Изучение изменчивости проростков Larix gmelinii под воздействием экзотоксинов биоинсектицида тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.03.01, кандидат сельскохозяйственных наук Воронина, Ольга Евгеньевна

• Воронина, Ольга Евгеньевна
• кандидат сельскохозяйственных наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат сельскохозяйственных наук Воронина, Ольга Евгеньевна

Введение

Глава 1 Обоснование экологической проблемы применения энтомоцидных экзотоксинсодержапдах бактериальных препаратов.

Глава 2 Объекты и методы исследования.

2.1 Экзотоксины Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis.

2.2 Количественное определение ß- и р2-экзотоксинов в энтомоцидном бактериальном препарате битоксибациллине.

2.3 Характеристика объектов исследования

2.4 Методы исследования изменения состояния растений.

Глава 3 Исследование влияния ß- и р2-экзотоксинов биоинсектицидов битоксибациллина и лепидоцида на биометрические показатели проростков Larix gmelinii и Pisum sativum.

3.1 Особенности измерения биологических показателей проростков лиственницы и гороха в процессе онтогенеза.

3.2 Изучение изменений ряда биометрических показателей проростков лиственницы под воздействием ß- и Рг-экзотоксинов из битоксибациллина.

3.3 Сравнительный анализ роста и развития проростков высших растений под действием экзотоксинов из битоксибациллина.

3.4 Сравнительное изучение воздействия |3- и (^-экзотоксинов и энтомоцидных препаратов битоксибациллина и лепидоцида на биометрические показатели проростков лиственницы.

Глава 4 Воздействие экзотоксинов на пигментный аппарат и процесс фотосинтеза растений.

4.1 Количественное исследование содержания пигментов в проростках лиственницы и гороха, выращенных в среде с экзотоксинами.

4.2 Изучение спектров поглощения спиртовых экстрактов пигментов и гомогенатов растений, выращенных на среде с экзотоксинами.

4.3 Исследование состояния пигментных систем проростков лиственницы {1,апх %те1тп) и гороха {Пхит тИхит\ выращенных в присутствии р- и рг-экзотоксинов, методом низкотемпературной (77,2°К) флуоресценции.

4.4 Изучение особенностей протекания процесса фотосинтеза у проростков растений, выращенных в присутствии экзотоксинов энтомоцидного биопрепарата битоксибациллина.

Глава 5 Изучение влияния экзотоксинов битоксибациллина на темновые и световые стадии процесса биосинтеза хлорофилла у лиственницы (,Ъаггх £теНпИ).

5.1 Фотопревращение протохлорофиллида у растений.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение изменчивости проростков Larix gmelinii под воздействием экзотоксинов биоинсектицида»

Актуальность темы диссертации.

На смену химическим пестицидам, отрицательно зарекомендовавшими себя с экологической точки зрения, в конце XIX и в начале XX столетия, приходят биологические. В 1990 году выпуск биологических энтомоцидных препаратов в СССР составил более 10 ООО тонн. Основная масса выпущенных биоинсектицидов была представлена тремя препаратами (Африкян, 1970) битокси бацилл и ном, дендробациллином и лепидоцидом. Продуцентами указанных биологических пестицидов служили бактерии вида Bacillus thuringiensis.

Известно (Ohba et. al., 1981), что одним из основных энтомоцидных компонентов битоксибацилдина является ß-экзотоксин (ß-ЭТ), вещество нуклеотидной природы. Впервые обнаруженный Мс. Connel и Richards в 1959 году ß-ЭТ синтезируется многими подвидами бактерий Bacillus thuringiensis. Однако, исследованиями последних лет (Ефимцев и др., 1988-1999) было обнаружено, что кроме ß -ЭТ некоторые подвиды вышеупомянутых бактерий синтезируют экзогенный метаболит, близкой ß-ЭТ природы. Было установлено (Ефимцев и др., 1998), что в энтомоцидных препаратах дендробациллине и лепидоциде, не содержащих ß-ЭТ, присутствует экзогенный метаболит названный экзотоксином (ß2-3T). Изучение свойств этого экзотоксина показало, что он обладает энтомоцидной активностью, а структура его молекулы близка ß-ЭТ. 6

Природа двух токсинов - адениннуклеотиды. Было обнаружено (Лескова и др., 1989), что ß -ЭТ, присутствующий в битоксибациллине, оказывает воздействие на рост и развитие сельскохозяйственных растений. Другими исследователями (Ефимцев и др., 1989) было показано, что именно ß-ЭТ и ß 2-ЭТ оказывают глубокое влияние на растения. Известно (Sebesta et. al., 1969), что воздействие ß-ЭТ происходит в результате его влияния на ДНК-зависимую РНК полимеразу в клетке. Обработка проростков ß -ЭТ и ß 2-ЭТ (Валентирова, 1992) приводила к изменениям генетического аппарата растений.

Таким образом, широкое применение энтомоцидных биологических препаратов, синтезируемых на основе Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis (битоксибациллин), Bacillus thuringiensis subsp. dendrolimus (дендробациллин), Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki ( лепидоцид), может привести к необратимым изменениям в arpo- фитоценозах. Обработка биопрепаратами вредителей леса и сельскохозяйственных угодий приобрела неконтролируемый характер из-за отсутствия количественных методов определения экзотоксинов в препаратах и слабой изученности их влияния на растения.

Цель исследования. Заключалась в определении характера и особенностей воздействия ß- и ß 2- экзотоксинов энтомоцидного бактериального препарата битоксибациллина на проростки голо- и покрытосеменных растений.

Задачи исследования:

1 Выделение и количественное определение и р2- экзотоксинов в промышленном биопрепарате битоксибациллин.

2. Изучение влияния экзотоксинов битоксибациллина на биометрические показатели проростков лиственницы и гороха.

3. Воздействие экзотоксинов биоинсектицида на пигментный аппарат и процесс фотосинтеза растений.

4. Изучение влияния экзотоксинов битоксибациллина на процесс биосинтеза хлорофилла у проростков лиственницы.

Научная новизна: Впервые изучено индивидуальное влияние Р - и 02- экзотоксинов, выделенных из битоксибациллина, на биометрические показатели проростков лиственницы (Larix gmelinii (Rupr.) Rupr.) (далее-лиственница), из семян, собранных с маточников в популяциях России и Китая, а так же гороха (Pisum sativum L.) сорта Торсдаг ( далее- горох).

У двух видов растений обнаружена зависимость между изменениями биометрических параметров проростков и концентрацией каждого из токсинов. Возрастание концентраций экзотоксинов в среде приводило к уменьшению длины гипокотиля у 8 лиственницы и стебля у гороха, корней у этих видов растений, что отражалось в снижении их биомассы на 20-35%. Изменялась пространственная ориентация корневой системы проростков, что свидетельствовало о потере ими геотропизма. Показано, что нарушение темновых стадий биосинтеза хлорофилла и подавление процесса фотосинтеза является одной из причин, отмеченных эффектов торможения роста и развития проростков. Ранее были выявлены случаи малой активности промышленных препаратов битоксибациллина. Причина этого была неясна. В результате проделанной нами работы получены дополнительные сведения, позволяющие объяснить утрату биологической активности промышленного препарата. Так, в ходе роста проростков лиственницы и гороха на фоне разных концентраций только р2-экзотоксина отмечали эффект подавления роста и синтеза хлорофилла. В этом случае, как правило, в конце опыта наблюдали гибель растений. Однако совместное воздействии и р2-экзотоксинов снимало отмеченный эффект. Есть данные, что два токсина образуют комплекс (Шабарова, 1976 ), который, вероятно, биологически малоактивен. Поэтому именно увеличение отношения |3-ЭТ к р2-ЭТ в конкретном товарном препарате в ряде случаев могло быть причиной его низкой биологической активности.

Отсутствие изменений формы спектра поглощения образца в опыте против контроля свидетельствует о неизменности соотношения различных форм хлорофилла в обеих вариантах. Соотношение форм хлорофилла а и Ь в спиртовые экстрактах из проростков при воздействии экзотоксинов и их суммы по сравнению с контролем в наших экспериментах было неизменным. Однако, форма спектра поглощения гомогената проростков в опыте (на фоне экзотосинов и их суммы) заметно отличалась от контрольного варианта. Поэтому сделан вывод о влиянии экзотоксинов именно на пигмент-белковый комплекс фотосинтетического аппарата растения. По изменению уровня фотосинтеза, формы кинетических и световых кривых семядолей лиственницы и листьев гороха доказано отрицательное воздействие экзотоксинов на растения. При увеличении содержания экзотоксинов в среде отмечали падение скорости выделения кислорода на свету. Следует отметить, что на проростках гороха выделение кислорода на свету при всех вариантах обработки растений вообще не происходило. Однако, непосредственно после выключения света в том же опыте в темноте следовал выброс кислорода. Темновой выброс кислорода позволяет исключить участие механизма Мёлера в световой части эффекта.

10

Сам эффект, по нашему мнению, предполагает временное торможение фотолиза воды и/или перехват фотосинтетического кислорода по неизвестному механизму.

Полученные результаты, в свою очередь, подтверждаются наблюдаемой взаимосвязью между процессами падения скорости фотосинтеза, изменениями в пигмент-белковом комплексе и биосинтезе хлорофилла.

В темноте биосинтез хлорофилла у этиолированных проростков лиственницы и гороха подавлен. В спектре флуоресценции наблюдали единственный максимум при длине волны 655 нм (Пхс,55). Освещение образца приводило к образованию флуоресцирующих форм хлорофилла при длине волны 685,696 (главный максимум) и 734 нм. Следует отметить, необычное для выращивания этиолированных проростков лиственницы на фоне Р -экзотоксина явление формирования у них как I, так и II фотосистем даже в темноте. В отличие от Р - экзотоксина в случае выращивания этиолированных проростков лиственницы в присутствии Рг-экзотоксина отмечали лишь частичное формирование II фотосистемы . В спектре флуоресценции этиолированного проростка помимо максимумов 685 и 696 нм также наблюдали полосу с максимумом 655 нм. Однако, в этом случае I фотосистема

II полностью отсутствовала. Оба токсина были способны к запуску механизма биосинтеза хлорофилла в темноте. При этом, в случае Р~ экзотоксина процесс биосинтеза хлорофилла в темноте у этиолированных проростков не был завершен. Поэтому ' биологические активности р— и р2- экзотоксинов различны.

Итак, нами установлено, что /3- и Р2- экзотоксины биопрепаратов специфично влияют на темновой биосинтез протохлорофиллида и протекание процесса его фотопревращения в хлорофиллид и хлорофилл.

Практическая значимость исследования. Известно, что рекомендуемые фирмой-производителем дозы при применении битоксибациллина варьируют в 2-2,5 раза. Это происходит из-за отсутствия количественных данных по содержанию в нём экзотоксинов. Установлено, что допустимая концентрация битоксибациллина и лепидоцида для применения на лиственнице и горохе должна быть снижена, как физиологически не обоснованная.

Изучение воздействия битоксибациллина показало, что его применение, в рекомендуемых фирмой дозах, приводит к

12 изменению онтогенеза проростков, физиологическим и биохимическим нарушениям.

Показана видоспецифичность в действии каждого из экзотоксинов на растения, что указывает на необходимость дифференцированного подхода при применении препаратов содержащих ß~ и ß2-(битоксибациллин) или только ß2-3T (лепидоцид, дендробациллин).

Результаты работы позволяют сделать вывод о прямом неблагоприятном биологическом воздействии ß- и ß2- ЗТ {Bacillus thuringiensis sabsp. thuringiensis ) на рост и развитие растений и о необходимости введения количественного контроля за их содержанием в промышленных препаратах (битоксибациллине, дендробациллине, лепидоциде).

На защиту выносится следующее положение: оценка характера и особенностей воздействия ß-и ß 2- экзотоксинов энтомоцидного бактериального препарата битоксибациллина на растения.

Апробация работы.

Результаты работы были доложены на II съезде Биохимического общества Российской Академии Наук (Пущино, 1997), на IY международной конференции «Регуляторы роста и

13 развития растений» (Москва, 1997); на конференции «Мониторинг состояния зеленого фонда города» (Москва, 1999).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 3 тезисов, на указанных выше - съезде и конференциях, 1 статья в журнале «Физиология растений», 2 методических указания.

Структура диссертации: Диссертация содержит следующие разделы: введение, материалы и методы исследования, результаты и их обсуждение, отраженные в 5 главах, в которые вошли литературные данные, результаты экспериментов и их обсуждение. Отдельно даны, выводы, список литературы (128 источников) и приложение. Работа изложена на 168 страницах машинописного текста и включает 12 таблиц, 41 рисунок, 5 фотографий.

Заключение диссертации по теме «Лесные культуры, селекция, семеноводство», Воронина, Ольга Евгеньевна

Выводы и практические предложения.

Доказано, что для экзотоксинов бактериального энтомоцидного препарата битоксибациллина характерно угнетающее действие на рост и развитие растений. Подавление биосинтеза хлорофилла является одной из основных причин, отмеченных эффектов торможения роста и ингибирования развития проростков, выращенных на фоне экзотоксинов.

Установлено ингибирование фотосинтеза проростков лиственницы и гороха под действием р- и р2- экзотоксинов, оцененное по изменению формы и уровня кинетических и световых кривых выделения кислорода.

Доказано, что Рг- экзотоксин обладал большей биологической активностью, чем Р- экзотоксин. Применение смеси Р~ и р2 - экзотоксинов снижало ингибирующий эффект, вызванный Рг - экзотоксином. Последнее свидетельствует о частичной потере биологической активности р2- экзотоксина в присутствии р-экзотоксина.

Обнаружено, что в отличие от спектров поглощения спиртовых растворов пигментов формы спектров поглощения гомогената проростков в контроле и опыте заметно различались. По-видимому, это было связано с влиянием экзотоксинов на пигмент - белковый комплекс.

Доказано различие в характере влияния экзотоксинов на темновые стадии процесса биосинтеза хлорофилла, р - экзотоксин индуцировал механизм

144 гемнового синтеза хлорофилла у этиолированных проростков лиственницы, формируя фотосистему I и II. 02 - экзотоксин частично инициировал процесс Зиосинтеза хлорофилла. В этом случае отмечали формирование только фотосистемы II.

Установлено, что спектры флуоресценции проростков лиственницы и гороха, зыращенных на свету, существенно различаются по форме, в зависимости от типа яспользуемых токсинов, их концентрации и вида растений.

Рекомендованы, апробированы и дополнены методы биологической лгектрофотометрии растений и оценки уровня фотосинтеза в качестве основы экспресс - анализа их прижизненного состояния.

145

Список литературы диссертационного исследования кандидат сельскохозяйственных наук Воронина, Ольга Евгеньевна, 2000 год

1. Акулович U.K., Орловская К.И., Паршикова Т.А. Характеристика процессов накопления протохлорофиллида и образования егс^пектральных форм в развивающихся этиолированных растениях//Минск. Хлорофилл. 1974. с. 168-178.

2. Алешина O.A., Заикина И.Н., Раковская Н.И. Бактериальные инсектициды// Обзор ОНТИ ТЭИ. М. Микробиопром. 1978.172 с.

3. Африкян Э.К. Бактериальные инсектициды и их применение. // Известия АН СССР. М. 1970. Т. 1. с. 14-28.

4. Бейли Л. Безвредность патогенов насекомых для полезной энтомофауны// Микроорганизмы в борьбе с вредными насекомыми и клещами. М. Колос. 1976. с.67-75.

5. Бейли Н. Статистические методы в биологии// М. Из-во иностранной литературы. 1962. 260 с.

6. Беляева О.Б., Литвин Ф.Ф. Фото- био- синтез хлорофилла // М. Из-во МГУ. 1989. 104с.146

7. Бобров Е.Г. Лесообразующие хвойные леса СССР. // Ленинград. Наука. 1978. 187с.

8. Бреев К.А. Новые аспекты методологии борьбы с паразитами в связи с проблемой охраны среды// Труды сельскохозяйственной микробиологии. 1980. Т.48. с.209-210.

9. Булыгин Н.Е. Дендрология//Лен-д. Агропромиздат. 1991. 352 с.

10. Валентирова О.Б. Влияние бета-экзотоксинсодержащих биоинсектицидов на сосну обыкновенную// Автореферат на соискание степени кандидата биол. наук. Москва. 1992. 24с.

11. Власенок Л.И., Шлык A.A. Хлорофиллид, как промежуточный продукт в процессе превращения протохлороф илла в хлорофилл //Биохимия. М. 1963. Т. 42. с. 57-64.

12. Воробьева Л.М., Борисова М.И., Красновский A.A. Фитольные и безфитольные формы пигментов в листьях и гомогенатах // Биохимия. М. 1963. Т.12 . С. 524-534.

13. Глушкова А.И., Кац М.Б., Данилова М.Б. Микробные инсектициды, содержащие термостабильный экзотоксин// Обзорная информация. ВНИИСЭНТИ. 1985. 38 с.

14. Годнев Т.Н. и др. К вопросу о непосредственном предшественнике хлорофилла // Бюлл. Ин-та биологии АН БССР. 1958. с.89-95.

15. Годнев Т.Н. и др. О реакции перехода протохлорофиллида // Физиология растений. М. 1959. т.6. с. 36-41.

16. Годнев Т.Н. и др. О синтезе хлорофилла в темноте у покрытосеменных растений // М. Физиология растений. 1959. Т.6 с. 56-64.

17. Годнев Т.Н., Терентьева М.А. О превращении протохлорофиллида в хлорофилл в этиолированных листьях кукурузы // М. ДАН СССР. 1952. Т. 83. с. 725-727.

18. Гуляев Б. А. Спектральные методы исследования стационарных свойств биологических систем. Динамические спектральные методы исследования биологических систем // М. Высшая школа. 1988. С. 6-110.

19. Гуляев Б. А., Литвин Ф.Ф. К вопросу о единой системе агрегированных форм фотосинтетических пигментов в клетках высших растений, водорослей и бактерий // Биофизика. М. 1967. Т.12. вып.5. с. 845-854.

20. Данилова Э.Б., Барабанова Н.М. Спектрофотометрическое определение ß-экзотоксина в культуральной жидкости Bacillus thuringiensis // М. Труды ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии. 1985.С. 115 119.

21. Ефимцев Е.И., Буров Г.П., Соломин A.A., Юдина Т.Г., Егоров Н.С. Определение роли компонентов битоксибациллина впроявлении его биологической активности// Антибиотики и химиотерапия. М. 1989. Вып. 34. № 11. с. 841-846.

22. Ефимцев Е.И. Экологические аспекты применения экзотоксиносодержащих биопрепаратов на сосне обыкновенной.// автореферат на соискание ученой степени доктора биологических наук. Москва. 1994. 48 с.

23. Ефимцев Е.И. Полярографический метод исследования спектров действия и кинетики газообмена 02 при фотобиолог ических процессах// М. Физиология растений. 1978. Г.25. №4. с. 45-49.

24. Ефимцев Е.И., Буров Г.П. Авторское свидетельство № 1745172 от 8.03.1992.

25. Ефимцев Е.И., Буров Г.П. Обнаружение и некоторые свойства Рг-экзотоксина, синтезируемого Bacillus thuringiensis //Достижения биотехнологии агропромышленному комплексу. Черновцы, тез. докладов. 1991. с. 151.

26. Ефимцев Е.И., Буров Г.П., Воронина O.E., Мао Цзи Цзюнь. Регуляция метаболизма бактерий энтомоцидными экзотоксинами // Тезисы докладов на Втором съезде Биохимического общества Российской Академии Наук. М. 1997. с. 188.

27. Ефимцев Е.И., Буров Г.П., Соломин A.A. Количественное определение Рг-экзотоксина Bacillus thuringiensis в инсектицидных биопрепаратах// М. Биол. Науки. 1990. №2. с.119 126.

28. Ефимцев Е.И., Воронина O.E. Методические указания по дисциплине «Радиационная экология леса»// М. Из-во Московского государственного университета леса. 1997.44с.

29. Ефимцев Е.И., Воронина O.E. Методические указания по проведению исследований фотоиндуцированного обмена кислорода у проростков древесных растений и водорослей полярографическим методом//М. МЛТИ. 1989. 20 с.

30. Знаменский B.C., Куприянова В.А. Из практики применения биопрепаратов в защите леса// Лесное хозяйство. 1983. №12. с.63-64.

31. Иванов Г.М. Влияние культуральных жидкостей экзотоксинпродуцирующих кристаллообразующих бактерий на проростки гороха// Зональные системы защиты растений от вредителей и болезней в Сибири. Новосибирск. 1981. с. 132-135.150

32. Иванов Г.М., Серебренникова Л.Г1. Влияние энтомопатогенных бактерий на рост проростков и корней пшеницы и гороха// Сибирский вестник с/х науки. 1980.№ 6. с.57-58.

33. Игаунис Г.А. Биологические основы ускоренного выращивания сеянцев древесных пород// Рига. Зинатие. 1974. 133 с.

34. Казакова А. С. Фотоиндуцированное и темновое образование первичных и агрегированных форм хлорофилла у некоторых голосеменных растений // Автореферат на соискание степени кандидата биологических наук. М. МГУ. 1977. 24 с.

35. Калер В.А., Подчуфарова Г.М. Световое управление скоростью ресинтеза протохлорофиллида в этиолированных проростках ячменя // Минск. Физиолого-биохимические исследования растений. 1967. с. 27-34.

36. Кандыбин Н.В. и др. БТБ новый эктомоцидный препарат// Тезисы докладов YI.II международного конгресса по защите растений.М. 1975. с. 163-164.

37. Кандыбин Н.В. Микробиологические средства защиты растений// Научные основы защиты растений. М. Колос. 1984. с. 175-199.

38. Кандыбин Н.В. Специфика действия микробиопрепаратов// Защита растений. М. 1987. №12. с.35-40.151

39. Кандыбин Н.В., Барбашова Н.М. Эффективность БТБ-202 против колорадского жука, совок и других вредных насекомых// Сб. Научных трудов ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии. 1976. Т.45. с. 78-96.

40. Кандыбин Н.В., Лескова А.Н., Мельникова Е.А. Распределение и сохранность БТБ при обработке им растений картофеля и томатов// Сельскохозяйственная биология. 1982. №3. с. 323-326.

41. Кандыбин Н.В., Струсь A.A. Экологические принципы применения битоксибациллина против колорадского жука// Бюлл. ВПС МОББ. 1987. № 18. с. 1-12.

42. Касымжанова Г.С., Махно Н.М. Некоторые морфологические изменения в тканях кур при обработке их турингином// Труды ВНИИВС. 1976. Т.52. с.42-44.

43. Кац Б.М. Характеристика чистоты образцов термостабильного ß-экзотоксина// Проблемы ветеринарной санитарии. М. Минздрав СССР. 1971. с. 11-13.

44. Король И.Т., Романовен З.А. Роль битоксибациллина и боверина в снижении численности колорадского жука// Защита растений. Минск. 1983. с.85-93.

45. Красновский A.A., Войновская К.К. Фотохимические свойства протохлорофиллида // М. Доклады АН СССР. 1949. Вып. 66.с. 663-665.152

46. Красновский A.A. и др. Фракционирование различных пигментных форм в гомогенатах этиолированных и освещенных листьях// М. Докл. АН СССР. 1961. Вып. 5. с. 1227-1230.

47. Крушев JI.T. Биопрепараты и микробиологическая защита лесных насаждений в СССР// Биология и интег рированная борьба с вредителями в лесных биоценозах. М. Лесная промышленность. 1986. с.82-88.

48. Крушев Л.Т. и др. Защита сосновых насаждений Белорусии от вредных насекомых// Ведение хозяйства в сосновых лесах Белорусии. Минск. Полымя. 1982. с. 37-47.

49. Крушев Л.Т. и др. Применение микробиологических средств борьбы с вредителями лева в СССР и за рубежом // Охрана и защита леса: Обзорная информация . ЦЫНТИлесхоз .1983.254 с.

50. Крушев Л.Т. и др. Эффективность применения бактериальных препаратов против шелкопряда-монашенки в сосновых лесах Белорусии// Формирование высокопродуктивных насаждений БСССР. Минск. 1980. с.41-48.

51. Крушев Л.Т., Машнина Т.И. Применение бактериальных средств защиты леса от вредных насекомых// Охрана и защита леса. Обзорная информация. ЦБНТИлесхоз. 1977. с.3-51.153

52. Ланг Ф., Воробьева Л.М., Красновский A.A. Образование и выцветание пигментов в листьях мутантов кукурузы // М. Докл. Академии Наук СССР. 1968. Вып. 183. с. 711-713.

53. Ланг Ф., Воробьева Л.М., Красновский A.A. Образование хлорофилла и формирование хлоропластов в зеленеющих листьях в нормальных и зеленеющих растениях кукурузы // М. Молекул. Биология. 1971. Вып. 3 с. 366-374.

54. Лескова А.Н. Термостабильный экзотоксин как биологически активное вещество// Тез. Докладов Всесоюзной конференции Проблемы создания и применения микробиологических средств защиты растений. Велигож. Москва. 1989. с.51.

55. Лескова А.Я., Рыбин Л.М. Термостабильный ß-экзотоксин Bacillus thuringiensis // М. Микробиологическая промышленность. 1970. с. 39-45.

56. Литвин Ф.Ф., Беляева О.Б. Характеристика отдельных реакций и общая схема биосинтеза нативных форм хлорофилла в этиолированных листьях растений // М. Биохимия. 1971. Вып. 1. с. 615- 620.

57. Литвин Ф.Ф., Красновский A.A. Исследование промежуточных стадий образования хлорофилла в этиолированных листьях по спектрам флуоресценции // М. ДАН СССР. 1957. Вып. 117.с. 82-85.154

58. Лиховидов В.Е., Ганневата К.С. Сравнительная эффективность экзотоксинсодержащтих биопрепаратов в интегрированной защите баклажанов от колорадского жука в Молдавии// Микроорганизмы в защите растений. Кишинев. Штинница. 1985. с. 51-58.

59. Логойца С.С. Битоксибациллин и амбуш в дубравах// Защита растений. 1986. №6. с. 32-33.

60. Любименко В.Н. Фотосинтез и хемосинтез в растительном мире //М. Лит-ра. 1935. 165 с.

61. Македонский В.В., Шебеста К., Хаджиолов A.A. Подавление синтеза рибонуклеиновых кислот в печени мышей под действием экзотоксина Bacillus thuringiensis // Структура и функции клеточного ядра. М. Наука. 1972. с. 183-190.

62. Малый Л.П., Солонович Д.И. Опыт применения бактериальных препаратов против дубовой хохлатки// Лесное хозяйство. 1982. №2. с. 47-48^

63. Мао Цзи Цзюнь Сравнительное изучение видовых особенностей проростков лиственницы (Larix Mill.)// Автореферат диссертации на соискание степени канд. биол. наук.// М. МГУ леса РФ. 1998. 24 с.

64. Махно П.М. и др. Морфологические изменения в органах и тканях теплокровных животных под действием экзотоксина155

65. Bacillus thuringiensis// Гигиена содержания сельскохозяйственных животных. М. 1980. с. 66-72.

66. Мельникова Е.А., Мурза В.И. Токсиколого-гигиеническая характеристика микробиологических средств защиты растений// Надзор за вредителями и болезнями леса и совершенствование мер борьбы с ними. М. 1981. с. 136-137.

67. Микульская И.И. Технология применения битоксибациллина и дендробациллина в борьбе с комплексом листогрызущих вредителей сада в Белорусии// I Болгаро-Советский симпозиум но микробиологическим пестицидам. Пловдив. 1988. с. 61-62.

68. Милютин Л.И. О некоторых физиологических признаках листвнниц сибирской и даурской// Красноярск. В сб. статей «Изменчивость древесных растений Сибири». 1974. с. 38-45.

69. Молотков П.И., Патлай H.H., Давыдова Н.И. Селекция лесных пород// М. Лесная промышленность. 1982. 224 с.

70. Николаева Л.Ф., Рубин А.Б., Казакова A.C., Кононенко A.A. Изучение кинетики фотоиндуцированного перехода протохлорофиллида в хлорофиллид у некоторых голосеменных растений и кукурузы // М. Докл. Высш. Школы. Биол. Науки. 1976. № 8. с. 97-99.

71. Новиков М.Н. Изменчивость сосны обыкновенной под влиянием промышленных выбросов // Автореферат диссертации на соискание степени кандидата с/х. наук. М. МЛТИ. 1989. 24 с.

72. Рубин Б. А. и др. Изменение пиг ментного состава листьев хлопчатника при заболевании вилтом// Биологические науки. 1974. №9. с. 57-63.

73. Синещеков В.А. Возбужденные состояния пигментов и миграция энергии при фотосинтезе и других фотобиологических процессах // Автореферат диссертации на соискание степени доктора биологических наук. М. 1983. 52 с.

74. Сказкин Ф.Д., Ловчиновская Е.И., Миллер М.С., Аникеев В В. Практикум по физиологии растений.// М. Сов. Наука 1958. 340 с.

75. Смирнов П.С. Темпы морфогенеза одно- и двулетних растений в зависимости от влияния физиологически активных веществ// Вопросы физиологии и культуры растений в связи с интродукцией, селекцией и продуктивностью. Горький. 1980. с. 21-27.157

76. Струсь A.A. Энтомоцидность битоксибациллина для некоторых чешуекрылых Крыма //Бюлл. НИИ сельскохозяйственной микробиологии. 1980. №30. с. 19-20.

77. Тимирязев К.А. Избранные сочинения // М. Т. 1. 1956. 652 с.

78. Фадеев Ю.Н. Стратегия борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняков в будущем// М. Колос. 1977. 881 с.

79. Фалкон J1.A. Использование бактерий в микробиологической борьбе// В кн. Микроорганизмы в борьбе с вредными насекомыми и клещами. Под редакцией М.С. Гилярова. М. Колос 1976. с. 54-74.

80. Федоринчик Н.С., Строева И.А. Термостабильный экзотоксин энтомопатогенных бацилл группы Bacillus thuringiensis// Микробиологическая промышленность. 1970. №5. с.37-41.

81. Харсун А.И. Изучение показателя патогенности микробиопрепаратов, используемых для борьбы с вредителями жесткокрылыми//Доклады ВАСХНИЛ. М. 1977. с. 21-23.

82. Цзи Цзюнь Мао, Воронина O.E. и др. Содержание и спектральные свойства хлорофилла проростков разных видов лиственницы//М. Физиология растений. 1998. №4. с.513-520.

83. Шарафутдинов Ш.А., Кандыбин Н.В., Барбашова Н.М. Действие битоксибациллина на полезных насекомых// Сб. Научных трудов ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии. 1977. Т.45.1.7a1. С. 113-117.

84. Ширяева Н.В., Савин И.М. Влияние биопрепаратов и ювенильных средств на полезную энтомофауну// Лесное хозяйство. 1988. № 3. с. 38 40.

85. Шлык А. А. Метаболизм хлорофилла в зеленом растении// Минск, Наука и техника. 1965. 395 с.

86. Шлык А.А. Организация биосинтеза хлорофилла в растении// М. Вестник АН СССР. 1972. Т. 12. с. 83 89.

87. Штерншис М.В. Микробиологическая борьба с вредителями сельскохозяйственных культур Сибири и Дальнего Востока// М. Росагропромиздат. 1988. 125 с.

88. Щербаков А.П. Некоторые данные о биологии роста однолетних сеянцев сосны и накопления ими питательных веществ// М. Физиология древесных растений. 1958. с. 48 56.

89. Bailey N.R., Nelson C.D., Tregunna Е.В. Photosynthesis action spectra for leaves in normal and low oxygen// Plant Physiology. 1969. V. 44. P. 678-697.

90. Batler W.L., Briggs W.R. The relation between structure and pigments during the first stades of proplastid greening// Biochim. Biophys. Acta. 1966. V. 112. P. 45-53.

91. Bubenshikova S., Kargramova V. Determination of heat-stabl exotoxin of Bacillus thuringiensis by high perfomance anionexchange chromatography// J. of invertibrate pathology. 1983. V.42. P. 344. 347.

92. Cantwell G, Cantalo W. Potential of Bacillus thuringiensis as a microbial agent against the Mexican bean Beetle// J. Econom. Entomol. 1982. V.2. P. 348-350.

93. Farcas J., Sebesta K., Horski K at al. The structure of exotoxin of Bacillus thuringiensis var. gelechiae//Coll. Czech. Chem. Commun. 1979. V. 34. P. 1118-1129.

94. Frank S. R. The effectiveness of the spectrum in chlorophyll formation//J. Gen. Physiol. 1946. V.29. p.157-171.

95. Hall J.M., Arakawa K.V. The susceptibility of the housetly,Musca domestica Linnaeus to Bacillus thuringiensis var. Thuringiensis// J. Insect. Pathol. 1959. P. 351-355.

96. Heimpel A.M. A critical review of Bacillus thuringiensis var. thuringiensis Berliner and other crystalliformus bacteriae// Annual review of entomology. 1967. v.12. p.287-332.

97. Heimpel A.M. A review of Basillus thuringiensis as producent of bacterial insecticides// New Approaches to Pest Control and Eradication. Bull. An. Chem. Soc. 1963. V. 41. P. 64-74.

98. Henningsen K.V., Thome S.W. Esterification and spectral shifts of chlorophyll in wildtype and mutant seedlings development in darkness // Plant Physiol. 1974. V. 30. P. 82-89.

99. Henningsen K.W., Thorn S.W., Boardm // Plant. Physiol. 1974. V. 30. P.82-89.

100. Jimenes J., Karabach, Fernandez R. Bitoxibacillin, a new microbiological Bacillus thuringiensis Preparation for the control of Heliothis virescens on tobaco. //Agrotech. Cube. 1988. P. 73-79.

101. Kim Y.T., Hyang H. The beta-exotoxin of Basilius thuringiensis. Isolation and characterization// J. of invertebrate pathology. 1970. V. 15 P. 100-108.

102. Klier A.F., Lecadet M.M., Dedonder R. Sequential modification of DNA-dependent RNA polymerase during sporogenesis in Basilius thuringiensis//Eur. J. Biochem. V. 36.1976. P. 317-318.

103. Koski V.M., French C.S., Smith J.N.C. The action spectrum for transformation of protochlorophyll to chlorophyll a in normal and albino corn seedlings // Arch. Biochim. Biophys. 1951.V.31. P. 1-17.

104. Koski V.M., Smith J.N.C. The isolation and spectral absorption properties of protochlorophyll from etiolated barley seedling // J. Amer. Chem. Soc. 1948. V. 70. P. 3558-3562.

105. Koski V.M., Smith J.N.C. The nature of the transformation of protochlorophyll to chlorophyll // Cam. Inst. Wash. Y. B. 1949. V. 48. P. 90-92.

106. Loeffler J. E. Precursor ofprotochlorophyll in etiolated leaves // Cam. Inst. Wash.Y.B. 1955. V.54. p.l59-160.

107. Marshall L Environmental impact of insect control by microorganisms//Ann. N.J. Acad. Sei. 1973. V.217. P. 56-59.

108. Mc. Connel, Richards A.G. The production by Bacillus thuringiensis Berliner of a heat-stable substance toxic for insect.// Can. J. Microbiol. 1959. V. 5. № 2. P. 161-168.

109. Meteroja T., Carlberg G., et al. Mutagenicity of Basilius thuringiensis exotoxin. I. Mammalian tests//Hereditas. 1977.V.85. №1. P. 105-112.

110. Michio Ohba, Achara Tantichodok, Keio Aizawa/ Production of heat-stable exotoxin by Basilius thuringiensis and related bacteria// J. of invertebr^ pathology. V.38.1981. P. 26-32.161

111. Nadler K., Granick S. Control on chlorophyll synthesis in barley // Plant Physiol. 1970. v.46. P.240-246.

112. Sarma C.B.S.R., Prasad S.S.V., Pal S.B., Sharma S. The exotoxin of Bacillus thuringiensis a new e- mitotic agent.// Experientia. 1976.- V. 32. P. 1465-1466.

113. Sebesta K., Horska K. Inhibition of DNA-dependent RNA polimerase by the exotoxin of Bacillus thuringiensis var. gelechiae// Biochim. Biophys. Acta. 1968. V. 169. P.281-292.

114. Sebesta K., Horska K., Vankova J. Inhibition of de novo RNA synthesis by the insecticidae exotoxin of Bacillus thuringiensis var. gelechiae//Coll. Czech. Chem. Commun. 1969. V. 34. P. 1786-1787.

115. Sebesta K., Horska K., Vankova J. Isolation and properties of the insecticidae of Bacillus thuringiensis var. gelechiae auct// Insect Pathology and Microbial Control. Amsterdam. 1967. P.238-242.

116. Shibata K. Spectroscopic studies on chlorophyll formation in intact leaves // Cam. Inst. Wash. Y.B. 1956. V.55. p. 248-250.

117. Shibata K. Spectroscopic studies on chlorophyll formation in intact leaves // Joraal Biochem. 1957. V. 44. № 3. P. 147-173.

118. Siraoval C., Michel-Wolwerst M.R., Madsen A. On the nature and possible functions of the 673- and 684- forms in vivo of chlorophyll // Biochim. Biophys. Acta. 1965. V. 94. P. 344-348.162

119. Sorsa M., Carlberg G., at al. Mutagenic activity of Bacillus thuringiensis exotoxin, the potential biological insecticide// Hereditas. V.B4. P. 253-261.

120. Thorn S.W // Biochem. Biophys. Acta. 1971. V. 226. №1. P.128-134.

121. Vancova J. Pathogenicity of different strains of Bacillus thuringiensis group for Calleria raellonella L.// Acta Entomol. Bohemoslov. 1966. №l.P. 10-11.

122. Vancova J., Kralic O. An electron microscope studies of protein cristals in different strains of the Bacillus thuringiensis group// Intbl. F. Bakt. 1966. V. 199. P. 37-39.

123. Vankova G. The heat-stable exotoxin of Bacillus thuringiensis // Folia microbiol. 1978. V.23. P. 162-174.