Иммунологический анализ защитных реакций морской звезды Asterias Rubens тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Кудрявцев, Игорь Владимирович

• Кудрявцев, Игорь Владимирович
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кудрявцев, Игорь Владимирович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Сбор экспериментальных животных.

2.2. Модельные антигены.

2.3. Иммунизация экспериментальных животных.

2.4. Подсчет числа целомоцитов в целомической жидкости.

2.5. Культуральная среда.

2.6. Фракционирование целомоцитов морской звезды Asterias rubens.

2.7. Оценка поглощения меченых модельных антигенов целомоцитами.

2.8. Оценка поглощение нейтрального красного целомоцитами морской звезды Asterias rubens.

2.9. Оценка гемолитической активности целомоцитов морской звезды Asterias rubens.

2.10. Оценка кислородного метаболизма целомоцитов.

2.11. Оценка метаболической активности целомоцитов.

2.12. Определение гемагглютинирующей и гемолитической активности

2.13. Определение активности ингибиторов бактериальных токсинов в целомической жидкости Asterias rubens.

2.14. Определение концентрации гемоглобина в целомической жидкости.

2.15. Определение времени циркуляции живых бактерий рода Pseudomonas в целомической жидкости Asterias rubens.

2.16. Определение времени циркуляции меченых ФИТЦ частиц зимозана и бактерий E.coli.

2.17. Исследование экспрессии гена, гомологичного СЗ компоненту комплемента, во фракциях целомоцитов.

2.18. Статистические методы.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Исследование функциональной активности фракций целомоцитов морской звезды Asterias rubens.

3.1.1. Результаты градиентного центрифугирования.

3.1.2. Продукция активных форм кислорода по целомоцитами различных фракций циркулирующих клеток Asterias rubens.

3.1.3. Поглощение нейтрального красного целомоцитами различных фракций морской звезды Asterias rubens.

3.1.4. Оценка фагоцитарной активности различных фракций целомоцитов морской звезды Asterias rubens.

3.1.5. Экспрессия гомолога СЗ компонента комплемента млекопитающих (ARC3-like) целомоцитами трех фракций морской звезды Asterias rubens.

3.1.6. Исследование гемолитической активности различных фракций целомоцитов морской звезды Asterias rubens.

3.2. Исследование функциональной активности нефракционированных целомоцитов морской звезды Asterias rubens.

3.3. Продукция активных форм кислорода в ответ различные антигены.

3.3.1. Оценка влияния рекомбинаптных цитокинов человека на продукцию активных форм кислороды целомоцитами.

3.3.2. Влияние лектинов на продукцию активных форм кислорода целомоцитами морских звезд.

3.3. Влияние различных антигенов на параметры защитных реакция морской звезды Asterias rubens.

3.3.1. Динамика численности циркулирующих клеток.

3.3.2. Динамика продукции активных форм кислорода целомоцитами.

3.3.3. Исследование метаболической активности целомоцитов.

3.3.4. Динамика титров гемагглютининов и гемолизинов в цел омической жидкости.

3.3.5. Динамика факторов целомической жидкости Asterias rubens, подавляющих активность стрептолизина 0.

3.3.6. Подавления гемолиза целомической жидкости на разных сроках после введения модельных антигенов.

3.3.7. Оценка скорости элиминации антигенов из целомической жидкости.

3.4. Поиски признаков иммунологической памяти в защитных реакциях морской звезды Asterias rubens.

3.4.1. Динамика численности целомоцитов в целомической жидкости Asterias rubens при ответе на первичное и повторное введение ЭЧ

3.4.2. Динамика спонтанной продукции активных форм кислорода целомоцитами Asterias rubens при ответе на первичное и повторное введение ЭЧ.

3.4.3. Динамика зимозан-индуцированной продукции активных форм кислорода целомоцитами Asterias rubens при ответе на первичное и повторное введение ЭЧ.

3.4.4. Метаболическая активность целомоцитов Asterias rubens при ответе на первичное и повторное введение ЭЧ.

3.4.5. Динамика титров гемагглютининов и гемолизинов в целомической жидкости морской звезды Asterias rubens при ответе на первичное и повторное введение ЭЧ.

3.4.6. Определение времени циркуляции антигена в целомической жидкости морской звезды Asterias rubens при первичном и повторном введении ЭЧ.

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

5. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунологический анализ защитных реакций морской звезды Asterias Rubens»

Актуальность исследовании.

Традиционно в иммунологических исследованиях особое внимание уделяется изучению защитных реакций наиболее продвинутых форм животных, главным образом, млекопитающих. Данный класс, сравнительно молодой в филогенетическом плане, обладает самыми эффективными механизмами защиты, которые являются результатом длительной эволюции. Однако для изучения процесса становления отдельных элементов иммунной системы, характера взаимосвязей ее элементов и понимания причин ее возникновения в целом необходим сравнительно-иммунологический подход, предусматривающий обращение к филогенетически более ранним группам животных. С точки зрения анализа становления системы защитных реакций, важным представляется систематическое положение типа Ecliinoderniata. Он находится в основании древа Deuterostomia, к которому относятся и позвоночные. Иглокожие рано отделились от магистрального пути эволюции данной группы, но из всех современных животных они, как считается, наиболее близки к предкам хордовых. Поэтому систему их защитных реакций традиционно рассматривают в качестве предковой по отношению к иммунной системе более эволюционно продвинутых форм [1,8].

Основными характеристиками реакций приобретенного иммунитета позвоночных являются специфичность и память, основанные на распознающих молекулах иммуноглобулинового суперсемейства. Становление данной системы шло параллельно с процессом развития гораздо более древней и не менее эффективной системы врожденного иммунитета. Спорным остается вопрос о наличии иммунологической памяти у беспозвоночных животных, которым свойственны только реакции врожденного иммунитета [115, 73]. Вместе с тем, за последние годы накопились данные об использование различными группами беспозвоночных механизмов реаранжировки поверхностных рецепторов для увеличения спектра распознаваемых лигандов [144, 184]. У представителей иглокожих также были выделены две группы генов (семейства скевенжер-рецепторов SRCR и То11-подобных белков), проходящих процессы перестройки, аналогичные таков имуноглобулиновых генов позвоночных [143, 145]. Поэтому иглокожие, обладающие родством с предками хордовых животных, представляют важнейшую группу организмов, в которой можно наблюдать как наличие сложных механизмов врожденного иммунитета, так и первые признаки реакций приобретенного иммунитета. Клеточные реакции врожденного иммунитета опосредуются циркулирующими клетками целомической жидкости (целомоцитами), основными функциями которых являются распознавание патогена, его фагоцитоз, участие в реакциях инкапсуляции и тромбообразования [8, 82]. Целомоциты играют ведущую роль в продукции гуморальных защитных факторов: лектинов различной лигандной специфичности, гомологов компонентов комплемента и антимикробных факторов [164]. Следует отметить, что именно в пределах иглокожих происходит становления альтернативного и, возможно, лектинового каскадов комплемента [140]. Исследование основ функционирования каскада комплемента в группах, где происходило его становление, позволит определить исходные функции этой системы и приблизиться к ее клиническому применению при дисфункциях комплемента у млекопитающих.

Особый интерес с точки зрения эволюции иммунной системы представляют исследования клеточного звена защитных реакций иглокожих. В серии работ было показано, что в ответ на стимуляцию в целомоцитах иглокожих усиливается экспрессия транскрипционных факторов, гомологичных NF-кВ, GATA и Runt лимфоцитов млекопитающих, что позволяет поставить вопрос о наличие у иглокожих лимфоцитонодобных клеток [146, 93, 169]. Более того, в аксиальном органе Asterias rubens были выделены две популяции клеток, обладающих рядом свойств Т- и В-лимфоцитов млекопитающих , причем последние были способны к продукции антителоподобного фактора, гомологичного легкой к-цепи иммуноглобулинов [117].

Вместе с тем, до настоящего времени в рамках единого исследования не проводилось комплексного анализа основ функционирования клеточного звена врожденного иммунитета иглокожих в условиях in vivo и in vitro. Не исследована роль и функции отдельных клеточных популяций, а также не установлено их точное число, равно как и спектр распознаваемых клеточными рецепторами лигандов.

Цель работы: проведение сравнительно-иммунологического анализа реакций врожденного иммунитета морской звезды Asterias rubcns.

Задачи исследования:

1. Разработка метода фракционирования циркулирующих клеток морской звезды A.rubens и исследование функциональной активности отдельных фракций целомоцитов.

2. Определение спектра распознаваемых целомоцитами патоген-ассоциированных паттернов.

3. Исследование роли клеточных и гуморальных факторов врожденного иммунитета в ходе реализации защитных реакций иглокожих и поиск механизмов их регуляции.

4. Изучение динамики клеточных и гуморальных факторов при первичном и повторных контактах с модельными антигенами.

Научная новизна.

Впервые проведено комплексное исследование функциональных особенностей различных фракций циркулирующих клеток морских звезд с использованием иммунологических и молекулярно-биологических методов. С использование методов проточной цитометрии в сочетании с фракционированием клеток иглокожих впервые проведено изучение фагоцитарной активности, продукции активных форм кислорода, цитотоксических свойств и характера ответа на цитокины человека по выявленным фракциям циркулирующих целомоцитов. Получены приоритетные данные о наличие у морской звезды Asterias rubens гена, гомологичного СЗ компоненту комплемента, и показан уровень его экспрессии в разных фракциях целомоцитов.

Установлено, что повторное введение ЭЧ не приводит к усилению ответа, опосредуемого как клеточными, так и гуморальными защитными механизмами, и не влияет на скорость удаления антигена из циркуляции. Результаты подтверждают отсутствие иммунологической памяти у данной группы животных, а также указывают на высокую эффективность реакций врожденного иммунитета.

Впервые для морских звезд A.rubens было проведено сравнение нескольких модельных антигенов в условиях как in vivo, так и in vitro.

Научно-практическая значимость.

Основным научным значением работы является важный вклад в изучение процесса становления врожденного иммунитета на примере исследования примитивных защитных реакций иглокожих животных и эволюции каскада комплемента. Подтверждена тождественность клеточных механизмов врожденного иммунитета у иглокожих и высших позвоночных животных. Полученные данные о становлении каскада комплемента и системы регуляторных цитокинов могут лечь в основу разработки новых подходов к клиническому применению этих белков при первичных и вторичных иммунодефицитных состояниях. Полученные в работе результаты могут войти в лекционные курсы по общей и сравнительной иммунологии. Методические разработки могут быть использованы для изучения защитных реакций различных таксонов беспозвоночных и позвоночных животных.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. В реакциях врожденного иммунитета морской звезды Asterias rubens клеточные реакции играют более значимую роль по сравнению с гуморальными реакциями и обеспечивают клиренс внутренней среды в течение 24 часов после введения модельных антигенов.

2. По результатам центрифугирования в ступенчатом градиенте плотности диатризоата натрия целомоциты морской звезды Asterias rubens разделяются на три фракции, которые различаются по степени проявлении функциональной активности, но составляют одну линию клеточной дифференцировки.

3. Целомоциты морской звезды Asterias rubens способны различать как корпускулярные и растворимые антигены, так и корпускулярные антигены между собой в условиях in vivo и in vitro.

4. Следствием повторных введений антигена морской звезде Asterias rubens не является ускорение элиминации антигена или прирост амплитуды клеточных и гуморальных факторов. Выявленные изменения ряда показателей носят неиммунологический характер.

Реализация работы.

Результаты работы легли в основу 9 опубликованных статей и 33 тезисов докладов.

Личный вклад в проведение исследования.

Личным вкладом автора в выполненную работу включает самостоятельное проведение большинства исследований, разработку и адаптацию методов исследования, а также интерпретацию полученных результатов. Вклад остальных соавторов ограничивается помощью в освоении и постановке новых методов исследования, а также предоставлением в распоряжение автора ряда необходимых реактивов.

Апробация работы.

Основные положения работы доложены и обсуждены на Научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов Санкт-Петербургской Академии Ветеринарной Медицины (Санкт-Петербург, 2002), на V, VI и VII научной сессии морской биологической станции Санкт-Петербургского государственного университета (Санкт-Петербург, 2004, 2005, 2006), на молодежной конференции с международным участием "Современные достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины" (Астрахань, 2004), на Объединенном иммунологическом форуме (Екатеринбург, 2004), на международной конференции молодых ученых "Вчеш майбутнього" (Одесса, 2004), на Юбилейной конференции молодых ученых Северо-занадного региона, посвященной 60-летию РАМН (Санкт-Петербург, 2004), на конференции молодых ученых "Физиология и медицина" (Санкт-Петербург, 2005), на 1-м Съезде физиологов стран СНГ (Москва, 2005), на конференции "Биологические ресурсы Белого моря и внутренних водоемов европейского Севера" (Вологда, 2005), на летней школе "Current trends in Comperative Immunology" (Санкт-Петербург, 2005), на юбилейной конференции молодых ученых, посвященной 110-летию основания Института экспериментальной медицины (Санкт-Петербург, 2005), на X Санкт-Петербургской Ассамблеи молодых ученых и специалистов (Санкт-Петербург, 2006), на IV съезде иммунологов Урала (Уфа, 2005), на Российской научно-практической конференции "Современные технологии в иммунологии: иммунодиагностика и иммунотерапия" (Курск, 2006), на X Российской конференции "Дни иммунологии в Санкт-Петербурге" (Санкт-Петербург, 2006).

Объем и структура работы.

Работа изложена на 142 страницах текста и содержит описание литературных данных по рассматриваемому вопросу, описание материалов и методов исследования, изложение полученных результатов и их обсуждение. Материал проиллюстрирован 10 таблицами и 24 рисунками. Библиографический указатель содержит 184 источника, в том числе 13 отечественных и 171 иностранный.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Кудрявцев, Игорь Владимирович

121 ВЫВОДЫ

1. Целомоциты морской звезды Asterias rubens играют главную роль в осуществлении реакций врожденного иммунитета. Целомоциты способны к продукции активных форм кислорода, фагоцитозу корпускулярных антигенов, эндоцитозу и активации иод действием растворимых антигенов, проявлению -цитотоксичности - -в-- отношении—эритроцитов —человека,—-— экспрессии СЗ-подобных молекул, изменению метаболизма под действием рекомбинантных цитокинов человека, а также способностями к адгезии и агрегации.

2. Полученные в результате градиентного центрифугирования фракции целомоцитов морской звезды Asterias rubens достоверно не различаются по данным проточной цитометрии, но различаются но способностям проявлять различные функциональные свойства.

3. Клетки третьей (самой тяжелой) фракции обладают наибольшими гемолитической активностью в отношении эритроцитов человека и способностью поглощать нейтральный красный. Клетки второй (средней) фракции обладают наиболее выраженными фагоцитарной активностью в отношении корпускулярных антигенов и продукцией активных форм кислорода в индуцированном НСТ-тесте. Клетки первой (самой легкой) фракции наименее активны по результатам всех функциональных тестов.

4. Гуморальные реакции морских звезд Asterias rubens играют второстепенную роль в осуществлении реакций врожденного иммунитета, так как их параметры не различаются при ответе на разные модельные антигены и повреждение покровов. В целомической жидкости Asterias rubens обнаружено наличие фактора (-ов), обладающих ингибирующей активность в отношении бактериального токсина стрептолизина О.

5. Реакции врожденного иммунитета Asterias rubens обладают высокой эффективностью: полное выведение модельных антигенов (эритроциты человека, культуры бактерий, частицы зимозана) из целомической жидкости осуществляются в течение 12-24 часов, в то время как внутри целомоцитов антигены сохраняются большее время.

6. Повторные введения эритроцитов человека не сопровождается усилением ответа на антиген, опосредуемого клеточными и гуморальными защитными механизмами, и не ведут к ускорению его элиминации.

123

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кудрявцев, Игорь Владимирович, 2006 год

1. Галактионов В.Г. Очерки эволюционной иммунологии. М.: Наука, 1995.- 256 с.

2. Заварзин А.А. Очерки эволюционной гистологии крови и соединительной ткани. Избр. труды. Т.4. М.;Л.: Изд-во АН СССР, 1953.- 720 е.—

3. Исаева В.В., Коренбаум Е.С. Защитные функции целомоцитов и иммунитет иглокожих // Биология моря.- 1989.- № 6,- С.3-14.

4. Коренбаум Е.С. Защитно-морфологические реакции целомоцитов морской звезды Asterias amurensis: Автореф. дис. . канд. биол. наук.-Владивосток: Институт биологии моря ДВО РАН, 1989.- 45 с.

5. Коренбаум Е.С. Ультраструктура целомоцитов морской звезды Asterias amurensis II Цитология.- 1989.- Т.31, № 10.- С. 1165-1171.

6. Коренбаум Е.С., Воробьев В.А. Клетки целомической жидкости морской звезды Asterias amurensis II Биология моря.- 1988,- № 1.- С.27-33.

7. Коренбаум Е.С., Исаева В.В. Тромбоцитарные функции целомоцитов иглокожих // Цитология, биохимия и физиология морских организмов. Владивосток: Изд-во ДВГУ, 1990.- С.84- 90.

8. Купер Э. Сравнительная иммунология. М.: Мир, 1980.- 422 с.

9. Мечников И.И. Невосприимчивость в инфекционных болезнях.- М.: Гос. изд-во медицинский лит-ры, 1947.- 700 с.

10. Назаров П.Г. Реактанты острой фазы воспаления. СПб.: Наука, 2001,- 423 с.

11. Подгорная О.И., Исаева В.В. Тромбообразовательная функция клеток-морул целомической жидкости морского ежа // Биология моря.- 1985.-№5.- С.26-31.

12. Полевщиков А.В. Лектины в защитных реакциях беспозвоночных // Журн. общ. биологии.- 1996.- Т.57, №6.- С.718-739.

13. Фримель Г. Иммунологические методы / пер. с нем. М.:Медицина, 1987.- 420 с.

14. Akiyama S.K., Johnson M.D. Fibronectin in evolution: presence in invertebrate and isolaton from Microcionia prolifera II Сотр. Biochem. Physiol.-1983.- Vol.76B, №4.- P.687-694.

15. Al-Sharif W.Z., Sunyer J.O., Lambris J.D., Smith C.L. Sea urchin coelomocytes specifically express a homologue of the complement component C3 // J. Immunol.- 1998.- Vol.160, №6.- P.2983-2997.

16. Andersson L., Bohlin L., Iorizzi M., Riccio R., Minale L., Moreno-Lopez W. Biological activity of some saponins and saponinlike compounds from starfish and brittle-stars // Toxicon.- 1989.- Vol.27.- P. 179-188

17. Ballaris L., Scanferla M., Cima F., Sabbadin A. Phagocyte spreading and phagocytosis in the compound ascidian Botryllus schlosseri evidence for an integrin-like, RGD-dependent recognition mechanism // Dev. Сотр. Immunol.- 2002.-Vol.26, №4.- P.345-354.

18. Beck G. Macrokines: invertebrate cytokine-like molecules? // Frontiers in Bioscience.- 1998.- Vol.3.- P.559-569.

19. Beck G., Ellis Т., Zhang H., Lin W., Beauregard K., Habicht G. S., Truong N. Nitric oxide production by coelomocytes of Asterias forbesi II Dev. Сотр. Immunol.- 2001.- Vol.25, №1.- P.l-10.

20. Beck G., Habicht G. Isolation and characterization of a primitive IL-1-like protein from an invertebrate, Asterias forbesi II Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1986.- Vol.83, №19.- P.7429-7433.

21. Beck G., O'Brien R.F., Habicht G.S., Stillman D.L., Cooper E.L., Raftos D.A. Invertebrate cytokines III: Interleukin 1-like molecules stimulate phagocytosis by tunicate and echinoderm cells // Cell. Immunol.- 1986.- Vol.146, №2.- P.284-299.

22. Bertheussen K. The cytotoxic reaction in allogeneic mixtures of echinoid phagocytes// Exp. Cell. Res.- 1979.- Vol.120.- P.373-381.

23. Bertheussen K. Receptors for complement on echinoid phagocytes. II. Purified human complement mediates echinoid phagocytosis // Dev. Сотр. Immunol.- 1982.- Vol.6, №4.- P.635-642.

24. Bertheussen K. Complement-like activity in sea urchin coelomic fluid // Dev. Сотр. Immunol.- 1983.- Vol.7, № 1.- P.21-31.

25. Bertheussen K., Seljelid R. Receptors for complement on echinoid phagocytes. I. The opsonic effect of vertebrae sera on echinoid phagocytosis // Dev. Сотр. Immunol.- 1982.- Vol.6, №3.- P.423-431.

26. Bird S., Wang Т., Zou J., Cunningham C., Secombes C.J. The first cytokine sequence within cartilaginous fish: IL-1 beta in the small spotted catshark (Scyliorhinus canicula) // J. Immunol.- 2002.- Vol.168.- P.3329-3340.

27. Blanber L., Anderson R.S. Modulation of Crassostrea virginica hemocyte reactive oxygen species production by Listonclla anguillarum II Dev.Comp.Immunol.- 1997.- Vol.21.- P.337-348.

28. Boolootain R.A., Guise A.C. Coelomic corpuscles of echinoderms // Biol. Bull.- 1958.-Vol.115, №1.- P.53-63.

29. Boolootain R.A., Guise A.C. Clotting of echinoderm coelomic fluid // J. Exp. Zool.- 1959.- Vol.140, №3.- P.207-229.

30. Borenfreund E., Puerner J.A. Toxicity determined in vitro by morphological alterations and neutral red absorption // Toxicol. Lett.- 1984.— Vol.24.- P. 119-124.

31. Boshra II., Peters R., Li J., Sunyer J.O. Production of recombinant C5a from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss): role in leucocyte chemotaxis and respiratory burst // Fish Shellfish Immunol.- 2004.- Vol.17.- P.293-303.

32. Brillouet C., Leclerc M., Luquet G. Mitogens induced regulation of sea star axial organ cell humoral immune response in vitro // Cell. Biol. Int. Repts.-1986.- Vol.10, №8.- P.667-675.

33. Burke R.D., Watkins R.F. Stimulation of starfish coelomocytes by interleukin-1 // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1991.- Vol.180.- P.579-584.

34. Burton M.P.M. Echinoid coelomic cells // Nature.- 1966.- Vol.211, № 5053.- P.1095-1096.

35. Canicatti C. Binding properties of Paracentrotus Hvidus (Echinoidea) hemolysin // Сотр. Biochem. Physiol. A.- 1991.- Vol.98, №3-4.- P.463-468

36. Canicatti C. Lysosomal ensyme pattern in Holothuria polii coelomocytes//J. Invert. Pathol.- 1990.- Vol.56, №1.- P.70-74.

37. Canicatti C., Ciulla D. Studies on Holothuria polii (Echinodermata) coelomocyte lysate I I Dev. Сотр. Immunol.- 1988.- Vol.12 №.1.- P.55-64.

38. Canicatti C., D'Ancona G. Cellular aspects of Holothuria polii immune response//J. Invert. Pathol.- 1989.- Vol.53,№2.- P.152-158.

39. Canicatti C., D'Ancona G. Biological protective substances in Marthasterias glaciates epidermal secretion // J. Zool.- 1990.- Vol.222, №.3.- P.445-454.

40. Canicatti С., Farina-Lipari E. Dynamics and morphological aspects of coelomocytes clotting in Holothuria polii // J. Invert. Pathol.- 1990.- Vol.56, №1.-P.63-69.

41. Canicatti C., Pagliara P., Stabili L. Sea urchin coelomic fluid agglutinin mediates coelomocyte adhesion // Eur. J. Cell Biol.- 1992.- Vol.58, №2.- P.291-295.

42. J Canicatti C., Quaglia A. Ultrastructure of Holothuria polii encapsulated body//J. Zool.- 1991,- Vol.224, №3. P.419-429.

43. Canicatti C., Roch P., Studies on Holothuria polii (Echinodermata) antibacterial proteins. I. Evidence for and activity of a coelomocyte lysozyme // Experientia.- 1989.- Vol.45.- P .756-759.

44. Canicatti C., Rossigno F. Cellular reactions mimicking encapsulation in Holothuria polii (Echinodermata) // Eur. Arch. Biol.- 1992.- Vol.103, №1.- P.51-55.

45. Carballal M.J., Villalba A., Lopez C. Seasonal variation and eects of age, food availability, size, gonadal development, and parasitism on the hemogram of Mytilus galloprovincialis И J. Invert. Pathol.- 1998.- Vol.72.- P.304-312;

46. Casella G.F., Flanagon M.D., Lin S. Cytochalasin В inhibits actin polymerization and induces depolymerization of actin filaments formed during platelet shape change//Nature.- 1981.- Vol.293, №5830.- P.302-305.

47. Cheng W., Hsiao I-S., Hsu C.-H., Chen J.-C. Change in water temperature on the immune response of Taiwan abalone Haliotis diversicolor supertexta and its susceptibility to Vibrio parahaemolyticus II Fish Shellfish Immunol.- 2004.-Vol. 17.- P.235-243.

48. Chia F.S., Xing J. Echinoderm coelomocytes // Zool. Studies.- 1996.-Vol.35.- P.231-254.

49. Clow L.A., Gross P.S., Shih C.S., Smith L.C. Expression of SpC3, the sea urchin complement component, in response to lipopolysaccharide // Immunogenetics.- 2000.- Vol.51, №12.- P.1021-1033.

50. Coffaro К., Hinegardner R. Immune response in the sea urchin Lytechinuspictus // Science.- 1977.- Vol.197.- P.1389-1390.

51. Coffaro, K.A. Clearance of bacteriophage T4 in the sea urchin Lytechinus pictus //J.Invert.Pathol.- 1978.- V.32.- P:384-387.

52. Conlon P., Jangoux M. Coelomocyte reaction against Lithocystis schneideri (Apicomplexa: Sporozoea), a gregarine parasite of the spatanoid echinoid Echinocardium cordatum II Echinoderm biology. Rosserdam, 1988.- P.769-773.

53. Coteur G., Corriere N., Dubois Ph. Environmental factors influencing the immune responses of the common European starfish {Asterias rubens) II Fish Shellfish Immunology.- 2004.- Vol.16.- P.51-63.

54. Coteur G., Danis В., Fowler S.W., Teyssie J.-L., Dubois Ph., Warnau M. Effects of PCB's on reactive oxygen species (ROS) production by the immune cells of Paracentrotus lividus (Echinodermata) // Mar. Pollut. Bull.- 2001.- Vol.42.-P.667-672.

55. Coteur G., DeBecker G., Warnau M., Jangoux M., Dubois Ph. Differentiation of immune cells challenged by bacteria in the common European starfish, Asterias rubens (Echinodermata) // Europ. J. Cell Biol.- 2002,- Vol.81.-P.413-418.

56. Coteur G., Gillan D., Joly G., Pernet Ph., Dubois Ph. Field contamination of the starfish Asterias rubens by metals. Part 2: effects on cellular immunity // Environmental Toxicology and Chemistry.- 2003.- Vol.22.- P.2145-2151,

57. Coteur G., Warnau M., Jangoux M., Dubois P. Reactive oxygen species (ROS) production by amoebocytes of Asterias rubens (Echinodermata) // Fish and Shellfish Immunology.- 2002b.- Vol.12, №3.- P.l87-200.

58. Cowder R.R. Cytological and histochemical observations on connective tissue cells and wound healing in the sea cucumber Shichopus bolinales II J. Invert. Pathol.- 1968.- Vol. 10, №2.- P. 151 -159.

59. Dales R.P. Phagocyte interactions in echinoid and asteroid echinoderms // J. Marine Biol. Assoc. UK.- 1992.- Vol.72.- P.473-482.

60. Davids B.J., Yoshino T.P. Integrin-like RGD-dependent binding mechanism involved in the spreading response of circulating molluscan phagocytes // Dev. Сотр. Immunol.- 1998.- Vol.22, №1.- P.39-53.

61. Doolittle R.F. Fibrinogen and fibrin // Annu. Rev. Biochem- 1984-Vol.53.- P. 195-229.

62. Drickamer K. Two distinct classes of carbohydrate-recognition domains in animal lectins // J. Biol. Chem.- 1988.- Vol.263.- P.9557-9560.

63. Dybas L., Frankboner P.V. Holothurian survival strategies: mechanisms for the maintenance of bacteriostatic environment in the coelomic cavity of the sea cucumber, Parastichopus California us II Dev. Сотр. Immunol.- 1986.- Vol. 10.-P.311-330.

64. Edds K.T. Cell biology of echinoid coelomocytes. I. Diversity and characterization of cell types // J.Invert.Path 1993 - Vol.61,№2 - P.173-178.

65. Ellis A.E. Innate host defense mechanisms of fish against viruses and bacteria // Dev. Сотр. Immunol.- 2001.- Vol.25, №8-9.- P.827-839.

66. Endean R. The coelomocytes and coelomic fluid // Physiology of Echinodermata. N.Y.: Academic Press, 1966.- P.301-328.

67. Erber A., Riemer D., Hofemeister H., Bovenschulte M., Stick R., Panopoulou G., Lehrach H., Weber K. Characterization of the Hydra lamin and its gene: A molecular phylogeny of metazoan lamins // Mol. Evol.- 1999.- Vol.49, №2.-P.260-271.

68. Faulhaber L.M., Karp R.D. A diphasic immune response against bacteria in the American cockroach // Immunology.- 1992. Vol.75. P.378-381.

69. Flajnik M.F., Du Pasquier L. Evolution of innate and adaptive immunity: can we draw a line?// Trends Immunol.- 2004.- Vol.25, №12.- P.640-644.

70. Fontain A.R., Lambert P. The fine structure of the haemocytes of holothurian, Cucumaria miniata II Canad. J. Zool.- 1973.- Vol.51, №3.- P.323-332.

71. Fontain A.R., Lambert P. The fine structure of the leukocytes of holothurian, Cucumaria miniata II Canad. J. Zool.- 1977.- Vol.55, №9.- P.1530-1544.

72. Fraser I.P., Ezekowitz R.A.B. Receptors for microbial products: carbohydrates // in Inflammation: Basic Principles and Clinical Correlates, 1999/ J.I.Gallin and R.Snyderman eds. Philadelphia/. P.515-523

73. Fuller G.M., Doolittle R.F. Studies of invertebrate fibrinogen. II. Transformation of lobster fibrinogen into fibrin // Biochemistry- 1971- Vol.10-P.l 311—1315.

74. Gerardi G., Lassegues M., Canicatti C. Cellular distribution of sea urchin antibacterial activity//Biol. Cell.- 1990.- Vol.70.- P. 153-157.

75. Ghiradella H.T. The reaction of two starfish, Patiria miniata and Asterias forbesi, to foreign tissue in the coelom // Biol. Bull.- 1965.- Vol.128.- P.77.

76. Giga Y., Ikai A., Takahashi K. The complete amino acid sequence of echinoidin, a lectin from the coelomic fluid of the sea urchin Anthocidaris crassispina II J. Biol. Chem.- 1987.- Vol.262, № 13.- P.6197-6203.

77. Gross P.S., Al-Sharif W.Z., Clow L.A., Smith L.C. Echinoderm immunity and the evolution of the complement system // Dev. Сотр. Immunol-1999.-Vol.23.-P.429-442.

78. Gross P.S., Clow L.A., Smith L.C. SpC3, the complement homologue from the purple sea urchin, Strongylocentrotus purpuratus, is expressed in two subpopulations of the phagocytic coelomocytes // Immunogenetics.- 2000.- Vol.51.-P.l 034-1044.

79. Guo T.J., Aldrich C.E., Mason W.S., Pugh J.C. Characterization of serum amyloid A protein mRNA expression and secondary amyloidosis in the domestic dusk // PNAS.- 1996.- Vol.93, №25.- P.14548-14553.

80. Hahn U.K., Bender R.C., Bayne C.J. Production of reactive oxygen species by hemocytes of Biomphalaria glabrata: carbohydrate-specific stimulation I I Dev. Сотр. Immunol.- 2000,- Vol.24.- P.531-541.

81. Hatakeyama Т., Nagotomo II., Yamasaki N. Interaction of the hemolitic lectin CEL-III from the marine invertebrate Cucumaria echinata with the erythrocyte membrane // J. Biol. Chem.- 1995.- Vol.270, № 8,- P.3560-3564.

82. Hauton C., Smith V.J. In vitro cytotoxicity of crustacean immunostimulants for lobster (Homarus gamntarus) granulocytes demonstrated using the neutral red uptake assay // Fish Shellfish Immunol.- 2004 Vol.17.— P.65-73.

83. Hetzel H.R. Studies on holothurian coelomocytes. 1. A survey of eoelomoeyte types//Biol. Bull.- 1963.- Vol.125, №2.- P.283-301.

84. Hetzel H.R. Studies on holothurian coelomocytes. 2. The origin of coelomocytes and the formation of brown bodies // Biol. Bull.- 1965.- Vol.128, № 1.-P.102-111.

85. Hillier B.J., Vacquier V.D. Amassin, an olfactomedin protein, mediates the massive intercellular adhesion of sea urchin coelomocytes // J. Cell Biol.- 2003.-Vol.160, №4.- P.597-604.

86. Hinman V.F., Nguyen A.T., Cameron R.A., Davidson E.H. Developmental gene regulatory network architecture across 500 million years of echinoderm evolution// PNAS.-2003.- Vol.100, №23.- P. 13356-13361.

87. Hobaus E. Coelomocytes in normal and pathological altered body wall of sea urchin // Echinoderms: present and past. Rotterdam, 1980.- P.247-249.

88. Holland L.Z., Giese A.C., Phillips J.H. Studies on the perivisceral coelomic fluid protein concentration during seasonal and nutritional changes in the purple sea urchin // Сотр. Biochem. Physiol.- 1967.- Vol.21.- P.361-371.

89. Holmblad Т., Soderhall K. Cell adhesion molecules and antioxidative enzymes in a crustacean, possible role in immunity // Aquaculture.- 1999.- Vol.172, №1.- P.l 11-123.

90. Huising M.O., Stet R.J.M., Kruiswijk C.P., Savelkoul II.F.J., van Kemenade B.M.L. Response to Shields: Molecular evolution of CXC chemokines and receptors // Trends in Immunology.- 2003.- Vol.24.- P.356-357.

91. Iorizzi M,, DeMarino S., Zollo F. Steroidal oligoglycosides from the asteroidea // Curr.Org.Chem 2001.- Vol.5.- P.951-973.

92. Ito Т., Matsutani Т., Mori K., Nomura T. Phagocytosis and hydrogen peroxide production by phagocytes of the sea urchin Strongylocentrotus nudus //. Dev. Сотр. Immunol.- 1992.- Vol.16.- P.287-294.

93. Janeway C.A., Travers P., Walport M., Capra J.D. Immunobiology: the immune system in health and disease. 4th ed. Curr. Biol. Ltd., 1999. 740 p.

94. Jangoux, M., Vanden Bossche, J.-P. Morphology and dynamics of the coelomocytes of Asterias rubens L. (Echinodermata, Asteroidea) // Forma Functio.- 1975.-Vol.8.- 191-208.

95. Johansson M.W. Cell adhesion molecules in invertebrate immunity // Dev. Сотр. Immunol.- 1999.- Vol.23, №4-5.- P.303-315.

96. Johnson P.T. The coelomic elements of the sea urchins {Strongylocentrotus). I. The normal coelomocytes, their morphology and dynamics in hanging drops // J. Invert. Pathol.- 1969a.- Vol. 13, № 1. P.25-41.

97. Johnson P.T. The coelomic elements of the sea urchins {Strongylocentrotus). III. In vitro reaction to bacteria // J. Invert. Pathol.- 1969b.-Vol.13, №1.- P.42-62.

98. Johnson P.T., Chapman F.A. Infection with diatoms and other microorganisms in sea urchin spines {Strongylocentrotus franciscanus) II J. Invert. Pathol.- 1970.- Vol.16, №2.- P.268-276.

99. Jones G.E., Partridge T. Limpet haemocytes. Effect of cytochalasin В and colchicine on cell spreading and aggregation // J. Cell. Sci.- 1974.- Vol.16, №2.-P.385-400.

100. Kanost M.R. Serine proteinase inhibitors in arthropod immunity // Dev. Сотр. Immunol.- 1999.- Vol.23.- P.291-301.

101. Kanungo K. In vitro studies on the effect of cell-free coelomic fluid, calcium and/or magnesium on clumping of coelomocytes of the sea star Asterias forbesi// Biol. Bull.- 1982.- Vol.163, №3.- P.438-452.

102. Kard R.D., Hildemann W.H. Specific allograft reactivity in the sea star Desmasterias imbricata II Transplantation.- 1976.- Vol.22.- P.434-445.

103. Karp R.D., Rheins L.A. Induction of specific humoral immunity to soluble proteins in the American cockroach (Periplaneta americana). 2. Nature of the secondary response // Dev. Сотр. Immunol.- 1980.- Vol.4.- P.629-639.

104. Kokos A.M., Fulsford A.L. Natural killer cells in sea urchin blood // J. Mar. Biol. Assoc. U.K.- 1991.- Vol.71, №4.- P.934-935.

105. Koros A.M., Goodwin D.G., Siderits R.H., Malavasi F. "Natural killer" (NK) cell antigens and others are expressed on breast and lung tumor cells as well as sea urchin coelomocytes // J.Biol.Regul.Homeost. Agents 2002 - Vol.16.- P. 173175.

106. Kurtz J. Memory in the innate and adaptive immune systems // Microbes and Infection. 2004. Vol.6. P. 1410-1417.

107. Kurtz J., Franz K. Evidence for memory in invertebrate immunity // Nature. 2003. Vol. 425. P.37-38.

108. Leclerc M. Human kappa-like expression in the axial organ of the sea star Asterias rubens (Echinoderma) // Eur. J. Morphol.- 2000.- Vol.38, №3.- P.206-207.

109. Leclerc M., Arneodo V.J., Legas E., Bajelan M., Vaygier G.L. Identification of T-like and B-like lymphocyte subsets in sea star Asterias rubens by monoclonal antibodies to human leukocytes // Thymus.- 1993a.- Vol.21, №3.- P. 133139.

110. Leclerc M., Bajelan M. Homologous antigen for T cell receptor in axial organ cells from the asterid Asterias rubens //Cell. Biol. Int. Rep.- 1992.- Vol.16, №5.- P.487-490.

111. Leclerc ML, Bajelan M., Barot M., Tlaskalova-Hogenova II. Effect of silica on the spontaneous cytotoxicity of axial organ cells from Asterias rubens II Cell Biol. Int.- 1993b.- Vol.17, №5.- P.787-789.

112. Leclerc M., Luquet G., Brillouet C. In vitro effect of rabbit anti sea star lymphocyte serum on axial organ cells // Cell. Biol. Int. Rep.- 1987.- Vol.11, №11.-P.819-823.

113. Legas E., Vaugier G.L., Bousquet F., Bajelan M., Leclerc M. Primitive cytokines and cytokine receptors in invertebrates: the sea star Asterias rubens as a model of study 11 Scand. J. Immunol.- 1996.- Vol.44, №4.- P.375-380.

114. Lemaitre В., Reichhart J.-M., Hoffmann J.A. Drosophila host defense: differential induction of antimicrobial peptide genes after infection by various classes of microorganisms // PNAS.- 1997. Vol.94. P.l 4614-14619.

115. Leonard L.A., Standberg J.D., Winkelstein J.A. Complement-like activity in the sea star, Asterias forbesill Dev.Comp.Immunol.- 1990.- Vol.14, №1.- P. 19-30.

116. Lin W., Zhang H., Beck G. Phylogeny of natural cytotoxicity: cytotoxic activity of coelomocytes of the purple sea urchin, Arbacia punctulata II J. Exp. Zool.-2001.-Vol.290.- P.741-750.

117. Little T.J., Kraaijeveld A.R. Ecological and evolutionary implications of immunological priming in invertebrates // Trends Ecol. Evol.- 2004.- Vol.19.- P.58-60.

118. Little Т.J., O'Connor В., Colegrave N., Watt K., Read A.F. Maternal transfer of strain-specific immunity in an invertebrate // Curr. Biol. 2003. Vol.13. P.489-492.

119. Loker E.S., Adema C.M., Zhang S.-M., Kepler T.B. Invertebrate immune systems not homogeneous, not simple, not well understood // Immunol. Rev.-2004.- Vol.198.- P. 10-24.

120. Magnadottir В., Jonsdottir H., Helgason S., Bjornsson В., Solem S.T., Pilstrom L. Immune parameters of immunised cod (Gadus morhua L.) 11 Fish Shellfish Immunol.- 2001.- Vol.11.- P.75-89.

121. Matranga V., Toia G., Bonaventura R., Muller W.E.G. Cellular and biochemical responses to environmental and experimentally induced stress in sea urchin coelomocytes // Cell Stress Chaperones.- 2000.- Vol.5.- P.l 13-120.

122. Medzhitov R., Janeway C.A. An ancient system of host defense // Curr. Opinion in Immunol.- 1998.- Vol.10.- P.12-15.

123. Meek R.L., Eriksen N., Benditt E.P., Murine serum amyloid A3 is a high density apolipoprotein and is secreted by macrophages // PNAS.- 1992.- Vol.89, №17.- P.7049-7952.

124. Meyerowitz E.M. Plants compared to animals: the broadest comparative study of development// Science.- 2002.- Vol.295.- P. 1482-1485.

125. Miyazawa S., Azumi K., Nonaka M. Cloning and characterization of integrin a-subunits from the solitary ascidian, Halocynthia roretzi U J. Immunol.-2001.- Vol.166, №4,- P.l710—1715.

126. Moret Y., Siva-Jothy M.T. Adaptive innate immunity? Responsive-mode prophylaxis in the mealworm beetle Tenebrio molitor II Proc. R. Soc. Lond. Ser. В

127. Biol. Sci.- 2003.- Vol.270.- P.2475-2480.

128. Multerer K.A., Smith L.C. Two cDNAs from the purple sea urchin, Strongylocentrotus purpuratus, encoding mosaic proteins with domains found in factor H, factor I, and complement components C6 and C7 // Immunogenetics-2004.- Vol.56.- P.89-106.

129. Nappi A.J., Vass E., Frey F., Carton Y. Nitric oxide involvement in Drosophila immunity // NITRIC OXIDE: Biology and Chemistry.- 2000.- Vol.4, №4.- P.423-430.

130. Nonaka M., Kimura A. Genomic view of the evolution of the complement system//Immunogenetics.- 2006.- Vol.58.- P.701-713.

131. Ottaviani E., Franchini A., Cassanelli S., Genedani S. Cytokines and invertebrate immune responses // Biol. Cell.- 1995.- Vol.85.- P.87-91.

132. Pagliara P., Canicatti C. Isolation of cutolitic granules from sea urchin amoebocytes // Eur. J. Cell. Biol.- 1993.- Vol.60, №1,- P. 179-184.

133. Pancer Z. Dynamic expression of multiple scavenger receptor cysteine-rich genes in coelomocytes of the purple sea urchin // PNAS.- 2000.- Vol.97.- P. 13156-13161.

134. Pancer Z., Amemiya Ch.T., Ehrhardt G.R.A., Ceitlin J., Gartland G.L., Cooper M.D. Somatic diversification of variable lymphocyte receptors in the agnathan sea lamprey // Nature.- 2004.- Vol.430.- 174-180.

135. Pancer Z., Cooper M.D. The evolution of adaptive immunity // Annu. Rev. Immunol.- 2006.- Vol.24.- P.497-518.

136. Pancer Z., Rast J.P., Davidson E.H. Origins of immunity: transcription factors and homologues of effector genes of the vertebrate immune system expressed in sea urchin coelomocytes // Immunogenetics.- 1999.- Vol.49.- P.773-786.

137. Ponce M.R., Micol J.L., Peterson K.J., Davidson E.H. Molecular characterization and phylogenetic analysis of SpBMP5-7, a new member of the TGFb superfamily expressed in sea urchin embryos // Mol. Biol. Evol- 1999.- Vol. 16-P.634-645.

138. Quesenberry M.S., Ahmed H., Elola M.T., O'Leary N., Vasta G.R. Diverse lectin repertoires in tunicates mediate broad recognition and effector innate immune responses//Integr. Сотр. Biol.-2003.- Vol.43.- P.323-330.

139. Raftos D., Cooper E., Habicht G., Beck G. Invertebrate cytokines: tunicate cell proliferation stimulated by an IL-l-like molecule // PNAS.- 1991.-Vol.88.- P.9518-9522.

140. Raftos D.A., Robbins J., Newton R.A., Nair S.V. A complement component СЗа-like peptide stimulates chemotaxis by hemocytes from an invertebrate chordate—the tunicate, Pyura stolonifera II Comp.Biochem.Physiol. Part A.- 2003.- Vol.134.- P.377-386.

141. Raftos D.A., Raison R.L. The echinoid immune system revisited // Immunol. Today.- 1993.- Vol.14, №2.- P.92-93.

142. Raftos D.A,. Stillman D.L., Cooper E.L. Interleukin-2 and phytohaemagglutinin stimulate the proliferation of tunicate cells // Immunol. Cell Biol.- 1991.- Vol.69, Pt.4.- P.225-234.

143. Reinisch C., Bang F.B. Cell recognition of sea star {Asterias vulgaris) to the injection of amoebocytes of the sea urchin (Arbacia. punctulata) // Cell Immunol.- 1971.- Vol.2.- P.496-503.

144. Reinisch C.L. Phylogenetic origin of xenogeneic recognition // Nature.-1974.- Vol.250, №5464.- P.349-350.

145. Santiago-Cardona P.G., Berrios C.A., Ramirez F., Garcia-Arraras J.E. Lipopolysaccharides induce intestinal serum amyloid A expression in the seacucumber Holothuria glaberrima II Dev. Сотр. Immunol.- 2003.- Vol.27, №2.-P. 105—110.

146. Service M., Wardlaw A.C. Bacteridical activity of coelomic fluid of the sea urchin, Echinus esculentus, on different marine bacteria // J. Mar. Biol. Ass. UK.- 1985.- Vol.65.- P. 133-139.

147. Shah M., Brown K.M., Smith L.C. The gene encoding the sea urchin complement protein, SpC3, is expressed in embryos and can be upregulated by bactcria // Dev.Comp.Immunol.- 2003.- Vol.27.- P.529-538.

148. Shimizu V., Kohno S., Kagawa II., Ischise N. Lytic activity and biochemical properties of lysozyme in the coelomic fluid of the sea urchin Strongylocentrotus intermedins II J. Invert. Pathol.- 1999.- Vol.73, №2.- P.214-222.

149. Silva J.R.M.C., Ilernandez-Blazquez F.J., Porto-Neto L.R., Borges J.C.S. Comparative study of in vivo and in vitro phagocytosis including germicidal capacity in Odontaster validus (Koehler, 1906) at 0°C // J. Invert. Pathol 2001.- Vol.77.-P. 180-185.

150. Smith L.C. Thioester function is conserved in SpC3, the sea urchin homologue of the complement component C3 // Dev. Сотр. Immunol.- 2002.-Vol.26, №7.- P.603-614.

151. Smith L.C., Britten R.J., Davidson E.H. SpCoell, a sea urchin profilin gene expressed specifically in coelomocytes in response to injury// Mol. Bio. Cell.-1992.- Vol.3.-P.403^14.

152. Smith L.C., Britten R.J., Davidson E.H. Lipopolysaccharide activates the sea urchin immune system // Dev. Сотр. Immunol.- 1995.- Vol.19, №3.- P.217-224.

153. Smith L.C., Clow L.A., Terwilliger D.P. The ancestral complement system in sea urchins // Immunological Reviews.- 2001.- Vol.180, №12.- P. 16-34.

154. Smith L.C., Shin C.S., Dachenhausen S.G. Coelomocytes express SpBf, a homologue of factor B, the second component in the sea urchin complement system // J. Immunol.- 1998.- Vol.161, №12.- P.6784-6793.

155. Stabili L., Pagliara P. Antibacterial protection in Marthasterias glacialis eggs—characterization of lysozyme-like activity // Comp.Biochem.Physiol. B — 1994.- Vol. 109.- P.709-713.

156. Stafford J.L., Galvez F., Goss G.G., Belosevic M. Induction of nitric oxide and respiratory burst response in activated goldfish macrophages requires potassium channel activity // Dev. Сотр. Immunol.- 2002.- Vol.26, №5.- P.445-459.

157. Suzuki M.M., Sato M., Nonaka M. C6-like and C3-like molecules from the cephalochrodate, Amphioxus, suggest a cytolytic complement system in invertebrates I I J.Mol.Evol.- 2002.- Vol.54.- P.671-679.

158. Tafalla C., Gomez-Leon J., Novoa В., Figueras A. Nitric oxide production by carpet shell clam (Ruditapes decussatus) hemocytcs // Dev. Сотр. Immunol.- 2003.- Vol.27, №3.- P. 197-205.

159. Tai J.Y., Seid R.C., Huhn R.D., Liu T.Y. Studies on Limulus amoebocyte lysate. II. Purification of the coagulogen and the mechanism of clotting // J. Biol. Chem.- 1977.-Vol.252.- P.4773-4776.

160. Uhlar C.M., Whitehead A.S. Serum amyloid A, the major vertebrate acute-phase reactant // Eur. J. Biochem.- 1999.- Vol.265, №2.- P.501-523.

161. Vasta G.R. Invertebrates lectins, C-reactive protein and serum amyloid -structural relationships and evolution // Defence Molecules. New Series. Los Angeles: Alan R. Liss, Inc., 1990.- Vol.121.- P. 183-199.

162. Vethamany V.G., Fung M. The fine structure of the coelomocytes of the sea urchin Strongylocentrotus droebachiensisll Canad. J. Zool.- 1972.- Vol.50, №1-P.77-81.

163. Walport M.J. Complement. First of Two Parts // N. Engl. J. Med.- 2001 .-Vol.344.-P.1058-1066

164. Wardlaw A.C., Unkles S.E. Bactericidal activity of coelomic fluid form the sea urchin Echinus esculentus II J. Invert. Pathol.- 1978,- Vol.32, №1.- P.25-34.

165. Witteveldt J., Cifuentes C.C., Vlak J.M., Van Hulten M.C.W. Protection of Penaeus monodon against white spot syndrome virus by oralvaccination // J. Virol.- 2004.- Vol.78.- P.2057-2061.

166. Wootton E.C., Dyrynda E.A., Ratcliffe N.A. Bivalve immunity: comparisons between the marine mussel (Mytilus edulis), the edible cockle {Cerastoderma edule) and the razor-shell (Ensis siliqua) // Fish Shellfish Immunol.-2003.- Vol.15.- P. 195-210.

167. Yui M.A., Bayne C.J. Echinoderm immunology: bacterial clearance by the sea urchin Strongylocentrotus purpuratus II Biol. Bull.- 1983.- Vol.165, №2.-P.478-486.

168. Zarkadis I.K., Mastellos D., Lambris J.D. Phylogenetic aspects of the complement system// Dev. Сотр. Immunol.- 2001.- Vol.25, №8-9.- P.745-762.

169. Zelck U.E., Janje В., Schneider О. Superoxide dismutase expression and H2O2 production by hemocytes of the trematode intermediate host Lymnaea stagnalis (Gastropoda) // Dev. Сотр. Immunol.- 2004.- Vol.28.- P.l-10.