное изучение структурного состояния плазматических мембран головного мозга и печени мышей под действием тиролиберина in vitro // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2007. - Т. 144. - № 8. - С. 151-155.

26. Белов В.В., Мальцева E.JL, Пальмина Н.П. Изучение влияния низких концентраций альфа-токоферола на динамические параметры микросомальных мембран методом спиновых проб // Биофизика. - 2007. -Т. 52. - № 1. - С. 75-83.

27. Белов В.В., Мальцева E.JL, Пальмина Н.П. Модификация структуры плазматических мембран печени под действием альфа-токоферола in vitro // Биофизика. - 2011. - Т. 56. - № 2. - С. 372-375.

28. Пальмина Н.П., Богданова Н.Г., Мальцева Е.Л., Пынзарь Е.И. Форболовый эфир как модификатор структуры биологических мембран // Биологические мембраны. - 1992. - № 9. - С. 77-91.

29. Сторожок Н.М., Перевозкина М.Г., Никифоров Г.А., Русина И.Ф., Бурлакова Е.Б. Взаимосвязь строения и ингибирующего действия производных фенозана // Кинетика и катализ. - 2004. - Т. 45. — JNa 6. — С. 863-71.

30. Молочкина Е.М., Озерова И.Б., Бурлакова Е.Б. Действие фенозана и экзогенного ацетилхолина на ацетилхолинэстеразу и систему липидной пероксидации в мембранах клеток головного мозга // Российский химический журнал Менделеевского общества. - 1999. - Т. XLIII. - № 5. - С. 63-71.

31. Мальцева Е.Л., Пальмина Н.П., Бурлакова Е.Б. Природный (а-ТФ) и синтетический (калиевая соль фенозана) АО как регуляторы активности ПКС в широком диапазоне концентраций (10-4 - 10-20 М) // Биологические мембраны. - 1998. - Т. 15. № 2. - С. 199-212.

32. Трещенкова Ю.А., Голощапов А.Н., Бурлакова Е.Б. Действие малых доз фенозана на биологические свойства лактатдегидрогеназы и микровязкость мембран микросом мозга мышей // Радиационная биология Радиоэкология. -2003. - Т. 43. - № 3. - С. 320-322.

33. Бинюков В.И., Алексеева О.М., Миль Е.М., Албантова A.A., Фаттахов С.Г., Голощапов А.Н., Бурлакова Е.Б., Коновалов А.И. Изучение влияния фенозана, ИХФАН-10 и мелафена на эритроциты in vivo методом атомно-силовой микроскопии // Доклады Академии Наук. - 2011. - Т. 441. - № 1. - С. 114-117.

34. Ерохин В.Н., Кременцова А.В., Семенов В.А., Бурлакова Е.Б. Влияние антиоксиданта (4-гидрокси-3,5-дитретбутилфенил) пропионовой кислоты (фенозана) на развитие злокачественных новообразований // Известия Российской Академии Наук Серия биологическая. - 2007. - № 5. - С. 585-588.

35. Миль Е.М., Албантова А.А., Бурлакова Е.Б. Влияние антиоксиданта фенозана и облучения в малой дозе на содержание белков Р53 и BCL-2 у мышей разных линий // Радиационная биология Радиоэкология. - 2010. - Т. 50. -№1.~ С. 58-63.

36. Жижина Г.П., Заварыкина Т.М., Миль Е.М., Бурлакова Е.Б. Изменение структурных характеристик ДНК селезенки у мышей после введения фенозана и общего воздействия радиации в малой дозе с малой мощностью // Радиационная биология Радиоэкология. - 2007. - Т. 47. - № 4. -С. 414-420.

37. Pal'mina N.P., Gaintseva V.D., Burlakova Ye.B. Modification of chemotherapeutic activity in adriablastine with the synthetic antioxidant in low doses // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2003. - V. 135-136 (suppl). - P. 52-53.

38. Cunha J.M., Sachs D., Canetti C.A., Poole S., Ferreira S.H., Cunha F.Q. The critical role of leukotriene B4 in antigen-induced mechanical hyperalgesia in immunised rats // British Journal of Pharmacology. - 2003. - V. 139. - P. 1135-1145.

39. Духович Ф.С., Горбатова E.H., Курочкин B.K., Петрунин В.А. Количественный подход к определению понятия "сверхмалые дозы лекарственных веществ и ядов" // Российйский химический журнал. - 1999. - Т. XLIII. -№ 5. - С. 12-15.

40. Бурлакова Е.Б. Особенности действия сверхмалых доз биологически активных веществ и физических факторов низкой интенсивности // Российский химический журнал. - 1999. - T. XLIII. - № 5. -С. 3-11.

41. Варфоломеев С.Д., Гуревич К.Г. Биокинетика. - М.: ФАИР Пресс, 1998.-720 с.

42. Zaitsev S.V., Khegai L.A., Kim B.B.,Gavrilova E.M., Yanovsky O.G., Zakharova L.A. Involvement of opioid receptors in Met-enkephalin modulation of blast-transformation of mouse splenocytes // Immunology letters. - 1992. - V. 32(1). -P. 27-30.

43. Будников Г.К. Определение следовых количеств веществ как проблема современной аналитической химии // Соросовский образовательный журнал. -2000.-Т. 6. -№ 3. - С. 45-51.

44. Бурлакова Е.Б., Греченко Т.Н., Соколов Е.Н., Терехова С.Ф. Влияние ингибиторов радикальных реакций окисления липидов на электрическую активность изолированного нейрона виноградной улитки // Биофизика. - 1986. -Т. 31. -№ 5. - С. 921-922.

45. Крутова Т.В., Островская JI.A., Рыкова В.А., Корман Д.Б. Чувствительность опухолевых клеток к низким дозам противоопухолевых препаратов // Известия РАН Серия биологическая. - 1994. - № 5. - С. 738-744.

46. Safrit J., Tsuchitani Т., Zighubolm J., Bonavida В. Overcoming tumor cells drug resistance by low-doses of recombinant tumor necrosis factor and drug // Ultra-low doses. - France: Univ. Bordeaux. 1991. - P. 27-43.

47. Montfort H. A new homeopathic approach to neoplastic diseases: from cell destruction to carcinogen-induced apoptosis // The British Homeopathic Journal. -2000.-V. 89(2).-P. 78-83.

48. Lindemann A., Brossart P., Hoffken K., Flasshove M., Voliotis D., Diehl V., Kulmburg P., Wagner H., Mertelsmann R. Serum cytokine levels in cancer patients treated with different schedules of ultra-low-dose interleukin-2 // Journal of immunotherapy with emphasis on tumor immunology. - 1994. - V. 15(3). - P. 225230.

49. Бурлакова Е.Б., Конрадов A.A., Мальцева E.JI. Действие сверхмалых доз биологически активных веществ и низко интенсивных физических факторов // Химическая физика. - 2003. - Т. 22. - № 2. - С. 21-40.

50. Серова Р.Я., Зоз Н.Н., Морозова И.С., Ческис Т.А. Действие регуляторов роста растений в сверхмалых лозах в модельных опытах и полевых

условиях // Тезисы II Международного симпозиума: Механизмы действия сверхмалых доз. - М., 1995.-С. 176-177

51. Бурлакова Е.Б., Бойков П.Я., Папина Р.И., Карцев В.Г. Бимодальный эффект производных пиколиновой кислоты на скорость прорастания пшеницы и гороха // Известия РАН, Серия биологическая. - 1996. - № 1. - С. 39-45.

52. Тушмалова H.A., Прагина Л.Л., Мальцева Е.Л., Воеводина Е.Б., Бурлакова Е.Б. Влияние малых доз полидана на условный рефлекс пассивного избегания (как модели памяти) у крыс // Вестник Московского университета. Серия 16: Биология. - 2008. - № 4. - С. 3-7.

53. Молодавкин Г.М., Бурлакова Е.Б., Чернявская Л.И., Воронина Т.А., Хорсева Н.И., Середенин С.Б. Фармакологический анализ активности феназепама и флунитразепама, вводимых в сверхмалых дозах // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1996. - Т. 121. -№ 2. - С. 164-166.

54. Воронина Т.А., Молодавкин Г.М. Экспериментальный анализ транквилизирующего действия сверхмалых доз феназепама // Российский химический журнал. - 1999. - T. XLIII. - № 5. - С. 89-95.

55. Mannaioni P.F., Mastroianni R., Mastrangelo D. Adrenaline inhibits the immunological activation of human basophils at pharmacological and ultra-low doses // Medical science monitor. - 2010. - V. 16(7). - P. 227-232.

56. Зайцев C.B., Ефанов A.M., Сазанов Л.А. Общие закономерности и возможные механизмы действия биологически активных веществ в сверхмалых дозах // Российский химический журнал. - 1999. - T. XLIII. - № 5. - С. 28-33.

57. Паевская O.A., Юдина Ю.В., Белая О.Ф., Каншина H.H., Туркадзе К.А., Шабалина О.Ю., Нечаева И.П., Кашаева О.В. Влияние сверхмалых доз иммуномодулирующего препарата (Деринат) на миграционную активность лейкоцитов // Тезисы VI Международного конгресса "Слабые и сверхслабые поля и излучения в биологии и медицине". - М., 2012. - С. 173-174.

58. Novikov K.N., Berdnikova N.G., Novikov А.К., Lyusina O.Y., Muhitova O.G., Yablonskaya O.I., Minh H.D., Voeikov V.L. Changes in chemiluminescence of whole blood of COPD patients treated with Hypoxen® and effects of C60 fullerenes

on blood chemiluminescence // Medical science monitor. - 2012. - V. 18(2). - P. 7683.

59. Хохряков H.B., Колодов В.И. Влияние активных частиц на структуру полярных жидкостей // Химическая физика и мезоскопия. - 2009. - Т. 11. - № 3. - С. 398-402.

60. Мишарина Т.А., Бурлакова Е.Б., Фаткуллина Л.Д., Теренина М.Б., Крикунова Н.И., Воробьева А.К., Ерохин В.Н., Голощапов А.Н. Изменения в составе жирных кислот мозга и печени при возрастных изменениях у мышей высокораковой линии АКР и влияние приема эфирного масла чабера на лейкозный процесс // Биомедицинская химия. - 2011. - № 6. - С. 604-614.

61. Мишарина Т.А., Алинкина Е.С., Фаткуллина Л.Д., Воробьёва А.К., Медведева И.Б., Бурлакова Е.Б. Влияние состава смесей эфирных масел на их антиоксиданстные и антирадикальные свойства // Прикладная биохимия и микробиология.-2012.-Т. 48.-№ 1.-С. 117-123.

62. Ильина А.П., Куликова О.Г., Мальцев Д.И., Краснов М.С., Рыбакова Е.Ю., Скрипникова B.C., Кузнецова Е.С., Буряк А.К., Ямскова В.П., Ямсков И.А. Идентификация новых пептидов из межклеточное пространства методом MALDI-TOF масс-спектрометрии // Прикладная биохимия и микробиология. -2011.-Т. 47.-№2.-С. 135-140.

63. Ямскова В.П., Краснов М.С., Ямсков И.А. Новые экспериментальные и теоретические аспекты в биорегуляции. Механизм действия мембранотропных гомеостатических тканеспецифических биорегуляторов. - Saarbrucken: Lambert Academic Publishing. - 2012 - С. 127-131.

64. Ямскова В.П., Рыбакова Е.Ю., Виноградов A.A., Вечеркин В.В., Ямсков И.А. Исследование белка-инактиватора адгезивного гликопротеина из сыворотки крови млекопитающих // Прикладная биохимия и микробиология. -2004. - Т. 40. -№ 4. - С. 407-413.

65. Ямскова В.П., Скрипникова В.С, Молявка A.A., Ильина А.П., Краснов М.С., Маргасюк Д.В., Борисенко A.B., Березин Б.Б., Кузнецова Е.С., Буряк А.К., Ямсков И.А. Структурно-функциональные особенности

новогобиорегулятора, выделенного из ткани пигментного эпителия глаза быка // Биохимия. - 2009. - Т. 74. - № 9. - С. 1195-1203.

66. Rola-Pleszczynsky М. Priming of human monocytes with PAF augments their production of tumor necrosis factor // Journal of Lipids. - 1990. - V. 2. - P. 577-582.

67. Faith R.E., Liang H.J., Murgo A.J., Plotnikoff N.P. Neuroimmunomodulation with enkephalins: enhancement of human natural killer (NK) cell activity in vitro // Clinical immunology and immunopathology. - 1984. -V. 31(3).-P. 412-418.

68. Zaitsev S.V., Sazanov L.A., Koshkin A.A., Sud'ina G.F., Varfolomeev S.D. Respiratory burst inhibition in human neutrophils by ultra-low doses of [D-Ala2]methionine enkephalinamide // FEBS letters. - 1991. - V. 291(1). - P. 84-86.

69. Efanov A.M., Koshkin A.A., Sazanov L.A., Borodulina O.I., Varfolomeev S.D., Zaitsev S.V. Inhibition of the respiratory burst in mouse macrophages by ultra-low doses of an opioid peptide is consistent with a possible adaptation mechanism // FEBS Letters. - 1994. - V. 355(2). - P. 114-116.

70. Reibman J., Meixler S., Lee T.C., Gold L.I., Cronstein B.N., Haines K.A., Kolasinski S.L., Weissmann G. Transforming growth factor beta 1, a potent chemoattractant for human neutrophils, bypasses classic signal-transduction pathways // Proceedings of the National Academy of Sciences USA. - 1991. - V. 88(15).-P. 6805-6809.

71. Deliconstantinos G., Kopelkina-Tslboukidou L., Villotou V. Evaluation of membrane fluidity effects and enzyme activities alterations in adriamycin neurotoxicity // Biochemical pharmacology. - 1987. - V. 36(7). - P. 1153-1161.

72. Williamson S.A., Knight R.A., Lightman S.L., Hobbs J.R. Differential effects of beta-endorphin fragments on human natural killing // Brain, behavior, and immunity. - 1987. -V. 1(4). - P. 329-335.

73. Zakharova L.A., Belevskaya R.G., Yanovskii O.G. Participation by opioids in the immunostimulatory activity of myelopeptides // Biomedical science. - 1990. -V. 1(2).-P. 139-143.

74. Williamson S.A., Knight R.A., Lightman S.L., Hobbs J.R. Effects of beta endorphin on specific immune responses in man // Immunology. - 1988. - V. 65(1). -P. 47-51.

75. Crain S.M., Shen K.F.. Etorphine elicits anomalous excitatory opioid effects on sensory neurons treated with GM1 ganglioside or pertussis toxin in contrast to its potent inhibitory effects on naive or chronic morphine-treated cells // Brain Recearch.

- 1996. - V. 741. - P. 275-283.

76. Marotta D., Marini A., Banaudha K., Maharaj S., Ives J., Morrissette C.R., Jonas W.B. Non-linear effects of cycloheximide in glutamate-treated cultured rat cerebellar neurons // Neurotoxicology. - 2002. - V. 23(3). - P. 307-312.

77. Sergeeva M.Y., Gonchar M.V., Chistyakov V.V., Mevkh A.T. Superlow Concentrations of Ibuprofen Activate Cell Prostaglandin Synthesis // Applied Biochemistry and Biotechnology. - 1996. - V. 61. - P. 167-171.

78. Молочкина E.M., Озерова И.Б. Влияние фармакологически активных веществ разных классов в ультрамалых дозах на пероксидное окисление липидов в клеточных мембранах головного мозга и активность ацетилхолинэстеразы in vivo и in vitro // Радиационная биология Радиоэкология.

- 2003. - № 43(3). - Р. 294-300.

79. Богатыренко Т.Н., Редкозубова Г.П., Конрадов А.А. Влияние органических пероксидов на рост культивируемых клеток высших растений // Биофизика. - 1989. - Т. 34. - № 26. - С. 327-329.

80. Жерновков В.Е., Богданова Н.Г., Пальмина Н.П. . Структурные изменения в мембранах эндоплазматического ретикулума при воздейсвии сверхмалых доз тиролиберина in vitro // Биологические мембраны. - 2006. -Т. 23. -№ 1. - С. 52-59.

81. Munn N.A., Lum L.G. Immunoregulatory effects of alpha-endorphin, beta-endorphin, methionine-enkephalin, and adrenocorticotropic hormone on anti-tetanus toxoid antibody synthesis by human lymphocytes // Clinical immunology and immunopathology. - 1989. - V. 52(3) - P. 376-385.

82. Gick G.G., Zeytin F.N., Brazeau P., Ling N.C., Esch F.S., Bancroft C. Growth hormone-releasing factor regulates growth hormone mRNA in primary cultures of rat pituitary cells // Proceedings of the National Academy of Sciences USA. - 1984. - V. 81(5). - P. 1553-1555.

83. Yada Т., Sakurada M., Ihida K., Nakata M., Murata F., Arimura A., Kikuchi M. Pituitary Adenylate cyclase activating polypeptide is an extraordinarily potent intra-pancreatic regulator of insulin secretion from islet beta-cells // The Journal of biological chemistry. - 1994. - V. 269(2). - P. 1290-1293.

84. Dubinin K.V., Zakharova L.A., Khegai L.A., Zaitsev S.V. Immunomodulating effect of met-enkephalin on different stages of lymphocyte proliferation induced with concanavalin A in vitro // Immunopharmacology and immunotoxicology. - 1994. - V. 16(3). - P. 463-472.

85. Артемьев И.Ю., Даринский Ю.А., Сологуб М.И., Ложкина Т.К. Новый механизм действия вазопрессина на мембраны нейронов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1991. - Т. 111. - № 2. - С. 115-116.

86. Palmina N.P., Belov V.V., Maltseva E.L. Modification of lipid domains in liver plasmatic membranes by a-tocopherol in a wide concentration range in vitro // Chemistry and Physics of Lipids. - 2007. - V. 149(suppl.). - P. 37-38.

87. Blumenfeld L.A., Grosberg A.Ju., Tikhonov A.N. . Fluctuations and mass action law breakdown in statistical thermodynamics of small systems // The Journal of chemical physics. - 1991. -V. 95(10).-P. 7541-7544.

88. Розен В.Б., Матарадзе Г.В.,Смирнова O.B., Смирнов А.Н. Половая дифференцировка функций печени. - М: Медицина. - 1991. - 400 с.

89. Robertson A.D., Grutsch JF. Jr. Biphasic responses, quantal signals and cellular behaviour // Journal of theoretical biology. - 1987. - V. 125(1). - P. 41-60.

90. Бурлакова Е.Б., Конрадов А.А., Худяков И.В. Воздействие химических агентов в сверхмалых дозах на биологические объекты // Известия АН СССР. Серия биологическая. - 1990. -№ 2. - С. 184-188.

91. Гуревич К.Г. Применение математического моделирования для определения параметров рецепторного связывания // Вестник Московского университета. Серия2 Химия. -2001. -Т. 42. -№ 1. -С. 131-134.

92. Хохлов А.П., Ярыгин К.Н. Специфическое связывание синтетического антиоксиданта из ряда пространственно затрудненных фенолов ЗН-фенозана с изолированными энтероцитами крыс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1988. - Т. 105. - № 5. - С. 545-547.

93. Бурлакова Е.Б., Хохлов А.П. Изменение структуры и состава липидной фазы биологических мембран при действии синтетических антиоксидантов: Влияние на передачу информационного сигнала на клеточном уровне // Биологические Мембраны. - 1985. - Т. 2. - № 6. - С. 557-562.

94. Рыжкина И.С., Муртазина Л.И., Киселева Ю.В., Коновалов А.И. Свойства супрамолекулярных наноассоциатов, образующихся в водных растворах низких и сверхнизких концентраций биологически активных веществ // Доклады Академии наук. - 2009. - Т. 428. - № 4. - С. 487-491.

95. Григорьев Е.И., Хавинсон В.Х., Малинин В.В., Григорьев А.Е., Кочнев И.Н., Кудрявцева Т.А. Изучение роли водной среды в механизмах действия пептидов в малых и сверхмалых дозах // Радиационная биология Радиоэкология. - 2003. - Т. 43. - № 3. - С. 358-362.

96. Воейков В.Л., Виленская Н.Д., До Минь Ха, Малышенко С.И., Буравлева Е.В., Яблонская О.И., Тимофеев К.Н. Устойчиво неравновесное состояние бикарбонатных водных систем // Журнал физической химии. - 2012. -Т. 86. - № 9. - С. 1518-1521.

97. Del Giudice Е., Tedeschi A. Water and autocatalysis in living matter // Electromagnetic biology and medicine. - 2009. - V. 28(1). - P. 46-52.

98. Зубарева Г.М., Зубарев A.M., Бутавин Н.Ю., Алексеев A.B. Вода как основной компонент биологических систем в аспекте исследовательских работ и результатов их внедрения в обучение и практику // Вестник Тверского государственного университета. Серия: Химия. - 2011. - № 12. - С. 24-30.

99. Зубарева Г.М., Бутавин Н.Ю. Эффекты действия малых концентраций некоторых аминокислот на водный компонент их расстворов // Вестник Тверского государственного университета Серия: Химия. - 2011. - № 14. - С. 55-61.

100. Ширинкин С.В., Шапошников А.А., Волкова Т.О., Андриевский Г.В., Давыдовский А.Г. Гидратированный фуллерен как инструмент для понимания роли особых структурных свойств водной среды живого организма для его нормального функционирования // Научные ведомости Белгородского государственного университета Серия: Естественные науки. - 2012. - Т. 19. -№9.-С. 122-129.

101. Шенынин А.И., Жиров А.А., Назаров Г.В., Злобин В.А. . Влияние сверхнизких концентраций феназипама на структуру воды // Биомедицина. -2006.-Т. 1. -№ 3. - С. 134-137.

102. Csermely P. Water and cellular folding processes // Cellular and Molecular Biology (Noisy-le-grand). - 2001. - V. 47(5). - P. 791-800.

103. Aksyonov S.I., Knox P.P., Kononenko A.A., Chamorovsky S.K., Rubin A.B. Mechanisms of hydration effects on the structural-dynamic and functional characteristics of photosynthetic membranes in various purple bacteria // European Biophysics Journal. - 1997. - V. 26(6). - P. 461-470.

104. Крупянский Ю.Ф., Ещенко Г.В., Есин C.B., Михийлюк М.Г., Ветров О.Д., Коротина О.А., Захарова Н.И., Нокс П.П., Рубин А.Б. Изучение изменения структуры белков при их гидратации методом диффузного рассеяния рентгеновских лучей // Биофизика. - 2005. - Т. 50. - № 6. - С. 1002-1012.

105. Митчелл Дж. С. Акваметрия. Пер. с англ. под ред. Ф. Б. Шермана. - М.: Химия, 1980.-600 с.

106. Эйзенберг Д., Кауцман В. Структура и свойства воды. - Д.: Гидрометео-издат, 1975. - 280 с.

107. Самойлов О.Я., Носова Т.А. . Структурные особенности воды // Журнал структурной химии. - 1966. - Т. 6. - № 5. - С. 767-77.

108. Чумаевский Н.А., Родникова М.Н., Виноградов С.А. Времена жизни и динамика водородных связей жидкой воды // Журнал физической химии. -2006. - Т. 80. - № 10. - С. 1747-1752.

109. Зацепина Г.Н. Физические свойства и структура воды. - М.: Изд-во МГУ, 1998.-184 с.

110. Bernal J.D., Fowler. R.H. A Theory of Water and Ionic Solution, with Particular Reference to Hydrogen and Hydroxyl Ions // The Journal of chemical physics. - 1933.-V. 1(8).-P. 515-548.

111. Наберухин Ю.И. Загадки воды // Соровский образовательный журнал. -1996.-№5.-С. 41-48.

112. Немухин А.В. Ван-дер-ваальсовы кластеры // Соровсовский образовательный журнал. - 2001. - № 7. - С. 39-44.

113. Немухин А.В. Молекулы в матрицах и кластерах // Соросовский образовательный журнал. - 2000. - № 6. - С. 27-31.

114. Frank H.S. The structure of water // Federation proceedings. - 1965. - V. 4. -P. 1-11.

115. Боровков A.B., Антипова M.JI., Петренко B.E., Кесслер Ю.М. Влияние на структуру модельной жидкости учета водородных связей в потенциале парного взаимодействия вода-вода // Журнал структурной химии. - 2004. - Т. 45.-№4.-С. 678-682.

116. Shin J.W., Hammer N.I., Diken E.G., Johnson M.A., Walters R.S., Jaeger T.D., Duncan M.A., Christie R.A., Jordan K.D. Infrared signature of structures associated with the H+(H20)n, n = 6-27, clusters // Science. - 2004. - V. 304(5674). -P. 1137-1140.

117. Frank N.K., Richard J. S. Water clusters: Untangling the mysteries of the liquid, one molecule at a time // Proceedings of the National Academy of Sciences USA. - 2001. - V. 98(19). - P. 10533-10540.

118. Маленков Г.Г., Наберухин Ю.И., Волошин В.П. Коллективные эффекты в движении молекул в жидкостях // Журнал физической химии. -2012. - Т. 86. - № 9. - С. 1485-1488.

119. Маленков Г.Г., Наберухин Ю.И., Волошин В.П. Согласованное движение молекул в водных средах. Извлечение корреляции из шума // Российский химический журнал. - 2009. - Т. LIII. - № 6. - С. 25-32.

120. Relph R.A., T.L. Guasco, В.М. Elliott, M.Z. Kamrath, A.B. McCoy, R.P. Steele, D.P. Schofield, K.D. Jordan, A.A. Viggiano, E.E. Ferguson, & M.A. Johnson. . How the shape of an H-bonded network controls proton-coupled water activation in HONO formation // Science. - 2010. - V. 327. - P. 308-312.

121. Антонченко В.Я., Давыдов A.C., Ильин B.B. Основы физики воды. -Киев: Наукова Думка, 1994. - 672 с.

122. Зенин С.В., Тяглов Б.В. Гидрофобная модель структуры ассоциатов молекул воды // Журнал физической химии. - 1994. - Т. 68. - № 4. - С. 636-641.

123. Зенин С.В, Новые представления о состоянии и свойствах водной среды // Сложные системы. - 2012. - № 1. - С. 59-79.

124. Фесенко Е.Е., Терпугов E.JI. Необычные свойства воды в тонких слоях // Биофизика. - 1999. - № 44. - С. 5-9.

125. Домрачев Г.А., Родыгин Ю.Л., Селивановский Д.А. Роль звука и жидкой воды как динамически нестабильной полимерной системы в механохимически активированных процессах продуцирования кислорода в условиях Земли // Журнал химической физики. - 1992. - Т. 66. - № 3. - С. 851855.

126. Ikeda S., Takata Т., Komoda М., Нага М., Kondo J.N., Domen К., Tanaka A., Hosono Н., Kawazoe Н. . Mechano-catalysis - a novel method for overall water splitting // Physical chemistry, chemical physics. - 1999. - V. 1. - P. 4485-4491.

127. Домрачев Г.А., Селивановский Д.А., Родыгин Ю.Л., Диденкулов И.Н. Потери энергии звука при сонолизе воды // Журнал физической химии. - 1998. -Т. 72.-№2.-С. 347-352.

128. Домрачев Г.А., Селивановский Д.А., Диденкулов И.Н., Родыгин Ю.Л., Вакс В.Л., Стунжас. П.А. Эффективность образования Н202 и радикалов воды в природе // Препринт ИПФ РАН. - 2000. - С. 537-542.

129. Маргулис М.А., Гаврилов В.А. Образование пероксида водорода и оксидов азота при электрическом разряде и акустической кавитации в дистиллированной воде // Журнал химической физики. - 2000. - Т. 66. - № 3. -С. 771-775.

130. Voeikov V.L., Naletov V.I. Weak Photon Emission of Non-Linear Chemical Reactions of Amino Acids and Sugars Aqueous Solutions // Biophotons. - Dortrecht, Netherlands: Kluwer Academic Publishers, 1998. - C. 93-108.

131. Воейков В.JI., Баскаков И.В., Кафкалиас К., Налетов В.И. Инициация сверхлабым уф-облучением или перекисью водорода вырожденно-разветвленной цепной реакции дезаминирования глицина // Биоорганическая химия. - 1996. - Т. 22. - № 1. - С. 39-47.

132. Voeikov V.L. Reactive oxygen species - (ROS) pathogens or sources of vital energy? Part 1. ROS in normal and pathologic physiology of living systems // Journal of Alternative and Complementary Medicine. - 2006. - V. 12(2). - P. 111-118.

133. Воейков В.Л. Ключевая роль устойчиво неравновесного состояния водных систем в биоэнергетике // Российйский химический журнал. - 2009. - Т. LIII. -№ 6. - С. 41-49.

134. Pollack G.H. Is the cell a gel and why does it matter // Japanese Journal of Physiology.-2001.-V. 51(6).-P. 649-660.

135. Zheng J.M., Wexler A., Pollack G.H. . Effect of buffers on aqueous solute-exclusion zones around ion-exchange resins // Colloid Interface Science. - 2009. - V. 332. - P. 511-515.

136. Черников Ф.Р. Экспериментальные исследования структурной динамики жидких гомеопатических средств. - М.: Индрик, 2002. - С. 17-24.

137. Черников Ф.Р. Фрактальная структура гомеопатических препаратов // Радиационная биология. Радиоэкология. - 2003. - Т. 43. - № 3. - С. 367-369.

138. Зубарева Г.М., Каргаполов А.В., Ягужинский Л.С. Влияние сверхмалых количеств пероксида водорода на водную основу растворов // Биофизика. -2003.-Т. 48.-№4. _с. 581-584.

139. Зубарева Г.М., Каргаполов A.B., Ягужинский JI.C. Флуктуации коэффициентов пропускания воды и водных растворов солей в ИК-области спектра // Биофизика. - 2003. - Т. 48. - № 2. - С. 197-200.

140. Белов В.В., Беляева И.А., Шматов Г.П., Зубарева Г.М., Пальмина Н.П. ИК-спектрометрия тонких слоев воды и механизм действия альфа-токоферола в малых дозах // Доклады Академии Наук. - 2011. - Т. 439. - № 1. - С. 68-71.

141. Хакен Г. Синергетика. Иерархии неустойчивостей в самоорганизующихся системах и устройствах. - М.: Мир, 1985. - 424 с.

142. Гленсдорф П., Пригожин И.Р. Термодинамическая теория структуры, устойчивости и флуктуаций. - М.: Мир, 1973. - 280 с.

143. Белоусов Б.П. Периодически действующая реакция и ее механизм // Сборник рефератов по радиационной медицине. - 1958. - С. 145-147.

144. Жаботинский A.M. Периодический ход окисления малоновой кислоты в растворе (исследование кинетики реакции Белоусова) // Биофизика. - 1964. -№9.-С. 306-311.

145. Блюменфельд JI.A. Параметрический резонанс, как возможный механизм действия сверхнизких концентраций биологически активных веществ на клеточном и субклеточном уровнях // Биофизика. - 1993. - Т. 38. - № 1. - С. 129-132.

146. Блюменфельд JI.A. Решаемые и нерешаемые проблемы биологической физики. - Москва: Едиториал УРСС, 2002. - 160 с.

147. Рыжкина И.С., Муртазина Л.И., Шерман Е.Д., Валитова Ю.Н., Катаев Е.А., Коновалов А.И. Водные растворы макроциклического пиридин-пиррольного соединения низких концентраций: взаимосвязь параметров супрамолекулярных наноразмерных ассоциатов, физико-химических свойств и физиологической активности // Доклады Академии Наук. - 2010. - Т. 433. - № 5.-С. 647-651.

148. Рыжкина И.С., Муртазина Л.И., Масагутова Э.М., Мишина O.A., Павлова Т.П., Фридланд C.B., Коновалов А.И. Самоорганизация растворов хлористого натрия в отсутствие и в присутствии биологически активного

вещества низкой концентрации в нормальных и гипоэлектромагнитных условиях // Доклады Академии Наук. - 2012. - Т. 446. - № 6. - С. 646-652.

149. Рыжкина И.С., Киселева Ю.В., Тимошева А.П., Сафиуллин P.A., Кадиров М.К., Валитова Ю.Н., Коновалов А.И. Водные растворы амфифильного производного калике[4]резорцинарена низких концентраций: самоорганизация, физико-химические свойства и биологическая активность в нормальных и гипоэлектромагнитных условиях // Доклады Академии Наук. -2012. - Т. 447. - № 1. - С. 56-62.

150. Рыжкина И.С., Киселева Ю.В., Желтухина Г.А., Окороченков С.А., Муртазина Л.И., Тимошева А.П., Небольсин В.Е., Коновалов А.И. Взаимосвязь самоорганизации, физико-химических свойств и биологической активности водных растворов производных гемина // Доклады Академии Наук. - 2011. - Т. 440.-№ 1.-е. 59-63.

151. Алексеева О. М., Фаткулина Л. Д., Ким Ю. А., Бурлакова Е. Б., Голощапов А. Н., Фаттахов С. Г., Коновалов А. И. Действие регулятора роста растений мелафена на мембраны клеток животных // Доклады Академии Наук. - 2008. - Т. 422. - № 3. - С. 402-404.

152. Алексеева О.М., Шибряева Л.С., Кременцова A.B., Ягольник Е.А., Ким Ю.А., Голощапов А.Н., Бурлакова Е.Б., Фаттахов С.Г., Коновалов А.И. Влияние водных растворов мелафена в широком диапазоне концентраций на микродомены фосфолипидной мембраны // Доклады Академии Наук. - 2011. -Т. 439.-№4.-С. 548-550.

153. Рыжкина И.С., Киселева Ю.В., Муртазина Л.И., Пальмина Н.П., Белов В.В., Мальцева Е.Л., Шерман Е. Д., Тимошева А.П., Коновалов А.И. Влияние концентрации а-токоферола на самоорганизацию, физикохимические свойства растворов и структуру биологических мемебран // Доклады Академии Наук. -2011. - Т. 438. - № 5. - С. 635-639.

154. Рыжкина U.C., Муртазина Л.И., Коновалов А.И. Действие внешнего электромагнитного поля - условие образования наноассоциатов в

высокоразбавленных водных растворах // Доклады Академии Наук. - 2011. - Т. 440.-№6.-С. 778-781.

155. Скрипникова B.C., Краснов М.С., Березин Б.Б., Бабушкина Т.А., Борисенко А.В., Измайлов Б.А., Ямскова В.П., Ямсков И.А. Биологически активный в сверхмалых дозах низкомолекулярный белок склеры // Доклады Академии Наук. - 2007. - Т. 417. - № 6. - С. 736-745.

156. Краснов М.С., Маргасюк Д.В., Ямсков И.А., Ямскова В.П. Действие новых регуляторных белков из растений сверхмалых дозах // Радиационная биология Радиоэкология. - 2003. - Т. 43. - № 3. - С. 269-272.

157. Ямскова В.П., Мальцев Д.И., Куликова О.Г., Рыбакова Е.Ю., Богданов В.В. К вопросу о механизме биологического действия сверхмалых доз // Тезисы VI Международного конгресса «Слабые и сверхслабые поля и излучения в биологии и медицине» - 2012. - С. 197- 198.

158. Ямскова В.П., Ямсков И.А. Механизм биологического действия физико-химических факторов в сверхмалых дозах // Российский химический журнал. - 1999. - Т. 43. - № 2. - С. 74-79.

159. Геннис Р. Биомембраны: молекулярная структура и функции. Пер. с англ. - М.: Мир, 1997. - 624 с.

160. Mahler S.M., Wilce B.C., Shanley P.A. . Studies on regenerating liver and hepatoma plasma membranes~II. Membrane fluidity and enzyme activity // The International journal of biochemistry. - 1988. -V. 20. - P. 613 - 619.

161. Артюхов В.Г., Наквасина M.A. Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами: Учеб. пособие. - Воронеж: Издательство Воронежского государственного университета, 2000. - 296 с.

162. Dowhan W., Bogdanov М. Functional roles of lipids in membranes // Biochemistry of Lipids, Lipoproteins and Membranes, 4th Ed. - B.V.: Elsevier Science, 2002.-P. 1-34

163. Kusumi A., Suzuki K.G., Kasai R.S., Ritchie K., Fujiwara T.K. Hierarchical mesoscale domain organization of the plasma membrane // Trends in Biochemical Sciences. - 2011. - V. 36(11). - P. 604-615.

164. Morone N., Nakada C., Umemura Y., Usukura J., Kusumi A. Three-dimensional molecular architecture of the plasma-membrane-associated cytoskeleton as reconstructed by freeze-etch electron tomography // Methods in cell biology. -2008.-V. 88.-P. 207-236.

165. Hagiwara A., Tanaka Y., Hikawa R., Morone N., Kusumi A., Kimura H., Kinoshita M. Submembranous septins as relatively stable components of actin-based membrane skeleton // Cytoskeleton (Hoboken). - 2011. -V. 68(9). - P. 512-525.

166. Pike LJ. Lipid rafts: heterogeneity on the high seas // The Biochemical journal. - 2004. - V. 378. - P. 281-292.

167. Pike L.J. The challenge of lipid rafts // Journal of lipid research. - 2009. - V. 50(Suppl). - P. 323-328.

168. Zajchowski L.D., Robbins S.M. Lipid rafts and little caves. Compartmentalized signalling in membrane microdomains // European Journal of Biochemistry. - 2002. - V. 269(3). - P. 737-752.

169. van Blitterswijk W.J., van der Luit A.H., Veldman R.J., Verheij M., Borst J. Ceramide: second messenger or modulator of membrane structure and dynamics // The Biochemical journal. - 2003. - V. 369(Pt2). - P. 199-211.

170. Marin R., Marrero-Alonso J., Fernandez C., Cury D., Diaz M. Estrogen receptors in lipid raft signalling complexes for neuroprotection // Frontiers in bioscience (Elite edition). - 2012. - V. 4. - P. 1420-1433.

171. Lemaire-Ewing S., Lagrost L,. Neel D. Lipid rafts: a signalling platform linking lipoprotein metabolism to atherogenesis // Atherosclerosis. - 2012. - V. 221(2).-P. 303-310.

172. Toews M.L., Prinster S.C., Schulte N.A. Regulation of alpha-IB adrenergic receptor localization, trafficking, function, and stability // Life Sciences. - 2003. - V. 74(2-3).-P. 379-389.

173. De Waard M., Hering J., Weiss N., Feltz A. How do G proteins directly control neuronal Ca2+ channel function // Trends in Pharmacological Sciences. -2005. - V. 26(8). - P. 427-436.

174. Guo W., Shi L., Filizola M., Weinstein H., Javitch J.A. Crosstalk in G protein-coupled receptors: changes at the transmembrane homodimer interface determine activation // Proceedings of the National Academy of Sciences USA. -2005. - V. 102(48). - P. 17495-17500.

175. Buchner K. The role of protein kinase С in the regulation of cell growth and in signalling to the cell nucleus // Journal of cancer research and clinical oncology. -2000.-V. 126(1).-P. 1-11.

176. Fulda S., Debatin K.M. Exploiting death receptor signaling pathways for tumor therapy // Biochemica et biophysica acta. - 2004. - V. 1705(1). - P. 27-41.

177. Angelow S., Zeni P., Hohn В., Galla H.J. Phorbol ester induced short- and long-term permeabilization of the blood-CSF barrier in vitro // Brain Recearch. -2005.-V. 1063(2).-P. 168-179.

178. Burlakova Ye.B., Molochkina Ye.M., and Pal'mina N.P. Role of membrane lipids in control of enzymatic activity // Advances in Lipid Research. - New York: Pergamon Press, 1980.-P. 163-179.

179. Мальцева Е.Л., Бурлакова Е.Б. Различие в ответе мембран клеток мозга и печени на действие антиоксиданта и жирной кислоты in vitro (по изменению активности циклаз и вязкости) // Биологические мембраны. - 1986. - Т. 3. - № 8.-С. 773-780.

180. Gutierrez J., Ballinger S. W., Darley-Usmar V. M., Landar A. Free radicals, mitochondria, and oxidized lipids: the emerging role in signal transduction in vascular cells // Circulation research. - 2006. - V. 99(9). - P. 924-932.

181. Droge W. Free radicals in the physiological control of cell function // Physiological Reviews. - 2002. - V. 82(1). - P. 47-95.

182. Lin D., Takemoto D.J. Oxidative activation of protein kinase Cgamma through the CI domain. Effects on gap junctions // The Journal of biological chemistry. - 2005. - V. 280(14). - P. 13682-13693.

183. Бурлакова Е.Б. Роль липидов мембран в передаче информации // Биохимия липидов и их роль в метаболизме клетки. - М.: Наука, 1981.-е. 2326.

184. Wang X., Quinn P.J. . The location and function of vitamin E in membranes // Molecular membrane biology. 2000; 17(3): 143-56.

185. Lemaire-Ewing S., Desrumaux C., Neel D., Lagrost L. Vitamin E transport, membrane incorporation and cell metabolism: Is alpha-tocopherol in lipid rafts an oar in the lifeboat? // Molecular nutrition and food research. - 2010. - V. 54(5). - P. 631640.

186. Atkinson J., Harroun Т., Wassail S.R., Stillwell W., Katsaras J. The location and behavior of alpha-tocopherol in membranes // Molecular nutrition and food research. - 2010. - V. 54(5). - P. 641 -651.

187. Burlakova E.B., Palmina N.P., Maltseva E.L. Physico-Chemical System Regulating Lipid Peroxidation in Biomembranes during Tumor Growth // Membrane Lipid Oxidation. - 1990. - V. 3. - P. 209-237.

188. Полезина A.C., Аникиенко К. А., Курочкин B.K. Разработка методологичееких основ обнаружения повреждающих воздействий сверхмалых количеств физиологически активных веществ на форменные элементы крови человека // Российский химический журнал. - 1999. - Т. XLIII. - № 5. - С. 7279.

189. Архипова Г.В., Бурлакова Е.Б., Семиохина А.Ф. Антирадикальный механизм защитного действия синтетических антиоксидантов на эпилептоформные припадки у крыс и их гибель от кровоизлияний в мозг // Доклады АН СССР. - 1982. - Т. 267. - № 2. - С. 469-471.

190. Кириллов В.Н. Влияние фенозана на канцерогенез, индуцированный в почках крыс нитрозодиметиламином // Экспериментальная онкология. - 1988. -Т. 10.-№5.-С. 23-26.

191. Беспалов В.Г., Александров В.А., Корман Д.Б. Антиканцерогенный эффект фенольного антиоксиданта фенозана (4-гидрокси-3,5-ди-трет-

бутилфенилпропионовой кислоты) на спонтанный канцерогенез у крыс и мышей // Сибирский онкологический журнал. - 2012. - № 2. - С. 52-56.

192. Наглер Л.Г., Гуревич С.М., Козаченко А.И. Изменения активностей антиоксидантных ферментов под влиянием фенозана в малых дозах // Тезисы IV Междунар. Симпозиума «Механизмы действия СМД». - 2008. - С. 77-78.

193. Щегловитова О.Н., Орлова Т.Г., Склянкина H.H. Влияние фенозана на репродукцию вируса простого герпеса в первичной культуре эндотелия пупочной вены и диплоидной культуре фибробластов человека // Тезисы IV Междунар. Симпозиума «Механизмы действия СМД». - 2008. - С. 120-121.

194. Трещенкова Ю.А., Герасимов Н.Ю., Голощапов А.Н., Бурлакова Е.Б. . Противоопухолевая активность фенозана в сверхмалых дозах // Тезисы IV Междунар Симпозиума «Механизмы действия СМД». - 2008. - С. 104-107.

195. Жигачева И.В., Евсеенко Л.С., Бурлакова Е.Б. Фенозан калия как препарат для защиты тканей в условиях гипоксии и ишемии // Тезисы VIII Всероссийской научной конференции "Химия и медицина". - 2010. - С. 168170.

196. Пальмина Н.П., Мальцева ЕЛ., Пынзарь Е.И., Бурлакова Е.Б. Модификация активности протеинкиназы С лигандами в сверхмалых концентрациях. Роль протеинкиназы и ее эффекторов в процессах пероксидного окисления // Российйский химический журнал. - 1999. - Т. XLIII. - № 5. - С. 55-62.

197. Горбатова E.H., Духович Ф.С., Курочкин В.К. Изучение эффектов сверхмалых доз фенозана // Российский химический журнал. - 1999. - Т. XLIII. -№ 5. - С. 80-81.

198. Паршина Е.Ю., Гендель Л.Я., Рубин А.Б. Влияние ихфанов на структурные особенности мембраны эритроцитов // Известия Российской академии наук. Серия биологическая. - 2007. - № 6. - С. 645-649.

199. Паршина Е.Ю., Гендель Л.Я., Рубин А.Б. Влияние новых гибридных антиоксидантов - ихфанов - на кинетику аскорбат-индуцированного

восстановления радикальных центров спиновых зондов в липосомах // Биофизика. - 2005. - Т. 50. - № 4. - 676-679.

200. Перевозкина М.Г., Сторожок Н.М., Борисенко В.Е. Сравнительная активность радикалов пространственно затрудненных фенолов производных фенозана // Вестник Тюменского государственного университета. - 2006. - № 3. - С. 58-66.

201. Фаткулина Л.Д., Молочкина Е.М., Мишарина Т.А., Зорина О.М., Теренина М.Б., Голощапов А.Н., Бурлакова Е.Б. Влияние препарата ИХФАН в широком диапазоне концентраций на состояние мембран мозга мышей in vivo // Тезисы IV Междунар. Симпозиума «Механизмы действия СМД». - 2008. - С. 109-110.

202. Loten E.G., Redshaw-Loten J.C. Preparation of rat liver plasma membranes in a high yield // Analytical biochemistry. - 1986. - V. 154(1). - P. 183-185.

203. Lowry O.H., Rosenbrouch N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent // The Journal of biological chemistry. -1951.-V. 193(1).-P. 265-275.

204. Bligh E. G., Dyer W. J. A rapid method of total lipid extraction and purification // Canadian journal of biochemistry and physiology. - 1959. - V. 37. - P. 911-917.

205. Гриффит О., Джост П., Метод спиновых меток. Теория и применение. -М.: Мир, 1979.-638 с.

206. Бурлакова Е.Б., Голощапов А.Н. Исследование микровязкости и структурных переходов в липидах и белках клеточных мембран методом спиновых зондов // Метод спиновых зондов (проблемы и перспективы). - М.: Наука, 1986.-С. 212-225.

207. Мальцева Е.Л. Спиновые зонды в изучении биологических мембран // Применение электронного парамагнитного резонанса для исследования биологических систем. - М.: МАКС Пресс. - 2005. - С. 102-121.

208. Buttefield D.A., Whisnant C.C., Chesnut D.B. On the use of the spin labeling technique in the study of erythrocyte membranes // Biochemica et biophysica acta. - 1976. - V. 426(4). - P. 697-702.

209. Sauerherber R.D., Gordon L.M., Grosland R.D., Kuwahara M.D. Spin-label studies on rat liver and heart plasma membranes: do probe-probe interactions interfere with the measurement of membrane properties? // The Journal of membrane biology. - 1977. - V. 31(1-2). - P. 131-169.

210. Кузнецов A.H., ed. Метод спинового зонда. M.: Наука, 1976.

211. Whetton A.D., Houslay M.D., Dodd N.J.F., Evans W.H. The lipid fluidity of rat liver membrane subfractions // Biochemical journal. - 1983. - V. 214(3). - P. 851-854.

212. Curtis M.T., Gilfor D., Farber J.L. Lipid peroxidation increases the molecular order of microsomal membranes // Archives of biochemistry and biophysics. - 1984. - V. 235(2). - P. 644-649.

213. Shinitzky M., Inbar M. Microviscosity parameters and protein mobility in biological membranes // Biochimica et biophysica acta. - 1976. - V. 433(1). - P. 133-149.

214. Кухлинг X., ed. Справочник по физике. M.: Мир, 1983.

215. Chapman D. Phase transitions and fluidity characteristics of lipids and cell membranes // Quarterly reviews of biophysics. - 1975. - V. 8. - P. 185-191.

216. Severcan F., Cannistraro S. A spin label ESR and saturation transfer ESR study of alpha-tocopherol containing model membranes // Chemistry and Physics of Lipids. - 1990. - V. 53(1). - P. 17-26.

217. Рихирева Г.Т., Голубев И.Н., Прудченко И.А., Михалева И.И. Изменение динамической структуры клеточных мембран под действием дельта-сон-индуцирующего пептида (ДСИП) // Биологические мембраны. - 2003. - Т. 20.-№5.-С. 409-418.

218. Азизова О.А., Торховская Т.И. , Лопухин Ю.М. Изучение структурно-функциональных свойств Са-АТФаза саркоплазматического ретикулума //

Метод спиновых зондов (проблемы и перспективы). - М.: Наука, 1986. - С. 143163.

219. Berne B.J., Pecora R., Dynamic Light Scattering - with Applications to Chemistry, Biology, and Physics. - Malabar: Robert E. Krieger Publishing Company, 1990.-346 p.

220. Schätzel К. Single-photon correlation techniques in Dynamic Light Scattering: The method and some applications // Monographs on the physics and chemistry of materials. - 1993. - V. 49. - P. 76-148.

221. Richtering W., Müller H. Comparison between viscosity and diffusion in monodisperse and bimodal colloidal suspensions // Langmuir. - 1995. - V. 11(10).-P. 3699-3704.

222. Einstein A. Über die von der molekularkinetischen Theorie der Wärme geforderte Bewegung von in ruhenden Flüssigkeiten suspendierten Teilchen (On the motion of suspended particles in quiescent fluids required by the molecular-kinetic theory of heat) // Annalytic Physics. - 1905. - V. 17. - P. 549-560.

223. Muller D.J., Dufrene Y.F. Atomic force microscopy as a multifunctional molecular toolbox in nanobiotechnology // Nature Nanotechnology. - 2008. - V. 3(5).-P. 261-269.

224. Dufrene Y. F. Towards nanomicrobiology using atomic force microscopy // Nature Reviews Microbiology. - 2008. - V. 6(9). - P. 674-680.

225. Hohne G.W.H., Hemminger W.F., Flammersheim HJ. Differential Scanning Calorimetry. - Berlin: Springer, 2003. - 289 p.

226. Шестак Я. Теория термического анализа. Пер. с англ. - М.: Мир, 1987. -456 с.

227. Gill P., Moghadam Т.Т., Ranjbar В. Differential scanning calorimetry techniques: applications in biology and nanoscience // Journal of biomolecular techniques. - 2010. - V. 21(4). - P. 167-193.

228. Holinej J., Ando H.Y., Snows J.W. Resolving Multiple Overlapping Calorimetric Transitions by Use of a Microcomputer: Studies on Erythrocyte

Membranes // Journal of chemical infornation and computer science. - 1989. - V. 29(4).-P. 233-236.

229. Jackson W.M., Kostyla J., Nordin J.H.,Brandts J.F. Calorimetric Study of Protein Transitions in Human Erythrocyte Ghosts // Biochemistry. - 1973. - V. 12(19).-P. 3362-3367.

230. Елисеева И.И., Юзбашев M.M. Общая теория статистики: Учебник. -Москва: Финансы и Статистика, 2005. - 656 с.

231. Student. The probable error of a mean // Biometrika. - 1908. - V. 6(1). - P. 1-25.

232. Дерффель К. Статистика в аналитической химии. Пер. с англ. - М.: Мир, 1994.-286 с.

233. Wilcoxon F. Individual comparisons by ranking methods // Biometrics. -1945.-V. l.-P. 80-83.

234. Бронштейн И.Н., Семендяев K.A. Справочник по математике для инженеров и учащихся втузов. - М.: Наука, 1986. - 545 с.

235. Гмурман В.Е. Теория вероятностей и математическая статистика: Учебное пособие для вузов. - М.: Высшая школа, 2004. - 404 с.

236. Рубин А.Б. Биофизика. Учебник. - М.: МГУ, Наука, 2004. - 448 с.

237. Lepock J.R., Frey Н.Е., Ritchie К.Р. Protein denaturation in intact hepatocytes and isolated cellular organelles during heat shock // The Journal of cell biology. - 1993. -V. 122(6). - P. 1267-1276.

238. Lepock J.R., Ritchie K.P., Kolios M.C., Rodahl A.M., Heinz K.A., Kruuv J. Influence of transition rates and scan rate on kinetic simulations of differential scanning calorimetry profiles of reversible and irreversible protein denaturation // Biochemistry. - 1992.-V. 31(50).-P. 12706-12712.

239. Livingstone C.J., Schachter D. Lipid Dynamics and Lipid-Protein Interactionisn Rat Hepatocyte Plasma Membrane // The Journal of biological chemistry. - 1980. - V. 255(22). - P. 10902-10908.

240. Болдырев A.A., Кяйвяряйнен Е.И., Илюха B.A. Биомембранология. -Петрозаводск: Изд-во Кар НЦ РАН, 2006. - 226 с.

241. Giartosio A., Wang C., D'Alessio S., Ferraro A., Altieri F., Eufemi M., Turano C. Differential scanning calorimetry of chicken erythrocyte nuclei // European Journal of Biochemistry. - 1992. - V. 208(1). - P. 17-22.

242. Berntsen P., Bergman R., Jansson H., Weik M., Swenson J. Dielectric and calorimetric studies of hydrated purple membrane // Biophysical journal. - 2005. - V. 89(5).-P. 3120-3108.

243. Mackey B.M., Miles C.A., Parsons S.E., Seymour D.A. Thermal denaturation of whole cells and cell components of Escherichia coli examined by differential scanning calorimetry // Journal of general microbiology. 1991. - V. 137(10).-P. 2361-2374.

244. Sugahara M., Takehira M., Yutani K. Effect of Heavy Atoms on the Thermal Stability of a-Amylase from Aspergillus oryzae // Plos One. - 2013. - V. 8(2). - e-pub.

245. Bennett M.P., Mitchell D.C. Regulation of membrane proteins by dietary lipids: effects of cholesterol and docosahexaenoic acid acyl chain-containing phospholipids on rhodopsin stability and function // Biophysical journal. - 2008. - V. 95(3).-P. 1206-1216.

246. Epand R.F., Epand R.M., Jung C.Y. Glucose-induced thermal stabilization of the native conformation of GLUT 1 // Biochemistry. - 1999. - V. 38(1). - P. 454458.

247. Bonechi C., Martini S., Ciani L., Lamponi S., Rebmann H., Rossi C., Ristori S. Using liposomes as carriers for polyphenolic compounds: the case of trans-resveratrol // Plos One. - 2012. - V. 7(8). - e-pub.

248. Jiaa Y., Jolya H., Omri A. Liposomes as a carrier for gentamicin delivery: Development and evaluation of the physicochemical properties // International Journal of Pharmaceutics. - 2008. - V. 359. - P. 254-263.

249. Kucerka N., Pencer J., Sachs J.N., Nagle J.F., Katsaras J. Curvature effect on the structure of phospholipid bilayers // Langmuir. - 2007. - V. 23(3). - P. 12921299.

250. Гуревич Д.Г., Меерович И.Г., Меерович Г.А., Воробьев С.И., Певгов В.Г., Смирнова З.С., Оборотова Н.А., Лукьянец Е.А., Барышников А.Ю. Влияние размеров липосом на уровень и селективность накопления тиосененса в опухоли // Российский биотерапевтический журнал. - 2007. - Т. 6. - № 2. - С. 45-49.

251. Ruozi В., Tosí G., Leo Е., Vandelli М.А. Application of atomic force microscopy to characterize liposomes as drug and gene carriers // Talanta. - 2007. -V. 73(1).-P. 12-22.

252. Spyratou E., Mourelatou E.A., Makropoulou M., Demetzos C. Atomic force microscopy: a tool to study the structure, dynamics and stability of liposomal drug delivery systems // Expert Opinion in Drug Delivery. - 2009. - V. 6(3). - P. 305-317.

253. Ruozi В., Belletti D., Tombesi A., Tosi G., Bondioli L., Forni F., Vandelli M.A. AFM, ESEM, ТЕМ, and CLSM in liposomal characterization: a comparative study // International Journal of Nanomedicine. - 2011. - V. 6. - P. 557-563.

254. Xia S., Xu S., Zhang X., Zhong F. Effect of coenzyme Q(10) incorporation on the characteristics of nanoliposomes // The Journal of physical chemistry. - 2007. -V. 111(9).-P. 2200-2207.

255. Micol V., Sánchez-Piñera P., Villalaín J., de Godos A., Gómez-Fernández J.C. Correlation between protein kinase С alpha activity and membrane phase behavior // Biophysical journal. - 1999. - V. 76(2). - P. 916-927.

256. Константинова М.Ф., Некрасова Т.П., Нисман Б.Х. Температурная зависимость активности протеинкиназ А и С у вариантов клеток нейроболастомы мыши, генетически различающихся по теплоустойчивости // Цитология. - 1991. - Т. 33. -№ 12. - С. 54-58.

257. Пальмина Н.П., Часовская Т.Е, Рыжкина И.С, Муртазина Л.И. , Коновалов А.И. Водные растворы фенозана калия: влияние на структуру биологичсеких мембран и электропроводность // Доклады Академии Наук. -2009.-Т. 429.-№ 1.-С. 128-131.