Патофизиологические и биохимические механизмы развития диабетических ангиопатий и патогенетическое обоснование их коррекции в эксперименте тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат медицинских наук Дзугкоев, Сергей Гаврилович

• Дзугкоев, Сергей Гаврилович
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Дзугкоев, Сергей Гаврилович

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Патогенетические механизмы развития нефро- и ангиопатий при сахарном диабете.

1.2. Микроциркуляторные нарушения при сахарном диабете. Роль NO в

1 1 1 1 ; » ос их патогенезе:.!.

1.3. ПОЛ и АОЗ при сахарном диабете. Возможные пути коррекции нарушений.

Глава 2. Материалы, методы и структура исследования.

2.1. Материал и структура исследования.

2.2. Методика воспроизведения аллоксанового диабета (АД).

2.3; Характеристика модели аллоксанового диабета.

2.4. Патофизиологические методы исследований.

2.4.1. Исследование кровотока в магистральных сосудах - брюшной аорте (БА), нижней полой вене (HI 1В), почечных артериях (ПА) и микроцирку ляторном звене.

2.5. Исследование системы гемостаза.

2.5.1. Метод электрокоагулографии.

2.5.2. Исследование агрегации тромбоцитов.

2.5.3. Агрегатография тромбоцитов.

2.6. Биохимические методы исследований.'.

2.6.1. Методика определения натрия и калия в моче и плазме крови.

2.6.2. Количественное определение креатинина в моче и плазме крови.

2.6.3. Расчет показателей водо- и электролитовыделительной функции почек производили по формулам Ю.В.Наточина.

2.6.4. Определение активности Ыа+,К+-АТФ-азы в гомогенатах, митохондриальной и микросомальной фракциях коркового и мозгового вещества почечной ткани.

2.6.5. Изучение степени переокисления в мембранах эритроцитов и в почечной ткани.

2.6.6. Выделение эритроцитов и определение в них концентрации малонового диальдегида.

2.6.7. Изучение состояния антиоксидантной системы (АОС) по активности каталазы (КФ 1:11:1:6).

2.6.8., Определение активности супероксиддисмутазы (СОД) (КФ

1.15.1.11.) методом аутоокисления адреналина.

Глава 3. Собственные данные.

3.1. Состояние микро- и макрогемодинамики, системы гемостаза при экспериментальном сахарном диабете.

Глава 4. Показатели функционального состояния почек при' экспериментальном сахарном диабете.

4.1. Изменения водо- и электролитовыделительной функции почек у крыс с аллоксановым диабетом.

4.2. Состояние активности №+,К+-АТФазы в гомогенатах коркового и мозгового вещества почечной ткани, митохондриальной и микросомальной фракциях при аллоксановом диабете.

Глава 5. Перекисное окисление липидов и активность антиоксидантной системы цри аллоксановом диабете.

5.1. Перекисное окисление липидов при аллоксановом диабете.

5:2. Состояние антиоксидантной системы защиты организма при аллоксановом диабете.

Глава 6. Изменение активности про- и антиоксидантных систем, показателей ДН, макро- и микрогемодинамики, и системы гемостаза* на фоне корригирующей терапии при экспериментальном сахарном диабете.98J

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Патофизиологические и биохимические механизмы развития диабетических ангиопатий и патогенетическое обоснование их коррекции в эксперименте»

Актуальность проблемы.

Диабетическая ангио- и нефропатия являются не только частым осложнением СД, но и его интегральным патогенетическим звеном, частота и выраженность которого коррелирует с длительностью заболевания и степенью метаболических нарушений. Микроциркуляторные изменения носят органоспецифический характер и отмечаются в различных областях. Так, поданным Дедова И.И., Сунцова Ю.И., Кудряковой С.В. и др., 1997, из 82,7% обследованных больных СД, ретинопатия у 61,1%, нейропатия' — 50,5%, диабетическая нефропатия — 28,2%. При экспериментальном» сахарном диабете отмечается нарушение кровоснабжения! нервов и уменьшение плотности сосудов (Schratzberger Р, Walker DH, Ritting К, Bahlmann FH et al; 2001). Диабетическая* нефропатия - одно из наиболее тяжелых последствий' СД, снижающее качество и продолжительность жизни больных (Дедов И.И., Шестакова М.В., Бондарь И.А., Климентов В.В., Королева Е.А. и др., 2003) и занимающее первое место среди других ангиопатий. Каждый второй больной СД типа 1 и каждый четвертый больной СД типа 2 умирает от острой и хронической почечной недостаточности (Сунцов Ю.И., 1998; Дедов И.И., 2003).

При экспериментальном сахарном диабете на ранних стадиях его развития и в клинике у больных отмечаются функциональные нарушения основных процессов- мочеобразования и почечного плазмотока, трансканальцевого транспорта электролитов и изменение ренин-ангиотензин-альдостероновой системы (РААС), которая урегулирует секрецию альдостерона (Dj Loreto V, Moreno HS, Puche RC et al, 2004; Awad AS, Huang A, Ye H, Duoung ET, Bolton WK, Linden J, Okusa MD, 2005; Pfab T, Thone-Reineke C, Theilig F et al, 2006; Caden MP, Lautenslager OS, HikLE et al, 2007; Hartner A, Cordasic N, Klanke В et al, 2007). Активация РААС и повышение в крови ангиотензина II сопровождается почечной гипертензией и клеточной пролиферацией (Hartner А,

Cordasic N, Klanke В et al, 2007). У больных с диабетической нефропатией в доклинической стадии развития патологического процесса определяется увеличение систолической скорости кровотока на фоне повышения активности РААС. Нарушение кровотока и его неоднородность Карпов Р.С., Кошельская О. А., Ефимова Е.В. и др., 2001, рассматривают как один из допплерографических признаков начальной нефроангиопатии.

В развитии структурно-функциональных аномалий, лежащих в основе диабетических ангио- и нефропатий и ассоциированных с ними патологий (изменения свертывающей системы крови, артериальной гипертензии), участвует множество взаимосвязанных между собой процессов. Одним из таких нарушений является дисбаланс окислительно-восстановительных процессов и усиление ' неконтролируемых свободно-радикальных реакций (СРО), называемые окислительным стрессом (Baynes JW, 1991; Tesfamariam В, 1994; I

Van Damn PC, Van Asbeck BS, Erkelens, 1995).

Проявляются системные метаболические расстройства, характер и направленность которых позволяют предполагать, что повышение интенсивности СРО мембранных фосфолипидов, приводит к накоплению токсических продуктов» окислительной деструкции липидов, изменению проницаемости сосудов вследствие дисфункции эндотелия, нарушению функциональной способности мембранных структур, активности мембранных ферментов клеточного метаболизма (Колесниченко JI.C., Мантарова Н.С., Шапиро Л.А., 1989; Гонский Я.И., Корда М.М., Клищ И.Н., Фира Л.С., 1996; Васильева О.В., Мобицкий О.Б., Клебанова Г.К., Владимиров Ю.А., 1998).

Перекисное окисление липидов (ПОЛ) в мембранах тромбоцитов способствует повышению функциональной активности кровяных пластинок и освобождению тромбоцитарных факторов (Кретова Е.Ю., Кондратьев Е.И., Суханова Т.А., 2004; Токманова А.Ю., Староверова Д.Н., Анциферов М.Б., 2004; Remuzzi С et al, 1992; Natsumoto Н, Nakao Т, 2000). Воздействие длительной гипергликемии на эндотелиальные клетки приводит к увеличению продукции фибринолитических факторов, более активной агрегации тромбоцитов, спазму сосудов и повреждению эндотелия капилляров (Волкова А.К., Недосугова JI.B., Рудько И.А. и др., 2000; Кретова Е.Ю. и др., 2004; Kawamori R, Jmano Е, Watarai Т et al, 1994; Levin O'Neal's, 2000). Эти данные подтверждают наличие у больных с диабетическими ангиопатиями перманентного внутрисосудистого свертывания крови с участием тромбоцитарного компонента гемостаза, что и определяет риск развития тромбозов (Бондарь Т.П., Муратова А.Ю., Пол-Тарабатько Н.П., 2004; Хаютина Т.Л., Балаболкин М.И., Коновалова Г.А. и-др., 2004).

Учитывая, важную роль в развитии диабетических ангиопатий окислительного стресса, необходимой составляющей патогенетической терапии является применение антиоксидантов (АО) (Кулагин O.JL, 2000; Кокорева Е.В., 2002; Yin X, Zhang Y, Yu J et al, 2006). Исследование ангиопротекторных эффектов препаратов АО у больных с диабетическими ангиопатиями свидетельствует о перспективности данного направления. (Бобырева JLE., 1997, 1998; Машков-Ю.И., 2001; Янькова В.И., Иванова И.Л., Федореев С.А., Кулеш Н.И., 2002; Чугунова JI.A., Шамхалова И.Ш., Шестакова М:В., 2004) и о повышении факторов АОЗ и угнетении процессов ПОЛ.

Наряду с общеизвестными АО — а-токоферол, а-липоевая кислота и др., в литературе имеются- данные об успешном использовании растительных экстрактов — фитоадаптогенов (Кулагин О.Л. и др., 2001; Янькова В.И. и др., 2002). Вместе с тем, отсутствуют исследования, посвященные изучению сопряженных систем СРО и факторов* АОЗ клеток, обуславливающих нарушения макро- и микроциркуляции в периферических сосудах и структурах нефрона, сопровождающихся нарушениями в системе гемостаза, при экспериментальном сахарном диабете, а также патогенетическая их коррекция.

Актуальность настоящего исследования заключается в комплексном изучении патогенетических механизмов развития сосудистых осложнений СД, их корреляционных взаимоотношений на молекулярном, клеточном и органосистемном уровнях организации, что позволит экспериментально обосновать новые подходы к оптимизации лечения и профилактики диабетических ангиопатий.

Цель исследования: изучить патофизиологические и биохимические особенности нарушений взаимосвязанных систем СРО и ферментов АОЗ клеток, обуславливающих изменения макро- и микроциркуляции, системы гемостаза, активности мембраносвязанных ферментов почечной ткани и их роль в патогенезе диабетических ангиопатий. Обосновать новые методы коррекции нарушенных механизмов* регуляции, повысить эффективность лечения и профилактики сосудистых осложнений СД в эксперименте.

Задачи исследования:

1. Исследовать характер изменений макро- и микрогемодинамики у крыс с экспериментальным сахарным диабетом допплерографически.

2. Изучить возможную роль изменений плазменного* коагуляционного и тромбоцитарного гемостаза в сочетании с нарушениями тканевой перфузии в развитии экспериментальных диабетических ангиопатий.

3. Изучить при экспериментальном сахарном диабете нарушения стандартных молекулярно-клеточных механизмов оксидативного стресса: мембранных механизмов трансканальцевого транспорта ионов, роль перекисного окисления липидов (ПОЛ) и антиокислительной системы клеток (АОС) в патогенезе диабетических нефро- и ангиопатий.

4. Исследовать корреляционные взаимосвязи микроциркуляции, коагуляционных и биохимических метаболических нарушений при экспериментальном сахарном диабете, выделив зависимости, способствующие сосудистым осложнениям.

5. Используя новые знания патофизиологических и биохимических механизмов патогенеза диабетических ангиопатий, результатов корреляционного анализа, обосновать и разработать новые технологии профилактики и коррекции, используя современные антиоксиданты и мембранопротекгорные вещества.

Научная новизна. Впервые использован комплексный подход к анализу механизмов развития экспериментальных диабетических нефро- и ангиопатий с применением корреляционного анализа. Выявлены новые звенья патогенеза, вскрыто участие нарушений метаболизма арахидоновой кислоты и АОС в нарушении эндотелий-зависимой регуляции тонуса сосудов, макро- и микрогемодинамики, включая почечные артерии. Показана роль системных нарушений коагуляционного и тромбоцитарного гемостаза в развитии диабетических сосудистых осложнений. На основании этих знаний разработан новый методологический подход к коррекции- выявленных нарушений. Доказано положительное влияние антиоксидантов и мембранотропных веществ на состояние почечной и общей гемодинамики, активность мембранных ферментов почечных канальцев, а. также ПОЛ и АОЗ клеток при экспериментальном сахарном диабете.

Научно-практическая значимость. Полученные результаты дают новые знания, углубляют и расширяют представления о патогенетических механизмах развития сосудистых осложнений сахарного диабета, обосновывают новую, более эффективную технологию коррекции системных нарушений с применением' современных антиоксидантов, мембранотропных веществ- и фитоадаптогенов.

Практическая ценность результатов — в патофизиологическом обосновании нового методологического подхода к профилактике и лечению диабетических ангиопатий.

Основные положения выносимые на защиту.

1. При экспериментальном сахарном диабете развиваются-нарушения микро-и макрогемодинамики, что приводит к ангиопатиям. Уменьшается-перфузия тканей (жидкостный обмен), снижаются-средняя-и систолическая скорости кровотока и повышается диастолическая скорость кровотока. Изменения гемодинамики в микроциркуляторном русле и магистральных сосудах (БА, почечные артерии) сопровождаются нарушениями коагуляционного и тромбоцитарного звеньев гемостаза и торможением системы фибринолиза.

2. Нарушаются водо- и электролито-выделительная функции почек, вследствие угнетения трансмембранного транспорта воды и электролитов. Снижение уровня канальцевой реабсорбции Na обусловлено падением активности №,К-АТФ-азы почечной ткани.

3. При экспериментальном сахарном диабете повышается интенсивность ПОЛ в гомогенатах коркового и мозгового слоев почечной ткани, изменяющее состояние липидного матрикса мембран клеток структур нефрона. Нарушается АОЗ клеток.

4. Коррекция нарушений ПОЛ и АОС клеток антиоксидантами в сочетании с мембранотропными веществами приводит к снижению степени выраженности диабетической нефропатии, нарушений гемодинамики и системы гемостаза.

Апробация диссертации. Материалы диссертации докладывались на: 61-ой межвузовской научной конференции молодых ученых и студентов «Актуальные вопросы современной медицинской науки и здравоохранения» (Владикавказ, 2006); научно-практической конференции южного Федерального округа с международным участием «Экстремальная медицина. Проблемы экстремальных состояний» (Владикавказ, 2006); научной конференции молодых ученых СОГМА) (Владикавказ, 2007); IV региональной научно-практической.? конференции «Новые технологии' в рекреации здоровья населения» (Владикавказ, 2007).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 работ, в том числе в рекомендованном ВАК РФ рецензируемом журнале // «Вестник новых медицинских технологий», т.15, №1, 2008, с.40-41. •

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 150 страницах, включая! библиографию. Состоит из введения; обзора литературы, описания материалов' и методов» исследования; четырех глав изложения^ результатов исследования, обсуждения, полученных результатов, заключения, общих выводов и списка использованной литературы и приложений. Библиографический указатель включает 242 источника литературы, из них 155 отечественных и 87 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 15 рисунками и 13 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Дзугкоев, Сергей Гаврилович

Общие выводы.

1) При экспериментальном сахарном диабете развиваются ангиопатии, нарушается микро- и макрогемодинамика: уменьшается перфузия тканей (жидкостный обмен) вследствие снижения средней и систолической скоростей кровотока при одновременном повышении диастолической скорости кровотока, повышаются упруго-эластические свойства (плотность) сосудистой стенки t и увеличивается регионарное периферическое сосудистое сопротивление.

2) Исследования' макрогемодинамики в магистральных сосудах (брюшная аорта, почечные артерии) выявили повышение средней, систолической и диастолической скоростей кровотока, нарушение реологических свойств крови, вследствие повышения активности коагуляционного и-тромбоцитарного звеньев гемостаза, на фоне торможения, системы фибринолиза в сочетании с геперактивацией тромбоцитов при экспериментальном сахарном диабете.

3) Нарушаются водо- и электролитовыделительная функции почек, сопровождающиеся угнетением трансмембранного транспорта воды и электролитов. В механизме нарушения канальцевого транспорта Na принимает участие №,К-АТФ-аза, активность которой снижается5 в гомогенатах, митохондриальной и микросомальной фракциях клеток коркового и мозгового' вещества почек у крыс с экспериментальным сахарным* диабетом.

4) При экспериментальном сахарном диабете происходит активация системы СРО, увеличивается концентрация МДА в эритроцитах и гомогенатах коркового и мозгового вещества почечной ткани, снижается активность перекись-продуцирующего фермента - супероксиддисмутазы (СОД), а активность каталазы компенсаторно повышается, что препятствует образованию радикала гидроксила путем метаболического удаления перекиси водорода.

5) Повреждение эндотелий-зависимой регуляции тонуса сосудов частично обусловлено изменением физико-химических свойств сосудистой стенки вследствие перекисного окисления липидов (ПОЛ). Выявлена обратная корреляционная связь между изменением концентрации МДА и активностью Na+,K+-ATO-a3bi почечной ткани, и прямые — между показателями микро- и макрогемодинамики.

6) Коррекция нарушений ПОЛ и АОС клеток антиоксидантами в сочетании с мембранотропными веществами приводит к уменьшению степени выраженности диабетической нефропатии, микро- и макрогемодинамики, системы гемостаза и их корреляционных взаимодействий, что вскрывает патогенетическую роль нарушений про- и антиоксидантной систем в механизмах развития сосудистых осложнений в ранние сроки экспериментального сахарного диабета.

Заключение.

Диабетическая ангио- и нефропатия являются не только частым осложнением СД, но и его интегральным патогенетическим звеном, частота и выраженность которого коррелирует с длительностью заболевания и степенью метаболических нарушений. Микроциркуляторные изменения носят органоспецифический характер и отмечаются в разных областях. По данным Дедова И.И., Сунцова Ю.И., Кудряковой С.В. и др., 1997, из 82,7% обследованных больных СД, ретинопатия у 61,1%, нейропатия — 50,5%, диабетическая нефропатия - 28,2%. При экспериментальном сахарном диабете отмечается нарушение кровоснабжения нервов и уменьшение плотности сосудов (Schratzberger Р, Walker DH, Ritting К, Bahlmann FH et al, 2001). Диабетическая нефропатия — одно из наиболее тяжелых последствий». СД, снижающее качество и продолжительность жизни больных (Дедов И:И., Шестакова М.В., Бондарь И.А., Климонтов В.В., Королева Е.А. и др., 2003) и: занимающее первое место среди других ангиопатий. Каждый второй больной СД типа 1 и каждый четвертый больной СД типа 2* умирает от острой и хронической почечной недостаточности (Сунцов Ю.И., 1998; Дедов И.И., 2003).

При экспериментальном сахарном диабете на ранних стадиях его развития и в клинике у больных отмечаются функциональные нарушения основных процессов мочеобразования и почечного плазмотока, трансканальцевого транспорта электролитов и изменение ренин-ангиотензин-альдостероновой системы (РААС), которая регулирует секрецию альдостерона (Dj Xoreto • V, Moreno HS, Puche RC et al, 2004; Awad AS, Huang A, Ye H, Duoung ET, Bolton WK, Linden J, Okusa MD, 2005; Pfab T, Thone-Reineke C, Theilig F et al, 2006; Caden MP, Lautenslager OS, Hud E et al, 2007; Hartner A, Cordasic N, Klanke В et al, 2007).

В развитии структурно-функциональных аномалий, лежащих в основе 114 •■.• диабетических ангиопатий и: ассоциированных с ними патологий (изменения? свертывающей системы крови, артериальной гипертензии) участвует множество взаимосвязанных, между собой процессов. Одним из таких нарушений является- дисбаланс окислительно-восстановительных процессов и усиление неконтролируемых • свободно-радикальных реакций- (СРО), называемые окислительным стрессом (Baynes JW, 1991; Tesfamariam В' 1994; Van Damn PC, Van Asbeck BS, Erkelens, 1995). . . ;

Проявляются системные метаболические* расстройства; характер и направленность которых позволяют предполагать, что повышение: интенсивности; СРО мембранных фосфолипидов. приводит к; накоплению», токсических продуктов окислительной деструкции? липидов, изменению проницаемости сосудов- вследствие дисфункции, эндотелия; нарушению. функциональной? способности мембранных структур, активности мембранных, ферментов- клеточного метаболизма; (Колесниченко Л.С., Мантарова Н.С., Шапиро Л.Л., 1989; Еонский Ж№, Корда1М;М., Клищ И:Н., Фира Л.С., 1996; Васильева О.В:, Мобицкий О.Б., Клебанова F.K., Владимиров Ю.А., 1998), перманентного внутрисосудистого свертывания крови? с участием, тромбоцитарного компонента гемостаза (Бондаоь Т.П., Муратова А.Ю., Пол-Тарабатько Н-Ш, 2004; Хаютина Т.Л., Балаболкин MiH., Конвалова Г.А. и др., 2004).

Учитывая важную роль в развитии диабетических ангиопатий окислительного стресса, необходимой составляющей патогенетической терапии, является- применение антиоксидантов (АО) (Кулагин- О.Л., 2000; Кокорева Е.В:, 2002; Yin X, Zhang Y, Yu J et al, 2006).

Однако, в доступной литературе отсутствуют комплексные исследования, посвященные изучению патофизиологических и биохимических особенностей нарушений взаимосвязанных систем СРО и АОЗ клеток, обуславливающих развитие диабетических нефро- и ангмопатий. Анализ результатов информационно-патентного поиска послужил основанием для изучения патофизиологических и биохимических механизмов нарушений взаимосвязанных систем СРО и ферментов АОЗ клеток, обуславливающих изменения активности мембраносвязанных ферментов почечной ткани, макро- и микроциркуляции, системы гемостаза и их роли в патогенезе диабетических ангиопатий. На основе этих знаний разработать эффективное лечение сосудистых осложнений в эксперименте.

Для решения данной цели опыты проводились на 249 крысах — самцах линии Вистар массой 200-220^ грамм, находящихся на стандартном пищевом рационе со свободным доступом к воде и естественным световым режимом. Экспериментальный сахарный диабет (ЭСД), характеризующийся инсулиновой недостаточностью (ИЗСД) вызывали парентеральным введением 5% водного раствора аллоксана в дозе 150-180 мг/кг.

Аллоксановая интоксикация, повреждая Р-клетки островков Лангерганса уже через- 48-72 часа характеризовалась повышением уровня I сахара в крови. В хронической стадии аллоксанового диабета изучали состояние микро- и макрогемодинамики, сопровождаемые нарушениями в системе гемостаза, эффективность их коррекции антиоксидантами и мембранотропными веществами, показатели диабетической нефропатии — нарушения водо- и электролитовыделительной функции почек, мембраносвязанных механизмов нарушения трансканальцевого транспорта электролитов, активность №,К-АТФ-азы, процессы ПОЛ и АОЗ клеток.

Все подопытные животные были разделены на 4 группы:

1. контрольная группа

2. животные с нелеченным ЭСД легкой степени тяжести (глюкоза крови — до 10 ммоль/л)

3. животные с нелеченным ЭСД средней степени тяжести (глюкоза крови — от 10 до 20 ммоль/л)

4. животные с ЭСД средней степени тяжести, леченные антиоксидантами: а-токоферол-ацетат, комбинация (атокоферол-ацетат с витамином «С» и а-липоевой'кислотой), а также мембранотропными веществами: милдронат и L-карнитин.

Исследование характера кровотока в крупных сосудах и: в микроциркуляторном русле показало, что при анализе перфузии тканей при ЭСД; во всех- точках- локации снижается средняя? скорость кровотока (М) преимущественно за счет снижения; систолической; скорости: кровотока; (S) при повышении; диастолической скорости кровотока (D). Географические показатели характеризуются повышением индекса Гослинга, который отражает повышение упруго-эластических свойств (плотности) сосудистой стенки и снижение градиента давления в сосудах микроциркуляторного русла. Одновременно повышался реографический индекс (RI — индекс Пурселло), свидетельствующий о нарастании регионарного периферического сосудистого сопротивления. , '•.,/' "

В магистральных артериальных сосудах. (БА, почечные артерии) наблюдалось, повышение средней (М); систолической1 (S) и диастолической (D) скоростей кровотока, что согласуется с; теорией генерализованной гиперперфузии, рассматриваемой в; качестве основы; патогенеза осложнений СД в виде микроангиопатии сетчатки, почечных клубочков и периферического сосудистого русла (Ouncha-Vaz JG, 1978). Наблюдаемое уменьшение скорости тканевого обмена; (перфузии) можно объяснить, утолщением базальных мембран сосудов, пролифирацией и набуханием эндотелиальных клеток в начальные периоды развития СД (Петряйкина Е.Е., 2002).

У крыс с ЭСД повышается синтез в эндотелии коллагена IV типа и фибронектина (Cagliero Е, 1991; Бондарь И.А., Климентов В.В., 2005; Matsubara Т et al, 2006; Park CW et аГ, 2006; Roestenberg P et al, 2006), что и приводит к утолщению основной сосудистой мембраны.

Выявленное повышение упруго-эластических свойств? сосудистой стенки (PI) и ОПСС отчасти может быть связано со способностью АФК «гасить» NO, т.е. активные радикалы взаимодействуют с NO и приводят к его инактивации (Аметов А.С., 2005). Кроме того, повышению сосудистого тонуса способствует активизация симпатико-адреналовой и ренин-ангиотензиновой систем (Флоря B.F., Беленков Ю.Н., 1996; Кобалава Ж.Д., Котовская Ю.В.-, 2000; Watanabe К, Sekiya М, Tsuruoka Т et al, 1999):

Анализ системы гемостаза выявил повышение- степени и скорости агрегации тромбоцитов, выраженное при индукции АДФ: Латентный период, характерный для здоровых животных, на кривой агрегации отсутствует. Первичная, агрегация обратима, затем развивается волна вторичной агрегации тромбоцитов. Одновременно развивается гиперкоагуляция и торможение системы фибринолиза в сочетании с гиперактивацией; тромбоцитов:

Пусковым звеном в активации агрегации тромбоцитов очевидно является ПОЛ в мембранах тромбоцитов у крыс с ЭСД, о чем свидетельствует нарастание концентрации МДА в крови у крыс с аллоксановым диабетом. Это согласуется с данными литературы (Нелаева А.А., Трошина А.А., 1999; Кретова Е.Ю., Кондратьева Е.И., Суханова Г.А., 2004), установившими у больных ИЗСД с микроальбуминурией, нарушение коагуляционного и тромбоцитарного гемостаза и их взаимосвязь с ПОЛ- в мембранах тромбоцитов. Воздействие длительной-гипергликемии-приводит к увеличению продукции фибринолитических факторов и усилению тромботической активности, вследствие активации в мембранах тромбоцитов ПОЛ, уменьшения синтеза простациклина и увеличения синтезалромбоксана А2 (Волкова А.К., Недосугова Л.В., Рудько И:А. и др., 2000; Kawamori R, Jmano Е, Watarai Т et al, 1994; Levin, O'Neal's, 2000).

Поскольку ангиопатии носят органоспецифический характер и наиболее тяжелым последствием сосудистых осложнений является диабетическая нефропатия, нами была исследована гемодинамика в почечных артериях, а также изменения электролитовыделительной функции почек, включая активность мембранных ферментов. Данные показали повышение средней (М), систолической (S) и диастолической (D) скоростей кровотока,, т.е. генерализованной гиперперфузии как основы патогенеза сосудистых осложнений в почечных клубочках. Это и способствовало поддержанию уровня-клубочковой фильтрации, которая, по нашим данным, приобрела лишь, тенденцию к снижению: Вместе с тем; имело место угнетение трансканальцевого транспорта воды и электролитов, что приводило к диуретическому и натрийуретическому эффектам.

Как известно; реабсорбция натрия в почечных канальцах является активным процессом и в нём принимает участие Na,K-ATO-a3a, являющаяся составной частью' натриевого насоса. Фермент расщепляет макроэргические фосфатные связи АТФ, обеспечивает энергией активный транспорт Na+ и К+.

В доступной литературе отсутствуют данные о состоянии №+,К+-АТФ-азы в субклеточных фракциях клеток коркового и мозгового? вещества почечной ткани при экспериментамьном сахарном диабете.

Анализ данных наших исследований показал, что при инсулиновой недостаточности — аллоксановый диабет — отмечается- снижение активности Ыа+,К+-АТФ-азы в микросомальной и митохондриальной; фракциях клеток (р<0,001). Учитывая тот факт, что митохондрии: являются» энергообразующими, структурами» клетки, мы определяли активность! фермента и в этих субклеточных фракциях. Данные показали понижение активности Ыа+,К+-АТФ-азы, что свидетельствует о снижении энергообразования' и нарушении фосфорилирования; энзима: вследствие уменьшения субстрата АТФ.

Это подтверждается данными исследований Rosea MG, Mustard TG, Kinter MT et al, 2005 об изменении митохондриальной биоэнергетики на изолированной почечной корковой' митохондрии у крыс со стрептозотоциновым диабетом показали снижение активности III комплекса дыхательной цепи и окислительного фосфорилирования, что сыграло патогенетическую роль при поражении почек оксидативным стрессом в хронической стадии диабета.

Учитывая важную роль в развитии сосудистых осложнений при экспериментальном сахарном диабете окислительного стресса, мы исследовали концентрацию конечного продукта МДА в эритроцитах и в клетках коркового и мозгового вещества.

Анализ полученных результатов у крыс с экспериментальным' сахарным диабетом показал, что действительно происходит активация системы СРО, свидетельством чему является увеличение концентрации МДА в эритроцитах - универсальной модели тканевых клеток, основной мишенью повреждения являются почки, поэтому мы определяли интенсивность ПОЛ" в клетках коркового и мозгового вещества почечной ткани. Данные показали» достоверное повышение концентрации- МДА не только в эритроцитах, но. и клетках коркового и мозгового вещества почечной ткани (соответственно р<0,001, р<0,05).

Поскольку ПОЛ происходит не только с фосфолипидами цитоплазматических мембран, но распространяется и на мембраны субклеточных фракций, нами производилось гомогенизирование тканей коркового и мозгового вещества в среде выделения, в. соотношении 1 объем ткани : 9 объемов среды выделения. Разрушение митохондрий и микросом проводили однократным замораживанием" проб в морозильной камере при t° 10 С с последующим оттаиванием. Определяли активность Ыа,К-АТФ-азы в микросомальной и митохондриальной фракциях клеток коркового и мозгового вещества почечной ткани. Данные показали статистически достоверное снижение активности энзима в субклеточных фракциях клеток слоев.почечной ткани (в микросомах с 4,39±0,18 Рн/мг б/час до 3,19±0,15 Рн /мг б/час (корковое в-во); с 6,62±0,07 Рн/мг б/час до 4,69±0,08 Рн/мг б/час (мозговое в-во) и в митохондриях с 2,72±0,089 до 1,90±0,053 Рн/мг б/час мозговое в-во) и с 1,89±0,058 до 1,09±0,029 Рн/мг б/час (корковое в-во).

Изучая взаимосвязь между изменением концентрации МДА и. активностью Ыа,К-АТФ-азы выявили,, что при аллоксановом диабете происходит резкое понижение активности Иа,К-АТФ-азы и это сопровождается достоверным возрастанием концентрации; малонового диальдегида, конечного продукта переокисления липидов: Анализ корреляционной связи между интенсивностью перекиснош окисления липидов и активностью Кга,К-АТФ-азы в корковом и мозговом веществе почечношткани; выявили отрицательную связь (г соответствует = -0,8; -0,75). Кроме этого;, отмечаются; однонаправленные изменения процессов; липопероксидации в эритроцитах и клетках почечной ткани, что может быть использовано в клинике для^ более ранней; диагностики оксидативного' стресса, как показателя декомпенсации сахарного диабета.

Таким образом; в г результате интенсификации; ПОЛ, происходят изменения качественного состава; липидного бислоя мембран- клеток, что сопровождается изменением; активности №,К-АТФ-азы почечной; ткани- и других мембраносвязанных ферментов.

Полученные нами данные' демонстрируют патогенетическую роль перекисного окисления липидов; в угнетении активности; Na-транспортирующего энзима, что; приводит к повышению экскрецит электролитов с мочой.

Стационарное состояние ПОЛ; поддерживается: системой-АОЗ; которая; обеспечивается ферментативными-; механизмами; (первая! линия* защиты — СОД, катал аза, глютатион-редуктаза) и .неферментативными. В; условиях оксидативного стресса у крыс с ЭСД выявлено снижение активности: СОД в крови (р<0;05), тогда, как. активность каталазы существенно возросла (р<0,01). Сравнивая: характер окислительной модификации активными; формами: кислорода СОД; и каталазы; мы предположили на- основании данных литературы, что специфика. процесса определяется; особенностью уникальной структурной организации биомолекул данных ферментов. По сравнению с СОД каталаза, содержащая 4 группы гема и 4 молекулы НАДФН, оказывается более устойчивой к инактивирующему действию Н202 и компенсаторно препятствует образованию ОН"" путем метаболического удаления перекиси водорода и может неспецифически стимулировать распад гидроперекисей липидов (Kirkman HN, Gaetani GF, 1984; Gutteridge JMC, 1991). Т.о., патобиохимической составляющей в. генезе диабетических нефропатии является активация ПОЛ, которая индуцируется активными формами кислорода: супероксидный анион радикал Ог", перекись водорода Н202,' продукт реакции Хабера-Вейса — радикал гидроксила ОН", который считается1 наиболее активным инициатором ПОЛ: Источниками АФК являются митохондрии и мембраны ЭПР, в которых одноэлектрониое восстановление кислорода с образованием супероксид аниона 02~ является результатом ответвления от основного пути переноса электронов от субстрата на кислород на уровне цх b или цх Р459, а также активация НАДНН" -оксидазы.

С другой стороны, значительное угнетение активности перекись-продуцирующего фермента СОД, что является свидетельством наличия в крови, почечной ткани высокого уровня. АФК, вызывающих^ окислительную модификацию фермента. Активность каталазы, восстанавливающей Н2©2 до воды, и< кислорода, повышена компенсаторно; но вместе с тем концентрация' конечного продукта ПОЛ - МДА остается повышенной. Т.о., нарушение стационарного состояния окислительно-восстановительных реакций вызывает изменения в митохондриальнои биоэнергетике клеток коркового' и мозгового вещества'почечной ткани из-за окислительной модификации; SH и NH2 белков, нарушения липид-белковых и липид-липидных взаимодействий, увеличения протонной проводимости, понижения процесса окислительного фосфорилирования, снижения синтеза АТФ и активности №+,К+-АТФ-азы митохондрий и микросом гомогенатов коркового и мозгового вещества почечной ткани.

Повреждающее действие ПОЛ на сосудистую стенку и форменные элементы крови приводит к целому ряду нарушений микроциркуляции, реологических свойств крови и состояния гемостаза.

Учитывая важную роль в развитии ЭСД окислительного стресса необходимой составляющей патогенетической терапии диабетических ангио-и нефропатий, является применение антиоксидантов (АО). Исследование ангиопротекторных эффектов препаратов АО свидетельствует о перспективности данного направления^ (Бобырева-Л.Е., 1997, 1998; Янькова В:И., Иванова И.Л., Федореев С.А., Кулеш Н.И., 2002; Машков*Ю.И., 2001; Чугунова Л.А., Шамхалова М.Ш., Шестакова М.В1., 2004).

Исходя из этого для коррекции» нарушений ПОЛ, АОС, показателей диабетической нефропатии, микро- и макрогемодинамики и системы гемостаза вводили крысам с ЭСД в течение месяца АО и мембранопротекторные вещества: а-токоферол-ацетат, комбинацию а-токоферол-ацетата с а-липоевой кислотой и витамином! «С», милдронат, L-карнитин и фитококтейль — ФК «Биоритм-Э». Эффекты милдроната и L-карнитина* сравнивали с действием а-токоферола. Своё физиологическое действие а-токоферол проявляет непосредственно в липидном бислое плазматических и клеточных мембран, обладает способностью прерывать цепь свободно-радикальных реакций (СРВ); Из водорастворимых соединений (аскорбиновая кислота, глутатион, а-липоевая кислота), реагирующие с водорастворимыми радикалами и восстанавливающие а-токофероксильный радикал (Афанасьев Ю.И., Боронихина Т.В., 1987; Gutteridge JMC, 1992).

По истечении периода введения исследовали показатели ПОЛ, АОС, активность №+,К+-АТФ-азы, состояние микро- и макрогемодинамики, коагуляционный и тромбоцитарный гемостаз.

Анализ полученных результатов выявил значительное ингибирование ПОЛ по данным МДА в крови на фоне введения витамина «Е» и его комбинации с аскорбиновой и а-липоевой кислотами. Поскольку витамин «Е» является ловушкой свободных радикалов, на его фоне устранялось ингибирующее влияние О2" на активность СОД и её активность повышалась. Активность каталазы снижалась с повышенного уровня, поскольку один из путей генерации перекиси водорода устранялся СОД. Однако, активность каталазы не снижалась до исходного уровня, что является свидетельством еще повышенного уровня пероксида. Для . выявления эффективности действия антиоксидантов на интенсивность ПОЛ и активность ферментов АОЗ мы провели корреляционный, анализ между концентрацией МДА, активностью СОД и каталазы. Результаты- показали наличие выраженной обратной корреляционной связи между концентрацией МДА и активностью СОД на фоне введения L-карнитина (г=-0,59). На фоне введения милдроната выявляется прямая- сильная корреляционная- связь между концентрацией МДА и активностью каталазы, тогда как выявлены слабые связи между уровнем снижения концентрации МДА и повышением активности СОД.

Нашими исследованиями впервые установлены АО свойства у препаратов мембранопротекторов: милдроната и L-карнитина. Ингибирование ПОЛ и относительное улучшение липидного микроокружения в мембранах клеток коркового и мозгового вещества привели к повышению активности Ыа+,К+-АТФ-азы в мозговом^ веществе, в то время"как-в корковом веществе наши данные показали лишь тенденцию к повышению активности энзима. Действительно, выявлена выраженная обратная корреляционная связь между концентрацией МДА и активностью Na ,К -АТФ-азы в мозговом веществе на фоне введения L-карнитина (г=-0,64) и милдроната в основном в корковом веществе (г=-0,64).

На фоне АО" терапии уменьшается плотность сосудистой стенки достоверно в Б А, ПА пр, ПА лев. Наиболее эффективны витамин «Е», милдронат, L-карнитин.

Коэффициенты корреляции между интенсивностью ПОЛ и показателем плотности сосудов на фоне витамина «Е», милдроната, L-карнитина следующие: в БА ri=0,55; г2=0,50; г3=0,65; в почечных артериях Г]=0,49; ^=0,60; г3=0,69, т.е. выявляется прямая корреляционная связь.

Данные МЦ (жидкостный обмен) показывают улучшение перфузии, из-за снижения плотности сосудистой стенки и повышения средней и систолической скоростей кровотока.j Сравнительный анализ результативности влияний АО выявил, что наиболее эффективным оказался L-карнитин, который ингибировал липопероксидацию и способствовал улучшению качественного состава ФЛ сосудистой стенки, в результате чего уменьшилась её плотность. С другой стороны, улучшая метаболические процессы и энергообразование в эпителиальных клетках сосудов и кардиомиоцитов он стимулировал макро- и микрогемодинамику.

Анализ корреляционной связи между концентрацией МДА и скоростью кровотока (S) демонстрирует отрицательные сильные связи на фоне витамина «Е», L-карнитина (коэффициенты корреляции соответственно: г=-0,71; г=-0,69), на фоне милдроната выявляется отрицательная корреляционная связь, но не сильная (г=-0,33). Что касается плотности сосудов микроциркуляции, то она не только снижается, но находится в прямой взаимосвязи с активностью ПОЛ (коэффициенты корреляции: витамин Е — г=0,43; милдронат г=0,60; L-карнитин г=0;70).

Нормализация ПОЛ на фоне витамина «Е», L-карнитина и милдроната приводит к улучшению состояния прокоагулянтного звена системы гемостаза и фибринолитической системы крови.

Таким образом, в развитии структурно-функциональных изменений, лежащих в основе диабетических ангио- и нефропатий участвует множество взаимосвязанных процессов, ведущим из которых является дисбаланс окислительно-восстановительных процессов, усиление неконтролируемых свободнорадикальных реакций. Процессы ПОЛ вызывают дезинтеграцию липопротеиновых комплексов, нарушение митохондриальной биоэнергетики, наш - - .li ГТ А'гЧЙТМ'* fVl I I' l'l*.

Г

Г 1 i fi • f ■ •

L I J L L. 1

Дисциркулнторные нарушения при ЭСД

Метаболические нарушения: гемодинамические нарушения в макрососудах: почек, брюшной аорты, нажней полой вены и конечностей р расстройства микроциркуляции —► снижение перфузии тканей 7 Г эндотелпопиты Т МДА дисфункция эндотелия —> нарушение секреции ферментов системы гемокоагуляции тонус сосудов I метаболические нарушения дисбаланс окислительновосстановительных процессов , т активация СРО активация ПОЛ недостаточность АОЗ ^ образование избытка МДА

Эндотелиоцит нарушение секреции прокоагулянтов

I антиагрегационной способности сосудистой стенки I активация Тг степени и скорости агрегации торможение фибринолиза коагулопатии

---„------- li I Т й ч с к иЩщщЙЩ^

Схема: Роль взаимосвязанных сосудистых, метаболических и коагулопатических изменений в патогенезе экспериментальных диабетических ангиопатий.

КЛЕТКА ПОЧЕЧНОГО КАНАЛЬЦА

ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ (ПОЛ)

HbFe глутатионпероксидаза

ФОСФОЛИПИДЫ КЛЕТОЧНЫХ МЕМБРАН мембранная фосфолипаза А2

ГИДРОПЕРЕКИСИ

ПОЛИЕНОВЫЕ ЖИРНЫЕ КИСЛОТЫ

ДИЕНОВЫЕ КОНЬЮГАТЫ глутатионредуктаза

МАЛОНОВЫИ ДИАЛЬДЕГИД

ИЗМЕНЕНИЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ КЛЕТОЧНЫХ МЕМБРАН, МЕМБРАН МИТОХОНДРИЙ И МИКРОСОМ торможение ПОЛ

УМЕНЬШЕНИЕ КАНАЛЬЦЕВОЙ РЕАБСОРБЦИИ НАТРИЯ

СНИЖЕНИЕ АКТИВНОСТИ ЫЭ+К+-АТФ АЗЫ ПОЧЕЧНОЙ ТКАНИ

СНИЖЕНИЕ МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ БИОЭНЕРГЕТИКИ

СХЕМА 1. Молекулярно-клеточные биохимические механизмы в патогенезе экспериментальной диабетической нефропатии активности мембранных ферментов канальцев почек. Эндотелиальная дисфункция, вызванная продуктами ПОЛ, вызывает нарушение регуляции сосудистого тонуса, плотности сосудистой стенки и изменение характера микро- и макрогемодинамики, сопровождаемые нарушением коагуляционного и тромобоцитарного гемостаза.

Это согласуется с данными литературы, согласно которым супероксиданион радикал взаимодействует с оксидом азота в 3 раза быстрее, чем происходит дисмутация Ог супероксиддисмутазой с образованием пероксида. Продуктом этой реакции является пероксинитрит (ONOO"), вызывающий дисфункцию эндотелия с нарушением вазодилятации в системе микро- и макрогемодинамики при сахарном диабете (Зенков Н.К., Меншиков Е.Б., Реутов В.Г., 2000; Аметов А.С., 2005; Аметов А.С., Демидова Т.Ю., Косых С.А., 2005).

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Дзугкоев, Сергей Гаврилович, 2008 год

1. Агаев Б А., Велиханова Д.М., Гаджиев А.Н., Аскерова ТА.,

2. Кязимов И.Л. Динамика содержания гликированного гемоглобина и малонового диальдегида при экспериментальном сахарном диабете. Бюлл.эксп.биол. и мед., 1992, №9, с.243-244.

3. Албертс Б., Брей Д., Льюис Дж. Молекулярная биология клетки. М.: Мир, 1986, т.2, с.99-116.

4. Алмазов В.А., Беркович OA., Ситникова М.Ю., Воякова* Е.В. Эндотелиальная дисфункция у больных с дебютом * ИБС в раннем возрасте. Кардиология, 2001, №5, с. 1-5.

5. Аметов А.С., Демидова Т.Ю., Косых СА. Синтез оксида азота в эндотелии сосудов у больных сахарным диабетом 2-го типа. Клин.мед., 2005, №8, с.62-68.

6. Аметов А.С. Перспективы развития диабетологии 'II Терапевтический архив.- 2005.- N 10.- С. 5-9

7. Аметов А.С. Синтез оксида азота в эндотелии сосудов у больных сахарным диабетом 2-го типа // Клиническая медицина.- 2005.- N 8.- С. 62-68

8. Балаболкин М.И., v Креминская В.И., Клебанова Е.М. Роль окислительного стресса в патогенезе диабетической нейропатии и возможность его коррекции препаратами а-липоевой кислоты. Пробл.энд., 2005, т.51, №3, с.22-33.

9. Балаболкин М.И., 1997. Состояние и перспективы борьбы с сахарным диабетом. Пробл.энд., 1997, №6, т.43, с.3-10.

10. Балаболкин М.И. Роль окислительного стресса в патогенезе диабетической нейропатии и возможность его коррекции препаратами а-липоевой кислоты // Проблемы эндокринологии.- 2005.- N 3.- С. 22-33г

11. Балаболкин М.И., Клебанова Е.И., Креминская В.М. Микроангиопатия — одно из сосудистых осложнений сахарного диабета.г2408.2007.

12. Балаболкин М.И., Клебанова Е.М., Креминская В.Я. Патогенез и механизмы развития ангиопатий при сахарном диабете. Кардиология. 2000; 10: 74-87.

13. Балаболкин М.И., Клебанова Е.М. Роль окислительного стресса в патогенезе сосудистых осложнений диабета (лекция). Пробл.энд., т.4, №6, 2000, с.29-36.

14. Балашова Т.С., Голета Е.Н., Рудько. И.А., Балаболкин М.И., Кубатиев А.А. ПОЛ и антиоксидантеая защита эритроцитов у больных СД. Пер.архив, №10,1003, с.23-27.

15. Башкатова В.Г., Вицкова Г.Ю., Наркевич В.Б. Возможная роль оксида азота в патогенезе судорожных состояний различной природы. Бюлл.эксп.биол. и мед., 1998, Т. 125, №1, с.26-30.

16. Берхин Е.Б. Фармакология почек и её физиологические основы. М.: Медицина, 1979,-336с.

17. Биохимические методы исследования в клинике. Справочник (Под ред. А.А.Покровского.-М.: Медицина, 1969.-652с.).

18. Бобырева Л.Е. Влияние фенольных антиоксидантов на развитие аллоксанового диабета у крыс. Ж.«Экспериментальная и клин.фармакол».-1997.- Т.60.- №3.- с.51-53.

19. Бобырева Л.Е. Антиоксиданты в комплексной терапии диабетических ангиопатий. Эксперим. и клинич.фармакология.- 1998.- т.61, №1.- с.74-80:

20. Бобырев В.В., Почерняева В.Ф., Думенко И. Л. и др. Сободнорадикальные процессы в патогенезе аллоксанового диабета. Пробл.энд., 1992, т.38, №6, с.55-57.

21. Болдырев А.А. Биологические мембраны и транспорт ионов. М., Изд-во МГУ, 1985,-208с.

22. Болдырев А.А., Булыгина Е.Р., Волонская Е.А., Курелла Е.Г.,

23. Тюлина О.В. Влияние пероксида водорода и гипохлорида на активность Na,K-ATO-a3bi мозга. //Биохимия.-1995, т.60, вып.10, с.1688-1695.

24. Болдырев А.А. Проблемы и перспективы исследования мембранных ферментов. Хроника V международной конференции по Na,K-зависимой АТФ-азе//Биохимия, 1988, т.53, вып.1, с.166-167.

25. Болдырев А.А. Функциональная активность №,К-АТФ-азы тканей в норме и при патологиях // Украинский биохимический журнал, 1992, т.64, №5, с.3-10:

26. Болдырев А.А. Na,K—зависимая АТФ-аза как олигомерная система, М., 1982, т. 17, с.75-146 ВИНИТИ (Итоги науки и техники. Серия биологическая т. 17).

27. Бондарь И. А., Климентов В. В. Изменения метаболизма коллагена при диабетической нефропатии // Проблемы эндокринологии.-2005.- N 2.- С. 23-28.

28. Бондарь И.А., Климонтов В.В., Королева Е.А., Желтова Л.И. Суточная динамика артериального давления у больных сахарным диабетом типа 1 с нефропатией. Пробл.энд., 2003, т.49, № 5, с.5-10.

29. Бондарь И.А., Пупышев А.Б., Климонтов В.В. а-токоферола ацетат в лечении больных сахарным диабетом // Новые методы диагностики, лечения заболеваний и управления в медицине: Тез.докл. научно-практич. конф.- Новосибирск, 1995.- с. 147.

30. Бондарь И.А., Масычева В.И. Уровень фактора некроза опухоли у больных сахарным диабетом // Актуальные вопросы современной медицины: Тез.докл. 5-й научно-практич. конф.врачей.- Новосибирск, 1995.-T.I.- с.247.

31. Бондарь И.А., Масычева В.И. Исследование содержания интерлейкина -1(3 в сыворотке крови больных сахарным диабетом // Актуальные вопросы современной медицины: Тез.докл. 5-й научно-практической конф.врачей.- Новосибирск, 1995.- T.I.- с.247-248.

32. Бондарь И.А., Орешкова С.Ф. Роль экспрессии генов цитокинов в патогенезе инсулинзависимого сахарного диабета // Актуальные проблемы эндокринологии: Тез.докл. III Всероссийского съезда эндокринологии,-Москва, 1996.- с.36.

33. Бондарь И.А., Климентов В.В. Ранняя диагностика нефропатии при сахарном диабете // Новые методы диагностики, лечения заболеваний и управления в медицине: Тез.докл.научно-практич.конф:- Новосибирск, 1997.-с.69-71.

34. Бондаоь И.А., Шпагина JI.A., Поспелова Т.И. Роль перекисного окисления липидовг в патогенезе диабетических ангиопатий // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний: Тез.докл. II Всесоюзной конф.- Гродно, 1991.- Ч.1.- с.490-492.

35. Бондарь И.А., Поспелова» Т.И. Активность лизосомальных ферментов при сахарном диабете // Тез.докл. IIs Всесоюзной конф.- Гродно, 1991.-4.Ii-c.170.

36. Бондарь И. А. Клинические, метаболические и имунные особенности формирования поздних осложнений сахарного диабета. Автореферат док.дисс. Новосибирск, 1997, 44 с.

37. Бондарь И.А., Поспелова Т.И., Климонтов В.В. Роль лизосомальных ферментов в патогенезе сосудистых осложнений при сахарном диабете // Актуальные вопросы современной медицины: Тез.докл. 4-й научно-практич. конф. Врачей.- Новосибирск, 1994.- с. 175.

38. Бувальцев В.И. Дисфункция эндотелия как новая концепция профилактики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний.

39. Междун.мед.жур., 2001, №9, с.1-10.

40. Бышевский А.Ш., Галян G.JL, Дементьева*И.А. и др. Тромоциты (состав, функции; биомедицинское значение). Тюмень, 1996 г.40; Ванин1 А.Ф. Оксид азота в биомедицинских исследованиях. Вестник РАМН, №4; 2000; с.З-10.

41. Ванин А.Ф. Оксид азота в биологии. История, состояние и перспективы исследования. Биохимия, 1998; т.63, №7, с.867-869.

42. Ванин А.Ф. Динитрозильные комплексы железа и S-нитрозилы — две возможные формы стабилизации и транспортах оксида азота в биосистемах. Биохимия, 1998, Т.63, с.924.

43. Веверис М.М., Атаре З.А., Кименис А.А., Калвинып И.Я. Результатььфармакологического исследования милдроната. С. 15-22.

44. Вербовая Н.И., Лебедева Е.А. Роль гликозилированных продуктов метаболизма в формировании сосудистых осложнений сахарного диабета. Пробл.энд., 1997, №1, т.43, с.43-46.

45. Волкова' А.К., Недосугова Л.В., Рудько И.А. и ,др. Сахарный диабет 2000; 3: 8-12.

46. Галстян Г. Р. Диабетическая нейропатия: классификация, диагностика и лечение // Consilium medicum.- 2005.- N 9.- С. 765-768

47. Геворкян Д.М. Антиоксиданты как мембраностабилизирующие факторы при аллоксановом диабете. Биологический ж.Армении, т.41, №12,1988, с.982-988.

48. Геворкян Д.М., Мхитарян JI.B., Семерджян JI.B. Роль антиоксидантов в патогенезе аллоксанового диабета. Сб.науч.трудов «ПОЛ в норме и патогенезе различных заболеваний», Ереван, 1988, с.54-57.

49. Гогин Е.Е. Изменения артериального русла при гипертонической болезни и стратегия лечения больных. Тер.арх. 1999; 1: 64-7.

50. Горелышева В.А., Смирнова О.М., Романовская Г.А., Филиппов И.К. Никотинамид и альфа-токоферола ацетат в дебюте инсулин-зависмого диабета // Клиническая фармакология и-терапия.- М.Фарма'Пресс — 1993.-№3. с.51-52.

51. Григорян О. Р., Гродницкая Е. Э. Фолацин (фолиевая кислота) в профилактике врожденных пороков развития у потомства женщин с сахарным диабетом // Акушерство и гинекология.- 2005.- N 5.-' С. 47-49

52. Григорян О. Р. Современные принципы коррекции метаболического синдрома у женщин в период постменопаузы // Consilium medicum.- 2005.- N 9.- С. 734-736

53. Дедов И.И., Александров А.А. Сердечно-сосудистая патология и сахарный диабет. Стратины и «микрососудистая ишемия» миокарда. Consilium medicum. Т.06, №9, 2004, с.1-9.

54. Дедов И.И., Горелышева В.А., Смирнова О.М., Романовская Г.А., Филиппов И.К. Применение никотинамида и альфа-токоферола в дебюте инсулинзависимого сахарного диабета // Клиническая медицина, принято в печать.

55. Дедов И.И. // Сахарный диабет. 1998, №1, с.2-18.

56. Дедов И.И. Сахарный диабет в Российской Федерации: проблемыи- пути решения. Мат. Г Росс.диабетологического конгресса. Ж.Сахарный диабет, 1998, №1,с.7-17.

57. Дедов И.И., Сунцов Ю.И., Кудрякова С.В., Рыжкова С.Г., Лисицын В.Ю. Государственный регистр сахарного диабета: распространенность инсулинзависимого диабета и его осложнений. Пробл.энд., 1997, т.43, №6, с.3-10.

58. Дедов И.И., Сунцова . Ю.И., Кудрякова С.И. и др. Государственный регистр сахарного диабета; распространенность инсулинозависимого диабета и его осложнений: Пробл.энд., №6, т.43, 1997, с.10-13.61. ' Дедов И;И.', Шестакова М.В. Сахарный диабет. М., 2003.

59. Дмитриев Л.В., Дугин С.Ф. Кардиоренальная патология прш сахарном диабете типа 1: механизмы: развития и возможности медикаментозной коррекции // Терапевтический архив.- 2005.- N 6.- С. 40-45

60. Еременко НЛI. Влияние каптоприла на процессы ПОЛ в норме и при аллоксановом диабете, особенности фармакокинетики препарата. Рязань, 2005. .

61. Ефимов A.G. Диабетические ангиопатии. М., Медицина, 1989,288с.

62. Зенков Н.К., Меньшикова. Е.Б., Реутов В:П. // NO-синтазы в норме и при патологии различного генеза.- Вестн.РАМН, 2000, №4, с.30-34.

63. Зимин Ю.В. Инсулинорезистентность, гиперинсулинемия и артериальная гипертония. Кардиология. 1996; 11: 80-91*.

64. Зубкова С.Т. Некоторые аспекты диагностики и лечения диабетических ангиопатий (www.he-., 2007, с. 1-5).

65. Князева JI.A. Провоспалительные цитокины и эндотелиальная дисфункция у больных ИБС на фоне С.Д. типа 2. Ж. «Иммунология», т.26, №3,2005, с. 175-179.

66. Князева JI.A. Провоспалительные цитокины и эндотелиальная дисфункция у больных ИБС на фоне СД типа 2. Ж. «Иммунология», 2005, т.26, с.175-179:

67. Кобалава Ж.Д., Котовская Ю.В. Артериальная гипертония 2000: ключевые аспекты диагностики и дифференциальной диагностики, профилактики, клиники/и лечения. Под ред. В.С.Моисеева. М.:,Форте ФРГ, 2001.

68. Козлов В.А. и. др. Ультразвуковая допплерография в оценке' состояния гемодинамики в тканях шеи, лица и полости рта в норме и при некоторых патологических состояниях СПБ: ООО «СП Минимакс», 2000.-31с.

69. Козлов В.И., Соколов В.Г. Исследование колебаний кровотока в системе микроциркуляции. «Применение лазерной допплеровской флоуметрии в медицинской практике». М., 1998; с. 8-14.

70. Козлова Е.Г. Клинико-иммунологические сопоставления на различных стадиях нефропатии при инсулинзависимом сахарном, диабете. Автореф.канд.дисс. Москва, 1994, 29 с.

71. Козловская JI.B., Фомин В.В. Нефротический синдром: подходы к диагностике и лечению. Consilium medicum (ж.жоказательной мед. для практ.врачей), том 07, № 7, 2005.

72. Кокорева Е.В., Инчина В.И., Макарова. М.Ю. Антиокислительные и гиполипидемические свойства мексидола и а-токоферола при эксприментальном диабете у крыс // Науки о человеке: Сборник статей молодых ученых и специалистов.- Томск.- 2001.- с.208-209.

73. Кокорева Е.В., Инчина В.И., Цыганова С.Ю., Макарова М.Ю.

74. Кондратьев Я.Ю., Носиков В.В., Дедов И.И. Полиморфные генетические маркеры и сосудистые осложнения сахарного диабета. Пробл.энд., 1998, М., с.43-51.

75. Кондратьев Я.Ю. Полиморфные генетические маркеры и содистые осложнения^.Д., Пробл.энд., 1998, №1, с.43-51.

76. Королева Т.В. Клинические аспекты нарушений внутрисосудистой микроциркуляции у больных сахарным диабетом: Дис. д-р мед.наук, ММА,,Защ.1999.09.22.

77. Кулагин 0:Л., Лебедева Е.А., Макарова Д.А. Перекисное окисление липидов при экспериментальном' сахарном.диабете // Материалы, научной конференции «Актуальные проблемы медицины и фармации». Курск. 1999., с.11-13.

78. Кулагин ОШ.*, Лебедева. Е.А. Перекисное окисление липидов в ткани печени, почек, поджелудочной- железы, в плазме крови» крыс с аллоксановым диабетом // Сборник научных работ «Клиническая эндокринология». Саратов. 1999., с.59-61.

79. Кулагин О.Л. Фармакологическая коррекция аллоксанового диабета и факторов, вызывающих развитие его осложнений.

80. Автореф.док.дисс. Челябинск, 2000, 36 с.

81. Кутырина И.М., Тареева И.Е., Шестакова М.В., Зверев К.В. Нарушения внутрипочечной гемодинамики при гломерулопатиях. Вестник РАМН, 1995, №5, с.47-51.

82. Лобджанидзе Т.В., Шикова Х.В., Кобалава Ж.Д. Оценка функционального состояния микроциркуляции и. эффективность эпросартана у больных с артериальной гипертонией и нарушениями углеводного обмена. Тевентен.ру. 24.08.2007, с. 1-8.

83. Мазуров В.И., Столов С.В., Линецкая Н.Э., Балдуева И.А. Содержание провоспалительных цитокинов ил-2, ил-8 и растворимого рецептора ил-2 в крови у больных ИБС различных вариантов. Тер.архив,2001, №12, с.14-17.

84. Маколкин В.И., Боанько В.В. Метод ЛДФ в кардиологии: Пособие для врачей, 1999, 48 с.

85. Маколкин В.И., Подзолков В.И., Павлов В.И. и др. Состояние микроциркуляции при артериальной гипертонии. Кардиология. 2002; 7: 3640.

86. Маневич И.М., Бондарь И.А. Динамика ПОЛ у больных сахарным диабетом // Новое в биологии и медицине: Тез.докл. 52-й итоговой научной конференции студентов и молодых ученых.- Новосибирск, 1991.-с.122-123.

87. Манухина Е.Б., И.Ю.Малышев, Ю.В.Архипенко. Оксид азота в сердечно-сосудистой системе: роль в адаптационной защите. Вестн.РАМН, 2000, №4, с.16-21.

88. Матюшкин И.Ф., Бояринов Г.А., Богдарин Ю.А. Метаболизм жирных кислот в миокарде в норме и при ишемии // Вопр.мед.химии.- 1984.-№1.- с. 2-13.

89. Машков Ю.И. Изучение нефропротекторных свойств мексидола, димефосфона и альфа-токоферола при острой интоксикации четыреххлористым углеродом, гентамицином и аллоксановом диабете.

90. Автореф.канд.дисс. Саранск, 2001, 22 с.

91. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца.- М., 1984.- 268с.

92. Наточин Ю.В. Основы физиологии почки.-JI.: Медицина, 1982.206с.

93. Наточин Ю.В. I Европейский коллоквиум «Физиология нефрона: механизмы и регуляция». Урология и нефрология.-1974.-№6.-с.51-53.

94. Нелаева А.А*., Трошина И.А. Состояние перекисного окисления липидов в мембранах тромбоцитов у больных ИЗСД при кетоацидозе и коррекция витаминами антиоксидантами. Ж. «Сахарный диабет», 1999, т.З, №4, с. 1-6.

95. Новиков В.И., Молотков О.В., Подчеко А.П. Протективньпъ эффект Т-активина при экспериментальном сахарном диабете. Ж. «Сахарный диабет», 1999, №2, с.37-39.

96. Патент РФ № 2158600. Экстракт пажитника жидкий. // Бюлл. изобретений. 2001г., №31 (Кулагин 0:Л., Куркин В.А., Лебедев А.А., Лебедева Е.А., Правдивцева О.Е.).

97. Полищук Н. Сахарный диабет: ретинопатия и нефропатия. 2007. Изд.дом «Здоровье», Украина. 2006-2007.

98. Прайор У. Свободные радикалы в биологии.- М: Мир, 1979.-318с.

99. Радбиль О.С. Свободные радикалы и заболевания органов пищеварения (обзор). Клин.мед., 1989, №3, с. 16-21.

100. Реутов В.П. Медико-биологические аспекты циклов оксида азота и супероксидного анион-радикала. Вестн.РАМН, 2000, №4, с.35-41.

101. Р.Марри, Д.Греннер, П.Мейсс, В.Родуэлл. Биохимия человека, изд.мир, Москва, 2004 г., с.218-219.

102. Салтыков Б.Б., Пауков B.C. Диабетическая микроангиография. Медицина, 2002,240 с.

103. Светухин A.M., Титова М.И., Земляной А.Б., Амиранов Ю.А.,

104. Руднева В.Г. и др. Состояние системы гемокоагуляции больных с гнойнонекротическими формами синдрома диабетической стопы. Си Эс Си ЛТД. Научные публикации метаанализ некоторых результатов. С. 1-6.

105. Северина И.С., Бусыгина О.Г., Пятакова Н.В. // Активация растворимой гуанилатциклазы новыми донорами NO как основа направленного поиска новых эффективных вазодилататоров и антиагрегантов. Вест. РАМН, №4, 2000, с.25-30.

106. Северина А.С., Шестакова М.В. Новое о механизмах развития, диагностике и лечении диабетической нефропатии: Сахарный- диабет, №3 (12), 2001, с.59-60.

107. Сидорова Л.Д., Бондарь И.А., Климонтов В.В., Пупышев А.Б., Поршенников И.А. Окислительный стресс при сахарном диабете и его-коррекция тиоктовой кислотой. Бюлл.сиб.отдел.РАМН., 2000, № 1, с.94-98.

108. Сидорова Л.Д., Бондарь И.А. Участие цитокинов в патогенезе сахарного диабета и его осложнений // Новые методы диагностики, лечения заболеваний и управления в медицине: Тез.докл. научно-практич.конф.-Новосибирск, 1996.- с.33-35.

109. Симхович Б.З., Мейрена Д.В., Хаги Х.Б. и др. Влияние милдроната на карнитин-зависимый и карнитиннезависимый кетогенез у крыс. // Фармакол. и токсикол.- 1991.- т.54.- №4.- с.41-42.

110. Слепова О.С., Герасименко В.Л., Захарова Г.Ю., Новикова-Билак Т.И. Сравнительный анализ роли цитокинов в глазных болезнях. Диабетическая ретинопатия. Вестник офтальмологии, 2001, т. 117, №3, с.35-37.

111. Смирнова О.М. Клинические, иммуногенетические, гормонально-метаболические аспекты впервые выявленного инсулинзависимого сахарного диабета (клиника, диагностика, лечение, профилактика). Автореф.док.дисс. Москва, 1995, 49 с.

112. Степанян M.JI. Функционально-метаболические и ультраструктурные особенности тромбоцитов в динамике развития экспериментального, сахарного диабета / Сб.научн.работ // Патофизиология микроциркуляции и гемостаза.- СПБ: 1998.- с.141-154.

113. Столярова В.В., Гарькин Г.Р., Кокорева Е.В., Инчина В.И. Эффективность фармакологической- коррекции повреждений миокарда при стрессорных воздействиях // II Российский конгресс по патофизиологии: Тезисы докладов.- Москва.- 2000.- с.68-69.

114. Страйер JI. Биохимия. М.: Мир,-1985.-т.З, с.304-324.

115. Строков И.А., Гурфинкель Ю.И.,Дедов И.И., Дрепа О.И., и др. Влияние танакана на микроциркуляцию, состояние периферических нервов и сетчатки у больных сахарным диабетом типа 2. Пробл.эндокрин., 2004, №5; с.18.

116. Строков И.А., Лаврова И.Н., Моргоева Ф.Э. Антиоксидантная терапия полиневропатии и ретинопатии у больных СД 2-го типа. Мед.Инфа, 2007, с.1-9.

117. Сусеков А.В. Статины при лечении СД типа 2. Consilium medicum, т.06, №5, 2004, с. 1-8.

118. Терехина Н.А., Хоробрых О.Ю., Хоробрых Т.П. Активность антиоксидантных ферментов в эритроцитах крыс при аллоксановом диабете.

119. Скаф.биох.-Перм.Гос.мед.акад., проф.-Терехина Н.А. Пат.физ. и эксп.тер., 1998, №4, с.25-26.

120. Токмакова А.Ю., Староверова Д.Н., Анциферов М.Б. Антикоагулянты в терапии диабетической макроангиопатии. Consilium medicum, т.04, №10, 2002, с. 1-6.

121. Токмакова А.Ю., Анциферов М.Б., Дедов И.И. Медикаментозная терапия нижних конечностей у больных сахарным диабетом 2 типа. Ж. «Сахарный диабет».

122. Токмакова А.Ю., Староверова Д.Н. Современные методы ранней диагностики диабетической макроангиопатии. Пробл.энд., 2005, т.51, №3, с.39-43.

123. Токмакова А.Ю., Староверова Д.Н., Анциферов М.Б. Антикоагулянты в терапии диабетической макроангиопатии. Ж.доказат.мед., 2004.

124. Токмакова А.Ю., Старовера Д.Н. Современные методы ранней диагностики диабетической макроангиопатии. Пробл.энд., 2005, т.51, №3, с.39-43.

125. Трусов В.В., Аксенов К.В., Черемискина И.Б. Нарушения микроциркуляции у больных сахарным диабетом типа 1 с нефропатией и пути коррекции // Проблемы эндокринологии.- 2004,- т.50.- №5.- с.24-27.

126. Федорук А.С., Гоженко А.И., Роговый Ю.В. Защитное воздействие а-токоферола на функцию почек и перекисное окисление липидов при острой гемической гипоксии. Пат.физ. и эксп.хир., №4, 1998, с.35.

127. Флеров М.А., Смирнова Н.Н., Светлова З.В. Перекисное окисление белков плазмы крови больных сахарным диабетом типа 1. Пробл.энд., 2003, т.49, №4, с.3-8.

128. Флоря В.Г., Беленков Ю.Н. Ремоделирование сосудов как патогенетический компонент заболеваний сердечно-сосудистой системы. Кардиология. 1996; 12: 72-7.

129. Хаютина Т.Л., Балаболкин М.И., Коновалов Г.А., Борисов И.А., Чебышев А.Н. и др. Пути коррекции липидного обмена у больных сахарным диабетом 2 типа. Поликлиника МЕДСИ (MEDSI), 2007.

130. Хаютина Т.Л., Балаболкин М.И., Коновалов Г.А. и др. Пути коррекции*липидного обмена у больных СД 2 типа. Ж.доказательной мед. для практикующих врачей, 2004 г.

131. Хегай М.Д., Зайчик С.Е. ПОЛ и гликозилирование белков в аорте кроликов с аллоксановым диабетом при. инсулинокоррекции: Пат.физ. и эксп.тер., 1995, №4, с.6-7.

132. Чугунова Л.А. Аутоимунные аспекты патогенеза, диагностики и лечения впервые выявленного инсулинзависимого сахарного диабета. Автореф.канд.дисс. Москва, 1994, 21 с.

133. Чугунова Л.А., Шамхалова М.Ш., Шестакова М.В. Лечебная тактика при сахарном диабете типа 2 с дислипидемией (по результатам крупных международных исследований). Consilium medicum, том 06, №9, 2004, с. 1-9.

134. Шестакова М.В., Сунцов Ю.И., Дедов И.И. Диабетическая нефропатия: состояние проблемы в мире и России. Сахарный диабет, №312., 2001, с.2-6.

135. Шестакова М.В. Сахарный диабет и артериальная гипертония: каковы препараты первого ряда выбора. Consilium medicum, 2004, т.06, №9, с.

136. Шестакова М.В, Северина И.С., Дедов И.И.,' Рагозин А.К., Белушкина Н.Н., Ряпосова И.К. // Эндотелиальный фактор релаксации в развитии диабетической нефропатии. Вестн.Росс.Амн, 1995, №5, с.30-34.

137. Шор Н.А., Зеленый И.И: Состояние микроциркуляции в нижних конечностях у больных сахарным диабетом. Методология флоуметрии, 1999, с.41-46.

138. Шубина А.Т., Демидова И.Ю., Карпов Ю.А. Метаболический синдром: предпосылки- к развитию артериальной гипертонии и атеросклероза: Клин.фарм. и тер. 2001; 10 (4): 44-7.

139. Шутенко Ж.В., Мейрена Д.В., Хаги Х.Б. и др. Биохимический механизм действия милдроната.// Вопр.мед.химии.-1987.-с.57-62.

140. Шутенко Ж.В., Приедена И.А., Калвинып И.Я., Лукевиц Э.Я. Воздействие структурного аналога у-бутиробетаина милдроната 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата. на карнитинзависимый метаболизм в динамике.// Вопросы мед.химии.-1991.-т.37.-№37.- с.24-26.

141. Юрасова Т.Ф. Исследование особенностей транспорта ионов в разных зонах почки крыс. Автореф. дисс. канд.мед.наук.-Ташкент, 1973.

142. Яфасов К.М., Дубянская Н.В. Дислипидемия при сахарном диабете 2-го типа: патогенез и лечение. Кардиология. 2001; 9: 74-7.

143. Янькова В.И., Иванова И.Л., Федореев С.А., Кулеш Н.И.

144. Антиоксидантное действие гепатопротектора максара при экспериментальном диабете. Ж.«Эксперим. и клинич.фармакология».- 2002.-Т.65.- №4.- с.33-36.

145. Asaba К, Tojo A, Onozato ML, Goto A, Fujita Т. Double-edged action of SOD mimetic in diabetic nephropathy. J Cardiovasc Pharmacol. 2007 Jan;49(l):13-9.

146. Awad AS, Huang L, Ye H, Duong ET, Bolton WK, Linden J, Okusa MD. Adenosine A2A receptor activation attenuates inflammation and injury in diabetic nephropathy. Am J Physiol Renal Physiol. 2006 Apr;290(4):F828-37. Epub 2005 Dec 6.

147. Beshay E, Carrier S. Oxidative stress plays a role in diabetes-induced bladder dysfunction in a rat model. Urology. 2004 Nov;64(5): 1062-7.

148. Bhatti F, Mankhey RW, Asico L, Quinn MT, Welch WJ, Marie C. Mechanisms of antioxidant and pro-oxidant effects of alpha-lipoic acid in the diabetic and nondiabetic kidney. Kidney Int. 2005 Apr;67(4): 1371-80.

149. Biswas SK, Lopes de Faria JB. Hypertension induces oxidative stress but not macrophage infiltration in the kidney in the early stage of experimental diabetes mellitus. Am J Nephrol. 2006;26(5):415-22.

150. Bondar IA, Masicheva VI, OreshkovaSD, Sidorova LD. The role of cytokines in pathogenesis of IDDM and its complication // Diabetologia.- 1996.-Vol.39, Suppl.l.-A95.

151. Brownlee M, VlassaraH, Cerami A. Diabetes 1984; 33: 532-5.

152. Broze G.J., Miletich J.P. Characterization of the Inhibition of Tissue Factor in Serum. // Blood, 1987, Vol.69, p.150-155.

153. Burns WC, Twigg SM, Forbes JM, Pete J, Tikellis C, Thallas-Bonke

154. Calles Escandon Cipolla. Diabetes and endothelial disfunction: a clinical perspective. Endocrine Reviews 2002; 1: 36-52.

155. Ceriello A. et al. Diabetologia 1990; 33: 532-5.

156. Chang JM, Kuo MC, Kuo HT, Chiu YW, Chen HC. Increased glomerular and» extracellular malondialdehyde levels in patients and* rats with diabetic nephropathy. J Lab Clin Med. 2005 Oct; 146(4):210-5.

157. Cojocel C, Al-Maghrebi M, Thomson MS, RawootP, Raghupathy R. Modulation of the transforming growth factor betal by vitamin^ E in early nephropathy. Med Princ Pract. 2005 Nov-Dec;14(6):422-9.

158. Colwell J et al. Do platelets anything to do with diabetic microvascular disease? // Diabetes 1983.- N.32 (Suupl. 2).- p. 14-19.

159. Colwell JA. Diabetes Care 1997; 20: 1767-71.

160. Dedov II, Gorelysheva VA, Smirnova OM, Romanovskaya GA, Fillippov IK. The protective effect of nicotinamid on B-cells in newly diagnosed type 1 diabetic patients // 15th International Diabetes Congress. 1994, Kobe (Poster).

161. Dedov I., Smirnova O., Zlobina E., Brykova S., Dubinkin J., Gudima G., Prikhozhan A., Tchugunova L. Antibodies to B-cell p64 antigen in newly diagnosed diabetic patients // Diabetes Research and Clin. Practice.- 1991.- Vol.14, Suppl.l.-SlO.

162. Desfaits AC, Serri O, Renier G. Нормализация ПОЛ, адгезии моноцитов и продукции фактора некроза — а у больных ИНСД после лечения гликлазидом. Клин.фарм., 1999, №2, с.82-87.

163. Di Loreto V, Moreno HS, Puche RC, Locatto ME. Severe hyperglycemia: a determinant factor for hypofiltration in alloxan diabetic. Acta Diabetol., 2004, Jun, 41 (2):56-62.

164. Epstein M. Diabetes and hypertension: the bad companions. J Hypertens. 1997; 15 (suppl. 12): 55-62.

165. Flyvbjerg A. Inhibition and reversibility of renal changes: lessonsfrom diabetic kidney disease. Acta Paediatr Suppl. 2006 Apr;95(451):83-92. Comment in: Acta Paediatr Suppl. 2006 Apr;95(451):75-6.

166. Furrukh S, Malik M.D., Cart J et all Renin-angiotensin system: genes to beside.// Am.Heart J.-1997, vol.134, N3, p!514-527.

167. GorelysHeva VA, Romanovskaya DA, Smirnova OM. The activity of lipid peroxidation,and antiperoxide protection enzymes in newly diagnosed type 1 diabetic patients // 9 International Congress of Endocrinology.- 1992.- Nice.- P. 385 (Poster).

168. Ischiropolos H, Ihi L, Beckman J.S. Peroxynitrite Formation from Macrophage-Derived Nitric Oxide.// Arch.Biochem., 1992, vol.298, p.446-451.

169. Jokl R. et al. Diabetes Care 1995; 18: 1150-5

170. Jorgensen RL, Mechanisms of the Na,K-ATP-ase protein structureand conformation of the pure Na,K-ATP-ase. 11 Biochim.Biophys. Acta.-1982.-vol.694.-p.27-68.

171. Kawamori R, Imano E, Watarai T. et al. Diabetes Res Clin Pract 1994 Jun; 24 (2): 89-95.

172. Lerco MM; Macedo CS, Silva PJ, Pinheiro D de O, Spadella CT. The number of podocyte and, slit diaphragm is decreased in experimental diabetic nephropathy. Acta cir Bras, 2006, Mar.Apr, 21 (2): 87-91.

173. Levin and1 O'Neal's. The diabetic foot. 6th edition/ed. Bowker JH, PfeiferMA, 2001.

174. Mensah-Brown EP, Obineche EN, Galadari S, Chandranath E, Shahin A, Ahmed I, Patel SM, Adem A. Streptozotocin-induced diabetic nephropathy in rats: the role of inflammatory cytokines. Cytokines, 2005, Ang, 7, 31. (3): 180-190.

175. Mogensen CE. Prevention and Treatment of Diabetic Late Complications. Berlin, 1989, p.41-73.

176. Nakanishi K, Onuma S, Higa M, Nagai Y, Inokuchi T. The intrarenal blood flow distribution and role of nitric oxide in diabetic rats. Metabolism. 2005 Jun;54(6):788-92.

177. Nascimento Gomes G, Barbosa FT, Radaeli RF, Cavanal MF, Mello Aires M, Zaladek Gil F. Effect of D-alpha-tocopherol on tubular nephron acidification by rats with- induced diabetes mellitus. Braz J Med Biol Res. 2005 Jul;38(7):1043-51. Epub 2005 Jul 4

178. O.Donnell MP, Kasiske BL, Keane WF. Glomerular hemodinamic and structural alterations in experimental diabetes mellitus. Faseb J., May: 2(8), 1988,2339-2347.

179. Opatrny KJr, Zemanova P, Mares J et al. Fibrinolysis defect in long-term hemodialysis patients with type 2 diabetes mellitus and its relation to metabolic disorders. Am J Nephrol 2002; 22 (5-6): 429-36.

180. Osterman H et al. Factors of the hemostasis system in diabetic patients //Haemost.- 1986.- vol.16.- p.368-416.

181. Palm. F, Carlsson PO, Fasching A, Hansell P, Liss P. Diabetes-induced decrease in- renal oxygen tension: effects of an altered metabolism. Adv Exp Med Biol. 2006;578:161-6.

182. Park CW, Kim HW, Ко SH, Chung HW, Lim SW, Yang CW, Chang YS, Sugawara A, Guan Y, Breyer MD. Accelerated' diabetic nephropathy in mice lacking the peroxisome proliferator-activated receptor alpha. Diabetes. 2006 Apr;55(4):885-93.

183. Petrone JR, Hackney JF, Dixon GF, Hokin LE. Molecular propertiesof purified Na,K-ATP-ase and their subunits from the rectal gland of squalus acanthi's and the electric organ of Electroforus electricus. // J.Biol.chem.-19*75.-vol.250.-p.4184-4187.

184. Saleh A, Wohaier and David V.Godin. Alteration in Free- radical Tissue-Defense Mechanisms in Streptozotocin-Induced Diabetes in Rat. Effect of Insulin treatment. Diabetes, vol.36, Sep.1987, p.1014-1018.

185. Sasser JM, Sullivan JC, Hobbs JL, Yamamoto T,. Pollock DM, Carmines PK, Pollock JS. Endothelin A receptor, blockade reduces diabetic renal injury via an anti-inflammatory mechanism. J Am Soc Nephrol. 2007 Jan; 18(1): 143-54. Epub 2006 Dec 13.

186. Schena FP, Gesualdo L. Pathogenetic mechanisms of diabetic nephropathy. J Am Soc Nephrol. 2005 Mar; 16 Suppl l:S30-3.

187. Schratzberger P, Walter DH, Ritting K, Bahlmann FH, Pola R, Curry C, Silver M, Kraini JG, Weinberg DH, Ropper AH, Ysner YM. Reversal of experimental diabetes neuropathy by VEGE gene transfer. J.Clin.Invest, 2001, May. 107(a): 1215-1218.

188. Simkhovich BZ; Shutenko Zh.V, Meirena DV et al. 3-(2,2,2-Trimethylhydrazinium) propionate (THP) a novel y-butyrobetaine hydroxylase inhibitor with cardioprotective properties // Biochem.Pharm.- 1998.- vol.37, N 2.-P. 195-202.

189. Siu B, Saha j; Smoyer WE, Sullivan KA, Brosius FC 3rd. Reduction in podocyte density as a pathologic feature in early diabetic nephropathy in rodents: prevention by lipoic acid treatment. BMC Nephrol. 2006 Mar 1'5;7:6.

190. Shepheral A, Oberg P. Lazer-Doppler blood flowmetry. Kluw Ac Publish 1990; p.416.

191. Shulman G. Cellular mechanisms of insulin resistance in human. Am J Cardiol 1999; 84 (1 PtA): 3j-10j.

192. Sohn EJ, Kim CS, Kim YS, Jung DH, Jang DS, Lee YM, Kim JS. Effects of magnolol (5,5'-diallyl-2,2'-dihydroxybiphenyl) on diabetic nephropathy in type 2 diabetic Goto-Kakizaki rats. Life Sci. 2007 Jan 9;80(5):468-75. Epub 2006 Oct 6.

193. Sowers IR. Insulin and insulin-like growth in normal and pathological cardiovascular physiology. J Hypertension 1997; 29: 691-99.

194. Stammler F, Diehm C. Z Artztl Fortbild Jena 1995; 89 (5): 459-66.

195. TagarR, Okabe E. Hydroxyl radical participation in the in vitro effects of gramnegative endotoxin on cardiac sarcolemmal Na,K-ATP-ase activity. // Jpn.J.Pharmacol.-1991.-vol.55.-p.339-349.

196. Verma S, Anderson T. Fundamentals of endothelial function for the clinical cardiologist Circulation 2002; 105: 546-9.

197. Vicaut E. Hypertension and the microcirculation: a brief overniew of experimental studies. J Hypertens 1991; 10 (Suppl. 5): S59-S68.

198. Vinic Al, Park TS, Stansberry KB, Pittenger GL. Diabetic neuropathies. Diabetologia. 2000; 43 (8): 957-73.240: Walker GD, Vilerti GC // Textbook of Diabetes / Eds.C.E.Modensen, E.Stande, 1991., vol.3, p.263-281.

199. Watanabe K, Sekiya M, Tsuruoka T et al. Relationship between, insulin resistance and cardiac sympathetic nervous function in essential hypertension. J Hypertension 1999; 17: 1161-8.

200. Winocour P.D. platelets abnormality in diabetes mellitus // Diabetes — 1992.- vol.41 (Suppl.2).- p.26-31.

201. X Special' Topics in Clinical Endocrinology. P.48. Dermatologic Manifestations of Endocrine Disorders. Diabetes mellitus, 1998, 4.- p.631-632.

202. Xu Y, Osborne BW, Stanton RC. Diabetes causes inhibition of glucose-6-phosphate dehydrogenase via activation of PKA, which contributes, to, oxidative stress in rat kidney cortex. Am J Physiol Renal Physiol. 2005 Nov;289(5):F 1040-7.

203. Yin X, Zhang Y, Yu J, Zhang P, Shen J, Qiu J, Wu H, Zhu X. The antioxidative effects of astragalus saponin I protect against development of early diabetic nephropathy. J Pharmacol Sci. 2006 Jun; 101 (2): 166-73.

204. Yoshida M, Kimura H, Kyuki K, Ito M. Combined effect of probucol and insulin on renal damage in diabetic rats fed a high cholesterol diet. Eur J Pharmacol. 2006 Oct 24;548(l-3): 174-80. Epub 2006 Aug 22.

205. Yoshida M, Kimura H, Kyuki K, Ito M. Effect of combined vitamin E and insulin administration on renal damage* in diabetic rats fed a high cholesterol diet. Biol Pharm Bull. 2005 Nov;28(l l):2080-6.

206. Zatz R, Brenner B.M. Pathogenesis of diabetic microangiopathy: thehemodynamic view // Am J.Med.- 1986.- vol.80.- p.443-453.

207. Zent R, Yan X, Su Y, Hudson BG, Borza DB, Moeckel GW, Qi Z, Sado Y, Breyer MD, Voziyan P, Pozzi A. Glomerular injury is exacerbated in diabetic integrin alphal-null mice. Kidney Int. 2006 Aug;70(3):460-70. Epub 2006 Jun 14.

208. Zhu B, Shen H, Zhou J, Lin F, Hu Y. Effects of simvastatin on oxidative stress in streptozotocin-induced diabetic rats: a role for glomeruli protection. Nephron Exp Nephrol. 2005;101(l):el-8.