Молекулярно-биологические методы в оценке метастазирования и прогноза у больных раком молочной железы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, доктор медицинских наук Ориновский, Михаил Борисович

• Ориновский, Михаил Борисович
• доктор медицинских наук
• 2003

Оглавление диссертации доктор медицинских наук Ориновский, Михаил Борисович

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Система активации плазминогена и ее клиническое значение при раке молочной железы.

1.2. Фактор роста эндотелия сосудов при раке молочной железы.

1.3. Апоптоз при раке молочной железы.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Общая характеристика обследованных больных.

2.2. Определение рецепторов эстрадиола-17р в цитозольной фракции опухолей молочной железы.

2.3. Иммуноферментное определение (ELISA) содержания uPA, PAI-1 и tPA в цитозолях опухолей.

2.4. Иммуногистохимический метод исследования опухолей молочной железы.

2.5. Статистический анализ данных.

Глава 3. Рецепторы эстрогенов и система активации плазминогена (uPA, tPA, PAI-1) в цитозольной фракции злокачественных опухолей, а также в гистологически неизмененных тканях молочной железы (результаты собственных исследований).

3.1. Влияние предоперационного лечения на концентрации uPA, PAI-1 и tPA, а также на уровни рецепторов эстрогенов в опухолях молочной железы

3.2. Возрастные особенности в распределении рецепторов эстрогенов в опухоли у больных раком молочной железы.

3.3. Зависимость концентраций uPA, PAI-1 и tPA в опухолях от возраста и состояния репродуктивной функции у больных раком молочной железы

3.4. Зависимость концентраций uPA, PAI-1 и tPA в опухолях больных раком молочной железы от содержания рецепторов эстрогенов в опухоли.

3.5. Зависимость выявления рецепторов эстрогенов в опухолях молочной железы от стадии заболевания.

3.6. Концентрации uPA, PAI-1 и tPA в цитозолях опухолей больных раком молочной железы в зависимости от стадии заболевания и отдельных показателей системы TNM.

3.7. Связь гистологического варианта строения опухоли на уровни эстрогенов в опухолях молочной железы.

3.8. Зависимость концентраций uPA, PAI-1 и tPA в опухолях больных раком молочной железы от гистологического строения опухоли.

3.9. Сравнение концентраций uPA в опухолях и гистологически неизмененных тканях молочной железы.

3.10. Прогностическая значимость клинических факторов, рецепторов эстрогенов и системы активаторов плазминогена (uPA, tPA, PAI-1) при раке молочной железы.

Глава 4. Иммуногистохимический анализ экспрессии молекуляр-но-биологических маркеров (Bcl-2, BclX, ВАХ, VEGF, Ki-67, PCNA) в опухолях больных раком молочной железы (результаты собственных исследований).

Обсуждение результатов исследования.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-биологические методы в оценке метастазирования и прогноза у больных раком молочной железы»

Актуальность проблемы. Рак молочной железы (РМЖ) в структуре онкологической заболеваемости в России прочно удерживает первое место. Статистические данные последнего десятилетия (1992-2001 гг.) свидетельствуют о максимальном, по сравнению с другими злокачественными новообразованиями, темпе роста заболеваемости. По разным регионам России этот показатель колеблется в пределах 32,3-43,4, а смертности - 12,0-14,1 (Н.И.Переводчикова, 1998; М.И.Давыдов и Е.М.Аксель, 2002).

В последнее время существенно улучшились возможности диагностических методов выявления РМЖ, что способствует обнаружению заболевания на более ранних стадиях и улучшению отдаленных результатов лечения. Однако индивидуальный подбор схем лечения и возможность выявления пациенток, у которых велика вероятность раннего рецидива заболевания является весьма актуальным. Для решения этих вопросов изучают ряд молекуляр-но-биологических тканевых маркеров в злокачественных опухолях молочной железы (Е.С.Герштейн и Н.Е.Кушлинский, 1998; А.Ю.Барышников и Ю.В.Шишкин, 2002). Большинство таких маркеров характеризует определенные особенности опухоли - гормональную чувствительность, способность к инвазии и метастазированию (В.М.Моисеенко, 1998; Б.Ф.Душников и А.Ю.Абросимов, 2001). В последние годы также проводятся исследования молекулярных маркеров, которые сфокусированы в основном на амплифици-рованых генах при канцерогенезе (И.З.Зборовская и соавт., 1998; Б.П.Копнин, 2002). При этом отдается предпочтение перед традиционными маркерами исследованию мутаций, амплификации или других повреждений самих генов, а также изучению экспрессии белков, регулируемых этими генами. Эти исследования могут проводиться и с использованием иммуноги-стохимических методов в парафиновых блоках опухолей. Так, например, одной из наиболее важных характеристик опухоли является потенциал ее про-лиферативной активности. Стало известным, что пролиферативный антиген

Ki-67, тесно связан с биологически агрессивным поведением РМЖ (Brown D.C. et al., 1990), выявлена значительная связь между показателем экспрессии антигена Ki-67 в опухоли и временем прогрессировала заболевания, метастатическим статусом и объемом новообразования (Е.В.Степанова, 2002; Harper М.Е. et al., 1992). Отмечена определенная зависимость содержания Вс1-2 в опухоли и ее чувствительности к адъювантной терапии (А.Ю.Барышников и Ю.В.Шишкин, 2002).

Большой интерес у исследователей в последнее время вызывает система активации плазминогена, так называемому протеолитическому каскаду, участвующему в разрушении базальной мембраны и внеклеточного матрикса, что в свою очередь резко увеличивает вероятность метастазирования (Ellis V. et al., 1991; Duggan С. et al* 1995; Bell W.R., 1996). Ключевым звеном этого каскада является сериновая протеаза - активатор плазминогена урокиназного типа (иРА) - ращепляющая плазминоген до плазмина, который уменьшает уровень внеклеточных матричных гликопротеидов и активирует некоторые прометаллопротеазы, играя решающую роль в процессах инвазии и метастазирования. Помимо иРА в образовании плазмина может участвовать также активатор плазминогена тканевого типа (tPA) (Е.С.Герпггейн и соавт., 1998; Damjanovich L. et al., 1994). Стало известно, что активность обоих ферментов подавляется двумя белковыми ингибиторами, принадлежащими к семейству серпинов, - РА1-1 и РА1-2 (Andersen P.A. et al., 1990). Результаты клинических исследований свидетельствуют о том, что изучение компонентов системы активации плазминогена в злокачественных опухолях молочной железы является весьма перспективным с клинической точки зрения (Foekens J. et al., 1992,1996; Kim S. et al., 1998).

В настоящее время большое внимание исследователи уделяют проблеме неоангиогенеза в злокачественных опухолях, так как уже не вызывает сомнения тот факт, что опухоль не может развиваться и расти без образования в ней разветвленной сети сосудов, обеспечивающих снабжение клеток кислородом и питательными веществами (Войск N. et al., 1996; Pintucci G. et al., 1996; Folkman J., 1998). В регуляции ангиогенеза участвуют многие факторы роста и цитокины, такие как основные и кислые факторы роста фибробластов (aFGF и bFGF), эпидермальный фактор роста (EGF), а- и р-трансформирующие факторы роста (TGF), тромбоцитарный фактор роста эн-дотелиальных клеток/тимидинфосфорилаза, фактор некроза опухолей (TNF), интерлейкины и др. (Е.С.Герштейн и соавт., 2002; Е.С.Степанова, 2002; С.М.Киселев и соавт., 2003; И.В.Бабкина и соавт., 2003; Bouck N. et al., 1996). Однако, важнейшим положительным регулятором ангиогенеза бесспорно считается фактор роста эндотелия сосудов (VEGF). Особенность этого фактора заключается в том, что, в отличие от всех других факторов роста, VEGF является активным митогеном для микро- и макроваскулярных клеток кровеносных и лимфатических сосудов, но он не действует на другие типы клеток (Ferrara N., 1995). Биологическая доступность VEGF во многом определяется размером молекулы и регулируется на генетическом уровне при альтернативном сплайсинге мРНК, а также эпигеномно при протеолитическом расщеплении синтезированных молекул с участием системы активации плазминогена (Н.Е.Кушлинский и Е.С.Герштейн, 2002). Основными растворимыми формами VEGF являются молекулы размером 121 и 165 аминокислотных остатков, они же являются и основными биологически активными формами VEGF. Основной изоформой VEGF в тканях является VEGF-165 (Е.С.Герштейн и соавт., 2003). Для эффективного связывания VEGF с рецепторами клеток-мишеней необходимо его взаимодействие с гепарино-подобными компонентами внеклеточного матрикса (ВКМ) (Е.С.Герштейн и соавт., 2003).

Помимо общего для большинства рецепторных киназ митоген-активируемого протеинкиназного каскада, регулирующего экспрессию генов, связанных с пролиферацией, к числу важных генов, регулируемых VEGF в эндотелиальных клетках, относится протоонкоген с-ets-l, кодирующий транскрипционный фактор Ets-1. Исследования с использованием гибридизации in situ показали, что c-ets-1 экспрессируется в эндотелиальных клетках на ранних стадиях формирования кровеносных сосудов (Vandenbunder В., 1993). Его продукт Ets-1 способствует проявлению ангиогенного фенотипа этих клеток, активируя транскрипцию генов и последующий синтез белков важнейших протеаз, расщепляющих внеклеточный матрикс, в частности, активатора плазминогена урокиназного типа (Sato Y., 1998). Эти эффекты достигают максимума через 2 часа после добавления VEGF (а также других ангио-генных факторов - aFGF, bFGF и EGF) и ингибируются антисмысловыми олигонуклеотидами к ets-1 (Iwasaka С., 1996). Активация протеаз имеет три важных для стимуляции ангиогенеза последствия: облегчает дезинтеграцию эндотелиальных клеток и их инвазию в базальный слой сосудов, генерирует продукты деградации ВКМ, способствующие хемотаксису эндотелиальных клеток, а также активирует и мобилизует находящиеся в ВКМ факторы роста (Mignatti P., Rifkin D., 1996).

Проблеме сочетания вышеуказанных молекулярно-биологических факторов в патогенетических механизмах инвазии, метастазирования и прогнозе у больных РМЖ в мировой и отечественной литературе посвящено достаточное количество сообщений. Однако отсутствует одновременный сравнительный анализ уровней экспрессии молекулярно-биологических маркеров Ki-67, PCNA, Bcl-2, В АХ, BclX, VEGF и компонентов системы активации плазминогена uPA, tPA, PAI-1 в опухолях. Не существует четких критериев оценки взаимосвязи данных молекулярно-биологических факторов с основными клинико-морфологическими факторами прогноза РМЖ. Все выше изложенное позволяет считать проблему весьма актуальной.

Цель исследования

Изучение содержания ряда молекулярно-биологических маркеров - Ki-67, PCNA, Bcl-2, ВАХ, BclX, VEGF, основных ферментов системы активации плазминогена - uPA, tPA, PAI-1 в злокачественных опухолях молочной железы, определение их взаимосвязи с основными клинико-морфологическими характеристиками заболевания и выявление роли в прогнозе и при выборе адекватных методов лечения.

Задачи исследования

1. Иммуноферментным методом определить содержание в злокачественных опухолях молочной железы активаторов плазминогена урокиназного (иРА) и тканевого ОРА) типа и ингибитора активаторов плазминогена 1 типа (РА1-1).

2. Иммуногистохимическим методом определить в первичных опухолях молочной железы уровни экспрессии Кл-67, РСЫА, Вс1-2, ВАХ, Вс1Х, УЕОР.

3. Сопоставить уровни экспрессии Кл-67, РСЫА, Вс1-2, ВАХ, Вс1Х, УЕОР, а также иРА, 1РА, РА1-1 в злокачественных опухолях молочной железы и гомологичных неизмененных тканях.

4. Оценить взаимосвязь содержания молекулярно-биологических маркеров Кл-67, РСЫА, Вс1-2, ВАХ, Вс1Х, УЕОР и показателей системы активации плазминогена иРА, 1РА, РА1-1 в злокачественных новообразованиях молочной железы с основными клиническими и морфологическими факторами прогноза.

5. Оценить взаимосвязь содержания Кл-67, РСЫА, Вс1-2, ВАХ, Вс1Х, УЕОР и показателей системы активации плазминогена иРА, 1РА, РА1-1 с гор-моночувствительностью опухоли.

6. Провести сравнительный анализ данных иммуногистохимического определения в первичной опухоли уровней экспрессии К>67, РСЫА, Вс1-2, ВАХ, Вс1Х, УЕОР и содержания в опухоли иРА, 1РА, РА1-1 и показать их роль в оценке прогноза заболевания.

7. Выявить возможные варианты соотношения основных показателей системы активации плазминогена и молекулярно-биологических маркеров (Кл-67, РСЫА, Вс1-2, ВАХ, Вс1Х, УЕОР) в прогнозе рака молочной железы.

Научная новизна

Впервые в отечественной практике на большом клиническом материале проведено одновременное иммуногистохимическое определение уровня экспрессии ряда молекулярно-биологических маркеров, таких как Ki-67, PCNA, Bcl-2, В АХ, BclX, VEGF и содержание основных компонентов системы активации плазминогена (uPA, tPA, PAI-1) в опухоли и гистологически неизмененной ткани молочной железы, а также оценена их связь с гормоночувстви-тельностью первичной злокачественной опухоли молочной железы, клиническими и морфологическими факторами прогноза у данной категории больных.

Практическая значимость исследования

Полученные результаты клинических наблюдений, биохимических, эндокринологических, молекулярно-биологических показателей в первичной злокачественной опухоли молочной железы могут служить основой для прогнозирования течения болезни, выбора наиболее эффективного варианта лечения, а также теоретическим обоснованием для разработки новых патогенетических методов терапии рака молочной железы.

Апробация работы. Диссертационная работа апробирована на совместной научной конференции сотрудников хирургических отделений диагностики опухолей, опухолей молочных желез, опухолей женской репродуктивной системы и отделения изучения новых противоопухолевых лекарств, лаборатории клинической биохимии, отдела патологической анатомии опухолей человека НИИ клинической онкологии РОНЦ им. H.H. Блохина РАМН 25 апреля 2003 г.

Материалы диссертации доложены на V Российской онкологической конференции (Москва, 2001); на IX и X Российском Национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2002, 2003); на II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Научно-организационные аспекты и современные лечебно-диагностические технологии в маммологии» (Москва, 2003); на VII Российской онкологической конференции (Москва, 2003).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 19 научных работ и монография.

Объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, которая включает описание материалов и методов, двух глав собственных результатов исследования, их обсуждения, выводов, списка цитируемой литературы. Объем диссертации 253 страницы машинописного текста. Список литературы включает 287 отечественных и зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 33 таблицами и 70 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Ориновский, Михаил Борисович

ВЫВОДЫ

1 .Иммуноферментным методом в цитозолях злокачественных опухолей молочной железы установлены средние уровни основных ферментов системы активации плазминогена: для активатора плазминогена урокиназного типа (иРА) - 1,29 нг/мг белка, для активатора плазминогена тканевого типа ((РА) - 3,98 нг/мг белка, для ингибитора активаторов плазминогена 1 типа (РА1-1) - 3,19 нг/мг белка.

2.Среднее значение уровня иРА в опухолях больных РМЖ были в 4 раза, а показателя РА1-1 в 28 раз выше, чем в гистологически неизмененной ткани молочной железы (различия высоко достоверны). При сравнении средних значений концентраций показателей (РА в опухолях больных РМЖ и гистологически неизменных тканях больных РМЖ достоверных различий выявлено не было.

3.Изучение компонентов системы активации плазминогена с учетом основных клинических и морфологических признаков выявило следующие особенности: концентрации иРА достоверно увеличивались с возрастом у больных РМЖ, как и концентрации показателя РАН. Концентрации показателя (РА достоверно уменьшались с увеличением возраста больных РМЖ. Частота выявляемое™ концентрации РА1-1 линейно возрастала с возрастом больных РМЖ.

Средняя концентрация иРА при протоковом инфильтративном РМЖ была достоверно выше по сравнению с его концентрацией при дольковом инфильтративном раке. Для показателей (РА и РА1-1 эти различия не являлись значимыми.

У больных РМЖ в постменопаузе выявлены недостоверно более высокие уровни концентрации активатора системы плазминогена иРА, как и его ингибитора РА1-1 и более низкие уровни показателя тканевого типа системы активации плазминогена (РА по сравнению с уровнями этих показателей у больных РМЖ с регулярным менструальным циклом.

Не обнаружено достоверных различий концентраций исследуемых показателей системы активации плазминогена с учетом стадий у больных РМЖ. При анализе отдельных показателей системы ТШ выявлено слабое достоверное снижение уровня 1РА с увеличением показателя Т (г=-0,19).

4.Иммуногистохимическим методом во всех исследованных опухолях больных раком молочной железы (РМЖ) определены средние уровни экспрессии молекулярно-биологических маркеров: УЕОР=2,1 балла; Кл-67=20,1 балла; РС1ЧА=31,6 баллов; Вс1-2=1,7 баллов; ВАХ=2,1 балла; Вс1Х=2,2 балла.

5.Оценка взаимосвязи содержания молекулярно-биологических маркеров УЕОИ, Кл-67, РС1МА, Вс1-2, ВАХ, Вс1Х в РМЖ с основными клинико-морфологическими факторами показала, что наблюдалось незначительное повышение уровней показателей УЕОИ, РСЫА, Кл-67, Вс1Х в группе больных старше 45 лет. Отмечена тенденция к более высоким средним уровням маркера УЕОБ и Вс1Х у женщин в постменопаузе, чем в репродуктивном возрасте. Эти различия для показателей пролиферативной активности РСКА и Кл-67 были достоверны. Выявлено недостоверное увеличение уровней УЕОБ, РСМА, Кь67 при увеличении показателя Т (система ТЫМ). Увеличение уровня экспрессии УЕОБ в опухоли с ростом показателя N было достоверным.

6.Между изучаемыми концентрациями компонентов системы активации плазминогена и положительными уровнями РЭ выявлены достоверно значимые корреляции: концентрация как показателя системы активации плазминогена иРА (г=0,42), так и его ингибитора РА1-1 (г=0,32), были связаны с уровнями РЭ положительной корреляционной связью.

Не выявлено значимых различий концентраций РА1-1,1РА и иРА в РЭ+ и РЭ-опухолях больных РМЖ.

Определена достоверная зависимость между концентрациями показателей системы активации плазминогена иРА и 1РА в РЭ+опухолях г=0,5). В РЭ- опухолях достоверной зависимости между концентрациями иРА и 1РА не выявлено.

Определена достоверная положительная корреляционная зависимость между показателями экспрессии Вс1Х и уровнями положительных значений РЭ в цитозольной фракции РМЖ (г=0,7).

Выявлена прямая корреляционная зависимость уровней экспрессии УЕОР с уровнями РЭ+ в опухолях у больных РМЖ (г=0,4).

Доказано, что в РЭ+опухолях выявлялись достоверно более высокие уровни экспрессии Вс1-2, чем в РЭ-опухолях.

В группе РЭ+опухолей недостоверно чаще (в 55 из 65% случаев соответственно) обнаруживались положительные показатели РА1-1 и 1РА. В группе РЭ - опухолей чаще (в 60 и 63% случаев, соответственно) определялись нулевые показатели РА1-1 и 1РА.

7.При изучении взаимозависимостей между уровнями молекулярно-биологических маркеров УЕОР, Кл-67, РСКА, Вс1-2, ВАХ, Вс1Х и концентрациями РА1-1, 1РА и иРА в цитозольной фракции РМЖ выявлены достоверные линейные положительные корреляционные зависимости между показателями Кь67 и РСКА (г=0,89); УЕв¥ и РСКА (г=0,6), экспрессией УЕОР и Кл-67 (г=0,56), между показателями РСКА и Вс1Х (г=0,43).

Дисперсионный анализ не выявил различий уровней исследуемых молекулярно-биологических маркеров в зависимости от знака ингибитора активаторов плазминогена 1 типа (РА1-1+ и РА1-1-), а также активатора плазминогена тканевого типа (№А+ и 1РА-).

Была выявлена положительная зависимость между уровнями экспрессии фактора ангиогенеза УЕОР и ингибитором показателей системы активации плазминогена РА1-1 (г=0,43).

Выявлена корреляционная зависимость между уровнями иРА и маркерами, регулирующими апоптоз: прямая с Вс1Х (г=0,35) и обратная с Вс1-2 (г=-0,3).

Была выявлена значимая обратная корреляция средней степени тесноты связанности между уровнем показателя системы активации плазминогена урокиназного типа №А и маркером, регулирующим апоптоз ВАХ г=-0,63. Также выявлены недостоверные обратные корреляционные зависимости показателя №А с экспрессиями маркеров пролиферативной активности К1-67 и РСЫА, а также с фактором роста эндотелия сосудов УЕОР.

8.Выявлены высокозначимые различия показателей экспрессии УЕОР, Кл-67, РСЫА, Вс1-2, ВАХ, Вс1Х в опухолях больных РМЖ с рецидивом и без рецидива заболевания.

Методом регрессионного анализа выделены пороговые уровни УЕОР, Кл-67 и РСЫА, выше которых прогноз заболевания следует считать неблагоприятным относительно развития рецидива. Так, для показателя УЕОР пороговым значением оказался уровень экспрессии в 2,0 балла, для Кл-67 в 24,0 балла, а для РСЫА в 30,0 баллов.

9.Выявлено, что с увеличением уровня экспрессии маркера УЕОР в опухоли уменьшается длительность безрецидивного периода у больных РМЖ (г=-0,55). Эта же обратная корреляционная зависимость характерна для маркеров пролиферативной активности Кл-67 и РСИА.

При проведении однофакторного анализа наихудшая безрецидивная выживаемость больных РМЖ отмечена среди пациентов с уровнями концентрации РА1-1+>5нг/мг белка.

Безрецидивная выживаемость у больных с низкими уровнями 1РА, а также при уровнях иРА>3 нг/мг белка была ниже, однако эти результаты статистически недостоверны.

При многофакторном анализе безрецидивной выживаемости больных РМЖ с использованием маркеровУЕОР, Кь67 и РСЫА, активаторов плазминогена (1РА и иРА) и его ингибитора (РА1-1) независимыми факторами прогноза оказались УЕвРи РАМ.

Список литературы диссертационного исследования доктор медицинских наук Ориновский, Михаил Борисович, 2003 год

1. Alsabeh R., Wilson C.S., Ahn C.W., Vasef M.A. & Battifora H. 1996 Expression of bcl-2 by breast cancer: a possible diagnostic application. Modern Pathology 9,439-444.

2. Andreasen P.A., Georg В., Kund L.R. et al. Plasminogen activator inhibitors: hormonally regulated serpins. Mol. Cell. Endocrinol.-1990.-Vol.68.-p.l-19.

3. Andreasen P.A., Georg В., Lund L.R., Riccio A., Stacey S.N. // Plasminogen activator inhibitors: hormonally regulated serpins. Mol. Cell Endocrinol. 1990. Vol. 68. P. 1-19.

4. Asano M., Yukita A., Suzuki H. Wide spectrum of antitumor activity of a neutralizing monoclonal antibody to human vascular endothelial growth factor. Jpn. J. Cancer Res.-1999.-Vol.90, N.1.-P.93-100.

5. Barbareschi M., Gasparini G., Morelli L., Forti S., Dalla Palma P. // Novel methods for the determination of the angiogenic activity of human tumors. Breast Cancer Res. Treat. 1995. Vol. 36. P. 181-192.

6. Bardelli A., Longati P., Albero D., Goruppi S., Schneider C., Ponzetto C. & Comoglio P.M. 1996 HGF receptor associates with the anti-apoptotic protein BAG-1 and prevents cell death. EMBO Journal 15,6205-6212.

7. Bell W.R. // The fibrinolytic system in neoplasia. Semin. Thromb. He-most. 1996. Vol. 22. P. 459-478.

8. Benjamin C.W., Hiebsch R.R. & Jones D.A. 1998 Caspase activation in MCF-7 celL responding to etoposide treatment. Molecular Pharmacology 53, 446450.

9. Bianchi E., Cohen R.L., Dai A., Thor A.T., Shuman M.A., Smith H.S. // Immunohistochemical localization of the plasminogen activator inhibitor-1 in breast cancer. Int. J. Cancer. 1995. Vol. 60. P. 597-603.

10. Bortis S., Siziopikou K.P., Schnitt S.J., Harris J.R. & Fisher D.E. 1995 Extensive apoptosis in ductal carcinoma in situ of the breast. Cold Spring Harbor Meeting on Programmed Cell Death, abstract no 30.

11. Boise L.H., Gonzalez-Garcia M., Postema S.E., Ding L., Lindsten T., Turka L.A., Mao X., Nunez G. & Thompson C.B. 1993 Bcl-x, a bcl-2-related gene that functions as a dominant regulator of apoptotic cell death. Cell 74, 597-608.

12. Bukholm I.K., Nesland J.M., Karesn R., Jacobsen U. & Borresendale A.L. 1997 Interaction between bcl-2 and p21 (WAF/CIP1) in breast carcinomas with wild-type p53. International Journal of Cancer 73, 38-41.

13. Chun M.H. // Plasmin induces the formation of multicellular spheroids of breast cancer cells. Cancer Lett. 1997. Vol. 117. P. 51-56.

14. Clarkson R.W. & Watson C.J. 1999 NF-kappaB and apoptosis in mammary epithelial cells. Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia 4,165-175.

15. Clarkson R.W., Heeley J.L., Chapman R., Ailet F., Hay R.T., Wyllie A. & Watson C.J. 2000 NF-kappaB inhibits apoptosis in murine mammary epithelia. Journal of Biological Chemistry 275, 12737-12742.

16. Crowley C.W., Cohen R.L., Lucas B.K., Liu G., Shuman M.A., Levin-son A.D. // Prevention of metastasis by inhibition of the urokinase receptor. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. Vol. 90. P. 5021-5025.

17. Cubellis M.V., Nolli M.L., Cassani G., Blasi F. // Binding of single-chain prourokinase to the urokinase receptor of human U937 cells. J. Biol. Chem. 1986. Vol. 261. P. 15819-15822.

18. Cubellis M.V., Wun T.C., Blasi F. // Receptor-mediated internalization and degradation of urokinase is caused by its specific inhibitor PAI-1. EMBO J. 1990. Vol. 9. P. 1079-1085.

19. Damjanovich L., Turzo C., Adany R. // Factors involved in the plasminogen activation system in human breast tumours. Thromb. Haemost. 1994. Vol. 71. P. 684-691.

20. Dano K., Andreasen P.A., Gr0ndahl-Hansen J., Kristensen P.I., Nielsen L.S., Skriver L. // Plasminogen activators, tissue degradation, and cancer. Adv.Cancer Res. 1985. Vol. 44. P. 139-266.

21. Del Bufalo D., Biroccio A., Leonetty C. & Zupi G. 1997 Bcl-2 overexpresssion enhances the metastatic potential of a human breast cancer line. FASEB Journal 11, 947-953.

22. Del Vecchio S., Stoppelli M.P., Carriero M.V. et al. Human urokinase receptor concentration in malignant and benign breast tumors by in vitro quatitative autoradiography: comparison with urokinase levels. Cancer Res. 1993. - Vol. 53. -p. 2198-3206.

23. Ding I., Sun J.Z., Fenton B., Liu W.M., Kimsely P., Okunieff P., Min W. Intratumoral administration of endostatin plasmid inhibits vascular growth and perfusion in MCa-4 murine mammary carcinomas. Cancer Res.-2001.-Vol.61, N.2.-P.526-531.

24. Dole M., Nunez G., Merchant A.K., Maybaum J., Rode C.K., Bloch C.A. & Castle V.P. 1994 Bcl-2 inhibits chemotherapy-induced apoptosis in neurob-lostoma. Cancer Research 54,3253-3259.

25. Donovan D. Harmey J.H. Toomey D. Osborne D.H. Redmond H.P. Bouchier-Hayes D.J. TGF beta-1 regulation of VEGF production by breast cancer cells see comments. Ann. Surg. Oncol.-1997.-Vol.4, N.8.-P.621-627.

26. Duffy M.J. The role proteolytic enzymes in cancer invasion and metastasis. Clin. Exp. Metastasis. 1992. - Vol.10. - p. 145-155.

27. Duffy M.J., O'Grady P., Devaney D., O'Siorain L., Fennelly J.J., Lijnen H.J. // Urokinase plasminogen activator, a marker for aggressive breast carcinomas: preliminary report. Cancer. 1988. Vol. 62. P. 531-533.

28. Duffy M.J., Reilly D, O'Sullivan C, O'Higgins N, Fennelly J.J., An-dreasen P. // Urokinase-plasminogen activator, a new and independent prognostic marker in breast cancer. Cancer Res. 1990. Vol. 50. P. 6827-6829.

29. Duggan C., Kennedy S., Kramer M.D., Barnes C., Elvin P., McDermott E., O'Higgins N., Duffy M.J. // Plasminogen activator inhibitor type 2 in breast cancer. Br. J. Cancer. 1997. Vol. 76. P. 622-627.

30. Duggan C., Maguire T., McDermott E., O'Higgins N., Fennelly J.J., Duffy M.J. // Urokinase plasminogen activator and urokinase plasminogen activator receptor in breast cancer. Int. J. Cancer. 1995. Vol. 61. P. 597-600.

31. Duttaroy A., Qian J.F., Smith J.S. & Wang E. 1997 Up-regulated P21CIP1 expression is part of the regulation quantitatively controlling serum deprivation-induced apoptosis. Journal of Cellular Biochemistry 64,434-446.

32. Eissa S., Labib R., Khalifa A., Swelam N., Khalil F. & El-Shenawy A.M. 1999 Regulators of apoptosis in human breast cancer. Clinical Biochemistry 32, 321-326.

33. Ellis V., Behrendt N., Dan0 K. // Plasminogen activation by receptor-bound urokinase. J. Biol. Chem. 1991. Vol. 266. P. 12752-12758.

34. Ellis V., Pyke C., Eriksen J., Solberg H., Dan0 K. // The urokinase receptor: involvement in cell surface proteolysis and cancer invasion. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1992. Vol. 667. P. 13-31.

35. Ellis V., Wun T.C., Behrendt N, R0nne E., Dan0 K. // Inhibition of receptor» bound urokinase by plasminogen-activator inhibitors. J. Biol. Chem. 1990. Vol. 265. P. 9904-9908.

36. Evans D.M., Lin P.L. // Suppression of pulmonary metastases of rat mammary cancer by recombinant urokinase plasminogen activator inhibitor. Am. Surg. 1995. Vol. 61. P. 692-697.

37. Ferrara N. The role of vascular endothelial growth factor in pathological angiogenesis. Breast Cancer Res. Treat.-1995.-Vol.36, N.2.-P.127-137.

38. Foekens J. Plasminogen activator inhibitor-1 and prognosis in primary breast cancer. J. Clin. Oncol. 1994. - Vol. 12. - p. 1648-1658.

39. Foekens J.A., Look M.P., Meijervan Gelder M.E., van Putten W.L.J., Klijn J.G.M. // The predictive value of the urokinase system of plasminogen activation in recurrent breast cancer. Eur. J. Cancer. 1996b. Vol. 32A (Suppl. 2). P. 55.

40. Foekens J.A., Schmitt M., van Putten W.L.J., Peters H.A., Bontenbal M., JSnicke F., Klijn J.G.M. // Prognostic value of urokinase-type plasminogen activator in 671 primary breast cancer patients. Cancer Res. 1992. Vol. 52. P. 6102-6105.

41. Foekens J.A., Schmitt M., van Putten W.L.J., Peters H.A., Portengen H., Kramer M.D., Janicke F., Klijn J.G.M. // Plasminogen activator inhibitor and breast cancer prognosis. J. Clin. Oncol. 1994. Vol. 12. P. 1648-1658.

42. Folkman J. Angiogenesis. In: Harrison's Textbook of Internal Medicine, 15th Edition. Braunwald E., Fauci A.S., Kasper D.L., Hauser S.L., Longo D.L., Jameson J.L., eds. New York: McGraw-Hill.-2001.-P.517-530.

43. Foucre D., Bouchet C., Hacene K. et al. Relationship between cathepsin D, urokinase, and plasminogen activator inhibitors in malignant vs benign breast tumours. Br. J. Cancer. -1991. Vol.64. - p.926-932.

44. Furlong E.E., Keon N.K., Thornton F.D., Rein T. & Martin F. 1996 Expression of a 74-kDa nuclear factor 1 (NF1) protein is induced in mouse mammary gland involution.

45. Involution-enhanced occupation of a twin NF1 binding element in the testosterone-repressed prostate message-2/custerin promoter. Journal of Biological Chemistry 271, 29688-29697.

46. Gandolfo G.M., Conti L., Vercillo M. // Fibrinolysis components as prognostic markers in breast cancer and colorectal carcinoma. Anticancer Res. 1996. Vol. 16. P. 215^ 2159.

47. Gaspanni G. Clinical significance of determination of surrogate markers of angiogenest n breast cancer. Crit. Rev. Oncol. Hematol.-2001.-Vol.37, N.2.-P.97-114.

48. Gasparini G. Prognostic value of vascular endothelial growth factor in breast cancer. Oncologist.-2000.-Vol.5, Suppl.l.-P.37-44.

49. Gigliotti A.P. & DeWille J.W. 1999 Local signals induce CCAAT/enchancer binding protein -delta (C/EBP-delta) and C/EBP-beta mRNA expression in the involuting mouse mammary gland. Breast Cancer Research and Treatment 58, 57-63.

50. Graeff H., Harbeck N, Pache L., Wilhelm O, Janicke F, Schmitt M. // Prognostic impact and clinical relevance of tumor-associated proteases in breast cancer. Fibrinolysis. 1992. Vol. 6 (Suppl. 4). P. 45-53.

51. Greb R.R., Maier I., Wallwiener D., Kiesel L. Vascular endothelial growth factor A (VEGF-A) mRNA expression levels decrease after menopause in normal breast tissue but not in breast cancer lesions. Br. J. Cancer.-1999.-Vol.81, N.2.-P.225-231.

52. Gutierrez L.S., Eliza M., Niven-Fairchild T., Naftolin F. & Mor G. 1999 The Fas/Fas-ligand system: a mechanism for immune evasion in human breast carcinomas. Breast Cancer Research and Treatment 54, 245-253.

53. Hoyer-Hansen G., Ronne E., Solberg H., Behrendt N., Ploug M., Lund L.R., Ellis V., Dano K. // Urokinase plasminogen activator cleaves its cell surface receptor releasing the ligand-binding domain. J. Biol. Chem. 1992. Vol. 267. P. 1822418229.

54. Hall S.W., Humphries J.E., Gonias S.L. // Inhibition of cell surface receptor-bound plasmin by alpha 2-antiplasmin and alpha 2 macroglobulin. J. Biol. Chem. 1991. Vol. 266. P. 12329-12336.

55. Harbeck N., Dettmar P., Thomssen C., Henselmann B., Kuhn W., Ulm K., Janicke F., Hofler H., Graeff H., Schmitt M. // Prognostic impact of tumor biological factors on survival in node-negative breast cancer. Anticancer Res. 1998. Vol. 18. P. 2187-2197.

56. Harris A.L. Anti-angiogenesis therapy and strategies for integrating it with adjuvant therapy. Recent Results Cancer Res.-1998.-Vol.l52.-P.341-352.

57. Heermeier K., Benedict M., Li M., Furth P., Nunez G. & Hennighausen L. 1996 Bax and Bcl-xs are induced at the onset of apoptosis in involuting mammary epithelial cells. Mechanisms of Development 56,197-207.

58. Hembrough T.A., Kralovich K.R., Li L., Gonias S.L. // Cytokeratin 8 released by breast carcinoma cells in vitro binds plasminogen and tissue-type plasminogen activator and promotes plasminogen activation. Biochem. J. 1996a. Vol. 317. P. 763-769.

59. Henderson B.E., Ross R.K. & Pike M.C. 1993 Hormonal chemopreven-tion of cancer in women. Science 259,633-638.

60. Hickman J.A. 1992 Apoptosis induced by anticancer drugs. Cancer Metastasis Reviews 11,121-139.

61. Hildenbrand R., Dilger I., Horlin A., Stutte HJ. // Urokinase and macrophages in tumour angiogenesis. Br. J. Cancer. 1995. Vol. 72. P. 818-823.

62. Hildenbrand R., Dilger I., Horlin A., Stutte H.J. // Urokinase plasminogen activator induces angiogenesis and tumor vessel invasion in breast cancer. Pathol. Res. Pract. 1995a. Vol. 191. P. 403-409.

63. Hockenbery D.M., Nunez G., Milliman C., Schreiber R.D. & Korsmeyer S.J. 1990 Bcl-2 is an inner mitichondrial membrane protein that blocks programmed cell death. Nature 348, 334-336.

64. Hockenbery D.M., Zutter M., Hickey W., Nahm M. & Korsmeyer S. 1991 Bcl-2 protein is topographically restricted in tissues characterized by apoptotic cell death. PNAS 88, 6961-6965.

65. Hyder S.M., Chiappetta C., Stancel G.M. Pharmacological and endogenous progestins induce vascular endothelial growth factor expression in human breast cancer cells. Int. J. Cancer.-2001.-Vol.92, N.4.-P.469-473.

66. Hyder S.M., Murthy L., Stancel G.M. Progestin regulation of vascular endothelial growth factor in human breast cancer cells. Cancer Res.-1998.-Vol.58, N.3.-P.392-395.

67. Hyder S.M., Nawaz Z., Chiappetta C., Stancel G.M. Identification of functional estrogen response elements in the gene coding for the potent angiogenic factor vascular endothelial growth factor. Cancer Res.-2000.-Vol.60, N.12.-P.3183-3190.

68. Hyder S.M., Stancel G.M. Regulation of VEGF in the reproductive tract by sex-steroid hormones. Histol Histopathol.-2000.-Vol. 15, N.1.-P.325-334.

69. Ichinose A., Fujikawa K., Suyama T. // The activation of pro-urokinase by plasma kallikrein and its inactivation by thrombin. J. Biol. Chem. 1986. Vol. 261. P. 3486-3489.

70. Janicke F., Graeff H., Schmitt M. // Clinical relevance of the urokinase-type and tissue-type plasminogen activators and of their type 1 inhibitor in breast cancer. Semin. Thromb. Hemost. 1991. Vol. 17. P. 303-312.

71. Janicke F., Schmitt M., Hafter R., Hollreider A., Babic R., Ulm K., Gossner W., Graeff H. // Urokinase-type plasminogen activator (u-PA) antigen is a predictor of early relapse in breast cancer. Fibrinolysis. 1990. Vol. 4. P. 69-78.

72. Janicke F., Schmitt M., Pache L., Ulm K., Harbeck N., Graeff H. // Urokinase (uPA) and its inhibitor PAI-1 are strong and independent prognostic factors in node-negative breast cancer. Breast Cancer Res. Treat. 1993. Vol. 24. P. 195208.

73. Jager R., Heizer U., Schenkel J. & Weiher H. 1997 Overexpression of Bcl-2 inhibits alveolar cell apoptosis during involution and accelerates c-myc-induced tumorigenesis of the mammary gland in transgenic mice. Oncogene 15, 1787-1795.

74. Jankun J., Merrick H.W., Goldblatt P.J. // Expression and localization of elements of the plasminogen activation system in benign breast disease and breast cancers. J. Cell Jiochem. 1993. Vol. 53. P. 135-144.

75. Jerry D.J., Pinkas J., Kuperwasser C., Dickinson E.S. & Naber S.P. 1999 Regulation of p53 and its targets during involution of the mammary gland. Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia 2,177-181.

76. Kandouz M., Siromachkova M., Jacob D., Chretien M., Therwath A. & Gompel A. 1996 Antagonism between estradiol and progestin on Bcl-2 expression in breast-cancer cells. International Journal of Cancer 68,120-125.

77. Kapranos N., Karaiosifidi H., Valavanis C., Kouri E. & Vasilaros S. 1997 Prognostic significance of apoptosis related proteins Bcl-2 and Bax in node-negative breast cancer patients. Anticancer Research 17, 2499-2505.

78. Keane M.M., Ettenberg S.A., Lowrey G.A., Russell E.K. & Lipkowitz S. 1996 Fas expression and function in normal and malignant breast cell lines. Cancer Research 56,4791-4798.

79. Kerbel R.S. Acquired resistance to the antitumor effect of epidermal growth factor receptor-blocking antibodies in vivo: a role for altered tumor angio-genesis. Cancer Res.-2001.-Vol.61, N.13.-P.5090-5101.

80. Kerbel R.S., ViloriaPetit A., Klement G., Rak J. 'Accidental' anti-angiogenic drugs, anti-oncogene directed signal transduction inhibitors and conventional chemotherapeutic agents as examples. Eur.J.Cancer.-2000.-Vol.36, N.10.-P. 1248-1257.

81. Knowlton K., Mancini M., Creason S., Morales C., Hockenbeiy D. & Anderson B.O. 1998 Bcl-2 slows in vitro breast cancer growth despite its antiapop-totic effect. Journal of Surgical Research 76,22-26.

82. Knudson C.M., Tung K.S., Tourtelloutte W.G., Brown G.A. & Korsmeyer S.J. 1995 Bax-deficient mice with lymphoid hyperplasia and male germ cell death. Science 270,96-99.

83. Korsmeyer S.J. Bcl-2 initiates a new category of oncogenes: regulator of cell death. Blood 80, 879-886.

84. Kraft, A., Weindel, K., Ochs A., Marth C., Zmija J., Schumacher P., Unger C., Marme D., Gastl G. Vascular endothelial growth factor in the sera and effusions of patients with malignant and nonmalignant disease. Cancer.-1999.^-Vol.85, N.1.-P.178-187.

85. Krajewski S., Thor A.D., Edgerton S.M., Moore D.H., Krajewska M. & Reed J.C. 1997 Analysis of Bax and Bcl-2 expression in p53-immunopositive breast cancers. Clinical Cancer Research 3,199-208.

86. Kralovich K.R., Li L., Hembrough T.A., Webb D.J., Karns L.R., Gonias S.L. // Characterization of the binding sites for plasminogen and tissue-type plasminogen activator in cytokeratin 8 and cytokeratin 18. J. Protein Chem. 1998. Vol. 17. P. 845-854.

87. Kranz A., Mattfeldt T., Waltenberger J. Molecular mediators of tumor angiogenesis: enhanced expression and activation of vascular endothelial growth factor receptor KDR in primary breast cancer. Int. J. Cancer.-1999.-Vol.84, N.3.-P.293-298.

88. Kumar R., Mandal M., Lipton A., Harvey H. & Thompson C.B. 1996 Overexpression of HER2 modulates bcl-2, bcl-XL, and tamoxifen-induced apoptosis in human MCF-7 breast cancer cells. Clinical Cancer Research 2, 1215-1219.

89. Kurebayashi J. Otsuki T. Kunisue H. Mikami Y. Tanaka K. Yamamoto S. Sonoo H. Expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) family members in breast cancer. Jpn. J. Cancer Res.-1999.-Vol.90, N.9.-P.977-981.

90. Kurebayashi J., Kunisue H., Yamamoto S., Kurosumi M., Otsuki T., Sonoo H. Paradoxical hormone responses of KPL-1 breast cancer cells in vivo: a significant role of angiogenesis in tumor growth. Oncology.-2000.-Vol.59, N.2.-P.158-165.

91. Kurizaki T., Toi M., Tominaga T. Relationship between matrix metallo-proteinase expression and tumor angiogenesis in human breast carcinoma. Oncol. Rep.-1998.-Vol.5, N.3.-P.673-677.

92. Lau D.H., Xue L., Young L.J., Burke P.A., Cheung A.T. Paclitaxel (Taxol): an inhibitor of angiogenesis in a highly vascularized transgenic breast cancer. Cancer Biother. Radiopharm.-1999.-Vol. 14, N.1.-P.31-36.

93. Le Querrec A., Duval D., Tobelem G. Tumour angiogenesis. Baillieres Clin. Haematol.-1993.-Vol.6, N.3.-P.711-730.

94. Lee A.H., Dublin E.A., Bobrow L.G., Poulsom, R. Invasive lobular and invasive ductal carcinoma of the breast show distinct patterns of vascular endothelial growth factor expression and angiogenesis. J. Pathol.-1998.-Vol.185, N.4.-P.394-401.

95. Leek R.D., Hunt N.C., Landers R.J., Lewis C.E., Royds J.A., Harris A.L. Macrophage infiltration is associated with VEGF and EGFR expression in breast cancer. J. Pathol.-2000.-Vol.190, N.4.-P.430-436.

96. Li B. & Dou Q.P. 2000 Bax degradation by the ubiquitin/proteosome dependent pathway: involvement of tumor survival and progression. PNAS 97, 38503855.

97. Li M., Hu J., Heermeier K., Hennighausen L. & Furth P.A. 1996 Apop-tosis and remodeling of mammary gland tissue during involution proceeds through p53-independent pathways. Cell Growth and Differentiation 7,13-20.

98. Li M, Liu X., Robinson G., Bar-Peled U., Wagner K.U., Young W.S., Hennighausen L. & Furth P.A. 1997 Mammary-derived signals activate programmed cell death during the first stage of mammaiy gland involution. PNAS 94,3425-3430.

99. Li Y., Bhuiyan M. & Sarkar F.H. 1999 induction of apoptosis and inhibition of c-erbB-2 in MDA-MB-435 cells by genistein. International Journal of Oncology 15, 525-533.

100. Li Y., Bhuiyan M., Alhasan S., Senderowicz A.M. & Sarkar F.H. 2000 Induction of apoptosis and inhibition of c-erbB2 in breast cancer cells by flavopiri-dol. Clinical Cancer Research 6, 223-229.

101. Linderholm B., Lindh B., Tavelin B., Grankvist K., Henriksson R. p53 and vascular-endothelial-growth-factor (VEGF) expression predicts outcome in 833 patients with primary breast carcinoma. Int. J. Cancer.-2000.-Vol.89, N.1.-P.51-62.

102. Linderholm B., Tavelin B., Grankvist K., Henriksson R. Does vascular endothelial growth factor (VEGF) predict local relapse and survival in radiotherapy-treated node-negative breast cancer? Br. J. Cancer.-1999.-Vol.81, N.4.-P.727-732.

103. Liotta L.A., Tryggvason K., Garbisa S., Hart I., Foltz C.M., Shafie S. // Metastatic potential correlates with enzymatic degradation of basement membrane collagen. Nature. 1980. Vol. 284. P. 67-68.

104. Lithgow T., van Driel R., Bertram J.F. & Strasser A. 1994 The protein product of the oncogene bcl-2 is a component of the nuclear envelope, the endoplasmic reticulum, and the outer mitochondrial membrane. Cell Growth and Differentiation 5,411-417.

105. Liu R., Takayama S., Zheng Y., Froesch B., Chen G., Zhang X. & Reed J.C. 1998 Interaction of BAG-1 with retinoic acid receptor and its inhibition of reti-noic acid induced apoptosis in cancer cells. Journal of Biological Chemistry 273, 16985-16992.

106. Locopo N., Fanelli M., Gasparini G. Clinical significance of angiogenic factors in breast cancer. Breast Cancer Res. Treat.-1998.-Vol.52, N. 1-3.-P. 159-173.

107. Lund L.R., Romer J., Ronne E., Ellis V., Blasi F., Dano K. // Urokinase-receptor biosynthesis, mRNA level and gene transcription are increased by transforming growth factor pi in human A549 lung carcinoma cells. EMBO J. 1991a. Vol. 10. P. 3399-3407.

108. Moller L.B. // Structure and function of the urokinase receptor. Blood Coagul. Fibrinolysis. 1993. Vol. 4. P. 293-303.

109. Mignatti P., Rifkin D.B. // Biology and biochemistry of proteinases in tumor invasion. Physiol. Rev. 1993. Vol. 73. P. 161-195.

110. Mignatti P., Rifkin D.B. Plasminogen activators and matrix metallopro-teinases in angiogenesis. Enzyme Protein.-1996.-Vol.49.-P.l 17-137.

111. Motwani M., Delohery T.M. & Schwartz G.K. 1999 Sequential dependent enhancement of caspase activation and apoptosis by flavopiridol on paclitaxel-treated human gastric and breast cancer cells. Clinical Cancer Research 5, 18761883.

112. Mullauer L., Mosberger I., Grusch M., Rudas M & Chott A. 2000 Fas ligand is expressed in normal breast epithelial cells and is frequently up-regulated in breast cancer. Journal of Pathology 190,20-30.

113. Nathan B., Anbazhagan R., Dver M., Ebbs S.R., Jayatilake H. & Guster-son B.A. 1993 Expression of Bcl-2 like immunoreactivity in the normal breast and in breast cancer. Breast 2, 134-137.

114. Nielsen B.S., Sehested M., Timshel S., Pyke C., Dano K. // Messenger RNA for urokinase plasminogen activator is expressed in myoblasts adjacent to cancer cells in human breast cancer. Lab. Invest. 1996. Vol. 74. P. 168-177.

115. Nozaki S., Sledge G.W. Jr. Nakshatri H. Cancer cell-derived interleukin 1 alpha contributes to autocrine and paracrine induction of pro-metastatic genes in breast cancer. Biochem. Biophys. Res. Commun.-2000.-Vol.275, N.1.-P.60-62.

116. O'Grady P., Lijnen H.R., Duffy M.J. // Multiple forms of plasminogen activator in human breast tumors. Cancer Res. 1985. Vol. 45. P. 6216-6218.

117. Ohhashi T. Lymphodynamic factors governing lymphatic spread of carcinoma cells. Nippon Geka Gakkai Zasshi.-2001.-Vol.102, N.6.-P.435-439.

118. Okada A., Bellocq J.-P., Rouyer N. et al. // Membrane-type matrix met-alloproteinase (MT-MMP) gene is expressed in stromal cells of human colon, breast, and head and neck carcinomas. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. Vol. 92. P. 27302734.

119. Oltvai Z., Milliman C.L. & Korsmeyer S.J. 1993 Bcl-2 heterodimerizes in vivo with a conserved homolog Bax that accelerates programmed cell death. Cell 73, 609-619.

120. Ossowski L., Russo-Payne H., Wilson E.L. // Inhibition of urokinase-type plasminogen activator by antibodies: the effect on dissemination of a human tumor in the nude mouse. Cancer Res. 1991. Vol. 51. P. 274-281.

121. Pidgeon G.P., Barr M.P., Harmey J.H., Foley D.A., BouchierHayes D.J. Vascular endothelial growth factor (VEGF) upregulates BCL-2 and inhibits apoptosis in human and murine mammary adenocarcinoma cells. Br. J. Cancer -2001.-Vol.85, N.2.-P.273-278.

122. Pierga J.Y., Laine-Bidron C., Beuzeboc P., De Cremoux P., Pouillart P., Magdelenat H. // Plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) is not related to response to neoadjuvant chemotherapy in breast cancer. Br. J. Cancer. 1997. Vol. 76. P. 537540.

123. Pintucci G., Bikfalvi A., Klein S., Rifkin D.B. Angiogenesis and the fibrinolytic system. Semin Thromb Hemost.-1996.-Vol.22, N.6.-P.517-524.

124. Pratt W.B. & Toft D.O. 1997 Steroid receptor interactions with heat shock protein and immunophilin chaperones. Endocrine Reviews 3,306-360.

125. Pyke C., Graem N., Ralfkiaer E., Ronne E., H0yer-Hansen G., Briinner N., Dano K. // The receptor for urokinase is present in tumor-associated macrophages in ductal breast carcinoma. Cancer Res. 1993. Vol. 53. P. 1911-1915.

126. Pyke C., Kristensen P., Ralfkiaer E., Eriksen J., Dano K. // Urokinase-type plasminogen activator is expressed in stromal cells and its receptor in cancer cells at invasive foci in human colon cancer. Am. J. Pathol. 1991. Vol. 138. P. 10591067.

127. Ronne E., Behrendt N. Ploug M., Nielsen H.J., Wollisch E., Weidle U., Dano K., Hoyer-Hansen G. // Quantitation of the receptor for urokinase plasminogen activator be enzyme-linked immunosorbent assay. J. Immunol. Methods. 1994. Vol. 167. P. 91-101.

128. Rampino N., Yamomoto H., Ionov Y., Li Y., Sawai H., Reed J.C. & Perucho M. 1997 Somatic frameshift mutations in the BAX gene in colon cancers of the microsatellite mutator phenotype. Science 275,967-969.

129. Reed J.C. 1994 Bcl-2 and the regulationof programmed cell death. Journal of cell biology 124,1-6.

130. Reilly D., Christensen L., Duch M., Nolan N., Duffy M.J., Andreasen P.A. // Type-1 plasminogen activator inhibitor in human breast cancer. Int. J. Cancer. 1992. Vol. 50. P. 208-214.

131. Reimer T., Herrnring C., Koczan D., Richter D., Gerber B., Kabelitz D., Friese K. & Thiesen H.J. 2000 FasL: Fas ratio — a prognostic factor in breast carcinomas. Cancer Research 60, 822-828.

132. Rella C., Coviello M., Quaranta M., Paradiso A. // Tissue-type plasminogen activator as marker of functional steroid receptors in human breast cancer. Thromb. Res. 1993. Vol. 69. P. 209-220.

133. Ricca A., Biroccio A., Del Bufalo D., Mackay A.R., Santoni A. & Cip-pitelli M. 2000 bcl-2 overexpression enhances NF-kappaB activity and induces mmp-9 transcription in human MCF-7 (ADR) breast-cancer cells. International Journal of Cancer 86,188-196.

134. Rondinelli R.H., Haslam S.Z. & Fluck M.M. 1995 The role of ovarian hormones, age and mammary gland development in polymavirys mammary tumori-genesis. Oncogene 11,1817-1827.

135. Russo J. & Russo I.H. 1980 Susceptibility of the mammary gland to carcinogenesis. II. Pregnancy interruption as a risk factor in tumor incidence. American Journal of Pathology 100, 497-512.

136. Russo J. & Russo I.H. 1982 Differentiation of the mammary gland and susceptibility to carcinogenesis. Breast Cancer Research and Treatment 2, 5-73.

137. Sabourin J.C., Martin A., Baruch J., True J.B., Gompel A. & Poitout P. 1994 Bcl-2 expression in normal breast tissue during the menstrual cycle. International Journal of Cancer 59,1-6.

138. Salven P. Perhoniemi V. Tykka H. Maenpaa H. Joensuu H. Serum VEGF levels in women with a benign breast tumor or breast cancer. Breast Cancer Res. Treat.-1999.-Vol.53, N.2.-P.161-166.

139. Salven P., Manpaa H., Orpana A., Alitalo K., Joensuu H. Serum vascular endothelial growth factor is often elevated in disseminated cancer. Clin. Cancer Res.-Vol.3, N.5.-P.647-651.

140. Sappino A.-P., Skalli O., Jackson W., Schiirch W., Gabbiani G. // Smooth-muscle differentiation in stromal cells of malignant and nonmalignant breast tissues. Int. J. Cancer. 1988. Vol. 41. P. 707-712.

141. Sato Y. Transcription factor ETS-1 as a molecular target for angiogene-sis inhibition. Hum. Cell.-1998.-Vol.ll, N.4.-P.207-214.

142. SchorT K., Li M., Krajewski S., Reed J.C. & Furth P.A. 1999b Bcl-2 gene family and related proteins in mammary gland involution and breast cancer. Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia 4,153-164.

143. Scott P.A., Smith K., Poulsom R., De Benedetti A., Bicknell R., Harris

144. A.L. Differential expression of vascular endothelial growth factor mRNA vs protein isoform expression in human breast cancer and relationship to eIF-4E. Br. J. Cancer.-19986.-Vol.77, N.12.-P.2120-2128.

145. Scott R.W., Bergman B.L., Bajpai A., Harsh R.T., Rodriquez H., Jones

146. B.N., Barreda C., Watts S., Baker J.V. // Protease nexin. J. Biol. Chem. 1985. Vol. 260. P. 7029-7034.

147. Sentman C.L., Shutter J.R., Hockenbery D., Kanagawa O. & Korsmeyer S.J. 1991 Bcl-2 inhibits multiple forms of apoptosis but not negative selective in thymocytes. Cell 67, 879-898.

148. Skobe M., Hawighorst T., Jackson D.G., Prevo R., Janes L., Velasco P., Riccardi L., Alitalo K., ClafFey K., Detmar M. Induction of tumor lymphangiogene-sis by VEGF-C promotes breast cancer metastasis. Nat. Med.-2001.-Vol.7, N.2.-P.192-198.

149. Speirs, V., Atkin, S.L. Production of VEGF and expression of the VEGF receptors Flt-1 and KDR in primary cultures of epithelial and stromal cells derived from breast tumours. Br. J. Cancer.-1999.-Vol.80, N.5-6.-P.898-903.

150. Stonelake P.S., Jones C.E., Neoptolemos J.P., Baker P.R. // Proteinase inhibitors reduce basement membrane degradation by human breast cancer cell lines. Br. J. Cancer. 1997. Vol. 75. P. 951-959.

151. Strange R., Li F., Saurer S., Burkhard A. & Friis R.R. 1992 Apoptotic cell death and tissue remodeling during mouse mammary gland involution. Development 115,49-58.

152. Streuli C.H., Edwards G.M., Delcommenne M., Whitelaw C.B., Burdon T.G., Schindler C. & Watson C.J. 1995 Stat5 as a target for regulation by extracellular matrix. Journal of Biological Chemistry 270,21639-21644.

153. Sumantran V.N., Ealovega M.W., Nunez G, Clarke M.F. & Wicha M.S. 1995 Overexpression of Bcl-Xs sensitizes MCF-7 cells to chemotherapy-induced apoptosis. Cancer Research 55, 2507-2510.

154. Sumiyoshi K., Serizawa K., Urano T., Takada Y., Takada A., Baba S. // Plasminogen activator system in human breast cancer. Int. J. Cancer. 1992. Vol. 50. P. 345-348.

155. Takayama S., Sato T., Krajewski S., Irie S., Millan J.A. & Reed J.C. 1995 Cloning and functional analysis of BAG-1: a novel Bcl-2-binding protein with anti-cell death activity. Cell 80, 279-284.

156. Tamm I., Wang Y., Sausville E., Scudiero D.A., Vigna N., Oltersdorf T. & Reed J.C. 1998 IAP-family protein survivin inhibits caspase activity and apoptosis induced by Fas (CD95), Bax, caspases, and anticancer drugs. Cancer Research 58, 5315-5320.

157. Teixeira C., Reed J.C. & Pratt MAC 1995 Estrogen promotes chemo-therapeutical drug resistance by a mechanism involving Bcl-2 protooncogene expression in human breast cancer cells. Cancer Research 55,3902-3907.

158. Toi M., Hoshina S., Takayanagi T., Tominaga T. Association of vascular endothelial growth factor expression with tumor angiogenesis and with early relapse in primary breast cancer. Jpn. J. Cancer Res.-1994.-Vol.85, N.10.-P.1045-1049.

159. Toi M., Inada K., Suzuki H., Tominaga T. Tumor angiogenesis in breast cancer: its importance as a prognostic indicator and the association with vascular endothelial growth factor expression. Breast Cancer Res. Treat.-19956.-Vol.36, N.2.-P. 193-204.

160. Toi M., Kondo S., Suzuki H., Yamamoto Y., Inada K., Imazawa T., Ta-niguchi T., Tominaga T. Quantitative analysis of vascular endothelial growth factor in primary breast cancer. Cancer.-1996a.-Vol.77, N.6.-P. 1101-1106.

161. Toi M., Yamamoto Y., Taniguchi T., Saji S., Hayashi K., Tominaga T. Regulation of endothelial growth factor expressions in breast cancer. Gan To Kagaku Ryoho.-19966.-Vol.23, Suppl.l.-P.75-79.

162. Tsuijimoto Y., Gorham J., Cossman J., Jaffe E. & Croce C.M. 1985 The t(4:18) chromosome translocation involved in B-cell neoplasms results from mistake in VDJ joining. Science 299,1390-1393.

163. Turley J.M., Fu T., Ruscetti F.W., Mikovits J.A., Bertolette D.C. & Birchenall-Roberts M.C. 1997 Vitamin E succinate induces Fas-mediated apoptosis in estrogen receptor-negative human breast cancer cells. Cancer Research 57, 881890.

164. Tzeng Y.J., Zimmermann C., Guhl E., Berg B., Avantaggiati M.L. & Graessmann A. 1998 SV40 T/t-antigen induces premature mammary gland involution by appoptosis and selects for p53 missense mutation in mammary tumors. Oncogene 16,2103-2114.

165. Umeda T., Eguchi Y., Okino K., Kodama M., Hattori T. Cellular localization of urokinase-type plasminogen activator, its inhibitors, and their mRNAs in breast cancer tissues. Pathol. 1997. Vol. 183. P. 388-397.

166. Vakkala M., Paakko P. & Soini Y. 1999 Expression of caspases 3,6 and 8 is increased in parallel with apoptosis and histological aggressiveness of the breast lesion. British Journal of Cancer 4, 592-599.

167. Valtola R., Salven P., Heikkila P., Taipale J., Joensuu H., Rehn M., Pihlajaniemi T., Weich H., deWaal R., Alitalo K. VEGFR-3 and its ligand VEGF-C are associated with angiogenesis in breast cancer. Am. J. Pathol.-1999.-Vol. 154, N.5.-P.1381-1390.

168. Vandenbunder B., Wernert N., Queva C., Desbiens X., Stehelin D. Does the transcription factor c-etsl take part in the regulation of angiogenesis and tumor invasion? Folia Biol. (Praha).-1994.-Vol.40, N.5.-P.301-313.

169. Veis D.J., Sorenson C.M., Shutter J.R. & Korsmeyer S.J. 1993 Bcl-2-deficient mice demonstrate fulminant lymphoid apoptosis, polycystic kidneys, and hypopigmented hair. Cell 75,229-240.

170. Veronesi U., Goldhirsch A., Yarnold J. Breast cancer.- In: Oxford textbook of oncology / Ed. by M.Peckham, H.Pinedo, U.Veronesi. Oxford University Press.-1995.-p. 1241-1292.

171. Wagener C., Bargou R.C., Daniel P.T., Bommert K., Mapara M.Y., Royer H.D. & Dorken B. 1996 induction of the death-promoting gene bax-alpha sensitizes cultured breast-cancer cells to drug-induced apoptosis. International Journal of Cancer 67,138-141.

172. Wang G., Dong Z., Xu G., Yang Z., Shou C., Wang N., Liu T. The effect of antibody against vascular endothelial growth factor on tumor growth and metastasis. J. Cancer Res. Clin. Oncol.-1998.-Vol. 124, N.11.-P.615-620.

173. Wang G., Yang Z., Shou C. The effect of antibody against vascular endothelial growth factor (VEGF) on tumor metastasis. Chung Hua Chung Liu Tsa Chih.-1997.-Vol.19, N.6.-P.407-409.

174. Wang H.G., Takayama S., Rapp U.R. & Reed J.C. 1996 Bcl-2 interacting protein Bag-1 binds to and activates the kinase Raf-1. PNAS 93,7063-7068.

175. Wang Q., Maloof P., Wang H., Fenig E., Stein D., Nichols G., Denny T.N., Yahalom J. & Wieder R. 1998 Basic fibroblast growth factor downregulates Bcl-2 and promotes apoptosis in MCF-7 human breast cancer cells. Experimental Cell Research 238, 177-187.

176. Wang T.T. & Phang J.M. 1995 Effects of estrogen on apoptotic pathways in human breast cancer cell line MCF-7. Cancer Research 55,2487-2489.

177. Weidner N., Folkman J., Pozza F. et al. // Tumor angiogenesis: a new significant and independent prognostic indicator in early-stage breast carcinoma. J. Natl. Cancer Inst. 1992. Vol. 84. P. 1875-1887.

178. Weidner N., Semple J.P., Welch W.R., Folkman J. // Tumor angiogenesis and metastasis correlation in invasive breast carcinoma. N. Engl. J. Med. 1991. Vol. 324. P. 1-8.

179. Weinstat-Saslow D., Steeg P. Angiogenesis and colonization in the tumor metastatic process: basic and applied advance. FASEB J.-1994.-Vol.8.-p.401-407.

180. Weinstein E.J., Grimm S. & Leder P. 1998 The oncogene heregulin induces apoptosis in breast epithelial cells and tumors. Oncogene 17,2107-2113.

181. Wolf C., Rouyer N., Lutz Y. et al. // Stromelysin 3 belongs to a subgroup of proteinases expressed in breast carcinoma fibroblastic cells and possibly implicated in tumor progression. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. Vol. 90. P. 18431847.

182. Xie B., Tam N.N., Tsao S.W., Wong Y.C. Co-expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and its receptors (flk-1 and flt-1) in hormone-induced mammary cancer in the Noble rat. Br. J. Cancer.-1999.-Vol.81, N.8.-P.1335-1343.

183. Xing R.H., Mazar A., Henkin J., Rabbani S.A. // Prevention of breast cancer growth, invasion, and metastasis by antiestrogen tamoxifen alone or in combination with urokinase inhibitor B-428. Cancer Res. 1997. Vol. 57. P. 3585-3593.

184. Yamashita J., Ogawa M., Sakai K. // Prognostic significance of three novel biologic factors in a clinical trial of adjuvant therapy for node-negative breast cancer. Surgery. 1995. Vol. 117. P. 601-608.

185. Yang X., Hao Y., Ding Z., Pater A. & Tang S.C. 1999 Differential expression of antiapoptotic gene BAG-1 in human breast normal and cancer cell lines and tissues. Clinical Cancer Research 5,1816-1822.

186. Yoshiji H., Gomez D.E., Shibuya M., Thorgeirsson U.P. Expression of vascular endothelial growth factor, its receptor, and other angiogenic factors in human breast cancer. Cancer Res.-1996.-Vol.56, N.9.-P.2013-2016.

187. Zebrowski B.K., Yano S., Liu W., Shaheen R.M., Hicklin D.J., Putnam J.B. Jr, Ellis L.M. Vascular endothelial growth factor levels and induction of permeability in malignant pleural effusions. Clin. Cancer Res.-1999.-Vol.5, N.11.-P.3364-3368.

188. Ziche M., Donnini S., Morbidelli L., Parenti A., Gasparini G., Ledda F. Linomide blocks angiogenesis by breast carcinoma vascular endothelial growth factor transfectants. Br. J. Cancer.-1998.-Vol.77, N.7.-P.1123-1129.

189. Герштейн E.C., Кушлинский H.E. // Молекулярные маркеры прогноза и лекарственной чувствительности рака молочной железы. В кн.: "Новое в терапии рака молочной железы" под ред. Н.И. Переводчиковой. М. 1998. С. 19-24.

190. Зборовская И.Б., Ельчева И.А., Татосян А.Г. Молекуляр-генетические исследования рака молочной железы: онкогены и гены супрессо-ры. Новое в терапии рака молочной железы (под ред. проф. Переводчиковой Н.И.).-М.- 1998.-с.11-19.

191. Моисеенко В.М. Клиническое значение прогностических факторов при раке молочной железы. Новое в терапии рака молочной железы (под ред. проф. Переводчиковой Н.И.). М. -1998. - с.25-31.

192. Переводчикова Н.И. Новое в терапии рака молочной железы (под ред. проф. Переводчиковой Н.И.). М. -1998. - 91 С.

193. Рецепторы стероидных гормонов в опухолях человека. Под ред. Л.С. Бассалык. - М. "Медицина". 1987. 223 С.

194. Трапезников H.H., Аксель Е.М. // Заболеваемость злокачественными новообразованиями и смертность от них населения стран СНГ. М. 2001.

195. Трапезников H.H., Аксель Е.М. Статистика рака молочной железы. Новое в терапии рака молочной железы (под ред. проф. Переводчиковой Н.И.). -M.- 1998.-c.6-10.