Использование клубней георгины простой как альтернативного источника получения инулина тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат фармацевтических наук Ананьина, Нина Александровна

• Ананьина, Нина Александровна
• кандидат фармацевтических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Ананьина, Нина Александровна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 «Нерастворимое пищевое волокно» инулин. Характеристика. Особенности химического строения. Источники получения.

1.2 Фармакологическая активность инулина. Перспективы применения биологически активных добавок и пищевых продуктов, содержащих инулин.

Выводы по обзору литературы.

ГЛАВА 2 ИЗУЧЕНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА КЛУБНЕЙ ГЕОРГИНЫ ПРОСТОЙ (DAHLIA SINGLE L.).

2.1 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

2.1.1 Аминокислоты.

2.1.2 Белки.

2.1.3 Макро- и микроэлементный состав.

2.1.4 Углеводы.

2.1.5 Органические кислоты.

2.1.6 Стерины.

2.1.7 Полифенольные соединения.

2.1.7.1 ВЭЖХ-анализ спиртовых и водно-спиртовых извлечений клубней георгины простой.

2.1.7.2 Кумарины.

2.1.7.3 Фенолкарбоновые кислоты.

2.1.7.4 Дубильные вещества.

2.2 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.2.1 Определение товароведческих показателей сырья.

2.2.2 Аминокислоты.

2.2.3 Белки.

2.2.4 Макро- и микроэлементный состав.

2.2.5 Углеводы.

2.2.6 Органические кислоты.

2.2.7 Полифенольные соединения.

Выводы по главе 2.

ГЛАВА 3 ПОЛУЧЕНИЕ ИНУЛИНА ИЗ КЛУБНЕЙ ГЕОРГИНЫ ПРОСТОЙ. СТАНДАРТИЗАЦИЯ ПОЛУЧЕННОГО ИНУЛИНА.

3.1 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

3.1.1 Обоснование выбора георгины простой (Dahlia single L.) в качестве инулинсодержащего сырья.

3.1.2 Разработка методики получения и очистки инулина из клубней георгины простой.

3.1.3 Определение показателей качества высокоочищенного инулина, полученного из клубней георгины простой.

3.2 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

3.2.1 Определение показателей качества высокоочищенного инулина, полученного из клубней георгины простой.

Выводы по главе 3.

ГЛАВА 4 КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ ИНУЛИНА ИЗ КЛУБНЕЙ ГЕОРГИНЫ ПРОСТОЙ.

3.1 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

4.1.1 Качественное определение инулина в клубнях георгины простой.

4.1.2 Усовершенствование методики количественного определения инулина в клубнях георгины простой.

4.1.3 Валидация методики количественного определения инулина в сырье.

4.2 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

4.2.1 Определение инулина в клубнях георгины простой.

4.2.2 Количественное определение инулина в клубнях георгины простой.

Выводы по главе 4.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Использование клубней георгины простой как альтернативного источника получения инулина»

Актуальность проблемы. Среди эндокринных заболеваний на долю сахарного диабета приходится примерно 70%. Смертность от данного заболевания занимает третье место после сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний.

Ассортимент противодиабетических лекарственных средств для перорального применения условно подразделяют на две группы — химико-фармацевтические противодиабетические препараты и гипогликемические средства на основе лекарственных растений.

В настоящее время фитотерапия является одним из распространённых методов профилактики и лечения инсулиннезависимого сахарного диабета, в связи с чем широкое применение нашли инулинсодержащие субстанции. Инулин называют «природным инсулином». Спектр его действия достаточно разнообразен благодаря его высокой гипогликемической, гиполипидемической, гипохолестеринемической активности. Являясь препаратом выбора в фитотерапии инсулиннезависимого сахарного диабета и проявляя пребиотический эффект, он находит широкое применение за рубежом. Наряду с этим данный полисахарид является источником промышленного получения фруктозы.

В России в качестве инулинсодержащего сырья рекомендованы клубни топинамбура, однако себестоимость чистого инулина из этого сырья достаточно высока. Это объясняется тем, что помимо инулина клубни топинамбура содержат карамелеобразующие фруктозаны с более низкой молекулярной массой, из-за чего возникает ряд проблем с технологией выделения и очистки инулина.

Экспериментально установлено, что процесс получения инулина из клубней топинамбура сопровождается осмолением веществ. Всё это порождает множество проблем, связанных с необходимостью применения трудоёмких технологических процессов для выделения полисахарида, требующих значительных затрат средств и времени. В клубнях топинамбура содержится большое количество энзимов, которые способствуют деполимеризации инулина, а изомеразы вызывают процесс эпимеризации фруктозы. Именно из-за наличия данных ферментов измельчённые клубни топинамбура быстро темнеют (осмоляются), а инулин, полученный из данного сырья, представляет собой смолообразную субстанцию и требует многоступенчатой очистки (например, использование ионообменных смол, очистка алюминия оксидом и кальция карбонатом), что приводит к значительным потерям инулина. Возникает необходимость инактивации ферментов с помощью лиофильной сушки, денатурации органическими растворителями, воздействия высоких температур.

Альтернативным топинамбуру сырьём являются клубни отдельных видов георгин, которые используют как в США (вид Dahlia imperialis), так и в странах Европы (вид Dahlia variabilis) в качестве источника промышленного получения инулина. Стоимость инулина, полученного из клубней георгин, варьирует в пределах 2-5 € за 1г в зависимости от степени чистоты.

Исходя из вышеизложенного, мы считаем, что поиск оптимальных путей получения инулина из альтернативного инулинсодержащего сырья -других видов клубней георгин, а также изучение возможности применения самих клубней георгин в фитотерапии инсулиннезависимого сахарного диабета является актуальным вопросом.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы является экспериментальное обоснование целесообразности применения клубней георгины простой в качестве альтернативного топинамбуру инулинсодержащего источника, а также разработка оптимальных способов получения и очистки инулина из данного сырья.

Для реализации поставленной цели мы сочли необходимым решение следующих задач:

- экспериментально обосновать возможность применения клубней георгины простой в качестве источника инулина;

- разработать оптимальные условия выделения инулина;

- провести химическое исследование клубней георгины простой на присутствие основных групп БАВ и разработать методику количественного определения инулина в сырье; изучить влияние высокоочищенного инулина и порошка измельчённых клубней георгины простой на углеводный обмен при экспериментальном сахарном диабете.

Научная новизна. Предложен технологически доступный метод получения полиморфных форм инулина (а-, [3-, у-инулин) из клубней георгины простой, как альтернативного инулинсо держащего сырья. Разработаны оптимальные условия выделения инулина из свежего сырья, сока клубней георгин, а также сухого сырья, более устойчивого к хранению.

Для полученного нами высокоочищенного инулина определены числовые показатели качества, соответствующие требованиям зарубежного стандарта Official Monographs «Inulin» (The United States Pharmacopoeia, XXII).

Усовершенствована и валидирована методика количественного определения инулина в клубнях георгины простой.

Проведено химическое изучение клубней георгины простой, позволившее качественно и количественно охарактеризовать такие биологически активные соединения, как полисахариды, аминокислоты, макро- и микроэлементы, органические кислоты, фенольные соединения.

В ходе фармакологических исследований на модели экспериментального сахарного диабета установлено, что высокоочищенный инулин, а также порошок измельчённых клубней георгины простой существенно понижают уровень глюкозы в крови при моделировании сахарной нагрузки, лимитируют развитие основных патогенетических звеньев сахарного диабета - ограничивают гипергликемию, лактат-ацидоз, а также предотвращают активизацию процессов перекисного окисления липидов, способствуют активизации каталазы — фермента антиоксидантной защиты. Полученные данные свидетельствуют о том, что высокоочищенный инулин, а также порошок измельчённых клубней георгины простой могут быть рекомендованы для профилактики и комплексного лечения инсулиннезависимого сахарного диабета.

Практическая значимость работы. На основании проведённых экспериментальных исследований доказана целесообразность применения клубней георгины простой в качестве альтернативного топинамбуру источника инулина.

Изучение фармакологической активности инулина, полученного из клубней георгины простой, а также порошка измельчённых клубней георгины простой позволяет рекомендовать их для дальнейших углублённых исследований гипогликемической, гиполипидемической, гипохолестеринемической активности.

Внедрение результатов в практику. По материалам диссертации составлено информационное письмо «Обоснование применения высокоочищенного инулина из клубней георгины простой для коррекции экспериментального инсулиннезависимого сахарного диабета», которое передано в НИИ питания РАМН для дальнейших возможных совместных исследований, о чём имеется соответствующий акт внедрения.

Положения, выдвигаемые на защиту:

- результаты химического исследования основных групп БАВ клубней георгины простой;

- обоснование использования клубней георгины простой в качестве источника получения инулина;

- разработка методики получения полиморфных форм инулина (а-, (3-, у-инулин), стандартизация высокоочищенного инулина;

- результаты предварительного фармакологического исследования влияния высокоочищенного инулина и порошка измельчённых клубней георгины простой на основные показатели углеводного обмена при экспериментальном сахарном диабете.

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом НИР ГОУ ВПО «Пятигорской государственной фармацевтической академии Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию», а также в соответствии с соглашением о выполнении НИР между Федеральным агенством по здравоохранению и социальному развитию и ГОУ ВПО «Пятигорской государственной фармацевтической академией Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию» (№ государственной регистрации 01200411089).

Апробация работы и публикации. Основные положения диссертационной работы доложены на 63-й, 64-й и 65-й научных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2008-2010гг.). По теме диссертации опубликовано 8 научных работ, в том числе 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК.

Объём и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 129 страницах текста компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы и 3 глав собственных исследований, общих выводов, списка литературы, включающего 155 источников, в том числе 70 иностранных, приложения; содержит 52 таблицы, 20 рисунков и приложения.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия, фармакогнозия», Ананьина, Нина Александровна

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. В качестве альтернативного топинамбуру источника инулина предложены клубни георгины простой, собранные в фазу плодоношения на втором году жизни растения. Разработаны оптимальные методики получения и очистки инулина из свежего и сухого сырья, а также из сока клубней георгин (содержание инулина составляет от 19 до 22% в пересчёте на сухое сырьё). Выделены и идентифицированы три полиморфные формы инулина: а, Р" и у-инулины, отличающиеся по внешнему виду и растворимости в воде.

2. Полученный высокоочищенный инулин должен соответствовать следующим показателям: содержание действующего вещества 95,23±1,40%, содержание связанной глюкозы 4,33±0,07%.

3. Методом ВЭЖХ определено содержание низкомолекулярных компонентов инулина, а именно, глюкозы <0,1%, сахарозы 0,6%, олигомеров с DP2 2,8%, DP3 4,7%, DP5 10,5%.

Хромато-масс-спектрометрически определены нейтральные сахара и олигомеры с DP меньше 17 (глюкоза <0,1%, сахароза 0,3%, F2 2,4%, F3 4,6%, F4 5,8%, F5 9,8%, F6 9,1%, F7 11,1%, F8 15,1%, F9 12,9%, F10 15,5%).

Высокоэффективной анионообменной хроматографией с импульсным амперометрическим детектированием установлено, что средняя степень полимеризации и молекулярная масса инулина, полученного из клубней георгины простой, соответственно равны DP 25-30 и 5200 Da.

Методом метилирования с последующим формолизом и хромато-масс-спектометрическим детектированием ацетатов полиолов установлена структурная формула инулина: p-D-Frcr(2[-^l)-P-D-Frcy-(2]n—»1-a-D-Glc^, n-25.

4. Определены качественные и количественные характеристики биологически активных веществ клубней георгины простой и установлено, что содержание инулина составляет 24,03-34,38%, свободных аминокислот -2,42±0,07%, общего белка - 10,02±0,17%, свободных органических кислот -0,2±0,002%, кумаринов - 1,17±0,03%, дубильных веществ - 3,24±0,14%, водорастворимой фракции полисахаридов - 11,2±0,01%, пектиновых веществ - 4,0±0,003%, гемицеллюлозы А - 2,01±0,002% и гемицеллюлозы Б -0,52±0,001%.

5. Методом хромато-масс-спектрометрии триметилсилильных производных определён качественный и количественный состав водорастворимых полисахаридов (ВРПС) (Glc 21,5%, Frc 64,7%), пектиновых веществ (ПВ) (GalА 77%, Ara 3,6%, Gal 5,2%, Rha 2,4%, Glc 1,8%, Xyl 0,8%), гемицеллюлозы А (ГЦ A) (Ara 3,3%, Gal 4,1%, Glc 8,6%) и гемицеллюлозы Б (ГЦ Б) (Ara 2,7%, Gal 3,5%, Glc 8,2%).

6. Ионообменной хроматографией на DEAE-целлюлозе и гельфильтрацией на сефакриле S-500 осуществлены очистка и разделение полидисперсных пектиновых веществ на две фракции (ПВ-1 и ПВ-2), отличающиеся по содержанию в них нейтральных полисахаридов и уронидной составляющей (ПВ-1: GalA 57%, Ara 1,6%, Gal 6,4%, Rha 1,5%, Glc 2,3%; ПВ-2: GalA 78,4%, Ara 3,6%, Gal 4,6%, Rha 2,7%, Glc 1,5%, Xyl 0,7%), молекулярной массе (ПВ-1 10015Da, ПВ-2 13020Da) и величине удельного вращения (ПВ-1 +144°, ПВ-2 +198,2°).

7. Методом метилирования с последующим хромато-масс-спектрометрическим определением ацетатов полиолов установлена последовательность расположения нейтральных моносахаридов в молекуле пектина: ->5)-Ara/-(l->, Xyl-(1-^, -*4)-Xyl-(l-+, Glcp-(1-^, ^4)-Glc-(l->,

6)-Galp-(l—

8. Изучение эффективности применения при экспериментальном аллоксановом сахарном диабете порошка измельчённых клубней георгины простой и высокоочищенного инулина, полученного из данного сырья, свидетельствует, что изучаемые объекты лимитируют развитие основных патогенетических звеньев сахарного диабета: ограничивают гипергликемию, лактат-ацидоз, нарушение липидного обмена и развитие эндогенной интоксикации, а также предотвращают активизацию процессов ПОЛ и способствуют активизации ферментов антиоксидантной защиты, являясь, таким образом, эффективным средством коррекции углеводного, липидного и белкового обмена при сахарном диабете (Приложение).

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Ананьина, Нина Александровна, 2011 год

1. Айвазов, Б.В. Введение в хроматографию / Б.В. Айвазов. М.: Мир, 1983. -238 с.

2. Аймухамедова, Г.Б. Свойства и применение пектиновых веществ / Г.Б. Аймухамедова, Д.Э. Алиева, Н.П. Шелухина. Казань: Просветитель, 1981.-124 с.

3. Айса, H.A. Полисахариды двух видов Cicer, культивируемых в Китае / H.A. Айса, Б.Т. Сагдуллаев // Химия природ, соединений. 2006. - № 3. -С. 288-289.

4. Айса, H.A. Полисахариды семян Plantago ovatax / H.A. Айса, М.Р. Абдурахим // Химия природ, соединений. 2006. - № 3. - С. 286-287.

5. Александров, Ю.И. Погрешность и неопределённость результата химического анализа / Ю.И. Александров, В.И. Беляков // Журн. аналит. химии. 2002. - Т. 57, №2. - С. 118-129.

6. Андреева, В.Ю. Исследование химического состава манжетки обыкновенной Alchemilla vulgaris L. S. L. / В.Ю. Андреева, Г.И. Калинкина // Химия раст. сырья. 2000. - № 2. - С. 79-85.

7. Арзамасцев, А.П. Валидация фармакопейных методов / А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, Ю.Я. Харитонов // Фармация. 2001. - № 1. - С. 28-29.

8. Артемьев, В.Д. Особенности получения фруктозо-глюкозного сиропа из инулинсодержащего сырья / В.Д. Артемьев, В.В. Манешев // Вопр. питания. 2001. - №4. - С. 7-9.

9. Аспинал, Г.О. Методы химии углеводов / Г.О. Аспинал, Е.Л. Хёрст. 4-е рус. изд. - М.: Мир, 1967. - 371 с.

10. Балаболкин, М.И. Диетология / М.И. Балаболкин. М.: Медицина, 2000. - 672 с.

11. Бандюкова, В.А. Фенолокислоты растений, их эфиры и гликозиды / В.А. Бандюкова // Химия природ, соединений. 1983. - № 3. - С. 263-273.

12. Беляков, K.B. Определение инулина в корневищах и корнях девясила высокого / К.В. Беляков, Д.М. Попов // Фармация. 1998. - Т. 47, № 1. -С. 34-36.

13. Беляков, К.В. Определение инулина в корнях лопуха большого / К.В. Беляков, Д.М. Попов, Д.А. Шматков // Фармация. 1998. - Т. 47, № 6. - С. 17-20.

14. Беюп, Е.А. Дисбактериозы кишечника и их клиническое значение / Е.А. Беюп, И.Б. Куваева // Клинич. медицина. 1986. - № 12. - С. 37-44.

15. Блажей, А.Г. Фенольные соединения растительного происхождения / А.Г. Блажей, JI.H. Шутый. М.: Медицина, 1997. - 236 с.

16. Бубенчиков, P.A. Фенольные соединения и полисахариды фиалки собачьей / P.A. Бубенчиков // Вестн. ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация.-2004.-№ 1.-С. 156-159.

17. Булатов, М.И. Практическое руководство по фотоколориметрическим и спектрофотометрическим методам анализа / М.И. Булатов, И.П. Калинкин. JL: Ленинград, 1976.- 376 с.

18. Буркина, H.A. Исследование аминокислотного состава сфагнума бурого / H.A. Буркина, Г.И. Калинкина, Л.В. Фоминых // Химия раст. сырья. -2000.-№ 1.-С. 81-83.

19. Голубев, В.Н. Способ переработки клубней топинамбура / В.Н. Голубев, С.Ю. Беглов //Раст. ресурсы. -2002. -Т.35, №6. -С.15-21.

20. Голубев, В.Н. Топинамбур: состав, свойства, способы переработки и применение / В.Н. Голубев, И.В. Волкова, Х.М. Кумаланов. М.: Медицина, 1995.- 185 с.

21. Городецкий, Г.Б. Получение инулина и других фруктанов из инулинсодержащего сырья / Г.Б. Городецкий, Л.А. Аравина, Н.Я. Иванова // Раст. ресурсы. 2001. - Т. 15, №3. - С.5-9.

22. ГОСТ 5725-1-2002. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Ч. 1. Основные положения и определения. — Введ. 2002. 23.04. - М.: Изд-во стандартов, 2002. - 32 с.

23. ГОСТ 5725-4-2002. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. 4.4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений. — Введ. 2002. 23.04. — М.: Изд-во стандартов, 2002. - 32 с.

24. Государственная фармакопея Российской Федерации. — 12-е изд. М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения, 2008. -4.1.-704 с.

25. Гринкевич, Н.И. Химический анализ лекарственных растений / Н.И. Гринкевич, JI.H. Сафронич. М.: Мир, 1983. - 176 с.

26. Дарбе, А. Практическая химия белка / А. Дарбе. 2-е рус. изд. - М.: Мир, 1989.-389 с.

27. Донченко, JI.B. Свойства пектиновых веществ / JI.B. Донченко, Н.С. Карпович, Т.И. Костенко. Киев: Знание, 1982. - 134 с.

28. Дроздова, И.Л. Выделение и химическое изучение полисахаридов травы донника рослого / И.Л. Дроздова // Вестн. ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2004. - № 1. - С. 173-175.

29. Дуб, В.Г. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / В.Г. Дуб. М.: Медицина, 2000.-398 с.

30. Жданова, В.В. Критерии оценки методов исследования / В.В. Жданова. -Кольцово: Вест-сервер, 1999. — 205 с.

31. Жукова, О.Л. Изучение фенольного состава подземных органов сабельника болотного / О.Л. Жукова, A.A. Абрамов, Т.Д. Даргаева // Вестн. ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2006. - Т. 47. - № 5. -С. 342-345.

32. Жусупова, Г.Е. Аминокислотный и минеральный составы субстанций, полученных из надземной части и корней Limonium Gmelinii / Г.Е. Жусупова // Химия природ, соединений. 2006. - № 1. — 97 с.

33. Завадская, П.М. Количественное определение углеводов резорциновым и анилинфталатным методом / П.М. Завадская, Г.И. Горбачёва, И.С. Малушина. -М.: Медицина, 1962. — 169 с.

34. Западнюк, И.П. Лабораторные животные, их разведение, содержание и использование в эксперименте / И.П. Западнюк, В.И. Западнюк, Е.А. Захария. — Киев: Знание, 1962. — 350 с.

35. Запрометов, М.Н. Основы биохимии фенольных соединений / М.Н. Запрометов. -М.: Медицина, 1984. 214 с.

36. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения / М.Н. Запрометов. М.: Медицина, 1990. - 358 с.

37. Исламбеков, Ш.Ю. Растительные дубильные вещества / Ш.Ю. Исламбеков, А.К. Каримджанов, С.М. Мавлянов // Химия природ, соединений. 1990. - № 3. - С. 293-307.

38. Исследования растительного полисахаридного комплекса / А.Г. Гончаров и др. // Актуальные вопросы поиска и технологии лекарств: тез. докл. Республик, науч. конф. 5-7 марта. 1981 г. Харьков, 1981. - С. 139-140.

39. Каширская, Н.Ю. Значение пробиотиков и пребиотиков в регуляции кишечной микрофлоры / Н.Ю. Каширская // Рус. мед. журн. 2000. - № 13.-С. 13-14.

40. Кемертелидзе, Э.П. Количественное определение танина / Э.П. Кемертелидзе, П.А. Явич, А.Г. Сарабунович // Фармация. 1994. - № 4. -С. 34-37.

41. Кисличенко, B.C. Изучение аминокислотного состава цветков, листьев и экстракта из цветков Sambucus nigra / B.C. Кисличенко, В.В. Вельма // Химия природ, соединений. 2006. - № 1. - С. 97-98.

42. Колб, В.Г. Справочник по клинической химии / В.Г. Колб. Минск: Беларусь, 2000.-350 с.

43. Кочетков, Н.К. Химия биологически активных природных соединений / Н.К. Кочетков. М.: Химия, 1970. - 700 с.

44. Кочнев, H.K. Способ переработки клубней топинамбура / Н.К. Кочнев, Ю.П. Карачун // Хим.-фармац. пр-во. 2004. - Т.2, №13. - С. 15-18.

45. Краснов, В. А. Выделение и анализ природных Б AB / В. А. Краснов. -Томск: Изд-во Томск, 1987. 184 с.

46. Лемар, К.Н. Растворимый в воде порошок цикория, способ его получения и устройство для осуществления этого способа / К.Н. Лемар // Хим.-фармац. пр-во. 1999. - Т.З, №20. - С. 35-40.

47. Лигай, Л.В. Изучение углеводов Malva neglecta L. / Л.В. Лигай, Д.А. Рахимов, В.А. Бандюкова // Химия природ, соединений. 1989. - № 2. -С. 280-281.

48. Логинская, Л.П. Выделение органических веществ из растительных объектов / Л.П. Логинская, С.Ф. Тимофеев, B.C. Трошкин. — М.: Зелёная химия, 1986. 368 с.

49. Ложкин, A.B. Природные кумарины: методы выделения и анализа / A.B. Ложкин, Е.И. Саканян // Хим.-фармац. журн. 2006. - Т.40, № 6. - С. 4756.

50. Манешин, В.В. Способ получения инулинсодержащего раствора из топинамбура / В.В. Манешин, В.Д. Артемьев, Ю.П. Васильева // Хим.-фармац. пр-во. 2006. - Т.8, № 7. - С. 21-28.

51. Масяго, A.B. Особенности количественных тест-систем / A.B. Масяго // Новости «Вектор-Бест». 2004. - № 1. - С. 15-21.

52. Матасова, С.А. Получение сухого экстракта из корней девясила высокого и изучение его химического состава / С.А. Матасова, H.A. Митина // Химия раст. сырья. 1999. - № 2. - С. 119-123.

53. Мацек, X. Хроматография на бумаге / X. Мацек. 3-е рус. изд. - М.: Иностр. лит., 1962. - 780 с.

54. Меньшиков, В.В. Лабораторные методы исследования в клинике /В.В. Меньшиков. М.: Медицина, 1987. - 115 с.

55. Меньшиков, B.B. Статистическая обработка данных аналитических методов / В.В. Меньшиков, JI.H. Делекторская, Р.П. Золотницкая. М: Медицина, 1992. - 368 с.

56. Назаренко, Г.И. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований / Г.И. Назаренко, A.A. Кишкун. М.: Медицина, 2002. - 544 с.

57. Оболенский, Д.А. Внутрилабораторный контроль качества количественных методов клинических лабораторных исследований / Д.А. Оболенский // Новая аптека. 2003. - № 7. - С. 8-12.

58. Оводова, И.Н. Аккредитация клинико-диагностических лабораторий / И.Н. Оводова, В.Е. Швецов // Новая аптека. 2000. - № 5. - С. 20-24.

59. Оленников, Д.Н. Исследование колориметрической реакции инулина с резорцином в зависимости от условий ее проведения / Д.Н. Оленников, Л.М. Танхаева // Химия раст. сырья. 2008. - № 1. - С. 87-93.

60. Оленников, Д.Н. Методика количественного определения суммарного содержания полифруктанов в корневищах и корнях девясила высокого / Д.Н. Оленников, Л.М. Танхаева // Химия раст. сырья. 2008. - № 1. - С. 95-99.

61. Полежаева, И.В. Аминокислотный и минеральный состав вегетативной части кипрея узколистного / И.В. Полежаева, Н.И. Полежаева, Л.Н. Меняйло // Хим.-фармац. журн. 2007. - Т.41, № 3. - С. 27-29.

62. Политов, А.Г. Организация управления качеством исследований в учреждениях здравоохранения Российской Федерации / А.Г. Политов // Новая аптека. 2004. - № 3. - С. 19-22.

63. Полуколичественный спектральный метод анализа минерального сырья из кратера угольного электрода (50 элементов). ФГУП Кавказгеологсъёмка. Центральная испытательная лаборатория. Методика предприятия МП-4С. Ессентуки, 1998. - 23 с.

64. Получение и фитохимическое исследование полисахаридов из лекарственных растений / А.Г. Горин // Всерос. съезд фармацевтов: тез. докл. Свердловск, 1975. — С. 313-314.

65. Полюдек-Фабини, Р. Органический анализ / Р. Полюдек-Фабини. 2-е рус. изд. — JL: Химия, 1981.-680 с.

66. Поляков, И.В. Практическое пособие по медицинской статистике / И.В. Поляков, Н.С. Соколова. -М.: Медицина, 1995. 152 с.

67. Прокопенко, О.П. Колориметрический метод количественного определения кумаринов / О.П. Прокопенко, О.О. Тарасенко // Фармац. журн. 1962. -№ 6. - С. 18-22.

68. Пулина, С.А. Обзор инулинового сегмента мирового фармацевтического рынка / С.А. Пулина // Врачеб. дело. 2009. - № 5. - С. 9-13.

69. Сернов, JI.H. Элементы экспериментальной фармакологии / JI.H. Сернов, В.В. Гацура. -М.: Медицина, 2000. 352 с.

70. Смагунова, А.Н. Способы оценки правильности результатов анализа / А.Н. Смагунова // Журн. аналит. химии. 1997. - Т.52, № 10 - С. 122-129.

71. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов / Б.Н. Степаненко. М.: Высш. шк., 1978.-256 с.

72. Сумцов, М.А. О выборе методики количественного определения метилпарагидроксибензоата с использованием процедуры валидации / М.А. Сумцов, A.B. Титова // Вестн. ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2005. - № 1. - С. 236-239.

73. Тица, Н.Ю. Клиническая оценка лабораторных тестов / Н.Ю. Тица. М.: Медицина, 1986. - 480 с.

74. Трубачёв, A.A. Определение инулина в капсулах Инулин-Лиавир спектрофотометрическим методом / A.A. Трубачёв, Г.И. Олешко // Вестн. ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. 1999. - № 5. - С. 84-87.

75. Турсубекова, Б.И. Идентификация и количественное определение инулина в корнях лопуха гладкосемянного / Б.И. Турсубекова // Вопр. питания. 2006. - № 3. - С. 61-64.

76. Федосеева, JI.M. Способы определения полифенольных соединений в растительном сырье / Л.М. Федосеева // Химия раст. сырья. — 1999. — № 9. -С. 28-37.

77. Федосеева, Л.М. Изучение дубильных веществ подземных и надземных вегетативных органов бадана толстолистного, произрастающего на Алтае / Л.М. Федосеева // Химия раст. сырья. 2005. - № 3. - С. 45-50.

78. Федосеева, Л.М. Расчёт эффективности процесса экстракции бурых листьев бадана толстолистного / Л.М. Федосеева // Химия раст. сырья. -2000. -№ 1.-С. 117-119.

79. Филиппов, М.П. Колориметрическое определение уронидной части в пектиновых веществах / М.П. Филиппов // Вестн. АМН СССР. 1973. - № З.-С. 76-79.

80. Хайс, И.М. Хроматография на бумаге / И.М. Хайс, X. Мацек. 4-е рус. изд. -М.: Мир, 1962. - 386 с.

81. Хворост, О.П. Сравнительная количественная оценка содержания дубильных веществ у Alnus glutinosa (L.) Gaertn. / О.П. Хворост, В.В. Беликов, А.Г. Сербии // Раст. ресурсы. 1986. - Т.22, № 2. - С. 258-262.

82. Цаль, О.Я. Фруктозаны растений. Перспективы применения / О.Я. Цаль, Л .Я. Роговская // Фармац. журн. 2002. - № 2. - С. 64-65.

83. Чармс, Ш. Хроматография. Практическое приложение метода / Ш. Чармс, Л. Фигибейн, Дж. Вагман. 3-е рус. изд. - М.: Мир, 1986. - 520 с.

84. Чепин, Л.И. Мацерация инулинсодержащего сырья / Л.И. Чепин // Вопр. Питания. 1998. -№ 1. - С. 35-37.

85. Чугунова, Л.А. Дислипопротеинемия и её лечение при сахарном диабете II типа / Л.А. Чугунова // Врачеб. дело. 2000. - № 5. - С. 66-70.

86. Abroad, К. Validation of analytical methods and procedures / K. Abroad // Drugs. 2006. - Vol. 10.-P. 17-25.

87. Asami, T. New tuber yacon containing large amounts of fructooligosaccharides / T. Asami, T. Ohyama // Good Feed Chem. 1999. - Vol. 9. - P. 33-41.

88. Bell, D. Structural studies both Inulin from Inula helenium and levans from Dactylis glomerata and Lolium italicum / D. Bell, A. Palmer // J. of Biochem. -1992.-Vol. 27.- P. 63-70.

89. Bengmark, S. Colonic food: pre- and probiotics / S. Bengmark // Am. J. Gastroenterol. 2000 . - Vol. 95. - P. 9-15.

90. Botham, R.L. Structural features of polysaccharides and their influence on fermentation behavior / R.L. Botham, P. Ryden. Lisbon: Portugal, 1998. — 305 p.

91. Campbell, R.K. Type II diabetes mellitus: disease state management / R.K. Campbell // Retail Pharmacy News. 2009. - Vol. 9. - P. 15-18.

92. Carpenter, T. The utilization of Jerusalem artichokes by a patient with diabetes / T. Carpenter // Arch. Intern. Med. 2005. - Vol. 42. - P. 64-73.

93. Carpita N.C. Linkage structure of fructans and fructan oligomers from Triticum aestivum and Festuca arundinaceae leaves / N.C. Carpita, J. Kanabus // J. Plant Physiology.-2001. Vol. 134.-P. 162-168.

94. Causey, J.L. Effect of dietary inulin on serum lipids, blood glucose and the gasatrointestinal environment in hypercholesterolemic men / J.L. Causey, M.K. Slavin // Nutr. Res. 2007. - Vol. 20. - P. 191-201.

95. Causey, J.L. Stimulation of human immune system by inulin in vitro / J.L. Causey, J. Slain // Probiotics and Immunity. 2009. - Vol. 7. - P. 21-34.

96. Cooper, P.D. Anti-complementary action of polymorphic solubility forms of particulate inulin / P.D. Cooper // Mol. Immun. 1997. - Vol. 23. - P. 25-36.

97. Cooper, P.D. The adjuvanticity of gamma inulin / P.D. Cooper, E. Steele // Immunol. Cell. Biol. 1998. - Vol. 66. - P. 45-52.

98. Cooper, P.D. The anti-melanoma activity of inulin in mice / P.D. Cooper // Mol. Immun. 1999. - Vol. 23. - P. 37-44.

99. Development of the chicory industry in Nebraska / G. Smith et al. // Ninth seminar on inulin. Budapest, 2002. - P. 70-71.

100. Development pharmaceutics and process validation / B. Cruse et al. // Laboratory. 2006. - Vol. 7. - P. 10-20.

101. Ernst, M. Purification and characterization of a new fructan series from species of Asteraceae / M. Ernst, N.J. Chatterton // New Phytologyst. 1996. -Vol. 132. - P. 63-66.

102. Europen accreditation for chemical laboratories / L. Well et al. // Laboratory. -2003. Vol. 5. - P. 8-15.

103. Evaluation of chicory varieties in north Italy: inulin production and photosynthesis / A. Monti et al. // Ninth seminar on inulin. Budapest, 2002. - P. 65-68.

104. Fiordaliso, M.F. Dietary oligofructose lowers triglycerides, phospholipids and cholesterol in serum and very low density lipoprotein of rats / M.F. Fiordaliso, N. Kok // Lipids. 1995. - Vol. 30. - P. 163-167.

105. French, A.D. Recent advances in the structural chemistry of inulin / A.D. French. London: Elsevier, 1993. - 222 p.

106. French, A.D. Chemical and physical properties of fructans / A.D. French // Plant Physiol.-1991.-Vol. 134.-P. 125-136.

107. Friday, J. Presence of inulin and oligofructose in the diets of Americans / J. Friday, J. Goldman // J. Nutr. 1999. - Vol. 129. - P. 14-19.

108. Fructose-rich concentrates from chicory roots: physical and chemical' characterisation / N. Leitao et al. // Ninth seminar on inulin. Budapest, 2002. -P. 58-61.

109. Fuchs, Ed. A process for the production of inulin and its hydrolysis products from plant material / Ed. Fuchs. Amsterdam: Books, 2004. - 255 p.

110. Functional properties of fructans / E. Kopec et al. // Ninth seminar on inulin. Budapest, 2002. - P. 22-25.

111. General principles of validation / A. Praznik et al.. Rockville: Center for drug and research, 2007. - 210 p.

112. Gibson, G. Dietary modulation of the human gut microflora using the prebiotics oligofructose and inulin / G. Gibson // J. Nutr. 1999. - Vol. 129. -P. 7-12.

113. Green, J. Practical guides to analytical method validation / J. Green // Anal, chem. news and features. 1996. - Vol. 1. - P. 305-309.

114. Grushetsky, R. Comparative analysis of different methods of inulin isolation / R. Grushetsky // Carbohydrates. 2004. - Vol. 7. - P. 8-13.

115. Hoebregs, H. Fructans in foods and food products, ion exchange chromatographic method: collaborative study / H. Hoebregs // Carbohydrates. 1997.-Vol. 8.-P. 129-137.

116. Huber, L. Validation of computerized analytical systems: installation and operation qualification / L. Huber // Magazine. 1996. - Vol.14, № 9. - P. 5061.

117. ICH Q2A: Validation of analytical methods, definitions and terminology / International conference on harmonization of technical requirements for the registration of pharmaceuticals for human use. Geneva: ICH Secretariat, 2004.-30 p.

118. ICH Q2A: Validation of analytical procedures / International conference on harmonization of technical requirements for the registration of pharmaceuticals for human use. Geneva: ICH Secretariat, 1995. - 60 p.

119. Influence of x-short-chain fructo-oligosaccharides (sc-FOS) on bioavailability of magnesium and calcium in human / R. Bornet et al. // Ninth seminar on inulin. Budapest, 2002. - P. 39-42.

120. Inulin as an ingredient of functional and health food / I. Grinenko et al. // Ninth seminar on inulin. Budapest, 2002. - P. 52-54.

121. Ivie, K. High-performance liquid chromatography in sugar analysis / K. Ivie // Carbohydrates. 2000. - Vol. 77. - P. 44-56.

122. Jackson, K.G. The effect of a daily ingestion of inulin on fasting lipid, insulin and glucose cocentrations in middle aged men and women / K.G. Jackson, G. Taylor // Br. J. 2007. - Vol. 82. - P. 23-30.

123. Klotke, J. Possible role of fructans in membrane protection during freezing or drying / J. Klotke, A. Heyer // Carbohydrates. 2002. - Vol. 13. - P. 25-30.

124. Kosher, O. A new look at dietary carbohydrate: chemistry, physiology and health / O. Kosher, D. Aaron. Israel: P.D, 2008. - 267 p.

125. Kroom, L.A. The management of Type II diabetes mellitus: a call to act for pharmacists / L.A. Kroom // US Pharmacist. 2009. - Vol. 11. - P. 1-17.

126. Kulka, R.G. Colorimetric estimation of ketopentoses and ketohexoses / R.G. Kulka // Biochem. J. 1986. - Vol. 63. - P. 542-548.

127. Lewis, R. The value of inulin as a foodstutf / R. Lewis // J. Am. Med. Assoc. -2008.-Vol. 58.-P. 76-79.

128. Livingstone, D.P. Structure and quantity of fractan oligomers in oat (Avena spp.) / D.P. Livingstone, N.J. Chatterton // New Phytologyst. 2005. - Vol. 178.-P. 25-34.

129. Lowry, H. Proteins / H. Lowry, J. Nira. Whashington: Department of Pharmacology, 1951.- 475 p.

130. Macrae, R. Encyclopedia of food science / R. Macrae, R. Robinson // Food technol. and nutr. 1993. - Vol. 2. - P. 863-867.

131. Marchetti, G. Chicory (Cichorium intybus) and Jerusalem artichoke (Helianthus tuberoses L.) as inulin sources / G. Marchetti. — Milan: L 'Industria Saccarfera ltalinana, 2007. 398 p.

132. Molis, C. Digestion, excretion, and energy value of fiuctooligosaccharides in healthy humans / C. Molis, B. Flourie // Am. J. Clin. Nutr. 1993. - Vol. 64. -P. 324-328.

133. Nilsson, U. Carbohydrates and Fibers / U. Nilsson, I. BjOrck // Life Sci. -2000. Vol. 6. - P. 1482-1486.

134. Nutritive value of different Jerusalem artichoke varieties / J. Barta et al. // Ninth seminar on inulin. — Budapest, 2002. P. 12-15.

135. Petschow, B.W. Evaluation of fructooligosaccharide supplementation of oral electrolyte solutions for treatment of diarrhea: recovery of the intestinal bacteria / B.W. Petschow, R.K. Buddington // Carbohydrates. 1998. - Vol. 43. - P. 138-147.

136. Piccaglia, R. Effect of harvest time on sugar profile and inulin chain length of chicory varieties / R. Piccaglia, G. Pritoni // Carbohydrates. — 2007. — Vol. 91.-P. 38-43.

137. Probiotics and prebiotics / A. Peter et al. // Ninth seminar on inulin. — Budapest, 2002.-P. 8-11.

138. Roberfroid, M. Dietary fiber, inulin, and oligofructose: a review comparing their physiological effects / M. Roberfroid // Food Sci. 1993. - Vol. 33. - P. 103-148.

139. Roberfroid, M. The bifidogenic nature of chicory inulin and its hydrolysis products / M. Roberfroid, J.A. Van Loo // J. Nutr. 1998. - Vol. 128.-P. 1119.

140. Sakai, K. Effect of dietary short-chain fructooligosaccharides on the fecal microflora in gastrectomized rats / K. Sakai, K. Aramaki // Biochem. 2001. -Vol. 65.-P. 264-269.

141. Shahidullah, M. The sensitivity and selectivity of the Seliwanoff test for fructose / M. Shahidullah, S. Khorasani // Biochem. 1987. - Vol. 61. - P. 37-39.

142. Simonovska, B. Determination of Inulin in Foods / B. Simonovska // J. Nutr. -2000.-Vol. 83.-P. 65-68.

143. Sinner, M. The chromatographic behaviour of polysaccharides / M. Sinner, J. J. Puis // Chromatography. 1978. - Vol. 156. - P. 194-204.

144. Siomi, S. Production of Fructan Composition / S. Siomi, D. Tokeshoo // Biotechnol. 1992.-Vol. 16.-P. 9-19.

145. Spiller, G.A. Dietary fiber in health and nutrition / G.A. Spiller. Florida: CRCPress, 1994.- Ill p.

146. Stephen, A. Mechanism of action of dietary fiber in the human colon / A. Stephen, J.H. Cummins. Whashington: Nature, 1990. - 301 p.

147. Suzuki, M. Science and technology of fructans / M. Suzuki, N.J. Chatterton. Florida: CRC Press, 1993. - 400 p.

148. The role of carbohydrates in drought and freezing tolerance of wheat / G. Kerepesi et al. // Ninth seminar on inulin. Budapest, 2002. - P. 43-46.

149. Timmermans J.W. Quantitative analysis of the molecular weight distribution of inulin by means of anion exchange HPLC with pulsed amperometric detection / J.W. Timmermans, M. Leeuwen // Carb. chem. 1994. - Vol. 13. -P. 81-88.

150. Van Loo, J.A. Functional food properties of non-digestible oligosaccharides / J.A. Van Loo, N.A. Englyst // Br. J. Nutr. 1999. - Vol. 81. - P. 121-132.

151. Van Loo, J. A. Non-digestible oligosaccharides / J.A. Van Loo // Br. J. Nutr. -2001.-Vol. 106.-P. 11-16.

152. Veessman, J. Selectivity or specificity? Validation of analytical methods from the perspective of an analytical chemist in the pharmaceutical industry / J. Veesman // J. Pharm. Biomed. Analysis. 1996. - Vol. 14. - P. 867-869.

153. Vukov, S.A. Preparation of pure inulin and various inulin-containing products from Jerusalem Artichokes for human consumption and diagnostic use / S.A. Vukov // Carbohydrates. 2007. - Vol. 8. - P. 71-75.

154. Wight, A. Determination of reducing sugars, sucrose, and inulin in chicory root by high-performance gas chromatography / A. Wight, W. Niekerk // J. Agric. Food Chem. -2003. Vol. 31. - P. 282-285.

155. The United States Pharmacopoeia 22. The National Formulary 22. Электронный ресурс.: информ. система на компакт, диске / Т. Smith [и др.]. Электрон, дан. - Whashington: Scientist USA, 2006. - 1 электрон, опт. диск (CD-ROM). - Загл. с экрана.