Исследование биологических аспектов противоопухолевого действия трополона в эксперименте тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Лукбанова Екатерина Алексеевна

• Лукбанова Екатерина Алексеевна
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Лукбанова Екатерина Алексеевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. НОВЫЕ АСПЕКТЫ В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ОНКОЛОГИИ

(обзор литературы)

1.1 Рак легкого - эпидемиологические данные

1.2 Общие понятия о химиотерапии рака легкого

1.3 Цитотоксическая активность алкалоидов трополонового ряда in vitro

1.4 Исследования острой токсичности трополонов как одного из ключевых этапов доклинических исследований химических субстанций

1.5 Опыт создания и применения CDX- и PDX-моделей рака легкого в онкологии

1.6 Противоопухолевые эффекты трополонов природного происхождения и сведения о механизмах их влияния на злокачественные клетки in vitro и in vivo

1.7 Значение некоторых иммуногистохимических показателей в туморогенезе

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Общая характеристика исследования

2.2 Исследование цитотоксической активности и токсичности in vivo 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона

2.3 Воспроизведение CDX- и PDX-моделей рака легкого на иммунодефицитных мышах

2.4 Исследование противоопухолевой активности 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона на CDX-модели НМРЛ на иммунодефицитных мышах Balb/c Nude

2.5 Исследование противоопухолевой активности 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона на PDX-модели НМРЛ на иммунодефицитных мышах Balb/c Nude

2.6 Гематологический и биохимический анализ крови мышей-реципиентов опухолевого материала

2.7 Гистологический анализ опухолевого материала

2.8 Статистические методы исследования

Глава 3. ИССЛЕДОВАНИЕ ТОКСИЧНОСТИ 2-(6,8-ДИМЕТИЛ-5-НИТРО-4-

ХЛОРХИНОЛИН-2-ИЛ)-5,6,7-ТРИХЛОР-1,3-ТРОПОЛОНА IN VITRO

И IN VIVO

3.1 Исследование цитотоксической активности 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона

3.2 Исследование острой токсичности 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона

Глава 4. ВОСПРОИЗВЕДЕНИЕ CDX- И PDX-МОДЕЛЕЙ РАКА ЛЕГКОГО

Глава 5. ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ДЕЙСТВИЯ

ТРОПОЛОНОВ

5.1 Исследование противоопухолевого действия 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона на CDX-моделях рака легкого

5.2 Исследование противоопухолевого действия 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона на PDX-моделях рака легкого

5.3 Влияние 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона на пролиферативную активность, апоптоз опухолевых клеток CDX-моделей рака легкого человека

5.4 Влияние 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона на пролиферативную активность, апоптоз опухолевых клеток PDX-моделей рака легкого человека

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование биологических аспектов противоопухолевого действия трополона в эксперименте»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы исследования

Рак является серьезной проблемой современного общества. Наблюдается рост заболеваемости злокачественными новообразованиями. В мире ежегодно отмечается 8 млн. новых случаев злокачественных опухолей и более 5,2 млн. умерших от них (Сизова Я.Н., Циринг Д.А., 2019). Современные противоопухолевые препараты зачастую обладают тяжелыми побочными эффектами и вместе с этим оказываются чрезвычайно дорогими. Подсчитано, что расходы на лечение одного пациента составляют несколько (десятков) тысяч долларов в месяц (Аганбегян А.Г., 2019). В связи с вышеперечисленным актуальным является поиск новых лекарственных препаратов, обладающих улучшенными свойствами по сравнению с использующимися в онкологии средствами.

Механизм действия химиотерапевтических средств основан на нарушении клеточной пролиферации, обусловленного разрушением молекул ДНК, блокировании транскрипции и митоза. Это в свою очередь ведет к апоптозу или некрозу клеток. Использование химиотерапевтических препаратов основано на чувствительности раковых клеток к цитостатику, которая обеспечивается большим процентом пролиферирующих клеток в опухоли и отсутствием механизмов резистентности в них (Харатишвили Т.К., Петроченко Н.С., Буров Д.А. и соавт., 2019).

Тропоноиды являются группой органических соединений, к которой относятся тропон и а-трополон (2-гидрокситропон), впервые описанные в качестве ароматических систем в 1945 году индийским химиком теоретиком Михаэлем Джеймсом Стюартом Деваром (Бауарт Уи.Л. е1 а1., 2008; Ошакоу Е.А. е1 а1., 2021). Было показано, что у растений тропоноиды отвечают за защитную функцию, а также за цвет, вкус и запах. Данные соединения обладают целым набором важных свойств, таких как инсектицидное действие, противовоспалительная, противовирусная и противоопухолевая активности, антиоксидантные свойства. Благодаря технологиям виртуального скрининга и

высокопроизводительного биологического скрининга были синтезированы синтетические аналоги тропоноидов, показавшие высокий терапевтический потенциал in vivo (Sayapin Y.A. et al., 2015). Алкалоиды трополонового ряда обладают большим спектром разнообразных фармакологических свойств, в том числе и противоопухолевую активность.

Например, относящееся к группе тропоноидов природное соединение Хиноктиол, выделенное из древесины тайванского кипариса, оказывает цитотоксический эффект на опухолевые клетки (Magori N., Fujita T., Kumamoto E., 2018). Такие вещества как Р-Долабрин, у-Туаплицин и 4-ацетилтрополон проявляют сильный цитотоксический эффект по отношению к некоторым культурам опухолевых клеток, например, по отношению к клеткам P388 лимфоцитарной лейкемии и на модельных клетках опухоли желудка человека KATO-III и асцитной карциномы Эрлиха (Zhang G., He J., 2019).

2-гетарил-1,3-трополоны, которые планируется исследовать в данной работе, представляют из себя комбинированные гетероциклические системы, в которых присутствуют сразу две потенциально активные группы, способные связываться с активным сайтом биологической мишени. Известно множество подобного рода соединений, обладающих высоким терапевтическим потенциалом.

Для прогнозирования мишень-специфичной активности 2-гетарил-1,3-трополонов применим алгоритм самоорганизующихся карт Кохонена и метод Сэммона, которые позволяют редуцировать размерность многопараметрических пространств признаков. Для данной группы веществ была построена компьютерная модель, способная классифицировать органические соединения по профилю мишень-специфичной активности (Ткачев В.В., Саяпин Ю.А., Шилов Г.В. и соавт., 2015). В результате прогнозирования (классификации) было установлено, что 2-гетарил-1,3-трополоны попали в ячейки на карте, среди которых можно выделить следующие: блокаторы кальциевых каналов, ингибиторы липоксигеназы, антагонисты/агонисты дофаминовых (D1-D4) рецепторов, антагонисты/агонисты серотониновых рецепторов, ингибиторы

тирозиновых киназ. Перечисленные биологические мишени необходимо учитывать при планировании биологических исследований.

Доклинические исследования новых химических соединений, представляющих интерес с точки зрения потенциальной биологической активности, включают множество методов, способных охарактеризовать те или иные свойства веществ. Одним из методов является изучение цитотоксичной активности химических субстанций на культурах опухолевых клеток человека, представляющее собой «бутылочное горлышко», которое отсеивает соединения с незначительной противоопухолевой активностью. Важным аспектом возможности дальнейшего применения вещества является его токсичность. В частности, для цитостатиков необходимо разумное сопоставление наносимого организму больного вреда, обусловленного токсичностью подавляющего большинства химиопрепаратов, и вероятной пользы в виде угнетения развития злокачественных новообразований (Миронов А.Н., 2013).

Неотъемлемыми методами являются исследования противоопухолевой эффективности in vivo, проводимые с использованием опухолевых моделей на животных. Наиболее адекватными моделями считаются ксенографты опухолей человека на иммунодефицитных грызунах (Трещалина Е.М., 2017). В зависимости от способа получения и сайта имплантации выделяют подкожные и ортотопические ксенографты. Последние считаются моделью, наиболее адекватно отражающей свойства первичной опухоли благодаря свойственному данному типу опухоли микроокружению. Однако получение таких ксенографтов бывает технически невозможно осуществить по ряду причин. Кроме того, ортотопический сайт имплантации осложняет мониторинг развития опухоли. Подкожные модели отличаются относительной простотой получения и дальнейшей оценки динамики онкогенеза, в силу чего используются для оценки противоопухолевого эффекта веществ в подавляющем большинстве случаев. В зависимости от имплантируемого опухолевого материала различают CDX- и PDX-модели. CDX (Cell Derived Xenograft) - ксенографты, получаемые в результате имплантации иммунодефицитным мышам культуры опухолевых

клеток человека. Такие модели являются наиболее распространенными и легко воспроизводимыми. Однако, они обладают рядом существенных недостатков, способных повлиять на качество исследований. В частности, клеточные линии, полученные благодаря избирательной селекции in vitro, утрачивают свойства первичной опухоли. Из-за этого доклинические исследования фармакологических субстанций на клеточных линиях теряют свою прогностическую значимость. Другой моделью, используемой в экспериментальной онкологии, является PDX (Patient Derived Xenograft) - ксенографты, получаемые в результате трансплантации опухолевого материала, взятого непосредственно от онкобольного. Данная модель считается наиболее адекватной благодаря ее способности воспроизводить все многообразие биологических характеристик опухолей пациентов благодаря гетерогенности их клеточного состава (Williams S.A. et al., 2013), в том числе гистологические и генетические характеристики (DeRose Y.S., 2011; Li S., 2013; Hidalgo M., 2014). Таким образом, существует большое разнообразие экспериментальных моделей, предназначенных для доклинических исследований противоопухолевых средств. Выбор той или иной модели зависит от конкретных задач исследования.

Степень разработанности темы

Основными подходами к терапии злокачественных новообразований является хирургическое лечение и цитотоксическая химиотерапия, которая включает введение противоопухолевых препаратов по стандартизированной схеме лечения (Holohan C. et al., 2013). На сегодняшний день общепринятым стандартом первой линии терапии многих видов рака является применение препаратов на основе платины, обладающих цитотоксическим эффектом широкого спектра действия (Румянцев А.А., Покатаев И.А., Тюляндин С.А., 2018; Bai L. et al., 2017; Moreira-Pais A., Ferreira R., da Costa R.G., 2018). К ним относятся цисплатин, карбоплатин и оксалиплатин с различной эффективностью и токсичностью (Cheff D.M., Hall M.D., 2017). Их противоопухолевая активность связана со способностью повреждать ДНК, что впоследствии приводит к апоптозу опухолевых клеток (Саяпин Ю.А. и соавт., 2016). В комбинации с другими

противоопухолевыми препаратами (этопозид, паклитаксел, блеомицин, гемцитабин, циклофосфамид) платиновые агенты используются для лечения рака легкого, рака яичников, рака поджелудочной железы, рака молочной железы, меланомы и лимфом (Комиссаров В.Н. и соавт., 2008; Зыонг Нгиа Банг и соавт., 2015; Саяпин Ю.А. и соавт., 2019). Несмотря на широкое применение, все цитостатики вызывают многочисленные нежелательные токсические эффекты: нейротоксичность, тошнота, рвота, потеря мышечной массы (Cheff D.M., Hall M.D., 2017; Moreira-Pais A., Ferreira R., da Costa R.G., 201S). В связи со значительным ростом онкологических заболеваний актуальным является разработка и внедрение новых противоопухолевых средств, которые обладали бы высокой эффективностью на фоне низкого риска развития нежелательных реакций.

Первым этапом в поиске новых противоопухолевых соединений в экспериментальной клеточной биологии является тест на жизнеспособность, который позволяет проводить начальный отбор перспективных лекарственных средств среди вновь синтезированных соединений (Bai L. et al., 2017).

В ряду 2-хинолин-2-ил-производных 1,3-трополона известен 2-(4h-l,3-бензоксазин-4-он-2-ил)-4,5,б-трихлор-1,3-трополон, обладающий

антибактериальной активностью против госпитальных штаммов грамотрицательных и грамположительных бактерий (Саяпин Ю.А. и соавт., 2016). Известны также 2-гетарилзамещенные 1,3-трополона, обладающие антимикробным действием (Патент РФ № 2314295).

Известен 2-[7-ацетил-9,11 -ди(трет-бутил)-4-метил-5-

хлорбензо[^][1,4]оксазепино[7,6,5-^е]-хинолин-2-ил]-5,б,7-трихлор-1,З-трополон, проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток молочной железы MCF-7 (Human breast carcinoma) в концентрации IC50 12.9б цг/мл, а также опухолевых эпителиальных клеток KB, опухолевых клеток легких Lu и печени Hep-G2 в концентрациях IC50>128 цг/мл (Зыонг Нгиа Банг и соавт., 2015).

Наиболее близким по достигаемому результату является 5,7-ди(трет-бутил)-4-нитро-2-(4,7-дихлор-5-нитро-8-метилхинолин-2-ил)-1,3-трополон проявляющий цитотоксическую активность на клеточные линии OVCAR-8, OVCAR-3, H441, A549, HCT-116, Panc1 (Патент РФ № 2702648).

Цель исследования

Изучение противоопухолевой эффективности нового синтезированного вещества из группы трополонов (2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона) и изучение некоторых механизмов, лежащих в основе его противоопухолевого действия в эксперименте.

Задачи исследования

1. Изучить цитотоксическую активность 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона (далее - трополон) на культуре опухолевых клеток аденокарциномы легких человека А549.

2. Исследовать острую токсичность трополона на мышах линии Balb/c

Nude.

3. Воспроизвести CDX- и PDX-модели аденокарциномы и плоскоклеточного рака легкого человека.

4. Исследовать противоопухолевое действие трополона на CDX-моделях аденокарциномы легкого человека.

5. Изучить противоопухолевое действие трополона на PDX-моделях плоскоклеточного рака легкого человека.

6. Определить влияние трополона на уровень онкомаркеров Ki-67, b-catenin, Bcl-2, P53.

Научная новизна исследования

В диссертационной работе впервые:

• исследована цитотоксическая активность трополона на культуре опухолевых клеток человека - аденокарцинома легкого А-549;

• исследована острая токсичность трополона при пероральном введении мышам линии Balb/c Nude;

• созданы CDX- и PDX-модели немелкоклеточного рака легкого человека на иммунодефицитных мышах линии Balb/c Nude;

• исследована противоопухолевая эффективность композиции трополона на подкожных ксенографтах культуры опухолевых клеток А-549 и PDX-модели плоскоклеточного рака легкого человека на иммунодефицитных мышах Balb/c Nude.

Теоретическая и практическая значимость

Полученные результаты исследования противоопухолевой эффективности композиции трополона in vitro и in vivo дополнили существующие представления о противоопухолевых соединениях и раскрыли их новые механизмы противоопухолевого действия в экспериментальной онкологии.

Было показано, что трополон проявляет цитотоксическую активность в отношении клеточной линии немелкоклеточного рака легкого человека A549: ингибирующая концентрация IC50 составила 0,21±0,01 мкМ.

Было продемонстрировано, что трополон в выбранном диапазоне доз (0,0055, 0,055, 0,55 и 2,75 мг/г), не проявляя токсичности на мышах, оказывает выраженный противоопухолевый эффект трополона на CDX-моделях рака легкого и на подкожных PDX-моделях НМРЛ человека. Выявлена прямая зависимость между дозой трополона и его противоопухолевым эффектом.

Методология и методы диссертационного исследования

Диссертация логически структурирована, представленные результаты основаны на изучении большого экспериментального материала. Работа выполнена с использованием патофизиологических, биохимических, гематологических, морфологических и статистических методов исследования.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Созданы CDX- и PDX-модели, имеющие стабильную кинетику роста в организме мышей линии Balb/c Nude.

2. 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополон в выбранном диапазоне доз (0,0055, 0,055, 0,55 и 2,75 мг/г), не проявляя

токсичности на мышах, оказывает выраженный противоопухолевый эффект на подкожных CDX-моделях рака легкого и на подкожных PDX-моделях НМРЛ человека, реализуемый посредством активации апоптоза.

Степень достоверности результатов работы

Диссертационная работа выполнена на современном научном уровне. Достоверность научных положений и выводов диссертационной работы подтверждается результатами анализа экспериментального материала, данными статистической обработки полученных результатов. В работе использовались современные клинико-лабораторные методы исследования.

Проведена статистическая обработка данных с определением достоверности полученных результатов, на основе чего сделаны обоснованные выводы и предложены практические рекомендации.

Апробация диссертации

Основные положения диссертации и результаты работы доложены на VII петербургском международном онкологическом форуме «Белые ночи 2021», Санкт-Петербург, 2021 г.

Апробация результатов работы состоялась на заседании Ученого совета ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России 24 декабря 2021 года.

Публикации

Всего по теме диссертационного исследования опубликовано 9 печатных работ в российских и зарубежных изданиях. По результатам исследования опубликовано 5 статьей в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки России, из них две статьи входят в международную базу цитирования Scopus, получен патент на изобретение Российской Федерации.

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа изложена на 141 странице печатного текста и состоит из введения, обзора литературы, характеристики материала и методов, 5 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 177 источника, в том числе

44 отечественных и 133 зарубежных. Работа иллюстрирована 41 рисунком и 22 таблицами.

Глава 1

НОВЫЕ АСПЕКТЫ В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ОНКОЛОГИИ

(литературный обзор)

1.1 Рак легкого - эпидемиологические данные

В мире злокачественные новообразования уже многие годы занимают лидирующие позиции в структуре заболеваемости и смертности населения. Ежегодно из 7,4 млрд жителей планеты заболевает раком свыше 18,1 млн (Data source: GLOBOCAN, 2018), а умирает 8,2 млн человек (Bray F., Ferlay J., Soerjomataram I. et al., 2018). Среди всех злокачественных опухолей рак легкого (РЛ) занимает первое место, регистрируясь более чем у 2,1 млн больных и составляя таким образом 11,6% в структуре онкологической заболеваемости мирового населения. (Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В., 2018; Data source: GLOBOCAN, 2018). Данное заболевание относится к новообразованиям с высоким уровнем летальности и низким процентом выживаемости. В большинстве стран однолетняя выживаемость составляет 20 - 30% (Чойнзонов Е.Л., Жуйкова Л.Д., Ананина О.А., 2017; Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В., 2018; Чойнзонов Е.Л., Жуйкова Л.Д., Одинцова И.Н., 2018; Data source: GLOBOCAN, 2018).

Гистологическими типами опухолей легкого являются: немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ, NSCLC), составляющий 80-90% от всех случаев заболеваемости РЛ и являющийся таким образом наиболее распространенным. Подтипами НМРЛ являются плоскоклеточный рак (40% больных) и аденокарцинома (40-50%). (Herbst R.S., Morgensztern D., Boshoff C., 2018).

1.2 Общие понятия о химиотерапии рака легкого

Значительную роль в лечении рака легкого выполняет химиотерапия при помощи препаратов, направленных на нарушение процессов пролиферации опухолевых клеток. Благодаря пристальному вниманию ученых к явлениям химиочувствительности и химиорезистентности в клинической практике происходит постоянное обновление арсенала лекарственных препаратов

(Переводчикова Н.И., 1996; 2000). Большинство химиотерапевтических препаратов обладают дозозависимым эффектом - при повышении дозы увеличивается и эффективность препарата. Однако при этом значительно увеличивается вероятность развития тяжелых побочных эффектов (Янкелевич М.Я., 2000; Сивашинский М.С., 2004; Lennon S., 1991).

В настоящее время существует большой арсенал химиотерапевтических препаратов, однако многие из них вызывают тяжелые токсические реакции. Кроме того, имеет место развивающаяся в процессе лечения химиорезистентность опухолей. Поэтому остается актуальным вопрос поиска новых более совершенных химиотерапевтических средств. Очень важным в использовании цитостатиков в клинической практике является минимизация их влияния на нормальные клетки и ткани человека. В различных исследованиях было показано, что трополоны отвечают этому требованию (Wakabayashi H., Narita T., Suga A., 2010; Shih Y.-H., Chang K.-W., Hsia S.-M., 2013). В представленной ниже таблице 1.1 приведены результаты изучения цитотоксической активности трополонов в отношении некоторых культур клеток человека in vitro, проведенных с использованием МТТ-теста.

Таблица 1.1 - Противоопухолевая активность алкалоидов трополонового ряда in vitro

Вещество Культура клеток Время инкубации, ч Концентрация мкМ Действие, % Источник

24 289

Плоскоклеточная карцинома ротовой полости 48 84

человека HSC-2 72 62

96 61

24 450

7-бром-2-(4- Плоскоклеточная карцинома ротовой полости 48 102 * 50

гидроксианилино)-тропон человека HSC-3 72 69

96 63

24 345

Плоскоклеточная карцинома ротовой полости 48 124

человека HSC-4 72 63 Wakabayashi H. et al., 2010

96 49

24 375

Плоскоклеточная карцинома ротовой полости 48 63

человека HSC-2 72 31

96 37

24 409

4-изопропил-2-(2- Плоскоклеточная карцинома ротовой полости 48 103 50*

гидроксианилино)-тропон человека HSC-3 72 52

96 48

24 354

Плоскоклеточная карцинома ротовой полости 48 94

человека HSC-4 72 56

96 50

Плоскоклеточная карцинома ротовой полости 15**

человека HSC-3 Shih Y.-H. et al., 2013

Хиноктиол (Р-туяплицин) Плоскоклеточная карцинома ротовой полости 24 200 45**

человека SAS

Плоскоклеточная карцинома ротовой полости 30**

человека SCC4

Хиноктиол (Р-туяплицин) Рак желудка человека КАТО-Ш 72 0,002 54** Matsumura E. et al., 2001

Асцитная карцинома Эрлиха 58**

у-туяплицин Рак желудка человека КАТО-Ш 0,002 85**

Асцитная карцинома Эрлиха 91**

Р-долабрин Рак желудка человека КАТО-Ш 0,002 67**

Асцитная карцинома Эрлиха 75**

Хиноктиол (Р-туяплицин) Рак желудка человека КАТО-Ш - 0,03 10** Morita Y. et я1., 2002

0,12 8**

Асцитная карцинома Эрлиха 0,03 24

0,12 у**

4-ацетилтрополон Рак желудка человека КАТО-Ш 0,03 75**

0,12 12**

Асцитная карцинома Эрлиха 0,03 92**

0,12 __** 30

Винкристин Рак желудка человека КАТО-Ш 0,006 32

0,024 30**

Асцитная карцинома Эрлиха 0,006 48**

0,024 36**

Хиноктиол (Р-туяплицин) Рак толстой кишки человека HCT-116 72 10 26** Seo J.S. et Я1., 2017

50 13**

100

Рак толстой кишки человека SW480 10 30**

50 26**

100 22**

Нормальная клеточная линия толстой кишки CCD18Co 10 67**

50 52**

100 67**

Хиноктиол (Р-туяплицин) Рак молочной железы человека AS-B145 48 266,9±42,6 * 50 ^П S.-M. et Я1., 2017

Рак молочной железы человека ВТ-474 46,5±8

Хиноктиол (Р-туяплицин) Рак толстой кишки человека НСТ-116 48 10 . „** 40 Lee et я1., 2013

Рак толстой кишки человека SW-620 30**

Нормальные клетки толстой кишки человека CCD- 112СоК 98

50 60

Рак печени человека HepG2 100 __** 50

200 47

50 87

Рак печени человека SMMC-7721 100 78**

Хиноктиол (Р-туяплицин) 24 200 70 О. е

50 87** а1., 2019

Рак печени человека НС^МЗ 100 85**

200 68

50 90**

Нормальные клетки печени человека НЬ-7702 100 98

200 87**

Примечание.* - ингибирующая концентрация (1С50), ** - жизнеспособность клеток

1.3 Цитотоксическая активность алкалоидов трополонового ряда in

vitro

Одним из самых изученных на сегодняшний день трополоном является хиноктиол (в-туяплицин), имеющий природное происхождение (Zhu Y.-J., Qiu L., Zhou J.-J., 2010; Lee Y.-S., Choi K.-M., Kim W., 2013; Tsao Y.T., 2016). Данное соединение проявляет противоопухолевую активность по отношению к различным культурам опухолевых клеток, что было продемонстрировано в ряде работ (Nakano H. et al., 2006; Li L.-H. et al., 2014; Huang M.-H. et al., 2016). Так, Shih Y.-H. и соавт. исследовали цитотоксическую активность данного вещества по отношению к культурам клеток плоскоклеточной карциномы ротовой полости человека HSC-3, SAS, HCC-4 и выяснили, что при воздействии в течение 24 часов хиноктиолом в концентрации 200 мкМ наименьшую жизнеспособность проявляет культура клеток HSC-3 - 15% (Shih Y.-H., Chang K.-W., Hsia S.-M., 2013).

При более длительном воздействии (72 часа) хиноктиола малых концентраций (0,002 мкМ) на клетки рака желудка человека КАТО-III и асцитной карциномы Эрлиха был отмечен незначительный цитотоксический эффект (Matsumura E., Monta Y., Date T., 2001).

Seo J.S. и соавт. провели сравнительное изучение цитотоксической активности хиноктиола на культуры клеток рака толстой кишки человека HCT-116, SW-480 и нормальной клеточной линии толстой кишки CCD18Co, показавшее относительную резистентность к воздействию неопухолевых клеток по сравнению со злокачественными. Наибольший дозо-зависимый ответ был получен на линии HCT-116: уже при 10 мкМ вещества жизнеспособность составила 26% и уменьшилась до 5% при действии хиноктиола концентрацией 100 мкМ (Seo J.S. et al., 2017).

Аналогичное исследование было проведено с культурами клеток рака толстой кишки человека HCT-116, SW-620 и нормальными клетками толстой кишки человека CCD-112CoN1, показавшее еще более выраженную

резистентность нормальных клеток по сравнению с опухолевыми: жизнеспособность культуры CCD-112CoN составляла 98%, а культур HCT-116 и SW-620 - 40 и 30% соответственно (Lee Y.-S. et al., 2013).

Различия в чувствительности к воздействию хиноктиолом нормальных и опухолевых клеток, вероятно, связано с их пролиферативной активностью: трополон, судя по приведенным данным, в большей степени оказывает ингибирующий эффект на высокопролиферирующие клетки, к которым относятся раковые (Chen S.-M., Wang B.-Y., Lee C.-H., 2017; Zhang G. et al., 2019).

Zhang G. и соавт. также показали резистентность нормальных клеток печени HL-7702 к действию хиноктиола: в зависимости от значений его концентрации в диапазоне 50-200 мкМ жизнеспособность составляла от 87 до 90%. При воздействии хиноктиолом на опухолевые культуры HepG2, SMMC-7721 и HCCLM3 его цитотоксическая активность оказалась невысокой и изменялась незначительно при четырехкратном увеличении концентраций вещества. Наиболее чувствительной в данном эксперименте оказалась культура HepG2 (Zhang G. et al., 2019).

Активность хиноктиола была также опробирована на культурах клеток рака молочной железы AS-B145 и BT-474. Последняя оказалась более чувствительной к цитотоксическому действию вещества (IC50=46,5±8 мкМ) по сравнению с AS-B145(ICs0=266,9±42,6 мкМ) (Chen S.-M., Wang B.-Y., Lee C.-H., 2017).

Интерес представляет сравнительное исследование цитотоксической активности в отношении культур клеток рака желудка КАТО-III и асцитной карциномы Эрлиха синтетического 4-ацетилтрополона, природного хиноктиола и винкристина. Наибольший ингибирующий эффект был проявлен хиноктиолом: при воздействии концентрациями 0,03 и 0,12 мкМ жизнеспособность клеток рака желудка составляла 10 и 8%, а асцитной карциномы Эрлиха - 24 и 7% соответственно. Активность 4-ацетилтрополона оказалась ниже, чем у хиноктиола, однако при действии в концентрации 0,12 мкМ на клетки КАТО-III его цитотоксическая активность была в 2 раза выше по сравнению с винкристином в той же концентрации. Данное исследование свидетельствует о

том, что трополоны могут оказывать даже больший цитотоксический эффект, чем некоторые цитостатики, использующиеся в терапевтической практике, что позволяет рассматривать их в качестве соединений, обладающих противоопухолевой активностью (Morita Y., Matsumura E., Tsujibo H., 2002).

Помимо изучения действия соединений трополонового ряда исследовали цитотоксическую активность у-туяплицина и Р-долабрина в отношении культур клеток рака желудка КАТО-III и асцитной карциномы Эрлиха. В результате воздействия обоих веществ в течение 72 часов в низкой концентрации 0,32 мкг/мл показатель жизнеспособности клеток оказался высоким и варьировал от 75 до 91% в зависимости от вещества и клеточной культуры (Matsumura E., Morita Y., Date T., 2001).

Wakabayashi H. и соавт. изучали цитотоксическую активность синтезированных 7-бром-2(4-гидроксианалино)-тропона и 4-изопропил-2-(2-гидроксианалино)-тропона в отношении культур клеток плоскоклеточной карциномы ротовой полости человека HSC-2, HSC-3, HSC-4. Наименьшие ингибирующие концентрации (IC50), а, следовательно, и наибольшая цитотоксическая активность, были отмечены для 7-бром-2(4-гидроксианалино)-тропона при его воздействии в течение 72 и 96 часов на культуру HSC-4 и 4-изопропил-2-(2-гидроксианалино)-тропона - на культуру HSC-2 (Wakabayashi H., Narita T., Suga A., 2010).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Лукбанова Екатерина Алексеевна, 2022 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Аганбегян, А.Г. Онкозаболевания - главная угроза жизни людей в перспективе / А.Г.Аганбегян // ОРГЗДРАВ: новости, мнения, обучение. Вестник ВШОУЗ. - 2019. - Т. 5. - № 4. - С. 43-54. doi: 10.24411/2411-86212019-14003

2. Бурбаева, Г.Ш. Связывание колхицина с тубули-ном в структурах головного мозга в норме и при шизофрении / Г.Ш. Бурбаева, Л.В. Андросова, О.К. Савушкина // Нейрохимия. - 2020. - 37(2). - С. 183-187. doi: 10.31857/S1027813320010069.

3. Бурнашева, Е.В. Поражение почек при противоопухолевой терапии / Е.В. Бурнашева, Ю.В. Шатохин, И.В. Снежко и соавт. // Нефрология. - 2018. - 22 (5). - С. 17-24. https://doi.org/10.24884/1561-6274-2018-22-5-17-24

4. Владимирова, Л.Ю. Опыт применения бевацизумаба в поддерживающей терапии у больных раком яичников / Л.Ю. Владимирова, А.Э. Сторожакова, Е.А. Калабанова и соавт. // Южно-российский онкологический журнал. - 2020. - 1(3). - С. 67-74. https://doi.org/10.37748/2687-0533-2020-1-3-7.

5. Жукова Г.В., Минкин В.И., Гончарова А.С., Шевченко А.Н., Лукбанова Е.А., Саяпин Ю.А., Гусаков Е.А., Миндарь М.В., Заикина Е.В., Курбанова Л.З., Волкова А.В., Ходакова Д.В., Пандова О.В. Некоторые дозозависимые эффекты нового производного трополонового ряда, 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона, у мышей линии balb/c nude при его однократном приеме // Современные проблемы науки и образования. -2021. - № 2. - С. 114; DOI 10.17513/spno.30573

6. Жукова Г.В., Лукбанова Е.А., Протасова Т.П., Заикина Е.В., Киблицкая А.А. О механизмах противоопухолевого действия соединений трополонового ряда. Исследования и практика в медицине. 2021; 8(3): 118-132. https://doi.org/10.17709/2410-1893-2021-8-3-11

7. Заборовский, А.В. Направленная доставка доксорубицина с помощью экзогенных биосовместимых нановекторов при экспериментальных неоплазиях / А.В. Заборовский, А.В. Кокорев, Е.П. Бродовская // Вестник

Мордовского университета. - 2017. - 27(1). - 93-107. doi: 10.15507/02362910.027.201701.093-107.

8. Злокачественные новообразования в России в 2017 году (заболеваемость и смертность) / Под ред. А.Д. Каприна, В.В. Старинского, Г.В. Петровой; филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России. - М.: МНИОИ им. П.А.Герцена.

9. Зыонг, Нгиа Банг. Синтез и цитотоксическая активность производных [бензо[b][1,4]оксазепино[7,6,5-de]хинолин-2-ил]-1,3-трополонов / Нгиа Банг Зыонг, Ю.А. Саяпин, Лам Хоанг и соавт. // Химия гетероциклических соединений. - 2015. - 51(3). - С. 291-294.

10. Каприн, А.Д. Злокачественные новообразования в России в 2016 году (заболеваемость и смертность) / А.Д. Каприн, В.В. Старинский, Г.В. Петрова. -М., 2018. - 250 с.

11. Комарова Е.Ф., Жуковская О.Н., Лукбанова Е.А., Енгибарян М.А., Ващенко Л.Н., Харагезов Д.А. и др. Производное бензимидазола как противоопухолевое средство в отношении экспериментальной злокачественной опухоли легкого. Вестник РГМУ. 2021; (3): 49-53. DOI: 10.24075/vrgmu.2021.031 [Benzimidazole derivative as antitumor drug against experimentally induced lung carcinoma / E.F. Komarova, E.A. Lukbanova, M.A. Yengibaryan, L.N. Vashenko, D.A. Kharagezov, V.V. Pozdnyakova, N.D. Ushakova, Y.S. Shatova, Y.V. Przhedetsky, O.N. Zhukovskaya // Bulletin of Russian State Medical University. - 2021. - № 3. - С. 44-48]

12. Кит, О.И. Методы создания ортотопических моделей рака пищевода и их применение в доклинических исследованиях / О.И. Кит, Е.Н. Колесников, А.Ю. Максимов // Современные проблемы науки и образования. - 2019. - № 2. - 6 с.

13. Кит О.И., Минкин В.И., Лукбанова Е.А., Саяпин Ю.А., Гусаков Е.А., Ситковская А.О., Филиппова С.Ю., Комарова Е.Ф., Волкова А.В., Ходакова Д.В., Миндарь М.В., Лазутин Ю.Н., Енгибарян М.А., Колесников В.Е. Оценка цитотоксической активности и токсичности производного трополонов с

потенциальным противоопухолевым действием. Бюллетень сибирской медицины. 2022;21(2):60-66. https://doi.org/10.20538/1682-0363-2022-2-60-66

14. Колесников Е.Н., Лукбанова Е.А., Ванжа Л.В., Максимов А.Ю., Кит С.О., Гончарова А.С., Заикина Е.В., Миндарь М.В., Ткачев С.Ю., Ходакова Д.В., Волкова А.В. Способ проведения наркоза у мышей Balb/c Nude при оперативных вмешательствах. Патент РФ. RU 2712916 С1. Заявка № 2019130699 от 26.09.19 г.

15. Лукбанова Е.А., Дженкова Е.А., Гончарова А.С., Максимов А.Ю., Комарова Е.Ф., Минкин В.И., Саяпин Ю.А., Гусаков Е.А., Курбанова Л.З., Киблицкая А.А., Заикина Е.В., Миндарь М.В., Волошин М.В., Шапошников А.В., Лысенко И.Б., Николаева Н.В. Исследование противоопухолевой активности 2-хинолин-2-ил-производного 1,3-трополона в эксперименте. Исследования и практика в медицине. 2022;9(2):50-64. https://doi.org/10.17709/2410-1893-2022-9-2-4

16. Лукбанова Е.А., Заикина Е.В., Саяпин Ю.А., Гусаков Е.А., Филиппова С.Ю., Златник Е.Ю., Волкова А.В., Курбанова Л.З., Ходакова Д.В., Каймакчи Д.О., Лазутин Ю.Н., Шевченко А.Н., Пандова О.В. Оценка противоопухолевого эффекта 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона на подкожных ксенографтах культуры опухолевых клеток А-549. Альманах клинической медицины. 2021;49. - С. 396-404 -https://doi.org/10.18786/2072-0505-2021-49-021

17. Лукбанова Е. А., Миндарь М. В., Дженкова Е. А., Максимов А. Ю., Гончарова А. С., Шатова Ю. С., Маслов А. А., Шапошников А. В., Заикина Е. В., Лазутин Ю. Н. Экспериментальный подход к получению подкожного ксенографта немелкоклеточного рака легкого. Исследования и практика в медицине. 2022; 9(2): 65-76. https://doi.org/10.17709/2410-1893-2022-9-2-5

18. Лукбанова, Е.А. Оценка противоопухолевого эффекта 2-(6,8-диметил-5-нитро-4-хлорхинолин-2-ил)-5,6,7-трихлор-1,3-трополона на подкожных ксенографтах культуры опухолевых клеток А-549 / Е.А. Лукбанова, Е.В.

Заикина, Ю.А. Саяпин // Альманах клинической медицины. - 2021. - С. 49. https://doi. org/10.18786/2072-0505-2021 -49-021

19. Максимов А.Ю., Лукбанова Е.А., Саяпин Ю.А., Гусаков Е.А., Гончарова А.С., Лысенко И.Б., Протасова Т.П. Противоопухолевая активность алкалоидов трополонового ряда in vitro и in vivo // Современные проблемы науки и образования. - 2020. - № 2. - С. 169; DOI 10.17513/spno.29722

20. Методы исследования цитотоксичности при скрининге лекарственных препаратов. Учебно-методическое пособие к практическим занятиям по курсу «Методы скрининга физиологически активных веществ» / А.Г. Иксанова, О.В. Бондарь, К.В. Балакин. -Казань: Казанский университет, 2016 -40 с.

21. Патент № 2712916 Российская Федерация, МПК A61K 31/54, A61K 31/5513, A61P 23/00. Способ проведения наркоза у мышей Balb/c Nude при оперативных вмешательствах: №2019130699: заявлено 26.09.2019: опубликовано 03.02.2020 / Колесников Е.Н., Лукбанова Е.А., Ванжа Л.В., Максимов А.Ю., Кит С.О., Гончарова А.С., Заикина Е.В., Миндарь М.В., Ткачев С.Ю., Ходакова Д.В., Волкова А.В.; заявитель и патентообладатель федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, «ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России» (RU). - 6 с. - Текст: непосредственный.

22. Патент №2741311 Российская Федерация, МПК C07D 215/18, A61K 31/47, A61P 35/00. Средство, обладающее цитотоксической активностью в отношении культуры клеток немелкоклеточного рака легких А 549: № 2020123736: заявлено 17.07.2020: опубликовано 25.01.2021 / Минкин В.И., Кит О.И., Гончарова А.С., Лукбанова Е.А., Саяпин Ю.А., Гусаков Е.А., Туркин И.Н., Ситковская А.О., Филиппова С.Ю., Лейман И.А., Лазутин Ю.Н., Чубарян А.В., Пащенко Д.Г., Тищенко И.С.; заявитель и патентообладатель федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Южный федеральный университет» (RU), федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский

исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, «ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России» (RU). - 9 с. - Текст: непосредственный.

23. Патент на изобретение № 2702648 Российская Федерация, МПК C07D215/18. 5,7-Ди(трет-бутил)-2-(4,7-дихлор-8-метил-5-нитрохинолин-2-ил)-4-нитро-1,3-трополон, обладающий цитотоксической активностью: № 2019121680: заявлено 11.07.2019: опубликовано 09.10.2019 / Саяпин Ю.А., Гусаков Е.А., Мазитова А.М., Топчу Ю.А., Дороган И.В., Бумбер Я.А., Минкин В.И.; заявитель и патентообладатель федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Южный федеральный университет» (RU). - 6 с. - Текст: непосредственный.

24. Патент на изобретение № 2314295 Российская Федерация, МПК C07D215/14. 2-гетарилзамещенные 1,3 -трополона, способ их получения (варианты) и фармацевтическая композиция антимикробного действия: № 2006106438/04: заявлено 01.03.2006: опубликовано 10.01.2008 / Комиссаров В.Н., Саяпин Ю.А., Минкин В.И.; заявитель и патентообладатель федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Южный федеральный университет» (RU). - 30 с. -Текст: непосредственный.

25. Переводчикова, Н.И. Химиотерапия опухолевых заболеваний / Н.И. Переводчикова. - М.: Медицина, 2000. - 393 с.

26. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Под ред. А.Н. Миронова. — М.: Гриф и К, 2013. — 944 с.

27. Румянцев, А.А. Современные аспекты антиангиогенной терапии при раке яичников / А.А. Румянцев, И.А. Покатаев, С.А. Тюляндин // Медицинский совет. - 2018. - № 19. - С. 19-21. doi:10.21518/2079-701X-2018-19-17-21.

28. Русакова, Я.Л. Воздействие препарата субалин на морфологию лимфатических узлов и гематологические показатели мышей Balb/c, инфицированных вирусом лейкоза Раушера / Я.Л. Русакова, С.Н. Магер, В.В. Храмцов // Ветеринария. - 2015. - 3 (36). - С. 90-98.

29. Сагакянц, А.Б. Объединенный иммунологический форум: современные направления развития фундаментальной и прикладной онкоиммунологии / А.Б. Сагакянц // Южно-российский онкологический журнал. - 2020. - 1(2). - С. 36-45. https://doi.org/10.37748/2687-0533-2020-1-2-5

30. Саяпин, Ю.А. Новый 2- (4^1,3-бензоксазин-4-он-2-ил)- 1,3-трополон: синтез, структура и антибактериальные свойства / Ю.А. Саяпин, Е.А. Гусаков, И.В. Дороган // Биоорганическая химия. - 2016. Т. 42. - № 2. - С. 247-2522.

31. Сивашинский, М.С. Некоторые пути повышения эффективности химиотерапии больных с диссеминированными солидными опухолями / М.С. Сивашинский // Вопросы онкологии. - 2004. - № 2. - С. 237-242.

32. Сизова, Я.Н. Особенности преодоления ситуации болезни пациентами со злокачественными новообразованиями / Я.Н. Сизова, Д.А.Циринг // Психология. Историко-критические обзоры и современные исследования. -2019. - Т. 8. - № 5А. - С. 240-246. DOI: 10.34670/AR.2020.46.5.024

33. Ткачев, В.В. Молекулярные структуры новых 2-(хинолин-2-ил)-1, 3-трополонов / В.В. Ткачев, Ю.А. Саяпин, Г.В. Шилов // Журнал структурной химии. - 2015. - Т. 56. - №. 6. - С. 1208-1213

34. Трещалина, Е.М. Иммунодефицитные мыши Balb/c Nude и моделирование различных вариантов опухолевого роста для доклинических исследований / Е.М. Трещалина // Российский биотерапевтический журнал. - 2017. - Т. 16. - С. 6-13.

35. Трещалина, Е.М. Методические указания по изучению противоопухолевой активности фармакологических веществ. / Е.М. Трещалина, О.С. Жукова, Г.К. Герасимова // В кн.: Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. Хабриева Р.У.- М: Медицина; 2005; с. 637-651.

36. Чойнзонов, Е.Л. Рак легкого в Томской области (эпидемиологические аспекты) / Е.Л. Чойнзонов, Л.Д. Жуйкова, О.А. Ананина // Современная онкология. - 2019. - Т. 21. - №2. - С. 6-9.

37. Чойнзонов, Е.Л. Выживаемость больных раком легкого на территории Томской области (2004-2013 гг.) / Е.Л. Чойнзонов, Л.Д. Жуйкова, О.А. Ананина // Сибирский онкологический журнал. - 2017. - 16 (4). С. 5-10.

38. Чойнзонов, Е.Л. Смертность населения Томской области от злокачественных новообразований дыхательной системы / Е.Л. Чойнзонов, Л.Д. Жуйкова, И.Н. Одинцова // Сибирский онкологический журнал. - 2018. - 17 (3). - С. 5-10.

39. Харатишвили, Т.К. Современные представления о возможностях применения перфузионной химиотерапии в лечении злокачественных опухолей / Т.К. Харатишвили, Н.С. Петроченко, Д.А. Буров и соавт. // Саркомы костей, мягких тканей и опухоли кожи. - 2019. - 11(2). - С. 18-24.

40. Янкелевич, М.Я. Использование субтрансплантационных доз периферических стволовых клеток - новый подход к преодолению гематологической токсичности многократных интенсивных курсов химиотерапии у детей / М.Я. Янкелевич, И.С. Долгополов, Л.Ю. Андреева // Вестник Российской Академии медицинских наук. - 2000. - № 6. - С. 21-24.

41. Aasen, T. Gap junctions and cancer: Communicating for 50 years / T. Aasen, M. Mesnil, C.C. Naus et al. //Nat. Rev. Cancer. - 2016. - Vol. 16. P. 775-788.

42. Ahn, J.-H. Anticancer Activity of Gukulenin A Isolated from the Marine Sponge Phorbas gukhulensis In Vitro and In Vivo / J.-H. Ahn, J.-H. Woo, J.-R. Rho et al. // Marine Drugs. - 2019. - Vol. 17(2). - P. 126. https://doi.org/10.3390/md17020126

43. Albayrak, G. Memantine shifts cancer cell metabolism via AMPK1/2 mediated energetic switch in A549 lung cancer cells / G. Albayrak, K.F. Demirtas // EXCLI Journal. - 2021. - Vol. 20. - P. 223-231. https://doi.org/10.17179/excli2020-2890

44. Alkadi, H. Colchicine: A Review on Chemical Structure and Clinical Usage. Infect // Disord. Drug Targets. - 2018. - Vol. 18(2). - P.105-121. doi: 10.2174/1871526517666171017114901.

45. Artigiani, N.R. Ki-67 expression score correlates to survival rate in gastrointestinal stromal tumors (GIST) / N.R. Artigiani, A.F. Logullo, J.N. Stavale // Acta Cir. Bras. - 2012/ - Vol. 27. P. 315-321.

46. Bai, L. Research progress in modern structure of platinum complexes / L. Bai, Ch. Gao, Q. Liu et al.// Eur. J. Med. Chem. - 2017. - Vol. 140. - P. 349-382. https://doi.org/10.1016/j.ejmech.2017.09.034.

47. Bang, D.N. Chemlnform Abstract: Synthesis and Cytotoxic Activity of [Benzo[b][1,4]oxazepino[7,6,5-de]quinolin-2-yl]-1,3-tropolones / D.N. Bang, Yu.A. Sayapin, H.L. Nguyen et al. // Chemistry of Heterocyclic Compounds. - 2015. -Vol. 51(3). - P. 291-294. doi: 10.1007/s10593-015-1697-2.

48. Berridge, M.V. Tetrazolium dyes as tools in cell biology: new insights into their cellular reduction / M.V. Berridge, P.M. Herst, A.S. Tan // Biotechnology Annual Review. - 2005. Vol. 11. - P. 127—152. https://doi.org/10.1016/S1387-2656(05)11004-7.

49. Bhattacharyya, B. Antimitotic activity of colchicine and the structural basis for its interaction with tubulin / B. Bhattacharyya, D. Panda, S. Gupta et al. // Med. Res. Rev. - 2008. Vol. 28. P. 155e83. doi: 10.1002/med.20097.

50. Borner, M.M. Expression of apoptosis regulatory proteins of the Bcl-2 family and p53 in primary resected non-small-cell lung cancer / M.M. Borner, P. Brousset, B. Pfanner-Meyer et al. // Br. J. Cancer. - 1999. - Vol. 79. - P. 952-958.

51. Brown, J.M. The role of apoptosis in cancer development and treatment response / J.M. Brown, L.D. Attardi // Nat. Rev. Cancer. - 2005. Vol. 5. - P. 231-237.

52. Coburn, J.M. Engineering Biomaterial-Drug Conjugates for Local and Sustained Chemotherapeutic Delivery / J.M. Coburn, D.L. Kaplan // Bioconjug Chem. - 2015. Vol. 26 (7). P. 1212-1223. doi:10.1021/acs.bioconjchem.5b00046

53. Colchicum autumnale L. Bulbs. Saudi Journal of Biological Sciences. - 2019. -Vol. 26(2). - P. 345-351. https://doi.org/10.1016Zj.sjbs.2018.10.003

54. Casado, S. Predictive value of P53, BCL-2, and BAX in advanced head and neck carcinoma / S. Casado, J. Forteza, S. Dominguez et al. // Am J Clin Oncol. - 2002. -Vol. 25 (6). - P. 588-590. 10.1097/00000421-200212000-00012

55. Chan J. The role of tumor DNA as a diagnostic tool for head and neck squamous cell carcinoma / J. Chan, G. Zhen, N. Agrawal // Semin Cancer Biol. - 2019. - Vol. 55. - P. 1-7. 10.1016/j.semcancer.2018.07.008

56. Cheff, D.M. A drug of such damned nature.1 Challenges and opportunities in translational platinum drug research / D.M. Cheff, M.D. Hall // J. Med. Chem. -2017. - Vol. 60. - P. 4517-4532. doi: 10.1021/acs.jmedchem.6b01351.

57.Chen, P. Synergistic inhibitory effect of berberine and icotinib on non-small cell lung cancer cells via inducing autophagic cell death and apoptosis / P. Chen, C.H. Dai, Z.H. Shi // Apoptosis. - 2021. - Vol. 26. - P. 639-656. https://doi.org/10.1007/s10495-021-01694-w

58. Chen, S.-M. Hinokitiol up-regulates miR-494-3p to suppress BMI1 expression and inhibits self-renewal of breast cancer stem/progenitor cells / S.-M. Chen, B.-Y. Wang, C.-H. Lee et al. // Oncotarget. - 2017. - Vol. 8(44). - P. 76057-76068. www.impactjournals.com/oncotarget/

59. Chen, W.-J. Hinokitiol Induces DNA Damage and Autophagy followed by Cell Cycle Arrest and Senescence in Gefitinib-Resistant Lung Adenocarcinoma Cells / W.-J. Chen, C.-C. Wang, M.-Y. Yen et al. // PlosOne. - 2014. - Vol. 9(8). - P. e104203/ https://doi.org/10.1371/journal.pone.0104203/

60. Chen, Q. Carcinoma-astrocyte gap junctions promote brain metastasis by cgamp transfer / Q. Chen, A. Boire, X. Jin et al. // Nature. - 2016. - Vol. 533. - P. 493498.

61. Ciancio, N. Prognostic value of p53 and Ki67 expression in fiberoptic bronchial biopsies of patients with non small cell lung cancer / N. Ciancio, M.G. Galasso, R. Campisi et al. // Multidiscip. Respir. Med. - 2012. - Vol. 7. - P. 29.

62. Conroy, JD. Canine skin tumours / JD. Conroy // J Am Anim Hosp Assoc. - 1983. -Vol. 19. - P. 91-114.

63. Cottrell, S. Molecular analysis of APC mutations in familial adenomatous polyposis and sporadic colon carcinomas / S. Cottrell, D. Bicknell, L. Kaklamanis et al. // Lancet. - 1992. - Vol. 340. - P. 626-30.

64. Cuylen, S. Ki-67 acts as a biological surfactant to disperse mitotic chromosomes / S. Cuylen, C. Blaukopf, A.Z. Politi et al. // Nature. - 2016. - Vol. 535. P. 308-312.

65. Data source: GLOBOCAN 2018. Global Cancer Observatory. International Agency for Research on Cancer 2019 // http://gco.iarc.fr/today/online-analysis/

66. DeRose, Y.S. Tumor grafts derived from women with breast cancer authentically reflect tumor pathology, growth, metastasis and disease outcomes / Y.S. DeRose // Nat. Med. - 2011. - Vol. 17. - P. 1514-1520.

67. Elagawany, M. Identification of 4-isopropyl-thiotropolone as a novel antimicrobial: regioselective synthesis, NMR characterization, and biological evaluation / M. Elagawany, L. Hegazy, F. Cao et al. // RSC Adv. - 2018. - Vol. 8(52). - P. 29967-29975. doi: 10.1126/science.2475911.

68. Fasching, P.A. Ki67, chemotherapy response, and prognosis in breast cancer patients receiving neoadjuvant treatment / P.A. Fasching, K. Heusinger, L. Haeberle et al. // BMC Cancer. - 2011. - Vol. 11. - P. 486.

69. Fu, W. CAR exosomes derived from effector CAR-T cells have potent antitumour effects and low toxicity / W. Fu, C. Lei, S. Liu et al. // Nat Commun. - 2019. - Vol. 10(1). - P. 4355. doi:10.1038/s41467-019-12321-3

70. Florian, S. Anti-Microtubule Drugs / S. Florian, T.J. Mitchison // Methods Mol Biol. - 2016. - Vol. 1413. - P. 403-21. doi: 10.1007/978-1-4939-3542-0_25.

71. Gerdes, J. Production of a mouse monoclonal antibody reactive with a human nuclear antigen associated with cell proliferation / J. Gerdes, U. Schwab, H. Lemke et al. // Int. J. Cancer. - 1983. - Vol. 31. - P. 13-20.

72. Gerlach, C. Ki-67 expression during rat liver regeneration after partial hepatectomy / C. Gerlach, D.Y. Sakkab, T. Scholzen et al. // Hepatology. - 1997. - Vol. 26. - P. 573-578.

73. Gioacchini, F.M. The clinical relevance of Ki-67 expression in laryngeal squamous cell carcinoma / F.M. Gioacchini, M. Alicandri-Ciufelli, G. Magliulo et al. // Eur Arch Otorhinolaryngol. - 2015. - Vol. 272 (7). - P. 1569-1576. 10.1007/s00405-014-3117-0

74. Gioacchini, F.M. Prognostic value of Bcl-2 expression in squamous cell carcinoma of the larynx: a systematic review / F.M. Gioacchini, M. Alicandri-Ciufelli, C. Rubini et al. // Int J Biol Markers. - 2015. - Vol. 30 (2). - P. e155-e160, 10.5301/jbm.5000116

75.Guo, H. lncRNA FOXD3 AS1 promotes the progression of non small cell lung cancer by regulating the miR 135a 5p/CDK6 axis / H. Guo, S. Lin, Z. Gan // Oncology Letters. - 2021. - Vol. 22 (6). - P. 853. https://doi.org/10.3892/ol.2021.13114

76. Gusakov, E.A. Design, synthesis and biological evaluation of 2-quinolyl-1,3-tropolone derivatives as new anti-cancer agents / E.A. Gusakov, I.A. Topchu, A.M. Mazitova et al. // RSC Advances. - 2021. - Vol. 11. - P. 4555-4571. DOI: 10.1039/d0ra10610k

77. Haney, S.L. Novel tropolones induce the un-folded protein response pathway and apoptosis in multiple myeloma cells / S.L. Haney, Ch. Allen, M.L. Varney et al. // Oncotarget. - 2017. - Vol. 8(44). - P. 76085-76098. https://doi.org/10.18632/oncotarget.18543.

78. Herbst, R.S. The biology and management of non-small cell lung cancer / R.S. Herbst, D. Morgensztern, C. Boshoff // Nature. - 2018. - Vol. 553. - P. 446-454

79. Hidalgo, M. Patient-derived xenograft models: an emerging platform for translational cancer research / M. Hidalgo // Cancer Discovery. - 2014. - Vol. 4. - P. 998-1013.

80. Holohan, C. Cancer drug resistance: an evolving paradigm / C. Holohan, S. Van Schaeybroeck, D.B. Longley et al. // Nat. Rev. Cancer. - 2013. - Vol. 13. - P. 714726. doi: 10.1038/nrc3599.

81. Huang, C.H. Hinokitiol exerts anticancer activity through downregulation of MMPs 9/2 and enhancement of catalase and SOD enzymes: In vivo augmentation of lung histoarchitecture / C.H. Huang, T. Jayakumar, C.C. Chang et al. // Molecules. -2015. - Vol. 20(10). - P. 17720-17734. https://doi.org/10.3390/molecules201017720.

82.Huang, Ch. s-Viniferin and a-viniferin alone or in combination induced apoptosis and necrosis in osteosarcoma and non-small cell lung cancer cells / Ch. Huang, Z.-J. Lin, Ch.-J. Lee // Food and Chemical Toxicology. - 2021. - Vol. 158. - P. 112617. https://doi.org/10.1016/j.fct.2021.112617.

83. Huang, M.-H. Physical characteristics, antimicrobial and odontogenesis potentials of calcium silicate cement containing hinokitiol / M.-H. Huang, Y.-F. Shenb, T.-T. Hsu // Materials Science and Engineering. - 2016. - Vol. 65. - P. 1-8.

84.Huang, T. RablA promotes IL-4R/JAK1/STAT6-dependent metastasis and determines JAK1 inhibitor sensitivity in non-small cell lung cancer / T. Huang, B. Chen, F. Wang et al. // Cancer Letters. - 2021. - Vol. 523. - P. 182-194. https://doi.org/10.1016/j.canlet.2021.10.008.

85. Ido, Y. Induction of apoptosis by hinokitiol, a potent iron chelator, in tera-tocarcinoma F9 cells is mediated through the activation of caspase-3 / Y. Ido, N. Muto, A. Inada et al. // Cell Prolif. - 1999. - Vol. 32(1). - P. 63-73. doi: 10.1046/j.1365-2184.1999.3210063.x.

86. Ioachim, E. Expression patterns of cyclins D1, E in laryngeal epithelial lesions: correlation with other cell cycle regulators (p53, pRb, Ki-67 and PCNA) and clinicopathological features / E. Ioachim, D. Peschos, A. Goussia et al. // J Exp Clin Res. - 2004. - Vol. 23 (2). - P. 277-283.

87. Ishihara, M. Quantitative Structure-Cytotoxicity Relationship of Newly Synthesized Tropolones Determined by a Semiempirical Molecular-orbital Method (PM5) / M. Ishihara, H. Wakabayashi, N. Motohashi et al. // Anticancer Research. - 2010. -Vol. 30. - P. 129-134. PMID: 21378332.

88.Isobe, T. Evaluation of Novel Orthotopic Nude Mouse Models for Human Small-Cell Lung Cancer / T. Isobe, A. Onn, D. Morgensztern et al. // Journal of Thoracic Oncology. - 2013. - Vol. 8 (2). - P. 140-146. https://doi.org/10.1097/JT0.0b013e3182725ff9.

89. Iwatsuki, M. In vitro and in vivo antimalarial activity of puberulic acid and its new analogs, viticolins A-C, produced by Penicillium sp. FKI-4410 / M. Iwatsuki, S. Takada, M. Mori et al. // J Antibiot. - 2011. - Vol. 64. - P. 183-188. https://doi.org/10.1038/ja.2010.124

90. Jayakumar, T. Hinokitiol Inhibits Migration of A549 Lung Cancer Cells via Suppression of MMPs and Induction of Antioxidant Enzymes and Apoptosis / T.

Jayakumar, C.-H. Liu, G.-Y. Wu et al. // Int. J. Mol. Sci. - 2018. - Vol. 19. - P. 939. doi: 10.3390/ijms19040939

91. Jansen van Vuuren, L. Crystal structure of 2-(methyl-amino)-tropone / L. Jansen van Vuuren, H.G. Visser, M. Schutte-Smith // Acta Crystallogr E Crystallogr Commun. - 2019. - Vol. 75(Pt 8). - P. 1128-1132. doi: 10.1107/S2056989019009502.

92. Jäckel, M.C. Spontaneous apoptosis in laryngeal squamous cell carcinoma is independent of bcl-2 and bax protein expression / M.C. Jäckel, M.A. Dorudian, D. Marx et al. // Cancer. - 1999. - Vol. 85 ( 3 ). - P. 591 - 599.

93. James, C.C. Altered translation initiation of gja1 limits gap junction formation during epithelial-mesenchymal transition / C.C. James, M.J. Zeitz, P.J. Calhoun // Mol. Biol. Cell. - 2018.

94.Kan, J. He-Chan Pian inhibits the metastasis of non-small cell lung cancer via the miR-205-5p-mediated regulation of the GREM1/Rap1 signaling pathway / J. Kan, B. Fu, R. Zhou // Phytomedicine. - 2021. - Vol. 94. - P. 153821. https://doi.org/10.1016/j.phymed.2021.153821.

95. Kantorowski, E.J. Expansion to Seven-Membered Rings / E.J. Kantorowski, M.J. Kurth // Tetrahedron. - 2000. - Vol. 56. - P. 4317-4353. doi: 10.1016/S0040-4020(00)00218-0.

96. Kim, K.I. Ki-67 as a predictor of response to neoadjuvant chemotherapy in breast cancer patients / K.I. Kim, K.H. Lee, T.R. Kim et al. // J. Breast Cancer. - 2014. -Vol. 17. - P. 40-46.

97. Kim, P.J. Survivin and molecular pathogenesis of colorectal cancer / P.J. Kim, J. Plescia, H. Clevers et al. // Lancet. - 2003. - Vol. 362. - P. 205- 209.

98. Kinzler, K.W. Identification of FAP locus genes from chromosome 5q21 / K.W. Kinzler, M.C. Nilbert, L.K. Su et al. // Science. - 1991. - Vol. 253. - P. 661- 5.

99. Kurek, J. Antifungal, anticancer, and docking studies of colchiceine complexes with monovalent metal cation salts / J. Kurek, P. Kwasniewska-Sip, K. Myszkowski // Chem Biol Drug Des. - 2019. - Vol. 94(5). - P. 1930-1943. doi: 10.1111/cbdd.13583

100. Larue, L. The WNT/Beta-catenin pathway in melanoma / L. Larue, V. Delmas // Front Biosci. - 2006. - Vol. 11. - P. 733- 742.

101. Lee, Y.-S. Hinokitiol Inhibits Cell Growth through Induction of S-Phase Arrest and Apoptosis in Human Colon Cancer Cells and Suppresses Tumor Growth in a Mouse Xenograft Experiment / Y.-S. Lee, K.-M. Choi, W. Kim et al. // J. Nat. Prod.- 2013.

- Vol. 76. - P. 2195-2202. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0104203

102. Leemans, C.R. The molecular biology of head and neck cancer / C.R. Leemans, B.J. Braakhuis, R.H. Brakenhoff et al. // Nat Rev Cancer. - 2011. - Vol. 11 (1). - P. 9-22, 10.1038/nrc2982

103. Lennon, S. Wheelchair transfer naining in a snoke parient wim neglect: A single case study design / S. Lennon // Physiotherapy Theory and Practice. - 1991. - Vol. 7.

- P. 51-55.

104. Li, J. Novel a-substituted tropolones promote potent and selective caspase-dependent leukemia cell apoptosis / J. Li, E.R. Falcone, S.A. Holstein et al. // Pharmacol Res. - 2016. - Vol. 113 (Pt A). - P. 438-448. doi: 10.1016/j.phrs.2016.09.020.

105. Li, J. Hinokitiol reduces matrix metalloproteinase expression by inhibiting Wnt/p-Catenin signaling in vitro and in vivo / J. Li, X. Zhou, K. Yang et al. // International Immunopharmacology. - 2014. - Vol. 23. - P. 85-91.

106. Li, L.-H. Hinokitiol Induces DNA Damage and Autophagy followed by Cell Cycle Arrest and Senescence in Gefitinib-Resistant Lung Adenocarcinoma Cells / L.-H. Li, P. Wu, J.-Y. Lee et al. // PLoS ONE. - 2014. - Vol. 9(8). - P. e104203. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0104203

107. Li, S. Endocrine-therapy-resistant ESR1 variants revealed by genomic characterization of breast-cancer-derived xenografts / S. Li // Cell Rep. - 2013. -Vol. 4. - P. 1116-1130.

108. Lin, Y.P. Gjb4 serves as a novel biomarker for lung cancer and promotes metastasis and chemoresistance via src activation / Y.P. Lin, J.I. Wu, Tseng // Oncogene. - 2019. - Vol. 38. - P. 822-837.

109. Lin, Y. EGFR-TKI resistance in NSCLC patients: Mechanisms and strategies / Y. Lin, X. Wang, H. Jin et al. // American Journal of Cancer Research. - 2014. - Vol. 4. - P. 411- 435.

110. Lin, Z.-Y. Anticancer effects of clinically acceptable colchicine concentrations on human gastric cancer cell lines / Z.-Y. Lin, C. Kuo, D. Wu et al. // The Kaohsiung Journal of Medical Sciences. - 2016. - Vol. 32. - P. 68-73. doi:10.1016/j.kjms.2015.12.006.

111. Liu, S. Hinokitiol, a metal chelator derived from natural plants, suppresses cell growth and disrupts androgen receptor signaling in prostate carcinoma cell lines / S. Liu, H. Yamauchi // Biochem Biophys Res Commun. - 2006. - Vol. 351(1). - P. 26-32. doi: 10.1016/j.bbrc.2006.09.166.

112. Lucero, O.M. A re-evaluation of the "oncogenic" nature of Wnt/p-catenin signaling in melanoma and other cancers / O.M. Lucero, D.W. Dawson, R.T. Moon et al. // Curr Oncol Rep. - 2010. - Vol. 12. - P. 314- 318.

113. Lu, M.L. Impact of alterations affecting the p53 pathway in bladder cancer on clinical outcome, assessed by conventional and array-based methods / M.L. Lu, F. Wikman, T.F. Orntoft et al. // Clin Cancer Res. - 2002. - Vol. 8 ( 1 ). - P. 171 -179.

114. Ma, X. Ki67 Proliferation index as a histopathological predictive and prognostic parameter of oral mucosal melanoma in patients without distant metastases / X. Ma // J. Cancer. - 2017. - Vol. 8. - P. 3828-3837. https://doi.org/10.7150/jca.20935.

115. Magori, N. Hinokitiol inhibits compound action potentials in the frog sciatic nerve / N. Magori, T. Fujita, E. Kumamoto // Eur J Pharmacol. - 2018. - Vol. 819. -P. 254-260. doi: 10.1016/j.ejphar.2017.12.014. Epub 2017 Dec 7. PMID: 29225186.

116. Maldonado, E.N. Freetubulin modulates mitochondrial membrane potential in cancer cells / E.N. Maldonado, J. Patnaik, M.R. Mullins et al. // Cancer Res. - 2010.

- Vol. 70. - P. 10192e201. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-10-2429.

117. Martin, T.A. Loss of tight junction barrier function and its role in cancer metastasis / T.A. Martin, W.G. Jiang // Biochim Biophys Acta. - 2009. - Vol. 1788.

- P. 872-91.

118. Matsumura, E. Cytotoxicity of the Hinokitiol-Related Compounds, y-Thujaplicin and ß -Dolabrin / E. Matsumura, Y. Morita, T. Date // Biol. Pharm. Bull. - 2001. -Vol. 24(3). - P. 299-302. doi: 10.1248/bpb.24.299

119. Menachem, A. Intercellular transfer of small rnas from astrocytes to lung tumor cells induces resistance to chemotherapy / A. Menachem, V. Makovski, O. Bodner et al. // Oncotarget. - 2016. - Vol. 7. - P. 12489-12504.

120. Miller, I. Ki67 is a Graded Rather than a Binary Marker of Proliferation versus Quiescence / I. Miller, M. Min, C. Yang et al. // Cell Rep. - 2018. - Vol. 24. - P. 1105-1112.e5.

121. Modlin, I.M. Priorities for improving the management of gastroenteropancreatic neuroendocrine tumors / I.M. Modlin, S.F. Moss, D.C. Chung et al. // J. Natl. Cancer Inst. - 2008. - Vol. 100. - P. 1282-1289.

122. Moreira-Pais, A. Platinum-induced muscle wasting in cancer chemotherapy: Mechanisms and potential targets for therapeutic intervention / A. Moreira-Pais, R. Ferreira, R.G. da Costa // Life Sciences. - 2018. - Vol. 208. - P. 1-9. https://doi.org/10.1016/jlfs.2018.07.010.

123. Morin, P.J. Activation of beta-catenin-Tcf signaling in colon cancer by mutations in beta-catenin or APC / P.J. Morin, A.B. Sparks, V. Korinek et al. // Science. -1997. - Vol. 275. - P. 1787-90.

124. Morita, Y. Biological Activity of 4-Acetyltropolone, the Minor Component of Thujopsis dolabrata Sieb. et Zucc. hondai Mak / Y. Morita, E. Matsumura, H. Tsujibo // Biol. Pharm. Bull. - 2002. - Vol. 25(8). - P. 981—985. doi: 10.1248/bpb.25.981.

125. Morita, Y. Biological Activity of ß -Dolabrin, y -Thujaplicin, and 4-Acetyltropolone, Hinokitiol-Related Compounds / Y. Morita, E. Matsumura, T. Okabe et al. // Biol. Pharm. Bull. - 2004. - Vol. 27(10). - P. 1666-1669.

126. Morita, Y. Biological Activity of a -Thujaplicin, the Isomer of Hinokitiol / Y. Morita, E. Matsumura, T. Okabe // Biol. Pharm. Bull. - 2004. - Vol. 27(6). - P. 899—902.

127. Munemitsu, S. Regulation of intracellular beta-catenin levels by the adenomatous polyposis coli (APC) tumor-suppressor protein / S. Munemitsu, I. Albert, B. Souza et al. // Proc Natl Acad Sci USA. - 1995. - Vol. 92. - P. 3046- 50.

128. Nakano, H. Human Metallothionein Gene Expression Is Upregulated by b -Thujaplicin: Possible Involvement of Protein Kinase C and Reactive Oxygen Species / H. Nakano, S. Ikenaga, T. Aizu et al. // Biol. Pharm. Bull. - 2006. - Vol. 29(1). - P. 55—59.

129. Nanjoo, S. Combination of Atorvastatin with Sulindac or Naproxen Profoundly Inhibits Colonic Adenocarcinomas by Suppressing the p65/ß-Catenin/Cyclin D1 Signaling Pathway in Rats / S. Nanjoo, S.R. Bandaru, A. DeCastro, et al. // Cancer prevention research. - 2011. - Vol. 4(11). DOI: 10.1158/1940-6207.

130. Nelson, W.J. Convergence of Wnt, beta-catenin, and cadherin pathways / W.J. Nelson, R. Nusse // Science. - 2004. - Vol. 303. - P. 1483-1487.

131. Neijssen, J. Cross-presentation by intercellular peptide transfer through gap junctions / J. Neijssen, C. Herberts, J.W. Drijfhout et al. // Nature. - 2005. -Vol. 434. - P. 83- 88.

132. Oliveira, R. Contribution of gap junctional communication between tumor cells and astroglia to the invasion of the brain parenchyma by human glioblastomas / R. Oliveira, C. Christov, J.S. Guillamo et al. // BMC Cell Biol. - 2005. - Vol. 6. - P. 7.

133. Ononye, S.N. Studies on the antiproliferative effects of tropolone derivatives in Jurkat T-lymphocyte cells / S.N. Ononye, M.D. Van Heyst, C. Giardina et al. // Bioorg Med Chem. - 2014. - Vol. 22(7). - P. 2188-2193. doi: 10.1016/j.bmc.2014.02.018.

134. Onn, A. Development of an Orthotopic Model to Study the Biology and Therapy of Primary Human Lung Cancer in Nude Mice / A. Onn, T. Isobe, S. Itasaka et al. // Clin Cancer Res. - 2003. - Vol. 9 (15). - P. 5532-5539.

135. Onn, A. Epidermal Growth Factor Receptor Tyrosine Kinase Inhibitor Does Not Improve Paclitaxel Effect in an Orthotopic Mouse Model of Lung Cancer / A. Onn, T. Isobe, W. Wu et al. // Clin Cancer Res. - 2004. - Vol. 10 (24). - P. 8613-8619. DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-04-1241

136. Parkin, D.M. Global cancer statistics / D.M. Parkin, F. Bray, J. Ferlay et al. // // CA Cancer Journal for Clinicians. - 2005. - Vol. 55. - P. 74-108.

137. Pascale, M. The proliferation marker Ki67, but not neuroendocrine expression, is an independent factor in the prediction of prognosis of primary prostate cancer patients / M. Pascale // Radiol. Oncol. - 2016. - Vol. 50. - P. 313-320. https://doi.org/10.1515/raon-2016-0033.

138. Petitjean, A. Impact of mutant p53 functional properties on TP53 mutation patterns and tumor phenotype: lessons from recent developments in the IARC TP53 database / A. Petitjean, E. Mathe, S. Kato et al. // Hum Mutat. - 2007. - Vol. 28 ( 6 ). - P. 622 - 629 , 10.1002/humu.20495

139. Poeta M.L. TP53 mutations and survival in squamous-cell carcinoma of the head and neck / M.L. Poeta, J. Manola, M.A. Goldwasser et al. // N Engl J Med. - 2007.

- Vol. 357 ( 25 ). - P. 2552 - 2561 , 10.1056 / NEJMoa073770

140. Polakis, P. Wnt signaling and cancer / P. Polakis // Genes Dev. - 2000. - Vol. 14.

- P. 1837- 51.

141. Polakis, P. The many ways of Wnt in cancer / P. Polakis // Curr Opin Genet Dev.

- 2007. - Vol. 17. - P. 45- 51.

142. Preusser, M. Ki67 index in intracranial ependymoma: A promising histopathological candidate biomarker / M. Preusser // Histopathology. - 2008. -Vol. 53. - P. 39-47. https://doi.org/10.1111/j.1365-2559.2008.03065.x.

143. Raimbourg, J. Sensitization of EGFR Wild-Type Non-Small Cell Lung Cancer Cells to EGFR-Tyrosine Kinase Inhibitor Erlotinib / J. Raimbourg, M.P. Joalland, M. Cabart et al. // Mol Cancer Ther. - 2017. - Vol. 16(8). - P. 1634-1644. doi: 10.1158/1535-7163.MCT-17-0075. Epub 2017 May 18. PMID: 28522592

144. Rashad, U.M. Alterations of p53 and Bcl-2 protein expression in the recurrent laryngeal and pharyngeal squamous cell carcinoma / U.M. Rashad, M.R. Hussein, S.M. Algizawy et al. // Am J Otolaryngol. - 2011. - Vol. 32 (3). - P. 210-214, 10.1016/j.amjoto.2010.01.012

145. Rubinfeld, B. Association of the APC gene product with beta-catenin / B. Rubinfeld, B. Souza, I. Albert et al. // Science. - 1993. - Vol. 262. - P. 1731- 4.

146. Russell, W.M.S. The principles of humane ex- perimental technique / W.M.S. Russell, R.L. Birch - Methuen, London. - 1959. - 258 p.

147. el-Sabban, M.E. Adhesion-mediated gap junctional communication between lung-metastatatic cancer cells and endothelium / M.E. el-Sabban, B.U. Pauli // Invasion Metastasis. - 1994. - Vol. 14. - P. 164-176.

148. Sad, K. Prochlorperazine enhances radiosensitivity of non-small cell lung carcinoma by stabilizing GDP-bound mutant KRAS conformation / K. Sad, P. Parashar, P. Tripathi et al. // Free Radical Biology and Medicine. - 2021. - Vol. 177. - P. 299-312. https://doi.org/ 10.1016/j.freeradbiomed.2021.11.001.

149. Sayapin, Yu.A., Komissarov, V.N., Bang, D.N., Dorogan, I.V., Minkin, V.I., Tkachev, V.V., Aldoshin, S.M., Shilov, G.V., Charushin, V.N. // Mend. Commun. -2008. - Vol. 18 (4). - P. 180-182.

150. Sayapin, Y.A. 2-Hetaryl-1,3-tropolones based on five-membered nitrogen heterocycles: synthesis, structure and properties / Y.A. Sayapin, I.O. Tupaeva, A.A. Kolodina et al. // Beilstein J Org Chem. - 2015. - Vol. 11. - P. 2179-88. doi: 10.3762/bjoc.11.236. PMID: 26664640; PMCID: PMC4661002

151. Seo, J.S. Hinokitiol induces DNA demethylation via DNMT1 and UHRF1 inhibition in colon cancer cells / J.S. Seo, Y.H. Choi, J.W. Moon et al. // BMC Cell Biology. - 2017. - Vol. 18 (1). - P. 14. doi: 10.1186/s12860-017-0130-3.

152. Shirendeb, U. Human papillomavirus infection and its possible correlation with p63 expression in cervical cancer in Japan, Mongolia, and Myanmar / U. Shirendeb, Y. Hishikawa, S. Moriyama et al. // Acta Histochem. Cytochem. - 2009. - Vol. 42.

- P. 181-190.

153. Shih, Y.H. In vitro antimicrobial and anticancer potential of hinokitiol against oral pathogens and oral cancer cell lines / Y.H. Shih, K.W. Chang, S.M. Hsia et al. // Microbiol. Res. - 2013. - Vol. 168 (5). - P. 254-262. https://doi.org/10.1016/j.micres.2012.12.007.

154. Sorbye, S.W. Prognostic impact of Jab1, p16, p21, p62, Ki67 and Skp2 in soft tissue sarcomas / S.W. Sorbye, T.K. Kilvaer, A. Valkov et al. // PLoS ONE. - 2012.

- Vol. 7. - P. e47068.

155. Streets, P.T. The anti-apoptotic members of the Bcl-2 family are attractive tumor-associated antigens / P.T. Streets, M.H. Andersen // Oncotarget. - 2010. - Vol. 1 (4). - P. 239-245, 10.18632/oncotarget.100804

156. Soussi, T. p53 alterations in human cancer: more questions than answers / T. Soussi // Oncogene. - 2007. - Vol. 26 (15). - P. 2145-2156, 10.1038/sj.onc.1210280

157. Sullivan, J.P. Tumor Oncogenotypes and Lung Cancer Stem Cell Identity / J.P. Sullivan, J.D. Minna // Cell Stem Cell. - 2010. - Vol. 7. - P. 2-4. https://doi.org/10.1016/j.stem.2010.05.021Get rights and content

158. Szadvari, I. Athymic Nude Mice as an Experimental Model for Cancer Treatment / I. Szadvari, O. Krizanova, P. Babula // Physiol. Res. - 2016. - Vol. 65 (4). - P. 441-453. https://doi.org/ 10.33549/physiolres.933526

159. Tkachev, V.V. Structure of 2-(benzoxazole-2-yl)- 5,7-di(tert-butyl)-4-nitro-1,3-tropolone / V.V. Tkachev, G.V. Shilov, S.M. Aldoshin // Journal of Structural Chemistry. - 2018. - Vol. 59(1). - P. 197-200. doi: 10.1134/S0022476618010316.

160. Tsao, Y-T. Hinokitiol Inhibits Melanogenesis via AKT/mTOR Signaling in B16F10 Mouse Melanoma Cells / Y-T. Tsao, Y-F. Huang, C-Yu. Kuo et al. // Int. J. Mol. Sci. - 2016. - Vol. 17. - P. 248; doi: 10,3390 / ijms17020248

161. Tu, D.G. Hinokitiol inhibits vasculogenic mimicry activity of breast cancer stem/progenitor cells through proteasome-mediated degradation of epidermal growth factor receptor / D.G. Tu, Y. Yu, C.H. Lee et al. // Oncol Lett. - 2016. - Vol. 11(4). - P. 2934-2940. doi: 10.3892/ol.2016.4300

162. de Vicente, J.C. Prognostic significance of p53 expression in oral squamous cell carcinoma without neck noted metastases / J.C. de Vicente, L.M. Junquera Gutierrez, A.H. Zapatera et al. // Head Neck. - 2004. - Vol. 26 (1). - P. 22, 10.1002/hed.10339

163. Wakabayashi, H. Hormetic Response of Cultured Normal and Tumor Cells to 2-Aminotropone Derivatives / H. Wakabayashi, T. Narita, A. Suga // In vivo. - 2010. - Vol. 24. - P. 39-44.

164. Wang, L. Cancer-associated fibroblasts contribute to cisplatin resistance by modulating ANXA3 in lung cancer cells / L. Wang, X. Li, Y. Ren t al. // Cancer Sci. - 2019. - Vol. 110(5). - P. 1609-1620. doi: 10.1111/cas.13998. Epub 2019 Apr 9. PMID: 30868675; PMCID: PMC6500998

165. Warth, A. Tumour cell proliferation (Ki-67) in non-small cell lung cancer: A critical reappraisal of its prognostic role / A. Warth, J. Cortis, A. Soltermann et al. // Br. J. Cancer. - 2014. - Vol. 111. - P. 1222-1229.

166. Weiss, I.D. In the Hunt for Therapeutic Targets: Mimicking the Growth, Metastasis, and Stromal Associations of Early-Stage Lung Cancer Using a Novel Orthotopic Animal Model / I.D. Weiss, E. Ella, O. Dominsky et al. // Journal of Thoracic Oncology. - 2015. - Vol. 10 (1). - P. 46-58. https://doi.org/10.1097/JTO.0000000000000367.

167. Westover, D. Mechanisms of acquired resistance to first- and second-generation EGFR tyrosine kinase inhibitors / D. Westover, J. Zugazagoitia, B.C. Cho et al. // Annals of Oncology. - 2018. - Vol.29. - P. i10- i19.

168. Williams, S.A. Patient-derived xenografts, the cancer stem cell paradigm, and cancer pathobiology in the 21st century / S.A. Williams, W.C. Anderson, M.T. Santaguida et al. // Laboratory Investigation. - 2013. - Vol. 93. - P. 970-82.

169. Wilson, A.N. Method for Orthotopic Transplantation of Lung Cancer in Mice. Li X. (eds) Hedgehog Signaling / A.N. Wilson, B. Chen, X. Liu et al. // Methods in Molecular Biology. - 2021. - P. 2374. https://doi.org/10.1007/978-1-0716-1701-4_20

170. Wu, W. Targeted therapy of orthotopic human lung cancer by combined vascular endothelial growth factor and epidermal growth factor receptor signaling blockade / W. Wu, A. Onn, T. Isobe et al. // Mol Cancer Ther. - 2007. - Vol. 6 (2). - P. 471483. DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-06-0416

171. Yamato, M. Synthesis and antitumor activity of tropolone derivatives. 7. Bistropolones containing connecting methylene chains / M. Yamato, J. Ando, K. Sakaki et al. // J Med Chem. - 1992. - Vol. 35(2). - P. 267-73. doi: 10.1021/jm00080a010

172. Yan, J. Relation between Ki-67, ER, PR, Her2/neu, p21, EGFR, and TOP II-alpha expression in invasive ductal breast cancer patients and correlations with prognosis / J. Yan // Asian Pac. J. Cancer Prev. APJCP. - 2016. - Vol. 16. - P. 823-829.

173. Zhao, J. Plant Troponoids: Chemistry, Biological Activity, and Biosynthesis / J. Zhao // Curr. Med. Chem. - 2007. - Vol. 14(24). - P. 2597-2621. doi : 10.2174/092986707782023253.

174. Zhao, W.-Y. Prognostic value of Ki67 index in gastrointestinal stromal tumors / W.-Y. Zhao, J. Xu, M. Wang et al. // Int. J. Clin. Exp. Pathol. - 2014. - Vol. 7. - P. 2298-2304.

175. Zhang, G. ß-Thujaplicin induces autophagic cell death, apoptosis, and cell cycle arrest through ROS-mediated Akt and p38/ERK MAPK signaling in human hepatocellular carcinoma / G. Zhang, J. He, X. Ye et al. // Cell Death and Disease. -2019. - Vol. 10. - P. 255. https://doi.org/10.1038/s41419-019-1492-6

176. Zhang, L. Natural product ß-thujaplicin inhibits homologous recombination repair and sensitizes cancer cells to radiation therapy / L. Zhang, Y. Peng, I.P. Uray et al. // DNA Repair. - 2017. - Vol. 60. - P. 89-101. doi: 10.1016/j.dnarep.2017.10.009

177. Zhu, Y.-J. Inhibitory effects of hinokitiol on tyrosinase activity and melanin biosynthesis and its antimicrobial activities / Y.-J. Zhu, L. Qiu, J.-J. Zhou // Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry. - 2010. - Vol. 25(6). - P. 798-803.