Клиническое значение системы активации плазминогена у больных раком желудка тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат медицинских наук Казьмин, Александр Иванович

• Казьмин, Александр Иванович
• кандидат медицинских наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Казьмин, Александр Иванович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1.

Обзор литературы.

1.1. Инвазия и метастазирование опухоли.

1.2. Система активации плазминогена.

1.3. Клиническое значение системы активации плазминогена.

ГЛАВА 2.

Материал и методы исследования.

2.1. Характеристика больных.

2.2. Получение и обработка тканей.

2.3. Иммуноферментное определение (ELISA) uPA , tPA и PAI-1 в цитозолях опухолей и гистологически неизмененной ткани желудка.

2.4. Статистический анализ данных.

ГЛАВА 3.

Компоненты системы активации плазминогена в опухолях больных раком желудка - взаимосвязь с клинико-морфологическими факторами.

3.1. Содержание uPA , tPA и PAI-1 в опухолевой ткани у больных раком желудка

3.2. Сравнение концентраций uPA , tPA и PAI-1 в опухолях и гистологически неизмененой ткани желудка.

3.3. Зависимость концентраций uPA , tPA и PAI-1 в опухолях больных раком желудка от стадии заболевания.

3.4. Зависимость концентраций uPA , tPA и PAI-1 в опухолях от возраста больных раком желудка.

3.5. Зависимость концентраций uPA , tPA и PAI-1 в опухолях при раке желудка от гистологического строения.

ГЛАВА 4.

Общая выживаемость больных раком желудка в зависимости от клинико-морфологических признаков и экспрессии компонентов системы активации плазминогена.

4.1. Выживаемость больных раком желудка в зависимости от стадии заболевания

4.2. Выживаемость больных раком желудка в зависимости от содержания uPA , tPAnPAI-1 в опухолевой ткани.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клиническое значение системы активации плазминогена у больных раком желудка»

Актуальность проблемы

Рак желудка - широко распространенное злокачественное новообразование, занимающее одно из первых мест среди онкологических заболеваний. Длительное время это грозное заболевание оставалось ведущей причиной смертности от онкологической патологии во всем мире. В последнее время частота рака желудка в экономически развитых странах постепенно снижается и в настоящее время он занимает второе место в структуре заболеваемости злокачественными новообразованиями среди мужчин (12,7%) и третье место - среди женщин (8,9%) в России (Давыдов М.И., Аксель Е.М., 2002). Однако, несмотря на стабильное снижение заболеваемости и смертности, проблема раннего выявления рака желудка и разработка новых подходов к адъювантному лекарственному лечению этого заболевания, мало чувствительного к традиционным видам химиотерапии, на сегодняшний день остается актуальной.

В связи с этим не теряет своей значимости разработка новых подходов к общему прогнозу заболевания и выбору наиболее адекватных схем лечения для каждого больного. Большое внимание в этой области уделяется различным молекулярным и клеточным маркерам, характеризующим биологические свойства опухоли. Они могут быть полезны, по крайней мере, в трех ситуациях. Во-первых, для выявления пациентов с очень хорошим прогнозом, для которых осложнения и стоимость адъювантного лечения не будут оправданы имеющимся риском рецидива. Во-вторых, для выявления группы больных с плохим прогнозом, которым требуется более агрессивное адъювантное лечение. И, в-третьих, для определения чувствительности или резистентности к конкретным видам терапии. Кроме того, на основании исследований молекулярно-биологических особенностей опухоли может быть создана новая стратегия лечения, непосредственно влияющая на определенные молекулярные и биологические процессы.

Знание специфических биологических характеристик опухоли может помочь в усовершенствовании существующих схем терапии, а также в разработке новых подходов к лечению и общему прогнозу. К таким биологическим характеристикам злокачественной опухоли относится ее способность к инвазии, основным механизмом которой является разрушение окружающей базальной мембраны и внеклеточного матрикса ассоциированными с опухолью протеазами. Как известно, протеазы также участвуют в процессах метастазирования и неоангиогенеза. Центральное место среди протеолитических систем, регулирующих метастазирование и инвазию, безусловно, принадлежит каскаду активации плазминогена, в первую очередь, активатору плазминогена урокиназного типа - иРА (Mignatti P., Rifkin D., 1993, 1996; E.C. Герштейн, Н.Е.Кушлинский, 1999). Определение уровня и соотношения экспрессии различных компонентов системы активации плазминогена в опухолевой ткани может служить показателем инвазивной и метастатической активности опухоли, являясь биологически значимым фактором прогноза. В тоже время подавление активации плазминогена на различных уровнях (ингибирование активаторов, торможение их связывания с рецепторами) может стать одним из подходов к разработке новых схем противоопухолевой антиметастатической терапии.

В настоящее время при некоторых локализациях (рак молочной железы, рак яичников, рак толстой кишки и др.) показано клиническое и прогностическое значение активаторов плазминогена (Duffy M.J., 1999, Герштейн Е.С. с соавт., 2000, 2001, 2002, 2003). Однако при раке желудка подобного рода изыскания практически не проводились. Это и послужило основанием для проведения данного исследования.

Цель исследования

Изучить клиническое значение различных компонентов системы активации плазминогена - активаторов плазминогена урокиназного (иРА) и тканевого (tPA) типов и их ингибитора (PAI-1) в опухолях больных раком желудка.

Задачи исследования

1. Определить концентрацию uPA, PAI-1 и tPA в цитозолях опухолей больных раком желудка и неизмененных тканей желудка.

2. Провести сравнительную оценку состояния системы активации плазминогена в опухолевых и гистологически неизмененных тканях желудка.

3. Сопоставить полученные данные с клиническими особенностями и результатами морфологических исследований у больных раком желудка.

4. Определить прогностическое значение компонентов системы активации плазминогена при раке желудка.

Научная новизна

Впервые в отечественной практике на большом клиническом материале исследовано состояние системы активации плазминогена в опухолях и гистологически неизмененных тканях больных раком желудка. Изучена взаимосвязь этих показателей с основными клинико-морфологическими особенностями опухолей и выживаемостью больных после оперативного лечения.

В результате проведенных исследований выявлена взаимосвязь инвазивной и метастатической активности рака желудка с состоянием системы активации плазминогена в опухоли и оценена возможность клинического и прогностического использования иммуноферментного определения активаторов плазминогена у больных раком желудка.

Практическая значимость

Полученные результаты иммуноферментного исследования компонентов системы активации плазминогена у больных раком желудка свидетельствуют о том, что повышенная по сравнению с нормальной тканью экспрессия иРА и его ингибитора PAI-1 в опухоли, а также пониженная экспрессия tPA являются характерными особенностями рака желудка. Показано, что с повышением уровня иРА и PAI-1 в цитозолях опухолей происходит снижение общей продолжительности жизни больных раком желудка. Данный факт является теоретическим обоснованием для определения инвазивной и метастатической активности опухолей данной локализации, а в соответствии с этим, можно оценивать прогноз течения заболевания и планировать проведение адъювантной терапии, что, безусловно, будет способствовать увеличению продолжительности жизни пациентов.

Основные положения, выносимые на защиту

1. У больных раком желудка отмечается повышение экспрессии uPA и PAI-1 и снижение уровня tPA в опухолевой ткани по сравнению с неизмененной тканью желудка.

2. По мере увеличения стадии заболевания в опухоли значительно возрастает активация плазминогена по урокиназному типу с параллельным увеличением уровня PAI-1.

3. Увеличение уровня экспрессии uPA и PAI-1 в опухолевой ткани достоверно сопровождается снижением общей продолжительности жизни больных раком желудка.

Апробация работы

Апробация диссертации состоялась на совместной научной конференции сотрудников кафедр онкологии с лучевой терапией и диагностикой, биохимии, общей хирургии Воронежской государственной медицинской академии им. Н.Н. Бурденко и отделения клинической химии Воронежского областного клинического лечебно-диагностического центра 17 октября 2003 года. Материалы работы представлены на VI и VII Российской онкологической конференции

Москва, 2002, 2003), ISFP/IFRS Conference (Мюнхен, 2002), 14 International congress on anti-cancer chemotherapy (Париж, 2003), межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы он-когастроэнтерологии» (Барнаул, 2003).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 12 работ, из них 3 в зарубежной печати.

Структура и объем работы

Диссертация состоит из введения, обзора данных литературы, клинической характеристики материала и методов исследования, 2 глав собственных исследований, заключения, выводов, указателя литературы, включающего 10 отечественных и 104 зарубежных источников. Работа изложена на 113 страницах машинописного текста, содержит 7 таблиц и 15 рисунков.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Казьмин, Александр Иванович

ВЫВОДЫ

1. Концентрация uPA в цитозолях опухолей первичных больных раком желудка (0,01-4,10 нг/мг белка) обнаружена в 100% случаев, РАМ (0,01-11,46 нг/мг белка) - в 93% опухолей, a tPA (0,01-3,03 нг/мг белка) — в 76%.

2. При сравнительном исследовании опухолей и гистологически неизмененных тканей желудка показано, что концентрация uPA в опухолях у 76% больных в 1,1-9,3 раза выше, чем в неизмененной ткани; концентрация PAI-1 в опухолях 71% больных превышает его концентрацию в неизменной ткани в 1,1-15,2 раза, а концентрация tPA, напротив, в опухолях 76 % больных была в 1,5-131,4 раза ниже, чем в гистологически неизмененных тканях желудка.

3. Обнаружена достоверная прямая корреляция между уровнями PAI-1 в опухоли и неизмененной ткани желудка (R=0,51; р<0,05), тогда как концентрации uPA и tPA в опухоли не коррелировали с соответствующими показателями в неизмененной ткани желудка. Выявлена также достоверная положительная взаимосвязь концентраций PAI-1 и tPA в гистологически неизмененной ткани желудка (R=0,46; р<0,05), а также концентраций PAI-1 и uPA в опухоли (R=0,74; р<0,05).

4. На поздних стадиях в опухоли значительно возрастает концентрация uPA с параллельным увеличением уровня PAI-1 и наблюдается тенденция к уменьшению содержания tPA в опухоли.

5. Уровень uPA в опухоли положительно коррелирует с возрастом пациентов (R=0,21, р<0,05), а концентрация tPA находится в обратной зависимости от возраста больных раком желудка (R= -0,32, р<0,001).

6. Концентрация иРА достоверно отличается у больных с умеренно (G2)- и низкодифференцированными (G3) опухолями. Причем уровень иРА в первой группе был выше в 1,8 раза (р=0,01).

7. Высокая концентрация PAI-1 в опухолевой ткани больных раком желудка является неблагоприятным прогностическим фактором и коррелирует с низкой выживаемостью данных пациентов, при этом наиболее значимым пороговым уровнем является показатель верхнего квартиля -1,61 нг/мг белка.

8. Концентрация иРА в ткани рака желудка, превышающая медианный показатель - 0,37 нг/мг белка, достоверно ухудшает выживаемость больных раком желудка (р=0,03).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Среди злокачественных новообразований человека рак желудка занимает по уровню заболеваемости и смертности одно из ведущих мест в большинстве регионов. В последние годы многие исследователи указывают на целесообразность разработки новых методов лечения рака желудка, основанных на современных достижениях в области молекулярной биологии и биохимии опухолей, что позволит повысить эффективность терапии и уменьшить уровень смертности от этого заболевания, малочувствительного к традиционным видам химио- и лучевой терапии.

Известно, что одним из основных механизмов инвазии злокачественных опухолей является разрушение окружающей опухоль базаль-ной мембраны и внеклеточного матрикса ассоциированными с опухолью протеазами. Протеазы также участвуют в процессах метастазирования (Dano К. et al., 1985; Mignatti P., Rifkin D.B., 1993; Герштейн E.C., Кушлинский H.E., 2001). Центральную роль в этих процессах играет се-риновая протеаза - активатор плазминогена урокиназного типа. Данный фермент является ключевым звеном протеолитического каскада, приводящего к образованию плазмина и разрушающего компоненты опухолевой стромы (Liotta L.A. et al., 1990). В последнее время доказано также, что система активации плазминогена и, в частности иРА, имеет непосредственное отношение к процессам неоангиогенеза в опухолях (Hil-denbrand R. et al., 1995). Активность uPA регулируется несколькими способами: в частности, подавляется двумя белковыми ингибиторами, принадлежащими к семейству серпинов, - PAI-1 и PAI-2 (Andreasen Р.А. et al., 1990). При этом роль PAI-1 сводится преимущественно к защите опухолевых клеток от разрушающего действия uPA (Bianchi Е. et al.,1995).

Результаты ряда клинических исследований свидетельствуют о том, что изучение компонентов системы активации плазминогена в злокачественных опухолях различной локализации является весьма перспективным с клинической точки зрения (Foekens J.A. et al., 1996; Thomssen С. et al., 1997; Kim S. et al., 1998, и др.). Причем наиболее значимыми показателями являются, по-видимому, иРА и PAI-1, повышенный уровень которых свидетельствует о неблагоприятном прогнозе заболевания. Соответственно определение уровня и соотношения экспрессии данных компонентов системы активации плазминогена в опухолевой ткани может служить показателем инвазивной и метастатической активности опухоли, являясь биологически значимым фактором прогноза. В тоже время подавление активации плазминогена на различных уровнях (ингибирование активаторов, торможение их связывания с рецепторами) может стать одним из подходов к разработке новых схем противоопухолевой антиметастатической терапии.

Все вышеизложенное и послужило основанием для проведения настоящего исследования, в которое вошли 97 больных раком желудка оперированных в Воронежском областном клиническом онкологическом диспансере. Содержание uPA, tPA и PAI-1 в цитозолях опухолей и гистологически неизмененной ткани больных раком желудка было определено с помощью чувствительных, хорошо воспроизводимых наборов для иммуноферментного анализа, разработанных в Лаборатории эндокринологии Католического университета г. Наймеген (Нидерланды). Ранее эти наборы хорошо зарекомендовали себя при исследовании различных злокачественных опухолей (Герштейн Е.С., Кушлин-ский Н.Е., 2001; Е.С. Герштейн и соавт., 2001, 2002). Проведенное им-муноферментное определение концентрации данных компонентов системы активации плазминогена в цитозолях опухолей и гистологически неизмененных тканей больных раком желудка позволило выявить следующие закономерности.

В первую очередь, было убедительно продемонстрировано многократное увеличение концентрации uPA и его ингибитора PAI-1 в злокачественных опухолях желудка по сравнению с окружающей их гистологически неизмененной тканью. При этом средние концентрации uPA и PAI-1 в опухолевой ткани были достоверно выше, чем в неизмененной ткани, а концентрация tPA, напротив, была выше в неизмененной ткани желудка, чем в опухолевой. Так, уровень uPA в ткани опухоли был выше в среднем в 2,7 раза, чем в окружающей неизмененной ткани желудка. Концентрация PAI-1 также была выше в опухолевой ткани в среднем в 2,8 раза, чем в окружающей неизмененной ткани желудка. И наоборот, уровень tPA в опухолевой ткани был ниже в среднем в 5 раз по сравнению с окружающей неизмененной тканью желудка.

Это наблюдение согласуется с предполагаемой ролью данных белков в злокачественной трансформации клеток желудка и последующем распространении опухоли. Как известно, uPA является ключевым звеном протеолитической цепочки, обеспечивающей разрушение базальной мембраны и внеклеточного матрикса и последующий выход опухолевых клеток из их первоначального окружения. В то же время, основной функцией PAI-1, в отличие от ингибитора 2 типа (PAI-2), по мнению ряда авторов (Constantini V. et al., 1996), является защита самих опухолевых клеток от разрушающего действия uPA. Причем с увеличением уровня ингибитора 1 типа связывают повышенный риск возникновения метастазов и рецидивов опухоли.

Одновременное увеличение содержания этих компонентов системы активации плазминогена (uPA и PAI-1) является, по-видимому, характерной особенностью большинства злокачественных опухолей различной локализации (Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е., 2001). И в нашем исследовании лишь в единичных случаях содержание uPA и/или PAI-1 оказалось в нормальной ткани желудка выше или таким же, как в опухолевой, причем все эти случаи отличались низкой концентрацией исследуемых компонентов, как в опухолевой, так и в нормальной ткани (менее 0,2 нг/мг белка).

При сопоставлении средних значений уровня tPA в неизмененных тканях и опухолях тех же пациентов концентрация tPA в опухолевой ткани оказалась достоверно ниже, чем в нормальной ткани желудка.

Таким образом, нам удалось продемонстрировать, что при раке желудка происходят изменения в экспрессии отдельных компонентов системы активации плазминогена, наблюдавшиеся ранее при различных злокачественных новообразованиях, а именно, усиление активации плазминогена по урокиназному типу с параллельным увеличением уровня PAI-1, а также снижение экспрессии tPA.

Также было показано, что экспрессия uPA - ключевого компонента протеолитического каскада, обеспечивающего инвазию, возрастает на поздних стадиях рака желудка. При этом обнаружено, что внут-риопухолевая концентрация иРА на поздней стадии заболевания достоверно выше в 3,2 раза (р=0,02), чем на I стадии. Такая же тенденция характерна и для PAI-1. Его концентрация в опухолевой ткани при IV стадии рака желудка выше в 9,4 раза (р=0,01), чем в ткани опухоли у больных с I стадией заболевания, и в 2,3 раза выше (р=0,02), чем при II стадии рака желудка.

Отмечено также достоверное увеличение содержания иРА и PAI-1 в опухолевой ткани по сравнению с неизмененной тканью желудка у больных II, III и IV стадиями заболевания (р<0,01), в то время как для группы больных I стадии содержание иРА и PAI-1 в опухоли достоверно не отличалось от неизмененной ткани желудка. Одновременно медиана соотношения концентрации иРА в ткани опухоли желудка к его концентрации в неизмененной ткани возрастала на поздних стадиях заболевания. Подобная тенденция наблюдалась и для PAI-1. Содержание tPA в опухоли по сравнению с неизмененной тканью желудка было достоверно ниже только у больных III стадией заболевания (р=0,02), в других группах не выявлено достоверного отличия этого показателя в ткани опухоли желудка от неизмененной ткани.

Таким образом, прослеживается тенденция к взаимосвязи содержания компонентов системы активации плазминогена в опухолевой ткани желудка со стадией заболевания. На поздних стадиях в опухоли значительно возрастает активация плазминогена по урокиназному типу с параллельным увеличением уровня PAI-1, что, по-видимому, связано с прогрессированием заболевания. Значимая взаимосвязь концентрации активатора плазминогена тканевого типа в опухоли и стадии заболевания пока не установлена, однако наблюдается тенденция к уменьшению содержания tPA в опухоли на поздних стадиях.

Результаты нашего исследования показывают, что с увеличением возраста больных раком желудка происходит повышение уровня экспрессии иРА. Так, содержание иРА в опухоли слабо положительно коррелировало с возрастом пациентов (R=0,21, р<0,05). С другой стороны, обнаружена слабая отрицательная корреляция концентрации tPA в опухоли с возрастом больных раком желудка (R=-0,32, р<0,001).

Таким образом, в старших возрастных группах больных раком желудка прослеживается тенденция к усилению в опухолевой ткани активации плазминогена по урокиназному типу и параллельному уменьшению концентрации в опухоли активатора плазминогена тканевого типа. По-видимому, полученная взаимосвязь указывает на усиление протеазной активности опухоли, способствующей ее инвазии у больных старших возрастных групп.

В тоже время нами не было обнаружено достоверной взаимосвязи уровней tPA и PAI-1 в опухолевой ткани и их соотношения со степенью дифференцировки опухоли. Концентрации иРА значительно и достоверно различались только между двумя наиболее репрезентативными группами больных с умеренно- и низкодифференцированны-ми опухолями (G2 и G3). При этом уровень иРА в ткани умеренно-дифференцированной опухоли был выше более чем в 2 раза. Полученное соотношение уровней активатора плазминогена урокиназного типа свидетельствует о том, что активация этой протеазы, по-видимому, не связана напрямую с увеличением степени злокачественности рака желудка, а следовательно указывает на относительную независимость изменений в системе активации плазминогена от степени дифферен-цировки рака желудка.

При изучении отдаленных результатов лечения больных раком желудка, включенных в исследование, были получены интересные данные об общей продолжительности жизни пациентов в зависимости от концетрации компонентов системы активации плазминогена в опухолевой ткани. Так, общая выживаемость больных раком желудка с более низким (менее 0,37 нг/мг белка) содержанием в опухолевой ткани uPA была выше, чем у пациентов с содержанием uPA в опухолевой ткани большим 0,37 нг/мг белка (медиана выживаемости - 16,6 и 12,8 месяцев соотвественно, р=0,03). Такая же тенденция отмечалась и для PAI-1. При этом с увеличением концентрации PAI-1 в опухолевой ткани показатели общей продолжительности жизни больных раком желудка ухудшались. Медиана выживаемости составляла 16,6 и 9,7 месяцев соответственно при меньшем и большем 1,61 нг/мг белка содержанием PAI-1 в опухолевой ткани (р=0,004).

Неоднозначные результаты получены для активатора плазминогена тканевого типа. Так, общая продолжительность жизни больных раком желудка была ниже при большей концентрации tPA в опухолевой ткани. Медиана выживаемости при этом равнялась 12,7 и 15 месяцам, соответственно при уровне tPA более и менее 0,55 нг/мг белка. В тоже время двухлетняя выживаемость была выше у пациентов с уровнем tPA более 0,55 нг/мг белка и составила 22,8% против 17,7% у больных с меньшей концентрацией фермента в опухоли. Однако полученные результаты статистически недостоверны.

Сравнение соотношений концетраций активаторов плазминогена урокиназного и тканевого типов (uPA/tPA) в опухолевой ткани у больных раком желудка показало, что в группе пациентов с соотношением uPA/tPA>l общая продолжительность жизни была ниже, чем у пациентов с соотношением иРАЛРА<1 (медиана выживаемости -11,5 и 17 месяцев соответственно). Однако полученные различия общей продолжительности жизни не достигали уровня статистической значимости.

Следует отметить, что определенное влияние на ухудшение выживаемости при высоких показателях иРА и PAI-1, по-видимому, оказывает тот факт, что в эти подгруппы попадают большинство больных с IV стадией заболевания, а больные с I стадией в основном находятся в подгруппах с низкими уровнями данных маркеров. Однако, учитывая относительно низкую долю больных с I и IV стадиями в общей группе, влияние этого фактора не следует преувеличивать. Это предположение подтверждается и при проведении многофакторного анализа с помощью регрессионной модели Кокса, который свидетельствует о том, что уровень PAI-1 выше верхнего квартиля является более значимым фактором прогноза, чем наличие отдаленных метастазов, степень поражения лимфатических узлов и стадия заболевания в целом (р =0,048).

Таким образом, исследование общей продолжительности жизни свидетельствует о том, что высокий уровень (более 1,61 нг/мг белка) ингибитора PAI-1 в опухолевой ткани больных раком желудка является неблагоприятным прогностическим фактором и коррелирует с низкой выживаемостью данных пациентов (р=0,004). В тоже время низкое содержание PAI-1 в опухоли (меньшее или равное 1,61 нг/мг белка) у больных раком желудка может служить благоприятным прогностическим фактором, так как коррелирует с лучшей выживаемостью у данных пациентов. То же самое относится и к активатору плазминогена урокиназного типа. Высокие показатели его концетрации в опухолевой ткани (более 0,37 нг/мг белка) коррелируют с худшей продолжительностью жизни больных раком желудка, и наоборот, низкое содержание иРА в опухоли (меньшее или равное 0,37 нг/мг белка) свидетельствует о лучшей выживаемости данных пациентов (р=0,03). Следовательно, высокий уровень PAI-1 и иРА в опухолевой ткани больных раком желудка может расцениваться как неблагоприятный прогностический фактор.

Выявленные закономерности могут иметь как теоретическое, так и практическое значение. С одной стороны, они подтверждают тот факт, что усиление активации плазминогена по урокиназному типу, сопровождающееся усилением защиты опухолевых клеток от саморазрушения (за счет увеличения уровня PAI-1), является достаточно универсальным признаком малигнизации. С другой стороны, повышенная экспрессия иРА в опухоли желудка по сравнению с окружающей неизмененной тканью делает этот фермент перспективной избирательной мишенью для антиметастатической противоопухолевой терапии рака желудка - заболевания с достаточно низкой чувствительностью к стандартным видам химиотерапии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Казьмин, Александр Иванович, 2004 год

1. Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Активаторы плазминогена урокиназного и тканевого типов и их ингибитор PAI-1 в опухолях человека // Бюлл. эксп. биол. мед. 2001. - Т. 131, № 1. - С. 81 -87.

2. Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Клинические перспективы исследования системы активации плазминогена при раке молочной железы // Вестник Российской Академии Медицинских Наук. -1999. №8. - С. 58-61.

3. Давыдов М.И., Аксель Е.М. Злокачественные новообразования в России и странах СНГ в 2002 г. М.: РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН.-2002.-281 с.

4. Юсифов А.И., Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е., Соловьев Ю.Н., Алиев М.Д., Огнерубов Н.А., Трапезников Н.Н. Ферменты регуляции активности плазминогена в опухолях костей // Новое в онкологии: сб. науч. тр., вып. 5. Воронеж, 2001. - С. 682-695.

5. Allan Е.Н., Martin T.J. Prostaglandin E2 regulates production of plasminogen activator isoenzymes, urokinase receptor, and plasminogen activator inhibitor-1 in primary cultures of rat calvarial osteblasts. // J.Cell Physiol. 1995. Vol.165. - P.521-529.

6. Allgayer H., Heiss M.M., Schildberg F.W. Prognostic factors in gastric cancer. //Br. J. Surg. 1997. - Vol.84, №12. - P. 1651-1664.

7. Andreasen P.A., Georg В., Lund L.R., Riccio A., Stacey S.N. Plasminogen activator inhibitors: hormonally regulated serpins. // Mol. Cell. Endocrinol. 1990. - Vol.68. - P.l-19.

8. Antonyak H., Babych N., Solohub L., Snitynski V., Binder B. Regulation of expression of the components of plasminogen activation system in the leukemic cells. // Exp. Oncology. 2001. - Vol.23. - P.253-259.

9. Arroyo de Prada N., Schroeck F., Sinner E., Mtihlenweg В., Twell-meyer J., Sperl S., Wilhelm O., Schmitt M., Magdolen V. Interaction of plasminogen activator inhibitor type-1 (PAI-1) with vitronectin. // Eur. J. Biochem. 2002. - Vol. 269. - P. 184-192.

10. Bindal A.K., Hamomoud M., Shi W.M., Wu S.Z., Sawaya R., Rao I.S. Prognostic significance of proteolytic enzymes in human brain tumors // J. Neurooncol. 1994. - Vol.22, №2. - P. 101 -110.

11. Blasiak J., Smolarz В., Kubryn I., Kulig A., Dziki A., Ulanska J., Pander B. Plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) level and 4G/5G genetic polymorphism in patients with colorectal cancer. // Exp. Oncology. 2000. - Vol.22 - P.48-51.

12. Castellote J.C., Grau E., Linde M.A., Pujol-Moix N., Rutllant M.L. Detection of both type 1 and type 2 plasminogen activator inhibitors in human monocytes. // Thromb.Haemost. 1990. - Vol.63, №1 - P.67-71.

13. Dano K., Andreasen P.A., Grondahi-Hansen J., Kristensen P.I., Nielsen L.S., Skriver L. Plasminogen activators, tissue degradation, and cancer. //Adv. Cancer Res. 1985. - Vol.44. - P. 139-266.

14. Dear A.E., Medcalf R.L. The Urokinase-type-Plasminogen-activator receptor (CD87) is a pleiotropic molecule. // Eur.J.Biochem. 1998. -Vol.252.-P.185-193.

15. Duffy M.J. The role of proteolytic enzymes in cancer invasion and metastasis.//Clin. Exp. Metastasis. 1992. - Vol.10. - P.145-155.

16. Duffy M.J., Reilly D., O'Sullivan C., O'Higgins N., Fennelly J.J., An-dreasen P. Urokinase-plasminogen activator, a new and independent prognostic marker in breast cancer. // Cancer Res. 1990. - Vol.50. -P.6827-6829.

17. Duffy M.J. Proteases as prognostic markers in cancer. // Clin. Cancer Res. 1996.-Vol.4.-P.613-618.

18. Duffy M.J., Maguire T.M., McDermott E.W., O'Higgins N. Urokinase plasminogen activator: a prognostic marker in multiple types of cancer. //J. Surg. Oncol. 1999.-Vol.2.-P. 130-135.

19. Eaton D.L., Scott R.W., Baker J.B. Purificatoin of human fibroblast urokinase proenzime and analysis of its regulation by proteases and protease nexin. // J.Biol.Chem. 1984. - Vol.259. - P.6241-6247.

20. Ellis V., Руке С., Eriksen J. et al. The urokinase receptor: involvement in cell surface proteolysis and cancer invasion // Ann. N.Y.Acad.Sci. -1992.-Vol.667.-P.13-31.

21. Ellis V., Wun T.C., Behrendt N. et al. Inhibition of receptor-bound urokinase by plasminogen activator inhibitors // J. Biol. Chem. 1990. - Vol.265. - P.9904-9908.

22. Erickson L.A., Hekman C.M., Lokutoff D.J. The primary plasminogen activator inhibitors in endothelial cells, platelets, serum and plasma areimunologically related // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. - Vol.82.- P.8710-8714.

23. Etoh Т., Inoue H., Tanaka S., Barnard G.F., Kitano S., Mori M. Angio-poietin-2 is related to tumor angiogenesis in gastric carcinoma: possible in vivo regulation via induction of proteases. // Cancer Res. 2001.- Vol.61, №5. P.2145-2153.

24. Foekens J.A., Berns E.M.J.J., Look M.P., Klijn J.G.M. Prognostic factors in node-negative breast cancer. // J.R. Pasqualini: Molecular and Clinical Endocrinology. Hormone Dependent Cancer. 1996. - Vol.1.- P.217-253.

25. Foekens J.A., Look M.P., Meijervan Gelder M.E., van Putten W.L.J., Klijn J.G.M. The predictive value of the urokinase system of plasminogen activation in recurrent breast cancer // Eur. J. Cancer. 1996. -Vol.32.-P.55.

26. Foekens J.A., Schmitt M., van Putten W.L.J., Peters H.A., Portengen H., Kramer M.D., Janicke F., Klijn J.G.M. Plasminogen activator inhibitor and breast cancer metastasis. // J. Clin. Oncol. 1994. - Vol.12.- P.1648-1658.

27. Graeff H., Harbeck N., Pache L. et al. Prognostic impact and clinical relevance of tumor-associated proteases in breast cancer // Fibrinolysis.- 1992. №6. - P.45-53.

28. Graham C.H., Forsdike J., Fitzgerald C.J., Macdonald-Goodfellow S. Hypoxia-mediated stimulation of carcinoma cell invasiveness via upregulation of urokinase receptor expression. // Int.J.Cancer. 1999. -Vol.80, №4.-P.617-623.

29. Harbeck N., Dettmar P., Thomssen C., et al. Risk-group discrimination in node-negative breast cancer using invasion and proliferation markers: 6-year median follow-up. // Br. J. Cancer. 1999. - Vol.80. -P.419-426.

30. Harbeck N., Kruger A., Sinz S., Kates R.E., Thomssen C., Schmitt M., Janicke F. Clinical relevance of the plasminogen activator inhibitor type 1 a multifaceted proteolytic factor. // Onkologie. - 2001. -Vol.24, №3.-P.238-244.

31. Herszenyi L., Plebani M., Cardin R., Carraro P., De Paoli M., Roveroni G., Naccarato R., Farinati F. The role of urokinase-type plasminogen activator and its inhibitor PAI-1 in gastric cancer. // Acta Physiol. Hung. 1995. - Vol.83, №3. - P.213-221.

32. Herszenyi L., Plebani M., Carraro P., De Paoli M., Roveroni G., Cardin R., Foschia F., Tulassay Z., Naccarato R., Farinati F. Proteases in gastrointestinal neoplastic diseases. // Clin. Chim. Acta. 2000. - Vol.291, №2. - P.171-187.

33. Но C.H., Chao Y., Lee S.D., Chau W.K., Wu C.W., Liu S.M. Diagnostic and prognostic values of plasma levels of fibrinolytic markers in gastric cancer. // Thromb Res. 1998. - Vol.91, №1. - P.23-27.

34. Но С.Н., Yuan С.С., Liu S.M. Diagnostic and prognostic values of plasma levels of fibrinolytic markers in ovarian cancer // Gynecol. Oncol. 1999. - Vol.75, №3. - P.397-400.

35. Hofmann, R., Lehmer, A., Hartung, R., Grothe, F. Clinical relevance of urokinase plasminogen activator u-PA, its receptor and its inhibitor PAI-1 in renal cell cancer. // British Journal of Cancer. 1996. - Vol. 78.-P. 487-492.

36. Hoyer-Hansen G., Ploug M., Behrendt N., Ronne E., Dano K. Cell-surface acceleration of urokinase-catalyzed receptor cleavage. // Eur.J.Biochem. 1997. - Vol.243. - P.21-26.

37. Ichinose A., Fujikawa K., Suyama T. The activation of pro-urokinase by plasma kallikrein and ist inactivation by thrombin // Ibid. 1986. -Vol.261.-P.3486-3489.

38. Janicke F., Schmitt M., Pache L. Urokinase (uPA) and its inhibitor PAI-1 are strong and independent prognostic factors in node-negative breast cancer. // Breast Cancer Res. Treat. 1993. - Vol.24. - P.195-208.

39. Janicke F., Graeff H., Schmitt M. Clinical relevance of the urokinase-type and tissue-type plasminogen activators and of their type 1 inhibitor in breast cancer. // Semin. Thromb. Hemost. 1991. - Vol.17. -P.303-312.

40. KimY., Kovalski K., Ossowski L. Requirement for specific proteases in cancer cell intravasation as revealed by novel semiquantitative PCR-based assay. // Cell. 1998. - Vol.94. - P.353-362.

41. Koretz K., Moller P., Schwartz-Albiez R. Plasminogen activators and plasminogen activator inhibitors in human colorectal carcinoma tissues are not expressed by the tumour cells. // Eur.J.Cancer. 1993. -Vol.29, №8. - P.l 184-1189.

42. Lacueva Gomez F.I. The role of plasminogen activators and their specific inhibitor in lung cancer biology (squamous and adenocarcinoma) // Diss. Abstr. Int. 1993. - Vol.54, №3. - P.802.

43. Lijnen H.R., de Cock F., Collen D. Characterization of the binding of urokinase-type plasminogen activator (uPA) to plasminogen, to plas-minogen-activator inhibitor-1 and to the uPA receptor // Eur. J. Bio-chem. 1994. - Vol.224. - P.567-574.

44. Liotta L.A., Tryggvason K., Garbisa S., Hart I., Foltz C.M., Shafie S. Metastatic potential correlates with enzymatic degradation of basement membrane collagen. // Nature. 1990. - Vol.284. - P.67-68.

45. Liotta L.A. Tumor invasion and metastases role of extracellular matrix. // Cancer Res. - 1986. - Vol.46. - P.l.

46. Look M.P., Foekens J. A. Clinical relevance of the urokinase plasminogen activator system in breast cancer // APMIS. 1999. - Vol.107. -P.150-159.

47. Magdolen U., Krol J., Sato S., Mueller M.M., Sperl S., Kriiger A., Schmitt M., Magdolen V. Natural inhibitors of tumor-associated proteases. // Radiol Oncol. 2002. - Vol.36, №2. - P. 131-143.

48. Mignatti P., Rifkin D. B. Biology and biochemistry of proteinases in tumor invasion // Physiol. Rev. 1993. - Vol.73. - P. 161-195.

49. Muehlenweg В., Sperl S., Magdolen V., Schmitt M., Harbeck N. Interference with the urokinase plasminogen activator system: a promising therapy concept for solid tumours. // Expert Opin. Biol. Ther. 2001. -Vol. l.-P. 683-691.

50. Okusa Y., Ichikura Т., Mochizuki H., Shinomiya N. Urokinase type plasminogen activator and its receptor regulate the invasive potential of gastric cancer cell lines. // Int.J.Oncol. 2000. - Vol.17, №5. -P.1001-1005.

51. Plebani M., Herszenyi L., Cardin R., Roveroni G., Carraro P., Paoli M.D., Rugge M., Grigioni W.F., Nitti D., Naccarato R. et al. Cysteine and serine proteases in gastric cancer. // Cancer. 1995. - Vol.76, №3. - P.367-375.

52. Pollanen J., Sakseba O., Salonen E.M. et al. Distinct localisation of urokinase-type plasminogen activator and its type 1 inhibitor under cultuked human fibroblasts and sarcoma cells // J.Cell.Biol. 1987. -Vol.104.-P.1085-1097.

53. Rajput В., Degen S.F., Reich I., E.K. Waller, J. Axelrod, R.L. Eppy, Shows T.B. Chromosomal localisation of human tissue plasminogen activator and urokinase genes. // Science. 1985. - Vol.230. - P. 672674.

54. Reilly D., Christensen L., Duch M. et al. Type-1 plasminogen activator inhibitor in human breast carcinomas // Int. J. Cancer. 1992. -Vol.50.-P. 208-214.

55. Reuning, U., Magdolen, V. , Wilhelm, O., Fischer, K., Lutz, V., Graeff, H. and Schmitt, M. Multifunctional potential of the plasminogen activation system in tumor invasion and metastasis. // Int. J. Oncol. 1998. -Vol. 13. - P.893-906.

56. Rha S.Y., Noh S.H., Kim T.S., Yoo N.C., Roh J.K., Min J.S., Kim B.S. Modulation of biological phenotypes for tumor growth and metastasis by target-specific biological inhibitors in gastric cancer. // Int. J. Mol. Med. 1999. - Vol.4, №2. - P.203-212.

57. Riccio A., Grimaldi G., Verde P., Sebastio G., Boast S., Blasi F. The human urokinase gene and its promoter. // Nucleic Acids Res. 1986. - Vol.13. -P.2759-2771.

58. Romer J., Руке С., Lund L.R., Eriksen J., Kristensen P., Ronne E., Hoyer-Hansen G., Dano K., Brunner N. Expression of uPA and its receptor by both neoplastic and stromal cells during xenograft invasion. // Int.J.Cancer. 1994. - Vol.57, №4. - P.553-560.

59. Schlechte W., Murano G., Boyd D. Examination the role of the urokinase receptor in human colon cancer mediated laminin degradation. // Cancer Res. 1989. - Vol.49. - P.6064-6069.

60. Schmitt M., Thomssen C., Janicke F. et al. Clinical significance of the serine protease uPA (urokinase) and its inhibitor PAI-1 as well as the cysteine proteases cathepsin В and L in breast cancer. // In Calvo F,1.l

61. Crepin M, Magdelenat H, eds. Breast cancer. Advances in biology and therapeutics. Montrouge, John Libbey Eurotext. 1996. - P. 191-200.

62. Sier C.F., Verspaget H.W., Griffioen G., Ganesh S., Vloedgraven H.J., Lamers C.B. Plasminogen activators in normal tissue and carcinomas of the human oesophagus and stomach. // Gut. 1993. - Vol.34, №1. -P.80-85.

63. Sperl S., Mueller M.M., Wilhelm O.G., Schmitt M., Magdolen V., Moroder L. The uPA/uPA Receptor System as a Target for Tumor Therapy. // Drug News Perspect. 2001. - Vol. 14, № 7. - P. 401-411.

64. Stoppelli M.P., Tacchetti C., Cubellis M.V., Corti A., Hearing V.J., Cassani G., Apella E., Blasi F. Autocrine saturation of pro-urokinase receptors on human A431 cells. // Cell. 1986. - Vol.45. - P.675-684.

65. Tanaka N., Fukao H., Ueshima S., Okada K., Yasutomi M., Matsuo O. Plasminogen activator inhibitor 1 in human carcinoma tissues. // Int.J.Cancer. 1991. - Vol.48, №4. - P.481 -484.

66. Takai S., Yamamura M., Tanaka K., Kawanishi H., Tsuji M., Nakane Y., Hioki K., Yamamoto M. Plasminogen activators in human gastric cancers: correlation with DNA ploidy and immunohistochemical staining. //Int.J.Cancer. 1991. - Vol.48, №1. -P.20-27.

67. Wang J., Mazar A., Quan N., Schneider A., Henkin J. Plasminogen activation by pro-urokinase in complex with its receptor dependence on a tripeptide Spectrozyme plasmin. // Eur.J.Biochem. - 1997. - Vol.247. - P.256-261.

68. Werner M., Becker K.F., Keller G., Hofler H. Gastric adenocarcinoma: pathomorphology and molecular pathology. // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 2001. - Vol.127, №4. - P.207-216.

69. Yasuda Т., Sakata Y., Kitamura K., Morita M., Ishida T. Localization of plasminogen activators and their inhibitor in squamous cell carcinomas of the head and neck. // Head Neck. 1997. - Vol.19, №7. -P.611-616.