Изучение биохимических и фармакологических свойств селекартена тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Холов, Абдулхаким Кувватович

• Холов, Абдулхаким Кувватович
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Холов, Абдулхаким Кувватович

Список исползованных сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА СЕЛЕНА И НЕОБХОДИМОСТЬ ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ТЕРАПИИ И ПРОФИЛАКТИКЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ.

Глава И. ОБЪЕМ ВЫПОЛНЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Методы изучения гепатозащитного действия селекартена.

2.2. Биохимические методы, использованные в работе.

2.3. Методы оценки безвредности селекартена.

Глава III. ГЕПАТОПРОТЕКТИВНЫЕ СВОЙСТВА

СЕЛЕКАРТЕНА.

3.1. Желчегонное действие селекартена при токсическом поражении печени СС14.

3.2. Влияние селекартена на антитоксическую и экскреторную функцию печени при токсическом гепатите.

3.3. Влияние селекартена на активность печеночных ферментов при токсическом поражении печени у крыс ССЦ.

3.4. Влияние селекартена на липидный и белковый состав сыворотки крови животных при подостром токсическом поражении печени СС14.

3.5. Влияние селекартена на уровень холестерина общих липидов, сиаловых кислот и гликогена в ткани печени при внутримышечном введении на фоне токсического гепатита.

3.6. Антиоксидантные свойства селекартена при подостром токсическом поражении печени CCI4.

3.7. Влияние селекартена на активность печеночных ферментов и липидов на фоне подострого токсического поражения печени

ССЦ при внутривенном введении.

3.8. Влияние селекартена на антитоксическую и экскреторную функции печени при подостром токсическом гепатите при внутривенном введении кроликам.

3.9. Патоморфологические исследования печени животных при подостром токсическом поражении печени ССЦ.

РЕЗЮМЕ.

Глава IV. ИЗУЧЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ И БЕЗВРЕДНОСТИ

СЕЛЕКАРТЕНА.

4.1. Исследование острой токсичности селекартена при однократном введении лабораторным животным.

4.2. Изучение хронической токсичности селекартена при 3-х и 5-ти месячном внутрижелудочном и внутримышечном введении.

4.3. Изучение токсичности селекартена в условиях 3-месячного хронического эксперимента на белых крысах.

4.3.1. Оценка влияния селекартена на организм крыс в условиях 3-х месячного хронического эксперимента.

4.3.2. Результаты патоморфологических исследований крыс с хронической токсичностью.

4.4. Изучение мутагенных свойств селекартена.

4.4.1. Исследование влияния селекартена на число антителообразующих клеток в селезенке.

Резюме.

Глава V. ОБСУЖДЕНИЕ И ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение биохимических и фармакологических свойств селекартена»

Актуальность.

Проблема изучения значимости селена в патологии человека довольно важна. Как известно, микроэлемент селен (Se) принадлежит к числу незаменимых (эссенциальных) пищевых факторов, адекватное поступление которых - необходимое условие обеспечения здоровья человека. Строгое соблюдение этого условия особенно важно в раннем детском возрасте, когда все метаболические процессы особенно напряжены и сочетаются с определенной незрелостью механизмов их регуляции. В этой связи вопросы обеспеченности селеном организма человека вызывают значительный интерес специалистов [Авцын А.П. 1995; Гмошинский И.В., Мазо В.К., 1999; Голубкина H.A., Шагова М.В., 2000; В.А.Тутельян и др., 2002; Walker WA, Watkins JB., 1997; van Dael].

В нашей республике также уделяется недостаточно внимания проблеме микроэлементов и оценке витаминной обеспеченности. Накопленные к настоящему времени в мировой практике результаты эпидемиологических и клинических исследований позволяют заключить, что дефицит селена в окружающей среде, обуславливающий его низкое содержание в организме, способен вызвать прогрессирующее поражение миокарда (один из примеров - селенодефицитная кардиопатия) [Азонов Д.А., 2000; Тутельян В.А., 2000]. Также нарушения репродуктивной функции у мужчин, сопровождает кистозный фиброз поджелудочной железы, бронхиальную астму и ряд других патологий [Тутельян В.А. и др., 2002]. При пониженной обеспеченности селеном, и соответственно, низком содержании этого элемента в крови возрастает риск возникновения онкологических заболеваний [Голубкина Н.А и др., 1995; Klein Е.А. et al., 2000; Kim J. et al., 2005], селен оказывает детоксицирующее действие по отношению к тяжелым металлам [Авцын А.П., 1995]. Обеспеченность селеном очень важна для людей, подвергшихся воздействию радиоактивного йода и входящих в группу риска развития аденомы щитовидной железы [Kohrle J. 2000].

Недостаточная обеспеченность селеном снижает устойчивость организма к вредным воздействиям у лиц, проживающих в экологически неблагоприятных регионах и в то же время, у этих лиц, имеет место дальнейшее снижение уровня эндогенного селена вследствие антропогенных воздействий (в первую очередь,- радиации и химических загрязнений) [Шандала Н.К., 1997].

Многочисленные исследования указывают на снижение содержания селена в сыворотке крови жителей крупных промышленных городов. Недостаточность селена наблюдается в старческом возрасте, у детей, получающих низкокалорийное и низкобелковое питание, при беременности [Голубкина H.A., Шагова М.В., 2000; Тутельян В.А. и др., 2002].

Среди различных причин создавшейся ситуации можно выделить недопонимание многими клиницистами и нутриционистами важности адекватной обеспеченности организма эссенциальными микроэлементами и в том числе селеном.

Согласно современным представлениям, биологическая роль селена в первую очередь, определяется его антиоксидантным и иммуномодулирующими действиями [Рисман М, 1998; Тутельян В.А. и др., 2002; McKenzu R. et al., 1998; Thompson H. J., 2001; Van Dael P.,et al., 2004]. Как известно, влияние внешних оксидантов (радиация, ультрафиолет, химические загрязнители воздуха, воды, продуктов питания, холодивые воздействия и многие другие факторы), а также активация эндогенных механизмов генерации активных метаболитов кислорода и интенсификация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) при различных патологических состояниях приводят к развитию так называемого окислительного стресса - важного патогенного фактора многих заболеваний. В условиях окислительного стресса имеет место напряжение системы антиоксидантной защиты организма, которое требует восполнения антиоксидантов путем их поступления с пищей. Именно поэтому чрезвычайно важно, чтобы наше питание обеспечивало ежесуточные потребности организма человека в антиоксидантах, причем в определенных экстремальных ситуациях эти потребности могут существенно возрастать.

Адекватное обеспечение населения микронутриентами является важной составной частью политики здорового питания. Анализ фактического питания населения Российской Федерации и стран СНГ свидетельствует о широком распространении во многих регионах недостаточной обеспеченности (или даже дефицита) ряда важнейших микронутриентов, в том числе эссенциальных микроэлементов. Важным является вопрос о суточных нормах потребления селена. Безопасный и достаточный уровень потребления селена составляет 50-200 мкг [Голубкина H.A., 1994; Тутельян В.А. и др., 2002]. Разработаны рекомендуемые уровни потребления селена в США. Отечественные нормы среднесуточного потребления селена в настоящее время рассматриваются и они близки к величинам, предлагаемые американскими нутриционистами [Food and Nutrition Board. Recommended Daily Allowances, 10-th edition, 1989]. Суточная потребность в селене не установлена; ориентировочная величина оптимального потребления для взрослого населения составляет 80-150 мкг/сут [Гмошинский И.В., Мазо В.К., 1999].

В мировой практике накоплен определенный опыт эффективной коррекции селенового статуса путем рационализации питания. Основными источниками поступления селена в организм человека являются пищевые продукты растительного и животного происхождения, в которых практически весь селен находится в органической форме

Гореликова Г.А. и др., 1997]. Однако содержание селена в пищевых продуктах будет существенно различаться в различных регионах и определяться его уровнем в почвах.

Такое положение определяет актуальность задачи обогащения пищевых продуктов эссенциальными микроэлементами (ЭМ) и широкого использования в питании населения биологически активных добавок к пище (БАД) - дополнительных источников ЭМ. При этом очевидна недопустимость бесконтрольного обогащения пищевых продуктов и БАД микроэлементами, вследствие опасности их возможных передозировок и соответствующего неблагоприятного воздействия на организм человека.

Для решения поставленной задачи, было выбрано лекарственное вещество, разработанное в центре наномолекулярных и биоселеновых структур г. Москвы, под руководством проф. Ю.А.Новицкого, обладающее регулирующим действием на тканевый и клеточный метаболизм - селеновое каротинопротеиновое органическое вещество -селекартен, имеющее в своем составе помимо селена, ß-каротиноиды, низкомолекулярный протеин, фосфолипиды, витамины С и Е, флавонолы, различные органические ионы и катионы цинка, меди, марганца. Хотя существует множество селен-содержащих препаратов, селекартен превосходит все остальные по содержанию антиоксидантных и противовоспалительных составных компонентов, с хорошей биодоступностью и длительным периодом полувыведения из организма.

Решение этих вопросов тесно связано с фундаментальными общебиологическими проблемами, такими как образование свободнорадикальных форм кислорода, пероксидной модификацией липидов и белков, функционированием биомембран, компартментализацией биохимических реакций, и может быть весьма полезным для выяснения сложных многоуровневых взаимоотношений различных метаболических звеньев при токсическом повреждении печени.

Токсическое повреждение печени, вызванное введением ССЦ, является адекватной моделью токсического поражения печени у человека [Арчаков А.Н., Карузина H.H., 1973; Блюгер А.Ф. Зальцман В.К., 1983]. Механизм повреждающего действия ССЦ реализуется через активацию процессов свободнорадикального окисления [Зиямутдинова З.Х., Холмухамедова Н.М., 1991]. Образование свободных радикалов и реактивных метаболитов кислорода является важным механизмом повреждения клеток печени. В частности, чрезмерная продукция активных форм кислорода (АФК), инициирует лавинообразное разветвление процессов свободнорадикального окисления [Зенков Н.К. с соавт., 2001].

Все вышеизложенное и определило общую направленность работы, выбор методологических подходов и экспериментальных моделей.

Цель. Целью настоящего исследования явилось всестороннее изучение биохимических и фармакологических свойств селекартена, включая его антиоксидантные и гепатозащитные свойства в эксперименте у животных.

Задачи исследования включали:

1. Изучение гепатозащитного и холеретического действий селекартена при его в/ж, в/м и в/в введении на фоне токсического поражения печени крыс СС14.

2. Выяснение характера в/ж, в/м введения селекартена на изменение количества белков, липидов и печеночных ферментов на фоне токсического гепатита.

3. Оценка антиоксидантных свойств селекартена при токсическом поражении печени ССЦ.

4. Изучение безвредности селекартена.

Научная новизна.

1. Впервые на комплексе пищевых нутриентов разработано новое эффективное средство, которое благоприятно влияет на функциональное состояние гепатобилиарной системы (печень, желчный пузырь, желчные протоки, химический состав желчи и внутрипеченочные обменные процессы).

2. Впервые доказаны гепатозащитные свойства изучаемого вещества при токсическом гепатите при внутрижелудочном и внутримышечном введении препарата.

3. Впервые дано экспериментальное обоснование использования селекартена в качестве гепатопротективного и антиоксидантного средства.

4. Впервые нами изучены вопросы безопасности селекартена, поэтому получено разрешение для проведения его клинического испытания.

Положения, выносимые на защиту:

1. Селекартен, в дозах 0,02; 0,04 г/кг массы тела животных при внутрижелудочном, и в дозе 0,01; и 0,02 мл/кг при внутримышечном и внутривенном введении на фоне ССЦ крысам и кроликам оказывает заметное гепатопротективное действие, благодаря наличию антиоксидантных и ангиопротективных свойств.

2. Селекартен усиливает секрецию желчи и улучшает ее химический состав при подострой интоксикации крыс СС14.

3. Селекартен в дозах 0,01 и 0,02 мл/кг проявляет антиоксидантное и мембраностабилизирующее свойства.

4. По эффективности селекартен не уступает карсилу, олиметину, жирозиталу и бутадиону. л 9

6. Селекартен является малотоксичным препаратом и при длительном 3-х и 5-месячном подкожном и внутрижелудочном введении не оказывает отрицательного воздействия на органы и системы

Ф подопытных животных.

7. Селекартен не обладает токсическими свойствами.

Практическая значимость работы.

Впервые на основе селена, В-каротина, низкомолекулярного фитопротеина, фосфолипидов, витаминов С и Е, инулина, флавонов различных неорганических ионов и катионов цинка, меди и марганца центром специальной технологии г. Москвы под руководством профессора Новицкого Ю.А. разработано новое средство, предложенное для использования в качестве регулятора метаболических и антиоксидантных процессов в организме.

Успешное решение поставленной цели и задач исследования, позволят улучшить качество лечения и профилактики заболеваний гепатобилиарной системы (гепатиты, холециститы, холангиты, стеатозы) ф и некоторых других воспалительных и обменных заболеваний.

Проведено всестороннее фармакобиохимическое исследование селекартена и установлено, что изучаемое вещество обладает достаточно выраженным желчегонным, гепатозащитным, и антиоксидантным действиями. Дано экспериментальное обоснование по использованию данного препарата в клинической практике для лечения и профилактики различной патологии органов и систем.

Разработаны показания и противопоказания к практическому применению препарата.

По теме диссертации опубликовано 6 научных работ.

Апробация работы. Основные результаты работы доложены на заседании общества фармакологов Таджикистана (2003). На заседании Ученого совета ГНИИ питания (2004), международной конференции «Фитотерапия и народная медицина эпохи авиценны», посвященное 80-летию г. Душанбе, Душанбе (2004) и на расширенном заседании кафедры биохимии Таджикского государственного национального университета (2005).

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 93 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы материалов и методов исследования, глав результатов собственных исследований, общего обсуждения заключения, выводов, # практических рекомендаций и указателя литературы, включающего 57

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Холов, Абдулхаким Кувватович

ВЫВОДЫ

1. При подостром токсическом поражении печени, вызванном СС14, селекартен в дозах 0,01 и 0,02 мл/кг массы оказывает заметный желчегонный эффект, проявляющийся в повышении объема секретируемой желчи на 98%, и улучшении ее химического состава: концентрация холестерина снизилась на 26.87%, возросло содержание СЖК и ФЛ, ХХК увеличился до 11.65.

2. Селекартен в дозах 0,02-0,04 г/кг при в/ж и в/м введении 0,01-0,02 мл/кг массы крыс, проявляет гепатозащитные свойства; улучшает антитоксическую и экскреторную функции печени: продолжительность барбамилового сна сократилась на 29.9% и 32.9%; активность АсАТ и АлАТ снизились на 23.9-27.3% и 45.547%. Нормализовались уровни гликогена, сиаловых кислот. При в/в введении кроликам с токсическим гепатитом селекартен в дозе 0,01 и 0,02 мл/кг массы усилил антитоксическую и экскреторную функции печени. Достоверно (Р<0,001) снизилась активность ферментов переаминирования.

3. Селекартен обладает заметным антиоксидантным действием, которое реализуется за счет увеличения скорости ферментативной утилизации липопероксидов, защищающих клетки от повреждающего влияния свободных радикалов: стабилизируются активности МДА и ГПЛ на 34-46%, как в сыворотке крови, так и в ткани печени животных.

4. Селекартен оказался малотоксичным веществом. Однократное в/м введение селекартена в дозе 25-50мл/кг признаков интоксикации животных и их гибели не вызывает. Изучение хронической токсичности селекартена при 3-х и 5- месячном в/м введении заметных патологических отклонений антитоксической, экскреторной функций (АлАТ, АсАТ, ЩФ) не обнаружено. Имело место недостоверное увеличение уровней билирубина, ХС, общих липидов и ТГ. Патоморфологические исследования внутренних органов, а также патологии не обнаружили. Для белых крыс, при в/б введении препарата ЛД50 составляет 54 мл/кг, а для мышей линии ВАЫЗ/с при в/м введении 66 мл/кг и при внутрибрюшинном введении 59 мл/кг массы тела.

5. Селекартен можно использовать в терапии различных заболеваний, обусловленных накоплением продуктов пероксидации различного генеза. Препарат противопоказан для применения беременным животным (пороки развития эмбрионов и процент мертворожденных был выше у крыс, получавших селекартен в дозе 0.21 мл/кг и наблюдались при 30-кратной максимальной терапевтической дозе для человека).

Глава. V. ОБСУЖДЕНИЕ И ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Среди актуальных задач стоящих перед физиологами, фармакологами, биохимиками, фитохимиками, фармаконутрициологами является изучение и разработка новых, лекарственных препаратов, БДА и пищевых добавок на основе лекарственных и пищевых растений, а также пищевых нутриентов (витаминов и микроэлементов).

Минеральные вещества играют важную роль в различных обменных процессах организма, в частности, они выполняют пластическую функцию, участвуют в построении костной ткани, регуляции водно-солевого и кислотно-щелочного равновесия, участвуют в формировании клеток крови, в процессе формирования нервной системы, регуляции мышечного тонуса. Подобно витаминам, минералы функционируют как коэнзимы, участвуя в процессе образования энергии и т.д.

Среди известных витаминов и микроэлементов наиболее широко при различных заболеваниях используют антиоксидантные нутриенты такие как селен, цинк, медь, витамин С, каротиноиды, витамины А и Е.

Несмотря на производство многочисленных лекарственных препаратов, используемых в качестве регуляторов метаболических процессов, проблема активации и коррекции обмена веществ в организме до настоящего времени не решена. В большинстве своем используются разнообразные препараты элективного и целенаправленного действия для коррекции тех или иных биохимических процессов.

Учитывая тот факт, что в настоящее время во всем мире наблюдается рост частоты хронических заболеваний гепатобилиарной системы, нарушение липидного обмена и особенно, атеросклероза и желчнокаменной болезни, то спрос на малотоксичные и эффективные лекарственные препараты природного и растительного происхождения, обладающие гепатопротекторным, гиполипидемическим и противовоспалительным действием огромный.

В связи с этим, вновь создаваемые лекарственные средства по своему строению и механизму действия должны быть стерохимические, то есть биологически и химически соответствовать тем веществам организма человека, которые непосредственно осуществляют метаболические процессы в организме человека.

В центре наномолекулярных и биоселеновых структур г. Москвы, для решения поставленной задачи под руководством Новицкого Ю.А. разработано новое лекарственное вещество, обладающее регулирующим действием на тканевый и клеточный метаболизм, селеновое каротинопротеиновое органическое вещество, для регулирования метаболических процессов (селекартен).

В связи с чем, целью настоящего исследования явилось всестороннее изучение биохимических и фармакологических свойств селекартена.

Проведенными исследованиями установлено, что наиболее выраженный терапевтической эффект селекартена проявляется в дозе 0,02 и 0,04 г/кг при внутрижелудочном, 0.01 и 0,02 мл кг массы тела животных при внутривенном и внутримышечном способах введения. Исходя из этого, данные дозы были приняты как основные для дальнейших исследований. Необходимо отметить, что селекартен является органическим низкомолекулярным соединением, обладающим регуляторными метаболическими действиями, полностью растворим в воде и биологических жидкостях. В 1 мл селекартена, в зависимости от количества аминокислот в лиганде содержится от 0,02 до 0,022 г субстанции и 6 -8 мкг селена.

Учитывая разностороннюю направленность препарата, нами было изучено его влияние на патологию гепатобилиарной системы, липидный обмен и воспалительный процесс различного генеза.

Гепатопротекторные свойства селекартена были исследованы на модели токсического поражения печени СС14.

В связи с тем, что желчесекретирующая функция печени является наиболее чувствительной к воздействию токсических веществ, в том числе к CCI4, доклинические исследования селекартена проводили на белых крысах и кроликах при внутрижелудочном, внутривенном и внутримышечном введении на фоне подострой интоксикации CCI4.

Выяснено, что при токсической интоксикации печени гепатотоксином происходят тяжелые нарушения со стороны секреторной функции печени и химического состава желчи. Наблюдается резкое уменьшение объема секретируемой желчи и достоверное (Р<0,05- 0,001) снижение концентрации холестерина, СЖК, фосфолипидов и ХХК.

Исследуемое вещество при токсическом гепатите оказало выраженный гепатозашитный эффект, что проявилось в достоверном повышении объема секретируемой желчи, улучшении химического состава желчи, нормализации концентрации холестерина, увеличении концентрации суммарных желчных кислот, фосфолипидов и повышении холатохолестеринового коэффициента. По эффективности селекартен превосходил аналогичный эффект препаратов сравнения (карсил, олиметин).

При остром и хроническом токсическом поражениях печени происходят тяжелые нарушения синтетической ее функции, проявляющиеся снижением концентрации холестерина, фосфолипидов и желчных кислот с нарушением их соотношения. Селекартен, возможно, снижая токсический эффект СС14> восстанавливает метаболические функции печени: улучшает синтетическую функцию печени, нормализует концентрацию холестерина до уровня интактных крыс с одновременным увеличением концентрации фосфолипидов, суммарных желчных кислот и нормализацией холатохолестеринового коэффициента.

Как известно, для образования желчи печеночным клеткам требуется больше энергетических затрат. Таким источником энергии служат макроэргические соединения типа АТФ. Установлено, что введение ССЦ в течение одного месяца вызывало резкое снижение активности №+, К+ и АТФ-аз в гомогенатах ткани печени, что свидетельствует о значительном снижении макроэргических соединений в печеночных клетках, необходимых для осуществления активной синтетической их деятельности. Более того, с активностью этих ферментов связана стабильность фосфолипидных мембран и оптимальная работа натрий-калиевого насоса. Кроме того, проведены исследования на животных, содержащихся на некрогенном, безбелковом рационе и на модели токсического поражения. Установлено, что данные опыты сопровождаются резким снижением содержания АТФ, РНК, белков и их биосинтеза в печени. Однократное введение метионина, витамина Е и селена вызывают повышение содержание АТФ, РНК и белков микросомальной фракции печени сниженных введением гепатотоксина.

Как известно, жидкая часть каналикулярной желчи состоит из двух фракций - холатозависимой и холатонезависимой. В образовании холатонезависимой фракции каналикулярной желчи, которая усиливает синтез желчных кислот, активное участие принимают ионы Ыа и К. В тоже время стимуляторы №,К-АТФ-аз активируют транспорт ионов № из клеток и усиливают образование холатонезависимой фракции желчи.

Установлено, что эфирные масла (геранол, гераноретинол и розанол) на фоне токсического действия ССЦ, одинаково нормализуют активность АТФ-азных ферментов в гомогенатах ткани печени, что свидетельствует о повышении биоэнергетических процессов в печеночных клетках, и улучшении, таким образом, их синтетической функции. Как было сказано выше, однократное введение метионина, витамина Е и селена на фоне поражения печени вызывают повышение активности АТФ, РНК, белков и их биосинтез в печени. Вероятно, селекартен, стимулируя активность АТФ-азных ферментов, усиливает секрецию холатонезависимой фракции каналикулярной желчи и синтез желчных кислот.

Подострое токсическое поражение печени сопровождается выраженными, биохимическими, патофизиологическими и морфологическими изменениями, проявляющиеся выраженным нарушением антитоксической и экскреторной функций печени.

В связи с тем, что инактивация барбитуратов осуществляется единой системой микросомальных ферментов (МЭОС), при токсических интоксикациях печени резко нарушается продолжительность снотворного эффекта барбамила.

Нашими исследованиями установлено, что при подострой интоксикации печени селекартен достоверно сокращает продолжительность барбамилового сна, что свидетельствует о восстановлении детоксицируюшей функции печени. Наряду с этим селекартен оказывает положительное влияние на экскреторную функцию печени, о чем свидетельствует усиление скорости элиминации бромсульфалеина.

Многочисленными исследованиями установлено, что уже на ранних стадиях токсического поражения печени происходит нарушение обмена гликогена и гликопротеинов, что проявляется истощением запаса гликогена и сиаловых кислот в ткани печени.

Известно, что уменьшение содержания сиаловых кислот в ткани печени связано с нарушением гликопротеидных мембран гепатоцитов в результате активации фермента нейраминидазы под действием СС14. В наших исследованиях селекартен не только повышал накопление гликогена в печеночных клетках, но и, подавляя активность нейраминидаз, восстанавливал содержание сиаловых кислот в мембранных структурах гепатоцитов.

Токсическое поражение печени сопровождается нарушением обмена белков, альбумина, холестерина, триглицеридов, общих липидов и фосфолипидов состава сыворотки крови. Селекартен в испытуемых дозах, как при внутрижелудочном, так и при внутривенном введении, достоверно снижал концентрацию холестерина, триглицеридов и общих липидов. И одновременно повышал концентрацию общих белков альбумина, фосфолипидов в сыворотке крови, гликоген и сиаловые кислоты в гомогенатах печени.

При подостром токсическом поражении печени наблюдалось заметное повышение активности аланинаминотрансферазы (АлТ), аспартатаминотрансферазы (АсТ) и щелочной фосфатазы (ЩФ), которые согласно являются маркерами цитолиза гепатоцитов. . Селекартен достоверно снижал активность указанных ферментов, что свидетельствует о выраженном мембраностабилизирующем эффекте испытуемого вещества.

Гепатозащитный эффект селекартена при токсическом поражении печени ССЦ подтверждается ее антитоксическими свойствами. Препарат не только улучшает антитоксическую функцию печени, но одновременно нормализует экскреторную.

В патогенезе токсических поражений печени, важную роль играет процесс пероксидации или активное образование продуктов ПОЛ. Установлено, что продукты ПОЛ являются универсальными факторами, разрушающими мембраны гепатоцитов, нарушающими их проницаемость, способствующими процессу цитолиза.

Месячная интоксикация крыс СС14 привела к значительному повышению количества продуктов ПОЛ. Выяснилось, что содержание

МДА превысило контрольные значения в сыворотке крови в 3 раза и в гомогенатах ткани печени в 2,9 раза.

У животных, леченных селекартеном на фоне СС14, наблюдается достоверное подавление процесса липопероксидации. Многочисленными работами установлено, что селен, В-каротиноиды и витамин Е обладают достаточно выраженным антиоксидантными свойствами, и суммарно обеспечивают высокий антиоксидантный потенциал селекартена.

Селекартен оказывает положительное влияние на структурные изменения печени при токсическом гепатите. Препарат способствует предотвращению развития жировой дистрофии гепатоцитов. Если при исследовании печени контрольных животных, на фоне токсического поражения печени имело место диффузное крупнокапельное ожирение гепатоцитов, то в печени крыс леченных селекартеном, обнаруживались лишь единичные очаги среднекапельного ожирения. Кроме того, под влиянием селекартена происходило заметное уменьшение степени гидропической и баллонной дистрофии гепатоцитов, усиливалась регенерация печеночных клеток, увеличивалось количество двуядерных клеток. Наряду с этим, селекартен предотвращал развитие некроза паренхимы, наблюдаемого при подостром поражении печени СС14. В срезах печени крыс леченных селекартеном, в отличие от контрольных, где в центролобулярных зонах развивались обширные очаги некроза, изредка наблюдаются единичные некрозы нескольких групп печеночных клеток, что свидетельствует о выраженном гепатопротекторном эффекте селекартена.

Таким образом, селекартен оказывает положительное влияние на основные патоморфологические механизмы токсического поражения печени. Вышеизложенное позволяет рекомендовать изучаемое вещество в качестве средства для лечения различных поражений печени.

Согласно требованиям Фармакологического комитета, наряду с изучением специфических свойств изучаемого препарата, необходимо было исследовать безвредность селекартена.

При изучении селекартена, предложенного в качестве препарата, обладющего регулирующим действием на тканевой метаболизм, как регулятора метаболических и антиоксидантных процессов, обладающим гепатопротекторным, гиполипидемическим, противовоспалительным и мембраностабилизирующим свойствами, выяснилось, что препарат является малотоксичным при однократном внутримышечном введении лабораторным животным, а также хорошо переносится при длительном внутримышечном введении крысам линии \Vistar и кроликам.

Проведенные исследования показали, что однократное внутримышечное введение субстанции селекартена мышам линии ВАЬВ/С в разведении 1:10 физиологическим раствором в дозах 0,5-1,0 мл/мышь (25-50 мл/кг) препарат не вызывает признаков интоксикации и гибели животных. При увеличении дозы препарата (в разведении 1:10 физиологическим раствором) до 1,5-2,0 мл/мышь (75-100 мл/кг) наблюдалось снижение двигательной активности и угнетение животных, в тоже время гибели животных не отмечалось.

Внутримышечное и внутрибрюшинное введение мышам линии BALB/C субстанции селекартена в разведении 1:5 физиологическим раствором сопровождалось резким угнетением животных, наркозом и сном. Указанная интоксикация животных селекартеном на уровне ЛД50 была сходна с картиной их отравления этиловым спиртом, входящим в состав препарата.

По показателям ЛД50 при внутримышечном (мыши BALB/C, крысы Wistar) способе введения, установленным на уровне 51-66 мл/кг для субстанции препарата в разведении 1:5 физиологическим раствором, селекартен можно отнести к малотоксичным препаратам. При этом не выявлено существенных видовых и половых различий в чувствительности, указанных видов лабораторных животных к токсическому действию препарата.

Изучение токсичности селекартена в условиях хронического эксперимента проведено на крысах Wistar, при ежедневном 3-х месячном внутримышечном введении препарата в дозах 0,07 и 0,21 мл/кг и кроликам при 5-месячном внутрижелудочном введении препарата в дозе 0,06 -0,18 мл/кг. Указанные дозы препарата перед введением ex tempore разводили стерильным физиологическим раствором 1:10. Испытанные в хронических опытах на крысах и кроликах дозы селекартена превышали суточную терапевтическую дозу для человека (0,5 мл/человека или 0,007 мл/кг) в 10 и 30 раз.

Как показали проведенные исследования, селекартен в испытанных дозах 0,07 и 0,21 мл/кг в течение 3-х месячного хронического эксперимента на крысах и в дозе 0,07- 0,18 мл/кг в 5-и месячного хронического опыта на кроликах, хорошо переносился животными, и не влиял на гематоло-гические показатели, функциональное состояние основных органов и систем подопытных животных (по данным использованных биохимических тестов и ЭКГ). Отсутствие токсических повреждений внутренних органов, общих и местных токсико-аллергических реакций, связанных с действием селекартена, было подтверждено результатами патоморфологических исследований, проведенных после окончания хронических экспериментов. Не установлено местнораздражающего действия препарата в хроническом опыте на крысах и кроликах в испытанных дозах 0.07, 0.21 и 0.06-0.18 мл/кг соответствено при длительном внутримышечном введении в разведении 1:10 стерильным физиологическим раствором.

В испытанных дозах 0,07 и 0,18 мл/кг (10- и 25-кратные высшие суточные дозы, рекомендованные для человека) селекартен не влияет на число антителообразующих и ядросодержащих клеток в селезенке, а также на реакцию гиперчувствителыюсти замедленного типа у мышей. Полученные данные свидетельствуют об отсутствии негативного влияния селекартена на гуморальный и клеточный иммунитет и, следовательно, об отсутствии у препарата иммунотоксичности.

Селекартен, таким образом, обладает гепатопротекторным, желчегонным и антиоксидантным свойствами, и может быть рекомендован для проведения клинических испытаний. Беременность является противопоказанием для назначения препарата.

Таким образом, с помощью достаточно адекватных методов исследований, установлено, что селекартен при внутрижелудочном, внутривенном, внутримышечном и подкожном способах введения, особенно при внутривенном и внутримышечном способах введения обладает выраженным гепатопротекторным, желчегонным, холатообразующим и антиоксидантным свойствами.

На основании полученных результатов селекартен был представлен в Фармакологический комитет Министерства здравоохранения Республики Таджикистан для получения разрешения на проведение клинических испытаний в лечении заболеваний печени и билиарной патологии. Согласно решению Фармакологического комитета, протокол № 1/24 от 10 ноября 2004 года получено разрешение на проведение клинических испытаний селекартена в клинических базах Фармакологического комитета Министерства здравоохранения Республики Таджикистан.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Холов, Абдулхаким Кувватович, 2005 год

1. Авцын А.П., Жаворонков A.A., Pom М.А., Строчкова J1.C. "Микроэлементозы человека". - М.-Медицина,- 1991.- 496 С.

2. Авцын.А.П. Микроэлементозы человека. //Клин. Мед. 1995. № 6.-С. 6.

3. Азонов Д.А. Фармакология геранола. Автореф. Дисс. Канд. Мед. наук.-Л.: 1987 16 с.

4. Азонов Д.А Фармакология гераноретинола и эфирных масел. Автореф. Дисс. Докт. мед. наук.-Санкт-Петербург,- 1995.- с.

5. Александрович Е.В., Доровских В.А., Анохина P.A. и др. Фармакологическая защита печени от повреждающего действия СС14 в эксперименте.- //Тез. докл. междунар. Конф. поев. 100-летию акад. Аничкова (8 октября 1992).- Санкт-Петербург.- 1992.Т. 1.-С. 8.

6. Арчаков А.Н., Карузина H.H. Молекулярные механизмы взаимодействия четыреххлористого углерода с мембранами эндоплазматического ретикулума печени. //Успехи гепатологии. -Рига:, Зинатне. 1973. - Т.4. - С. 39-59.

7. Блюгер А.Ф. Зальцман В.К. Современные ультраструктурные аспекты патологии печени. //Ультраструктурная патология печени. //Рига.-Выпуск 16.-1983 -С. 7-11.

8. Виноградова Л.Ф., Мирзоянц Ж.А. Регуляция антиоксидантами изменений экскреторной функции печени при токсическом гепатите. //Эксперим. и клин, фармкол. 1993. - 56. - №5. - С.50-52.

9. Воробев Р.Н. Питание и здоровье М: Медицина.-1990.- 160 с.

10. Ю.Воробьев В.И. Есть можно всё. М: Рипол классик, 2001 .- 409 с.

11. П.Вощенко A.B., Чугаев В.Н., Ахмедьянов Г.С. Применениепрепаратов селена в медицине. Тезисы конференции "Патология человека и роль препаратов селена и пантов в ее терапии", Чита, 1993.

12. Голубкина H.A., Шагова М.В., Спиричев В.Б. и др. Содержание селена в продуктах питания и сыворотке крови жителей Норильска. //Вопр. питания.- 1992.-№4.-С.43-45.

13. П.Голубкина H.A. Потребление селена жителями Брянской области в районах радиоактивного заражения // Вопр. питания,-1994.-№4,-С.3-5.

14. Н.Голубкина H.A., Алиев Б.Д., Кушлинский Н.Е., Соколов Я.А. Селен в сыворотке крови и костной ткани при доброкачественных и злокачественных опухолях костей. // Вопр. Мед. химии.-1995.-т,4. С. 50-54.

15. Голубкина H.A., Мальцев Г.Ю., Богданов Н.Г. и др. Обеспеченность селеном жителей Калужской области. //Вопр. питания,-1995.-№5.-С.13-16.

16. Голубкина H.A., Шагова М.В., Спиричев В.Б. Обеспеченность селеном различных групп населения республики Башкортостан. //Вопр. питания.-1996.-№4.-С.З-5.

17. П.Голубкина H.A. Содержание Se в пшеничной и ржаной муке России, стран СНГ и Балтии. //Вопр. питания.-1997.-№3.-С. 17-20.

18. Голубкина H.A., Соколов Я.А. Уровень обеспеченности селеном жителей северного экономического района России. //Гигиена и санитария,-1997.-№3.-С.22-24.

19. Голубкина H.A., Батурин А.К., Шагова М.В., Мартинчик А.Н. Обеспеченность селеном жителей Алтайского края. //Вопр. питания.-1998.-№5-6.-С. 16-18.

20. Голубкина H.A., Парфенова Е.О., Решетник Л.А. Потребление селена населением Иркутской области. //Вопр. питания.-1998.-№4.-С.24-26

21. Голубкина H.A., Гмошинский И.В., Зорин С.Н. и др. Влияние биологически активной добавки автолизата обогащенных селеном пекарских дрожжей на состояние кишечного барьера у крыс при анафилаксии. //Вопр. питания.- 1998.-№3.-С. 18-22.

22. Голубкина H.A., Шагова М.В. Оценка уровня потребления селена беременными женщинами в отдельных регионах России и Украины. Тез. I Всероссийского конгресса с международным участием "Питание детей: XXI век", 2000; 28.

23. Гореликова Г.А., Маюрникова J1.A., Поздняковский В.М. Нутрицевтик селен: недостаточность в питании, меры профилактики // Вопр. питания.-1997.-№5.-С. 18-21.

24. Горбачев В.В., Горбачева В.Н. Витамины микро- и макроэлементы. Минск. Книжный дом.- 2002.- с.418-432.

25. Гмошинский И.В., Мазо В.К. Селен в питании: краткий обзор. //Medicina Altera.-1999.-№ 4.-С. 18-22.

26. Жаворонков A.A., Михалева JI.M., Авцын А.П. Микроэлементы. Новый класс болезней человека, животных и растений. //Проблемы биогеохимии и геохимической экологии. М.: Наука, 1999. С. 183199.

27. ЗО.Золотова Т.В., Давыдова А.П. Клинико-иммунологическое применение «Биоселена в лечение хронических аденоидитов у детей с вторичным иммунодефицитом. //Рос. Ринол.-1999. №1.- с 80-81.

28. ЗККнижникова В.А., Комлева В.А., Шандала Н.К. и др. Исследование антиканцерогенных свойств микроэлемента селена в санитарно-гигиеническом эксперименте. //Гиг. и сан. 1993. - № 7. - С. 54-57.

29. Книжникова В.А., Комлева В.А., Тутельян В.А. Влияние повышенного поступления органического селена с диетой на резистентность крыс к воздействию ионизирующего излучения, афлотоксина В1 и инфекции. //Вопросы питания. 1991.-№4. - С. 52-55.

30. Кукес В.Г. Клиническая фармакология. М:, Гэотар Медицина.-2000.-517 с.

31. Макарчук Н.М., Лещинская Я.С., АкимоваЮ.А. и соавт., Фитонциды в медицине. Киев. Наукова-думка. 1990. - 210 с.

32. Мансуров Х.Х. Желчнокаменная болезнь. Душанбе, Ирфон.- 1991 .221 с.

33. Мазо В.К., Гмошинский И.В., Тамбиев А.Х. и др. Влияние биологически активной добавки к пище, содержащей биодоступный селен, на протекание реакции системной анафилаксии у крыс. //Биотехнология.- 1997,- №9 -10. -С.45-48.

34. Махатов Б.К.Аширматова М.Н., Абдуллабекова P.M. Лекарственные растения Казахстана, обладающие профилактическими и противовоспалительными свойствами// метод. Разработки.-1999.- 62 с.

35. Мехтиев М.А.Абдуллаев Ф.Н. Селен в биологии.- Баку. ЭЛМ,-1976.- с. 67-69.

36. Низкодубова C.B., Федотов Д.С., Писанко Н.Ю. Коррекция энергетического метаболизма печени крыс при отравлении тетрахлорметаном с помощью липидов. //Вопр. мед. химии. -1992,Т. 37.-С. 53-56.

37. Николаевский В.В. Ароматерапия.- М.: Москва.- Колос.-2000.- с. 179-223.

38. Новицкий Ю.А., Новицкий М.Ю., Новицкая Т.И. Селеновое ка-ратинопротеиновое органическое вещество для регулирования метаболических процессов. Патент № 2177321.

39. Нурмухаметова Е. Недостаточность витаминов. //РМЖ. 1998, Том 6.- № 18.-С. 35.

40. Пиллат Т.Л., Шарманов Т.Ш. и соавт., Основные принципы Фармаконутрициологии. Астана-Алматы-Шымкент.- 2001.-309 с.

41. Попова P.A., Риппати П.О, Бехтерева З.А. и соавт. Определение суммарного содержания желчных кислот и холевой кислоты в желчи. //Лаб. дело. 1969. - № 11. С. 664-665.

42. Рисман М. Биологические активные пищевые добавки: неизвестное об известном, (пер. с английского М.А. Новицкой и соавт.). М: -1998.-489 с.

43. Романовский В.Е., Синькова Е.А. Витамины и витаминотерапия. -Ростов Н/Д: Феникс. 2000. - 320 с.

44. Руденко С.С., Бондарь Б.М., Кухаркин О.Л. и др. Влияние селена на функциональное состояние почек крыс при отравлении алюминием и кадмием. //Укр. Биохим. журн. 1998. №6.- С. 98-105.

45. Сейфула Р. Д., Голубкина H.A., Соколов Я.А. Экологические проблемы нарушения сперматогенеза у спортсменов и молодежи. // Сб. науч. Тр. ВНИФК. М:, 1997. С. 322-333.

46. Сидельникова В.Д. Геохимия селена в биосфере. //Проблемы биогеохимии и геохимической экологии. М: - Наука.-1999.-Т. 23. -С. 80-99.

47. Скакун Н.П., Климнюк Е.В. Экспериментальная фармакотерапия поражений печени, вызванных индометацином. //Фармакол. и токсикол.-1990. №6. - С.52-53.

48. Тутельян В.А., Суханов Б.П., Австриевских А.Н. и соавт., Биологические активные добавки в питании человека. Томск. Изд-во НТЛ. 1999. - 296 с.

49. Тутельян В.А., Княжев В.А., Хотимченко С.А., Голубкина H.A. и соавт. Селен в организме человека. М: Изд-во РАМН. 2002. - 224 с.

50. Тутельян В.А., Спиричев Б.В, Суханов Б.П. и соавт., Микронутриенты в питании здорового и больного человека Москва.- Колос.- 2002 .- 422 с.

51. Шагова М.В. Гигиеническая оценка обеспеченности селеном беременных женщин и детей России. Автореф. дисс. канд. мед. наук М., 2000. 45с.

52. Шарманов Т.Ш., Пиллат Т.Л. Биологические активные добавки: здоровье в настоящем и будущем. //Фармацевтический бюлл.-2000. №8. - с. 20-22.

53. Шаховская А.К., Гмошинский И.В., Зорин С.Н. и соавт. О применении органической формы селена в питании гастроэнтерологических больных. //Экология моря. Севастополь -2000.-T.54.-c. 83 -86.

54. Aaseth J. Optimum selenium levels in animal products for human consumption // Norweg. J. Agr.Sci.-1993.-Suppl.l 1.-P.121-126.

55. AlImang C., Carbon P., Krol A. The SBP2 and 15.5 kD/Snul3p proteins share the same RNA binding domain: identification of SBP2 amino acids important to SECIS RNA binding. //RNA. 2002. - N 8. - P. 13081318.

56. Amberg R., Mizutani T., Wu X.Q., Gross-H.J. Selenocysteine synthesis in mammalia: an identity switch from tRNA(Ser) to tRNA(Sec) //J.Mol.Biol.-1996.-V.263,N 1.-P.8-19

57. Arthur J.R., Beckett G.J. Roles of selenium in type I iodithyronine 5'-deiod-inase and in thyroid hormone and iodine metabolism. //Selenium in biology and human health. //Ed. R.F. Burk. N.Y.: Springer-Verlag. -1994.-P. 93-115.

58. Bamsal M.P., Ip C., Medina D. Levels and 75Se-labelling of specific proteins as a consequence of dietary selenium concentration in mice and rats. //Proc. Soc.Environ.Biol.Med.-1991 .-V. 196.-P. 147-154.

59. Campa A., Miguez-Burbano M. J., Burbano X., and Shor-Posner G. Role of selenium in HIV/AIDS. In D. L. Hatfield (ed.), Selenium: its molecular biology and role in human health. Kluwer Academic Publishers, Norwell, Mass. 2001. P. 247-255.

60. Bazley W.D., Caze D., Panske A. et al. Serum selenium levels and blood glutathioine perozidase activities in vitiligo // Br. J. Dermatol. 1999. Vol. 141, N2. P. 301-303

61. Beck M.A., Levander O.A. Dietary oxidative stress and the potentiation of viral infection. //Annu. Rev. Nutr.-1998.-V.18.-P. 93-116.

62. Beck M. A. Selenium as an antiviral agent. In D. L. Hatfield (ed.), Selenium: its molecular biology and role in human health. Kluwer Academic Publishers, Norwell, Mass. 2001. P. 235-245.

63. Bedwal R.S., Nair N., Sharma M.P., Mathur R.S. Selenium its biological perspectives. //Med.Hypotheses.-1993.-V.41 .-P. 150-159.

64. Benavides J.T., Mojica R.F.S. Selenosis occurencia de selenio en rocas, svelos y plantas. Intoxicación por en animalis y en humanos. Publicación IT-3, Instituto Geográfico de Colombia. Bogota. 1959.

65. Bende D., Weiss-Nouar C., et.al. Studies in distribution and Characteristics of new mamalian selenium containing proteins. //Analyst. 1995. - V. 120. P. 823-825.

66. Berry M.J., Kieffer J.D., Harney J.W., e.a. Selenocysteine confers the biochemical properties characteristic of the type I iodothyronine deiodinase. //J. Biol.Chem.-1991.-V.266.-P.14155-14158.

67. Berry M. J., Harney J. W., Ohama T., and Hatfield D. L. Selenocysteine insertion or termination factors affecting UGA codon fate and complementary anticodon: codon mutations. //Nucleic Acids Res. 1994. vol. 22.-P. 3753-3759.

68. Besk M.A., Esworlby M.A., Ho Y.S., Cbu F.F. Glutathone perocsidase protectsmice from viral ioduced miocarditis. //FASEB J.-1998. V. 12. -P. 1143-1149.

69. Bock A. Selenium metabolism in bacteria. In D. L. Hatfield (ed.), Selenium: its molecular biology and role in human health. Kluwer Academic Publishers, Norwell, Mass. 2001. P. 7-22.

70. Bock A., Forchhammer K., Heider J., and Baron C. Selenoprotein synthesis: an expansion of the genetic code. //Trends Biochem. Sci. 1991.-vol. 16.-P. 463-467.

71. Bosl M. R., Takadu K., Oshima M., Nishimura S., and Taketo M. M. Early embryonic lethality caused by targeted disruption of the mouse selenocysteine tRNA gene (Trsp). //Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997. -vol. 94.-P. 5531-5534.

72. Bowrey D.J., Morris-Stiff G.J., Puntis M.C. Selenium deficiency and chronic pancreatitis: disease mechanism and potential for therapy. //HPB Surg. 1999. Vol. 11. - N 4. - P. 207-215.

73. Brigelius-Flohe R., Fridrichs B., Maurer S., Streicher R.Determinants of PHGPx expression in a cultured endothelial cell line // Biomed.Environ.Sci.-1997.-V.10, N 2-3.-P.163-167.

74. Brtkova A., Brtko J. Selenium: metabolism and endocrines (Minireview). //Endocr. Regul. 1996 Sep. - 30(3). - P. 117-128.

75. Burk R.F. Recent developments in trace element metabolism and function: novell roles of selenium in nutrition. //J.Nutr.-1989.-V.l 19, N7.-P.1051-1054.

76. Busch A, Will S, Backofen R. SECIS Design: a server to design SECIS-elements within the coding sequence. //Bioinformatics. 2005 Aug 1. -vol. 21(15).-P. 3312-3.

77. Butler J.A., Beilstein M.A., Whanger P.D. Influence of dietary methionine on the metabolism of selenomethionine in rats. //J.Nutr.-1989.-V.119, N 7.-P.1001-1009.

78. Calomme M. et al. Seleno-Lactobacillus an organic selenium source. //Biological Trace Element Research. 1995. - vol.47. - P. 379-383.

79. Castellano S., Morozova N., Morey M., Berry M. J., Serras F., Coraminas M., and Guigo R. In silico identification of novel selenoproteins in the Drosophila melanogaster genome. //EMBO Rep. -2001.-vol. 2.-P. 697-702.

80. Cemeli E, Carder J, Anderson D, Guillamet E, Morillas MJ, Creus A, Marcos R. Antigenotoxic properties of selenium compounds on potassium dichromate and hydrogen peroxide. //Teratog. Carcinog. Mutagen. 2003. - Suppl 2. - P. 53 - 67.

81. Ciapellano S., Testolin G., Allegrini M., Porrini M. Availability of selenium in dough and bisquits in comparison to wheat meal. //Ann.Nutr. Metab. 1990. - V.34. - P. d343-349.

82. Ciapellano S., Testolin G., Allegrini M., Porrini M. Availability of selenium in dough and bisquits in comparison to wheat meal //Ann.Nutr. Metab.-1990.-V.34.-P.343-349.

83. Chavatte L., Brown B.A., Driscoll D.M. Ribosomal protein L30 is a component of the UGA-selenocysteine recoding machinery in eukaryotes. //Nat Struct. Mol. Biol. 2005. - vol. 12. - P. 408-416.

84. Chittum, H. S., W. S. Lane, B. A. Carlson, P. P. Roller, F. T. Lung, B. J. Lee, and D. L. Hatfield. 1998. Rabbit B-globin is extended beyond its UGA stop codon by multiple suppressions and translation reading gaps. Biochemistry 37:10866-10870.

85. Chu F.F., Dorosbow J.H., Eswordby R.S. Expression, characterization and tissue distribution of a new cellular selenium -dependent glutatione perocsidase GSHPx-GL// J. Biol. Chem, 1993.- V. 268.-H.2571-2576.

86. Chu F.F.Esworby R.S., Ho Y.S.et.al., Expression and chromosomal mapping of mause Gpx2 gene encoding the gastrointestinalform of glutathione peroxidase, GPX-GI. //Biomed. Environ Sci.-1997.-V.10. -P. 156-162.

87. Clark L.C., Combas G.F., Turndull B.W., et.al. The nutritional prevention of cancer with selenium in 1983-1993; a randomized clinical trial. //JAMA. 1996. - V.276. - P. 1957-1963.

88. Combs G.F. Selenium in nutrition. //Encyclopedia of human biology /Ed. R. Dulbecco. 2nd. Ed. San Diego: Acad.Press. 1997. - Vol. 7. P. 743-754.

89. Combs G. F., Lu L. Selenium as a cancer preventive agent. 2001. -P. 205-217. In D. L. Hatfield (ed.), Selenium: its molecular biology and role in human health. Kluwer Academic Publishers, Norwell, Mass.

90. Copeland P.R., Driscoll D. M. Purification, redox sensitivity, and RNA binding properties of SECIS-binding protein 2, a protein involved in selenoprotein biosynthesis. //J. Biol. Chem. 1999. - N. 274. - P. 25447-25454.

91. Copeland P.R., Fletcher J.E., Carlson B.A., Hatfield D.L., Driscoll D.M. A novel RNA binding protein, SBP2, is required for the translation of mammalian selenoprotein mRNAs. //EMBO J. 2000. -vol. 19.-P. 306-314.

92. Copeland P.R., Stepanik V.A., Driscoll D.M. Insight into mammalian selenocysteine insertion: domain structure and ribosome binding properties of sec insertion sequence binding protein 2. //Mol. Cell. Biol. 2001 -vol. 21. - 1491-1498.

93. Copeland P.R. Regulation of gene expression by stop codon recoding: selenocysteine. //Gene. -2003. -vol. 312.-P. 17-25.

94. Coppinger R. J., Diamond A. M. Selenium deficiency and human disease. 2001. - P. 219-233. In D. L. Hatfield (ed.), Selenium: its molecular biology and role in human health. Kluwer Academic Publishers, Norwell, Mass.

95. Daher R., Van Lente F. Characterization of selenocysteine lyase in human tissues and its relationship to tissue selenium concentration. //J.Trace.Elem.Electrolytes Health Dis.-1992.-V. 6, N 3.-P.189-194.

96. Deagen J.T., Butler J.A., Beilstein M.A., Wranger P.D. Effects of dietary selenite, selenocysteine and selenomethionine on selenocysteine lyase and glutathione peroxidase activities and on selenium in rat tissues //J.Nutr.-1989.-V.l 17, N 1.- P.91-98.

97. Esworthy R.S., Swwiderer K.M.,Ho Y.S., Cby F.F. Selenium -dependet glutathioneperocsidase GI is a major glutathione peroxidase activiti in the mucosal epithelum of rodentintestine. //Biochem.Biophys. Acta. - 1998. - V.1381. - P.213-226.

98. Fauci A.S., Braunwald E., Isselbacher K.J. Harrison's principles of internal medicine 14th edition, 1998. Chapter 79: Vitamin deficiency and excess, P. 480-487.

99. Fleming C.R., McCull J.T., O'Brein J.F. Selenium status in patients receiving home parenteral nutrition. //J. Parenter. Enter. Nutr. 1990. -Vol. 8.-P. 258-262.

100. Fletcher J. E., Copeland P. R., Driscoll D. MPolysome distribution of phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase mRNA: evidence for a block in elongation at the UGA/selenocysteine codon. //RNA. -2000.-N. 6. P. 1573-1584.

101. Fletcher J.E., Copeland P.R., Driscoll D.M., Krol A. The selenocysteine incorporation machinery: interactions between the SECIS RNA and the SECIS-binding protein SBP2. //RNA . 2001. - N 7. - P. 1442-1453.

102. Fryer M.J. Rationale for clinical trials of selenium as an antioxidant for the treatment of the cardiomyopathy of Friedreich's ataxia. //Med. Hypotheses. 2002 Feb. - vol. 58(2). - P. 127 - 32.

103. Gladyshev V.N., Jeang K.T., Stadtman T.C. Selenocystein, identified as the penu ltimate C-terminal residue in human T-cell thioredoxin reductase, corresponds to TGA in the human placental gene. //Proc. Nath. Sci. USA. 1996.-Vol. 93.-P. 6146-6151.

104. Gladysdev V.N., Jeang K.T., Wootton J.C., Hatfield D.L. A new human selenium containing protein. Purification, characterization and cDNA sequenced. //Ibid. 1998. - Vol. 273. P. 8910-8915.

105. Gladysdev V.N., Hatfield D.L. Selenocysteine-containing proteins in mammals. //J. Biomed.Sci. 1999. - Vol.6, N 3. p. 151-160.

106. Gladyshev V. N. Selenium in biology and human health: controversies and perspectives. 2001. - P. 313-317. In D. L. Hatfield (ed.), Selenium: its molecular biology and role in human health. Kluwer Academic Publishers, Norwell, Mass.

107. Gladyshev V. N., Kryukov G. V. Evolution of selenocysteine-containing proteins: significance of identification and functional characterization of selenoproteins. //Biofactors 2001. - vol. 14. - P. 8792.

108. Glass R. S., Singh W. P., Jung W., Veres Z., Scholz T. D., Stadtman T. C. Monoselenophosphate: synthesis, characterization, and identity with the prokaryotic biological selenium donor, compound SePX. //Biochemistry 1993. - vol. 32. - P. 12555-12559.

109. Golubkina N.A., Alfthan G.V. The Human Selenium Status in 27 regions of Russia. //J.Trace elements med. Biol. -1999-V. 13, P.15-20.

110. Grundner-Culemann E., Martin III G. W., Harney W., Berry M. J. Two distinct SECIS structures capable of directing selenocysteine incorporation in eukaryotes. //RNA 1999. - N 5. - P. 625-635.

111. Grundner-Culemann E., Martin III G. W., Tujebajeva R., Harney J. W., Berry M. J. Interplay between termination and translation machinery in eukaryotic selenoprotein synthesis. //J. Mol. Biol. 2001. - vol. 310. -P. 699-707.

112. Hatfield D. L., Lee B. J., Hampton L., Diamond A. M. Selenium induces changes in the selenocysteine tRNA Ser. Sec population in mammal cells.//Nucleic Acids Res. 1991.-vol. 19.-P. 939-943.

113. Hatfield D.L., Gladyshev V.N. How selenium has altered our understanding of the genetic code. //Mol. Cell. Biol. 2002. - vol. 22. -P. 3565-3576.

114. Heider J., Baron C., Bock A. Coding from a distance: dissection of the mRNA determinants required for the incorporation of selenocysteine into protein. //EMBO J. 1992. - vol. 11. - P. 3759-3766.

115. Hill K. E., Lyons P. R., Burk R. F. Differential regulation of rat liver selenoprotein mRNAs in selenium deficiency. //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. - vol. 185. - P. 260-263.

116. Hill K. E., Chittum H. S., Lyons P. R., Boeglin M. E., Burk R. F. Effect of selenium on selenoprotein P expression in cultured liver cells. //Biochim. Biophys. Acta 1996.-vol. 1313.-P. 29-34.

117. Howard, M.T., Aggarwal, G., Anderson, C.B., Khatri, S., Flanigan, K.M., Atkins, J.F. Recoding elements located adjacent to a subset of eukaryal selenocysteine-specifying UGA codons. //EMBO J. 2005. -24. -P. 1596-1607.

118. Hu F.B., Dietary modulation of endothelial function: implications for cardiovascular disease. //American Journal of Clinical Nutrition. 2001.- vol. 73, №4. P. 673 - 686.

119. Hubert N., Sturchler C., Westhof E., Carbon P., Krol A. The 9/4 secondary structure of eukaryotic selenocysteine tRNA: more pieces of evidence.//RNA 1998.-N. 4.-P. 1029-1033.

120. Ioudovitch A., Steinberg S. V. Modeling the tertiary interactions in the eukaryotic selenocysteine tRNA. //RNA 1998. -N. 4. - P. 365-373.

121. Janghorbani M., Lynch N.E., Mooers C.S., Ting B.T. Comparison of the magnitude of the selenite exchangeable pool and whole body selenium in adult rats. //J.Nutr.-1990.-V.120, N 2.-P.190-199.

122. Janghorbani M., Martin R.F., Kasper L.J., e.a. The selenite-exchangeable metabolic pool in humans: a new concept for the assessment of selenium status // Amer.J.Clin.Nutr.-1990.-V.51.-P.670-677.

123. Janghorbani M., Mooers C.S., Smith M.A., et al. Correlation between the size of the selenite-exchangeable metabolic pool and total body or liver selenium in rats //J.Nutr.-1991.-V.121.-P.345-354.

124. Kanase R., Patil S., Kanase A. Effect of Hepatoprotective aurvedic drugs on lusosomal enzumes during hepatic induced by single doses of CC14. //Indian J. Exp. Biol. 1994. - vol. 32. - N5. - P. 328 - 332.

125. Khorana G. H., Buchi H., Ghosh H., Gupta N., Jacob T. M., Kossel H., Morgan R., Narang S. A., Ohtusda E., Wells R. D. Polynucleotide synthesis and the genetic code. Cold Spring Harbor Symp. //Quant. Biol.- 1996.-vol. 31.-P. 39-49.

126. Klein E.A., Thompson I.M., Lippman S.M., Goodman P.J., Albanes D., Taylor P.R., Coltman C. SELECT: the Selenium and Vitamin E Cancer Prevention Trial: rationale and design. //Prostate Cancer Prostatic Dis. 2000 Nov. - N. 3(3). - P. 145 - 151.

127. Kohrle J. The deiodinase family: selenoenzymes regulating thyroid hormone availability and action. //Cell. Mol. Life Sci. 2000. - vol. 57. -P. 1853-1863.

128. Korotkov K. V., Novoselov S. V., Hatfield D. L., Gladyshev V. N. Mammalian selenoprotein in which selenocysteine (Sec) incorporation is supported by a new form of Sec insertion sequence element. //Mol. Cell. Biol. 2002. - vol. 22. - P. 1402-1411.

129. Kryukov G. V., Kryukov V. M., Gladyshev V. N. New mammalian selenocysteine-containing proteins identified with an algorithm that searches for selenocysteine insertion sequence elements. J. Biol. Chem. -1999. vol. 274. - P. 33888 - 33897.

130. Kryukov G. V., Kumar R. A., Koc A., Sun Z., Gladyshev V. N. Selenoprotein R is a zinc-containing stereospecific methionine sulfoxide reductase. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2002. - vol. 99. - P. 42454250.

131. Lei X. G., Evenson J. K., Thompson K. M., Sunde R. A. Glutathione peroxidase and phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase are differentially regulated in rats by dietary selenium. //J. Nutr. 1995. -vol. 125.-P. 1438- 1446.

132. Lescure A., Gautheret D., Carbon P., Krol A. Novel selenoproteins identified in silico and in vivo by using a conserved RNA structural motif. //J. Biol. Chem. 1999. - vol. 274. P. 38147 - 38154.

133. Levander O.A. Scentific rational for the 1989 recommended dietaru allovance for selenium. //J.Am. Diez Ass. 1991. - V.91. - 12. - P. 1572 - 1576.

134. Levander O., Burk R.F. Selenium. //Present knowledge in nutrition / Eds. E.E. Ziegler, L.F. Filer. N.Y.: Acad. Press, 1998. P. 320-328

135. Li C.Z., Huang J.R., Li C.X. Sedium selenite as a preventive measure for Kaschin-Beck disease as evaluated in X-ray studies. //Ibid. 1996. -P. 934-93.

136. Longnecker M.P., Taylor P.R., Levander O.A., e.a. Selenium in diet, blood and toenails in relation to human health seleniferous area //Amer.J.Clin.Nutr.-1991 .-V.53.-P. 1288-1294.

137. Longnecker M.P., Stram D.O., Taylor P.R. et al. Use of selenium concentration in whole blood, serum, toenails or urine as a surrogate measure of selenium intake. // Epidemiology. 1996. - Vol. 7. - P. 384390.

138. Low S.C., Harney J.W., Berry M.J. Cloning and functional characterization of human selenophosphate synthetase, an essential component of selenoprotein synthesis. //J. Biol. Chem. 1995. - vol. 270. - P. 21659-21664.

139. Low S.C., Berry M.J. Knowing when not to stop: selenocysteine incorporation in eukaryotes. //Trends Biochem. Sci. 1996. - vol. 21. -P. 203-208.

140. Low S.C., Grundner-Culemann E., Harney J. W., Berry M. J. SECIS-SBP2 interactions dictate selenocysteine incorporation efficiency and selenoprotein hierarchy. //EMBO J. 2000. - vol. 19. - P. 6882 - 6890.

141. Lundstrom J., Holmgren A. Protein disulfide-isomerase is a substrate for thio redoxin reductase and has thioredoxin-like activity. //J. Biol. Chem. 1990. - Vol. 265. - P. 9114-9120.

142. Majorino M., Wissing J.B., Brigelius-Flobe R. et al., Testosterone mediates expression of the selenoprotein PHGPx by induction of spermatogenesis and not by direct transcriptional gene activation. //|FASEB J. 1998.-V.12-P. 1359-1370.

143. Martin G. W., Berry M. J. Selenocysteine codons decrease polysome association on endogenous selenoprotein mRNAs. //Genes Cells -2001.-N6.-P. 121-129.

144. Maswe R.L., Magenbeimer B.S.Calvet J.P. Mouse plasma glutathione peroxidsec DNA Seqense analysis and renal proximal tubular expression and secretion. //J. Biologi Chem. 1994.-V. 269. - P. 27066 - 27073.

145. Matsui M., Oshima M., Oshima H., Takaku K., Maruyama T., Yodoi J., Taketo M. M. Early embryonic lethality caused by targeted disruption of the mouse thioredoxin gene. //Dev. Biol. 1996. - vol. 178. -P. 179 -185.

146. McKenzie R. C., Rafferty T. S., Beckett G. J., Arthur J. R. Effects of selenium on immunity and aging. 2001. - P. 257-272. In D. L. Hatfield (ed.). Selenium: its molecular biology and role in human health. Kluwer Academic Publishers, Norwell, Mass.

147. Mehta A., Rebsch C.M., Kinzy S.A., Fletcher J.E., Copeland P.R. Efficiency of mammalian selenocysteine incorporation. //J. Biol. Chem. 2004. - N 3. - P. 37852-37859.

148. Meltzer H.M., Norheim G., Loken E.B., Holm H. Supplementation with wheat selenium induces a dose-dependent responce in serum and urine of a Se-replete population. //Brit.J.Nutr.-1992.-V.67.-P.287-294.

149. Mitchell J.H., Nicol F., Beckett G. J., Arthur J. R. Selenium and iodine deficiencies: effects on brain and brown adipose tissue selenoenzyme activity and expression. //J. Endocrinol. 1997. - vol. 155. - P. 255 -263.

150. Michel J.-B. NO (Nitric oxide) and Cardiovascular Homeostasis. -1999. Menarini International Industrie Farmaceutiche Riunite s.r.l. Paris. A.A. Brown.,

151. Michelson A.M. Selenium glutathione peroxidase: some aspects in man. //J. Environ. Pathol. Toxicol. Oncol. 1998 vol. 17(3-4). - P. 233 -9.

152. Misso N.I., Powers K.A., Gillon R.L. et.al. Reduce platelet glutathione peroxidase activity and serum selenium concentration in atopic asthmatic patients. //Clin. Exp. Allergy. 1996. - V.26.-P. 838-847.

153. Mfksimovic Z., Dijic I., Jovic V., Rsumovic M. Selenium deficiency in Yugoslavia // Biol. Trace Elem. Res. 1992. Vol. 33. P. 187-196.

154. Moody D.E. Effect of fhenobarbital treatment on carbon tetrachoridemediated cytochrom P-450 Loosand diene conigate formation. //Toxicol. Lett. 1992 - vol. 61. - P. 213-224.

155. Moskovitz J., Bar-Noy S., Williams W. M., Requena J., Berlett B. S., Stadtman E. R. Methionine sulfoxide reductase (MsrA) is a regulator of antioxidant defense and lifespan in mammals. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA-2001.-vol. 98.-P. 12920- 12925.

156. National Research council recomendid dietaru allovances 9th ed Nat.Acad.press 1980.

157. Nasim M. T., Jaenecke S., Belduz A., Kollmus H., Flohe L., McCarthy J. E. G. Eukaryotic selenocysteine incorporation follows a nonprocessive mechanism that competes with translational termination. //J.Biol. Chem. -2000. -vol. 275.-P. 14846- 14852.

158. Navarro-Alarcon M., Lopez G., de la Serrana H. et al. Serum and urine selenium concentrations as indicators of body status in patients with diabetes mellitus. //Sci. Total Environ. 1999. - Vol. 228, N 1. - P. 7985.

159. Nazioglu M. Protective role of interperitoneally administred vitamin E and selenium in rats anesthetized with enflurane. //Biol. Trace Elem. Res. 1999. - V. 69. - P. 199-209.

160. Nicolic M., Jorga J.B., Janosevic S. Effects of sellenium supplementation in cancer patents. //Proc. Int. "Selenium in geochemistri, biology and medicine». Belgrad. 1996. - P. 73.

161. Pepine C.J., Celermajer D.S., Drexler H. Vascular health as a therapeutic tagert in cardiovascular disease. //University of Florida. -1998. N 10.

162. Patterson B.H., Levander O.A. Naturally occurring selenium compounds in cancer chemo-prevention trials. //Cancer Epidemiology Markers and Prevention. 1997. - Vol. 6. - P. 63-69.

163. Pfeiffer J.M., Askew E.W., Roberts D.E. et.al. Effect of antioxidant supplementation on urine and blood markers of oxidative stress during extended moderate -altitude training. //Wilderness Environ. Med. -1999.-V. 10. -N2. -P. 66-74.

164. Rother M., Resch A., Gardner W. L., Whitman W. B., Bock A. Heterologous expression of archaeal selenoprotein genes directed by the SECIS element located in the 3' non-translated region. //Mol. Microbiol. 2001.-vol.40.-P. 900-908.

165. Roveri A., Casasco A., Maiorino M. et al. Phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase of rat testis. Gonadotropin dependence and immunocytochemical identification. //J. Biol. Chem. 1992. - Vol. 267. -N9.-P. 6142-6146.

166. Sable A.D., Morriss V.C., Levander O.A. Selenium content of rat hair, hails and other tisues is afected by concurrent exprosure to toxic elements.//Nutr. res. 1993.-V. 13.-P. 31-36.

167. Sayato Y., Nakamuro K., Hasegawa T. Selenium methylation and toxicity mechanism of selenocystine//Yakugaku Zasshi.-1997.~V.l 17, N 10-11.-P.665-672.

168. Spallholz J.E. Of the nature of selenium toxicity and carcinostatic activity. //Free Radic. Biol. Med. 1994. - Vol. 17, N 1. - P. 45-64.

169. Sun Q. A., Wu Y., Zappacosta F., Jeang K. T., Lee B. J., Hatfield D. L., Gladyshev V. N. Redox regulation of cell signaling by selenocysteine in mammalian thioredoxin reductases. //J. Biol. Chem. -1999. vol. 274. - P. 24522 - 24530.

170. Sun X., Moriarty P. M., Maquat L. E. Nonsense-mediated decay of glutathione peroxidase 1 mRNA in the cytoplasm depends on intron position. //EMBO J. 2000. - vol. 19. - P. 4734 - 4744.

171. Sun Q. A., Kirnarsky L., Sherman S., Gladyshev V. N. Selenoprotein oxidoreductase with specificity for thioredoxin and glutathione systems. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2001. - vol. 98. - P. 3673 - 3678.

172. Sunde R.A. Molecular biology of selenoproteins //Annu.Rev.Nutr.-1990.-V.10.-P.451-474.

173. Sunde R. Intracellular glutatione perocsidasses structure, regulation, and functions selenium in biology and human health. Ed R.F. Burk, N.Y: Springer-Verlag. 1998.-P. 146-177.

174. Tamura T., StadtmanT.C. A new selenoprotein from human lung adenocarcinoma cells: purification, properties, and thioredoxin reductase activity. //Proc.Natl.Acad.Sci.USA.-1996.-V 93, N 3.- P.1006-1011.

175. Taylor E.W. Selenium and cellular immunity. //Biol. Trace Elem. Res.- 1995.-V.49.-P.85-89.

176. Thompson H.J. Role of low molecular weight, selenium-containing compounds in human health. 2001. - P. 283-297. In D. L. Hatfield (ed.). Selenium: its molecular biology and role in human health. Kluwer Academic Publishers, Norwell, Mass.

177. Trace elements in human nutrition and health. Geneva, WHO. - 1996.- 343 P.

178. Tujebajeva R.M., Copeland P.R., Xu X.-M., Carlson B.A., Harney J.W., Driscoll D.M., Hatfield D.L., Berry M.J. Decoding apparatus for eukaryotic selenocysteine insertion. //EMBO Rep. 2000. — vol. 1. - P. 1-6.

179. Tzatchev K., Georgiou Z., Gentchev G. Reference limits of selenium concentraeion in blood serum of healthy bulgarian sub-population // Metal ions in biology and medicine. / Eds. J. Anactassopoulou et al. Paris: J. Libbey, 1992. P. 420-425.

180. Vanderplas J.B., Contempre B., Duale N.L. Iodine and selenium deficiency associated with cretinism in northern Zaire. //Am. J. Clin. Nutr. 1990. - Vol. 52. - P. 1087-1093.

181. Van der Torre H., Dokkum W., Schaafsma G., e.a. Effects of various levels of Se in wheat and meat on blood Se status indices and on Se balance in Dutch men//Brit.J.Nutr.-1991.-V.65.-P.69-80.

182. Walczak R., Westhof E., Carbon P., Krol A. A novel RNA structural motif in the selenocysteine insertion element of eukaryotic selenoprotein mRNAs. //RNA 1996. - N. 2. - P. 367 - 379.

183. Walker WA, Watkins JB. Nutrition in Pediatric London, 1997; P. 91-114.

184. Waschulewski I.H., Sunde R.A. Effect of dietary methionine on utilization of tissue selenium from dietary selenomethionine for glutathione peroxidase activity in the rat. //J.Nutr.-1992.-V.l 18, N 3.-P.367-374.

185. Weiss S.L., Sunde R.A. cis-Acting elements are required for selenium regulation of glutathione peroxidase-1 mRNA levels. //RNA 1998. - N. 4.-P. 816-827.

186. Wendeland S.C., Beilstein M.A., Chen C.L. Purification and properties of selenoprotein W from rat muscle. //J. Biol. Chem. 1993. - Vol. 268. -P. 17 103-17 107.

187. Wendeland S.C., Beilstein M.A., Yen J.Y. et al. Rat skeletal muscle seleno protein W: cDNA clone and mRNA modulation by dietary selenium // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. Vol. 92. P. 8749-8753.

188. Whanger P.D., Butler J.A. Effects of various dietary levels of selenium as selenite or selenomethionine on tissue selenium levels and glutathione peroxidase activity in rats // J.Nutr.-1988.-V.l 18, N 7.-P.846-852.

189. Xu X. M., Zhou X., Carlson B. A., Kim L. K., Huh T.-L., Lee B. J., Hatfield D. L. The zebrafish genome contains two distinct selenocysteine tRNA Ser. Sec genes. //FEBS Lett. 1999. - vol. 495. -P. 16-20.

190. Xu X. M., Carlson B. A., Kim L. K., Lee B. J., Hatfield D. L., Diamond A. M. Analysis of selenocysteine (Sec) tRNASer.Sec gene in Chinese hamsters. //Gene 1999. - vol. 239. - P. 49 - 53.

191. Yamamoto Y., Tarabasibi K. Glutatione peroxidase isolated from plasma reduced phospolipid hydroperoxides. //Arch. Biochem. Biophys.- 1993.-V. 305.-P.541-545.

192. Yasumoto K., Iwami K., Yoshida M. vitamin B6 dependence of selenomethionine and selenite utilization for glutathione peroxidase in the rat. //Ibid. 2002. - P. 760-764.

193. Yukio H., Jtary Y.M, Eilchi G. Characienization of mouse hepatocyte growth stimulating factor in serum of mice treated with carbon tetrachloride. //Chem. And pharm. Bull. 1992. - vol. 40. - P.452-455.

194. Yusuf S.W., Rehman Q., Casscells W. Cardiomyopathy in association with selenium deficiency: a case report. //JPEN J Parenter Enteral Nutr.- 2002 Jan-Feb. vol. 26(1). - P. 63 - 66.