Клеточный состав пуповинной крови доношенных новорожденных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.29, кандидат медицинских наук Плясунова, Светлана Александровна

• Плясунова, Светлана Александровна
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Плясунова, Светлана Александровна

RDW (red cells distribution width) показатель гетерогенности эритроцитов по объему, характеризует степень анизоцитоза

PLT (platelet) количество тромбоцитов

MPV ( mean platelet volume) средний объем тромбоцитов (фл/фемтолитры) PDW (platelet distribution width) ширина распределения тромбоцитов по объему, характеризует степень анизоцитоза (%)

РСТ (platelet crit) тромбокрит (%), отражает долю объема цельной крови, занимаемой тромбоцитами

NRBC (nuclear red blood cell) нормобласты (ЛООлейкоцитов) ФПН фетоплацентарная недостаточность

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 3. КЛЕТОЧНЫЙ СОСТАВ ПУПОВИННОЙ КРОВИ ДОНОШЕННЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ

ГЛАВА 4. КЛЕТОЧНЫЙ СОСТАВ ПУПОВИННОЙ КРОВИ ДОНОШЕННЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ СОСТОЯНИЯХ ОСТРОЙ И ХРОНИЧЕСКОЙ ГИПОКСИИ

ГЛАВА 5. КОЛИЧЕСТВО НОРМОБЛАСТОВ В ПУПОВИННОИ КРОВИ ДОНОШЕННЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ

ГЛАВА 6. СРАВНЕНИЕ РУЧНОГО И АВТОМАТИЧЕСКОГО ПОДСЧЕТА КЛЕТОК ПУПОВИННОЙ КРОВИ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клеточный состав пуповинной крови доношенных новорожденных»

Наличие экстрагенитальных и гинекологических заболеваний у женщин, их обострение во время беременности и родов оказывают существенное влияние на состояние и развитие, как плода, так и новорожденного ребенка. Воздействие вредных факторов в ранние сроки беременности часто сопровождается нарушением закладки и развития органов и систем плода [Гармашева H.JL и др., 1978; Кошелева Н.Г.,1979]. Патологические состояния, возникшие в более поздние сроки беременности, проявляются замедлением развития органов и систем плода, гипотрофией, задержкой внутриутробного развития [Дементьева Г.М.,1984; Демин В.Ф., 1988]. Как правило, в основе всех патологических состояний плода при осложненном течении беременности лежат изменения в плаценте и фетоплацентарная недостаточность, приводящие к нарушению газообмена плода и его гипоксии. Таким образом, патологическое течение беременности приводит к дисбалансу и дисфункции практически всех систем организма плода и новорожденного. Кроветворная ткань представляющая собой динамическую, постоянно обновляющуюся систему, обладающую высокой функциональной активностью, является наиболее чувствительной к воздействию неблагоприятных факторов. Изменения, возникающие в крови в результате воздействия неблагоприятных факторов, могут быть визуализированы либо в форме изменения количественного состава, либо в форме цитологических изменений морфологии клеток, и/или сдвигами их распределения.

Таким образом, клеточный состав пуповинной крови, полностью отражающий состояние гемопоэза плода к концу гестационного периода, в значительной степени зависит как от особенностей течения беременности и родов, так и от перенесенных заболеваний.

Несмотря на многочисленные исследования клеточного состава пуповинной крови (Monroe B.L., 1979; Stokman Р.А., 1992; Alacron Р.А., 1992; Торубарова Н.А. 1993; Cairo M.S., 2005; Aravita S., 2005) многое остается неясным. До сих пор отсутствуют референтные значения клеточного состава пуповинной крови доношенных новорожденных, что обусловлено широким диапазоном факторов, определяющих особенности гемопоэза плода и клеточный состав пуповинной крови и значительно затрудняющих формирование групп с целью их получения.

Наличие гемопоэтических стволовых клеток в пуповинной крови человека в количестве, сравнимом с содержанием в костном мозге, стало основанием использования пуповинной крови в качестве альтернативного источника гемопоэтических стволовых клеток для трансплантации при многих гематологических, онкологических, иммунологических и наследственных заболеваниях (Armitage J., 1994; Bensinger W. et al., 1995; Schmitz N. Et al., 1995; Румянцев А.Г., 1996, Thomas E.D., 2000; Rubinstein P., 1999; Gluckman E., 2004). Разработка методов трансплантации гемопоэтических клеток-предшественников привела к повышению в них потребности. Широкомасштабный сбор пуповинной крови позволяет быстро формировать банк данных для подбора неродственного донора. Ряд ведущих зарубежных банков пуповинной крови объединен в систему NetCord, одним из результатов деятельности которой стала разработка и публикация нормативных требований ко всем этапам технологического процесса получения и обработки образцов пуповинной крови, предшествующих криоконсервации. Появившиеся в последнее время сообщения о различии клеточного состава пуповинной крови в зависимости от вида родоразрешения, от пола и массы тела новорожденного, а также от сроков, прошедших после родов и сбора пуповинной крови до начала процесса обработки (Cairo M.S., 2005; Araviita S.,2005) демонстрируют, что остаются неясными множество факторов, влияющих на клеточный состав пуповинной крови и, как следствие, на эффективность заготовки трансплантационного материала. Скрининг состава и характеристик клеток пуповинной крови, проводимый при помощи автоматических счетчиков клеток крови при выполнении технологических элементов банка пуповинной крови не вполне удовлетворителен, поскольку пуповинная кровь имеет некоторые физиологические отличия от периферической крови взрослого человека (Solves Р., 2005; Bradley М.В., 2005). В связи с этим целью настоящего исследования является создание референтных значений клеточного состава пуповинной крови доношенных новорожденных с помощью аппаратных и светооптических методов исследования и изучение влияния на эти показатели течения и сроков беременности, родов, состояний перинатального риска.

Для достижения этой цели поставлены следующие задачи:

1. Охарактеризовать клеточный состав пуповинной крови доношенных новорожденных с помощью автоматического гематологического анализатора АВХ Pentra 60 С+.

2. Провести анализ клеточного состава пуповинной крови в зависимости от течения и сроков беременности и родов, состояния, физического развития и пола новорожденного.

3. Изучить факторы, влияющие на количество нормобластов в пуповинной крови доношенных новорожденных.

4. Оценить степень различий в подсчете субпопуляций лейкоцитов пуповинной крови при помощи автоматического гематологического анализатора АВХ Pentra 60 С+ и светооптической микроскопии в окраске по Паппенгейму-Крюкову.

5. Оценить влияние количества нормобластов на - разницу показателей субпопуляций лейкоцитов пуповинной крови, определяемых при подсчете с помощью автоматического гематологического анализатора АВХ Pentra 60 С+ и светооптической микроскопии в окраске по Паппенгейму-Крюкову.

В работе получены данные, содержащие научную новизну. Подробно охарактеризован клеточный состав пуповинной крови доношенных новорожденных. Показано изменение клеточного состава пуповинной крови в зависимости от течения и сроков беременности и родов, состояния, физического развития и пола новорожденного.

Установлено, что наличие инфекционных заболеваний у матери во время беременности приводит к снижению концентрации гемоглобина и гематокрита, а наличие

Ч V» -. , патологии почек у матери приводит к повышению концентрации гемоглобина в пуповинной крови. При ожирении у матери во время беременности выявлено снижение количества тромбоцитов.

Показано увеличение количества лейкоцитов в пуповинной крови при увеличении длительности безводного периода и периода изгнания плода, внутриутробной гипоксии, обвитии пуповины новорожденных, увеличении массы тела ребенка при рождении.

Впервые показана зависимость клеточного состава пуповинной крови от пола ребенка. Установлено, что у девочек уровень лейкоцитов выше, чем у мальчиков. При этом у девочек в процентном соотношении больше нейтрофилов, а лимфоцитов, моноцитов и эозинофилов меньше. В абсолютных количествах у девочек больше нейтрофилов, меньше эозинофилов. Количество эритроцитов, содержание гемоглобина и уровень гематокрита у девочек меньше, чем у мальчиков, при этом различий в эритроцитарных индексах (MCV, МСН, МСНС, RDW) в зависимости от пола не обнаружено. Количество тромбоцитов у девочек больше, чем у мальчиков, а средний размер тромбоцитов различий не имеет.

Научно-практическое значение имеет тот факт, что количество нормобластов увеличивается при внутриутробной гипоксии, но не увеличивается при острой гипоксии в родах.

Обвитие пуповины при рождении приводит к повышению абсолютного количества лейкоцитов за счет увеличения количества нейтрофилов, лимфоцитов и моноцитов. При этом повышается количество эритроцитов, уровень гематокрита.

Показано, что с увеличением веса ребенка при рождении увеличивается количество лейкоцитов. Также увеличивается абсолютное количество нейтрофилов и эозинофилов, а количество моноцитов уменьшается.

При определении количества нейтрофилов при помощи микроскопии был получен достоверно больший уровень, чем при определении при помощи автоматического счетчика. Уровень лимфоцитов, моноцитов, эозинофилов и базофилов, наоборот оказался выше при определении с помощью автоматического счетчика. Полученные закономерности не зависели от сроков гестации, количества лейкоцитов, степени разведения образца пуповинной крови антикоагулянтом, времени, прошедшего после родов до начала сбора и обработки пуповинной крови.

Практическое значение работы заключается в установлении референтных значений при проведении анализа пуповинной крови доношенных новорожденных, как при использовании автоматического анализатора клеток крови, так и при подсчете клеток крови при светооптической микроскопии. Полученные данные имеют важное практическое значение при проведении технологических расчетов в повседневной работе банков стволовых клеток.

Результаты исследования внедрены в работу ГУЗ «Банк стволовых клеток департамента здравоохранения г. Москвы».

Результаты работы были доложены на X Съезде педиатров России (февраль 2006) и Российском Съезде гематологов и трансфузиологов (апрель 2006).

Диссертация апробирована на совместной научно-практической конференции клинических и лабораторных отделов ФГУ НИИ детской гематологии Росздрава и ГУЗ «Банк стволовых клеток департамента здравоохранения г. Москвы».

Работа выполнена в ФГУ Федеральном научно-клиническом центре детской гематоогии, онкологии и иммунологии Росздрава (директор ФГУ ФНКЦ ДГОИ - член-корреспондент РАМН, доктор медицинских наук, профессор А.Г.Румянцев) и лаборатории контроля количества и жизнеспособности стволовых клеток (зав. - к.м.н. С.А.Румянцев) ГУЗ Банк стволовых клеток департамента здравоохранения г. Москвы (директор — доктор медицинских наук, профессор О.А.Майорова).

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Плясунова, Светлана Александровна

выводы

1. Установлены референтные значения клеточного состава пуповинной крови доношенных новорожденных. При использовании автоматического гематологического анализатора АВХ Pentra 60 С+ количество лейкоцитов составило 17,24±0,16 х109/л, абсолютное количество нейтрофилов - 8,41+0,10 х109/л, лимфоцитов - 5,54±0,06 х109/л, моноцитов - 2,42±0,03 х109/л, эозинофилов - 0,64±0,16 х109/л, базофилов - 0,23±0,01 х109/л. Количество эритроцитов составило 4,40±0,01 х1012/л, концентрация гемоглобина -157,4±0,46 г/л, количество тромбоцитов - 307,54±1,97 х109/л.

2. Проведена оценка степени различий в подсчете субпопуляций лейкоцитов пуповинной крови доношенных новорожденных с помощью аппаратных и светооптических методов исследования. При определении количества нейтрофилов при помощи микроскопии был получен достоверно больший уровень (57,48±0,47 %), чем при определении при помощи автоматического счетчика (47,48±0,44 %; /><0,0001). Уровень лимфоцитов (32,76±0,36 %; 28,66±0,43 %; /?<0,0001), моноцитов (14,64±0,24 %; 9,95±0,19 %; р<0,0001), эозинофилов (3,86±0,1 %; 3,28±0,13 %; /КО,0001) и базофилов (1,25±0,04 %; 0,61 ±0,03 %; р<0,0001), наоборот оказался выше при определении с помощью автоматического счетчика. Полученные закономерности не зависели от сроков гестации, количества лейкоцитов, степени разведения образца пуповинной крови антикоагулянтом, времени, прошедшего после родов до начала сбора и обработки пуповинной крови.

3. Установлено, что на состав пуповинной крови не оказывают влияние: анемия матери во время беременности, видимо, вследствие адекватной терапии препаратами железа; угроза прерывания беременности; количество околоплодных вод; внутриутробная задержка развития плода и энцефалопатия новорожденного.

4. Повышение гемоглобина выявлено при: наличии патологии почек у матери (р=0,0112); обвитии пуповины - 162,2 ± 1,7 г/л против 156,1 ± 0,9 г/л (р=0,001). При обвитии пуповины повышается количество эритроцитов 4,55 ± 0,05 х10 /л против 4,35 ± 0,02 х1012/л (р<0,0001). Повышение гематокрита отмечается при обвитии пуповины -32,98 ± 0,46 % против 31,86 ± 0,24 % (р=0,027); увеличении длительности периода изгнания (р=0,009); с увеличением массы тела новорожденного (от 28,48±2,47 % при массе тела <2,5 кг до 33,86±0,39 % при массе тела >4 кг; /?<0,0001). Показано, что с увеличением срока гестации снижается МСН (р-0,028) и MPV (р=0,032). С увеличением массы тела ребенка отмечено уменьшение МСНС (р<0,0001) и увеличение MPV (р=0,025).

5. Наличие инфекционных заболеваний у матери во время беременности приводит к снижению концентрации гемоглобина (р=0.02) и гематокрита (р<0,0001).

6. Ожирение у матери во время беременности приводит к снижению количества тромбоцитов (р=0,012) в пуповинной крови. Также выявлена зависимость количества тромбоцитов от пола ребенка. Установлено, что количество тромбоцитов у девочек (314,87±2,98 х109/ л) больше, чем у мальчиков (300,72±2,62 х109/ л; р<0,0001). Средний размер тромбоцитов не имеет различий.

7. Повышение количества лейкоцитов отмечается при: увеличении длительности безводного периода от 16,75±0,34 х109/л при длительности безводного периода менее 6 часов, до 17,23±0,51 х109/л - от 6 до 10 часов и 18,45±0,77 х109/л при длительности безводного периода более 10 часов (р<0,089); увеличении длительности периода изгнания плода: 15,23±0,72 х109/л - менее 15 мин.; 16,91±0,31 х 109/л - от 15 до 30 мин.; 18,29±0,6 х109/л - более 30 мин. (р=0,014); внутриутробной гипоксии плода - 18,84 ± 0,92 х109/л против 16,72 ± 0,26 х109/л (р=0,008); обвитии пуповины 18,69 ± 0,61 х109/л против 16,45 ± 0,27 х109/л (р<0,0001); с увеличением массы тела ребенка при рождении - от 15,52±0,59 х109/ л в группе с массой тела 2,5-3 кг до 17,51±0,44 х109/ л в группе с массой тела >4 кг (Р=0,01).

8. Выявлена зависимость показателей пуповинной крови от пола новорожденного. Показано, что у девочек уровень лейкоцитов выше 17,74±0,24 х109/ л, чем у мальчиков 16,8±0,23 х109/ л (р=0,005). При этом, у девочек в процентном соотношении больше нейтрофилов, а лимфоцитов, моноцитов и эозинофилов меньше. В абсолютных количествах у девочек больше нейтрофилов, а меньше эозинофилов.

9. Уровень эритроцитов (4,33±0,02 х1012/ л) и гемоглобина (155,1±0,70 г/л) у девочек меньше, чем у мальчиков (4,46±0,02 хЮ12/ л; 159,5±0,60 г/л; р<0,0001). Уровень гематокрита у девочек (31,79±0,2 %) также меньше, чем у мальчиков (32,76±0,19 %; /?<0,0001). Различий в эритроцитарных индексах (MCV, МСН, МСНС, RDW) в зависимости от пола не обнаружено.

10. Внутриутробная гипоксия приводит к увеличению количества нормобластов -11,94 ±3,11 : 100 лейкоцитов против 5,42 ± 0,53 : 100 лейкоцитов (р<0,0001). Увеличения количества нормобластов при острой гипоксии в родах не выявлено 6,21 ± 0,66 : 100 лейкоцитов против 5,32 ± 1,25 : 100 лейкоцитов (р=0,55).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Полученные значения показателей клеточного состава пуповинной крови рекомендуется использовать в качестве референтных значений при проведении анализа крови у новорожденных первых суток жизни, как при использовании автоматического анализатора клеток крови, так и при подсчете клеток крови при светооптической микроскопии.

2. Данные о расхождении результатов подсчета клеток пуповинной крови при помощи автоматического анализатора клеток крови и проведении светооптической микроскопии рекомендуется использовать при технологических расчетах в работе банков пуповинной крови.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Плясунова, Светлана Александровна, 2006 год

1. Бабак О.А. Динамическая оценка эритропоэза • новорожденных. Автореферат диссертации канн.мед.наук. -М., 1999.

2. Балашова В.А., Абдулкадырова К.М. Клеточный состав гемопоэтической ткани печени и селезенки у плодов человека // Арх.анат. 1984. №46, 80-83.

3. Байдун JI.B., Логинов А.В., Значение автоматического анализа крови в клинической практике. Гематология и трансфузиология, 1996,2.

4. Балика Ю.Д:, Абубакирова A.M., Козлова С.И., Красильникова А.Я., Коваленко Л.В. Биохимические показатели крови матери, пуповинной крови и околоплодных вод при гипоксии плода. Акушерство и гинекология, 1988,7:23-25.

5. Балика Ю.Д., Елизарова И.П., Головацкая Г.И., Изменения в системе крови новорожденных как приспособительная реакция на роды. Акушерство и гинекология, 1973, 11:27-30.

6. Балика Ю.Д., Карташова В.Е., Фурсова 3:К. Об особенностях системы крови плода и новорожденного. XIII Всесоюзный съезд акушеров гинекологов.М.,1979.

7. Волынец М.Д. Морфологический состав и функциональная активность клеток пуповинной крови человека. Автореферат диссертации кан.мед.наук. -М., 1998:

8. Гематология детского возраста. Руководство для врачей. Под редакцией Н.А. Алексеева. Санкт-Петербург. «Гиппократ». 1998. с27-32.

9. Гематология/онкология детского возраста. Практическое руководство по детским болезням под общей редакцией В.Ф.Коколиной и А.Г. Румянцева. Том IV, с.81-113.

10. Глузман Д.Ф., Бабешко В.Г., Надгорная В.А., Скляренко Л.М., Дроздова В.Д. Эмбриональное кроветворение и гемобластозы у детей (иммунология и цитохимия). Киев. Наукова Думка, 1988, 198с.

11. Замораева Н.В. Пуповинная кровь человека — альтернативный источник стволовых клеток для трансплантации. Автореферат диссертации док.мед.наук -М.,1999.

12. Зангиева Т.Д. Красная кровь плода человека в разные периоды внутриутробного развития. Вопросы охраны материнства и детства, 1972, 17,1,22-24.

13. Исследование системы крови в клинической практике. Под редакцией Г.И. Козинца и В.А. Макарова. Москва. «Триада-Х».1997; с9-49;259-97.

14. Карел Полачек и соавторы. Физиология и патология новорожденных детей, АВИЦЕНУМ, медицинское издательство Прага, 1986. с. 339-342.

15. Кнорре А.Г. Эмбриональный гистогенез, JL, Медицина, 1971, с 431.

16. Козинец Г.И., Погорелов В.М., Шмаров Д.А., Боев С.Ф., Сазонов В.В. Клетки крови. Современные технологии их анализа, Москва, 2002.

17. Коровина Н.А., Заплатникова A.JL, Захарова И.Н. Железодефицитные анемии у детей. Руководство для детей. М., 1999,64.

18. Кравкова Е.В. Морфологическая картина крови плода человека в разные периоды внутриутробной жизни. Акушерство и гинекология, 1954, 5, 16-25.

19. Кузнецова Ю.В. Автоматический анализ клеток крови в дифференциальной диагностике и моноторинге лечения микроцитарных анемий у детей. Автореферат диссертации канн.мед.наук М.,2004.

20. Кузнецова Ю.В., Ковригина Е.С., Токарев Ю.Н. Оценка эритроцитарных параметров автоматического анализа крови и их применение для диагностики анемий. Гематология и трансфузиология, 1996, 5,44.

21. Левина Т.Н. Современный проточный счетчик в службе крови. Автореферат диссертации кан.биол.наук-М.,1999.

22. Луговская С.А., Миронова И.И., Почтарь М.Е., Лукина Е.А., Городничева В.Ф., Цветаева Н.В., Мадрала А. Диагностика железодефицита с помощью современных гематологических анализаторов. Гематология и трансфузиология, 1996,4, 31.

23. Серов В.Н., Стрижаков Ф.Н., Маркин С.А. Практическое акушерство: Руководство для врачей.- М., Медицина, 1989; с.53,255-66

24. Станкуте Д. и др. Клиническая оценка некоторых биохимических показателей пуповинной крови новорожденных от матерей с поздним токсикозом беременности. Сборник «Болезни матери и ребенка», Vilnius, 1990,56-61.

25. Султанова Г.Ф. Железодефицитные анемии у детей. Йошкар-Ола, 1992, 113.

26. Торубарова Н.А. Кошель И.В., Яцык Г.В. Кроветворение плода и новорожденного. Москва, «Медицина», 1993.

27. Шмаров Д.А., Козинец Г.И. Лабораторно-клиническое значение проточно-цитометрического анализа крови, Москва, 2004.

28. Altinkaynak S, Alp Н, Bastem A, Selimoglu М, Energin М. Serum Ferritin and Hemoglobin Levels of mothers and their newborns. Published erratum appears in Turk J Pediatr 1995 Oct-Dec; 37(4):439.

29. Andrew M, Castle V, saigal S, Carter C, Kelton J. Clinical impact of neonatal thrombocytopenia. J Pediatr 1987;110:457-64.

30. Aroviita P. Teramo K. Hiilesmaa V, Kekomaki R. Cord blood hematopoietic progenitor cell concentration and infant sex. Transfusion. 2005 Apr;45(4):613-21.

31. Axt R, Ertan K, Hendrik J, Wrobel M, Mink D, Schmidt W. Nucleated red blood cells in cord blood of singleton term and post-term neonates. J Perinat Med. 1999;27(5):376-81.

32. Baschat A, Gembruch U, Reiss I, at al. neonatal nucleated red blood cell counts in growth-restricted fetuses: Relation-ahip to arterial and venosus Doppler studies. Am J Obstet Gynecol 1999;181;190-5.

33. Beardsley D. Immune Thrombocytopenia in the perinatal period/ Semin Perinatal 1990;14:368-73.

34. Bentley SA, Johnson A, Bishop CA, A parallel evaluation of four automated hematology analyzers. Am J Clin Pathol 1993;100:626-32.

35. Bernstein PS, Minior VK, Divon MY. Nucleated red blood cells counts in small-for-gestational age fetuses with abnormal umbilical artery Doppler studies. Am J Obstet Gynecol 1997;177:1079-84.

36. Blackwell SC, Refuerzo JS, Ahn MO, Martin GI. Nucleated red blood cell count and early onset neonatal seizures. Am J Obstet Gynecol 2000;182:1452-7.

37. Buonocore-G; De-Filippo-M; Gioia-D; Picciolini-T; Luzze-E; Bocci-V; Bracci-R. Maternal and neonatal plasma cytokine levels in relation to mode of delivery. Biol-Neonate. 1995; 68(2): 104-10.

38. Buonocore G, Perrone S, Gioia D, Gatti MG, Massafra C, Agosta R, et al. Nucleated red blood cell count at birth as an index of perinatal brain damage. Am J Obstet Gynecol 1999;181:1500-5.

39. Carbonell F., Calvo W., Fliender T.M. Celluler composition of human fetal bone marrow. Histologic study in methacrylate section. Act.anat. 1982, 113: 371-375.

40. Castle V, Andrew M, Kelton J, Giron D, Johnston M, Carter C. Frequency and mechanism of neonatal thrombocytopenia. J Pediatr 1986;108:749-55.

41. Dollberg S, Livny S, Mordecheyev N, Minouni F. Nucleated red blood cells in meconium aspiration syndrome. Obstet Gynecol 2001;97;593-6.

42. Dorner K, Schulze S, Reinhardt M, Seeger H, Van Hove L. Improved automated leucocyte counting and differential in newborns achieved by haematology analyser CELL-DYN 3500. Clin Lab Haematol. 1995 Mar; 17 (1): 23-30.

43. D'Souza S.W., Black P., MacFarlane T. Jennison R.F. Hematological values in cord blood in relation to fetal hypoxia. Br.J. Obstet. Gynaecol, 1981,88:129-132.

44. Fahnenstish-H; Dame-C; Allera-A; Rosskamp-R; Kowalewski-S. Erythropoietin as a biochemical parameter for fetal hypoxia. Klin-Paediatr. 1995 Nov-Dec; 207(6): 326-30.

45. Ferber A, Grassi A, Akyol D, O'reilly-Green C, Divon MY. The association of fetal heart rate patterns with nucleated red blood cell counts at birth. Am J Obstet Gynecol 2003;188:1228-30.

46. Ferns SJ, Bhat BV, Basu D. Value of nucleated red blood cells in predicting severity and outcome of perinatal asphyxia.

47. Forestier F., Cox W.L.; Daffos F.; Rainaut M. The assessment of fetal blood samples. AmJ. Obstet. Genecol. 1988,158,1184-1188.

48. Forestier F., Daffos F., Galacteros G., Bardakjan J., rainaut M.,Beuzard Y. Hematological nalues of 163 normal fetuses between 18 and 30 weeks of gestation. Pediatr. Res., 1986,20.4,342-346.

49. Forestier F. Some aspect of fetal biology. Fetal Ther. 1987,2:181-187.

50. Forestier F., Daffos F., Rainaut M., Trivin F. Blood chemistry of noemal fetuses at midtrimester of pregnancy. Pediatr. Res.,1987,21,6:579-583.

51. George D, Bussel JB. Neonatal thrombocytopenia. Semin Thromb Hemostat 1995; 21:276-93.

52. Gilmour J.R. Normal hemopoiesis in intrauterine and neonatal life. J.Pathol., 1942,52,25.

53. Green DW, Elliott R, Mandel D, Dollberg S, Mimouni FB, Littner Y. Neonatal nucleated red cell in discordant twins. Am J Perinatol. 2004 Aug;21(6):341-5.

54. Gulati Gl, Bong IIII, Ashton JK. Advances of the past decade in automated hematology. Am J Clin Pathol 1992:89(suppl 1):S11-S16.

55. Gupta S., Pahwa R., O'reilly R., Good R.A., Siegal F.P. Ontogeny of lymphocyte subpopulations in human fetal liver. Proc. Natl. Acad. Sci.U.S.A., 1976,73,919.

56. Hanlon-lundberg KM, Kirby RS. Nucleated red blood cells as a marker of academia in term neonates. Am J Obstet Gynecol 1999; 181:196-201.

57. Hokama T. Relationship between maternal and cord blood plasma iron concentrations. J Trop Pediatr 1999Apr; 45(2): 120.

58. Jones III C.M., Greiss F.C. The effect of labor on maternal and fetal circulating cteholamines. Am.J.Obstet. Gynecol. 1982,144,2,149-153.

59. Korst LM, Phelan JP, Ahn MO, Martin GI. Nucleated red blood cells: an update on the marker for fetal asphyxia. Am J Obstet Gynecol 1996; 175:843-6.

60. Letsky EA. Erythropoiesis in pregnancy. J Perinat Med 1995; 23(1-2): 39-45,39.

61. Maconi M, Rolfo A, Cardaropolo S, Brini M, Danise P. Haematologic values in healthy and small for gestational age newborns. Lab hematol. 2005;ll(2):152-6.

62. Mary E Koenn, Beverly A Kirby, Linda L Cook, Jilie L Hare et al. Comparison of Four Automated Hematology Analyzers. Clinical Laboratory Science Fall 2001; 14;4.

63. McCarthy JM, Capullari T, Thompson Z, Zhu Y, Spellacy WN. Umbilical cord nucleated red blood cell counts: normal values and the effect of labor. J Perinatol. 2006 Feb:26(2):89-92.

64. Meberg A, Jakobsen E, Halvorsen K. Humoral regulation of erythropoiesis and thrombopoiesis in appropriate and small for gestational age infants. Acta Paediatr Scand. 1982 Sep;71(5):769-73.

65. Moore M.A.S., Metcalf D. Ontogeny of the haemopoietic system; yolk sac origin of in vivo and in vitro colony forming cells in the developing mouse embryos. Br.J.Haematol., 1970, 18,279-296.

66. Naeye R, Localio R, Determining the time before birth when ischemia and hypoxemia initiated cerebral palsy. Odstet Gynecol 1995;86:713-9.

67. Patricia Pranke, Renato R. Failace, Waldir F. Allebrandt, Gustavo Steibel, Francisco Schmidt, Nance Beyer Nardi. Hematologic and Immunophenotypic Characterization of Human Umbilical Cord Blood. Acta Haematol 2001; 105; 71-76.

68. Perkov S, Flegar-Mestric Z, Seper I. Biologic variation in,electrolytes and essential microelements in the blood of neonates and their mothers. Lijec vjesn .1998 Jun; 120(6): 145-50.

69. Phelan J Korst L, Ock AhnM, Martin G. Neonatal Nucleated red blood cells and Lymphocyte counts in fetal brain injury. Obstet Gynecol 1998;91:485-9.

70. Picaud JC, Putet G, Salle BL, claris O. Iron supplementation in preterm infants treated with erythropoietin. Arch Pediatr 1999 Jun; 6(6): 657-64.

71. Redzko S, Przepiesc J, Zak J, Turowski D, Urban J, Wysocka J. {Hematologic parameters in the cord blood labor complicated by meconium-stained amniotic fluidj.Ginekol Pol. 2000 Aug;71(8):931-5.

72. Sainio S, Jarvenpaa AL, Renlund M, Riikonene S, Teramo K, Kekomaki R. Thrombocytopenia in Term Infants: A Population-Based Study. Obstet Gynecol. 2000 Mar;95(3):441-6.

73. Sainio S, Kekomaki R, Riikonen S, Teramo K. Maternal thrombocytopenia at term: a population-based study. Acta Obstet Gynecol Scand. 2000 Sep;79(9):744-9.

74. Salafia-CM; Minior-VK; Lopez-Zeno-JA; Whittington-SS; Pezzullo-JC; Vintzleos-AM. Relationship between placental histologic features and umbilical cord blood gases in preterm gestations. Am-J-ObstetGynecol. 1995 Oct; 173(4): 1058-64.

75. Saracoglu F, Sahin I, Eser E, Gol K, Turkkani B. Nucleated red blood cells as a marker in acute and chronic fetal asphyxia. Int J Gynaecol Obstet. 2000 Nov: 71(2):113-8.

76. Schwartz KA. Gestational thrombocytopenia and immune thrombocytopenias in pregnancy. Hematol Oncol Clin North Am. 2000 Oct;14(5):l 101-16.

77. Tamar Perri, MD, Asaf Ferber, MD, Ayala Digli, MD, Esther Rabizadeh, PhD, Alina Weissmann-Brenner, MD and Michael Y. Divon, MD. Nucleated Red Blood Cells in Uncomplicated Prolonged Pregnancy. Obstetrics Gynecology 2004;104:372-376.

78. Thomas D.B., Yoffey J.M. Human fetal haemopoiesis. I. The cellular composition of fetal blood. Br.J.Haemat., 1962.8:290-295.

79. Thilaganathan B, Athanasiou S, Ozmen S, Creighton S, Watson NR, Nicolaides KH. Umbilical cord blood erythroblast count as an index of intrauterine hypoxia. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 1994 May;70 (3):F192-4.

80. Tsao PN, Teng RJ, Chou HC, Tsou KI. The thrombopoietin level in cord blood in infants born mothers with pregnancy-induced hypertension. Biol Neonate.2002; 82(4) :217-21.

81. Udom-Rice I, Bussel JB. Fetal and neonatal thrombocytopenia. Blood Rev 1995;9:5764.

82. Ustun Y, Engin-Ustun Y, Kaya E, Meydanli MM, Kulak N. Elevated nucleated red cell count: a population-based study. J Reprod Med. 2006 Jan;51(l):36-40.

83. Van den HofMC, Nicolaides KN. Platelet count in normal, small, and anemic fetuses. Am J Gynecol. 1990 Mar; 162(3):735-9.

84. Vento M, Vina J, Asensi M. Erythropoietin and iron therapy for preterm infants. J pediatr 1999 Apr; 134(4): 520; discussion 521-2.

85. Walka M.M., Sonntag J., Kage A., Dudenhausen J.W., Obladen M. Complete Blood Countsfrom Umbilical Cords of Healthy Term Newborns by Two Automated Cytometers. Acta Haematol 1998; 100; 167-173.

86. Wang FS, Itose Y, Tsuji T, Hamaguchi Y, Hirai K, Sakata T. Development and clinical application of nucleated red cell counts and staging on the automated haematology analyzer XE-2100. Clin Lab Haematol. 2003 Feb;25(l): 17-23.

87. Williams W. Haematology, 1983.

88. Yeruchimovich M, Dollberg S, Green DW, Mimouni FB. Nucleated red blood cells in infants of smoking mothers. Obstet Gynecol 1999;93:403-6.

89. Yeruchimovich M, Mimouni FB, Green DW, Dollberg S. Nucleated red blood cells in healthy infants of women with gestational diabetes. Obstet Gynecol 2000;95:84-6.

90. Zipursky A., Brown E., Palko J., Brown EJ. The erythrocyte differential count in newborn infants. Fm J Pediatr Hematol Oncol 1983:5:45-51.