Клинико-биологические параллели диспластического невуса и меланомы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.10, кандидат медицинских наук Арутюнян, Лилит Саркисовна

• Арутюнян, Лилит Саркисовна
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Арутюнян, Лилит Саркисовна

Список принятых сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Эпидемиология диспластического невуса и меланомы кожи

1.2 Этиопатогенетическая взаимосвязь диспластического невуса и меланомы кожи

1.3 Генетические нарушения, ассоциированные с диспластическим невусом и меланомой кожи

1.4 Клинико — гистологическая картина диспластического невуса и меланомы кожи

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1 Объём исследования и общая характеристика больных

2.2 Забор, исследование крови и операционного материала

2.3 Статистическая обработка

Глава 3. Результаты исследования

3.1 Анализ клинических особенностей новообразований при ДН и МК

3.1.1 Клинико — гистологические особенности ДН

3.1.2 Клинико - гистологические особенности МК

3.2 Комплексный анализ молекулярно-генетической патологии диспластического невуса и меланом кожи

3.3 Диагностическая ценность используемых в настоящем исследовании клинических признаков дифференциального диагноза ДН и МК

Глава 4 Обсуждения результатов

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-биологические параллели диспластического невуса и меланомы»

Актуальность темы

Меланома кожи (МК) является одним из агрессивных злокачественных новообразований кожи. В последние годы наблюдается» тенденция к росту заболеваемости МК. Среднегодовой прирост заболеваемости МК в мире составляет 3-7% среди белокожего населения Diepgen TL, 2002 [50]. Вместе с тем, в экономически развитых странах отмечается снижение смертности от этого заболевания. Так, выживаемость больных с МК в США составляет 91%, в Европе - 81% и приблизительно 40% в развивающихся странах Parkin DM,2002 [114].

Прогноз заболевания определяет своевременная диагностика и лечение заболевания. Отмечено, что при выявлении опухоли на ранних стадиях (рТ1, рТ2) можно достигнуть 10-летнего безрецидивного периода в 80-90% случаев путём хирургического лечения Демидов JI.B. 2002 [6]. Несмотря на высокий уровень заболеваемости, в развитых странах отмечается снижение смертности, что связана с ранней диагностикой заболевания, своевременным лечением, выявлением лиц входящих в группу риска, и лечением новообразований являющихся предшественниками МК, одним из которых является диспластический невус (ДН). Позже в 1968 г. Lynch и Krush первыми описали два случая этого заболевания, отметив при этом ряд его особенностей [93].

В 1974г. Munro описал наличие взаимосвязи между пигментными образованиями и семейной МК [107]. Официально, этот синдром был представлен в 1978г. Clark, Reimer, и соавторами, назвав его FAMMM (familial atypical multiple mole melanoma syndrome) - синдром семейных атипических множественных невусов и меланомы [40].

По данным ВОЗ около половины случаев МК развивается на фоне предшествующих меланоцитарных невусов Avril M. F. 1994 [21], в 20 - 40% случаев МК возникает на фоне ДН Benova G.2003, Rhodes A.R 1983[27, 125].

По данным Таскег и соавторов 1997, относительный риск возникновения МК из ДН имеет прямую связь с его количеством и, в зависимости от этого колеблется.от 1 до12 раз [147]. В связи с этим выявление пациентов с ДН и их диспансерное наблюдение приобретает важное значение и определяет актуальность ранней диагностики МК.

Семейная или наследственная предрасположенность является одним из главных факторов возникновения ДН, но встречаются и спорадические формы, которые, как правило, имеют менее высокий коэффициент перерождаемости в МК. Так, риск возникновения МК у пациента, имеющего ДН, в семье которого, хотя бы один близкий родственник болен МК, составляет 100%, а в случаях, не ассоциированных с синдромом диспластических невусов (СДН) — 50-60% Щетинина Л.Н.,1992[17]. При изучении гистологических данных установлено, что 36% процентов МК возникает на фоне спорадического ДН Skender-Kalnenas TM., 1995[135]. По данным Friedman, 1985 МК из ДН развивается в 6 раз чаще, чем из простого невуса. Однако надо отметить, что прогноз МК развивающейся на фоне меланоцитарных невусов благоприятнее, чем у пациентов с развитием опухоли на не измененной коже[57].

Механизмы, приводящие к озлокачествлению клетки разнообразны. К ним относятся делеции определенных хромосомных районов, аномальное метилирование регуляторных районов генов-супрессоров и мутации в различных генах. При этом надо отметить, что к образованию опухоли могут приводить как мутации в протоонкогенах (гены, способствующие клеточному делению), так и в генах-супрессорах опухолевого роста. Несмотря на имеющиеся научные данные в литературе, механизмы малигнизации ДН в МК до сих пор недостаточно ясны, что определяет актуальность данного исследования.

Последние достижения в молекулярной биологии раскрыли механизмы злокачественной трансформации нормальной клетки в злокачественную.

Однако, причины перерождения доброкачественных невусов- в МК до сих 6 пор остаются неясными, что определяет необходимость исследования молекулярно - генетических механизмов трансформации доброкачественных невусов.

В этой связи были определены цели и задачи исследования.

Цель исследования:

Усовершенствовать диагностику и прогнозирование течения диспластического невуса и меланомы кожи на основе молекулярно-генетических исследований.

Задачи исследования:

1. Провести сравнительную оценку особенностей клинической картины диспластического невуса и меланомы кожи;

2. Провести комплексный молекулярно-генетический анализ структурных и функциональных нарушений при диспластическом невусе и меланоме кожи;

3. Определить диагностическую и прогностическую значимость выявленных онкомаркёров (ВКАБ, р16, р53) при диспластическом невусе;

4. Разработать диагностические и прогностические алгоритмы при ведении больных с диспластическим невусом и меланомой кожи.

Научная новизна:

Впервые проведено исследование клинико-биологических параллелей диспластического невуса и меланомы кожи.

Впервые проведен комплексный молекулярно-генетический анализ структурных и функциональных нарушений при диспластическом невусе и меланоме кожи, включающий поиск делеций короткого плеча хромосомы 9р21 (район расположения гена р16/ОЖША), мутаций и аномального метилирования гена р16/СОКЫ2А, активирующих мутаций протоонкогена ВКАР и делеций гена р53.

Практическая значимость работы:

Выявлены особенности? клинического проявления ДН и МК, что позволяет совершенствовать дифференциальную диагностику, проводить адекватное лечение и прогнозировать течение заболевания.

По результатам определения? метилирования и делеций гена р16 для; меланом и активирующих мутаций протоонкогена ВЯАР при диспластическом невусе разработан подход ведения больных; при ДН и МК. Мутации: гена р16 необходимо определять- в семейных случаях меланомы. кожи и диспластического невуса, а также при раннем возникновении и распространенной форме заболевания с другими типами злокачественных новообразований.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Выявлены, клинические особенности ДН и МК, позволяющие улучшить диагностику этих заболеваний, выявить группу риска и провести адекватное лечение.

2. Исследование образцов опухолевой ткани выделенных у пациентов с ДН и МК выявило молекулярную патологию гена р1б в 62,5% случаев МК и в 25,8% - ДН. Таким образом, нарушения р16 более характерны для МК.

3. Мутации ВРАБ были обнаружены в 25,8% случаев*в образцах ДН и лишь в 6,25% случаев МК, что подтверждает характерность мутаций ВКАР дляДН.

4. Рекомендуется определение мутаций ВКАБ при ДН для оценки риска малигнизации и диспансерного наблюдения. Целесообразно определение структурных нарушений р16 при МК, особенно в семейных случаях заболевания.

Внедрение работы

Результаты работы внедрены в практику на кафедре кожных и венерических болезней Ф] 1110В им И.М. Сеченова, Научно Исследовательского Центра Первого МГМУ им. И.М; Сеченова, МНИОИ им.

П. А. Герцена, кафедра онкологии ИПК ФМБА. 8

Апробация диссертации:

Материалы диссертации доложены на научно - практических конференциях: «IV международный конгресс эстетической медицины» (Москва, 2004); «V международный конгресс эстетической медицины» (Москва 2005); «I международное научное собрание Индонезского Общества Хирургисекой Онкологии» (Джакарта 2005), «Международный конгресс по онкохирургии» (Сочи 2008), I международный форум «Медицины и красоты» (Москва 2008), международный конгресс « Индустрия красоты: от прикладной эстетики до коррекции патологии» (Москва 2008), «Международное собрание эстетической и реконструтивной хирургии лица» (Миконас 2009), III конгресс с международным участием «Опухоли головы и шеи» (Сочи 2009), научно - практическая конференция « Инновации в дерматологии, косметологии и эстетической медицины» (Уфа 2009).

Публикации:

По материалам диссертации опубликовано 14 печатных работ.

Структура и объем диссертации: Диссертация изложена на 113 страницах машинописного текста. Содержит: введение, 4 главы, выводы, практические рекомендации и список литературы. Диссертация иллюстрирована 17 таблицами и 15 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Кожные и венерические болезни», Арутюнян, Лилит Саркисовна

Выводы

1. Установлены отличительные клинические признаки, позволяющие дифференцировать диспластический невус и меланому кожи: асимметрия (ДН 4,3%, МК 72,4%), резкие границы (ДН 23,1%, МК 68,9), динамические изменения (ДН 1,4%, МК 93,3%), стертость кожного рисунка (ДН 33,4%, МК 80%)

2. В результате комплексного молекулярно-генетического анализа структурных и функциональных нарушений при диспластическом невусе и меланоме кожи выявлены делеции короткого плеча 9 хромосомы, аномальное метилирование гена р16, точечные мутации гена ВКАТ, как наиболее значимые прогностические факторы.

3 Определение активирующей мутации протоонкогена ВКА!7 при диспластическом невусе, особенно в сочетании с другими молекулярно-генетическими нарушениями, свидетельствует о высоком риске его малигнизации.

4. Оптимальным прогностическим алгоритмом в плане развития меланомы кожи является выявление у больных с диспластическими невусами молекулярно-генетических нарушений с последующим динамическим клинико-инструментальным наблюдением.

Практические рекомендации

1. Отличительные признаки ДН и МК позволяют использовать их в качестве дифференциально-диагностических критериев, что ведет к улучшению диагностики этих заболевании, выбору оптимальных методов лечения и более точному прогнозированию их течения.

2. Предложенный дифференциально-диагностический алгоритм можно рекомендовать в качестве скрининга среди населения.

3. При меланоме кожи целесообразно определение делеций хромосомы 9р22 и метилирования гена р16 для прогноза течения заболевания, а при диспластическом невусе - определение активирующих мутаций протоонкогена ВЯАР для оценки риска малигнизации.

4. В семейных случаях меланомы кожи при раннем возникновении и распространенной форме заболевания, нередко сочетающегося с другими злокачественными новообразованиями, у пациента информативно определение мутации гена р16.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Арутюнян, Лилит Саркисовна, 2011 год

1. Барчук A.C. Хирургическое лечение меланом Практическая онкология. 2001. 4 (8). 31 36с

2. Борисова Г.Н., Кудрявцева Г.Т. // Вестн. дерматол. 2006 - № 3. -С. 43-45

3. Гладунова З.Д. Цитологическая диагностика меланом кожи. Канд. дисс.,1972 с 10

4. Давыдов М.И., Аксель Е.М. М. Злокачественные новообразования в России и странах СНГ в 2000 году: РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, 2002.-281с

5. Даниель-Бек К.В., Колобяков A.A. Злокачественные опухоли кожи и мягких тканей.М:Медицина, 1979. С184

6. Демидов JI.B., Харкевич Г.Ю. Адъювантное лечение больных меланомой кожи//Практическая онкология.2002-№4(8): 42-49

7. Демидов Л.В., Харкевич Г.Ю., Маркина И.Т. и др. Меланома и другие злокачественные новообразования кожи. Энциклопедия клинической онкологии // Руководство для практических врачей / М.И. М.: РЛС, 2005. С. 341 -364

8. Казубская Т.П., Харкевич Г.Ю.,Мусатов В.К. и др. Диспластические невусы и их значимость для идентификации предрасположенности к развитию и ранней диагностики меланомы кожи // Вестни Онкол. Научн центра им. H.H. Блохина 1993. №1.С20-25

9. Макин И.Л., Пшенистов К.П., Избранные вопросы пластической хирургии. —Ярославль, ДИА пресс, 1999. - Т.1, №1

10. Мукерия А.Ф. Эпидемиология злокачественной меланомы кожи в Москве. Автореф. дис канд.мед.наук.М.,1991С.ЗО

11. Соколов Д.В., И.В. Булычева, Махсон А.Н., и др. Диспластический невус // Российский онкологический журнал 2009 - №5. -С. 44-45

12. Трапезников Н.Н., Аксель Е.М., Бармина Н.М., Состояние онкологической помощи населению стран СНГ в 1998 году Москва: РОНЦ им Н.Н. Блохина РАМН 1999. С. 192

13. Харкевич Г.Ю., Егоров Г.Н., Манзюк JI.B. и др., Отечественные нитропроизводные в лечении меланомы кожи. Российский биотерапевтический журнал, №2, том 1, 2003, С. 49 53

14. Червонная' Л.В., Диагностика опухолей кожи меланоцитарного генеза: автореферат. М., 2003. - С. 21

15. Червонная Л.В., Потекаев Н.Н., Диспластический невус, // Клиническая дерматология и венерология 2003 - №3. - С. 82

16. Чиссов В.И., Старинский В.В., Петрова Г.В., Состояние онкологической помощи населению России в 2003 году, 2004г, ст.84

17. Щетинина Л.Н., Паршкова С.М. .Диспластический невус. Архив патологии 1992;2(54):45-47

18. Annessi G., Cattaruzza Maria. S., Adeni D, Balivia G, Laurenza M., Macchini V., Melchi F, et al. Correlation between clinical atypia and histologyc dysplasia in acquired melanocytic nevi.J Am Acad Dermatol 2001: 77-85

19. Atkins MB, Lotze MT, Dutcher JP et al. High-dose recombinant interleukin 2 therapy for patients with metastatic melanoma: analysis of 270 patients treated between 1985 and 1993. J. Clin. Oncol 1999,. 17: 2105-2116

20. Avril M. F., Cascinelli N., Cristofolini M. Clinical diagnosis of melanoma:- W.H.O. Melanoma Programme Publications.-Milano(Italy).-1994.- 3: -28

21. Bafounta ML, Beauchet A, Aegerter P, Saiag P. Is dermoscopy (epiluminescence microscopy) useful for the diagnosis of melanoma? Arch Dermatol. 2001;137:1343-1350

22. Balch CM, Soong SJ, Gershenwald JE, et al. Prognostic factors analysis of 17,600 melanoma patients: validation of the American Joint Committee on Cancer Melanoma Staging System. J Clin Oncoli 2001;19:3622-3634.

23. Barnbill L Raymond., Thomas B Fitzpatrick, Katrin Fandray, Robert O. Kenet, Martin C Mibm, Arthur J. Sober "Color atlas and synopsis of pigmented1 lesions", 123-134

24. Barnhill RL. Current status of the dysplastic melanocytic nevus. J Cutan Pathol. 1991;18:147-59

25. Barnier J.V., Papin C., Eychene A., Lecoq O., Calothy G. The mouse B-raf gene encodes multiple protein isoforms with tissue-specific expression. J. Biol. Chem. 1995; 270: 23381-23389

26. Benova G, Goggins W, Quinn T, et al, cutaneous melanoma associated with nevi. Arch Dermatol 2003; 139: 1620 1624

27. Bishop DT, Demenais F, Goldstein AM et al. Geographical variation in the penetrance of CDKN2A mutations for melanoma. J Natl. Cancer inst 2002, 94:894-903

28. Black WC, Hunt WC/ Histologic correlations with the clinical diagnosis of dysplastic nevus. Am J Surg Pathol 1990; 14:44-52

29. Brose, M.S., Volpe P., Feldman M., Kumar M., Rishi I., Gerrero R., Einhorn E., Herlyn M., Minna J., Nicholson A., Roth S.M., Albelda S.M., Davies H. BRAF and RAS mutations in human lung cancer and melanoma. Cancer Res. 2002; 62:6997-7000

30. Busca R. et al. Ras mediates the cAMP-dependent activation of extracellular signal-regulated kinases (ERKs) in melanocytes. EMBO J. 2000; 19: 2900-2910

31. Carey WP, Thompson CJ, Synnestvedt M, Guerry D, Halpern A,Schultz D, Elder DE. Dysplastic nevi as a melanoma risk factor inpatients with familial melanoma. Cancer 1994;74 :3118-3125

32. Carli P, Naldi L, Lovati S, La Vecchia C. The density of melanocytic nevi correlates with constitutional variables and history of sunburns: a prevalence study among Italian schoolchildren1. Int J»f Cancer 2002;101:375-379

33. Cascinelli N. Margin of resection- in the management of primary melanoma.' Semin Surg Oncol. 1998;14:272-275

34. Castresana JS, Rubio MP, Vazques JJ, Idoate M, Sober AJ, Seizinger BR, Barnhill RL. Lack of allelic deletion and point mutation as mechanisms of p53 activation-in human malignant melanoma Int. J Cancer 1993 Oct 21; 55(4): 562-5

35. Chantelle Ung-Juurlink. American Academy of Dermatology 1999 Awards for Young Investigators in Dermatology. The prevalence of CDKN2A mutations in patients with atypical nevi and malignant melanoma. J Am Acad Dermatol 1999; 41

36. Chapman PB, Einhorn LH, Meyers ML et al. Phase III multicenter randomized trial of the Dartmouth regimen versus dacarbazine in patients with metastatic melanoma. J. Clin. Oncol. 1999.17: 2745-2751

37. Chin L, Merlino G, DePihno RA(1998) malignant melanoma:modern black plague and genetic black box. Genes Dev 12:3467-3481

38. Chong H., Vikis H.G., Guan K-L. Mechanisms of regulating the Raf kinase family. Cell Signal. 2003; 15: 463-469

39. Clark WH Jr, Reimer RR, Greene M, Ainsworth AM, Mastrangelo MJ.Origin of familial malignant melanomas from heritable melanocytic lesions. The B-K mole syndrome'. Arch Dermatol May1978; 114(5):732-8

40. Clark WH, Elder DE,Guerry D IV, Epstein MN, Greene MH, Van Horn M. A study of tumor progression: the precursor lesions of superficial spreading and nodular melanoma. Hum Pathol 1984; 15:1147-65107

41. Conley J., Lattes H., Orr W. Desmoplastic in malignant melanoma (a rare variant of spindle cell melanoma)// Cancer.- 1971-Vol.28. P.914-936

42. Consensus Developmental Panel on early melanoma. Diagnosis andtreatment of early melanoma. JAMA 1992;268:1314-9101

43. Cooke K.R., Spears G.F.S., Elder D.E. et al., «Dysplastic nevi in a population based study»., Cancer! 1989; 63:1240-44

44. Cowan JM, HalabanR, Francke U (1998) Cytogenetic analysis, ofmelanocytes from premalignantnevi and melanomas. J Natl Cancer Inst 80:1159i1164

45. Cox NH1, Aitchison TC, Mackie RM. ExtrafaciaL lentigo maligna melanoma: analysis of 71 cases and comparison^ with'lentigo maligna melanoma of the head and neck. Br J Dermatol. 1998;139:439-443

46. Crombie J.K. Racial differences in melanoma incidence."Brit.J. Cancer", 1979,40,№2,185-193

47. Crutcher W. A., Sagebeil R.W. Clinical diagnosis of dysplastic nevi in community practice. Lancet. 1984; 1: 729

48. Diepgen TL, Mahler V. The epidemiology of skin cancer. Br J Dermatol 2002; 146

49. Elder D, Elenitsas R. Benign pigmented lesions and malignant melanomas. In: Elder D, Elenitsas R, Jaworsky C, Johnson B Jr, eds. Histopathology of the Skin. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven; 1997:625-684.

50. Eton O, Legha SS, Bedikian- AY et al Sequential biochemotherapyversus chemotherapy for metastatic melanoma: results from a Phase IIIrandomized trial. J. Clin. Onco /2002. 20,2045-2052102

51. Fernando SS, Johnson S, Bate J. Immunohistochemical analysis of cutaneous malignant melanoma: comparison of S-100 protein,. HMB-45 monoclonal' antibody and NKI/C3' monoclonal antibody. Pathology. 1994;26:16- . 19.

52. Fetsch PA, Riker Alf Marineóla FM, et ah Tyrosinase: immunoreactivity in fine-needle aspiration; samples of metastatic; malignant melanoma. Cancer. 2000;90:252-257.

53. Flores JF, Walker GJ, Glendening JM, et al. (1996) Loss of the pl6INK4a and pi5INK4b genes, as well as neighboring 9p21 markers, in sporadic melanoma. Cancer Res 56: 5023-5032.

54. Fountain' JW, Karayiorgou M, ernstoff MS. Et al. (1992) Homozygous deletions within human chromosome band 9p21 in melanoma. Proc Natl Acad Sci USA89:10557-105561;

55. Friedman RJ, Rigel DS, Kopf AW. Early detection of malignant melanoma: the role of physician examination and self-examination of the skin. CA Cancer J-Clin. 1985;35:130-151

56. Fujimoto A, morita R, Hatta N, Takehara K, Minoru Takata. (1999) pl6INK4a inactivation is not frequent in uncultured sporadic primary cutaneus melanoma: Oncogene 18:2527-2532

57. Garbe C, Blum A. Epidemiology of cutaneous melanoma in Gennany and worldwide. Skin Pharmacol Appl Skin Physiol 2001; 14: 280-90

58. Goldstein A.M, Tucker MA. Genetic epidemiology of cutaneous melanoma. A global perspective. Arch. Dermatol. 2001,137:1493-6:

59. Gonzalgo ML, Bender CM, You EH, et al. Low frequency of pi6/ CDKN2A methylation in sporadic melanoma: comparative approaches for methylation analysis of primary tumors. Cancer Res. 1997;57(23):5336- 5347

60. Grant B.D., Hemmer W., Tsigelny I., Adams J.A., Taylor S.S. Kinetic analyses of mutations in the glicine-rich loop of cAMP-dependent protein kinase. Biochemistry 1998; 37: 7708-7715.

61. Greene MH, Clark WHJ, Tucker MA, Kraemer KH, Elder DE, Fraser MC. High risk of malignant melanoma in melanoma-pronefamilies with dysplastic nevi. Ann Intern Med 1985; 102:458-465 105.

62. Grob JJ. How to detect melanoma among thousands of nevi? Presented at: Twentieth World Congress of Dermatology; July 1-5, 2002; Paris, France.

63. Gulec A, Seckin D, Saray Y, Sarifakioglu E, Moray G, Colak T. Number of acquired melanocytic nevi in renal transplant recipients as a risk factor for melanoma. Transplant Proc 2002;34:2136.

64. Haumburg-Lever G, Metzler G, Kaiserling E. Ultrastructural localization of HMB-45 binding sites. J Cutan Pathol. 1991;18:432-435

65. Hayward NK(1996) The current situation with regard to human melanoma and genetic inferences. Curr Opin Biol 8: 136-142.

66. Healy E, Belgaid CE, Takata M, et al. (1996) Allelotypes of primary cutaneous melanoma and benigh melanocytic nevi. Cancer Res 56: 589-593

67. Healy E, Sikkink S, Ress JL (1996) Infrequent mutation of pl6INK4a in sporadic melanoma. J Invest Deramtol 107: 318-321.

68. Holly EA, Kelly JW, Shpall SN, Chiu SH. Number of melanocytic nevi as a major risk factor for malignant melanoma. J Am Acad Dermatol 1987;17:459-46

69. Hussussian C. J., J.P. Struewing, A.M. Goldstein, P. A. T. Higgins, D. S. Ally, M.D, Steahan, W.H. Clark, M.A. Tucker, N. C. Dracopoli, Germline pi6 mutation in familial melanoma, Nat. Genet. 8 (1994) 15-21

70. Ikawa S., Fukui M., Ueyama Y., Tamaoki N., Yamamoto T., Toyoshima K. B-raf, a new member of the raf family, is activated* by DNA rearrangement. Mol. Cell Biol 1988; 8: 2651-2654

71. Ives NJ, Stowe RL, Lorigan P, Wheatley K. Chemotherapy compared! with biochemotherapy for the treatment of metastatic melanoma: a meta-analysis of 18 trials involving 2,621 patients. J. Clin. Oncol. 25,5426-5434 (2007).

72. Jain S., Alien P.W. Desmoplastic malignant melanoma and its variants.A study of 45 cases //Am. J. Surg. PathoL- 1989,- Volt 13.-P.4927-4932

73. Jansen H.W., Lurz R., Bister K., Bonner T.I., Mark G.E., Rapp U.R. Homologous cell-derived oncogenes in avian carcinoma virus MH2 and murine sarcoma virus 3611. Nature 1984; 307: 281-284

74. Jemal A, Siegel R, Ward E, et al. Cancer statistics, 2006.CA Cancer J C//«. Mar-Apr 2006;56(2): 106-30

75. Jungbluth AA, Iversen K, Coplan K, et al. T311: an anti-tyrosinase monoclonal antibody for the detection of melanocytic lesions in paraffin embedded tissues. Pathol Res Pract. 2000;196:235-242.

76. Kanzler MH, Mraz-Gernhard S. Primary cutaneous melanoma and its precursor lesions: diagnostic and therapeutic overview. J Am Acad Dermatol. 2001;45:260-276. 88.

77. Kaufmann O, Koch S, Burghardt J, et al. Tyrosinase, melan-A, and KBA62 as markers for the immunohistochemical identification of metastatic amelanotic melanomas on paraffin sections. Mod Pathol. 1998; 11:740-746.

78. Kefford RF, Newton Bishop JA, Bergman W, Tucker MA.

79. Counseling and DNA testing for individuals perceived to be genetically105predisposed to melanoma: a consensus statement of the Melanoma Genetics Consortium. J Clin Oncol.

80. Kelly JW, Crautcher WA, Sagebiel RW. Clinical diagnosis of dysplastic melanocytic nevi: a clinicopathologic correlation. J Am Acad Dermatol 1986;14:1044-52

81. King R, Weilbaecher KN, McGill G, et al. Microphthalmia transcription factor: a sensitive and, specific melanocyte marker for melanoma diagnosis. Am J Pathol. 1999;155:731-738.

82. Kolch W. Ras/Raf signalling and emerging pharmacotherapeutic targets. Expert. Opin. Pharmacother. 2002; 3: 709-718

83. Kopf AW, Friedman RJ, Rigel DS. Atypical mole syndrome. J Am Acad Dermatol 1990;22:117-118

84. Kraemer KH, Greene MH, Tarone R, Elder DE, Clark WHJ, Guerry D. Dysplastic naevi and cutaneous melanoma risk. Lancet 1983;2:1076-1077 72.

85. Kraemer KN,Greene MN. Dysplastic naevus syndrome: familial and sporadic precursors of cutaneous melanoma. Dermatol Clin 1985;3:225-37

86. La Vecchia C., Lucchini F., Negri E et al. Recent trends in worldwide mortality from cutaneous melanoma in youth and middle age. Int J Cancer 1999; 81: 62-6

87. Lee JY, Dong SM, Shin MS, et al. (1997) Genetic alterations of pl6INK4a and p53 genes in sporadic dysplastic nevus. Biochem Biophys Res Commun 237: 667-672

88. Levin B. David, Wilson K, Valadares de A. G., Webber J, Kenny P, Kusser W (1995) Detecton of p53 Mutations in Benign and Dysplastic Nevi. Cancer research 55, 4278 4282, October 1, 1995

89. Liu V, Mihm MC.Pathology of malignant melanoma. Surg Clin North Am. Feb 2003;83(1):31-60, v.

90. Lynch H.T., Krush A J., Slowinsky E.J., Marsh M.F., Cancer families, hereditary cancer syndrome, Nebr State Med J. 1968; Nov; 53(11):524-30

91. MacKie RM, Bray CA, Hole DJ et al Incidence of and survival from malignant melanoma in Scotland: an epidemiological study. Lancet 2002; 360: 587-91 20.

92. MacKie RM, Lang J, Boxer M. BRAF mutations in malignant melanoma. Br J Dermatol 2003; 149 (Suppl. 64): 43

93. MacKie RM: Incidence, risk factors and prevention of melanoma. Eur J Cancer 1998; 34 (Suppl. 3): S3-6.

94. Marais R., Light Y., Paterson H.F., Mason C.S., MarshallC,J. 1997. Differential regulation of Raf-1, A-Raf and' B-Raf by oncogenic Ras and tyrosine kinases. J. Biol Chem. 272: 4378-4383

95. Marks R. Epidemiology of melanoma. Clin Exp Dermatol 2000; 25: 459-63

96. Mays SR, Nelson BR. Current therapy of cutaneous melanoma. Cutis 63,293-298 (1999)

97. Menzies SW, Westerhoff K, Rabinovitz H, Kopf AW, McCarthy WH, KatzB/ Surface Microscopy of pigmented Basal cell carcinoma/ Arch Dermatol.2000; 36:1012-1016

98. Mercer K.E., Pritchard C.A. Raf proteins and cancer: B-Raf is identified as a mutational target. Biochim. Biophys. Acta 2003; 1653: 25-40

99. Meyer P, Klaes R, Schmitt C et al Exclusion of BRAFV599E as a melanoma susceptibility mutation. Int J Cancer 2003; 106:78-80

100. Middleton MR, Grob JJ, Aaronson N et al Randomized Phase III study of temozolomide versus dacarbazine in the treatment of patients with advanced metastatic malignant melanoma. J. Clin. Oncol 18,158-166 (2000).

101. Miettinen M, Fernandez M, Franssila K, et al. Microphthalmia transcription factor in the immunohistochemical diagnosis of metastatic melanoma: comparison with, four other melanoma markers. Am J; Surg Pathol. 2001;25:205-211.

102. Miller JG, Neil SM. Gender, and cutaneous melanoma. Br J Dermatol. 1997;136:657-665

103. Munro DD. Multiple active junctional naevi with, family history of malignant,melanoma. Proc R Soc.Med. Jun 1974;67(7):594-5

104. Nakajima T, Watanabe S, Sato Y, et al. An immunoperoxidase study of S-100 protein distribution in normal and neoplastic tissues. Am J Surg Pathol. 1982;6:715-727.

105. Orchard GE. Comparison of immunohistochemical labelling of melanocyte differentiation antibodies melan-A, tyrosinase and HMB 45 with NKIC3 and S100 protein in the evaluation of benign naevi and malignant melanoma. Histochem J. 2000;32:475-481

106. Ordonez NG, Ji XL, Hickey RC. Comparison of HMB-45 monoclonal antibody and S-100 protein in the immunohistochemical diagnosis of melanoma. Am J Clin Pathol. 1988;90:385-390.

107. Papin C., Denouel-Galy A., Laugier D., Calothy G., Eychene A. Modulation of kinase activity and oncogenic properties by alternative splicing reveals a novel regulatory mechanism for B-Raf. J. Biol. Chem. 1998; 273: 2493924947

108. Park W-S, Vortmeyer A, Pack S, et al (1998) Allelic deletion at chromosome 9p21 (pl6) and 17pl3 (p53) in microdissected sporadic dysplastic nevus. Human Pathol. 29:127-130

109. Parkin DM, Bray F, Ferlay J, Pisani P. Global cancer statistics, 2002. CA Cancer J Clin. Mar-Apr 2005;55(2):74-108

110. Piepkorn M., Meyer L.J., Goldgar D. et al. «The dysplastic melanocytic nevus: a prevalent lesion that correlates poorly with clinical phenotype», J Am Acad Dermatol. 1989; 20: 407-15)

111. Poynter JN; Elder JT; Fullen DR; Nair RP; Soengas MS; Johnson TM; Redman B; Thomas NE; Gruber SB. BRAF and NRAS mutations in melanoma and melanocytic nevi // Melanoma Res. 2006; 16(4):267-73 (ISSN: 0960-8931)

112. Pritchard C.A., Samuels M.L., Bosch E., McMahon M. Conditionally oncogenic forms of the A-Raf and B-Raf protein kinases display different biological and biochemical properties in NIH 3T3 cells. Mol. Cell Biol. 1995; 15: 6430-6442

113. Radhi JM(1999) Malignant melanoma arising from nevi, p53, pl6, and Bcl-2:expression in benign versus malignant components.J cutan Med Surg 3: 293-297.

114. Rajagopalan, H., Bardelli A., Lengauer C., Kinzler K.W., Vogelstein B., Velculescu V.E. Tumorigenesis: RAF/RAS oncogenes and mismatch-repair status. Nature 2002; 418: 934.

115. Rapp U.R., Goldsborough M.D., Mark G.E., Bonner T.I., Groffen J., Reynolds Jr. F.Hi, Stephenson J.R: Structure' and' biological activity of v-raf, a unique oncogene transduced by a retrovirus. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1983; 80: 4218-4222.

116. Reed JA, Loganzo Jr F, Shea CR^et al.(1995) Loss of expression of the pl6/cyclin-dependent kinase inhibitor 2 tumor suppressor gene in melanocytic lesions correlates with invasive stage of tumor progression. Cancer Res 55:2713-2718f

117. Rhodes A.R, Harrist TJ, Day CL, et al, Dysplastic melanocityc nevi in histologic association with 234 primary cutaneous melanomas. J Am Academ Dermatol 1983; 9: 563 -574

118. Rigel DS, Anderson RR1, Ceilley RI, et al. Cutaneous Tumors. Program of the 61st Annual Meeting of the American Academy of Dermatology; San Francisco, California; March 22-26, 2003. Symposium 325

119. Rigual NR, Popat SR, Jayaprakash V, et al.Cutaneous head and'neck melanoma: the old and the new. Expert Rev Anticancer Ther. Ma 2008;8(3):403-12.142,143

120. Rippey J.J.,Rippey E., Girand R.M. Patology of malignant melanoma of the skin in Black Africans."S.Afr.Med.J.1975, 49, № 19,789-792

121. Rogers RS 3rd, Gibson LE. Mucosal, genital, and unusual clinical variants of melanoma. Mayo Clin /Voc.Aprl997;72(4):362-6.143

122. Sagebiel RW. Melanocytic nevi in histologic association with primary cutaneous melanoma of superficial spreading and nodular types: effect of tumor thickness. J Invest Dermatol 1993;100:322S-325S

123. Schittek B, Busch S et al. The RAS/RAF/MEK/ERK and PI3K/AKT signaling pathways present molecular targets for the effective treatment of advanced melanoma. Front. Biosci. 2005,10: 2986-3001

124. Serrano M., Hannon D. Beach, A new regulatory motif in cell cycle control causing specific inhibition of cyclin D/CDK4 Nature 366 1993, 704 -707

125. Serrone L, Zeuli M, Sega FM, Cognetti F. Dacarbazine-based chemotherapy for metastatic melanoma: thirty-year experience overview. J. Exp. Clin. Cancer Res. 2000 19:21-34'

126. Slade J., Marghood A.A., Salopek T.G. et al. «Atypical mole syndrome : Risk factor for cutaneous malignant' melanoma and implications for management», J Am Acad Dermatol. 1995;32:47

127. Slade Johnny MD, Ashfaq A. Varghood MD, Thomas G. Salopek MD et al. Atypical mole syndrome: Risk factor of cutaneous malignant melanoma and implications for management. JAMACAD DERMATOL 1995;32:479-94(AM)

128. Steijlen P.M., Bergman W.,Hermans J. et al., «The efficacy of histopathological criteria- required for diagnosing dysplastic nevi», Histopathology. 1998;12:289-300

129. Stephens R.M., Sithanandam G., Copeland T.D., Kaplan D.R., Rapp U.R., Morrison D.K. 95-kilodalton B-Raf serine/threonine kinase: identification of the protein and its major autophosphorylation site. Mol. Cell Biol. 1992; 12: 37333742

130. Stork P.J.S., Schmitt J.M. Crosstalk between cAMF and MAP kinase signaling in the regulation of cell proliferation. Trends in Cell Biology 2002; 12: 258-266

131. Storm S.M., Cleveland J.L., Rapp U.R.Expression of raf family proto-oncogenes in normal mouse tissues. Oncogene 1990; 5: 345-351ill

132. Streetly A, Markowe H. Changing trends in the epidemiology of malignant melanoma: gender differences and their implications for public health. Int J Epidemiol 1995; 24: 897-907

133. Swerdlow Aj; English J, MacKie RM, O'Doherty CJ; Hunter JA, Clark J} Hole DJ. Benign melanocytic naevii as a risk factor for malignant melanoma. Br Med J (Clin»Res Ed)1986;292:1555-1*5 59

134. Tacker MA, Halpern! A, Holly EA etj al. Clinically recognized' dysplastic nevi. A centrarrisk factor for cutaneous melanoma. JAMA 1997; 277: 1439- 1444

135. Tannapfel A., Sommerer F., Benicke M., Katalinic A., Uhlmann D., Witzigmann Hi, Hauss J., Wittekind C. 2003. Mutations of the BRAF gene in cholangiocarcinoma but not in hepatocellular carcinoma. Gut 52: 706-712

136. Tran P Tina., Linda'Titus-Ernstoff, Ann E. Perry, Marc S. Ernstoff & Irene F. Newsham(2002) Alteration of chromosome 9p21 and/or pl6 in benign and dysplastic nevi suggests a role in early melanoma progression Cancer Causes and Controll3:657-682

137. Tsao Hensis MD,PhD, Update on familial cancer syndromes and the skin, J Am Acadof Dermatol 2000;42:939-69

138. Tucker MA, Fraser MC, Goldstein AM, Struewing JP, King MA, Crawford JT, Chiazze EA, Zametkin DP, Fontaine LS, Clark WH Jr. A natural history of melanomas and dysplastic nevi: an atlas of lesions in melanoma-prone families. Cancer 2002;94:3192-3209

139. Vennegoor C, Hageman P, Van Nouhuijs H, et al. A monoclonal antibody specific for cells of the melanocyte lineage. Am J Pathol. 1988;130:179-192

140. Wagner SN, Wagner C, Briedigkeit L, Goos M (1998) Homozygous deletion of the pl6INK4a and the pl5INK4b tumour suppressor genes in a suset of human sporadic cutaneous malignant melanoma. BR J Dermatol 138 13-21

141. Weiss J, Bertz J, Jung EG. Malignant melanoma in southern Germany: different predictive value of risk factors for melanoma subtypes. Dermatológica 1991; 183:109-113

142. Whiteman DC, Whiteman CA, Green AC. Childhood sun exposure as a risk factor for melanoma: a systematic review of epidemiological studies. Cancer Causes Control 2001; 12: 69-82

143. Wick MR, Swanson PE, Rocamora A. Recognition of malignant melanoma by monoclonal antibody HMB-45: an immunohistochemical study of 200 paraffin-embedded cutaneous tumors. J Cutan Pathol. 1988;15:201-207

144. Zitelli JA, Brown CD, Hanusa BH. Surgical margins for excision of primary cutaneous melanoma. J Am Acad Derma