Особенности физико-химических, кинетических и регуляторных свойств изоформ малатдегидрогеназы из печени крыс при аллоксановом диабете тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.04, кандидат биологических наук Фарис Сатар Абуд

• Фарис Сатар Абуд
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Фарис Сатар Абуд

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Особенности биохимических нарушений при аллоксановом диабете.

1.1.1. Понятие об аллоксановом диабете.

1.1.2. Ультраструктурные изменения клеток животных при диабете и голодании

1.1.2.1. Гликоген как основной энергетический субстрат клеток при стрессовых условиях.

1.1.2.2. Функционирование глиоксилатного цикла в тканях животных и человека.

1.1.2.3. Процессы гликолиза и глюконеогенеза в тканях высших животных.

1.2. Роль малатдегидрогеназы в регуляции метаболических процессов.

1.2.1. Общая характеристика малатдегидрогеназной активности.

1.2.2. Участие малатдегидрогеназы в метаболических процессах.

1.2.3. Молекулярная масса и субъединичное строение.

1.2.4. Каталитические свойства малатдегидрогеназы.

1.2.4.1. Общая характеристика каталитического действия.

1.2.4.2. Кинетические параметры.

1.2.5. Влияние концентрации ионов водорода на активность малатдегидрогеназы.

1.2.6. Влияние температуры на активность малатдегидрогеназы.

1.2.7. Влияние интермедиатов и ионов на активность малатдегидрогеназы.

1.2.8. Изоферментный состав малатдегидрогеназы.

1.3. Механизмы адаптации животных к диабету.

1.3.1. Ультраструктурные изменения клеток животных при диабете и голодании.

1.3.2. Гормональная регуляция энергетического метаболизма у высших животных при пищевой депривации.

1.3.3. Биохимические сведения о конверсии жирных кислот в углеводы в клетках высших животных.

ГЛАВА 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.1. Объект и методы исследования

2.1.1. Объект исследования

2.1.2. Методы исследования.

2.1.2.1. Контроль за индукцией диабета.

2.1.2.2. Получение материала для исследования.

2.1.2.3. Определение активности ферментов.

2.1.2.4. Определение количества метаболитов.

2.1.2.5. Определение количества белка.

2.1.2.6. Методы хроматографического разделения изоформ малатдегидрогеназы.

2.1.2.7. Электрофоретические исследования.

2.1.2.7.1. Определение гомогенности ферментов.

2.1.2.7.2. Специфическое проявление МДГ.

2.1.2.7.3. Определение молекулярной массы субъединиц фермента методом Ds-Na ПААГ-электрофореза.

2.1.2.8. Определение молекулярной массы нативного фермента.

2.1.2.9. Исследование кинетических характеристик и регуляторной активности изоформ фермента.

2.2.3. Статистическая обработка данных.

2.3. ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

2.3.1. Доказательство индукции аллоксанового диабета.

2.3.2. Изменение активности некоторых метаболических путей в печени крыс.

2.3.3. Динамика содержания углеводов в тканях печени крыс с аллоксановым диабетом.

2.3.4. Доказательство наличия трёх изоформ малатдегидрогеназы в печени крыс с аллоксановым диабетом.

2.3.5. Очистка изоформ малатдегидрогеназы из печени крыс с аллоксановым диабетом.

2.3.6. Электрофоретические исследования.

2.3.6.1. Определение гомогенности фермента.

2.3.6.2. Определение молекулярной массы субъединиц ферментов методом DS-Na ПААГ-электрофореза.

2.3.7. Определение молекулярной массы малатдегидрогеназы.

2.3.8. Кинетические и регуляторные характеристики изоформ малатдегидрогеназы.

2.3.8.1. Отношение изоформ малатдегидрогеназы к концентрации субстрата.

2.3.8.2. Определение константы Михаэлиса.

2.3.9. Влияние концентрации ионов водорода.

2.3.10. Влияние концентрации ионов магния.

2.4. Влияние температуры на активность МДГ, выделенной из различных органоидов гепатоцитов крыс с аллоксановым диабетом.

2.4.1. Термостабильность изоформ МДГ из гепатоцитов крыс.

2.4.2. Температурный оптимум изоформ МДГ из гепатоцитов крыс.

2.5. Строение и механизм действия активного центра малатдегидрогеназы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Особенности физико-химических, кинетических и регуляторных свойств изоформ малатдегидрогеназы из печени крыс при аллоксановом диабете»

Актуальность проблемы. Диабет - хроническое заболевание, приводящее к нарушениям углеводного, белкового и жирового обменов в результате недостатка гормона инсулина.

Известно, что основным энергетическим субстратом в клетках и тканях организма выступают углеводы. Постоянное поступление глюкозы в качестве источника энергии особенно необходимо для нервной ткани и эритроцитов. При экспериментальном диабете ткани испытывают недостаток в глюкозе. В качестве механизма адаптации к данному процессу выступает глюконеогенез. Он имеет особенно важное значение в печени, которая является главным метаболически активным органом, участвующим в поддержании гомеостаза глюкозы. Соотношение между процессами катаболизма и анаболизма глюкозы в клетках печени находится под контролем целого ряда факторов регуляции, включая концентрацию метаболитов, нуклеотидов, а также воздействие гормонов. В нормальных условиях глюконеогенетические трансформации в печени млекопитающих протекают с относительно низкой скоростью. Интенсификация данного процесса наблюдается при дефиците углеводов, в частности при диабете [19,20].

Кроме того, при адаптации клеточного метаболизма к изменениям условий среды организм использует стратегию регуляции активности ферментного аппарата клетки. Важная роль в осуществлении адаптивных реакций организма принадлежит малатдегидрогеназной системе. Малатдегидрогеназа (К.Ф. 1.1.1.37), являясь полифункциональным ферментным комплексом, обеспечивает протекание конструктивного и энергетического обменов. В последнее время малатдегидрогеназа (МДГ) является объектом значительного количества исследований, что обусловлено ее полифункциональностью. Малатдегидрогеназный комплекс обеспечивает функционирование важнейших метаболических процессов, обеспечивающих нормальное функционирование клетки. Особенностью малатдегидрогеназы является участие в глюконеогенезе при мобилизации запасных жиров, то есть данный фермент относится к биокатализаторам глиоксилатного цикла. Наличие в клетке различных процессов, связанных с функционированием одного фермента малатдегидрогеназы требует сложной многоуровневой регуляции его активности. К механизмам такой регуляции причисляют пространственно разделенные изоформы, имеющие различные кинетические характеристики и структуру молекул данного фермента. По мнению некоторых исследователей, МДГ может быть представлена в виде димерной или тетрамерной формы, которые участвуют в анаболическом и катаболическом метаболизме. По данным современных исследователей димерная изоформа имеет митохондриальную локализацию и участвует в энергетическом обмене (ЦТК), а тетрамерная МДГ, локализованная в цитоплазме или этиопластах, функционирует в анаболических процессах клетки.

В связи с этим большой интерес представляет изучение действия экспериментального диабета на структурно-функциональные трансформации малатдегидрогеназы в гепатоцитах крыс. Кроме того, мало известно о их роли в адаптивных реакциях, обеспечивающей переключение метаболизма на утилизацию жирных кислот и их превращение в водорастворимые углеводы.

Таким образом, целесообразно изучить структуру адаптивного ответа клеточной энергетики печени, оценить особенности различных метаболических путей крыс при аллоксановом диабете, а также рассмотреть возможность участия малатдегидрогеназной системы в адаптивной реакции организма лабораторных крыс к экспериментальному диабету.

Цель и задачи исследования. Целью данной работы явилось изучение особенностей глюконеогенетических трансформаций в печени крыс с индуцированным аллоксановым диабетом; получение гомогенных препаратов изоформ малатдегидрогеназы из печени крыс с индуцированным аллоксановым диабетом и сравнение их физико-химических, каталитических и регуляторных свойств. Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1) изучить концентрацию интермедиатов основных метаболических процессов в печени крыс при экспериментальном диабете;

2) определить динамику ключевых ферментов основных метаболических путей в печени крыс при индукции аллоксаном экспериментального диабета;

3) установить возможность индукции малатдегидрогеназной активности в гепатоцитах крыс в условиях экспериментального диабета и определить наличие множественных молекулярных форм изучаемого энзима;

4) получить электрофоретически гомогенные ферментные препараты изоформ МДГ из органоидов гепатоцитов крыс;

5) исследовать физико-химические, кинетические и регуляторные свойства цитоплазматической, митохондриальной и пероксисомальной форм МДГ из гепатоцитов крыс в условиях экспериментального диабета;

6) исследовать особенности регуляции изоформ малатдегидрогеназы интермедиатами основных метаболических путей;

7) установить действие различных ионов и температуры на активность исследуемых форм малатдегидрогеназы из гепатоцитов крыс.

Научная новизна. Научные положения настоящей работы расширяют и углубляют современные представления о способах трансформации метаболических потоков в животной клетке с помощью изоферментов малатдегидрогеназной системы в условиях экспериментального диабета. Показано появление дополнительной пероксисомальной изоформы фермента, обуславливающей функционирование глиоксилатного цикла, как этапа глюконеогенеза. Выделение изоформ малатдегидрогеназы из гепатоцитов крыс в условиях экспериментального диабета позволило получить новые данные о физико-химических характеристиках, особенностях структурной организации и регуляции метаболитами. Сравнительный анализ указывает на значительное сходство по большинству характеристик (Rf, четвертичной структуре, рН-оптимуму, сродству к субстрату, активации ионами и др.) пероксисомальной и цитоплазматической форм изучаемого фермента. Структурно-функциональная трансформация малатдегидрогеназной системы может иметь важное значение в реализации механизмов адаптивных реакций гепатоцитов крыс в условиях экспериментального диабета.

Практическая значимость. Научные положения диссертационной работы позволяют расширить и углубить наши представления о роли разных изоформ малатдегидрогеназы в животной клетке в механизмах реализации адаптивных реакций к повышенным концентрациям глюкозы. Высокоочищенные изоформы МДГ могут быть использованы для количественного определения малата в клеточном соке клеток. Получение препаратов множественных молекулярных форм исследуемого фермента открывает перспективы его применения в научно-исследовательских изысканиях, связанных с исследованием ферментативной кинетики и моделированием сопряженных ферментных систем при патологиях, а также для биохимических анализов в лабораторной практике.

Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе на биолого-почвенном факультете Воронежского государственного университета при чтении лекций по биохимии, спецкурсах по энзимологии, кроме того, они используются при проведении практикумов и выполнении курсовых и дипломных работ.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы докладывались и обсуждались на международных, региональных и университетских конференциях и были представлены на 12 международной Пущинской конференции молодых ученых «Биология — наука XXI века», межрегиональных конференциях, посвященных памяти А.А. Землянухина «Организация и регуляция физиолого-биохимических процессов» (Воронеж, 2008, 2009, 2010), ежегодных научных секциях отчетной конференции преподавателей и сотрудников Воронежского государственного университета.

Публикации. Основные результаты диссертационной работы изложены в 5 публикациях.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 122 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части и обсуждения результатов, заключения, выводов, списка литературы (148 источников). Иллюстрационный материал включает 21 рисунок, 7 таблиц.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Фарис Сатар Абуд

ВЫВОДЫ

1. Показано, что аллоксан является индуктором диабета, повышая концентрацию глюкозы в крови. Введение 150 мг аллоксана на 1 кг массы животного приводит к увеличению концентрации глюкозы в крови в 2-4 раза. Повышенная концентрация глюкозы у экспериментальных животных сохраняется не менее двух месяцев.

2. Установлено, что при экспериментальном диабете наблюдается активация большинства ферментов цикла трикарбоновых кислот в печени крыс, изменение содержания органических кислот, уменьшение активности ключевых ферментов гликолиза и пентозофосфатного пути, а также индукция маркерных ферментов глиоксилатного цикла.

3. Активность малатдегидроненазы, принимающая участие как в глиоксилатном цикле, так и в цикле трикарбоновых кислот, увеличивалась в 2,5 раза в гепатоцитах крыс в условиях экспериментального диабета. При этом повышение ферментативной активности сопровождалось появлением новой изоформы фермента с Rf 0,15.

4. С помощью четырёхстадийной очистки получены в электрофоретически гомогенном состоянии изоформы малатдегидрогеназы из гепатоцитов крыс в условиях аллоксанового диабета. Удельная активность для цитозольной МДГ составляла 7,78 Е/мг белка (степень очистки 70,7 раза), для митохондриальной МДГ - 4,04 Е/мг белка (36 раз) и для пероксисомальной МДГ - 3,41 Е/мг белка (31 раз).

5. Методами гель-хроматографии на Toyopearl HW-65 и Ds-Na ПААГ-электрофорезом исследовано субъединичное строение изоформ малатдегидрогеназы из гепатоцитов крыс. Установлено, что исследуемый фермент имеет димерное (митохондриальная форма) или тетрамерное (цитозольная или пероксисомальная форма) строение. Значения молекулярной массы субъединицы, определенные методом денатурирующего электрофореза в присутствии додецилсульфата натрия, колеблются от 40 до 44 кДа.

6. Анализ кинетических характеристик и физико-химических свойств индуцируемой формы МДГ3 выявил её значительное сходство с МДГ2, имеющей цитоплазматическую локализацию. Отличительной особенностью данной изоформы является ее меньшее сродство к кофакторам NADH и NAD+. Установлено также, что все обнаруженные изоформы МДГ в гепатоцитах крыс регулируют свою активность с помощью аллостерического механизма.

7. Выявлены определенные закономерности влияния концентрации ионов водорода на скорость ферментативных реакций, катализируемых различными изоформами малатдегидрогеназы. Значение рН-оптимума для реакции окисления малата лежит в более щелочной среде (МДГ1 - 9,8; МДГ2 - 9,9 и МДГ3 - 9) по сравнению с реакцией восстановления оксалоацетата (МДГ, - 9, МДГ2 - 8,7 и МДГз - 8,5).

8. Установлено, что двухвалентные ионы магния оказывают регуляторное влияние на скорость ферментативной реакции. При этом, выявлено активирующее действие ионов Mg2+ в используемых концентрациях на все изоформы МДГ.

9. Определены значения температурных оптимумов и термостабильности изучаемых изоформ малатдегидрогеназ. Индуцированная в условиях аллоксанового диабета пероксисомальная форма малатдегидрогеназы обладает более термостабильными свойствами.

10. В активном центре пероксисомальной и цитозольной форм малатдегидрогеназы обнаружены остатки следующих аминокислот: лизин, цистеин и гистидин. Предполагается механизм превращения субстрата в активном центре при взаимодействии молекул фермента и кофермента.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В стрессовых условиях перед организмом возникают новые метаболические потребности, для удовлетворения которых необходимы количественные и качественные перестройки ферментных систем клетки. Адаптивные изменения включают трансформацию регуляторных механизмов метаболических путей, что ведет либо к изменению изоферментного спектра, либо к новым каталитическим свойствам существующих ферментов, при этом активируются пути, которые в норме функционируют незначительно или вовсе отсутствуют. Поэтому главной задачей метаболизма при диабете остается поддержание достаточного уровня глюкозы в тканях организма и, в первую очередь, в мозге, что достигается интенсификацией метаболизма, гибкостью обмена веществ, строгостью регуляции реакций, катализируемых исследуемыми ферментами [21, 22, 33].

Кроме того, немаловажное значение в адаптивной реакции организма при аллоксановом диабете играет малатдегидрогеназа [125]. Существенный рост активности фермента у животных при индукции аллоксанового диабета, вероятно, связан с процессами утилизации запасных питательных веществ. После мобилизации запасного гликогена наиболее важным ресурсом клетки остаются запасные жиры. Р-окисление жирных кислот интенсивно протекает как в митохондриях, так и в пероксисомах гепатоцитов [118, 129]. Данный факт позволяет предположить, что максимальная индукция малатдегидрогеназной активности была связана с появлением новой изоформы МДГ, выделенной ионообменной хроматографией на ДЭАЭ-Toyopearl, которая имеет, по-видимому, пероксисомальную локализацию. Получение в электрофорётически гомогенном состоянии пероксисомальной, цитозольной и митохондриальной изоформ МДГ открыло перспективу исследования их физико-химических и регуляторных характеристик. Анализ полученных данных в этой работе и опубликованных ранее в научной литературе позволяет считать, что димерная изоформа МДГ из митохондрий обеспечивает протекание реакций цикла Кребса, а тетрамерная цитозольная и индуцированная пероксисомальная малатдегидрогеназа катализируют реакции глюконеогенеза и глиоксилатного цикла соответственно. Обсуждение свойств пероксисомальной изоформы МДГ и цитозольной формы исследуемого фермента показывает их значительное сходство (рН оптимум, Км по субстрату и по ферментам, температурный оптимум и др.). Можно предположить, что именно цитозольная изоформа МДГ претерпевает посттрансляционные трансформации и доставляется в пероксисомы гепатоцитов печени крыс, где принимает участие в осуществлении реакций глиоксилатного цикла. Подобный механизм описан для некоторых пероксисомальных белков [32, 39]. Полученные результаты позволили разработать гипотетическую схему участия изоформ малатдегидрогеназы в трансформации метаболических процессов в гепатоцитах крыс при аллоксановом диабете (рис. 21).

Увеличение активности и появление новой изоформы МДГ в печени крыс при диабете подтверждают возможность участия малатдегидрогеназной системы в адаптивной реакции организма при стрессовых условиях и ее полиморфизм. Роль малатдегидрогеназы в адаптации к изменяющимся условиям среды сводится к интенсификации глюконеогенетических и дыхательных процессов, мобилизации запасного пула малата и ускорению внутриклеточного транспорта углеродных соединений.

Рис. 21. Гипотетическая схема участия изоформ малатдегидрогеназы в трансформации метаболических процессов в гепатоцитах крыс в условиях аллоксанового диабета.

Условные обозначения: ЖК - жирные кислоты, двойная стрелка указывает на индукцию пероксисомальной МДГ. МДГ1 -цитоплазматическая форма малатдегидрогеназы, МДГ2 - митохондриальная форма малатдегидрогеназы, МДГ3 — пероксисомальная форма малатдегидрогеназы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Фарис Сатар Абуд, 2010 год

1. Биохимия человека : в 2-х т. / Р. Мари и др. ; перевод с англ. В.В. Борисова, Е.В. Дайниченко ; под ред. Л.М. Гинодмана. — М. : Мир, 1993. Т. 1.-384 с.

2. Блюменфельд Л.А. Единичные циклы прямой ферментативной реакции на примере малатдегидрогеназы / Л.А. Блюменфельд, П.Г. Плешанов // Биофизика. 1986. - Т.30, № 5. - С. 760-763.

3. Быковская К.Н. Особенности синтеза гликогена в кардиомиоцитах при диабете / К.Н. Быковская, Д.А. Мешков // Архив патологии. 1981. - № 1.-С. 36-40.

4. Варфоломеев С.Д. Биокинетика / С.Д. Варфоломеев, К.Г. Гуревич. М. : ФАИР-ПРЕСС, 1999. - 720 с.

5. Волвенкин С.В. Субклеточная локализация и свойства ферментов глиоксилатного цикла в печени крыс с аллоксановым диабетом / С.В. Волвенкин, В.Н. Попов, А.Т. Епринцев // Биохимия. 1999. - Т.64, №. 9. - С. 1185-1191.

6. Гааль Э. Электрофорез в разделении биологических макромолекул / Э. Гааль, Г. Медьеши, Л. Верецкеи. М. : Мир, 1982. - 446с.

7. Давранов К. Влияние некоторых органических кислот на активность малатдегидрогеназы семян хлопчатника / К. Давранов, М.А. Кученкова, П.Х. Юлдашев // Химия природных соединений. — 1972. — № 2. — С. 75-79.

8. Детерман Г. Гель-хроматография / Г. Детерман. М. : Мир, 1970. -173 с.

9. Детлаф Т.А. Методы биологии развития / Т.А. Детлаф. М.: Наука, 1974.-619 с.

10. Диксон М. Ферменты / М. Диксон, Э. Уэбб. М. : Мир, 1982. - Т.З. С. 809-1118.

11. Догаева JI.H. Ультраструктурные особенности миокарда собак при сахарном диабете / Л.Н. Догаева // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1960. - №4. - С.53-55.

12. Дюв К. Де. Путешествие в мир живой клетки / К.Де Дюв. М.: Мир, 1987.-225 с.

13. Епринцев А.Т. Ферментативная регуляция метаболизма ди- и трикарбоновых кислот в растениях / А.Т. Епринцев, В.Н. Попов. Воронеж: ВГУ, 1999.- 192 с.

14. Епринцев А.Т. Индукция аконитатгидратазы в гепатоцитах голодающих крыс / А.Т. Епринцев, Е.В. Семёнова, В.Н. Попов // Биохимия. 2002. - Т.67, № 7. - С. 956-966.

15. Епринцев А.Т. Очистка и физико-химические свойства малатдегидрогеназы из бактерий p. Beggiatoa I А.Т. Епринцев и др. // Биохимия. 2003. - Т.68, вып.2. - С. 207-211.

16. Епринцев А.Т. Роль изоформ малатдегидрогеназы в регуляции анаболических и катаболических процессов у Beggiatoa leptomitiformis / А.Т. Епринцев и др. // Микробиология. 2004. - Т.73, № 4. - С.437-442.

17. Епринцев А.Т Малатдегидрогеназа термофильных бактерий Vulcanithermns medioatlant / А.Т. Епринцев, М.И. Фалалеева, Н.В. Парфёнова // Биохимия. 2005. - Т. 70, № 9. - С. 1345-1349.

18. Епринцев А.Т. Получение и свойства малатдегидрогеназы из мезо- и термофильных бактерий / А.Т. Епринцев и др. // Прикладная биохимия и микробиология. 2006. - Т. 42, № 3. - С. 274-278.

19. Епринцев А.Т. Экспрессия и регуляция ферментов глиоксилатного цикла / А.Т. Епринцев, В.Н. Попов, М.Ю. Шевченко. -Воронеж: Центрально-Черноземное книжное изд-во, 2005. — 224 с.

20. Епринцев А.Т. Физико-химические характеристики малатдегидрогеназы из бактерий Rhodopseudomonas palustris штамм fBpt / А.Т. Епринцев и др. // Биохимия. 2006. - Т.71, вып.6. - С. 856-860.

21. Епринцев А.Т. Глиоксилатный цикл: универсальный механизм адаптации?/ А.Т. Епринцев, В.Н. Попов, М.Ю. Шевченко // Москва. ИКЦ «Академкнига». 2007. - 228с.

22. Епринцев А.Т. Распространение глиоксилатного цикла у организмов различных таксономических групп / А.Т. Епринцев, М.Ю. Шевченко, В.Н. Попов // Успехи современной биологии. 2008. - Т. 128, № З.-С. 271.

23. Епринцев А.Т. Регуляция потоков углерода в системе: цикл трикарбоновых кислот глиоксилатный шунт у Rhodopseudomonas palustris в различных условиях роста/ А.Т. Епринцев и др. // Микробиология. -2008. - Т.77, №2.-С. 158-163.

24. Епринцев А.Т. Углеводный метаболизм в печени крыс при пищевой депривации и экспериментальном диабете/ А.Т. Епринцев, М.Ю. Шевченко, В.Н. Попов // Известия РАН, серия биологическая. 2008. -№ 1.-С. 115-118.

25. Епринцев А.Т. Структурно-функциональная трансформация малатдегидрогеназной системы бактерий Sphaerotilus sp. Штамм Д-507 в зависимости от типа питания / А.Т. Епринцев и др. //Известия РАН, сер. биологическая. 2009. - № 3. - С. 269-275.

26. Епринцев А.Т. Особенности структурной организации и экспрессионной регуляции изоформ малатдегидрогеназы из Rhodobacter sphaeroides Штамма 2г / А.Т. Епринцев и др. // Биохимия. 2009. - Т.74, вып. 7. - С. 977-984.

27. Ермолаева Л.П. Регуляция глюконеогенеза в онтогенезе / Л.П. Ермолаева. М. : Наука, 1987. - 140 с.

28. Глиоксилатный цикл растений / А.А. Землянухин и др.. -Воронеж: Изд-во Воронеж, ун-та, 1986. 148 с.

29. Землянухин А.А. Субклеточная локализация изоформ аконитатгидратазы в высших растениях/ А.А. Землянухин и др. // Физиология растений, 1984. Т. 31, вып. 2. - С. 337-343.

30. Землянухин А.А. Глиоксилатный цикл растений / А.А. Землянухин и др. Воронеж: ВГУ, 1986. - 148 с.

31. Иванищев В.В. Ферменты метаболизма малата: характеристика, регуляция активности и биологическая роль / В.В. Иванищев, Б.И. Курганов // Биохимия. 1992. - Т. 57, вып. 5. - С. 653-661.

32. Игамбердиев А.У. Микротельца в метаболизме растений/ А.У. Игамбердиев//Воронеж: Изд-во ВГУ, 1990. 148 с.

33. Игамбердиев А.У. Логика организации живых систем / А.У. Игамбердиев // Воронеж: ВГУ, 1995. 152 с.

34. Кац В.А.Ультраструктура эмбриональной липосаркомы человека / В.А. Кац, Г.А. Лавникова, С.А. Синицкая // Архив патологии. 1984. - Т.46, №5.-С. 38-45.

35. Келети Т. Основы ферментативной кинетики. / Т.Келети. М.: Мир, 1990.-350 с.

36. Клячко О.С. Температура вызывает структурные и функциональные изменения лактатдегидрогеназы из скелетных мышц рыб / О.С.Клячко, Е.С.Полосухина, Н.Д.Озернюк // Биофизика. 1993. - Т.38, № 4. -С. 596-601.

37. Кондрашова М.Н. Формакологическая коррекция гипоксических состояний / М.Н. Кондрашова. М.: Мир, 1989. - 96 с.

38. Косматых Т.Н. Физико-химические и кинетические свойства изоформ малатдегидрогеназы из гепатоцитов голодающих крыс: автореф. дис. . канд. биол. наук / Т.Н. Косматых. Воронеж, 2002. - 24 с.

39. Курганов Б.И. Аллостерические ферменты / Б.И.Курганов. М.: Мир, 1987.-248 с.

40. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1990. -352 с.

41. Лебкова Н.П. Особенности липидного обмена в период голодания / Н.П. Лебкова, М.Ф. Бондаренко // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1980. - № 5. - С. 614-617.

42. Лебкова Н.П. Трансформация липидов в гликоген в клетках животных и человека / Н.П. Лебкова // Архив патологии. 1981. - № 2. - С. 72-77.

43. Лебкова Н.П. Современные представления о внутриклеточных механизмах обеспечения энергетического гомеостаза в норме и при патологии / Н.П. Лебкова // Вестник РАМН. 2000. - № 9. - С. 6-22.

44. Лебкова Н.П. Внутриклеточное превращение жирных кислот в гликоген у крыс с аллоксановым диабетом по данным электронной авторадиографии / Н.П. Лебкова, О.Е. Колесова, В.Д. Горбунова // Бюлл. Экспер. Биол. и медицины. 1984. - №12. - С. 734-736.

45. Лебкова Н.П. Субклеточная локализация карнитинацетилтрансферазы в клетках разных органов интактных и голодающих крыс/ Н.П. Лебкова // Бюлл. экспер. биол. и медицины. 1983.-№7.- С. 32-35.

46. Лебкова Н.П. Механизмы трансформации жирных кислот при пищевой депривации / Н.П. Лебкова, А.В. Смольянников // Архив патологии. -1983. Т.45, №7. - С. 41-47.

47. Мак-Мюррей У. Обмен веществ у человека / У. Мак-Мюррей. М. : Мир, 1981.-257 с.

48. Марри Р. Биохимия человека / Р. Марри, Д. Греннер, П. Мейес. М. : Мир, 1993.-Т.2.-418 с.

49. Мауэр Г. Диск-электрофорез / Г. Мауэр / Пер. с англ. М. : Мир, 1971.-222 с.

50. Ноздрачева А.Д. Общий курс физиологии человека и животных / А.Д. Ноздрачева. М. : Высш. шк., 1991. - Т. 1. - 512 с.

51. Остерман JI.A. Исследование биологических макромолекул / Л.А.Остерман. М. : Мир, 1983. - 297 с.

52. Панин Л.Е. Биохимические механизмы стресса / Л.Е. Панин. -Новосибирск, 1983. —213 с.

53. Панин Л.Е. Энергетические аспекты адаптации / Л.Е. Панин. М. : Мир, 1987. - 225с.

54. Панченко Л.Ф. Роль пероксисом в патологии клетки / Л.Ф. Панченко, A.M. Герасимов, В.Д. Антоненко. М. : Мир, 1981. - 312 с.

55. Пинейру де Корвалью М.А.А. Малатдегидрогеназа высших растений / М.А.А. Пинейру де Корвалью, А.А. Землянухин, А.Т. Епринцев Воронеж: Изд-во ВГУ, 1991.-216 с.

56. Попов В.Н., Игамбердиев А.У., Волвенкин С.В. Очистка и свойства изоцитратлиазы и малатсинтазы из печени голодающих крыс / В.Н. Попов, А.У. Игамбердиев, С.В. Волвенкин // Биохимия. 1996. - Т.61, Вып. 10. - С. 1898-1903.

57. Попов В.Н. Индукция ферментов глиоксилатного цикла в различных тканях голодающих крыс / В.Н. Попов и др. // Известия РАН, Серия биологическая 2000. - № 6. - С. 663-667.

58. Попов В.Н. Влияние ингибиторов электронного транспорта на образование активных форм кислорода при окислении сукцината митохондриями гороха / В.Н. Попов, Э.К. Рууге, А.А. Старков // Биохимия. 2003. Т. 68, № 7. - С. 910-916.

59. Попов В.Н. Сравнительный анализ ключевого фермента глиоксилатного цикла, изоцитралиазы, из организмов разных систематических групп / В.Н. Попов и др. // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 2005. - № 6. - С. 317-329.

60. Скоупс Р. Методы очистки белков / Р. Скоупс. М. : Мир, 1985. -358 с.

61. Скулачев В.П. Энергетика биологических мембран / В.П. Скулачев -М.: Наука, 1989.-564 с.

62. Скулачев В.П. Снижение внутриклеточной концентрации 02 как особая функция дыхательных систем клетки / В.П. Скулачев // Биохимия. -1994. Т. 59, вып. 12. - С. 1910-1912.

63. Степанова И.Ю. Зависимость структуры МДГ от типа метаболизма у пресноводных нитчатых серобактерий рода Beggiatoa / И.Ю. Степанова и др. // Микробиология. 2002. - Т.71, № 4. - С. 445-451.

64. Страйер JI. Биохимия: в 3-х т. / JI. Страйер. М. : Мир, 1985. - Т.2312с.

65. Струмилло С. Сравнение свойств изоферментов малатдегидрогеназы из сердца зайца и кролика / С. Струмило и др. // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 2006. - Т. 42, № 5. - С. 450-453.

66. Тыщенко В.П. Физиология насекомых / В.П. Тыщенко М.: МГУ, 1986.-283 с.68. 79. Хочачка П. Биохимическая адаптация. / П.Хочачка, Дж.Сомеро. -М. : Мир, 1988.-518 с.

67. Чернышев Г.А. Вероятность и статистика в биологии и химии / Г.А. Чернышев, В.Н. Стариков. Воронеж : Изд-во Воронеж, ун-та, 1998. - 270 с.

68. Aquino-Silva M.R. Isoform expression in the multiple soluble malate dehydrogenase of Hoplias malabaricus (Erythrinidae, Characiform.es} / M.R. Aquino-Silva, M.L.B. Schwantes, A.R. Schwantes // Braz. J. Biol. 2003. - V. 63, № l.-P. 7-15.

69. Atwal O.S. Glycogen accumulation in alveolar type II cells in 3-methylindole-induced pulmonary edema in goats / O.S. Atwal, T.M. Bray // Am. J. Pathol. 1981. - Vol. 105, №3.-P. 255-262.

70. Backman L. Enzime Enzime complexes between aspartate aminotransferase and Malate dehydrogenase from pig heart muscule / L. Backman, G. Johansson // FEBS Lett. - 1976. - Vol. 65, № 1. - p. 180-183.

71. Barrett E.J. Hepatic glucose metabolism and insulin resistance in NIDDM and obesity / E.L. Barrett, Z. Liu // Baillieres Clin. Endocrinol. Metab. 1993. -Vol.7, №4.-P. 875-901.

72. Barrett J. The glyoxylate cycle and the conversion of triglicerides to carbonhydrates in developing eggs of Ascaris lumbricoides / J.Barrett, C.W. Ward, D. Fairbairn // Сотр. Biochem. And Physiol. 1970. - Vol. 35, № 4. - P. 577585.

73. Beale E.G. 6,02 -dibutyryl cycle AMP and glucose regulate the amount of messenger RNA coding for hepatic phosphoenolpyruvate carboxykinase (GTF) / E.G. Beale, E.G. Hartley, J.L. Granner // J. Biol. Chem. 1982. - Vol. 257, № 4. - P. 2022-2028.

74. Beeckmans S. Specific association between the glyoxylic-acid-cycle enzymes isocitrate lyase and malate synthase / S. Beeckmans et. al.. // European Journal of Biochemistry. 1994. - V.224, № 1. - P. 197-201.

75. Benziman M. The activation of the NAD-Malic dehydrogenase from Acetobacter xylinum bi monovalent anions / M.Benziman, Y.Karnrely // European Journal Biochemistry. 1968. - Vol. 51, № 1. - P. 134-138.

76. Bjork A. Stabilisation of a tetrameric malate dehydrogenase by introduction of a disulfide bridge at the dimmer-dimer interface / A. Bjork et. al.. // J. Mol. Biol. 2003a. - V. 334, № 4. - P. 811-821.

77. Bjork A. Large improvement in the thermal stability of a tetrameric malate dehydrogenase by single point mutations at the dimer-dimer interface / A. Bjork et. al. // Mol. Biol. 2004. - V.341. - P. 1215-1226.

78. Burchell A. Identification and purification of a liver microsomal glucose6-phosphatase / A. Burchell, B. Burchell // Biochem. J. 1982. - Vol. 205, №3.-P. 567-573.

79. Caravelli A.H. Reduction of hexavalent chromium by Sphaerotilus natans a filamentous micro-organism present in activated sludges / A.H. Caravelli, L. Giannuzzi, N.E. Zaritsky // J Hazard Mater. 2008. - V.156, № 1-3. - P. 214-222.

80. Chan M. Functional characterization of an alternative lactate dehydrogenase-like. malate dehydrogenase in Plasmodium falciparum / M. Chan, Sim T.S. // Parasitol. Res. 2004. - V. 92, № 1. - P. 43-47.

81. Chang H.C. Metal ions stabilize a dimeric molten globule state between the open and closed forms of malic enzyme / H.C. Chang et.al. // Biophys J. -2007. V. 93, № 11. - P. 3977-3988.

82. Chen J. Amide hydrogen exchange shows that malate dehydrogenase is a folded monomer at pH 5 / J.Chen, D.L.Smith // Protein Sci. 2001. - Y.10, N 5. -P. 1079-1083.

83. Cioni M. Comparative biochemistry of glyoxylate cycle / M. Cioni, G. Pinzauti, P. Vanni // Сотр. Biochem. and Physiol. 1981. - Vol. 70, № 1. - P. 126.

84. Cold-active enzymes studied by comparative molecular dynamics simulation / V. Spiwok et.al. // О Mol Model. 2007. - V. 13, № 4. - P. 485497.

85. Courtois-Verniquet F. Lack of aconitase in glyoxysomes and peroxisomes / F. Courtois-Verniquet, R. Douce // Biochem. J. 1993. - № 294. - P. 103-107.

86. Cox B. Organelle and translocatable forms of glyoxysomal malate dehydrogenase. The effect of the N-terminal presequence / Cox B. et.al. // FEBS Journal. 2005. - V. 272, № 3. - P. 643-654.

87. Davis W.L. Cytochemical localization of malate synthase in amphibian fat body adipocytes: possible glyoxylate cycle in a vertebrate / W.L. Davis, R.G.

88. Jones, D.B. Goodman // J. Histochem. Cytochem. 1986. - Vol. 34, № 5. - P. 689-692.

89. Davis W.L. Glyoxylate cycle in the rat liver: effect of vitamin D3-treatment / W.L. Davis, J.L. Matthews, D.B. Goodman // FASEB J. 1989. -Vol. 3.-P. 1651-1655.

90. Davis W.L. Hibernation activates glyoxylate cycle and gluconeogenesis in black bear brown adipose tissue / W.L. Davis, D.B. Goodman, L.A. Crawford // Biochim Biophys Acta. 1990. - Vol.1051, № 3. - P. 276-278.

91. Davis W.L. Evidence for the glyoxylate cycle in human liver / W.L. Davis, D.B. Goodman // Source Anatomikal Record. 1992. - Vol. 234, № 4. -P. 461-468.

92. De Duve C. Peroxisomes (microbodies and related particles) / C. De Duve, P. Baudhuim // Physiol. Rev. 1966. - Vol.46, № 2. - P. 323-357.

93. Eprintzev A.T. Succinate dehydrogenase in Arabidopsis thaliana is regulated by light via phytochrome A / A.T. Eprintzev et. al.. // FEBS Letters. 2010. -C. 199-202.

94. Fukuchi S. Protein surface amino acid compositions distinctively differ between thermophilic and mesophilic bacteria / S. Fukuchi, K. Nishikawa // J. Mol. Biol. 2001. - V. 309, № 4. - P. 835-843.

95. Genda T. Purification and characterization of malate dehydrogenase from Corinebacterium glutamicum / T. Genda, T. Nakamatsu, H. Ozaki // J. of Bioscience and Bioengineering. 2003. - V. 95, № 6. - P. 562-566.

96. Gerhardt B. Microbodies. Peroxisomen pflanzlicher Zeilen. / B. Gerhardt // Cell Biology Monographs. Wien, 1978, vol. 5.

97. Glusker J.P. Aconitase / J.P. Glusker, S.S. Badour, S.R. Waygood // Enzymes. New York-London. 1971. -V. 5. - P. 413-439.

98. Goodman D.B. Glyoxylate cycle in toad urinary bladder: possible stimulation by aldosterone / D.B. Goodman, W.L. Dawis, R.G. Jones // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1980. - Vol. 77, № 3. - P. 1521-1525.

99. Holmes R.P. The absence of glyoxylate cycle enzymes in rodent and embrionic chick liver / R.P. Holmes // Biochim. Biophys. Acta. 1993. - Vol. 1158.- P. 47-51.

100. Iannetta P.P. Identification, cloning and expression analysis of strawberry (Fragaria xananassa) mitochondrial citrate synthase and mitochondrial malate dehydrogenase / P.P. Iannetta et. al. // Physiol. Plant. 2004. - V. 121, № l.-P. 15-26.

101. Iyer S.L. Regulation of glucose 6-phosphatase in hepatic microsomes by thyroid and corticosteroid hormones / S.L. Iyer, A.C. Liu, C.C. Widnell // Arch. Biochem. Biophys. 1983. - Vol .223, № l.-P. 173-184.

102. Iynedjian P.B. Effect of glucagon, dexamethasone and triiodthyromine on phosphoenolpyruvate carboxikinase (GTP) synthesis and m RNA level in rat liver cells / P.B. Iynedjian, A. Salavert // Europ. J. Biochem. 1984. - Vol. 145, № 3. - P. 489-497.

103. Jaenicke R. Stability and folding of ultrastable proteins: eye lens crystallins and enzymes from thermophiles / R. Jaenicke // FASEB J. -1996b. V. 10, № l.-P. 84-92.

104. Jane A.I. Characterizatin of alanine and malate dehydrogenases from a marine psychrophile strain PA-43 / A.I. Jane et.al. // Extermiphiles. 2001. - V. 5, №3. -P.199-211.

105. Jones J.D. The glyoxylate cycle: does it function in the dormant or active bear? / J.D. Jones, P. Burnett, P. Zollman // Сотр. Biochem. Physiol. B. -1999.-Vol. 124.-P. 177-179.

106. Jones C.T. Is there a gloxylate cycle in the liver of the fetal guinea pig? / C.T. Jones // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1980. - Vol. 95. - P. 849-856.

107. Kampfer P., Spring S. Genus Intertas Sedis XVI. Sphaerotilus Kiitzing 1833 // Bergie's Manual of Systematic Bacteriology. 2nd ed. // Eds: Brenner D.Y., Krieg N.R., Garrity G.M. New York: Springer. 2005. - V.2., Part C. - P. 750755.

108. Klinov D. High-resolution atomic force microscopy of duplex and triplex DNA moleculs / D. Klinov // Nanotechnology. 2007. - V. 18, № 22. - P. 225102.

109. Kondrashova M.N. Interaction of transamination and oxidation processes / M.N. Kondrashova // Biochemistry (Mosc) 1991, Vol.56. - P. 388405.

110. Komberg H.L. Synthesis of cell constituents from C2-units by a modigied tricarboxylic acid cycle / H.L. Kornberg, H.A. Krebs // Nature. 1957. -Vol.179.-P. 988-991.

111. Kumar S. Close-range electrostatic interactions in proteins / S. Kumar, R. Nussinov // Chembiochem. 2002. - V.3, № 7. - P. 604-617.

112. Labrou N.E. L-Malate dehydrogenase from Pseudomonas stutzeri: purification and characterization / N.E.Labrou, Y.D.Clonis // Arch. Biochem.Biophys. -1997. Vol. 337, № 1. - P. 103-114.

113. Laemmly U.K. Cleavage of structural proteins during assembly of the head of bacteriophage T4 / U.K. Laemmly // Nature. 1970. - Vol. 77, № 4. - P. 680-683.

114. Lang-Unnasch N. Purification and properties of Plasmodium falciparum malate dehydrogenase / N. Lang-Unnasch // Mol. Biochem. Parasitol. 1992. - V. 50, № l.-P. 17-25.

115. Lazarow P.B. Biogenesis of peroxisomes / P.B. Lazarow, J. Fujiki // Ann. Rev. Cell. Biol. 1985. - Vol. 1. - P. 489-530.

116. Liu F. Bifunctional glyoxylate cycle protein of Caenorhabditis elegans: a developmentally regulated protein of intestine and muscle / F. Liu, J.D. Thatcher, J.M. Barral //Dev. Biol. 1995. - Vol.169. - P. 399-414.

117. Liu F. Induction of glyoxylate cycle expression in Caenorhabditis elegans: a fasting response throughout larval development / F. Liu, J.D. Thatcher, and H.F. Epstein // Biochemistry. 1997. - Vol. 36. - P. 255-260.

118. Lowry O.H. Protein meacuament with the folin pihend reagent / O.H. Lowry et. al. // J. Biologi. 1951. - Vol.193. - P. 265-275.

119. Madern D. Molecular evolution within the L-malate and L-lactate dehydrogenase super-family / D. Madern // Journal of Molecular Evolution.2002. V.54, №6. - P. 0825-0840.

120. Madern D. Molecular adaptation: the malate dehydrogenase from the extreme halophilic bacterium Salinibacter rubber behaves like a non-halophilic protein / D. Madern, G. Zaccai // Biochimie. 2004. - V. 86, № 4-5. - P. 295-303.

121. Malick A.W. Effect of lipids on enzymatic activity of pig heart mitichondrial malate dehydrogenase monomolecular films / A.W. Malick, N.D. Weiner//J. Pharm. Science. 1977.-V. 66, № 10.-P. 1465-1469.

122. Markina V.L. The effect of modification of lactate and malate dehydrogenases on their stability and activity / V.L. Markina, A.N. Eremin, D.I. Metelitsa // Biophis. 1990. - V. 35, № 1. - P. 30-35.

123. Martinez N. Measuring phase shifts and energy dissipation with amplitude modulation atomic force microscopy / N.F.' Martinez, R. Garcia // Nanotechnology. -2006. V.17. - P. 167-172.

124. Matthews B.W. Enhanced protein thermostability from site-directed mutations that decrease the entropy of unfolding / B.W. Matthews, H. Nicholson, W.J. Becktel // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. - V. 84, № 19. - P. 6663-6667.

125. Moor R.E. The development and application of a radioimmunoassay for rat phosphoenolpyruvate carboxikinase / R.E. Moor et. al. // J. Biol. Chem. -1983. Vol.257, № 21. - P. 12546-12552.

126. Mottram J.C. Purification of particulate malate dehydrogenase and phosphoenolpyruvate carboxykinase from Leishmania mexicana / J.C. Mottram, G.H. Coombs // Biochem. Biophys. Acta. 1985. - V. 827, № 2. - P. 310-319.

127. Murray R. Horpers Biochemistry / R. Murray, D. Granner, P. Mayes. -Lange medical book, 1998. 720 p.

128. Nesterenko M.V. A simple modification of Blum's silver stain method allows for 30 minute detection of proteins in polyacrylamide gels / M.V. Nesterenko, M. Tilley, S.J. Upton // J. Biochem. Biol. 1994. - Vol.28. - P. 239242.

129. Nicholson H. Enhanced protein thermostability from designed mutations that interact with aipha-helix dipoles / H. Nicholson, W.J. Becktel, B.W. Matthews //Nature. 1988. - V. 336, № 6200. - P. 651-656.

130. Popov V.N. Induction of glyoxylate cycle enzymes in rat liver upon food starvation / V.N. Popov, A.U. Igamberdiev, C. Schnarrenberger // FEBS Lett. -1996. Vol. 390. - P. 258-260.

131. Popov V.N. Glyoxylate cycle enzymes are present in liver peroxisomes of alloxan-treated rats / V.N. Popov, S.V. Volvenkin, A.T. Eprintsev // FEBS Lett.- 1998.-Vol. 440.-P. 55-58.

132. Qian Т. Formation and characterization of protein patterns on the surfaces with different properties / T. Qian et. al.. // Synthetic Metals. 2004. -V. 147.-P. 247-252

133. Reawen G.M. Role of insulin resistance in human disease / G.M. Reaven //Diabetes.- 1988.-Vol. 37, № 12.-P. 1595-1607.

134. Stumvoll M. Renal glucose production and utilization: new aspects in humans / M. Stumvoll et. al. // Diabetologia. 1997. - Vol.40, № 7. - P. 749-757.

135. Reshef L. The interaction of catecholamines and adrenal corticostroides in the induction of phosphoenolpyruvate carboxikinase in rat liver and adipose tissue / L. Reshef, R.W. Hanson // Biochem. J. 1972. - Vol. 127, № 5.- P. 809-818.

136. Rest M.E. Functions of the membrane associated and cytoplasmic malate dehydrogenase in the citric acid cycle of Escherichia coli / M.E.Rest, C.Frank, D.Molenaar // J. Bacteriol. - 2000. - Vol.182, № 24. - P. 6892-6899.

137. Rubin H. Subcellular localization of glyoxylate cycle enzymes in Ascaris suum larvae / H. Rubin, R.N. Trelease // J. Cell. Biol. 1976. - Vol.70. -P. 374-383.

138. Schnarrenberger C. Evolution of the enzymes of the citric acid cycle and the glyoxylate cycle of higher plants. A case study of endosymbiotic gene transfer / C. Schnarrenberger, W. Martin // Eur. J. Biochem. FEBS. 2002. - V. 269. - P. 868-883.

139. Song S. Can the glyoxylate pathway contributes to fat-indused hepatic insulin resistance? / S. Song // Med. Hypotheses. 2000. - Vol.54. - P. 739-747.

140. Steffan J.S. Isolation and characterization of the yeast gene encoding the MDH-3 isoenzyme of malate dehydrogenase / J.S. Steffan, L. McAlister-Henn // J. Biol. Chem. 1992. - Vol.267, №34. - P. 24708-24715.

141. Vessal M. Partial purification and kinetic properties of cytoplasmic malate dehydrogenase from ovine liver Echinococcus granulosus protoscolices /

142. M.Vessal, S.M.Tabei // Comp.Biochem.Physiol. B.Biochem.Mol. Biol. 1996. -Vol.113, №4.-P. 757-763.

143. Uttaro A.D. Characterization of the two malate dehydrogenase from Phytomonas sp. Purification of the glicosomal isoenzyme / A.D.Uttaro, F.R.Opperdoes // Mol. Biochem. Parasitol. 1997. - Vol.89, № 1. - P. 51-59.

144. Yennaco L.J. Charactrerisation of malate dehydrogenase from the hypertermophilic archaeon Pyrobaculum islandicum / L.J. Yennaco, Y. Hu, J.F. Holden // Extermophiles. 2007. - V.l 1, № 5. - P. 741-746.