Клинико-экспериментальное обоснование трансвагинального сонографически-ассистированного получения ооцитов крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.06, кандидат наук Чинаров Роман Юрьевич

• Чинаров Роман Юрьевич
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Чинаров Роман Юрьевич

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Морфологические особенности и топография половых 15 органов коров

1.2. Особенности полового цикла у самок крупного рогатого 19 скота

1.3. Вспомогательные репродуктивные технологии

1.4. Развитие методов прижизненного получения ооцитов у 26 коров

1.5. Факторы, влияющие на результативность 28 трансвагинального УЗИ-ассистированного получения ооцитов у коров

1.5.1. Технические факторы

1.5.2. Кратность проведения сессий OPU

1.5.3. Породные особенности

1.5.4. Возраст, физиологическое состояние, алиментарные и 37 климатические факторы

1.5.5. Использование гормональной стимуляции

1.6. Заключение по обзору литературы

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Материалы исследований

2.2. Методы исследований

2.2.1. Методика проведения сонографически-ассистированной 47 трансвагинальной пункции фолликулов (OPU)

2.2.2. Методика получения эмбрионов in vitro (IVP-эмбрионов) 55 с использованием OPU-ооцитов

2.2.3. Определение показателей результативности OPU

2.2.4. Проведение практической апробации оптимизированной 57 методики OPU для получения эмбрионов in vitro

2.2.5. Проведение биохимических и клинических 59 исследований крови телок-доноров

2.2.6. Проведение микробиологических исследований смывов 62 из репродуктивных органов телок-доноров

2.2.7. Статистическая обработка результатов исследований 64 ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ 66 ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Изучение влияния различных факторов на 66 результативность OPU

3.1.1. Обоснование технического обеспечения методики 66 трансвагинальной сонографически-ассистированной пункции фолликулов у коров

3.1.2. Влияние индивидуальных особенностей телок-доноров

3.1.3. Влияние кратности проведения сессий OPU

3.1.3.1. Число УЗИ-видимых фолликулов, степень извлечения и 74 качество получаемых ооцит-кумулюсных комплексов

3.1.3.2. Результативность получения эмбрионов из OPU-ооцитов 78 в системе in vitro

3.1.4. Влияние гормональной стимуляции

3.2. Практическая апробация оптимизированной методики 87 трансвагинальной сонографически-ассистированной пункции фолликулов коров

3.2.1. Сравнительная оценка результативности у телок- 87 доноров симментальской и ярославской пород

3.2.2. Закладка банка IVP-эмбрионов, полученных из OPU- 93 ооцитов, у ярославской породы крупного рогатого скота

3.3. Влияние многократного проведения прижизненной 96 пункции фолликулов на клинический статус телок-доноров

3.3.1. Биохимический статус организма телок-доноров

3.3.1.1. Характеристика показателей азотистого обмена

3.3.1.2. Характеристика показателей углеводно-липидного 105 обмена

3.3.1.3. Характеристика показателей минерального обмена

3.3.2. Клинические показатели крови телок-доноров

3.3.3. Микробиологические исследования смывов из 109 репродуктивных органов телок-доноров

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ПРАКТИЧЕСКОМУ ИСПОЛЬЗОВАНИЮ 115 НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ 116 ИССЛЕДОВАНИЙ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-экспериментальное обоснование трансвагинального сонографически-ассистированного получения ооцитов крупного рогатого скота»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследований. В молочном и мясном скотоводстве актуальной является задача получения как можно большего количества потомков от лучших матерей с целью повышения степени реализации их генетического потенциала в последующих поколениях. Решение данной задачи высоко актуально и для реализации программ сохранения малочисленных и генофондных пород, а также уникальных генетических ресурсов, например, полученных с использованием геномного редактирования. Однако относительно позднее половое созревание (12-13 месяцев и старше), малоплодная стельность (как правило один теленок) и относительно длительный период стельности (9 месяцев) обуславливают возможности получения первого потомства у коров только в возрасте двух лет и старше, а в последующий период (в оптимальных условиях) - получения в среднем одного теленка в год. В этой связи, актуальной задачей является разработка технологий, обеспечивающих возможности получения большего количества потомства от одной самки (Нежданов А.Г., 2003; Гавриченко Н.И., 2014; Faber D.C. et al., 2003; Pontes J.H.F. et al., 2010; Ferré L. et al., 2019 и др.).

Наличие в яичниках самок сельскохозяйственных животных большой популяции ооцитов обусловили возможность разработки методов, позволяющих осуществлять многократное извлечение их из фолликулов живых животных. В отличие от ооцитов, полученных из яичников животных после убоя (post mortem), для прижизненного извлечения ооцитов могут быть отобраны животные-доноры с высоким генетическим потенциалом продуктивности и известным статусом здоровья. Среди известных методов прижизненного получения ооцитов (хирургический, лапароскопический и трансвагинальный), метод УЗИ-ассистированной трансвагианльной пункции (Ovum Puck Up - ОPU) является наиболее распространенным. Несмотря на то, что метод ОPU наименее травматичен и имеет низкую инвазивность, так как доступ к яичникам осуществляется трансвагинально под ультразвуковым

контролем, по данным научной литературы достаточно распространено появление осложнений при выполнении данной процедуры, связанных, как с воспалительными процессами, так и с травмированием внутренних структур, не установлены особенности многократного проведения процедуры у одной коровы. В связи с этим, актуальным является определение оптимальных параметров выполнения OPU, в том числе с учетом используемого оборудования, влияющих на результативность процедуры, как в отношение количественных, так и качественных характеристик получаемых ооцитов (Машлтплер Д.В. и др., 2018; Galli C. et al., 2001; Chastant-Maillard S. et al., 2003; Пестис В.К. и др., 2019; Никитин Г.С., 2021).

Необходима разработка научно-обоснованного алгоритма проведения OPU, которая приобретает особую актуальность для рутинного использования как с научными, так и с практическими целями.

Степень разработанности темы. Анализ научно-информационных источников в предметной области исследований показывает, что в отечественной и зарубежной научной литературе имеется достаточно работ, посвященных проблеме повышения результативности и снижению негативного влияния трансвагинальной сонографически-ассистированной пункции фолликулов при прижизненном получении ооцитов крупного рогатого скота, что подтверждает актуальность исследований. Особое внимание уделяется определению оптимальных параметров проведения аспирации фолликулов и факторов, определяющих результативность получения ооцитов. Следует отметить работы Bols P.E. с соавт. (2004), Chaubal S.A. с соавт. (2007), Takuma T. с соавт. (2010), Boni R. с соавт. (2012), Gimenes L.U. с соавт. (2015), Sartori R. с соавт. (2016), Пестис В.К. с соавт. (2016), Голубец Л.В. с соавт. (2017), Машталер Д.В. с соавт. (2018), Bols P.E.J. и Stout T.A.E. (2018), Пестис В.К. с соавт. (2019), Ротарь Л.Н. с соавт. (2019).

Цель исследований - на основании результатов клинико-экспериментальных исследований определить влияние различных факторов на результативность прижизненного получения ооцитов и усовершенствовать

методику проведения трансвагинальной сонографически-ассистированной пункционной биопсии фолликулов у коров.

Задачи исследований:

1. На основании результатов клинических исследований определить влияние технических факторов (тип аспирационной иглы, уровень вакуума и параметры сонографии) на результативность трансвагинальной пункции фолликулов у телок симментальской породы.

2. Изучить влияние индивидуальных особенностей телок-доноров симментальской и ярославской пород на результативность ОРи.

3. Провести анализ результативности прижизненного получения ооцитов у телок симментальской породы при различной кратности проведения ОРИ-сессий.

4. Выполнить сравнительные исследования результативности ОРи при использовании и при отсутствии гормональной стимуляции телок-доноров.

5. Изучить влияние многократного прижизненного получения ооцитов посредством трансвагинальной сонографически-ассистированной пункции фолликулов на клинический статус телок-доноров симментальской и ярославской пород.

6. На основании проведенных исследований усовершенствовать методику трансвагинальной сонографически-ассистированной пункции фолликулов для получения ооцитов и провести ее практическую апробацию у телок-доноров симментальской и ярославской пород.

Научная новизна. На основании клинико-экспериментальных исследований усовершенствована методика проведения сонографически-ассистированной пункции фолликулов у телок симментальской породы, отличающаяся оптимизированными техническими и технологическими параметрами проведения ОРи, использованием оригинальной схемы гормональной стимуляции, низкой травматичностью и контролем результативности выполнения процедуры за счет последующей оценки качества полученных ооцит-кумулюсных комплексов.

В результате исследований количественных и качественных показателей получаемых ооцит-кумулюсных комплексов установлено, что проведение OPU-сессий с кратностью 2 раза в неделю позволяет достигать большей результативности OPU за определенный период времени без потери качества получаемого генеративного материала.

На основании результатов биохимических и клинических исследований крови, а также микробиологических исследований образцов смывов из репродуктивных органов (влагалище и цервикальный канал) показано, что многократное использование телок-доноров симментальской и ярославской пород для прижизненного получения ооцитов с использованием авторской методики не приводит к нарушениям клинического состояния и обменных процессов.

Результаты исследований позволяют предоставить научное обоснование для решения важной народно-хозяйственной задачи- сохранения генофонда отечественных пород крупного рогатого скота посредством создания банка эмбрионов известного происхождения, что продемонстрировано на примере начального этапа закладки банка эмбрионов ярославской породы крупного рогатого скота, полученных по авторской методике.

Теоретическая и практическая значимость работы. В результате исследований уточнены имеющиеся и получены новые базовые знания о возможностях применения метода трансвагинального извлечения ооцитов и влияния его на функциональное и клиническое состояние животных.

Определены режимы выполнения трансвагинальной сонографически-ассистированной пункционной биопсии фолликулов у коров, отличающиеся малой травматичностью при проведении процедуры, отсутствием осложнений в раннем послеоперационном периоде и отсутствием побочных реакций со стороны систем органов.

Предложена схема гормональной стимуляции у телок крупного рогатого скота симментальской породы в период многократных сессий OPU, позволяющая добиться значительного увеличения количества получаемых

жизнеспособных яйцеклеток от одного донора и показано ее преимущество по сравнению с классической схемой проведения ОРи без использования гормональной стимуляции.

Практической значимостью работы является возможность широкого применения предлагаемой авторской методики, заключающейся в том, что повышение степени извлечения ооцит-кумулюсных комплексов и обеспечение сохранения их высоких качественных характеристик обуславливается использованием аспирационной иглы 1,2 х 75 мм (18G, длинный срез), уровня вакуума 90 мм. рт. ст. и проведением процедуры с кратностью 1 -2 раза в неделю под сонографическим контролем с использованием конвексного датчика с частотой 5 МГц.

Полученные данные являются базовыми для дальнейших исследований возможностей биотехники размножения сельскохозяйственных животных и имеют несомненную актуальность для использования в подготовке кадров высшей квалификации в аспирантуре и учебном процессе по направлениям подготовки Зоотехния и Ветеринария по дисциплинам клинического цикла, акушерства, биотехнике репродукции и др.

Методология и методы исследований. В проведении исследований были использованы как общенаучные (анализ, синтез, системный подход, селективность, фотографирование, метод статистической обработки результатов), так и специальные (клинические, лабораторные, хирургические, сонографические, эмбриологические) методы исследований, позволяющие выполнить исследования на высоком методическом уровне.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Использование аспирационной иглы 1,2 х 75 мм (180, длинный срез), уровня вакуума 90 мм. рт. ст. и конвексного датчика с частотой 5 МГц позволяет повысить степень извлечения ооцит-кумулюсных комплексов у телок-доноров симментальской породы.

2. Проведение ОРИ-сессий у телок-доноров симментальской породы с кратностью 2 раза в неделю обеспечивает получение большего количества

ооцит-кумулюсных комплексов от одного донора за определенный период времени по сравнению с кратностью сессий один раз в неделю без развития побочных реакций и осложнений.

3. Использование гормональной стимуляции телок симментальской породы позволяет увеличить более чем в 2 раза количество получаемых ооцит-кумулюсных комплексов за одну сессию по сравнению с использованием не стимулированных доноров.

4. Использование сонографически-ассистированной трансвагинальной пункции фолликулов в сочетании с получением эмбрионов в системе in vitro является перспективным методом для сохранения генофонда отечественных пород крупного рогатого скота посредством создания банка эмбрионов известного происхождения.

5. Многократное использование телок симментальской и ярославской пород для прижизненного получения ооцитов методом трансвагинальной сонографически-ассистированной пункции фолликулов по разработанной методике не оказывает негативного влияния на клинический статус животных-доноров.

Степень достоверности и апробация результатов исследований.

Достоверность результатов исследований базируется на применении современных методик анализа, использовании сертифицированного оборудования, статистической обработки результатов исследований. Результаты апробированы и внедрены в учебные курсы по репродукции и биотехнике репродукции животных ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина», ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины», ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины».

Результаты диссертационной работы получены, в том числе, при проведении исследований по проектам Российского научного фонда № 19-1600115 (сроки выполнения 2019-2021 гг.), № 21-66-00007 (сроки выполнения

2021-2024 гг.) и проекту Российского фонда фундаментальных исследований № 20-316-90003 (сроки выполнения 2020-2022 гг.).

Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на конференциях:

— девятой международной межвузовской конференции по клинической ветеринарии, посвященной 100-летию Московской ветеринарной академии, г. Москва, 10-11 октября 2019 г. (стендовый доклад);

— международной учебно-методической и научно-практической конференции, посвященной 100-летию Московской ветеринарной академии, г. Москва, 21 ноября 2019 г. (стендовый доклад);

— круглом столе по вопросам развития современных репродуктивных технологий в животноводстве, посвященном 116-летию со дня рождения академика В.К. Милованова, п. Быково Московской области, 28 февраля 2020 г. (устный доклад);

— научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых (3-й тур Всероссийского конкурса среди организаций, подведомственных МСХ РФ), г. Москва, 11 мая 2020 г. (онлайн-конференция, устный доклад);

— 47-й ежегодной виртуальной научной конференции Международного общества трансплантации эмбрионов (ШТБ), 18-21 января 2021 года (онлайн-конференция, стендовый доклад);

— международной научно-практической конференции «От импортозамещения к экспортному потенциалу: научно-инновационное обеспечение АПК», УралГАУ, г. Екатеринбург, 25-26 февраля 2021 года (онлайн-конференция, устный доклад);

— национальной научно-практической конференции «Актуальные вопросы биологии, биотехнологии, ветеринарии, зоотехнии и переработки сырья животного и растительного происхождения», МГАВМиБ - МВА им. К.И. Скрябина, г. Москва, 1 апреля 2021 г. (устный доклад);

— научно-практической конференции с международным участием «Научные достижения генетики и биотехнологии в ветеринарной медицине и

животноводстве», Уральский НИВИ ФГБНУ УрФАНИЦ УрО РАН, г. Екатеринбург, 27-28 мая 2021 г. (онлайн-конференция, устный доклад);

— annual meeting of the American society of animal science, г. Кентукки, Луисвиль, США, 14-18 июля 2021 г. (онлайн-конференция, стендовый доклад);

— международной научно-практической конференции "Генетика, селекция, биотехнология: интеграция науки и практики в животноводстве", ВНИИГРЖ - филиал ФИЦ ВИЖ им. Л.К. Эрнста, г. Санкт-Петербург, 1-3 декабря 2021 г. (устный доклад);

— одиннадцатой международной межвузовской конференции по клинической ветеринарии в формате Purina partners, МГАВМиБ - МВА им. К.И. Скрябина, г. Москва, 8 декабря 2021 г. (устный доклад).

Публикации результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ в периодических изданиях, в том числе 4 - в журналах, индексируемых в Web of Science и SCOPUS, 2 - в журналах, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией Российской Федерации, 1 - в журнале, входящем в перечень RSCI. Подготовлено 1 методическое руководство по теме диссертации.

Публикации в журналах, индексируемых в Web of Science и SCOPUS

1. Singina G.N., Chinarov R.Y., Lukanina V.A., Vorozhbit T.A. The effect of prolactin on the quality of heifer oocytes retrieved by transvaginal puncture of follicles // Sel'skokhozyaistvennaya Biologiya [Agricultural Biology], 2021, 56 (6), 1148-1155. doi: 10.15389/agrobiology.2021.6.1148eng (SCOPUS, Q3).

2. Chinarov R.Y., Singina G.N., Havlicek V., Taradajnik N.P., Taradajnik T.E., Shedova E.N., Pozyabin S.V. Efficiency of embryo production using OPU-oocytes recovered from stimulated and non-stimulated cows // Reproduction, Fertility and Development, 2021, 33 (2), 169-170. doi: 10.1071/RDv33n2Ab123 (WoS, Q2, SCOPUS, Q1).

3. Chinarov R.Y., Singina G.N., Taradajnik N.P., Pozyabin S.V. The quality of cows' oocyte derived at different timing regimens of transvaginal follicular

puncture // J. of Animal Science, 2021, 99 (Suppl. 3), 330-331. doi: 10.1093/jas/skab235.608 (WoS, Q2, SCOPUS, Q1).

4. Zinovieva N.A., Pozyabin S.V., Chinarov R.Y. Assisted reproductive technologies: the history and the role in the development of genetic technologies in cattle // Sel'skokhozyaistvennaya Biologiya [Agricultural Biology], 2020, 55 (2), 225-242. doi: 10.15389/agrobiology.2020.2.225eng (SCOPUS, Q3).

Публикации в журналах, рекомендованных ВАК РФ

5. Чинаров Р.Ю., Луканина В.А. Влияние технических параметров на результативность прижизненного получения ооцитов у телок симментальской породы // Достижения науки и техники АПК, 2022, Т. 36, № 1, с. 46-50. doi: 10.53859/0235-2451_2022_36_1_46.

6. Чинаров Р.Ю., Луканина В.А., Сингина Г.Н., Тарадайник Н.П. Результативность получения ооцитов коров при использовании различных временных режимов трансвагинальной пункции фолликулов // Достижения науки и техники АПК, 2020, Т. 34, № 2, с. 57-60. doi: 10.24411/0235-2451-202010212.

Публикации в журналах, индексируемых в RSCI

7. Сингина Г.Н., Гавличек В., Тарадайник Н.П., Чинаров Р.Ю., Тарадайник Т.Е., Шедова Е.Н. Трансвагинальная аспирация фолликулов и способность OPU-ооцитов коров к эмбриональному развитию в условиях in vitro // Молочное и мясное скотоводство, 2019, № 6, с. 17-19. doi: 10.33943/MMS.2019.6.39670.

Учебно-методические пособия

8. Чинаров Р.Ю., Позябин С.В., Тарадайник Н.П., Луканина В.А., Тарадайник Т.Е., Шумаков Н.И., Рыков Р.А., Боголюбова Н.В., Колодина Е.Н., Артемьева О.А., Гусев И.В., Сингина Г.Н. Методическое руководство по прижизненному получению ооцитов методом трансвагинальной сонографически-ассистированной пункции фолликулов у телок-доноров симментальской породы // Московская обл.: ФГБНУ ФИЦ ВИЖ им. Л.К. Эрнста, 2022, 32 с. ISBN 978-5-902483-66-3.

Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 141 странице машинописного текста, содержит 14 рисунков, 28 таблиц и состоит из введения, трех глав (Обзор литературы, Материалы и методы исследований, Результаты собственных исследований и их обсуждение), заключения, рекомендаций по практическому использованию научны выводов, перспектив дальнейшей разработки темы исследований, списка сокращений, списка используемой литературы и приложения. Список используемой литературы включает 142 источника, в том числе 95 - в международных изданиях.

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Морфологические особенности и топография половых органов

коров

Морфофункциональные и топографические особенности половых органов сельскохозяйственных животных разных видов подробно описаны целым рядом авторов (Глаголев П.А., Ипполитова В.М., 1977; Вракин В.Ф., Сидорова М.В., 1991; Хрусталева И.В. и др., 1994; Вракин В.Ф. и др., 2001; Медведев Г.Ф. и др., 2008; Максимов В.И. и др., 2016; Акаевский А.И. и др., 2018; Зеленевский Н.В., Щипакин М.В., 2019; Назаров М.В., Гаврилов Б.В., 2019). Поэтому в настоящем разделе мы представим лишь краткое описание особенностей половых органов коров, что представляется важным с точки зрения проведения процедуры прижизненного получения ооцитов коров методом трансвагианльной сонографически-ассистированной пункции фолликулов (Ovum Pick-Up, OPU).

Половые органы самок сельскохозяйственных животных представлены наружными (genitalia externa) и внутренними половыми органами (genitalia interna). К наружным половым органам относят половые губы, преддверие влагалища и клитор. Внутренние половые органы включают влагалище, матку (шейка, тело, рога), яйцеводы (истмическая и ампулярная части, воронка) и яичниками. Внутренние половые органы удерживаются с помощью широких маточных связок (ligamenta lata uteri), представляющих собой удвоение брюшины, идущей от поясничной области (рис. 1).

Внешние половые органы. Половые губы (labium pudendi) представляют собой два выпячивания в форме валиков, расположенных над седалищными буграми. Преддверие влагалища (vestibulum vaginae) - это узкий, сжатый с боков участок вагинальной трубки длиной 4-8 см, направленный к влагалищу снизу-вверх и вперед. На разрезе влагалище представляет собой вертикальную щель. На границе с влагалищем открывается отверстие мочеиспускательного канала, нижняя стенка которого имеет слепой мешок (diverticulum

suburethrale) глубиной 2 см. По бокам от отверстия и сзади от него находятся выводные протоки Бартолиниевых желез. Внизу преддверия влагалища расположен клитор (clitor) - гомолог полового члена. Тело клитора образовано двумя пещеристыми телами, расположенными на седалищных буграх, и заостренной головкой в нижнем углу половой щели (Медведев Г.Ф. и др., 2008).

Рис. 1. Органы размножения самок крупного рогатого скота (по Медведеву Г.Ф. с соавт., 2008): 1 - клитор, 2 - половые губы, 3 - отверстия вентральных и дорсальных желез, 4 - преддверие влагалища, 5 - отверстие мочеиспускательного канала, 6 - влагалище, 7 - мочевой пузырь, 8 -влагалищное отверстие шейки матки, 9 - шейка матки, 10 - тело матки, 11 -рога матки (на рисунке слева вскрыт правый рог); 12 - яйцевод, 13 - яичник,

14 - широкая маточная связка.

Внутренние половые органы. Дистальной частью внутренних половых органов является влагалище (vaginae, colpos), представляющее собой широкую, сжатую сверху вниз трубку длиной до 22 см, расположенную в тазовой области. На разрезе влагалище представляет собой горизонтальную щель. Внизу влагалище почти по всей длине прочно сращено с

мочеиспускательным каналом. У телок в месте перехода влагалища в преддверие влагалища отмечается сужение полового канала. Примерно на сантиметр впереди отверстия мочеиспускательного канала находится перегородка - мочеполовой клапан (hymen). Передняя часть влагалища имеет ампуловидное расширение, которое обхватывает со всех сторон шейку матки. В этой области между шейкой матки и стенками влагалища образуются боковые, верхний и нижний карманы. Наиболее хорошо выражен верхний карман, получивший название свода влагалища (fornix vaginae) (Медведев Г.Ф. и др., 2008; Максимов В.И. и др., 2016).

Матка (uterus, hystera, metra) у телок и не стельных молодых коров находится в тазовой полости, в ложбине лонного сращения, в то время как у многократно рожавших коров она смещается в брюшную полость. Шейка матки (cervix) - плотная, имеет длину 5-10 см и толщину 3-4,5 см. Она расположена в тазовой области и хорошо прощупывается рукой через прямую кишку. К середине беременности шейка матки перемещается в брюшную полость. Тело матки (corpus uteri) м сравнительно мягкое, имеет длину 2-5 см, спереди разделяется на два рога (cornua uteri). На протяжении 10-15 см рога сращены между собой, образуя снаружи хорошо заметную межроговую борозду (желоб). После раздвоения (бифуркации) рога расходятся в стороны, затем загибаются вниз и назад, а конечная часть их приподнимается вверх к яичникам и переходит в яйцеводы. В месте расхождения рога имеют диаметр 2-3,5 см, но по направлению к верхушке сильно истончаются. В среднем длина рогов небеременных телок составляет 28 см, ширина - 2,4 см, а у взрослых коров соответственно - 32,5 и 3,4 см. В области тела и рогов матки в эндометрии имеются особые образования - карункулы. В каждом роге 4 ряда карункулов, по 10-14 в ряду, всего - 80-112 (Медведев Г.Ф. и др., 2008; Акаевский А.И. и др., 2018; Зеленевский Н.В., Щипакин М.В., 2019).

Яйцеводы (oviductus, tuba uterina, salpinx) - две извитые трубочки, расположенные в складках брюшины, служат местом оплодотворения яйцеклеток и обеспечивают проведение их в рога матки. В зависимости от

возраста животных длина яйцеводов колеблется от 20 до 35 см. Яйцеводы берут свое начало от верхушки соответствующего рога матки (маточное отверстие) и заканчиваются в области яичника. В яйцеводах различают три части: начальная часть - перешеек (istmus) диаметром 1-3 мм примыкает к рогу матки и составляет около половины всей длины; средняя часть - ампула имеет диаметр 3-5 мм, а конечная часть - воронка, открывающаяся отверстием в брюшную полость, имеет диаметр 5-7 мм. Свободный длинный край воронки, который тесно прилегает к яичнику, получил название бахромки (fimbriae tubae). Бахромка обеспечивает попадание овулировавших яйцеклеток в отверстие яйцевода (Медведев Г.Ф. и др., 2008; Максимов В.И. и др., 2016).

Яичники (ovaria, oophoron) расположены на границе тазовой и брюшной полости. К верхушкам рогов матки яичники прикреплены с помощью яичниковой связки, являющейся частью широкой маточной связки. Яичниковая связка образует две складки: яйцеводную (mesosalpinx), в которую заключен яйцевод, и яичниковую (lig. ovarii proprium). Соединяясь, эти складки образуют открытый яичниковый карман, в котором располагается яичник. Яичники имеют яйцевидную или округлую форму, их длина составляет 32-42 мм, ширина - 19-32 мм, толщина - 13-19 мм, масса - 10-19 г. Яичник имеет белочную оболочку, которая придает ему соответствующую форму. В яичнике различают два слоя: центральный мозговой и периферический корковый (паренхиматозный). В мозговом слое содержатся кровеносные сосуды, нервы и рыхлая соединительная ткань. Корковый слой состоит из клеток соединительной ткани, желтых тел и фолликулов на различных стадиях развития (Медведев Г.Ф. и др., 2008).

Таким образом, литературные данные показывают достаточно подробное описание морфологических особенностей строения половых органов у самок крупного рогатого скота, однако в доступной литературе не представлена информация о результативности OPU у пород крупного рогатого скота, используемых в скотоводстве РФ.

1.2. Особенности полового цикла у самок крупного рогатого скота

Общие принципы гормональной регуляции репродуктивной функции самок домашних животных, являются одинаковыми для различных видов животных, однако при этом наблюдаются некоторые видоспецифические и породные особенности. Так, например, у коров и свиней эструс происходит несколько раз в год, в то время как у некоторых других видов (лошади, овцы) полиэструс носит сезонный характер. Наблюдаются различия и в механизме овуляции. Как показано на рисунке 2, регуляция репродуктивной функции самок - это сложный процесс, в который вовлечены центральная нервная система, секреторные ткани и железы внутренней секреции, ткани-мишени.

Рис. 2. Общая схема гормональной регуляции репродуктивной функции самок млекопитающих (по Пташинской М., 2012)

У большинства видов домашних животных, включая крупный рогатый скот, овуляция происходит спонтанно, в то время как, например, у верблюдиц и крольчих овуляция является индуцированной, то есть происходит при стимулировании сенсорных рецепторов во влагалище и шейке матки во время коитуса (Прокофьев М.И., 1983).

Отрицательная обратная связь, обусловленная V прогестероном

Гормоны, участвующие в регуляции репродуктивной функции самок, и их функции (в части регуляции репродукции) обобщены в таблице 1 (по Пташинской М., 2012, с дополн.).

Таблица 1.

Гормоны, участвующие в регуляции репродуктивной функции самок

млекопитающих, и их функции (по Пташинской М., 2012, с дополн.)

Название Место секреции Мишень Основная функция Химическая структура

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Чинаров Роман Юрьевич, 2022 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Акаевский А.И., Селезнев С.Б., Юдичев Ю.Ф. Анатомия домашних животных // Аквариум-Принт, 2018, 640 с.

2. Алиев А.А. Липидный обмен и продуктивность жвачных животных // М.: Колос, 1980.

3. Баймишев Х.Б. Морфология яичников и репродуктивные качества телок в зависимости от возраста и двигательной активности // Ветеринария, 1999, № 11, с. 33-34.

4. Варенников М.В., Чомаев А.М., Оборин А.Е. Управление воспроизводством в молочном животноводстве. Изд. 2-е дополненное // М.: Мосагроген, 2014, 70 с. Электрооный ресурс. URL: http://www.mosagrogen.ru/pdf/MAG vosproizvodstvo 2014.pdf.

5. Вракин В.Ф., Сидорова М.В. Морфология с/х животных // М.: Агропромиздат, 1991, 528 с.

6. Вракин В.Ф., Сидорова М.В., Панов В.П., Иванова Л.Я. Практикум по анатомии с основами гистологии и эмбриологии сельскохозяйственных животных // М.: Колос, 2001, 272 с.

7. Гавриченко Н.И., Турчанова Л.Н. Особенности течения фолликулогенеза в период полового цикла в яичниках коров с различным уровнем плодовитости // Актуальные проблемы интенсивного развития животноводства, 2014, №17 (2), с. 193-198.

8. Глаголев П.А., Ипполитова В.М. Анатомия сельскохозяйственных животных с основами гистологии и эмбриологии // М.: Колос, 1977, 480 с.

9. Голубец Л.В., Дешко А.С., Бабенков В.Ю., Кысса И. С., Якубец Ю.А., Ерин С.Н., Попов М.В., Хромов Н.И. Влияние диаметра фолликулов и их количества на созревание ооцитов и их оплодотворяемость // Сборник научных статей по материалам XIX международной научно-практической конференции «Современные технологии сельскохозяйственного производства», г. Гродно, 2016, с. 135-136.

10. Грачева O.A., Пахомов r.A., Елдашев A3. Методы взятия крови у разных видов животных, птиц и рыб. Учебно-методическое пособие // Kазань: ФГОУ ВПО казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана», 2008, 33 с.

11. Гусев И.В., Боголюбова Н.В., Рыков P.A., Левина Г.Н. ^нтроль биохимического статуса свиней и коров: руководство // Дубровицы: ФГБНУ ВИЖ им. Л.К Эрнста, 2019, 40 с.

12. Зеленевский Н.В., Щипакин М.В. Aнатомия и физиология животных // Санкт-Петербург: Лань, 2019, 368 с.

13. Зиновьева H.A., Позябин С.В., Чинаров Р.Ю. Зиновьева H.A., Позябин С.В., Чинаров Р.Ю. Вспомогательные репродуктивные технологии: история становления и роль в развитии генетических технологий в скотоводстве (обзор) // Сельскохозяйственная биология, 2020, том 55, № 2, с. 225-242.

14. Kазарцев В.В., Ратошный A.H. Унифицированная система биохимического контроля за состоянием обмена веществ коров // Зоотехния, 1986, Т. 3, с. 323-330.

15. Kарымсаков T.H., Бекенов Д., Спанов A. Сравнительные результаты приживляемости сексированных эмбрионов, полученные методами «in vivo» и «in vitro» // Молочное и мясное скотоводство, 2017, № 6, с. 9-11.

16. ^дрин A.r. Ферменты крови и прогнозирование продуктивности молочного скота // Мичуринск-наукоград РФ: Изд-во Мичурин. гос. аграр. унта, 2006, 142с.

17. ^дряшов H.C, Ряябышев В.В. Aкушерство и гинекология сельскохозяйственных животных // Изд-во Моордов. Ун-та, 2004, 24 с.

18. Лакин Г.Ф. Биометрия. Учеб. пособие для биол. спец. вузов // М.: Высш. шк., 1990, 352 с.

19. Максимов В.И., Слесаренко H.A., Селезнев С.Б., Ветошкина r.A. Aнатомия и физиология домашних животных // М.: Инфра-М, 2016, 600 с.

20. Машталер Д.В., Голубец Л.В., Дешко А.С., Хромов Н.И. Некоторые аспекты трансвагинальной аспирации ооцитов крупного рогатого скота // FarmNews, 2018, № 1, с. 22-26.

21. Медведев Г.Ф., Гавриченко Н.И., Долин И.А. Биотехника размножения сельскохозяйственных животных. Ч. 1. Половой аппарат самок и самцов сельскохозяйственных животных и птиц: методические указания // Белорусская государственная сельскохозяйственная академия, г. Горки, 2008, 36 с.

22. Методические указания МУ 4.2.2039-05 "Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории" (утв. и введены в действие Главным государственным санитарным врачом РФ 23 декабря 2005 г.)

23. Назаров М.В., Гаврилов Б.В. Морфологические и физиологические особенности половой системы животных: метод. Указания // Краснодар: КубГАУ, 2019, 20 с.

24. Нежданов А.Г. Современное представление о половом цикле самок животных // Ветеринария, 2003, № 11, с. 32-36.

25. Некрасов Р.В., Головин А.В., Махаев Е.А. и др. Нормы потребностей молочного скота и свиней в питательных веществах: Монография / Под. ред. Р.В. Некрасова, А.В. Головина, Е.А. Махаева // Москва, 2018, 290 с.

26. Никитин Г.С. Современные подходы при получении и криоконсервации эмбрионов крупного рогатого скота in vitro // Международный вестник ветеринарии, 2021, № 3, с. 192-205.

27. Панкратова, А.В. Динамика фолликулогенеза у молочных коров / А.В. Панкратова, Г.Ю. Косовский, А.С. Самохин // Проблемы биологии продуктивных животных, 2011, № 4, с. 97-100.

28. Перерядкина С.П., Авдеенко В.С., Кочарян В.Д., Кемешев Ж.О. Особенности фолликулогенеза у коров мясных пород (казахская белоголовая, шевроле и герефорд) в контексте восстановления плодовитости // Известия

Нижневолжского агроуниверситетского комплекс: наука и высшее профессиональное образование, 2018, 2 (50), с. 227-235.

29. Пестис В.К., Голубец Л.В., Дешко А.С., Кысса И.С., Попов М.В. Получение ооцитов коров путем трансвагинальной пункции фолликулос // Доклады национальной академии наук Беларуси, 2016, 60 (91), с. 123-128.

30. Пестис В.К., Голубец Л.В., Дешко А.С., Кысса И.С., Попов М.В., Якубец Ю.А. Первый опыт получения эмбрионов крупного рогатого скота in vitro в системе трансвагинальной аспирации ооцитов (ТАО) // Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия аграрных наук, 2015, № 1, с. 86-91.

31. Пестис В.К., Голубец Л.В., Дешко А.С. Вспомогательные репродуктивные технологии в воспроизводстве и селекции крупного рогатого скота // Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия аграрных наук, 2019, Том 57, № 2, с. 192-203.

32. Плахова А.И. Повышение функциональной активности яичников и качества ооцитов у высокопродуктивных коров с использованием синтетических каротиноидов // Автореф. дисс. канд. вет. Наук, Санкт-Петербург, СПбГУВМ, 2020, 22 с.

33. Пособие по искусственному осеменению коров и телок // МСХ РФ, ОАО «Головной центр по воспроизводству с.-х. животных», М.: ФГБНУ «Росинформагротех», 2012, 50 с. (электронный ресурс, URL: http://www.chelagro.ru/legislation/zhivotnovodstvo/posobie isk osemenen 2012 moskva msh.pdf).

34. Прокофьев М.И. Регуляция размножения сельскохозяйственных животных // Л.: Наука, 1983, 263 с.

35. Прокофьев М.И. Регуляция воспроизводства крупного рогатого скота // М.: Московский рабочий, 1989, 69 с.

36. Пташинская М. (ред.) Краткое руководство по репродукции животных. Крупный рогатый скот, ч. 1 и 2, изд. 10-е // Intervet Internation BV, 2012, 176 с., ISBN 90-801886-6-2.

37. Ротарь Л.Н. Фенотипические и генетические маркеры, ассоциированные с количественной и качественной характеристикой ооцит-кумулюсных комплексов крупного рогатого скота // Дисс. канд. биол. наук, СПбГАУ, 2019, 105 с.

38. Ротарь Л.Н., Souza J.F. Морфологическая характеристика ооцит-кумулюсных комплексов Bos taurus и Bos indicus разного направления продуктивности // Российская сельскохозяйственная наука, 2019, № 3, с. 6466.

39. Савинков А.В., Баймишев Х.Б. Клинические и лабораторные методы исследования: учебное пособие // Кинель: РИЦ СГСХА, 2014, 219 с.

40. Сарсадских А.А., Абрамов С.В. Регуляция воспроизводства крупного рогатого скота с помощью гормональных препаратов на основе бусерелина и D-клопростенола // Молочное и мясное скотоводство, 2015, №2 3, с. 29-32.

41. Сингина Г.Н., Гавличек В., Тарадайник Н.П., Чинаров Р.Ю., Тарадайник Т.Е., Шедова Е.Н. Трансвагинальная аспирация фолликулов и способность OPU-ооцитов коров к эмбриональному развитию в условиях in vitro // Молочное и мясное скотоводство, 2019, № 6, с. 17-19.

42. Сингина Г.Н., Чинаров Р.Ю., Луканина В.А., Ворожбит Т.А. Влияние пролактина на качество ооцитов, полученных методом трансвагинальной пункции фолликулов телок // Сельскохозяйственная биология, 2021, № 6, с. 1148-1155.

43. Хрусталёва И.В., Михайлов Н. В., Шнейберг Я. И. Анатомия домашних животных // М.: Колос, 1994, 704 с.

44. Чинаров Р.Ю., Луканина В.А. Влияние технических параметров на результативность прижизненного получения ооцитов у телок симментальской породы // Достижения науки и техники АПК, 2022, Т. 36, № 1, с. 46-50.

45. Чинаров Р.Ю., Луканина В.А., Сингина Г.Н., Тарадайник Н.П. Результативность получения ооцитов коров при использовании различных

временных режимов трансвагинальной пункции фолликулов // Достижения науки и техники АПК, 2020, Т. 34, № 2, с. 57-60.

46. Чинаров Р.Ю., Позябин С.В., Тарадайник Н.П., Луканина В.А., Тарадайник Т.Е., Шумаков Н.И., Рыков Р.А., Боголюбова Н.В., Колодина Е.Н., Артемьева О.А., Гусев И.В., Сингина Г.Н. Методическое руководство по прижизненному получению ооцитов методом трансвагинальной сонографически-ассистированной пункции фолликулов у телок-доноров симментальской породы // Московская обл.: ФГБНУ ФИЦ ВИЖ им. Л.К. Эрнста, 2022, 32 с.

47. Эрнст Л.К., Сергеев Н.И. Трансплантация эмбрионов сельскохозяйственных животных // М.: Агропромиздат, 1989, 304 с.

48. Ahmad N., Townsend E.C., Dailey R.A., Inskeep E.K. Relationships of hormonal patterns and fertility to occurrence of two or three waves of ovarian follicles, before and after breeding, in beef cows and heifers // Animal Reproduction Science, 1997, 49, 13-28.

49. Armstrong D.G., McEvoy T.G., Baxter G., Robinson J.J., Hogg C.O., Woad K.J., Webb R., Sinclair K.D. Effect of dietary energy and protein on bovine follicular dynamics and embryo production in vitro: associations with the ovarian insulin-like growth factor system // Biology of Reproduction, 2001, 64, 1624-1632.

50. Baruselli P.S., Vieira L.M., Sa Filho M.F., Mingoti R.D., Ferreira R.M., Chiaratti M.R., Oliveira L.H., Sales J.N., Sartori R. Associations of insulin resistance later in lactation on fertility of dairy cows // Theriogenology, 2016, 86, 263-269.

51. Batista E.O.S., Macedo G.G., Sala R.V., Ortolan M., Sa Filho M.F., Del Valle T.A., Jesus E.F., Lopes R., Renno F.P., Baruselli P.S. Plasma antimullerian hormone as a predictor of ovarian antral follicular population in Bos indicus (Nelore) and Bos Taurus (Holstein) heifers // Reproduction in Domestic Animals, 2014, 49, 448-452.

52. Becker F., Kanitz W., Nürnberg G., Kurth J., Spitschak M. Comparison of repeated transvaginal ovum pick up in heifers by ultrasonographic and endoscopic instruments // Theriogenology, 1996, 46, 999-1007.

53. Bentele W., Humke R. Vergleich verschiedener Behandlunsmethoden mit einem Prostaglandinanalog bei amostrischen Rindem // Tierärztliche Umschr., 1989, 37 (2), 243-325.

54. Betteridge K.J. A history of farm animal embryo transfer and some associated techniques // Animal Reproduction Science, 2003, 79, 203-244.

55. Betteridge K.J., Smith C., Stubbings R.B., Xu K.P., King W.A. Potential genetic improvement of cattle by fertilization of fetal oocytes in vitro // J. Reproduction & Fertility, 1989, 38, 87-98.

56. Bols P.E., Leroy J.L., Vanholder T., Van Soom A. A comparison of a mechanical sector and a linear array transducer for ultrasound-guided transvaginal oocyte retrieval (OPU) in the cow // Theriogenology, 2004, 62, 906-914.

57. Bols P.E.J., Stout T.A.E. Transvaginal ultrasound-guided oocyte retrieval (OPU: Ovum Pick-Up) in cows and mares // In: Animal Biotechnology 1. Reproductive Biotechnologies. Eds. Niemann H., Wrenzycki C., 2018, p. 209-234.

58. Bols P.E., Van Soom A., Ysebaert M.T., Vandenheede J.M., de Kruif A. Effects of aspiration vacuum and needle diameter on cumulus oocyte complex morphology and developmental capacity of bovine oocytes // Theriogenology, 1996, 45, 1001-1014.

59. Bols P.E., Ysebaert M.T., Van Soom A., de Kruif A. Effects of needle tip bevel and aspiration procedure on the morphology and developmental capacity of bovine compact cumulus oocyte complexes // Theriogenology, 1997, 47, 12211236.

60. Boni R. Ovum pick-up in cattle: A 25 years retrospective analysis // Animal Reproduction, 2012, 9 (3), 362-369.

61. Boni R., Roelofsen M.W.M., Pieterse M.C., Wurth Y.A., Kruip T.A.M. Ovum Pick-Up and embryo- production in vitro: an established procedure in cattle

// In: Proceedings of the VIII Congress. European Embryo Transfer Association, 1992, Lyon, France. Lyon: AETE. pp. 128.

62. Bousquet D., Twagiramungu H., Morin N., Brisson C., Carboneau G., Durocher J. In vitro embryo production in the cow: an effective alternative to the conventional embryo production approach // Theriogenology, 1999, 51, 59-70.

63. Brackett B.G., Bousquet D., Boice M.L., Donawick W.J., Evans J.F., Dressel M.A. Normal development following in vitro fertilization in the cow // Biology of Reproduction, 1982, 27, 147-158.

64. Burke C.R., Day M.L., Bunt C.R., Macmillan K.L. Use of a small dose of estradiol benzoate during diestrus to synchronize development of the ovulatory follicle in cattle // J. Animal Science, 2000, 78, 145-151.

65. Callesen H., Greve T., Christensen F. Ultrasonically guided aspiration of bovine follicular oocytes // Theriogenology, 1987, 27, 217.

66. Cavalieri F.L.B., Morotti F., Seneda M.M., Colombo A.H.B., Andreazzi M.A., Emanuelli I.P., Rigolon L.P. Improvement of bovine in vitro embryo production by ovarian follicular wave synchronization prior to ovum pick-up // Theriogenology, 2018, 117, 57-60.

67. Chastant-Maillard S., Quinton H., Lauffenburger J., Cordonnier-Lefort N., Richard C., Marchal J., Mormede P., Renard J.P. Consequences of transvaginal follicular puncture on well-being in cows // Reproduction, 2003, 125, 555-563.

68. Chaubal S.A., Ferre L.B., Molina J.A., Faber D.C., Bols P.E., Rezamand P., Tian X., Yang X. Hormonal treatments for increasing the oocyte and embryo production in an OPU-IVP system // Theriogenology, 2007, 67, 719-728.

69. Chaubal S.A., Molina J.A., Ohlrichs C.L., Ferre L.B., Faber D.C., Bols P.E.J., Riesen J.W., Tian X., Yang X. Comparison of different transvaginal ovum pick-up protocols to optimise oocyte retrieval and embryo production over a 10-week period in cows // Theriogenology, 2006, 65, 1631-1648.

70. Chinarov R.Y., Singina G.N., Havlicek V., Taradajnik N.P., Taradajnik T.E., Shedova E.N., Pozyabin S.V. Efficiency of embryo production using OPU-

oocytes recovered from stimulated and non-stimulated cows // Reproduction, Fertility and Development, 2021, 33 (2), 169-170.

71. Chinarov R.Y., Singina G.N., Taradajnik N.P., Pozyabin S.V. The quality of cows' oocyte derived at different timing regimens of transvaginal follicular puncture // J. of Animal Science, 2021, 99 (Suppl. 3), 330-331.

72. De la Isla G., Ayala A., Ake R., Gonzalez A. Effects of body condition change over oestrus, follicular development and ovulation rate in Pelibuey ewes under tropical conditions // Tropical and Subtropical Agroecosystems, 2011, 14, 337-347.

73. De Roover R., Bolsb P.E.J., Genicota G., Hanzen Ch. Characterisation of low, medium and high responders following FSH stimulation prior to ultrasound-guided transvaginal oocyte retrieval in cows // Theriogenology, 2005, 63, 19021913.

74. Ding L.J., Tian H.B., Wang J.J., Chen J., Sha H.Y., Chen J.Q., Cheng G.X. Different intervals of ovum pick- up affect the competence of oocytes to support the preimplantation development of cloned bovine embryos // Molecular Reproduction and Development, 2008, 75, 1710-1715.

75. Elsden R.P., Hasler J.F., Seidel G.E. Jr. Nonsurgical recovery of bovine eggs // Theriogenology, 1976, 6, 523-532.

76. Ericksson B.H. Developmental and senescence of the postnatal bovine ovary // J. Animal Science, 1966, 25, 800-805.

77. Faber D.C., Molina J.A., Ohlrichs C.O., Vander Zwaag D.F., Ferre L.B. Commercialization of animal biotechnology // Theriogenology, 2003, 59, 125-38.

78. Fayrer-Hosken R.A., Caudle A.B. The laparoscope in follicular oocyte collection and gamete intrafallopian transfer and fertilization (GIFT) // Theriogenology, 1991, 36, 709-725.

79. Fernandes C.A.D.C., Miyauchi T.M., Figueiredo A.C.S.D., Palhao M.P., Varago F.C., Nogueira E.S.C., Neves J.P., Miyauchi T.A. Hormonal protocols for in vitro production of Zebu and taurine embryos // Pesq Agropec Bras, 2014, 49, 813-817.

80. Ferré L., Kjelland M., Strabech L., Hyttel P., Mermillod P., Ross P. Review: Recent advances in bovine in vitro embryo production: Reproductive biotechnology history and methods // Animal, 2019, 1-14.

81. Ferreira R.M., Ayres H., Chiaratti M.R., Ferraz M.L., Araújo A.B., Rodrigues C.A., Watanabe Y.F., Vireque A.A., Joaquim D.C., Smith L.C., Meirelles F.V., Baruselli P.S. The low fertility of repeat-breeder cows during summer heat stress is related to a low oocyte competence to develop into blastocysts // J. Dairy Science, 2011, 94, 2383-2392.

82. Ferreira R.M., Chiaratti M.R., Macabelli C.H., Rodrigues C.A., Ferraz M.L., Watanabe Y.F., Smith L.C., Meirelles F.V., Baruselli P.S. The infertility of repeat-breeder cows during summer is associated with decreased mitochondrial DNA and increased expression of mitochondrial and apoptotic genes in oocytes // Biology of Reproduction, 2016, 94 (66), 1-10.

83. Figueiredo R.A., Barros C.M., Pinheiro O.L., Soler J.M. Ovarian follicular dynamics in Nelore breed (Bos indicus) cattle // Theriogenology, 1997, 47, 1489-1505.

84. Galli C, Crotti G, Notari C, Turini P, Duchi R, et al. Embryo production by ovum pick up from live donors // Theriogenology, 2001, 55, 1341-1357.

85. Gimenes L.U., Ferraz M.L., Fantinato-Neto P., Chiaratti M.R., Mesquita L.G., Sá Filho M.F., Meirelles F.V., Trinca L.A., Rennó F.P., Watanabe Y.F., Baruselli P.S. The interval between the emergence of pharmacologically synchronized ovarian follicular waves and ovum pickup does not significantly affect in vitro embryo production in Bos indicus, Bos taurus, and Bubalus bubalis // Theriogenology, 2015, 83, 385-393.

86. Gonzalez Moreno C., Fontana C., Cocconcelli P.S., Callegari M.L., Otero M.C. Vaginal microbial communities from synchronized heifers and cows with reproductive disorders // Journal of Applied Microbiology, 2016, 121 (5), 12321241.

vitro fertilization of in-vitro matured follicular oocytes // J. Reproduction and Fertility, 1988, 83, 753-758.

88. Gradela A., Esper C.R., Matos S.P.M., Lanza J.A., Deragon L.A.G., Malheiros R.M. Dominant follicle removal by ultrasound guided transvaginal aspiration and superovulatory response in Nellore cows // Arq Bras Med Vet Zootec, 2000, 52, 53-58.

89. Guerreiro B.M., Batista E.O., Vieira L.M., Sa Filho M.F., Rodrigues C.A., Castro Netto A., Silveira C.R., Bayeux B.M., Dias E.A., Monteiro F.M., Accorsi M., Lopes R.N., Baruselli P.S. Plasma anti-mullerian hormone: an endocrine marker for in vitro embryo production from Bos taurus and Bos indicus donors // Domestic Animal Endocrinology, 2014, 49, 96-104.

90. Hamilton S.A., Garverick H.A., Kesler D.H., Xu Z.Z., Loos K., Youngquist R.S., Salfen B.E. Characterization of ovarian follicular cysts and associated endocrine profiles in dairy cows // Biology of Reproduction, 1995, 53 (4), 890-898.

91. Ireland J.J., Roche J.F. Development of antral follicles in cattle after prostaglandin-induced luteolysis: changes in serum hormones, steroids in follicular fluid, and gonadotropin receptors // Endocrinology, 1982, 111(6), 2077-2086.

92. Iwata H., Goto H., Tanaka H., Sakaguchi Y., Kimura K., Kuwayama T., Monji Y. Effect of maternal age on mitochondrial DNA copy number, ATP content and IVF outcome of bovine oocytes // Reproduction, Fertilily and Development, 2011, 23, 424-432.

93. Kaneko J.J., Harvey J.W., Bruss M.L. Clinical Biochemistry of Domestic Animals // Academic Press, San Diego, CA, 2008.

94. Kruip T.A.M., Pieterse M.C., van Beneden T.H., Vos P.L., Wurth Y.A. et al. A new method for bovine embryo production: a potential alternative to superovulation // Veterinary Records, 1991, 128, 208-210.

95. Kruip T.A.M., Boni R., Wurth Y.A., Roelofsen M., Pieterse M.C. Potential use of Ovum Pick-Up for embryo production and breeding in cattle // Theriogenology, 1994, 42, 675-683.

96. Lambert R.D., Bernard C., Rioux J.E., Beland R., D'Amours D., Montreuil A. Endoscopy in cattle by the paralumbar route: technique for ovarian examination and follicular aspiration // Theriogenology, 1983, 20, 149-161.

97. Li F., Chen X., Pi W., Liu C., Shi Z. Collection of oocytes through transvaginal ovum pick-up for in vitro embryo production in Nanyang Yellow cattle // Reproduction of Domestic Animals, 2007, 42, 666-670.

98. Lopes A.S., Martinussen T., Greve T., Callesen H. Effect of days post-partum, breed and ovum pick- up scheme on bovine oocyte recovery and embryo development // Reproduction of Domestic Animals, 2006, 41, 196-203.

99. Lucy M.C., Staples C.R., Michel F.M., Thatcher W.W. Energy balance and size and number of ovarian follicles detected by ultrasonography in early postpartum dairy cows // J. Dairy Science, 1991, 74, 473-482.

100. Macrae A.I., Whitaker D.A., Burrough E., Dowell A., Kelly J.M. Use of metabolic profiles for the assessment of dietary adequacy in UK dairy herds // Veterinary Records, 2006, 159 (20), 655-661.

101. Manik R.S., Singla S.K., Palta P. Collection of oocytes through transvaginal ultrasound-guided aspiration of follicles in an Indian breed of cattle // Animal Reproduction Science, 2003, 76, 155-161.

102. Mapletoft R.J. History and perspectives on bovine embryo transfer // Animal Reproduction, 2013, 10 (3), 168-173.

103. Murphy M.G., Enright W.J., Crowe M.A., McConnell K., Spicer L.J., Boland Roche M.P.J.F. Effect of dietary intake on pattern of growth of dominant follicles during the oestrous cycle in beef heifers // J. Reproduction and Fertility, 1991, 92 (2), 333-338.

104. Ongaratto F.L., Rodriguez-Villamil P., Tribulo A., Bo G.A. Effect of follicle wave synchronization and gonadotropin treatments on the number and quality of cumulus-oocyte complex obtained by ultrasound-guided ovum pick-up in beef cattle // Animal Reproduction, 2015, 12, 876-883.

105. Parrish J.J. Bovine In vitro fertilization: In vitro oocyte maturation and sperm capacitation with heparin // Theriogenology, 2014, V. 81(1), P. 67-73.

106. Pieterse M.C., Kappen K.A., Kruip T.A., Taverne M.A. Aspiration of bovine oocytes during transvaginal ultrasound scanning of the ovaries // Theriogenology, 1988, 30, 751-762.

107. Pieterse M.C., Vos P.L.A.M., Kruip T.A.M., Wurth Y.A., van Beneden T.H., Willemse A.H., Taverne M.A. Transvaginal ultrasound guided follicular aspiration of bovine oocytes // Theriogenology, 1991, 35, 857-862.

108. Pontes J.H.F., Silva K.C.F., Basso A.C., Ferreira C.R., Santos G.M., Sanches B.V., Porcionato J.P., Vieira P.H., Faifer F.S., Sterza F.A., Schenk J.L., Seneda M.M. Large-scale in vitro embryo production and pregnancy rates from Bos taurus, Bos indicus, and indicus-taurus dairy cows using sexed sperm // Theriogenology, 2010, 74, 1349-1355.

109. Presicce G.A., Neglia G., Salzano A., Padalino B., Longobardi V., Vecchio D., De Carlo E., Gasparrini B. Efficacy of repeated ovum pick-up in Podolic cattle for preservation strategies: a pilot study // Italian J. Animal Science, 2020, 19 (1), 31-40.

110. Qi M., Yao Y., Ma H., Wang J., Zhao X., Liu L., Tang X., Zhang L., Zhang S., Sun F. Transvaginal ultrasound guided Ovum Pick-up (OPU) in cattle // J. Biomimetics, Biomaterials and Biomedical Engineering, 2013, 18, 118.

111. Reichenbach H.D., Wiebke N.H., Modl J., Zhu J., Brem G. Laparoscopy through the vaginal fornix of cows for the repeated aspiration of follicular oocytes // Veterinary Records, 1994, 135, 353-356.

112. Rhodes F.M., Fitzpatrick L.A., Entwistle K.W., De'ath G. Sequential changes in ovarian follicular dynamics in Bos indicus heifers before and after nutritional anoestrus // J. Reproduction and Fertility, 1995, 104, 41-49

113. Rizos D., Burke L., Duffy P., Wade M., Mee J.F., O'Farrell K.J., Macsiurtain M., Boland M.P., Lonergan P. Comparisons between nulliparous heifers and cows as oocyte donors for embryo production in vitro // Theriogenology, 2005, 63, 939-949.

114. Roth Z., Arav A., Braw-Tai R. Effect of treatment with follicle-stimulating hormone or bovine somatotropin on the quality of oocytes aspirated in

115. Rowe R.F., Del Campo M.R., Critser J.K., Ginther O.J. Embryo transfer in cattle: nonsurgical transfer // American J. Veterinary Res., 1980, 41, 1024-1028.

116. Rozenkrans C.F., First N.L. Effect of free amino acids and vitamins on cleavage and developmental rate of bovine zygotes in vitro // J. Anim. Science, 1994, V. 72, 434-437.

117. Rubin K.C.P., Pontes J.H.F., Nonato-Junior I., Ereno-Junior J.C., Pansard H. Influencia do grau de sangue Nelore na produ?ao in vivo de oocitos // Acta Scientiae Veterinariae, 2005, 33, 183.

118. Santl B., Wenigerkind H., Schernthaner W., Modl J., Stojkovic M., Prelle K., Holtz W., Brem G., Wolf E. Comparison of ultrasound-guided vs laparoscopic transvaginal ovum pick-up (OPU) in Simmental heifers // Theriogenology, 1998, 50, 89-100.

119. Sartori R., Gimenes L.U., Monteiro P.L.Jr, Melo L.F., Baruselli P.S., Bastos M.R. Metabolic and endocrine differences between Bos taurus and Bos indicus females that impact the interaction of nutrition with reproduction // Theriogenology, 2016, 86, 32-40.

120. Sasamoto Y., Sakaguchi M., Katagiri S., Yamada Y., Takahashi Y. The effects of twisting and type of aspiration needle on the efficiency of transvaginal ultrasound-guided ovum pick-up in cattle // J. Veterinary Medicine and Science, 2003, 65, 1083-1086.

121. Savio J.D., Keenan L., Boland M.P., Roche J.F. Pattern of growth of the dominant follicles during the oestrous cycle of heifers // J. Reproduction and Fertility, 1988, 83, 663-671.

122. Segerson E.C., Hansen T.R., Libby D.W., Randel R.D., Getz W.R. Ovarian and uterine morphology and function in Angus and Brahman cows // J. Animal Science, 1984, 59,1026-1046.

123. Sendag S., Cetin Y., Alan M., Hadeler K.G., Niemann H. Effects of eCG and FSH on ovarian response, recovery rate and number and quality of oocytes

obtained by ovum pick-up in Holstein cows // Animal Reproduction Science, 2008, 106, 208-214.

124. Seneda M.M., Esper C.R., Garcia J.M., Oliveira J.A.d., Vantini R. Relationship between follicle size and ultrasound-guided transvaginal oocyte recovery // Animal Reproduction Science, 2001, 67, 37-43.

125. Simon L., Burgartz L., Rath D., Niemann H. Repeated bovine oocyte collection by means of a permanently rinsed ultrasound guided aspiration unit // Theriogenology, 1993, 39, 312 (abstract).

126. Singina G.N., Chinarov R.Yu., Lukanina V.A., Vorozhbit T.A. The effect of prolactin on the quality of heifer oocytes retrieved by transvaginal puncture of follicles // Sel'skokhozyaistvennaya Biologiya [Agricultural Biology], 2021, 56 (6), 1148-1155.

127. Singina G.N., Shedova E.N., Lopukhov A.V., Mityashova O.S., Lebedeva I.Y. Delaying effects of prolactin and growth hormone on aging processes in bovine oocytes matured in vitro // Pharmaceuticals, 2021, V. 14 (7), 684.

128. Sirois J., Fortune J.E. Ovarian follicular dynamics during the estrous cycle monitored by real-time ultrasonography // Biology of Reproduction, 1988, 39, 308-107.

129. Smith C. Applications of embryo transfer in animal breeding. Theriogenology, 1988, 29, 203-212

130. Takuma T., Sakai S., Ezoe D., Ichimaru H., Jinnouchi T., Kaedei Y., Nagai T., Otoi T. Effects of season and reproductive phase on the quality, quantity and developmental competence of oocytes aspirated Japanese Black cows // J Reproduction and Development, 2010, 56, 55-59.

131. Taylor C., Raj amahendran R. Follicular dynamics, corpus luteum growth and regression in lactating dairy cattle // Can. J. Animal Science, 1991, 71, 61-68.

132. Thibier M. Stabilization of numbers of in vivo collected embryos in cattle but significant increases of in vitro bovine produced embryos in some parts of the world // IETS Embryo Transfer Society Newsletter, 2004, 22, 12-19.

133. Thornton I.I. Factors affecting the urinary excretion of urea nitrogen in cattle the plasma urea nitrogen concentration //Australian J. Agricultural Research 1970, 21(1), 182.

134. Torres-Júnior J.R., Pires M.F.A., de Sá W.F., Ferreira A.M., Viana J.H., Camargo L.S., Ramos A.A., Folhadella I.M., Polisseni J., Freitas C., Clemente C.A., de Sá Filho M.F., Paula-Lopes F.F., Baruselli P.S. Effect of maternal heat-stress on follicular growth and oocyte competence in Bos indicus cattle // Theriogenology, 2008, 69, 155-166.

135. Townson D.H., Tsang C.W., Butler W.R., Frajblat M., Griel L.C., Jr., Johnson C.J., Milvae R.A., Niksic G.M., Pate J.L. Relationship of fertility to ovarian follicular waves before breeding in dairy cows // J. Animal Science, 2002, 80, 10531058.

136. Velazquez M.A. Assisted reproductive technologies in cattle: applications in livestock production, biomedical research and conservation biology // Annual Review of Biomedical Sciences, 2008, 10, 36-62.

137. Viana J.H.M., Ferreira A.M., Sá W.F., Camargo L.S.A. Follicular dynamics in zebu cattle // Pesquisa Agropecuária Brasileira, 2000, 35, 2501-2509.

138. Ward F.A., Lonergan P., Enright B.P., Boland M.P. Factors affecting recovery and quality of oocytes for bovine embryo production in vitro using ovum pick-up technology // Theriogenology, 2000, 54, 433-446.

139. Willett E.L., Black W.G., Casida L.E., Stone W.H., Buckner P.J. Successful transplantation of a fertilized bovine ovum // Science, 1951, 113, 247.

140. Wolfenson D., Roth Z., Meidan R. Impaired reproduction in heat-stressed cattle: basic and applied aspects // Animal Reproduction Science, 2000, 6061, 535-547.

141. Zeron Y., Ocheretny A., Kedar O. Seasonal changes in bovine fertility: relation to developmental competence of oocytes, membrane properties and fatty acid composition of follicles // Reproduction, 2001, 121, 447-454.

142. Zinovieva N.A., Pozyabin S.V., Chinarov R.Yu. Assisted reproductive technologies: the history and the role in the development of genetic technologies in

ооцитов