Липидный состав, активность ферментов дыхательной цепи и Н-АТФ-АЗЫ мембран митохондрий печени крыс при аллоксановом диабете тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Ишанходжаев, Тохир Мухитдинович

• Ишанходжаев, Тохир Мухитдинович
• кандидат биологических наук
• 1984

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ишанходжаев, Тохир Мухитдинович

введение

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Ю

1.1. Липидный и белковый состав мембран мито-ховдрий. Ю

1.2. Липид . -белковые взаимодействия в мембранах митоховдрий.

1.3. Влияние на митохондрии стрессовых факторов и моделей патологических состояний

ГЛАВА 2. МАТЕРИМЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1.3. Липидный состав и активность ферментов дыхательной цепи и олигомицинчувствительной АТФ-азы митохондрий печени крыс при аллокса-новом диабете

3.1.1. Липидный состав мембран митоховдрий печени при аллоксановом диабете.

3.1.2. Активность ферментов дыхательной цепи митохондрий печени при аллоксановом диабете.

3.2. Модификация фосфолипидяого состава мембран митоховдрий печенш крыс с помощью , ЛГТБ.

3.2.1. Встраивание экзогенных фосфолипидов в мембрану митохондрий печени нормальных и аллоксан-ди-абетических крыс в црисутствии ЛПБ.

3.2.2. Влияние экзогенных фосфолипидов на активность ферментов дыхательной цепи мембран митохонд-. рий печени аллоксан-диабетических крыс

3.2.3. Влияние экзогенных фосфолипидов на активность олигомицинчувствительной АТФ-азы митохондрий печени аллоксан-диабетических крыс

3.2.4. Влияние инсулина на активность ферментов дыхательной цепи и липидный состав мембран митохондрий печени аллоксан-диабетических 1фыс

3.2.5. Свойство ЖБ,выделенных из печени аллоксан-диабетических крыс

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Липидный состав, активность ферментов дыхательной цепи и Н-АТФ-АЗЫ мембран митохондрий печени крыс при аллоксановом диабете»

Многочисленные исследования последних лет, направленные на изучение механизма возникновения и цротекания различных патологических процессов, свидетельствуют о том, что изменение структуры и функции мембран клетки является важным звеном в цепи возникающих нарушений. При этом независимо от того, действуют-ли повреждающие агенты на саму мембрану, или это действие опосредовано каким-либо промежуточным фактором, мембраны клетки чутко реагируют на воздействие изменением структурных компонентов и активности мембраносвязанных ферментов /1,8,16,19,23,29,30,64, 91/.

В основе этих повреждений во многих случаях лежит нарушение барьерной функции липидного бислоя, что указывает на важную роль липидов в патогенезе различных заболеваний.

Кроме того, важное значение липидов связано с тем, что они образуют гидрофобный матрикс, состояние которого влияет на функциональное состояние мембраны в целом.

Интенсивное изучение роли липидов в функционирований мембраносвязанных ферментов позволило прийти к следующим заключениям.

Липиды могут регулировать активность мембраносвязанных ферментов, оказывая влияние на конформацию белковых молекул, образуя гидрофобную среду, необходимую для цротекания различных химических реакций; они также могут выполнять кофакторную роль в различных ферментативных процессах /25,65,83,90,99,141/. Кроме того, липвды влияют на эффективность действия гормонов, токсинов и других физиологически активных веществ, на транспорт ионов и субстратов, а также на процессы энергообразования /2,15,68,112/.

Подобная полифункциональность привлекает большое внимание и в тоже время затрудняет выводы относительно значимости результатов исследований. В частности, остаются открытыми вопросы о роли липидов в обеспечении оптимальных условий для полного функционирования ферментов дыхательной цепи и ион-транспортирующих АТФ-аз.

Какое функциональное значение имеют наблюдаемые цри различных стресовых воздействиях изменения количественного и качественного состава липидных компонентов мембран?

Какова роль липидов в процессах рецепции гормонов, транспорта веществ и передаче нервных импульсов и т.д.?

Решение этих проблем должно отбыть широкие перспективы в регуляции функционального состояния мембран и, тем самым, даст возможность оказывать влияние на течение различных патологических процессов. Сказанное относится и к одной из важных цроблем современной эвдощшнологии - изучению сахарного диабета.

Благодаря интенсивным исследованиям последних лет достигнуты большие успехи в выяснении патогенеза и этиологии данного заболевания. В частности установлено, что цри относительной или абсолютной инсулиновой недостаточности возникают нарушения в поступлении глюкозы в инсулинзависимые ткани , наблюдается снижение окислительного фосфориишрования и образования глюкозо-6-фосфата с последующим нарушением гликолитического пути окисления глюкозы, нарушением цикла Кребса и гексозомонофосфатного цикла, угнетение гликогеногенеза, усиление глюконеогенеза и использования свободных жирных кислот в качестве источников энергии.

Наряду с нарушениями углеводного обмена при данном патологическом процессе обнаружены изменения и в липидном обмене.

В частности установлено, что цри сахарном диабете, на фоне повышения уровня глюкозы 1фови, наблюдается высокое содержание

НЭЖК, триглицеридов, холестерина, фосфолипидов, j8 -липоцротеи-дов и кетоновых тел.

При аллоксановом диабете было обнаружено изменение липидно-го состава различных тканей /48/, а также установлено снижение активности ферментов дыхательной цепи /I/ и изменение фосфоли-пидного состава митохоадрий /23/. Эти данные указывают на то, что при диабете наряду с нарушениями углеводного и липццного обмена на уровне целого организма наблюдаются изменения и в липид-ном компоненте мембранных образований клетки и, в частности, в мембранах митохондрий.

Анализ литературы, посвященной диабету, показывает, что в нарушениях углеводного и липидного обмена не-малая роль принадлежит повреждению барьерной функции мембран. Однако, в доступной нам литературе мы не обнаружили работ по исследованию особенностей взаимодействия липидов и мембраносвязанных ферментов митохондрий Щ)и данной патологии. В то время как выяснение этого вопроса может дать ключ к пониманию патогенеза и этиологии сахарного диабета на субклеточном уровне. Кроме того, нам кажется, необходимо исследовать свойство липид-первносящих белков при данной патологии, так как работы последних лет показали, что от их функциональной активности во многом зависит липидный состав субклеточных органелл /18/.

Исходя из вышеизложенного, целью данной работы явилось исследование липидного состава мембран митохондрий печени при аллоксановом диабете и выяснение влияния изменений в липидном составе на активность ферментов дыхательной цепи и олигомицин-чувствительной АТФ-азы митохондрий печени.

В соответствии с целью исследования были сформулированы следующие задачи:

- изучить качественный и количественный состав липидов внешней и внутренней мембраны митохондрий печени крыс с алло-ксановым диабетом;

- изучить жирнокислотный состав суммы и отдельных фракций фосфолипидов внешней и внутренней мембраны митохондрий при данной модели патологического состояния;

- определить зависимость между изменением в составе липидов мембран митоховдрий и активностью ферментов дыхательной цепи и олигомицинчувствительной АТФ-азы митохондрий цри алло-ксановом диабете;

- исследовать влияние индивидуальных фосфолипидов на активность ферментов дыхательной цепи и олигомицинчувствительной АТФ-азы митохондрий;

- исследовать свойства ЛПБ печени при данной модели патологического состояния;

- исследовать влияние инсулина на липидный состав и активность ферментов дыхательной цепи и олигомицинчувствительной АТФ-азы митохондрий печени аллоксан-диабетических крыс.

Результаты данной работы позволили установить зависимость между изменением липидного состава и активностью мембраносвя-занных ферментов митохондрий печени крыс при аллоксановом диабете. При этом установлена корреляция мевду низкой активностью исследованных ферментных систем и повышением содержания в мембранах митохондрий ЛФХ, ВЭ1К, холестерина и насыщенных жирных кислот в сумме фосфолипидов.

Модификация фосфолшщцного состава мембран митохондрий печени аллоксан-диабетических 1фыс с помощью ЛПБ и фосфолипид-ных липосом приводила к повышению активности ферментов дыхательной цепи и олигомицинчувствительной АТФ-азы митохондрий, при этом наибольшее влияние наблюдалось при добавлении суммы фосфо-липидов.

Инсулин не восстанавливал исходный липидный состав мембран митохондрий печени аллоксан-диабетических 1фыс, что указывает на отсутствие прямого воздействия последнего на липидный состав мембран митохондрий печени.

В целом,результаты данного исследования показывают, что важным звеном в механизме возникающих нарушений цри аллоксано-вом диабете являются изменения в лшшдном составе мембран митохондрий печени, вызывающие в свою очередь, снижение активности мембраносвязанных ферментов.

Изменения в лишщном составе митохондрий обусловлены, возможно, активацией эццогенной фосфолипазы и изменением свойств ЛПБ.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Ишанходжаев, Тохир Мухитдинович

выводы

1. Аллоксановый диабет вызывает существенные изменения в липидном составе мембран митохондрий печени крыс. При этом наблюдается снижение содержания суммы фосфолипидов во внешней мембране и увеличение их содержания во внутренней мембране, а также,повышение общего содержания нейтральных липидов.

2. Аллоксановый диабет вызывает изменения и в отдельных фракциях липидов мембран митохондрий печени 1фыс. В фосфолипидном составе установлено увеличение содержания ЛФХ и ДФГ и уменьшение содержания ФС как во внутренней, так и во внешней мембране. Содержание отдельных фракций нейтральных липидов было увеличено во всех препаратах мембран митохондрий по сравнению с нормой.

3. При аллоксановом диабете наблюдается тенденция к увеличению содержания насыщенных жирных кислот как в сумме, так и в отдельных фракциях фосфолипидов мембран митоховдрий печени.

4. При данной модели патологического состояния обнаружено снижение активности ферментов дыхательной цепи и олигомицин-чувствительной АТФ-азы митохондрий печени крыс. Это коррелирует с увеличением содержания ЛФХ, НЭЖК, ХС .и насыщенных жирных кислот в сумме фосфолипидов и снижением содержания ФС в мембранах митоховдрий печени.

5. Низкая активность ферментов дыхательной цепи и Н-АТФ-аз-ного комплекса митоховдрий при аллоксановом диабете, обусловлена, црежде всего, повышением содержания насыщенных жирных кислот в фосфолипидах.

6. При модификации мембран митохондрий печени аллоксан-диабетических 1фыс экзогенными фосфолипидами в црисутствии ЛПБ максимальное восстановление активности исследованных ферментных систем было достигнуто при добавлении к митохондриям ФХ, ДФГ, ФС и,в особенности,суммы фосфолипидов. Это указывает на большую чувствительность мембраносвязанных ферментов к жирно-кислотному составу, чем к полярной части фосфолипидов.

7. Инсулин не восстанавливает полностью липидный состав и активность исследованных ферментных систем мембран митохондрий печени аллоксан-диабетических |фыс.

8. Изменения в липидном составе мембран митохондрий печени крыс цри аллоксановом диабете, вероятно, обусловлены активацией эндогенной фосфолипазы и изменением свойств ЛПБ.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Анализ данных литературы и наших собственных исследований влияния на липидный состав мембран митохондрий стрессовых воздействий приводит к выводу, что в основе этих изменений, возможно, лежат две причины:

1. Стрессовое воздействие влияет на свойство ЛПБ,в результате чего нарушается распределение липидов между субклеточными органеллами /19/.

2. Стрессовое воздействие активирует литические ферменты (фосфолипазы) или стимулирует перекисное окисление липидов /45/. Эти факторы, вызывающие изменения в липидном составе мембран митоховдрий, следует рассматривать как звенья единого процесса, обеспечивающего адаптационную реакцию субклеточных органелл к различным внешним воздействиям.

Анализ данных литературы и наших результатов исследований по модификации липидного состава мембран митохондрий аллоксан-диабетических крыс с помощью ЛПБ, позволяет предположить, что первый механизм, поддерживающий оцределенный липидный состав мембран митохондрий, характерен для длительной адаптации, а второй, возможно, является немедленной реакцией органелл на стрессовое воздействие.

Это предположение подтверждается, в некоторой степени, данными табл. 12 и 13, из которых видно, что цри низкой температуре инкубации митоховдрий с фосфолипидами и ЛПБ количество переносимых фосфолипидов ЛПБ в мембраны митоховдрий больше, чем количество выводимых из мембраны аллоксан-диабетических крыс. А также данныштаблицы 14 и рис. 14, указывающими на то, что изменение свойств ЛПБ цри аллоксановом диабете и после введения инсулина является не единственной причиной, вызывающей изменения в липидном составе мембран митохондрий печени крыс.

Кроме того, это вытекает и из данных литературы,свидетельствующих о том, что активность ЛПБ зависит от состава жирных кислот фосфолипидов и их количественного содержания в мембранах /151/.

Таким образом,мы видим, что ЛПБ участвуют в поддерживании оцределейного состава липидов в мембранах митохондрий, досталяя к ним вновь синтезированные фосфолипиды, и, одновременно, удаляя продукты гидролиза фоофолипидов. При стрессовом воздействии, в данном случае при аллоксановом диабете, ЛПБ не справляются со своими функциями вследствие высокой активности гидролитических ферментов, что и приводит к наблюдаемым изменениям в липидном компоненте мембран митохондрий.

Работы, посвященные исследованию параметров функционального состояния субклеточных органелл цри аллоксановом диабете по: I казали, что при этом изменяется активность многих мембраносвя-занных ферментов, и в частности, ферментов дыхательной цепи

I/.

Результаты наших исследований показали, что изменение количественного содержания липидов ntB особенностигизменение качественного состава составляющих их жирных кислот оказывают существенное влияние на активность мембраносвязанных ферментов цри аллоксановом диабете. Возможный механизм возникающих изменений в липидном составе мембран митохондрий аллоксан-диабетических 1фыс состоит из следующей последовательности событий.

Повреждение аллоксаном инсулин-продуцирующих J& -клеток поджелудочной железы вызывает падение уровня макроэргов, это, в свою очередь, деэнергизует митохондрии и влияет на са2+-насос цитоплазматической мембраны по аналогии повреждения цри аноксии /45/.

2+

Дальнейшая цепь событий: появление ионов Са в цитоплазме активирует эндогенную фосфолипазу митохондрий, что приводит к изменению липидного состава мембран. В результате увеличивается проницаемость мембран для ионов К|" и На'"1" , и митохондрии набухают. Одновременно усиливаются процессы перекисного окисления липидов, приводящие к уменьшению их ненасыщенности и,как следствие, к повышению вязкости мембраны. Снижение подвижности жирнокислотных цепей фосфолипидов вызывает, в свою очередь, нарушение проницаемости мембраны для субстратов и кофакторов переноса электронов, и в конечном счете, приводит к снижению эффективности окислительного фосфорилирования.

Наряду с процессами фосфолипазного гидролиза и перекисного окисления следует учитывать также и влияние изменений в содержании холестерина и активности ЛПБ.

Возможно, что обнаруженное в нашей работе повышение уровня холестерина и суммы фосфолипидов во внутренней мембране связано с приспособительной реакцией митохондрий на данное стрессовое воздействие. Это предположение вытекает из данных литературы, указывающих на то, что холестерин увеличивает подвижность жирно-кислотных цепей липидов при добавлении его в бислой, находящийся в гельфазе, и оказывает противоположный эффект на бислои из "жидких" липидов /21/.

В нашем случае., увеличение содержания насыщенных жирных кислот в фосфолипидах мембран митохондрий при аллоксановом диабете соцровождается повышением уровня холестерина, который, вероятно, увеличивает относительную подвижность насыщенных жирнокислотных цепей.

Это обеспечивает оптимальные при данном стрессовом воздействии условия для проникновения субстратов и кофакторов к активным центрам ферментных систем мембран митохондрий.

Увеличение суммы фосфолипидов во внутренней мембране митохондрий при аллоксановом диабете, возможно, связано с необходимостью защиты дыхательной цепи от действия экзогенных и эндогенных литических ферментов (фосфолипаз и цротеаз), так как из литературы известно, что сами фосфолипиды могут быть ингибиторами активности фосфолипаз /7/.

Результаты наших исследований в отличие от данных литературы /18/ не позволяют сделать однозначных выводов относительно того, влияет ли аллоксановый диабет прямо на активность ЛПБ, или это действие опосредовано изменением количественного и качественного состава липидов мембран и нарушением липидного обмена в целом.

Однако, обнаруженные в наших исследованиях изменения в липидном составе митохондрий аллоксан-диабетических крыс после введения инсулина и сниженный межмембранный обмен ФХ и ФЭ в ФХ и ФЭ в црисутствии ЛПБ из печени аллоксан-диабетических крыс указывают на возможность црямого влияния данной модели патологического состояния на свойство ЛПБ.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ишанходжаев, Тохир Мухитдинович, 1984 год

1. Агзамов X., Алматов К.Т., Рахимов М.М., Туракулов Я.Х. Функционирование митохондрий печени при аллоксановом диабете. М.: Вопросы мед.химии, 1983, с. 61-66.

2. Алексеенко А.В., Бурлакова Б.Б. Роль фосфолипидов в .синтезе ДНК в клетках млекопитающих. ДАН СССР, 1976, 209, $ I,с. 199-202.

3. Алматов К.Т., Агзамов X., Рахимов М.М., Туракулов Я.Х. Окислительное фосфорилирование и активность полиферментных систем мембран митохондрий печени крыс цри голодании. М.: Вопросы мед.химии, 1982, J£ I, с. 50-56.

4. Антонов В.Ф. Липиды и ионная проницаемость мембран. М.: Наука, 1982, с. 150.

5. Асатиани B.C. Новые методы фотометрии. М.: Наука, 1965, с.495

6. Безуглов В.В., Молотковекий Юл.Г., Бергельсон Л.Д. Действие фосфолипазы Ag змеиного яда на аналоги фосфатидилхо-лина. Ж. Химия природных соединений, 1975, S3, с. 413-415.

7. Белоус A.M., Бондаренко В.А., Бондаренко П.П. Влияние замораживания-оттаивания на липццный состав митохондрий. Биохимия, 1978, вып. 12, Т. 43, с. 2175-2182.

8. Белоус A.M., Петренко А.Ю. Влияние скорости заморажива9+ния и отогрева на транспорт Са, в митохондрих печени крыс.

9. Укр.биохим.журнал, 1982, 54, №2, с. 194-197.

10. Бергельсон Л.Д. Биологические мембраны. М.: Наука, 1975, с. 183.

11. Бергельсон Л.Д., Дятловицкая З.В., Молотковский 10л.Г., Батраков С.Г., Барсуков Л.И., Проказова Н.Б. Препаративная биохимия липидов. М.: Наука, 1981, с. 195 .

12. Болдырев А.А. Потенциометрический метод определения активности АТФ-аз. В кн.: Транспортные аденозинтрифосфатазы. -М.: Наука, 1977, с. 69-78.

13. Бондаренко Т.П., Семенченко А.Ю., Белоус A.M. Влияние переохлаждения на митохондрии крыс: освобождение калия, малат-дегидрогеназы при температурах фазовых переходов липидов. Биохимия, 1982, 47, IS 4, с. 594-600.

14. Броккерхоф X., Дженсен Р. Липолитические ферменты. -М.: Мир, 1978, с. 396.

15. Бурлакова Е.Б. Влияние липидов мембран на ферментативную активность. В сб.: Липиды, Структура, биосинтез, превращение и функция. М.: Наука, 1977, с. 16-27.

16. Владимиров Ю.А., Суслова Т.Б., Оленев В.И. Регулятор-ная роль ионов железа в перекисном окислении липидов в митохондриях. В сб.: Митохондрии. Транспорт электронов и п реобразова-ние энергии". М.: 1976, с.109-125.

17. Дятловицкая Э.В., Тимофеева Н.Г., Горькова Н.Г., Бергельсон Л.Д. Обмен фосфолипидами между митохондриямЕГ и микросомами гепатомы 27 крыс. Биохимия, т.41, вып. 7, 1976, с. 12351240.

18. Дятловицкая Э.В., Тимофеева Н.Г., Горькова Н.П., Бергельсон Л.Д. Исследование липидпервносящих липопротеинов гепатомы 27 и печени крыс. Биохимия, т.42, вып.5, 1977, с. 940.

19. Дятловицкая Э.В., Торховская Т.И., Сорокина И.Б., Го-рькова В.И., Бирюзова В.И., Бергельсон Л.Д. Липиды опухолей. Распределение фосфолипидов в митохондриях и микросомах асцит-ной гепатомы Задцеля. Биохимия, т. 34, $ 2, 1969, с. 367-371.

20. Дятловицкая Э.В., Трусова В.М., Грешных К.И., Горько-ва Н.П., Бергельсон Л.Д. Липиды опухолей. Фосфолипидный обмен между митохондриями и миедосомами асцитной гепатомы Зажделя. Биохимия, т. 37, вып. 3, 1972, с. 607-613.

21. Ивков В.Г., Берестовский Г.И. Липидный бислой биологических мембран. М.: Наука, 1982, с. 224,

22. Кабак Я.М. Практикум по эццогоинологии. М.: Изд-во МГУ, 1963, с. 195,

23. Кейтс М. Техника липидологии. М.: Мир, 1975, с.324.

24. Козельцев В.Л., Голубев В.П., Володина Т.В. Защитная роль фосфолипидов при энзиматической деградации белков митохон-дриальных мембран. М.: Вопросы мед .химии, 1980, А^ 26, с. 680685.

25. Костава С.В. Активность и термостабильность ферментных комплексов митохоццрий миокарда 1фоликов. В сб.: Механизмы патологических процессов", Ташкент, 1981, с. 48-52.

26. Куликов В.И. Изучение молекулярной организации фосфолипидов в мембране. Автореф.канд.дис., М., 1977, с.20.

27. Ланкин В.З., Садовникова И.П. Прямой количественный метод прямой переэтерификации высших жирных кислот в биологических образцах. М.: Вопросы мед .химии, 1971, $ 17, с. 331335.

28. Лемешко В.В. Влияние тироксина на НАД.Н-цитохром С-ре-дуктазную активность микросом и наружной мембраны митохондрий печени крыс разного возраста. Биохимия, 1981, т. 46, № 10,с. I807-I8I4.

29. Лемешко В.В., Калиман П.А. Возрастные особенности действия тироксина на содержание цитохромом в митохондриях печени и массу тела крыс. М.: Вопросы мед.химии, 1980, $ 5,с. 632-636.

30. Микельсаар X., Северина И.И., Скулачев В.П. Фосфолипиды и окислительное фосфорилирование. Успехи современной биологии, 1974, т. 78, № 3 /6/, с. 348-370.

31. Мусаев Х.Н., Алматов К.Т., Рахимов М.М., Ахмедов Р. Функционирование митохондрий слизистой тонкой кишки при воздействии на организм 1фыс высокой температуры среды. Вопросы мед. химии, 1981, Ур- 6, с. 763-768.

32. Мусил Я. В кн.: Современная биохимия в схемах. М.: Мир, 1982, с. 115.

33. Озернюк Н.Д. В кн.: Рост и воспроизведение митохондрий. М.: Наука, 1979, с. 264»

34. Пальмина Н.Г. Обмен и распределение фосфатидилхолина в мембранах нормальных и опухолевых тканей. Тезисы докладов 1У Всесоюзного симпозиума по биохимии липидов. Киев, 1983, с. 13-14.

35. Петренко А.Ю., Белоус П.М., Лемешко В.В. Влияние скорости замораживания и отогрева на функциональное состояние и ионную проницаемость митохондрий печени крыс. Биохимия, 1982, т. 47., JS 4, с. 626-632.

36. Поляков В.М., Ланкин В.З. Изменение состава фосфолипидов в микросомах и митохондриях печени 1фыс при химическом канцерогенезе. Биохимия, 1977, т. 42, вып. 5, с. 799-808.

37. Рахимджанов М.Т., Исмаилходжаев Г., Саатов Т.С. Состояние полиферментных систем митохондрий сердца и мозга крыс при тиреоидной патологии. Узб.биол.ж., 1979, Jfc 5, с. 3-5.

38. Рахимов М.М., Алматов К.Т. Некоторые особенности деградации полиферментных систем митохондрий печени крыс,подвергавшихся тепловым воздействиям. Биохимия, 1977, т. 42, $ 10, с. 1852-1863.

39. Рахимов М.М., Алматов К.Т. Влияние ионов Са2+ на взаимодействие фосфолипазы Д с фосфолипидами мембран митохондрий. Биохимия, 1978, т. 43, вып. 8, с. I390-I403.

40. Робинсон Дж.Б. выделение и состав мембран. В кн.: Биологические мембраны. М.: Атомиздат, 1979, с. 13-32.

41. Рэкер Э. Биоэнергетические механизмы: новые взгляды.- М.: Мир, 19.79, с. 216. ,

42. Скулачев В.П. Трансформация энергии в биомембранах.- М.: Наука, 1972.с.203.

43. Сорокова В.И., Владимиров Ю.А. Повреждение митохондрий при аноксии. В кн.: Итоги науки и техники. Серия "Биофизика", т.5, М.: 1975, с. 12-45.

44. Соттоказа Дж. Вьщеление митохондрий и митохондриалъ-ных мембран. В кн.: Биохимические исследования мембран. Под ред. Мэдди Э. М.: Мир, 1979, с. 54-74.

45. ТЕ ХА-ЗЕН, Горбатая О.Н., Зиятдинова Р.Х., Алматов К.Т. Ахмеджанов Р., Рахимов М.М., Ташмухамедов Б.А. О локализации фосфолипазы А в митохондриях. ДАН УзССР, I, 1984, с. 50-52.

46. Туракулов Я.Х., Саатов Т.С., Исаев Э.И., Садыков С.С., Зайнутдинов Б.Р. Состав и содержание фосфолипидов в различных органах крыс при аллоксановом диабете. Проблемы эццокринологии, т. 25, № 2, 1979, с. 54-57.

47. Утно Л.Я., Лацис А.Т., Веверс С.Н., Силова А.А., Гринберг А.А., Кокта А.Я., Стопане А.Я., Страутмане И.Л., Корзан

48. В.В. Влияние глубокой гипотермии на перекисное окисление липидов и ферментативную активность митохондрий миокарда. В сб.: Биохимические характеристики патологических процессов. Рига, 1980, с. 94-97.

49. Фитов И.Л., Евтодиенко Ю.В. Ингибирование антиоксидан-тами митохондриалыюй Н*-АТФ-азы. Митохондрии. Механизм сопряжения и регуляции. Тезисы П Всесоюзного симпозиума. Пущино, 198Г, с. 49-50.

50. Франк Г.М., Кондрашова М.Н., Мохова Е.И., Ротенберг Ю.С. Руководство по изучению биологического окисления полярографическим методом. М.: Наука, 1973, с. 222*

51. Эйнисман Л.И., Горькова Н.П., Дятловицкая З.В. Жирно-кислотный состав и ненасыщенность фосфолипидов внутриклеточных мембран гепатомы 27 и печени крыс. Биохимия, т.42, вып.2, 1977,' с. 320-328.

52. Buglos В., Racker E. Partial resolution of the enzymes catalyzing oxidative phosphori^ation. XHII.The masking of adenosine triphosphatase in submitochondrial particles and its reactivation by phospholipids. J. Biol.Chem., 1968, v.243, p.3901-3905.

53. Buglos В., Racker E. Partial resolution of the enzymes catalyzing oxidative phosphorylation. XVII. Pusther.resolution of the rutamyein-sensitive adenosine triphosphatase. J.Biol.Chem., 1968, v.243, p.3891-3900.

54. Boguist Lennart, Helson Lennart. Effects of alloxan on thestructure and the jonic transport mechanisms of mouse mitochondria. A6ta endocrinol., 1980, 94, suppl. IT 237, 10.

55. Burstein C., Randrach A., Racker E. Effect of phospholipasesand lipases on submitochondrial particles. J.Biol. Chem., 1971, v.246, p4083-4089*

56. Burstein C., Loyter A., Racker E. Effect of phospholipaseson the structure and function of mitochondria. J.Biol. Chem., 1971, v.246, p.4075-4082.

57. Capaldi R.A. The structure of mitochondrial membranes. In:

58. Mammalian cell membranes", 1977» v.2, p.141-164.

59. Carlson L.A. Determination of Seriirm Triglycerides. J.Atheroscler.Res., 1963, v.3, p.334-336.

60. Chance В., Saramio C., Y/aring A., Leigh J.S. Cytochromec-cytochrome oxidase interaction at subzero temperatures. Biochem. et. biophys.acta, 1979, 503, 37-55»

61. Chauhan V.P.S., Singh V.N. Myocardial phospholipid metabolismin alloxan diabetic rats. Life Sci., 1978, v.22, H20, p.1171-1176.

62. Chuang T.F., Crane F.L. Phospholipids in the cytochrome oxidase reactions. J.Biol.nerg., 1973» v.4, p.569-578.

63. Chuang Т.Е., Awashi J.C., Crane F.L. A model mosaic membrane:

64. Association of phospholipids and cytochrome oxidase. -Bioenergetics, 1973, 5, 27-72.

65. Colbean A., Nachbaur G., Vignais P.M. Enzymatic characterization and lipid composition of rat liver subcellular membranes. ~ Biochim.Biophys.Acta, 1971, v.249, N 2, p.462-492a.

66. Coleman R. Membrane-bound enzymes and membrane ultrastructure.

67. Biochim.Biophys.Acta, 1973, v.300, U 1, p.1-30.

68. Coleman R., Hubscher G. Metabolism of phospholipids. VII.Onthe lipid requirement for phosphatidic acid phosphatase activity. BBA, 1963, v.73, p.257-266.

69. Deamer D.W. Isolation and characterization of a lysolecithinadenosine triphosphatase complex from lobsta musclemicrosomes. J.Biol.Chem., 1973, v.24B, p.5477-5485*

70. Deenen L.L.M. Van, Haas G.A. de. Phosphoglycerides and phospholipases. Ann.Rev.Bioch.em., 1966, v.35, p.157-194.

71. Fleischer S., Rouser G., Fleischer В., Casu A., Kvitchevsky

72. G. J.Lipid Res., 1967, 8, 170.

73. Folch J., Lees M., Sloane-Stauley G.H. A simple method forthe isolation and purification on total lipids from animal tissues. J.Biol.Chem., 1957, v.226, p.497-509.

74. Gebs G.S., Bastley D.L., Lurie D., Hotton B.M. The phospholipids of various shup organs rat liver and of their subcellular fractions. BBA, 1968, v.152, p.325-339.

75. Godinot G. Nature and possible functions of associationbetween glutamate dehydrogenase and cardiolipin. -Biochemistry, 1973, v.21, p.4029-4033.

76. Hendtickson H.S., Dammicras M.C.E. Van. The penetration oflocal anestheties into phosphatidylcholine monolayers.-J.Lipid Res., 1976, v.17, p.393-399*

77. Henning R., Kaulen H.D., Stoffel W. Hoppe-Seyler»s L. Physiol.Chem., 1970, 351, 1191.

78. Hill K.D., Ford S., Byington K.H., Tzagoloff A., Boyer P.D.32

79. Properties of a polar P-phospholipid isolated from a particulate mitochondrial ATPase. Arch.Biochem., 1968, v.127, p.756-765.

80. Hoch P.L., Chen Y.D.J., Evans Т.О., Shaw M.J. and Heymark Ы.А.

81. Mitochondrial inner membranes in hypothyroidism. Eddited by J.Robbins, L.E.Braverman. Hew York. American Elsevier, "Thyroid Research", 1976, p.347-350. 92» Hoch F.L., Subramanian C., Dhope shwarkar and J.P.Mead.

82. Thyroid Control over Biomembranes: VI. Lipids in Liver Mitochondria and Microsomes of Hypothyroid Rats. Lipids, 1981, 16, N 5, 328-335.

83. Hokin L.E., Hohin M.R. Diglyceride kinase and phosphatidicphosphatase in erythrocyte msmbranes. Bature, 1961, v.189, p.236-837.

84. Johnson J.D., Cornafzer W.E. Phospholipid composition of mitochondria and microsomes of liver and kidney in adre-nalectomized, hypophysectomized and diabetic rats. -Proc.Soc.Exp.Biol.and Med., 1969, v.131, N2, p.474-476.

85. Jost P.O., Capaldi R.A., Vanderkooi G., Griffith O.H. Lipidprotein and lipid-lipid interactions in cytochrome oxidase model membranes. J.Supramol.Struct., 1973, vol1, N 4/5, p.269-280.

86. Kagawa Y., Racker E. Partial resolution of the enzymes catalyzing oxidative phosphorilation. XXV. Reconstitution32of vesicles catalyzing P^-adenozine triphosphate exchange. J.Biol.Chem., 1971, v.246, p.5447-5487.

87. Kagawa Y., Kandrach A., Racker E. Partial resolution of theenzymes catalyzing oxidative phosphorylation. XX7I. Specificity of phospholipids required for energy transfer reactions. J.Biol.Chem., 1973» v.248, p.678-684.

88. Kamp H.H., Wirtz K.W.A., Baer P.R. et al. Specificity ofthe Phosphatidylcholine Exchange Protein from Bovine Liver. Biochemistry (Wash), 1977, v.16, p.1310.

89. Knight У.А., Settlemire C.T., Brierley G.P. Differencialeffects of mercurial reagents on mitochondrial thiol groups and mitochondrial permeability. Biochem. Biophys.Res.Commun., 1968, v.53, p.287-293.

90. Komai A., Hunter D.R., Takachashi Y. Effect of lysolecithintreatment on the structure and functions of the mitochondrial inner membrane. Bio chem. Biopbys. Res. Commun., 1973, v.53, p.82-89.

91. Lanz G. The role of lipid fluidity in structure and functions of heart mitochondrial membranes. J.Mol.and Cell Cardiol., 1981, 13, suppl., H1, 51.

92. Lanaz G. The role of lipids in the regulation of membraneassociated activities. Acta Vitamin, 1973, v.27, p.62-65.

93. Lerner E., Shug A.L., Elson Ch., Ghrado E. Reversible inhibition of adenizine nucleotide.translocation of long chain fatty aclye coenzyme A esters in liver mitochondria of diabetic and hiberanting animals. -J.Biol.Chem., 1962, v.247, N 5, p.1513-1519.

94. Levy M., Toury R., Sauner M.T., Andre J. Recent findingof the biochemical and enzymatic composition of the isolated mitochondrial membranes in relation to their structure. FEBS Sympos., 1969, 17, 33-42.

95. HO.Majewska M.O., Khatchatrian L., Strosznajder J., Lazarewicz J.W. Mechanisms of damage of mitochondrial lipid chemical structure after ichemicanaxia. Proc. Eur.Soc.ITeurochem. 2-nd Meet GSN, Gottingen, 1978, Weinheim - Hew York, 1978, 308.

96. Masahide J., Tadaehi T. Effect of lipid peroxidation on phospholipase A2 activity of rat liver mitochondria. Sap.J.Pharmacol., 1977, v.27, p.429-435.

97. McCaman R.E., Smith M. Cook K. Intermediary metabolism of phospholipids in brain tissue. Il.Phosphatidic acid phosphatase. J.Biol.Chem., 1965, v.240, p.3513-3517.

98. McMurray M.C., Magee W.L. Phospholipid metabolism. Annual Rev.Biochem., 1972, 41, 129-160.

99. Nach.baur J., Colbean A., Vignais P.M. Distribution of membrane-confined phospho lipases A in the rat hepato-cyte. BBA, 1972, v.274, p.426-446.

100. Papahadjopoulos D., Cowden M., Kimelberg H. Role of cholesterol in membranes effects on phospholipid-protein interactions, membrane permeability and enzymatic activity. BBA, 1973, v.330, N 1, p.8-26.

101. Pitotti A., Contessa A.R., Dabbenisala P., Bruni A. Activation by phospholipids of particulate mitochondrial ATPase from rat liver. 9 Biochem.Biophys.Acta, 1972, v.274, p.528-535.

102. Quarles R.H., Dowson R.M.C. Ashiftin the optimum pH of phospholipaee D produced by activating long chain anions. Biochem.J., 1969, v.112, p.795-799.

103. Quarles R.H., Dawson R.M.C. The hydrolysis of monolayersof phosphatidyl (Me-^C) choline by phospholipase D.-Biochem.J., 1969, v.113, p.697-705.

104. Racker E. Reconstitution of a calcium pump with phospholi1. Ojpids and a purified Ca ATPase from sarcoplasmic reticulum. - J.Biol.Chem., 1972, 247, 8198-8200.

105. Racker E. Reconstitution and mechanisms of ion translocationsystem, J.Biochem., 1976, 79» 46.

106. Raschnitz R.M., Hutery Y. Lipid oxidation in biological membranes. Electron transfer proteins as initiators of lipids autoxidation. Arch.Biochem.Biophys., 1975, v.171, p.292-304.

107. Rothfield L., Romeo D. Enzyme reaction in biological membranes. In: Structure and function of biological membranes. Mew York - London, Acad.Press, 251-284.

108. Rossi C.R., Sartorelli L., Tito L., Baretta L., Siliprandi N.

109. Phospholipase A activity of rat liver mitochondria.-Biochim.Biophys.Acta, 1965, v.98, p.207-249.

110. Rouslin W., Millard R.W. Canine myocardial ischemia: defect in mitochondrial electron transfer complex. J.Mol.and Cell Cardial., 1980, 12, N 6, 639-645. 128.Sanderman H. Regulation on membrane enzymes by lipids.

111. Smith Mary W., Collau Lejo, Rahug Myong Won, Zrump Benjamin

112. P. Changes in mitochondrial lipids of rat kidney during ischemia. Biochim.et Biophys.acta, 1980, 618, H 2, 192-201.

113. Sone N., Yoshida M., Hirata H., Kagawa Y. Resolution of themembrane moiety of the H+- ATPase complex into two kinds of subunits. Proc.Hat.Acad.Sci.USA, 1978, 75, 4219-4223.2+

114. Strosznajder J. Role of phospholipids in Ca accumulation inbrain mitochondria from adult rat after ischemic auoxia and hypoxic hypoxia. Proc.Eur.Soc.Heuro-chem. 2nd Meet. ESH, Gottingen, 1978, Weinheim -Hew York, 1978, 313.

115. The R., Hasselbach W. Properties of the sarcoplasmic ATPasereconstituted by oleate and lysolecithin after lipid depletion. Eur.J.Biochem., 1972, v.28, p.357-363.

116. Thompson E.D., Parks L.H. Lipids associated with cytochromeoxidase derived from yerst mitochondria. Biochim. Biophys.Acta, 1972, v.260, p.601-607.141.9Jzur R., Shapiro B. Purification of phospholipase D from peamits. BBA, 1972, v.280, p.290-296.

117. Upubi G.C., Lain M.K. Action of phospholipase Ag on unmodified phosphatidylcholine bilayers. Organizational delects are. Preferred sites of action. Z.Membrane Biol., 1980, v. 55, p.133

118. Vasdev S.C., Kako K.J. Effect of hypozia in vitro on phospholipid composition of isolated mitochondria and lysosomes of rabbit heart. Res.Commun.Chem.Pathol, and Pharmacol., 1980, 27, N 3, 599-602.

119. Yasdev S.C., Kako K.J., Biro G.P. Phospholipid composition of cardiac mitochondria and lysosomes in experimental myocardial ischemia in the dog. J.Mol.and Cell Cardiol., 1979, 11, N 11, 1195-1200.

120. Vaskovsky V.E., Kostetshy E.Y., Vasendin J. A universal reagent for phospholipid analysis. J.Chromatogr., 1975, v.114, p.129-141.

121. Waite M., Scherphot G.Z., Boshonwers P.M.G., Deenen L.L.M. Van, Differentiation of phapholipase A in mitochondria and lysosomes of rat liver. J.Lipid Res., 1969, v.10, p.411-420.

122. Waite M., Sisson P. Partial purification and characterization of the phospholipase from rat liver mitochondria. - Biochemistry, 1971, v.10, p.2377-2387.

123. Waite M., Sisson P. Effect lo.cal anes the tics on phospho-lipases from mitochondria and lisosomes A. Probe into the role of the calciumion in phospholipid hydrolysis.-Biochemistry, 1972, v.11, p.3098-4012.

124. Warren G.B., Birdsall N.J., Lee A.G., Metcalfe J.C. Lipid substitution. In: Membrane proteins in transport and phosphorylation (Ed. G.Azzone et al. Amsterdam: Horth Holland, 1974, p.95).

125. Warren G.E., Toon P.A., Birdsall N.J., Lee A.G., Metcalfe J.C. Complete control of the lipid enviroment of membranebound proteine: Application to a calcium transport system. FEBS Lett., 1974, v.41, IT 1, p.122-124.

126. Wirtz K.W.A. Transfer of phospholipids between membranes. -BBA, 1974, v.344, H 2, p.95-117.

127. Wo^tczak L. Effect of fatty acids and acyl-CoA on the permeability of mitochondrial membranes to monovalent cations. FEBS Lett., 1974, 44, 25-30.

128. Zambrano P., Fleischen S., Fleischen B. Lipid composition of the Golgi apparatus of rat kidney and liver in comparison with other subcellular organelles. BBA, 1975, v.380. H 3, p.357-369.