Иммунотропные эффекты и механизмы действия гуминовых кислот торфа различного происхождения (экспериментальное исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, доктор наук Трофимова Евгения Сергеевна

• Трофимова Евгения Сергеевна
• доктор наук
• 2024

Оглавление диссертации доктор наук Трофимова Евгения Сергеевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Структура и химические свойства гуминовых кислот

1.2 Фармакологические эффекты гуминовых кислот

1.3 Классификация и характеристика иммунотропных препаратов

1.4 Поляризация иммунокомпетентных клеток при развитии иммунного ответа

1.5 Заключение

Глава 2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Экспериментальные животные

2.2 Исследуемые вещества

2.3 Получение гуминовых кислот и их физико-химические свойства

2.4 Выделение макрофагов и спленоцитов мышей, мононуклеаров периферической крови человека, условия культивирования

2.5 Оценка влияния гуминовых кислот на функциональную активность макрофагов мышей

2.6 Исследование гуминовых кислот на наличие примесей эндотоксина

2.7 Оценка влияния гуминовых кислот на функциональную активность спленоцитов мышей

2.8 Оценка влияния гуминовых кислот на функциональную активность мононуклеаров периферической крови человека

2.9 Определение терапевтической дозы гуминовых кислот для проведения экспериментов in vivo

2.10 Определение фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов и нейтрофилов периферической крови мышей

2.11 Моделирование ТЫ-зависимого иммунного ответа у мышей

2.12 Моделирование Th2-зависимого иммунного ответа у мышей и морских свинок

2.13 Изучение роли мембранных рецепторов и сигнальных молекул в активации макрофагов гуминовыми кислотами

2.14 Определение внутриклеточного уровня NF-kB, c-Jun в макрофагах методом вестерн-блоттинга

2.15 Использование модели искусственной нейронной сети для прогнозирования биологической активности различных образцов торфа

2.16 Статистическая обработка результатов

ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 Изучение влияния гуминовых кислот различного происхождения на функциональное состояние иммунокомпетентных клеток in vitro

3.1.1 Исследование влияния гуминовых кислот на метаболизм аргинина (баланс активности NO-синтазы/аргиназы) в перитонеальных макрофагах интактных мышей

3.1.2 Оценка биологической активности образцов гуминовых кислот с помощью искусственной нейронной сети

3.1.3 Изучение влияния гуминовых кислот на пролиферацию лимфоцитов и макрофагов интактных мышей

3.2 Определение терапевтической дозы гуминовых кислот для проведения экспериментов in vivo

3.3 Исследование влияния гуминовых кислот на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов и нейтрофилов периферической крови мышей

3.4 Изучение влияния гуминовых кислот на протекание экспериментального ТЫ-зависимого иммунного ответа in vivo

3.5 Исследование влияния гуминовых кислот на протекание экспериментального Th2-зависимого иммунного ответа in vivo

3.6 Оценка влияния гуминовых кислот на продукцию про- и противовоспалительных цитокинов иммунокомпетентными клетками in vitro

3.6.1 Изучение влияния гуминовых кислот на продукцию про- и противовоспалительных цитокинов мононуклеарами крови здоровых доноров

3.6.2 Исследование влияния гуминовых кислот на продукцию про- и противовоспалительных цитокинов перитонеальными макрофагами мышей

3.6.3 Изучение влияния гуминовых кислот на продукцию про- и противовоспалительных цитокинов спленоцитами мышей

3.7 Исследование внутриклеточных механизмов иммуностимулирующего действия гуминовых кислот

3.7.1 Изучение вклада мембранных рецепторов TLR2 и TLR4 в активацию макрофагов гуминовыми кислотами

3.7.2 Исследование влияния ингибиторов молекул внутриклеточного сигналинга на функциональную активность перитонеальных макрофагов in vitro под действием гуминовых кислот

3.7.3 Оценка экспрессии внутриклеточных сигнальных молекул (NF-кВ, с-Jun) перитонеальных макрофагов интактных животных под влиянием гуминовых кислот методом вестерн-блоттинга

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунотропные эффекты и механизмы действия гуминовых кислот торфа различного происхождения (экспериментальное исследование)»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования. Распространенность заболеваний, связанных с патологией иммунной системы, приобрела масштаб эпидемии и стала серьёзной медико-социальной проблемой. Широкое использование антибиотиков, массовая неоднократная вакцинация снижают смертность и улучшают качество жизни человека, однако влекут за собой развитие таких патологий, как иммунодефицит, аллергия и аутоиммунные болезни (Vadala M. et al., 2017; Chen Y.L. et al., 2019; Herman R.A., 2020; Shekhar S., Petersen F.C., 2020; Yamamoto-Hanada K. et al., 2020; Olivieri B. et al., 2021).

Эпидемиологические данные убедительно свидетельствуют о неуклонном росте аллергических (астма, ринит, атопический дерматит) и аутоиммунных заболеваний (рассеянный склероз, инсулинозависимый сахарный диабет, болезнь Крона) в развитых странах с начала 1970-х годов, в то же время из-за улучшения гигиенических условий снизилась заболеваемость многими инфекционными болезнями (Murdaca G. et al., 2021). В 1989 году возникла так называемая «гигиеническая гипотеза», которая основывается на парадигме баланса Th1/Th2 и заключается в том, что в норме микробное окружение способствует «провоспалительной» ориентации иммунного ответа (Th1), в результате которого происходит быстрая и эффективная элиминация патогена. При ограничении контактов иммунной системы с патогенами вследствие применения антибиотиков, массовой вакцинации и улучшения гигиенических условий возникает смещение иммунного гомеостаза в сторону «противовоспалительного» Th2 ответа, способствующее развитию аллергий, аутоиммунных заболеваний и иммунодефицита (Versini M. et al., 2015; Bach J.F., 2018; Bach J.F., 2021; Murdaca G. et al., 2021).

Эффективный иммунный ответ зависит от координированного функционирования различных клеток врожденного и/или адаптивного иммунитета. Так, макрофаги, являясь неотъемлемой частью врожденного иммунитета, представляют собой первичное звено в формировании

приобретённого иммунитета, они связывают антиген и презентируют его в ассоциации с молекулами главного комплекса гистосовместимости Т-лимфоцитам, продуцируют различные цитокины (Sica A. et. al., 2015; Marshall J.S. et al., 2018; Lendeckel U. et al., 2022). Популяция макрофагов характеризуется гетерогенностью, но чаще всего выделяют два основных типа макрофагов: провоспалительные - классически активированные (M1) и противовоспалительные - альтернативно активированные макрофаги (М2) (Shapouri-Moghaddam A. et al., 2018; Qian C. et al., 2019; Abdelaziz M.H. et al., 2020).

Поляризация макрофагов в M1 обычно происходит под действием бактериальных липополисахаридов (ЛПС) или цитокинов Т-хелперов 1 (Th1), таких как интерферон гамма (ИФН-у) и фактор некроза опухоли альфа (ФНО-а). Макрофаги М1 секретируют высокий уровень провоспалительных цитокинов ФНО-а, интерлейкин 1 альфа (ИЛ-1а), ИЛ-1Р, ИЛ-6, ИЛ-12, ИЛ-23 и циклооксигеназу 2 (ЦОГ-2), а также низкий уровень ИЛ-10. Функционально макрофаги М1 участвуют в удалении патогенов во время инфекции посредством образования активных форм кислорода (АФК), обладают антимикробной и противоопухолевой активностью, а также опосредуют индуцированное АФК повреждение тканей, ухудшают регенерацию и заживление ран. Для защиты от такого повреждения воспалительный ответ ингибируется регуляторными механизмами, управляемыми

противовоспалительной функцией макрофагов М2 (Atri C. et al., 2018; Sharma N. et al., 2018; Lee H. et al., 2020; Perez S., Rius-Perez S., 2022; Purcu D.U. et al., 2022).

Макрофаги с фенотипом М2 поляризуются под действием цитокинов Т-хелперов 2 (Th2), таких как ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-13, ИЛ-33, обладают мощной способностью к фагоцитозу, отличаются противовоспалительным цитокиновым профилем, который характеризуется низкой продукцией ИЛ-12 и высокой продукцией ИЛ-10 и ТФР-р. Макрофаги М2 удаляют клеточный дебрис и апоптотические клетки, способствуют восстановлению тканей и заживлению

ран, а также обладают проангиогенными и профибротическими свойствами (Oishi Y., Manabe I., 2018; Shapouri-Moghaddam A. et al., 2018; Ferraro B. et al., 2019; Yao Y. et al., 2019; Setten E. et al., 2022), принимают участие в элиминации паразитов (Rolot M., Dewals B.G., 2018), образовании, прогрессировании и ангиогенезе опухолей (Boutilier A.J., Elsawa S.F., 2021; Cendrowicz E. et al., 2021; Xu Y. et al., 2022). В ответ на стимулы и сигналы, поступающие от микроокружения, макрофаги способны менять свой фенотип (Ham S.et al., 2020; Mosser D.M. et al., 2021; Rasheed A., Rayner K.J., 2021) и даже проявлять свойства, не позволяющие отнести их ни к одному из упомянутых типов (Калиш С.В. и др., 2020; Wang H. et al., 2021).

Т-лимфоциты, в частности Т-хелперы (CD4+), регулируют функцию клеток иммунной системы, вырабатывая целый ряд цитокинов, распознают антиген благодаря антиген-специфическим рецепторам на своей поверхности, запускают механизм иммунного ответа. Одна из гипотез регуляции иммунного гомеостаза в организме заключается в поддержании равновесия между активностью Th1 и Th2, которые различаются спектром продуцируемых ими цитокинов, а также направляют развитие иммунного ответа по клеточному или гуморальному пути. Так, Th1 продуцируют провоспалительные цитокины, например, ИФН-у, являющийся маркером этой субпопуляции Т-хелперных клеток, а также ИЛ-2 и ФНО-а. Тогда как Th2 вырабатывают ИЛ-4 (маркер Th2 субпопуляции), ИЛ-5, ИЛ-10 и ИЛ-13 (Raphael I. et al., 2015). Клетки Th1 играют важную роль в развитии реакций клеточного иммунитета, направленных против вирусных и внутриклеточных патогенов, раковых клеток, а также участвуют в реакциях гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) (Marshall J.S. et al., 2018). Клетки Th2 обеспечивают реакции гуморального иммунитета, поддерживая пролиферацию и дифференцировку В-лимфоцитов, элиминацию внеклеточных патогенов, участвуют в развитии гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ) и защищают организм от глистных инвазий (Walker J.A., McKenzie A.N.J., 2018; Maeda K. et al., 2019; Kokubo K. et al., 2022; Vacca F., Le Gros G., 2022). Чрезмерная активация

любого паттерна может вызвать иммунное заболевание, а один из путей способен реципрокно подавлять другой (Bretscher P., 2019). Так, чрезмерные воспалительные реакции, вызванные активацией Th1, могут привести к неконтролируемому повреждению тканей, а избыточный Th2 ответ будет противодействовать микробицидному действию, опосредованному Th1 , и способствовать развитию аллергии (Abrahamsson T.R. et al., 2011; Howard F.H.N. et al., 2022).

Таким образом, вещества, обладающие способностью «перепрограммировать» дифференцированные макрофаги, а также регулировать баланс Th1/Th2 и их цитокиновый профиль в желаемом направлении, представляют значительный интерес в качестве иммуномодулирующих средств при различных патологиях, связанных с нарушениями иммунного гомеостаза.

В последние годы растёт интерес к изучению таких природных соединений, как торф и сапропель, что связано с их огромными запасами и наличием месторождений по всей земной поверхности, а содержащиеся в них гуминовые вещества, состоящие на 80-90% из гуминовых и фульвовых кислот, всё чаще становятся объектами исследования в экспериментальной медицине.

Гуминовые кислоты (ГК) - это природные высокомолекулярные амфифильные амфотерные органические азотсодержащие рандомизованные редокс-гетерополимеры арилгликопротеидной природы, характеризующиеся коллоидными свойствами, отсутствием строгого постоянства химического состава и разной молекулярной массой, это полифункциональные полтамфолиты, представляющие собой кислотно-осн0вный комплекс c выраженными восстановительными свойствами (Попов А.И., 2004). Гуминовые кислоты образуются в результате разложения растительных и природных остатков (Ampong K. et al., 2022). ГК растворимы в щелочных средах, частично растворимы в воде и нерастворимые в кислых средах (García M. et al., 2020).

Гуминовые кислоты содержат различные функциональные группы, количество которых зависит от происхождения, возраста, климата и условий

окружающей среды при добыче/производстве ГК (de Melo B.A. et al., 2016). Биологическая активность гуминовых кислот в основном связана с функциональными группами фенола и карбоновой кислоты, которые обеспечивают такие свойства, как улучшение роста и питания растений (Nardi S. et al., 2021), противовирусная и противовоспалительная активность (Junek R. et al., 2009; Zhernov Y.V. et al., 2021; Hajdrik P. et al., 2022; Khuda F. et al., 2022). Кроме того, присутствие фенолов, карбоновых кислот и хинонов в структуре гуминовых кислот связывают с их антиоксидантной, фунгицидной, бактерицидной и антимутагенной активностью (Ferrara G. et al., 2006; Siddiqui Y et al., 2009; Zykova M.V. et al., 2018; Klein O.I. et al., 2021; Khuda F. et al., 2022; Verrillo M. et al., 2022a). Была изучена возможность использования ГК для лечения и профилактики заболеваний (Qali§ir M. et al., 2018; Haufe S. et al., 2021; Verrillo M. et al., 2022b). Основные медицинские аспекты применения гуминовых кислот были описаны R. Klöcking и B. Helbig (Klöcking R., Helbig B., 2005), а противовоспалительные свойства освещены в обзоре C.E.J. van Rensburg (van Rensburg C.E.J., 2015). При этом гуминовые кислоты обладают низкой токсичностью, они не оказывают общие или органные токсические эффекты при пероральном и накожном применении у экспериментальных животных (van Rensburg C.E.J. et al., 2007; Murbach T.S. et al., 2020), а в тестах на хромосомах млекопитающих не проявляют генотоксическое действие (Murbach T.S. et al., 2020). Однако применение гуминовых кислот в качестве иммуномодулирующих средств изучено недостаточно, несмотря на их большой биологический потенциал.

В нашей работе в качестве иммуномодулирующих агентов были выбраны образцы гуминовых кислот, полученные экстракцией натрий пирофосфатом из различных видов торфа болот Томской области на кафедре химии СибГМУ. Учитывая разнообразные биологические эффекты ГК, описанные в литературе, низкую токсичность и огромную сырьевую базу на территории России, представляется актуальным исследовать влияние гуминовых кислот торфа на показатели Th1 и Th2 иммунного ответа и функциональное состояние таких

иммунокомпетентных клеток, как макрофаги, лимфоциты и нейтрофилы с целью создания лекарственных средств на их основе для коррекции патологических состояний, связанных с иммунным дисбалансом.

Степень разработанности темы исследования. Несмотря на то, что гуминовые кислоты широко применяются в сельском хозяйстве и ветеринарии, а также в качестве биологически-активных добавок, в настоящее время на территории Российской Федерации отсутствуют зарегистрированные лекарственные средства на основе гуминовых соединений. Тем не менее, ГК различного происхождения и разных физико-химических характеристик обладают широким спектром плейотропных иммунологических эффектов. Они оказывают влияние на секрецию про- и противовоспалительных цитокинов (ИЛ-lß, ИЛ-10, ИЛ-6, ФНО-а), стимулируют пролиферацию активированных лимфоцитов, подавляют классический и альтернативный пути активации комплемента (van Rensburg C.E.J. et al., 2009; Szot K. et al., 2019; §ehitoglu M.H. et al., 2022; Verrillo M. et al., 2022b), усиливают поглощающую способность фагоцитов и гуморальный иммунный ответ (Habibian R. et al., 2010; Mudronova D. et al., 2020). Гуминовые кислоты оказывают двоякий (дозозависимый) эффект на митоген-стимулированную секрецию ФНО-а клетками линии U937 (Junek R. et al., 2009). ФНО-а является одним из основных провоспалительных цитокинов, играющим важную защитную роль против микробного воздействия, его высокий уровень наблюдается при многих воспалительных заболеваниях (Silva L.B. et al., 2019; Jang D.I. et al., 2021; van Loo G., Bertrand M.J.M., 2023). Показано, что при низких концентрациях ГК высвобождение ФНО-а усиливается (провоспалительный эффект), тогда как при высоких концентрациях (>100 мкг/мл) продукция снижается примерно в 10 раз (противовоспалительный эффект).

Также гуминовые вещества обладают противовирусной активностью против вирусов герпеса 1 и 2 типов (HSV1, HSV2), респираторного и цитомегаловируса человека (HCMV, RSV) (Cagno V. et al., 2015), коронавируса (SARS-CoV-2) (Hajdrik P. et al., 2022), вируса иммунодефицита человека (HIV-

1) (Zhernov YV. et al., 2021) in vitro, иммунокоррегирующими свойствами на фоне антибактериальной терапии рядом антибиотиков (ампициллин, амикацин, доксициклин, рифампицин, рифамицин), способствуют значительной локализации воспаления и усилению сосудообразования при ксенотрансплантации (Radomska-Lesniewska D.M. et al., 2016). Гуматы снижают количество эозинофилов в назальных мазках у больных с аллергическим ринитом, кожные пробы на аллерген (Gandy J.J. et al., 2010), а также контактную гиперчувствительность, вызванную динитрофторбензолом (van Rensburg C.E.J. et al., 2007). Показано антиоксидантное, гепатопротекторное, адаптогенное, ранозаживляющее, антибактериальное действие гуминовых веществ (Зыкова М.В. и др., 2018). ГК оказывают положительное влияние на заживление ран, подавляя избыточную экспрессию коллагена I типа и стимулируя экспрессию коллагена III типа (Qali§ir M. et al., 2018; Yalman V., La?in N.T., 2019).

Гуминовые кислоты могут также использоваться для терапии рака, поскольку в их структуру входят хиноны, которые являются высокоэлектрофильными молекулами, и, принимая на себя один или два электрона от флавоферментов и железо-серных белков, образуют семихиноны или гидрохиноны, способные высвобождать АФК с помощью различных механизмов (de Melo B.A. et al., 2016). Хиноны широко изучаются в качестве противоопухолевых средств, так как вызывают окислительный стресс в раковых клетках, фрагментацию ДНК и индуцируют апоптоз (Asche C., 2005; Tambama P. et al., 2014; Li S.-Y. et al., 2019; Pereyra C.E. et al., 2019; Aly A.A. et al., 2020; Tsao Y.C. et al., 2020; Lima D.J.B. et al., 2021).

Токсичность гуминовых кислот признана чрезвычайно низкой. Гуминовые кислоты в широком диапазоне доз не обладали мутагенным и тератогенным эффектом, а также общей или органной токсичностью (van Rensburg C.E.J. et al., 2007; Murbach T.S. et al., 2020).

Таким образом, гуминовые кислоты торфа являются многообещающими субстанциями для создания эффективных лекарственных препаратов,

обладающих иммуномодулирующими свойствами. Однако для разработки новых лекарственных средств на основе ГК требуется проведение систематизированного исследования их иммунотропных свойств, как на уровне иммунокомпетентных клеток, так и на уровне всего организма, а также изучение механизмов их действия.

Цель исследования - изучить иммунотропные эффекты и механизмы действия гуминовых кислот торфа различного происхождения и обосновать их применение для коррекции Th1/Th2 иммунного ответа и функционального состояния иммунокомпетентных клеток.

Задачи исследования:

1. Изучить влияние гуминовых кислот торфа на метаболизм аргинина перитонеальных макрофагов, для отбора наиболее перспективных образцов, обладающих иммуномодулирующими свойствами.

2. Исследовать влияние образцов гуминовых кислот на пролиферацию интактных макрофагов и лимфоцитов с целью выявления цитотоксического эффекта.

3. Изучить влияние образцов гуминовых кислот при курсовом введении на фагоцитарные реакции иммунокомпетентных клеток.

4. Исследовать влияние образцов гуминовых кислот на протекание экспериментального Th1 иммунного ответа in vivo.

5. Изучить влияние образцов гуминовых кислот на протекание экспериментального Th2 иммунного ответа in vivo.

6. Исследовать влияние образцов гуминовых кислот на продукцию про- и противовоспалительных цитокинов иммунокомпетентными клетками in vitro.

7. Изучить роль мембранных рецепторов, внутриклеточных сигнальных путей и молекул в механизмах иммуномодулирующего действия гуминовых кислот.

Научная новизна. Впервые проведено изучение влияния ГК торфа болот Томской области на функциональное состояние макрофагов in vitro по способу

метаболизма аргинина, что позволяет эффективно проводить скрининг веществ гуминовой природы для выявления их иммуномодулирующих свойств и отбора наиболее перспективных образцов. На основании проведенного скрининга были выбраны образцы, выделенные экстракцией натрий пирофосфатом, из трёх видов торфа (верхового сфагново-мочажинного - ГК-1, верхового сосново-сфагново-пушицевого - ГК-2 и верхового магелланикум - ГК-3), которые усиливают выработку оксида азота перитонеальными макрофагами, не зависящую от примеси эндотоксина в образцах, и снижают активность аргиназы в клетках. Впервые показано отсутствие цитотоксического действия исследуемых образцов гуминовых кислот на иммунокомпетентные клетки.

Была продемонстрирована возможность использования искусственной нейронной сети для прогнозирования КО-стимулирующей активности ГК различных образцов торфа в зависимости от их спектральных параметров.

Новыми являются сведения о том, что курсовое введение образцов гуминовых кислот торфа усиливает фагоцитарные реакции нейтрофилов периферической крови и перитонеальных макрофагов мыши.

Впервые проведено исследование иммуномодулирующих свойств образцов ГК торфа болот Томской области на моделях ТЫ и Th2 иммунного ответа. Установлено, что курсовое введение исследуемых веществ снижает реакцию ГЗТ (маркерную реакцию ТЫ типа). Кроме того, исследуемые вещества снижают интенсивность ТЪ2 иммунного ответа, подавляя реакцию общей анафилаксии у мышей и морских свинок, снижая продукцию аллерген-специфических иммуноглобулинов и степень дегрануляции тучных клеток.

Обнаружена способность образцов гуминовых кислот влиять на баланс про- и противовоспалительных цитокинов, продуцируемых интактными перитонеальными макрофагами, лимфоцитами и мононуклеарами крови здоровых доноров. Показано, что исследуемые вещества преимущественно увеличивают выработку провоспалительных цитокинов, таких как ФНО-а, ИЛ-1Р, ИЛ-12, ИФН-у, противовоспалительного цитокина ИЛ-10 и разнонаправленно, в зависимости от образца гуминовых кислот и типа клеток,

влияют на выработку таких цитокинов, как ИЛ-2 и ИЛ-4.

С помощью ингибиторов молекул внутриклеточного сигналинга впервые показано, что в механизмах иммуностимулирующего действия ГК принимают участие такие молекулы, как MAP киназа p38, PI3 киназа, киназы MEK 1/2, IKK-2, цАМФ, NF-kB.

На примере образца ГК-2 с помощью метода вестерн-блоттинга впервые обнаружена его способность увеличивать экспрессию таких внутриклеточных белков как NF-kB и с-Jun.

Впервые показано участие мембранных рецепторов TLR-2 и TLR-4 в активации макрофагов исследуемыми образцами гуминовых кислот.

Теоретическая и практическая значимость работы. В работе изучены иммунотропные свойства образцов гуминовых кислот, их способность изменять функциональное состояние макрофагов и других иммунокомпетентных клеток и регулировать иммунный ответ Th1 и Th2 типов. Получены данные о действии исследуемых веществ как на уровне целого организма (иммунный ответ), так и на клеточном (макрофаги, лимфоциты, нейтрофилы, моноциты), рецепторном (TLR2, TLR4) и внутриклеточном уровне (NF-kB, цАМФ, р38, PI3K, МЕК1/2, с-Jun), что может служить основой для дальнейшей разработки и получения новых фармакологических средств, обладающих иммуномодулирующим действием, а также средств, способных снижать реакции гиперчувствительности, реализованные как по Th1 , так и по Th2 типу, для лечения аллергических (ГНТ и ГЗТ) заболеваний. При этом преобладание провоспалительного цитокинового профиля при воздействии данных веществ на иммунокомпетентные клетки in vitro позволяет рассматривать их как перспективные агенты для лечения хронических вялотекущих, рецидивирующих инфекционных и онкологических заболеваний.

Методология и методы исследования. Согласно поставленным задачам выбраны современные методические подходы к исследованию иммунотропного действия образцов гуминовых кислот.

В качестве объекта исследования были использованы мыши линии C57BL/6 и стока CDI, короткошёрстные морские свинки пёстрой породы и аутбредные крысы стока SD. Основные методы исследования: клеточные (изучение влияние ГК на функциональную активность иммунокомпетентных клеток in vitro - баланс аргинина и пролиферативную активность), иммуноферментные (изучение влияния ГК на продукцию про- и противовоспалительных цитокинов иммунокомпетентными клетками -макрофагами, лимфоцитами, мононуклеарами), иммунологические (изучение влияния ГК на протекание Th1 иммунного ответа in vivo - влияние на реакцию ГЗТ, количество АОК, титр гемагглютининов; изучение влияния ГК на протекание Th2 иммунного ответа in vivo - влияние на реакцию общей анафилаксии, дегрануляцию тучных клеток, уровень иммуноглобулинов E и G1; изучение влияния ГК на фагоцитоз нейтрофилов и перитонеальных макрофагов), молекулярные (изучение механизмов иммуностимулирующего действия ГК in vitro с помощью ингибиторов молекул внутриклеточного сигналинга и мембранных рецепторов, а также методом вестерн-блоттинга), математические (использование искусственной нейронной сети для прогнозирования биологической активности ГК), статистический анализ результатов.

Положения, выносимые на защиту

1. Гуминовые кислоты торфа изменяют функциональное состояние иммунокомпетентных клеток, а именно активируют макрофаги по классическому провоспалительному пути, стимулируя синтез оксида азота и снижая активность аргиназы, усиливают способность макрофагов и нейтрофилов к фагоцитозу, стимулируют выработку иммунными клетками провоспалительных цитокинов.

2. Гуминовые кислоты торфа подавляют реакции гиперчувствительности, протекающие как по Th1, так и по Th2 типу, а именно, снижают реакцию ГЗТ, а также тяжесть протекания анафилактического шока, содержание иммуноглобулинов E и G1 в сыворотке крови и дегрануляцию тучных клеток.

3. Иммуномодулирующее действие исследуемых веществ реализуется за счет активации сигнальных путей с участием MAP киназы p38, PI3 киназы, киназы MEK 1/2, цАМФ, NF-kB через активацию рецепторов TLR-2 и TLR-4 и опосредуется транскрипционными факторами NF-кВ и c-Jun.

Степень достоверности и апробация результатов. Высокая степень достоверности полученных результатов подтверждается достаточным объемом экспериментального материала, использованием современных методов, высокотехнологичного оборудования, а также адекватных критериев для статистической обработки результатов.

Основные результаты доложены и обсуждены на Четвертой международной конференции IHSS СНГ по гуминовым инновационным технологиям «From Molecular Analysis of Humic Substances - to Nature-like Technologies» (HIT-2017) (Москва, 2017); Пятой международной конференции IHSS СНГ по гуминовым инновационным технологиям (Москва, 2019); Двенадцатом зимнем симпозиуме по хемометрике «Modern Methods of Data Analysis» (Саратов, 2020); на Международной научно-практической конференции «Разработка лекарственных средств - традиции и перспективы» (Томск, 2021); на III Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы и перспективы фармацевтической науки и практики» (Кемерово, 2023); на региональной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Медицинская наука XXI века - творчество молодых» (Томск, 2023).

По теме диссертации опубликована 21 научная работа, в том числе 10 статей в научных журналах и изданиях, включенных в перечень рецензируемых научных изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук, на соискание ученой степени доктора наук, из них 9 статей опубликованы в журналах, входящих в международные реферативные базы данных и системы цитирования Web of Science и Scopus, и 1 статья в журнале, входящем в международную реферативную базу данных и систему цитирования Scopus; 5

патентов ^и) на изобретение; 6 тезисов в материалах международных и региональных конференций.

Личный вклад автора. Вклад автора состоит в разработке дизайна экспериментальной работы, определении методологии исследования, изучении и анализе литературных данных. Соискатель самостоятельно проводил комплекс исследований по изучению иммунотропной активности исследуемых образцов гуминовых кислот, обрабатывал данные, обобщал и интерпретировал результаты, оформлял рукопись диссертации и автореферата. Автор участвовал в подготовке научных публикаций совместно с коллективом авторов лаборатории иммунофармакологии НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга Томского НИМЦ, а также кафедры химии и фармацевтического анализа ФГБОУ ВО СибГМУ Минздрава России.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 207 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, включающего 420 источников, из них 14 отечественных и 406 зарубежных. Работа проиллюстрирована 16 рисунками и содержит 32 таблицы.

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Структура и химические свойства гуминовых кислот

Гуминовые кислоты (ГК) представляют собой сложные гетерогенные органические соединения темного цвета, входящие в состав гуминовых веществ. Гуминовые вещества являются основным компонентом природного органического вещества на планете. Они образуются в результате биохимических и химических реакций при разложении растительных и животных остатков - гумификации (Kleber M., Lehmann J., 2019). Это аморфные агрегаты, которые не могут быть определены какой-либо одной молекулярной структурой, однако они демонстрируют значительную однородность с точки зрения химических свойств (MacCarthy Р., 2001). Гуминовые вещества широко распространены в почве, природных водах и отложениях, таких как торф, бурые угли и сланцы (Jarukas L. et al., 2021). Важными компонентами, участвующими в процессе гумификации, являются растительный лигнин и продукты его трансформации, полисахариды, меланин, кутин, белки, липиды, нуклеиновые кислоты и др. (Hu Z.T. et al., 2022). В зависимости от растворимости в водной среде и её pH, гуминовые вещества в почвах и отложениях можно разделить на три основные фракции: гуминовые кислоты, фульвокислоты и гумин (Gautam R.K. et al., 2021). Фульвокислоты растворимы при кислом или щелочном рН, гумин является нерастворимой фракцией. ГК растворимы в щелочных средах, частично растворимы в воде и нерастворимые в кислых средах, поэтому ГК извлекают из почвы и других источников с использованием сильного основания (NaOH или KOH) и осаждают добавлением сильной кислоты (доводят рН до 1 с помощью HCl) (Olk D.C. et al., 2019).

Список литературы диссертационного исследования доктор наук Трофимова Евгения Сергеевна, 2024 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Бельская, Н.В. Моделирование системной анафилаксии на мышах линии BALb/c / Н.В. Бельская, М.Г. Данилец, Ю.П. Бельский и др. // Биомедицина. - 2010. - № 1. - С. 37-50.

2. Венгеровский, А.И. Фармакология: учебник / А.И. Венгеровский // М.: ГЭОТАР-Медиа, 2020. - 848 с.

3. Зыкова, М.В. Высокомолекулярные соединения гуминовой природы -перспективные биологически активные соединения / М.В. Зыкова, Л.А. Логвинова, М.В. Белоусов // Традиционная медицина. - 2018. - № 2 (53). - С. 27-38.

4. Калиш, С.В. М3 макрофаги останавливают деление клеток предстательной железы больного раком простаты / С.В. Лямина, Л.В. Кузнецова, О.П. Буданова и др. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. -2020. - Т. 64, № 1. - С. 54-59.

5. Коваленко, Л.П. Методические рекомендации по оценке аллергизирующих свойств лекарственных средств / Л.П. Коваленко, В.Н. Федосеева, А.Д. Дурнев и др. // Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Отв. ред. А.Н. Миронов. - Москва, 2013. - С. 51-63.

6. Лактионов, Н.И. Особенности строения гидрозолей гуминовых кислот и гуматов натрия / Н.И. Лактионов, Ю.А. Рыбакова, Л.А. Сысоев и др. // Почвоведение. - 1992. - № 7. - С. 129-134.

7. Маркова, Т. П. Иммунотропные препараты и адаптогены // РМЖ. - 2019. - Т. 27, № 8-1. - С. 60-64.

8. Носик, Д.Н. Противовирусная активность экстрактов базидиомицетов и гуминовых соединений в отношении вируса иммунодефицита человека (Retroviridae: Orthoretrovirinae: Lentivirus: Human immunodeficiency virus 1) и вируса простого герпеса (Herpesviridae: Simplexvirus: Human alphaherpesvirus 1) / Д.Н. Носик, Н.Н. Носик, Т.В. Теплякова и др. // Вопр. Вирусол. - 2020. -Т. 65, № 5. - С. 276-283.

9. Попов, А.И. Гуминовые вещества: свойства, строение, образование / А.И. Попов. - С.-Пб.: Изд-во Санкт-Петерб. ун-та, 2004. - 248 с.

10. Сепиашвили, Р. И. Иммунотропные препараты: классификация, проблемы и перспективы // Аллергология и иммунология. - 2015. - Т. 16, № 1. - С. 64-69.

11. Фримель, Г. Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля. - М.: Медицина, 1987. - 472 с.

12. Хаитов, Р. М. Иммунотерапия / Под ред. Р.М. Хаитова, Р.И. Атауллаханова, А. Е. Шульженкою. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2020. - 768 с.

13. Хаитов, Р.М. Методические рекомендации по доклиническому изучению иммунотропной активности лекарственных средств / Р.М. Хаитов, И.С. Гущин, Б.В. Пинегин и др. // Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Отв. ред. А.Н. Миронов. - Москва, 2013a. - С. 626-641.

14. Хаитов, Р.М. Методические рекомендации по оценке иммунотоксического действия лекарственных средств / Р.М. Хаитов, А.С. Иванова, Л.П. Коваленко и др. // Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Отв. ред. А.Н. Миронов. - Москва, 2013б. - С. 64-79.

15. Abdelaziz, M.H. Alternatively activated macrophages; a double-edged sword in allergic asthma / M.H. Abdelaziz, S.F. Abdelwahab, J. Wan et al. // J. Transl. Med.

- 2020. - Vol. 18. - N 1. - P. 58.

16. Abrahamsson, T.R. A Th1/Th2-associated chemokine imbalance during infancy in children developing eczema, wheeze and sensitization / T.R. Abrahamsson, M. Sandberg Abelius, A. Forsberg et al. // Clin. Exp. Allergy. - 2011. - Vol. 41. - 12.

- P. 1729-39.

17. Aeschbacher, M. Antioxidant properties of humic substances / M. Aeschbacher, C. Graf, R.P. Schwarzenbach et al. // Environ. Sci. Technol. - 2012. - Vol. 46. - N 9. - P. 4916-25.

18. Afify, A.E.-M.M.R. Natural antioxidants of humic and fulvic acids against oxidative stress induced by hydrogen peroxide: in-vivo studies / A.E.-M.M.R.

Afify, O.K. Konswa // Fresenius Environ. Bull. - 2017. - Vol. 26. - N 10. - P. 5841-5848.

19. Agarwal, S.P. Humic acid from Shilajit: A physico-chemical and spectroscopic characterization / S.P. Agarwal, M.D. Anwer Khalid, R. Khanna et al. // J. Serb. Chem. Soc. - 2010. - Vol. 75. - N 3. - P. 413-422.

20. Akaichi, A. Boudhrioua Effect of humic acid and organic acids, alone or in combination, on blood biochemical constituents and humoral immune response in broiler chickens / A. Akaichi, A. Jebali, O. Abbes et al. // Livest. Sci. - 2022. -Vol. 258. - P. 104880.

21. Allen, I.C. Delayed-type hypersensitivity models in mice // Methods Mol. Biol. -2013. - Vol. 1031. - P. 101-7.

22. Aly, A.A. Synthesis of quinone-based heterocycles of broad-spectrum anticancer activity / A.A. Aly, A.A. Hassan, N.K. Mohamed et al. // J. Chem. Res. - 2021. -Vol. 45. - N 5-6. - P. 562-571.

23. Ampong, K. Understanding the role of humic acids on crop performance and soil health / K. Ampong, M.S. Thilakaranthna, L.Y. Gorim // Front. Agron. - 2022. -Vol. 4. - P. 848621.

24. Anastasiadis, A.D. New globally convergent training scheme based on the resilient propagation algorithm / A.D. Anastasiadis, G.D. Magoulasa, M.N. Vrahatisb // Neurocomputing. - 2005. - Vol. 64. - P. 253-270.

25. Andreu-Sanz, D. Role and potential of different T helper cell subsets in adoptive cell therapy / D. Andreu-Sanz, S. Kobold // Cancers. - 2023. - Vol. 15. - N 6. - P. 1650.

26. Arango Duque, G. Macrophage cytokines: involvement in immunity and infectious diseases / G. Arango Duque, A. Descoteaux // Front. Immunol. - 2014.

- Vol. 5. - P. 491.

27. Arranz, A. Akt1 and Akt2 protein kinases differentially contribute to macrophage polarization / A. Arranz, C. Doxaki, E. Vergadi et al // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.

- 2012. - Vol. 109. - N 24. - P. 9517-22.

28. Asche, C. Antitumour quinones // Mini Rev. Med. Chem. - 2005. - Vol. 5. - N 5.

- P. 449-67.

29. Atri, C. Role of human macrophage polarization in inflammation during infectious diseases / C. Atri, F.Z. Guerfali, D. Laouini // Int. J. Mol. Sci. - 2018. -Vol. 19. - N 6. - P. 1801.

30. Azizi, G. Th22 cells in autoimmunity: a review of current knowledge / G. Azizi, R. Yazdani, A. Mirshafiey // Eur. Ann. Allergy Clin. Immunol. - 2015. - Vol. 47.

- N 4. - P. 108-17.

31. Bach, J.F. Revisiting the Hygiene hypothesis in the context of autoimmunity // Front. Immunol. - 2021. - Vol. 11. - P. 615192.

32. Bach, J.F. The hygiene hypothesis in autoimmunity: the role of pathogens and commensals // Nat. Rev. Immunol. - 2018. - Vol. 18. - P. 105-120.

33. Baldo, BA. Immune- and non-immune-mediated adverse effects of monoclonal antibody therapy: a survey of 110 approved antibodies // Antibodies. - 2022. -Vol. 11. - N 1. - P. 17.

34. Banu, S. Role of macrophage in type 2 diabetes mellitus: macrophage polarization a new paradigm for treatment of type 2 diabetes mellitus / S. Banu, D. Sur // Endocr. Metab. Immune Disord. Drug Targets. - 2023. - Vol. 23. - N 1. - P. 2-11.

35. Banyer, J.L. Cytokines in innate and adaptive immunity / J.L. Banyer, N.H. Hamilton, I.A. Ramshaw et al. // Rev. Immunogenet. - 2000. - Vol. 2. - N 3. - P. 359-73.

36. Bascones-Martinez, A. Immunomodulatory drugs: oral and systemic adverse effects / A. Bascones-Martinez A, R. Mattila R, R. Gomez-Font R et al. // Med. Oral Patol. Oral Cir. Bucal. - 2014. - Vol. 19. - N 1. - P. e24-31.

37. Bashir, S. Macrophage polarization: the link between inflammation and related diseases / S. Bashir, Y. Sharma, A. Elahi et al. // Inflamm. Res. - 2016. - Vol. 65.

- N 1. - P. 1-11.

38. Bayati, F. The therapeutic potential of regulatory t cells: challenges and opportunities / F. Bayati, M. Mohammadi, M. Valadi et al. // Front. Immunol. -2021. - Vol. 11. - P. 585819.

39. Behl, T. Exploring the multifocal role of phytochemicals as immunomodulators / T. Behl, K. Kumar, C. Brisc et al. // Biomed. Pharmacother. - 2021. - Vol. 133. -P. 110959.

40. Belgiovine, C. Tumor-associated macrophages and anti-tumor therapies: complex links / C. Belgiovine, M. D'Incalci, P. Allavena et al. // Cell. Mol. Life Sci. - 2016. - Vol. 73. - N 13. - P. 2411-24.

41. Belousov, M.V. Hepatoprotective properties of native humic acids isolated from lowland peat of Tomsk region / M.V. Belousov, R.R. Akhmedzhanov, M.V. Zykova et al. // J. Pharm. Chem. -2014. - Vol. 48. - P. 249-252.

42. Belska, N.V. Water-soluble polysaccharide obtained from Acorus calamus L. classically activates macrophages and stimulates Th1 response / N.V. Belska, A.M. Guriev, M.G. Danilets et al. // Int. Immunopharmacol. - 2010. - Vol. 10. - N. 8. -P. 933-42.

43. Bersch, K.L. Bacterial peptidoglycan fragments differentially regulate innate immune signaling / K.L. Bersch, K.E. DeMeester, R. Zagani et al. // ACS Cent. Sci. - 2021. - Vol. 7. - N 4. - P. 688-696.

44. Bertschi, N.L. The concept of pathogenic TH2 Cells: Collegium internationale allergologicum update 2021 / N.L. Bertschi, C. Bazzini, C. Schlapbach // Int. Arch. Allergy Immunol. - 2021. - Vol. 182. - N 5. - P. 365-380.

45. Bishani, A. Activation of innate immunity by therapeutic nucleic acids / A. Bishani, E.L. Chernolovskaya // Int. J. Mol. Sci. - 2021. - Vol. 22. - N 24. - P. 13360.

46. Blagov, A.V. The role of macrophages in the pathogenesis of atherosclerosis / A.V. Blagov, A.M. Markin, A.I. Bogatyreva et al. // Cells. - 2023. - Vol. 12. - N 4. - P. 522.

47. Bojan, A. Macrophage activation syndrome: A diagnostic challenge (Review) / A. Bojan, A. Parvu, I.A. Zsoldos et al. // Exp. Ther. Med. - 2021. - Vol. 22. - N 2.

- P. 904.

48. Botes, M.E. Phase I trial with oral oxihumate in HIV-infected patients / M.E. Botes, J. Dekker, C.E.J. van Rensburg // Drug Dev. Res. - 2002. - Vol. 57. - N 1.

- P. 34-39.

49. Bouarab-Chibane, L. Antibacterial properties of polyphenols: characterization and QSAR (quantitative structure-activity relationship) models / L. Bouarab-Chibane, V. Forquet, P. Lanteri et al. // Front. Microbiol. - 2019. - Vol. 10. - P. 829.

50. Boutilier, A.J. Macrophage polarization states in the tumor microenvironment / A.J. Boutilier, S.F. Elsawa // Int. J. Mol. Sci. - 2021. - Vol. 22. - N 13. - P. 6995.

51. Bracci, L. Immune-based mechanisms of cytotoxic chemotherapy: implications for the design of novel and rationale-based combined treatments against cancer / L. Bracci, G. Schiavoni, A. Sistigu et al. // Cell Death Differ. - 2014. - Vol. 21. - P. 15-25.

52. Bretscher, P. On analyzing how the Th1/Th2 phenotype of an immune response is determined: classical observations must not be ignored // Front. Immunol. - 2019.

- Vol. 10. - P. 1234.

53. Broersen, L.H. Adrenal insufficiency in corticosteroids use: systematic review and meta-analysis / L.H. Broersen, A.M. Pereira, J.O. J0rgensen et al. / J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2015. - Vol. 100. - N 6. - P. 2171-80.

54. Brunner, C.J. Immunomodulatory effects of levamisole / C.J. Brunner, C.C. Muscoplat // J. Am. Vet. Med. Assoc. - 1980. - Vol. 176. - N 10 (Spec. No). - P. 1159-62.

55. Bujnak, L. The effect of dietary humic substances on cellular immunity and blood characteristics in piglets / L. Bujnak, A. Hresko Samudovska, D. Mudronova et al. // Agriculture. - 2023. - Vol. 13. - N 3. - P. 636.

56. Butcher, M.J. Recent advances in understanding the Th1/Th2 effector choice / M.J. Butcher, J. Zhu // Fac. Rev. - 2021. - Vol. 10. - P. 30.

57. Cagno, V. In vitro evaluation of the antiviral properties of Shilajit and investigation of its mechanisms of action / V. Cagno, M. Donalisio, A. Civra et al. // J. Ethnopharmacol. - 2015. - Vol. 166. - P. 129-134.

58. Çaliçir, M. Humic acid enhances wound healing in the rat palate / M. Çaliçir, A. Akpmar, A.C. Talmaç et al. // Evid. Based Complement Alternat. Med. - 2018. -Vol. 2018. - P. 1783513.

59. Canovas, B. Diversity and versatility of p38 kinase signalling in health and disease / B. Canovas, A.R. Nebreda // Nat. Rev. Mol. Cell Biol. - 2021. - Vol. 22.

- P. 346-366.

60. Canton, M. Reactive oxygen species in macrophages: sources and targets / M. Canton, R. Sanchez-Rodriguez, I. Spera et al. // Front. Immunol. - 2021. - Vol. 12.

- P. 734229.

61. Capasso, S. Macromolecular structure of a commercial humic acid sample / S. Capasso, S. Chianese, D. Musmarra et al. // Environments. - 2020. - Vol. 7. - N 4.

- P. 32.

62. Carty, S.A. Chapter 21 - T-Cell Immunity / S.A. Carty, M.J. Riese, G.A. Koretzky // Hematology (Seventh Edition) / Edited by R. Hoffman, E.J. Benz, L.E. Silberstein et al. - Elsevier, 2018. - P. 221-239.

63. Cendrowicz, E. The role of macrophages in cancer development and therapy / E. Cendrowicz, Z. Sas, E. Bremer et al. // Cancers (Basel). - 2021. - Vol. 13. - N 8. -P. 1946.

64. Chadzopulu, A. The therapeutic effects of mud / A. Chadzopulu, J. Adraniotis, E. Theodosopoulou // Prog. Health Sci. - 2011. - Vol. 1. - N 2. - P.132-136.

65. Chaloupka, K. Nanosilver as a new generation of nanoproduct in biomedical applications / K. Chaloupka, Y. Malam, A.M. Seifalian // Trends Biotechnol. -2010. - Vol. 28. - N 11. - P. 580-8.

66. Chan, B.C.L. IL33: roles in allergic inflammation and therapeutic perspectives / B.C.L. Chan, C.W.K. Lam, L.S. Tam et al. // Front. Immunol. - 2019. - Vol. 10. -P. 364.

67. Chang, W.T. Mutant glucocorticoid receptor binding elements on the interleukin-6 promoter regulate dexamethasone effects / W.T. Chang, M.Y. Hong, C.L. Chen et al. // BMC Immunol. - 2021. - Vol. 22. - P. 24.

68. Chang, Y.W. Neural network training with highly incomplete medical datasets / Y.W. Chang, L. Natali, O. Jamialahmadi // Mach. Learn.: Sci. Technol. - 2022. -Vol. 3. - N 3. - P. 035001.

69. Chaplin, D.D. Overview of the immune response // J. Allergy Clin. Immunol. -2010. - Vol. 125. - N 2, Suppl. 2. - P. S3-S23.

70. Chen, C.H. The effect of humic acid on the adhesibility of neutrophils / C.H. Chen, J.J. Liu, F.J. Lu et al. // Thromb. Res. - 2002. - Vol. 108. - N. 1. - P. 67-76.

71. Chen, J. The emerging role of Th1 cells in atherosclerosis and its implications for therapy / J. Chen, X. Xiang, L. Nie et al. // Front. Immunol. - 2023. - Vol. 13. - P. 1079668.

72. Chen, L.Y. Levamisole enhances immune response by affecting the activation and maturation of human monocyte-derived dendritic cells / L.Y. Chen, Y.L. Lin, B.L. Chiang // Clin. Exp. Immunol. - 2008. - Vol. 151. - N. 1. - P. 174-81.

73. Chen, S. Macrophages in immunoregulation and therapeutics / S. Chen, A.F. Saeed, Q. Liu et al. // Sig. Transduct. Target Ther. - 2023. - Vol. 8. - P. 207.

74. Chen, T. Th9 cell differentiation and its dual effects in tumor development / T. Chen, J. Guo, Z. Cai et al. // Front. Immunol. - 2020. - Vol. 11. - P. 1026.

75. Chen, X. Macrophage polarization and its role in the pathogenesis of acute lung injury/acute respiratory distress syndrome / X. Chen, J. Tang, W. Shuai et al. // Inflamm. Res. - 2020. - Vol. 69. - P. 883-895.

76. Chen, Y.L. Antibiotic overuse and allergy-related diseases: an epidemiological cross-sectional study in the grasslands of Northern China / Y.L. Chen, W.J. Sng, Y. Wang et al. // Ther. Clin. Risk Manag. - 2019. - Vol. 15. - P. 783-789.

77. Christian, F. The regulation of NF-kB subunits by phosphorylation / F. Christian, E.L. Smith, R.J. Carmody // Cells. - 2016. - Vol. 5. - N 1. - P. 12.

78. Ciofani, M. A validated regulatory network for Th17 cell specification / M. Ciofani, A. Madar, C. Galan et al. // Cell. - 2012. - Vol. 151. - N 2. - P. 289-303.

79. Ciszek-Lenda, M. Strain specific immunostimulatory potential of lactobacilli-derived exopolysaccharides / M. Ciszek-Lenda, M. Strus, S. Górska-Fr^czek et al. // Cent. Eur. J. Immunol. - 2011. - Vol. 36. - N 3. - P. 121-129.

80. Claeys, E. Immunosuppressive drugs in organ transplantation to prevent allograft rejection: Mode of action and side effects / E. Claeys, K. Vermeire // J. Immunological Sci. - 2019. - Vol. 3. - N 4. - P. 14-21.

81. Clay, T.M. Polyclonal immune responses to antigens associated with cancer signaling pathways and new strategies to enhance cancer vaccines / T.M. Clay, T. Osada, Z.C. Hartman et al. // Immunol. Res. - 2011. - Vol. 49. - N 1-3. - P. 23547.

82. Clem, A.S. Fundamentals of vaccine immunology // J. Glob. Infect. Dis. - 2011. - Vol. 3. - N 1. - P. 73-8.

83. Codish, S. Mud compress therapy for the hands of patients with rheumatoid arthritis / S. Codish, M. Abu-Shakra, D. Flusser et al. // Rheumatol. Int. - 2005. -Vol. 25. - N 1. - P. 49-54.

84. Copic, D. Antithymocyte globulin inhibits CD8+ T Cell effector functions via the paracrine induction of PDL-1 on monocytes / D. Copic, M. Direder, K. Klas // Cells. - 2023. - Vol. 12. - N 3. - P. 382.

85. Coutinho, A.E. The anti-inflammatory and immunosuppressive effects of glucocorticoids, recent developments and mechanistic insights / A.E. Coutinho, K.E. Chapman // Mol. Cell Endocrinol. - 2011. - Vol. 335. - N 1. - P. 2-13.

86. Crotty, S. T follicular helper cell biology: a decade of discovery and diseases // Immunity. - 2019. - Vol. 50. - N 5. - P. 1132-1148.

87. Cueva, C. Antibacterial activity of wine phenolic compounds and oenological extracts against potential respiratory pathogens / C. Cueva, S. Mingo, I. Muñoz-González et al. // Lett. Appl. Microbiol. - 2012. - Vol. 54. - N 6. - P. 557-63.

88. Dallagi, A. The activating effect of IFN-y on monocytes/macrophages is regulated by the LIF-trophoblast-IL-10 axis via Stat1 inhibition and Stat3 activation / A. Dallagi, J. Girouard, J. Hamelin-Morrissette et al. // Cell Mol. Immunol. - 2015. - Vol. 12. - N 3. - P. 326-41.

89. Davidson, J. S. Inflammation and Acute Phase Proteins in Haemostasis // Acute Phase Proteins / Edited by S. Janciauskiene. - InTech, 2013. URL: http://dx.doi.org/10.5772/55998

90. Davies, L.C. Tissue-resident macrophages / L.C. Davies, S.J. Jenkins, J.E. Allen et al. // Nat. Immunol. - 2013. - Vol. 14. - N 10. - P. 986-95.

91. de Melo, B.A. Humic acids: Structural properties and multiple functionalities for novel technological developments / B.A. de Melo, F.L. Motta, M.H. Santana // Mater. Sci. Eng. C: Mater. Biol. Appl. - 2016. - Vol. 62. - P. 967-74.

92. de Oliveira, L.K. Synthesis, characterization, and environmental applications of hybrid materials based on humic acid obtained by the sol-gel route / L.K. de Oliveira, E.F. Molina, A.L.A. Moura et al. // ACS Appl. Mater. Interfaces. - 2016. -Vol. 8. - P. 1478-1485.

93. De Silva, P. Targeting CTLA-4 in cancer: Is it the ideal companion for PD-1 blockade immunotherapy combinations? / P. De Silva, M. Aiello, C. Gu-Trantien et al. // Int. J. Cancer. - 2021. - Vol. 149. - N 1. - P. 31-41.

94. Demerdash, Y. Yin and Yang: The dual effects of interferons on hematopoiesis / Y. Demerdash, B. Kain, M.A.G. Essers et al. / Exp. Hematol. - 2021. - Vol. 96. -P. 1-12.

95. Di Christine Oliveira, Y.L. Inflammatory Profile of Th9 Cells and Their Protective Potential in Helminth Infections / Y.L. Di Christine Oliveira, Y.L.M. de Oliveira, T.M. Cirilo et al. // Immuno. - 2023. - Vol. 3. - N 2. - P. 228-236.

96. Dinarello, C.A. Anti-inflammatory agents: Present and future // Cell. - 2010. -Vol. 140. - N 6. - P. 935-50.

97. Dong, C. Cytokine regulation and function in T cells // Annu. Rev. Immunol. -2021. - Vol. 39. - P. 51-76.

98. Dong, G. Adamantane-resistant influenza a viruses in the world (1902-2013): frequency and distribution of M2 gene mutations / G. Dong, C. Peng, J. Luo et al. // PLoS One. - 2015. - Vol. 10. - N 3. - P. e0119115.

99. Dorrington, M.G. NF-kB signaling in macrophages: dynamics, crosstalk, and signal integration / M.G. Dorrington, I.D.C. Fraser // Front. Immunol. - 2019. -Vol. 10. - P. 705.

100. Do-Thi, V.A. Crosstalk between the producers and immune targets of IL-9 / V.A. Do-Thi, J.O. Lee, H. Lee et al. // Immune. Netw. - 2020. - Vol. 20. - N 6. -P. e45.

101. Du, H. Tuning immunity through tissue mechanotransduction / H. Du, J.M. Bartleson, S. Butenko et al. // Nat. Rev. Immunol. - 2023. - Vol. 23. - P. 174-188.

102. Duan, T. Toll-like receptor signaling and its role in cell-mediated immunity / T. Duan, Y. Du, C. Xing et al. // Front. Immunol. - 2022. - Vol. 13. - P. 812774.

103. Duncan, M.D. Transplant-related immunosuppression: a review of immunosuppression and pulmonary infections / M.D. Duncan, D.S. Wilkes // Proc. Am. Thorac. Soc. - 2005. - Vol. 2. - N 5. - P. 449-55.

104. Durham, S.R. Allergen immunotherapy: past, present and future / S.R. Durham, M.H. Shamji // Nat. Rev. Immunol. - 2023. - Vol. 23. - N 5. - P. 317-328.

105. Ehlting, C. Acute-phase protein synthesis: a key feature of innate immune functions of the liver / C. Ehlting, S.D. Wolf, J.G. Bode // ABio.l Chem. - 2021. -Vol. 402. - N 9. - P. 1129-1145.

106. Eigenbrod, T. Bacterial RNA: An underestimated stimulus for innate immune responses / T. Eigenbrod, A.H. Dalpke // J. Immunol. - 2015. - Vol. 195. - N. 2. -P. 411-8.

107. Epelman, S. Origin and functions of tissue macrophages / S. Epelman, K.J. Lavine, G.J. Randolph // Immunity. - 2014. - Vol. 41. - N 1. - P. 21-35.

108. Estrada Brull, A. Moving to the outskirts: interplay between regulatory T cells and peripheral tissues / A. Estrada Brull, C. Panetti, N. Joller // Front. Immunol. -2022. - Vol. 13. - P. 864628.

109. Evangelou, V.P. Composition and metal ion complexation behavour of humic fractions derived from corn tissue / V.P. Evangelou, M. Marsi // Plant and Soil. -2001. - Vol. 229. - P. 13-24.

110. Eyerich, K. Th22 cells in allergic disease / K. Eyerich, S. Eyerich // Allergo J. Int. - 2015. - Vol. 24. - N. 1. - P. 1-7.

111. Fajgenbaum, D.C. Cytokine Storm / D.C. Fajgenbaum, C.H. June // N. Engl. J. Med. - 2020. - Vol. 383. - N 23. - P. 2255-2273.

112. Fang, W. Identification and activation of TLR4-mediated signalling pathways by alginate-derived guluronate oligosaccharide in RAW264.7 macrophages / W. Fang, D. Bi, R. Zheng et al. // Sci. Rep. - 2017. - Vol. 7. - P. 1663.

113. Farahi, L. Roles of Macrophages in Atherogenesis / L. Farahi, S.K. Sinha, A.J. Lusis // Front. Pharmacol. - 2021. - Vol. 12. - P. 785220.

114. Ferrara, G. Humic acids reduce the genotoxicity of mitomycin C in the human lymphoblastoid cell line TK6 / G. Ferrara, E. Loffredo, N. Senesi et al. / Mutat. Res. - 2006. - Vol. 603. - N 1. - P. 27-32.

115. Ferraro, B. Pro-angiogenic macrophage phenotype to promote myocardial repair / B. Ferraro, G. Leoni, R. Hinkel et al. // J Am Coll Cardiol. - 2019. - Vol. 73. - N 23. - P. 2990-3002.

116. Fishman JA. Opportunistic infections - coming to the limits of immunosuppression? // Cold Spring Harb. Perspect. Med. - 2013. - Vol. 3. - N 10. - P. 015669.

117. Ford, N. Systematic review of the efficacy and safety of antiretroviral drugs against SARS, MERS or COVID-19: initial assessment / N. Ford, M. Vitoria, A. Rangaraj et al. // J. Int. AIDS Soc. - 2020. - Vol. 23. - P. e25489.

118. Fratzke, A.P. Coxiella burnetiid whole cell vaccine produces a Th1 delayed-type hypersensitivity response in a novel sensitized mouse model / A.P. Fratzke, A.E. Gregory, E.J. van Schaik et al. // Front. Immunol. - 2021. - Vol. 12. - P. 754712.

119. Frigo, D.E. Mechanism of AP-1-mediated gene expression by select organochlorines through the p38 MAPK pathway / D.E. Frigo, Y. Tang, B.S. Beckman et al. // Carcinogenesis. - 2004. - Vol. 25. - N 2. - P. 249-61.

120. Gandy, J.J. The clinical efficacy of potassium humate in the treatment of allergic rhinitis: a double-blind placebo-controlled trial / J.J. Gandy, J.P. Meeding, J.R. Snyman et al. // Drug Dev. Res. - 2010. - Vol. 71. - N 6. - P. 358-363.

121. Garcia, M. The wet oxidation of aqueous humic acids / M. Garcia, S. Collado, P. Oulego et al. // J. Hazard Mater. - 2020. - Vol. 396. - P. 122402.

122. Gau, R.J. Humic acid suppresses the LPS-induced expression of cell-surface adhesion proteins through the inhibition of NF-kappaB activation / R.J. Gau, H.L. Yang, S.N. Chow et al. // Toxicol. Appl. Pharmacol. - 2000. - Vol. 166. - N 1. -P. 59-67.

123. Gaudino, S.J. Cross-talk between antigen presenting cells and T cells impacts intestinal homeostasis, bacterial infections, and tumorigenesis / S.J. Gaudino, P. Kumar // Front. Immunol. - 2019. - Vol. 10. - P. 360.

124. Gautam, R.K. Humic substances: Its toxicology, chemistry and biology associated with soil, plants and environment / R.K. Gautam, D. Navaratna, S. Muthukumaran et al. // Humic Substances / Edited by A. Makan. - London: IntechOpen, 2021. URL: https://www.intechopen.com/chapters/77091.

125. Ghasemi, M. The MTT assay: utility, limitations, pitfalls, and interpretation in bulk and single-cell analysis / M. Ghasemi, T. Turnbull, S. Sebastian et al. // Int. J. Mol. Sci. - 2021. - Vol. 22. - N 23. - P. 12827.

126. Gong, J. Role of Th22 cells in human viral diseases / J. Gong, H. Zhan, Y. Liang et al. // Front. Med. (Lausanne). - 2021. - Vol. 8. - P. 708140.

127. Gordon, S. Physiological roles of macrophages / S. Gordon, L. Martinez-Pomares // Pflug. Arch. Eur. J. Physiol. - 2017. - Vol. 469. - P. 365-374.

128. Goto, A. Understanding the genetics of viral drug resistance by integrating clinical data and mining of the scientific literature / A. Goto, R. Rodriguez-Esteban, S.H. Scharf et al. // Sci. Rep. - 2022. - Vol. 12. - P. 14476.

129. Gribble, E.J. Toxicity as a result of immunostimulation by biologics / E.J. Gribble, P.V. Sivakumar, R.A. Ponce et al. // Expert. Opin. Drug. Metab. Toxicol. - 2007. - Vol. 3. - N 2. - P. 209-34.

130. Gu, S. Akt 3 deficiency in M2 macrophages impairs cutaneous wound healing by disrupting tissue remodeling / S. Gu, H. Dai, X. Zhao et al. // Aging. - 2020. -Vol. 12. - N 8. - P. 6928-46.

131. Gualdron-Lopez, M. Multiparameter flow cytometry analysis of the human spleen applied to studies of plasma-derived EVs from Plasmodium vivax patients / M. Gualdron-Lopez, M. Diaz-Varela, H. Toda et al. // Front. Cell Infect. Microbiol. - 2021. - Vol. 11. - P. 596104.

132. Gulhar, R. Physiology, acute phase reactants / M.A. Ashraf, I. Jialal // StatPearls. - Treasure Island (FL): StatPearls Publishing, 2023. URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK519570/

133. Habibian R. Effect of humic acid on humoral immune response and phagocytosis / R. Habibian, A. Morshedi, N. Delirezh // Global veterinaria - 2010. - Vol. 4. - N 2. - P. 135-139.

134. Hadden, J.W. Immunostimulants // Immunol. Today. - 1993. - Vol. 14. - P. 275-280.

135. Hafez, M. Humic substances as an environmental-friendly organic wastes potentially help as natural anti-virus to inhibit COVID-19 / M. Hafez, A.I. Popov, V.N. Zelenkov et al. // Sci. Arch. - 2020. - Vol. 1. - P. 53-60.

136. Hajdrik, P. In vitro determination of inhibitory effects of humic substances complexing Zn and Se on SARS-CoV-2 virus replication / P. Hajdrik, B. Palyi, Z. Kis et al. // Foods. - 2022. - Vol. 11. - N 5. - P. 694.

137. Ham, S. The impact of the cancer microenvironment on macrophage phenotypes / S. Ham, L.G. Lima, E. Lek et al. // Front. Immunol. - 2020. - Vol. 11. - P. 1308.

138. Hammoud G.M. Histopathological study on the protective effect of humic acid against aflatoxins induced oxidative stress in rats / G.M. Hammoud, N.S. Nail, Y.M. Abd El-Shafea et al. // Int. J. Adv. Res. Biol. Sci. - 2019. - Vol. 6. - N. 3. -P. 111-127.

139. Hammouda, M.B. The JNK signaling pathway in inflammatory skin disorders and cancer / M.B. Hammouda, A.E. Ford, Y. Liu et al. // Cells. - 2020. - Vol. 9. -N 4. - P. 857.

140. Hashimoto, D. Tissue-resident macrophages self-maintain locally throughout adult life with minimal contribution from circulating monocytes / D. Hashimoto, A. Chow, C. Noizat et al. / Immunity. - 2013. - Vol. 3. - N 4. - P. 792-804.

141. Haufe, S. Humic acids in patients with diarrhoea-predominant irritable bowel syndrome: results from a randomised controlled trial / S. Haufe, G. Gammel, I. Schiefke // Biomed. J. Sci. Tech. Res. - 2021. - Vol. 33. - N 1. - P. 25584-25591.

142. Hegazy, A.N. Interferons direct Th2 cell reprogramming to generate a stable GATA-3(+) T-bet(+) cell subset with combined Th2 and Th1 cell functions / A.N. Hegazy, M. Peine, C. Helmstetter // Immunity. - 2010. - Vol. 32. - N 1. - P. 11628.

143. Herman, R.A. Increasing allergy: are antibiotics the elephant in the room? // Allergy Asthma Clin. Immunol. - 2020. - Vol. 16. - P. 35.

144. Hirayama, D. The phagocytic function of macrophage-enforcing innate immunity and tissue homeostasis / D. Hirayama, T. Iida, H. Nakase // Int. J. Mol. Sci. - 2017. - Vol. 19. - N 1. - P. 92.

145. Hossein-Khannazer, N. Features and roles of T helper 22 cells in immunological diseases and malignancies / N. Hossein-Khannazer, Z. Zian, J. Bakkach et al. // Scand. J. Immunol. - 2021. - Vol. 93. - N 5. - P. e13030.

146. Howard, F.H.N. Understanding immune responses to viruses - do underlying Th1/Th2 cell biases predict outcome? / F.H.N. Howard, A. Kwan, N. Winder et al. // Viruses. - 2022. - Vol. 14. - N 7. - P. 1493.

147. Hseu, Y.C. Humic acid in drinking well water induces inflammation through reactive oxygen species generation and activation of nuclear factor-KB/activator protein-1 signaling pathways: a possible role in atherosclerosis / Y.C. Hseu, K.J. Senthil Kumar, C.S. Chen et al. // Toxicol. Appl. Pharmacol. - 2014. - Vol. 274. -N 2. - P. 249-62.

148. Hu, Z.T. Humic substances derived from biomass waste during aerobic composting and hydrothermal treatment: A review / Z.T. Hu, W. Huo, Y. Chen et al. // Front Bioeng Biotechnol. - 2022. - Vol. 10. - P. 878686.

149. Hussain, Y. Immunosuppressive Drugs / Y. Hussain, H. Khan // Encyclopedia of Infection and Immunity. - 2022. - P. 726-40.

150. Ierne, N.K. Plaque formation in agar by single antibody production cells / N.K. Ierne, A.A. Nordin // Science. - 1963. - Vol. 140. - N 3565. - P. 405-408.

151. Ignacio, S.R. Nitric oxide production by murine peritoneal macrophages in vitro and in vivo treated with Phyllanthus tenellus extracts / S.R. Ignacio, J.L. Ferreira, M.B. Almeida et al. // J. Ethnopharmacol. - 2001. - Vol. 74. - N 2. - P. 181-7.

152. Irwin, K.K. Antiviral drug resistance as an adaptive process / K.K. Irwin, N. Renzette, T.F. Kowalik et al. // Virus Evolution. - 2016. - Vol. 2. - N 1. - P. vew014.

153. Jang, D.I. The role of tumor necrosis factor alpha (TNF-a) in autoimmune disease and current TNF-a inhibitors in therapeutics / D.I. Jang, A.H. Lee, H.Y. Shin et al. // Int. J. Mol. Sci. - 2021. - Vol. 22. - N 5. - P. 2719.

154. Jarukas, L. Determination of organic compounds, fulvic acid, humic acid, and humin in peat and sapropel alkaline extracts / L. Jarukas, L. Ivanauskas, G. Kasparaviciene et al. // Molecules. - 2021. - Vol. 26. - N 10. - P. 2995.

155. Javaid, N. Toll-like Receptors from the Perspective of Cancer Treatment / N. Javaid, S. Choi // Cancers. - 2020. - Vol. 12. - N 2. - P. 297.

156. Ji, Y. Sodium humate accelerates cutaneous wound healing by activating TGF-ß/Smads signaling pathway in rats / Y. Ji, A. Zhang, X. Chen et al. // Pharm. Sin. B. - 2016. - Vol. 6. - N 2. - P. 132-40.

157. Jian, L. IL-21 regulates macrophage activation in human monocytic THP-1-derived macrophages / L. Jian, C. Li, L. Sun et al. // Rheumatol & Autoimmun. -2021. - Vol. 1. - P. 18-29.

158. Joone, G.K. An in vitro investigation of the anti-inflammatory properties of potassium humate / G.K. Joone, C.E.J. van Rensburg // Inflammation. - 2004. -Vol. 28. - P. 169-174.

159. Joone, G.K. Investigation of the immunostimulatory properties of oxihumate / G.K. Joone, J. Dekker, C.E.J. van Rensburg / Z. Naturforsch. C J. Biosci. - 2003. -Vol. 58. - N 3-4. - P. 263-7.

160. Juhas, U. Different pathways of macrophage activation and polarization / U. Juhas, M. Ryba-Stanislawowska, P. Szargiej et al. // Postepy Hig. Med. Dosw. -2015. - Vol. 69. - P. 496-502.

161. Junek, R. Bimodal effect of humic acids on the LPS-induced TNF-a release from differentiated U937 cells / R. Junek, R. Morrow, J.I. Schoenherr et al. // Phytomedicine. - 2009. - Vol. 16. - N 5. - P. 470-476.

162. Kaplan, M.H. The development and in vivo function of T helper 9 cells / M.H. Kaplan, M.M. Hufford, M.R. Olson // Nat. Rev. Immunol. - 2015. - Vol. 15. - N 5. - P. 295-307.

163. Kazmers, I.S. Effect of immunosuppressive agents on human T and B lymphoblasts / I.S. Kazmers, P.E. Daddona, A.P. Dalke et al. // Biochem. Pharmacol. - 1983. - Vol. 32. - N 5. - P. 805-10.

164. Kedia, S. Risk of tuberculosis in patients with inflammatory bowel disease on infliximab or adalimumab is dependent on the local disease burden of tuberculosis: A systematic review and meta-analysis / S. Kedia, V.P. Mouli, N. Kamat // Am. J. Gastroenterol. - 2020. - Vol. 115. - N 3. - P. 340-349.

165. Kerneur, C. Major pathways involved in macrophage polarization in cancer / C. Kerneur, C.E. Cano, D. Olive // Front. Immunol. - 2022. - Vol. 13. - P. 1026954.

166. Khavinson, V.K. The Use of Thymalin for immunocorrection and molecular aspects of biological activity / V.K. Khavinson, N.S. Linkova, N.I. Chalisova et al. // Biol. Bull. Rev. - 2021. - Vol. 11. - P. 377-382.

167. Khuda, F. Antimicrobial, anti-inflammatory and antioxidant activities of natural organic matter extracted from cretaceous shales in district Nowshera-Pakistan / F. Khuda, M. Anjum, S. Khan et al. // Arab. J. Chem. - 2022. - Vol. 15. - N 2. - P. 103633.

168. Kim, D. Immunologic aspects of dyslipidemia: a critical regulator of adaptive immunity and immune disorders / D. Kim, H. Chung, J.E. Lee et al // J. Lipid Atheroscler. - 2021. - Vol. 10. - N 2. - P. 184-201.

169. Kim, I.S. Inosine: A bioactive metabolite with multimodal actions in human diseases / I.S. Kim, E.K. Jo // Front. Pharmacol. - 2022. - Vol 13. - P. 1043970.

170. Kim, Y.K. Differential susceptibility to lipopolysaccharide affects the activation of toll-like-receptor 4 signaling in THP-1 cells and PMA-differentiated THP-1

cells / Y.K. Kim, J.H. Hwang, H.T. Lee // Innate Immunity. - 2022. - Vol. 28. - N 3-4. - P. 122-129.

171. Kinali, B. Effect of humic acid on oxidative stress and neuroprotection in traumatic spinal cord injury: An experimental study / B. Kinali, N. Özdemir, A. Karadag et al. // Turk. J. Med. Sci. - 2021.

172. Kleber, M. Humic substances extracted by alkali are invalid proxies for the dynamics and functions of organic matter in terrestrial and aquatic ecosystems / M. Kleber, J. Lehmann // J. Environ. Qual. - 2019. - Vol. 48. - N 2. - P. 207-216.

173. Klein, O.I. A systematic study of the antioxidant capacity of humic substances against peroxyl radicals: relation to structure / O.I. Klein, N.A. Kulikova, A.I. Konstantinov et al. // Polymers (Basel). - 2021. - Vol. 13. - N 19. - P. 3262.

174. Kleiveland, C.R. Peripheral blood mononuclear cells. Chapter 15 // The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models / Edited by K. Verhoeckx, P. Cotter, I. Lopez-Exposito et al. - Cham (CH): Springer, 2015. URL: http s: //www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK500157/

175. Kloc, M. Macrophages in diabetes mellitus (DM) and COVID-19: do they trigger DM? / M. Kloc, R.M. Ghobrial, S. Lewicki et al. // J. Diabetes Metab. Disord. - 2020. - Vol. 19. - P. 2045-2048.

176. Klöcking, R. Medical aspects and applications of humic substances / R. Klöcking, B. Helbig // Biopolym. Med. Pharm. Appl. / Edited by A. Steinbuchel, R.H. Marchessault. - Weinheim: WILLEY-VCH Verlag GmbH & Co, KGaA, 2005. - P. 3-16.

177. Klucakova, M. Solubility and dissociation of lignitic humic acids in water suspension / M. Klucakova, M. Pekar // Colloids Surf. A: Physicochem. Eng. Asp. - 2005. - Vol. 252. - N 2-3. - P. 157-163.

178. Knochelmann, H.M. When worlds collide: Th17 and Treg cells in cancer and autoimmunity / H.M. Knochelmann, C.J. Dwyer, S.R. Bailey et al. // Cell Mol. Immunol. - 2018. - Vol. 15. - N 5. - P. 458-469.

179. Koch, S. Th9 and other IL-9-producing cells in allergic asthma / S. Koch, N. Sopel, S. Finotto // Semin. Immunopathol. - 2017. - Vol. 39. - N 1. -P. 55-68.

180. Kodama, H. Antitumor effect of humus extract on murine transplantable L1210 leukemia / H. Kodama, Denso // J. Vet. Med. Sci. - 2007. - Vol. 69. - N 10. - P. 1069-71.

181. Kokubo, K. Conventional and pathogenic Th2 cells in inflammation, tissue repair, and fibrosis / K. Kokubo, A. Onodera, M. Kiuchi et al. // Front. Immunol. -2022. - Vol. 13. - P. 945063.

182. Kong, T. Role of the extracellular signal-regulated kinase 1/2 signaling pathway in ischemia-reperfusion injury / T. Kong, M. Liu, B. Ji et al. // Front. Physiol. -2019. - Vol. 10. - P. 1038.

183. Korn, T. IL-6 controls Th17 immunity in vivo by inhibiting the conversion of conventional T cells into Foxp3+ regulatory T cells / T. Korn, M. Mitsdoerffer, A.L. Croxford et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. - 2008. - Vol. 105. - N 47. -P. 18460-5.

184. Kufel, J. What is machine learning, artificial neural networks and deep learning? - Examples of practical applications in medicine / J. Kufel, K. Bargiel-L^czek, S. Kocot et al. // Diagnostics. - 2023. - Vol. 13. - N 15. - P. 2582.

185. Kumar, S. Dendritic cell-mediated Th2 immunity and immune disorders / S. Kumar, Y. Jeong, M.U. Ashraf et al. // Int. J. Mol. Sci. - 2019. - Vol. 20. - N 9. -P. 2159.

186. Kupryszewski, G. The effect of humic substances isolated from a variety of marine and lacustrine environments on different microorganisms / G. Kupryszewski, J. Pempkowiak, A. K^dzia // Oceanologia. - 2001. - Vol. 43. - N 2. - P. 257-261.

187. Lai, Y. Therapeutic antibodies that target inflammatory cytokines in autoimmune diseases / Y. Lai, C. Dong // Int. Immunol. - 2016. - Vol. 28. - N 4. -P. 181-8.

188. Lambadiari, V. COVID-19, endothelium and the cardiometabolic patient: a possible role for capillary leak syndrome / V. Lambadiari, E. Korakas, E. Oikonomou et al. // Biomedicines. - 2022. - Vol. 10. - N 10. - P. 2379.

189. Lamers, C. The promiscuous profile of complement receptor 3 in ligand binding, immune modulation, and pathophysiology / C. Lamers, C.J. Plüss, D. Ricklin // Front Immunol. - 2021. - Vol. 12. - P. 662164.

190. Lapi, I. Akt Isoforms in macrophage activation, polarization, and survival / I. Lapi, M.G. Daskalaki, K. Axarlis et al. // Curr. Top. Microbiol. Immunol. - 2022. - Vol. 436. - P. 165-96.

191. Lee, C.H. Macrophages and Inflammation / C.H. Lee, E.Y. Choi // J. Rheum. Dis. - 2018. - Vol. 25. - P. 11-18.

192. Lee, H. Macrophage polarization in innate immune responses contributing to pathogenesis of chronic kidney disease / H. Lee, M.B. Fessler, P. Qu et al. // BMC Nephrol. - 2020. - Vol. 21. - N 1. - P. 270.

193. Lee, J.Y. Risk and characteristics of tuberculosis after anti-tumor necrosis factor therapy for inflammatory bowel disease: a hospital-based cohort study from Korea / J.Y. Lee, K. Oh, H.S. Hong et al. // BMC Gastroenterol. - 2021. - Vol. 21. - P. 390.

194. Lee, S.J. Immunomodulator therapy: monoclonal antibodies, fusion proteins, cytokines, and immunoglobulins // S.J. Lee, J. Chinen, A. Kavanaugh // J. Allergy Clin. Immunol. - 2010. - Vol. 125. - N 2, Suppl 2. - P. S314-23.

195. Lee, Y.K. Late developmental plasticity in the T helper 17 lineage / Y.K. Lee, H. Turner, C.L. Maynard et al. // Immunity. - 2009. - Vol. 30. - N 1. - P. 92-107.

196. Lendeckel, U. Macrophages: shapes and functions / U. Lendeckel, S. Venz, C. Wolke // Chem.Texts. - 2022. - Vol. 8. - N 2. - P. 12.

197. León, B. Modulating Th2 cell immunity for the treatment of asthma / B. León, A. Ballesteros-Tato // Front. Immunol. - 2021. - Vol. 12. - P. 637948.

198. Li, D. Pattern recognition receptors in health and diseases / D. Li, M. Wu // Signal Transduct. Target Ther. - 2021. - Vol. 6. - N 1. - P. 291.

199. Li, G. Therapeutic options for the 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) / G. Li, E. De Clercq // Nat. Rev. Drug Discov. - 2020. - Vol. 19. - P. 149-150.

200. Li, J. Risk of adverse events after anti-TNF treatment for inflammatory rheumatological disease. A meta-analysis / J. Li, Z. Zhang, X. Wu et al. // Front. Pharmacol. - 2021. - Vol. 12. - P. 746396.

201. Li, N. Major signaling pathways and key mediators of macrophages in acute kidney injury (Review) / N. Li, J. Chen, P. Wang et al. // Mol. Med. Rep. - 2021. -Vol. 3. - P. 455.

202. Li, S.Y. Potent cytotoxicity of novel l-shaped ortho-quinone analogs through inducing apoptosis / S.Y. Li, Z.K. Sun, X.Y. Zeng et al. // Molecules. - 2019. -Vol 24. - N 22. - P. 4138.

203. Li, X. Complexation of humic acid with Fe ions upon persulfate/ferrous oxidation: Further insight from spectral analysis / X. Li, B. Wu, Q. Zhang et al. // J. Hazard Mater. - 2020. - Vol. 399. - P. 123071.

204. Liarte, S. Role of TGF-P in skin chronic wounds: a keratinocyte perspective / S. Liarte, Á. Bernabé-García, F.J. Nicolás // Cells. - 2020. - Vol. 9. - N 2. - P. 306.

205. Liberman, A.C. regulatory and mechanistic actions of glucocorticoids on T and inflammatory cells/ A.C. Liberman, M.L. Budziñski, C. Sokn et al. // Front. Endocrinol (Lausanne). - 2018. - Vol. 9. - P. 235.

206. Lima, D.J.B. It takes two to tango: synthesis of cytotoxic quinones containing two redox active centers with potential antitumor activity / D.J.B. Lima, R.G. Almeida, G.A.M. Jardim et al. // RSC Med. Chem. - 2021. - Vol. 12. - N 10. - P. 1709-1721.

207. Linton, M.F. Akt signaling in macrophage polarization, survival, and atherosclerosis / M.F. Linton, J.J. Moslehi, V.R. Babaev // Int. J. Mol. Sci. - 2019. - Vol. 20. - N 11. - P. 2703.

208. Litvin, V.A. Spectroscopy study of silver nanoparticles fabrication using synthetic humic substances and their antimicrobial activity / V.A. Litvin, B.F. Minaev // Spectrochim. Acta A Mol. Biomol. Spectrosc. - 2013. - Vol. 108. - P. 115-22.

209. Liu, C. Cytokines: from clinical significance to quantification / C. Liu, D. Chu, K. Kalantar-Zadeh et al. // Adv. Sci. (Weinh). - 2021. - Vol. 8. - N 15. - P. e2004433.

210. Liu, J. New insights into M1/M2 macrophages: key modulators in cancer progression / J. Liu, X. Geng, J. Hou et al. // Cancer Cell Int. - 2021. - Vol. 21. -P. 389.

211. Lloberas, J. Mitogen-activated protein kinases and mitogen kinase phosphatase 1: a critical interplay in macrophage biology / J. Lloberas, L. Valverde-Estrella, J. Tur et al. // Front. Mol. Biosci. - 2016. - Vol. 3. - P. 28.

212. Long, M.E. MEK1 regulates pulmonary macrophage inflammatory responses and resolution of acute lung injury / M.E. Long, K.Q. Gong, W.E. Eddy et al. // JCI Insight. - 2019. - Vol. 4. - N 23. - P. e132377.

213. Lu, F.J. In vitro anti-influenza virus activity of synthetic humate analogues derived from protocatechuic acid / F.J. Lu, S.N. Tseng, M.L. Li et al. // Arch. Virol. - 2002. - Vol. 147. - N 2. - P. 273-84.

214. Lu, R.M. Development of therapeutic antibodies for the treatment of diseases / R.M. Lu, Y.C. Hwang, I.J. Liu et al. // J. Biomed. Sci. - 2020. - Vol. 27. - N 1. -P. 1.

215. Lu, X.X. Polymyxin B as an inhibitor of lipopolysaccharides contamination of herb crude polysaccharides in mononuclear cells / X.X. Lu, Y.F. Jiang, H. Li et al. // Chin. J. Nat. Med. - 2017. - Vol. 15. - N 7. - P. 487-494.

216. Lucas, R.M. ERK1/2 in immune signaling / R.M. Lucas, L. Luo, J.L. Stow // Biochem. Soc. Trans. - 2022. - Vol. 50. - N 5. - P. 1341-1352.

217. Lukyanov, S.A. Thymalin as a potential alternative in the treatment of severe acute respiratory infection associated with SARSCoV-2 / S.A. Lukyanov, B.I. Kuznik, K.G. Shapovalov et al. // Int. J. Immunol. Immunother. - 2020. - Vol. 7. -P. 055.

218. MacCarthy, P. The principles of humic substances // Soil Sci. - 2001. - Vol. 66. - N 11. - P. 738-751.

219. Maeda, K. Innate immunity in allergy / K. Maeda, M.J. Caldez, S. Akira // Allergy. - 2019. - Vol. 74. - N 9. - P. 1660-1674.

220. Mahler, C.F. Chemical characteristics of humic substances in nature / C.F. Mahler, N.D.S. Svierzoski, C.A.R Bernardino // Humic Substances / Edited by A. Makan. - London: IntechOpen, 2021. URL: https://www.intechopen.com/chapters/76810.

221. Makarewicz, M. The interactions between polyphenols and microorganisms, especially gut microbiota / M. Makarewicz, I. Drozdz, T. Tarko et al. // Antioxidants (Basel). - 2021. - Vol. 10. - N 2. - P. 188.

222. Malek, T.R. Tolerance, not immunity, crucially depends on IL-2 / T.R. Malek, A.L. Bayer // Nat. Rev. Immunol. - 2004. - Vol. 4. - N 9. - P. 665-74.

223. Manresa, M.C. Animal models of contact dermatitis: 2,4-dinitrofluorobenzene-induced contact hypersensitivity // Methods. Mol. Biol. - 2021. - Vol. 2223. - P. 87-100.

224. Mantovani, A. Interleukin-1 and related cytokines in the regulation of inflammation and immunity / A. Mantovani, C.A. Dinarello, M. Molgora et al. // Immunity. - 2019. - Vol. 50. - N 4. - P. 778-795.

225. Mantovani, A. Macrophages as tools and targets in cancer therapy / A. Mantovani, P. Allavena, F. Marchesi et al. // Nat. Rev. Drug Discov. - 2022. -Vol. 21. - P. 799-820.

226. Marchi, D. Homeostatic regulation of glucocorticoid receptor activity by Hypoxia-Inducible Factor 1: From physiology to clinic / D. Marchi, F.J.M. van Eeden // Cells. - 2021. - Vol. 10. - N 12. - P. 3441.

227. Markin, A.M. The role of cytokines in cholesterol accumulation in cells and atherosclerosis progression / A.M. Markin, Y.V. Markina, A.I. Bogatyreva // Int. J. Mol. Sci. - 2023. - Vol. 24. - N 7. - P. 6426.

228. Marova, I. Antimutagenic and/or genotoxic effects of processed humic acids as tested upon S. cerevisiae D7 / I. Marova, J. Kucerik, K. Duronova et al. // Environ. Chem. Lett. - 2011. - Vol. 9. - P. 229-233.

229. Marques, R.E. Exploring the Homeostatic and Sensory Roles of the Immune System / R.E. Marques, P.E. Marques, R. Guabiraba et al. // Front. Immunol. -2016. - Vol. 7. - P. 125.

230. Marreiro, D.D.N. Antiviral and immunological activity of zinc and possible role in COVID-19 / D.D.N. Marreiro, K.J.C. Cruz, A.R.S.D. Oliveira et al. // Br. J. Nutr. - 2021. - Vol. 127. - N 8. - P. 1172-1179.

231. Marshall, J.S. An introduction to immunology and immunopathology / J.S. Marshall, R. Warrington, W. Watson et al. // Allergy Asthma Clin. Immunol. -2018. - Vol. 14 (Suppl 2). - P. 49.

232. Martinez-Sanchez, M.E. Role of cytokine combinations on CD4+ T Cell differentiation, partial polarization, and plasticity: continuous network modeling approach / M.E. Martinez-Sanchez, L. Huerta, E.R. Alvarez-Buylla et al. // Front. Physiol. - 2018. - Vol. 9. - P. 877.

233. Martins, F. Adverse effects of immune-checkpoint inhibitors: epidemiology, management and surveillance / F. Martins, L. Sofiya, G.P. Sykiotis et al. // Nat. Rev. Clin. Oncol. - 2019. - Vol. 16. - P. 563-580.

234. Mass, E. Tissue-specific macrophages: how they develop and choreograph tissue biology / E. Mass, F. Nimmerjahn, K. Kierdorf et al. // Nat. Rev. Immunol. -2023. - Vol. 23. - N 9. - P. 563-579.

235. McNab, F. Type I interferons in infectious disease / F. McNab, K. Mayer-Barber, A. Sher et al. // Nat. Rev. Immunol. - 2015. - Vol. 15. - N 2. - P. 87-103.

236. Meduri, G.U. General adaptation in critical illness: glucocorticoid receptor-alpha master regulator of homeostatic corrections / G.U. Meduri, G.P. Chrousos / Front. Endocrinol. (Lausanne). - 2020. - Vol. 11. - P. 161.

237. Meehan, E.V. Interleukin-17 family cytokines in metabolic disorders and cancer / E.V. Meehan, K. Wang // Genes (Basel). - 2022. - Vol. 13. - N 9. - P. 1643.

238. Mega Tiber, P. Evaluation of the apoptotic effects of the humic acid treatment on chronic myeloid leukemia cell line K562 / P. Mega Tiber, T. Balci-Okcanoglu, M. Karadeniz et al. // Cyprus J. Med. Sci. - 2021. - Vol. 6. - P. 157-161.

239. Megha, K.B. Cascade of immune mechanism and consequences of inflammatory disorders / K.B. Megha, X. Joseph, V. Akhil et al. // Phytomedicine. - 2021. - Vol. 91. - P. 153712.

240. Mezouar, S. Changing the paradigm of IFN-y at the interface between innate and adaptive immunity: Macrophage-derived IFN-y / S. Mezouar, J.-L. Mege // J. Leukoc. Biol. - 2020. - Vol. 108. - N 1. - P. 419-426.

241. Mills, K.H.G. IL-17 and IL-17-producing cells in protection versus pathology // Nat. Rev. Immunol. - 2023. - Vol. 23. - P. 38-54.

242. Mohammed, A. Humic substance coagulation: artificial neural network simulation / A. Mohammed, K. Al Anezi, D. Akram et al. // Desalination. - 2010.

- Vol. 25. - N 1-3. - P. 153-157.

243. Molteni, M. The Role of Toll-Like Receptor 4 in Infectious and Noninfectious Inflammation / M. Molteni, S. Gemma, C. Rossetti // Mediators Inflamm. - 2016.

- Vol. 2016. - P. 6978936.

244. Monteith, A.J. Neutrophil extracellular traps enhance macrophage killing of bacterial pathogens / A.J. Monteith, J.M. Miller, C.N. Maxwell et al. // Sci. Adv. -

2021. - Vol. 7. - N 37. - P. eabj2101.

245. Montesinos López, O.A. Fundamentals of artificial neural networks and deep learning / O.A. Montesinos López, A. Montesinos López, J. Crossa // Multivariate Statistical Machine Learning Methods for Genomic Prediction. - Cham: Springer,

2022. - P. 379-425.

246. Moote, W. Allergen-specific immunotherapy / W. Moote, H. Kim, A.K. Ellis // Allergy Asthma Clin. Immunol. - 2018. - Vol. 14 (Suppl 2). - P. 53.

247. Moro-García, M.A. Influence of inflammation in the process of T lymphocyte differentiation: proliferative, metabolic, and oxidative changes / M.A. Moro-García, J.C. Mayo, R.M. Sainz et al. // Front. Immunol. - 2018. - Vol. 9. - P. 339.

248. Mosmann, T.R. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays // J. Immnol. Methods. - 1983.

- Vol. 5. - P. 55-63.

249. Mosser, D.M. Macrophages and the maintenance of homeostasis / D.M. Mosser, K. Hamidzadeh, R. Goncalves // Cell. Mol. Immunol. - 2021. - Vol. 18. - N 3. -P. 579-587.

250. Mudronova, D. The effect of humic substances on gut microbiota and immune response of broilers / D. Mudronova, V. Karaffova, T. Pesulova et al. // Food Agric. Immunol. - 2020. - Vol. 31. - N 1. - P. 137-149.

251. Mukherjee, S. TLR2 and TLR4 mediated host immune responses in major infectious diseases: a review / S. Mukherjee, S. Karmakar, S.P. Babu // Braz. J. Infect. Dis. - 2016. - Vol. 20. - N 2. - P. 193-204.

252. Munder, M. Alternative metabolic states in murine macrophages reflected by the nitric oxide synthase/arginase balance: competitive regulation by CD4+ T cells correlates with Th1/Th2 phenotype / M. Munder, K. Eichmann, M. Modolell // J. Immunol. - 1998. - Vol. 160. - N 11. - P. 5347-5354.

253. Murbach, T.S. A toxicological evaluation of a fulvic and humic acids preparation / T.S. Murbach, R. Glavits, J.R. Endres et al. / Toxicol. Rep. - 2020. -Vol. 7. - P. 1242-1254.

254. Murdaca, G. Hygiene hypothesis and autoimmune diseases: a narrative review of clinical evidences and mechanisms / G. Murdaca, M. Greco, M. Borro et al. // Autoimmun. Rev. - 2021. - Vol. 20. - N 7. - P. 102845.

255. Murray P.J. Macrophage Polarization // Annu. Rev. Physiol. - 2017. - Vol. 79. - P. 541-566.

256. Musiol, S. TGF-ß1 drives inflammatory Th cell but not treg cell compartment upon allergen exposure / S. Musiol, F. Alessandrini, C.A. Jakwerth et al. // Front. Immunol. - 2022. - Vol. 12. - P. 763243.

257. Mussbacher, M. NF-kB in monocytes and macrophages - an inflammatory master regulator in multitalented immune cells / M. Mussbacher, M. Derler, J. Basiliom et al. // Front. Immunol. - 2023. - Vol. 14. - P. 1134661.

258. Naeem, H. Induction of Th1 type-oriented humoral response through intranasal immunization of mice with SAG1-Toxoplasma gondii polymeric nanospheres / H.

Naeem, M. Sana, S. Islam et al. // Artif. Cells Nanomed. Biotechnol. - 2018. -Vol. 46(Suppl 2). - P. 1025-1034.

259. Naish, E. The formation and function of the neutrophil phagosome / E. Naish, A.J. Wood, A.P. Stewart et al. // Immunol. Rev. - 2023. - Vol. 314. - N 1. - P. 158-180.

260. Nakayama, T. Th2 cells in health and disease / T. Nakayama, K. Hirahara, A. Onodera et al. // Annu. Rev. Immunol. - 2017. - Vol. 35. - P. 53-84.

261. Namdar Ahmadabad, H. Cytokine profile and nitric oxide levels in peritoneal macrophages of BALB/c mice exposed to the fucose-mannose ligand of Leishmania infantum combined with glycyrrhizin / H. Namdar Ahmadabad, R. Shafiei, G. Hatam et al. // Parasit. Vectors. - 2020. - Vol. 13. - P. 363.

262. Nardi, S. Chemical structure and biological activity of humic substances define their role as plant growth promoters / S. Nardi, M. Schiavon, O. Francioso // Molecules. - 2021. - Vol. 26. - N 8. - P. 2256.

263. Natarajan, K. The role of molecular flexibility in antigen presentation and T Cell receptor-mediated signaling / K. Nataraj an, J. Jiang, N.A. May et al. // Front. Immunol. - 2018. - Vol. 9. - P. 1657.

264. Naude, P.J.W. Potassium humate inhibits carrageenan-induced paw oedema and a graft-versus-host reaction in rats / P.J.W. Naude, A.D. Cromarty, C.E.J. van Rensburg // Inflammopharmacol. - 2010. - Vol. 18. - P. 33-39.

265. Neamatallah T. Mitogen-activated protein kinase pathway: a critical regulator in tumor-associated macrophage polarization // J. Microsc. Ultrastruct. - 2019. - Vol. 7. - N 2. - P. 53-56.

266. Negreiros-Lima, G.L. Cyclic AMP regulates key features of macrophages via PKA: recruitment, reprogramming and efferocytosis / G.L. Negreiros-Lima, K.M. Lima, I.Z. Moreira et al. // Cells. - 2020. - Vol. 9. - N. 1. - P. 128.

267. Nijboer, C.H. Inhibition of the JNK/AP-1 pathway reduces neuronal death and improves behavioral outcome after neonatal hypoxic-ischemic brain injury / C.H. Nijboer, M.A. van der Kooij, F. van Bel et al. // Brain Behav. Immun. - 2010. -Vol. 24. - N 5. - P. 812-21.

268. Noh, H.J. Immunostimulatory effect of heat-killed probiotics on RAW264.7 macrophages / H.J. Noh, J.M. Park, Y.J. Kwon et al. // J. Microbiol. Biotechnol. -2022. - Vol. 32. - N 5. - P. 638-644.

269. Nourshargh, S. Leukocyte migration into inflamed tissues / S. Nourshargh, R. Alon // Immunity. - 2014. - Vol. 41. - N 5. - P. 694-707.

270. Nuzzo, A. Conformational changes of dissolved humic and fulvic superstructures with progressive iron complexation / A. Nuzzo, A. Sánchez, B. Fontaine et al. // J. Geochem. Explor. - 2013. - Vol. 129. - P. 1-5.

271. Nwabo Kamdje, A.H. Role of signaling pathways in the interaction between microbial, inflammation and cancer / A.H. Nwabo Kamdje, R. Tagne Simo, H.P. Fogang Dongmo et al. // Holist. Integ. Oncol. - 2023. - Vol. 2. - P. 42.

272. Oishi, Y. Macrophages in inflammation, repair and regeneration / Y. Oishi, I. Manabe // Int. Immunol. - 2018. - Vol. 30. - N 11. - P. 511-528.

273. Olivieri, B. Vaccinations and autoimmune diseases / B. Olivieri, C. Betterle, G. Zanoni // Vaccines (Basel). - 2021. - Vol. 9. - N 8. - P. 815.

274. Olk, D.C. Environmental and agricultural relevance of humic fractions extracted by alkali from soils and natural waters / D.C. Olk, P.R. Bloom, E.M. Perdue et al. // J. Environ. Qual. - 2019. - Vol. 48. - N 2. - P. 217-232.

275. Olson, N.C. T helper cell polarization in healthy people: implications for cardiovascular disease / N.C. Olson, R. Sallam, M.F. Doyle et al. // J. Cardiovasc. Transl. Res. - 2013. - Vol. 6. - N 5. - P. 772-86.

276. Oray, M. Long-term side effects of glucocorticoids / M. Oray, K. Abu Samra, N. Ebrahimiadib et al. / Expert. Opin. Drug Saf. - 2016. - Vol. 15. - N 4. - P. 457-65.

277. Orecchioni, M. Macrophage polarization: Different gene signatures in M1(LPS+) vs. classically and M2(LPS-) vs. alternatively activated macrophages. M. Orecchioni, Y. Ghosheh, A.B. Pramod et al. // Front. Immunol. - 2019. - Vol. 10. - P. 1084.

278. Orihuela, R. Microglial M1/M2 polarization and metabolic states / R. Orihuela, C.A. McPherson, G.J. Harry // Br. J. Pharmacol. - 2016. - Vol. 173. - N 4. - P. 649-65.

279. Pan, Y. The role of T helper 22 cells in dermatological disorders / Y. Pan, D. Du, L. Wang et al. // Front. Immunol. - 2022. - Vol. 13. - P. 911546.

280. Panigaj, M. Therapeutic immunomodulation by rationally designed nucleic acids and nucleic acid nanoparticles / M. Panigaj, E. Skelly, D. Beasock et al. // Front. Immunol. - 2023. - Vol. 14. - P. 1053550.

281. Parisi, L. Macrophage polarization in chronic inflammatory diseases: killers or builders? / L. Parisi, E. Gini, D. Baci et al. // J. Immunol. Res. - 2018. - Vol. 2018.

- P. 8917804.

282. Paroli, M. The double game played by Th17 cells in infection: host defense and immunopathology / M. Paroli, R. Caccavale, M.T. Fiorillo et al. // Pathogens. -2022. - Vol. 11. - N 12. - P. 1547.

283. Patocka, J. Chemistry and toxicity - A review / J. Patocka, E. Nepovimova, K. Kuca et al. // Curr. Med. Chem. - 2021. - Vol. 28. - N 20. - P. 3925-3934.

284. Pelewicz, K. Glucocorticoid withdrawal-an overview on when and how to diagnose adrenal insufficiency in clinical practice / K. Pelewicz, P. Miskiewicz // Diagnostics (Basel). - 2021. - Vol. 11. - N 4. - P. 728.

285. Peng, C. The NF-kB signaling pathway, the microbiota, and gastrointestinal tumorigenesis: recent advances / C. Peng, Y. Ouyang, N. Lu et al. // Front. Immunol. - 2020. - Vol. 11. - P. 1387.

286. Pereyra, C.E. The diverse mechanisms and anticancer potential of naphthoquinones / C.E. Pereyra, R.F. Dantas, S.B. Ferreira et al. // Cancer Cell Int.

- 2019. - Vol. 19. - P. 207.

287. Perez, S. Macrophage polarization and reprogramming in acute inflammation: a redox perspective / S. Perez, S. Rius-Perez // Antioxidants (Basel). - 2022. - Vol. 11. - N 7. - P. 1394.

288. Piacenza, L. Reactive species and pathogen antioxidant networks during phagocytosis / L. Piacenza, M. Trujillo, R. Radi // J. Exp. Med. - 2019. - Vol. 216.

- N 3. - P. 501-516.

289. Piccolo, A. The soil humeome: chemical structure, functions and technological perspectives / A. Piccolo, R. Spaccini, D. Savy et al. // Sustainable Agrochemistry / Edited by Jr.S. Vaz. - Cham: Springer, 2019.

290. Piccolo, A. The supramolecular structure of humic substances: a novel understanding of humus chemistry and implications in soil science // Advances in agronomy. - 2002. - Vol. 75. - P. 57-134.

291. Pollard, A.J. A guide to vaccinology: from basic principles to new developments / A.J. Pollard, E.M. Bijker // Nat. Rev. Immunol. - 2021. - Vol. 21. - P. 83-100.

292. Polumuri, S. cAMP levels regulate macrophage alternative activation marker expression / S. Polumuri, D.J. Perkins, S.N. Vogel // Innate Immun. - 2021. - Vol. 27. - N 2. - P. 133-142.

293. Ponce, R. Adverse consequences of immunostimulation // J. Immunotoxicol. -2008. - Vol. 5. - N 1. - P. 33-41.

294. Prame Kumar, K. Partners in crime: neutrophils and monocytes/macrophages in inflammation and disease / K. Prame Kumar, A.J. Nicholls, C.H.Y. Wong // Cell Tissue Res. - 2018. - Vol. 371. - N 3. - P. 551-565.

295. Purcu, D.U. Effect of stimulation time on the expression of human macrophage polarization markers / D.U. Purcu, A. Korkmaz, S. Gunalp et al. // PLOS ONE. -2022. - Vol. 17. - N 3. - P. e0265196.

296. Qi, H. T follicular helper cells in space-time // Nat. Rev. Immunol. - 2016. -Vol. 16. - P. 612-625.

297. Qian, C. Heterogeneous macrophages: Supersensors of exogenous inducing factors / C. Qian, Z. Yun, Y. Yao et al. // Scand. J. Immunol. - 2019. - Vol. 90. -N 1. - P. e12768.

298. Radomska-Lesniewska, D.M. Angiomodulatory properties of some antibiotics and Tolpa Peat Preparation / D.M. Radomska-Lesniewska, E. Skopinska-Rozewska, J. Jozwiak et al. // Central-European Journal of Immunology. - 2016. -Vol. 41. - N 1. - P. 19-24.

299. Raggi, G. Interleukin-2 - induced vascular leak syndrome: clinically relevant in vitro recapitulation with a patient-derived lung-on-chip / G. Raggi, N. Roldan, V. Micallef et al. // Eur. Respir. J. - 2020. - Vol. 56. - N 64. - P. 4326.

300. Raphael, I. T cell subsets and their signature cytokines in autoimmune and inflammatory diseases / I. Raphael, S. Nalawade, T.N. Eagar et al. // Cytokine. -2015. - Vol. 74. - N 1. - P. 5-17.

301. Rasheed, A. Macrophage responses to environmental stimuli during homeostasis and disease / A. Rasheed, K.J. Rayner // Endocr. Rev. - 2021. - Vol. 42. - N 4. -P. 407-435.

302. Rath, M. Metabolism via arginase or nitric oxide synthase: two competing arginine pathways in macrophages / M. Rath, I. Müller, P. Kropf et al. // Front. Immunol. - 2014. - Vol. 5. - P. 532.

303. Ray, A. Regulatory T cells in many flavors control asthma / A. Ray, A. Khare, N. Krishnamoorthy et al. // Mucosal Immunol. - 2010. - Vol. 3. - N 3. - P. 21629.

304. Regateiro, F.S. The diverse roles of T cell subsets in asthma / F.S. Regateiro, P. Botelho Alves, A.L. Moura et al. / Eur. Ann. Allergy Clin. Immunol. - 2021. -Vol. 53. - N 5. - P. 201-208.

305. Roberts, M.B. Immunosuppressive agents and infectious risk in transplantation: managing the "Net state of immunosuppression" / M.B. Roberts, J.A. Fishman // Clin. Infect. Dis. - 2021. - Vol. 73. - N 7. - P. e1302-e1317.

306. Rocamora-Reverte, L. The complex role of regulatory T Cells in immunity and aging / L. Rocamora-Reverte, F.L. Melzer, R. Würzner et al. // Front. Immunol. -2021. - Vol. 11. - P. 616949.

307. Rolot, M. Macrophage activation and functions during helminth infection: recent advances from the laboratory mouse / M. Rolot, B.G. Dewals // J. Immunol. Res. - 2018. - Vol. 2018. - P. 2790627.

308. Rosales, C. Neutrophils at the crossroads of innate and adaptive immunity // J. Leukoc. Biol. - 2020. - Vol. 108. - N 1. - P. 377-396.

309. Rousse, J. LISI, a glyco-humanized swine polyclonal anti-lymphocyte globulin, as a novel induction treatment in solid organ transplantation / J. Rousse, P.J. Royer, G. Evanno et al. // Front. Immunol. - 2023. - Vol. 14. - P. 1137629.

310. Rupiasih, N.N. A review: Compositions, structures, properties and applications of humic substances / N.N. Rupiasih, P.B. Vidyasagar // J. Adv. Sci. Tecnol. -2005. - Vol. 8. - N I-II. - P. 16-25.

311. Ryan, T.A.J. An emerging role for type i interferons as critical regulators of blood coagulation / T.A.J. Ryan, L.A.J. O'Neill // Cells. - 2023. - Vol. 12. - N 5. - P. 778.

312. Sacta, M.A. Gene-specific mechanisms direct glucocorticoid-receptor-driven repression of inflammatory response genes in macrophages / M.A. Sacta, B. Tharmalingam, M. Coppo et al. // Elife. - 2018. - Vol. 7. - P. e34864.

313. Sakaguchi, S. Regulatory T cells and human disease / S. Sakaguchi, N. Mikami, J.B. Wing et al. // Annu. Rev. Immunol. - 2020. - Vol. 38. - P. 541-566.

314. Sameer, A.S. Toll-like receptors (TLRs): structure, functions, signaling, and role of their polymorphisms in colorectal cancer susceptibility / A.S. Sameer, S. Nissar // Biomed. Res. Int. - 2021. - Vol. 2021. - P. 1157023.

315. Saraiva, M. Biology and therapeutic potential of interleukin-10 / M. Saraiva, P. Vieira, A. O'Garra // J. Exp. Med. - 2020. - Vol. 217. - N 1. - P. e20190418.

316. Schepetkin, I. Medical drugs from humus matter: focus on mumie / I. Schepetkin, A. Khlebnikov, B. Se Kwon // Drug Dev. Res. - 2002. - Vol. 57. - P. 40-159.

317. Schinocca, C. Role of the IL-23/IL-17 pathway in rheumatic diseases: an overview / C. Schinocca, C. Rizzo, S. Fasano et al. // Front. Immunol. - 2021. -Vol 12. - P. 637829.

318. Schulz, E.G. Sequential polarization and imprinting of type 1 T helper lymphocytes by interferon-gamma and interleukin-12 / E.G. Schulz, L. Mariani, A. Radbruch et al. // Immunity. - 2009. - Vol. 30. - N 5. - P. 673-83.

319. §ehitoglu, M.H. Humic acid has protective effect on gastric ulcer by alleviating inflammation in rats / M.H. §ehitoglu, Ö. Öztopuz, í. Karaboga et al. // Cytol. Genet. - 2022. - Vol. 56. - P. 84-97.

320. Sell, S. How vaccines work: immune effector mechanisms and designer vaccines // Expert Rev. Vaccines. - 2019. - Vol. 18. - N 10. - P. 993-1015.

321. Setten, E. Understanding fibrosis pathogenesis via modeling macrophage-fibroblast interplay in immune-metabolic context / E. Setten, A. Castagna, J.M. Nava-Sedeño et al. // Nat. Commun. - 2022. - Vol. 13. - N 1. - P. 6499.

322. Shapouri-Moghaddam, A. Macrophage plasticity, polarization, and function in health and disease / A. Shapouri-Moghaddam, S. Mohammadian, H. Vazini et al. // J. Cell. Physiol. - 2018. - Vol. 233. - N 9. - P. 6425-6440.

323. Sharif, O. Macrophage rewiring by nutrient associated PI3K dependent pathways / O. Sharif, J.S. Brunner, A. Vogel et al. // Front. Immunol. - 2019. -Vol. 10. - P. 2002.

324. Sharma, N. Macrophages - common culprit in obesity and asthma / N. Sharma, M. Akkoyunlu, R.L. Rabin // Allergy. - 2018. - Vol. 73. - P. 1196-1205.

325. Sharma, P. Particle uptake driven phagocytosis in macrophages and neutrophils enhances bacterial clearance / P. Sharma, A. Vijaykumar, J.V. Raghavan et al. / J. Control. Release. - 2022. - Vol. 343. - P. 131-141.

326. Shekhar, S. The dark side of antibiotics: adverse effects on the infant immune defense against infection / S. Shekhar, F.C. Petersen // Front. Pediatr. - 2020. -Vol. 8. - P. 544460.

327. Shi, J. Involvement of IL-4, IL-13 and their receptors in pancreatic cancer / J. Shi, X. Song, B. Traub et al. // Int. J. Mol. Sci. - 2021. - Vol. 22. - N 6. - P. 2998.

328. Shimizu, J. Excessive CD4+ T cells co-expressing interleukin-17 and interferon-Y in patients with Behçet's disease / J. Shimizu, K. Takai, N. Fujiwara et al. / Clin. Exp. Immunol. - 2012. - Vol. 168. - N 1. - P. 68-74.

329. Sica, A. Macrophage polarization in pathology / A. Sica, M. Erreni, P. Allavena et al. // Cell. Mol. Life Sci. - 2015. - Vol. 72. - N 21. - P. 4111-26.

330. Siddiqui, S. Anti-thymocyte globulin in haematology: Recent developments / S. Siddiqui, J. Cox, R. Herzig et al. // Indian J. Med. Res. - 2019. - Vol. 150. - N 3. -P. 221-227.

331. Siddiqui, Y. In vitro fungicidal activity of humic acid fraction from oil palm compost / Y. Siddiqui, S. Meon, R. Ismail et al. // Int. J. Agric. Biol. - 2009. - Vol. 11. - P. 448-452.

332. Silva, L.B. The role of TNF-a as a proinflammatory cytokine in pathological processes / L.B. Silva, A.P. dos Santos Neto, S.M.A.S. Maia et al. // Open Dent. J. - 2019. - Vol. 13. - P. 332-338.

333. Slingerland, C.J. Polymyxin stereochemistry and its role in antibacterial activity and outer membrane disruption / C.J. Slingerland, I. Kotsogianni, C.M.J. Wesseling et al. / ACS Infect. Dis. - 2022. - Vol. 8. - N. 12. - P. 2396-2404.

334. Sliva, J. Inosine pranobex: A key player in the game against a wide range of viral infections and non-infectious diseases / J. Sliva, C.N. Pantzartzi, M. Votava // Adv. Ther. - 2019. - Vol. 36. - N 8. - P. 1878-1905.

335. Smyk, J.M. Evolution of influenza viruses - drug resistance, treatment options, and prospects / J.M. Smyk. - N. Szydlowska, W. Szulc et al. // Int. J. Mol. Sci. -2022. - Vol. 23. - N 20. - P. 12244.

336. Sonnenberg, G.F. Pathological versus protective functions of IL-22 in airway inflammation are regulated by IL-17A / G.F. Sonnenberg, M.G. Nair, T.J. Kirn // J. Exp. Med. - 2010. - Vol. 207. - N 6. - P. 1293-305.

337. Souza, F. Extraction and characterization of humic acid from coal for the application as dispersant of ceramic powders / F. Souza, S.R. Braganfa // J. Mater. Res. Technol. - 2018. - Vol. 7. - P. 254-260.

338. Stadhouders, R. A cellular and molecular view of T helper 17 cell plasticity in autoimmunity / R. Stadhouders, E. Lubberts, R.W. Hendriks // J. Autoimmun. -2018. - Vol. 87. - P. 1-15.

339. Stamm, C. Dose-dependent induction of murine Th1/Th2 responses to sheep red blood cells occurs in two steps: antigen presentation during second encounter is

decisive / C. Stamm, J. Barthelmann, N. Kunz et al. // PLoS One. - 2013. - Vol. 8. - N 6. - P. e67746.

340. Stevenson, F.J. Extraction, fraction and general chemical composition of soil organic matter // Humus Chemistry, Genesis, Composition, Reactions / Edited by F.J. Stevenson. - New York: John Wiley and Sons, 1982.

341. Stevenson, F.J. Humus chemistry: genesis, composition, reactions / F.J. Stevenson. - John Wiley & Sons, 1994. - 512 p.

342. Stout, A. Systemic absorption and side effects of locally injected glucocorticoids / A. Stout, J. Friedly, C.J. Standaert // P.M. R. - 2019. - Vol. 11. - N 4. - P. 409419.

343. Stout, R.D. Functional plasticity of macrophages: in situ reprogramming of tumor-associated macrophages / R.D. Stout, S.K. Watkins, J. Suttles // J. Leukoc. Biol. - 2009. - Vol. 86. - N 5. - P. 1105-9.

344. Sule, R. Western blotting (immunoblotting): history, theory, uses, protocol and problems / R. Sule, G. Rivera, A.V. Gomes // Biotechniques. - 2023. - Vol. 75. -N 3. - P. 99-114.

345. Summers, K.M. Network analysis of transcriptomic diversity amongst resident tissue macrophages and dendritic cells in the mouse mononuclear phagocyte system / K.M. Summers, S.J. Bush, D.A. Hume // PLoS Biol. - 2020. - Vol. 18. -N 10. - P. e3000859.

346. Sun, H. Predictive models for estimating cytotoxicity on the basis of chemical structures / H. Sun, Y. Wang, D.M. Cheff et al. // Bioorg. Med. Chem. - 2020. -Vol. 28. - N 10. - P. 115422.

347. Sun, L. T cells in health and disease / L. Sun, Y. Su, A. Jiao et al. // Signal Transduct. Target Ther. - 2023. - Vol. 8. - N 1. - P. 235.

348. Sutton, R. Molecular structure in soil humic substances: the new view / R. Sutton, G. Sposito // Environ. Sci. Technol. - 2005. - Vol. 39. - N 23. - P. 900915.

349. Swift, R.S. Macromolecular properties of soil humic substances: Fact, fiction, and opinion // Soil Sci. - 1999. - Vol. 164. - P. 790-802.

350. Szot, K. The effects of humic water on endothelial cells under hyperglycemic conditions: inflammation-associated parameters / K. Szot, K. Goralczyk, M. Michalska et al. / Environ. Geochem. Health. - 2019. - Vol. 41. - N 3. - P. 15771582.

351. Tambama, P. Antiproliferative activity of the isofuranonaphthoquinone isolated from Bulbine frutescens against Jurkat T cells / P. Tambama, B. Abegaz, S. Mukanganyama // Biomed. Res. Int. - 2014. - Vol. 2014. - P. 752941.

352. Taniai, N. Hepatotoxicity caused by both tacrolimus and cyclosporine after living donor liver transplantation / N. Taniai, K. Akimaru, Y. Ishikawa // Med. Sch. - 2008. - Vol. 75. - N 3. - P. 187-91.

353. Tao, N. Thymosin a1 and its role in viral infectious diseases: The mechanism and clinical application / N. Tao, X. Xu, Y. Ying et al. // Molecules. - 2023. - Vol. 28. - P. 3539.

354. Tavares, L.P. Blame the signaling: Role of cAMP for the resolution of inflammation / L.P. Tavares, G.L. Negreiros-Lima, K.M. Lima et al. // Pharmacol. Res. - 2020. - Vol. 159. - P. 105030.

355. Taye MM. Understanding of machine learning with deep learning: architectures, workflow, applications and future directions // Computers. - 2023. - Vol. 12. - N. 5. - P. 91.

356. Téllez Arévalo, A.M. Synthetic pharmacotherapy for systemic lupus erythematosus: potential mechanisms of action, efficacy, and safety / A.M. Téllez Arévalo, A. Quaye, L.C. Rojas-Rodriguez et al. // Medicina. - 2023. - Vol. 59. - N 1. - P. 56.

357. Terzi, F. Protective effect of silymarin on tacrolimus-induced kidney and liver toxicity / F. Terzi, M.K. Ciftci // BMC Complement Med. Ther. - 2022. -Vol. 22. - P. 331.

358. Tian, S. Surface activity of humic acid and its sub-fractions from forest soil / S. Tian, W. Tan, X. Wang et al. // Sustainability. - 2021. - Vol. 13. - N 15. - P. 8122.

359. Ting, H.C. Humic acid enhances the cytotoxic effects of arsenic trioxide on human cervical cancer cells / H.C. Ting, C.C. Yen, W.K. Chen et al. // Environ. Toxicol. Pharmacol. - 2010. - Vol. 29. - N 2. - P. 117-25.

360. Tönshoff, B. Immunosuppressants in Organ Transplantation // Handb. Exp. Pharmacol. - 2020. - Vol. 261. - P. 441-469.

361. Tsao, Y.C. Discovery of isoplumbagin as a novel NQO1 substrate and anticancer quinone / Y.C. Tsao, Y.J. Chang, C.H. Wang et al. // Int. J. Mol. Sci. -2020. - Vol. 21. - N 12. - P. 4378.

362. Tuzlak, S. Repositioning TH cell polarization from single cytokines to complex help / S. Tuzlak, A.S. Dejean, M. Iannacone et al. / Nat. Immunol. - 2021. - Vol. 22. - P. 1210-1217.

363. Tzavlaki, K. TGF-ß Signaling / K. Tzavlaki, A. Moustakas // Biomolecules. -2020. - Vol.10. - N 3. - P. 487.

364. Uribe-Querol, E. Phagocytosis: our current understanding of a universal biological process / E. Uribe-Querol, C. Rosales // Front. Immunol. - 2020. - Vol. 11. - P. 1066.

365. Vacca, F. Tissue-specific immunity in helminth infections / F. Vacca, G. Le Gros // Mucosal Immunol. - 2022. - Vol. 15. - N 6. - P. 1212-1223.

366. Vadalà, M. Vaccination and autoimmune diseases: is prevention of adverse health effects on the horizon? / M. Vadalà, D. Poddighe, C. Laurino et al. // EPMA J. - 2017. - Vol. 8. - N 3. - P. 295-311.

367. van Geenen, E.J. Azathioprine or mercaptopurine-induced acute pancreatitis is not a disease-specific phenomenon / E.J. van Geenen, N.K. de Boer, P. Stassen et al. // Aliment. Pharmacol. Ther. - 2010. - Vol. 31. - N 12. - P. 1322-9.

368. van Loo, G. Death by TNF: a road to inflammation / G. van Loo, M.J.M. Bertrand // Nat. Rev. Immunol. - 2023. - Vol. 23. - N 5. - P. 289-303.

369. van Rensburg, C.E.J. Investigation of the anti-HIV properties of oxihumate / C.E. J. van Rensburg, J. Dekker, R. Weis et al. // Chemotherapy. - 2002. - Vol. 48. - N 3. - P. 138-43.

370. van Rensburg, C.E.J. Potassium humate inhibits complement activation and the production of inflammatory cytokines in vitro / C.E. J. van Rensburg, P.J. Naude // Inflammation. - 2009. - Vol. 32. - N 4. - P. 270-276.

371. van Rensburg, C.E.J. Brown coal derived humate inhibits contact hypersensitivity; an efficacy, toxicity and teragenicity study in rats / C.E.J. Van Rensburg, J.R. Snyman, T. Mokoele et al. // Inflammation. - 2007. - Vol. 30. - N. 5. - P. 148-152.

372. van Rensburg, C.E.J. Potassium humate reduces inflammation and clinically improves the outcomes of patients with osteoarthritis of the knee / C.E.J. Van Rensburg, B.E. Badenhorst, J.J Gandy et al. // Open Conf Proc J 1: Conference Proceedings of the International Conference on Drug Discovery and Therapy, 2010. - P. 69-74.

373. van Rensburg, C.E.J. The antiinflammatory properties of humic substances: a mini review // Phytother. Res. - 2015. - Vol. 29. - N 6. - P. 791-5.

374. van Steenwijk, H.P. Immunomodulating effects of fungal beta-glucans: from traditional use to medicine / H.P. van Steenwijk, A. Bast, A. de Boer // Nutrients. -2021. - Vol. 13. - N 4. - P. 1333.