Структурная и функциональная характеристика маннан-связывающего лектина морского ежа Strongylocentrotus nudus тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат биологических наук Шамшурина, Екатерина Валерьевна

• Шамшурина, Екатерина Валерьевна
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шамшурина, Екатерина Валерьевна

1. ВВЕДЕНИЕ.:.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2. 1. Классификация зоолектинов.

2.2. Функции лектинов.

2.3. Участие лектинов в процессах морфогенеза.

2. 4. Маннан-связывающие лектины.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Материал.

3.2. Приготовление цел омической жидкости.

3. 3. Реакция прямой гемагглютинации (РПГА).

3. 4. Ингибирование РПГА.

3. 5. Определение зависимости активности МСЛ-БМ от температуры.

3. 6. Определение зависимости активности МСЛ-БК от рН.

3. 7. Определение зависимости активности МСЛ-8Ы от концентрации ионов Са2+ вереде.

3. 8. Выделение МСЛ-БИ.

3. 8. 1. Ионообменная хроматография.

3. 8. 2. Аффинная хроматография.

3. 8. 3. Гельфильтрация.

3. 9. Получение антисыворотки и АТ(МСЛ-81чГ).

3. 10. Получение конъюгатов АТ(МСЛ-8М) с Б1ТС.

3. 11. ДСН-ПААГ-электрофорез.

3. 12. Вестерн-блот анализ МСЛ-БЫ.

3.13. Установление первичной структуры МСЛ-8К.

3. 13. 1. Выделение РНК и синтез кДНК.

3. 13.2. Клонирование и секвенирование кДНК.

3. 14. Иммуноцитохимическое выявление МСЛ-БЫ в личинках и тканях 51. пис1ш.

3. 14. 1. Непрямое иммунофлуоресцентное окрашивание срезов тканей

S. nudus.

3. 14. 2. Непрямое иммунофлуоресцентное окрашивание мазков целомоцитов S. nudus.

3. 14. 3. Непрямое иммунофлуоресцентное окрашивание полутонких и ультратонких срезов.

3. 14. 4. Непрямое иммунофлуоресцентное окрашивание гистологических срезов и прижизненное прямое иммунофлуоресцентное окрашивание эмбрионов и личинок S. nudus.

3. 15. Исследование влияния MCJI-SN на фагоцитарную активность целомоцитов S. nudus в условиях in vitro.

3.16. Исследование влияния MCJI-SN на ранний онтогенез морского ежа S. nudus.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ.

4. 1. Выделение MCJI-SN из целомической жидкости S. nudus.

4.2. Определение молекулярной массы и субъединичного состава

MCJI-SN.

4. 3. Углеводная специфичность MCJI-SN.

4. 4. Зависимость активности MCJI-SN от концентрации ионов Са , рН и температуры.

4. 5. Установление первичной структуры MCJI-SN.

4. 6. Локализация МСЛ-SN в тканях S. nudus.

4. 7. Влияние МСЛ-SN на фагоцитарную активность целомоцитов S.nudus in vitro.

4. 8. Электрофоретическое выявление МСЛ-SN в эмбрионах и личинках

5. nudus.

4. 9. Локализация МСЛ-SN в личинках S. nudus.

4. 10. Влияние МСЛ-SN и его лигандов на ранний онтогенез морского ежа

5. nudus.

5. ОБСУЖДЕНИЕ.

5. 1. Физико-химические свойства МСЛ-БЫ.

5. 2. Аминокислотная последовательность и предсказанная пространственная структура молекулы МСЛ-8М.

5.3. Локализация МСЛ-8К в органах и тканях 5. пис1ш.

5. 4. Участие МСЛ-БЫ в защитных реакциях.

5. 5. Участие МСЛ-81ЧГ в раннем онтогенезе & писких.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Структурная и функциональная характеристика маннан-связывающего лектина морского ежа Strongylocentrotus nudus»

Лектины — это обширный класс белков, обладающих общим свойством обратимо и избирательно связывать углеводы и углеводные детерминанты биополимеров без изменения их ковалентной структуры (Королев, 1984). На данный момент лектины обнаружены у организмов, находящихся на разных ступенях эволюции, начиная от наиболее примитивных форм жизни -вирусов и бактерий — до представителей высших позвоночных, что свидетельствует об эволюционной древности и универсальности механизмов, основанных на белок-углеводном распознавании. Известно, что лектины принимают участие во многих биологических процессах, таких как — оплодотворение, развитие, миграция клеток, апоптоз и т.д., а биологическая значимость лектинов определяется значимостью их лигандов - углеводов (N1, Т1гагс1, 1996). Важную роль играют лектины в реакциях конститутивного или врожденного иммунитета. Являясь составной частью иммунитета позвоночных, лектины осуществляют немедленную, в отличие от системы адаптивного иммунитета, реакцию на инфекцию или повреждение. Наиболее изученными лектинами, выполняющими барьерную функцию, являются лектины С-типа, и, в частности, маннан-связывающие лектины (МСЛ), относящиеся к коллектинам. Исследована структура молекулы МСЛ и установлено наличие в ней консервативного участка, ответственного за связывание с углеводами (углевод-распознающего домена) и эффекторного коллагеноподобного домена. Установлено, что МСЛ в комплексе с сериновыми протеазами участвуют в активации системы комплемента по лектиновому пути (ТЬеа1 а1., 1997), активизируют фагоцитоз, выступая в роли опсонинов (КиЫтап е1 а1., 1989).

У представителей беспозвоночных животных структура и функции МСЛ исследованы значительно меньше, чем у позвоночных, несмотря на то, что данные лектины обнаружены как у первичноротых (коралловые полипы, моллюски, ракообразные, насекомые), так и у вторичноротых животных (иглокожие, низшие хордовые - асцидии, ланцетник). Вместе с тем, МСЛ

часть древней системы защиты, составляющей основу неспецифического иммунитета беспозвоночных и послужившей предшественником сложного иммунитета позвоночных животных. Поэтому, исследование системы неспецифического иммунитета беспозвоночных, в частности MCJI, имеет большое значение для понимания процесса формирования и становления функций этого компонента защитной системы в эволюции Metazoa. Для развития эволюционных представлений актуальны исследования, выполненные на иглокожих - примитивных, близких к предковым формам, представителях вторичноротых животных. Иглокожие являются классическим экспериментальным объектом для работ в области биологии развития и сравнительной иммунологии. Ранее у двух представителей голотурий — Cucumaria japónica и Apostichopus japonicus — были обнаружены и охарактеризованы MCJI, гомологичные MCJI позвоночных (Булгаков и др., 2000; Bulgakov et al., 2007). Исследована биологическая активность этих лектинов, их роль в иммунной защите. Кроме того, показано, что MCJI А. japonicus задействованы в процессе регенерации пищеварительного тракта после его эвисцерации, что является доказательством интегративной функции иммунной системы и участия ее компонентов в процессах поддержания структурного гомеостаза организма. В серии предварительных исследований показано наличие лектинной активности целомической жидкости морского ежа Strongylocentrotus nudus по отношению к маннанам -полисахаридам, построенным из остатков маннозы.

Цель и задачи работы. Целью работы явилось исследование структуры, физико-химических свойств, роли в защитных реакциях и эмбриогенезе нового лектина, выделенного из целомической жидкости морского ежа S. nudus (MCJI-SN) — вероятного гомолога маннан-связывающих лектинов позвоночных. В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Изучить основные физико-химические свойства MCJI-SN;

2. Определить аминокислотную последовательность молекулы MCJI-SN;

3. Установить локализацию в организме морского ежа и возможные места биосинтеза MCJI-SN;

4. Исследовать роль MCJI-SN в защитных реакциях и в эмбриогенезе морского ежа S. nudus.

Научная новизна. Из целомической жидкости морского ежа S. nudus выделен и всесторонне охарактеризован новый лектин. Установлена его тонкая углеводная специфичность, определены основные физико-химические свойства и аминокислотная последовательность молекулы. На основании полученных данных лектин был отнесен к маннан-связывающим лектинам С-типа. Установлено наличие в организме морского ежа двух иммунохимически идентичных форм лектина: растворенной в целомической жидкости и связанной, входящей в состав компонентов внеклеточного матрикса. Определены вероятные источники биосинтеза MCJI-SN. Показан широкий спектр биологической активности MCJI-SN: являясь компонентом неспецифического иммунитета и выступая в роли опсонина, лектин задействован в процессе эмбрионального развития, способствуя миграции клеток первичной мезенхимы.

Личный вклад. Материал, положенный в основу диссертационной работы, в основном, получен, обработан и проанализирован автором самостоятельно. Выделение и определение свойств МСЛ-SN было выполнено под руководством ст.н.с., к.х.н. A.A. Булгакова и н.с., к.б.н. И.Ю. Петровой. Установление аминокислотной последовательности лектина было проведено совместно с н.с., к.б.н. С.Н. Ковальчук. Основная часть работ по проведению иммуноцитохимических и электронно-микроскопических исследований, а также по установлению функций МСЛ-SN в организме морского ежа выполнена при непосредственном участии автора.

Теоретическое и практическое значение работы. У представителя иглокожих обнаружен МСЛ-SN, выполняющий защитную функцию и гомологичный МСЛ позвоночных животных, что доказывает эволюционную преемственность этого компонента неспецифического иммунитета в ряду вторичноротых. Полученные данные вносят существенный вклад в теорию происхождения системы комплемента - одного из основных механизмов защиты позвоночных. Установлено участие МСЛ иглокожих в процессах эмбриогенеза и показана интегративная роль этого компонента врожденного иммунитета. Практическое значение результатов работы связано с возможностью применения нового лектина, функционально и структурно охарактеризованного, обладающего уникальной углеводной специфичностью, в биомедицинских исследованиях.

Апробация работы. Основные материалы диссертации были представлены на симпозиуме с международном участием «Клеточные, молекулярные и эволюционные аспекты морфогенеза» (Россия, Москва, 2007), на XI Международной молодежной конференция по актуальным проблемам химии и биологии (ТИБОХ ДВО РАН, МЭС, 2007), на XII Всероссийской школе конференции по актуальным проблемам химии и биологии (ТИБОХ ДВО РАН, МЭС, 2009) и на годичных конференциях ИБМ ДВО РАН (2008-2010)

Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ, в том числе 2 статьи в журналах из списка, рекомендованного ВАК.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из 5 глав, выводов и списка литературы (167 источников, из которых 157 на английском языке). Работа изложена на 103 страницах, из них 61 машинописного текста, 24 илюстрации (2 таблицы, 14 микрофотографий, 1 электроннограмма, 7 графиков).

Финансовая поддержка. Работа проведена при финансовой поддержке ДВО РАН (проекты № 09-Ш-А-06-198 и Ю-П-В-06-088) и РФФИ (проекты № 07-04-01247-а и 09-04-98535-рвостока).

Заключение диссертации по теме «Клеточная биология, цитология, гистология», Шамшурина, Екатерина Валерьевна

ВЫВОДЫ

1. Из целомической жидкости морского ежа Б1гоп^1осеМгоШ8 пийиз выделен новый белок, обладающий лектинной активностью. На основании установленных физико-химических свойств (способность образовывать гомодимеры, Са2+- зависимость, углеводная специфичность к разветвленным а-О-маннанам) лектин отнесен к группе маннан-связывающих лектинов С-типа.

2. Определена аминокислотная последовательность маннан-связывающего лектина пискиз и установлено, что молекула лектина состоит только из углевод- распознающего домена, включающего 2 а-спиральных участка и 8 (3-тяжей. Лектин представлен в организме пис1т как минимум тремя высокогомологичными изоформами, различающимися единичными аминокислотными заменами. Степень гомологии маннан-связывающего лектина т^из и МСЛ других групп животных высока в участке, отвечающем за связывание с лигандом и ионами Са ("ЕРЫ" и "ЖЫО" мотивы), консервативным является и положение остатков цистеина.

3. Маннан-связывающий лектин присутствует в организме 5". писЬлБ в двух формах: растворенной в целомической жидкости и в связанной, ассоциированной со структурами соединительнотканного внеклеточного матрикса. Биосинтез лектина осуществляют клетки целомической жидкости - морулоподобные целомоциты 2 типа.

4. Маннан-связывающий лектин & пийт задействован в осуществлении защитных реакций. Он способствует агглютинации и опсонизации чужеродных частиц, активизируя процессы их фагоцитоза клетками целомической жидкости.

5. Маннан-связывающий лектин обнаружен в цитоплазме яйцеклеток, в эмбрионах (зигота, два бластомера) и личинках на стадиях плавающей бластулы, поздней гаструлы и плутеуса морского ежа 51. пийт. Показано, что лектин не влияет на процессы оплодотворения, а механизм его участия в эмбриогенезе связан с осуществлением миграции клеток в ходе гаструляции: являясь компонентом внеклеточного матрикса, заполняющего бластоцель, лектин взаимодействует с лигандами - углеводными составляющими поверхностных рецепторов эмбриональных клеток, обеспечивая их направленную миграцию.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шамшурина, Екатерина Валерьевна, 2010 год

1. Булгаков A.A., Назаренко E.JI., Петрова И.Ю., Елисейкина М.Г., Вахрушева Н.М., Зубков В.А. Выделение и свойства маннан-связывающего лектина из целомической жидкости голотурии Cucumaria japónica // Биохимия. 2000. Т. 65, № 8. С. 1099-1106.

2. Елисейкина М. Г., Магарламов Т. Ю. Морфология целомоцитов голотурий Apostichopus japonicus (Aspidochirota: Stichopodidae) и Cucumaria japónica (Dendrochirota: Cucumariidae) // Биол. моря 2002. Т. 28. № 3. С. 214-219.

3. Королев В.П. Функции лектинов в клетке // Итоги науки и техники. Общие проблемы физико-химической биологии, 1984. Т. 1. С. 53-65.

4. Левин В. С. Дальневосточный трепанг. Владивосток: Дальневост. кн. изд-во, 1982. 191 с.

5. Магарламов Т. Ю., Целомоциты иглокожих и их роль в защитных реакциях: Дис. канд. биол. наук. Владивосток: ДВО РАН, ИБМ. 2004. 133 с.

6. Миронов A.A., Комиссарчик Я. Ю., Миронов В. А. Методы электронной микроскопии в биологии и медицине. — Санкт-Петербург: Наука, 1994. с.

7. Объекты биологии развития // Под ред. Астауров Б. Л. М.: Наука. 1975. 580 с

8. Петрова И. Ю., Маннан-связывающие лектины дальневосточных голотурий Apostichopus japonicus (Aspidochiroia) и Cucumaria jponica (Dendrochirota) и их роль в защитных реакциях и морфогенезах: Дис. канд. биол. наук. Владивосток: ДВО РАН, ИБМ. 2002. 168 с.

9. Петрова И.Ю., Булгаков A.A., Назаренко Е.Л., Шамшурина Е.В., Кобелев С.С., Елисейкина М.Г. Маннан-связывающие лектины в целомической жидкости у представителей разных видов дальневосточных иглокожих // Биол. моря. 2009. Т. 35. № 2. С. 147-152.

10. Шамшурина Е.В., Елисейкина М.Г., Петрова И.Ю., Булгаков A.A. Обнарущение двух иммунохимически идентичных форм маннан-связывающих лектинов морского ежа Strongylocentrotus nudus // Биолю моря. 2010. Т. 36. № 4. С. 293-299.

11. Ahuja K.K. Carbohydrate determinants involved in mammalian fertilisation // Amer. J. Anat, 1985. V. 174. № 3. P. 207-223.

12. Alliegro M.C., Alliegro M.A. Echinonectin is a Del-1-like molecule with regulated expression in sea urchin embryos // Gene Expr. Patterns. 2007 V. 7(6) P. 651-656.

13. Appenzeller-Herzog C., Hauri H.P. The ER—Golgi intermediate compartment (ERGIC): in search of its identity and function // J. Cell Sci., 2006. V. 119. № 11. P. 2173-2183

14. Arason G.J. Lectins as defence molecules in vertebrates and invertebrates // Fish and Shellfish Immunol., 1996. V. 6. № 4 P. 277-289.

15. Ashwell G., Harford J. Carbohydrate-specific receptors of liver // Annu. Rev. Biochem. 1982. V. 51. P. 531-554.

16. Avezov E., Frenkel Z., Ehrlich M., Herscovics A., Lederkremer G.Z. ER Mannosidase I Is compartmentalized and required for N-glycan trimming to Man5 6GlcNAc2 in glycoprotein ER-associated degradation // Mol. Biol. Cell, 2008. V. 19. № 1. P.216-225

17. Axels en N.M., Kroll J., Weeke B. A manual of quantitative immunoelectrophoresis //Mir, Moskow. 1977. 198 p.

18. Baksh S., Michalak, M. Expression of calreticulin in Escherichia coli and identification of its Ca2+ binding domains // J. Biol. Chem. 1991. V. 266, P. 21458-21465.

19. Baksh S., Spamer C., Heilmann C., Michalak M. Identification of the Zn2+ binding region in calreticulin I IFEBS Lett. 1995. V. 376. №. 1-2. P. 53-57.

20. Ballou C. Advances in microbial physiology // Adv. Microb. Physiol., 1976. V. 14. № 11. P. 93-158.

21. Barondes S.H., Castronovo V., Cooper D.N., Cummings R.D., Drickamer K., Feizi T., Gitt M.A., Hirabayashi J., Hughes C., Kasai K. Galectins: a family of animal beta-galactoside-binding lectins // Cell. 1994. V. 76. P. 597-598.

22. Bisgrove B.W., Raff R.A. The SpEGF III gene encodes a member of the fibropellins: EGF repeat-containing proteins that form the apical lamina of the sea urchin embryo // Dev. Biol. 1993. V.157 № 2. P. 526-38.

23. Borowsky M.L., Hynes R. O. Layilin, a novel talin-binding transmembrane protein homologous with C-type lectins, is localized in membrane ruffles // J. Cell Biol. 1998. V. 143(2) P. 429^142.

24. Butcher S., Arney K. L., Cook G. P. MAFA-L, an ITIM-containing receptor encoded by the human NK cell gene complex and expressed by basophils and NK cells // Eur. J. Immunol. 1998. V. 28. P. 3755-3762.

25. Bycroft M, Bateman A., Clarke J., Hamill S.J., Sandford R., Thomas R.L., Chothia C. The structure of a PKD domain from polycystin-1: implications for polycystic kidney disease IIEMBO J. 1999. V. 18(2). P. 297-305.

26. Byrne M. The ultrastructure of the morula cells of Eupentacta quenquesemita (Echinodermata: Holothuroidea) and their role in the maintenance of the extracellular matrix//J. ofMorphol. 1986. V. 188. №. 2. P. 179-189.

27. Carred P., Harboe M, Oettinger T., Koch C., Svejgaard A. Dual role mannan-binding protein in infection another case of heterosis // Europ. J. of Immunogenetics. 1994. V. 21. № 2. P. 125-131.

28. Chamow S.M., Hedrick J.L. Subunit structure of a cortical granule lectin involved in the block in polyspermy in Xenopus laevis eggs // FEBS Lett. 1986. V. 206. № 2. P. 353-357.

29. Chia F., Xing J. Echinoderm coelomocytes // Zool. Stud. 1996. V. 35. P. 231-254.

30. Chomczynski P., Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chlorophorm extraction // Anal. Biochem. 1987. V. 162. P. 156-159.

31. Colley K.J., Beranek M.C., Baenziger J.U. Purification and characterization of the core-specific lectin from human serum and liver // Biochem. J. 1988. V. 256. № l.P. 61-68.

32. Colonna M., Samaridis J., Angman L. Molecular characterization of two novel C-type lectin-like receptors, one of which is selectively expressed in human dendritic cells // Eur. J. Immunol. 2000. V. 30 P.697-704.

33. Crocker P. R., Gordon, S. Properties and distribution of a lectin-like hemagglutinin differentially expressed by murine stromal tissue macrophages // J. Exp. Med. 1986. V. 164. P. 1862-1875.

34. Crocker P.R, Feizi T. Carbohydrate recognition systems: functional triads in cell-cell interactions // Curr. Opin. Struct. Biol. 1996. V. 6. № 5. P. 679-691.

35. Crocker P. R, Varki A. Siglecs, sialic acids and innate immunity // Trends Immunol. 2001. V. 22. P. 337-342.

36. Crocker P. R, Varki, A. Siglecs in the immune system // Immunology. 2001. V. 103. P. 137-145.

37. Res. Mol. Biol. 1993. V. 45. P. 207-232. Drickamer K., Fadden A.J. Genomic analysis of C-type lectins // Biochem. Soc.

38. Geider S., Baronnet A., Cerini C., Nitsche S., Astier J.P., Michel R., Boistelle R., Berland Y, Dagorn J.C., Verdier J.M. Pancreatic lithostathine as a calcite habit modifier // J, Biol, Chem. 1996, V. 271. № 42. P. 26302-26306.

39. Geijtenbeek T. B., van Vliet S. J., Engering A., Hart B. A., van Kooyk Y. Self- and nonself-recognition by C-type lectins on dendritic cells // Annu. Rev. Immunol. 2004. V. 22. P. 33-54.

40. Glabe C.G., Grabel L.B., Vacquier V.D., Rosen C.D. Carbohydrate specify of sea urchin sperm binding: a cell surface lectin mediating sperm-egg adhesion // J. Cell Biol., 1982. V. 94. № 1. P. 123-128.

41. Gourdine J.P., Smith-Ravin E.J. Analysis of a cDNA-derived sequence of a novel mannose-binding lectin, codakine, from the tropical clam Codakia orbicularis II Fish Shellfish Immunol. 2007. V. 22. № 5. P. 498-509.

42. Guay C. K., ZalikS. E. Expression of the 14 kDa and 16 kDa galactoside-binding lectins during differentiation of the chick yolk sac // Dev. genes and evol. V. 204. P. 126-140.

43. Hakomori S. Immunochemical and molecular genetics of the histo-blood group ABO (H) and related antigen system // Baillieres Chemical Haematology, 1991. V. 4. №4. P. 957-974.

44. Hartnell A., Steel J., Turley H., Jones M., Jackson D.G., Crocker P.R. Characterization of human sialoadhesin, a sialic acid binding receptor expressed by resident and infl ammatory macrophage populations // Blood. 2001. V. 97. № 1. P. 288-296.

45. Hatakeyama T., Ohuchi K., Kuroki M., Yamasaki N. Amino acid sequence of a C-type lectin CEL-IV from the marine invertebrate Cucumaria echinata II Biosci. Biotechnol. Biochem. 1995. V. 59. № 7. P. 1314-1317.

46. Hauri H.P., Kappeler F., Andersson H., Appenzeller C. ERGIC-53 and traffic in the secretory pathway // J. Cell Sci. 2000. V. 113. P. 587-596.

47. Helenius A., Aebi M. Roles of N-linked glycans in the endoplasmic reticulum // Annu. Rev. Biochem. 2004. V.73. P. 1019-1049.

48. Hibino Т., Loza-Coll M, Messier С., et al. The immune gene repertoire encoded in the purple sea urchin genome // Dev. Biol. 2006. V. 300. P. 349-365.

49. Hirabayashi J., Kasai K. The family of metazoan metal-independent b-galactoside-binding lectins: structure, function and molecular evolution // Glycobiology 1993.V. 3.P. 297-304.

50. Hirohashi N., Lennarz W.J. Role of a vitelline layer-associated 350 kDa glycoprotein in controlling species-specific gamete interaction in the sea urchin // Dev. Growth. Differ. 2001. V. 43. № 3. P. 247-255.

51. Holmskov U., Maholtra R., Sim R.B. et al. Collectins: collagenous C-type lectins of innate immune defence system. // Immunol. Today. 1994. V.15. P. 67-74.

52. Hosokawa N., Wada I., Hasegawa K., Yorihuzi Т., Tremblay L.O., Herscovics A., Nagata K. A novel ER alpha-mannosidase-like protein accelerates ER-associated degradation // EMBO Rep. 2001. V. 2. P. 415-422.

53. Huang H.C., Shi G.Y., Jiang S.J., Shi C.S., Wu C.M., Yang H.Y., Wu H.L. Thrombomodulin-mediated cell adhesion: involvement of its lectin-like domain // J. Biol. Chem. 2003. V. 278. № 47. P. 46750-46759.

54. Johnson L.V., Calarco P.G. Mammalian preimplantation development: the cell surface // Anat. Rec. 1980. V.196. № 2. P. 201-219.

55. Kamiya Y., Yamaguchi Y., Takahashi N., Arata Y., Kasai K., Ihara Y., Matsuo I., Ito Y., Yamamoto K., Kato K. Sugar-binding properties of VIP36, an intracellular animal lectin operating as a cargo receptor // J. Biol. Chem. 2005. V. 280. P.37178-37182.

56. Katow H. Pamlin, a primary mesenchyme cell adhesion protein, in the basal lamina of the sea urchin embryo II Exp. Cell Res. 1995. V. 218. № 2. P. 469^178.

57. Katow H., Washio M. Pamlin-induced tyrosine phosphorylation of SUp62 protein in primary mesenchyme cells during early embryogenesis in the sea urchin, Hemicentrotus pulcherrimus // Dev. Growth Differ. 2000. V. 42. № 5. P. 519-529.

58. Katow H., Sofuku S. An RGDS peptide-binding receptor, FR-1R, localizes to the basal side of the ectoderm and to primary mesenchyme cells in sand dollar embryos //Dev. Growth Differ. 2001. V. 43. № 5. P. 601-610.

59. Kawamura K., Fujiwara S., Sugino Y.M. Budding-specific lectin-induced in epithelial cell is an extracellular matrix component for stem cell aggregation in extracellular matrix // Development. 1991. V. 133. № 3. P. 995-1005.

60. Kawasaki N., Kawasaki T., Yamashina I. Isolation and characterization of a mannan-binding protein from human serum I I J. Biochem. 1983. V. 94. P. 937-947.

61. Kawasaki T. Structure and biology of mannose-binding protein, MBP, an important component of innate immunity // Biochim. and Biophys. Acta. 1999. V. 1473. P. 186-195.

62. Khramkova N. L, Abelev G. I. Limits of sensitivity of the agar precipitation method // Biull. Eksp. Biol. Med. 1961. V. 52. P. 107-111.

63. Khurrum M., Hernandez A., Eskalaei M., Badali O. Coyle-Thompson C, Oppenheimer SB. Carbohydrate involvement in cellular interactions in sea urchin gastrulation // Acta Histochem. 2004. V. 106. № 2. P. 97-106.

64. Kornfeld R., Kornfeld S. Assembly of asparagine-linked oligosaccharides // Ann. Rev. Biochem. 1985. V. 54. № 3. P. 631-664.

65. Kubo T., Kawasaki K, Nonomura Y., Natori S. Localization of regenectin in regenerates of American cockroach {Periplaneta americana) legs // Int. J. Dev. Biol. 1991. V. 35. № 2. P. 83-90.

66. Kuhlman M., Joiner K., Ezekowitz R.A. The human mannose-binding protein functions as an opsonin // J. Exp. Med. 1989. V. 169. № 5. P. 1733-1745.

67. Kurata H., Sannoh T., Kozutsumi Y., Yokota Y., Kawasaki T. Structure and functions of mannan binding proteins isolated from human liver and serum // J. Biochem. 1994. V.115. №. 6. P. 1148-1154.

68. Mâàttànen P., Gehring K, Bergeron J. J.M., Thomas D. Y. Protein quality control in the ER: The recognition of misfolded proteins // Seminars in Cell & Developmental Biology 2010. V. 21. № 5. P. 500-511.

69. McCarthy R.A., BeckK, Burger M.M. Laminin is structurally conserved in the sea urchin basal lamina //EMBO J. 1987. V. 6. № 6. P. 1587-1593.

70. McEver R. P. Selectins: lectins that initiate cell adhesion under flow // Curr. Opin. Cell Biol. 2002. V. 14. P. 581-586.

71. Miyazawa S., Azumi K, Nonaka M. Cloning and characterization of integrin alpha subunits from solitary ascidian, Halocynthia roretzi II J. Immunol., 2001. V. 166. №3. P. 1710-1715.

72. Mogues T., Ota T., Tauber A.T., Sastry KN. Characterization of the mannose-binding protein cDNAs from rhesus monkey (Macaca mulatto): structure and evolutionary implications // Glycobiology. 1996. V. 6. № 5. P. 543-550.

73. Monroy A., Rosati F., Dale B. Sperm-egg interaction // Boll. Zool. 1984. V. 51. № 1-2. P. 103-119.

74. Mullen M.M., Haan KM., Longnecker R., Jardetzky T.S. Structure of the Epstein-Barr virus gp42 protein bound to the MHC class II receptor HLA-DR1 // Mol. Cell. 2002. V. 9. № 2. P. 375-385.

75. Muramoto K, Kamiya H. The amino-acid sequence of multiple lectins of the acorn barnacle Megabalanus rosa and its homology with animal lectins // Biochim. Biophys. Acta. 1990. V. 1039. № 1. P. 42-51.

76. Nakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase-labeled antibody. A new method of conjugation//!. Histochem. Cytochem. 1974. V. 22. № 12. P. 1084-1091.

77. Ozeki Y., Yokota Y., Kato K.H., Titani K., Matsui T. Developmental expression of D-galactoside-binding lectin in sea urchin (Anthocidarus crassispina) eggs // Exp. Cell Res. 1995. V. 216. P. 318-324.

78. Perillo N. L., Marcus M. E., Baum, L. G. Galectins: versatile modulators of cell adhesion, cell proliferation, and cell death // J. Mol. Med. 1998.V. 76. P. 402412.

79. Poirier F., Kimber S. Cell surface carbohydrates and lectins in early development // Mol. Hum. Reprod. 1997. V. 3. № 10. P. 907-918.

80. Quarles R.H. Myelin-associated glycoprotein (MAG): past, present and beyond // J. Neurochem. 2007. V. 100. № 6. P. 1431-1448

81. Regan L.J., Dodd J., Barondes S.H., Jessell T.M. Selective expression of endogenous lactose-binding lectins and lactoseries clycoconjugatesin subset of rat sensory neurons // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1986. V. 83. № 7. P. 2248-2252.

82. Roberts D.L., Weix D.J., Dahms N.M., Kim J.-J.P. Molecular basis of lysosomal enzyme recognition: three-dimensional structure of the cation-dependent mannose 6-phosphate receptor// Cell. 1998. V. 93. P. 639-648.

83. Roche I. C., Monsigny A.C., Hauri H.P. ERGIC-53 is a functional mannose-selective and calcium-dependent human homologue of leguminous lectins // Mol. Biol. Cell. 1996. V. 7. P. 483-493.

84. Sato T., Endo Y., Matsushita M., Fujita T. Molecular characterisation of a novel serine-protease involved in activation of the complement system by mannose-binding protein // Inter.Immunol. 1994. V. 6. № 4. P. 665-669.

85. Schachner M., Bartsch U. Multiple functions of the myelin-associated glycoprotein MAG (siglec-4a) in formation and maintenance of myelin // Glia. 2000.V. 29. P. 154-156.

86. Schräg J. D., Bergeron J. J., Li Y., Borisova S., Hahn M., Thomas D. Y., Cygler M. The structure of calnexin, an ER chaperone involved in quality control of protein folding//Mol. Cell. 2001. V. 8 P. 633-644.

87. Seyfarth J., Garred P., Madsen H.O. The "involution" of mannose-binding lectin I I Hum. Molec. Genetics. 2005. V. 14. № 19. P. 2859 2869.

88. Shiratsuchi A., Watanabe I., Ju J., Lee B. L. Nakanishi Y. Bridging effect of recombinant human mannose-binding lectin in macrophage phagocytosis of Escherichia coli II Immunology. 2008. V. 124. P. 575-583.

89. Simpson A.J., Smithers S.R. Characterization of the exposed carbohydrates on the surface membrane of adult Schistosoma mansoni by analysis of lectin binding //Parasitology. 1980. V. 81. № 1. P. 1-15.

90. Smith L.C., Shih C. S., Dachenhausen S.G. Coelomocytes express SpBf, a homologue of factor B, the second component in the sea urchin complement system. II J. Immunol. 1998. V. 161. № 12. P. 6784-6793.

91. Smith L.C., Rast J.P., Brocktton D.P., Terwilliger D. P., Nair S. V., Buckley K. M., Majeske A. J. The sea urchin immune system // Invertebrate Survival J. 2006. V. 3. P. 25-39.

92. Spiegel E., Burger M., Spiegel M. Fibronectin in the developing sea urchin embryo //J. Cell Biol. 1980. V. 87. № 1. p. 309-313.

93. Swaminathan G.J., Myszka D.G., Katsamba P.S., Ohnuki L.E., Gleich G.J., Acharya K.R. Eosinophil-granule major basic protein, a C-type lectin, binds heparin // Biochemistry. 2005. V. 44. № 43. P. 14152-14158.

94. Takahashi M., Iwaki D., Matsushita A., Nakata M., Matsushita M., Endo Y., Fujita T. Cloning and characterization of mannose-binding lectin from lamprey (Agnathans) // J. Immunol. 2006. V. 176. № 8. P. 4861-4868.

95. Taylor M. E., Bezouska K, Drickamer K. Contribution to ligand binding by multiple carbohydrate-recognition domains in the macrophage mannose receptor // J. Biol. Chem. 1992. V. 267. P. 1719-1726.

96. Towbin K, Staehelin T., Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979. V. 76. № 9. P. 4350-^1354.

97. Uemura K, Yokota Y., Kozutsumi Y., Kawasaki T. A unique CD glycoform recognized by the serum mannan-binding protein in immature thymocytes // J. Biol. Chem. 1996. V. 271. № 9. P. 4581^1584.

98. Uemura K, Saka M., Nakagawa T., Kawasaki N., Thiel S., Jensenius J.C., Kawasaki T L-MBP is expressed in epithelial cells of mouse small intestine // J. Immunol. 2002. V. 169. P. 6945-6950.

99. Vas V., Fajka-Boja R., Ion G., Dudics V., Monostori E., Uher F. Biphasic effect of recombinant galectin-1 on the growth and death of early hematopoietic cells // Stem Cells. 2005. V. 23. № 2. P. 279-287.

100. Volanakis J.E. Human C-reactive protein: expression, structure, and function // Mol. Immunol. 2001. V. 38. № 2-3. P. 189-197.

101. Wang Q. C., Feng Z. H., Nie Q. H., Zhou Y. X. DC-SIGN: binding receptors for hepatitis C virus // Chin. Med. J. 2004. V. 117. P. 1395-1400.

102. Watt D.J., Jones G.E., Goldring K. The involvement of galectin-1 in skeletal muscle determination, differentiation and regeneration // Glycoconj. J. 2004. V. 19. №7-9. P. 615-619.

103. Weis WJ., Drickamer K., Hendrickson W.A. Structure of a C-type mannose-binding protein complexed with an oligosaccharide // Nature. 1992. V. 360. № 6400. P. 127-134.

104. Weis WJ., Taylor M.E., Drickamer K. The C-type lectin superfamily in the immune system // Immunol. Rev. 1998. V. 163. P. 19-34.

105. Wessel G.M., Berg L., Adelson D.L., Cannon G., McClay D.R. A molecular analysis of hyaline a substrate for cell adhesion in the hyaline layer of the sea urchin embryo //Dev. Biol. 1998. V. 193. № 2. P. 115-126.

106. Wetering J. K, Lambert M. G. van Golde, Batenburg J. J. Collectins. Players of the innate immune system // Eur. J. Biochem. 2004. V. 271. P. 1229-1249.

107. White R.A., Dowler L.L., Adkinson L.R., Ezekowitz R.A.B., Sastry K.N. The murine mannose-binding protein genes (MBL1 and MBL2) localize to chromosomes 14 and 19 //Mamra. Genome. 1994. V. 5. P. 807-809.

108. WilcockD., Duncan S.A., Traktman P., Zhang W.H., Smith G.L. The vaccinia virus A40R gene product is a nonstructural, type II membrane glycoprotein that is expressed at the cell surface // J. Gen. Virol. 1999. V. 80. P. 2137-2148.&

109. Williams D.B. Beyond lectins: the calnexin/calreticulin chaperone system of theendoplasmic reticulum // J. Cell Sci. 2006. V. 119. P. 615-623. Wilson P.D. Polycystin: new aspects of structure, function, and regulation // J. Am.

110. Glycoconj. J. 2004. V. 19. № 7-9. P. 601-606. ZalikS. E. On the possible role of endogenous lectins in early animal development

111. Anat. Embryol. 1991. V. 183. P. 521-536. Zelensky A. N., Gready J. E. The C-type lectin-like domain superfamily // FEBS J.2005. V. 272. P. 6179-6217. Zhang Y. W., Ding L.S., Lai M.D. Reg gene family and human diseases // World J.