Консервирование лейкоцитов в условиях околонулевых температур: экспериментальное исследование тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.21, кандидат биологических наук Лаптев, Денис Сергеевич

• Лаптев, Денис Сергеевич
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Лаптев, Денис Сергеевич

Список использованных сокращений.

Введение.

ГЛАВА I. Состояние проблемы хранения лейкоцитов в условиях околонулевых температур (обзор литературы).

1.1 Структура и функциональные свойства лейкоцитов.

1.2 Способы получения лейкоцитного концентрата и его применение.

1.3 Особенности хранения лейкоцитов в условиях околонулевых температур.

ГЛАВА II. Материалы и методы исследований.

2.1 Получение лейкоцитного концентрата.

2.2 Разработка метода хранения лейкоцитов в условиях околонулевых температур (+2° - 0 °С).

2.3 Методы исследования функционального состояния лейкоцитов до и после хранения в условиях околонулевых температур (+2° 0 °С).

2.4 Методы изучения биологических особенностей хладоограждающего раствора.

ГЛАВА III. Результаты экспериментальных исследований.

3.1 Сравнительное исследование влияния трех вариантов хладоограждающего раствора на функциональные и морфологические показатели лейкоцитов, хранившихся при +2° -ь 0 °С.

3.2 Изучение функциональных и морфологических особенностей лейкоцитов в зависимости от срока экспозиции в условиях +2° 0 °С.

3.3 Определение скорости образования продуктов перекисного окисления липидов в мембранах лимфоцитов, хранившихся при +2° 0 °С.

3.4 Влияние длительности хранения разработанного хладоограждающего раствора на его свойства.

3.5 Биологические особенности разработанного хладоограждающего раствора.

3.5.1 Испытание на «острую токсичность» разработанного хладоограждающего раствора.

3.5.2 Изучение «хронической токсичности» разработанного хладоограждающего раствора.

3.5.3 Определение пирогенности разработанного хладоограждающего раствора.

3.5.4 Изучение переносимости экспериментальными животными трансфузий аутологичных лейкоцитных концентратов, подвергнутых охлаждению до +2° 0 °С в течение 24 часов с разработанным хладоограждающим раствором.

Глава IV. Обсуждение результатов экспериментальных исследований.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Консервирование лейкоцитов в условиях околонулевых температур: экспериментальное исследование»

Актуальность темы. Изучению возможности сохранения физиологических функций клеток и тканей в условиях различной степени охлаждения посвящены работы многих исследователей (Белоус A.M., Грищенко Е.А., 1994; Утёмов C.B., 1999; Сведенцов Е.П., 2007; Goltsev A.N. et al, 2000; Halle P. et al, 2001; Nishimura M. et al, 2001). Основное внимание ученых обращено на выяснение механизмов перестроек биологических систем на различных уровнях организации, происходящих в условиях криоанабиоза различной глубины, и разработку методов консервации при низких и ультранизких температурах. Такой подход оправдан с точки зрения создания запасов клеток и тканей, так как позволяет сохранять свойства биоматериала в течение нескольких лет, но он требует высоких затрат (применения дорогостоящего криогенного оборудования, жидкого азота, привлечения высококвалифицированного обслуживающего персонала), что делает технологию криоконсервирования сложной, громоздкой, экономически неэффективной и поэтому имеет ограниченное практическое применение. Гораздо менее затратным и более доступным является способ хранения различных клеточных суспензий и биологических объектов в условиях +4° С. Альтернативного же метода краткосрочного хранения ядерных клеток крови при околонулевых температурах (+2° 0 °С) не существует.

Показаниями для применения лейкоцитных концентратов (ЛК) считают неонатальный сепсис, гранулоцитопению при грамположительных и грамотрицательных инфекциях с продолжительностью периода лихорадки более 5-7 суток и отсутствием эффекта от антибактериальной терапии; гранулоцитопению у больных лейкозом, апластической анемией с септицемией резистентной к антибиотикам (Абдулкадыров K.M., 1994; Румянцев А.Г., Аграненко В.А., 1998; Алексеев H.A., 2002; Engelfriet С.Р., 2000; Sputtek А., 2004). В каждом конкретном случае необходим индивидуальный подход, учитывающий большую стоимость и дефицитность этой трансфузионной среды.

Исследования по изучению влияния околонулевых температур (+2° О °С) на лейкоциты и их физиологические свойства, механизмов повреждения ядерных клеток крови при охлаждении — отогреве позволят создать простой, эффективный, безопасный метод сохранения ЛК. Это сделает данную трансфузионную среду более доступной и расширит область ее применения особенно в условиях, когда отсутствует возможность использовать холодовой анабиоз для хранения ЛК.

Цель исследования — создание метода консервирования лейкоцитов крови человека при околонулевых температурах от +2° до О °С.

Задачи исследования:

1. Разработать хладоограждающий раствор для консервирования лейкоцитов в условиях околонулевых температур (+2° -ь О °С).

2. Установить оптимальную концентрацию ингредиентов хладоограждающего раствора путем сравнения влияния трех его вариантов на сохранение жизнеспособности и функциональной активности лейкоцитов.

3. Изучить функциональную активность и морфологические показатели лейкоцитов в зависимости от сроков их хранения в условиях околонулевых температур.

4. Изучить биологические особенности оптимального хладоограждающего раствора и определить его переносимость лабораторными животными при внутривенном введении с отогретыми аутологичными лейкоцитными концентратами.

Научная новизна. Впервые установлена возможность сохранения на высоком уровне функциональной активности нейтрофилов, целостности плазматической мембраны лейкоцитов, стабильности их морфологического состава в условиях околонулевых температур (+2° О °С) в течение 6 суток под защитой разработанного нетоксичного и не требующего отмывания хладоограждающего раствора.

Предложен эффективный и широкодоступный метод краткосрочного хранения лейкоцитов при +2° О °С.

Теоретическая и практическая значимость. Результаты работы расширяют представления о механизмах холодового повреждения и защиты лейкоцитов крови человека в условиях околонулевых температур. Это создает предпосылки для разработки надежных и безопасных методов хранения лейкоцитов крови и других высокоспециализированных клеток.

С учетом особенностей воздействия околонулевых температур (+2° О °С) на ядерные клетки крови предложен оригинальный хладоограждающий раствор (патент РФ № 2311027 от 27 ноября 2007 г.), эффективно работающий в указанном диапазоне температур и не требующий применения дорогостоящего оборудования и высококвалифицированного" персонала. В работе дано научное обоснование применения каждого из ингредиентов препарата.

Под защитой данного хладоограждающего раствора удается сохранять на высоком уровне функциональную активность лейкоцитов1 в течение 6 суток, что в перспективе позволит накапливать большие дозы лейкоцитов.

Результаты исследования, представляют интерес для учреждений медицинского и биологического профиля, специалистов криобиологов и сотрудников криобанков.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Разработанный хладоограждающий раствор позволяет сохранять на высоком уровне физиологическую активность и морфологическую полноценность лейкоцитов, хранившихся в течение 6 суток в условиях околонулевых температур (+2° + О °С).

2. Хладоограждающий раствор, содержащий гексаметиленбистетраок-сиэтилмочевину, сукцинат оксиметилэтилпиридина, желатиноль, глюкозу, цитрат натрия и воду для инъекций, является нетоксичным, апирогенным, не требует отмывания перед применением ЛЕС и хорошо переносится экспериментальными животными при аутологичных трансфузиях лейкоцитов, хранившихся в условиях околонулевых температур (+2° О °С).

Апробация работы. Результаты исследования представлены в виде научных сообщений на Всероссийской научной конференции «Актуальные проблемы регионального экологического мониторинга: научный и образовательный аспекты» (Киров, 2006), V Молодежной научной конференции Института физиологии Коми НЦ УрО РАН «Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике» (Сыктывкар, 2006), Научно-практической конференции молодых ученых «Вопросы трансфузиологии и клинической медицины» (Киров, 2007), Всероссийском совещании (Епифановские чтения): «Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины» (Киров, 2008), объединенном заседании Кировского областного научного общества гематологов и трансфузиологов и Кировского филиала Всероссийского общества физиологов им. И.П. Павлова (Киров, 2008), Ученом совете Института физиологии Коми НЦ УрО РАН (Сыктывкар, 2008), а также на IX Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей «Человек и его здоровье» (С.-Петербург, 2006), «VI Сибирском физиологическом съезде» (Барнаул, 2008).

Личное участие автора в получении результатов. Автором самостоятельно выполнена работа по изучению жизнеспособности, морфологического состава лейкоцитов, фагоцитарной и метаболической активности нейтрофилов, а также работа по определению скорости образования малонового диальдегида в мембранах лимфоцитов. Проведена статистическая обработка результатов исследования. Автор принимал участие в разработке хладоограждающего раствора, проведении его биологических испытаний и в написании статей.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 печатных работ, из них 4 в журналах, рекомендованных ВАК; получен патент РФ №2311027 от 27 ноября 2007 г.

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Лаптев, Денис Сергеевич

выводы

1. Разработан оптимальный состав хладоограждающего раствора для консервирования лейкоцитов при околонулевых температурах, содержащий в конечной концентрации протектор гексаметиленбистетраоксиэтилмочевину (10 %), антиоксидант сукцинат оксиметилэтилпиридина (0,1 %), кровезаменитель «Желатиноль» (8 %), глюкозу (0,35 %), антикоагулянт цитрат натрия (0,1 %) и воду для инъекций.

2. Предложенный хладоограждающий раствор сохраняет при температуре +2° 0 °С в течение 6 суток на высоком уровне общее количество лейкоцитов (88,8±6,8 %), их жизнеспособность (84,1±6,3 %), фагоцитарную активность нейтрофилов (52,7±8,6 %), а скорость образования продуктов перекисного окисления липидов в мембранах лимфоцитов при этом остается без изменений.

3. Результаты изучения биологических особенностей разработанного хладоограждающего раствора для лейкоцитов доказывают его апирогенность, нетоксичность и хорошую переносимость лабораторными животными трансфузий с отогретыми аутологичными лейкоцитными концентратами.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Способ краткосрочного хранения лейкоцитов человека (патент РФ №2311027 от 27 ноября 2007), основанный на использовании оригинального хладоограждающего раствора в условиях околонулевых температур (+2° 0 °С), при котором функциональная активность лейкоцитов сохраняется в течение 6 суток, рекомендуется для использования в научных учреждениях биологического и медицинского профиля.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Лаптев, Денис Сергеевич, 2010 год

1. Абдулкадыров K.M. Гемокомпонентная терапия при заболеваниях системы крови / K.M. Абдулкадыров // Клинич. медицина. — 1994. — Т. 72.-№2. -С. 10-13.

2. Алексеев H.A. Клинические аспекты лейкопений, нейтропений и функциональных нарушений нейтрофилов / H.A. Алексеев. СПб.: Фолиант, 2002.-416 с.

3. Алмазов В.А. Физиология лейкоцитов человека / В.А. Алмазов. Л.: Наука, 1973.-232 с.

4. Архиреев В.П. A.c. №419617 (СССР). Способ получения тетраоксиалкилзамещенных мочевин / В.П. Архиреев, Е.В. Кузнецов, В.Г. Костромина. Опубликовано в Б.И., 1974, № Ю.

5. Архиреев В.П. A.c. №189689 (СССР). Способ получения тетраоксиалкилзамещенных мочевин в водной среде / В.П. Архиреев, Ж.Г. Савагина, Е.П. Сведенцов и др. — Приоритет 29.06.1982. Зарегистрировано в Госреестре изобретений СССР 6.06.1983.

6. Атлас клеток крови и костного мозга / под ред. профессора Г. И. Козинца. М.: Триада - X, 1998. - 160 с.

7. Барабой В.А. Механизмы стресса и перекисное окисление липидов / В.А. Барабой // Успехи современной биологии. — 1991. Т. 111. - Вып. 6.-С. 21-28.

8. Барабой В.А. Перекисное окисление и стресс / В.А. Барабой, И.И. Брехман, В.Г. Голотин, Ю.Б. Кудряшов. СПб.: Наука, 1992. - 148 с.

9. Белова Л.А. Биохимия процессов воспаления и поражения сосудов. Роль нейтрофилов / Л.А. Белова // Биохимия. 1997. - Т.62, № 6. - с. 659-668.

10. Белоус A.M. Структурные изменения биологических мембран при охлаждении / A.M. Белоус, В.А. Бондаренко. Киев: Наук.думка. -1982.-256 с.

11. Белоус A.M. Молекулярные механизмы криоповреждения мембранных структур / A.M. Белоус, Т.П. Бондаренко, В.А. Бондаренко // Криобиология и криомедицина. — 1979. — №■ 5. — С. 3 — 13.

12. Белоус. А.М. Криобиология / A.M. Белоус, В.И. Грищенко. Киев: Наукова Думка, 1994. - 430 с.

13. Бут П.Г. Миелопероксидаза пероксидазосом нейтрофила / П.Г. Бут, В.А. Фомина, P.A. Муравьев, В.В. Роговин // Известия АН. Серия биологическая. 2003. — № 3. - с. 261-265.

14. Бут П.Г. Антимикробная активность миелопероксидазы пероксидазосом нейтрофила / П.Г. Бут, P.A. Муравьев, В.А. Фомина.и др. // Изв. РАН. Сер.: Биологическая. 2002. - № 3. - С. 266-270.

15. Быков, B.JI. Цитология1 и общая- гистология (функциональная морфология клеток и тканей человека) / В.Л. Быков. СПб.: СОТИС, 1999. - 520 с.

16. Владимиров Ю.А. Свободнорадикальное окисление* липидов и> физические свойства1 липидного слоя биологических мембран / Ю.А. Владимиров. // Биофизика. 1987. - Т. 32, № 5. - С. 830-844.

17. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в* живых системах / Ю.А.Владимиров, O.A. Азизова, А.И. Деев.и др. // Итоги науки и техники. Биофизика. 1992. - Т. 29. - С. 3-250.

18. Владимиров Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.Н. Арчаков. М:: Наука: - 1972. -252 с.

19. Виксман М.Е. Применение реакции^ восстановления нитросинего тетразолия для оценки функционального состояния нейтрофилов человека / М.Е. Виксман, А.Н. Маянский // Казан, мед. журн. 1997. -Т,55,№ 5.-С. 99-100.

20. Воронина Т.А. Антистрессорные эффекты антиоксиданта мексидола и его- аналогов в экстремальных ситуациях / Т.А. Воронина, Л.Д. Смирнов; E.G. Телешова, Л.И. Ларенцова, И.Л. Бабаев, Г.Г. Незнамов,

21. JI.H. Неробкова, С.А. Сюняков, М.М. Ганиев // Психофармакол. Биол.Наркол. 2001. - Т.1, № 1. - С. 2-12.

22. Временная инструкция по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе метода ускоренного старения при повышенной температуре. — М., 1979. — 7 с.

23. Газизов В.З. Биохимические реакции перекисного окисления липидов и физиологические процессы антиоксидантной защиты организма плотоядных / В.З. Газизов, C.JI. Жданов, JI.E. Бояринцев. Киров. — 2001.-40 с.

24. Герасимов И.Г. Функциональная неравнозначность нейтрофилов крови человека: генетика активных форм кислорода / И.Г. Герасимов, Д.Ю. Игнатов // Цитология. 2001. - Т. 43, № 5. - С. 432-436.

25. Герасимов И.Г. Кинетика реакции восстановления нитросинего тетразолия нейтрофилами крови человека / И.Г. Герасимов, O.A. Калуцкая5 // Цитология. 2000. - Т. 42, № 2. - С. 160-165.

26. Гланц С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. М.: Практика, 1998.-459 с:

27. Гольдберг Е.Д. Методы культуры ткани в гематологии / Е.Д: , Гольдберг, A.M. Дыгай, В.П. Шахов: Томск: Изд-во Томского гос. унта, 1992.-264 с.

28. Гордиенко Е.А. Физические основы низкотемпературного консервирования клеточных суспензий / Е.А. Гордиенко, Н.С. Пушкарь. Киев: Наукова Думка, 19941 - 144 с.

29. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа, лекарственное растительное сырье /11-е изд. — Mi: Медицина, 1990. — С.182 —185.

30. Гребенюк А.Н. Нейтрофил и экстремальные воздействия / А.Н. Гребенюк, А.Е. Антушевич, В.Ф. Беженарь и др. СПб., 1998. - 216 с.

31. Гребенюк А.Н. Цитохимия нейтрофила / А.Н. Гребенюк, H.A. Смирнов, Е.Е. Давыдова и др. СПб., 1999. - 68 с.

32. Гулевский A.K. Барьерные свойства биомембран при низких температурах / А.К. Гулевский, В.А. Борндаренко, A.M. Белоус. -Киев: Наук, думка, 1988. — 208 с.

33. Гусейнов И.С. Выделение лейкоцитов из крови доноров для экспериментальных и клинических целей / И.С. Гусейнов, Л.И. Федорова // Пробл. гематологии и переливания крови. — 1963. № 4. -С.52-55.

34. Деветьярова О.Н. Функциональная активность лейкоцитов, перенесших криоанабиоз при -20 °С: автореф. дис. . канд. биол. наук / Деветьярова Ольга Нурзадиновна. — Киров, 2005.

35. Демин С.Ю. Основные типы и жизненные формы периферических и ФГА-стимулированных лимфоцитов человека, выявляемые in vitro / С.Ю. Демин // Цитология. 2003. - Т. 45, № 6. - С. 535 - 547.

36. Дюмаев K.M. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий \ ЦНС / K.M. Дюмаев, Т. А. Воронина, Л.Д. Смирнов. 1995. - М, 271 с.

37. Жибурт Е.Б. Трансфузиология / Е.Б. Жибурт. СПб.: Питер, 2002. -736 с.38.3аривчацкий М.Ф. Основы трансфузиологии / Под ред. М.Ф. Заривчацкого. Пермь: Изд-во Пермского ун-та, 1995. - С. 74-75.

38. Инструкция по применению полимерных контейнеров «Гемакон» и «Компопласт» / В.П. Кошивая, Е.М. Макарова, Н.М. Шишов и др. М., 1983.- 13 с.

39. Истаманова Т.С., Функциональная гематология / Т.С. Истаманова, В.А. Алмазов, C.B. Канаев. — Л.: Медицина, 1973. 310 с.

40. Калинин И.Н. Получение и применение концентрата тромбоцитов и лейкоцитов / И.Н. Калинин // Пробл. гематологии и переливания крови. -1980. -№ Ю.-С. 50-56.

41. Калинин И.Н. Получение концентрата тромбоцитов и лейкоцитов с помощью сепаратора клеток крови и их применение при миелодепрессии: автореф. дис. . канд. мед. наук / Калинин И.Н., 1978.-20 с.

42. Козинец Г.И. Практическая трансфузиология / Г.И. Козинец, Л.С. Барюкова, H.A. Горбунова и др. М.: Триада-Х, 1997. - 435 с.

43. Лаврик С.С. Применение низкомолекулярного ПВП в качестве защитной среды для консервирования и длительного хранения лейкоцитов методом глубокого замораживания / С.С. Лаврик, Г.И. Когут, Е.Ю. Афанасьева // Врачеб. дело. 1971. -№ 12. - С. 80-83.

44. Ларионов Л.Ф. Химиотерапия злокачественных опухолей / Л.Ф. Ларионов. М.: Медгиз, 1962. - 464 с.

45. Лебедев К.А., Иммунограмма в клинической практике / К.А. Лебедев, И.Д. Понякина. М.: Наука, 1990. 224 с.

46. Левин C.B. Структурные изменения клеточных мембран / C.B. Левин-Л.: Наука, 1976. 197 с.

47. Леонтович В.Н. Условия, удлиняющие срок хранения жизнеспособности клеток в лейкоцитарной массе / В.Н. Леонтович, H.H. Абезгауз // Проблемы гематологии и переливания крови. 1960. -№ 6, с. 44-50.

48. Леонтович В.А. Получение лейкоцитной массы из периферической крови человека и ее фракционирование на гранулоциты и лимфоциты / В.А. Леонтович, H.H. Абезгауз, В.М. Трошина // Пробл. гематологии и переливания крови. — 1971. — № 1. С. 51—57.

49. Луговой В.И. Механизмы повреждающего действия замораживания на растворимые и мембраносвязанные ферменты: автореф. дис. . д-ра биол. наук. / Луговой В.И. Харьков, 1985. - 38.

50. Лукьянова Л.Д. Проблемы фармакологической коррекции гипоксии и поиска антигипоксантов / Л.Д. Лукьянова // Клеточные механизмы реализации фармакологического эффекта. М.: Медицина. - 1990. — С. 184-216.

51. Лукьянова Л.Д. Особенности'антигипоксического действия мексидола, связанные с его специфическим влиянием на энергетический обмен / Л.Д: Лукьянова, В.Е. Романова и др. // Хим. фарм. журн. - 1990. - № 8.-С. 9-11

52. Мамаев А.Е. Применение модежеля и взвеси эритроцитов в модежеле в комплексном лечении больных разлитым перетонитом: автореф дис. . к.м.н. / Мамаев А.Е. СПб, 1998 - 16с.

53. Мамаев А.Е. Опыт применения взвеси эритроцитов в модежеле в комплексном лечении больных разлитым перетонитом / Мамаев А.Е.,

54. М.Д. Ханевич, Е.А. Селиванов // Terra medika nova 1997. - Т.З, № 3. -С.42 - 44.

55. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Изд. 15-е, перераб., испр. и доп. / М.Д. Машковский. М.: Новая волна, Умеренков изд. — 2007. — 1206 с.

56. Марковский А.Л. Влияние факторов криоконсервации на гидратацию глобулярных белков: автореф. дис. . канд. биол. наук / Марковский А.Л. Харьков, 1984. - 20с.

57. Мельникова В.Н. Заготовка, консервирование крови и ее компонентов. Руководство по, общей и клинической трансфузиологии / В.Н. Мельникова, В.Г. Плешаков, Е.А. Селиванов. — СПб.: Фолиант, 2003. -С. 115-150.

58. Мельникова В.Н. Получение и клиническое применение при гнойно-септических заболеваниях лейкоцитарной взвеси из крови иммунных доноров / В.Н. Мельникова // Трансфузионная медицина. 1995. - № 5. -С. 32-36.

59. Меныцикова Е.Б. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меныцикова, В.З. Ланкин, Н.К. Зенков, И.А. Бондарь, Н.Ф. Круговых, В.А. Труфакин. -М.: Фирма «Слово», 2006. -556 с.

60. Мовшев Б.Е. Трансфузионные среды: прикладные и фундаментальные аспекты / Мовшев Б.Е., Витвицкий В.М., Лисовская И.Л., Атауллаханов Ф.И. // Гематология и трансфузиология, № 3, 2001. с. 74-82.

61. Моисеев В.А. Молекулярные механизмы криоповреждения и криозащиты белков и биологических мембран: автореферат, дис. . д-ра биол. наук / Моисеев В.А. Харьков, 1984. — 47.

62. Муравьев P.A. Механизм бактерицидной активности в фагосомах нейтрофилов / PIA. Муравьев, П.Г. Бут, В.А. Фомина и др. // Изв. РАН. Сер.: Биологическая. 2002. - № 4. - С. 437-441.

63. Муравьев P.A. Желатиназные гранулы нейтрофильных гранулоцитов / P.A. Муравьев, В.А. Фомина, В.В. Роговин // Изв. РАН. Сер.: Биологическая. 2003. - №4. - С.389-394.

64. Основы физиологии человека / Под ред. Ткаченко Б.И. — СПб.: Международный фонд истории науки, 1994. — С. 212-218.

65. Петров В.И. Современные антиоксиданты в медицине / Под ред. В:И. Петрова. Волгоград: ФРУП «ИПК «Царицын». - 2001. - С. 12.

66. Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства / В.Е. Пигаревский. М.: Медицина, 1978. - С. 104 - 108.

67. Пигаревский В.Е. Лизосомально-катионный тест. Методические рекомендации / В.Е. Пигаревский. М., 1979. - 10 с.

68. Покровский В.М. Физиология человека / В.М. Покровский^ Г.Ф. Коротько. -М.: Медицина, 1997.

69. Полякова А.И. Изучение влияния, низких температур (-196 °С) и криопротектора (ПЭ0400) на сохранность клеток лейкоконцентрата и лимфоконцентрата периферической крови: автореф. дис. . канд. биол. наук / Полякова А.И. Харьков, 1975. — 14 с.

70. Попов C.B. Взаимодействие фагоцитов, млекопитающих сполисахаридами растений'/ C.B. Попов. — Сыктывкар, 2002. — 100 е./

71. Попов C.B. Функциональные реакции нейтрофилов и макрофагов на растительные полисахариды: автореф. дис. . канд. биол. наук / Попов C.B. Сыктывкар, 1999. - 19 с.

72. Потапова С.Г. Изучение поглотительной' способности нейтрофилов крови с использованием инертных частиц латекса / С.Г. Потапова, B.C. Хрустиков, Н.В. Демидова, Г.И. Козинец // Пробл. гематологии ипереливания крови. 1977. - № 9: - С. 58 - 59.

73. Пушкарь Н.С. Физико-химические- механизмы- криоповреждений биологических структур / Под- ред. Н.С.Пушкаря. Итоги науки и техники, вып. Биофизика, Т. 9:-Москва; 1978.

74. Пушкарь Н.С. Введение в криобиологию / Н.С. Пушкарь, A.M. Белоус. Киев: Наукова Думка, 1975. - 342 с.

75. Пушкарь Н.С. Разработка оптимальных режимов программного замораживания' лейкоцитов / Н.С. Пушкарь, Г.С. Лобынцева, А.И. Полякова и др. // Пробл. гематологии и*переливания крови. 1978. - № 8.-С. 8-13:

76. Румянцев А.Г. Клиническая трансфузиология / А.Г. Румянцев; А.Г. Аграненко М.: ГЭОТАР Медицина, 1998.-575 с.

77. Рыжков С.В:, Калеко С.П., Плоцкий А.Н. Клиническое применение лейкоконцентрата/ С.В. Рыжков, С.П. Калеко, А.Н: Плоцкий // Вест, хирургии. 1992. - № 1-3. - С. 78-82.

78. Рыжков С.В. Применение лейкоконцентрата при гнойно-септических состояниях / С.В. Рыжков, А.Н. Плоцкий, С.Ф: Малахов, и др. //

79. Актуальные вопросы службы крови и трансфузиологии (Тез. докл. Рос. конф., 1995, С. Петербург) СПб, 1995. - С. 343-344.

80. Сведенцов Е.П. Руководство по трансфузионной медицине / Под ред. Е.П. Сведенцова. Киров, 1999. - 715 с.

81. Сведенцов Е.П. К классификации разных уровней отрицательных температур, используемых для консервирования биообъектов/ Е.П. Сведенцов // Материалы научной сессии (30-31 марта 2004 г.). Киров, 2004.-С. 117-120.

82. Сведенцов Е.П. Получение и криоконсервирование костного мозга для клинического применения: автореф. дис. . д-ра мед. наук / Сведенцов Е.П.-Л., 1987.-45 с.

83. Сведенцов Е.П. Способ введения лейкоцитов крови человека в холодовой анабиоз при -50 °С / Е.П. Сведенцов, Т.В. Туманова, С.А. Якшина и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2003. - №11. -С. 35-37.

84. Сведенцов Е.П. Функциональное состояние лейкоцитов после выхода из криоанабиоза / Е.П. Сведенцов, Т.В. Туманова Екатеринбург: УрО РАН, 2007. - 81 с.

85. Сведенцов Е.П. Отечественные криоконсерванты для костного мозга / Е.П. Сведенцов, A.A. Костяев // Вестник службы крови России. -1997. №1.-С. 26-28.

86. Свиридов C.B. Гетерогенные коллоидные плазмозамещающие растворы: настоящее и будущее / C.B. Свиридов // Российский Журнал Анестезиологии и Интенсивной Терапии. 1 999. — № 2.

87. Славинский A.A. Цитоплазматическая зернистость нейтрофильных лейкоцитов/ A.A. Славинский // Клинич. лаб. диагностика. — 2002. — № З.-С. 39-42.

88. Смирнов Л.Д. Фармакологические свойства и перспективные области клинического применения антиоксидантов гетероароматического ряда / Л.Д. Смирнов // Свободные радикалы и антиоксиданты в химии и биологии. Тезисы докладов М.: РАН. - 2000. - С. 11.

89. Смирнов Л.Д. Фармакологическая коррекция гипоксических состояний алкилзамещенными 3-окси-пиридинами / Л.Д. Смирнов, Т.А. Воронина и др. //Фармакологическая коррекция кислородзависимых патологических состояний. М., 1989 - С. 87

90. Строев Е.М. Практикум по биологической химии. Учебное пособие для фармац. вузов и факультетов / Е.М. Строев, В.Г. Макарова М: Высш.шк., 1986. - С. 211-213.

91. Терентьева Э.И. Субмикроскопическая организация клеток крови, хранившихся в замороженном состоянии / Э.И. Терентьева, В.А. Леонтович, Л.И. Федорова и др. // Р.Ж. ВИНИТИ 04.Ai Общие проблемы биологии. — 1966. — № 1. — С. 154-168.

92. Трошина В.М. Криоконсервирование гранулоцитов с диметилацетамидом: автореф. дис. . канд. биол. наук / Трошина В.М. -М., 1981.-14 с.

93. Утемов C.B. Методы выделения лейкоцитов для клинических целей // Препараты крови и кровезаменители производство, контроль и клиническое применение: Мат-лы науч.-практ. конф / Утемов C.B. — Киров, 1995.-С. 68.

94. Файнштейн Ф.Э. Современные вопросы терапии больных хроническим миелолейкозом / Ф.Э. Файнштейн, Н.Д. Хорошко // Пробл. гематол. и перелив, крови. 1981. - № 4. - С. 3-7.

95. Фонталин Л.Н. Иммунологическая реактивность лимфоидных органов и клеток / Л.Н. Фонталин. Л.: Медицина, 1967. - 209 с.

96. Ханевич М.Д. Использование лейкоцитарной массы при лечении тяжелых форм разлитого перитонита / М.Д. Ханевич, А.В1 Маринин // Актуальные вопросы службы крови и трансфузиологии: Тез. докл. Рос. конф. (С.-Петербург, 1995 г.). СПб, 1995. - С.344-345.

97. Хлябич Г.Н. Кровезаменители, консерванты крови и костного мозга / Под ред. Г.Н. Хлябича. М.: Медицина, 1997. - 192 с.

98. Цуцаева A.A. Криоконсервирование клеточных суспензий / Под ред. A.A. Цуцаевой — Киев: Наукова Думка, 1983. — 240 с.

99. Чередеев А.Н. Fc-рецепторы на фагоцитирующих клетках / А.Н. Чередеев // Иммунология. 1995. - №3. - С. 21-25.

100. Шевченко Ю.Л. Руководство по общей и клинической трансфузиологии / Ю.Л. Шевченко, В.Н. Шабалин, М.Ф. Заривчацкий, Е.А. Селиванов. СПб.: Фолиант, 2003. - 608 с.

101. Шиффман Ф.Дж. Патофизиология крови / Ф.Дж. Шиффман. М. -СПб.: БИНОМ Невский диалект, 2000. - 448 с.

102. Шмидт Р. Физиология человека: в 3-х томах / Под ред. Р. Шмидта и Г. Тевса. М.: Мир, 1996. - 288 с.

103. Щеглова О.О. Функциональное состояние лейкоцитов после выхода из холодового анабиоза при умеренно-низкой температуре: Автореф. дис. . канд. биол. наук /. Щеглова Оксана Олеговна. -Киров, 2005.

104. Abdel-Mageed A. Effect of temperature variation on cell number, viability and clonogenic potential / A. Abdel-Mageed, M.L.U. Rosalio, C.E. Hutcheson // Blood. 1997. - Vol.90. - P. 321b (4194).

105. Aderem A. A. Mechanisms of phagocytosis in macrophages/ A. A. Aderem, D. M. Underhill // Annu. Rev. Immunol. 1999. - Vol. 17. - P. 593-623.

106. Baggiolini M. Chekines and leukocyte traffic / M. Baggiolini // Nature. 1998. - Vol. 392. - P. 565-568.

107. Bainton D.F. The development of neutrophilic polymorphonuclear leukocytes in human bone marrow / D.F. Bainton, J.L. Ulliot, M.G. Farquhar // J. Exp.Med. 1971 - Vol. 134(4 ): P. 907-934.

108. Bainton D.F. Distinct granule populations in human neutrophils and lysosomal organelles identified by immuno-electron microscopy / Bainton D.F. // J. Immunol. Methods. 1999. - Vol.232. - P. 153-168.

109. Bainton D.F. Neutrophilic leukocyte granules: from structure to function / Bainton D.F. // Adv. Exp. Med. Biol. 1993. - Vol. 336. - P. 1733.

110. Bhatia S. Granulocyte Transfusions: eficacy in treating fungal infections in neutropenic patients following bone marrow transplantation / S. Bhatia, J. McCullough, E.H. Perry et. al. // Transfusion. 1994. - Vol. 134. -P. 226-232.

111. Bjerrum O.W. Mixed enzyme-linked immunosorbent assay (MELISA) for HLA class I antigen: a plasma membrane marker / O.W. Bjerrum, N. Borregaard // Scand. J. Immunol. 1990. - Vol. 31, № 3. - P. 305-313.

112. Blystone S.D. Integrin avP3 differentially regulates adhesive and phagocytic functions of the fibronectin receptor a5Pi / S.D. Blystone, I.L. Graham, F.P. Linberg, E.P. Brown // J. Cell Biol. 1994. - Vol. 123. - P. 1129-1137.

113. Borregaard N. Biosynthesis of granule proteins in normal human bone marrow cells. Gelatinase is a marker of terminal neutrophil differentiation / N. Borregaard, M. Sehested, B. S. Nielsen et al. // Blood. 1995. - Vol. 85, № 3. - P. 812-817.

114. Borregaard N. Granules of the human neutrophilic polymorphonuclear leukocyte / N. Borregaard, J.B. Cowland // Blood. 1997. - V. 89. № 10. -P. 3503-3521.

115. Borregaard N. Development of neutrophil granule diversity / N. Borregaard // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1997. Vol. 15. № 832. - P. 62-68.

116. Cairo M.S. Randomized trial of granulocyte transfusions versus intravenous immuneglobulin therapy for neonatal neutropenia and sepsis / M.S. Cairo, C.C. Worchester, R.W. Rset et. al. // J.Pediatr. 1992. -Vol.120.-P.281-285.

117. Carroll M.C. The role of complement and complement receptors in induction and regulation of immunity / M.C. Carroll // Annu. Rev. Immunol. 1998. Vol. 16. - P. 545-568.

118. Clark R.A. The human neutrophil respiratory burst oxides / R.A. Clark // J. Infect. Dis. 1990. - Vol.161. - P.l 140-1147.

119. Clark R.A. Activation of the neutrophil respiratory burst oxides / R.A. Clark//J Infect Dis. 1999; 179: S309-S317.

120. Claus V. Lysosomal enzyme trafficking between phagosomes, endosomes, and lysosomes in J774 macrophages / V. Claus, A. Jahraus, T. Tjelle et al. // J. Biol. Chem. 1998. - Vol. 273. - P. 9842-9851.

121. Cottier-Fox M. Bone marrow collection techniques. In: Areman E.M., Deeg H. J., Sacher R. A. (eds) Bone marrow and stem cell processing: Amanual of current techniques / M. Cottier-Fox. Philadelphia: F.A. Davis, 1992: 38-48.

122. Cowland J.B. Molecular characterization and pattern of tissue expression of the gene for neutrophil gelatinase-associated lipocalin from humans/ J.B. Cowland, N. Borregaard //Genomics. — 1997. Vol. 45,№1. — P. 17-23.

123. Daeron M. Fc receptor biology / M. Daeron // Annu. Rev. Immunol. -1997. Vol. 15. - P. 203-234.

124. De Haas M. Neutrophil Fc Y RHIb deficiency, nature and clinical consequences: A study of 21 individuals from 14 families / De Haas M., Kleijer M., van Zwieten R. et al. // Blood. 1995, Vol. 86, N. 6, p. 2403.

125. De Montalembert M. Granulocyte transfusion in children / De Montalembert M., N.Jabado, D. Leman et al. // Blood, 1998, Vol. 92, N. 10, Suppl. 1, p. 131.

126. Gullberg U., Biosynthesis, processing and sorting of neutrophil proteins: insight into neutrophil granule development / U. Gullberg, E. Andersson, D. Garwicz et al. // Eur. J. Haematol. 1997, Vol. 58, N. 3, p. 137.

127. Hampton M.B. Inside the neutrophil phagosom: oxidants, myeloperoxidase and bacterial killing / M.B. Hampton, A.J. Kettle, C.C. Winterbourn//Blood. 1998. V. 92. № 9. P. 3007-3017.

128. Hill R.S. Nitroblue tetrazolium (NBT) activity in human leucocytes after freezing / R.S. Hill, M. Kennedy, C. Mackinder // Pathology, 1978. Vol. 10, No. l.P. 69-75.

129. Hartman M.L. Human peripheral blood eosinophils express stem cell factor / M.L. Hartman, A.M. Piliponsky, V. Temkin, F. Levi-Schaffer // Blood. 2001. - Vol. 97. - P.1086-1091.

130. Hubl W. Effect of storage on stem cell concentration and viability in cord blood / W. Hubl, J. Iturraspe, C.E. Hutcheson et al. // Blood. 1997. -Vol. 90.-P. 4217.

131. Hume H. The transfusion support patients with acquired or congenital bone marrow Ch. 2 // S.M. Wilson, J.S. Levott, R.G. Strauss / Improving transfusion practice for pediatric patients Arlington, AABB. 1991.-P. 19 -39.

132. Hurst J.K. Myeloperoxidase: active site strukture and catalyticmehanisms / J.K. Hurst, J. Everse, K.E. Everse, M.P. Grisham // Peroxidase in Chemistry and Biology. Boston: CRC Press. - 1991. - P. 37-62.

133. Jialan Shi. Role of the liver in regulating numbers of circulating neutrophils / Jialan Shi, Gary E. Gilbert, Yoshihiro Kokubo, Takashi Ohashi.//Blood, 15 August 2001, Vol. 98, No. 4, pp. 1226-1230.

134. Jahraus A. Evidence for retrograde traffic between terminal lysosomes and the prelysosomal/late endosomal compartment / A. Jahraus, B. Storrie, Griffiths, M. Dèjardins // J. Gell Sci. 1994.-Vol. 107. № 1. -P:145-157.

135. Klebanoff S.J. Oxygen metabolism from phagocytes // Inflammation: Basic Principles and Clinical Correlates. Second Edition / S.J. Klebanoff, Eds Gallin J.I., Goldstein I.M., Snyderman R.N.Y.: Raven Press, 1992. P. 541-588.

136. Mohn H. The sre-family protein tyrosine kinase p59 is locatcd on the secretory granules towards the phagosome during cell activation / H.

137. Mohn, V. LeOabec, S. Fisher, J. Mordonnean— Parini // Biochem. J. 1995. - V. 309. № 2. P. 657-668.

138. Neppert J. Therapie mit Granulozyten / J. Neppert // Transfusions — medizin, Berlin: Verlog Springer. - 1996. - S. 339-344.

139. Nesterova I.V. Current Views on the Role of Neutrophil Granulocyte System / I.V. Nesterova, N.V. Kolesnikova // Russ. J. Immunol. 1999. -Vol. 4, №3.-P. 229-233.

140. Nishimura M. Frozen-stored granulocytes can be used for an immunofluorescence test to detect granulocyte antibodies / M. Nishimura, S. Mitsunaga, T. Juji // Transfusion. 2001. - Vol.41, №10. - P.1268-1272.

141. Nusbacher J. Granulocyte collection and processing: function and clinical utilisation. Granulocyte / J. Nusbacher 1997. № 7. - P. 175-183.

142. Pettit E.J. Cytosolic Free Calcium and the Cytoskeleton in the Control of Leukocyte Chemotaxis / EJ. Pettit, F.S. Fay // Physiological Reviews; -1998. Vol.78,-P.949-967.

143. Ruthl R.C. Efficavy of granulocyte transfusions in control of systematic candidiasus in the leukopenic host / R.C. Ruthl, B.R. Anderson, B.L. Cunningham et al. // Blood. 1978. № 52. - P. 493-498.

144. Strauss R.G. Granulocyte transfusions. In:: Rossi E.C., Simon T.L., Moss G.S., Gould S.A. (eds). Principles of transfusion medicine, 2nd ed. Baitimor, MD: Williams and Wilkins, 1995: 321-8.

145. Schiffer C.A. Granulocyte transfusions:. An overlooked therapeutic modality/ C.A. Schiffer// Transfus. Rev. 1990 № 4. - P. 2 - 7.

146. Schreck R. A method for counting the viable cells in normal and malignant cell suspension / R. Schreck // Ann. J. Cancer 1936. - Vol.28 -P. 389-391.

147. Segal A.W. The NADPH oxidase of phagocytic leukocytes / A.W. Segal, K.P. Shatwell // Ann. N.Y. Acad. Sei. 1997. - Vol. 832. - P. 215 -222.

148. Segal B.H. Genetic, biochemical, and clinical features of chronic granulomatous disease / B.H. Segal, T.L. Leto, J.I. Gallin, H.L. Malech, S.M. Holland //Medicine.-2000; 79 : 170-200.

149. Sputtek A., Sputtek R. Cryopreservation in Transfusion Medicine and Haematology/ Sputtek A., Sputtek R. // In Life in the Frozen State / Fuller B. J., Lane N., Benson. London, New York, Washington: CRS Press, 2004.-P. 483-504.

150. Svedentsov E.P. Low temperature Leukocyte concentrate conserving / E.P. Svedentsov, V.P. Archireyev, S.V. Utyomov et al. // Vox Sanguineous. 25th Congress JSBT, 1998. Oslo, Norway. - P. 1254.

151. Svedentsov E.P. Effect of cryohypobiosis on concervation of human blood leukocytes / E.P. Svedentsov, E.S. Stepanova, T.V. Tumanova et al. // J. Cryoletters., 2005. Vol.26, No. 6. P. 387 394.

152. Taylor M.J. Function of lymphocytes and macrophages after cryopreservation by procedures for pancreatic islets: potential for reducing tissue immunogenicity / M.J. Taylor, H.L. Bank // Cryobiology. 1988. -Vol. 25, №1.-P. 1-17.

153. Warkentin P.I. Clinical backgroung for marrow and progenitor cell processing. In: Lasky L.C., Warkentin P.I. (eds). Marrow and stem cell processing for transplantion, Bethesda, MD: American Association of Blood Banks, 1995: 1-20.

154. Weis W.I. The C-type lectin superfamily in the immune system / W.I. Weis, M.E. Taylor, K. Drrickamer // Immunological Rev. 1998. - Vol. 163.-19-34.

155. Список работ, опубликованных по теме диссертации1. Патент:

156. Статьи в журналах, рекомендованных ВАК:

157. Лаптев Д.С. Консервирование ядерных клеток крови при температуре +2° 0 °С / Д.С. Лаптев // Пермский мед. журн. - 2008. - Т. 25, №5. -С. 58-60.

158. Сведенцов Е.П. Сохранение лейкоцитов в условиях околонулевых температур / Е.П. Сведенцов, Д.С. Лаптев, Т.В. Полежаева, О.О. Зайцева, О.Н. Соломина, А.Н. Худяков // Физиология человека. 2010. - Т. 36, №3. - С. 130-134.

159. Тезисы докладов на конференциях:

160. Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины». -г. Киров, 27-28 мая 2008 г. 2008. - С. 43-44.