Исследование морфологических и функциональных особенностей алло- и ксеногенных нейротрансплантантов при пересадках в головной и спинной мозг тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.23, кандидат биологических наук Воронов, Константин Александрович

• Воронов, Константин Александрович
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Воронов, Константин Александрович

2.2 fDvnna с введением эмбоиональных неовных клеток

I * » • I >

2.4 Группа с трансплантацией смеси эмбриональных нервных

2.5 Ксенотрансплантация крысиных нервных тканей взрослым мышам.

1 Толилпплитл! IMM □ гпииипй УПОГ ТХ j. i i /-и iv-n и mi t i iir i i-i \/i ir м н i\sv i iviuoi.' w

3.1 Исследование животных контрольной группы.

Ч '? АПППТПЯНГ.ППЯНТЯ1 ИЛИ R Г.П1ЛННПМ мпяг 7h — ■-•—Ip----' - ——I- - — ■ -.—

Q Q Tnrtl 1АП rifll ITfll Hirt líAnmiLIV 1/НЛХЛ1/ ПЛПАЛЛШПЛПМЛШ .Lililí. IЛ о i уапыташацил wivicoki пс^опил i\j ici vrv n>;ow(jvj/T\f^t¿nnvji'i iviuiu-iri vi эмбриональных нервных клеток дрозофилы в спинной мозг взрослых мышей.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование морфологических и функциональных особенностей алло- и ксеногенных нейротрансплантантов при пересадках в головной и спинной мозг»

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ. Трансплантации эмбриональных нервных тканей в мозг взрослого реципиента выполняются уже на протяжении столетия (Thompson, 1890; Ramon-Cueto et al., 2000). Важнейшей причиной растущего интереса к использованию трансплантаций в нейрохирургической практике явилось предположение о возможности коррекции заболеваний центральной нервной системы пересадками тканей эмбрионального мозга (Bjorklund, Stenevi, 1979; Bjorklund, Lindvall, 1999). К настоящему времени сформировались три основных хирургических нейротранс-плантационных направления. В первых операциях (Bjorklund, Stenevi, 1979) выполняли пересадки эмбриональных нервных клеток человека пациентам с некоторыми заболеваниями ЦНС, однако, эффективность этого подхода оказалась невелика. В другом случае осуществляли трансплантации смеси эмбриональных нервных тканей дрозофилы и человека (Савельев и др., 1994) для лечения болезни Паркинсона. У пациентов наблюдался выраженный терапевтический эффект после операции. В последнее время в США начаты трансплантации эмбриональных нервных клеток свиньи неврологическим пациентам. Однако, терапевтическая эффективность этих операций не отличается от таковой при трансплантации фетальных нервных тканей человека (Isacson, Breakefietd, 1997). Несмотря на разнообразие операций, сравнений эффективности пересадок различных типов тканей не проводилось. Исследование такого рода актуально как для выявления различий гистогенетических реакций мозга реципиента и ткани трансплантата, так и для анализа отдаленных последствий пересадок.

Поскольку конечной целью экспериментальных трансплантаций является разработка новых подходов к лечению заболеваний ЦНС человека, то в качестве экспериментальных животных использовались, в основном, млекопитающие и, с целью уменьшить риск отторжения пересаженных нервных клеток, практиковались аллотрансплантации, т.е. пересадки между особями одного вида (Александрова, 1998; Журавлёва, 1999; Ермакова, 1998; Taylor et al., 1991). Эти эксперименты показывают, что трансплантаты эффективно выживают и функционируют после операции. Однако, время наблюдения в редких случаях превышало 6 м-цев. С другой стороны, существуют данные и по ксенотрансплантациям нервной ткани (Honey, Shen, 1999; Jacoby et ah, 1999; van Home et al., 1990), в основном между представителями класса млекопитающих. При этом часто используется иммуносупрессия для повышения эффективности интеграции ксенотрансплантата в мозг реципиента (Honey et al., 1999; Jacoby et al., 1999). Пересадки же смеси клеток, полученных от животных разных видов, практически не исследовались (Савельев и ДР., 1994).

Таким образом, и в клинической практике, и в исследовательских программах сложилась ситуация, в которой выбор стратегии пересадок нервной ткани не ясен. Одни авторы предполагают, что в клинике наиболее эффективными будут аллотрансплантаты, другие считают, что необходимо искать новые подходы (Olson, 1990; Levivter, 1999), а именно: использовать для пересадки культуры клеток, генетически модифицированные клетки и межвидовые трансплантации - ксенотрансплантации. Преимущества различных как клинических, так и экспериментальных подходов к нейро-трансплантации сложно оценить из-за разнообразия нейрохирургических приемов и схем лабораторных экспериментов. Поэтому проведение операций по пересадке алло- и ксеногенной ткани и их смеси, выполненных по стандартной методике, является крайне актуальной задачей. Параллельная постановка контрольных экспериментов по введению мертвых тканей позволила бы отделить результаты собственно трансплантации от факта хирургического вмешательства в мозг.

Отсутствие экспериментальных работ, в которых проведено сравнение основных известных методов трансплантации и их отдаленных последствий делает настоящую работу актуальной как для фундаментальных, так и для клинических исследований.

ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Основная цель работы состояла в изучении морфофункциональных характеристик взаимодействия алло- и ксенотрансплантатов с ЦНС реципиента в течение длительного времени после нейрохирургических трансплантаций. В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Сравнить способность эмбриональных нервных клеток мыши, крысы и клеток нейрального зачатка А/о^с/?-мутантов дрозофилы выживать в мозге реципиентов;

2. Провести эксперименты по пересадке аллотрансплантатов тканей лобных долей переднего мозга и медиальных областей таламуса, гипоталамуса и крыши среднего мозга в головной и спинной мозг взрослых мышей;

3. Осуществить сравнительные эксперименты по пересадке нервной ткани дрозофилы и смеси алло- и ксеногенных тканей в мозг позвоночных животных для оценки их эффективности;

4. Разработать экспериментальную модель повреждения спинного мозга, осуществить различные типы трансплантаций нервной ткани и провести морфофункциональный анализ последствий экспериментальной травмы;

5. Сравнить степень дифференцировки клеток трансплантатов в мозге хозяина при длительном эксперименте, оценить интегрированность различных трансплантатов с мозгом реципиента и сравнить интенсивность васкуляризации тканей алло-, ксено- и смешанных трансплантатов. Изучить особенности образования глио-мезодермального рубца в различных экспериментальных группах;

6. Провести эксперименты по введению умерщвленных криодеетрукцией нервных клеток животным для определения влияния на мозг "ложных" операций;

7. Оценить морфологическую картину последствий трансплантации смешанных нервных тканей человеку.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЯ. Диссертация является законченной научно-исследовательской работой, содержащей новое решение актуальной научной задачи, состоящей в трансплантации различных видов эмбриональных нервных тканей в головной и спинной мозг взрослых реципиентов. Впервые проведено сравнение выживания алло- и ксенотрансплантатов различных видов, в том числе, содержащих клетки дрозофилы. Проведены сравнительные серии экспериментов с использованием единого лабораторного протокола, что позволило сопоставить эффективность приживления клеток при использовании трансплантатов различных видов.

Проведенное исследование позволило: доказать, что нервные клетки дрозофилы способны дифференцироваться и выживать в мозге млекопитающих, оперированных во взрослом состоянии и доживших до глубокой старости; доказать, что присутствие клеток дрозофилы в смешанном трансплантате способствует дифференцировке и выживанию эмбриональных клеток мыши в течение всего времени эксперимента, в то время как клетки аллотрансплантата практически полностью погибают. Этот эффект связан с хорошей васкуля-ризацией трансплантатов, содержащих нервные клетки дрозофилы; выяснить, что введение больших объемов суспензии нервных клеток и внесение фибробластов мозговых оболочек вызывает формирование плотного глио-мезодермального рубца, изолирующего трансплантат от мозга хозяина. Эта закономерность была характерна для всех групп животных; установить, что присутствие клеток дрозофилы в трансплантате подавляет образование глиального рубца; сравнить морфологическую и функциональную интеграцию различных трансплантатов в поврежденном спинном мозге реципиента; доказать способность эмбриональных нервных клеток дрозофилы пролиферировать, дифференцироваться и выживать в мозге амфибий в течение 2-х лет; впервые проведено гистологическое исследование трансплантатов эмбриональных нервных клеток человека и дрозофилы в мозге больных с инсультом и паркинсонизмом. Обнаружено сходство с морфологическими данными, полученными на животных. 9

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Полученные в настоящей работе данные расширяют наши представления о событиях, происходящих с трансплантированными нервными клетками в течение эксперимента, сравнимого по продолжительности со сроком жизни животного. Оцениваются результаты классических аллотрансплантаций, по сей день используемых в клинической практике, и оригинальных операций с использованием эмбриональных нервных клеток дрозофилы. Впервые выполнены подобные операции на спинном мозге.

Положительные результаты использования фетальных тканей дрозофилы в трансплантационной практике, полученные в экспериментах на животных, были подтверждены при исследовании уникального аутопсийного материала пациентов с заболеваниями ЦНС после трансплантации смеси фетальных тканей дрозофилы и человека. Это позволяет предложить использование нервных тканей дрозофилы в качестве специфического стимулятора при проведении нейротрансплантаций для коррекции заболеваний центральной нервной системы человека.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, эмбриология», Воронов, Константин Александрович

ВЫВОДЫ

1. Доказана возможность долгосрочной интеграции нервных систем позвоночных и беспозвоночных животных в течение всей жизни реципиента.

2. Клетки дрозофилы выживают в мозге шпорцевой лягушки в течение 2 лет, при этом сохраняют свойство вызывать дедифференцировку, васкуляризацию, направленный рост отростков и миграцию клеток мозга хозяина.

3. При пересадке взрослым мышам клеток дрозофилы было установлено, что живые клетки сохраняются на протяжении 11 м-цев, мигрируют на расстояние до 300 диаметров своего тела в мозг реципиента. В отличие от контрольной группы с введением умерщвленной ткани, наблюдается гиперваскуляризация и небольшая глиальная реакция на границе трансплантата.

4. Аллотрансплантация у мышей показала, что при большой длительности эксперимента значительная часть трансплантата погибает, а сохранившиеся клетки остаются в недифференцированном состоянии. Низкая степень васкуляризации, незначительное количество дифференцированных клеток и формирование глиального рубца ставят под сомнение использование аллотрансплантаций в клинической практике.

5. Трансплантация смеси эмбриональных клеток дрозофилы и нервных клеток новорожденных мышей показала, что при длительных экспериментах смешанный трансплантат приживается, васкуляризируется, реиннервируется нейронами хозяина и подавляет образование глиального рубца. При этом отсутствует четкая граница между трансплантатом и мозгом хозяина.

6. Исследование последствий аллотрансплантации через 11 месяцев после операции показало, что хотя имплантированные клетки и выживают в течение этого срока, они практически не интегрируются со спинным мозгом хозяина, не дифференцируются и частично погибают. Эти клетки не могут служить субстратом для восстановления нарушенных функций спинного мозга. Отсутствие дополнительной васкуляризации мозга затрудняет приживление и дифференцировку клеток трансплантата.

7. Трансплантаты, состоящие из смеси эмбриональных клеток дрозофилы и нервных клеток новорожденных мышей демонстрируют значительную степень интеграции с тканями спинного мозга хозяина и более высокую степень дифференцировки (в сравнении с аллотрансплантациями) нервных клеток мыши.

8. Сравнительный анализ экспериментальных повреждений спинного мозга показал, что у всех оперированных животных наблюдались те или иные нарушения спинномозговых функций. Наихудшие результаты получены при трансплантации мертвых и живых клеток дрозофилы и аллотрансплантациях. Наиболее удачные результаты поведенческих тестов были обнаружены в группе животных с трансплантацией смеси эмбриональных нервных клеток дрозофилы и клеток мозга новорожденных мышей. Это свидетельствует не только о высокой степени морфологической интеграции этого вида трансплантатов с мозгом хозяина, но и о восстановлении функциональных связей в поврежденных областях мозга.

9. Исследование двух случаев аутопсии головного мозга после пересадки смеси фетальной и ксеногенной ткани в мозг пациентов

106 с паркинсонизмом и инсультом показало, что в местах трансплантации обнаружен нейропиль, состоящий из нейронов дрозофилы и недифференцированных эмбриональных нервных клеток человека. По прошествии 7 недель в местах скопления клеток дрозофилы обнаруживается прорастание многочисленных кровеносных сосудов, появление дифференцированных нейронов и нейросекреторных клеток. В обоих случаях отсутствуют признаки формирования глио-мезодермального рубца.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Воронов, Константин Александрович, 2000 год

1. Александрова М.А. Дифференцировка эмбрионального неокортекса при трансплантации у крыс Бюллетень эксп. биол. и мед., 1998, том. 126, прил. 1, с. 88-92.

2. Александрова М.А. Механизмы дифференцировки нервной ткани и межклеточные взаимодействия при нейротрансплантации у млекопитающих - Автореферат, Москва, 1999.

3. Александрова М.А., Козлова E.H. Васкуляризация неокортикальных трансплантатов. - Трансплантация ткани мозга в биологии и медицине, «Наука», 1993, с. 88-93.

4. Глис П. Изучение регенерации коры мозга с применением имплантатов. - Регенерация центральной нервной системы, Москва, 1959, с. 75-86.

5. Грейвс Р. Мифы древней Греции - «Прогресс», 1992, с. 5.

6. Джерард Р. Оценка возможности регенерации центральной нервной системы у млекопитающих. - Регенерация ЦНС, Москва 1959, с. 178-189.

7. Ермакова И. В. Компенсация нарушенных поведенческих функций с помощью нейротрансплантации. - Бюллетень эксп. Биол. и мед., 1998, том. 126, прил. 1, с. 82-86.

8. Журавлёва З.Н. Ультраструктурное исследование пластичности клеточных элементов и межклеточных взаимодействий в трансплантатах нервной ткани Автореферат, Пущино, 1999.

9. Клемент К. Регенерация центральной нервной системы млекопитающих. Значение нейроглии и соеденительной ткани. -Регенерация ЦНС, Москва 1959, с. 113-122.

10. Литрел Дж. Восстановление функции у спинальных кошек, получавших пиромен. - Регенерация ЦНС, Москва 1959, с. 171178.

11. Лю Чань-нао. Ретроградная дегенерация после травмы центральной нервной системы у млекопитающих. - Регенерация ЦНС, Москва 1959, с. 67-75.

12. Матинян Л.А., Андреасян A.C. Ферментотерапия при органических повреждениях спинного мозга. - Ереван 1973.

13. Миронов Н.В., Шмырев В.И., Бугаев B.C., Миронов И.Н., Фесенко А.П. Комплексное лечение пациентов с паркинсонизмом с использованием живых фетальных клеток. - Бюллетень эксп. Биол. и мед., 1998, том. 126, прил. 1, с. 63-68.

14. Несмеянова Т.Н., Бразовская Ф.А., Арнаутова E.H. -Трансплантанты как стимуляторы регенерации. Механизмы компенсаторных приспособлений, Мосва «Наука» 1964, с. 115-123.

15. Несмеянова Т.Н., Бразовская Ф.А., Арнаутова E.H. Опыт стимуляции процесса регенерации проводящих путей перерезанного спинного мозга собаки. - Механизмы компенсаторных приспособлений, Мосва, 1964, с. 124-136.

16. Отелин В.А., Петрова Е.С. Строение длительно живущих трансплантатов эмбриональных закладок ЦНС крыс. Морфология, 1998, т. 113, № 2, с. 39-43.

17. Пермяков Н.К., Савельев C.B. Перспективы трансплантации ксеногенной нервной ткани в нейрохирургии. - Ж. Невр. и Псих, им С.С. Корсакова, 1998, т. 98, № 2, с. 59-61.

18. Петрова Е.С., Чумасов Е.И., Отелин В.А. Морфологическая оценка способности роста аксонов центральной нервной системыв периферическом нерве. Морф. И Патоморф., 1998, т. 125, № 2, с. 233-236.

19. Резников К.Ю. Пролиферация клеток мозга позвоночных в условиях нормального развития и при его травме. - Москва «Наука», 1981.

20. Сабурина И.Н. Изменение гематоэнцефалического барьера при трансплантации нервной ткани - Трансплантация ткани мозга в биологии и медицине, «Наука», 1993, с. 62-74.

21. Савельев C.B., Корочкин Л.И., Иванов А.И., Трнансплантация клеток дрозофилы в зародыши амфибий. - ДАН СССР, 1989, т. 305, № 5, с. 1239-1241.

22. Савельев C.B., Корочкин Л.И., Иванов А.И. и др. -Трансплантация нейральной закладки дрозофилы в нервную трубку зародышей амфибий. ДАН СССР, 1990, т. 313, № 6, с. 1491-1493.

23. Савельев C.B., Иванов А.И., Гулимова В.И. и др. Изенение поведения амфибий после трансплантации в мозг клеток нейральной закладки дрозофилы. - ДАН СССР, 1991, т. 316, № 3, с. 735-738.

24. Савельев C.B., Корочкин Л.И., Иванов А.И., Евгеньев Е.М., Бесова Н.В. Гулимова В.И. Трансплантация эмбриональных нервных клеток в мозг амфибий и млекопитающих. - Бюлл. Эксп. Биол. и Мед., 1994, № 4, с. 364-372.

25. Савельев C.B., Лебедев В.В., Войтына C.B., Корочкин Л.И., Молнар Е.М., Сухих Г.Т. Трансплантация фетальной и ксеногенной нервной ткани при больезни Паркинсона. - Бюлл. Эксп. Биол. и Мед., 1994, № 4, с. 369-372.

26. Скотт Д. Проведение возбуждения регенерировавшими нейронами центральной нервной системы. - Регенерация центральной нервной системы, Москва, 1959, с. 139-150.

27. Хэм А., Кормак Д. Гистология - «Мир», Москва, 1983, т. 1-5.

28. Фримен Л. Восстановление функции у крыс после повреждения спинного мозга. - Регенерация центральной нервной системы, Москва, 1959, с. 151-160.

29. Чемберс У. Регенерация центральной нервной системы у млекопитающих различного возраста. - Регенерация центральной нервной системы, Москва, 1959, с. 105-112.

30. Черкасова Л. В. Внутримозговые трансплантаты эмбриональной нервной ткани вызывают восстановление ультраструктуры дистрофированных после гипоксии нейронов взрослых крыс. - Онтогенез, 1992, т. 23, № 5, с. 534-541.

31. Яковлева Л.А. Процессы регенерации и репарации в спинном мозгу при травме. - Автореф. Канд. Дисс., 1952.

32. Akesson Е., Kjaeldgaard A., Seiger A. Human embryonic spinal cord grafts in adult rat spinal cord cavities: survival, growth and interactions with the host. Exp. Neurol., 1998, vol. 149, N 1, p. 262276.

33. Albrink W.S., Green H.S. Transplantation of tissue between zoological classes. Cancer. Res., 1953, vol. 13, p. 64-68.

34. Bankiewicz K.S., Plunkett R.J., Jacobowitz D.M., Kopin I.J., Oldfield E.H. Fetal nondofaminergic neural implants in parkinsonian primates. Histochemical and behavioral studies. J. Neurosurg., 1991, vol. 74, N 1, p. 97-104.

35. Barnard J.W., Carpenter W. Lack of regeneration in spinal cord of rat. J. Neurophysiol., 1950, vol.13, N 3, p.223-228.

36. Bjorklund A., Stenevi U. Reconstruction of the nigro-striatal dopamine pathway by intracerebral nigral transplants. Brain Res., 1979, vol. 177, p. 555-560.

37. Bjorklund A., Stenevi U., Dunnet S.B. et al. Cross-species neuron grafting in a rat model of Parkinson's disease. Nature, 1982, vol. 298, p. 652-654.

38. Bjorklund A., Lindvall O. Transplanted nerve cells survive and functional for many years. Lakartidningen, 1999, vol. 96, N 32-33, p. 3407-3412.

39. Borgen L. Historical development of neural transplantation. Appl. Neurophisioi., 1988., vol. 51, N 6, p. 265-277.

40. Borges L.F. Historical development of neural transplantation. -Appl. Neurophysiol., 1988, vol. 51, p. 265-277.

41. Broadwell R.D., Charlton H.M., Ebert P.S., Hickey W.F., Shirazi Y., Villegas J., Wolf A.L. Allografts of CNS tissue possess a blood-brain barrier. II Angiogenesis in solid tissue and cell suspension grafts. Exp. Neurol., 1991, Apr., p. 1-28.

42. Brotchi J., Levivier M. Brain grafts: ethical and scientific aspects. -Bull. Mem. Acad. R. Med. Belg., 1991, vol. 146, N 7, p. 296-301.

43. Brown J.O., Mc Couch G.P. Abortive regeneration of the transected spinal cord. J. Comp. Nenrel., 1947, vol. 87, N 2, p. 131137.

44. Clark W.E. Le Gros. Neuronal differentiation in implanted foetal cortical tissue J. Neur. Psychiat., 1940, vol. 3, p. 263-272.

45. Del Conte G. Einpflanzungen von embryonaien Gewebe ins Gehirn. Beitr. path. Anat. allg. Pathol., 1907, vol. 42, p. 193-203.

46. Doering L.C. Appropriate target interactions prevent abnormal cytoskeletal chainges in neurons: a study with intrasciatic grafts of the septum and the hippocampus. J. Neurosci., 1992, vol. 12, № 9, p. 3399-3413.

47. Dunnet $., Bjorclund A. Mechanisms of function of neural grafts in the adult mammalian brain. J. Exp. Biol., 1987, vol.132., p.256-289.

48. Dunnett S.B., Kendall A.L., Watts C., Torres E.M. Neuronal cell transplantation for Parkinson's and Huntington's diseases. Br. Med. Bull., 1997, vol. 53, N 4, p. 757-776.

49. Fawcett J.W. Spinal cord repair: from experimental models to human application. Spinal Cord, 1998, vol. 36., N 12, p. 811-817.

50. Fletcher J.C. Fetal tissue transplantation research and federal policy: a growing wall of separation. Fetal. Diagn. Ther., 1990, vol. 5, N4, p. 211-225.

51. Frisen J., Johansson C.B., Lothian C., Lendahl U. Central nervous system stem cells in the embryo and adult. Cell. Mol. Life. Sci., 1998, vol. 54, N 9, p. 935 - 945.

52. Fuchs H.E, Bullard D.E. Immunology of transplantation in the central nervous system. Appl. Neurophysiol., 1988, vol. 51, p. 278296.

53. Garcia A.R., Deacon T.W., Dinsmore J., Isacson O. Extensive axonal and glial fiber growth from fetal porcine cortical xenografts in the adult rat cortex. Cell Transplant., 1995, vol. 4, N 5, p. 515-527.

54. Gaillard A., Gaillard F., Roger M. Neocortical grafting to newborn and adult rats: developmental, anatomical and functional aspects. -Adv. Anat. Embryol. Cell. Biol., 1998, vol. 148, p. 1-86.

55. Gerloff C., Knappe U.J., Hettmannsperger U., Duffer T.K., Volk B. Intrastrial cerebellar grafts: differentiation of cerebellar anlage and sprouting of Purkinje cells axons. Brain. Res. Dev. Brain Res., 1993 Jul, vol. 74, N 1, p. 30-40.

56. Gimenez y Ribotta M., Orsal D., Feraboli-Lohnherr D., Privat A. Recovery of locomotion following transplantation of monoaminergic neurons in the spinal cord of paraplegic rats. Ann. N. Y. Acad. Sci., 1998, vol. 860, p. 393-411.

57. Giovanini M.A., Reier P.J., Eskin T.A., Wirth., Anderson D.K. Characteristics of human spinal cord grafts in the adult rat spinal cord: influences of lesion and grafting conditions. Exp. Neurol., 1997, vol. 148, N 2, p. 523-543.

58. Hallin R.G., Carlstedt T., Nilsson-Remahl I., Risling M. Spinal cord implantation of avulsed ventral roots in primates; correlation between restored motor function and morphology. Exp. Brain. Res., 1999, vol. 124, N 3, p. 304-310.

59. Henderson B.T., Clough C.G., Hughes R.C., Hitchcock E.R., Kenny B.G. Implantation of human fetal ventral mesencephalon to the right caudate nucleus in advanced Parkinson's disease. Arch. Neurol., 1991, vol. 48, N 8, p. 822-827.

60. Hitchcock E.R., Kenny B.G., Henderson B.T., Clough C.G., Hughes R.C., Detta a. A series of experimental surgery for advanced Parkinsons disease by foetal mesencephalic transplantation. Acta. Neurochir. Suppl. (Wien)., 1991, vol. 52, p. 54-57.

61. Isacson O., Breakefield O.X. Benefits and risks of hosting animal cell in the human brain. Nature Med., 1997, vol. 3, p. 964-969.

62. Itoh Y., Sugawara T., Kowada M., Tessler A. Time course of dorsal root axon regeneration into transplants of fetal spinal cord: an electron microscopic studu. Exp. Neurol., 1993, vol. 123, N 1, p. issue.

63. Jacobson M. Developmental neurobiology. 1978., N.Y.

64. Jacoby D.B., Lindberg C.,Cunningham M.G.,Ratliff J., Dinsmore J. Long-term survival of fetal porcine lateral ganglionic eminence cells in the hippocampus of rats.- J. Neurosci. Res., 1999, vol. 56, N 6, p. 581594.

65. Kearney W., Vawter D.E., Gervais K.G. Fetal tissue research and the misread compromise Hastings Cent. Rep., 1991, vol. 21, N 5, p. 7-12.

66. Keown J. The Polkinghorne Report on Fetal Research: nice recommendations, shame about the reasoning. J. Med. Ethics., 1993, vol. 19, N 2, p. 114-120.

67. Larsson L.C., Czech K.A., Widner H., Korsgren O. Discordant neural tissue survive longer in immunoglobulin deficient mice. -Transplantation, 1999, vol. 68, N 8, p. 1153-1160.

68. Leanza G., Nilsson O.G., Bjorklund A. Functional activity of intrahippocampal septal grafts is regulated by catecholaminergic host afferents as studied by microdialysis of acetylcholine. Brain Res., 1993 Jul 30, vol. 618, N 1, p. 47-56.

69. Leanza G., Cataudella T., Dimauro R., Monaco S., Stanzani S. Release properties and functional integration of nonadrenergic-rich tissue grafted to the denervated spinal cord of the adult rat. Eur. J. Neurosci., 1999, vol. 11, N 5, p. 1789-1799.

70. Levivier M. Intracerebral grafts in Parkinson disease. Current experiences and perspectives. Bull. Met. Acad. R. Belg., 1999, vol. 154, p. 99-106.

71. McDonald J.W., Liu X.Z., Qu Y., Liu S., Mickey S.K., Turetsky D„ Gottlieb D.I., Choi D.W. Transplanted embryonic cells survive, differentiate and promote recovery in injured spinal cord. Nat. Med., 1999, vol.5., N 12., p. 1410-1412.

72. Olson L. Grafts and growth factors in CNS. Basic science with clinical promise. Stereotact. Funct. Neurosurg., 1990, vol. 55, p. 250267.

73. Quinn N.P. The clinical application of cell grafting techniques in patients with Parkinson's disease. Prog. Brain. Res., 1990, vol. 82, p. 619-625.

74. Ramon-Cueto A., Cordero M.I., Santos-Benito F.F., Avila J. Functional recovery of paraplegic rats and motor axon regeneration in their spinal cords by olfactory ensheathing glia. Neuron, 2000, vol. 25, N2, p. 425-435.

75. Ramon y Cajal S. Degeneration and regeneration of the nervous system. London, Oxford Univ. Press., 1928, vol. 1, p. 396, vol. 2, p. 373.

76. Saltykow S. Versuche über Gehirnreplantation, zugleich ein Beitrag zur Kenntniss reaktiver Vorgange an den zelligen Gehirnelementen. -Arch. Psychiat. Nervenkrankh., 1905, vol. 40, p. 329- 388.

77. Saveliev S.V., Lebedev V.V., Evgeniev M.B., Korochkin L.l. Chimeric brain: theoretical and clinical aspects. Int. J. Dev. Biol., 1997, vol 41, p. 801-808.

78. Shetty A.K., Banerje R., Gopinath G., Tandou P.N. Fetal nigral grafts in the anterior eye chamber of adult rats: a long-term morphological study. Exp. Neurology, 1991, vol. 111, p. 106-114.

79. Stocum D.L. Regenerative biology and engineering: strategies for tissue restoration. Wound Repair Regen., 1998, vol. 6., N 4, p. 276290.

80. Subrt O., Tichy M., Vladyka V., Hurt K. Grafting of fetal dopamine neurons in Parkinson's disease. The Czech experience with severe akinetic patients. Acta. Neurochir. Suppl. (Wien)., 1991, vol. 52, p. 51-53.

81. Sugar O., Gerard R.W. Spinal cord regeneration in the rat. J. Neurophysiol., 1940, N 3, p. 1-19.

82. Wolff H.P. Medical use of fetal cells and tissue: ethical aspects. -Wien. Med. Wochenschr., 1992, vol. 142, N 3, p. 4-50.