Экспериментальное изучение гепатопротекторных и желчегонных свойств бетулина тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.25, кандидат медицинских наук Юрченко, Игорь Васильевич

• Юрченко, Игорь Васильевич
• кандидат медицинских наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Юрченко, Игорь Васильевич

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Берёза - источник лекарственного сырья

1.2. Биологически активные вещества берёзы, определяющие её лечебные свойства

1.3. Биологические свойства бетулина

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Объект исследования и изучаемые вещества

2.2. Объём выполненных исследований

2.3. Моделирование экспериментального гепатита

2.4. Методы и показатели биохимических исследований

2.5. Изучение функционального состояния печени

2.6. Морфогистохимические исследования

2.7. Исследование желчегонной активности

2.8. Изучение микросомальных ферментов печени

2.9. Статистическая обработка полученных данных

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Влияние бетулина на течение острого гепатита при токсическом повреждении печени парацетамолом

3.1.1. Влияние бетулина на биохимические показатели

3.1.2. Влияние бетулина на морфофункционалыюе состояние печени.

3.2. Влияние бетулина на течение острого гепатита при токсическом повреждении печени четыреххлористым углеродом

3.2.1. Влияние бетулина на биохимические показатели

3.2.2. Влияние бетулина на активность антиоксидантной системы

3.2.3. Влияние бетулина на экскреторную функцию печени

3.2.4. Влияние бетулина на состояние микросомальных ферментов печени при интоксикации СС

3.3. Влияние бетулина на течение острого гепатита при токсическом повреждении печени этиловым спиртом

3.3.1. Влияние бетулина на биохимические показатели

3.3.2. Влияние бетулина на течение мезенхимально-воспалительного синдрома

3.3.3. Влияние бетулина на развитие холестатического синдрома при экспериментальном этаноловом гепатите

3.3.4. Влияние бетулина на морфофункциональное состояние печени

3.4. Влияние бетулина на течение гепатита, вызванного галактозамином

3.5. Влияние бетулина на процессы желчеобразования при токсическом поражении печени

3.6. Изучение безвредности и безопасности

3.6.1. Острая токсичность бетулина

3.6.2. Хроническая токсичность бетулина

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспериментальное изучение гепатопротекторных и желчегонных свойств бетулина»

Актуальность исследования

В последнее время хронические заболевания печени занимают существенное место среди причин смертности и нетрудоспособности (Соринсон С.Н., 1998). Более того, отмечается тенденция роста числа больных с хроническими поражениями печени, которые распространены преимущественно у лиц работоспособного возраста (Подымова С.Д., 1993). Это обусловлено тем, что условия существования современного человека характеризуются наличием в окружающей среде большого числа химических соединений, вызывающих изменения биологических процессов в печени и приводящих к её токсическому поражению.

Круг веществ, проявляющих гепатозащитные свойства, достаточно велик, однако, в соответствии с современной классификацией лекарственных веществ, из их числа выделяют небольшую группу гепатопротекторов, оказывающих избирательное терапевтическое действие на печень. К ним относятся растительные полифенольные антиоксиданты (легалон, силибор, катерген, валилив), фосфолипидный препарат эссенциале, который проявляет иммуномоделирующие эффекты в условиях острой гепатопатии (Конопля H.A., 2000). Терапевтическая активность названных препаратов не всегда оказывается достаточной. Большинство из применяемых гепатопротекторов являются импортными, что побуждает к поиску новых эффективных отечественных гепатозащитных средств. Особенно велика потребность в гепатозащитных средствах при терапии заболеваний печени токсической этиологии. Гепатотропные токсиканты широко используются в промышленности, сельском хозяйстве, в быту (алкоголь, лекарственные средства и др.) (Bonkovsky H.L. et al., 1996). По данным комитета здравоохранения С-Петербурга (2003) болезни печени с 1997г. возросли в 2,1 раза.

Известно, что в окружающей среде присутствует около 80 ООО гепатотоксических ксенобиотиков с которыми человек контактирует в течение своей жизни. В 30% случаев острых отравлений возникают клинические проявления химического поражения печени, у 7% людей, получивших лекарственные препараты, развивается медикаментозное поражение этого органа (Арчаков А.И., Корузина Н.И., 1988).

Общим для всех форм токсических поражений печени является усиление свободно радикальных процессов и перекисного окисления липидов (ПОЛ), нарушение структуры мембран гепатоцитов и повышение их проницаемости (Костин C.B., 2000).

Поэтому изучение и выявление биологически активных веществ, способных блокировать патологические процессы в печени, является весьма актуальной проблемой.

Исторически в народной медицине широко используются экстракты (как водные, так и спиртовые) различных частей березы (почки, листья, кора), в том числе и для лечения заболеваний органов пищеварения, мочевыделительной системы. Настои и отвары почек и листьев березы известны своими противовоспалительными и ранозоживляющими свойствами при хронических формах экземы, лечении ран, эрозий, пролежней. Эффективными они считаются и при желтухах. Рекомендации по их применению дают не только народные травники, но и официальные медицинские издания («Русская медицинская газета», 1834г.). Береста наряду с листом подорожника использовалась в качестве раневых пластырей. В годы Великой Отечественной войны березовая кора использовалась в пищу как в виде отваров, так и в виде добавок бересты в хлеб.

В задачу нашего исследования входило изучение гепатозащитного действия бетулина - это тривиальное название (Мэзон, 1831) непредельного пентациклического тритерпенового спирта лупанового ряда бетулина -С30Н50О2 или луп-20(29)-ен-3 ß, 28-диола. Бетулин получают экстракцией органическим растворителем наружного слоя коры — бересты наиболее распространенных в России видов берёзы (Betula pubescens, Betula pendula). В бересте бетулин является основным экстрактивным веществом (около 70% по массе) и обеспечивает ее белый цвет.

Цель исследования

Экспериментальное изучение гепатопротекторных и желчегонных свойств бетулина.

Задачи исследования:

1. Изучить защитное действие бетулина при токсическом поражении печени четырёххлористым углеродом.

2. Изучить гепатопротекторное действие бетулина при токсическом поражении печени парацетамолом.

3. Изучить гепатопротекторное действие бетулина при токсическом поражении печени этанолом.

4. Изучить гепатозащитное действие бетулина при D-галактозаминовом гепатите.

5. Изучить репаративные свойства печени, её функциональное состояние и биохимические показатели крови в условиях воздействия бетулина при токсическом поражении печени.

6. Изучить влияние бетулина на процессы желчеобразования и желчевыделения при токсическом поражении печени.

Научная новизна работы

В работе получены новые данные о гепатопротекторном действии бетулина в условиях экспериментальной модели гепатита, вызванного СО4, парацетамолом, этанолом и галактозамином.

Показано, что гепатозащитное действие бетулина связано с нормализующим влиянием на индикаторные ферменты печени (АлАТ, АсАТ), предупреждением выраженности воспалительных процессов в печени, уменьшением показателей холестатического синдрома.

Установлено дозозависимое влияние бетулина на процессы регенерации в печени в условиях токсического ее поражения. Выявлена роль бетулина в реализации антиоксидантных и гепатопротекторных эффектов.

Бетулин восстанавливал секрецию желчи и концентрацию в ней желчных кислот, холестерина, билирубинов и фосфолипидов, восстанавливал процессы гидроксилирования желчных кислот и нормализовывал соотношение три- и дигидроксихолановых кислот.

Научно-практическая значимость

Полученные данные имеют важное научно-практическое значение, поскольку выявленные и изученные гепатозащитные свойства бетулина, представляют его перспективную значимость в качестве нового гепатопротекторного средства.

Установлены выраженные дозозависимые эффекты бетулина на процессы перекисного окисления липидов и физиологической регенерации гепатоцитов в условиях токсического поражения печени.

Экспериментально обоснована возможность использования в практике гепатологии нового гепатопротектора. Материалы по препарату представлены в ФК МЗ РФ с целью получения разрешения на его клинические испытания в качестве гепатопротектора в комплексной терапии гепатитов и гепатозов.

Полученные в работе результаты значительно расширяют представления о спектре биологической активности и возможных механизмах действия бетулина, что позволяет дать теоретическое обоснование его использования в клинической практике.

Получены Регистрационные удостоверения: 004726.Р.643.09.2002. «Берёзовый экстракт сухой - С» - сырье для производства биологически активных добавок к пище (16.09.2002г.). 004820.Р.643.09.2002. «Биологически активная добавка к пище «Бетула - Дэ-токс»».( 16.09.2002г.).

004823.Р.643.09.2002. «Биологически активная добавка к пище «Берёзовый экстракт сухой»». (16.09.2002г.).

Санитарно-гигиеническое заключение МЗ РФ № 77.99.20.937.Б. 000542.04.04. от 13.04.2004г. на биологически активную добавку к пище «Алкощит».

Основные положения, выносимые на защиту

1. Бетулин в дозах 1-10 мг/кг оказывает выраженное гепатопротекторное действие на моделях токсического поражения печени ССЦ, парацетамолом, этанолом и при О-галактозаминовом гепатите.

2. Бетулин оказывает нормализующее влияние на биохимические показатели крови, отражающие метаболизм и функцию печени.

3. Бетулин предупреждает выраженность воспалительных процессов в печени и показатели холестатического синдрома при экспериментальном гепатите.

4. Наиболее выраженный гепатопротекторный эффект по результатам гистоморфологического исследования бетулин проявляет в дозе 1 мг/кг.

5. Бетулин устраняет депрессию желчеобразования и восстанавливает секрецию желчи до уровня нормальных величин при введении парацетамола.

Внедрение в практику результатов исследования

Полученные результаты исследований используются в учебном процессе при преподавании физиологии, фармакологии и терапии для студентов, интернов, клинических ординаторов в СПбГМА им. И.И. Мечникова. Биологически активная пищевая добавка «Берёзовый экстракт сухой», содержащая бетулин, проходит апробацию на отделениях гастроэнтерологии, гепатологии клинической больницы Петра Великого, Св. преподобномученницы Елизаветы, городской инфекционной больницы им. П.И.Боткина, городском противотуберкулёзном диспансере. Результаты исследования специфической активности бетулина, его безвредности и безопасности легли в основу документов, - направленных в Фармакологический Комитет МЗ России для получения разрешения на клинические испытания.

Апробация работы

Основные положения диссертации доложены на 2'м Всероссийском съезде фармакологов (Москва, 2003), X Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2003), научно-практической конференции аспирантов и молодых учёных СПбГМА (СПб, 2004).

Основные положения диссертации изложены в 7 научных работах местной и центральной печати, в т.ч. 4 статьях.

Структура и объём диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, включающих 5 разделов, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, списка литературы.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Юрченко, Игорь Васильевич

ВЫВОДЫ

1. Установлены гепатопротекторные и желчегонные свойства, безвредность и безопасность бетулина — вещества, выделенного из коры березы.

2. Биохимические, функциональные и морфологические исследования показали, что бетулин в дозах 1-10 мг/кг предупреждает развитие цитолитического, холестатического и мезенхимально — воспалительного синдромов на моделях острого гепатита, вызванного парацетамолом, четыреххлористым углеродом, этанолом и О-галактозамином, что позволяет отнести его к группе природных гепатопротекторов.

3. Бетулин оказывает влияние на процессы желчеобразования и желчевыделения на фоне парацетамолового гепатита. Отмечено предупреждение снижения общих желчных кислот, билирубина и холестерина и на 4 сутки после интоксикации восстановление интенсивности секреции желчи.

4. Морфогистохимические исследования печени крыс с токсическим гепатитом, вызванным парацетамолом и этанолом, показали, что бетулин предупреждает деструкцию гепатоцитов, воспалительную инфильтрацию в портальных трактах, белковую и мелкокапельную дистрофию гепатоцитов, фокальный колликвационный некроз.

5. Бетулин обладает малой токсичностью (в дозе 2500 мг/кг не вызывает гибели животных), не оказывает влияния на общее состояние животных, поведение, функции сердца, печени, почек, на гематологические и биохимические показатели крови и может быть рекомендован для клинических испытаний в качестве гепатопротектора.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Полученные результаты, свидетельствующие о выраженной специфической активности, безвредности и безопасности бетулина, являются основанием рекомендовать его в медицинскую практику в качестве гепатопротектора.

2. Наличие выраженного желчегонного действия у бетулина, сопряженного с нормализацией состава желчи, позволяет рассматривать его в качестве гепатопротектора, эффективного в случаях поражений печени, осложненных холестазом.

3. Биологически активные добавки к пище, содержащие бетулин и зарегистрированные МЗ РФ, могут быть рекомендованы к клиническому изучению в качестве основы диетотерапии как острых, так и хронических заболеваний печени, в т.ч., осложненных холестазом.

4. Биологически активные добавки к пище, содержащие бетулин рекомендуются к применению в качестве алкогольпротекторных средств для профилактики токсических поражений печени этанолом.

5. Биологически активные добавки к пище, содержащие бетулин рекомедуются к применению в качестве средств профилактики токсических поражений печени лекарственными препаратами и промышленными гепатотоксикантами.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Юрченко, Игорь Васильевич, 2005 год

1. Айнабекова Б.А. "Об использовании препарата чаги как антиоксиданта". Клиническая геронтологии, 2001, №3-4. С. 59-60.

2. Афанасьев В.В., Рудотель J1.T., Афанасьев A.B. Острая интоксикация этиловым алкоголем. СПб. "Интермедика", 2002. 96 с.

3. Барнаулов О.Д. "Сравнительная оценка влияния некоторых титерпеновых соединений на резистентность организма к повреждающим воздействиям". Сборник "Экстрактивные вещества древесных растений". -Новосибирск, 1986. С. 160-161.

4. Башкирцев С.А., Карлина М.В. "Влияние бетуала на течение мезенхимально воспалительного синдрома при экспериментальном гепатите". Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины. - СПб., 2001. - С. 44.

5. Белобородова Э.И., Саратиков B.C., Венгеровский А.И., Шаловай A.A., Клин. мед. 2000. - Т.78. - №6. - С.56-59.

6. Беньдюкова В.А., Беликов В.Г., Березовская Ю.В. "Пролифенольное и тритерпеноидное соединение растений рода Betula". Обз. Инф. Хим. -фармац. производство. 1997. - №5. - С. 1-22.

7. Билибин Д.П., Дворников В.Е. "Патофизиология алкогольной болезни и наркоманий". Учебное пособие М. Издательство УДН, 1991. 104 с.

8. Блюгер А.Ф., Новицкий И.Н. Практическая гепатология. Рига. - 1984. -173 с.

9. Ю.Бобырев В.Н., Почерняева В.Ф., Стародубцева C.T.II Экспер. и клин, фармакол. 1994. - №1. - С.88-92.

10. П.Булатов Н.И., Березина М.К. "Чага и ее лечебное применение". -Ленинград. 1959. - 11 с.

11. Булатян Н.Д., Герасимова O.A., Сахарова Т.С., Яковлева Л.В. "Природные аминокислоты как гепатопротекторы". Экспериментальная и клиническая фармакология. - 1999. - Т.62 - №2. - С. 64-67.

12. Васильев A.B., Полоз Т.П., Соколов H.H., Вопр.мед. химии. — 2000. -46(2). С.101-109.

13. Веселов A.A. "Использование древесных отходов фанерного спичечного производства". М., 1987. - 182 с.

14. Вишневецкая Т.П., Жиганова Т.А., Степанов К.А., Стернин Ю.И., Юрченко И.В. "Влияние бетуленола на течение острого отравления этанолом". Тезисы докладов X Российского национального конгресса "Человек и лекарство". М., 2003. - С. 590.

15. П.Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах-М. 1972. - 154 .

16. Гаммерман А.Ф., Гром И.И. "Дикорастущие лекарственные растения СССР". Москва. - 1976. - 50 с.

17. Ганиткевич Я.В. "Роль желчи и желчных кислот в физиологии и патологии организма. Киев, 1980. 180 с.

18. Ганиткевич Я.В.// Успехи физиол. наук. 1984. - Т.15. - №4. - С.46-67.

19. Гацура В.В., Саратиков A.C. "Фармакологические агенты в экспериментальной медицине и биологии. Томск: Издательство Томского университета, 1977. - 56 с.

20. Голиков С.Н., Саноцкий И.В., Тиунов JI.A. "Общие механизмы токсического эффекта". Л., 1986. - 137 с.

21. Губский К.И. "Коррекция химического поражения печени. Киев: Здоровья, 1989. - 168 с.

22. Губский К.И. "Молекулярные механизмы повреждения мембран гепатоцитов при экспериментальном поражении печени" Автореферат дис.д-ра мед. наук. Киев, 1984. - 32 с.

23. Дерябин П.Г. "Влияние индукторов интерферона на инфекцию, вызванную вирусом гепатита С, и активность м РНК цитокинов в культурах клеток SW-13 и МТ-4". Вопросы вирусологии. 2002. - Т.47. -№6.-С. 17-21.

24. Дроговоз С.М. Вопросы медицинской химии, 1971. №4. - С.397-400.

25. Дроговоз С.М., Слышков В.В., Сарбаш Т.Ф., Сальникова С.И., Деримедведь Л.В., Шаронов Б.П. Супероксиддисмутаза перспективный гепатопротектор// Эксперим. и клин, фармакол. - 1993. - Т.56. - №4. -С.51-52.

26. Дьячук Г.И. "Отчет по изучению токсикологических свойств препарата бетулин". СПб. - 1993. - С. 1-64.

27. Дьячук Г.И., Вишневецкая Т.П., Лапкина Г.Я., Кулеба В.А., Павлова Р.Н. "Гепатопротекторные свойства бетуала". Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины. -СПб., 2001. С. 44.

28. Дьячук Г.И., Вишневецкая Т.П., Павлова Р.Н., Кулеба В.А., Коваленко А.Д. "Некоторые фармакологические свойства бетуленола". Тезисы научных докладов VIII Международной конференции "Экология и развитие общества". 2003. -С.45-46.

29. Дьячук Г.И., Вишневецкая Т.П., Юрченко И.В. "Гепатопротекторные свойства бетулина". Вестник СПбГМА, 2004. №3. - С. 113-114.

30. Дьячук Г.И., Шестакова Н.П., Карлина М.В., Юрченко И.В. "Исследование фармакокинетики бетулина". Вестник СПбГМА, 2004. -№2.-С. 107-110.

31. Зб.Захаров H.A. "Применение настойки березовых почек для лечения гнойных ран". Вестник хирургии им. Грекова, 1980. Т. 124. - №1. - С. 8285.

32. Иванова С.А., Кремков A.B., Карлина М.В. "Ранозаживляющие свойства бетулина". Материалы научно практичской конференции. - СПб, 2004. -С. 120.

33. Карачурина JI.T. "Противовоспалительные и противоязвенные свойства бисгемифталата бетулина". Химико-фармакологический журнал. Т.36. -№8.-2002.-С. 32.

34. Карачурина JI.T., Сапожникова Т.А., Зарудий Ф.С., Флехтер О.Б., Галин Ф.З. Противовоспалительные и противоязвенные свойства бисгемифталата бетулина // Хим. фармац. ж. - 2002. - Т. 36. - №8. - С. 3233.

35. Карбач Я.И. Биохимия, 1961. №2. - С. 305-309.

36. Карлина М.В., Иванова С.А. "Разработка методов качественного и количественного анализа бетулина". Материалы научно практической конференции. - СПб, 2004. - С. 121.

37. Карлина М.В., Юрченко И.В. "Разработка новой лекарственной формы бетулина". Материалы научно практической конференции. - СПб, 2004. -С.121.

38. Катикова О.Ю., Костин Я.В., Тишкин B.C. Гепатопротекторное действие препаратов растительного происхождения// Эксперим. и клин, фармакол.- 2002. Т.65. - №1. - С. 41-43.

39. Кашкова Э.К., Аскамов Б.М., Хакимов 3.3.// Функционально метаболические аспекты патологии внутренних органов. Ташкент. — 1989. - С.72-74.

40. Кислицин А.Н. "Химия древесины". 1994. - №3. - с. 3-28.

41. Коваленко А.Д., Вишневецкая Т.П., Рогова О.В., Павлова О.О., Юрченко И.В. "Изучение иммунотропной активности бетуленола". Вестник СПбГМА им. И.И. Мечникова (Приложение). 2003. - №1 (4). - С. 91.

42. Колб В.Г., Камышников B.C., Справочник по клинической химии, Беларусь, Минск. 1982. - С. 223-224.

43. Копылова Т.Н., Майоре А.Я., Элерте Д.Л.// Клеточная и субклеточная экспериментальная патология печени. Рига. 1982. - С.35-45.

44. Коробова Ю.В., Мельников К.Н., Денисова Т.В. "Гепатозащитная активность бетулина при экспериментальном поражении печени". Научно- практическая конференция "Проблемы охраны здоровья населения и окружающей среды". СПб., 2002. - С. 152.

45. Котелевцев C.B., Стволинский С.Л., Бейм A.M. "Эколого токсикологический анализ на основе биологических мембран". М. изд. МГУ, 1986.- 106 с.

46. Ладынина Е.А., Морозова P.C. "Фитотерапия". Ленинград: Медицина. Ленинградское отделение, 1987. - 206 с.

47. Лакин K.M., Крылов Ю.Ф. Биотрансформация лекарственных веществ. -М., 1981.- 104 с.

48. Ланкин В.З., Гуревич Е.М., Бурлакова Е.Б. "Определение скорости перекисного окисления липидов по скорости образования малонового диальдегида". Справочник по клинической химии. Минск, 1982. - С. 206208.

49. Машковский М.Д., Лекарственные средства. 14-е изд. - Т. 1-2. - М., 1998.

50. Минеджян Г.З. "Сборник по народной медицине и нетрадиционным способам лечения". Москва. - 1994. - 218 с.

51. Мутовкина М.Г. "Исследования в области переработки всей биомассы деревьев лиственных пород". Физические свойства и химический состав отдельных частей дерева березы и осины. Химия древесины. 1980. - №4. -С. 98-102.

52. Николаев С.М. "Растительные лекарственные препараты при повреждениях гепатобилиарной системы". ВО "Наука", Сибирская изд. Фирма, Новосибирск. 1982. - 121с.

53. Николаев С.М., Цыренжапов A.B., СамбуеваЗ.Г., Николаева Г.Г., Ратникова Г.В., Танхаева Л.М. Гепатозащитное действие гранул сухого экстракта горечавника бородатого// Экспер. и клин, фармакол. 2001. -Т.64. - № 1. - С.49-52.

54. Нуралиев Ю. Лекарственные растения, СП "ИКПА" Н. Новгород. 1977. -98 с.

55. Павлова О.О., Рогова О.В. "Оценка иммунотропной активности бетуленола". Научно практическая конференция, посвященная 300летию Санкт-Петербурга и 100-летию больницы им. Императора Петра Великого. СПб., 2003. - С.145.

56. Павлова Т.А. "Химический состав коры и древесины хвойных и лиственных пород". Гидролизная и лесохимическая промышленность, 1997.-№4.-С. 9-11.

57. Пашинский В.Г., Грибель И.В., Поветьева Т.И. "Противоязвенная, адаптогенная и противоопухолевая активность сухого экстракта из чаги". Растительные ресурсы, 1998. выпуск 1. - С. 68-71.

58. Пашинский В.Г., Грибель К.В., Поветьева Г.И. "Гастрозащитные свойства сухого экстракта чаги и его функций в эксперименте". Сибирский журнал гастроэнтерологии и гепатологии. - 1996. - №2. - С.80-81.

59. Пашинский В.Г., Ухов О.Н., Рапп O.A. "Антистрессорные, противоязвенные и противовоспалительные свойства препаратов из разных частей березы". Актуальные проблемы фармакологии и поиска новых лекарственных препаратов. Томск, 1992. - Т. 5. - С. 62-65.

60. Пашинский В.Г., Ухов О.Н., Рапп O.A. "Фармакологическая активность препаратов из веток брезы". Актуальные проблемы фармакологии и поиска новых лкарственных препаратов. Томск, 1992. - Т. 5. - С. 65-69.

61. Певзнер Е.С., Райцина М.З. "Опыт лечения больных экземой почками березы". В кн. "Сборник научных работ Белорусского кожно-венерологического института". 1954. - т. 4. - С. 368-370.

62. Перегонцева С.А. "Фитотерапия сухим экстрактом чаги, ахиграном, настоем крапивы в комплексном лечении язвенной болезни двенадцатиперстной кишки". Автореферат дис. канд. мед. наук: 14.00.05/ Сиб. гос. мед. университет. Томск, 2000. - 16 с.

63. Посохова Е.А. Микросомальная система печени и желчеобразование// Эксперим. и клин, фармакол. 1995. - Т.58. - №1. - С.73-77.

64. Прокофьева H.A. "Цитотоксическая активность бетулафолиентетраола и его глюкозидов: Тез. докл. 2-ого съезда онкологов стран СНГ". Экспериментальная онкология. 2000. - С. 79.

65. Рапп O.A. "Исследования фармакологической активности препаратов березы". Автореф. диссерт. на соискание ученой степени к. б. н. Томск. -1993.-30 с.

66. Рапп O.A., Пашинский В.Г. "Некоторые фармакологические свойства препаратов из разных органов и частей BETULA PENDULA ROTH". Ж. Биоорганическая химия, вып. 1-2, 1994. - с. 93-98.

67. Российский Д.М. "Лечебные препараты из белой березы". Фармация. -1943.-№3.-26 с.

68. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических средств. М. 2000. - 398 с.

69. Рыжова Г.Л., Кравцова С.С., Матасова С.А., Грибель Н.В., Пашинский

70. B.Г., Дычко К.А. "Химические и фармакологические свойства сухого экстракта чаги". Хим.-фармац. журнал. 1997. - №10. - С. 44-47.

71. Рычагов Г.П., Федотов A.A. "О лечении больных язвенной болезнью бефунгином". Сов. мед. 1973. - №12. - С. 81.

72. Саратиков A.C., Венгеровский А.И., Экспер. и клин, фармакол. 1995. -№1.-С. 8- 11.

73. Саратиков A.C., Венгеровский А.И. Новые гепатопротекторы природного происхождения// Лабораторные методы исследования в клинике / Под редакцией Меньшикова B.B. М: Медицина, 1987. - С.278.

74. Саратиков A.C., Венгеровский А.И., Батурина Н.О., Чучалин B.C. Эффективность гепатозащитных средств при экспериментальном хроническом гепатите// Эксперим. и клин, фармакол.- 1995. Т.59. - №1.1. C.24-26.

75. Саратиков A.C., Венгеровский А.И., Чучалин B.C. Экстракт солянки холмовой (лохеин) эффективная защита печени. - Томск: STT. - 2000. -С.114.

76. Саратиков A.C., Литвиненко Ю.А., Буркова В.Н., Венгеровский А.И., Чучалин B.C. Гепатопротекторные свойства липроксола// Эксперим. и клин, фармакол. 2002. — Т.65. - №2. - С.31-33.

77. Саратиков A.C., Скакун Н.П. Желчеобразование и желчегонные средства. 2-е изд. - Томск, 1991. - 171 с.

78. Сарбаш Т.Ф. "Поиск и изучение гепатозащитных и желчегонных средств среди производных азолов, азинов, нитробензойной кислоты". Автореферат дис. канд. фарм. наук. Купавна, 1990. - 29с.

79. Свитов К.В., Каплун А.П. "Бетулиновая кислота и ее производные как потенциальные антимеланомные препараты". Горизонты физ.-хим. биол. Пущино, 2000. Т.2. - С. 56.

80. Семенченко В.Ф., "Автореферат на соискание ученой степени д.ф.н". -Пятигорск, 1993. 29 с.

81. Семенченко В.Ф., Кудрин C.B. "Содержание бетуленола во внешней коре березы". Фармация. 1992. - №4. - С. 24-27.

82. Семенченко В.Ф., Степанюк С.П., Ботчаева A.C. "Разработка методов анализа бетулина в мазях на разных основах". Материалы 49-й Региональной конфеенции по фармации, фармакологи и подготовке кадров. Пятигорск. - 1994. - С. 73.

83. Середин P.M., Соколов С.Д. "Лекарственные растения и их применение". -Ставрополь. 1978. - С. 45-46.

84. Скакун Н.П., Писько Г.Т., Мосейчук И.П. "Поражение печеии четыреххлористым углеродом". Обзорная информация НИИТЭХИМ. Москва, 1989.-С. 107.

85. Скакун Н.П., Саратиков A.C., Олейник А.Н., Венгеровский А.И. Этиловый алкоголь: Фармакокинетика, взаимодействие с лекарствами, гепатотоксичность. Томск: Изд-во Томского ун-та, 1985. - 136 с.

86. Скакун Н.П., Шманько В.В., Охримович JI.M. Клиническая фар*макология гепатопротекторов. Тернополь: Збруч, 1995. - С.272.

87. Смелкова М.Г., Мещерякова Н.Ш., Тесакова C.B., Родионова Н.В. "Изучение литолитических свойств бетуленола". Вестник СПбГМА им. И.И, Мечникова (Приложение). 2003. - №1 (4). - С. 175.

88. Сыров В.Н., Хушбактова А.Н., Набиев А.Н. "Влияние гальбановой кислоты на течение экспериментального гепатита". Фармакология и токсикология. 1990. - Т. 53. - №2. - С. 41-43.

89. Трифонова ЕЛО. "Исследование центральных эффектов бетулина". Вестник СПбГМА им. И.И. Мечникова (Приложение). 2003. - №1 (4). -С. 175.

90. Троицкий И.В. "О мочегонном действии березовых почек и листьев". Русский физиологический журнал, 1929. №3. - С. 211-212.

91. Тугаринова В.Н., Миклашвский В.Е. "Оценка функционального состояния печени с помощью нагрузки бромсулфалеином в санитарно -токсикологическом эксперименте" Гигиена и санитария, 1966. №11. - С. 55-59.

92. Турова А.Д. "Лекарственные растения СССР и их применение". Москва. - 1974.-311 с.

93. Флехтер О.Б. "Синтез и фармакологическая активность диникотина бетулина". Биоорганическая химия. 2002. - Т.28. - №6. - с. 543-550. Арчаков А.И., Карузина И.И.// Веста. АМН СССР. - 1988. - №1. - С. 14-23.

94. Хунданова А.Л., Николаев С.М., Николаева Г.Г., Найдакова Ц.А., Танхаева Л.М., 921567 СССР, Бюлл. Открытий. С. 51-52.

95. Шамардина Л. А. "Влияние гепатопротекторов, содержащих полифенолы, на функциональную морфологию печени приэкспериментальном синдроме Рейе". Бюллетень сибирской медициы, Томск. 2003. - №4. - С.41-45.

96. Якушин С.С. "Опыт комбинированного лечения различных клинических форм хронического бронхита новыми фитотерапевтическими смесями". Терапевтический архив. 1992. - №3. -С. 134-136.

97. Banskota A.H., Tezuka Y., Adnyana I.K., Xiong Q., Hase K., Tran K.Q., Saiki I., Kadota S. Hepatoprotective effect Combretum quadrangulare and its constituents // Biol Pharm Bull.- 2000. Vol. 23 - № 4. - P. 456-460.

98. Bernard P., Scior Т., Didier В., Hibert M., Berthon J.Y. Ethnopharmacology and bioinformatic combination for leads discovery: application to phospholipase A(2) inhibitors // Phitochemistry. 2001. - Vol.58. - №6. -P.865-874.

99. Braca A., Morelli I., Mendez J., Battinelli L., Braghiroli L., Mazzanti G. Antimicrobial triterpenoids from Licania heteromorpha. // Planta Med. 2000 -Vol. 66.-№8-P. 768-769.

100. Channa S., Dar A., Yaqoob M., Anjum S., Sultani Z., Atta-ur-Rahman. Broncho-vasodilatory activity of fractions and pure constituents isolated from Bacopa monniera. //J Ethnopharmacol.-2003. Vol. 86-№ l.-P. 27-35.

101. Chou В., Zhu M., Xing W.X., Yang G.H., Mi H.M., Wu Y.T. Studies on chimical constituents in fruit of Eucalyptus globus // Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 2002. - Vol. 27. - №8. - P. 596-597

102. Chou K.J., Fang H.C., Chung H.M., Cheng J.S., Lee K.S., Tseng L.L., Tang K.Y., Jan C.R. Effect of betulinic acid on interacellular-free Ca(2+) levels in

103. Madin Darby canine kidney cells // Eur J Pharmacol. 2000. - Vol.17; 408. -№2. -P.99-106.

104. Costantini P., Jacotot E., Decaudin D., Kroemer G. Mitochondrion as a novel target of anticancer chemotherapy // J Natl Inst. 2000. - Vol. 5; 92. -№13.-P. 1042-1053.

105. Dunstan C., Liu B., Welch C. J., Perera P., Bohlin L. Alphitol, a phenolic substance from Alphitonia zizyphoides which inhibits prostaglandin biosynthesis invitro//Phytochemistry. 1998. - Vol.48. - №3. - P.495-497.

106. Enwerem N.M., Okogun J.I., Wambebe C.O., Okorie D.A., Akah P.A. Anthelmintic activity of the stem bark extracts of Berlina grandiflora and one of ist active principtes, Betulinic acid // Phytomedicine. 2001. - Vol.8. - №2. -P.l12-114.

107. Fulda S., Skaffidi C., Susin S.A., Krammer P.H., Kroemer G., Peter M.E., Debatin K.M. Activation of mitochondria and release of mitochondrial apoptogenic factors by betulinic acid // J Biol Chem. 1998. - Vol.18; 273. -№51. - P.33942-33948.

108. Guo H., Chang Z., Yang R., Guo D., Zheng J. Anthraquinones from hairy root cultures of Cassia obtusifolia. // Phytochemistry. 1998. Vol. 49. - №6. -P. 1623-1625.

109. Hwang B.Y., Chai H.B., Kardono L.B., Riswan S., Farnsworth N.R., Kinghorn A.D. Cytotoxic triterpenes from the twigs of Celtis Philippine // Phytochemistry. 2003. - Vol.62. - №2. - P. 197-201.

110. Kemp A., Heijningen A. A colorimetric micromethod for determination of glycogen in tissues // Biochem J. 1954. - V. 56. - P. 646-648.

111. Keyel P.A., Amjad M., Karim M.R. Synergistic anti-viral effect of betulin and acyclovir against herpes simples viruses: Abstr. 67 th Annual Meeting of the Minnesota Academy of Science, St. Paul, Minn., Apr., 1999. P. 23.

112. Kim D.S., Pezzuto J.M., Pisha E. Synthesis of betulinic acid derivatives with activity against human melanoma // Bioorg Med Chem Lett. 1998. - Vol.7; 8. - №13. — P.1707-1712.

113. Ko H.H. Cytotoxic isoprenylated flavans of Broussonetici Karinoki. J. Nat. Prod. 1999. - Vol. 62, №1. - P. 164-166.

114. Koch Benjamin R., Karim M.R. The effect of betulin, allobetulin, and derivatives against three different genera of bactria: Abstr. 67 th Annual Meeting of the Minnesota Academy of Scince, St. Paul, Minn., Apr., 1999. P. 245.

115. Lee S.M., Min B.S., Lee C.G., Kim K.S., Kho Y.H. Cytotoxic triterpenoids from the fruits of Zizyphus jujuba // Planta Med. 2003. - Vol.69. - №11. -P.1051-1054.

116. Li L. Antitumor agents, 138. Rotenoids and isoflavones as cytoxic contitutents from Amorpha fruticosa. J. Nat. Prod, 1993. V. 56. №5. - P. 690698.

117. Malini M.M., Lenin M., Varalakshmi P. Protective effect of triterpenes on calcium oxalate srystal-induced peroxidative changes in experimental urolithiasis//Pharmacol Res. -2000/- Vol.41. №4. -P.413-418.

118. Malzig F. Inhibition of neutrofil elastase activity by cinnamic acid derivatives from limicitugaracemosa. Planta Med. 2000. Vol. 66, №8. - P. 751-753.

119. Manez S., Recio M.C., Giner R.M., Rios J.L. Effect of selected triterpenoids on chronic dermal inflammation // Eur J Pharmacol. 1997. - Vol.3; 334. -№1. - P.103-105.

120. Maximov O.B., Kulesh N.I., Stepanenko L.S., Dmitrenok P.S. New prenylated isoflavanones and other constituents of Lespedeza bicolor. // Fitoterapia. 2004. - Vol. 75. - № 1. - P.96-98.

121. Meng R.D., El-Deiry W.S. p53-independent upregulation of KILLER/DR5 TRAIL receptor expression by glucocorticoids and interferon-gamma // Exp Cell Res. 2001. - Vol.15; 262. - №2. - P. 154-169.

122. Misra T.N., Singh R.S., Pandey H.S., Singh B.K., Pandey R.P. Constituents of Asteracanta longifolia // Fitoterapia. 2001. - Vol.72. - №2. - P. 194-196.

123. Miura N., Matsumoto Y., Miyari S., Nishiyama S., Naganuma A. Protective effects of triterpene compounds against the cytotoxicity of cadmium in HepG2 cells // Pharmacol. 1999. - Vol.56. - №6. - P.1324-1328.

124. Mu Q., Li C., Sun II. Chemical constituents of coleus carnosifolius Dunn // Zhongguo Zhong Zhi Yao Za- 1996. Vol.21. - №2. - P. 104-105; 128.

125. Okamoto I., Takeya Y., Kagawa Y., Kotani E. Iron (111) picolinate-induced oxygenation and subsequent rearrangement of triterpenoid derivaties with hydrohen peroxide // Chem Pharm Bull. 2000. - Vol.48. - №1. - P. 120-125.

126. Recio M.O., Giner R.M., Manez S., Gueho J., Julien H.R., Hostettmann K., Rios J.L. Investigations on the steroidal anti-inflammatory activity of triterpenoids from Diospyros leucomelas // Planta Med. 1995. - Vol.61. - №1. - P.9-12.

127. Ren F.Z., Luan X.H., Zhao Y.M., Qu H.H. Studies on flavonoids from leaves of Callicarpa bodinieri Levi. // Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 2001. -Vol. 26.-№12-P. 841-844

128. Schuhly W., Heilmann J., Calis I., Sticher O. New triterpenoids with antibacterial activity from Zizyphnus joazeiro // Planta Med. 1999. - Vol.65. -№8. - P.740-743.

129. So L.B. Synthesis of butulinic acid from betulin and study of ils sobubilization usingliposanes Bioorg Khim. 1998. - Vol.24, №10. - P. 787793.

130. Suksamrarn A., Tanachatchairatana T., Kanokredhakul S. Antiplasmoidal triterpenes from twigs of Gardenia saxatilis // J Ethopharmacol. 2003. -Vol.88. - №2-3. - P.275-277.

131. Suomatsu H., Kato S., Ishii H. // Lab. Invest. 1991. - Vol. 64, №2. - P. 167173.

132. Symon A.V., Kaplun A.P., Vlasenkova N.K., Gerasimova G.K., Shon L.M., Surkova E.L., Shvets V.l. Epimerization of hydroxyl group in the lupan series of // Bioorg Khim. 2003. - Vol.29. - №2. - P.208-213.

133. Tortoriello P., Riebow J., Advani S., Bidlack W. // Free Radic. Biol. Med. -1991. Vol. 10, №6. - P. 387-396.

134. Vidya L., Malini M.M., Varalakshmi P. Effect of pentacyclic triterpenes on oxalate-induced changes in rat erythrocytes // Pharmacol Res. 2000. -Vol.42. - №4.-P.313-316.

135. Vidya L., Varalakshmi P. Control of urinary risk factors of betulin and lupeol in experimental hyperoxaluria // Fitoterapia. 2000. - Vol.71. - №5. -P.535-543,

136. Wachberger P.R., Burd R., Wahl M.L., Leeper D.B. Betulinic acid sensitization of low pH adapted human melanola ceiis to hyperthermia // Int J Hyperthermia. 2002. - Vol. 18. - №2. - P. 153-164.

137. Wada S, Iida A, Tanaka R. Screening of triterpenoids isolated from Phyllanthus flexuosus for DNA topoisomerase inhibitory activity. // J Nat Prod. 2001. - Vol. 64. - № 12. - P. 1545-1547.

138. Wormser U., Zbinden G. // Arch. Toxicol. 1986. - Vol. 59, №2. -P. 111114.

139. Xu X, Hou C., Zhang Y., Liu Q., Liu Y., Yang J. Chemical coustituents of the roots of Glycyrrhiza eurycarpa P.C. Li. Zhongguo Zhong Yo Za Zhi. 1997. -Vol. 22, №11. -P. 679-680.

140. Yuan A., Du S., Qin. Chemical constituents of Alyxia levinei Merr // Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 1991. - Vol.16. - №4. - P.229-230; 255.

141. Zhu M., Phillipson J.D., Greengrass P.M., Bowery N.G. Chemical and biological investigation of the root bark of Clerodendrum mandarinorum. // Planta Med. 1996. - Vol. 62. - № 5. - P. 393-396.

142. Zhukov A.A., Abdugafurova M.A., Archakov A.I. // Phosphatidylcholine (Polyenephosphatidylcholine / PPC): Effects on Cell Membranes and Transport of Cholesterol / Eds Archakov A.I., Gundermann K.J. Bingen/Rhein, 1989. -P. 163-167.