Клинико-диагностическое и прогностическое значение обнаружения core-антигена вируса гепатита C у инфицированных детей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.02, кандидат наук Лейбман, Елена Александровна

• Лейбман, Елена Александровна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Лейбман, Елена Александровна

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Вирус гепатита С и организация его генома

1.2 Строение и функции core-белка

1.3 Эпидемический процесс гепатита С у детей в РФ

1.4 Особенности клинического течения гепатита С у детей

1.5 Лабораторная диагностика HCV-инфекции

1.6 ^re-Ag как новый маркер HCV-инфекции

1.7 Заключение по обзору литературы

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Объём исследования и характеристика пациентов

2.2 Дизайн исследования

2.3 Методы обследования

2.4 Статистическая обработка данных

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1 Результаты качественного и количественного определения core-Ag у детей

3.2 Зависимость концентрации core^g от вирусных факторов у детей с ХГС

3.2.1 Зависимость содержания core^g от концентрации РНК HCV

3.2.2 Зависимость концентрации core^g от субтипа вируса

3.3 Зависимость содержания core^g от специфических антител у детей с ХГС

3.3.1 Взаимосвязь core^g и anti-core IgM

3.3.2 Взаимосвязь core^g и anti-core IgG

3.4 Клиническое и прогностическое значение core^g при ХГС у детей

3.4.1 Клинико-анамнестические характеристики детей с ХГС

3.4.2 Анализ потенциальной связи core-Ag и клинико-анамнестических данных детей с ХГС у детей

3.4.3 Изучение связи еоге-Л§ и биохимических данных у детей с ХГС

3.4.4 Связь еоге-Л§ и фиброза печени у детей с ХГС

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ако — аминокислотный (-ые) остаток (остатки) АЛТ — аланинаминотрансфераза АСТ — аспартатаминотрасфераза

ВИЧ-инфекция — инфекция, вызываемая вирусом иммунодефицита человека ВН — вирусная нагрузка

ВОЗ — Всемирная организация здравоохранения ВПЗ — внепеченочные знаки

ГГТП — гаммаглутамилтранспептидаза

ДНК — дезоксирибонуклеиновая кислота

ИФА — иммуноферментный анализ

кДНК — комплементарная ДНК

кПа — килопаскаль

н.о. — нуклеотидные остатки

НТО — нетранслируемая область

ОПЦ — отрицательная прогностическая ценность (метода) ОТ-ПЦР — полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией пг/мл — пикограмм на миллилитр

ППЦ — положительная прогностическая ценность (метода)

РНК — рибонуклеиновая кислота

РФ — Российская Федерация

УЗИ — ультразвуковое исследование

фмоль/л — фемтомоль (10-15 моля) /литр

ХГС — хронический гепатит С

ХЛИА — хемилюнисцентный иммуноанализ

ЩФ — щелочная фосфатаза

Anti-HCV — антитела к антигенам вируса гепатита С Core^g — тоге-антиген

HCV-инфекция — инфекция, вызванная вирусом гепатита С (HCV)

IgM(G) — immunoglobulin M (G), иммуноглобулин класса M(G)

IRES — внутренний рибосомальный сайт посадки

METAVIR — шкала, предложенная французской группой METAVIR, разграничивающая стадии фиброза

Ме (медиана) — значение, которое делит упорядоченный по возрастанию (убыванию) массив исходных наблюдений пополам М - среднее значение

m - ошибка среднего

NS — неструктурные белки

Q1 — первый квартиль (он же 25% процентиль) - значение, отсекающее 25% наименьших значений выборки

Q3-Q1 — совокупность значений выборки, попадающих в интервал больше Q1, но меньше Q3

Q3 — третий квартиль (он же 75% процентиль) - значение, отсекающее 75% наименьших значений выборки (или 25% наибольших) 95%ДИ - 95%доверительный интервал

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-диагностическое и прогностическое значение обнаружения core-антигена вируса гепатита C у инфицированных детей»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования

Вирусный гепатит С характеризуется широким распространением во всем мире и высоким риском развития хронической патологии. Для естественного течения хронического гепатита С (ХГС) свойственно прогрессирующее поражение печени, которое через несколько десятков лет может завершиться циррозом печени и первичной гепатоклеточной карциномой [Alter H.J. et al., 2000; Alberti A. et al., 2004; Perz J.F. et al., 2006].

В Российской Федерации (РФ) наблюдается неблагоприятная эпидемиологическая ситуация по вирусному гепатиту С, доля серопозитивных лиц составляет около 4% [Daw M.A. et al., 2016; Petruzziello A. et al., 2016]. На такие страны как Китай, Пакистан, Нигерия, Египет, Индия и Россия приходится более половины всех инфицированных людей мира [Gower Е. et al., 2014]. По данным формы №1 «Сведения об инфекционных и паразитарных заболеваниях» показатели заболеваемости острым гепатитом С в РФ невысокие: 1,24 зарегистрированных случаев на 100 тысяч населения за 2016 г. [http://www.rospotrebnadzor.ru/]. Для сравнения, в 2000 г. этот показатель на 100 тысяч населения составлял 21,1. Однако количество случаев впервые выявленного ХГС за этот период увеличилось. Так в 2000 г. оно составляло 22,2 на 100 тысяч населения, а в 2016 году - 36,2 на 100 тысяч населения [http://www.rospotrebnadzor.ru/]. Пик значений впервые зарегистрированных случаев ХГС пришелся на 2009 год и составил - 40,9 на 100 тысяч населения [http://www.rospotrebnadzor.ru/]. Общий показатель хронически инфицированных лиц остается высоким - 335,8 на 100 тысяч населения [Mukomolov S.L. et al., 2016]. Надо учесть, что ХГС у некоторых взрослых имеет истоки в детском или подростковом возрасте. Проблема гепатита С у детей остается злободневной в связи с ростом количества женщин детородного возраста, инфицированных вирусом гепатита С (HCV), и риском вертикальной передачи вируса [Кистенева Л.Б. и др., 2012]. Развитие хронической HCV-инфекции в детском возрасте может

привести к развитию цирроза печени, гепатоклеточной карциноме и тяжелым внепеченочным проявлениям в молодом возрасте.

Гепатит С у детей в большинстве случаев протекает без выраженных клинических проявлений [Каганов Б.С. и др., 2005; Мартынова Г.П. и др., 2013], что создаёт трудности в своевременной диагностике инфекции, оценке прогноза течения и необходимости проведения терапии. Согласно опубликованным данным около 50% детей с ХГС уже в подростковом возрасте имеют легкий и умеренный фиброз, а 6-20% детей с ХГС — выраженный фиброз (на уровне стадии 3 и 4 по шкале METAVIR) [Mohan P. et al., 2007; Goodman Z.D. et al., 2008; Mohan P. et al., 2013]. Поэтому инфицированные дети нуждаются в оценке активности инфекционного процесса, в оценке тяжести поражения печени и, как следствие, необходимости назначения терапии.

Критерии начала терапии в детском возрасте четко не разработаны. Трудности, связанные с лечением препаратами на основе пегелированного интерферона в комбинации с рибавирином, известны: невысокая частота достижения устойчивого вирусологического ответа при 1 -м генотипе вируса; выраженные побочные эффекты терапии; высокая стоимость. Повышение эффективности, снижение выраженности побочных эффектов возможны при применении различных схем терапии на основе препаратов прямого противовирусного действия. Однако клинические исследования с использованием препаратов прямого противовирусного действия у детей на данный момент широко не проводятся [Garrison K. L. et al., 2016; Schwarz K et al., 2016; Kirby B. et al., 2015; Younossi Z.M. et al., 2016]. Перспективы использования безинтерфероновых схем терапии у детей позволяют многим авторам рекомендовать на данный момент детям, у которых низкие темпы развития фиброза печени, не проводить терапию препаратами на основе пегелированного интерферона в комбинации с рибавирином [Baker R.D. et al. 2015; А. El Sherbini et al. 2015]. В связи с вышесказанным, изучение факторов и маркеров прогрессирования HCV-инфекции у детей особенно актуально.

Современный этап диагностики вирусного гепатита С отмечается разработкой и внедрением в клиническую практику тест-систем для определения core-антигена (core-Ag). Появившиеся возможности определения core-Ag в сыворотке крови и отсутствие опыта оценки его определения с учетом генетических вариантов вируса, циркулирующих на территории РФ, недостаточная изученность роли core-Ag в патогенезе ХГС, отсутствие данных о взаимосвязи этого антигена с клинико-лабораторными и инструментальными показателями у детей с ХГС, а также взаимосвязи со специфическим иммунным ответом на ^re-Ag — все это определяет интерес к исследованию наличия core-Ag в сыворотке крови инфицированных детей.

Степень разработанности темы исследования

Более 15 лет проводились работы по созданию тест-систем для определения core-Ag с высокой аналитической чувствительностью [Takahashi K еt а!., 1992, Tanaka Т. ct а1, 1995; Aoyagi K. et al., 1999; Komatsu F., Takasaki K., 1999; Icardi G. et al., 2003; Morota K. et al., 2009; Ross R.S. et al., 2010; Murayama A. et al., 2012; Tedder R.S. et al., 2013]. В 90-х годах ХХ столетия была доказана возможность обнаружения core-антигена в сыворотке крови у больных, как с острой, так и с хронической инфекцией [Tanaka T. et al., 1995; Komatsu F., Takasaki K., 1999; Peterson J. et al., 2000; Courouce A.M. et al., 2000]. Так, в 1995 г. Tanaka T. и соавт. разработали иммуноферментный анализ (ИФА) для определения core-Ag и показали, что этот антиген может быть обнаружен в сыворотке крови больных ХГС и его количество коррелирует с уровнем рибонуклеиновой кислоты вируса гепатита С (РНК HCV) в сыворотке. Ряд исследований в этой области [Tanaka T. et al., 1995; Aoyagi K. et al., 1999; Komatsu F., Takasaki K., 1999] завершились появлением в 1999-2000 гг. первых диагностических наборов для качественного определения core-Ag методом ИФА, а в 2003 г. - для количественного определения core-Ag в крови [Icardi G. et al., 2003].

Хорошая корреляция выявления core-Ag с РНК HCV позволила исследователям предложить тест-системы для контроля эффективности терапии

[Komatsu F., Takasaki K., 1999; Veillon P. et al., 2003; Soffredini R. et al., 2004]. Практическое использование этих тест-систем не нашло широкого применения из-за их недостаточной чувствительности. Нижний предел чувствительности количественного теста был равен 3 пг/мл [Icardi G. et al., 2003], качественного -1,5 пг/мл [Krajden M. et al., 2004]. Дальнейшие исследования в этой области были направлены на повышение чувствительности определения этого антигена. В 2009 году появилась коммерческая тест-система «ARCHITECT HCV Ag» (Abbott; США) с высокой чувствительность (нижний предел определения равен 3 фмоль/л, что соответствует 0,06 пг/мл) и демонстрирующая сильную корреляцию между содержанием core-Ag и РНК HCV в сыворотке крови [Morota K. et al., 2009; Ross R.S. et al., 2010; Murayama A. et al., 2012; Tedder R.S. et al., 2013; Park Y. et al., 2010].

Параллельно изучались структура, свойства и функции core-белка. Стало известно, что соге-белок вызывает в инфицированной клетке окислительный стресс [Korenaga M. еt а!., 2005; Ivanov A.V. еt а!., 2016], нарушение метаболизма липидов [Perlemuter G. et al., 2002; Tsutsumi T. et al., 2002; Hourioux C. et al., 2007; Tanaka N. еt а!, 2008], нарушение защитных антивирусных механизмов [Lukens J.R. et al., 2008; Stone A.E. et al., 2014], индуцирует канцерогенез [Yamanaka T. et al., 2002; Fujinaga H. et al., 2011] и фиброгенез [Sansonno D. еt а!, 1995; Benzoubir N. et al., 2013].

Диагностическая значимость обнаружения core-антигена рассматривалось в работах ряда исследователей [Morota K. еt а!, 1995; Icardi G. еt а!, 2003; Ross R.S. еt а1 2010; Ergunay K. еt а1, 2011; Park Y. еt а1, 2010; Tedder S. еt а1, 2013]. Но, несмотря на имеющиеся успехи в области изучения этого антигена и разработки новых диагностических тест-систем для его выявления, многие клинико-диагностические и прогностические аспекты оставались неясными к моменту начала диссертационной работы. В первую очередь это относится к пониманию значения обнаружения core-Ag у детей с хроническим гепатитом С (ХГС). Лишь в одной статье, посвященной изучению диагностической значимости этого антигена, были включены дети: из 272 анализируемых сывороток только 11 были

детскими [Ег§Дпау К. е1 а1., 2011]. Не отражены в научной литературе данные, касающиеся взаимосвязи соге-Л§ и РНК ИСУ у детей, зависимости количественных значений этого антигена от субтипа вируса, связи его содержания с клинической картиной заболевания, биохимической активностью гепатита и развитием фиброза печени, а также связи апй-соге 1§М и с количественными значениями антигена.

Из всего вышесказанное следует актуальность проведения настоящего исследования.

Цель исследования - изучить клинико-диагностическое и прогностическое значение соге-Л§ вируса гепатита С у детей с хронической ИСУ-инфекцией.

Задачи

1. Установить диагностическую значимость соге-Л§ как маркера ИСУ-инфекции у детей и количественные значения его определения.

2. Оценить взаимосвязь содержания соге-Л§ и концентрации РНК ИСУ в крови с учетом субтипа вируса.

3. Проанализировать зависимость концентрации соге-Л§ от наличия и содержания специфических антител к данному антигену.

4. Изучить клиническое и прогностическое значение выявления соге-Л§ в сыворотке крови детей с ХГС.

Научная новизна

Впервые у детей изучена диагностическая значимость определения соге-антигена при ХГС. Учитывая, что содержание соге-антигена у детей колебалось в широком диапазоне значений, впервые были установлены пограничные значения для концентрационных диапазонов: до 200 фмоль/л, 200-2500 фмоль/л и более 2500 фмоль/л.

Впервые оценена взаимосвязь выявления вирусной РНК и соге-антигена в сыворотке крови детей с ХГС. Установлено, что корреляционная зависимость между содержанием соге-антигена и РНК ИСУ оценивается как сильная и прямая. Полученные данные свидетельствуют о том, что соге-антиген является маркером

репликативной активности вируса гепатита С.

Впервые при изучении структуры генотипов HCV у детей выявлен межгенотипный рекомбинантный вариант RF_2k/1b. Установлено, что доминирующими субтипами HCV в исследуемой группе детей с ХГС являются 1b и 3а.

Впервые для детей с ХГС уточнены показатели соотношений концентраций core-антигена и РНК HCV при различных субтипах. Впервые установлено, что более высокие значения core-антигенемии характерны для детей, инфицированных HCV субтипа 3 а, чем инфицированных HCV субтипа 1b.

Впервые установлена возможность отсутствия антител к core-Ag на фоне его высокого содержания у детей с ХГС.

Впервые проведена комплексная оценка взаимосвязи core-антигена с клинико-лабораторными и инструментальными данными для детей с ХГС. Впервые установлено, что низкие значения концентрации core-антигена (ниже 200 фмоль/л) характерны для стадии клинико-биохимической ремиссии и связаны с низким риском развития фиброза печени, в то время как высокие значения core-Ag в крови ассоциированы с активностью патологического процесса и фиброзом печени у детей с ХГС.

Теоретическая и практическая значимость работы

Учитывая ограниченное количество маркеров HCV-инфекции (anti-HCV и РНК HCV) и наличие сложных в диагностике клинических случаев, надо отметить практическое значение core-антигена в качестве дополнительного маркера этой инфекции. Показано, что core-Ag может быть определен в крови детей с высокой чувствительностью и специфичностью сравнимой с данными заявленными производителем тест-системы «ARCHITECT HCV Ag» (Abbott; США). Установленная прямая взаимосвязь между концентрацией core-Ag и РНК НСV в крови детей с ХГС, что позволяет оценивать репликативную активность вируса гепатита С по концентрации этого антигена.

Практическое значение имеют установленные в данном исследовании соотношения РНК НСУ и соге-антигена при различных субтипах вируса, влияние которых необходимо учитывать при оценке вирусной нагрузки по содержанию coгe-Ag. Найденные различия в соотношениях РНК НСУ и соге-антигена в зависимости от субтипов вируса имеют и теоретическое значение, связанное с недостаточной изученностью наличия дефектных частиц ИСУ в крови пациентов и ролью этих частиц в патогенезе заболевания.

Существенный теоретический и практический интерес представляет факт обнаружения у детей с ХГС межгенотипного рекомбинантного варианта ИСУ КР_2к/1Ь, особенности распространения и патогенеза которого требуют дальнейшего изучения. Для эпидемиологического контроля за ИСУ-инфекцией у детей, для планирования и разработки схем терапии значимыми являются сведения о высокой доли ИСУ субтипов 3а и 1Ь среди инфицированных.

Теоретический и практический интерес представляет информация о возможности обнаружения в сыворотке крови пациентов с ХГС соге-антигена при отсутствии апй-соге IgG и апй-соге 1§М. Данный факт требует дальнейшего изучения для установления возможных причин этого явления и его влияния на течение болезни.

Найденная связь содержания соге-антигена с биохимической активностью гепатита и частотой выявления фиброза печени у детей имеет практическое и теоретическое значение. Так, с одной стороны, эта связь позволяет использовать значения соге-антигена как один из критериев прогноза течения ХГС у детей и, с другой стороны - подтверждает данные о значительной патогенетической роли соге-антигена в течение гепатита С.

Методология и методы исследования

Методологическая основа диссертационной работы спланирована согласно поставленной цели исследования и включает последовательное применение методов научного познания с целью решения поставленных задач. Исследование клинико-диагностического и прогностического значения соге-Л§ у детей

выполнено по принципу проспективного когортного исследования с использованием метода гнездного исследования «случай - контроль». Был произведен забор образцов крови у всех пациентов с наличием или неоднозначными результатами анализа на anti-HCV в крови, затем сделан анализ крови тех пациентов, у которых был установлен ХГС, и у подобранной в рамках той же выборки контрольной группы, у которых гепатит С не подтвердился. Дизайн клинических исследований носит сравнительный открытый характер с использованием эпидемиологических, клинических, биохимических, вирусологических, серологических, молекулярно-генетических, аналитических и статистических методов исследования.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Соге-антиген - дополнительный чувствительный и специфичный антигенный маркер HCV-инфекции, который определяется у детей с хроническим гепатитом С в широком диапазоне количественных значений. Впервые установлена градация концентрационных значений соге-антигена: до 200 фмоль/л, 200-2500 фмоль/л и более 2500 фмоль/л.

2. Между концентрацией соге-антигена и РНК НСV в сыворотке крови установлена прямая сильная корреляция (r=0,89; p<0,0001). Установлены значимые различия в соотношении РНК HCV и core-антигена при инфицировании вирусом субтипов 1b и 3а. Для HCV субтипа 3а медиана значений соотношений РНК HCV к ште-антигену составила 482,17 и для HCV субтипа 1b - 269,54.

3. Соге-антиген может выявляться в сыворотке крови детей с ХГС при отсутствии anti-сore IgG и an^^ore IgM. Группа детей, имеющих core-антиген в диапазоне от 200 до 2500 фмоль/л, достоверно чаще имеет anti-core IgM, чем группы с иным содержанием антигена. Существенного влияния anti-core IgG на содержание core-антигена не обнаружено.

4. Низкие значения концентрации core-антигена (ниже 200 фмоль/л) характерны для стадии клинико-биохимической ремиссии и связаны с низким риском

развития фиброза печени. Высокие концентрации соге-антигена в сыворотке крови больных ХГС детей ассоциируются с более частым обнаружением фиброза печени и биохимической активностью гепатита (p<0,05).

Личный вклад автора состоит в самостоятельном сборе анамнестических данных пациентов, клиническом осмотре, катамнестическом наблюдении, планировании схем обследования, определении РНК HCV, anti-соге IgG и anti-соге IgM. Инструментальные исследования пациента проводились совместно с к.м.н. А.Г.Писаревым, к.м.н. Г.В. Сапроновым. Отдельные этапы молекулярно-биологических экспериментов проводились совместно с к.б.н. Е.И. Самохваловым, д.б.н. С.В. Альховским, науч. сотр. А.А. Гришечкиным, д.б.н. К.К. Кюрегяном и к.б.н. О.В. Исаевой. Диссертантом были подготовлены и написаны материалы для публикаций, в том числе в англоязычной литературе. Проведены обобщение, анализ и статистическая обработка полученных данных, сформулированы научные положения работы, выводы, практические рекомендации.

Внедрение результатов исследования

Результаты данного исследования внедрены и используются в ГБУЗ «ДГКБ № 9 им. Г.Н. Сперанского ДЗМ» и ФГБУ «РДКБ» Минздрава России. Количественное значение core-Ag используется для определения вирусной репликативной активности HCV-инфекции и как один из важных критериев начала и контроля терапии, как подтверждающий тест в сложных случаях диагностики HCV у детей. Результаты диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедре детских инфекционных болезней педиатрического факультета ФГБОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова» Министерства здравоохранения России.

Степень достоверности и апробация результатов

Степень достоверности результатов проведенного исследования определяется соответствием его критериям доказательной медицины, репрезентативностью выборки обследованных пациентов, достаточным объёмом проведенных наблюдений и использованием современных аналитических методов исследования. Примененные статистические методы адекватны поставленным задачам, а сформулированные положения, выводы и практические рекомендации аргументированы и логически вытекают из анализа полученных данных. Результаты исследования оформлены в тезисах, статьях, внедрены в лекции и практические занятия для студентов на кафедре инфекционных болезней у детей педиатрического факультета ФГБОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова» Министерства здравоохранения России и используются для определения наличия вирусной активности ИСУ-инфекции и как один из важных критериев начала и контроля терапии в ГБУЗ «ДГКБ № 9 им. Г.Н. Сперанского ДЗМ» и ФГБУ «РДКБ» Минздрава России.

Результаты работы были доложены на 1У-ой межрегиональной научно-практической конференции «Инфекционные болезни взрослых и детей: актуальные вопросы диагностики, лечения и профилактики» (26-27 сентября 2013, Саратов); на VI Ежегодном Всероссийском конгрессе по инфекционным болезням (24-26 марта 2014 г, Москва); на научно-практической конференции «Современная детская гастроэнтерология: от фундаментальных исследований к практическому применению» (19-21 июня 2014 г., Н. Новгород); на XIII Конгрессе детских инфекционистов России (11-13 декабря 2014 г., Москва); на VII Ежегодном Всероссийском конгрессе по инфекционным болезням (30 марта-1 апреля 2015 г., Москва); на XI конгрессе «Вирусные гепатиты - эпидемиология, диагностика, лечение и профилактика» (29 сентября-2 октября 2015 г., Москва); на XIV Конгрессе детских инфекционистов России (11 -13 декабря 2015 г., Москва); секции инфекционистов Московского Городского отделения союза педиатров России (27 сентября 2016 г., Москва).

В завершенном виде диссертационная работа была апробирована и рекомендована к защите на совместном заседании Совета по предварительной экспертизе диссертационных работ ФГБУ «Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России по проблеме «Общая вирусология и инфекционные болезни» и кафедры инфекционных болезней у детей педиатрического факультета ФГБОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова» Минздрава России 15 марта 2017 г.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 14 работ, в том числе 4 статьи в журналах, рекомендованных ВАК, и 2 последовательности соге-области ИСУ задепонированы в ОепБапк. По темам, близким к диссертационной работе, опубликованы еще 13 работ.

Объем и структура диссертации

Диссертация состоит из введения; 4-х глав, включающих обзор литературы, материалы и методы, результаты исследования, обсуждения полученных результатов и заключения; выводов; практических рекомендаций, перспектив дальнейшей разработки темы и списка литературы, состоящего из 35 отечественных и 223 зарубежных источников. Работа изложена на 147 страницах текста, иллюстрирована 29 таблицами и 23 рисунками, документирована 10 выписками из историй болезни.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Вирус гепатита С и организация его генома

Высокое разнообразие и дивергенция вируса гепатита С свидетельствуют о длительной циркуляции HCV в человеческой популяции - от 1300 до 2000 лет [Markov P.V. е1 а1., 2009; Li C. е1 а1., 2014]. На основании современных молекулярно-эпидемиологических данных многие ученые считают, что HCV возник в Африке, вероятнее всего в центральной части [Markov P.V. е1 а1., 2009; Li C. е1 а1., 2014; Thong V.D., е1 а1., 2014; Iles J.C. е1 а1., 2014]. Постепенно вирус распространился на другие континенты, чему способствовали миграция людей, работорговля, колониальные войны и ряд других социально-экономических событий [Simmonds P. 2001; Houghton M. е1 а1., 1991; Marte11 M. е1 а1., 1992; Okura I. еt а1., 2004].

Первые публикации о гепатите С, называемом в то время «посттрансфузионным гепатитом ни А, ни В», относятся к 1970-1980 гг. [A1ter H.J. еt а1.,1975; Tabor E. еt а1.,1978; Prince A., 1982]. До 1989 г. этиологический агент этого заболевания оставался неустановленным. Однако в исследовании Brad1ey D.W. и соавт. (1979) было показано развитие острого гепатита (гистопатологические данные, повышение уровня аланинаминотрасферазы (АЛТ) в крови и обнаружение вирусных частиц методом электронной микроскопии) в среднем через 7,5 недель после введения 4-м шимпанзе антигемофильного VIII фактора, с которым было связано развитие посттрансфузионного гепатита «ни А, ни В» у двух людей-реципиентов [Brad1ey D.W. еt а1.,1979]. В 1989 г., благодаря развитию молекулярно-генетических методов анализа нуклеиновых кислот, удалось обнаружить геном HCV в сыворотках людей больных гепатитом «ни А, ни В» [Choo Q. еt а1.,1989].

Анализ вирусных частиц в биологическом материале показал, что HCV имеет сферическую форму [He L.F. еt а1., 1987]. Вирусные частицы в сыворотке крови больных людей представлены гетерогенной по размерам популяцией,

основную часть представляют частицы диаметром около 40-80 нм [Yuasa T. еt а1.,1991; Prince A.M. еt а1.,1996; Gastaminza P. еt а1.,2010]. В крови инфицированных людей HCV присутствует как в виде частиц, связанных с липопротеинами, так и в свободный форме [Prince A.M. еt а1.,1996; Feneant L. et al., 2014]. Установлено, что вирионы, связанные с аполипопротеинами (рисунок 1), обладают наибольшей инфекционностью [Kapadia S.B. et al., 2007; Aizaki H. et al., 2008; Suzuki T., 2012]. Большинство ученых сходятся во мнении, что в жизненном цикле вируса важными являются аполипопротеины Е и В ^poE и apoB) [Huang H. et al., 2007; Chang K.S. et al., 2007; Icard V. et al., 2009; Hishiki T. et al., 2010; Gondar V. et al., 2015].

Оболочечные белки E1 и E2

Аполипротеины

соге-белок

РНК HCV

Рисунок 1 - Схематическое изображение вируса гепатита С приведено с изменениями по Ег§йпау К., 2011.

Как представлено на рисунке 1, в структуре вирусной частицы выделяют оболочку, под которой находится нуклеокапсид, сформированный соге-белком и РНК HCV. Оболочка вируса сформирована липидами клетки хозяина и двумя оболочечными гликопротеинами вируса - E1 и E2. Эти гликопротеины отвечают за связывание с рецептором и корецепторами, проникновение вируса и высвобождение РНК HCV в цитоплазму клетки [Moriishi K. et al., 2012; Feneant L. et al., 2014]. Сорбция HCV на поверхности клетки скорее всего происходит за счет взаимодействий вирионассоциированного аполипопротеина Е с рецептором липопротеинов низкой плотности (LDL) [Agnello V. et al., 1999; Owen D.M. et al., 2009] и с рецепторами гепарансульфат протеогликанов (HSPGs) [Barth H. et al., 2006; Jiang J. et al., 2013]. Для проникновения в клетку HCV взаимодействует с несколькими клеточными молекулами: сапрофитным рецептором (SR-BI) [Scarselli E. et al., 2002]; тетраспанином (CD81) [Pileri P. et al., 1998]; белками клаудин-1 [Evans M.J. et al., 2007] и окклюдин [Ploss A. et al., 2009] и некоторыми другими ко-факторами [Zona L. et al., 2013; Sainz B J.R. et al., 2012]. Взаимодействие вирусных частиц с клеткой приводит к их проникновению через клатрин-опосредованный эндоцитоз [Blanchard E. et al., 2006; Meertens L. et al., 2006] и слиянию при низком значении рН [Tscherne D.M. et al., 2006].

Размеры нуклеокапсида, как установлено методом электронно-микроскопического анализа, составляют 33-45 нм [Maillard M. еt а!., 2001]. Core-белок кроме формирования капсулы для хранения генома выполняет ряд других функций, что будет разобрано в подглаве 1.2 (строение и функции core-белка).

Геном HCV представлен однонитевой линейной молекулой РНК позитивной полярности, состоящей из 9,4-9,6 тысяч нуклеотидных остатков (н.о.) [Houghton M. еt а!, 1991; Dubuisson J. 2014]. Для РНК HCV характерна гетерогенность (различие) не только в количестве н.о., но и в их последовательности, что приводит к наличию множества вариабельных зон в РНК. Схема организации генома HCV представлена на рисунке 2.

)

PHKHCV

9.4-9,6 тысяч нукпеотидных остатков

кодирует один полипротеин

5' НТО

mis

3' нто

структурные белки неструктурные белки

М I р7 I \ т2 II WS3 ||WS4a||WS4B||NS5a||ÑS5B

" 0 Ф 51 П Ф фОО

ойо л очечны м и Енроиорнн глккопротеинанк вируса

соге-белок

Та-содержащая □ротеаза

и

сериновая у компоненты прогеа1а-лел5,ка1ареп1нкатнвного

комплекса

РНК-зависим ля кофактор сериновои nut'

Г JlLlvl

протеазы

-полимер а за

Рисунок 2 - Условная схема генома вируса гепатита С приведена с изменениями по Ergйnay 2011.

На 5'- и 3'- концах геномной РНК HCV имеются высокоструктурированные нетранслируемые области (НТО). Между 5'- и 3'- НТО генома вируса располагается один ген, кодирующий полипротеин, содержащий 3008-3037 аминокислотных остатков (ако). В зоне РНК HCV, кодирующей полипротеин, выделяют участки, с которых транслируются структурные (ближе к 5'- НТО) и неструктурные белки (остальная часть, продолжающаяся до 3'- НТО). Структурные белки (Е1, Е2, core) входят в состав вирусной частицы, в то время как неструктурные полипептиды (NS) являются в основном ферментами, участвующими в жизненном цикле вируса: р7 (виропорин), NS2 (Zn-содержащая протеаза), NS3 (сериновая протеаза-хеликаза), NS4a (кофактор сериновой протеазы), NS4b и NS5a (компоненты репликативного комплекса) и NS5b (РНК-зависимая РНК-полимераза).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Лейбман, Елена Александровна, 2017 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Апросина, З.Г. Позднее распознавание хронического заболевания печени вирусной (ИСУ) этиологии / З.Г.Апросина // Вирусные гепатиты: достижения и перспективы. - 2007. - №1. - С. 17.

2. Баранов, А.А. Заболеваемость хроническими вирусными гепатитами детского населения Российской Федерации за период 2003-2011 гг.: медико-статистический Обзор / Баранов А. А. и др. // Федеральное гос. бюджетное учреждение "Науч. центр здоровья детей" Российской акад. мед. наук, Союз педиатров России, Науч.-практ. центр детской гепатологии М-ва здравоохранения Российской Федерации. - Москва : [б. и.], 2013. - 46 с.

3. Бацких, С.Н. Вирус Гепатита С 3-го Генотипа: Такой «простой», такой «сложный» / С.Н. Бацких, С.В. Морозов, В.П. Чуланов, В.И. Покровский // Терапевтический Архив. - 2012. - Т.11. - С.1-7.

4. ВОЗ. Гепатит С. [электронный ресурс]. Информационный бюллетень. - 2016 г. - Режим доступа - http://www.who.int/mediacentгe/factsheets/fs164/гu/.

5. Горячева, Л.Г. НС-вирусная инфекция у детей и подростков: пособие для врачей / Л.Г. Горячева, М.Л. Пономарева, Н.В. Рогозина и др. - СПб. : Изд-во С.-Петербург. торг.-пром. палаты., 2002. - 46 с.

6. Евплова, И.А. Сравнительная клинико-эпидемиологическая характеристика детей с неопределенными результатами и больных хроническим гепатитом С / И.А. Евплова, Н.Е. Сенягина, В.И. Ершов // Медицинский альманах . - 2010. - № 2 ( 11 ). - С. 247-251.

7. Ершова, О.Н. Естественные пути передачи вируса гепатита С - современный взгляд на проблему / О.Н. Ершова, И.В. Шахгильдян, Т.В. Коленова и др. // Детские Инфекции. - 2006. - Т.5. - №1. - С. 16-18.

8. Есауленко, Е.В. Распространение генотипов вируса гепатита С в Санкт-Петербурге / Е.В. Есауленко, Т.А. Ветров, Н.В. Дунаева и др. // Вирусные Гепатиты: перспективы и достижения. - 2014. - №1. - С.14-16.

9. Жерлов, Г.К. Трансабдоминальное ультразвуковое сканирование в оценке структуры паренхимы печени: новые возможности / Г.К. Жерлов, А.П. Кошевой, М.И. Васильченко и др. // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2009. - №3. - С. 23-27.

10. Каганов, С.Б. Хронический гепатит С у детей: клиническое течение и эффективность терапии интерфероном / С.Б. Каганов, Т.В. Строкова, И.И. Орлова и др.// Вопросы современной педиатрии. - 2005. - T.4. - №3. - C.5-12.

11. Кистенева, Л.Б. Особенности перинатальной передачи вируса гепатита С / Л.Б. Кистенева, С.Г. Чешик, В.В. Малиновская и др. // Материалы V Российского Конгресса Детских Инфекционистов. - 2006. - С.78-79.

12. Кистенева, Л.Б. Перинатальный гепатит С: комплексная оценка факторов риска / Л.Б. Кистенева, С.Г. Чешик, Е.И. Самохвалов и др. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. - 2012.- №2. - С. 58-63.

13. Конев, В.А. Клинико-прогностическое значение количественных показателей содержания HBs-антигена в сыворотке крови при вирусных гепатитах В и Дельта у детей: автореф. дис. ... канд. мед. наук: 14.00.09 / Конев Владимир Александрович. - М., 1994. - 22 с.

14. Кудрявцева, Е.Н. О диагностической значимости определения соге-антигена вируса гепатита С / Е.Н. Кудрявцева, М.И. Корабельникова, К.С. Красавченко // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. - 2013. - №6. - С. 32-36.

15. Кудрявцева, Е.Н. О проблеме верификации результатов скрининговых исследований по определению антител к вирусу гепатита С / Е.Н. Кудрявцева, О.Н. Ястребова, А.И. Растегаева и др. // Альманах клинической медицины. - 2011. - №24. - С. 53-59.

16. Кузин, С.Н. Структура генотипов вируса гепатита у пациентов с хроническим гепатитом С / С.Н. Кузин, Е.И. Самохвалов, Е.Е. Заботина и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2011. - №3. - С. 33-38.

17. Мартынова, Г.П. Эффективность комбинированной противовирусной терапии у детей с хроническим гепатитом С / Г.П. Мартынова, И.А. Соловьева, Т.А. Жуковская, А.Б. Белкина // Журнал инфектологии. - 2013. -Т. 5. - №2. - С. 37-42.

18. Масалова, О.В. Вирусный гепатит С: новые подходы к изучению патогенеза и разработка средств диагностики и профилактики: автореф. дис. ... докт. биол. наук : 03.00.06/ Масалова Ольга Владимировна. - М., 2011. - 46 с.

19. Маянский, А.Н. Вирусный гепатит С: информационные материалы / А.Н. Маянский, А.П. Обрядина, Т.И. Уланова и др. - Н-Новгород: НПО «Диагностические системы». - 2003. - 47с.

20. Кюрегян, К.К. Молекулярно-биологические основы контроля вирусных гепатитов / К.К. Кюгерян, М.И. Михайлов. — М.: Издательство Икар, 2013. -336 с

21. Молочкова, О.В. Течение гепатита С у детей / О.В. Молочкова, Т.В. Чередниченко, М.О. Гаспарян, Г.В. Чаплыгина // Детские Инфекции. - 2002. - Т.4. - №1. - С.21-23.

22. Мукашева, Г.К. Кдинико-лабораторная характеристика течения ИСУ-инфекции у детей / Г.К. Мукашева, А.В. Горелов, Н.А. Геппе, Е.Г. Фаробина / Эпидемиология и инфекционные болезни. - 2012. -№2. - С.46-50.

23. Николаева, Л.И. Специфический гуморальный иммунитет при вирусном гепатите С: автореф. дис. ... докт. биол. наук : 03.00.06/ Николаева Людмила Ивановна - М., 2006. - 45 с.

24. Николаева, Л.И. Вирус гепатита С: антигены вируса и реакция на них иммунной системы макроорганизма: информационно-методическое пособие / Л.И. Николаева. - Новосибирск: «Вектор-Бест», 2009. - 78с.

25. Орехова, Е.Е. Вирусная нагрузка у детей с хроническими вирусными гепатитами В и С при различных сроках длительности заболевания / Е.Е. Орехова, В.Ф. Баликин // Вестник Ивановской медицинской академии. -2012. - № 1. - Т.7. - С. 25-28.

26. Писарев, А.Г. Ультразвуковая оценка степени фиброзирования печени при хронических вирусных гепатитах у Детей / А.Г. Писарев // Мед. Визуализация. Спец. Вып. - 2001. - С. 48-53.

27. Самохвалов, Е.И. Частота встречаемости отдельных субтипов вируса гепатита С в Московском регионе / Е.И. Самохвалов, Л.И. Николаева, С.В. Альховский и др. // Вопросы Вирусологии. - 2013. - Т.58. - №1. -С. 36-39.

28. Смирнов, A.B. Вирусные гепатиты у детей с соматической патологией / A.B. Смирнов, A.JI. Россина, Т.Н. Сырьева, В.Ф. Учайкин // Педиатрия. - 2001. -Спецвыпуск. - С. 18-22.

29. СП 3.1.3112-13. [электронный ресурс]. Санитарно-эпидемиологические правила от 22.10.2013 №58 - 2013г. - Режим доступа -http ://36. rospotrebnadzor. ru/documents/san_nor/14514

30. Учайкин, В.Ф. Вирусные гепатиты от А до TTV у детей: учебное пособие / Учайкин В.Ф., Нисевич Н.И., Чередниченко Т.В. - M.: ООО «Издательство Новая Волна», 2003. - 432 с.

31. Учайкин, В.Ф. Гепатит С у детей: / Пособие для врачей / В.Ф. Учайкин, Т.В. Черениченко, Б.А. Святский. О.Б. Ковалев. - М. - 2001. - 28 с.

32. Учайкин, В.Ф. Цирроз печени у детей / В.Ф. Учайкин, С.Б. Чуелов, А.Л. Россина // Педиатрия. - 2008. - Т.87. - №5. - С. 52-58.

33. Филимонов П.Н. Патоморфология хронических сочетанных вирусных гепатитов у детей: : автореф. дис. ... докт. мед. наук: 14.00.15 / Филимонов Павел Николаевич - Новосибирск, 2006 - 45 с.

34. Форма №1 «Сведения об инфекционных и паразитарных заболеваниях» [электронный ресурс] / Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. - 2016г. - Режим доступа -http: //www. ro spotrebnadzor. ru/

35. Чуб, Е.В. Рекомбинантные варианты вируса гепатита С типа 2k/1b на юге Западной Сибири: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 03.01.03 / Чуб Елена Владимировна. - Кольцово, 2015. - 32 с.

36. Abdel-Hady, M. Chronic hepatitis C in children-review of natural history at a National Centre / M. Abdel-Hady, S.K. Bunn, J. Sira et al. // M. J. Viral Hepat. -2011. - V.18(10). - P.535-540.

37. Agnello, V. Hepatitis C virus and other Flaviviridae viruses enter cells via low density lipoprotein receptor / V. Agnello, G. Abel , M. Elfahal et al. // Proc. Nat. Acad. Sci. - 1999. - V. 96. - P.12766-12771.

38. Aizaki, H. Critical role of virion-associated cholesterol and sphingolipid in hepatitis C virus infection / H. Aizaki, K. Morikawa, M. Fukasawa et al. // J. Virol.

- 2008. - V. 82. - P. 5715-5724.

39. Akuta, N. Amino acid substitution in hepatitis C virus core region and genetic variation near the interleukin 28b gene predict viral response to telaprevir with peginterferon and ribavirin / N. Akuta, F. Suzuki, M. Hirakawaet al. // Hepatology.

- 2010. - V. 52(2). - P.421-429.

40. Alberti, A. Natural history of initially mild chronic hepatitis C / A. Alberti, L. Benvegnu, S. Boccato et al. // Dig. Liver Dis. - 2004. - V. 36. - N. 10. - P. 646654.

41. Alesting, E. Core mutation, Il-28b polymorphisms and response to peginterferon/ribavirin treatment in Swedish patients, infected with hepatitis C virus genotype 1 infection / E. Alesting, B. Arnhold, A.Eilard et al. // Bmc. Infec. Dis. - 2011. - V.11. - P. 124-130.

42. Ali, A. Determination of HCV genotypes and viral loads in chronic HCV infected patients of Hazara Pakistan / A. Ali, M. Nisar, H. Ahmad et al. // Iran J. Pediatr. -2011. - V.8:466. - P. 4-6.

43. Alter, H.J. Recovery, persistence, and sequelae in hepatitis C virus infection: a perspective on long-term outcome / H.J. Alter, L.B. Seeff // Semin. Liver Dis. -2000. - V.20. - N.1. - P.17-35.

44. Alter, H.J. Clinical and serological analysis of transfusion-associated hepatitis./ H.J. Alter, P.V. Holland , A.G. Morrow et al. // Lancet. - 1975. - V. 1;2(7940).-P.838-841.

45. Ansaldi, F. Hepatitis C virus in the new era: perspectives in epidemiology, prevention, diagnostics and predictors of response to therapy / F. Ansaldi, A. Orsi, L. Sticchi, B. Bruzzone, G. Icardi // World J. Gastroenterol. - 2014. - V.7. -20(29). - P. 9633-9652.

46. Aoyagi, K. Development of a simple andhighly sensitive enzyme immunoassayfor hepatitis C virus coreantigen / K. Aoyagi, C. Ohue, K. Iida et al.// J. Clin Microbiol. - 1999. - V.37. - P.1802-1808.

47. Arshad, M. Hepatitis C virus infection during pregnancy and the newborn periodare they opportunities for treatment? / M. Arshad, S.S. El-Kamary, R.J. Jhaveri // Viral. Hepat. - 2011. - V.18(4). - P.229-236.

48. Badizadegan, K. Histopathology of the liver in children with chronic hepatitis C viral infection / K. Badizadegan, M.M. Jonas, M.J. Ott et al.// Hepatology. - 1998. - V. 28(5). - P.1416-1423.

49. Baker, R.D. Hepatitis C in children in times of change /Baker R.D., Baker S.S. // Curr. Opin. Pediatr. - 2015. - V.27(5). - P.614-618.

50. Baril, M. Translation of the F protein of hepatitis C virus is initiated at a non-AUG codon in a +1 reading frame relative to the polyprotein / Baril M. Brakier-Gingras L. // Nucleic. Acids. Res. - 2005. - V.33. - P. 1474-1486.

51. Barrera, J.M. Improved detection of anti-HCV in post-transfusion hepatitis by a third-generation elisa / J.M. Barrera, B. Francis, G. Ercilla et al. // Vox. Sang. -1995. - V.69. - P. 15-18.

52. Barth, H. Viral and cellular determinants of the hepatitis C virus envelope-heparan sulfate interaction / H. Barth, E.K. Schnober, F. Zhang et al.// J Virol. - 2006. - V. 80. - P.10579-10590.

53. Beach, M.J. Temporal relationships of hepatitis C virus RNA and antibody responses following experimental infection of chimpanzees / M.J. Beach, E.L. Meeks, L.T. Mimmset al.// J. Med. Virol. - 1992. - V.36(3). - P.226-237.

54. Beld, M. Quantitative antibody responses to structural (Core) and nonstructural (NS3, NS4, and NS5) hepatitis C virus proteins among seroconverting injecting drug users: impact of epitope variation and relationship to detection of HCV RNA

in blood / M.Beld, M. Penning, M. van Putten et al. // Hepatology. - 2009. - V.29. - №4. - P.1288-1298.

55. Benzoubir, N. HCV core-mediated activation of latent TGF-ß via thrombospondin drives the crosstalk between hepatocytes and stromal environment / N. Benzoubir , C. Lejamtel, S. Battaglia et al.// J. Hepatol. - 2013 . - V. 59(6). - P.1160-1168.

56. Bhattacharjee, D. Correlation study between HCV genotypes distribution pattern and viral load in a tertiary care hospital in Kolkata, India / D. Bhattacharjee, K. Mukherjee, G. Chakroborti et al. // J. Clin Diagn Res. - 2015. - V.9(5). - P. 15-17.

57. Blanchard, E. Hepatitis C virus entry depends on clathrin-mediated endocytosis / E. Blanchard , S. Belouzard, L. Goueslain et al. // J. Virol. - 2006. - V. 80. -P.6964-6972.

58. Bochud, P.Y.Genotype 3 is associated with accelerated fibrosis progression in chronic hepatitis C / P.Y.Bochud, T. Cai, K. Overbeck et al. // J Hepatol. - 2009. -V.5. - P. 655-666.

59. Bortolotti, F. Long-term course of chronic hepatitis C in children: from viral clearance to end-stage liver disease / F. Bortolotti, G. Verucchi, C. Camma , G. Cabibbo et al. // Gastroenterology. - 2008. - V. 134(7). - P.1900-1907.

60. Bouvier-Alias, M. Clinical utility of total HCV core antigen quantification: a new indirect marker of HCV replication / Bouvier-Alias M, Patel K, Dahari H, et al. // Hepatology. - 2002. - V. 36(1). - P.211-218.

61. Bozdayi, A.M. Influence of viral load and alanine aminotransferase on viral genetic heterogeneity in patients with chronic hepatitis C virus infection / A.M. Bozdayi, O. Uzunalimoglu, N. Aslan et al. // Intervirology. - 2000. - V.43(1). -P.61-66.

62. Bradley, D.W. Experimental infection of chimpanzees with antihemophilic (factor VIII) materials: recovery of virus-like particles associated with non-A, non-B hepatitis / D.W. Bradley, E.H. Cook, J.E. Maynard et al.// J. Med. Virol. - 1979. -V.3(4). - P. 253-269.

63. Brillanti, S. Significance of IgM antibody to hepatitis C virus in patients with chronic hepatitis C / S. Brillanti, C. Masci, P. Ricci, M. Miglioli, L. Barbara. -Hepatology. - 1992. - V.15(6). - P.998-1001.

64. Broide, E. Broidechronic hepatitis C in Israeli children / E. Broide, S. Reif, E. Brazovski et al. // Fetal. Pediatr. Pathol. - 2004. -V. 23(4). - P.231-239.

65. Budkowska, A . Asynonymous mutations in the core gene are linked to unusual serological profile in hepatitis C virus infection / A. Budkowska, A. Kakkanas, E. Nerrienet et al. // Plos One. - 2011.- V.6 (I1): e15871. P. 1-12.

66. Buket, C.A. Comparison of HCV core antigen and anti-HCV with HCV RNA results / C.A.Buket, A. Ayse et al. // Afr. Health. Sci. - 2014. - V.14. -P.816-820.

67. Bukh, J. Sequence analysis of the 5' noncoding region of hepatitis C virus / J. Bukh, R.H. Purcell, R.H. Miller // Proc. Natl. Acad. Sci USA. - 1992. - 1. - V. 89(11). - P.4942-4946.

68. Burbelo, P.D. Serology-enabled discovery of genetically diverse Hepaciviruses in a New Host / P. D. Burbelo, E.J. Dubovi, P. Simmonds et al. // J. Virol. - 2012 . -V. 86(11). - P. 6171-6178.

69. Ijaz, B. Association of laboratory parameters with viral factors in patients with hepatitis C / B. Ijaz, A. Waqar, T. Fouzia et al. // Virology Journal. - 2011. -V.8.:361.- P.1-9

70. Camarero, C. Hepatitis C virus infection acquired in childhood / C. Camarero, N. Ramos et al. // Eur. J. Pediatr. - 2008. - 167(2). - P.219-224.

71. Chandriani, S. Identification of a previously undescribed divergent virus from the Flaviviridae family in an outbreak of equine serum hepatitis /S. Chandriani, P. Skewes-Cox, D. E. Weidong Zhong et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2013. -V.9. -№ 110(15). - P. 1407-1415.

72. Chang, K.S. Human apolipoprotein E is required for infectivity and production of hepatitis C virus in cell culture / K.S. Chang, J. Jiang, Z. Cai, G. Luo // J. Virol. -2007. - V. 81. - P:13783-13793.

73. Chen, P.J.Transient immunoglobulin M antibody response to hepatitis C virus capsid antigen in posttransfusion hepatitis C: putative serological marker for acute

viral infection / P.J. Chen, J.T. Wang, L.H. Hwang, Y.H. Yang et al // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. - 1992. - V.89(13). - P.5971-5975.

74. Chevaliez, S.Clinical utility of hepatitis C virus core antigen quantification in patients with chronic hepatitis C / S. Chevaliez, A. Soulier, L. Poiteau et al. // J. Clin Virol. - 2014. - V.61. - P.145-148.

75. Cho, S.W. In situ detection of hepatitis C virus RNA in liver tissue using a digoxigenin-labeled probe created during a polymerase chain reaction / S.W. Cho, S.G. Hwang, D.C. Han et al // J. Med. Virol. - 1996. - V.48(3). - P.227-233.

76. Choo, Q. Algenetic organization and diversity of the hepatitis C virus / Q. Choo, K. Richman, J. Han et al // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. - 1991. - 15. - V. 88(6). -P. 2451-25455

77. Choo, Q. Isolation of a CDNA clone derived from a blood-borne Non-A, Non-B viral hepatitis genome / Q. Choo, G. Kuo, A. Weiner et al // Science. - 1989. - V. - 21. - V. 244(4902). - P.359-362.

78. Courouce, A.M. Efficacy of HCV core antigen detection during the preseroconversion period / A.M. Courouce, N. Le Marrec, F. Bouchardeau et al. // Transfusion. - 2000. - 40(10). - P.1198-1202.

79. Cresswell, F.V. Hepatitis C core antigen testing: a reliable, quick, and potentially cost-effective alternative to hepatitis C polymerase chain reaction in diagnosing acute hepatitis C virus infection / F.V. Cresswell, M. Fisher, D.J. Hughes et al. // Clin. Infect. Dis. - 2015. -V.60. - P.263-266.

80. Cristofari, G. The hepatitis C virus core protein is a potent nucleic acid chaperone that directs dimerization of the viral (+) strand RNA in vitro / G. Cristofari, R. Ivanyi-Nagy, C. Gabus et al. // Nucleic. Acids. Res. - 2004. - V. 32(8). - P. 26232631.

81. Daw, M.A. Geographic integration of hepatitis C virus: A global threat / M.A. Daw, A.A. El-Bouzedi, M.O. Ahmed et al. // World J. Virol. - 2016. - V.12. -№5(4). - P. 170-182.

82. De Moliner, L. Serum and liver HCV RNA levels in patients with chronic hepatitis C: correlation with clinical and histological features / L. De Moliner, P. Pontisso, G.L. De Salvo et al. // Gut. - 2008. - V. 42. - №5. - P. 856-60.

83. Delgado-Borrego, A. Influence of Body mass index on outcome of pediatric chronic hepatitis C virus infection / A. Delgado-Borrego, D. Healey, B. Negre, M. et al. // J Pediatr Gastroenterol Nutr. - 2010. - V.51. P.191-197.

84. Demetriou,V.L. Molecular epidemiology of hepatitis C infection in Cyprus: evidence of polyphyletic infection. / V.L. Demetriou, D.A. van de Vijver, L.G. Kostrikis // J. Med. Virol. - 2009. - V.81(2). - P. 238-248.

85. Descamps, V. Strong correlation between liver and serum levels of hepatitis C virus core antigen and RNA in chronically infected patients / V. Descamps, A. Op De Beeck, C. Plassart et al. // J. Clin. Microbiol. - 2012. -V.50(2). - P.465-458.

86. Dharancy, S. Impaired expression of the peroxisome proliferator-activated receptor alpha during hepatitis C virus infection / S. Dharancy, M. Malapel , G. Perlemuter et al. // Gastroenterology. - 2005. - V.128. - P.334-342.

87. Drexler, J.F. Evidence for novel Hepaciviruses in Rodents / J.F. Drexler, V.M. Corman, M.A. Mülleret al. // PLoS Pathog. - 2013. - V.9 (6). - P. e1003438.

88. Dubuisson, J. Virology and cell biology of the hepatitis C virus life cycle: an update / Dubuisson J., Cosset F.L. // J. Hepatol. - 2014. - V.61 (1 Suppl). P. S3-S13.

89. Durante-Mangoni, E. Clinico-pathological significance of hepatitis C virus core antigen levels in chronic infection / E. Durante-Mangoni, L. Vallefuoco, R. Sorrentino et al. // J. Med. Virol. -2013. - V.85. - P. 1913-1918.

90. EASL. Clinical practice guidelines: Management of chronic hepatitis B virus infection. / European Association for Study of Liver // J. Hepatol. - 2012 . - V. 57(1). - P. 167-185.

91. EASL. Recommendations on Treatment of Hepatitis C 2016 / European Association for Study of Liver // J. Hepatol. - 2017 . - V. 66. - P.153-194.

92. Easterbrook, P.J. Who to test and how to test for chronic hepatitis C infection -2016 WHO testing guidance for low- and middle-income countries / P.J. Easterbrook; WHO Guidelines Development Group // J. Hepatol. - 2016 . -V.65(1 Suppl). - P.46-66.

93. El Sherbini, A. Systematic review with meta-analysis: comparison between therapeutic regimens for paediatric chronic hepatitis C / El Sherbini A., Mostafa S., Ali E. // Aliment Pharmacol Ther. - 2015. - V.42(1). - P.12-19.

94. England, K. The impact of mode of acquisition on biological markers of paediatric hepatitis C virus infection / K. England, C.Thorne, H. Harris // J. Viral. Hepat. -2011. - V.18(8). - P. 533-541.

95. Enomoto, N. HCV genetic elements determining the early response to peginterferon and ribavirin therapy / Enomoto N., Maekawa S. // Intervirology. -2010. - V.53. - P. 66-69.

96. Epstein, J. H. Identification of GBV-D, a novel GB-like flavivirus from old world frugivorous bats (Pteropus giganteus) in Bangladesh / J. H. Epstein, P. L. Quan, T. Brieseet al. // PLoS Pathog. - 2010. - V.6. - e1000972.

97. Ergünay, K. [электронный ресурс]. - 2011г. - Режим доступа -http://www.tmc-online.org/userfiles/sunumlar/09_Kas/Koray_Ergunay.pdf

98. Ergünay, K. Utility of a commercial quantitative hepatitis C virus core antigen assay in a diagnostic laboratory setting / K. Ergünay, B. §ener, A. Alp et al. // Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. - 2011. - V. 70. - P. 486-491.

99. Evans, M.J. Claudin-1 is a hepatitis C virus co-receptor required for a late step in entry / M.J. Evans, T. von Hahn, D.M. Tscherne et al. // Nature. - 2007. - V.446. - P.801-805.

100. Fénéant, L. CD81 and hepatitis C virus (HCV) infection / L. Fénéant, S. Levy, L. Cocquerel // Viruses. - 2014. - V.6(2). - P.535-572.

101. Florea, D. Clinical usefulness of HCV core antigen assay for the management of patients with chronic hepatitis C / D. Florea, E. Neaga, I. Nicolae et al. // J. Gastrointestin Liver Dis. - 2014. - V.23. - P.393-396.

102. Forbi, J.C. Epidemic history of hepatitis C virus in two remote communities in Nigeria, West Africa / J.C. Forbi, M.A. Purdy, D.S. Campo et al. // J. Gen. Virol. -2012. - V 93. - P. 1173-1184.

103. Forton, D.M. Identification of unique hepatitis C virus quasispecies in the central nervous system and comparative analysis of internal translational efficiency of brain, liver, and serum variants / D.M. Forton, P. Karayiannis, N. Mahmud, S.D. Taylor-Robinson, H.C. Thomas // J. Virol. - 2004. - V.78 - P.5170-5183.

104. Freiman, J.M. Hepatitis C core antigen testing for diagnosis of hepatitis C virus infection. A systematic review and meta-analysis // J.M. Freiman; M.T.Trang; G.S. Samuel et al. // Ann. Intern. Med. - 2016. - V.165. - P.345-355.

105. Fujinaga, H. Hepatocarcinogenesis in hepatitis C: HCV shrewdly exacerbates oxidative stress by modulating both production and scavenging of reactive oxygen species / H. Fujinaga, T. Tsutsumi, H. Yotsuyanagi H, K. Moriya , K. Koike // Oncology. - 2011. - V.81 (1). - P.11-17.

106. Garbuglia,A.HCV core antigen and HCV-RNA in HIV/HCV co-

infected patients with different HCV genotypes / A. R. Garbuglia, A. Monachetti, C. Galli et al. // BMC Infect. Dis. - 2014. - V.14:222. - P. 1-6.

107. Garrison, K.L. Pharmacokinetics of once Daily sofosbuvir or ledipasvir/sofosbuvir in HCV-infected pediatrics aged 6 to 12 years old / K.L. Garrison, A. Mathias, K. Kersey, B. Kanwar et al. // Hepatology. - 2016. -V.64(suppl). -P:878A

108. Gastaminza, P. Ultrastructural and biophysical characterization of hepatitis C virus particles produced in cell culture / P. Gastaminza, K.A. Dryden, B . Boyd et al. // J. Virol. - 2010. - V.84(21). - P.10999-11009.

109. Gondar, V. Apolipoprotein E, but not apolipoprotein B, is essential for efficient cell-to-cell transmission of hepatitis C virus / V.Gondar, T. Hishiki, G. Koutsoudakis et al. // Journal of Virology. - 2015. - V. 89 (19). - P. 9962-9973.

110. Goodman, Z.D. Pathology of chronic hepatitis C in children: liver biopsy findings in the peds-C trial / Z.D. Goodman, H.R. Makhlouf, L.B. Liuet al. // J. Hepatology. - 2008. - V.47. - P. 836-843.

111. Gower, E. Global epidemiology and genotype distribution of the hepatitis C virus infection / E. Gower, C. Estes, S. Blach, K. Razavi-Shearer, H. Razavi // Journal of Hepatology. - 2014. - V.61. - P. 45-57.

112. Guido, M. Fibrosis in chronic hepatitis C acquired in infancy: is it only a matter of time? / M. Guido, F. Bortolotti, G. Leandro et al. // AmJ.GastrotnteroL - 2003. - V.98. - P.660-663.

113. Hayes, C. HCV substitutions and Il28b polymorphisms on outcome of Peg-Interferon plus ribavirin combination therapy / C. Hayes, M. Kobayashi, N. Akuta et al. // Gut . - 2011. - V.60 (2). - P. 261-267.

114. He, L.F. Determining the size of non-A, non-B hepatitis virus by filtration / L.F. He, D. Alling, T. Popkinet al. // J. Infect. Dis. - 1987. - V. 156(4). - P.636-640.

115. Helaly, G.F. Seronegative and occult hepatitis C virus infections in patients with hematological disorders / G.F. Helaly , A.G. Elsheredy , H.K. Ahmed et al. // Arch. Virol. - 2017. -162(1). - P. 63-69.

116. Henderson, W.A. Symptomatic and pathophysiologic predictors of hepatitis C virus progression in pediatric patients / W.A. Henderson, R. Shankar, J.J. Feld, C.M. Hadigan // The Pediatric Infectious Disease Journal. - 2009. - V. 28 (№8). -P.723-725.

117. Hernández-Aguado, I. False-positive tests for syphilis associated with human immunodeficiency virus and hepatitis B virus infection among intravenous drug abusers. Valencian Study Group on HIV Epidemiology / I. Hernández-Aguado, F. Bolumar, R. Moreno et al. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. - 1998. - V.17. -P.784-787.

118. Hishiki, T. Infectivity of hepatitis C virus is influenced by association with apolipoprotein E isoforms / T. Hishiki, Y. Shimizu, R. Tobita et al. // J. Virol. -2010. - V. 84. - P.12048-12057.

119. Houghton, M. Molecular biology of the hepatitis C viruses: implications for diagnosis, development and control of viral disease / M. Houghton, A. Weiner, J. Han, G. Kuo, Q.L. Choo // Hepatology. - 1991. - V.14. - P.381-388.

120. Hourioux, C. The genotype 3-specific hepatitis C virus core protein residue phenylalanine 164 increases steatosis in an in vitro cellular model / C. Hourioux, R. Patient, A. Morin et al. // Gut. - 2007. - V.56(9). - P.1302-1308.

121. Huang, H. Hepatitis C virus production by human hepatocytes dependent on assembly and secretion of very low-density lipoproteins / H. Huang, F. Sun, D.M. et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2007. - V. 104. - Р.5848-5853.

122. Huber, K.R. Detection of common hepatitis С virus subtypes with a third-generation enzyme immunoassay / K.R. Huber, C. Sebesta,K. Bauer // Hepatology.

- 1996. - V. 24. - P.471-473.

123. Icard, V. Secretion of hepatitis C virus envelope glycoproteins depends on assembly of apolipoprotein B positive lipoproteins / V. Icard, O. Diaz, C. Scholtes et al. // PLoS One 4:e4233.

124. Icardi, G. A new assay for hepatitis C virus (HCV) core antigen detection: an alternative to nucleic acid technologies in positive or indeterminate anti-HCV subjects? / G. Icardi, B. Bruzzone, F. Gota et al. // Ann. Ig. - 2003. - 15(6). -Р.863-870.

125. Iijima, A. Relationship between histological prognosis of chronic hepatitis C and amount of hepatitis C virus core protein in serum / A. Iijima, E. Tanaka, M. Kobayashi et al. // J. Gastroenterol. Hepatol. - 2000. - V.15.- P.311-319.

126. Iles, J.C. Phylogeography and epidemic history of hepatitis C virus genotype 4 in Africa / J.C. Iles, J. Raghwani, G. Harrison et al. // Virology. - 2014. -V.464-465.

- Р.233-243.

127. Imbert-Bismut, F. Biochemical markers of liver fibrosis in patients with hepatitis C virus infection: a prospective study / F. Imbert-Bismut, V. Ratziu, L. Pieroni et al. // Lancet. - 2001. - V.357. - P.1069-1075.

128. Indolfi, G. Perinatal transmission of hepatitis C virus infection / Indolfi G. Resti M. // J Med Virol. - 2009. - V.81(5). - P.836-843.

129. Instruction «ARCHITECT HCV Ag» (Abbott, США) [электронный ресурс]. -Режим доступа - www.ilexmedical.com/files/PDF/HCVAg_ARC.pdf

130. Iorio, R. Chronic hepatitis C in childhood: an 18-year experience / R. Iorio, A. Giannattasio, A. Sepe et al. // Clin. Infect. Dis. - 2005. - 41. - P.1431-1437.

131. Ivanov, A.V. HCV core protein uses multiple mechanisms to induce oxidative stress in human hepatoma Huh7 cells / O.A. Smirnova, I.Y. Petrushanko, O.N. Ivanova et al. // Viruses. - 2015. - 29;7(6). - P. 2745-2770.

132. Jhaveri, R. Specific polymorphisms in hepatitis C virus genotype 3 core protein associated with intracellular lipid accumulation / R. Jhaveri, J. McHutchison , K. Patel et al. // J. Infect Dis. - 2008. - V.197. -P.283-291.

133. Jiang, J. Apolipoprotein E mediates attachment of clinical hepatitis C virus to hepatocytes by binding to cell surface heparan sulfate proteoglycan receptors / J. Jiang, X. Wu, H. Tang, G. Luo. // PLoS One. - 2013. - 8:e67982.

134. Jonas, M.M. Children with hepatitis C / M.M. Jonas // Hepatology. - 2002. -V.36(5 Suppl 1). - P.173-178.

135. Kadkhoda, K. HCV antigen testing for the diagnosis of hepatitis C infection: a cost-efficient algorithm / K. Kadkhoda, G. Smart //Clin. Lab. - 2014. - V.60. -677-680.

136. Kage, M. Pathology of chronic hepatitis C in children. Child liver study group of Japan / M. Kage, T. Fujisawa, K. Shiraki et al. // Hepatology. - 1997. - V. 26(3).

- P.771-775.

137. Kalinina, O.A. Natural intergenotypic recombinant of hepatitis C virus identified in St. Peterburg / O. Kalinina, H. Norder, S. Mukomolov, L.O. Magnius // J. Virol.

- 2002. - V.76 (8). - P. 4034-4043.

138. Kapadia, S.B. Initiation of hepatitis C virus infection is dependent on cholesterol and cooperativity between CD81 and scavenger receptor B type I / S.B. Kapadia, H. Barth, T. Baumert, J.A. Mckeating, F.V. Chisari // J. Virol. - 2007. - V.81. -P.374-383.

139. Kapoor, A. Charakterization of a canine homolog of hepatitis C virus / A. Kapoor, P. Simmonds, G.Gerold et al. // Pnas (Usa). - 2011. - V.108. - P. 1160811613.

140. Karchava, M. Impact of hepatitis C virus recombinant form RF1_2k/1b on HCV treatment outcomes within Georgian national hepatitis C elimination program / M. Karchava, N. Chkhartishvili, L. Sharvadze // Hepatol Res. - 2017. - doi: 10.1111/hepr. 12890.

141. Kato, J. Utility of hepatitis C virus RNA levels for predicting the therapeutic efficacy of interferon / J. Kato, M. Komatsu , T. Ono et al. // J. Clin. Gastroenterol. - 1997. - V. 25(3). - P.525-528.

142. Kesli, R. Comparison of a newly developed automated and quantitative hepatitis C virus (HCV) core antigen test with the HCV RNA assay for clinical usefulness in confirming anti-HCV results / R. Kesli, H. Polat, Y. Terzi et al. // Clin Microbiol. - 2011. - V.49.- P.4089-4093.

143. Kim, K.H. HCV core protein induces hepatic lipid accumulation by activating SREBP1 and PPARgamma / K.H. Kim, S.P. Hong, K. Kim et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2007. - V.3(55). - P.883-888.

144. Kirby, B. Pharmacokinetics of Once Daily Sofosbuvir or Ledipasvir/Sofosbuvir in HCV-Infected Adolescents / B. Kirby, P. German B. et al. // Hepatology. 2015; 62 (suppl):1707A.

145. Kolykhalov, A.A. Identification of a higly conserved seoquence element at the 3" terminus of hepatitis C virus / Kolykhalov, A.A., Feinstone S.M., Rice C.M. // J. Virol. - 1996. - V. 70.- P.3363-3371.

146. Komatsu, F. Determination of serum hepatitis C virus (HCV) core protein using a novel approach for quantitative evaluation of HCV viraemia in anti-HCV-positive patients / F. Komatsu, K. Takasaki // Liver. - 1999. - V.19(5). - P.375-380.

147. Korba, B. Hepatitis C virus genotype 1a core gene nucleotide patterns associated with hepatocellular carcinoma risk. / B. Korba, K. Shetty, A. Medvedev et al. //J. Gen. Virol. - 2015. - V.96(9). - P.2928-2937.

148. Korenaga, M. Hepatitis C virus core protein inhibits mitochondrial electron transport and increases reactive oxygen species (ros) production / M. Korenaga, T. Wang, Y. Li, et al. // J. Biol. Chem. - 2005. - V.280. - P.37481-37488.

149. Kowala-Piaskowska, A. Influence of the presence of HCV-RNA in peripheral blood mononuclear cells on the clinical course of chronic hepatitis C in children / A. Kowala-Piaskowska, I. Mozer-Lisewska, M. Figlerowicz et al. // Eur. Jepidemiol. - 2007. - V.22. - P. 343-348.

150. Krajden, M. Evaluation of the core antigen assay as a second-line supplemental test for diagnosis of active hepatitis C virus infection / M. Krajden, R. Shivji, K. Gunadasa et al. // J. Clin Microbiol. - 2004. - 42(9). - P.4054-4059.

151. Kumar, R.M. Role of breast feeding in transmission of hepatitis C virus to infants of HCV-infected mothers / R.M. Kumar, S. Shabul // J. Hepatol. - 1998. -V. 29. - P.191-197.

152. Kuo, Y.H. Is hepatitis C virus core antigen an adequate marker for community screening? / Y.H. Kuo, K.C. Chang, J.H. Wang et al. // J Clin Microbiol. - 2012. -V.50. - P.1989-1993.

153. Kurbanov, F. Detection of hepatitis C virus natural recombinant RF1_2k/1b strain among intravenous drug users in Uzbekistan / F. Kurbanov, Y.Tanaka, D. Avazova et al. // Hepatol. Res. - 2008. - V.38(5). - P.457-464.

154. Lagging, L.M. Comparison of serum hepatitis C virus RNA and core antigen concentrations and determination of whether levels are associated with liver histology or affected by specimen storage time / L.M. Lagging , C.E. Garcia , J. Westin et al. // J. Clin Microbiol. - 2002. - V.40(11). -P.4224-4229.

155. Le Campion, A. Pathogenesis of hepatitis C during pregnancy and childhood / A. Le Campion, A. Larouche, S. Fauteux-Daniel, H. Soudeyns // Viruses. - 2012. -V.4(12). - P.3531-3550.

156. Li, C. Origin of hepatitis C virus in Africa as estimated through an evolutionary analysis of the Full-Length genome of nine subtypes, including the new sequenced 3d And 3e / C. Li, L. Lu, D.G. Murphy et al. // J. Gen. Virol. - 2014. - V.95. - P. 1677-1688.

157. Li, H.C. Production and pathogenicity of hepatitis C virus core gene products / H.C. Li, H.C. Ma, C.H. Yang, S.Y. Lo SY // World J. Gastroenterol. - 2014. -V.20(23). - P.7104-7122.

158. Lok, A.S.Antibody response to core, envelope and nonstructural hepatitis C virus antigens: comparison of immunocompetent and immunosuppressed patients / A.S. Lok , D. Chien , D.L. et al. // Hepatology. - 1993. - V.18(3). - P.497-502.

159. Lukens, J.R. Blockade of PD-1/B7-H1 interaction restores effector CD8+ T cell responses in a hepatitis C virus core murine model / J.R. Lukens, M.W. Cruise, M.G. Lassen, Y.S. Hahn. //J. Immunol. - 2008. - V.180(7). - P. 4875-4884.

160. Lvov, D.K. Prevalence of hepatitis C virus and distribution of its genotypes in Northern Eurasia / D.K. Lvov, E.I. Samokhvalov, F. Tsuda et al. // Arch Virol. -1996. - V.141. - P.1613-1622.

161. Maillard, P. Nonenveloped nucleocapsids of hepatitis C virus in the serum of infected patients / P. Maillard, K. Krawczynski, J. Nitkiewiczet et al. // J. Virol. -2001. - V. 75(17). - P. 8240-8246.

162. Markov, P.V. Phylogeography and Molecular epidemiology of hepatitis C virus genotype 2 in africa./ P.V. Markov, J. Penin, E. Frost et al. // J. Gen. Virol. - 2009. - V.90. - P. 2086-2096.

163. Martell, M. Hepatitis C virus (HCV) circulates as a population of different but closely related genomes: quasispecies nature of HCV genome distribution / M. Martell , J. Esteban , J. Quer et al.// // J. Virol. - 1992. - V.66(5). - P.3225-3229.

164. Masalova, O.V. Detection of hepatitis C virus core protein circulating within different virus particle populations. / O.V. Masalova, S.N. Atanadze, E.I. Samokhvalov et al. // J. Med. Virol. - 1998. - V.55(1). - P.1-6.

165. McLauchlan, J. Intramembrane proteolysis promotes trafficking of hepatitis C virus core protein to lipid droplets / J. McLauchlan, M. K. Lemberg, G. Hope, B. Martoglio // EMBO J. - 2002. - V. 21. - P. 3980-3988.

166. Mederacke, I. Performance and clinical utilityof a novel fully automated quantitative HCV-core antigen assay / I. Mederacke, H. Wedemeyer et. al.//. J Clinvirol. - 2009. - V.46. - P. 210-215.

167. Medici, M.C. Evolving strategy for HCV testing in an Italian tertiary care hospital / M.C. Medici, C. Chezzi, F.D. Conto et al. // J Clin Virol. - 2016. -V.77. -P.92-98.

168. Meertens, L. Hepatitis C virus entry requires a critical postinternalization step and delivery to early endosomes via clathrin-coated vesicles / L. Meertens, C. Bertaux, T. Dragic // J. Virol. - 2006. - V. 80. - P.11571-11578.

169. Miedouge, M. Analytical evaluation of HCV core antigen and interest for HCV screening in haemodialysis patients / M. Miedouge, K. Saune, N. Kamar et al. // J Clin Virol. - 2010. - V.48. - P. 18-21.

170. Miller, R.H., Purcell R.H. Hepatitis C virus shares amino acid sequence similarity with pestivises and Flaviviruses as well as members of two plant virus supergroups / Miller R.H., Purcell R.H. // Pnas (Usa). - 1990. - V. 87. - P. 20572061.

171. Mohan, P. Clinical spectrum and histopathologic features of chronic hepatitis C infection in children / P. Mohan, C. Colvin, C . Glymph et. al. //. J. Pediatr. -2007.- V.150(2). - P.168-174.

172. Mohan, P. Evaluating progression of liver disease from repeat liver biopsies in children with chronic hepatitis C: a retrospective study / P. Mohan, B.A. Barton B.A., M.R. Narkewicz et. al. //. Hepatology. - 2013. - V.58(5). - P.1580-1586.

173. Moradpour, D. Hepatitis C virus proteins: from structure to function. / D. Moradpour, F. Penin // Curr. Top. Microbiol. Immunol. - 2013. - V.369. - P.113-142.

174. Moreau, I. Serendipitous identification of natural intergenotypic recombinants of hepatitis C in Ireland / I. Moreau, S. Hegarty, J. Levis et al. // Virol J. - 2006. -V.15 (3):95. P. 1-7.

175. Moreno-Otero, R. Liver histology damage in children with chronic hepatitis C / R. Moreno-Otero, M. Trapero, P. Jara // Pediatr. Infect. Dis. J. - 2010. - V. 29(2).

- P.189-190.

176. Morice, Y. Seroconversion to hepatitis C virus alternate reading frame protein during acute infection / Y. Morice, M. Ratinier, A. Miladi et al. // Hepatology. -2009. - V.49(5). - P.1449-1459.

177. Moriishi, K. Exploitation of lipid components by viral and host proteins for hepatitis C virus infection /Moriishi K., Matsuura Y. // Front. Microbiol. - 2012.-V. 3: 54 - P. 1-14.

178. Morota, K. A new sensitive and automated chemiluminescent microparticle immunoassay for quantitative determination of hepatitis C virus core antigen / K. Morota, R. Fujinami, H. Kinukawa et al. // J. Virol. Methods. - 2009. - V.157(1).

- P.8-14.

179. Mukomolov, S. Hepatitis C in the Russian Federation: challenges and future directions / S. Mukomolov, G. Trifonova, I. Levakova, D. Bolsun, E. Krivanogova // Hepat. Med. - 2016. - V.8. - P. 51-60.

180. Mixson-Hayden, T. Performance of ARCHITECT HCV core antigen test with specimens from US plasma donors and injecting drug users / T. Mixson-Hayden, G.J. Dawson, E. Teshale et al. // J Clin Virol. - 2015. - V.66. - P.15-18.

181. Murayama, A. A Japanese reference panel of blood specimens for evaluation of hepatitis C virus RNA and core antigen quantitative assays / A. Murayama, N. Sugiyama, K. Watashi et al. // Clin Microbiol. - 2012. - V.50(6). - P.1943-1949.

182. Nakamuta, M. Serum levels of HCV RNA and core protein before and after incubation at 37 degrees C for 24 H / M. Nakamuta, N. Shimohashi, S. Tada Set al. // Hepatol. Res. - 2001. - V.26. -№ 19(3). - P.254-262.

183. Nguyen, L.T. Hepatitis C virus core mutations associated with false-negative serological results for genotype 3a core antigen / L.T. Nguyen, L. Dunford, I. Freitas et al. // J. Clin. Microbiol. - 2015. - V.53(8). - P.2697-2700.

184. Ogino, T. Membrane binding properties and terminal residues of the mature hepatitis C virus capsid protein in insect cells / T. Ogino, H. Fukuda, S.Imajoh-Ohmi et al. // Virol. - 2004. - V.78. - P. 11766-11777.

185. Okamoto, K. Intramembrane processing by signal peptide peptidase regulates the membrane localization of hepatitis C virus core protein and viral propagation / K. Okamoto, Y. Mori, Y. Komoda et al. // J. Virol. - 2008. - V.82. - P. 8349-8361.

186. Okura, I. Effect of mutation in the hepatitis C virus nonstructural 5B region on HCV replication / I. Okura , N. Horiike ,K. Michitaka , Onji M. // J. Gastroenterol. - 2004. - V.39(5). - P.449-454.

187. Owen, D. M. Apolipoprotein E on hepatitis C virion facilitates infection through interaction with low-density lipoprotein receptor / D.M. Owen, H. Huang, J. Ye, M. J. Gale // Virology. - 2009. - V.394. - P.99-108.

188. Papatheodoridis, G.V. Significance of IgM anti-HCV core level in chronic hepatitis C / G.V. Papatheodoridis, J.K. Delladetsima, A. Katsoulidou et al. //

J. Hepatol. - 1997 . -V. 27(1). -P.36-41.

189. Park, Y . New automated hepatitis C virus (HCV) core antigen assay as an alternative to Real-Time PCR for HCV RNA quantification / Y. Park, J.H. Lee, B.S. et al. // J Clin Microbiol. - 2010. - 48(6). - P. 2253-2256.

190. Patin, E. Genome-wide association study identifies variants associated with progression of liver fibrosis from HCV infection / E.Patin, Z. Kutalik, J. Guergnon et al. // Gastroenterology. - 2012. - V. 143(5). - P. 1244-1252.

191. Perlemuter, G. Hepatitis C virus core protein inhibits microsomal triglyceride transfer protein activity and very low density lipoprotein secretion: a model of viral-related steatosis / G. Perlemuter, A. Sabile, P. Letteron et al. // FASEB J. -2002. - 16(2). - P.185-194.

192. Perz, J.F. The contributions of hepatitis B virus and hepatitis C virus infections to cirrhosis and primary liver cancer worldwide / J.f. Perz, G.L. Armstrong , L.A. Farrington, Y.J. et al. // J. Hepatol. - 2006. -V. 45. - P.529-538.

193. Peterson, J. Detection of hepatitis C core antigen in the antibody negative 'window' phase of hepatitis C infection / J. Peterson, G. Green, K. Iida et al. // Vox. Sang. - 2000. - 78. - P.80-85.

194. Petruzziello, A. Global epidemiology of hepatitis C virus infection: An up-date of the distribution and circulation of hepatitis C virus genotypes / A. Petruzziello, S. Marigliano, G. Loquercio et al. // World J. Gastroenterol. - 2016. - V.14 №22(34). - P. 7824-7840.

195. Pileri, P. Binding of hepatitis C virus to CD81 / P. Pileri, Y. Uematsu, S. Campagnoli et al. // Science. - 1998. - V.282. - P. 938-941.

196. Pang, X. IL-10 plays a central regulatory role in the cytokines induced by hepatitis C virus core protein and polyinosinic acid:polycytodylic acid./ X. Pang, Z. Wang , N. Zhai et al. // Int Immunopharmacol. - 2016- V. 38. - P. 284290.

197. Ploss, A. Human occludin is a hepatitis C virus entry factor required for infection of mouse cells / A. Ploss, M. J. Evans, V.A. Gaysinskaya et al. // Nature. - 2009. -V. 457. - P.882-886.

198. Pratt, D.S. Evaluation of abnormal liver-enzyme results inasymptomatic patients / Pratt, D.S., Kaplan M.M. // N. Engl. J. Med. - 2000. - V.342. - P.1266-1271.

199. Prince, A. Nature Of non-A, non-B hepatitis viruses / Prince A. // Lancet. -1982.- V.22(1). - P. 1181-1182.

200. Prince, A.M. Visualization of hepatitis C virions and putative defective interfering particles isolated from low-density lipoproteins / A.M. Prince, T. Huima-Byron , T.S, Parker, D. M. Levine // J. Viral. Hepatitis. - 1996. - V.3. -P. 11-17.

201. Pybus, O.G. Genetic history of hepatitis C virus in East Asia / O.G.Pybus, E. Barnes, R. Taggart et al. // J. Virol. - 2009. - V.83. - P. 1071-1082.

202. Raghwani, J. Origin and evolution of the unique hepatitis C virus circulating recombinant form 2k/1b / J. Raghwani, X.V.Thomas, S.M.Koekkoek et al.// J. Virology. - 2012. - V.86 (4). - P. 2212-2220.

203. Rerksuppaphol, S. Long-term outcome of vertically acquired and posttransfusion hepatitis C infection in children / S. Rerksuppaphol, W. Hardikar, G. Dore G // J. Gastroenterol. Hepatol. - 2004. - V.19(12). - P.1357-1362.

204. Resti, M. Clinical features and progression of perinatally acquired hepatitis C virus infection / M. Resti, P. Jara, L. Hierro, et al. // J. Med Virol. - 2003. - V.70. - P. 373-377.

205. Resti, M. Mother to child transmission of hepatitis C virus: prospective study of risk factors and timing of infection in children born to women seronegative for HIV-1 / M. Resti, C. Azzari, F. Manneli et al. // Bmj. - 1998. - V.317. - P. 437441.

206. Richter, S.S. Laboratory assays for diagnosis and management of hepatitis C virus infection. J. Clin Microbiol. - 2002. - V.40(12). - P.4407-4412.

207. Robbins, P.W. Classification, nomenclature, and database development for hepatitis C virus (HCV) and related viruses: proposal for standardization. International committee on virus taxonomy / P.W. Robbins, G. Myers, C. Howard et al. // Arch. Virol. - 1998. - V.143. - P. 2493-2503.

208. Roingeard, P. Hepatitis C virus ultrastructure and morphogenesis / P. Roingeard, C. Hourioux, E. Blanchard , D. Brand , M. Ait-Goughoulte // Biol. Cell. - 2004. -V.96(2). - P.103-108.

209. Ross, R.S. Analytical performance characteristics and clinical utility of a novel assay for total hepatitis C virus core antigen quantification / R.S. Ross, S. Viazov, S. Salloum et al. // Clin Microbiol. - 2010. - V. 48(4). - P:1161-1168.

210. Rubbia-Brandt, L. Hepatocyte steatosis is a cytopathic effect of hepatitis C virus genotype 3 / L. Rubbia-Brandt, R. Quadri, K. Abid et al. // J. Hepatol. - 2000. -V.33. - P.106-115.

211. Sainz, B. J. Identification of the Niemann-Pick C1-like 1 cholesterol absorption receptor as a new hepatitis C virus entry factor / B.J. Sainz, N. Barretto, D.N. Martin et al. // Nat. Med. - 2012. - V. 18. - P.281-285.

212. Sansonno, D. Demonstration and distribution of HCV RNA sequences by in situ hybridization and HCV-Related proteins by immunohistochemistry in the liver

tissue of patients with chronic HCV infection / D. Sansonno, V. Cornacchiulo, A. Iacobelli et al // Pathobiology. - 1995. - V.63(5). - P.239-248.

213. Scarselli, E. The human scavenger receptor class B type I is a novel candidate receptor for the hepatitis C virus / E. Scarselli, H. Ansuini, R. Cerino et al // 2002. - EMBO J. - V.21. - P. 5017-5025.

214. Schröter, M. Definition of false-positive reactions in screening for hepatitis C virus antibodies / M. Schröter, H.H. Feucht, P. Schäfer et al. // - 1999. - V.37(1). -P.233-234.

215. Schüttler, C.G. Variable ratio of hepatitis C virus RNA to viral core antigen in patient sera / C.G. Schüttler , C. Thomas C, T. Discher et al. // J Clin Microbiol. -2004. -V.42(5). - P.1977-1981.

216. Schwarz, K. High rates of svr12 in adolescents treated with the combination of ledipasvir/sofosbuvir / K. Schwarz, K.F. Murray, P. Rosenthal, S. Bansal et al. // J. Hepatol. 2016;64 (suppl):GS17A.

217. Shahraki, T. Determination of hepatitis C genotypes and the viral titer distribution in children and adolescents with major thalassemia / T. Shahraki , M. Shahraki, E.S. Moghaddam et al. // Iran. J. Pediatr. - 2010. - V.20(1). - P.75-81.

218. Shouval, D. Focus: quantitative HBsAg measurement as a new surrogate marker for assessment of hepatic fibrosis in HBeAg+ chronic hepatitis B / D. Shouval //J. Hepatol. - 2013. - V.58. - P.1063-1064.

219. Simmonds, P. Classification Of hepatitis C virus into six major genotypes and a series of subtypes by phylogenetic analysis of the NS-5 region / P. Simmonds, E.C. Holmes, S.W. Cha et al. // J. Gen. Virol. - 1993. - V.74. - P. 2391-2399.

220. Simmonds, P. Reconstructing the origins of human hepatitis viruses / Simmonds P. // Phil. Trans. Soc. Lond. - 2001. - V.356. - P. 1013-1026.

221. Smith, D.B. Expanded classification of hepatitis C virus into 7 genotypes and 67 subtypes: updated criteria and genotype assignment web Resource / D.B. Smith, J. Bukh, K. Kuiken et al. // Hepatology. - 2014. - V.59. - P. 318-327.

222. Smith, D.B. The Origin Of Hepatitis C Virus Genotypes / D.B. Smith, S. Pathirana et al. //J. Gen. Virol. - 1997. - V.78(Pt 2). - P.321-328.

223. Soffredini, R. Serum levels of hepatitis C virus core antigen as a marker of infection and response to therapy / R. Soffredini, M. Rumi, M. Parravicini et al. // Am. J. Gastroenterol. - 2004. - V.99(9). - P.1738-1743.

224. Stapleton, J.T. The GB viruses: a review and proposed classification of GBV-A, GBV-C (HGV), and GBV-D in genus Pegivirus within the family Flaviviridae / J.T. Stapleton , S. Foung , A.S. et al. // J. Gen. Virol. - 2011. - 92(Pt 2). - P. 233246.

225. Steininger, C. Increased risk of mother-to-infant Transmission Of Hepatitis C Virus By Intrapartum Infantile Exposure To maternal blood / C. Steininger, M. Kundi, G. Jatzko et al. // J. Infect. Dis. - 2003. - V.187. - P. 345-351.

226. Stone, A.E. Hepatitis C virus core protein inhibits interferon production by a human plasmacytoid dendritic cell line and dysregulates interferon regulatory factor-7 and signal transducer and activator of transcription (STAT) 1 protein expression / A.E. Stone, A. Mitchell, J. Brownell et. al. // PLoS One. - 2014.- V. 1;9(5). P. 19.

227. Suzuki, T. Morphogenesis of infectious hepatitis C virus particles / T. Suzuki // Front Microbiol. - 2012. - V.7 (3): 38 - P: 1-11.

228. Suzuki, R. Molecular determinants for subcellular localization of hepatitis C Virus core protein / R. Suzuki, S. Sakamoto, T. Tsutsumi, et al. // J. Virol. - 2005. - V. 79(2). - P. 1271-1281.

229. Tabor, E. Transmission of non-A, non-B hepatitis from man to chimpanzee / E. Tabor , R. Gerety , J.A. Drucker et al. // Lancet. - 1978 - V.4; 1(8062). - P.463-466.

230. Takahashi, K. Demonstration of a hepatitis C virus-specific antigen predicted from the putative core gene in the circulation of infected hosts / K. Takahashi , H Okamoto, S. Kishimoto et al. // J. Gen. Virol. - 1992. - V.73 ( Pt 3). - P.667-672.

231. Tallo, T. Genetic characterization of hepatitis C virus strains in Estonia: fluctuations in the predominating subtype with time / T. Tallo, H. Norder, V. Tefanova et al. // J. Med. Virol. - 2007. - V.79(4). - P.374-382.

232. Tanaka, N. Is essential for HCV Core protein-induced hepatic steatosis and hepatocellular carcinoma in mice / N. Tanaka, K. Moriya, K. Kiyosawa et al. // J. Clin Invest. - 2008. - V.118(2). - P.683-694.

233. Tanaka, T. Simple fluorescent enzyme immunoassay for detection and quantification of Hepatitis C viremia / T. Tanaka, J. Lau , M. Mizokami, E. Orito et al. // J. Hepatol. - 1995. - V.23(6). - P.742-745.

234. Tanaka, Y. High stability of enzyme immunoassay for hepatitis C virus core antigen-evaluation before and after incubation at room temperature / Y. Tanaka, K. Takagi, T. Fujihara et al. // Hepatol. Res. - 2003. - V.26(4). - P.261-267.

235. Tedder, R.S. Therapy-Induced clearance of HCV core antigen from plasmapredicts an end of treatment viral response / R.S. Tedder, P. Tuke, N. Wallis et al. // Journal Of Viral Hepatitis. - 2013. - 20. - P. 65-71.

236. Thong, V.D. Hepatitis C virus genotype 6: virology, epidemiology, genetic variation and clinical implication / V.D. Thong, S. Akkarathamrongsin, K. Poovorawan et al. // J. Gastroenterol. - 2014. - V.20(11). - P. 2927-2940.

237. Thong, V.D. The correlation between hepatitis C core antigen and hepatitis C virus RNA levels with respect to human immunodeficiency virus status, hepatitis C virus genotype and interferon-lambda-4 polymorphism / V.D. Thong , S. Akkarathamrongsin , A. Avihingsanon et al. // Intervirology. - 2015. - V.58(2). - P.73-79.

238. Tovo, P. Persistence rate and progression of vertically acquired hepatitis C infection. European paediatric hepatitis C virus infection / P. Tovo, L. Pembrey, M. Newell // J. Infect. Dis. - 2000. - V.181. - P. 419-424.

239. Tscherne, D.M. Time- and temperature-dependent activation of hepatitis C virus for low-pH-triggered entry / D.M. Tscherne, C.T. Jones, M.J. Evanset et al.//J. Virol. - 2006. - V.80. - P.1734-1741.

240. Tsukiyama-Kohara, K. Internal ribosome entry site within hepatitis C virus RNA/ K.Tsukiyama-Kohara, N. Iizuka, M. Kohara, A. Nomoto // J. Virol. - 1992. - V. 66 (3). - P. 1476-1483.

241. Tsutsumi, T. Interaction of hepatitis C virus core protein with retinoid X receptor alpha modulates its transcriptional activity / T. Tsutsumi, T. Suzuki, T. Shimoike et al. // Hepatology. - 2002. - 35(4). - P. 937-946.

242. Van Helden, J. Hepatitis C diagnostics: clinical evaluation of the HCV-core antigen determination / J.Van Helden, R.Z. Weiskirchen // Gastroenterol. -2014. -V.52. - P.1164-1170.

243. Vassilaki, N. Expression studies of the HCV-1a core+1 open reading frame in mammalian cells / N. Vassilaki, H. Boleti, P. Mavromara // Virus Res. - 2008. -V.133. - P.123-135.

244. Veillon, P. Comparative evaluation of the total hepatitis C virus core antigen, branched-DNA, and Amplicor Monitor Assays In determining viremia for patients with chronic hepatitis C during interferon plus ribavirin combination therapy / P. Veillon, C. Payan, G. Picchio et al. // J. Clin Microbiol. - 2003. - V.41(7). - P. 3212-3220.

245. Viazov, S. Hepatitis C virus genotypes in different regions of the former Soviet Union (Russia, Belarus, Moldova and Uzbekistan) / S. Viazov, S. Kuzin, N. Paladi et al. // J. Med. Virol. - 1997. - V.53. - P.36-40.

246. Walewski, J.L. Evidence for a new hepatitis C virus antigen encoded in an overlapping reading frame / J.L. Walewski, T.R. Keller, D.D. Stump, A.D. Branch // RNA. - 2001. - V.7(5). - P.710-721.

247. Wang, C. Translation of human hepatitis C virus RNA in cultured cells is mediated by an internal ribosome-binding mechanism / C. Wang, P. Sarnow, A. Siddiqui // J. Virol. - 1993. - V.67 (6). - P: 3338-33444.

248. Wu, C.G. Effect of hepatitis C virus core protein on the molecular profiling of human B lymphocytes / C.G. Wu, A. Budhu, S. Chen et al. // Mol. Med. - 2006. -V.12(1-3). - P.47-53.

249. Yamanaka, T. Subcellular localization of HCV core protein regulates its ability for p53 activation and p21 suppression / T. Yamanaka, T. Kodama T, T. Doi // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2002. - V.294(3). - P.528-534.

250. Yeung, L.T. Mother-to-infant transmission of hepatitis C virus / L.T. Yeung, S.M. King // Hepatology. - 2001. - V.34(2). - P.223-229.

251. Younossi, Z.M. High Efficacy and Significant Improvement of Quality of Life (QoL) in Adolescent Patients with Hepatitis C Genotype 1 (GT1) Treated with Sofosbuvir (SOF) and Ledipasvir (LDV) / Z.M. Younossi, M. Stepanova, W. Balistreri, K.B. Schwarz et al. // Hepatology. - 2016. V.64(suppl):709A.

252. Yuasa, T. The particle size of hepatitis C virus estimated by filtration through microporous regenerated cellulose fibre / T. Yuasa, G. Ishikawa, S. Manabe et al. // J. Gen. Virol. - 1991. - V. 72.(8). - P. 2021-2024.

253. Zaaijer, H.L. Variability of IgM response in hepatitis C virus infection / H.L. Zaaijer, L.T. Mimms, H.T. Cuypers et al. // J. Med. Virol. - 1993. - V.40. - P.184-187.

254. Zahran, K.M. Pattern of hepatitis virus infection among pregnant women and their newborns at the women's health center of assiut university, Upper Egypt / K.M. Zahran, M.S. Badary, M.N. Agban, N.H. Abdel Aziz // Int. J. Gynaecol Obstet. - 2010. -V.111(2). - P.171-174.

255. Zanetti, A.R. Hepatitis C in pregnancy and mother-to-infant transmission of HCV. Congenital and other related infectious disease of the newborn / A.R. Zanetti, E.Tanzi, A.E. Semprini et al. // Mushahwar. - 2007. - P. 153-171.

256. Zanetti, A.R. Mother-to-infant transmission of hepatitis C virus. Lombardy study group on vertical HCV ransmission / A.R.Zanetti, E.Tanzi, S. Paccagnini S et al. // Lancet. -1995. - V.4;345(8945). - P. 289-291.

257. Zippel, C. Prognosis and epidemiology of acute hepatitis B infection. / C. Zippel, B. Brinkmann, H.J. Eggers et al. // Dtsch. Med. Wochenschr. - 1984. -V.109 (13). -P.483-488.

258. Zona, L. HRas signal transduction promotes hepatitis C virus cell entry by triggering assembly of the host tetraspanin receptor complex / L. Zona , J. Lupberger, N. Sidahmed-Adrar et al. // Cell. Host. Microbe. - 2013. - V.13. - P. 302-313.