Оценка изменений уровня матриксной металлопротеиназы-9, антител к ДНК и хемокина RANTES в крови больных рассеянным склерозом в мониторинге активности патологического процесса тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.13, кандидат медицинских наук Сланова, Ада Вячеславовна

• Сланова, Ада Вячеславовна
• кандидат медицинских наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Сланова, Ада Вячеславовна

Введение

Глава 1. Литературный обзор

1.1 Введение

1.2 Диагностика рассеянного склероза.

1.3 Общие механизмы функционирования 14 иммунной системы.

1.4 Гематоэнцефалический барьер в регуляции 18 иммунного ответа в ЦНС.

1.5 Цитокины в мониторинге 19 демиелинизирующего процесса.

1.6 Хемокины в патогенезе РС.

1.7 Гуморальный иммунитет в патогенезе РС.

1.8 Матриксная металлопротеинеза-9 в патогенезе РС.

Глава 2. Материалы и методы

2.1 Общая характеристика обследованных больных.

2.2 Клиническое обследование.

2.3 Исследование нейропсихологического статуса больных.

2.4 Иммунологические исследования.

2.5 Определение уровня антител к нативной и 44 денатурированной ДНК.

2.6 Количественное определение общей концентрации ММП-9 в плазме

2.7 Количественное определение хемокина КАЫТЕЭ в плазме

2.8 Статистическая обработка материалов.

Глава 3 Результаты исследования

3.1 Первичные характеристики исследуемой группы больных

3.2 Результаты клинико-иммуно-биохимического наблюдения за 10 больными РС на протяжении 12 месяцев.

3.3 Корреляционный анализ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оценка изменений уровня матриксной металлопротеиназы-9, антител к ДНК и хемокина RANTES в крови больных рассеянным склерозом в мониторинге активности патологического процесса»

Рассеянный склероз (PC) относится к наиболее часто встречающемуся поражению ЦНС из группы демиелинизирующих заболеваний. Хроническое прогрессирующее течение, поражение преимущественно лиц молодого и среднего возраста, ранняя инвалидизация обуславливают медицинскую и социальную значимость проблемы (Гусев К.И. и соав! 1983-2001; Завали-шин И.А. и соавт 1989, 1995, 2001; Compston AD et al 1998).

Современный уровень знаний об этиологии и патогенезе PC подтверждает развитие комплекса иммунопатологических и патохимических реакций в нервной ткани (Гусев Е.И. и соавт 1998-2001; Hohlfild R.et al 1995, Rüssel W.C. 1997). Наиболее значимыми из них считаются: активация клонов миелин-специфичных Т-клеток, миграция активированных Т-лимфоцитов через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ), повышенная продукция Thl-хелперами провоспалтельных цитокинов, экспрессия молекул адгезии и главного комплекса гистосовместимости (HLA-системы) второго класса микроглией мозга и эндотелием ГЭБ, активация макрофагов и продукция антител к антигенам миелина, активацией ряда протеолитических ферментов, синтетазы NO с повышением продукцией NO и других субстанций, токсичных для миелина и нервных волокон (Hohlfild R.et al 1995; Engehlgardt В. 1994). В последние годы принято считать, что ключевую роль при обострении заболевания может играть функциональное состояние Т-лимфоцитов хелперов (ТЫ и Th2), определяющее баланс между провоспа-лительными и антивоспалительными цитокинами.

Для PC характерно волнообразное клиническое течение. Активность заболевания и особенное!и его течения, верояшо, связаны с различной степенью выраженности системных иммунохимических изменений и в ткани мозга, нарушением взаимосвязей между клеточными системами (эндотелий-нейроэктодермальные клетки - микроглия) и индивидуальными компенсаторными возможностями мозга и иммунной системы. Современный уровень иммунохимических методов исследования позволяет объективизировать типы клеточных систем вовлеченных в патологический процесс и открывает возможности дальнейшего изучения заболевания (Чехонин В.П. и соавт 1995-99; Ьаввшапп Н 1995-97; 1^еЬ^агск В 1996-97). Большое значение в привлечении Т-клеток в ткань мозга имеют хемокины, особенно (3-хемокины, участвующие в воспалительных процессах, такие как ИАМТЕБ, хемокины М1Р- и МСР семейств. Однако изменения уровней хемокинов в сыворотке больных РС изучены недостаточно. Хотя ведущим механизмом при РС является Т-клеточный имм>нитет, в развиши заболевания также участвуе! и гуморальный иммунитет

В то же время до сих пор не установлены информативные иммуно-биохимические маркеры, позволяющие проводить мониторинг активности патологического процесса при различных формах течения РС, оценивая активность процесса, его прогноз, не ясны механизмы запуска обострений и ремиссий. Различные данные представлены о возможности использования иммунологических и биохимических маркеров для оценки эффективности проводимой иммунокоррегирующей и противовоспалительной терапии (ЫоБехлопИ) 1Н. 1999, Гусев Е.И. и Бойко А.Н. 2001) Многие из предлагаемых методов очень сложны, трудоемки и дорогоеюящи. В связи с этим актуальным является поиск информативных и достшых для широкого использования маркеров, пригодных для мониторирования и прогнозирования патологического процесса.

Одним из основных патогенетических звеньев при РС, таких как повреждение ГЭБ и обусловленная этим миграция белков плазмы в паренхиму головного мозга, являются матриксные металлопротеиназы (ММП). При воспалительных заболеваниях нервной системы ММ11, > частвуют в следующих процессах: а) открытие ГЭБ, б) регчляция активности цитокинов и их рецепторов, в) регуляция инвазии в ткань иммчннокомпетешныч клеток крови, г) прямое повреждение клеток при заболеваниях периферической и центральной нервной системы (КоишепИоуеп М. е1 а1. 2001, ЬерреП О ей а1.

2001), что способствует процессу демиелинизации. В ряде исследований было показано, что повышение уровня ММП-9 в сыворотке соответствует активации заболевания (обострению) (Clements J.M. et al. 1997, Kieseier B.C. et al. 1998).

Другой актуальной научно-практической задачей в исследовании PC является изучение механизмов развития нейродегенеративного процесса при PC, оценка взаимосвязи между воспалительным, иммунопатологическим и дегенеративным процессом.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Изучить изменение уровней каталитических антител к ДНК, матрикс-ной металлопротеиназы-9 и хемокина RANTES в плаше крови больных PC и оценить возможность использования этих покаiaiелей для мониторинга активности патологического процесса.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1. Изучить изменение содержания антител к ДНК в плазме крови больных рассеянным склерозом с ремиттирующим течением, в зависимости от активности патологического процесса.

2. Исследовать уровень матриксной металлопротеиназы (ММП-9) и хемокина RANTES в плазме крови больных PC на различных стадиях активности ремиттир\ющего PC.

3. Оценить связь выявленных изменений содержания антител к ДНК, ММП-9 и хемокина RANTES с изменением уровня продукции про- и антивоспалительных цитокинов активированными короткоживущими культурами мононуклеарных клеток крови больных PC на различных стадиях активности ремиттирующего PC.

4. При проведении динамического мониторинга провести анализ значимости и прогностической ценности изменений уровня антител к ДНК, ММП-9 и хемокина RANTES для выяснения степени активности заболевания.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА.

В результате проведенного комплексного динамического исследования впервые проведена оценка уровня провоспалительных цитокинов (у-ИНФ, ФНО-а), ММП-9, хемокина RANTES и активности ДНК антител в зависимости от особенностей клинического течения PC в связи с развитием клинического обострения заболевания. Это позволило выявить новые механизмы развития обострения и перехода к ремиссии.

При динамическом исследовании выявлено повышение продукции у-ИНФ и уровня ММП-9 в плазме на ранних стадиях обострения (в течение месяца до клинического проявления обострения). Таким образом, впервые отмечена возможность использования уровня ММП-9 для оценки активности иммунопатологического процесса при PC. IIa высоте клинического ухудшения отмечено повышение >ровня у-ИПФ и ФПО-а. Последнее изменение сохраняется на протяжении месяца после проявления обострения на высоких уровнях, а затем снижается. На стадии выхода в ремиссию отмечается повышение продукции антивоспалительных цитокинов (ТРФ-ßi). снижение содержания ММП-9 и хемокина RANTES, а затем снижение уровня провоспалительных цитокинов у-ИНФ и ФНО-а.

Впервые в работе выявлено отчетливое снижение уровня антител к ДНК перед обострением, и увеличение их во время обострения и некоторое время после него. Вероятно, снижение ангшел к ДНК перед обострением является одним из пусковых механизмов обострения, в результате чего снижается активность элиминации активированных клеток, т.е. нарушается один из механизмов поддержания ремиссии. В то же время при анализе корреляций отмечена достоверная связь между общим уровнем этих антител и скоростью нарастания необратимого неврологического дефицита, т.е. ней-родегенеративного компонента. Это позволило выдвинуть гипотезу о двойной роли антител при PC - как механизма элиминации пула активированных клеток и одновременно как механизма прогрессирования нейродегенератив-ного процесса.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ

Повышение уровня ММП-9 в крови и последующее повышение содержания у-ИНФ в супернатантах активированных короткоживущих культур клеток крови больных РС могут быть использованы как маркеры ранних стадий обострения РС. Более отчетливо на ранних с (алиях активизации патологического процесса повышается содержание ММР-9 в плазме крови. Наряду с этим неблагоприятным предвестником обосгрения РС можег явиться снижения уровня антител к ДНК. В то же время постоянно высокий уровень антител может одним из факторов неблагоприятного прогноза в плане более быстрого накопления необратимых неврологических нарушений вследствие развития нейродегеративного процесса.

Заключение диссертации по теме «Нервные болезни», Сланова, Ада Вячеславовна

ВЫВОДЫ:

1. Проведено динамическое клинико-иммунологическое обследование больных с ремиттирующим РС. При обострении отчетливо повышается содержание провоспалительных цитокинов у-ИФН и ФНО-а в суперна-тантах активированных клеток, что свидетельствует о наличие взаимосвязи между клиническими показателями и цитокиновым статусом. Корреляционный анализ подтвердил достоверную прямую связь между тяжестью состояния больных по клиническим шкалам (ЕОББ, сумма баллов ЕБ) и уровнями провоспалительных цитокинов.

2. На высоте обострения и во время выхода из него, перехода к ремиссии отмечается повышение продукции противовоспалительного цитоки-на ТРФ-(31, что указывает на участие этою цитокина в снижении активности патологического процесса.

3. При ремиттирующем рассеянном склерозе установлено повышение уровня ММП-9 перед обострением (в течение месяца до клинического проявления обострения) и во время обострения, Повышение содержания ММП-9 может быть использовано в качестве предвестника обострения РС. Степень повышения содержания ММП-9 находится в прямой связи с тяжестью обострения, т.е. клиническими показателями ЕОББ, Бит ЕБ, ЗСШРББ и с уровнем провоспалительных цитокинов.

4. Выявлено достоверное уменьшение уровня антител к нативной и денатурированной ДНК перед обострением и отчетливое увеличение их количества во время и после него, что может быть использовано, как прогностический признак обострения РС.

5. Прямая корреляционная связь между уровнем антител к ДНК и длительностью РС, а также со скоростью нарастания необратимого неврологического дефицита позволяет предположить их \частие в развитии нейро-дегенеративных изменений на поздних стадиях развития заболевания.

6. Повышение уровней хемокина ЯЛЫТЕБ в плазме больных РС не достигало статистически достоверного уровня при обострении РС, поэтому этот показатель не может быть рекомендован в качестве маркера активности патологического процесса г использоваться в мониторинге.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ:

1) Исследование ММП-9 может быть рекомендовано для мониторинга активности патологического процесса (воспаления) при ремиттирующем рассеянном склерозе , как маркер обострения.

2) Повышение уровня ТРФ-(31 можно быть использовано как прогностический признак благоприятного течения заболевания (ремиссия).

3) Существенное повышение содержание АТ к ДНК, у длительно болеющих пациентов с ремиттирующим РС, мож^т быть одним из признаков неблагоприятного развития заболевания и перехода к вторично-прогрессирующему типу течения (нейродегенеративный процесс).

4) Одновременное повышение уровня ММП-9, у-ИФН и ФНО-а является маркером обострений РС, в том числе субклинических.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Сланова, Ада Вячеславовна, 2003 год

1. Алексеева ТГ, Бойко АН, Гусев ЕИ./Спектр нейропсихологических изменений при рассеянном склерозе. Ж. Неврологии и психиатрии 2000, 11:1520

2. Андриевская O.A., Бунева В.Н., Забара В.Г.и др. Иммуноглобулины класса G из сыворотки больных системной красной волчанкой эффективно расщепляют РНК // Молекулярная биология.-1998.-Т.32., № 9.-С. 908-915

3. Барановский А.Г., Канышкова Т.Г., Могельницкий A.C. и др. Поликло-нальные антитела из крови больных рассеянным склерозом эффективно гид-ролизуют РНК и ДНК // Биохимия,-1998.-Т.63, №11 .-С. 1459-1469

4. Беличко О И, Дадзани С.А., Абрамова H.H., Терновой С.К. /Магнитно-резонансная томография в диагностике цереброваскулярных заболеваний/ М„ «ВИДАР». 1998

5. Бойко АН, Иванов АЕ, Оганезов ВК. Продукция ИЛ-1, ИЛ-2 и ФНО-альфа при хронических проградиентных формах рассеянного склероза. Материалы пленума правления Российского общества неврологов, Иркутск, 1992:33-34

6. Бойко АН, Фаворова ОО, Судомоина МА, и соавт. Иммуногенетика рассеянного склероза. В: «Вопросы диагностики и лечения демиелинизирующих заболеваний нервной системы» Сту пино. 1999:4-10

7. Бойко А.Н., Фаворова О.О. Рассеянный склероз: молекулярные и клеточные механизмы. Молекулярная биология 1995. 29(4):727-749.

8. Бойко АН, Бь кова OB, Бойко СЮ и соавт. Клинико прогностические характеристики рассеянного склероза с началом в детском возрасте. В: «Нейроиммунология», ООО «ЛПМ КОНТАКТ», Санкт-Петербург, 2000: 13-14

9. Бунева В.Н., Андриевская O.A., Романникова И.В. и др. Взаимодействие каталитически активных антител с олигорибонуклеотидами // Молекулярная биология.-1994.-Т.28.-С.738-743.

10. Власов A.B., Андриевская O.A., Канышкова Т.Г. и др. РНК-гидрализующие антитела из крови больных системной красной волчанкой // Биохимия. -1997.-Т.62, №5.-с.556-565

11. Власов А.В, Барановский А.Г., Канышкова Т.Г. и др. Субстратная специфичность ДНК- и РНК-гидролизующих из крови больных полиартритом и аутоиммунным тиреодитом // Молекулярная биология,- 1998. -Т.32, №5.-С-559-569.

12. Гусев ЕИ, Демина ТЛ, Бойко АН. Рассеянный склероз. Москва, Издательство «Нефтьгаз» 1997,464с

13. Гусев ЕИ, Бойко АН. Демиелинизируюшие заболевания центральной нервной системы. Consillium medicum 2000, 2(2): 84-86

14. Гусев ЕИ, Беляева ИА, Чехонин ВГ1, и соавт. Клинические и иммунохи-мические характеристики ремитирующего рассеянного склероза. Вестник Российской Академии Медицинских Наук 1999,7:40-45

15. Гусев Е.И., Беляева И.А., Чехонин В.П., и соавт. Сравнительный клини-ко-иммунохимический анализ ремитирующего и вторично-прогрессирующего течения рассеянного склероза. Ж. Неврологии и психиатрии 2000, 6:51-57

16. Е.И.Гусев, М.А.Судомоина, А.Н.Бойко и др. Факторы генетической предрасположенности к рассеянному склерозу (по данным генотипирования больных русской этнической группы). Ж.невр. и псих. 1997. 97(5):39-46

17. Гусев ЕИ, Демина ТЛ, Бойко АН, Пинегин БВ. Роль монокинов в патогенезе рассеянного склероза. Иммунология 1995, 4:58-63

18. Гусев ЕИ, Бойко АН, Смирнова НФ, Демина ТЛ. Факторы риска развития рассеянного склероза в Московской популяции. Экзогенные факторы риска. Ж.Неврологии и психиатрии 1999,5:32-40

19. Гусев Е.И., Демина Т.Л., Бойко А.Н., Анисимова А.В.' Иммуномодули-рующее лечение рассеянного склероза/ Учебно-методические рекомендации. М.1992

20. Марков Д.А., Леонович А.Л./Рассеянный склероз. Москва, Медицина, 1976

21. Петров Р.В./Иммунология. Москва, Медицина, 1987.

22. Пол У./ Иммунология (перевод с англ.) Москва, Мир, 1987;с.360.

23. Соловьева Н.И./Матриксные металлопротеиназы и их биологические функции./ Биоорганическая химия. 1998.

24. Anthony DC, Miller KM, Fearn S et al./ Matrix metalloproteinase expression in an experimentally-induced DTH model of multiple sclerosis in the rat CNS. J Neuroimmunol 1998;87:62-72

25. Antel J (ed.) Clinical neuroimmunolog>. Blackweel Science, Oxford London, 1997

26. Beamer NB„ Cooull BM„ Clark WM„ Hazel JS„ Silberger JR./ Interleukin-6 and interleukin-1 receptor antagonist in acute stroke/ Ann Neurol 1995;37:800-805

27. Bernd С., Kieseier, MD; Thomas Seifert, MD; Gavin Giovannoni, FCP;and Hans-Peter Hartung, MD;/Matrix metalloproteinases in inflammatory demyelination (Targets for treatment)/J. Neurology 1999;53:20-25

28. Benveniste EN, Merrill JE./Stimulation of oligodendroglial proliferation and maturation by interleukin-2./ Nature 1986; 321:610-613

29. Benveniste EN, Herman PK, Whitaker JN./ Myelin basic protein-specific RNA levels in interleukin-2-stimul ted oligodendrocytes./ J Neurochem 1987;49:1274-1279

30. Birkedal-Hansen H./ Proteolytic remodeling of extracellular matrix/ Curr Opin Cell Biol 1995;7:728-735

31. Black RA, Rauch CT, Koslosky CJ, et al / A metalloproteinase disintegrin that releases tumor necrosis factor-a from cells./Nature 1997;385:729-733

32. Boiko A, Deomina T, Gusev E, et al./ Epidemiology. of multiple sclerosis in Russia and other countries of the former Soviet Union: investigation of environmental and genetic factors. Acta Neurol. Scand, 1995,91,161:71-76

33. Cannella B., Reine C.S./ The adhesion molecule and profile of multiple scle-rois lesion/ Ann Neurol 1995 Apr;37(4):424-435

34. Cawson T./ Matrix metalloproteinases and TIMPs: properties and implications for rheumatic diseases./ Mol Med Today 1998;4:130-137

35. Calder V., Owen S., W atson C., Feldman M., Davidson A./ MS: alocalized immune disease of the central nervous system/ 1989 Immunol.Today 10:99.103

36. Coussens L.M.,Werb Z/Chem.Biol. 1996.V3.P.895-904

37. Chandler S., Coates R., Gearing A., Lury J., Wells G., Bone E./Matrix metalloproteinases degrade myelin basic protein./1995 Neurosci. Lett. 201:223-226

38. ChienY h Davis MM /How aP T-cell receptors "see" peptide/MHC complexes. Immunol Today 1993, 14: 597-602

39. Compston DAS. Genetic epidemiology of multiple sclerosis. J Neurol Neuro-siirj Psych 1997, 62:553-561

40. Del Prete G, Maggi E, Romagnani S./Biology of disease. Human Thl and Th2 cells: functional properties, mechanisms of regulation, and role in disease. Lab Invest 1994, 70: 299-306

41. Dinarello C.A./ The role of interleukin-1 in disease. In: New Advances on Cytokines. Romagnani S, Mossman TR, Abbas AK (eds). Raven Press, Neww York 1992:303-313

42. Engelhardt B., Conley F.K., Butcher E.C./J. Neuroimmunology1994;51:199-208

43. Ebers GC, Dyment DA. Genetics of multiple sclerosis Seminars in Neurology. 1998,18:295-299

44. Francis GS., Evans AC., Arnold DL./Neuroimaging in multiple sclerosis/ Neurologic Clinics. 1995. 13:147-171

45. Filippi M., Horafield MA., Morrisey SP, et al/Quantitative brain MRI lesion load predicts the course of clinically isolated syndromes suggestive of multiple scleosis./J.Neurology. 1994; 44:635-641

46. Gearing A .J./ Matrix metalloproteinases, tumor necrosis factor and multiple sclerosis: an overview./ 1997 J.Neuroimmunol.72:155-161

47. Gearing AJH, Beckett P, Christodoulou M, et al./Processing of tumor necrosis factor-a precursor by metalloproteinases./ Nature 1994;732:1 121

48. Gijbels K, Proost P, Carton H, Billiau A, Opdenakker G./ gelatinase B is present in the cerebrospinal fluid during exprerimental autoimmune encephalomyelitis and cleaves myelin basic protein./ J Neurosci Res 1993;36:432-440

49. Gijbels K., Galardy R.E., Steinman L ./ Reversal of experimental autoimmune encephalomyelitis with a hydroximate inhibitor of metalloproteinases/J.Clin. Invest. 1994; 94:2177-2182

50. Gijlbers K, Masure S, Carton H, Opdenakker G./ Gelatinase in cerebrospinal fluid of patients with multiple sclerosis and other inflammatory neurological disoders/ J. Neuroimmunol 1992;41:29-34

51. Gray RD, Paterson CA./Applicai'on of peptide-based matrix metalloproteinase inhibitors in corneal ulceration./ Ann NY Acad Sei 1994,732:206-216

52. Gusev EI, Boiko AN, Lauer K, et al. /Environmental risk factors in MS: a case-control study in Moscow. /Acta Neurol Scand 1996, 94:386-394

53. Härtung H-P, Jung S, Stoll G, et al / Inflammatory mediators in demyelinating disorders of the CNS and PNS./ J Neuroimmunol 1992;40:197-210

54. Hewson AK, Smith T, Leonard JP, Cuzner ML./ Suppression of experimental allergic encephalomyelitis in the Lewis rat by the matrix metalloproteinase inhibitor Ro31-9790./ Inflamm Res 199x44:345-349

55. Hillert J. Human leukocyte antigen studies in multiple sclerosis. Ann Neurol 1994, 36:S15-S17

56. Hvas J, McLean C, Justesen J et al. Perivascular T cell express the pro inflammatory chemokine RANTES mRNA in multiple sclerosis lesions Scand J Immunol 1997, 46: 195-203

57. Houssiau F., Van Snick I./ IL-6 and the T cell responce / Res Immunol 1992;143:740-743

58. Jacobs CA., Baker PE, Rou< ER, et al./Experimental autoimmune encephalomyelitis is exacerbated by IL-1 and suppressed by soluble IL-1 receptor./J Immunol 1991;146:2983-2989

59. Janeway CA., Bottomly K/ Signals and signs for lymphocyte responses. Cell 1994, 76: 275-285

60. Jencks W. Catalysis in chemistry and enzymology. N. Y.: Mc. Graw Hill, 1969. P. 33 -42.

61. Johns LD., Sriram S./ Experimental allergic encephalomyelitis: neutralizing antibody to TGF beta 1 enhances the clinical severity of the disease./ J.Neuroimmunol. 1993 Aug; 47(1): 1-7

62. Karpus WJ., Swanborg RH./ CD4+ suppressor cells inhibit the function of effector cells of experimental autoimmune encephalomyelitis through a mechanism involving transforming growth factor-beta. J. Immunol., 1991, 146: 1163-1168

63. Kieseier BC, Kiefer R, Clements JM, et al / Matrix metalloproteinase-9 and -7 are regulated in experimental autoimmune encephi' omyelitis.'' Brain 1998;121:159-166

64. KingsleyD.P., Mooseley I.F., Rudge P., McDonald W.I. /Breakdown of the blood br barrier precedes symptoms and other MRI signs of new lesions in multiple sclerosis/19$ Brain 113:1477-1489

65. Khoury S.J., Guttmann C.X., Orav EJ, et.al./Longitudinal MRI in multiple sclerosis: correlation between disability and lesion burden./' Neurology 1994;44:2120-2124

66. Lassmann H., Scmied M, Vass K, Hickey W./Bone morrow derived elements and resident microglia in brain inflammation. Glia 1993, 7: 19-24

67. Lassmann H, Waksman B, Brosnan CF. Mechanisms of vascular and tissue damage in demyelinating diseases. J Neuroimmunel 1991, 32: 83-85

68. Lassmann H, Suchanek G, Ozawa K. Histopathology and the blood cerebrospinal fluid barrier in multiple sclerosis. Ann Neurol 1994, 36: S42 -S46

69. Lauer K. Environmental associations with the risk of multiple sclerosis: the contribution of ecological studies. Acta Neurol Scand 1995; 91 (Suppl 161):77-88

70. Lee MA, Palace J, Stabler G, Ford J, Gearing A, Miller K./Serum gelatinase B, TIMP-1 and TIMP-2 levels in multiple sclerosis: a longitudinal clinical and MRI study/Brain 1999;122:191-197

71. Leppert D, Lindeberg RL, Kappos L, Leib SL./ Matrix metalloproteinases multifunctional effectors of inflammation in multiple sclerosis and bacterial meningitis/ Department of Neurologv , University Hospitals, Petergraben 4, Basel, Switzerland/ 2000

72. Leppert D./ The expression profile of matrix metalloproteinases and they inhibitors (TIMPs) in lesions and normal appearing white matter of muP'jJft. sclerosis/Brane 2001 Sep; 124(Pt 9): 1743-53

73. Leppert D, Ford J, Stabler G, et al/ Matrix metalloproteinases-9 (gelatinase B) is electiveiy elevated in CSF during relapses and stable phases of multiple sclerosis/ Brain 1998; 121:2327-2334

74. Leppert D, Waubant E, Galardy R,Bunnett NW, Hauser SL./T cell gelatinases mediate basement membrane transmigration in virto./ J Immunol 1 154:4379-4389

75. Lerner R.A.,Tramontane) A./ Antibodies as enzymes 11 Biochem. Sci. -1987.Vol. 12. P. 427- 430.

76. Lin CS, Bolts RC, Siekierka JJ, Sigal NH. FK-506 and cyclosporin A inhibit highly similar signal transduction pathways in human T-lymphocytes. Cell Immunol 1991, 133,269-284

77. Link H. / Multiple sclerosis: elevated expression of metallopn teinases in blood monocytes/ J Autoimmun 2001 Jun;16(4):463-70

78. Link J., Fredrikson S., Soderstrom M, Olsson T, Hojeberg B./Organ-specific autoantigens induce transforming growth factor-beta mRNA expression in mononuclear cells in multiple sclerosis and myasthenia gravis/ Ann Neurol 1994 Feb;35(2): 197-203

79. Lossef NA, Wang L. Lai HM. et al/Progressive cerebral atrophy in multiple sclerosis a serial MRI study/ Brain 1996; 119:2009-2019

80. Maeda A, Sobel RA./ Matrix metalloproteinases in normal human central nervous, microglial nodules, and mull pie sclerosis lesions./ J Neuropathol Exp Neurol 1996;55:300-309

81. Matyszak MK, Perry VH./ Delayed-type hypersensitivity lesions in the central nervous system are prevented by inhibitors of matrix metalloproteinases./ J Neuroimmunol 1996;69:141-149

82. Matrisian L.M. /Bioassay/1992. V.14. 455-463

83. Merrill JE, Kono DH, Clayton J. et al./ Inflammatory leukocytes and cytokines in the peptide-induced disease o xperimental allergic encephalomy elitis in SJL and BIO.PL mice. Proc Nat Acad Sci USA 1992, 89:574-578

84. Miller D.H., Barchof F., Nauta J.P Gadolinium enhancement incrisase the sensitively of MRI in detecting disease activity in multiple sclerosis/ Brain 1993;166:1077-1094

85. Mohler KM, Sleath PR, Fit/sner J\, et al.' Protection against lethal dose of endotoxin by an inhibitor of tumor necrosis factor processing/Nature 1994;370:218-220

86. Mohr DC, Goodkin DE, Bacchetti P et al. Psychological stress and the subsequent appearance of new brain MRI lesions in MS. Neurology 2000,55:55-61

87. Noronha A., Toscas A., Jensen MA./Interferon beta decreases T cell activation and interferon gamma production in multiple sclerosis/ J Neuroimmunol. 1993 Jul; 46(1-2): 145-153

88. Otten U., Gadeint RA./Neurotrophins and cytokines-intermediaries between the immune and nervous systems / Int.J.Dev.Neurosci.1995 Jun1. Jul; 13(3-4): 147-151

89. Pagenstecher A, Stalder AK, Kincaid CL, Shapiro SD, Campbell IL./ Differential expression of matrix metalloproteinase genes in the mouse central nervous system in normal and inflammatory states./ Am J Pathol 1998; 152:729-741

90. Pardridge W.M./ Physiol. Rev. 1983;63:1481-1535

91. Paul S., Voile L>. J., Beach C.M. et al. Catalytiic hydrolysis of vasoactive intestinal peptide by human autoantibody // Science. 1989. - Vol. 244. - P. 1158 — 1162.

92. Paul WE, Seder RA/ Lymphocyte responses and cytokines./ Cell 1994, 76:241-251

93. Pearl GS, Mullins RE./ a 1-Antitrypsin in cerebrospinal fluiid of patients with neurologic diseases/ Arch Neurol 1985;42:775-777

94. Poser C.M. 1994, Kurtzke J.F.I 980, Bauer H.J. 1987/The role of trauma in pathogenesis of multiple sclerosis: a review./Department of Neurology, Harvard Medical School, Boston, MA 02215. Clin-Neurol-Neurosurg. 1994 May; 96(2): 103-10

95. Proost P., Van Damme J., Opdenakker G./Leukocyte gelatinase B cleavage releases encephalitogens from human myelin basic protein/1993 Biochem. Bio-phys. Res. Commun. 192:1175-1 181

96. Prineas „ W, Barnard RO, Kwon EE, Sharer LR. Cho ES. /Multiple sclerosis: remyelination of nascent lesions./ Annals of Neurology1993;33:137-157

97. Raine CS, Wu E. / Multiple sclerosis: remyelinisation in acute lesions. J Neuropathol Exp Neurology 1993, 52: 199-204

98. Raine CS. / Demyelinating diseases. In: Davis RL, Robertson DM, eds. Textbook of neuropathology. Baltimore: Williams&Wilkins, 1992:535-552

99. Ries C, Petrides PE./ Cytokine regulation of matrix metalloproteinases activity and its regulatory dysfunction in disease./ Biol Chem Hoppe-Seyler 1995;376:345-355

100. Rosenberg G.A., Dencoff J.E., Correa N., Reiners M., Ford C.C./Effect of steroids on CSF matrix metalloproteinases in multiple sclerosis: relation to blood-brain barrier injury/1996 Neurology.46:1626-1632

101. Rosenberg GA, Kornfeld M, Estrada E, Kelley RO. I.iotta LA, StetlerStevenson WG./ TIMP-2 reduces proteolytic opening of blood-branin barrier by-type IV collagenase./ Brane Res 1992:576:203-207

102. Rosenberg GA, Dencoff JE, McGuire PG, Liotta LA, Stetler-Stevenson WA./ Injury-induced 92-kD gelatinase and urokinase expression in an expression in rat brain./ Lab Invest 1994;71:417-422

103. Romanic AM, Madri JA./ The induction of 72-kD gelatinase in T cells upon adhesion to endothelial cells is VCAM-1 dependent./J Cell Biol 1994; 15:11651178

104. Satoh T., Nakamura S., Taga T. et al./ Induction of neuronal differentiations in PC cells by B-cell stimulatory factor 2 interleukin6/Mol.Cell.Biol. 1998;8;3546-3549L

105. Schroder J.M., Sticherling M., Henneicke HH., Preissner WS., Christophers E/IL-1 tumor necrosis factor-stimulate release of three NAP-1. IL-8-relatedneurotrophil chematactic proteins in human dermal fibroblasts/ ¿Immunol. 1990. Vol. 144:2223-2232

106. Spuler S., Yousry T., Scheller A. et al/ Multiple sclerosis: prospective analysis of TNF-alpha and 55kDa TNF receptor in CSF and serum in correlation with clinical and MRI activity/J.Neuroimmonol. 1996;66:57-64

107. Svenningsson A, Hansson GK, Andersen I, et al. Adhesion molecule expression on cerebrospinal fluid T lymphocytes: evidence for common recruitment mechanisms in multiple sclerosis, aseptic meningitis, and normal controls. Ann Neurol 1993, 34: 155-161

108. Shuster A. M., Gololobov G. V., Kvashuk O. A., et al. /DNA hydrolizing autoantibodies.// Science. 1992. - Vol. 256. - P. 665 - 667.

109. Tramontano A., Janda K. D., Lerner R. A. Catalytic antibodies // Science. 1986. V. 234. -P. 1566- 1570

110. Thompson AJ., Kermode AG., Wicks D., MacManus DG., Kendall BE., Kingsley DO., MacDonald WI/ Major differences in the dynamics of primary and secondary progressive multiple sclerosis/Ann Neurol 1991;29:53-62

111. Ulvestad E, Williams K, Bi L, et al./ HLA class II molecules (HLA -DR,-DP,-DQ) on cells in the human central nervous system studied in situ and in vitro. Immunology 1994, 82: 535 541

112. Van Walderveen MA., Barkhoff.F., Hommes OR et al/Correlating MRI and clinical disease activity in multiple sclerosis relevance of hypointense lesions on short-TR/short-TE (T1-weighted) spin-echo images/ J.Neurology. 1995; 45:1684 1690

113. Vries H.E., Blom-Roosemalen M., Oosten M. et. al. J. Neuroimmunology 1996;64:37-43

114. Wang X, Fu X, Brown PD, Grimmin MJ, Hoffman RM./Matrix metallopro-teinase inhibitor BB-94 (Batistat) inhibits Human colon tumor growth and spread in a patient-lake orthotopic model in nude mice./ Cancer Res 1994;54:4726-4728

115. Wahl S.M./ Transforming growth factor beta (TGF-P) in inflammation: A cause and a cure./ J Clin Immunol 1992

116. Woessner JF Jr./ The family of matrix metalloproteinases/Ann NY Acad Sci 1994;732:11-21

117. Willoghby EW., Grochowski E., Li DKB., Oger J., Kastrukotf LF., Paty DW/Serial magnetic resonance scanning in multiple sclerosis: a second prospective study in relapsing patients./Ann Neurol 1989;25:43-49

118. Woodroof MN., Cuzner ML./Cytokine mRNA expression in inflammatory multiph sclerosis lesion: detection by nonradiactive in situ hybridization /1. Cytokine 1993;5:583-588

119. Woodroofe MN/ Cytokine production in central nervous system/ Neurology 1995 Jun; 45(6 Suppl 6):S6-10

120. Woessner J.F. /FASEB J/ V.5.H.2145-2154/1991

121. Xiao BG, Link H. Immune regulation within the central nervous system. J Neurol Sci 1998, 157: 1-12

122. Zoukos Y, Leonard JP, Thomaides T, et al. P-Adrenergic receptor density and function of peripheral blood mononuclear cells are increased in multiple sclerosis: a regulatory role for Cortisol and interleukin-1. Ann.Neurol 1992, 31: 657-662L