Исследование мутаций leg-arista-wing complex, нарушающих экспрессию фактора транскрипции TRF2 в эмбриогенезе Drosophila melanogaster тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.05, кандидат биологических наук Бурдина, Наталья Владимировна

• Бурдина, Наталья Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Бурдина, Наталья Владимировна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Эмбриональное развитие дрозофилы.

1.2. Генетический контроль эмбрионального развития дрозофилы.

1.2.1. Формирование вентральной борозды.

1.2.2. Удлинение и сокращение зародышевой полоски.

1.2.3. Спинное закрытие.

1.2.4. Развитие трахеи.

1.3. Роль поляризации эпителиальных клеток в морфогенетическом движении.

1.3.1. Гены, определяющие план строения организма вдоль переднезадний оси, контролируют поляризованное поведение клетки.

1.4. Характеристика гена leg-arista-wing complex.

1.5. Фактор базовой транскрипции TRF2.

Глава 2. Материалы и методы

2.1. Методы содержания дрозофилы и манипулирования с ней.

2.2. Генетические методы.

2.3. Флуоресцентная микроскопия и фотографирование.

2.4. Молекулярные методы.

2.5. Получение трансгенных конструкций.

2.6. Получение трансгенных линий D. melanogaster.

Глава 3. Результаты и обсуждение

3.1. Определение стадии летальности мутантов в линиях, содержащих lawc-ашели.

3.2. Анализ препаратов кутикулы погибших эмбрионов из линий с мутациями, нарушающими экспрессию укороченной изоформы белка TRF2.

3.3. Анализ препаратов кутикулы погибших эмбрионов из линий с мутациями, нарушающими экспрессию полноразмерной изоформы белка TRF2.

3.4. Анализ препаратов кутикулы погибших эмбрионов линий с мутациями, нарушающими экспрессию N-концевого домена белка TRF2.

3.5. Исследование материнского эффекта lawdTrfl.

3.6. Исследование молекулярной природы аллелей гена Iawc/Trf2.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование мутаций leg-arista-wing complex, нарушающих экспрессию фактора транскрипции TRF2 в эмбриогенезе Drosophila melanogaster»

Другим морфогенетическим событием эмбриогенеза дрозофилы является инвагинация мезодермы в вентральной борозде (Pilot, Lecuit, 2005). Во время гаструляции у части вентральных мезодермальных прекурсорных клеток происходит высоко скоординированное сокращение (сжимание) апикальной поверхности. Это событие способствует сначала инвагинации, а затем и формированию трубки, состоящей из клеток вентральной борозды. У эмбриона мыши смыкание нервной трубки зеркально отражает формирование вентральной борозды дрозофилы. Эти факты позволяют предположить, что молекулярные программы, лежащие в основе таких событий, как спинное закрытие и формирование вентральной борозды, консервативны и повторно использовались в эволюции.

Сейчас хорошо описаны отдельные изменения формы клеток, свойственные каждому морфогенетическому процессу, однако, недостаточно изучена роль конкретных факторов транскрипции, активирующих экспрессию регуляторов морфогенеза. Эти трудности часто связаны с отсутствием удобных для исследования мутаций этих генов.

Недавно было показано, что гомолог гена человека, кодирующего альтернативный фактор базовой транскрипции ТВР (TATA-box Binding Protein) Related Factor 2 (TRF2), у дрозофилы проявляет заметную специфичность и может контролировать определённый набор генов, участвующих в развитии. Исследовать in vivo функции этого гена помогло предварительное открытие многочисленных видимых и летальных мутаций дрозофилы, названных law с (leg-arista-wing complex), локализованных на достаточном расстоянии от его открытой рамки считывания, однако, основательно снижающих его экспрессию. Фенотипическое проявление этих мутаций достаточно чётко указывает на участие комплекса Iawc/Trf2 в сигнальных путях, контролирующих морфогенез на всех этапах развития дрозофилы.

Последние исследования показали, что кодирующий район мРНК Iawc/Trf2 дрозофилы содержит дополнительный альтернативный сайт инициации трансляции, благодаря которому с одной мРНК синтезируются две изоформы белка (полноразмерная и укороченная), отличающиеся N-концевыми последовательностями. Было показано, что 11 летальных мутаций, локализованных в 5'-нетранслируемом районе lawc/Trfl, нарушают экспрессию эволюционно-консервативной укороченной изоформы TRF2. Кроме того, в нашей лаборатории были изолированы летальные мутации lawc, нарушающие экспрессию только полноразмерной изоформы TRF2, либо только её эволюционно-вариабельного N-концевого домена. Однако их влияние на развитие Drosophila не исследовалось.

Цель и задачи исследования. Основная цель работы состояла в изучении у D. melanogaster особенностей эмбриогенеза мутантов leg-arista-wing complex, с нарушенной экспрессией фактора транскрипции TRF2.

В работе были поставлены следующие задачи:

1) определить стадии летальности мутантов в линиях с различными lawc- аллелями;

2) провести морфологический анализ кутикулы погибших эмбрионов с нарушенной экспрессией: а/ эволюционно-консервативной укороченной изоформы TRF2; б/ полноразмерной изоформы TRF2; в/ эволюционно-вариабельного N-концевого района полноразмерной изоформы TRF2;

3) исследовать материнский эффект гена Iawc/Trf2 на эмбриогенез;

4) определить особенности сегментации и формирования вентральной борозды и периферической нервной системы у мутантных эмбрионов с помощью иммунофлуоресцентного окрашивания;

5) определить молекулярную природу мутации lawcf', двух её т EF520 летальных производных, и летальной мутации lawc методом полимеразной цепной реакции и секвенирования районов открытой рамки считывания, кодирующей белок TRF2.

Научная новизна и практическая ценность работы.

Ген leg-aristae-wing complex/TBP related factor 2 (lawc/Tr/2), кодирующий фактор базовой транскрипции дрозофилы, гомологичный фактору базовой транскрипции человека, продуцирует две изоформы белка -полноразмерную и укороченную. Впервые было показано, что эмбрионы с пониженной экспрессией каждого из его продуктов погибают из-за повреждений, вызванных аномалиями в морфогенетических событиях, схожих с процессами ранозаживления и формирования нервной трубки у позвоночных животных. Впервые было показано, что эволюционно вариабельный N-концевой домен полноразмерной изоформы TRF2 обладает самостоятельной функцией в эмбриогенезе, контролирующей миграцию и слияние трахейных ветвей при формировании дыхательной системы зародыша. Впервые были идентифицированы и молекулярно исследованы четыре мутации, нарушающие кодирующий район гена Iawc/Trf2. Были получены новые данные, указывающие на специфическое участие полноразмерной изоформы в формировании нервной системы эмбриона. Исследование материнского эффекта гена Iawc/Trf2 показало нарушение синхронности первых делений-дроблений в эмбриогенезе дрозофилы. Таким образом, несмотря на то, что продуктом lawdTrfl является один из трёх известных на данный момент у дрозофилы факторов базовой транскрипции, нарушение его экспрессии вызывает хотя и сильные, но весьма специфические дефекты. В основном все они связаны с миграцией и движением эпителиальных клеток, в основе которых лежит скоординированное изменение их формы и размера. Выяснение того, как взаимодействуют морфогенетические регуляторы, и в частности эволюционно консервативные факторы транскрипции, к которым относится и TRF2, поможет понять процесс формообразования органов и тканей. Материалы работы используются как демонстрационный материал при чтении лекций для студентов кафедры эмбриологии биологического факультета МГУ им. Ломоносова.

Апробация работы. Результаты работы докладывались на ежегодных конференциях молодых ученых ИБР РАН (Москва, 2006; 2007; 2008), на международном семинаре «Генетика репродукции насекомых и её практическое применение» (Москва, 2006), на всероссийской медико-биологической научной конференции молодых учёных «Фундаментальная наука и клиническая медицина» (Санкт-Петербург, 2007), на международной молодёжной научно-методической конференции «Проблемы молекулярной и клеточной биологии» (Томск, 2007) и на 47-й, 49-й и 50-й ежегодных исследовательских конференциях по дрозофиле (Хьюстон, 2006; Сан-Диего, 2008; Чикаго, 2009).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 печатных работ, из них статей в журналах, соответствующих Перечню ВАК — 2, тезисов докладов и материалов конференций — 10.

Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 112 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов и обсуждения, заключения, выводов, списка цитируемой литературы (114 источников) и приложения. Содержит 25 рисунков и 7 таблиц.

Заключение диссертации по теме «Биология развития, эмбриология», Бурдина, Наталья Владимировна

Выводы

1. В линиях со сниженной экспрессией любой из двух изоформ TRF2 возникает гибель особей на эмбриональной стадии развития. Нарушение экспрессии лишь эволюционно-вариабельного N-концевого участка полноразмерной изоформы TRF2 сдвигает время гибели особей на более поздние стадии развития.

2. Снижение уровня экспрессии любой из изоформ TRF2 нарушает дорсо-вентральную полярность эмбрионов. Нарушение замыкания вентральной борозды в трубку у мутантов вызвано отсутствием сжимания апикальной поверхности ее клеток.

3. Снижение уровня экспрессии полноразмерной изоформы вызывает гипертрофию периферической нервной системы эмбриона.

4. Эволюционно-вариабельный домен TRF2 необходим на финальных этапах формирования дыхательной системы эмбриона во время слияния трахейных ветвей.

5. Снижение уровня экспрессии TRF2 в оогенезе родительских самок вызывает материнский эффект, приводящий к нарушению синхронности первых делений ядер эмбрионального синцития у их потомков.

6. Молекулярное исследование четырех мутантных линий выявило делеции внутри кодирующей белок последовательности гена lawdTrfl.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В данной работе впервые были охарактеризованы летальные мутации гена Iawc/Trf2 у D.melanogaster. Мы показали, что гибель особей наступает преимущественно на эмбриональной стадии развития. У дрозофилы в отличие от позвоночных животных и человека белок TRF2 представлен двумя изоформами. Более того, нокаут гена Trf2 у мыши не приводит к гибели особей и ограничивается лишь стерильностью самцов. Однако у позвоночных животных недавно обнаружен ген Тг/З, который, как оказалось, экспрессируется узкоспецифично: в ооцитах и на ранней эмбриональной стадии развития (Gazdag et al., 2007). У дрозофилы известны мутации гена Iawc/Trf2, снижающие фертильность самок, связанную с нарушением созревания ооцита (Копытова и др, 2005). Таким образом, можно предположить, что по влиянию на развитие белок TRF2 дрозофилы ближе к TRF3 позвоночных.

Исследуя фенотип погибших эмбрионов, и анализируя полученные ранее генетические данные, можно заключить, что небольшое нарушение концентрации любой из изоформ TRF2 приводит к неправильному формированию вентральной борозды. Этот процесс, очевидно, наиболее чувствителен к колебаниям уровня экспрессии гена lawc/Trfl. Более сильные аллели приводят к нарушениям сокращения зародышевой полоски и спинного закрытия, возможно, контролируя сигнальный путь JNK. Экспрессия полноразмерной изоформы специфически контролирует нейрогенез, возможно, через активацию сигнального пути Notch. Особой функцией в эмбриогенезе обладает и N-концевой отдел полноразмерной изоформы TRF2, которая очевидно, необходима для миграции и слияния трахейных ветвей при формировании дыхательной системы зародыша. Материнский эффект этого гена приводит к асинхронным делениям ядер эмбрионального синцития. Таким образом, несмотря на то, что продуктом lawc!Trf2 является один из трёх известных на данный момент у дрозофилы факторов базовой транскрипции, нарушение его экспрессии вызывает хотя и сильные, но весьма специфические дефекты. В основном все они связаны с миграцией и движением эпителиальных клеток, в основе которых лежит скоординированное изменение их формы и размера. Хотя отдельные изменения формы клеток, свойственные каждому процессу, хорошо описаны, однако, как это происходит механистически, мало понятно. Изменение формы клеток зависит от актина и миозина, а то, какую форму примет клетка зависит от регуляторных белков цитоскелета. Выяснение того, как взаимодействуют морфогенетические регуляторы, и в частности эволюционно консервативные факторы транскрипции, к каким относится TRF2, поможет понять процесс формообразования органов и тканей.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Бурдина, Наталья Владимировна, 2010 год

1. Жимулев И.Ф. Общая и молекурная генетика // Издательство Новосибирского Университета. Сибирское Университетское Издательство. Новосибирск 2002.

2. Иванова-Казас О.М., Кричинская Е.Б. Курс сравнительной эмбриологии беспозвоночных животных // Издательство Ленинградского университета. Ленинград. 1988. С.352.

3. Корочкин Л.И. Биология индивидуального развития // Издательство Московского университета. Москва. 1999.

4. Копытова Д.В., Краснов А.Н., Симонова О.Б. и др. Изучение гена lawc-trf2 Drosophila melanogaster и его белкового продукта // ДАН. 2005. Т.405. №1. С.125-127.

5. Модестова Е.А., Воронцова Ю.Е.,. Корочкин Л.И. и др. Получение летальных мутаций гена leg-arista-wing complex у D. melanogaster II ДАН. 2005. Т. 403, №4. С. 564-565.

6. Петрук С.Ф., Джагаева И.В., Солдатов А.В. и др. Клонирование гена гена leg-arista-wing complex (lawc) и анализ его мутантных производных у дрозофилы. // Генетика. 1998, 34, №3, С. 446-448.

7. Полуэктова Е.В., Митрофанов В.Г., Бурыченко Г.М. и др. Дрозофила-Drosophila II Объекты биологии развития // Изд-во «Наука». Москва. 1975.

8. Симонова О.Б., Кузин Б.А., Георгиев П.Г. и др. Новая регуляторная мутация Drosophila melanogaster II Генетика. 1992. № 2. Т.28. С. 164-167.

9. Симонова О.Б. Новый транс-регуляторный локус дрозофилы // Генетика. 2000. Т.36. N11. С. 1464 1474.

10. Слезингер М.С., Кузин Б.А. NO-синтаза участвует в регуляции поляризации клеток и их движения в морфогенезе Drosophila // Онтогенез. 2009. Т.40. №1. С.40-47.

11. Adler P.N. Planar signaling and morphogenesis in Drosophila // Devel.Cell. 2002. V.2. P.525-535.

12. Ashburner M, Drosophila. A laboratory handbook. // Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989 a.

13. Ashburner M., Drosophila. A laboratory manual. // Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989 b.

14. Axelrod J.D. Unipolar membrane association of Dishevelled mediates Frizzled planar cell polarity signaling// Genes Dev.2001.V.15. P.l 182-1187.

15. Baum B. and Perrimon N. Spatial control of the actin cytoskeleton in Drosophila epithelial cells //Nat. Cell Biol. 2001. V.3. P.883 -890.

16. BastockR., Strutt H.and Strutt D. Strabismus is asymmetrically localised and binds to Prickle and Dishevelled during Drosophila planar polarity patterning //Development. 2003. V.130. P.3007-3014.

17. Blankenship J.Т., Backovic S., Sanny J.S.P., et al. Multicellular rosette formation links planar cell polarity to tissue morphogenesis // Dev. Cell. 2006. V.ll.P.459-470.

18. Brouns M. R., Matheson S. F., Ни К. О., et al. The adhesion signaling molecule pi90 RhoGAP is required for morphogenetic processes in neural development//Development. 2000. V.127. P.4891-4903.

19. Campos-Ortega J.A. and Hartenstein V. In: The embryonic development of Drosophila melanogaster IУ Springer-Verlag. Berlin. 1985.

20. Ciruna В., Jenny A., Lee D. et al. Planar cell polarity signaling couples cell division and morphogenesis neurulation // Nature. 2006. V. 439. P. 220-224.

21. Colas J.F., Launay J.M., Kellermann O., et al. Drosophila 5-HT2 serotonin receptor: coexpression with fushi-tarazu during segmentation // Proc Natl Acad Sci USA. 1995. V.92. P. 5441-5445.

22. Colas J.F., Launay J-M, Maroteaux L. Maternal and zygotic control of serotonin biosynthesis are both necessary for Drosophila germband extension // Mech. Dev. 1999a. V.87. P.67-76.

23. Colas J.F, Launay J-M, Vonesch J-L, et al. Serotonin synchronises convergent extension of ectoderm with morphogenetic gastrulation movements in Drosophila // Mech Dev 1999b. V. 87. P.77-91.

24. Costa M, Wilson E. Т. and Wieschaus E. A putative cell signal encoded by the folded gastrulation gene coordinates cell shape changes during Drosophila gastrulation // Cell. 1994. V. 76. P. 1075-1089.

25. Dantonel J.C., Quintin S., Lakatos L., et al .TBP-like factor is required fpr embryonic RNA polymerase II transcription in C. elegans // Mol. Cell. 2000. V. 6. P. 715-722.

26. Das G., Jenny A., Klein T.J., et al. Diego interacts with Prickle and Strabismus/Van Gogh to localize planar cell polarity complexes I I Development. 2004. V.131. P.4467-4476.

27. Dawes-Hoang R.E., Parmor K.M., Christiansen A.E. et al. Folded gastrulation, cell shape change and the control of myosin localization // Development 2005. V.132. P. 4165-4178.

28. Fehon R.G., Dawson I.A. and Artavanis-Tsakonas S. A. Drosophila homologue of membrane-skeleton protein 4.1 is associated with septate junctions and is encoded by the coracle gene // Development 1994. V.120. P.545-557.

29. Fischer E., Legue E., Doyen A. et al. Defective planar cell polarity in polycystic kidney disease //Nat. Genet. 2006. V.38. P. 21-23.

30. Fox D.T. and Peifer M. Abelson kinase (Abl) and RhoGEF2 regulate actin organization during cell constriction in Drosophila // Development 2007. V.134. P.567-578.

31. Foe V.E., Alberts B.M. Studies of nuclear and cytoplasmic behaviour during the five mitotic cycles that precede gastrulation in Drosophila embryogenesis //J. Cell Sci. 1983. V.61. P.31-70.

32. Gertler F. В., Comer A. R., Juang J. L., et al. enabled, a dosage-sensitive suppressor of mutations in the Drosophila Abl tyrosine kinase, encodes an

33. Abl substrate with SH3 domain-binding properties I I Genes Dev. 1995. V.9. P.521-533.

34. Ghabrial A.S., Krasnow M.A. Social interactions among epithelial cells during tracheal branching morphogenesis //Nature. 2006. V.441. P.746-749.

35. Glise В., Bourbon H. and Noselli S. hemipterous encodes a novel Drosophila MAP kinase kinase, required for epithelial cell sheet movement // Cell. 1995. V.83.P.451-461.

36. Glise В., Nosell S. Coupling of Jun amino-terminal kinase and Decapentaplegic signaling pathways in Drosophila morphogenesis // Genes Dev. 1997. V.l 1. P.1738-1747.

37. Goldstein E.S., Treadway S.L., Stephenson A.E., et al. A genetic analysis of the cytological region 46C-F containing the Drosophila melanogaster homolog of the jun proto-oncogene // Molec. Genet. Genomics. 2001. V.266. P.695-700.

38. Grevengoed E.E., Loureiro J.J., Jesse T.L. et al. Abelson kinase regulates epithelial morphogenesis in Drosophila // J. Cell Biol. 2001.V.l55. P. 11851198.

39. Gubb D., Garcia-Bellido A. A genetic analysis of the determination of cuticular polarity during development in Drosophila melanogaster //J. Embryol. Exp. Morphol. 1982. V.62. P. 37-57.

40. Hacker U. and Perrimon N. DRhoGEF2 encodes a member of the Dbl family of oncogenes and controls cell shape changes during gastrulation in Drosophila// Genes Dev. 1998. V.12. P.274-284.

41. Hartenstein V. Atlas of Drosophila development // Cold Spring Harbor Laboratory Press. 1993.

42. Hochheimer A., Zhou S., Zheng S., Holmes MC, Tjian R. TRF2 associares with DREF and directs promoter-selective gene expression in Drosophila I I Nature. 2002. V.420. P.439-445.

43. Hochheimer A. and Tijan R. Diversified transcription initiation complexes expand promoter selectivity and tissuespecific gene expression // Genes & Dev. 2003. V. 17. P.1309-1320.

44. Hyodo-Miura, Yamamoto T.S., Hyodo A.C., et al. XGAP, an ArfGAP, is required for polarized localization of PAR proteins and cell polarity in Xenopus gastrulation// Dev. Cell. 2006. V.l 1. P.69-79.

45. Irvine K., Wieschaus E. Cell intercalation during Drosophila germband extension and its regulation by pair-rule segmentation genes // Development. 1994. V.120. P. 827-841.

46. Jiang L., Crews S. T. Transcriptional Specificity of Drosophila Dysfusion and the Control of Tracheal Fusion Cell Gene Expression // J. Biol. Chem. 2007. V.282. P.28659-28668.

47. Jones C., Chen P. Planar cell polarity signaling in vertebrates // BioEssays. 2007. V.29. P.120-132.

48. Jiirgens G, Wieschaus E, Niisslein-Volhard C. et al. Mutations affecting the pattern of the larval cuticle in Drosophila melanogaster: II. Zygotic loci on the third chromosome // Roux's Arch Dev Biol. 1984. V.193. P.283-295.

49. Kaltschmidt J.A., Lawrence N., Morel V., et al. Planar polarity and actin dynamics in the epidermis of Drosophila II Nature Cell Biology. 2002. V.4.P. 937-944.

50. Keller R., Davidson L., Edlund A., et al. Mechanisms of convergence and extension by cell intercalation // Philos. Trans. R. Soc. Lond. В Biol. Sci. 2002. V. 355. P.897-922.

51. Knust E. Drosophila morphogenesis: Follow-my-leader in epithelia // Curr Biol. 1996. V.6. P.379-381.

52. Kohn W.D., Kay C.M., Hodges R.S. Salt effects on protein stability: two-stranded alpha-helical coiled-coils containing inter- or intrahelical ion pairs I I J Mol Biol. 1997. V. 267 № 4 P: 1039-1052.

53. Koleske A. J., Gifford A.M., Scott M.L., et al. Essential roles for the Abl and Arg tyrosine kinases in neurulation //Neuron. 1998. V.21. P.1259-1272.

54. Kuzin В., Roberts /., Peunova N. et al. Nitric oxide regulates cell proliferation during Drosophila development//Cell. 1996. V.87. P.639-649.

55. Kuzin В., Regulski M., Stasiv Y. Nitric oxide interacts with retinoblastoma pathway to control eye development in Drosophila // Curr. Biol. 2000. V.10. P.459-462.

56. Lanier L.M. and Gertler F.B. From Abl to actin: Abl tyrosine kinase and associated proteins in growth cone motility // Curr. Opin. Neurobiol. 2000. V.10.P.80-87.

57. Lawrence P.A., Casal J., Struhl G. Towards a model of the organisation of planar polarity and pattern in the Drosophila abdomen // Development 2002. V.129. P.2749—2760.

58. Lawrence P.A., Sanson B. and Vincent P. Compartments, wingless and engrailed: patterning the ventral epidermis of Drosophila embryos // Development 1996. V.122 (12). P.4095-4103.

59. Lewis E. B. Homeosis: the first 100 years Trends in Genetics // Nature. 1994. V.10. P.P.341-343.

60. Lindsley, D.M., Zimm, G., The genome of Drosophila melanogaster II NY: Academic Press, Inc. 1992.

61. Logan C.Y., Nusse R. The Wnt signaling pathway in development and disease II Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 2004. V.20. P.781-810.

62. Luschnig S., Moussian В., Krauss J., et al. An Fi genetic screen for maternal-effect mutations affecting embryonic pattern formation in Drosophila melanogaster // Genetics. 2004. V.167. P.325-342.

63. MacKrell A.J., Blumberg В., Haynes S.R., et al. The lethal myospheroid gene of Drosophila encodes a membrane protein homologous to vertebrate integrin p subunits // Proc Natl Acad Sci USA. 1988. V.85. P.2633-2637.

64. Marshall C.J. MAP kinase kinase kinase, MAP kinase kinase and MAP kinase // Curr Opin Genet Dev. 1994. V.4. P.82-89.

65. Martin D., Zusman S., and Li X., et al. Wing blister, a new Drosophila laminin alpha chain required for cell adhesion and migration during embryonic and imaginal development // J. Cell Biol. 1999. V.145. P.191-201.

66. Martin P. and Nobes C.D. An early molecular component of the wound healing process in rat embryos: induction of c-fos protein in cells at the epidermal wound margin // Mech Dev. 1992. V.38. P.209-215.

67. Martin P., Dickson M.C., Milan F.A. et al. Rapid induction and clearance of TGFP-l is an early response to wounding in the mouse embryo // Dev Genet. 1993. V. 14. P.225—238.

68. Martin P. Wound healing aiming for perfect skin regeneration // Science.1997. У.216. P.75-81.

69. Miller J.R., Rowning B.A., Larabell C.A., et al. Establishment of the dorsal-ventral axis in Xenopus embryos coincides with the dorsal enrichment of dishevelled that is dependent on cortical rotation // J. Cell Biol. 1999. V.146. P. 427-437.

70. Mlodzik M. Planar cell polarization: do the same mechanisms regulate Drosophila tissue polarity and vertebrate gastrulation? // Trends Genet. 2002. V.18. P.564-571.

71. Morize P., Christiansen A.E., Costa M., et al. Hyperactivation of the folded gastrulation pathway induces specific cell shape changes // Development1998. V.125.P.589 -597.

72. Nazario-Yepiz N., Riecqo-Escovar Juan R. Characterization of a new dorsal closure gene piragua (pra) in Drosophila melanogaster // 46th Annual Drosophila Research Conference. San Diego (USA). 2005. P. 173.

73. Nelson W.J. Tube morphogenesis: closure, but many openings remain // Trends Cell Biol. 2003. V.13. P.615-621.

74. Nikolaidou К. К. and Barrett К. A Rho GTPase signaling pathway is used reiteratively in epithelial folding and potentially selects the outcome of Rho activation // Curr. Biol. 2004. V.14. P. 1822-1826.

75. Ninomiya H., Elinson R.P., Winklbauer R. Antero-posterior tissue polarity links mesoderm convergent extension to axial patterning // Nature. 2004. V.430. P.364-367.

76. Nobes C.D. and Hall A. Rho GTPases Control Polarity, Protrusion, and Adhesion during Cell Movement I IJ Cell Biol. 1999. V.144. P. 1235-1244.

77. Nusslein-Volhard C., Wieschaus E. Mutations affecting segment number and polarity in Drosophila// Nature. 1980. V.287(5785). P. 795-801.

78. Oda H., Tsukita S., Takeichi M. Dynamic behavior of the cadherin-based cell-cell adhesion system during Drosophila gastrulation // Dev Biol. 1998. V.203. P.435-450.

79. Parks S. and Wieschaus E. The Drosophila gastrulation gene concertina encodes a G alpha-like protein // Cell 1991. V. 64. P.447 -458.

80. Pastor-Pareja J.C., Grawe F., Martin-Blanco E., et al. Invasive cell behavior during Drosophila imaginal disc eversion is mediated by the JNK signaling cascade // Dev. Cell. 2004. V.7. P.387-399.

81. Perrimon N., Mahowald A. Multiple functions of segment polarity genes in Drosophila II Dev. Biol. 1987. V.l 19. P.587-600.

82. Perkins K.K, Admon A., Patel N. et al. The Drosophila fos-related AP-1 protein is a developmentally regulated transcription factor // Genes Dev. 1990. V.4. P. 822-834.

83. PeunovaN., Sheinker V., Ravi K., Enikolopov G. Nitric oxide coordinates cell proliferation and cell movements during early development of Xenopus И Cell Cycle. 2007. V.6. P. 3132-3144.

84. Pilot F. andLecuit T. Compartmentalized morphogenesis in epithelia: from cell to tissue shape // Dev. Dyn. 2005. V. 232. P.685 -694.

85. Rabenstein M. D, Zhou S, Lis J. Т., Tjian R. TATA box-binding protein (TBP)-related factor 2 (TRF2), a third member of the TBP family. // Proc Natl Acad Sci USA. 1999. V. 96 № 9. P. 4791-4796.

86. Riesgo-Escovar J.R. and Hafen E. Drosophila Jun kinase regulates expression of decapentaplegic via the ETS-domain protein Aop and the AP-1 transcription factor, DJun, during dorsal closure // Genes Dev. 1997. V.ll. P. 1717—1727.

87. Ring J.M. and Martinez-Arias A. puckered a gene involved in position-specific cell differentiation in the dorsal epidermis of the Drosophila larva // Development 1993. V.l 19. P.251-259.

88. Rogers S.L., Wiedemann U., Hacker U., et al. Drosophila RhoGEF2 associates with microtubule plus ends in an ЕВ 1-dependent manner // Curr. Biol. 2004. V.14. P.1827 -1833.

89. Sanchez L., Thieffy D. Segmenting the fly embrio: logical analysis of pair-rule cross-regulatory module // J Theor Biol. 2003. V.224 №4. PP.517-537.

90. Sauer F. and Tjian R. Mechanisms of transcriptional activation: differences and similarities between yeast, Drosophila, and man // Current Opinion in Genetics & Development. 1997. V.7. PP. 176-181.

91. SchockF., Perrimon N. Cellular processes associated with germ band retraction in Drosophila//Dev. Biol. 2002. V.248. P.29-39.

92. SchockF., Perrimon N. Retraction of the Drosophila germ band requires cell-matrix interaction // Genes & Development. 2003. V.l7. P.597-602.

93. Schoenwolf G.C., Alvarez I.S. Roles of neuroepithelial cell rearrangement and division in shaping of the avian neural plate // Development. 1989. V.l06. P. 427-439.

94. Scuderi A.B., LetsouA. Amnioserosal function in dorsal closure I 146th Annual Drosophila Research Conference. San Diego (USA).2005

95. Shimada M., Nakadai Т., Tamura T.A. TATA-binding protein-like protein (TLP/TRF2/TLF) negatively regulates cell cycle progression and is required for the stress-mediated G(2) checkpoint // Mo 1 Cell Biol. 2003. V. 23 P. 4106-4120.

96. Shimada Y., Yonemura S., Ohkura H., et al. Polarized transport of Frizzled along the planar microtubule arrays in Drosophila wing epithelium // Dev. Cell. 2006. V.10. P. 209-222.

97. Sonnenblick B. P. The early embryology of Drosophila melanogaster .In: Biology of Drosophila // N. Y. John Wiley and Sons. 1950. P.535-590.

98. Stasiv Y, Regulski M., Kuzin B. et al. The Drosophila nitricoxide synthasa gene (dNOS) encodes a family of proteins that can modulate NOS activity by acting as dominant negative regulators // J. Biol. Chem. 2001. V.276. P. 42241-42251.

99. Stasiv Y, Kuzin В., Regulski M. et al. Regulation of maltimers via truncated isoforms: a novel mechanism to control nitricoxide signaling // Genes Devel. 2004. V.l8. P.1812-1823.

100. Strutt D.I. The asymmetric subcellular localisation of components of the planar polarity pathway // Semin. Cell Dev. Biol. 2002. V.13. P.225-231.

101. Suzuki A., Ohno S. The PAR-aPKC system: lessons in polarity // J. Cell Sci. 2006. V.l 19. P.979-987.

102. Teichmann M., Wang Z, Martinez E. et al. Human TATA-binding protein-related factor-2 (hTRF2) stably associates with hTFIIA in HeLa cells // Proc Natl Acad Sci USA. 1999 V. 96. P. 13720-5.

103. Tree D.R., Shulman J.M., Rousset R., et al. Prickle mediates feedback amplification to generate asymmetric planar cell polarity signaling // Cell. 2002. V.109.P. 371-381.

104. Turner F.R., Mahowald A.P. Scanning electron microscopy of Drosophila melanogaster embryogenesis. II. Gastrulation and segmentation I I Dev Biol. 1977. V.57. P.403-416.

105. Usui Т., Shima Y., Shimada Y., et al. Flamingo, a seven-pass transmembrane cadherin, regulates planar cell polarity under the control of Frizzled // Cell. 1988. V.98. P.585-595.

106. Wong L.L., Adler P.N. Tissue polarity genes of Drosophila regulate the subcellular location for prehair initiation in pupal wing cells //J. Cell Biol. 1993. V. 123. P. 209-221.

107. Young P.E., Richman A.M., Ketchum A.S., et al. Morphogenesis in Drosophila requires nonmuscle myosin heavy chain function // Genes Dev. 1993. V.7. P. 29-41.

108. Zallen J.A, Wieschaus E. Patterned gene expression directs bipolar planar polarity in Drosophila //Dev Cell. 2004. V. 6. P.343-355.