Клиническая значимость ключевых компонентов системы активации плазминогена при раке слизистой оболочки полости рта тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат медицинских наук Бацев, Ахмед Фуаедович

• Бацев, Ахмед Фуаедович
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Бацев, Ахмед Фуаедович

Список условных сокращений.

Введение.

ГЛАВА I. Опухоли слизистой оболочки полости рта и система активации плазминогена.

1.1 Обзор литературы.

1.2 Опухолевые биомаркеры.

1.3 Общие представления о системе активации плазминогена.

1.4 Клинические исследования основных компонентов системы активации плазминогена в опухолях человека.

1.5 Система активации плазминогена в опухолях слизистой оболочки полости рта.

ГЛАВА И. Материалы и методы исследования.

2.1. Характеристика больных раком слизистой оболочки полости рта.

2.2. Специальные лабораторные методы исследования.

2.3. Статистический анализ результатов исследования.

ГЛАВА III. Показатели системы активации плазминогена в опухолях больных раком слизистой оболочки полости рта.

3.1. Содержание показателей системы активации плазминогена в опухоли и неизмененной ткани больных раком слизистой оболочки полости рта.

3.2. Содержание показателей системы активации плазминогена в опухоли больных раком слизистой оболочки полости рта с учетом основных клинических и морфологических признаков заболевания.

3.3. Связь показателей системы активации плазминогена в опухоли с возрастом, полом и длительностью анамнеза заболевания.

3.4. Связь показателей системы активации плазминогена в опухоли больных раком слизистой оболочки полости рта с учетом локализации процесса.

3.5. Связь показателей системы активации плазминогена в опухоли больных раком слизистой оболочки полости рта со стороной поражения.

3.6. Связь показателей системы активации плазминогена в опухоли больных раком слизистой полости рта с формой роста опухоли.

3.7. Связь показателей системы активации плазминогена в опухоли больных раком слизистой оболочки полости рта со степенью дифференцировки опухоли.

3.8. Связь показателей системы активации плазминогена с эффективностью лечения и степенью выраженности лечебного патоморфоза первичной опухоли больных раком слизистой оболочки полости рта.

ГЛАВА IV. Отдаленные результаты лечения больных раком слизистой оболочки полости рта.

4.1. Отдаленные результаты лечения больных раком слизистой оболочки полости рта.

4.2. Связь отдаленных результатов лечения больных раком слизистой оболочки полости рта с основными показателями системы активации плазминогена.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клиническая значимость ключевых компонентов системы активации плазминогена при раке слизистой оболочки полости рта»

Актуальность проблемы.

Среди злокачественных опухолей головы и шеи плоскоклеточный рак слизистой оболочки органов полости рта является наиболее распространенным, и по частоте занимает второе место после рака гортани (Chhetri D.K. et al., 2000; Diaz E.M. et al., 2003). В мире ежегодно регистрируется около 600000 больных, впервые заболевших раком органов полости рта (A.A. Уваров, 1997; Reichard К. et al., 1993; American Cancer Society, 2004). Среди вновь выявленных больных раком слизистой полости рта 50% вскоре будут иметь локальный рецидив и отдаленные метастазы (М.А.Кропотов, 2004; Khuri F.R. et al., 2000; Forastiere A. et al., 2001). При этом, по данным Н.Н.Трапезникова и Е.М. Аксель (2000) выявление больных раком слизистой оболочки полости рта и глотки увеличилось с 17,8% в 1995г. до 28,5% в 1999г. Отмечены также половые различия в частоте обнаружения рака слизистой полости рта. Так, рак слизистой оболочки полости рта в три раза чаще выявляется у мужчин по сравнению с женщинами (Кропотов М.А., 2004; Чиссов В.И. и Дарьялова C.JL, 2006). Следует подчеркнуть, что возраст является бесспорным фактором риска этого заболевания и среди пожилых людей рак слизистой оболочки полости рта встречается чаще, хотя в последнее время он стал выявляться и у молодых (Любаев В.Л., 1985; Кондратьева А.П., 1998; Пачес А.И., 2000; Reichard К. et al. 1993; Forastiere А. et al., 2001; Iype E. et al., 2004).

Эпидемиологические исследования в России и за рубежом показали, что за последние десятилетия заболеваемость и смертность от рака органов полости рта значительно возросли (Двойрин В.В. и соавт., 1995; Старинский В.В. и соавт., 2002; Mignagna M.D. et al., 2004). По данным Г.В. Фалилеева и соавт. (1988), W.J. Goodwin (2000), O.A. Жаркова (2007) 5-летняя выживаемость больных раком слизистой оболочки полости рта колеблется от 20,0 до 43,4%, а по результатам исследования Е.Г. Матякина (1988) 96,8% больных погибают от локальных рецидивов и/или регионарных метастазов в первые 2 года от начала лечения.

По данным ВОЗ летальность от рака органов полости рта занимает четвертое место после рака легкого, желудка и колоректального рака (Напалков Н.П., 1995; Mignogna M.D. et al., 2004).

Этиология рака слизистой оболочки полости рта не известна, патогенез изучен не до конца. Вместе с тем, анализ заболеваемости раком слизистой оболочки полости рта убедительно показал, что она зависит от наличия предраковых процессов, таких как лейкоплакия, болезнь Боуэна, папилломатоз, красный плоский лишай (Пачес А.И., 2000; Петрова JT.B., 2002; Shapiro S. et al., 1996; Vasudevan D. et al., 1998; Funk G.F. et al., 2002). Так, например, частота опухолевой трансформации очагов лейкоплакии составляет около 10%, а риск малигнизации очагов красного плоского лишая слизистой оболочки полости рта в плоскоклеточный рак увеличивается в 50 раз (Фицпатрик Ф. и соавт., 1999). По результатам эпидемиологического исследования L. Dobrossy (2005) и данным Американского общества по изучению рака (ASCO) большая часть злокачественных опухолей слизистой полости рта связана с курением, злоупотреблением алкоголем, а также ВПЧ-инфецированием слизистой полости рта, что представляет высокий риск развития определенных видов рака головы и шеи (Agrawal Y. et al., 2008; Petrelli N.J. et al., 2009).

Несмотря на легкую доступность полости рта для визуального осмотра, более 2/3 больных обращаются за специализированной помощью с распространенными III или IV стадиями опухолевого процесса (Матякин Е.Г. и соавт., 1991; Уваров А.А., 1997; Мудунов A.M., 2002). Лечение данной категории больных — крайне сложно, а часто даже малоэффективно. Кроме того, слизистая оболочка полости рта и ротоглотки с подлежащими тканями представляют анатомически сложную область, что обусловливает не только специфичность клинического течения опухолевого процесса, но и выбор метода лечения этих новообразований (Матякин Е.Г., 1988; Жарков О.А., 2007).

В связи с этим не теряет своей актуальности разработка новых подходов к оценке биологического поведения опухоли, а также общего прогноза заболевания и выбору наиболее адекватных схем лечения для каждого пациента.

Известно также, что плоскоклеточный рак слизистой оболочки полости рта характеризуется молекулярно-биологическими особенностями, а клиническое «поведение» опухоли тесно связано с таким биологическим признаком как степень ее агрессивности. Последнее характеризуют основные морфологические признаки болезни, а именно, размер первичного очага опухоли, степень ее дифференцировки, наличие метастазов в регионарных лимфатических узлах, прорастание капсулы опухоли, наличие опухолевых эмболов в кровеносных сосудах (Ferlito A. et al., 2002; Inagi К. et al., 2002; Jose J. et al., 2003; Mignogna M.D. et al., 2004). Перечисленные обстоятельства, свою очередь определяет выбор индивидуального плана лечения. Стало быть, вопрос об индивидуальном подборе схем лечения для каждого пациента не теряет своей актуальности. Анализ ближайших и отдаленных результатов хирургического, лучевого и химиолучевого лечения больных раком слизистой оболочки полости рта свидетельствует о неоднозначности выше указанных факторов прогноза и настоятельно требует изучения и внедрения в практику новых опухолевых маркеров (Федотенко С.П., 1998; Agra I. et al., 2003). И среди них, маркеры, характеризующие пролиферативную активность клеток опухоли, ее чувствительность к лекарственным препаратам, степень выраженности апоптоза и неоангиогенеза, которые характеризуют фундаментальные особенности злокачественной опухоли, а именно, инвазивную ее способность и метастатический потенциал (Герштейн Е.С. и соавт., 1998; Schliephake Н. et al., 2003; Thomas G.R. et al., 2005; Cortesina G. et al., 2006). Все вышеуказанные маркеры тесно связаны с прогнозом болезни.

Для решения этих вопросов используют определение в опухолях, в том числе и при плоскоклеточном раке головы и шеи, молекулярно-биологических маркеров, которые характеризуют определенные биологические особенности опухоли, а именно, специфику ее «поведения» и регуляции роста, лекарственную чувствительность, способность к инвазии и метастазированию (Кушлинский Н.Е., 2005; Имянитов Е.Н., 2008; Мирошниченко И.И. и соавт., 2009; Schliephake H., 2003; Cruz JJ. et al., 2007).

В последние годы пристальное внимание исследователи уделяют системе активации плазминогена - протеолитическому каскаду, участвующему в разрушении окружающей опухоль базальной мембраны и внеклеточного матрикса, что способствует выходу опухолевых клеток из их первоначального окружения и образованию опухолевых узлов в отдаленных органах и тканях (Герштейн Е.С. и соавт., 2007; Ulisse S. et al., 2009). Ключевым звеном этого каскада является сериновая протеаза - активатор плазминогена урокиназного типа (иРА), расщепляющая плазминоген до плазмина. Плазмин в свою очередь уменьшает уровень внеклеточных матричных гликопротеидов и активирует некоторые про-металлопротеиназы, играя решающую роль в процессах инвазии и метастазирования. Помимо иРА в образовании плазмина может участвовать также активатор плазминогена тканевого типа (tPA) (Damjanovich L. et al., 1994). Активность обоих ферментов подавляется двумя белковыми ингибиторами, принадлежащими к семейству серинов - PAI-1 и PAI-2 (Andreasen P.A. et al., 1990).

Клинические исследования выявили, что уровень и соотношение экспрессии различных компонентов системы активации плазминогена в опухоли может служить показателем ее метастатической и инвазивной активности, а также биологически значимым фактором прогноза при ряде новообразований (Кушлинский Н.Е. и соавт., 2005; Герштейн Е.С. и соавт., 2007).

Основополагающие исследования роли системы активации плазминогена были выполнены при РМЖ. В отечественной и зарубежной литературе представлены результаты исследований, свидетельствующие о том, что изучение компонентов системы активации плазминогена в злокачественных опухолях молочной железы является весьма перспективным с клинической точки зрения (Герштейн Е.С. и соавт., 2001, 2005; Foekens J.A. et al., 1992, 1996; Kim S. et al., 1998; Duffy M.J., 2005). При этом, наиболее значимыми показателями следует считать иРА и PAI-1, повышенный уровень которых свидетельствует о неблагоприятном прогнозе заболевания (Кушлинский Н.Е.и соавт., 2009; Janicke F. et al., 1993; Schmitt M. et al., 1997; Thomssen C. et al, 1998; Harbeck N. et al., 1998; Duffy M.J., 2005).

В России изучение основных компонентов системы активации плазминогена и их рецепторов проводили достаточно широко при различных доброкачественных и злокачественных опухолях у человека: колоректальном раке (Голубченко О.В., 2004), раке желудка (Щербаков A.M. и соавт., 2002; Огнерубов H.A. и соавт., 2005), пищевода (Кушлинский Н.Е. и соавт., 2002), РМЖ (Герштейн Е.С. и соавт., 2004, 2005), опухолях костей (Юсифов А.И.,

2001), новообразованиях щитовидной железы (Харидити Т.Ю. и соавт.,

2002), опухолях яичников и гиперплазии эндометрия (Герштейн Е.С. и соавт., 2002, 2003).

В последние годы пристальный интерес онкологи проявляют к системе активации плазминогена у больных плоскоклеточным раком слизистой полости рта (Baker Е.А. et al., 2007; Speleman L. et al., 2007; Bacchiocchi R. et al., 2008). Необходимо отметить, что исследователям удалось выявить в большинстве злокачественных опухолей различного гистогенеза, в том числе и при раке слизистой оболочки полости рта, увеличение уровней иРА и

PAI-1, по сравнению с гомологичными нормальными тканями (Герштейн Е.С. и соавт., 2010; Hundsdorfer В. et al., 2005).

Система активации плазминогена представляет собой протеолитический каскад, участвующий в разрушении окружающей опухоль базальной мембраны и внеклеточного матрикса, способствуя выходу опухолевых клеток из первичного очага и образованию опухолевых узлов в отдаленных органах и тканях. Ключевыми компонентом этой системы является сериновая протеаза — активатор плазминогена урокиназного типа (иРА), которая расщепляет плазминоген до плазмина (Огнерубов Н.А. и соавт., 2005). Плазмин уменьшает уровень внеклеточных матричных гликопротеидов и активирует некоторые про-металлопротеиназы, что играет решающую роль в процессах инвазии и метастазирования (Кушлинский Н.Е. и соавт., 2008; Mignatti P. et al., 1986; Baker Е.А. et al., 2007). Изучение системы активации плазминогена в опухолях слизистой оболочки полости рта показало, что уже на ранних стадиях заболевания проявляется характерное для большинства злокачественных новообразований усиление активации плазминогена по урокиназному типу (Hundsdorfer В. et al., 2005). Помимо uPA в активации плазминогена может участвовать также активатор тканевого типа (tPA), однако, его роль при развитии опухолей, по-видимому, противоположна роли иРА и сводится к разрушению опухолевых клеток и защите окружающих тканей от распространения опухоли (Герштейн Е.С. и соавт., 2010; Bell W.R., 1996).

Уровень и соотношение экспрессии различных компонентов системы активации плазминогена в опухолевой ткани может служить показателем метастатической и инвазивной активности опухоли, являясь вследствие этого биологически значимым фактором прогноза при различных новообразованиях (Герштейн Е.С. и соавт., 2001, 2004; Duffy M.J. et al., 1999). В работах В. Hundsdorfer et al. (2004a, 2004b), L.Speleman et al. (2007) также выявлена связь уровней иРА и его ингибитора PAI-1 в опухоли с прогнозом плоскоклеточного рака слизистой оболочки полости рта.

Несмотря на то, что исследования системы активации плазминогена проводили при различных опухолях, большинству исследователей удалось выявить общую закономерность, заключающуюся в том, что в злокачественных опухолях различного гистогенеза происходит значительное увеличение концентрации иРА и PAI-1 по сравнению с гомологичными нормальными тканями и доброкачественными новообразованиями. Содержание tPA в большинстве злокачественных опухолей снижено. Все это может иметь как теоретическое, так и практическое значение. С одной стороны, оно свидетельствует о том, что усиление активации плазминогена по урокиназному типу, сопровождающееся усилением защиты опухолевых клеток от саморазрушения (за счет увеличения уровня PAI-1), является достаточно универсальным признаком малигнизации. С другой стороны, повышенная экспрессия иРА в опухоли по сравнению с окружающей тканью делает этот фермент перспективной избирательной мишенью для антиметастатической противоопухолевой терапии рака слизистой полости рта, характеризующимся достаточно низкой чувствительностью к стандартным видам химиотерапии. S. Nozaki et al. (2005), S.F. Yang et al. (2008), H. Zhou et al. (2009) полагают, что подавление активации плазминогена по урокиназному типу может стать одним из подходов к разработке новых схем антиметастатической терапии рака слизистой оболочки полости рта.

Таким образом, прогноз плоскоклеточного рака слизистой оболочки полости рта определяет целый ряд клинико-морфологических и молекулярно-биологических факторов. В настоящее время известно большое количество молекулярно-генетических маркеров, которые являются показателями биологической активности раковых клеток и могут быть использованы в качестве прогностических критериев в онкологической клинике. Наличие или отсутствие экспрессии отдельных маркеров делает более точную оценку такого сложного, комплексного, многоступенчатого процесса как метастазирование опухоли. Вместе с тем, значение большинства этих факторов окончательно не изучено у больных раком слизистой оболочки полости рта. Стало быть, одновременный анализ уровня экспрессии ключевых компонентов системы активации плазминогена иРА, 1РА и их ингибитора РА1-1 в опухолях больных плоскоклеточным раком слизистой оболочки полости рта определяет несомненную актуальность настоящего исследования, так как позволяет оценить агрессивность этих опухолей и, возможно, выделить пациентов с высоким риском развития раннего рецидива, которым показано адъювантное лечение.

Роль основных компонентов системы активации плазминогена в опухоли больных плоскоклеточным раком слизистой оболочки полости рта изучена пока еще недостаточно, а в литературе клинические исследования иРА, 1РА, РА1-1 у этой категории пациентов представлены единичными наблюдениями. Вместе с тем, по данным отечественной и мировой литературы исследования продукции металлопротеиназ клеточного матрикса и некоторых компонентов системы активации плазминогена (иРА, 1РА, РА1-1) при плоскоклеточных раках и, в частности, при раке пищевода и слизистой оболочке полости рта проводятся достаточно активно в последнее десятилетие (Гончаров Д.Ю., 2003; Ка1ауата А.й а1., 2004; УатавИка К. е1 а1., 2004; НипсЫогГег В. ег а1., 2005).

Следовательно, актуальность данной работы заключается в возможности прогнозирования течения опухолевого процесса у больных с одинаковыми морфологическими формами злокачественного новообразования (плоскоклеточный рак) слизистой оболочки полости рта на основании изучения нескольких независимых биохимических показателей, а именно, концентрации основных компонентов системы активации плазминогена (иРА, 1РА, РА1-1), определяемых с помощью специфических иммуноферментных методов исследования в первичной опухоли.

Цель настоящего исследования — сравнительное изучение содержания основных компонентов системы активации плазминогена (иРА, 1РА, РА1-1) в биоптатах рака слизистой оболочки полости рта и непораженной слизистой, оценка их взаимосвязи с основными клинико-морфологическими особенностями заболевания, а также их роли в прогнозе и выборе адекватных методов терапии.

Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие задачи исследования:

1. Иммуноферментным методом определить концентрации активаторов плазминогена урокиназного (иРА) и тканевого (1РА) типов и ингибитора активатора плазминогена 1 типа (РА1-1) в цитозолях опухолей больных плоскоклеточным раком слизистой оболочки полости рта.

2. Сопоставить уровни иРА, 1РА и РА1-1 в злокачественных опухолях слизистой оболочке полости рта и гомологичных гистологически неизмененных тканях.

3. Оценить взаимосвязь содержания иРА, 1РА и РА1-1 в опухолях слизистой оболочки полости рта с основными клинико-морфологическими особенностями заболевания (стадией, локализацией, полом и возрастом пациентов, степенью дифференцировки и характером роста опухоли).

4. Оценить взаимосвязь содержания иРА, tPA и РА1-1 в опухолях слизистой оболочки полости рта со степенью выраженности лечебного патоморфоза.

5. Выявить прогностическую значимость компонентов системы активации плазминогена у больных раком слизистой оболочки полости рта.

Научная новизна

Впервые в отечественной практике на большом клиническом материале (71 больной плоскоклеточным раком слизистой оболочки полости рта) проведено одновременное иммуноферментное определение содержания нескольких компонентов системы активации плазминогена (иРА, tPA, РА1-1) в опухоли и гистологически неизмененной ткани слизистой оболочки полости рта. Обнаружено, что в опухолях слизистой оболочки полости рта уровни медиан основных компонентов системы активации плазминогена иРА и РА1-1 были выше, а 1РА ниже, чем в непораженной слизистой. При этом, выявлена прямая достоверная корреляционная зависимость между показателями иРА и РА1-1 в опухоли.

Обнаружено, что показатели иРА, tPA, РА1-1 в опухоли не связаны с возрастом больных раком слизистой оболочки полости рта, длительностью анамнеза заболевания и только медианы иРА в опухоли были достоверно выше у мужчин, чем у женщин.

Показано, что анатомическая локализация рака слизистой оболочки полости рта, форма его роста и степень дифференцировки не связаны с содержанием ключевых компонентов системы активации плазминогена в опухоли. Однако коэффициент соотношения иРАЛРА в опухолях, локализованных в области корня языка, был выше, чем в опухолях слизистой щеки.

Выявлено, что уровни иРА в опухоли достоверно выше при IV стадии, чем при I, при критерии Т4, чем при Ть при N2, по сравнению с N0. Показатели РА1-1 и 1РА в опухоли не связаны со стадией рака слизистой полости рта и критериями Т и N.

Обнаружено линейное увеличение частоты раннего прогрессирования (в 1 год наблюдения) рака слизистой оболочки полости рта после проведенной терапии при сочетании таких неблагоприятных признаков как Т3-Т4 и повышенные уровни экспрессии иРА в опухоли.

Наиболее высокие показатели 3-летней общей выживаемости больных раком слизистой полости рта выявлены при IV степени лечебного патоморфоза опухоли (100%), по сравнению с 1-Ш степенями (32,8±25,4%) и его отсутствием (25,0±21,7%). При этом выявлена связь уровней РА1-1 в опухолях слизистой оболочки полости рта со степенью выраженности лечебного патоморфоза.

Показано снижение показателей 3-летней общей выживаемости больных раком слизистой полости рта с увеличением содержания иРА в опухоли.

Многофакторный анализ установил, что критерий Т и экспрессия РА1-1 в опухоли, значимо связаны с прогнозом рака слизистой оболочки полости рта.

Практическая значимость исследования

Анализ результатов исследования основных компонентов системы активации плазминогена показал, что высокие уровни иРА в опухолях слизистой оболочки полости рта позволяют выделить группу пациентов с «высоким» риском развития раннего местного рецидива, регионарных и отдаленных метастазов, что настоятельно требует более пристального внимания за этими больными после проведенной терапии, а также дополнительного использования более агрессивных методов лечения этой категории пациентов. Уровень экспрессии РА1-1 в опухолях слизистой полости рта тесно связан со степенью выраженности лечебного патоморфоза первичной опухоли, что определяет прогноз 3-летней общей выживаемости больных. Многофакторный анализ установил, что критерий Т и экспрессия

РА1-1 в опухоли достоверно связаны с прогнозом рака слизистой оболочки полости рта и при неблагоприятных уровнях этих маркеров, пациенты нуждаются в более агрессивном адъювантном лечении.

Основные положения, выносимые на защиту

1. В опухоли слизистой оболочки полости рта уровни основных компонентов системы активации плазминогена иРА и РА1-1 выше, а 1РА ниже, чем в непораженной слизистой. При этом, выявлена прямая достоверная корреляционная зависимость между показателями иРА и РА1-1 в опухоли.

2. Показатели иРА, 1РА, РА1-1 не связаны с возрастом больных раком слизистой полости рта, длительностью анамнеза заболевания и только медианы иРА в опухоли были достоверно выше у мужчин, по сравнению с женщинами.

3. Уровни иРА в опухоли выше при IV стадии, чем при I, при Т4, чем при Ть при N2, по сравнению с N0. Показатели РА1-1 и 1РА в не связаны со стадией рака слизистой полости рта и критериями Т и N.

4. Анатомическая локализация рака слизистой полости рта, форма его роста и степень дифференцировки не связаны с содержанием ключевых компонентов системы активации плазминогена в опухоли.

5. Соотношение иРАЛРА в опухолях, локализованных в области корня языка, больше, чем в опухолях слизистой щеки.

6. Наиболее высокие показатели 3-летней общей выживаемости больных раком слизистой полости рта выявлены при IV степени лечебного патоморфоза опухоли, по сравнению с 1-Ш степенями и его отсутствием.

7. Степень выраженности лечебного патоморфоза достоверно связана с экспрессией РА1-1 в опухоли.

8. Обнаружено линейное повышение частоты раннего прогрессирования (в 1 год наблюдения) рака слизистой полости рта после проведенной терапии при сочетании таких неблагоприятных признаков как Т3-Т4 и увеличения уровней иРА в опухоли.

9. Выявлено снижение показателей 3-летней общей выживаемости больных раком слизистой полости рта с увеличением содержания иРА в опухоли:

10. Многофакторный анализом установил, что критерий Т и экспрессия РА1-1 в опухоли достоверно связаны с прогнозом рака слизистой оболочки полости рта.

Апробация работы

Основные результаты диссертации доложены на: XI Российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 19-23 апреля 2004г.); Конгрессе «Национальные дни лабораторной медицины России-2004» (Москва, 20-22 октября 2004г.); Российской научно-практической конференции «Современное состояние и перспективы развития экспериментальной и клинической онкологии», посвященной 25-летию НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН (Томск, 24-25 июня 2004г.); XII Российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 18-22 апреля 2005г.); I Всероссийской научно-практической конференции патологоанатомов «Актуальные вопросы патологической анатомии» (Орел, 31 мая - 2 июня 2005г.); X Российском онкологическом конгрессе (Москва, 21-23 ноября 2006г.); XIII Российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 3-7 апреля 2006г.); XIV Российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 8-12 апреля 2007г.); Конгрессе «Национальные дни лабораторной медицины России-2007» (Москва, 10-12 октября 2007г.).

Материалы диссертации доложены на совместной научной конференции сотрудников лаборатории клинико-диагностической, лаборатории клинической биохимии и лаборатории клинической иммунологии опухолей централизованного клинико-лабораторного отдела, отделения опухолей опорно-двигательного аппарата, отделения вертебральной хирургии, патологоанатомического отдела опухолей человека НИИ клинической онкологии РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН 24 сентября 2010г.

Публикации результатов исследования

По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, 3 из них в журналах, рекомендованных ВАК.

Структура и объем работы

Диссертация изложена на 170 страницах машинописного текста, включает введение, обзор данных литературы, главу «Материалы и методы исследования», две главы посвященных анализу результатов собственных наблюдений, обсуждение полученных данных, выводы, список цитируемой литературы, который состоит из 60 работ отечественных и 172 работ зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 18 таблицами, 23 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Бацев, Ахмед Фуаедович

выводы

1. В злокачественных опухолях слизистой оболочки полости рта уровни медиан основных компонентов системы активации плазминогена (иРА — 1,3 и РА1-1 — 21,8 нг/мг белка) были выше, а 1РА ниже (0,3 нг/мг белка), чем в непораженной слизистой (иРА — 0, РА1-1 - 0,2 и гРА — 0,4 нг/мг белка). При этом, выявлена прямая достоверная корреляционная зависимость между показателями иРА и РА1-1 в опухоли (г=0,67; р=0,0001).

2. Показатели иРА, 1РА, РА1-1 не связаны с возрастом больных раком слизистой полости рта, длительностью анамнеза заболевания и только у мужчин медианы иРА в опухоли были достоверно выше, чем у женщин (1,7 и 1,1 нг/мг белка, соответственно; р=0,038).

3. Значения показателей иРА, 1РА и РА1-1 неоднозначны при злокачественных опухолях слизистой оболочки полости рта. Уровни иРА в опухоли выше при IV стадии, чем при I (0 и 1,7 нг/мг белка, р=0,01), при Т4, чем при Т1 (1,4 и 0 нг/мг белка), при N2, по сравнению с N0 (1,9 и 0,9 нг/мг белка). Показатели РА1-1 и 1РА в не связаны со стадией рака слизистой полости рта и критериями Т и N.

4. Анатомическая локализация рака слизистой полости рта, форма его роста и степень дифференцировки не связаны с содержанием ключевых компонентов системы активации плазминогена в опухоли. Однако соотношение иРАЛРА в опухолях, локализованных в области корня языка, больше, чем в опухолях слизистой щеки (соответственно 10,3 и 0,7; р=0,02).

5. Экспрессия РА1-1 достоверно связана со степенью лечебного патоморфоза. Наиболее высокие показатели 3-летней общей выживаемости больных раком слизистой полости рта выявлены при

IV степени лечебного патоморфоза опухоли (100%), по сравнению с 1-Ш степенями (32,8±25,4%) и его отсутствием (25,0±21,7%), а его степень достоверно связана с экспрессией РА1-1 в опухоли, уровни которой были достоверно ниже при IV степени, чем без такового (соответственно 10,4 и 47,4 нг/мг белка, р=0,04).

6. Обнаружено линейное повышение частоты раннего прогрессирования (в 1 год наблюдения) рака слизистой полости рта после проведенной терапии при сочетании таких неблагоприятных признаков как Т3-Т4 и увеличения уровней иРА в опухоли: в 50,0% - при иРА <0,07 нг/мг белка, в 60,0% - иРА 0,071-1,3 нг/мг белка, 69,2% - иРА 1,31-2,6 нг/мг белка, в 83,3% при значениях иРА >2,61 нг/мг белка.

7. Выявлено снижение показателей 3-летней общей выживаемости больных раком слизистой полости рта с увеличением содержания иРА в опухоли: 66,7±27,2% - при уровнях иРА<0,07 нг/мг белка, 41,8±19,9% - иРА 0,071-1,3 нг/мг белка, 35,1±15,2% - иРА 1,31-2,6 нг/мг белка и 21,4+18,8% - иРА >2,6 нг/мг белка.

8. Многофакторный анализ установил, что критерий Т (р=0,03) и экспрессия РА1-1 в опухоли (р=0,027) значимо связаны с прогнозом рака слизистой оболочки полости рта.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Анализ отечественной и в основном зарубежной литературы по исследованию системы активации плазминогена в опухолях слизистой полости рта и данные проведенного нами исследования показали, что важной общей закономерностью являлся тот факт, что значительное увеличение тканевой концентрации иРА и РА1-1 является практически универсальным свойством исследованных злокачественных опухолей. При этом у преобладающего числа пациентов, содержание иРА и РА1-1 в опухоли, как правило, в несколько раз было выше, чем в окружающей неизмененной слизистой. Эти данные подтверждают теоретические представления о том, что усиление активации плазминогена по урокиназному типу способствует инвазивному росту, характерному для злокачественных опухолей. При этом опухолевые клетки эффективно защищают себя от саморазрушения за счет увеличения экспрессии ингибитора РА1-1. Еще одной важной особенностью, характерной для рака слизистой полости рта, является положительная корреляционная взаимосвязь между уровнями иРА и РА1-1 в опухоли. Таким образом, усиление экспрессии иРА и РАМ в опухоли происходит координировано и, как правило, не зависит от их уровня в окружающей неизмененной ткани.

Более сложная картина отмечена для 1РА, экспрессия которого в опухолях снижается независимо от изменений в экспрессии других компонентов системы активации плазминогена, но в определенной степени взаимосвязана с уровнем этого фермента в окружающей ткани. Хотя средние концентрации этого белка, как правило, в опухоли ниже, чем в окружающей неизмененной ткани, что соответствует его предполагаемой роли протектора нормальной ткани от прорастающих в нее опухолевых клеток, у отдельных больных достаточно часто могли наблюдать и противоположное соотношение. Кроме того, показано, что митогенные клеточные эффекты инициируются комплексом иРА/иРАЯ, который является также промотором опухолевого неоангиогенеза и подтверждает роль иРА и РА1-1 в УЕОЕ-зависимом ангиогенезе. При этом, в нормальных тканях и доброкачественных новообразованиях подобных корреляционных взаимоотношений, как правило, не наблюдали.

Таким образом, значительное и координированное увеличение содержания иРА и РА1-1 является практически универсальным свойством не только рака слизистой оболочки полости рта, но различных злокачественных опухолей, а содержание 1РА в большинстве злокачественных опухолей слизистой полости рта снижено, при этом показатели экспрессии компонентов системы активации плазминогена связаны в основном со стадией рака слизистой полости рта (иРА), степенью выраженности лечебного патоморфоза опухоли (РА1-1) и прогнозом заболевания (иРА).

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Бацев, Ахмед Фуаедович, 2011 год

1. Абелев, Г.И. На пути к пониманию природы рака /Г.И. Абелев, Т.Л.Эрайзер // Биохимия. — 2008. — Т. 73, №5. — С. 605-618.

2. Аксель, Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ /Е.М. Аксель, М.И. Давыдов, Т.И. Ушакова. — М., 2001. —256с.

3. Арсенин, С. Л. Молекулярно-биологическая диагностика в онкологии /С.Л. Арсенин // Клиническая лабораторная диагностика. — 2006. №10. —С. 25-32.

4. Возный, В.К. Возможности радикального лечения больных с эпителиальными опухолями головы и шеи III-IV стадий: Химиотерапия в лечении онкологических больных /В.К. Возный, М.Ю. Добровольская. — М., 1993. —С. 13-16.

5. Воробьев, Ю.И. Методика химиолучевой терапии местнораспространенного рака орофарингеальной зоны / Ю.И. Воробьев, М.Ю. Бяхов, М.И. Гарбузов и соавт.// Российский онкологический журнал. — 2000. — №2. — С. 39-42.

6. Герштейн, Е.С. Фактор роста эндотелия сосудов и компоненты системы активации плазминогена при раке и гиперплазии эндометрия /Е.С.

7. Герштейн, E.B. Грицаенко, М.Е. Щербаков, A.M. Щербаков, H.A. Огнерубов, Н.Е. Кушлинский // Вопросы онкологии. — 2003. — том 49, №6. — С. 725729.

8. Герштейн, Е.С. Активаторы плазминогена урокиназного и тканевого типов и их ингибитор PAI-1 в опухолях человека /Е.С. Герштейн, Н.Е. Кушлинский // Бюлл. Экспер. Биол. Мед. — 2001. — том 131, №1. — С. 81-87.

9. Герштейн, Е.С. Биологические маркеры рака молочной железы: методологические аспекты и клинические рекомендации /Е.С. Герштейн, Н.Е. Кушлинский // Маммология. — 2005. №1. — С. 65-70.

10. Герштейн, Е.С. Фактор роста эндотелия сосудов при раке пищевода /Е.С. Герштейн, A.M. Щербаков, Д.Ю. Гончаров, И.В. Поддубная, Н.Е. Кушлинский // Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химии. — 2004. №1. — С. 26-29.

11. Голубченко, О.В. Клиническое значение исследования компонентов системы активации плазминогена в опухолях толстой кишки /О.В. Голубченко // Автореф.дисс.канд.мед.наук. — Москва, 2004.

12. Давыдов, М.И. Злокачественные новообразования в России и странах СНГ в 2002 году /М.И. Давыдов, Е.М. Аксель // М. — Издательство ММА. — 2004.

13. Доброхотова, В.З. Анализ осложнений реконструктивных операций при злокачественных опухолях полости рта /В.З. Доброхотова // Автореф.дисс.канд.мед.наук. — Москва, 2006.

14. Жарков, O.A. Эффективность хирургического лечения больных раком слизистой оболочки полости рта и ротоглотки после радикальной лучевой терапии /O.A. Жарков // Автореф.дисс.канд.мед.наук. — Москва,2007.

15. Жуков, Н.В. Целевая терапия в лечении солидных опухолей: практика противоречит теории /Н.В. Жуков, С.А. Тюляндин // Биохимия. —2008.—том 73, №5. —С. 751-768.

16. Замятин, O.A. Отдаленные результаты внутритканевой гамма-терапии рака слизистой оболочки языка и дна полости рта /O.A. Замятин, М.П. Вахрамова, М.Н. Иванов и соавт. // Вопросы онкологии. — 1999. — том 45, №1. — С. 26-28.

17. Зимина, H.A. Клинико морфологические особенности первичной опухоли и регионарных лимфатических узлов в прогнозе лечения ракаорганов полости рта /H.A. Зимина // Автореф.дисс.канд.мед .наук. — Москва, 1998. —26с.

18. Злокачественные новообразования в России в 2008 году (заболеваемость и смертность) /Под ред. академика РАМН В.И.Чиссова, проф. В.В.Старинского, Г.В.Петровой // М. — 2010. — 255с.

19. Имянитов, E.H. Молекулярная диагностика в онкологии /E.H. Имянитов // Молекулярная биология. — 2008. — том 42, №5. — С. 772-785.

20. Казьмин, А.И. Система активации плазминогена при раке желудка /А.И. Казьмин, H.A. Огнерубов, Е.С. Герштейн, Н.Е. Кушлинский // Успехи современного естествознания. — 2003., №8. — С. 25-28.

21. Кисличко, А.Г. Химиотерапия в комбинированном и комплексном лечении злокачественных опухолей слизистой оболочки полости рта, ротоглотки и верхней челюсти /А.Г. Кисличко // Автореф.дисс. .докт.мед.наук. — Москва, 1998. — 34с.

22. Кропотов, М.А. Органосохраняющие и реконструктивные операции на нижней челюсти в комбинированном лечении рака слизистой оболочки полости рта /М.А. Кропотов // Автореф.дисс.докт.мед.наук. — Москва, 2004.

23. Кушлинский, Н.Е. Молекулярные маркеры опухолей /Н.Е. Кушлинский, Е.С. Герштейн, Л.К. Овчинникова, М.А. Дигаева // Бюлл. Экспер. Биол. Мед. — 2009. — том 148, №8. — С. 199-208.

24. Кушлинский, Н.Е. Биологические маркеры опухолей в клинике — достижения, проблемы, перспективы /Н.Е. Кушлинский, Е.С. Герштейн // Молекулярная медицина. — 2008., №3. — С. 48-55.

25. Любаев, В.Л. Показания к функционально-сохранным операциям при местно-распространенном плоскоклеточном раке слизистой оболочкиполости рта и ротоглотки /В.Л. Любаев // Стоматология. — 1990., №2. — С. 46-48.

26. Любаев, В.Л. Хирургический метод в лечении местнораспространенного рака слизистой оболочки полости рта и ротоглотки /В.Л. Любаев// Автореф.дисс.докт.мед.наук. — Москва, 1985.

27. Манухин, И.Б. Синдром поликистозных яичников /И.Б. Манухин, М.А. Геворкян, Н.Е. Кушлинский // М. — Медицинское информационное агенство. — 2004. — 190с.

28. Матякин, Г.Г. Радиохирургическое лечение рака языка и полости рта /Г.Г. Матякин // Автореф.дисс.докт.мед.наук. — Москва, 1989.

29. Матякин, Е.Г. Особенности хирургических вмешательств у больных раком полости рта и ротоглотки после радикального курса лучевой терапии /Е.Г. Матякин, A.A. Уваров, Г.Г. Матякин, В.А. Парамонов // Медицинская радиология. — 1991. — том 36, №4. — С. 33-36.

30. Медведева, C.B. Активаторы плазминогена урокиназного (иРА) и тканевого (tPA) типа и их ингибитор (PAI-1) при меланоме кожи /C.B. Медведева // Автореф.дисс.канд.мед.наук. — Москва, 2001.

31. Мирошниченко, И.И Биомаркеры в современной медико-биологической практике /И.И. Мирошниченко, С.Н. Птицина // Биомедицинская химия. — 2009. — том 55, вып. 4. — С. 425-440.

32. Мудунов, A.M. Сравнительная оценка эффективности неоадъювантной химиотерапии в комплексном и комбинированном лечении плоскоклеточного рака слизистой оболочки полости рта и ротоглотки /A.M. Мудунов // Автореф.дисс.канд.мед.наук. — Москва, 2002.

33. Напалков, Н.П. Злокачественные новообразования в СССР /Н.П. Напалков, В.М. Мерабишвили, Г.Ф. Церковный, М.Н. Преображенская // Вопросы онкологии. — 1995. — том 34, №3. — С. 277-309

34. Огнерубов, H.A. Система активации плазминогена при раке желудка /H.A. Огнерубов, Н.Е. Кушлинский, А.И. Казьмин // Монография. — Издательство Воронежского государственного университета. — 2005. — 96с.

35. Пачес, А.И. Опухоли головы и шеи /А.И. Пачес // М.: Медицина, 2000.—490с.

36. Петрова, JI.B. Клиника, патогенез и лечение красного плоского лишая слизистой оболочки полости рта /Л.В. Петрова // Автореф.дисс.докт.мед.наук. — Москва, 2002.

37. Поляков, П.Ю. Нетрадиционные подходы к лучевому лечению онкологических больных /П.Ю. Поляков, А.И. Коршунова, H.A. Ларионова и соавт. // Вопросы онкологии. — 1997., №5. — С. 487-492.

38. Проценко, С.А. Поиски путей индивидуализации противоопухолевой терапии /С.А. Проценко // Практическая онкология. —2007. —том 8, №4. —С. 173-181.

39. Светицкий, П.В. К вопросу о хирургическом лечении рака слизистой оболочки дна полости рта и языка /П.В. Светицкий, Е.Ф. Исламова // Стоматология. — 2005. — том 84, №5. — С. 55-57.

40. Сергеева, Н.С. Серологические опухолеассоциированные маркеры / Онкология. Национальное руководство. Под ред. В.И.Чиссова, М.И.Давыдова /Н.С. Сергеева, Н.В. Маршутина // М. — ГЕОТАР-Медиа.2008. — С. 8-26.

41. Танеева, А.Ш. Комбинированные реконструктивно-пластические операции при местно-распространенных опухолях орофарингеальной области /А.Ш. Танеева // Автореф.дисс.канд.мед.наук. — Москва, 2005.

42. Трапезников, H.H. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ /H.H. Трапезников, Е.М. Аксель // М. — 1999. — 295с.

43. Уваров, A.A. Органосохраняющие методы лечения местно-распространенного рака орофарингеальной области /A.A. Уваров // Автореф.дисс.докт.мед.наук. —Москва, 1997.

44. Федотенко, С.П. Злокачественные эпителиальные опухоли головы и шеи. Руководство по химиотерапии опухолевых заболеваний под ред. Н.И.Переводчиковой /С.П. Федотенко // М.: Практическая медицина. — 2005. —С. 182-195.

45. Фицпатрик, Т. Дерматология: Глава 4 «Нарушение пролиферации и дифференцировки кератиноцитов» /Т. Фицпатрик, Р. Джонсон, К. Вулф, М. Полано, Д. Сюрмонд // М. — Издательство «Практика». — 1999. — С. 76-79.

46. Чиссов, В.И. Онкология. Клинические рекомендации. (2-е издание исправленное и дополненное) /В.И. Чиссов, C.JI. Дарьялова // М.-ГЕОТАР-Медиа.-2009. — 928с.

47. Шенталь, В.В. Химиолучевое лечение рака ротоглотки. В материалах V Российской онкологической конференции (27-29 ноября2001г.) /В.В. Шенталь, И.К. Исмагулова, И.Н. Пустынский, Д.В. Гугунов // М. —2001. —С. 156.

48. Щербаков, A.M. Компоненты системы активации плазминогена при раке желудка /A.M. Щербаков, А.И. Казьмин, Е.С. Герштейн, Н.А. Огнерубов, Н.Е. Кушлинский // Тезисы докладов VI Российской онкологической конференции. —М. — 2002. — С. 169.

49. Юсифов, И.А. Активаторы плазминогена урокиназного и тканевого (uPA, tPA) типов и их ингибитор (PAI-1) при опухолях костей /И.А. Юсифов // Автореф.дисс. .канд.мед.наук. — Москва, 2001.

50. Agra, I.M.G. Postoperative complications after en bloc salvage surgery for head and neck cancer /I.M.G. Agra, A.L. Carvalho, E. Pontes et al. // Arch. Otolaryngol. Head Neck Surg. — 2003. — Vol.l29, N.12. — P. 1317-1321.

51. Allen, B.J. et al. Preclinical studies of targeted alpha therapy for breast cancer using 213Bi-labelled-plasminogen activator inhibitor type 2 /B.J.Allen, Z. Tian, S.M. Rizvi et al. // Br. J. Cancer. — 2003. — Vol.88, N.6. — P. 944-950.

52. Allgayer, A. Translational research on u-PAR /А. Allgayer // Eur. J. Cancer.-2010.-Vol.46, Iss.7.-p. 1241-1251.

53. American Cancer Society. Cancer Facts and Figures 2004. Atlanta, GA: American Cancer Society 2004.

54. Andreasen, P.A. Plasminogen activator inhibitors: hormonally regulated serpins. /P.A. Andreasen, B. Georg, L.R. Lund, A. Riccio, S.N. Stacey // Mol. Cell. Endocrinol. 1990. - Vol.68. - P. 1-19.

55. Arens, N. In vitro suppression of urokinase plasminogen activator in breast cancer cells — a comparison of two antisense strategies /N. Arens, M. Gandhari, U. Bleyl, R. Hildenbrand // Int. J. Oncol. — 2005. — Vol.26, N.l. — P. 113-119.

56. Baker, E.A. Plasminogen activator system in oral squamous cell carcinoma /E.A. Baker, D.J. Leaper, J.P. Hayter, A.J. Dickenson // Br. J. Oral Maxillofac. Surg.-2007. — Vol. 45, N.8. — P. 623-627.

57. Bell, W.R. The fibrinolytic system in neoplasia /W.R. Bell // Semin. Thromb. Hemost. — 1996. — Vol.22. — P. 459-478.

58. Berkenblit, A. A6, a urokinase plasminogen activator (uPA)-derived peptide in patients with advanced gynecologic cancer: a phase I trial /A. Berkenblit, U.A. Matulonis, J.F. Kroener et al.// Gynecol Oncol . — 2005. — Vol.99,N.l.—P. 50-57.

59. Bettendorf, O. Prognostic and predictive factors in oral squamous cell cancer: important tools for planning individual therapy? /O. Bettendorf, J. Piffko, A. Bankfalvi // Oral Oncol. —2004. — Vol.40. — P. 110-119.

60. Binder, B.R. uPAR-uPA-PAI-1 Interactions and Signaling: a Vascular Biologist's View /B.R. Binder, J. Mihaly, G.W. Prager // Thromb. Haemost. — 2007. — Vol.97. — P. 336-342.

61. Bloom, N.D. Carcinoma of the cheek mucosa. A retrospective analysis /N.D. Bloom, R.H. Spiro // Am. J. Surg. — 1980. — Vol.140. — P. 556559.

62. Boysen, M. The value of follow-up in patients treated for squamous cell carcinoma of the head and neck /M. Boysen, O. Lovdal, J. Tausjo, F. Winther // Eur. J. Cancer. — 1992. — Vol.28, N.2/3. — P. 426-430.

63. Brennan, J.A. Molecular assessment of histopathological staging in squamous-cell carcinoma of the head and neck /J.A. Brennan, L. Mao, R.H. Hruban, J.O. Boyle, Y.J. Eby, W.M. Koch et al. // N. Engl. J. Med. — 1995. — Vol.332. —P. 429-435.

64. Brizel, D.M. Hyperfractionated irradiation with or without concurrent chemotherapy for locally advanced head and neck cancer /D.M. Brizel, M.E. Albers, S.R. Fisher et al. //N. Engl. J. Med. — 1998. — Vol.338. — P. 1798-1804.

65. Brizel, D.M. Hyperfractionated irradiation with or without concurrent chemotherapy for locally advanced head and neck cancer /D.M. Brizel, M.E. Albers, S.R. Fisher et al.// N. Engl. J. Med. — 1998. — Vol.338, N.25. — P. 17981804.

66. Bryce, D.P. Experience in the surgical and radiological treatment in 500 cases of carcinoma of the larynx /D.P. Bryce, P.E. Ireland, W.D. Rider // Ann. Otol. Phinol. Laryngol. — 1963. — Vol.72. — P. 416-430.

67. Bryce, D.P. Pre-operative irradiation in the treatment of advanced laryngeal carcinoma /D.P. Bryce, W.D. Rider // Laringoscope. — 1971. — Vol.81.1. P. 1481-1490.

68. Cakarovski, K. Novel inhibitors of urokinase-type plasminogen activator and matrix metalloproteinase expression in metastatic cancer cell lines /K.Cakarovski, J.Y. Leung, C. Restall et al. // Int. J. Cancer. — 2004. — Vol.110, N.4.—P. 610-616.

69. Cakarovski, K. Novel inhibitors of urokinase-type plasminogen activator and matrix metalloproteinase expression in metastatic cancer cell lines /K. Cakarovski, J.Y. Leung, C. Restall et al. // Int. J. Cancer. — 2004. — Vol.110, N.4.—P. 610-616.

70. Campbell, N.E. ExtracellularMatrix Proteins and Tumor Angiogenesis . /N.E. Campbell, L. Kellenberger, J. Greenaway, R.A. Moorehead, N.M. Linnerth-Petrik, J. Petrik // J.Oncol. — 2010. — Article ID 586905, 13 pages.

71. Carmeliet, P. Angiogenesis in health and disease /P.Carmeliet // Nature Medicine.-2003. — Vol.9, N.6. — P. 653-660.

72. Castellote, J.C. Detection of both type 1 and type 2 plasminogen activator inhibitors in human monocytes. /J.C. Castellote, E. Grau, M.A. Linde, N. Pujol-Moix, M.L. Rutllant // Thromb.Haemost. 1990. - Vol.63, №1 - P. 67-71.

73. Chapman, H.A. Macrophage fibrinolytic activity: identification of two pathways of plasmin formation by intact cells and of a plasminogen activator inhibitor /H.A. Chapman, Z. Vavrin, J.B. Hibbs // Cell. 1982. - Vol.28. - P. 653662.

74. Chen, Zu-Lin Neuronal Death in the Hippocampus Is Promoted by Plasmin-Catalyzed Degradation of Laminin /Chen Zu-Lin, Sidney Strickland // Cell. — 1997. — Vol.91. — P. 917-925.

75. Chhetri, D.K. Carcinoma of the buccal mucosa /D.K. Chhetri, J.D. Rawnsley, T.C. Calcaterra // Otolaryngol. Head Neck Surg. — 2000. — Vol.123.1. P. 566-571.

76. Choong, P.F. Urokinase Plasminogen Activator System: A Multifunctional Role in Tumor Progression and Metastasis /P.F. Choong, A.P. Nadesapillai // Clin. Orthop. Relat. Res. — 2003. — Vol.415S.-S46-S58.

77. Chow, V. Prognostic significance of serum p53 protein and p53 antibody in patients with surgical treatment for head and neck squamous cell carcinoma /V. Chow, A.P. Yuen, K.Y. Lam, W.K. Ho, W.I. Wei // Head Neck. — 2001. — Vol.23. — P. 286-291.

78. Conley, B.A. Treatment of advanced head and neck cancer: what lessons have we learned? /B.A. Conley // J. Clin. Oncol. — 2006. — Vol.24. — P. 1023-1025.

79. Cortesina, G. Molecular metastases markers in head and neck squamous cell carcinoma: review of the literature /G.Cortesina, T. Martone // Acta Otophinolaryngol. Ital. — 2006. — Vol.26. — P. 317-325.

80. Crippa, M.P. Urokinase-Type Plasminogen Activator /M.P. Crippa // Int. J. Biochem. Cell Biol. — 2007. — Vol.39. — P. 690-694.

81. Cruz, J.J. Targeting receptor tyrosine kinases and their signal transduction routes in head and neck cancer /J.J. Cruz, A. Ocana, E. Del Barco, A. Pandiella // Ann. Oncol. — 2007. — Vol.18, N.3. — P. 421-430.

82. Dass, K. Evolving Role of uPA/uPAR System in Human Cancers /K. Dass, A. Ahmad, A.S. Azmi, S.H. Sarkar, F.H. Sarkar // Cancer Treat. Rev. — 2008. —Vol.34. —P. 122-136.

83. Delias, C. Historical Analysis of PAI-1 from its Discovery to its Potential Role in Cell Motility and Disease /C. Delias, D.J. Loskutoff // Thromb. Haemost. — 2005. — Vol.93. — P. 631-640.

84. Di Renzo, M.F. Somatic mutations of the MET oncogene are selected during metastatic spread of human HNSC carcinomas /M.F. Di Renzo, M. Olivero, T. Martone, A. Maffe, P. Maggiora, A.D. Stefani et al. // Oncogene. — 2000. — Vol.19. —P. 1547-1555.

85. Diaz, E.M. Squamous cell carcinoma of the buccal mucosa: one institution's experience with 119 previously untreated patients /E.M. Diaz, F.C. Holsinger, E.R. Zuniga, D.B. Roberts, D.M. Sorensen // Head Neck. — 2003. — Vol.25. —P. 267-273.

86. Dimitroulis, G. Referral patterns of patients with oral squamous cell carcinoma, Australia /G. Dimitroulis, P. Reade, D. Wiesenfeld // Eur. J. Cancer B Oral. Oncol. — 1992. — Vol.28B. — P. 23-27.

87. Duffy, M.J. Predictive markers in breast and other cancers: a review /M.J. Duffy // Clinical Chemistry. — 2005. — Vol.51, N.3. — P. 494-503.

88. Duffy, M.J. The urokinase plasminogen activator system: role in malignancy /M.J. Duffy // Current Pharmaceutical Design. — 2004. — Vol.10. — P. 39-49.

89. Duffy, M.J. The Urokinase Plasminogen Activator System: Role in Malignancy /M.J. Duffy // Curr. Pharm. Des. — 2004. — Vol.10. — P. 39-49.

90. Duffy, M.J. The urokinase plasminogen activator system: a rich source of tumour markers for the individualized management of patients with cancer /M.J. Duffy, C. Duggan // Clin. Biochem. — 2004. — Vol.37. —.P. 541548.

91. Duffy, M.J. Urokinase Plasminogen Activator, a Marker for Aggressive Breast Cancer. Preliminary Report /M.J. Duffy, P. O'Grady, D. Devaney, L. O'Siorain, J.J. Fennelly, H.J. Lijnen // Cancer. — 1988. — Vol.62. — P.531-533.

92. Eckardt, A. Recurrent carcinoma of the head and neck: treatment strategies and survival analysis in a 20-year period /A. Eckardt, E.L. Barth, H. Kokemueller, G. Wegener // Oral. Oncol. — 2004. — Vol.40, N.4. — P. 427-432.

93. Fang, F.M. Combined-modality therapy for squamous cell carcinoma of the buccal mucosa: treatment results and prognostic factors /F.M. Fang, S.W. Leung, C.C. Huang et al. // Head Neck. — 1997. — Vol.19. — P. 506-512.

94. Fazioli, F. The Urokinase-Sensitive Region of the Urokinase Receptor is Responsible for its Potent Chemiotactic Activity /F. Fazioli, M. Resnati, N. Sidenius, Y. Higashimoto, E. Appella, F. Blasi // EMBO J. — 1997. — Vol.16. — P. 7279-7286.

95. Fedotenko, S.P. Postoperative complications in squamous cell oral and oropharyngeal carcinoma after radiotherapy /S.P. Fedotenko, O.A. Zharkov // J. Craniomaxillofac. Surg. — 2004. — Vol.32, Suppl.l. — P. 225-226.

96. Foekens, J.A. Plasminogen activator inhibitor and breast cancer prognosis /J.A. Foekens, M. Schmitt, W.L.J, van Putten, H.A. Peters, H. Portengen, M.D. Kramer, F. Janicke, J.G.M. Klijn // J. Clin. Oncol. — 1994. — Vol.12. —P. 1648-1658.

97. Forastiere, A. Head and neck cancer /A. Forastiere, W. Koch, A. Trotti, D. Sidransky//N. Engl. J. Med. — 2001. — Vol.345. — P. 1890-1900.

98. Funk, G.F. Presentation, treatment, and outcome of oral cavity cancer: A National Cancer Data Base report /G.F. Funk, L.H. Karneil, R.A. Robinson et al. // Head Neck. — 2002. — Vol.24. — P. 165-180.

99. Garden, A.S. Is concurrent chemöradiation the treatment of choice for all patients with Stage III or IV head and neck carcinoma? /A.S. Garden, J.A. Asper, W.H. Morrison et al. // Cancer. — 2004. — Vol.100. — P. 1171-1178.

100. Goodwin, W.J. Salvage surgery for patients with recurrent squamous cell carcinoma of the upper aerodigestive tract: when do the ends justify the means? /WJ. Goodwin // Laryngoscope. — 2000. — Vol.110, N.3, Pt.2 (Suppl.93). — P. 1-18.

101. Grondahl-Hansen, J. Prognostic Significance of the receptor for urokinase plasminogen activator in breast cancer /J. Grondahl-Hansen, H.A. Peters, L.J. Wim et al. // Clinical Cancer Res. — 1995. — N.l. — P. 1079-1087.

102. Hackel, P.O. Epidermal growth factor receptors: critical mediators of multiple receptor pathways /P.O. Hackel, E. Zwick, N. Prenzel, A. Ullrich // Current Opinion on Cell Biology. — 1999. — Vol.11. — P. 184-189.

103. Ildstad, S.T. Clinical behaviour and results of current therapeutic modalities for squamous cell carcinoma of the buccal mucosa /S.T. Ildstad, M.E. Bigelow, J.P. Remensnyder // Surg. Gynecol. Obstet. — 1985. — Vol.160. — P. 254-258.

104. Inagi, K. Treatment effects in patients with squamous cell carcinoma of the oral cavity /K. Inagi, H. Takahashi, M. Okamoto et al. // Acta Otolaryngol. Suppl. — 2002. — Vol.547. — P. 25-29.

105. Irigoyen, J.P. The Plasminogen Activator System: Biology and Regulation /J.P. Irigoyen, P. Munoz-Canoves, L. Montero, M. Koziczak, Y. Nagamine // Cell. Mol. Life Sci. — 1999. — Vol.56. — P. 104-132.

106. Iype, E. Squamous cell cancer of the buccal mucosa in young adults IE. Iype, M. Pandey, A. Mathew, G. Thomas, M. Nair // Br. J. Oral. Maxillofac. Surg. —2004. —Vol.42. —P. 185-189.

107. Janicke, F. Urokinase (u-PA) and its type 1 inhibitor are strong and independent prognostic factors in node negative breast cancer IF. Janicke, M. Shmitt, L. Pache et al. // Breast Cancer Res. Treat. — 1993. — Vol.24. — P. 195208.

108. Janicke, F. Urokinase-type plasminogen activator (u-PA) antigen is a predictor of early relaps in breast cancer IF. Janicke, M. Shmitt, R. Hafter, A. Hollreider, R. Babic, K. Ulm, W. Gossner, H. Graeff// Fibrinolysis. — 1990. — Vol.5. —P. 69-78.

109. Kalluri, R. Basement membranes: structure, assembly and role in tumour angiogenesis /R. Kalluri // Nature Reviews Cancer. — 2003. — Vol.3, N.6.1. P. 422-433.

110. Khuri, F.R. Treatment of patients with recurrent or metastatic squamous cell carcinoma of the head and neck: current status and future directions /F.R. Khuri, D.M. Shin, B.S. Glisson et al. // Semin. Oncol. — 2000. — Vol.27. — P. 25-33.

111. Kowalski, L.P. Results of salvage treatment of the neck in patients with oral cancer /L.P. Kowalski // Arch. Otolaryngol. Head Neck Surg. — 2002.1. Vol.128. —P. 58-62.

112. Kurul, S. Plastic surgery in irradiated areas: analysis of 200 consecutive cases /S. Kurul, M. Dinfer, A. Kizir, A. Uzunismail, E. Darendeliler // Eur. J. Surg. Oncol. — 1997. — Vol.23, N.l. — P. 48-53.

113. Lee, K.H. Role of combined modality treatment of buccal mucosa squamous cell carcinoma /K.H. Lee, M.J. Veness, T. Pearl-Larson, G.J. Morgan // Australian Dental J. — 2005. — Vol.50, N.2. — P. 108-113.

114. Liang, X. The expression of urokinase-type plasminogen activator in oral squamous cell carcinoma /X. Liang, Z. Mao, Y. He // Hua Xi Kou Qiang Yi Xue Za Zhi. — 2003. — Vol.21, N.2. — P. 147-149.

115. Martone, T. Prognostic relevance of CD 105+ microvessel density in HNSCC patient outcome /T. Martone, P. Rosso, R. Albera, G. Migliaretti, F. Fraire, L. Pignataro et al. // Oral Oncol. — 2005. — Vol.41. — P. 147-55.

116. Mignogna, M.D. The world cancer report and the burden of oral cancer /M.D. Mignogna, S. Fedele, L. Lo Russo // Eur. J. Cancer Prev. — 2004. — Vol.13. —P. 139-142.

117. Mishra, R.C. Tumour thickness and relationship to locoregional failure in cancer of the buccal mucosa /R.C. Mishra, T.K. Parida, S. Mohanty // Eur. J. Surg. Oncol. — 1999. — Vol.25. — P. 186-189.

118. Nagamine, Y. Transcriptional and Posttranscriptional Regulation of the Plasminogen Activator System /Y. Nagamine, R.L. Medcaf, P. Munoz-Canoves // Thromb. Haemost. — 2005. — Vol.93. — P. 661-675.

119. Nair, M. Evaluation of the role of radiotherapy in the management of carcinoma in the buccal mucosa /M. Nair, R. Sankaranarayanan, T.K. Padmanabhan // Cancer. — 1988. — Vol.61. — P. 1326-1331.

120. O'Brien, C. Tumor thickness influences prognosis of T1 and T2 oral cavity cancer but what thickness? /C. O'Brien, C.S. Lauer, S. Fredricks et al. // Head Neck. — 2003. — Vol.25. — P. 937-945.

121. Onguchi, T. Membrane type-1 matrix metalloproteinase potentiates basic fibroblast growth factor-induced corneal neovascularization /T. Onguchi,

122. K.Y. Han, J.-H. Chang, D.T. Azar // Am. J. Pathol. — 2009. — Vol.174, N.4. — P. 1564-1571.

123. Parsons, J.T. Hyperfractionation for head and neck cancer /J.T. Parsons, W.M. Mendenhall, N. Cassisi et al. // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. — 1988.—Vol.14. —P. 649-658.

124. Pearlman, N.W. Treatment outcome in recurrent head and neck cancer /N.W. Pearlman // Arch. Surg. — 1979. — Vol. 114, N. 1. — P. 39-42.

125. Pedersen, A.N. Determination of the Complex between Urokinase and Its Type-1 Inhibitor in Plasma from Healthy Donors and Breast Cancer Patients /A.N. Pedersen, N. Brunner, G. Hoyer-Hansen et al. // Clin. Chem. — 1999. — Vol.45.—P. 1206-1213.

126. Pernot, M. Role of interstitial brachytherapy in oral and oropharyngeal carcinoma /М. Pernot, S. Hoffstetter, D. Peiffert et al. // Int. S. Otolaringol. — 1996. —Vol.115, N.6. —P. 519-526.

127. Peters, L. Head and neck surgery. /L. Peters, R. Weber, W. Morrison et al.// — 1996. — P. 552-559.

128. Plebani, M. Urokinase-type plasminogen activator receptor in gastric cancer: tissue expression and prognostic role /М. Plebani, L. Herszenyi, P. Carraro et al. //Clin. Exp. Metastasis. 1997.- Vol.15, N.4. - P. 418-425.

129. Pollanen, J. Distinct localisation or urokinase-type plasminogen activator and its type 1 inhibitor under cultured human fibroblasts and sarcomacells /J. Pollanen, O. Sakseba, E.M. Salonen et al. // J. Cell. Biol. — 1987. — Vol.104. —P. 1085-1097.

130. Pop, L. A. Evaluation of treatment results of squamous cell carcinoma of the buccal mucosa /L.A. Pop, W.M. Eijkenboom, M.F. de Boer et al. // Int. J. Radiat. Oncol. Bio. Phys. — 1989. — Vol.16. — P. 483-487.

131. Praus, M. Reduction of tumor cell migration and metastasis by adenoviral gene transfer of plasminogen activator inhibitors /M. Praus, K. Wauterickx, D. Collen, R.D. Gerard // Gene Ther. — 1999. — Vol.6. — P. 227236.

132. Rodgers, L.W.Jr. Management of squamous cell carcinoma of the floor of mouth /L.W.Jr. Rodgers, S.P. Stringer, W.M. Mendenhall et al. // Head Neck. —1993.—Vol.15, N.I. —P. 16-19.

133. Schliephake, H. Prognostic relevance of molecular markers of oral cancer a review /H. Schliephake // Int. J. Oral Maxillofac. Surg. — 2003. — Vol.32. —P. 233-245.

134. Schmidt, M. Increased levels of urokinase receptor in plasma of head and neck squamous cell carcinoma patients /M. Schmidt, F. Hoppe // Acta Otolaryngol. — 1999. — Vol.119, N.8. — P. 949-953.

135. Schmidt, M. Urokinase receptor up-regulation in head and neck squamous cell carcinoma / M. Schmidt, G. Schler, P. Gruensfelder, J. Muller, F. Hoppe // Head Neck. — 2000. — Vol.22, N.5. — P. 498-504.

136. Schwartz, GJ. Salvage treatment for recurrent squamous cell carcinoma of the oral cavity /G.J. Schwartz, R.H. Mehta, B.L. Wenig, C. Shaligram, L.G. Portugal // Head Neck. — 2000. — Vol.22, N.l. — P. 34-41.

137. Shi, Z. Urinary-type plasminogen activator (uPA) and its receptor (uPAR) in squamous cell carcinoma of the oral cavity /Z. Shi, M.S. Stack // Biochem J. — 2007. — Vol.407, N.2. — P. 153-159.

138. Sieczka, E. Cancer of the buccal mucosa: are margins and T-stage accurate predictors of local control ? /E. Sieczka, R. Datta, A. Singh et al. // Am. J. Otolaryngol. — 2001. — Vol.22. — P. 395-399.

139. Siren, V. Transforming Growth Factor Beta Induces Urokinase Receptor Expression in Cultured Retinal Pigment Epithelial Cells /V. Siren, H. Myohanen, V. Antti, I. Immonen 11 Ophthalmic Research. — 1999. — Vol.31. — P. 184-191.

140. Sliva, D. Signaling pathways responsible for cancer cell invasion as targets for cancer therapy /D. Sliva // Curr. Cancer Drug Targets. — 2004. — Vol.4. —P. 327-336.

141. Sonohara, S. Laminin and estradiol regulation of the plasminogen-activator system in MCF-7 breast-carcinoma cells /S. Sonohara, R. Mira-y-Lopez, M.M. Brentani // Int. J. Cancer. — 1998. — Vol.76. — P. 77-85.

142. Speleman, L. Prognostic value of plasminogen activator inhibitor-1 in head and neck squamous cell carcinoma /L. Speleman, J.D. Kerrebijn, M.P. Look,

143. C.A. Meeuwis, J.A. Foekens, E.M. Berns // Head Neck. — 2007. — Vol.29, N.4. — P. 341-350.

144. Strome, S.E. Squamous cell carcinoma of the buccal mucosa /S.E. Strome, W. To, M. Strawderman et al.// Otolaryngol. Head Neck Surg. — 1999. — Vol.120. —P. 375-379.

145. Tanaka, N. Expression of E-cadherin, alpha-catenin, and beta-catenin in the process of lymph node metastasis in oral squamous cell carcinoma /N. Tanaka, T. Odajima, K. Ogi, T. Ikeda, M. Satoh // Br. J. Cancer. — 2003. — Vol.89. —P. 557-563.

146. Thomas, G.R. Molecular predictors of clinical outcome in patients with head and neck squamous cell carcinoma /G.R. Thomas, H. Nadiminti, J. Regalado // Int. J. Exp. Pathol. — 2005. — Vol.86. — P. 347-363.

147. Tran-Thang, C. Modulation of the plasminogen activation system by inflammatory cytokines in human colon carcinoma cells /C. Tran-Thang, E. Kruithof, H. Lahm et al. // Br. J. Cancer. — 1996. — Vol.74. — P. 846-852.

148. Ulisse, S. The Urokinase Plasminogen Activator System: A Target for Anti-Cancer Therapy /S. Ulisse, E. Baldini, S. Sorrenti, M. D'Armiento // Current Cancer Drug Targets. — 2009. — Vol.9. — P. 32-71.

149. Vermorken, J.B. Platinum-based chemotherapy plus cetuximab in head and neck cancer /J.B. Vermorken, R. Mesia, F. Rivera et al. // N. Engl. J. Med. — 2008. — Vol.359. —.P. 1116-1127.

150. Wang, Y. The Role and Regulation of Urokinase-Type Plasminogen Activator Receptor Gene Expression in Cancer Invasion and Metastasis /Y. Wang // Med. Res. Rev. — 2001. — Vol.21. — P. 146-170.

151. Weidner, N. Angiogenesis as a predictor of clinical outcome in cancer patients. Review /N. Weidner // Hum. Pathol. — 2000. — Vol.31. P. 403-405.

152. Welkoborsky, H.J. Tumor biologic prognostic parameters in T1N0M0 squamous cell carcinoma of the oral cavity /H.J. Welkoborsky, J.L. Gluckman, R. Jacob, H. Bernauer, W. Mann // Laryngorhinootologie. — 1999. — Vol.78. — P. 131-138.

153. Whitehurst, J.O. Surgical treatment of squamous cell carcinoma of the oral tongue: factors influencing survival /J.O. Whitehurst, C.A. Droulias // Arch. Otolaryngol. — 1977. — Vol.103, N.4. —P. 212-215.

154. Wong, L.Y. Salvage of recurrent head and neck squamous cell carcinoma after primary curative surgery /L.Y. Wong, W.I. Wie, L.K. Lam, A.P. Yuen // Head Neck. — 2003. — Vol.25, N.l 1. — P. 953-959.

155. Yang, S.F. Antimetastatic potentials of flavones on oral cancer cell via an inhibition of matrix-degrading proteases /S.F. Yang, W.E. Yang, W.H. Kuo, H.R. Chang, S.C. Chu, Y.S. Hsieh // Arch. Oral. Biol. — 2008. — Vol.53, N.33. — P. 287-294.

156. Yasuda, T. Localization of plasminogen activators and their inhibitor in squamous cell carcinomas of the head and neck /T. Yasuda, Y. Sakata, K. Kitamura, M. Morita, T. Ishida // Head Neck. —1997. — Vol.19. — P. 611-616.

157. Yuen, A.P.W. Elective neck dissection versus observation in the treatment of early oral tongue carcinoma /A.P.W. Yuen, W.I. Wei, Y.M. Wong, K.C. Tang//HeadNeck. — 1997. — Vol.19. — P. 583-588.

158. Zender, C.A. Why do patients with head and neck squamous cell carcinoma experience distant metastases: can they be prevented? /C.A. Zender, G.J. Petruzzelli // Curr. Opin. Otolaryngol. Head Neck Surg. — 2005. — Vol.13.1. P. 101-104.

159. Zhou, H. RNAi targeting urokinase-type plasminogen activator receptor inhibits metastasis and progression of oral squamous cell carcinoma in vivo /H. Zhou, Y. Tang, X. Liang et al. // Int. J. Cancer. — 2009. — Vol.125, N.2.1. P. 453-462.

160. Zinis, L.O. Salvage surgery in squamous cell carcinoma of the oral cavity /L.O. Zinis, D. Ghizzardi, E. Casati, P. Nicolai, A.R. Antonelli // Acta Otorhinolaryngol. Ital. — 2002. — Vol.22, N.3. — P. 135-141.