Использование иммуноферментного анализа для выявления вируса инфекционного ринотрахеита и антител к нему у крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Непоклонова, Ирина Владимировна

• Непоклонова, Ирина Владимировна
• кандидат ветеринарных наук
• 1984

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Непоклонова, Ирина Владимировна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Краткие сведения об инфекционном ринотрахеите

1.2. Диагностика инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота

1.3. Новые методические подходы в лабораторной диагностике инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.

1.3.1. Использование иммуноферментного анализа для выявления локализации антигенов (гистохимический вариант).

1.3.2. Иммуноферментный анализ с использованием твердой фазы.

1.3.3. Методы твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA ).

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА П. ПОЛУЧЕНИЕ ШШУНОПЕРОКСИДАЗНЫХ КОНЬЮГАТОВ И ОТРАБОТКА ПОСТАНОВКИ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА

ПЛ. Литературная справка

П.1.1. Ферменты и субстраты, используемые в иммуноферментном анализе

ПЛ.2. Методы получения инмунопероксидазных коньюга

П.2. Материалы и методы.

П.З. Результаты исследований

П.3.1. Получение специфической сыворотки. Выделение гамма-глобулинов

П.3.2. Очистка пероксидазы и получение иммунопероксидазных коньюгатов.

П.3.3. Сравнительное изучение различных субстратов для пероксидазы

П.3.4. Определение активности, специфичности, чувствительности полученных коньюгатов, отработка elisa -теста для выявления вируса

ГЛАВА Ш. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТВЕРДОФАЗНОГО ИММУНОФЕРМЕНТНОГО

АНАЛИЗА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСА ИРТ И АНТИТЕЛ К НЕМУ

111.1. Литературная справка.

Ш.2. Материалы и методы.

Ш.З. Результаты исследований

Ш.3.1. Выявление вируса ИРТ иммуноферментным методом при использовании в качестве твердой фазы культуры клеток.

Ш.3.2. Использование elisa-теста для обнаружения вируса ИРТ в материале от экспериментально-зараженных животных и в полевом материале 62 Ш.3.3. Использование метода elisa для определения антител к вирусу ИРТ крупного рогатого скота.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

ВЫВОДЫ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЩОШИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Использование иммуноферментного анализа для выявления вируса инфекционного ринотрахеита и антител к нему у крупного рогатого скота»

Майский (1982 г.) Пленум ЦК КПСС принял Продовольственную программу СССР на I98I-I985 и на период до 1990 года, являющуюся важнейшей составной частью экономической стратегии партии на ближайшее десятилетие, в ней определены четкие задачи ветеринарной науки и практики нашей страны - сохранить и приумножить поголовье продуктивных животных, повысить качество животноводческой продукции.

Эти задачи могут быть решены при наличии своевременной и правильной диагностики инфекционных и неинфекционных болезней сельскохозяйственных животных.

Диагностические исследования, проведенные в ряде зарубежных стран и у нас, показали широкое распространение в промышленных комплексах крупного рогатого скота так называемых "пневмо-энтеритов", наносящих значительный экономический ущерб (47, 106). Одним из агентов, участвующих в формировании "пневмоэнтеритов телят", является вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота (ИРТ).

Успех борьбы с этой инфекцией в значительной степени зависит от надежной и своевременной диагностики. Классическая реакция нейтрализации (РН) для идентификации полевых изолятов и специфических антител высокоспецифична, обеспечивает достоверный лабораторный диагноз, но, к сожалению, трудоемка и малодоступна для практических ветеринарных врачей областных, краевых и республиканских лабораторий, поскольку для ее проведения необходимо иметь чувствительную культуру клеток.

Реакция непрямой гемагглютинации, разработанная в отделе вирусологии Московской ветеринарной академии в настоящее время проходит стадию внедрения в биофабричную и ветеринарную практику. В случае успешного завершения этого этапа оправдаются надежды практических врачей относительно широких серологических обследований больших групп скота.

Метод флуоресцирующих антител, широко применяющийся для выявления специфического антигена вируса ИРТ, к сожалению, так же не лишен недостатков - главным образом субъективизма в учете результатов.

В последние годы все большее внимание вирусологов и эпизо-отологов привлекает метод иммуноферментного анализа (ЙФА) для обнаружения специфического антигена и антител (192, 193). Иммуно-ферментный метод диагностики обладает высокой чувствительностью и специфичностью, не уступающей радиоиммунному методу (192).

Во-первых, процедура проведения этой реакции может быть почти полностью автоматизирована, что позволяет серологически обследовать большие группы животных. Во-вторых, иммуноферментный анализ позволяет выявлять бактериальные и вирусные агенты, вызывающие болезни животных, проводить санитарный контроль продуктов животноводства и окружающей среды и др. Поэтому не случайно Государственный комитет СССР по науке и технике б января 1983 года принял постановление № 6 "О расширении научно-исследовательских работ в области создания диагностических препаратов и оборудования для иммуноферментного анализа и их применения в медицине, сельском хозяйстве, промышленности и научных исследованиях? а министр сельского хозяйства СССР 5 марта 1984 года издал соответствующий приказ (Мг 39), определяющий порядок внедрения данного метода в ветеринарную практику, защиту растений и животноводство.

Учитывая все возрастающий интерес к иммуноферментной диагностике со стороны ученых в области ветеринарии, медицины, паразитологии мы поставили целью изучить возможность использования этого метода для выявления антигена вируса ИРТ крупного рогатого скота и антител к нему, В соответствии с этой целью мы наметили следующие задачи собственных исследований:

1. Получить иммуно-перокеидазные конъюгаты и отработать методы постановки ИФА.

2. Изучить возможность использования твердофазного ИФА для выявления вируса ИРТ и антител к нему.

Новым в диссертации является:

1) Получение иммунопероксидазных конъюгатов с использованием гамма-глобулина крупного рогатого скота.

2) Выявление вируса инфекционного ринатрахеита крупного рогатого скота в иммуноферментном анализе при использовании в качестве твердой фазы культуры клеток.

3) Использование иммуноферментного анализа для обнаружения и идентификации вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.

На защиту выносятся результаты исследований:

1. По получению иммуноферментных коньюгатов,используемых для обнаружения индентификации вируса ИРТ и антител к нему.

2. По изучению возможности использования иммуноферментного анализа для обнаружения и идентификации вируса ИРТ крупного рогатого скота и антител к нему в материале от экспериментально зараженных и естественно больных животных.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Непоклонова, Ирина Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Одноступенчатая хроматография на колонке с КМ-целлю-лозой позволяет очистить пероксидазу до RZ = 3,1. Полученный препарат фермента пригоден для приготовления иммуноферментного коньюгата.

2. Коньюгаты, полученные перйодатным методом, более активны и специфичны, чем коньюгаты, полученные глутаральдегид-ным методом.

3. Гистохимический вариант ИФА с использованием коньюгата, полученного по методу Avrameas S. (1969), позволяет выявлять антиген вируса ИРТ в культуре клеток через 27-30 часов после их заражения.

4. Разработана модификация метода ИФА с использованием в качестве твердой фазы культуры клеток, позволяющая выявлять вирус ИРТ через 8-10 часов после их заражения.

5. Чувствительность полученных коньюгатов при выявлении вируса ИРТ в elisa составляет 4- lg ТЦД50.

6. Методом elisa (в общепринятом исполнении) можно выявить вирус в носовых экскретах экспериментально зараженных телят с 3 по 10 день, в конъюнктивальных смывах - с 3 по 5 день. Данный метод может быть использован для выявления вируса при экспериментальной естественной инфекции.

7. Метод elisa позволяет выявлять вирус ИРТ в те же сроки, что и выделение в культуре клеток.

8. Непрямой elisa -метод пригоден для обнаружения антител к вирусу ИРТ. Результаты применения его совпадают с данными реакции нейтрализации.

9. Метод elisa является чувствительным,специфическим и воспроизводимым методом для выявления вируса ИРТ и антител к нему.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Метод ИФА рекомендуется для выявления вируса ИРТ в экскретах экспериментально зараженных животных и при естественном течении инфекции.

2. Непрямой метод- elisa рекомендуется для обнаружения специфических антител у реконвалесцентов и вакцинированных животных.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Непоклонова, Ирина Владимировна, 1984 год

1. Аспетов Р.Д., Рязанова Г.Л. Использование иммунопероксидаз-ного метода для идентификации энтеровирусов. Лабораторное дело, 1977, to 8, с. 486-488.

2. Бензин И.В., Угарова Н.Н., Киршенгольц В.Н. Влияние просте-тической группы пероксидазы из хрена на стабильность фермента. Биохимия, 1975, to 2, с. 297-301.

3. Ванеева Л.И., Цветкова Н.В. Иммуноферментный метод, его настоящее и будущее: /Обзор/ Иммунология, 1980, to 2, с.13-19.

4. Васильев А.В. Использование метода радиального гемолиза в геле для обнаружения антител к вирусу инфекционного рино-трахеита крупного рогатого скота. Сб. науч.трудов /Моск. вет.акад.,им.К.И.Скрябина, 1980, т. 113, с. 61-65.

5. Воллер А., Бидуэлл Д., Бартлет А. Иммуноферментативные реакции в диагностической медицине. Бюл. ВОЗ, 1977, 53,to I, с. 38-48.

6. Временное Наставление по лабораторной диагностике инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, М., 1973, 20 с.

7. Вспышка инфекционного ринотрахеита у племенного скота после транспортировки /В.С.Иванов, З.Ф.Зудилина, Г.А.Надточей, Н.Н.Крюков. Бюл.Всесоюз. ин-та эксперим.ветеринарии, 1972, вып.14, с.16-17.

8. Выделение вируса ИРТ в культурах перевиваемых клеток /Н.Н. Крюков, Т.И.Козыренко, Г.А.Надточей и др. Ветеринария, 1977, to 9, с. 46-47.

9. Выявление антигена вируса болезни Ауески в культуре клеток иммуноферментным методом /Н.Н.Козлова, А.В.Балмасов, Е.Г. Реутова и др. В кн.: Актуал.вопр. вет.вирусологии: Тезисы докл. У Всесогоз.вет.вирусологич.конф. Казань, 1980, с.41.

10. Гаврилова Е.М., Дзантиев Б.Б., Егоров A.M. Получение и свойства иммунопероксидазных комплексов. Биохимия, 1979, вып. 9, т. 44, с. I6I4-I622.

11. Гарднер П.С., Грандиен М., Мак-Куиллин Д. Сравнение иммуно-флуоресцентного и иммунопероксидазного методов вирусологического диагноза на большом расстоянии: совместное исследование ВОЗ. Бюл. ВОЗ, 1978, Ш 56, с. 67-74.

12. Герпетическая инфекция быков-производителей /Е.В.Андреев, Н.П.Чечеткина, О.Д.Дудник и др. Ветеринария, 1977, № 9, с. 56-57.

13. Гришенкова А.С., Назаров В.А. Идентификация вируса ИРТ методом иммунофлуоресценции. Ветеринария, 1976, № 3, с. II2-II3.

14. Давыдова А.А. Вирусемия в иммунном организме при герпесе и клещевом энцефалите: Автореф. Дис. . канд.биол.наук. - М., 1981. - 10 с.

15. Данишевский Д.А. Цитопатогенное действие вирусов инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 в культуре клеток: Автореф. Дис. . канд. вет.наук. М., 1981. 19 с.

16. Динамика накопления преципитиногенов при экспериментальном ринотрахеите крупного рогатого скота /Ю.В.Фомин, И.А.Петрова, Г.А.Иванова и др. В кн.: Тезисы докл. Всесоюз. меж-вуз. науч. конференции по вет.вирусологии, М., 1973, ч. I, с. I2I-I22.

17. Зудилина З.Ф., Крюков Н.Н., Надточей Г.А. Выделение и идентификация двух штаммов вируса инфекционного ринотрахеита. -Бюл. Всесоюз. ин-та эксперим.ветеринарии, 1971, й II, с. 29-30.

18. Иммуноферментный анализ /В.С.Авилов, Л.А.Мникова, В.К.Сологуб и др. Ветеринария, 1981, № 8, с. 33-35.

19. Использование антител, меченых пероксидазой и ФИТЦ для экспресс-диагностики гриппа /Е.С.Кетиладзе, Н.Н.Жилина, Х.Херрман и др. Вопросы вирусологии, 1978, й 6, с. 695699.

20. Использование метода иммунофлуоресценции при диагностики инфекций крупного рогатого скота /А.М.Игнатьев, Ю.В.Моин, Р.А.Бабикова, И.А.Петрова. Сб. науч.трудов /Моск. вет. акад., 1973, т. 70, с. II8-II9.

21. Караджов И., Игнатов Г. Диагнозирование на инфекциозния ринотрахеит по говедата., Ветер. Сбирка, 1979, ffi 2, с. II-12.

22. Крюков Н.Н., Семенихин А.Л. Реакция непрямой гемагглюти-нации при лабораторной диагностике инфекционного ринотра-хеита крупного рогатого скота. Бюл. Всесоюз. ин-та эк-сперим. ветеринарии, 1970, й 8, с. 48-53.

23. Крюков Н.Н. Инфекционный ринотрахеит /пустулезный вуль-вовагинит/ крупного рвгатого скота. Сб. научн.трудов Всесоюз. ин-та эксперим. ветеринарии, 1970, т. 37, с. 146149.

24. Крюков Н.Н. Инфекционный ринотрахеит-пустулезный вуль-вовагинит крупного рогатого скота. В кн.: Инфекционные болезни при промышленном скотоводстве., М., 1980, т. 13, с. 32-113.

25. Бучерявенко Л.И. Цит. по Н.Н.Крюкову. В кн.: Инфекционные болезни при промышленном скотоводстве., М., 1980, т.13, с. 32-113.

26. Лабораторная диагностика вирусных болезней животных /В.Н. Сюрин, Г.А.Иванова, Е.А.Краснобаев, Ю.В.Фомин. М., Колос, - 416 с.

27. Майборода А.Д. Бляшкообразующие свойства вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. Бюл. Всесоюз.ин-та эксперим.ветеринарии, 1972, т. 14, с. 28-29.

28. Майборода А.Д., Кашкинбаев К.А. Выделение вируса и клинико-морфологические особенности ИРТ у телят раннего возраста. -Ветеринария, 1977, У& 3, с. 54-55.

29. Морфологические изменения в органах телят при инфекционном ринотрахеите /С.Ф.Чевелев, Ф.П.Курченко, Н.И.Архипов и др.-В кн.: Тезисы докл. Всесоюз.науч. конференции по вет.вирусологии, М., MBA, 1973, ч. 2, с. 38-39.

30. Определение антител иммуноферментным методом /Л.А.Мникова, B.C. Авилов, М.М.Гоголев и др. Ветеринария, 1983, № 4, с. 65-66.

31. Патоморфология при инфекционном ринотрехеите телят /В.А.Шубин, З.Ф.Зудилина, Н.Н.Крюков и др. Ветеринария, 1972,12, с. 58-60.

32. Петрова И.А. Изучение экспериментального инфекционного рино-трахеита крупного рогатого скота и усовершенствование методов лабораторной диагностики этого заболевания: Автореф. Дис. . канд.вет.наук., Тарту, 1973. 19 с.

33. Респираторное заболевание откормочных телят /З.Ф.Зудилина, В.А.Шубин, В.А.Сергеев и др.- Бюл. Всесоюз. ин-та экспе-рим. ветеринарии, 1972, с. 14-15.

34. Реутова Е.Г. Иммуноферментный метод диагностики вирусных болезней. Ветеринария, 1980, 1° 7, с. 25-27.

35. Свешникова Н.А., Мальцева Н.Н., Хабахпашева Н.А. Применение иммунопероксидазного метода для быстрой индикации некоторых тогавирусов, ортопоксвирусов и антител к ним. Вопросы вирусологии, 1980, !й 5, с. 31-35.

36. Соловей Г.А., Линник С.А. В кн.: Защита животных от инфекционных болезней в комплексах Молдавии., Кишинев, 1980,с. 27-31.

37. Соловьев Б.В., Фомин Ю.В., Абдулла Нияз. О бляшкообразующей способности вируса инфекционного ринотрахеита. В кн.: Тезисы докл. Всесоюз. межвузов. науч. конференции по вет. вирусологии, М., 1973, ч. I, с. 36-37.

38. Соловьев Б.В. Некоторые биологические свойства вируса и специфическая профилактика инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. Дис; . канд. вет.наук. М., 1976,- 386 с.

39. Соловьев Б.В., Бехтерев С.И. Современные проблемы специфической профилактики инфекционного ринотрахеита. Сельское хозяйство за рубежом, 1980, Ш 2, с. 50-53.

40. Сравнительная оценка методов лабораторной диагностики ИРТ " крупного рогатого скота /И.А.Петрова, Ю.В.Фомин, Л.В.Цепаева и др. Тезисы докл. Всесоюз. межвузов, науч.конференции по вет. вирусологии, М., 1973, ч. I, с. 85-87.

41. Сравнительные данные при использовании прямого иммунопероксидазного и иммунофлуоресцентного методов в диагностикехронической герпетической инфекции /А.А.Давыдова, А.К.Шублад' зе, Н.А.Захарова и др. Вопросы вирусологии, 1980, № I, с. 100-103.

42. Сюрин В.Н., Еуненков В.В. Актуальная проблема ветеринарной вирусологии. Ветеринария, 1977, № 4, с. 45-48.

43. Сюрин В.Н., Фомина Н.В.,.Частная Ветеринарная вирусология, М.: Колос, 1979. 472 с.

44. Харламбиев X. Мукозна болеет и заразен ринотрахеит по гове-дата. Нац.Центр науч. и техн.информ. сел. хоз-ва при ССА.- София, 1975, 132 с.

45. Химическая модификация Е- групп остатков лизина в пероксидазе из хрена. Доступность этих групп различным модифицирующим агентам /Н.Н.Угарова, Г.Д.Рожкова, Т.Е.Васильева, И.В.Березин. Биохимия, 1978, вып. 5, т.43, с.793-797.

46. Шилд Г., Перейра М. Радиальный гемолиз, новый метод определения антител к гемагглютинину гриппа. Бюл. ВОЗ, 1976, 52, й I, с. 47-54.

47. Штрауб О.Х. Инфекции крупного рогатого скота, вызываемые вирусами герпеса. М.: Колос, 1981. - 207 с.

48. Bachmann P. Isolierung und Identificierung vor Rotaviren als Durchfallerreger bei Perkeln und deren verbreitung beim Schwein in der Bundesrepublik Deuschland.- Tierarztl. Umsch., 1979, 34, 12, p. 825-828.

49. Bagdadi M., Martin J. Uber das vorcommen von meningoen-zephalitis im verlaufe von IRR-infectionen bei Kalbern und Jung-rinden.- Monatshr. Veterinarmed., 1974, 29, 7, s. 253-257.

50. Bartha A., Kisary J., Belak s. The general febrile respiratory from of infectious bovine rhinotracheitis in calves.- Acta Vet. Acad. Sci. Hung., 1974, 24, 1-2, p. 77-83.

51. Bergmann H., Hahnefeld H. Immunofluoreszenz studien mit viren der infectiosen bovinen Rhinotracheitis und des Blaschen-ausschlages des Rindes in Kalbern encellkulturen.- Arch. Exp. Veterinermed., 1967, 21, N.3, p. 801-808.'

52. Bindrich H. Untersuchungen ubcr die virusarten der Rhinotracheitis und des Exanthema Coitale vesiculosum Bovis mittels der Fluorescenzmicroskopie.- Zbl. Baceriol.,1963, 189, p. 135-146.

53. Bommeli W., Kihm U. ELISA-the nucleus of the IBR/IPV control programm in Switzerland.-In: Current Topics in Vet. Med. and Anim. Sci., vol.22, 1981, p. 242-251.

54. Bowes N.D., Nisnovich L., Morgavi M. Experimental production of bovine infectious rhinotracheitis.-Gac. Vet. /В. Aires/, 32, 1970, p. 181-186.

55. Bowling C.P., Goodheart C.R., Plummer G. Oral and Genital bovine herpesviruses.- J. Virol., 1969, 3, N 1, p. 95-97.

56. Briaire J. An enzyme-linked immunosorbent assay /ELISA/ for the detection of antibody against Aujeszky's disease virus in pig sera.- Zbl. Veter. Med. R.B., 1979, 26, 76-81.

57. Bruskova M., Svandova E,, Syrucek L. Detection of serum antibodies to respirators'1 syncytial virus by ELISA.-Acta Virol., 1981, 25, 1, p. 41-47.

58. A comparative study of different techniques for the detection of rotaviruses in stools / R. Gevenini, F.Rumpia-nesi, m. Donati, E. Facieri et al. Microbiologica,1982, 5, IT 2, p. 131-135.

59. Chasey D.A. A simple and rapid immunoperoxidase test for the detection of viruses antigens in tissue culture.- Vet. Rec., 1980, 106, N.24, p. 506-507.

60. Chia W.K., Savan M. Electron microscopic observationson infectious bovine rhinotracheitis virus in bovine fetal trahe-al organ cultures.- Arch. Ges. Virusforsch., 1974, 45, ИЗ, p.185-198.

61. Chow T.L., Deem A.W., Jensen L.A. Infectious rhinotrache-itis in cattle. 2.Experimental reproduction.- Proc. U.S. Livestock San. A., 1955, p. 168-172.

62. Chun P.W., Pried M., Ellis E.F. Use of watern -soluble polymers for the isolation and purification of human immunoglobulins.- Anal. Biochem., 1967, 19, 3, p. 481-487.

63. Comparison of viral isolation direct immunofluorescence and indirect immunoperoxidase techniques for detection of genital herpes simplex virus infection /R.S.Moseley, L.Corey, D.Benjamin et al.- J Clin. Microbiol., 1981, 13, IT 5, 913-918/

64. Crook 1T.E., Payne C.C. Comparison of three methods of ELISA for baculoviruses.- J.Gen. Virol., 1980, 46, 1, 29-37.

65. Crowther J., Abu Elzein E.M.E. Detection and quantification of foot and mouth disease virus by enzime labelled immunosorbent assay techniques.- J. Gen. Virol., 1979, 42, Ж 3, 597-602.

66. Darcell C.Q. The prevalence of neutralizin antibodies to infectious bovine rhinotracheitis /IBR/ in cattlein Alberta.-- Can. Vet.J. , 1973, 17, 7, 167-169.

67. De Pauli F.G., Sabina L.R. Studies of infectious bovine rhinotracheitis virus. Aminoacid requiremens for viral replication.--Arch. ges. Virusforschung., 1972, 36, N 3/4, p. 380-390.

68. Durham P.J.K. Infectious bovine rhinotracheitis virus and its role in bovine abortion.- II. Zeland. Vet. J., 1974, 22,H 10, p. 175-180.

69. Engvall E., Jonssen K., Perlmann P. Enzyme-linked immnnosor-bent assay. 11. Quantitative assay of protein antigen, immunoglobulin G, by means of enzyme-labelled antigen and antibody-coated tubes.--Biochim.,Biophys. Acta, 1971, 25, 427-435*

70. Engvall E., Perlmann P. Enzyme-linked immunosorbent assay /ELISA/: Quantitative assay of immunuglobulin G.-Immunochemistry, 1971, 8, p. 871-874.

71. Enzyme-linked immunosorbent assay /ELISA/ for detection of human reovirus-like agent of infantile gastroenteritis. /R.H.Yolken, H.W.Kim, T.Clem et al.- Lancet, 1977, 2, 8032,263.266.

72. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of respiratory syncitial virus infection: application to clinical samples/ K. Mcintosh, M.Hendry, M.L.Pahnestock et al.-J.Clin. Microbiol., 1982,v,2, p. 329-333.

73. Estela L.A. Application of the agar gel technique jg the diagnosis of infectious bovine rhinotracheitis. Amer. J. vet. Res., 1967, 28, 1903-1904.

74. Ferrari M., Gualandi G.L., Castrucci G. Susceptility of cell line cultures of bovine kidney origin to infectious bovine rhinotracheitis and parainfluenza-3 viruses.- Сотр. Immunol. Microbiol, and Infect. Diseases, 1981, 4, Ж 3-4, 301-306.

75. Pink В., Lapfe E. Immunoperoxidase technique for the rapid diagnosis of methanol-H202 labile viral antigens in clinical material.- Experientia, 36,4, 496-498, 1980.

76. French E.L. A specific virus encephalitis of calves isolation and characterisation of the casual agent.- Austral. Vet. J., 1962, 38, p. 216-221.

77. Gerna G., Achilli G., Chambes R. Determination of neutralizing antibody and IgG antibody to varicella-zoster virus and IgG antibody to membrane antigens by the immunoperoxidase technique.- J. Infec. Diseases, 1977, 135, N. 6, p. 975-979.

78. Ghose L.h., Schlagl R.D., Holmes J.H. Comparison of an enzyme linked immunosorbent assay for quantitation of rotavirus antibodies with complement fixation in an epidemiological survey.- J. Clin. Microbiol., 8,p. 268-276.

79. Gibbs E.P.J., Rweymamu M.H. Bovine Herpesviruses. Part 1. Bovine herpesviruses 1.-Yet. Bull., 1977, N 5, p. 317343.

80. Gracham R.G., Kamozski II.J. The early stages of aa-sorbtion of injected horseradish peroxidase in the proximal tubules of mouse kidnei: ultrastructural cytochemistry by a new technique.- J. Histochem. Cytochem., 1966, 14, p. 291-302.

81. Grillner L., Landquist M. Enzyme-Linked immunosorbent assay for detection and typing of herpes simplex virus.-Eur.

82. J. Clin. Microbiol., 1983, N 1, p. 39-42.109» Grocham D., Estes M. Comparison of methods for immu-nocytochemical detection of rotavirus infections.- Infect, and Immun. , 1979, 26, Ж 2, p. 686-689.

83. Halkin G.H., Sarov I. Immunoperoxidase antibody to human cytomegalovirusinduced membrane antigen assay in the absen-ceof interfering immunoglobulin G receptors.- Intervirolagy, 1980, 14, H 3-4, p. 155-156.

84. Halkin H., Leventon K., Sarov L. Antibody to varicella-zoster virus induced membrane antigen: immunoperoxidase assay with air-dried targent cells.- Infect. Diseases, 1979, 140, II 4, p. 601-604.

85. Hendry R.M., Herrman J.E. Immobilization of antibodies on nylon for use in enzyme-linked immunoassay.- J. Immunol. Methods 35, 1980, 285-286.

86. Hendry R.M., Mclntoch K. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of respiratory syncytial virus infection: development description.- J.Clin. Microbiol., 1982, 16, 2, 324-328.

87. Herring A.J., ITettleton P.P., Burrels C. A micro-enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of antibodies to infectious bovine rhinotracheitis virus.- Vet. Rec., 1980, 107, 155-156.

88. Herrman J.E., Hendry R,M., Collins M.P. Factors involved in enzyme-linked immunoasaay of viruses and evaluation of the method for identification of enteroviruses.- J.Clin. Microbiol.,1979, Ю, 2, 210-217.

89. Herrman J.E., Morse S.A., Collins M.P. Comparison of techniques and immunoreagents used for indirect immunofluorescence and immunoperoxidase identification of enterovirus.- Infect. Immun. 1974, 10, 220-226.

90. Huck R.A., Millar P.G., Woods D.G. Experimental infectious of maiden heifers by the vagina with IBR/IPV virus. An experimental study.- J. Сотр. Pathol., 1973, 83, 2, 271-279.

91. Hugles J.P.,01ander H.J., Wada M. Keratoconjunctivitis associated with infectious bovine rhinotraceitis.- J. Amer. Vet. Med. Assoc., 1964, 145, IT 1, 32-39.

92. Hubschle O.J.В., Lorenz R.J., Mathena M.D. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of bluetongue virus antibodies.-- Am. J. Vet. Res.,1981, 42, 1, 61-65.

93. Immuno-perozydase. Houvelle technique specifique de mise en evidence de I'antigene rabique intra et extracellulare en mic-roscopie optique/ P.Atanasiu, P. Dragonas, H.Tsiang, A.Harbi.-Annls. Inst. Pasteur, Paris, 1971, 121, 2, 247-251.

94. Impiegodella tecnica immunoenzimatica /ELISA/ per la diagnos delle malatie del polio adenovirus /L.Battistacci, P. Vivo-li, T.Prescura, L. Giallerri.- Clin. Vet. ,1982, 105, IT 9-10, 289- 296.

95. Ivanov Л.P., Bashkirtsev V.H., Tcachenko E.A. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of arenaviruses.- Arch. Virol., 1981, 67, 1, 71-74.

96. Jasty V., Chang P.W. Infectious bovine rhinotracheitis virus in.bovine kidney cells: sequence of viral prodaction, cellular changes, and localization of viral nucleuc acid and protein.-Am. J. Vet. Res., 1969, 30, II 8, 1325-1332.

97. Lis Jeune J.M., Hart L.T., barson A.D. Microijnmunodiffusion test for detection of antibodies to IBR virus in bovine serum. Amer. J. Yet. Res., 1977, 38, it 4, 459-463.

98. Kachrs R.P. Infectious bovine rhinotracheitis. A review and update.- J.AM. Vet. Med. Assoc., 1977, 171, II 10, 1055-1064.

99. Kibry P.D., Martin H.T., Ostler O.C. An indirect haem-agglunation test for the detection and assay of antibody to bovine rhinotraheitis virus.- Vet. Rec., 1974, 94, H 6, 361-362.

100. Kodama Y., Ogata,M, Schimizy Y. Serum immunoglobulin A antibody response in svine TGS virus, as determined by ELISA.-Am. J. Vet. Res. 42, 3, 437-442, 1980.

101. Kondorosi E., HHgy G., Denes P. Optimal condition for the separation of ratt lymfhocjtes on anti-immunoglobulin-immunoglobulin affinity columns.- J. Immunol. Methods, 1977, 16, 1, 1-7.

102. Kraai^eveld C.A., Madge M.H., Machnaughton M.R. Enzyme -linkedimmunosorbent assay for coronaviruses HCV 229E, MHV3.--J.Gen. Virol., 1980,49, 1, p.83-89.

103. Krishnaswamy S., Keshavamurthy B.S., Sundararajan S.-The use of the direct immunoperoxidase test to detect the multiplication of rinderpest virus in bovine kidney cell culture.- Vet. Microbiol., 1981, 6, IT 1, p. 23-29.

104. Kurstak E. The immunoperoxidase technique: lokalization of viral antigens in cells.-In.: Methods in Virology, 1971, vol5, 423-444.

105. Madin S.H., York C.J. Isolation of the infectious bovine rhinotracheitis virus.- Science, 1956, 19, 124, 721-722.139» Marel P., van der Wezel A.L. Quantitative determination of rabies antigen by ELISA.- Devel. Biol. Stand., 1982,50, 267-273*

106. McKercher D.G., Wada E.M., Straub O.C. Distribution and persistence of infectious Bovine Rhinotracheitis virus in experimentally infected cattle.- Am. J. Vet. Res., 1963, 24, 100, p.510-514.

107. McKercher D.G. A comparison of the viruses of infectious Bovine Rhinotracheitis /IBR/ , Infectious Bovine Vulvovaginitis /IPV/ and Rindpest. Part 2. Plaque assay.- Can. J. Сотр. Med. Vet. Sci., 1964, 28, p. 113-120.

108. Micro indirect hemagglutination test for detecting antibody infections rhinotracheitis virus/Y.Schimizu, Y.Isayama, Y.Kawakami et al.-Hat. Inst. Anim. Health. Quart.,1972, 12, 1.p. 1-7.

109. Mockett A.P.A., Darbyschire J.H. Comparative studies with an enzyme-linked immunosorbent assay /ELISA/ for antilpgdies to avian infectious bronchitis virus.- Avian Patol.,1981, p.1-10.

110. Mohanty S.B., Lillie M.G. Relationship of infectious bovine keraticonjunctivitis virus to the virus of infectious bovine rhinotracheitis.- Cornell. Vet., 1970, 60, H 2, p. 3-9«

111. Mollelo J.A., Owen H., Jensen R.Placental pathology.Y. Placental lesions of cattl experimentally infected with infection bovine irhinotracheitis virus.- Am. J. Vet. Res., 1966, 27, 119, p. 907-915.

112. Moyniham M., Ladefoged P., Mathiesen L. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of poliovirus antigen and antibody.- Proc. 3 rd.Gen. Meet.Eur.Soc. Anim. Cell. Technol. Oxford., 1979, Basel e.a., p. 203-205.

113. Hakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase-labelled antibody: A new method of conjugation.- J. Histochem. Cytochem., 1974, 22, p. 1084-1091.

114. Uakane P.K., Pierce G.B. Enzyme-labelled antibodies: preparation and application for the localization of antigens.-J. Histochem. Cytochem., 1966, 14, p. 929-931.

115. Hakane P.K. , Pierce G.B. Ezyme-labelled antibodies for the light and electron microscopie localization of tissue antigens.--J. Cill.Biol., 1967, 33, p. 307-318.

116. Hew enzyme immunoassay for measurement of influenza A /Victoria/ 3/75 virus in nasal wasches/R.A.Berg, J.Rennard, B.R. Murphy et al.- Lancet, 1980, 8173, p. 851-853.

117. O'Beirne A.J., Cooper H.R. Heterogeneous Enzyme Immunoassay.- J. Histochem. Cytochem., 1979, 27, 1148-1162.

118. Occurence of encephalitis caused Ъу infectious bovine rhinotracheitis virus in calves in Hungary/A. Bartha, G.Hajdu, P.Aldary et al.- Acta Vet. Acad. Scientiarum Hungaricae., 1969, 19 /2/, p. 145-151.

119. Prtfikaz protilatek proti viru infebcni bovinni rhinotra-cheitidy /IBR/ v ranem a pozdnim postinfefccnim obdobi/ J.Mensik, A.6epica, M.hajkova et al.- Vet. Med., 1975, 20, N 10-11,p. 595-608.

120. A rapid enzyme immunoassay for detection of antibodies ti varicella-zoster virus/ H.Halkin, S.Leventon-Kriss, R.Joffeet al.- Int. Virol., lY.Abstr., 4th Int. Congr.Virol.,Hague,1978,. Y/ageningen, 1978,635*

121. Recent developments in upper respiratory diseases of cattle/D.G. McKercher, J.E.Moulton, J.W.Kendrick et al.-Proc. 59 Ann. Meet. U.S.Livestock San. Ass., 1955, p. 152-167.

122. Recherche des anticorps contre le virus de la rhinotrach ite bovine infectieuse par la methode ELISA/ M.Solsona, B.Perrin, M.Perrin, A Moussa.- Bull. Acad. Vet. de Prance, 1980, 53, p.215--225.

123. Revappa K.L., Ramachandra R.U., Radhavan R. Pathogenesis of Marek's disease-distribution of viral antigens in infected chickens as detected by immuno- peroxidase test.- Indian Vet., J., 1979, 56, IT 4, p. 257-261 .

124. Rosner S.F. Infectious bovine rhinotracheitis: clinical review, immunity and control.- J.Am. Vet. Med. Ass., 1968, 153,1. 12, p. 1631-1638.

125. Ruitenberg E.J., Brosi B.J. Automation in Enzyme-immunoassay.- Scand.J.Immunol., 1978, 8, /suppl 7/, p. 63-72.

126. Scherrer R., Bernard S.Application of enzyme-linked ims. munosorbent assay /ELISA/ to the detection of calf rotavirusand rotavirus antibodies.- Ann. Microbiol.,1977, 128A, p. 499- 5Ю.

127. Schmidt IT.J., J.Dennis., Lennete E.H. Comparison of immunofluorescence and immunoperoxidase straining for identification of rubella virus isolates.- J.Clin. Microbiol., 1978,7, N 6, p. 576-583.

128. Schmidt N.J., Helen H., Chin J. Application of immunoperoxidase staining to more rapid detection and identifi-catian of rubella virus isolates.- J. Clin. Microbiol., 1981, 13, N 4, p. 627-630.

129. Schroeder R.L., Moys M.D. An acute uppern respiratory infection of dairy cattle.- J. Am. Vet. Ned. Ass., 1954,125,p. 471-472.

130. Sela Ы., Fuchs S.S. Preparation of syntetic antigens. In: Ilandboock of experimental Immunology,Oxford, 1978,p. 10-30.

131. Shanon Ъ., Kay E., Lev/ J. Purification of horseradish peroxidase.

132. J. Biol. Chem., 1966, 241, p. 2166-2172.

133. Skaug K. Application of the passive haemolysis test for the determination of rubella virus antibody.- Acta pathol. microbiol. Scand.,1975, Sect.B. 83, p. 367-372.

134. Sheffy B.E., Davis D.H. Reactivation of a bovine herpesvirus after corticosteroid treatment.- Proc. Soc. exptl. Biol. Med., 1972, 140, 3, p. 974-976.

135. Shimizy Y.»Isayama Y., Kawakami Y. A micro indirect hemagglutionation test for detecting antibody against infectious bovine rhinotraheitis virus. Hat. Inst. Anim. Helth.Quart. 1972., 12., 1-7.

136. Solid Phase enzyme-immunoassay for detection of hepatitis В surface antigen3/ G. V/olters, L. Kuijpers, J. Kacaki, et al.- J.Clin. Pathol., 1976, 29, p. 873-879.

137. Steinhoff Ы.С., Hall C.B., Schnabel K.C. Respiratory sincytial virus serology by a simplified enzyme- linked immunosorbent assay.- J. Clin. Microbiol.,1980, 12, 3,p. 447-450.

138. Straub O.C., Bohm H.O. Untersuchungen ilber die Localisation und Persistenz der Virus der infectiosen Rhinotrache-itis und des Blaschenausschlages in experimentell infizieren Rindern .- Berl. und Munch. Tierarztl. Wchschr., 1964, 77. 23, s. 458-462.

139. Strauss II. Phenylhydrasine as inhibitor of horseradish peroxidase for use in immunoperoxidase procedurs.- J. Histo-chem. Cytochem., 1972, 20, p. 249-251.

140. Swanepoel R., Blackburg U.K. ,Y/ilson A. A comparison methods for demonstrating antibodies to the virus of infectious bovine rhinotraheitis /infectious pustular vulvovaginitis /. Brit. Vet. J., 1976, 4, p. 423-427.

141. Toma B. Recherche des anticorps anti-virus de la ma-ladie d'Aueszky par la technique ELISA.- Rec. Med. Veter., 1979, 155, 5, p. 455-463.

142. Ultrastruktural localization by immunoperoxidase techniques of influenza virus antigens in abortive infection of L cells.-/Acta Virol., 1981, 25, JJ 6, p. 381-389--F.Ciampor, E.V. Sidorenlco, IT.V.Taikova et al.

143. Use of immunoenzsnne technique for the detection of Au^eszky's disease virus in cell culture /J. Roszkov/ski, M. Bar-toszcze, J. Zadura at all- Yet. Rec., 1978, 102, p. 462-463.

144. Voller A., Bartlett A., Bidvell D. Enzyme immunoassays with reference to ELISA techniques.- J. of Clin. Pathol.,1978, 31, 6, p. 507-520.

145. Voller A., Bidvell D., Bartlett A. Microplate enzyme immunoassays for the immunodiagnosis of virus infections. In: -Am. Soc. Microbiol., 1976, p. 506-512.

146. Vyuziti komplexni virologiche teclmiky к primemu pru-kazu PI-3 a IBR v organech infikovanych telat /J. Memsik, J. Pospisil, A. Suchankova et al.- Vet. Med. /CSSR/, 1975, 20,1. 10-11, p. 609-622.

147. Watanabe H. , Malkenzie J.S. The detection of influenza A viruses antigens in cultured cells by enzyme-linked immunosorbent assay.- Arch. Virol., 1981, 67, 1, p. 31-43.

148. Wellemans G., Leunen J. Le tropism digestif du virus IBR . 2. part. Examens virologiques.- Ann. Med. Vet. 1974, 118, 4, p. 243-251.

149. Wicker R., Avrameas S. Localization of virus antigens by enzyme-labelled antibodies.- J. Gen. Virol., 1969 a, 4,p. 465-471.

150. Yolken R.H., Stopa P.J. Comparison of seven enzyme immunoassay sistems for measurement of citomegalovirus.-J. Clin. Microbiol., 1980, 11, 6, p. 546-551.

151. Zuffa J., Rajaani J., Matis J. Replication of infectious bovine rhinotracheitis virus in calf kidney cells studied by immuno and acridine orange fluorescence.- J. Acta Virol. , 1970, 14, N. 6, p. 459-466.