Изучение метаболома сырья и лекарственных форм крапивы двудомной тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат наук Скалозубова, Татьяна Александровна

• Скалозубова, Татьяна Александровна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Скалозубова, Татьяна Александровна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Ботанико-фармакогностическая характеристика крапивы двудомной

1.2. Фармакологическая активность и медицинское применение сырья и препаратов крапивы двудомной

1.3. Фармакологические свойства кальция. Лекарственные препараты кальция27

1.4. Методы количественного определения ионов кальция в лекарственных препаратах и лекарственном растительном сырье

Выводы из главы 1

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика объектов

2.2. Методы исследования

ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ ГИДРОФИЛЬНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ЛИСТЬЕВ КРАПИВЫ ДВУДОМНОЙ

3.1. Качественный анализ БАВ листьев крапивы двудомной

3.2. Определение показателей качества сырья крапивы

двудомной

3.3. Количественный анализ БАВ листьев крапивы двудомной

Выводы из главы 3

ГЛАВА 4. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАКРОЭЛЕМЕНТОВ -КАЛЬЦИЯ И МАГНИЯ В КРАПИВЕ ДВУДОМНОЙ

4.1. Определение кальция и магния в крапиве двудомной методом атомно-абсорбционной спектроскопии

4.2. Комплексонометрическое определение кальция и магния в сырье крапивы двудомной

4.3. Валидация количественного определения ионов кальция в солянокислом извлечении из листьев крапивы

4.4. Потенциометрическое определение кальция в сырье крапивы двудомной

Выводы из главы 4

ГЛАВА 5. ИЗУЧЕНИЕ ДИНАМИКИ НАКОПЛЕНИЯ НЕКОТОРЫХ ГИДРОФИЛЬНЫХ ГРУПП БАВ И МАКРОЭЛЕМЕНТОВ КАЛЬЦИЯ И МАГНИЯ В ЛИСТЬЯХ КРАПИВЫ ДВУДОМНОЙ

Вывод из главы 5

ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ НАСТОЯ И ЖИДКОГО ЭКСТРАКТА ЛИСТЬЕВ КРАПИВЫ ДВУДОМНОЙ

6.1. Определение некоторых показателей качества лекарственных форм крапивы двудомной

6.2. Количественное определение БАВ в настое и жидком экстракте крапивы двудомной

6.3. Определение кальция и магния в лекарственных формах крапивы двудомной

6.4. Получение экстракта крапивы, обогащенного кальцием

Выводы из главы 6

ГЛАВА 7. ИЗУЧЕНИЕ ГОМЕОПАТИЧЕСКИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ, ПОЛУЧАЕМЫХ ИЗ КРАПИВЫ ДВУДОМНОЙ

7.1. Изготовление гомеопатических лекарственных форм

7.2. Определение содержания БАВ в гомеопатических лекарственных формах из крапивы двудомной

7.3. Определение кальция и магния в гомеопатических лекарственных формах крапивы двудомной

Выводы из главы 7

ГЛАВА 8. РАЗРАБОТКА ПРОЕКТА ФАРМАКОПЕЙНОЙ СТАТЬИ ДЛЯ ГФ XII «КРАПИВЫ ЛИСТЬЯ»

Выводы из главы 8

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение метаболома сырья и лекарственных форм крапивы двудомной»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Несмотря на достигнутые успехи в области синтеза лекарственных веществ, лекарственные растения остаются важным источником для получения лекарственных препаратов [12, 20, 27, 35, 88, 122]. В их число входят лекарственные препараты, получаемые из листьев крапивы двудомной [21, 33,45].

Крапива двудомная используется в официнальной и народной медицине в качестве кровоостанавливающего и витаминного средства, применяется в гомеопатии [2, 21, 33, 34]. Наиболее часто листья крапивы используются в виде настоя, также разрешен к применению жидкий экстракт.

Крапива двудомная изучалась достаточно подробно (работы Сошниковой О.В., Сапроновой H.H. и др.), однако данные о гидрофильной фракции биологически активных веществ (БAB) растения представлены недостаточно. Действующая на настоящий момент нормативная документация на листья крапивы не отвечает современным требованиям стандартизации лекарственного растительного сырья (JIPC) [29].

Рост заболеваний, связанных с нарушением обмена кальция в организме (остеопороз, дефицит кальция у детей), обуславливает повышенный интерес к лекарственным средствам (JIC), являющимися источниками кальция. Широкий спектр таких JIC в аптеках представлен, в основном, синтетическими препаратами, которые имеют ряд побочных эффектов [70]. В тоже время, минеральные вещества лекарственных растений (ЛР) находятся в биоусваиваемой форме и более эффективны в нормализации минерального обмена [1, 39, 52, 122].

Листья крапивы двудомной, помимо богатого комплекса БАВ (флавоноиды, витамины, дубильные вещества, органические кислоты и др.), содержат значительное количество кальция, который переходит в жидкие лекарственные формы (работы Арзамасцева А.П., Листова С.А., Петрова A.B. и др.), поэтому, получаемые из сырья крапивы, настой и жидкий экстракт могут рассматриваться в качестве возможного источника кальция [4, 26, 32, 47, 54].

Целью исследования является углубленное изучение гидрофильной части БАВ и минерального состава метаболома крапивы двудомной, а также рассмотрение возможности получения лекарственной формы (ЛФ) крапивы двудомной, обогащенной кальцием.

Постановка задач и выбор средств для их решения:

Для осуществления поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. провести информационно-аналитическое исследование по вопросам изучения метаболома и биологической активности крапивы двудомной;

2. изучить гидрофильную фракцию БАВ и минеральный комплекс сырья крапивы двудомной;

3. уточнить и разработать характеристики листьев крапивы двудомной для создания проекта фармакопейной статьи (ФС) на сырье;

4. провести сравнительный анализ БАВ в сырье, аллопатических и гомеопатических лекарственных формах крапивы двудомной, используя принцип «сквозной стандартизации»;

5. изучить факторы, способствующие переходу кальция из сырья в ЛФ.

Решение задач осуществлялось путем обобщения данных литературы и

проведения экспериментальных исследований.

Научная новизна. Дана подробная качественная и количественная характеристика гидрофильной фракции БАВ и минерального состава метаболома крапивы двудомной с использованием комплекса современных методов анализа (тонкослойная хроматография (ТСХ), атомно-абсорбционная спектрометрия, титриметрия, потенциометрия, спектрофотометрия). Идентифицированы: флавоноиды - рутин, кверцетин, лютеолин, кумарин - скополетин, кислоты -аскорбиновая, кофейная, галловая, хлорогеновая. Для определения содержания суммы свободных органических кислот, кислоты аскорбиновой, дубильных веществ, суммы флавоноидов, суммы гидроксикоричных кислот, хлорофилла, полисахаридов, восстанавливающих моносахаров, суммы свободных аминокислот, макроэлементов кальция и магния адаптированы действующие и

разработаны оригинальные методики определения, защищенные двумя патентами РФ на изобретение.

В процессе исследований в сравнительном аспекте методик титриметрического анализа (титрование 2,6-дихлорфенолиндофенолятом натрия, йодометрия и йодатометрия) показана равноценная возможность их использования для анализа кислоты аскорбиновой в листьях и ЛФ крапивы. Установлено, что наиболее оптимальной для анализа является методика йодометрии.

Разработаны оригинальные методики комплексонометрического определения макроэлементов кальция и магния, и определения содержание кальция методом потенциометрии с использованием ионоселективного кальциевого электрода в листьях и ЛФ крапивы двудомной. Методики защищены патентами РФ № 2466387 и № 2488818.

Подобраны условия увеличивающие переход кальция и магния из сырья в извлечение. Показана возможность получения методом дробной мацерации жидкого экстракта листьев крапивы двудомной, обогащенного ионами кальция. Дана качественная и количественная характеристика полученного экстракта.

Практическая значимость результатов исследования. На основании проведенных исследований:

- разработан проект ФС «Крапивы листья» для ГФ XII изд. В проект ФС введены новые разделы «Количественное определение» и «Микробиологическая чистота», существенно дополнены разделы: «Внешние признаки» (добавлено описание порошков разной степени измельченности), «Микроскопия» (проведена визуализация и добавлены микроскопические характеристики на измельченное сырье и порошки), «Качественные реакции» (добавлены хроматографические характеристики сырья по кислоте аскорбиновой и флавоноидам), «Числовые показатели» (введены разработанные показатели содержания действующих веществ и показатели, характеризующие порошки крапивы);

- в работу испытательной лаборатории ООО «ЦККЛС «Центр Экофарм» внедрена йодометрическая методика количественного определения кислоты

аскорбиновой в лекарственном растительном сырье, содержащем витамины, и методика определение кальция в растительных биологически активных добавках (БАД) методом потенциометрии с использованием кальций-селективного электрода;

- в учебный процесс кафедры фармакогнозии фармацевтического факультета ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России в тему «Лекарственное растительное сырье, содержащее витамины» внедрена альтернативная методика определения кислоты аскорбиновой методом йодометрии и йодатометрии.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 13 научных работ, из них 6 статей - в журналах, рекомендованных ВАК РФ, 2 патента РФ на изобретение.

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты изучения состава и определения содержания биологически активных веществ (органических кислот, кислоты аскорбиновой, дубильных веществ, флавоноидов, гидроксикоричных кислот и хлорофилла, полисахаридов, восстанавливающих моносахаров, аминокислот, макроэлементов кальция и магния) в листьях и ЛФ крапивы двудомной;

- данные по изучению ЛФ крапивы: настоя и жидкого экстракта из листьев крапивы, настоя гомеопатического и настойки матричной гомеопатической;

- результаты исследований по разработке методик количественного определения макроэлементов кальция и магния в листьях и ЛФ крапивы двудомной.

Апробация диссертации. Основные положения диссертации доложены на XXI Московской Международной Гомеопатической конференции (Москва, 2011 г.), Итоговой Всероссийской научной конференции молодых исследователей с международным участием «Татьянин день» (Москва, 2011 г.), конференции «Вопросы стандартизации лекарственных препаратов» (секция молодых ученых) (Москва, 2010 г.), 5-й Международной научно-методической конференции «Фармобразование-2013. Пути и формы совершенствования фармацевтического

образования. Создание новых физиологически активных веществ» (Воронеж, 2013 г.).

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 131 странице машинописного текста, содержит 36 таблиц и 21 рисунок.

Работа состоит из введения, обзора литературы, 8 экспериментальных глав, выводов, библиографии из 135 наименований, из которых 14 на иностранных языках и 3 интернет ресурса, приложений.

Во введении раскрыта актуальность темы, определены цель и задачи исследования, сформулированы научная новизна и практическая значимость работы. В первой главе на основании данных литературы рассмотрены сведения о ботанической характеристике крапивы двудомной; химическом составе; методах стандартизации сырья в зарубежной нормативной документации; фармакологических свойствах метаболома и лекарственных препаратов (ЛП) крапивы двудомной; фармакологических свойствах кальция, его роли в организме. Представлена сравнительная характеристика лекарственных препаратов кальция, методов определения ионов кальция в ЛРС и ЛФ. Вторая глава посвящена характеристике объектов и методов исследования. В третьей главе изложены результаты качественного и количественного исследований по изучению гидрофильных БАВ крапивы двудомной. В четвертой главе приводятся результаты количественного определения кальция и магния разными методами: атомно-абсорбционной спектрометрией, комплексонометрическим титрованием и методом потенциометрии с использованием ионоселективного кальциевого электрода представлены, данные по обнаружению солей кальция в листьях крапивы микроскопическим методом. В пятой главе изложены экспериментальные данные по изучению динамики накопления флавоноидов и макроэлементов - кальция и магния в листьях крапивы двудомной в зависимости от стадии вегетации. В шестой и седьмой главах рассмотрены результаты изучения БАВ и минеральных соединений кальция и магния в аллопатических и гомеопатических лекарственных формах из крапивы двудомной. Восьмая глава посвящена разработке проекта фармакопейной статьи «Крапивы листья».

Результаты, полученные при проведении исследований, обработаны статистически и представлены в таблицах и на рисунках, которые приведены в тексте работы. В приложение вынесены некоторые рисунки, проект фармакопейной статьи, акты внедрения результатов работы.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Ботанико-фармакогностическая характеристика крапивы двудомной 1.1.1. Ботаническая характеристика крапивы двудомной

Семейство крапивные (Urticaceae) состоит из 45 родов и 850 видов, которые распространены по всему земному шару. В России это семейство представлено только родом крапива (Urtica L.) и следующими видами - крапивой двудомной (Urtica dioica L.), крапивой жгучей (Urtica urens L.), крапивой коноплевой (Urtica cannabina L.) [5, 6, 25, 90, 92, 93].

Крапива двудомная - Urtica dioica L. многолетнее, морозо- и засухоустойчивое двудомное травянистое растение (рис. 1.1.1.1). Крапива двудомная является рудеральным растением и относится к группе сырья, величину запасов которого не определяют, т.к. произрастает повсеместно — у заборов, на огородах, в лесах, по сорным местам, около водоемов, на полянах, среди кустарников [88, 95, 116].

Рисунок 1.1.1.1. Крапива двудомная

Корневище крапивы двудомной длинное, ползучее, с подземными побегами и тонкими узловатыми корнями. Стебли прямые, 60-180 см высотой, тупочетырехгранные, обычно не ветвящиеся, раскидано-опушенные простыми короткими волосками, с густым покровом жгучих волосков, образованных из оксида кремния, особенно сгущающихся на узлах [100, 101, 102, 116]. При любом

прикосновении хрупкая оболочка ломается, острые края ее ранят кожу, а содержащиеся в волосках муравьиная кислота, гистамин и ацетилхолин, попадая на рану, вызывают раздражение. Листья яйцевидно-сердцевидные, крупнозубчатые, пильчатые с изогнутыми к вершине зубцами, основанием сердцевидные, к верхушке заостренные, длинночерешковые, супротивные с прилистниками. Прилистники свободные, продолговатые, пленчатые, до 12 мм длиной. Соцветия пазушные, ложно-колосовидные, длинные, ветвистые, повисающие, густо прижато-волосистые с расставленными жгучими волосками. Цветки мелкие зеленые, обоеполые, но с рудиментарной завязью, тычиночные или пестичные. Околоцветник тычиночных цветков четырехраздельный, неизменяющийся, пестичных цветков - с двумя внутренними (дорзальными) долями, разрастающимися после цветения и двумя наружными (латеральными — боковыми к плоскости сжатия орешка) неизменяющимися. Тычинок четыре. Завязь с сидячим рыльцем или с очень коротким столбиком. Плод - орешек, округло-эллиптический или яйцевидный, желтовато-серый, длиной до 1,5 см [29, 31, 61,123, 125]. Цветет в июне — июле, плодоносит в июле — сентябре. Размножается крапива двудомная семенами, и вегетативно. Период вегетации составляет 175 - 188 дней, наиболее интенсивный прирост побегов наблюдается в фазах стеблевания и цветения растения и составляет 10 - 15 см за неделю [6,15, 24,32,61].

Крапива встречается по краям дорог, как сорное растение в посевах и у жилья, по тенистым влажным лесам, повсеместно в Европейской части РФ, на Кавказе, Дальнем Востоке, в Западной и Восточной Сибири, Средней Азии. Занесено человеком в Северную и Южную Америку, Австралию, Скандинавию, Средиземноморье, Иран [55, 56, 61, 90].

Некоторые исследователи выделяют две географические расы крапивы двудомной: крапиву узколистную (U. angustifolia Fischer ex Hörnern), растет в Сибири и на Дальнем Востоке, и крапиву опушенную (U. pubescens L.), встречается на юго-востоке европейской части России, включая Предкавказье и Дагестан. Первый вид характеризуется более узкими листьями и слабо

выраженной опушенностью железистыми волосками; второй, сформировавшийся как однодомное растение, имеет густое шерстистое опушение нижней стороны листьев, черешков и стебля [5, 116].

Во многих районах ареала крапивы двудомной на сорных местах растут два не фармакопейных вида этого рода. Крапива жгучая (U. urens L.) встречается преимущественно в Европейской части России, и как заносное, на востоке страны. От крапивы двудомной отличается меньшими размерами, более мелкими листьями с глубокими тупыми прямыми зубцами. У крапивы коноплевой (U. cannabina L.), довольно высокого растения с основным ареалом в Сибири и на Дальнем Востоке, листья глубоко 3 - 5-раздельные с перисто-, иногда дважды перисто-зубчатонадрезанными долями [92, 93, 110].

1.1.2. Характеристика сырья «Листья крапивы»

Фармакопейным лекарственным растительным сырьем в России являются листья крапивы двудомной Folia Urticae (Folia Urticae dioicae) (рис. 1.1.2.1), которые заготавливают в фазу цветения в мае — июле. Сушат сырье на чердаках с железной крышей или под навесом, в помещениях с хорошей вентиляцией или в сушилках при температуре 50°С, расстилая тонким слоем (3-5 см) на бумаге или ткани. Нельзя сушить этот вид сырья под солнцем, т.к. листья при этом обесцвечиваются. Выход сухого сырья 22 - 23%. Хранят сырье в сухих, хорошо проветриваемых помещениях без доступа прямых солнечных лучей [29, 61].

Сырье представляет собой листья, цельные или частично измельченные, простые, черешковые, длиной до 20 см и шириной до 9 см (у основания), яйцевидно-ланцетовидные и широкояйцевидные, заостренные, при основании обычно сердцевидные, края остро- и крупнопильчатые с изогнутыми к вершине зубцами. Поверхность листа шершавоволосистая, особенно много волосков по жилкам листа. Черешки листьев длиной 7-8 см, округлые или полукруглые в сечении, с бороздкой на верхней стороне черешка, покрытые волосками. Цвет листьев темно-зеленый, черешков - зеленый. Запах слабый. Вкус горьковатый. Измельченное сырье: кусочки листьев различной формы, проходящие сквозь сито

с диаметром отверстий 7 мм. Цвет темно-зеленый. Запах слабый. Вкус горьковатый [29].

Рисунок 1.1.2.1. Внешний вид сырья «Листья крапивы»

Листья крапивы двудомной включены во многие фармакопеи, в том числе в Европейскую, Немецкую, Британскую и Белорусскую [31, 123, 125]. Помимо листьев в качестве лекарственного растительного сырья используют и другие части растения. Например, Фармакопея США (U.S. Pharmacopeia) разрешает к медицинскому применению корневища и корни крапивы двудомной. Сырье должно представлять собой изогнутые корневища, светлого серо-коричневого цвета снаружи, с продольными бороздками, корни снаружи светлого желто-коричневого цвета. Во Французскую и Британскую Травяную Фармакопеи включены статьи на траву и корни крапивы, а в Немецкую Фармакопею - статьи на листья, корневища и корни крапивы.

1.1.3. Химический состав крапивы двудомной

Метаболом крапивы двудомной представлен богатым набором органических соединений и достаточно разнообразным минеральным комплексом. БАВ крапивы двудомной представлены витаминами, флавоноидами, дубильными вещества и другими соединениями (табл. 1.1.3.1).

Листья крапивы двудомной содержат от 15 до 19% минеральных веществ [40, 67, 91], которые представлены как макро- (К, Са, Mg, Fe), так и микроэлементами (Mn, Си, Zn, Со, Mo, Cr, Al, Ва, Se, Ni, Sr, Pb). При изучении

золы листьев крапивы двудомной были найдены К20 - 15,2%, СаО - 36,5%, Ыа20 - 2,0%, - 8,4%, Ре203 - 6,3%, Р205 - 10,3%, 803 - 10,6%, 8Ю2 - 8,0% [67]. Таблица 1.1.3.1. Химический состав листьев крапивы двудомной

Название вещества Содержание, % Литературный

источник

Азотсодержащие соединения 0,01-0,03 [75, 103]

(ацетилхолин, гистамин, 5-

гидрокситриптамин, холин, бетаин)

Алкалоиды [67]

никотин 0,02 - 0,03

Аминокислоты [19, 67, 82]

Незаменимые аминокислоты:

• лейцин 1,50

• лизин 1,10

• аргинин 1,10

• фенилаланин 0,90

• метионин 0,50

• изолейцин 0,80

• валин 1,00

• треонин 0,50

• гистидин 0,60

Заменимые аминокислоты:

• кислота аспарагиновая 1,60

• серин 0,80

• кислота глютаминовая 2,20

• пролин 0,90

• глицин 1,00

• аланин 1,10

• цистеин 0,30

• тирозин 0,60

Белки 25,0-30,0 [67, 114]

Витамины: [41,67, 104]

• филлохинон (витамин Ьч) 0,003

• кислота аскорбиновая (витамин С) 0,150

• токоферол (витамин Е) 0,004

кислота никотиновая(витамин РР) 0,001

• тиамин (витамин В [) 0,001

• кислота пантотеновая (витамин Вз) 0,0002

• кислота фолиевая

Гликозид уртицин 0,09 [67]

Дубильные вещества 2,5-3,1 [67, 120, 121]

Жирное масло 2,0 [86, 110]

Каротиноиды: 0,57 [48, 67]

• Р-каротин* 0,06

• гидрокси-а-каротин 0,0009

• лютеоксантин 0,010

• лютеин-эпоксид

• виолоксантин 0,010

• ксантофилл 0,015

• ксантофилл-эпоксид и др.

Клетчатка 20,0 [67]

Кумарины: 0,10 [67, 83]

• скополетин

• кумарин

• умбеллиферон

Лигнин 11,0 [47, 114]

Органические кислоты: галловая, 2,0-5,0 [9, 67, 120, 121]

эллаговая, лимонная, линолевая, масляная,

молочная, муравьиная, кофейная, п-

кумаровая, хинная, хлорогеновая,

щавелевая, феруловая, янтарная.

Минеральные элементы (мг/г): [40, 67, 91, 127,

• калий 2,0 133, 134]

• кальций 1,0-2,0

• магний 0,5-1,0

• натрий 0,3 - 0,4

• железо 0,01

• цинк 0,003

• хром

• медь 0,001

• алюминий

• марганец 0,01

• кобальт 0,00019

• молибден

• барий

• селен

• никель 0,00001

• стронций

• свинец

• бор

Углеводы: крахмал, глюкоза, сахароза, 25,0 [67, 82, 88]

фруктоза.

Флавоноиды: 1,90 [8, 43, 66, 89]

• кверцетин

• диосметин

• лютеолин 0,65

• рутин

• кемпферол

• гиперозид

• цинарозид

З-О-метилкверцетин

• 5-О-метиллютеолин

Хлорофилл**: а-хлорофилл, |3-хлорофилл 2,0 — 3,9 [67, 75]

Эфирное масло следы [67]

* - Содержание каротина в листьях крапивы в период цветения составляет 48 мг% (в пересчете на абсолютно сухое вещество), в фазе появления семян - 46,7 мг%, в фазе созревания семян - 34,8 мг%. По данным В.А. Сафинова содержание каротина в листьях крапивы двудомной, собранной в мае, составляет 60,6 мг%. ** - соотношение содержания а- и (З-хлорофилла составляет 1:3.

В клеточном соке жгучих волосков крапивы содержится кислота муравьиная (общее содержание органических кислот 1,34%), которая и обуславливает жгучесть крапивы.

Трава крапивы двудомной, особенно стебли, содержит большое количество органических кислот (1,8%) [9].

Цветки содержат флавоноиды (З-О-глюкозид изорамнетин, З-О-глюкозид кемпферола, изокверцитрин, З-О-рутинозид изорамнетина, З-О-рутинозид кемпферола, рутин, З-О-неогеперозид изорамнетина), витамин С [88, 89].

Семена содержат витамин С, жирное масло - 32,5% (в его составе: кислота линолевая до 73%, токоферолы), белки, углеводы [88].

Из корней крапивы выделены 11 лигнановых гликозидов. Корни содержат монотерпеноиды, стероиды ([3-ситостерин, Зр-Э-глюкозид (3-ситостерина, 7-гидроксиситостерин, 7а-гидроксиситостерин, (З-О-глюкозид 7 а-

гидроксиситостерина, (З-Б-глюкозид 7[3-гидроксиситостерина, 3-0-(6'-0-пальмитоил)-(3-Е)-глюкозид ситостерина, 24(Ы)-этил-5-холестадиол-3(3,6), азотсодержащие соединения (церамиды), алкалоиды (никотин), фенолы и их производные (гомованилиновый спирт, 4'-глюкозид гомованилинового спирта, о-гидрксиэтилфенол, п-гидроксиацетофенон и др.), лигнаны ((+)-изоларицирезинол, (-)-секоизоларицирезинол, неоолиовил, 1,9'-бисацетилнеооливил, 4-0-(3-0-глюкозид неооливила, 4-0-(3-0-глюкозид 9,9'-бисацетилнеооливила), кумарины (скополетин, эскулетин), флавоноиды (рутин), высшие жирные кислоты ((10Е, 127)-9-гидроксиоктадекадиен-10,12-овая), фенолкарбоновые кислоты (галловая, хлорогеновая), лектины, витамин С, танины, углеводы, полисахариды [88].

1.1.4. Стандартизация листьев крапивы

В настоящее время в России оценку качества листьев крапивы двудомной проводят в соответствии с требованиями ст. 25 ГФ XI изд., вып. 2. В фармакопейной статье предусмотрена хроматографическая проба на присутствие в сырье витамина К]. В сырье крапивы двудомной содержатся различные группы БАВ, которые представлены веществами гидрофильной и липофильной природы, которые можно обнаружить с помощью хроматографического анализа или качественных (пробирочных) реакций.

Гексановое извлечение из листьев крапивы хроматографируют на пластинках «8Пи!Ы» в системе растворителей бензол - петролейный эфир. В качестве детектора используют УФ-свет, положительным результатом является пятно с желто-зеленой флюоресценцией (витамин К]).

Европейская Фармакопея в листьях крапивы предлагает проводить хроматографическое обнаружение кумарина скополетина и хлорогеновой кислоты (метанольное извлечение из сырья) хроматографируют в системе ангидрид муравьиной кислоты - вода - метанол - этилацетат. В качестве детектора используется просмотр в УФ-свете после прогревания пластинки. На пластинке должны наблюдаться зоны с синей флюоресценцией и соответствующими значениями (рис. 1.1.4.1).

Американская Фармакопея предлагает методику ТСХ со свидетелем (3-ситостеролом для качественной идентификации корневищ и корней крапивы. Зона Р-ситостерола проявляется в виде фиолетово-красного пятна под УФ-светом. По ГФ XI изд. в листьях крапивы двудомной не определяют содержание действующих веществ, что является существенным недостатком действующей нормативной документации. В Европейской Фармакопее предлагается стандартизовать листья крапивы по сумме кислот кафеоилмаликовой и хлорогеновой в пересчете на кислоту хлорогеновую (не менее 0,3%), используя метод высокоэффективной жидкостной хроматографии.

1 ^

2 €»>

Исследуе С.О. скополетина

мыи и кислоты

раствор хлорогеновой

Рисунок 1.1.4.1. Схема тонкослойной хроматографии (Европейская Фармакопея). 1 - кислота хлорогеновая, 2 - скополетин.

Стандартом является раствор кислоты хлорогеновой. Подвижные фазы представляет собой метанол (А) и смесь метанола и воды, подкисленной кислотой фосфорной разведенной до рН=2 (В). Детектирование проводят с помощью спектрофотометрического детектора при длине волны 330 нм. Относительное время удерживания кислоты хлорогеновой около 13 мин, кислоты кафеоилмаликовой около 2,2 мин.

1.2. Фармакологическая активность и медицинское применение сырья и

препаратов крапивы двудомной

В Государственном Реестре лекарственных средств, разрешенных к медицинскому применению, листья крапивы зарегистрированы как кровоостанавливающее средство, относящееся к группе витаминов.

Кровоостанавливающий эффект крапивы объясняется наличием в ней комплекса БАВ: антигеморрагического витамина Кь эскулена, флавоноидов, витамина С и дубильных веществ.

Витамин К] (филлохинон) участвует в синтезе специфического белка -протромбина, необходимого для свертывания крови при повреждении ткани, а также, предотвращает возникновение раковых заболеваний. Необходим для образования в печени протромбина и VII, IX и X факторов свертывающей

системы крови. Предполагают, что витамин К является кофактором фермента у-глутамилкарбоксилазы, при участии которого осуществляется карбоксилирование у-карбоксильной группы остатков глутамата, входящих в состав по крайней мере четырех белков свертывающей системы крови [103, 104, 110].

Гидрофильная фракция БАВ листьев крапивы представлены водорастворимыми витаминами (кислота аскорбиновая, витамины группы В, кислоты никотиновая и фолиевая), дубильными веществами, флавоноидами, органическими кислотами, аминокислотами, сахарами. Эти соединения определяют следующие виды фармакологических свойств:

иммуномодулирующее, антиоксидантное (витамин С), противовоспалительное, гипотензивное, капиллярукрепляющее (флавоноиды), катализирующее процессы репарации и др. [55, 88, 110].

Богатый метаболом крапивы двудомной обуславливает ее кровоостанавливающее, противовоспалительное, поливитаминное,

иммунотропное, стимулирующее регенерацию тканей, нормализующее обмен веществ, усиливающее гемопоэз, желчегонное, мочегонное, гепатопротекторное, отхаркивающее, обезболивающее, антисептическое, противосудорожное свойства [10, 11, 19, 22, 24, 26, 37]. Усиление гемопоэза обусловлено наличием комплекса белковых веществ в сочетании с железом, составляющим основу для синтеза гемоглобина. Благодаря этому комплексу улучшается всасывание железа через воспаленную слизистую тонкого кишечника [12, 34].

Повышение сопротивляемости организма объясняется наличием в крапиве кремния, входящего в состав кремниевой кислоты и ее солей. Набор аминокислот, макро- и микроэлементов обеспечивает широкий спектр общеукрепляющего действия на организм. Кислота лимонная кислота в сочетании с флавоноидами, витамином С и селеном улучшает протекание энергетических процессов, происходящих в организме. Поэтому настой крапивы рекомендуется употреблять при всех острых и хронических заболеваниях, когда отмечается снижение общей сопротивляемости организма.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Скалозубова, Татьяна Александровна, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Авцын, А. П. Микроэлементозы человека/ А.П. Авцын, А. А. Жаворонков, М. А. Риш.— М.: Медицина, 1991.— 496 с.

2. Акопов, И.Э. Кровоостанавливающие растения: кровоостанавливающее и другие их лечебные свойства/ И.Э. Акопов. - Т.: Медицина, 1981. - 296 с.

3. Алексеенко, В.А. Химические элементы в окружающей среде и развитии организмов / В.А. Алексеенко // Геохимия биосферы: материалы 2-ого Междунар. совещ. — Новороссийск, 1999. - С. 106 - 111.

4. Артемов, А. Н. Крапива исцеляющая и омолаживающая/ А.Н. Артемов. - С-Пб.: «Дила», 2001.- 160 с.

5. Атлас ареалов и ресурсов лекарственных растений СССР. М., 1976. -

248с.

6. Баландина, И.А. Лекарственные растения: справочное пособие/ И.А. Баландина, Н.И. Гринкевич, В.А. Ермакова. - М.: Высшая школа, 1991. - С.152 -164.

7. Баландина, И. А. Совершенствование принципов и методов фармакопейного анализа в системе стандартизации лекарственного растительного сырья и лекарственных средств на его основе [Текст]: автореф. дис. док. фарм. наук/ Баландина И.А.; Москва, 2004. - 38 с.

8. Бандюкова, В.А. Исследование химии флавоноидных соединений и закономерности их распределения в растениях [Текст]: автореф. дис. док. биол. наук / Бандюкова В.А.; Ереван. - 1975. - 41с.

9. Бандюкова, В. А. Фенолокислоты растений, их эфиры и гликозиды / В. А. Бандюкова// Химия природных соединений. - 1983. - № 3. - С. 263 - 273.

10. Барабой, В.А. Биологическое действие растительных фенольных соединений/ В.А. Барабой. - Киев: Наукова думка, 1976. - 260 с.

11. Барабой, В. А. Растительные фенолы и здоровье человека/ В. А. Барабой. - М.: Наука, 1984. - 160 с.

12. Барнаулов, О. Д. Введение в фитотерапию/ О. Д. Барнаулов. - СПб.: Издательство «Лань», 1999. - 160 с.

13. Барашков, Г.К. Основы медицинской бионеорганики/ Г.К. Барашков. - М.: Издательство «ЧеРо», 2007. - 516 с.

14. Беликов, В. В. Унифицированная методика определения флавоноидов для стандартизации фитохимических препаратов/ В. В. Беликов// Новые лекарственные препараты из растений Сибири и Дальнего Востока: Тезисы Всесоюзной конференции. - Томск, 1989. - С. 21 - 22.

15. Беликов, П.С. Физиология растений/ П.С. Беликов, Г.А. Дмитриева. -М.:РУДН, 1992,- 172 с.

16. Белякова, A.B. Применение синтетических эфиров высших жирных кислот для экстрагирования листьев крапивы/ A.B. Белякова// Химико-фармацевтический журнал. - 2005. - Т.39, №11. - С. 35-39.

17. Береговых, В.В. Валидация в производстве лекарственных средств/ В.В. Береговых, Н.В. Пятигорская, В.В. Беляев, Ж.И. Аладышева, А.П. Мешковский. - М.: ИД «Русский врач», 2010. - 286 с.

18. Бобкова, Н.В. Изучение влияния измельченности на анатомо-диагностические признаки лекарственного растительного сырья/ Н.В. Бобкова, В.А. Ермакова, И.А. Самылина// Фармация на современном этапе проблемы и достижения. Научные труды ВНИИФ. - М., 2000. - Т. XXXIX, Ч. 2. - С. 204209.

19. Броновицкая, З.Г. Аминокислоты, их производные и регуляция метаболизма/ З.Г. Броновицкая. - Ростов-на-Дону, 1983. - 112 с.

20. Вайс, Р.Ф. Фитотерапия. Руководство: Пер. с нем./ Р.Ф Вайс., Ф. Финтельманн, - М.: Медицина, 2004. - 552 с.

21. Варлаков, М.Н. О растительных кровоостанавливающих средствах/ М.Н. Варлаков// Фармация. - 1993. - № 1. - С. 31-35.

22. Василяускас, Ю.Ф. Некоторые биохимические исследования крапивы двудомной/ Ю.Ф. Василяускас// Съезд фармацевтов Лит. СССР, 2-ой тез. докл. -Литва, 1977.-4.1.-С. 115.

23. Высочина, Г. И. Содержание суммы и некоторых основных флавоноидов в надземной части Polygonum aviculare L., произрастающего в Сибири/ Г.И. Высочина// Растительные ресурсы. - 1998. - Вып. 4. - С. 4754.

24. Гаммерман, А.Ф. Лекарственные растения (растительные целители)/ А.Ф. Гаммерман, Г.Н. Кадаев, А.А. Яценко-Хмилевский. - М.: Высшая школа, 1990.-398 с.

25. Гельтман, Д.В. Некоторые вопросы филогении вида подсекции Urtica рода Urtica (Urticeae)/ Д.В. Гельтман// Ботанический журнал. - 1990. - №6. - С. 840-845.

26. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений/ В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комисаренко, С.Е. Дмитрук. - Новосибирск: Наука сиб. отд-ния, 1990. - 333 с.

27. Голышенко, П.П. Лекарственные растения и их использование/ П.П. Голышенко. - Саранск: Мордовское книжное изд-во,1996. - 291с.

28. Государственная фармакопея СССР: Выпуск 1/ МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1987. - 336 с. с ил.

29. Государственная фармакопея СССР: Выпуск 2/ МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1989. - 400 с. с ил.

30. Государственная фармакопея Российской Федерации / МЗиСР РФ. -12-е изд. - М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения, 2008. - 704 с. с ил.

31. Государственная Фармакопея Республики Белорусь/ под общ. ред. Шерякова А.А. - Минск: УП «Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении», 2007. - Т. 2.-471 с.

32. Гринкевич, Н. И. Лекарственные растения/ Н.И. Гринкевич. - М.: Высш. шк, 1991. - 225с.

33. Гуревич, К.Г. Фитопрепараты в урологии/ К.Г. Гуревич// Фарматека. -2003. -№15.-С. 71 - 75.

34. Елецкая, O.A. Перспективы использования сырья крапивы двудомной в составе мочегонных сборов/ O.A. Елецкая// Актуальные вопросы дерматовенерологии - 2000. - Вып. 3. - С. 42 - 43.

35. Завражнов, В.И. Лекарственные растения: лечебно-профилактическое использование/ В.И. Завражнов, Р.И. Китаев, К.Ф. Хмелев. - Воронеж: Изд-во Воронеж, ун-та, 1993. - 413 с.

36. Запрометов, C.B. Выделение и анализ природных БАВ/ C.B. Запрометов, Е.Е. Сироткина, Е.А. Краснов. - Томск: Изд-во Томск, ун-та, 1987. -184 с.

37. Запрометов, М.Н. Основы биохимии фенольных соединений/ М.Н. Запрометов. - М.: Высшая школа, 1974. - 287 с.

38. Земцова, Г. Н. Сравнительная оценка методов определения суммы флавоноидов в Р-витаминном комплексе/ Г. Н. Земцова, А. Б. Дмитриев// Химико-фармацевтический журнал, 1986. - № 6. - С. 754 - 757.

39. Исаев, Ю. А. Лечение микроэлементами, металлами и минералами/ Ю.А. Исаев. - Киев: Здоровье, 1992. - 118 с.

40. Кабата-Пендиас, А. Микроэлементы в почвах и растениях/ А. Кабата-Пендиас, X. Пендиас. - М., 1989. - 231 с.

41. Кавторадзе, Н.Ш. Химические компоненты Urtica dioica, произрастающей в Грузии/ Н.Ш. Кавторадзе, М.Д. Алания, Дж. Н. Анем// Химия природных соединений. - 2001. - №3. - С.244.

42. Киселева, Т.Л. Лекарственные растения в мировой медицинской практике: государственное регулирование, номенклатура и качество/ Т.Л. Киселева, Ю.А. Смирнова. - М.: Издательство Профессиональной ассоциации натуртерапевтов, 2009. - 295 с. с ил.

43. Клышев, Л.К. Флавоноиды растений (распространение, физико-химические свойства, методы исследования)/ Л.К. Клышев, В.А. Бандюкова, A.C. Алюкина. - Алма-Ата: Наука, 1978. - 220 с.

44. Коломиец, Н.Э. Вопросы стандартизации листьев крапивы двудомной/ Н.Э. Коломиец, Г.И. Калинкина, H.H. Сапронова// Фармация. - 2011. -N 6. - С. 22-24.

45. Комаров, B.JI. Флора СССР/ B.JI. Комаров [и др.]. - М.: Издат. Академия наук СССР, 1966. - Т.5 - 978 с.

46. Коржавых, В. Фитопрепараты на зарубежном фармацевтическом рынке/ В. Коржавых// Фармацевтический мир. - 1997. - №2. - С. 41 - 43.

47. Кочетков, Н.К. Химия биологически активных природных соединений/ Н.К. Кочетков. - М., 1970. - 486 с.

48. Кошечкин, Д.В. Крапива (Urtica)/ Д.В. Кошечкин// Гомеопатия и фитотерапия. - 1997. - №2. - С. 50 - 53.

49. Краснов, Е.А. Выделение и анализ природных биологически активных веществ / Е.А.Краснов, Т.П. Березовская, Н.В. Алексеюк [и др.]. - Томск: Изд-во ТГУ, 1987.- 184 с.

50. Кретович, В. JI. Основы биохимии растений/ B.J1. Кретович.- М.: Высшая школа, 1980. - 445 с.

51. Кристиан, Г. Аналитическая химия/ Г. Кристиан. - М.: Бином, 2007. -

298 с.

52. Крылов, А. А. Руководство по фитотерапии/ А. А Крылов, В. А. Марченко. - СПб: Издательство «Питер» Серия «Современная медицина», 2000.-416 с.

53. Кудрин, A.B. Иммунофармакология микроэлементов/ A.B. Кудрин, A.B. Скальный, A.A. Жаворонков. - М.: Изд. КМК, 2000. - 537 с.

54. Кузнецова, М.А. Сказания о лекарственных растениях/ М.А. Кузнецова, A.C. Резникова. - М.: Высшая школа, 1992 - 272 с.

55. Куркин, В.А., Основы фитотерапии/ В.А. Куркин. - Самара: ООО «Офорт»; ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава», 2009. - 963 с.

56. Кьосев, П.А. Полный справочник лекарственных растений/ П.А. Кьосев. - М.: Эксмо-пресс, 2000. - 992 с.

57. Лавренов, В.К. Полная энциклопедия лекарственных растений/ В.К. Лавренов, Г.В. Лавренова. - СПб.: «Издательский дом Нева»., М.: «ОЛМА-ПРЕСС», 1995. - Т. 1. - С. 206 - 207.

58. Ладыгина, Е.Я., Химический анализ лекарственных растений/ Е.Я. Ладыгина, Л.Н. Сафронич, В.Э. Отряшенкова; под ред. Н.И. Гринкевич, Л.Н. Сафронич. - М.: Высшая школа, 1983. - 176 с.

59. Лапинская, Е.С. Изучение состава липофильной фракции настоек гомеопатических матричных крапивы двудомной и крапивы жгучей/ Е.С. Лапинская// Химико-фармацевтический журнал. - 2008. - Т.42, №12. - С. 26-29.

60. Лежнева, Л.П. Теоретическое и экспериментальное обоснование возможности применения крапивы двудомной в практической медицине [Текст]: дисс. канд. фарм. наук/ Л.П. Лежнева. - Пятигорск, 2010.- 100 с.

61. Лежнева, Л.П. Изучение возможности применения препарата уртифиллин при лечении язвы желудка/ Л.П. Лежнева// Новые лекарственные препараты из растений Сибири и Дальнего Востока. - Томск, 1989. - Т.2 - С. 94 -95.

62. Лекарственные растения Государственной Фармакопеи [Текст]/ под ред. И.А. Самылиной. - М.: Анми, 1999. - 487 с.

63. Лесиовская, Е. Е. Фармакотерапия с основами фитотерапии/ Е. Е. Лесиовская, Л. В. Пастушенков: 2-е изд. доп. - М.: ГЭОТАР-МЕД Серия «XXI век», 2003.-592 с.

64. Листов, С.А. О содержании тяжелых металлов в лекарственном растительном сырье/ С.А. Листов, Н.В. Петров, А.П. Арзамасцев// Фармация. -1990. - №2.-С. 19-25.

65. Листов, С.А. Содержание тяжелых металлов в настоях и отварах из лекарственного растительного сырья/ С.А. Листов, Г.А. Непесов, Э.С. Сахатов// Фармация. - 1992. - №4. - С. 37 - 41.

66. Листов, С.А. Изучение влияния измельченности лекарственного растительного сырья на степень извлечения микроэлементов/ С.А. Листов//

Реализация научных достижений в практической фармации. - 1991. - С. 197 — 198.

67. Литвиненко, В. И. Природные флавоноиды/ В.И. Литвиненко. -Харьков, 1995.-56 с.

68. Ловкова, М. Я. Почему растения лечат/ М.Я. Ловкова, А. М. Рабинович, С. М. Пономарева [и др.]. - М.: Наука, 1990. - 256 с.

69. Макаренко, А. Б. Клиническая классификация растительных лекарственных средств / А. Б. Макаренко // Врачебное дело. - Киев: Здоровье, 1994.-№3-4.-С. 47-51.

70. Максимова, И. Целительная крапива/ И. Максимова. - С-Пб.: ИК «Невский проспект», 2001. - 128 с.

71. Марахова, А.И. Методологические подходы к использованию спектрофотометрии в анализе лекарственного растительного сырья [Электронный ресурс]/ А.И. Марахова, H.H. Федоровский, Т.А. Скалозубова, A.C. Аврач, A.A. Сорокина, Е.В. Сергунова// Электронный научный журнал «Медицина и образование в Сибири»: - 2011. - №5. - Режим доступа: http://www.ngmu.ru/cozo/mos/article/text_full.php?id=526. - Загл. с экрана.

72. Марахова, А.И. Спектрофотометрия в анализе сборов [Электронный ресурс]/ А.И. Марахова, A.C. Аврач, Т.А. Скалозубова, A.A. Сорокина, Е.В. Сергунова, H.H. Федоровский// Электронный научный журнал «Медицина и образование в Сибири». - 2012. - №2. Режим доступа: http://www.ngmu.ru/cozo/mos/article/text_full.php?id=706. - Загл. с экрана.

73. Машковский, М.Д. Лекарственные средства/ М.Д. Машковский . - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Издательство "Новая волна"», 2005. -1200 с. с ил.

74. Медик, В. А. Руководство по статистике в медицине и биологии. В 2-х томах / В. А. Медик, М. С. Токмачев, Б. Б. Фишман; под ред. проф. Ю.М. Комарова. - М.: Медицина, 2000. - Т. 1. Теоретическая статистика. - 412 с.

75. Меньшикова, Н.Л. Применение крапивы двудомной в комплексном лечении эксудативно-катарального диатеза у детей в период диспансерного

наблюдения/ H.JI. Меньшиков// Актуальные проблемы аллергии в педиатрии. -М., 1987. -№4.2-С. 301.

76. Минаева, В. Г. Лекарственные растения Сибири / В. Г. Минаева. - 5-е изд., перераб. и доп. - Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, 1991. - 431 с.

77. Минина, С. А. Химия и технология фитопрепаратов/ С.А. Минина, И. Е.Каухова. - М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. - 560 с. с ил.

78. Мирошников, В. М. Лекарственные растения и препараты растительного происхождения в урологии/ В.М. Мирошников. - М.: МЕДпресс-информ, 2005. - 240 с. с ил.

79. Молчанов, Г.И. Целебные травы/ Г.И. Молчанов. - Ростов на Дону, 1993.-247 с.

80. Муравьев, И.А. Исследования по разработке таблеток с суммарным водорастворимым препаратом из крапивы двудомной// Фармацевтический журнал. - 1990. -№1.-С. 47-49.

81. Никитина, Л.Е. Физические методы идентификации органических соединений/ Л.Е. Никитина, В.В. Племенков. - Казань, 2003. - 92 с.

82. Носаль, М.А. Лекарственные растения в народной медицине/ М.А. Носаль, И.М. Носаль. - М.: «Внимиберика», 1991. - 256 с.

83. Носов, А. М. Лекарственные растения/ A.M. Носов. - М.: ЭКСМО-Пресс, 1999.-350 с.

84. Нуралиев, Юсуф. Лекарственные растения/ Юсуф Нуралиев. -Н.Новгород, 1991.-223 с.

85. Ожигова, М.Г. Количественное определение суммарного содержания флавоноидов в листьях Urtica dioica спектрофотометрическим методом/ М.Г. Ожигова, М.В. Богма// Растительные ресурсы. -2006. - Вып. 2. - Т.42. - С. 183 -186.

86. Олейников, Д.Н. Методики количественного определения суммарного содержания органических кислот в растительном сырье/ Д.Н. Олейников, Л.М. Танхаева, Г.Г. Николаева, A.A. Маркарян// Растительные ресурсы. - 2004. - вып. З.-С. 112-117.

87. Олешко, Г.И. Разработка унифицированной методики количественного определения суммы свободных аминокислот в лекарственном растительном сырье и экстракционных препаратах/ Г.И. Олешко, Т.И. Ярыгина, Е.В. Зорина, М.Д. Решетникова// Фармация. - 2011. - №3. - С. 14-17.

88. Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения [Текст]: ОСТ 91500.05.001-00. - Введ. 01.03.2000. - М.: Изд-во стандартов, 1999. -23 с.

89. Патудин, A.B. Биологически активные вещества гомеопатического лекарственного сырья [Текст]/ A.B. Патудин, Н.С. Терешина, B.C. Мищенко, Л.И. Илченко. - М.: Знак, 2009. - 588 с.

90. Перешукова, A.M. Флавоноидные соединения листьев крапивы двудомной/ A.M. Перешукова, Г.П. Сафронова, Н.Я. Антонова, Р.Ф. Арбузина// РЖ Лекарственные растения. - 1991. - №8. - С.7.

91. Петрищева, В.О. Фармакогностическое изучение растений рода Urtica L. [Текст]: дисс. канд. фарм. наук/ В.О. Петрищева; Национальная медицинская академия последипломного образования имени П.Л. Шупика. - Киев, 2008. - 168 с.

92. Петров, Н.В. Определение микроэлементов в лекарственном растительном сырье, заготовленном в Московской области/ Н.В. Петров// Фармация. - 1993. - Т.42. - №3. - С.44 - 48.

93. Пецуха, B.C. Фармакогностическое изучение крапивы коноплевой (Urtica cannabina L.) [Текст]: дисс. канд. фарм. наук/ B.C. Пецуха - Улан-Удэ, 2009.- 163 с.

94. Пластинина, З.А. Характеристика крапивы коноплевой как биологически активного сырья/ З.А. Пластинина, Т.Ф.Чиркина, Д.Б. Бураева, М.Д. Гончикова// Тибетская медицина: состояние и перспективы исследований: сб. научных работ СО РАН. - Улан-удэ, 1994. - С. 76 - 68.

95. Пузаков, С.А. Химия/ С.А. Пузаков. - М.: Медицина, 1995. - 624 с.

96. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование семейства Urticaceae. - Л.: Наука, 1988. - 357 с.

97. Ратахина, JI.В. Некоторые фармацевтические свойства настоя крапивы двудомной/ Л.В. Ратахина, Н.И. Суслов, Н.Г. Пашинский// Актуальные проблемы фармакогнозии и поиск новых лекарственных препаратов. - 1984. - Т.З. - С.31 -33.

98. Ратахина, Л.В. Фармакологические свойства препаратов крапивы двудомной [Текст]: автореф. дисс. канд. фарм. наук/ Ратахина Л.В. - Москва, 1990.-25 с.

99. Руженкова, И. В. Основы фитотерапии/ И. В. Руженкова. - Ростов-на-Дону: «Феникс», Серия «Медицина для вас», 2005. - 192 с.

100. Самылина, И.А. Определение Сахаров спектрофотометрическими методами/ H.A. Самылина, И.П. Рудакова, Ж.И. Аладышева, C.B. Ковалева// Фармация. - 2009. - №4. - С. 3 - 5.

101. Самылина, И.А. Фармакогнозия. Атлас в 3-х томах/ H.A. Самылина, В.А. Ермакова, Н.В. Бобкова, О.Г. Аносова. - М.: ГЭОТАР - Медиа, 2009. - Т.1. -192 с.

102. Самылина, H.A. Фармакогнозия. Атлас в 3-х томах/ H.A. Самылина, В.А. Ермакова, Н.В. Бобкова, О.Г. Аносова. - М.: ГЭОТАР - Медиа, 2009. - Т.2. -384 с.

103. Самылина, И.А. Фармакогнозия. Атлас в 3-х томах/ И.А. Самылина, В.А. Ермакова, Н.В. Бобкова, О.Г. Аносова. - М.: ГЭОТАР - Медиа, 2009. - Т.З. -488 с.

104. Сапронова, H.H. Изучение ресурсов лекарственных растений в целях их рационального использования и охраны [Текст]: автореф. дисс. канд. фарм. наук: 15.00.02/ Сапронова H.H. - Москва, 1989. - 24 с.

105. Сапронова, H.H. Содержание витамина К] и некоторых микроэлементов в Urtica dioica L./ H.H. Сапронова, Н.И. Гринкевич, Л.П. Орлова [и др.]// Растительные ресурсы. - 1989. - вып. 2. - том 25. - С. 243 - 247.

106. Сергунова, Е.В. Исследования по стандартизации плодов шиповника и лекарственных форм на его основе [Текст]: дисс. канд. фарм. наук/ Е.В. Сергунова. - Москва, 2002. - 150 с.

107. Скальный, А. В. Химические элементы в физиологии и экологии человека / А. В. Скальный. - М.: Издательский дом «ОНИКС 21 век»: Мир, 2004. -216 с. с ил.

108. Соколов, С. Я. Фитотерапия и фитофармакология: Руководство для врачей/ С. Я. Соколов. - М.: Медицинское информационное агентство, 2000. - 976 с.

109. Соколов, C.JI. Справочник по лекарственным растениям (фитотерапия)/ C.JI. Соколов, И.П. Замотаев. - М.: Металлургия, 1989. - 428 с.

110. Сорокина, A.A. Теоретическое и экспериментальное обоснование стандартизации настоев, отваров и сухих экстрактов из лекарственного растительного сырья [Текст]: дисс. докт.фарм.наук: 14.04.02/ A.A. Сорокина; ММА им. И.М. Сеченова. - М., 2002. - 269 с. с ил.

111. Сошникова, О.В. Изучение химического состава и биологической активности растений рода крапива [Текст]: дисс. канд. фарм. наук: 14.04.02/ О.В. Сошникова; КГМУ. - Курск, 2006. - 214 с. с ил.

112. Спирова, С.Н. Определение микроэлементов в лекарственном растительном сырье, заготавливаемом в Московской области/ С.Н. Спирова, В.И. Шиянов, С.С. Стуловский [и др.]// Фармация. - 1993. - Т. XIII., № 3. - С. 44 - 48 .

113. Степанюк, С.Н. Определение полисахаридного комплекса алтея лекарственного в листьях и экстракте сухом/ С.Н. Степанюк, Н.В. Никитина, Н.В. Причиненко// Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. трудов. - Пятигорск, 2008. - Вып. 63. - С. 336 - 337.

114. Тимофеев, В.В. Изучение состава БАВ шрота крапивы/ В.В. Тимофеев// Тез. докл. «Основные направления работы по улучшению качества лекарственных средств». - Харьков, 1983. - Ч. 1 - С. 89.

115.Ушанова, В.А. Исследование влияния условий произрастания на химический состав крапивы двудомной/ В.А. Ушанова, О.И. Лебедева, С.М. Репях// Химия растительного сырья. - 2001. - №3. - С.97 - 104.

116. Фитотерапия с основами клинической фармакологии/ Под ред. В.П. Кукеса. - М.: Медицина, 1999. - 192 с.

117. Чиков, П.С. Лекарственные растения — путь к здоровью/ П.С. Чиков. - М.: Медицина, 1997. - 489 с.

118. Фрумина, Н.С. Аналитическая химия кальция/ Н. С. Фрумииа, Е. С. Кручкова, С. П. Муштакова. - М.: Изд-во «НАУКА». - 1974. - 246 с.

119. Bakker, J. Water soluble acids from Urtica dioica L./ J. Bakker, E. Thorsen, A. Nordal// Medd. Norsk. Farv. Selskap. - 1978. - Vol. 40. - №30. - p. 181 - 187.

120. Bate-Smith, E.C. The commoner phenolic constituents of plants and systematic distributor/ E.C. Bate-Smith // Sei. Droc. Poy. Dubbin. Soc. - 1956. - Vol. 27.-N.6-P. 165.

121. Bate-Smith, E.C. The phenolic constituents of plants and their taxonomic significance/ E.C. Bate-Smith // I. Soc. London: Botany. - 1962. - Vol. 58 - N. 371. -P.95 - 175.

122. Bisset, N. Herbal Drugs and Phytopharmaceuticals: A handbook for practice on a Scientific basis / N. Bisset. - CRC Press, Boca Raton. - 1994. - 566 p.

123. British Pharmacopoeia 2009: Volume IV/ British Pharmacopoeia Commission. - London, 2009. - 10952 p.

124. Bryant, C.T. A note of differentiation between flavonoid glycoside and their aglicones/ C.T. Bryant // J. Amer. Assoc. Sei. Ed. - 1950. - Vol. 39. - N.8. - P.480 -489.

125. European Pharmacopoeia 7.0: Volume I/ European Pharmacopoeia Commission. - 2010. - 1812 p.

126. Fijalek, Z. Determination of some micro- and macroelements in pfeparations made from peppermint and nettle leaves/ Z. Fijalek, K. Soltyk, A. Lozak// Pharmazie. - 2003. - Vol. 58. - p. 480 - 482.

127. Fliberg, L. Handbook on the Toxicology of Metals/ L. Fliberg, G. F. Nordberg, V. В. Vouk. - Amsterdam; New York; Oxford. - 1986. - Vol. 11. - P. 12 -15.

128. Harborne, J. B. Comparative biochemistry of the flavonoids/ J. B. Harborne. - London; New York. - 1967. - 383 p.

129. Harborne, J. B. Plant polyphenols. Characterization of flavonoid glycosides by acidic and enzimic hydrolysis/ J. B. Harborne// Phytochemistry. - 1965. - Vol.4. -N.l. - P.1207 - 1209.

130. Harborne, J. B. The chromatography of the flavonoid pigments/ J. B. Harborne// J. Chrom. - 1959. - Vol.2. - N.6 - P. 581 - 604.

131. Validation of analytical procedures: methodology Q2B/ Intern, conf. on harmonization of technical requirements for registration of pharmaceuticals for human use. - Geneva: ICH Secretariat, 1996. - 8 p.

132. Wagner, H. Biologically active compounds from the aqueous extract of Urtica dioica/ H. Wagner, F. Wilier, B. Kreher// Plante Med. - 1989. - Vol. 55 (5). - P. 452-454.

133. www.microelements.ru

134. www.ecosystem.com

135. www. med.israelinfo.ru/articles/2/70/

{5>г