Иммуноферментный анализ в диагностике вирусной диареи крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Амиров, Акмал Холмуродович

• Амиров, Акмал Холмуродович
• кандидат ветеринарных наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Амиров, Акмал Холмуродович

1 ВВЕДЕНИЕ

1.1 Актуальность.

1.2 Цель и задачи исследования.

1.3 Научная новизна.

1.4 Практическая значимость.

1.5 Основные положения, выносимые на защиту:.

1.6 Личный вклад соискателя.

1.7 Апробация работы.

1.8 Публикация результатов исследований.

2 Обзор литературы.

2.1 Вирусные респираторные инфекции крупного рогатого скота.

2.2 Вирусная диарея крупного рогатого скота.

2.3 Лабораторная диагностика вирусных респираторных инфекций крупного рогатого скота.

2.3.1 Общие принципы лабораторной диагностики вирусных респираторных инфекций крупного рогатого скота.

2.3.2 Реакция нейтрализации.

2.3.3 Реакция связывания комплемента.

2.3.4 Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).

2.3.5 Иммуноферментный анализ (ИФА).

2.3.6 Анализ данных литературы.

3 Собственные исследования.

3.1 Материалы.

3.1.1 Штаммы вирусов:.

3.1.2 Диагностические сыворотки.

3.1.3 Реактивы.

3.1.4 Конъюгаты.

3.1.5 Клеточные культуры.

3.1.6 Среды.

3.1.7 Объекты исследований.

3.1.8 Животные.

3.2 Методы.

3.2.1 Клинико-эпизоотологические методы исследований.

3.2.2 Вирусологические методы исследований.

3.2.3 Иммунологические методы.

3.2.3.1 Реакция нейтрализации.

3.2.3.2 Реакция иммунодиффузии.

3.2.3.3 Реакция непрямой гемагглютинации.

3.2.3.4 Твердофазный иммуноферментный анализ.

3.2.4 Статистические методы.

3.3 Эпизоотологический мониторинг респираторных и желудочно-кишечных болезней телят, маститов и эндометритов у коров в хозяйствах Смоленской области.

3.3.1 Распространение респираторных и желудочно-кишечных болезней телят, маститов и эндометритов у коров.

3.3.2 Изучение этиологии энтеритов телят в Смоленской области.

3.4 Разработка методов выявления специфических антител и антигенов вируса диареи крупного рогатого скота.

3.4.1 Получение гипериммунной сыворотки против возбудителя вирусной диареи крупного рогатого скота.

3.4.2 Совершенствование методов ТФ ИФА для выявления антител к вирусу диареи крупного рогатого скота.

3.4.2.1 Определение специфичности метода ТФ ИФА для обнаружения антител к вирусу ВД КРС в сыворотках крови КРС.

3.4.3 Разработка конкурентного метода ТФ ИФА для выявления антигенов к вирусу диареи КРС.

3.4.3.1 Определение специфичности конкурентного метода ТФ ИФА для обнаружения антигена вируса диареи КРС в биологическом материале.

3.4.4 Определение оптимальных параметров постановки ТФ ИФА для выявления специфических к вирусу диареи КРС антител в сборном молоке коров.

3.4.5 Сравнительная эффективность различных методов выявления антител к вирусу диареи в сыворотке крови крупного рогатого скота.

3.5 Серологический мониторинг вирусной диареи в хозяйствах Смоленской области с использованием ИФА.

3.6 Схема лабораторной диагностики вирусной диареи КРС.

3.7 Экономическая эффективность диагностических мероприятий при вирусной диареи телят.

4 Обсуждение.

5 Выводы.

6 Практические предложения.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммуноферментный анализ в диагностике вирусной диареи крупного рогатого скота»

1.1 Актуальность

Специализация молочного и мясного скотоводства способствует более рациональному использованию в практике достижений науки. Однако интенсификация животноводства ставит ряд порой трудноразрешимых проблем перед ветеринарной медицине в плане эффективной системы профилактики инфекционных заболеваний, поражающих различные возрастные группы крупного рогатого скота, что может быть обусловлено высокой концентрацией поголовья на ограниченной площади, нарушением микроклимата, неполноценным кормлением, технологическими стрессами и другими условиями. Вследствие этого, появляется значительное количество особей, особенно среди молодняка, с ослабленной резистентностью, поэтому возрастает вероятность возникновения инфекционных болезней и повышается роль бактерио- и вирусоносительства. В таких условиях причиной респираторных и желудочно-кишечных болезней крупного рогатого скота, как правило, являются ассоциации возбудителей, включающие вирусы, бактерии и другие этиологические агенты, в том числе микотоксины, которые обладают мощными иммуносупрессивными свойствами. В этом случае, даже условно-патогенные микроорганизмы могут вызывать массовые вспышки болезней желудочно-кишечного тракта и дыхательных путей, заболеваемость при которых достигает от 5 до 100% с летальностью от 10 до 70%. Особенно следует акцентировать внимание на хозяйствах, работающих на сборном поголовье, поступающем из хозяйств-поставщиков с различным эпизоотическим и иммунным статусом. Среди болезней крупного рогатого скота наибольшее распространение получили желудочно-кишечные и респираторные инфекции, обусловленные возбудителями вирусной диареи, инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3. Указанные возбудители выделяются больными животными с истечениями, экскретами, загрязняя объекты окружающей среды, что способствует быстрому и широкому распространению инфекций.

При искусственном осеменении контаминированной спермой быков-производителей и выпаивании телят молоком от больных коров происходит одновременное инфицирование большого количества животных.

Респираторные и желудочно - кишечные болезни КРС распространены практически во всех хозяйствах Смоленской области. Они наносят серьезный экономический ущерб животноводству, связанный с потерей живой массы скота, снижением молочной продуктивности, нарушением воспроизводства и гибелью молодняка. Изменения структуры и технологии ведения животноводства, возникающие на фоне экономической реформы народного хозяйства, экономическое давление на сельскохозяйственное производство наложили отпечаток нестабильности на эпизоотическую ситуацию, требующую от животных определенного адаптивного периода, когда приходят в равновесие взаимоотношения их организма с условиями содержания. Эти периоды, сопровождающиеся временным снижением резистентности, являются наиболее благоприятными для развития инфекционных болезней, которые при традиционных режимах содержания животных, как правило, не возникают или протекают в латентной форме. За последние годы в хозяйствах Смоленской области, у клинически здоровых животных в сыворотке крови обнаруживаются антитела к вирусам ВД КРС (вирусной диареи), что связано с вирусоносительством. До сих пор ветеринарные специалисты не вооружены надежными способами оперативного выявления латентной формы ВД КРС. Феномен латенции при ВД КРС приводит к неконтролируемому распространению возбудителя инфекции

Характер течения латентной формы ВД КРС в России практически не изучен, недостаточно выявлены особенности проявления эпизоотического процесса заболеваний в хозяйствах. Ранняя диагностика, а также своевременное выявление скрытых вирусоносителей являются важным фактором в оздоровлении хозяйств от ВД КРС и недопущении распространения инфекции. Для успешного осуществления комплекса противоэпизоотических и профилактических мероприятий большое значение имеют сроки проведения диагностики и достоверность полученных результатов. Имеющиеся методы в арсенале ветеринарных лабораторий мало пригодны для экспресс-диагностики из-за низкой их чувствительности и производительности, продолжительности анализа, что является сдерживающим фактором для принятия срочных мер, а также проведения эпизоотологического мониторинга, включая серологические исследования.

Поэтому разработке и усовершенствованию иммуноферментного анализа и его различным вариантам в последние годы уделяется особое внимание. С помощью названного теста появляется возможность в течение короткого отрезка времени исследовать большое количество проб биологического материала на предмет выявления антигенов возбудителей или специфических антител. С помощью ИФА можно выявлять антитела в молоке коров и антигены вируса диареи, инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 в сперме быков-производителей.

Однако специфичность ИФА во многом зависит от чистоты реагентов, в т.ч. антигена, специфичности поликлональных и моноклональных антител, активности пероксидазы, технологии приготовления конъюгатов, а также качества подготовленных проб к анализу.

Таким образом необходимость совершенствование средств и методов лабораторной диагностики вирусной диареи крупного рогатого до настоящего времени остается актуальной для ветеринарной медицины проблемой и это послужило основанием для выбора темы диссертационной работы.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Амиров, Акмал Холмуродович

5 Выводы

1. Результаты эпизоотологического мониторинга инфекционных болезней крупного рогатого скота в хозяйствах Смоленской области, свидетельствуют, о том что уровень респираторных и желудочно-кишечных заболеваний телят составляет соответственно, 62,2% и 83,2% от народившихся. Заболеваемость коров маститами и эндометритами имеет тенденцию к росту и составляет, соответственно 10,5% и 15,9% от поголовья коров. Выбытие, убой и падеж телят от желудочно-кишечных и респираторных болезней составляют 16,0% от народившихся животных.

2. Разработана схема гипериммунизации телят, обеспечивающая получение специфических к возбудителю вирусной диареи КРС сывороток крови с активностью в реакции нейтрализации до 1:1280, пригодных для использования в диагностических тестах на основе ТФ ИФА.

3. Разработан способ получения антигена возбудителя вирусной диареи КРС для сенсибилизации твердой фазы пластин при постановке ТФ ИФА, который заключается в получении и использовании вируса через 12-24 часа культивирования на культуре клеток (ПЭК) без проявления ЦПД. Оптимальная концентрация белка в антигене для иммобилизации составляет 30 мкг/мл.

4. На основе созданных для лабораторной диагностики вирусной диареи КРС иммунореагентов, разработаны непрямой и конкурентный методы ТФ

ИФА, позволяющие эффективно выявлять противовирусные антитела классов IgM и IgG в сыворотках крови, молозиве и молоке КРС начиная с 4-х суток после заражения и вирусные антигены в биологическом материале.

5. Разработана схема лабораторной диагностики вирусной диареи крупного рогатого скота, включающая идентификацию возбудителя и выявление специфических антител методами ТФ ИФА.

6. При проведении серологического мониторинга в Смоленской области с помощью разработанных тест-систем, установлена персистенция вируса диареи КРС, у животных следующих групп: телят клинически здоровых невакцинированых-32,3%, переболевших энтеритами- 84,9%, респираторными болезнями- 71,8 %, коров клинически здоровых невакцинированых - 31,6%; многократно перегуливающих-90,2%, абортировавших-86,2%, больных катаральным, серозным маститом-79,6% и субклиническим маститом-77,8%.

7. Расчет экономической эффективности применения иммуноферментного анализа при диагностике вирусной диареи показал, что окупаемость составляет 1,78 рублей на затраченный рубль.

6 Практические предложения

На основании проведенных исследований разработаны, утверждены и предложены для практического использования «Методические рекомендации по использованию иммуноферментного анализа для выявления антител класса Ig G к вирусу диареи крупного рогатого скота (утверждены Заместителем Главы администрации Смоленской области - Начальником областного департамента по сельскому хозяйству, продовольствию и переработке 9 декабря 2002 г.).

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Амиров, Акмал Холмуродович, 2004 год

1. Азаренко B.C., Ковалев Н.А. Методические указания по лабораторнойдиагностике PC-инфекции крупного рогатого скота методом ИФА: Утв.

2. ГУВ Госагропрома БССР 4.11.90.- Минск, 1991.- 14 с.

3. Андреев Е.В., Дудник О.Д. Выделение цитопатогенных агентов из спермы быков-производителей //Сб. Ветеринария,- КиевД977,- В. 45.- С. 3-5.

4. Андреев Е.В., Драгомир А.В. Острые респираторные заболевания крупного рогатого скота.- Кишинев: Картя-Малдовеняскэ, 1979,- 194 с.

5. А.с. 614377 СССР, МКИ А 61 К 39/00. Способ сенсибилизации эритроцитов /Шамардин В.А., Каральник Б.В. (СССР) 4 е.: ил.

6. А.с. 643749 СССР, МКИ А 61 К 39/00. Способ получения эритроцитарного диагностикума /Шамардин В.А., Каральник Б.В. (СССР) 4 е.: ил.

7. А.с. 1322673 СССР, МКИ А 61 К 39/20. Штамм вируса Bovine viral diarrhoea micosal disease virus для изготовления вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота /Жидков С.А., Крюков Н.Н. (СССР) 4 е.: ил.

8. Баева Е.В. Функции иммунной системы при стрессовых воздействиях в раннем постнатальном онтогенезе: Автореф. дис. . д-ра биол. наук Л., 1991.- 34 с.

9. Бим М, Хамр Д. Респираторно-синцитиальный вирус //Лабораторная диагностика вирусных и риккетсиозных заболеваний,- М.: Медицина, 1974,- С.391-402.

10. Бродянский Ю.М. Реакция связывания комплемента //Иммунологическая диагностика вирусных инфекций. /Под ред. Т.В.Перадзе и П.Халонена.-М.: Медицина, 1985.- С.77-98.

11. Ветеринарная микробиология и иммунология /Радчук Н.А., Дунаев Г.В., Колычев Н.М., Смирного Н.И.- М.: Агропромиздат, 1991.- 383 с.

12. И. Шашенько А.С., Красочко П.А., Красочко И.А. Выявление антител к возбудителям вирусно-бактериальных инфекций у беловежских зубров //Современные проблемы охраны зубра: Материалы международного симпозиума по зубру.- Минск,1994.- С.73-74.

13. Гайдамович С.Я., Кирушенко Т.В. Микрокапельный метод постановки

14. РСК с арбовирусом //Вопросы вирусологии. 1972,- № 3,- С.358-361.

15. Гайдамович С.Я., Лаврова Н.А. Реакция связывания комплемента на твердой основе //Рукопись деп. во ВИНИТИ. № 1846-81 Деп,- М., 1981.9 с.

16. Головко В.В. Латентная форма респираторной инфекции крупного рогатого скота, особенности ее клинического проявления, диагностики и серопрофилактики //Сб. Совершенствование мер борьбы с болезнями сельскохозяйственных животных.-М., 1986 С.11-15.

17. Горбань Н.И. Вирусные респираторные болезни животных.- Киев: Урожай, 1981,- 64 с.

18. Гуненков В.В., Халенев Г.А., Сюрин В.Н. Вирусные и хламидозойные респираторные и кишечные инфекции крупного рогатого скота //Животноводство и ветеринария,- М., 1975.- Т.8.- С.5-131.

19. Джавец Э., Мельник Дж., Эйдельберг Э. Руководство по медицинской микробиологии.- М.: Медицина, 1982,- Т.З.- С.97-98.

20. Дудник О.Д. Вирусологический контроль спермы быков-производителей на наличие вируса инфекционного ринотрахеита пустулезного вульвовагинита (баланопостита) с использованием метода культуры клеток//Сб. Ветеринария,- М.:Колос, 1987.- В.62.- С.16-17.

21. Дяченко Н.С. Пассивная гемагглютинация и ее применение в вирусологии. Киев: Наукова Думка, 1979.- 148 с.

22. Жидков С.А. Вирусная диарея болезнь слизистых оболочек крупного рогатого скота /характеристика возбудителя, диагностика и специфическая профилактика: Автореф. дис. . д-ра вет. наук.- М.,1994.-44 с.

23. Зелютков Ю.Г., Красочко П.А. Эффективность постановки реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) при диагностике вирусной диареи крупного рогатого скота //Информационный листок.- Витебск: ЦНТИ, 1989,- №21.- с.4.

24. Зелюткоу Ю.Г., Красочко П.А. Атрыманне антыгеннага эрытрацытарнагадыягностыкума В1руснай дыярэ1 буйной рагатай живёлы //Весщ Акадэми навукБССР. Сер. сельскагаспадарчых навук.- 1990,- № С.113-116.

25. Илясова Л.С. Патогенность возбудителя вирусной диареи для нетелей //Ветеринария,- 1986,- № 4,- С.36.

26. Карпуть И.М. Иммунология и иммунопатология болезней молодняка.-Минск: Ураджай, 1993,- 288 с.

27. Каральник Б.В., Царевский Ю.П., Шамардин В.А. Эритроцитарные белковые диагностикумы,- Алма-Ата: Наука, 1981.- 152 с.

28. Каральник Б.В. Эритроцитарные диагностикумы.- М.: Медицина, 1976.164 с.

29. Карышева А.Ф., Сюрин В.Н. Руководство по практической вирусологии.-Кишинев: Штиинца, 1980,- С. 135-142.

30. Карышева А.Ф., Конопаткин А.А., Спатарь Ф.В. Эпизоотология, меры профилактики и борьбы с острыми респираторными болезнями крупного рогатого скота. Кишинев, 1983.- 100 с.

31. Карышева А.Ф., Карышев С.В. Справочник по инфекционным заболеваниям. Кишинев: Штиинца, 1989.-658 с.

32. Йерген Л. Клиническая иммунология и аллергология. М.: Медицина, 1990,- Т.З.- 528 с.

33. Кравченко А.Т., Соколов М.И. Адсорбция специфических полисахаридов эритроцитами человека // Микробиология, 1946.- № 12.- 10 с.

34. Кравченко А.Т. Быстрый и ранний метод диагностики возбудителей инфекционных заболеваний в выделениях больного и окружающей среды // Микробиология.- 1947,- № 2.- 25 с.

35. Краснобаев В. А. Лабораторная диагностика вирусных болезней животных М.: Колос, 1972.- С.107-118.

36. Красочко П.А. Моно и ассоциативные вирусные респираторные инфекции крупного рогатого скота, иммунологическая диагностика, профилактика и терапия: Автореф. дис. .д-ра вет.наук,- Минск, 1997.-34 с.

37. Красочко П.А., Зелютков Ю.Г., Красочко И.А. Вирусные пневморэнтериты телят- Минск: БИТ «Хата», 1999. 162 с.

38. Красочко П.А., Помирко Т.И. Рекомендации по диагностике вирусных респираторных инфекций крупного рогатого скота в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА).-Кишинев, 1988.-12 с.

39. Крюков Н.Н., Зудилина З.Ф., Евдокимов С.М. Вирусные респираторные болезни крупного рогатого скота //Ветеринария.- 1976.-№2.-С.111-113.

40. Литвин В.П., Поживил А.И. Инфекционные и инвазионные болезни телят. Киев: Наукова Думка, 1991.- 208 с.

41. Лярски 3. Диагностика вирусных болезней животных. М.: Колос, 1980.400 с.

42. Макаревич В.Г. Изучение биологических свойств вируса диареи крупного рогатого скота //Материалы конференции молодых ученых ВНИИВВ и М.- Покров, 1967,- 25 с.

43. Мак-Керчер Д.Г. Вирусы и проблемы воспроизводства крупного рогатого скота //Сельское хозяйство за рубежом 1970.- № 7.- С.31-32.

44. Макаров В.В., Козлова Д.И. Профилактика вирусных болезней сельскохозяйственных животных.- М.: Россельхозиздат, 1981.- 127 с.

45. Макаров В.В., Чевелев С.Ф. Иммунологическая депрессия при вирусных инфекциях //Проблемы ветеринарной иммунологии: Труды ВИЭВ М., 1983,- Т.57.- С.28-35.

46. Макаревич В.Г., Назарев В.П. Лабораторная диагностика вирусной диареи крупного рогатого скота // Сельское хозяйство за рубежом.- 1972.-С.28-32.

47. Михайлов Н.Н., Ильясова Л.С. Роль вирусов в патологии репродукции животных //Труды ВИЭВ М.,1985.- вып.63.- С.34-42.

48. Методика определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий //Ветеринария, -1984. № 1,- С.73-79.

49. Методика определения экономической эффективности использования в сельском хозяйстве результатов научно-исследовательских и опытноконструкторских работ, новой техники, изобретений и рационализаторских предложений. М.: ВНИИПИ, 1983.- С.44-46.

50. Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных /Сюрин В.Н., Белоусова Р.В., Соловьев Б.В. и др.- М.: Агропромиздат, 1986.-351с.

51. Москаленко Е.П., Эссель А.Е., Чернавская П.Н. К методике РСК в геле //Лабораторное дело.- 1973,- № 9,- С.560-562.

52. Непоклонова И.В. Применение метода ELISA для обнаружения антител к вирусу ИРТ //Проблемы ветеринарной иммунологии,- М.: Агропромиздат, 1985.- С. 152-153.

53. Никитин В.М. Справочник серологических реакций.-Кишинев: Штиинца, 1977,-220 с.

54. Никитин В.М. Справочник методов иммунологии.- Кишинев: Штинца, 1982.-304 с.

55. Оловников A.M. Агрегат-гемагглютинационная проба на антиэритроцитарные антитела //Бюллетень эксп. медицины. 1975,- № 9.-61с.

56. Панкова Г.Е. Респираторные болезни крупного рогатого скота.- М., 1986.44 с.

57. Перадзе Т.В., Халонен П. Иммунологическая диагностика вирусных инфекций.- М.: Медицина, 1985.- 302 с.

58. Плященко С.И., Сидоров В.Т. Стрессы у сельскохозяйственных животных.- М.: Агропромиздат, 1987.- 192 с.

59. Плященко С.И. Стрессы благо или зло. Минск: Ураджай, 1991.- 173 с.

60. Помирко Т.И., Красочко П.А., Басин А.Д. Применение реакции непрямой гемагглютинации для серологического исследования при респираторных заболеваниях овец //Сельское хозяйство Молдавии,- 1986.- № 9.- 33 с.

61. Помирко Т.И. , Красочко П.А., Басин А.Д. Серологическая диагностика заболеваний овец, вызванная респираторными вирусами крупного рогатого скота //Технологическое и ветеринарное обеспечениеживотноводства. Кишинев, Штиинца, 1989,- С.95-97.

62. Притулин П.И., Привалова Н.В. Экспресс-иммунологические методы при индикации и диагностике инфекционных болезней животных //Труды ВИЭВ.-М., 1984,- Вып.60,- С.35- 41.

63. Профилактика инфекционных болезней животных /Ковалев Н.А., Музычин С.И., Бутьянов Д.Д. и др. / Под ред. Н.А.Ковалева и С.И.Музычина,- Минск: Урожай, 1988,- 173 с.

64. Рахими С.К. Материалы по изучению роли вирусов в этиологии гастроэнтеритов телят: Автореф. дис. . канд. вет. наук. Киев, 1966,18 с.

65. Респираторные вирусы //Доклады Научной группы ВОЗ.- Женева, 1971.-С.71-74.

66. Респираторные болезни сельскохозяйственных животных /Атамась В.А., Андреев Е.В., Чечеткина Н.В. и др./ Под ред. В.А.Атамася.- Киев: Урожай, 1986.- 184 с.

67. Риихикоски У. Профилактика болезней молодняка крупного рогатого скота.- М.: Агропромиздат, 1986.- 120 с.

68. РНГА в серодиагностике респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота /Васильев А.В., Осидзе Н.Г., Сюрин В.Н., Акбаева JT.M., Строганова И.Я., Баринова Л.И. //Ветеринария.- 1988,-№ 10.- С.33-34.

69. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. М.: Высшая школа, 1967.327 с.

70. Руководство к практическим занятиям по ветеринарной микробиологии /Смирнова Н.И., Кольцова Т.Г., Тимофеев Ф.Е. и др. /Под ред. Н.И.Смирновой.- Минск: Вышэйшая школа, 1977.- 208 с.

71. Сеймур П., Халберт, Теу-Минг-Мин. Иммуноферментный анализ антител //Иммуноферментный анализ. /Под ред. Нго Т.Т., Ленкоффа Г.- М.: Мир, 1988.- С. 193-209.

72. Соколов М.А., Синицкий А.А., Ремезов П.И. Вирусологические исерологические исследования при вирусных инфекциях,- Свердловск, 1980.-С.З-7.

73. Старчеус А.П., Синица В.А. Метод иммуноферментного анализа для диагностики болезней животных //Научные основы профилактики и борьбы с заболеваниями сельскохозяйственных животных: Сборник научных трудов.- Киев: Южное отделение ВАСХНИЛ, 1987,- С.72-81.

74. Стрелков Р.Б. Метод вычисления стандартной ошибки и доверительных интервалов средних арифметических величин с помощью таблиц.-Сухуми: Алашара, 1966.- 16 с.

75. Сюрин В.Н., Фомина Н.В. Частная ветеринарная вирусология,- М.: Колос, 1979.-472 с.

76. Сюрин В.Н., Белоусова Р.В., Фомина Н.В. Ветеринарная вирусология,-М.: Колос, 1984,- 376 с.

77. Сюрин В.Н., Белоусова, Р.В., Фомина Н.В. Диагностика вирусных болезней животных: Справочник.- М.: Агропромиздат, 1991,- 528 с.

78. Сюрин В.Н. и др. Вирусные болезни животных М:. ВНИИТИБ, 1998,- 928 с.

79. Татаринцев Н.Г. Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота (сводный реферат) //Сельское хозяйство за рубежом,- 1961,- № 12,- С.39-40.

80. Течение смешанных вирусных инфекций и роль вирусов в их возникновении /Муравьев В.И., Басов В.И., Усманова Г.В., Петрова И.А. //Проблемы биологии и патологии сельскохозяйственных животных: Сб. научных трудов MBA М., 1987.- С.95-96.

81. Халенев Г.А. Разработка методов производства диагностикумов и усовершенствование лабораторной диагностики вирусной диареи и респираторно-синтициальной инфекции крупного рогатого скота: Автореф. дис. . канд. вет. наук.- М.,1976.- 20 с.

82. Халенев Г.А., Лосева Т.В. Изучение антигенных связей между инактивированными штаммами вируса диареи крупного рогатого скота

83. Проблемы вирусологии, молекулярной биологии и гистологии сельскохозяйственных животных. 1983. - С.22-24.

84. Фримель X., Хольцхайд Г. Иммуноферментный анализ //Иммунологические методы /Под ред. А.Фримеля,- М.: Медицина, 1987472 с.

85. Фукс П.П. Вирусно-микоплазменная патология генитальных и респираторных органов крупного рогатого скота /этиология, патогенез, диагностика: Автореф. дис. . д-ра вет. наук.-Казань, 1990,- 38 с.

86. Штельциер А. Реакция связывания комплемента //Иммунологические методы /Под ред. А.Фримеля,- Медицина, 1987.- С. 193-204.

87. Штрауб О.Х. Инфекции крупного рогатого скота, вызванные вирусами герпеса.— М.: Колос, 1981,- 207 с.

88. Amis T.R. The causative sgert of BVD: STS epidemiology and pathogenesis //Veter. Med. Edwardswille.- 1986.-Vol.81, № 9,- P.848-850;863-869.

89. Barber D.M.I., Nettleton P.F., Hering J.A. Disease in a dairy herd associated with the introduction and spread of bovine virus diarrhoea virus //Veter. Rec.-1985,-Vol. 117, № 18,- P.459-464.

90. Barel G.M., Fakrell H.B. The binding of fluorescemnlabelled staphylococal alpha-toxoid to erytocytes //Can. J. Microbiol.- 1979.- Vol.25.- P. 1219.

91. Beamont J.L. L'Heagglutination passive an chlorure de chrome. Son emploi sans diluant maeromoleculare // J.Pathol. Biologie.- 1969,- Vol.17.- P.429.

92. Bielannski A., Hare W.C.D. Effect in vitro of bovine viral diarrhea virus on bovine embrios with the zona pellicida intract, damaged and removed // Veter. Res. Communic.- 1988.- Vol.12. № 1,- P.19-24.

93. Bock R.E., Burges G.W., Douglas I.G. Development of an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for the detecton of bovine serum antibody bovine viral diarrhoea virus // Austral. Veter. J.- 1986.- Vol.63, № 12,- P.406-408.

94. Bogel K. Epizootologte et prophylaxie sur le territoriee de la Republique Faderale d'Allemagua des maladtes a virus des bovidesn affectant be muqueuses // Bull. Off. Int. Epiz.- 1966,- Vol.66, № 1,- P.355-388.

95. Borgen H.Ch., Dinter Z. Mucosal disease in Denmark // Nord. Veter. Med.-1961,-Vol.13.-P.644-653.

96. Bouters R., Vanderplassche M., Flarent Leunen J. Virusinfecties eu steriliteit bij runderen // Vloeanis diergenuskundig tijdschr.- 1964.- Vol.33, № 12,-P.405-421.

97. Brown T. The Teratogenic effect of bovine viral diarrhea virus the bovine foetus // Veter. practic.- 1978,- Vol.18, № 7.- P.4-10.

98. Burki F. Experimental Adenovirus vaccines in cattle // J. Amer. Vet. Med. Assoc.- 1973,- Vol.163.- P.897.

99. Cancellotti F., Carlotto F., Gageiardi G. Some observations on respiratory syncytial bovine virus (RSBV) incidene in Northeastern Italy feedlot cattle // Internal Congress on dis if cattle.- 1980,- Vol.1.- P.355-357.

100. Castrucci G. et al. Study of the experimental infection of pigs with bovine viral diarrhea (BVD) virus // Bull, dele sierd. M. lancse.- 1974,- Vol.53, №5,-P.585-591.

101. Clinical bovine virus diarrhea in Morocco first report // Machin L., Chaldi M., Briouga J. et al. // Zdl. Veter. Med. Reiche.- 1982.- Bd.29, № 10,- S.789-793.

102. Coggins L. Standartization of virus-neutralization test for bovine virus diarrhea

103. An. Vet. J. Res.- 1964,- Vol.25, № Ю4.- P.103-107.

104. Cutlip R. et al. lesions in clinically healthy cattle persistently infected with virus of bovine viral diarrhea-glomeralonephritis and enoephalitis // Am. J. Veter.Rec.- 1980,- Vol.41, № 12,-P.1938-1941.

105. Dannacher G., Moussa A., Ratogenic et formes cliniquen de Г infection par le virus de la diarrhee viral bes bivins (BVD) // Rev. Med. veter.- 1986.- Vol.137, № 5.- P.359-365.

106. Edwards S. IBR Infections bovine Rhinitracheitis // The Brit. Pres. J.- 1983.-Vol.65, № 5,- P.392-393.

107. Ehrlich P. Leuraemie, Pseudoleucomiae, Haemoglobineamie.- Wien, 1901,-P.99-101.

108. Engvall E., Perlmann P. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) Quantitaliv assay of immunoglobulin G. // Immunochem.- 1971,- № 8.- P.871-874.

109. Embryotransfer und BVD-Virusinfection bei Rindern. / Liess. В., Frey H.-R., Grambow H., Stahl C. // DT. Tierarztl. WSCHR.- 1987,- Vol.94, № 9.- P.506-508.

110. Evermann J., Faris M. Current clinical aspects of bovine viral diarrhea virus infection // Bovine pract.-1981.- Vol.2, № 3,- P.39- 41.

111. Fanlk P.W., Houba V. Immunological reactions with chromic chloridetreated arytrocytes // J. Immunol. Meth.- 1972.- № 3,- P.87.

112. Les affections respiratoires virales des bovines: resultats de 2 aus d'examens de laboratoire /Fedida M., Perrin M., Dannacher Q., Condest M., Martel J.-L. // Bull office int. epizoot.- 1976.- Vol.85, № 1-2.- P.33- 45.

113. Fernelius A.L. Characterization of bovine viral diarrhea viruses-1 determination of byogant density-2. Ultrafiltration ofodifferent strains after various treaments // Arch. ges. virusforch.- 1968.- Vol.25.- P.211-218, 219221.

114. Fertility of cows chllenged with a cytopathic strain of bovine viral diarrhea virus during an outbreak of spontaneous infection with a noncytopathic strain /

115. Viracul P., Fahning M.L., Joo H.S., Zemjanis R. // Theriogenology.- 1988.-Vol.29, № 2,- P.441- 449.

116. Frey H.R., Liess В., Peters W. Atiologische Bezeihungen zwischen BVD-Virusinfectionen bei Rindern und Fallen mit klinischem Vedacht auf bovine Virusdiarrhoe //Dt. Tierarztl. Wschr.- 1987,- Vol.94, № 10,- S.580-583.

117. Frey H., Liess B. Vermechrungsidnetik und Vermenbarkeit eines stark Zatopathogenen VD-MD-Virusstamme fur diagnoatisch Untersuchungen hit der Microtiter-Methode // Zbtl. Vet. Med. В.-1971,- Vol.18, № 1,- P.61-71.

118. Fundenberg H.H., Drews G., Misonoff A. Serologic demonstration of duare specificity of rabbit bivalent hybrid antibody // J. exp. Med.- 1964,- Vol.119,-P.151.

119. Gillespie J.H., McEutee K., Baker J.A. A cytopathogenic strain of virus diarrhea virus // Cornell. Vet.- 1960,- Vol.50, № 1.- P.73-79.

120. Gillespie J.H. Cellular resistance in tissue cultura induced by morecytopathogenic of cattle // Proc. Soc. Exp. Biol. Med.- 1962.- Vol.110.-P.248-250.

121. Grahn T.C., Fahning M.L., Zemjanis R. Nature of early reproductive failure caused by bovine viral diarrhea virus // J. Am. Veter. Med. Assn.- 1984.-Vol.185, № 4.- P.429-432.

122. Hirata A.A., Stall W.T. Passive hemagglutination enhancement by peridate, low pH and freezethaw trament of processed cells // Proc. Soc. exp. Biol. Med.- 1969.- Vol.131.-P.851.

123. Howard C.I., Clarke M.C., Broelie I. An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of antibodies to bovine viral diarrhea virus (BVDV) in cattle sera // Veter. Microbiol.- 1985,- Vol.10, № 4.- P.359-369.

124. Hyera J.M.K., Liess В., Frey H.R. A direct neutralizing peroxidase-linkedantibody assay for detection and tiration of antibodies to bovine viral diarrhea virus // J. Veter. Med. Ser. В.- 1987,- Vol.34, № 3,- P.227-239.

125. Jandl J.H., Simmons R.Z. The agglutination and seneitization of red cells by metalic cations: interactions between Multivalent Metals and red cells Membrane//Brit. J. Haematol.- 1957,- Vol.3.- P.19.

126. Jons F.S. Agglutunation by precipitin // J. exp. Med.- 1927,- Vol.46.- P.303.

127. Kahrs R.F., Baker J.A. Combined Vaccines for dairy cattle // Proc. U.S.-1965.-Vol.3.-P.87.

128. Keast J.C., Goldings N.K. Futher developments in relation to Swine Fever in New South Wales // Aust. Vet. J.- 1964,- Vol.40.- P. 137.

129. King C.A., van Heyningen W.E. Deactivator of cholera toxin by a sialidase-resistant monosialosyl-ganglioside // J. infect; Dis.- 1973,- Vol.127.- P.127-639.

130. Kofler R., Wick G. Some metodologic aspects of thr chromium cloride method for conpling antigen to erytrocytes // J.Immunol. Meth.- 1977.- Vol.16.- P.201.

131. Kozumplik J. Virove choroby ve vztahu к porucham plodnosti plemennych byku // Veterinarstvi.- 1985.- Vol.35, № 3,- P.114-116.

132. Krauss H. Virusinfection des Atemtraktes bei Haustiren // Forbild. Jhotaxkr.-1976,- Vol.7.- P.116-121.

133. Kudlac E. Vliv nekterych virovych infectii na reprodukci skotu // Veterinarstvi.- 1985.- Vol.35, № 4.- P.152-153.

134. Liess B. Bedentung der Immunotelerance fur die Pathogenese der bovinen Virusdiarrhoe (BVD) // Berl. U. Munch. Tierarztl. Wschr. 1985,- Vol.98, № 12.-P.420- 423.

135. Ludwig H. Bovine herpesviruses // The Herpesviruses (ed. B.Roizman) I.B.Plenum Press New York and London.- Charter, 1982,- P.135-214.

136. Ludwig H. Herpesviruses of Bovidae: The characterization, gronping and role of different types, ineluding latend viruses // CEC Symposium on "Latendy of herpesviruses".- Tubimgen, 21-23 Sept. 1982-1984,-P.171-189.

137. Ludovic В., Blagovic S. Respiratorue bolesti goveda: Kratac pregleg // Praxisveter.- 1978,- Vol.26, № 5,- P.293-297.

138. Maninger R., Bartha A., Juhass M. Studies on the Etiology of virus diarrhea among cattle in Hungary // Acta vet. hang. 1963,- Vol.13, № 4,- P.407- 414.

139. Mensik J., Pospisil Z., Stepanek J., Jurak E., Madr V. Soucsna epizootologiska sitiace v intenzivich chovech v sonvislosti s nemochosti a mortaliton telat v prubehu jejich odhovu // Veterinarui medicina.- 1984.- № 1,- P.47-64.

140. Morter R. Problems associated with bovine virus diarrhea. // Med. Veter. Pract.- 1980.-Vol.61, № 11,-P.917-920.

141. Moyr A. Virus Krankheiten der Kalber // Reportsand summaries Rapparts et resumes Referate und Zusammenfassungen.- 1980.- P.233-260.

142. Navetat H. Uhe enzoctie de maladie des muqueses dans unelevage de vashes allaintantes // Bull. Soc. Veter. Pract. Fr.- 1983.- Vol.67, № 4,- P.247-252.

143. Nettleton P. I solation of bovine virus diarrhea From a Scottish red deer // Veter. Rec.- 1980,- Vol.107, № 18,- P.425- 426.

144. Paterson A.B. Virus diseases in calves (Enteric viruses). // Vet. Rec.- 1962.-Vol.74, № 49.- P.1387-1388.

145. Phillip I.L.M., Derbyshire J.H. Respiratory viruses of cattle // Adv. Vet. Sci. Сотр. Med.- 1971.- Vol.15.- P.159-199.

146. Петкова К., Манчева H. Бърз пероксидазен тест за индикация на говеждня пестивирус в клетьчни культури // Вет. мед. науки.- 1986.- Вып.23, № 2.-С.9-11.

147. Rapic D. Immunoenzimski test (ELISA) kao dijagnosticka metoda // Praxis. Veter.- 1985,- Vol.33, № 56,- S.375-380.

148. Rinaldo C. Fetal and abult bovine interferon production during bovine viral diarrhea virus infection // Imfect. Immun.- 1976,- Vol.14, № 3,- P.660-666.

149. Roeder P.L., Drew T.W. Mucosal disease of cattle: a late sequel to fetal infection//Veter. Red.- 1984.- Vol.114,№ 13.-P.309-313.

150. Roeder P.L., effrey M., Cranwell M.P. Pestivirus fetopatogenicity in cattle: Changing segnetal with fetal maturation // Veter. Rec.- 1986,- Vol.118, №2,-P.44-47.

151. Romvary J. Inoidence of virus diarrhea among newborn calves // Acta. Vet. Hung.- 1965,- Vol.15, № 3,- P.341-347.

152. Romvary J. Inoidence of virus diarrhea among rats // Acta. Vet. Hung.- 1975.-Vol.15, № 4.- P.451- 454.

153. Salisbury R.M., Hartley W.J. A mucosal disease-like syndrom of cattle in new Zealand // Bull. off. int. Epizzot.-1961Vol.56.- P.62-78.

154. Schilow W.F., Meyer U. Durchfuhrung und Anwendungsmog lichkeiten des ELISA in der veterinaermedizinischen Virusdiagnostik // Mh. Veter. Med.-1985,-Jg.40,№6.- S.186-189.

155. Sethi J., Pei D., Hirschant Y. Choice and specificity of camplement in complement fization assay // J.Clin, Microbiol.- 1981,- Vol.13, № 5,- P.888-890.

156. Snowdown M.A. Infectious bovine rhinitracheitis and infections pustular vulvovaginitis in Australian cattle // Austral. Veter. J.- 1964.- Vol.40, № 8,-P.277-279.

157. Snowdon W.A., French E.L. The bovine Mucosal Disease-Swine Fever complex in pigs // Aust. Vet. J.- 1968,- Vol.44.- P. 179.

158. Solono A., Gomez-Tejedor C., Conzalez R. Respiratory viral infection of cattle and its clinical association // Proceedings Vol. J.-1986.- P.458- 462.

159. Sentongo Y. Association of bovine viral diarrhea-mucosal disease virus with ovariitis in cattle // Austral. Veter. G.- 1980,- Vol.56, № 6,- P.272-273.

160. Steinhagen P., Zimmermann T. Infectionsgeschehen und Bedentung der Bovinen Virusdiarrhoe / Mucosal Disease in Schleswig-Holstein // Tierarztl. Unch.- 1988,- Vol.43, № 5,- P.298-302.

161. Taylor O.N., Gustafson D.P., Clajlin R.M. Properties of some viruses of the mucosal disease-virus diarrhea complex // Am. J. Veter. Rec.- 1963.- Vol.24, № 98,- P.143-149.

162. Trantvein G. et al. Kleinhiruhipoplaste und Hydranemzephalle beim Rind nach transplazentarer Boviner Virusodiarrhoeinfection // Dt. tierarztl. Wschr.-1987,- Vol.84, № ю,- P.588-590.

163. Van Weemen B.K., Schnurs A.H.W. Immunoassay using antigenenzyme conjugate//F.E.B.S. Letters.-1971.-№ 15.-P.232-236.

164. Verhoeff J., Nienwstadt I. BRS virus,PI-3 virus and BHV1 infections of young stock on self-contained dairy forms: Epidemiological and clinical findings // Vet. Rec.- 1984,- Vol.114.- P.288-293.

165. Ward A.S. Kaeberle M.Z. Use of immunoperoxidas stain for the demonstration to bovine viral diarrhea virus by ligcht and alectron microscopies // Amer. J. Veter. res.- 1984,- Vol.45, № 1,- P.165-170.

166. Weinbach R. Die Verwendbarkeit formolbeha undelber erytrocyten als antigentrager in der indirekten haemagglutination // Schweiz. Z. Allg. Pathol.-1958,- Vol.21, № 6,- S.1043-1052.

167. Whitmore H. Effect of viral diarrhea virus on conception in cattle // J. Am. Veter. Med. Assn.-1981.- Vol.178.- P.1065-1067.

168. Wittlowski G., Orban S. Genouftes Auftreten von Aborten, Fruhgeburten und neonatalen Kalbervertlusten in einem Rinderebestand-Folge einer BLD-Virusinfection // Berl. u. munch. Tierarztl. Wschr.- 1984,- Vol.97, № 9.-S.305-310.(OS

169. Российская академия сельскохозяйственных наук

170. Департамент ветеринарии Смоленской области1., t

171. Смоленская областная ветеринарная лабораторияi

172. Смоленская областная ветеринарная станция1 '

173. Смоленская научно-исследовательсКая1 i iветеринарная станция 1методические рекомендации1.1по использованию иммуноферментного анализа для выявления, I '!и Iантител Ig G класса к вирусу диареи - болезни слизистых крупного1' ■рогатого скота i11-10G

174. Утверждаю: --Ззмеетителi. Главы Администрацииy^V4 ^^еДё'и^крй облаетй

175. Настоящие метоДические рекомендации разработаны: Красочко П.А. главны^ научном сотрудником РНИУП « Институт экспериментальной ветеринари^ им. C.jH. Вмшелесского» НАМ Беларуси, дрктором ветеринарных наук, профессором; , |

176. Новиковым О.Г. начальником Департамен та Смоленской Ьбласти но ветеринарии, доктором ветеринарных йаук, Заслуженным ветвркчом РФ;

177. Амировым А.Х. — ведущим ветвркчом ГУ Смоленской областной ветеринарной лаборатории; |

178. Кашко Л.С. заместителем начальника Департамента ОДолеЬской области по ветеринарии, кандидатом ветеринарных наук; !

179. Грибко С.М. начальников ГУ Смоленской областной сткнции по берьбе с болезнями животных, кандидатом ветеринарных наук!, Заслуженным вешрачрм РФ; I i

180. Красочко И.А. — старшим научны^ сотрудником РНИУ^Л « Инсти тут :периментальной ветеринарий им. C.( l. Вышелесского» НАН'Беларуси,эк калаидидатом ветеринарных наук^ доцентэм;моратории, Заслуженным ветврачом F

181. КоЬгуновым И.Б. директором ГУ Смоленской областной йетерипарной1. Ф;

182. Амйровой И.В. директором ГУ( Смоленской научно - исследовательский ветеринарной станции. !11

183. Рекомендации рассмотрены и сдобрены на заседании ученого Совета молецекой научно — исследовательской ветеринарной станции 2» ноября 2002г. Протокол 3. | ; 1j