Апоптоз мононуклеаров периферической крови у больных сахарным диабетом 1-го типа тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.46, кандидат медицинских наук Луговая, Анна Владимировна

• Луговая, Анна Владимировна
• кандидат медицинских наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Луговая, Анна Владимировна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Современные представления о сахарном диабете 1 типа.

1.2 Участие иммунокомпетентных клеток в деструкции островкового аппарата поджелудочной железы.

1.3 Апоптоз как завершающий механизм иммунообусловленной деструкции Р-клеток.

1.4 Лабораторная диагностика и мониторинг СД-1.

1.5 Иммунный статус у больных СД-1.

1.6 Выявление маркеров апоптоза мононуклеаров периферической крови у больных СД-1.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1 Характеристика обследованных больных и объём проведённых исследований.

2.2 Получение крови для исследования.

2.3 Определение глюкозы в крови.

2.4 Определение гликозилированного гемоглобина.

2.5 Определение кетоновых тел в моче.

2.6 Выделение мононуклеаров периферической крови.

2.7 Иммунофенотипирование.

2.8 Определение экспрессии Fas-рецептора на Т-лимфоцитах.

2.9 Индукция пролиферации мононуклеаров.

2.10 Оценка пролиферативной активности лимфоцитов в реакции бласттрансформации методом проточной ДНК-цитометрии.

2.11 Оценка активационного апоптоза мононуклеаров периферической крови в ответ на стимуляцию методом проточной ДНК-цитометрии.

2.12 Получение сыворотки крови.

2.13 Иммунноферментный анализ.

2.14 Определение растворимой формы Fas-лиганда.

2.15 Определение растворимой формы Fas-рецептора.

2.16 Определение С-пептида.

2.17 Определение аутоантител к клеткам островков

Лангерганса методом непрямой иммунофлуоресценции.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1 Содержание С-пептида в крови больных СД-1.

3.2 Аутоантитела к клеткам островков

Лангерганса в сыворотке крови больных СД-1.

3.3 Особенности экспрессии Fas- антигена лимфоцитами периферической крови больных СД-1.

3.4 Особенности продукции растворимой формы Fas-лиганда и

Fas-рецептора иммуннокомпетентными клетками больных СД-1.

3.5 Оценка эффективности Fas-опосредованного апоптоза лимфоцитов периферической крови больных СД-1 и лиц с высоким риском развития СД-1.

3.6 Оценка индукции апоптоза мононуклеаров периферической крови больных СД-1.

3.7 Изменение пролиферативной активности лимфоцитов периферической крови у больных

СД-1 и лиц с высоким риском развития СД-1.

3.8 Сравнительная оценка процессов апоптоза и пролиферации Т-лимфоцитов периферической крови больных СД-1.

3.9 Параметры клеточного звена иммунитета у больных СД-1 и лиц с высоким риском развития СД-1.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Апоптоз мононуклеаров периферической крови у больных сахарным диабетом 1-го типа»

Актуальность проблемы

Сахарный диабет 1 типа (СД-1) является органоспецифическим аутоиммунным заболеванием, которое развивается в результате селективного разрушения р-клеток поджелудочной железы цитотоксическими лимфоцитами, Т-хелперами 1 типа и аутоантителами [Хаитов P.M. и соавт., 2000; Фрейдлин И.С., Тотолян А.А., 2001]. В результате постепенной деструкции Р-клеток наступает инсулиновая недостаточность, приводящая к расстройству гомеостаза глюкозы и возникновению СД-1. Клинически классические симптомы СД-1 -гипергликемия и кетоз, проявляются только при разрушении 80-90% островков Лангерганса [Балаболкин М.И., 2000; Зак К.П. и соавт., 2002].

Несмотря на активное изучение иммунопатогенеза СД-1 многие ключевые моменты в развитии и прогрессировании данного заболевания остаются не ясными. По-прежнему актуальными являются проблемы ранней диагностики СД-1, обеспечения стабильного течения заболевания и борьбы с его вторичными осложнениями [Карпищенко А.И., 2001; Зилов А.А., 2002]. В связи с тенденцией к «омоложению» возраста больных СД-1, приводящей к ранней инвалидизации, увеличению частоты заболеваемости, особую актуальность приобретают уточнение механизмов иммунопатогенеза и разработка новых методов своевременной диагностики СД-1.

В последнее время внимание многих исследователей привлечено к роли апоптоза в гибели р-клеток при развитии СД-1. В патогенезе СД-1 с апоптозом связаны 2 основных механизма: 1) нарушение процессов апоптоза в тимусе, приводящее к неэффективной селекции аутореактивных Т-лимфоцитов, накоплению их в циркуляции, и, как следствие, к утрате толерантности к р-клеткам поджелудочной железы;

2) роль апоптоза как завершающего механизма иммунообусловленной деструкции Р-клеток [Зак К.П. и соавт., 2002; Один В.И., 2003; Mauricio D., Mandrup-Poulsen Т., 1998].

Ключевым моментом в инициации СД-1 является резистентность аутореактивных Т-лимфоцитов к апоптозу [Мохорт Т.В. и соавт., 2000]. Ускользание аутореактивных клеток от иммунологического надзора приводит к активной деструкции Р-клеток и последующей манифестации заболевания [Mauricio D., Mandrup-Poulsen Т., 1998]. Установлено, что у мышей линии NOD (nonobese diabetic), являющихся моделью спонтанного аутоиммунного диабета, близкого к СД-1 человека, CD4+- и С08+-лимфоциты при блокировании влияния на них ИЛ-2 проявляют повышенную устойчивость к апоптозу. При этом Т-хелперы оказываются более резистентны к апоптозу, чем С08+-клетки, что нарушает нормальный баланс хелперы/цитотоксические Т-лимфоциты и способствует поддержанию аутоиммунной агрессии. Резистентность Т-лимфоцитов NOD-мышей к апоптозу объясняется повышенной экспрессией Т-клетками ингибитора апоптоза белка Bcl-xL [Lamhamedi-Cherradi S.E etal., 1998].

Аутореактивные лимфоциты, устойчивые к апоптозу, мигрируют из кровяного русла в орган-мишень - поджелудочную железу - и образуют воспалительные инфильтраты - инсулиты [Зак К.П. и соавт., 2002; Eizirik D.L. et al., 2001]. Иммунокомпетентные клетки, инфильтрирующие островковую ткань, продуцируют провоспалительные цитокины (ФНОа, ИЛ-ip, ИФНу), оксид азота, цитотоксические ферменты (перфорин и гранзим В), избыточное количество свободных радикалов и другие соединения, вызывающие гибель Р-клеток по механизму апоптоза [Колесник Ю.М., Орловский М.А., 2004; Yoon J.W. et al., 1998]. ИЛ-ip самостоятельно или в s комбинации с ИФНу и ФНОа усиливает экспрессию Fas-рецептора на р-клетках, что приводит к их апоптозу в результате взаимодействия с аутореактивными лимфоцитами, экспрессирующими Fas-лиганд [Колесник Ю.М., Орловский М.А., 2004; Benoist С. et al., 1997]. В настоящее время Fas-опосредованный апоптоз рассматривается как ведущий механизм деструкции р-клеток [Chernovsky A.V. et al., 1997; Kreuwel H.T. et al., 2001; Nakayama M. et al., 2002].

В патогенезе СД-1 важное значение имеют нарушения Fas-опосредованного апоптоза лимфоцитов, играющего главную роль в поддержании периферической аутотолерантности [Lejon К. et al., 1996; Kim S. et al., 2000, 2002]. В то же время большинство результатов по изучению Fas-опосредованного апоптоза при СД-1 получено в экспериментах in vitro с использованием изолированных островков поджелудочной железы человека и NOD-мышей. Не вызывает сомнений тот факт, что аутоиммунные изменения in vivo носят более глубокий характер, и экстраполяция эффектов, выявленных в системе in vitro, на организм не всегда правомочна. Установлено, что особенности индукции и регуляции апоптоза у экспериментальных животных существенно отличаются при СД-1 у людей [Horens A., Pipeleers D., 1999]. В связи с этим представляется актуальным изучение особенностей Fas-опосредованного апоптоза лимфоцитов у больных СД-1 и лиц с высоким риском развития аутоиммунного диабета, а также уточнение механизмов развития апоптоза мононуклеаров периферической крови в зависимости от состояния компенсации углеводного обмена и длительности течения СД-1.

Цель исследования

Охарактеризовать особенности процессов апоптоза мононуклеаров периферической крови больных СД-1 в зависимости от фазы компенсации и длительности течения заболевания, а также у лиц с высоким риском развития СД-1 и сопоставить полученные результаты с состоянием Р-клеток по уровню С-пептида в крови.

Задачи исследования

1. Оценить функциональное состояние Р-клеток по уровню С-пептида в сыворотке периферической крови больных СД-1 и лиц с высоким риском развития СД-1.

2. Определить титр антител к островкам поджелудочной железы (1СА) у больных СД-1 и лиц с высоким риском развития СД-1 для оценки активности процесса деструкции Р-клеток.

3. Охарактеризовать готовность к апоптозу Т-лимфоцитов больных СД-1 и лиц группы риска путём определения количества CD3+CD95+-, CD4+CD95+- и С08+СЭ95+-лимфоцитов.

4. Провести количественное определение растворимых форм Fas-рецептора и Fas-лиганда и исследовать корреляционные связи между этими показателями и количеством С095+-клеток для оценки эффективности Fas-опосредованного апоптоза лимфоцитов больных СД-1 и лиц с высоким риском развития СД-1.

5. Определить чувствительность мононуклеаров периферической крови больных СД-1 к активационному апоптозу в ответ на стимуляцию фитогемагглютинином и инсулином методом проточной ДНК-цитометрии через 144 часа культивирования и сопоставить с уровнем глюкозы и С-пептида.

6. Изучить пролиферативную активность лимфоцитов больных СД-1 и лиц с высоким риском развития СД-1 в ответ на стимуляцию митогенами и антигеном (инсулином).

7. Выявить зависимость между показателями апоптоза и пролиферации Т-лимфоцитов у больных СД-1 и лиц с высоким риском развития СД-1.

Основные положения, выносимые на защиту

1. У больных СД-1 выраженность спонтанного и активационного апоптоза мононуклеаров периферической крови находится в прямой зависимости от содержания глюкозы в крови и в обратной - от содержания С-пептида.

2. У больных СД-1 выявлена повышенная чувствительность мононуклеаров к активационному апоптозу в ответ на стимуляцию фитогемагглютинином, более выраженная в фазе декомпенсации заболевания.

3. В периферической крови больных СД-1 отмечается увеличение количества аутореактивных С095+-клеток и Т-лимфоцитов, экспрессирующих Fas-рецептор, более значимое при декомпенсации заболевания.

4. У больных в фазе декомпенсации СД-1 и у лиц с высоким риском развития СД-1 происходит ингибирование Fas-опосредованного апоптоза аутореактивных лимфоцитов за счёт растворимой формы Fas-рецептора. В фазе компенсации СД-1 Fas-опосредованный апоптоз аутореактивных СЭ95+-клеток реализуется с помощью растворимой формы Fas-лиганда и С016+-клеток, экспрессирующих мембранный Fas-лиганд.

Научная новизна

Выявлены особенности Fas-опосредованного апоптоза мононуклеаров периферической крови у больных СД-1 в разных фазах компенсации заболевания и у лиц с высоким риском развития СД-1.

Установлена выраженная корреляционная связь между содержанием сывороточного Fas-лиганда и высоким титром аутоантител к островковым клеткам поджелудочной железы и уровнем С-пептида в крови у лиц с высоким риском развития СД-1.

Установлено, что уровень спонтанного и индуцированного апоптоза мононуклеаров больных СД-1 коррелирует с декомпенсацией заболевания и содержанием С-пептида в крови.

Выявлена повышенная чувствительность мононуклеаров больных СД-1 к активационному апоптозу в ответ на стимуляцию фитогемагглютинином. Более выраженная чувствительность клеток к индукции апоптоза при декомпенсации заболевания объясняется влиянием гипергликемии, являющейся дополнительным индуктором активационного апоптоза.

Установлена прямая корреляционная связь между интенсивностью пролиферативного ответа лимфоцитов на инсулин и повышенным титром аутоантител к островковым клеткам поджелудочной железы, уровнем С-пептида крови у лиц с высоким риском развития СД-1.

Практическая значимость

Определение сывороточного Fas-лиганда может быть использовано для прогноза развития СД-1 у пациентов с нарушением толерантности к глюкозе.

Реакцию бластной трансформации лимфоцитов с инсулином можно рассматривать в качестве дополнительного критерия оценки риска развития СД-1 у лиц первой степени родства больных диабетом 1 типа.

Определение индуцированного апоптоза в ответ на стимуляцию фитогемагглютинином и инсулином позволяет оценить фазу компенсации заболевания и контролировать эффективность проводимой терапии у больных СД-1.

Апробация работы

Основные положения диссертационного исследования были доложены и обсуждены на Межгородской научной конференции «Актуальные проблемы патофизиологии» (Санкт-Петербург, 2002,

2003), II Всероссийской конференции по нейроиммунопатологии (Москва, 2002), Российской научно-практической конференции «Актуальные вопросы гематологии и трансфузиологии» (Санкт-Петербург, 2002), научных конференциях «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (2002, 2003). По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ.

Реализация результатов исследования

Результаты работы внедрены в учебный процесс на цикле «Клиническая лабораторная диагностика», «Гематологические и общеклинические методы исследований» на кафедре клинической лабораторной диагностики ГОУ ДПО Санкт-Петербургской медицинской академии последипломного образования Минздрава России, используются в работе научно-исследовательской лаборатории клеточного и гуморального иммунитета Всероссийского центра экстренной и радиационной медицины МЧС России, Санкт-Петербург.

Заключение диссертации по теме «Клиническая лабораторная диагностика», Луговая, Анна Владимировна

ВЫВОДЫ

1. У больных СД-1 выявлена достоверная корреляция между обострением процесса и активностью спонтанного и индуцированного апоптоза мононуклеаров периферической крови, которая выражается в наличии прямой связи между содержанием глюкозы в крови и количеством гиподиплоидных клеток и обратной зависимости между содержанием С-пептида в крови и количеством гиподиплоидных клеток.

2. При СД-1 наблюдается повышенная чувствительность мононуклеаров периферической крови к активационному апоптозу в ответ на стимуляцию фитогемагглютинином, более выраженная в фазе декомпенсации заболевания.

3. В периферической крови больных СД-1 выявлено увеличение количества С095+-клеток и Т-лимфоцитов, экспрессирующих Fas-рецептор, что свидетельствует о повышенной готовности иммунокомпетентных клеток к апоптозу. Максимальное повышение количества С095+-клеток и Т-лимфоцитов, несущих рецептор CD95, наблюдается при декомпенсации заболевания, что указывает на связь между повышенной готовностью клеток к апоптозу и обострением процесса.

4. У лиц с высоким риском развития СД-1 отмечается увеличение количества С08+-лимфоцитов, экспрессирующих Fas-рецептор, что свидетельствует о накоплении в циркуляции аутореактивных цитотоксических Т-лимфоцитов, участвующих в деструкции р-клеток поджелудочной железы. Повышение количества CD8+CD95+-лимфоцитов в периферической крови лиц группы риска способствует прогрессированию аутоиммунного процесса и является неблагоприятным прогностическим фактором.

5. У больных СД-1 наблюдается повышение растворимой формы Fas-лиганда, более выраженное в фазе компенсации заболевания.

Увеличение содержания растворимой формы Fas-лиганда имеет протективное значение и способствует достижению компенсации заболевания, поскольку растворимый Fas-лиганд принимает участие в удалении аутореактивных С095+-клеток периферической крови больных СД-1.

6. У больных в фазе декомпенсации СД-1 и у лиц с высоким риском развития диабета 1 типа происходит ингибирование Fas-опосредованного апоптоза аутореактивных СВ95+-клеток при участии растворимой формы Fas-рецептора. В фазе компенсации заболевания наблюдается реализация апоптоза СР95+-клеток по Fas-пути с помощью растворимого Fas-лиганда и С016+-клеток, экспрессирующих мембранный Fas-лиганд.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Определение сывороточного Fas-лиганда необходимо осуществлять с целью прогноза развития СД-1 у пациентов с нарушением толерантности к глюкозе.

2. В качестве дополнительного критерия оценки риска развития СД-1 у лиц первой степени родства больных СД-1 необходимо рассматривать повышение пролиферативного ответа на инсулин в реакции бластной трансформации лимфоцитов.

3. Данные по определению количества гиподиплоидных клеток в ответ на стимуляцию фитогемагглютинином и инсулином целесообразно применять для оценки фазы компенсации заболевания и контроля эффективности проводимой терапии у больных СД-1.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Луговая, Анна Владимировна, 2004 год

1. Асфандиярова Н.С., Колчева Н.Г., Шатрова И.В., Гончаренко Л.В. Сравнительная иммунопатология сахарного диабета // Пробл. Эндокринол. 1998.- Т.44, №6. - С.3-5.

2. Балаболкин М.И. Диабетология.- М.: Медицина, 2000.- 672с.

3. Балдуева И.А., Моисеенко В.М., Хансон К.П. Система дендритных клеток и её роль в регуляции функциональной активности Т- и В-лимфоцитов человека // Вопр. онкологии,- 1999,- Т.45, №5.-С.473-483.

4. Барышников А.Ю., Шишкин Ю.В. Иммунологические проблемы апоптоза.- М.: Эдиториал УРСС, 2002. 320с.

5. Биохимические основы патологических процессов: Учеб. пособие / Под ред. Е.С. Северина.- М.: Медицина.- 2000.- 304с.

6. Бондарь Т.П., Козинец Г.И. Лабораторная диагностика сахарного диабета и его осложнений.- М.: Мед. информ. агентство.-2003.- 88с.

7. Вартанян Н.Л., Соминина А.А., Зарубаев В.В., Стройкова А.С., Острецова И.Н., Киселёв О.И. Определение аутоантител к антигенам поджелудочной железы у больных сахарным диабетом типа 1 и детей группы риска // Пробл. эндокринол. 2000.- Т.46, №3.- С.3-7.

8. Вартанян Н.Л., Дубинина Т. А., Серебряная Н.Б. Иммунологические маркеры в диагностике сахарного диабета 1 типа // Медицинская иммунология. 2003.- Т.5, №3-4.- С. 248-249.

9. Владимирская Е.Б. Биологические основы противоопухолевой терапии.- М.: Агат-Мед,- 2001,- 110с.

10. Волчегорский И. А., Харченкова Н.В. Фруктозамин, липопротеины высокой плотности и степень дислипопротеидемии у больных с сосудистыми осложнениями сахарного диабета типа 1 // Клин. лаб. диагн.- 2003.- №1.- С.14-17.

11. Волчегорский И.А., Харченкова Н.В. Содержание продуктов перекисного окисления липидов, а-токоферола и церулоплазмина в крови больных с сосудистыми осложнениями инсулинзависимого сахарного диабета // Клин. лаб. диагн.- 2003.-№4.- С.13-15.

12. Галитовский В.Е., Гогвадзе В.Г. Ингибиторы энергетики митохондрий предотвращают межнуклеосомную фрагментацию ДНК в тимоцитах// Биохимия.- 1998.- Т.63, №12.- С.1616-1620.

13. Гельман В.Я. Медицинская информатика: практикум (2-е изд.).- СПб: Питер, 2002.- 480с.

14. Глазанова Т.В., Бубнова JI.H., Мазуров В.И. Аутоиммунные заболевания щитовидной железы: роль иммунологических и иммуногенетических факторов // Медицинская иммунология.- 2000.-Т.З, №3.- С.257-270.

15. Глазанова Т.В., Бубнова JI.H., Мазуров В.И. Аутоиммунные заболевания щитовидной железы: роль иммунологических и иммуногенетических факторов // Медицинская иммунология.- 2000.-Т.З, №3.- С.257-270.

16. Глазанова Т.В. Иммунологические иммуногенетические особенности органоспецифических и системных аутоиммунных заболеваний: Автореф. дис. . д-ра. мед. наук.- СПб, 2002. -41с.

17. Григорьева Т.Ю., Никонова М.Ф., Ярилин А.А. Различная чувствительность к индукции апоптоза Т-лимфоцитов субклассов CD4+ и CD8+ // Иммунология .- 2002.- №4.- С.200- 205.

18. Дедов И.И., Чугунова Л. А., Смирнова О.М. и соавт. Особенности клеточного иммунитета у больных с впервые выявленным сахарным диабетом // Пробл. эндокринол. 1994.- Т.40, №1. - С. 17-20.

19. Дедов И.И., Мельниченко Г.А., Фадеев В.В. Эндокринология. М.: Медицина.- 2000.- 632с.

20. Дедов И.И., Кураева Т.Л., Петеркова В.А., Щербачёва Л.Н. Сахарный диабет у детей и подростков. М.: Универсум паблишинг.-2002.- 391с.

21. Долгачёв В.А., Афанасьев В.Н., Долгачёва Н.Н., Печатников В. А. Предотвращение М-ацетил-Ь-цистином апоптоза тимоцитов, вызванного УФС-облучением // Иммунология .- 2000.- №4,- С.37-38.

22. Долгих В.Т. Основы иммунопатологии,- 2003.- М.: Медицинская книга, Н.Новгород: Изд-во НГМА.- 2003.- 229с.

23. Долгов В.В., Луговская С.А., Почтарь М.Е., Шевченко Н.Г. Лабораторная диагностика нарушений обмена железа: Учеб. пособие.-М.- 1996.- 64с.

24. Долгов В.В., Луговская С.А., Морозова В.Т. Лабораторная диагностика анемий: пособие для врачей.- Тверь: Губернская медицина.-2001.-88с.

25. Дранник Г.Н. Клиническая иммунология и аллергология.-М.: ООО «Мед.информ.агенство».- 2003.- 604с.

26. Драпкина О.М., Клименков А.В., Ивашкин В.Т. Апоптоз кардиомиоцитов и роль ингибиторов АПФ // Российский кардиологический журнал.- 2003,- Т.39, №1,- С.81-86.

27. Ефимов А.С., Скробонская Н. А. Клиническая диабетология.- К.: Здоровья.- 1998,- 320с.

28. Зак К.П., Малиновская Т.Н., Тронько Н.Д. Иммунитет у детей, больных сахарным диабетом.- К.: Книга плюс.- 2002.- 112с.

29. Зенков Н. К., Меныциков Е. Б., Вольский Н. Н., Козлов В. А. Внутриклеточный окислительный стресс и апоптоз // Успехи современной биологии.- 1999.- №5.- С.440-450.

30. Зилов А.А. Факторы предрасположенности к инсулинодефициту и перспективы лечения сахарного диабета 1 типа // Врач.- 2002 №7.- С.44-47.

31. Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля, Пер. с нем. А.П. Тарасова.- М.: Медицина- 1987.- 472с.

32. Исследование системы крови в клинической практике. // Под ред. Козинца Г.И., Макарова В.А. М.- 1997.- 106с.

33. Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике: Т.2. Мн.: Беларусь.- 2000.- 463с.

34. Кандрор В.И. Аутоиммунные заболевания щитовидной железы и апоптоз // Пробл. эндокринол.- 2002.- Т.48, № 1.- С.45-48.

35. Казначеев К.С. Механизмы развития цитокининдуцированного апоптоза // Гематол. и трансфузиол. 1999.-Т.44, №1. - С.40-43.

36. Карягина И.Ю., Эммануэль Ю.В. Лабораторные технологии диагностики и мониторинга сахарного диабета // Клин. лаб. диагн. -2002. № 5. - С.25-32.

37. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врача. СПбгТОО.- Изд-во «Гиппократ». 1998. - 156с.

38. Клаус Дж., Лимфоциты: Методы. Пер. с англ. / Под ред. Дж. Клауса.- М.: Мир.- 1990.- 400 с.

39. Клиническая иммунология. Руководство для врачей / Под ред. акад. РАМН Е.И.Соколова.- М.: Медицина.- 1998.- 272с.

40. Колесник Ю.М., Орловский М.А. Панкреатические островки: некоторые аспекты морфологии, физиологии и процессовдеструкции при сахарном диабете типа 1 // Пробл. эндокринол.- 2004,-Т.50, №2. С. 3-10.

41. Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф., Меньшиков В. В. Биохимические исследования в клинике. Л.: Медицина.- 1976.- 75 с.

42. Крекова Ю.В., Мазуров В.И., Бубнова Л.Н., Глазанова Т.В. Изменения некоторых иммунологических показателей у больных сахарным диабетом 1 и 2 типов при лечении системной энзимотерапией //Медицинская иммунология. 2000.- Т.З, №2.- С. 183-184.

43. Лабораторные исследования в клинике: Справочник /под ред. В.В. Меньшикова.- М.: «Медицина»,- 1987.- 368 с.

44. Ланг Н.Р. Стимуляция лимфоцитов // М.: Медицина, 1976.288с.

45. Ласунская Е. Б., Кравцов В. Д., Фрейдлин И. С. Взаимодействие макрофагов и стволовых кроветворных клеток мышей in vitro // Цитология.- 1989.- Т. 31№3.- С.359-363.

46. Леках И.В., Замулаева И.А., Саенко А.С., Поверенный A.M. Скрытые натуральные антитела вызывают апоптоз лимфоцитов // Иммунология. 2000.- №4.- С.39-42.

47. Лукьянова Н. Ю., Кулик Г.И., Чехун В.Ф. Роль генов р53 и bcl-2 в апоптозе и лекарственной резистентности опухолей // Вопр. онкологии. 2000.- Т.46, № 2. - С. 121-128.

48. Лушников Е.Ф., Загребин В.М. Апоптоз клеток: морфология, биологическая роль, механизмы развития. // Архив патологии.- 1987.- Т.49, №2.- С.84-89.

49. Мазурик В.К. Успехи в изучении механизмов регуляции клеточного цикла, репарации ДНК и апоптоза при участии белка и гена р-53 первый шаг на пути к предсказываемой революции в лабораторной медицине XXI века // Лабораторная медицина.- 2001.-№4.- С.33-43.

50. Мазуров В.И., Климко Н.Н. Клиническая гематология.- СПб: ВМедА.- 1993- С.1881-188.

51. Мазуров В.И., Крекова Ю.В., Бубнова Л.Н., Глазанова Т.В. Показатели клеточного и гуморального иммунитета у больных сахарным диабетом 1 типа // Медицинская иммунология.- 2002.- Т.4, №2.- С. 199.

52. Маянский Н.А., Заславская М.И., Мянский А.Н. Апоптоз экссудативных нейтрофилов человека // Иммунология. 2000. - №2. -С.11-13.

53. Маянский Н.А. Состояние каспазы-3 при подавлении апоптоза нейтрофилов гранулоцитарно-макрофагальным колониеобразующим фактором // Иммунология. 2001. - №2. - С.22-25.

54. Маянский Н.А. Субклеточное перераспределение Вах и его слияние с митохондриями при спонтанном апоптозе нейтрофилов // Иммунология. 2001. - №6. - С.29-32.

55. Маянский Н.А., Росс Д., Кайперс Т. Каспазонезависимый путь клеточной гибели нейтрофилов человека, индуцированный TNFa // Цитокины и воспаление.- 2003.- Т.2, №1.- С.29-35.

56. Медицинская лабораторная диагностика (программы и алгоритмы) / Под ред. проф. А.И. Карпищенко.- СПб:, Интермедика.-2001.- 544с.

57. Мохорт Т.В., Мельнов С.Б., Горанов В.А. Апоптоз роль в развитии сахарного диабета типа I / Пробл. эндокринол.- 2000.- Т.46, №2.- С.8-13.

58. Мустафин И.Г., Бойчук С.В., Фассахов Р.С., Романенко О.М. Изучение механизмов апоптоза лимфоцитов периферической крови больных атопической бронхиальной астмой.- Медицинская иммунология .- 2001.- Т.З, №2.- С.166.

59. Мустафин И.Г., Бойчук С.В., Хамзина Р.В., Романенко О.М. Изучение апоптоза лимфоцитов периферической крови при ВИЧ-инфекции.- Медицинская иммунология .- 2002.- Т.4, №2.- С.246.

60. Никонова М.Ф., Литвина М.М., Варфоломеева М.И., Ярилина А.А., Ярилин А.А. Апоптоз и пролиферация как альтернативные формы ответа Т-лимфоцитов на стимуляцию // Иммунология. 1999.- №2.- С. 20-23.

61. Никонова М.Ф., Григорьева Т.Ю., Литвинова М.М., Дейгин В.И., Ярилин А.А. Трипептид неоген усиливает апоптоз Т-лимфоцитов человека при их ответе на митоген // Иммунология . 2000.- №4. - С. 3537.

62. Новик А.А., Богданов А.Н. Принципы трансплантации костного мозга и стволовых клеток периферической крови.- СПб.: ВМедА.- 2001.- 168с.

63. Один В.И. Аутоиммунный сахарный диабет / Под ред. А.А.Новика.- СПб.: ВмедА.- 2003.- 344с.

64. Окулов В.Б., Афанасьев Б.В. Иммунологические аспекты трансплантации костного мозга // Вопр. онкологии.- 1992.- № 5.- С.387-394.

65. Осипова Е. Ю. Клеточные модели для оценки уровня и характера апоптоза клеток крови человека. Автореф. дис. канд. биол. наук.- М., 2003-45 с.

66. Панов М.А. Апоптоз и патогенез инсулинзависимого сахарного диабета вопрос жизни и смерти // Клиническая эндокринология (реферативный сборник).- 1999- №9.- С. 1-3.

67. Пинегин Б.В., Ярилин А.А., Симонова А.В., Климова С.В., Мазуров Д.В., Дамбаева С.В., Бахус Г.О. Применение проточной цитометрии для оценки функциональнйо активности иммунной системы человека. Пособие для врачей-лаборантов.- М., 2001. 53с.

68. Погорелов В.М., Козинец Г.И. Морфология апоптоза при нормальном и патологическом гемопоэзе. // Гематология и трансфузиология.- 1995.- Т.40, № 5.- С. 17-24.

69. Потемкин В.В., Никонова Т.В., Брыкова С.В. Динамика ряда показателей клеточного и гуморального иммунитета у больных сахарным диабетом 1 типа // Пробл. эндокринол. 1994. -Т.40, №6. -С.5-7.

70. Программированная клеточная гибель / Под ред. проф. B.C. Новикова-СПб.: Наука.- 1996.- 276с.

71. Райхлин Н. Т., Смирнова Е. А., Перевощиков А. Г. Апоптоз и его роль в механизмах регуляции роста опухолевых клеток с множественной лекарственной устойчивостью // Арх. пат.- 1996,- Вып.2-С. 3-8.

72. Робинсон М. В. Морфология и метаболизм лимфоцитов. Новосибирск: Наука.- 1986.- 113с.

73. Робинсон М. В., Труфакин В. А. Апоптоз клеток иммунной системы // Успехи современной биологии.- 1991.- Т. 111.- Вып.2.- С.246-259.

74. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. Пер. с англ,-М.: Мир.- 2000.- 592с.

75. Севергина Э.С. Инсулинзависимый сахарный диабет -взгляд морфолога. М.: Издательский дом Видар-М.- 2002.- 152с.

76. Сергеев П.В., Шимановский H.JI., Петров В.И. Рецепторы физиологически активных веществ.- Волгоград: Изд-во «Семь ветров».-1999.-640с.

77. Скалецкий Н.Н., Шумаков В.И. Лечение инсулинзависимого сахарного диабета методом трансплантации островковых клеток поджелудочной железы плодов новорожденных / Трансплантация фетальных тканей и клеток.- М.: 1996.- С.33-40.

78. Скалецкий Н.Н., Кирсанова Л.А., Баранова Н.В. и соавт. Получение культур островковых клеток для трансплантации: новые подходы и новое качество // Вестник трансплантологии и искусственных органов.- 2002.- №3.- С.86.

79. Тотолян А.А., Балдуева И.А., Бубнова Л.Н., Закревская А.В., Зуева Е.Е., Калинина Н.М., Лисицина З.Н. Стандартизация методов иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга человека // Клин. лаб. диагн.- 2002.- №1.- С.44-50.

80. Тронов В.А., Константинов Е. М. Репарация ДНК и гибель покоящихся лимфоцитов крови человека, индуцированные перекисью водорода // Биохимия.- 2000. -Т.65, Вып. 11 С. 1516-1524.

81. Тронько Н.Д., Ефимов А.С., Кравченко В.И., Паньков В.И. Эпидемиология сахарного диабета. К., 1996. - 152с.

82. Уманский С.Р. Апоптоз: молекулярные и клеточные механизмы//Молекулярная биология.- 1996.- Т.30.- Вып.З.- С. 487-493.

83. Уоткинс П.Д. Сахарный диабет.- М.: СПб.: Бинам.- Невский диалект.- 2000.- 96с.

84. Файнштейн Ф. Э., Козинец Г. И., Бахрамов С. М., Хохлова М. П. Болезни системы крови.- Ташкент.- 1987.- 671с.

85. Федосеев Г.Б., Эммануэль В.Л. и соавт. Сахарный диабет. Клин. лаб. диагн.- СПб.- 1995.- 98с.

86. Флеров М.А., Смирнова Н.Н., Светлова З.В. Перекисное окисление белков плазмы крови больных сахарным диабетом типа 1 // Пробл. эндокринол.- 2003.- Т.49, №4.- С.3-4.

87. Фрейдлин И.С. Иммунная система и её дефекты: Руководство для врачей. СПб.- 1998.- 113с.

88. Фрейдлин И.С., Тотолян А.А. Клетки иммунной системы. -СПб.: Наука.-2001.-390с.

89. Хаитов P.M., Дедов И.М., Брыкова С.В. и др. Динамика нарушений показателей клеточного и гуморального иммунитета у больных инсулинзависимым сахарным диабетом // Пробл. эндокринол.-1992.- Т.38, №2.- С. 8-12.

90. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология.- М.: Медицина.- 2000.- 432с.

91. Цитокины и их роль в развитии типовых патологических процессов / Под ред. проф. С.А.Кетлинского, проф. Н.Н.Петрищева-Изд-во СПбГМУ.- 2000.- 78с.

92. Цыганенко А.Я., Жуков В.И., Мясоедов В.В., Завгородний И.В. Клиническая биохимия.- М.: Триада-Х.- 2002.- 504с.

93. Чумаков П. М. Функция гена р53 выбор между жизнью и смертью: обзор // Биохимия.- 2000.- №1.- С.34-47.

94. Шарова Н.И., Дзуцаев А.Х., Литвина М.М., Харченко Т.Ю., Ярилин А.А. Результаты взаимодействия лимфоидных и эпителиальных клеток тимуса человека in vitro, активация и апоптоз // Иммунология.-2000.- №3.- С.7-12.

95. Шишко П.И., Древаль А.В., Садыкова Р.Е. и соавт. Иммунологические характеристики больных инсулинзависимым сахарным диабетом с различной длительностью заболевания // Пробл. эндокринол.- 1993.- №1.- С.8-11.

96. Щетникова К.А. Сахарный диабет. Современные аспекты лабораторной диагностики // Лаборатория.- 2000.- №3.- С.8-9.

97. Энциклопедия клинических лабораторных тестов // Под ред. Н.Тица.- М.: Лабинформ.- 1997.- 98с.

98. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах // Иммунология. 1996.- №6.- С. 10-23.

99. Ярилин А. А. Апоптоз. Природа феномена и его роль в целостном организме // Патол. физиол. эксперим. терапия.- 1998.- №2,-С.38-48.

100. Ярилин А.А. Интерлейкин-7 и другие лимфопоэтины // Иммунология. 2000.- № 1. - С.4 - 13.

101. Ярилин А.А., Никонова М.Ф., Ярилина А.А., Варфоломеева М.И., Григорьева Т.Ю. Апоптоз, роль в патологии и значимость его оценки при клинико-иммунологическом обследовании больных // Медицинская иммунология. 2000. -Т.2, № 1. - С.7 - 16.

102. Abe R., Shimizu Т., Shibaki A. et al. Toxic epidermal necrolysis and Stevens-Johnson syndrome are induced by soluble Fas ligand // Am. J. Pathology .- 2003.- Vol. 162, №5.- P. 1515-1520.

103. Adrie Ch., Bachelet M., Vayssier-Taussat M et al. Mitochondrial membrane potential and apoptosis of peripheral blood monocytes in severe human sepsis // Am.J.Respir.Crit.Care Med.- 2001.- Vol. 164, N3.- P.389-395.

104. Almawi W.Y., Tamim H., Azar S.T. T-helper type 1 and 2 cytokines mediate the onset and progression of type 1 (insulin-dependent) diabetes // J. Clin. Endocrinol. Metab.- 1999.- Vol. 84, № 5.- P.1497-1502.

105. Al-Sakkaf L., Pozzilli P., Tarn A.C. et al. Persistent reduction of CD4/CD8 lymphocyte ratio and cell activation before the onset of type 1 (insulin-dependent) diabetes // Diabetologia. 1989. - Vol. 32, №5.- P. 322325.

106. Ashman R.F. Активация лимфоцитов. В кн.: Иммунология: В трех томах. Т.1. Пер. с англ. / Под ред. У.Пола,- М.: Мир, 1987-1988,-С.413-469.

107. Bach J.-F. Insulin-dependent diabetes mellitus as an autoimmune disease // Endocrine Reviews. 1994.- Vol. 15, № 4.- P.516 - 542.

108. Bach J-F. Expression of Fas on T cells in patients with high risk of type I diabetes // Diabetologia.- 1998.- Vol.41, №1.- P. 163-169.

109. Bedard S., Marcotte В., Marette A. Insulin inhibits inducible nitric oxide synthase in skeletal muscle cells // Diabetologia.- 1998.- Vol.41.-P. 1523-1527.

110. Bedossa P., Bendelac A., Bach J.F., Carnaud C. Syngenic T cell transfer of diabetes into NOD newborn mice: in situ studies of the autoimmune steps leading to insulin-producing cell destruction // Eur. J. Immunol. 1989. - Vol. 19. - P. 1947 - 1951.

111. Benoist C., Mathis D., Wilson A.J. Cell death mediators in autoimmune diabetes. No shortage of suspects // Cell.- 1997.- Vol.89.- P. 1-3.

112. Binimelis J., Codina M., OriolaJ. et al. Activated T-lymphocytes in newly diagnosed type 1 diabetic patients: relationship to residual beta cell function // J. Autoimmun. 1990.- Vol.3, №5.- P.579-585.

113. Boise L.H., Gonzalez-Garcia M., Postema С. E. et al. Bcl-x, and Bcl-2 related gene that functions as a dominant regulator of apoptotic cell death // Cell.- 1993.- Vol. 74.- P. 597-608.

114. Bonifacio E., Bingley P.J., Shattock M et al. Quantification of islet-cell antibodies and prediction of insulin-dependent diabetes // Lancet.-1990.- Vol. 335, N8682.- P.147-149.

115. Bosi E., Sarugeris E. Advences and controversies in etiopatogenesis of type 1 (insulin-dependent) diabetes mellitus // J. Pediatr. Endocrinol. Metab.- 1998.- Vol.l l.-Suppl.2.-P.293-305.

116. Bottazzo G.F., Florin-Christensen A., Doniach D. Islet cell antibodies in diabetes mellitus with autoimmune polyendocrine deficiencies // Lancet.- 1971.-№ 11. P.1279-1283.

117. Boyum A. Separation of leukocytes from blood and bone morrow// Scand. S. Clin. Lab. Investig.- 1968.- Vol.76.- P.1092-1097.

118. Buschard K., Dejgaard A., Madsbad S., Ropke C. Different percentages of CD8+ lymphocytes in long-term type 1 diabetics with and without residual beta-cell function // Diabetes Res.- 1989.- Vol.12, № 3.-P.105-108.

119. Cascino I., Fiucci G., Papoff G. and Ruberti G. Three functional soluble forms of the human apoptosis-inducing Fas molecule are produced by alternative splicing. // J. Immunol. 1995. - Vol. 154, № 6. - P. 2706-2713.

120. Chatenoud L. Restoration of self-tolerance is feasible approach to control ongoing beta-cell specific autoreactivity: its relevance for triatment in established diabetes and islet transplantation // Diabetologia.- 2001.- Vol. 44, №5.- P.521-536.

121. Cheng J., Zhou Т., Liu C. et al. Protection from Fas-mediated apoptosis by a soluble form of the Fas molecule // Science.- 1994.- Vol. 263.-P. 1759-1762.

122. Cheng J., Tamura S., Yasuda H. et al. Fas-mediated apoptosis of beta-cell specific CD8+-cells in IDDM patients and high-risk subjects // Autoimmunity. 1999.- Vol.28, № 5.- P.258-164.

123. Chernovsky A.V., Wang Y., Wong F.S. et al. The role of Fas in autoimmune diabetes // Cell.- 1997.- Vol.89.- P.17-24.

124. Chernovsky A.V., Wong F.S. Allisson V.B. The major role of Fas-mediated apoptosis in beta-cell destruction and initiation of IDDM // Ann. N.Y. Acad. Sci. 2003.- Vol. 1005.- P.172-176.

125. Clement M.V., Stamenkovirc I. Fas and TNF receptor-mediated cell death: similarity and distinctions // J. Exper. Med.- 1994.- Vol. 180.-P.557-567.

126. Colucci F., Cilio C.M., Lejon K. et al. Programmed Cell Death in the Pathogenesis of Murine IDDM: Resistance to Apoptosis Induced in1.mphocytes by Cyclophosphamide // J. Autoimmun.- 1996.- Vol.9, N2-P.271-276.

127. Comi M., Leone M., Bonissoni S., et al. Defective T-cell Fas function in patients with multiple sclerosis // Neurology.- 2000.- Vol. 55, N 7.- P.921-927.

128. Corbett J.A., Daniel M.L. Intraislet release of interleukine-1 inhibits beta-cell function by inducing beta-cell expression of inducible nitric oxide synthase // J. Exper. Med.- 1995.- Vol. 181 P.559-568.

129. Darville M.L., Eizirik D.L. Regulation by cytokines of the inducible nitric oxide synthase promoter in insulin-producing cells // Diabetologia.- 1998.- Vol.41, №9.-P.l 101-1108.

130. Decochez K., Keymeulen В., Somers G. Use of an islet cell antibody assay to identify type 1 diabetic patients with rapid decrease in C-peptide levels after clinical onset. Belgian Diabetes Registry // Diabetes Care .- 2000.- Vol.23, N8.- P.1072-1078.

131. Dhein J., Waiczak H., Baumier C. et. al. Autocrine T-cell suicide mediated by APO-l(Fas/CD95) //Nature.- 1995.- Vol.373.- P.438-441.

132. Durinovic-Bello I. Autoimmune diabetes: the role of T-cells, MHC molecules and autoantigenes // Autoimmunity.- 1998.- Vol.27, №3.-P. 159-177.

133. Eizirik D.L. Beta-cell defence and repair mechanisms in human pancreatic islets // Horm. Metab. Res.- 1996.- Vol.28.- P.302-305.

134. Eizirik D.L., Mandrup-Poulsen Т., Sandler S. A choice of death -the signal- transduction of immune-mediated beta-cell apoptosis // Diabetologia.- 2001.- Vol.44, № 12.- P.2115-2133.

135. Espersen G.T., Mathiesen O., Grunnet N. et al. Cytokine plasma levels and lymphocyte subsets in patients with newly diagnosed IDDM before aand folloving initial insulin treatment // APMIS.- 1993.- Vol.101.- P.703-706.

136. Faustman D., Eisenbarth G., Daley J. et al. Abnormal T-lymphocyte subsets in type I diabetes // Diabetes.- 1989.- Vol.38.- P. 14621468.

137. Field J.B. Hypoglycemia. Definition, clinical presentation, classification and laboratory tests // Endicrinol.Metab.Clin.North Am.- 1989.-Vol.18.- P.27-43.

138. Forst Т., Kunt Т., Pohlmann T. et al. Biological activity of C-peptide on the skin microcirculation in patients with IDDM // J.Clin.Invest.-1998.- Vol.101.- P.2036-2041.

139. Gearson C.L., Hussain M.J., Vergani D., Peakman M. Lymphocyte vaccination protects prediabetic non-obese diabetic mice from developing diabetes mellitus // Diabetologia.- 1998 Vol.41.- P.1401-409.

140. Giordano C., De Maria R., Stassi G., Todaro M., Richiusa P., Giordano M., Testi R., Galluzzo A. Defective expression of the apoptosis-inducing CD95 (Fas/APO-1) molecule on T and В cell in IDDM // Diabetologia.- 1995.- Vol.38.- P.1449-1454.

141. Giordano C., Stassi G., Todaro M. et al. Low bcl-2 expression and increased spontaneous apoptosis in T-lymphocytes from newly-diagnosed IDDM patients // Diabetologia.- 1995.- Vol.38.- P.953-958.

142. Green A., Patterson C.C. Trends in the incidence of childhood-onset diabetes in Europe 1989-1998 // Diabetologia.- 2001.-Vol.44.-Suppl.3.-P.133-138.

143. Gruss H.J., Duyster J., Herrmann F. Structural and biological features of the TNF receptor and TNF ligand superfamilies: interactive signals in the pathobiology of Hodgkin's disease // Ann. Oncol.- 1996.- Vol.7.-Suppl.4.- P.19-26.

144. Guillot R., Bringuier A.F., Porokhov B. et al. Increased levels of soluble Fas in serum from diabetic patients with neuropathy // Diabetes Metab.- 2001.- Vol.27, N3.- P.315-321.

145. Gusmans C.A., Pavlovic D., Boilton R. et al. Dual role of interferon-y signalling pathway in sensitivity of pancreatic beta-cells to immune destruction // Diabetologia.- 2001.- Vol.44, № 5.- P.567-574.

146. Hargreaves R.G., Borthwick N.J., Mantani M.S.G., Piccolella E. Dissociation of T-cell anergy from apoptosis by blocade of Fas/Apo-1 (CD95) signaling // J. Immunol. 1997.-Vol.158.- P.3099-3107.

147. Hayshi Т., Faustman D.L. Implications of altered apoptosis in diabetes mellitus and autoimmune disease // Apoptosis.- 2001.- Vol.6, N1/2,-P.31-45.

148. Hayshi Т., Faustman D.L. Role of defective apoptosis in type 1 diabetes and other autoimmune disease // Recent Prog. Horm. Res.- 2003,-Vol.58.- P.131-153.

149. Hetts S.W. To Die or not to Die // JAMA.- 1998.- Vol.279.-P.300-307.

150. Hietanen Т., Kellokumpulehtinen P., Pitkanen M. Action of recombinant interferons and IL-2 in modulating radiation effect on viability and cytotoxicity of large grannular lymphocytes // Int. J. Rad. Biol.- 1995.-Vol.67.- P.l 19-126.

151. Hiromatsu Y., Bednarczuk Т., Soyejima E. et al. Increased serum soluble Fas in patients with Graves disease // Thyroid.- 1999.- Vol.9.- P.341-349.

152. Hofmann M.A. Characterization of autoreactive T cell subtypes in IDDM patients with different course and duration of disease // Diabetologia.-1997.- Vol.40, №1.- p.141-144.

153. Horens A., Pipeleers D. Nicotinamide protects human beta cells against chemically-induced necrosis, but not against cytokine-induced apoptosis //Diabetologia.- 1999.- Vol.42.- P.55-59.

154. Howie S.E.M., Harrison D.J., Wyllie A.H. Lymphocyte apoptosis -mechanisms and implication in disease // Immunol. Rev. 1994. -Vol. 142. -P.141-148.

155. Hussain M.Y., Maker J., Wamock T. et al. Cytokine overproduction in healthy first degree relatives of patients with IDDM // Diabetologia.- 1998. -Vol.41, №3.- P.343-349.

156. Hussain M.Y., Peakman M., Gollati H. et al. Elevated serum levels of macrophage-derived cytokines precede and accompany the onset of IDDM // Diabetologia.- 1996.- Vol.39, №1.- P.60-69.

157. Imagawa A., Hanafusa Т., Miyagawa J. et al. A proposal of three distinct subtypes of type 1 diabetes mellitus based on clinical an pathological evidence // Ann.Med.- 2000.- Vol.320, N8.- P.539-543.

158. Iwahasi H., Hanagusa Т., Egnchi Y. et al. Cytokine-induced apoptotic cell death in a mouse pancreatic beta-cell: inhibition by bcl-2 // Diabetologia.-1996.-Vol.39, №5.-P.530-536.

159. Ju S.T., Panka D.L., Cui H. et al. Fas (CD95)/FasL interaction required for programmed cell death after T cell activation // Nature.- 1995.-Vol. 373.- P.444-448.

160. Kaaba E.A., Stone A.L., Harbi S.A. Abnormal lymphocyte subsets in Kuwaiti patients with type 1 insulin-dependent diabetes mellitus and their first-degree relatives // Immunology Letter.- 1995.- Vol.47, №3.-P.209-213.

161. Karlsson M.G.E., Sederholm L.S., Ludvigsson J. Th-l-like dominance in high risk first-degree relatives of type 1 diabetic patients // Diabetologia.- 1999.-Vol.42.-Suppl.l.- P. 63.

162. Kaufman S.H. Specific photolytic cleavage of poly (ADP-ribose) polymerase: an early markers of chemotherapy induced apoptosis // Cancer Res.- 1993.- Vol.53, N17.- P.3976-3985.

163. Kayagaki N., Kawasaki A., Ebata T. et al. Metalloproteinase-mediated release of human Fas ligand // J. Exp. Med.- 1995.- Vol.182, N12.-P. 1777-1783.

164. Keller R.J. Cellular immunity to human insulin in individuals at high risk for the development type I diabetes mellitus // J.Autoimmun.- 1990.-Vol.3, №3.- P. 321-327.

165. Keller R.J., Eisenbarth G.S., Jackson R.A. Insulin prophilaxis in individuals at high risk of type I diabetes // Lancet.- Vol341, N8850.- P.927-928.

166. Kim S., Kim K.A., Hwang D.Y., Lee Т.Н., Kayagaki N., Yagita H., Lee M.S. Ingibition of autoimmune diabetes by Fas ligand: the paradox is solved // J. Immunol.- 2000.- V.164.- P.2931-2936.

167. Klass С., Debanm K.-A., Jonker R. R. and Krammer P. H. Activation interferes with the APO-1 pathway in mature human T cells // Int. Immunology. -1993.- Vol.5. P.625-630.

168. Kolb H., Gale E.A.M. Does partial preservation of residual beta-cell function justify immune intervention in recent onset Type 1 diabetes? // Diabetologia.- 2001.- Vol.44, №10.- P.1349-1353.

169. Kreuwel H.T., Sherman L.A., Barret D.J. The role of Fas-FasL in CD8+ T-cell-mediated insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM) // J. Clin. Immun.- 2001.- Vol.21, N1.- P.15-18.

170. Kroemer G. The pharmacology of T-cell apoptosis // Adv. Immunol.- 1995-. Vol.58. P. 211-296.

171. Kroemer G., Petit P. X., Zamzumani N. et. al. The biochemistry of apoptosis//FASEBJ.- 1995.-Vol. 9.-P. 1277-1287.

172. Kukreja A., Maclaren N., Riley W.J. Autoimmunity and diabetes // J. Clinic. Endocrin. A. Metabolism. 1999. - Vol.84, №12. - P. 4371-4378.

173. Kumagai J., Akiyama H., Iwashita S. et al. In vitro regeneration of resting lymphocytes from stimulated lymphocytes and its inhibition by insulin // J.Immunol.-1981.- Vol. 126.- P. 1249-1254.

174. Kurrer M.O., Pakala S.K, Hanson H.I., Katz J.D. Beta-cell apoptosis in T-cell mediatied autoimmune diabetes // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1997.- Vol.94, №1.- P.213-218.

175. Lalain S., Chaillous L., Couin E., Sai P. Intensity and mechanisms of in vitro xenorecognition of adult pig pancreatic islet cells by CD4+ and CD8+ lymphocytes from Type 1 diabetic or healthy subjects // Diabetologia.- 1999.- Vol.42.- P.330-335.

176. Lalic N.M., Lukic M.L., Yotic A. Clinical remission in type 1 diabetes association with changes in CD4+ T cells subsets and not with islet cell antibody and glutamic acid decarboxylase antibody levels // Diabetologia.- 2001.- Vol.44.- Suppl.l.- P.570.

177. Lamhamedi-Cherradi S.E., Luan J.J., Eloy L. et al. Resistance of T-cells to apoptosis in autoimmune diabetes (NOD) mice is increased early in life and is associated with dysregulation of Bcl-x // Diabetologia.- 1998.-Vol.41.- P. 178-184.

178. Lanier L.L. NK cell receptors // Annu. Rev. Immunol.- 1998.-Vol.16. -P.359-393.

179. Laue S., Nietzchmann U., Kapellen TM. Reduced expression of Thl-associated chemokine receptors on peripheral blood lymphocytes of patients with newly diagnosed type 1 diabetes // Diabetologia. 2001.-Vol.44.- Suppl.l.- P.74.

180. Lee K.U., Amano K., Yoon Y-W. Evidence for initial involvement of macrophage in development of insulitis in NOD mice // Diabetes.- 1988.- Vol. 37, №7.- P.989-991.

181. Leech N.Y., Elsegood K.A, Narendran P., Dayan C.M. Deficit in Th2 cytokine production from peripheral T-cell subsets in recent onset Type 1 diabetes //Abstract Book. 4th Immunol. Diabet. Soc. Congr., Rome, 12-15 Nov.- 1999.-P. 75.

182. Lejon K., Cervera R., Ballesta I.M. Defective Fas-mediated apoptosis of some lymphocyte subclasses in patients with type 1 diabetes mellitus and related non-diabetic individuals // Diabetes.- 1996,- Vol.45.-P.181-187.

183. Lindberg В., Ivarsson S.-A., Landin-Olsson M. et al. Islet-autoantibodies in cord blood from children who developed Type 1 (insulin-dependent) diabetes mellitus before 15 years of age // Diabetologia.- 1999.-Vol.42.- P.181-187.

184. Lorini R., Morreta A., Valtirta A. et al. Cytotoxic activity in children with insulin-dependent diabetes mellitus // Diabetes Res. Clin. Pract.- 1994.- Vol.23, №1.- P.37-42.

185. Lynch D.H., Ramsdell F., Alderson M.R. Fas and FasL in the homeostatic regulation of immune responses // Immunol. Today.- 1995.-Vol.16, № 12.-P.569-574.

186. Mabley J.G., Hasko G., Sakman A., Szabo C. Essential role of NF-kappaB (p50) in the development of type 1 diabetes // Diabetologia.-2001.- Vol.44.- Suppl.l.- P.41.

187. Mandrup-Poulsen T. The role of interleukin-1 in the pathogenesis of IDDM// Diabetologia.- 1996.- Vol.39, №9.- P.1005-1029.

188. Manual of Flow Cytometry // Abstract of the X world congress of laboratory research.- 1999.- Mainz.- P.72.

189. Mariani S.M., Matiba В., Baumer C., Krammer P.H. Regulation of cell surface APO-l/Fas(CD95) ligand expression by metalloproteases // Eur. J. Immunol.- 1995.- Vol.25.- P.2303.

190. Marner В., Agner Т., Binger C. et al. Increased reduction in fasting C-peptide is associated with islet cell antibodies in type 1 diabetic patients // Diabetologia.- 1985.- Vol.28.- P.875-880.

191. Massaia M., Borrione P., Attisano C. et al. Dysregulated Fas and Bcl-2 expession leading to enhancend apoptosis in T-cell of multiple myeloma patients // Blood.- 1995.- Vol.85.- P.3679-3687.

192. Mauricio D., Mandrup-Poulsen T. Apoptosis and the pathogenesis of IDDM: a question of life and death // Diabetes.- 1998.-Vol.47, №.10.- P.1537-1543.

193. McCloskey T.W., Oyaizu N., Coronesi M., Pahwa S. Use of a flow cytometric assay to quantitate apoptosis in human lymphocytes // Clin. Immunol. Immunopath.- 1994.- Vol.71.- P. 14-18.

194. Mianovska В., Bodalska-LepinskaJ., Krokowski M. et al. Soluble interleukin-2 receptor in prediabetes, in overt diabetes type 1 and diabetes type 2 //Diabetologia.- 1999.- Vol.41.- Suppl.l.- P.325.

195. Miret С., Font J., Molina R. et al. Relationship of oncogenes (sFas, BcI-2) and cytocines (IL-10, alfa-TNF) with the activity of systemic lupus erythematosus // Anticancer Res.- 2001.- Vol.21, N4.- P.3053-3059.

196. Moretta A., Biassoni R., Bottino C. et al. Major histocompatibility complex class I specific receptors on human natural killer and T-lymphocyte// Immunol. Rev.- 1997.- Vol.155.-P. 105-107.

197. Mouawad R., Khayat D., Soubrane C. Plasma Fas ligand, an inducer of apoptosis, and plasma soluble Fas, an inhibitor apoptosis, in advanced melanoma // Melanoma Res.- 2000.- Vol.10, N5.- P.461-467.

198. Muser E.S., Baier Y.E., BergbanerM. et al. Differential tumor necrosis factor and interleukin-6 production in diabetic patients with diabetic neuropathy treated with a-liponacid // Diabetologia.- 1999.- Vol.42.-Suppl. 1.- P. 102.

199. Nagata S., Golstein P. The Fas death factor // Science.- 1995.-Vol.267.- P.1449-1456.

200. Nagata S., Suda T. Fas and Fas ligand: lpr and gld mutations // Immunol. Today.- 1995.- Vol.16.- P.39-42.

201. Nagata S. The role of soluble Fas in the inhibition of Fas-mediated apoptosis // Autoimmunity. 1999. - Vol.28, №3. - P.239-342.

202. Nakayama M., Nagata M., Yasuda H. et al. Fas/Fas ligand interactions play an essential role in the initiation of murine autoimmune diabetes // Diabetes.- 2002.- Vol.51, N5.- P. 1391-1397.

203. Naquet Ph., Ellis J., Tibensky D., Kenshole A., Sing В., Hodgest R., Delovitch T.L. T cell autureactivity to insulin in diabetic and related non-diabetic individuals // J. Immunology.- 1988.- Vol.140, № 8.- P.2569-2578.

204. Negishi K., Waldeck N., Chandy G. et al. Natural killer cells and islet killer cells activities in Type 1 (insulin-dependent) diabetes / Diabetologia. -1986. Vol.29, N 6.- P.352-357.

205. Nicoletti I., Miglorati G., Pagliacci M.C. et al. A rapid and simple method for measuring thymocyte apoptosis by propidium iodide staining and flow cytometry // J. Immunological Methods.- 1991.- Vol. 139.-P.271-279.

206. Nicoletti F., Conget J., Di Marco R., Speciale A.M. Serum levels of the interferon-y-inducing cytokine interleukin-18 are increased in individuals at high risk of developing type 1 diabetes // Diabetologia.- 2001.-Vol.44, №3.- P.309-311.

207. Nunez G., Merino R., Grillot D., Gonsalez-Garica M. Bcl-2 and Bcl-x: regulatory switches for lymphoid death and survival // Immunol. Today. 1994.- Vol.15.- P.582-586.

208. O'Brien D.A., Harmon B.V., Cameron D.P., Allan D.J. Apoptosis is the mode of beta-cell death responsible for the development of IDDM in the nonobese diabetic (NOD) mouse // Diabetes.- 1997.- Vol.46, № 5.- P.750-757.

209. Oltvai Z, Millman C.L., Korsmeyer S.J. Bcl-2 heterodimerises in vivo with a conserved homolog, Bax, that accelerates programmed cell death // Cell.- 1993.- Vol.74.- P.609-619.

210. Ogasavara J., Suda Т., Nagata S. Selective apoptosis of CD4+CD8+ thymocytes by the anti-Fas antibody // J. Exp. Med.- 1995.-Vol.181, N2.- P.485-491.

211. Onkamo P., Vaananen S., Kawonen M, Tuomilehto J. Worldwide increase in incidence of Type 1 diabetes — the analysis of the data on published incidence trends // Diabetologia.- 1999.- Vol.42, №2.- P. 13951403.

212. Ostenstad В., Sioud M., Schlichting E. et al. Freshly isolated tumour-infiltrating T-lymphocytes have a high cytotoxic potential, as measured by their ability to induce apoptosis in the target cell // Scand. J. Immunol.- 1995.- Vol.41, N1.- P.42-48.

213. Ota Т., Takamura Т., Nagail Y. Predictive value of antibodies to IA-2 for insulin regurement in Japanese type 1 diabetes // Diabetologia.-2001.- Vol. 44, №1.-P.384 391.

214. Penha G.C., Leijon K., Persson L., Holmberg D. Type 1 Diabetes and the Control of Dexamethazone-Induced Apoptosis in Mice Maps to the Same Region on Chromosome 6 // Genomics.- 1995.- Vol.28, N.3.- P.398-404.

215. Pontesilli O., Chase H.P., Carotenuto P. et al. T-lymphacyte subpopulations in insulin-dependent (type 1) diabetes mellitus // Clin. Exp. Immunol.- 1986.- Vol.63.-P.68-72.

216. Petersen L.D., Dinkerken G., Bruining G.J. et al. Increased numbers of in vivo activated T-cells in patients with recent onset insulin-dependent diabetes mellitus // J. of Autoimmunity.- 1996.- Vol.9, №6.- P.731-737.

217. Petersen L.D., M. van der Keur, De Vries R.R., Roep B.O. Autoreactive and immunoregulatory T-cell subsets in insulin-dependent diabetes mellitus // Diabetologia.- 1999.- Vol.42.- P.443 449.

218. Podack E.R. Execution and suicide: cytotoxic lymphocytes enforce draconian laws through separate molecular pathways // Curr. Opin. Immunol. 1995.- Vol.7.- P. 11-16.

219. Roep O., Andreani D., Beverly P.C.L. The role of cytotoxic T-lymphocytes in the initiation of IDDM // Diabetes.- 2002.- Vol.51.- Suppl.l.-P.151-158.

220. Reiux-Laucat F., Le Deist F., Hivros C. et al. Mutation in Fas associated with human lymphoproliferative syndrome and autoimmunity // Science.- 1995.- Vol.268.- P. 1347-1356.

221. Riley W.J., MacLaren N.K., Silverstein J.H. The predictability of insulin-dependent diabetes mellitus // Adv. Pediatr.- 1988.- Vol.35.- P. 167187.

222. Russel J.H. Activation-induced apoptosis of mature T cells in the regulation of immune responses // Curr. Opin. Immunol.- 1995.- Vol.7 -P.382-388.

223. Shapiro A.M.Y., Lakey I.R.T., Ryan E.A. et al. Islet transplantation in seven patients with type 1 diabetes mellitus using a glucocorticoid-free immunosuppressive regimen // N. Engl. J. Med.- 2000,-Vol.343, №4.- P.230-238.

224. Schatz D.A., Riley W.J., Maclaaren N.K., Barrett D.J. Defective inducer T-cell function before the onset of insulin-dependent diabetes mellitus //J. Autoimmun.- 1991.- Vol.103.- Suppl.2.- P.88-94.

225. Scheinin Т., Maenpaa J., Koskimies S. et al. Insulin responses and lymphocyte subclasses in children with newly diagnosed insulin-dependent diabetes // Clin. Exp. Immunol.- 1988.- Vol.71.- P.91-95.

226. Scherbaum W.A., Siessler Y. Cellular and humoral autoimmunity in insulin-dependent diabetes mellitus // Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes.- 1995.- Vol.103.- Suppl.2.- P.87-91.

227. Schloot N.C., Willemen S., Duinkerken G. et ai Cloned T-cells from a resent onset IDDM patient reactive with insulin B-chain // J. Autoimmun.-1998.- №2.-P. 169-175.

228. Schmidt S., Wachlin G., Kuttler B. et al. Surface antigens, HSP 70 and specific function of pancreatic islet beta cells after combined action of cytokines //Diabetologia.- 2001.- Vol.44.- Suppl.l.- P.151.

229. Segal B.M., Cross A.H. FasL track to apoptosis in multiple sclerosis: TNF receptor may suppress or potentiate CNS demyelination // Neurology.- 2000.- Vol. 55, N 7- P.906-907.

230. Signore A., Pozzilli P., Gale E.A.M., Andreani D., Beverly P.C.L. The natural history of lymphocyte subsets infiltrating the pancreas of NOD mice // Diabetologia.- 1989.- Vol.32.- P.282-289.

231. Sjoberg S., Gunnarsson R., Gjotterberg M. et al. Residual insulin production, glycemic control and prevalence microvascular lesions and polyneuropathy in long-term IDDM // Diabetologia.- 1987.- Vol.30.- P.208-213.

232. Smerdon R.A., Peakman M., Hussain M. et al. Increase in simultaneous coexpression of naive and memory lymphocyte markers at diagnosis of IDDM// Diabetes. 1993.-Vol.42, №1.- P.127-133.

233. Smiley S.T., Reers M., Mottola-Hartshorn C. et al. Intracellular heterogeneity in mitochondrial membrane potential revealed by a J-aggregate-forming lipophilic cation JC-1 // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1991.- Vol.88.-P.3671-3675.

234. Srikanta S., Ganda O.P., Rabizadeh A., Soeldner J.S., Eisenbarth G.S. First-degree relatives of patients with Type I diabetes mellitus: Islet cell antibodies and abnormal insulin secretion // New Engl. J. Med.- 1985.-Vol.313.- P.461-464.

235. Strasser A., Whittingham S., Vaux D. et al. Enforced Bcl-2 expression in B-lymphoid cells prolong antibody responses and elicits autoimmune disease // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.- 1991.- Vol.188.- P.8661-8669.

236. Stassi G., Todoro M., Richiusa P et al. Human insulin-producing p-cells die through Fas-mediated apoptosis // Autuimmunity.- 1996.- Vol.24.-Suppl.l.- P.6.

237. Stoian I., Oros A., Moldoveanu E. Apoptosis and free radicals // Biochem. Mol. Med.- 1996.- Vol.59, N2.- P.93-97.

238. Su X., Hu Q., Kristan J.M. et al. Significant role for Fas in the pathogenesis of autoimmune diabetes // J. Immunol.- 2000.- Vol.164, N5.-P.2523-2532.

239. Suda Т., Takahashi Т., Golstein P. and Nagata S. Molecular cloning and expression of the Fas-ligand, a novel member of the tumor necrosis factor family // Cell.- 1993.- Vol.75.- P. 1169-1178.

240. Suda Т., Nagata S. Purification and characterization of the Fas-ligand that induces apoptosis // J. Exp. Med.- 1994.- Vol. 179. N3.- P.873-879.

241. Sytwu H.K., Liblau R.S., McDevitt H.O. The role of Fas/APO-1 and TNF in antigen -induced programmed cell death in the T cell transgenic mice // Immunity.- 1996.- Vol.5.- P. 17-30.

242. Takahashi Т., Tanaka M., Inazawa J. et al. Fas ligand: gene structure, chromosomal location and species specificity // Int. J. Immunol.-1994.- Vol.6.-P.1567-1574.

243. Takahashi Т., Tanaka M., Brannan C.I. et al. Generalized lymphoproliferative disease in mice, caused by a point mutation in the Fas ligand // Cell.- 1994.- Vol.76.- P.969-976.

244. Takamura Т., Kato I., Kimura M et al. Transgenic mice overexpressing type 2 nitric-oxide synthase in pancreatic P-cells develop insulin-dependent diabetes without insulitis // J. Biol. Chem.- 1998.-Vol.273.- P.2493-2496.

245. Tanaka M., Suda Т., Haze K. et al. Fas ligand in human serum // Nature medicine.- 1996.- Vol.2.- P.317-322.

246. Thivolet C., Bendelac A., Bedossa P. et al., CD+8 T cell homing to the pancreas in the nonobase diabetic mous is CD4+ T cell-dependent // J.Immunol.-1991.- Vol.146.- P.85-88.

247. Tomoda Т., Kurashige Т., Taniguchi T. Imbalance of the interleukin-2 system in children with IDDM // Diabetologia.- 1994.- Vol.37.-P.476.

248. Vignaux F., Vivier E,, Malissen В., Depraetere K, Nagata S. and Golstein P. TCR/CD3 coupling to Fas-based cytotoxicity // J. Exp. Med. -1995. Vol.181, №2.- P. 781-786.

249. Wanka H., Kloting I., Kuttler B. NK-cells and macrophages influence T-helper lymphocyte mediated B-cell destruction in BB rats // Diabetologia.- 2001.-Vol. 44.-Suppl.l. -P. 150.

250. Wesselberg S., Janssen O., Kabelitz D. Induction of activation-driven death (apopotosis) in activated but not resting peripheral blood T cells //J. Immunol.- 1993.-Vol.150.-P.4338-4345.

251. Williams M.S., Henkart P.A. Apoptotic cell death induced by intracellular proteolysis //J. Immunol.- 1994.- Vol.153, N9.- P.4247-4255.

252. Wyllie A.H. Apoptosis (the Frank Rose Memorial lecture) // Brit. J. Cancer.- 1993.- Vol.67.- P.205-208.

253. Yoon J.W., Jun H.S., Santamaria P. Cellular and molecular mechanisms for the initiation and progression of beta cell destruction resulting from the collaboration between macrophages and T cells // Autoimmunity.- 1998.- Vol.27, №2,- P. 109-122.

254. Yoon J.W., Jun H.S. Cellular and molecular roles of beta cell autoantigens, macrophages and T cells in the pathogenesis of aautoimmune diabetes //Arch. Pharm. Res.- 1999.- Vol.22, №5.- P.437-447.

255. Zamaklar M., Jotic A., Lalic K. et al. Relation between course of disease in type 1 diabetes and islet cell antibodies // Ann. N. Y. Acad. Sci.-2002.- Vol. 958, №.4.- P.251-253.

256. Zheng L., Fisher G., Miller R.E. et al. Induction of apoptosis in mature T cells by tumor necrosis factor // Nature. 1995. - Vol. 377. - P. 348-351.

257. Zimmet P.Z. Diabetes epidemiology as a tool to trigger diabetes research and care // Diabetologia. 1999. - Vol. 42. - P. 499 - 518.