Иммуногистохимическая оценка предиктивных маркеров потенциала злокачественности полипов толстой кишки тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.02, кандидат наук Олейникова, Нина Александровна

• Олейникова, Нина Александровна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Олейникова, Нина Александровна

Содержание

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Предопухолевые поражения толстой кишки

Пути канцерогенеза толстой кишки

ПОНЯТИЕ ОБ ОПУХОЛЕВЫ1Х СТВОЛОВЫ1Х КЛЕТКАХ

Маркеры, характерные для CSC толстой кишки

Экспрессия Ki67 в колоректальном раке и предопухолевык поражениях

толстой кишки

Экспрессия клаудинов в колоректальном раке и предопухолевык

ПОРАЖЕНИЯХ ТОЛСТОЙ КИШКИ

Экспрессия клаудинов в колоректальном раке

Экспрессия клаудинов в предопухолевых поражениях толстой кишки

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Экспрессия маркера Musashi- 1 в полипах и раке толстой кишки

3.2. Экспрессия клаудинов в полипах и раке толстой кишки

3.2.1. Экспрессия маркера клаудин-1 в полипах и раке толстой кишки

3.2.2. Экспрессия маркера клаудин-3 в полипах и раке толстой кишки

3.2.3. Экспрессия маркера клаудин-4 в полипа и раке толстой кишки

3.3. Экспрессия маркера Ki67 в полипах и раке толстой кишки

3.4. Экспрессия маркера CD44 в полипах и раке толстой кишки

ГЛАВА IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СОКРАЩЕНИЯ

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

ЛИТЕРАТУРА

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммуногистохимическая оценка предиктивных маркеров потенциала злокачественности полипов толстой кишки»

Введение

Актуальность темы исследования:

Колоректальный рак - одно из самых часто встречающихся злокачественных образований. Несмотря на то, что симптомы проявляются на ранних стадиях заболевания, имеется возможность для ранней диагностики и оперативного лечения, колоректальный рак остается второй причиной смертности в Европе и третьей в структуре онкологической заболеваемости США [58].

Среди предопухолевых поражений толстой кишки обсуждаются полипы -тубулярные, тубуло-ворсинчатые и ворсинчатые аденомы, гиперпластические полипы (HP), зубчатые аденомы на широком основании (SSA) и традиционные зубчатые аденомы (TSA), которые, как считается, обладают значительным потенциалом малигнизации [65]. Однако не для всех полипов толстой кишки определен потенциал злокачественности. В литературе описаны как минимум два пути канцерогенеза толстой кишки [92], которые, возможно, имеют разные клинические характеристики, в связи с чем оценка характеристик различных полипов толстой кишки с позиций их возможной малигнизации, представляется актуальной.

В качестве источника колоректального рака обсуждаются «cancer stem cells» (CSC), которые способны к самоподдержанию и мультипотентной дифференцировке и могут образовываться из мутантных стволовых клеток или путем дедифференцировки эпителиальных клеток крипты [13, 14, 53]. Изучается уровень экспрессии маркеров CSC в раках разных локализаций, однако в литературе нет данных об их состоянии в предопухолевых поражениях толстой кишки. Маркер Musashi-1 (Msi-1) рассматривается некоторыми авторами как маркер CSC в раке толстой кишки и желудка, однако не определен критический уровень его экспрессии, локализация маркера в качестве маркера CSC, а также нет данных о его экспрессии в предопухолевых поражениях, таких как полипы толстой кишки [88, 94]. Белок CD44, являющийся молекулой адгезии, также рассматривается в качестве маркера CSC. Изменение уровня CD44 ассоциировано

с плохим прогнозом, увеличением количества метастазов у пациентов с колоректальным раком [42]. Возможно, изменение уровня или характера реакции этих маркеров может быть обнаружено и в полипах толстой кишки, обладающих большим потенциалом злокачественности.

Традиционно считается, что уровень пролиферативной активности (оцениваемый чаще всего по уровню Ю67) выше в злокачественных образованиях по сравнению с доброкачественными. Уровень пролиферативной активности в разных типах полипов толстой кишки оценен в единичных работах [60, 79]. Есть данные о низком индексе пролиферативной активности в ОТ и SSA, об отсутствии отличий экспрессии маркера в эктопических криптах TSA и о более высоком уровне Ю67 тубулярном компоненте полипов [23, 29, 79]. Для оценки потенциала злокачественности полипов толстой кишки считаем целесообразным определить не только количество прореагировавших клеток, но и характер распределения реакции по крипте.

В плане оценки потенциала злокачественности в литературе обсуждаются белки плотных контактов эпителиальных клеток, в частности клаудины [136], обеспечивающие поддержание архитектоники эпителиального пласта. Теоретически, изменение экспрессии этих белков может инициировать опухолевый рост, однако в литературе нет однозначных данных на этот счет. В связи с этим сравнение уровня экспрессии клаудинов в аденомах толстой кишки, зубчатых образованиях (И?, SSA, TSA) и колоректальном раке может позволить понять механизмы канцерогенеза и разработать систему оценки потенциала злокачественности каждого из них.

Существующая классификация полипов толстой кишки включает 5 разных типов, критерии определения которых недостаточно четко обозначены [65]. Так, например, критерием отличия SSA от НР является наличие расширения базальных отделов крипт вдоль мышечной пластинки, которые не всегда представляется возможным оценить ввиду отсутствия последней в биоптате. Критерием TSA является наличие эктопических крипт, расположенных перпендикулярно к основной оси крипты, однако количество таких крипт и

способ дифференцировки эктопических крипт от простых ветвлений не определены. Современная гипотеза о разном потенциале злокачественности, разной частоте малигнизации побуждает к поиску дополнительных критериев отличия полипов друг от друга.

Цель исследования

Изучить предиктивные маркеры потенциала злокачественности полипов толстой кишки разного типа.

Задачи исследования:

1. Обосновать уточнения к классификации предопухолевых поражений толстой кишки.

2. Оценить характер распределения и уровень экспрессии маркера CSC - Msi-1- в аденокарциноме и полипах толстой кишки разных типов;

3. Оценить состояние белков плотных контактов (клаудина-1, -3, -4) в аденокарциноме и полипах толстой кишки разных типов;

4. Оценить характер и уровень пролиферативной активности - Ki67 - в аденокарциноме и полипах толстой кишки разных типов;

5. Оценить уровень экспрессии и характер распределения молекулы адгезии и маркера CSC - CD44 - в аденокарциноме и полипах толстой кишки разных типов;

Объект исследования

Биопсии полипов толстой кишки, полученные при диагностических эндоскопических исследованиях и операционный материал, полученный при колэктомиях, у больных раком толстой кишки.

Изучаемые явления

Строение и молекулярно-биологические характеристики полипов и рака толстой кишки.

Научная новизна работы

В работе впервые изучены, подробно описаны и проиллюстрированы иммуногистохимические характеристики предопухолевых поражений толстой кишки. Предложены уточнения существующей классификации полипов толстой кишки, существенно ее упрощающие, до двух групп: "классических аденом", включающих тубулярные, тубуло-ворсичнатые аденомы и традиционные зубчатые аденомы, и "зубчатых образований", объединяющих гиперпластические полипы и зубчатые аденомы на широком основании. Данное укрупнение подкреплено достоверными различиями между группами по всем исследуемым маркерам и отсутствием статистически значимой разницы между группами, сформированными согласно классификации ВОЗ.

Разработаны шкалы оценки уровня экспрессии маркеров CSC - CD44 и Msi-1, обоснована необходимость оценки реакции в каждом компартменте клетки: ядре, мембране и цитоплазме. Показан значимо более высокий уровень цитоплазматической реакции Msi-1 и CD44 в аденокарциноме и "классических аденомах" толстой кишки, позволившие сделать вывод об их большем потенциале злокачественности. Предложено считать именно цитоплазматический CD44 и цитоплазматический Msi-1 маркерами CSC в слизистой оболочке толстой кишки не учитывая типичную мембранную реакцию CD44 и ядерную реакцию Msi-1.

Показана значимая разница между "зубчатыми образованиями" и "классическими аденомами" по локализации реакции Ki67 и различия корреляции с локализацией мембранного CD44, что позволило сделать вывод о возможном развитии колоректального рака по обеим моделям канцерогенеза - восходящей и нисходящей - в зависимости от конкретного типа полипа.

Показано, что клаудин-1 является прогностическим маркером у пациентов с колоректальным раком: чем ниже его уровень, тем больше вероятность метастазирования в регионарные лимфатические узлы, наличие эмболов в кровеносных и лимфатических сосудах и уровень инвазии опухоли. Впервые описана парадоксальная ядерная реакция клаудина-3 в аденокарциномах и

клаудина-4 в полипах толстой кишки, для объяснения сущности которой необходимы дополнительные исследования.

Научно-практическая значимость

Предложена упрощенная классификация полипов толстой кишки, включающая в себя две группы, отличающиеся путем канцерогенеза: «классические аденомы» (включает тубулярные, тубуло-ворсинчатые и традиционные зубчатые аденомы) и «зубчатые образования» (включают гиперпластические полипы и зубчатые аденомы на широком основании). Данное объединение основано на отсутствии статистически значимой разницы в экспрессии маркеров, отражающих потенциал злокачественности полипов толстой кишки между различными типами полипов и появлением статистически значимой разницы после объединения групп. Упрощенная классификация устраняет необходимость введения дополнительных критериев отличия полипов разных типов, значительно облегчает диагностику полипов толстой кишки ввиду отсутствия различий потенциала злокачественности.

В качестве маркеров CSC и оценки потенциала злокачественности предложено учитывать только цитоплазматическую экспрессию предиктивных маркеров Msi-1 и CD44. При этом предложена методика оценки предиктивного маркера Msi-1: отдельно оценивается реакция в ядрах по 5-ти бальной шкале и цитоплазме по 3-х бальной шкале. Предложена методика оценки маркера CD44: отдельно оценивается реакция на мембране по 3-х бальной шкале, в цитоплазме по 3-х бальной шкале с обязательным указанием зоны реакции (верхняя, средняя или нижняя трети крипты), а также наличия градиента.

Реакции с клаудинами целесообразно оценивать только в полипах и раке толстой кишки, не сравнивая с окружающей интактной слизистой оболочкой толстой кишки. Помимо интенсивности реакции, рекомендовано оценивать локализацию маркера: мембранная или цитоплазматическая.

Обнаружена согласованность распределения реакции CD44 и Ki67 в различных зонах полипов толстой кишки, в связи с чем показана возможность

использования только одного из этих двух антител с целью эффективного использования средств.

Показано, что иммуногистохимическое исследование клаудина-1 может быть эффективно для оценки метастатического потенциала аденокарциномы толстой кишки, поскольку между уровнем экспрессии клаудина-1 и степенью злокачественности аденокарциномы наблюдалась умеренная отрицательная взаимосвязь, то есть чем выше степень злокачественности, тем ниже уровень экспрессии клаудина-1.

Личный вклад автора

Лично автором произведены анализ данных литературы по теме исследования, разработка дизайна исследования, отбор первичных материалов из архива, просмотр и анализ гистологических препаратов, постановка и оценка иммуногистохимических реакций, разработка оригинальных методик оценки реакции исследуемых маркеров, морфометрическая обработка результатов, статистическая обработка результатов, подготовка материалов для публикаций, представление результатов исследования на научных конгрессах и конференциях, написание текста диссертации.

Положения, выносимые на защиту

1. Маркеры CSC - Msi-1 и CD44 - являются предиктивными в полипах толстой кишки лишь при нетипичной для них локализации в цитоплазме. Уровень цитоплазматического CD44 значимо выше в аденокарциномах по сравнению с другими группами (p<0,05). Уровень Msi-1 в цитоплазме значимо выше в аденокарциномах по сравнению с "классическими аденомами" (p<0,01) и в "классических аденомах" по сравнению с "зубчатыми образованиями" (p<0,01).

2. В «зубчатых образованиях» атипичная цитоплазматическая реакция клаудина-3 наблюдалась реже, чем в аденокарциномах (p<0,01), реакция клаудина-4 - реже, чем в "классических аденомах" и аденокарциномах

(p<0,01). Интенсивность реакции клаудина-1 и -3 значимо ниже в "зубчатых образованиях" (p<0,05). Снижение уровня экспрессии клаудина-1 коррелирует со снижением степени дифференцировки (p<0,05).

3. "Зубчатые образования" развиваются по восходящей модели канцерогенеза (реакция CD44 и Ki67 в базальных отделах); "классические аденомы" - по нисходящей (реакция Ki67 и CD44 в поверхностных отделах или равномерно по полипу с наличием градиента выраженности реакции).

4. В "зубчатых образованиях" значимо ниже уровень клаудина-1 (p<0,05), клаудина-3 (p<0,05), Ki67 (p<0,01) по сравнению с "классическими аденомами" и аденокарциномами; отсутствуют цитоплазматические реакции Msi-1, CD44, клаудина-1, клаудина-3 в отличие от «классических аденом» и «аденокарцином» (0,01<p<0,05), что косвенно указывает на их более низкий потенциал злокачественности.

Апробация результатов

Результаты исследования представлены на XXVII European Congress of Pathology (Belgrad, 8 сентября, 2015), VI международном молодежном медицинском конгрессе (Санкт-Петербург, 2-4 декабря, 2015), Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных «Ломоносов-2016» (Москва, 11-15 апреля 2016), VII конференции молодых ученых РМАПО с международным участием «Шаг в завтра» (Москва, 30 апреля, 2016), II Петербургском онкологическом форуме (Санкт-Петербург, 22-24 июня, 2016), XXVIII European Congress of Pathology (Cologne, 25-29 сентября, 2016), XX Российском онкологическом конгрессе (Москва, 15-17 ноября, 2016), Московском эндоскопическом обществе (Москва, 25 января, 2017), V съезде Российского общества патологоанатомов (Челябинск, 1-4 июня, 2017).

Публикации по теме работы

По теме исследования за период с 2015 по 2017 опубликовано 19 работ, из них 8 в журналах из списка ВАК, 10 - в материалах конгрессов и конференций.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 219 страницах и включает в себя введение, 4 главы: обзор литературы (25 стр.), материалы и методы (18 стр.), результаты собственных исследований (120 стр.), обсуждение результатов собственных исследований (29 стр.), заключение, выводы и список литературы. Работа проиллюстрирована 35 таблицами и 171 рисунком, из них 106 микрофотографиями и 65 диаграммами. Библиографический аппарат работы включает 171 источников, из них 17 российских и 154 зарубежных. Количество ссылок за последние 5 лет (с 2012 года) составляет 77 (45,03%), за последние 10 лет (с 2007 года) - 131 (74,84%).

Глава I. Обзор литературы

Предопухолевые поражения толстой кишки

Текущая WHO Classification of Tumours of the digestive system в качестве предопухолевых поражений (precursor lesions) толстой кишки обозначает аденомы, "зубчатые" образования, хроническую воспалительную болезнь толстой кишки и гамартомные полипы, такие как ювенильные и Пейтца-Егерса [65].

Традиционные (conventional) аденомы представляют доброкачественные образования с четкой границей, определяемые по наличию диспластического эпителия. Дисплазия (интраэпителиальная неоплазия) может быть низкой или высокой степени в зависимости от степени вариабельности архитектоники, выраженности стратификации ядер и ядерного атипизма [65]. Большинство аденом имеют тубулярное строение и размер менее 1 см. Ворсинчатая архитектоника определяется как листовидные или пальцевидные выросты эпителия, расположенные над малой площадью собственной пластинки. Тубуловорсинчатые аденомы представляют собой смесь тубулярных и ворсинчатых структур при наличии ворсинчатого компонента в пределах 25% -75%.

«Зубчатые» образования были расценены как предопухолевые поражения толстой кишки и включены в классификацию ВОЗ лишь в 2010 году [118, 142]. Среди них выделяют:

• гиперпластический полип (hyperplastic polyp, HP) - "сидячее" образование, преимущественно в левой половине толстой кишки, характеризующееся наличием удлиненных «недоформированных» крипт на всем протяжении от поверхности слизистой оболочки до мышечной пластинки, с зубчатым характером просвета в верхней половине и в апикальной части крипты.

• зубчатая аденома/полип на широком основании (sessile serrated adenoma/ polyp, SSA/P) - приподнятое образование, характеризующееся распространением "зубчастости" на всю глубину крипт до базальных отделов с признаками патологического ветвления, дилатации базальных отделов и

горизонтальным ростом вдоль мышечной пластинки [36]. Возможна так называемая дисплазия эпителия по зубчатому типу - большое количество кубических клеток с эозинофильной цитоплазмой и везикулярными ядрами с выраженными ядрышками [140, 142]. • традиционная зубчатая аденома (TSA) - полиповидное образование, морфологически характеризующееся наличием эктопических крипт, перпендикулярно расположенных относительно продольной оси крипты, и не достигающих мышечной пластинки слизистой оболочки.

По некоторым данным зубчатые аденомы состоят из двух типов клеток: (1) "высоких столбчатых" с эозинофильной цитоплазмой и вытянутым ядром посередине клетки, морфологически похожих на терминально дифференцированные клетки поверхностного эпителия нормальной слизистой оболочки и (2) "низких" клеток с базально расположенным круглым ядром и большим количеством гранул муцина в цитоплазме, морфологически похожих на клетки базальных отделов крипт [79]. Стоит отметить, что данное выделение различных типов клеток встречается только в единственной работе и не соотносится с терминологией, предусмотренной гистологической номенклатурой. Возможно, "низкие" клетки соответствуют бескаемчатым энтероцитам, а "высокие" - каемчатым, или же эти клетки, характеризующиеся особыми мутациями, могут представлять собой новое качество.

Пути канцерогенеза толстой кишки

Несмотря на то, что колоректальный рак выделен в структуре МКБ в качестве самостоятельной нозологии, он представляет совокупность гетерогенных типов опухолей, формирующихся в результате различных комбинаций генетических и эпигенетических альтераций [19, 70]. Накопленный массив данных позволяет объединять в подтипы колоректального рака на основе комбинации микросателитной нестабильности (microsatellite instability, MSI), метиляторного фенотипа (CpG island methylator phenotype, CIMP), соматической BRAF мутации и/или KRAS мутации. При этом для определения пути

канцерогенеза важна не только комбинация, но и последовательность молекулярных изменений [93].

Исчерпывающая модель канцерогенеза толстой кишки была предложена Leggett B. и Whitehall V. [93]. Авторы предлагают три основных пути развития спорадического рака: традиционный, альтернативный и зубчатый [132].

Традиционный путь представляет собой классическую концепцию развития колоректального рака Vogelstein B. [161], основанную на возникновении его из традиционных аденом (тубулярных, ворсинчатых и тубуло-ворсинчатых) в результате активации Wnt-сигнального каскада из-за инактивирующей мутации в "adenomatous polyposis coli" (APC) гене, приводящей к активации KRAS/BRAF [166]. В норме в отсутствии активированного Wnt-сигнального пути цитоплазматический ß-катенин быстро фосфорилируется комплексом белков, называемым "разрушительный комплекс", состоящим из белка APC, аксин/кондуктин, GSK3 (гликогенсинтетическая киназа) и CK1. Фосфорилирование ß-катенина посредством GSK3 приводит к его убиквитинированию и деструкции в протеасоме. При возникновении мутации в APC, активность GSK3 ингибирована, что позволяет ß-катенину избежать деградации, накапливаться в цитоплазме и транслоцироваться в ядро, где он активирует транскрипционные факторы ядерного комплекса ß-катенин и TCF/LEF (T cell factor / lymphoid enhancer factors), которые регулируют транскрипцию большого количества различных генов, вовлеченных в поддержание гомеостаза тканей, эмбриональное развитие [54, 92]. Помимо регуляции Wnt-пути APC играет роль в миграции клеток, адгезии, сегрегации хромосом и сборке веретена деления [66]. Соматические мутации в APC обнаружены в 5% диспластических очагов аберрантных крипт, в 30%-70% спорадических аденом и более, чем в 72% спорадических опухолей, что указывает на то, что функциональная потеря APC является ранним этапом в развитии опухоли [122]. По другим данным общая доля опухолей толстой кишки, возникших по данному механизму составляет 60% [22]. Стоит отметить, что для этого типа канцерогенеза не характерна CIMP и MSI.

В большинстве очагов диспластических аберрантных крипт не наблюдается мутация гена APC, но наблюдается мутация в гене KRAS [150]. Эти данные дают предпосылку для наличия альтернативного пути, при котором инициирующим моментом является не мутация в гене APC. Возможно, это активирующая мутация в гене, кодирующем Р-катенин или гиперметилирование промотера APC, приводящее к инактивации гена APC [51].

В отличие от последовательности аденома ^ аденокарцинома, характеризующейся хромосомной нестабильностиью вследствие накопления мутаций в онкогенах и генах-супрессорах опухоли, "зубчатый" путь канцерогенеза характеризуется обязательным метилированием региона-промотора специфических генов и характерен для 10-30% колоректальных раков [33, 92]. Эпигенетический механизм, лежащий в основе канцерогенеза, основывается на гиперметилировании последовательностей пар нуклеотидов цитозин и гуанин (называемыми CpG island), обнаруживаемых в промоторных участках генов. Эти изменения приводят к формированию метиляторного фенотипа (CpG island methylator phenotype, CIMP), который в большей или меньшей степени редуцирует экспрессию генов без прямого воздействия на последовательность ДНК [145]. Гиперметилирование может происходить в генах, ответственных за репарацию неспаренных оснований hMLH-1, что приводит к развитию микросателитно нестабильного (MSI) рака [33]. Hawkins N. J. и Ward R. L. продемонстрировали, что все зубчатые полипы, обнаруженные у пациентов со спорадическим MSI-раком имели гиперметилирование промотора hMLH-1 [69].

Инициирующим событием в зубчатых образованиях является соматическая мутация V600E в гене BRAF или мутация в гене KRAS, в связи с чем в литературе описано не менее двух молекулярных механизмов развития карциномы толстой кишки из зубчатого образования [15, 28, 36, 165]. Первый предполагает развитие карциномы из микровезикулярного гиперпластического полипа или SSA/P в результате начальной активирующей мутации BRAF, второй - из TSA в результате начальной мутации KRAS. Однако есть данные о том, что TSA в

качестве предшественника могут иметь ББЛ/Р или гиперпластический полип, в связи с чем возможна общность этих двух зубчатых путей (рис. 1) [4, 10, 16, 29].

Рис. 1. «Зубчатые» пути канцерогенеза. Приводится по ВеШп^оп М., 2015 [29] с изменениями.

Несмотря на большое количество публикаций посвященных молекулярным механизмам зубчатого пути, полного понимания процессов, вовлеченных в формирование полипов и их прогрессию в карциному толстой кишки до сих пор нет. Вместе с тем установлено, что карциномы толстой кишки, развившиеся по зубчатому пути могут нуждаться в особом режиме химиотерапии [41, 80]. Колоректальные карциномы, характеризующиеся мутацией БЯЛЕ У600Б, имеют значительно худшую общую выживаемость по сравнению с аденокарциномами с диким типом БЯЛБ или £ЛЛ5-мутацией [133].

Понятие об опухолевых стволовых клетках

Поскольку данная тематика только развивается, не для всех понятий правильно и однозначно определены термины. Так, например, большинство

авторов, связывающих развитие злокачественного новообразования с особым пулом стволовых клеток, говорят о термине "cancer stem cells", то есть "опухолевые стволовые клетки", что должно относиться к любой опухоли. Для описания процесса зарубежные авторы используют самые общие термины: "cancer" ("злокачественная опухоль"), "tumour" (опухоль), "lesion" ("поражение"), а также более конкретные "carcinoma" (опухоль из эпителия, рак). Однако в русскоязычных источниках "cancer stem cells" стабильно именуются "раковыми стволовыми клетками", что акцентирует внимание на гистогенезе опухолей из эпителиев, хотя термины "cancer" и "рак" не являются синонимами в отличие от "carcinoma" и "рак". Принимая во внимание плюрипотентность стволовых клеток, а также теории развития опухолей из стволовых клеток (вследствие мутации во взрослой стволовой клетке или дедифференцировки терминально дифференцированной клетки), логично предположить, что из подобной модифицированной стволовой клетки может развиться не только эпителиальная опухоль (рак), но и опухоль иной гистогенетической принадлежности, причем не обязательно злокачественная, на что и указывается в англоязычных статьях. Учитывая широкую распространенность термина «cancer stem cells» (CSC) в специальной литературе, а также не совсем корректный, на наш взгляд, перевод, далее по тексту для обозначения опухолевых стволовых клеток нами используется аббревиатура CSC.

Традиционная, так называемая "стохастическая" (stochastic, англ. -случайный) модель развития опухоли, предполагающая, что каждая опухолевая клетка может давать начало новой опухоли, в последнее десятилетие с момента идентификации CSC вытеснена "иерархической" моделью, постулирующей, что только CSC способны инициировать опухолевый рост, как в первичном очаге, так и в метастазах (рис. 2) [1, 2, 5, 53, 130].

Рис. 2. Иерархическая и стохастическая модели канцерогенеза. Приводится по Ап1опши А., 2013 [21] с изменениями.

Согласно этой модели опухоль организована иерархично, как нормальная ткань, с небольшой субпопуляцией недифференцированных клеток, имеющих уникальные биологические свойства, необходимые для инициации, поддержания и распространения опухоли [9, 159]. CSC расположены в нише с мезенхимальными клетками, которые обеспечивают выживание CSC, регулируют их пролиферацию посредством секреции растворимых факторов [61]. Данная модель косвенно указывает на то, что полная эрадикация опухоли возможна лишь при элиминации всех CSC, а оставшиеся могут вызывать рецидивы и/или метастазы у пациентов с колоректальным раком [37]. Идентификация и изоляция CSC необходима для лучшего понимания их роли в туморогенезе и развития CSC-специфичной терапии. Поэтому для идентификации специфических поверхностных маркеров CSC предпринимается большое количество исследований.

CSC отличаются от остальных клеток тремя уникальными особенностями: (1) способностью к неограниченному самообновлению; (2) способностью воссоздавать полный пул опухолевых клеток в "материнской" опухоли и (3) наличием своеобразного фенотипа, характеризующегося экспрессией уникального набора маркеров [124]. Как и нормальные стволовые клетки, CSC обладают мультилинейным потенциалом дифференцировки и дают начало иерархично организованной клеточной популяции. Увеличение популяции самих CSC осуществляется благодаря преобладанию симметричного деления CSC (приводящему к образованию двух дочерних CSC) над ассимметричным (в результате которого образуется одна дочерняя CSC и одна дифференцированная клетка) [101, 121]. Эта концепция была неоднократно подтверждена с помощью математического моделирования и флюоресцентного окрашивания с PKH-26 [32, 39].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Олейникова, Нина Александровна, 2017 год

Литература

1. Аллина Д.О., Андреева Ю.Ю., Завалишина Л.Э., Кекеева Т.В., Франк Г.А. Простатическая интраэпителиальная неоплазия высокой степени: современное состояние проблемы // Архив патологии. - 2015. - 77(1). - С. 69-74.

2. Бывальцев В.А., Степанов И.А., Белых Е.Г., Яруллина А.И. Роль опухолевых стволовых клеток в развитии глиом головного мозга // Сибирское медицинское обозрение. - 2015. - 6(96). - С. 5-14.

3. Виноградова Т.В., Чернов И.П., Монастырская Г.С., Кондратьева Л.Г., Свердлов Е.Д. Раковые стволовые клетки: пластичность против терапии // Acta Naturae (русскоязычная версия). - 2015. - 7(4). - С. 53-63.

4. Григорьев Е.Г., Владимирова А.А., , Раевская Л.Ю., Чашкова Е.Ю. Зубчатая аденома толстой кишки и ее клиническое значение // Клиническая медицина. - 2009. - 87(6). - С. 50-52.

5. Дашян Г.А., Семиглазов В.Ф., Донских Р.В., Воротников В.В., Аполлонова В.С., Семиглазова Т.Ю. Роль стволовых клеток рака молочной железы в метастазировании // Вопросы онкологии. - 2015. - (2). - С. 169-173.

6. Ким Я.С., Кайдина А.М., Чанг Ю.Х., Ярыгин К.Н., Лупатов А.Ю. Молекулярные маркеры раковых стволовых клеток, верифицированные in vivo // Биомедицинская химия. - 2016. - 62(3). - С. 228-338.

7. Гуревич, Л. Е. Иммуногистохимическое иследование фенотипа и инвазивного потенциала опухолей поджелудочной железы: дис. ... док.биол.наук: 03.00.25 / Гуревич Лариса Евсеевна. - М., 2003. - 218 с.

8. Леенман Е.Е., Коурова Н.В., Белогурова М.Б., Пожарисский К.М. Иммуногистихимическое исследование мелкоклеточных сарком и факторов (NM23, CD44), прогнозирующих их метастазирование у детей // Архив патологии. - 2003. - 1. - С. 21-27.

9. Пучинская М.В. Раковые стволовые клетки как возможный источник возникновения и прогрессирования опухолей // Вопросы онкологии. - 2016. - 62(1). - С. 14-23.

10. Михалева Л.М., Комлева Р.А., Бирюков А.Е., Шахлазян Н.К. Зубчатые аденомы толстой кишки: клинико-морфологическая и молекулярно-генетическая характеристика // Архив патологии. - 2017. - 79(1). - С. 19-27.

11. Корсакова, Н.А., Оценка степени злокачественности эпителиальных новообразований толстой кишки на основе определения иммунофенотипа опухолевых клеток: дис. ... канд. мед. наук: 14.00.15 / Корсакова Нина Анатольевна. - М., 2007. - 136 с.

12. Петров Н.С., Верещагина Н.А., Сушилова Е.Н., Кропотов А.В., Михеева Н.Ф., Попов Б.В. Продукт гена Bmil - ключевой компонент семейства polycomb - позитивно регулирурет жировую дифференцировку мезенхимных стволовых клеток // Цитология. - 2016. - 58(2). - С. 83-90.

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

Раскин Г.А., Орлова Р.В., Петров С.В., Протасова А.Э., Пожарисский К.М. Пролиферация раковых стволовых клеток аденокарциномы толстой кишки // Вопросы онкологии. - 2014. - 60(1). - С. 47-51.

Раскин Г.А., Орлова Р.В., Протасова А.Э., Петров С.В., Иванова А.К., Пожарисский К.М. Роль стволовых раковых клеток, хемокинов и их рецепторов в канцерогенезе, рецидивировании и метастазировании опухолей // Вопросы онкологии. - 2013. - 59(6). - С. 694-700. Харлова О.А., Данилова Н.В., Мальков П.Г., Агейкина Н.В., Князев М.В. Клинико-морфологические особенности зубчатых образований толстой кишки // Архив патологии. - 2015. - 77(4). - С. 24-32.

Харлова О.А., Данилова Н.В., Мальков П.Г., Агейкина Н.В., Князев М.В. Зубчатые образования (serrated lesions) толстой кишки // Архив патологии. -2015. - 77(1). - С. 60-68.

Хлебникова А.Н., Гуревич Л.Е., Корсакова Н.А., Уситинова Е.В. Молекулы адгезии CD44H в базальноклеточном раке кожи // Иммунодерматология. -2007. - 3. - С. 30-39.

AbdElazeem, M.A. and El-Sayed M. The pattern of CD44 and matrix metalloproteinase 9 expression is a useful predictor of ulcerative colitis-associated dysplasia and neoplasia // Ann Diagn Pathol. - 2015. - 19(6). - P. 369-74.

Abdelzaher, E., et al. Predictive value of immunohistochemical expression of claudin-1 in colonic carcinoma // J Egypt Natl Canc Inst. - 2011. - 23(4). - P. 123-31.

Agarwal, R., D'Souza T., and Morin P.J. Claudin-3 and claudin-4 expression in ovarian epithelial cells enhances invasion and is associated with increased matrix metalloproteinase-2 activity // Cancer Res. - 2005. - 65(16). - P. 7378-85. Antoniou, A., et al. Cancer stem cells, a fuzzy evolving concept: a cell population or a cell property? // Cell Cycle. - 2013. - 12(24). - P. 3743-8. Arends, M.J. Pathways of colorectal carcinogenesis // Appl Immunohistochem Mol Morphol. - 2013. - 21(2). - P. 97-102.

Baker, A.M., et al. Characterization of LGR5 stem cells in colorectal adenomas and carcinomas // Sci Rep. - 2015. - 5. - P. 8654.

Balda, M.S., Garrett M.D., and Matter K. The ZO-1-associated Y-box factor ZONAB regulates epithelial cell proliferation and cell density // J Cell Biol. -2003. - 160(3). - P. 423-32.

Balda, M.S. and Matter K. The tight junction protein ZO-1 and an interacting transcription factor regulate ErbB-2 expression // Embo j. - 2000. - 19(9). - P. 2024-33.

Barker, N., et al. Crypt stem cells as the cells-of-origin of intestinal cancer // Nature. - 2009. - 457(7229). - P. 608-11.

Basakran, N.S. CD44 as a potential diagnostic tumor marker // Saudi Med J. -2015. - 36(3). - P. 273-9.

Bettington, M., et al. The serrated pathway to colorectal carcinoma: current concepts and challenges // Histopathology. - 2013. - 62(3). - P. 367-86.

29

30

31

32

33

34

35

36

37

38

39

40

41

42

43

44

45

46

Bettington, M.L., et al. A clinicopathological and molecular analysis of 200 traditional serrated adenomas // Mod Pathol. - 2015. - 28(3). - P. 414-27. Blanpain, C., Horsley V., and Fuchs E. Epithelial Stem Cells: Turning over New Leaves // Cell. - 2007. - 128(3). - P. 445-58.

Bobryshev, Y.V., et al. Expression of the putative stem cell marker Musashi-1 in Barrett's esophagus and esophageal adenocarcinoma // Dis Esophagus. - 2010. -23(7). - P. 580-9.

Boman, B.M., et al. Symmetric division of cancer stem cells--a key mechanism in tumor growth that should be targeted in future therapeutic approaches // Clin Pharmacol Ther. - 2007. - 81(6). - P. 893-8.

Bordacahar, B., et al. Sessile serrated adenoma: from identification to resection // Dig Liver Dis. - 2015. - 47(2). - P. 95-102.

Botchkina, G. Colon cancer stem cells--from basic to clinical application // Cancer Lett. - 2013. - 338(1). - P. 127-40.

Buda, A., et al. Prevalence of different subtypes of serrated polyps and risk of synchronous advanced colorectal neoplasia in average-risk population undergoing first-time colonoscopy // Clin Transl Gastroenterol. - 2012. - 3. - P. e6. Caruso, M., et al. Claudin-1 Expression Is Elevated in Colorectal Cancer Precursor Lesions Harboring the BRAF V600E Mutation // Transl Oncol. - 2014. - 7(4). - P. 456-63.

Chang, J.C. Cancer stem cells: Role in tumor growth, recurrence, metastasis, and treatment resistance // Medicine (Baltimore). - 2016. - 95(1 Suppl 1). - P. S20-5. Chetty, C., et al. MMP-9 induces CD44 cleavage and CD44 mediated cell migration in glioblastoma xenograft cells // Cell Signal. - 2012. - 24(2). - P. 54959.

Cicalese, A., et al. The tumor suppressor p53 regulates polarity of self-renewing divisions in mammary stem cells // Cell. - 2009. - 138(6). - P. 1083-95. Collina, F., et al. Prognostic Value of Cancer Stem Cells Markers in Triple-Negative Breast Cancer // Biomed Res Int. - 2015. - 2015. - P. 158682. Conesa-Zamora, P., et al. Expression profiling shows differential molecular pathways and provides potential new diagnostic biomarkers for colorectal serrated adenocarcinoma // Int J Cancer. - 2013. - 132(2). - P. 297-307. Dallas, M.R., et al. Divergent roles of CD44 and carcinoembryonic antigen in colon cancer metastasis // Faseb j. - 2012. - 26(6). - P. 2648-56. Davies, J.M., Santaolalla R., and Abreu M.T. Use of Cancer Stem Cells to Investigate the Pathogenesis of Colitis-associated Cancer // Inflamm Bowel Dis. -2016. - 22(4). - P. 976-83.

de Oliveira, S.S., et al. Claudins upregulation in human colorectal cancer // FEBS Lett. - 2005. - 579(27). - P. 6179-85.

de Souza, W.F., et al. Claudin-3 overexpression increases the malignant potential of colorectal cancer cells: roles of ERK1/2 and PI3K-Akt as modulators of EGFR signaling // PLoS One. - 2013. - 8(9). - P. e74994.

Dexter, D.L., et al. Heterogeneity of cancer cells from a single human colon carcinoma // Am J Med. - 1981. - 71(6). - P. 949-56.

47. Dhawan, P., et al. Claudin-1 regulates cellular transformation and metastatic behavior in colon cancer // J Clin Invest. - 2005. - 115(7). - P. 1765-76.

48. Du, L., et al. CD44 is of functional importance for colorectal cancer stem cells // Clin Cancer Res. - 2008. - 14(21). - P. 6751-60.

49. Endo, A., et al. A significant imbalance in mitosis versus apoptosis accelerates the growth rate of sessile serrated adenoma/polyps // Virchows Arch. - 2013. -462(2). - P. 131-9.

50. Ersoz, S., et al. Prognostic importance of Claudin-1 and Claudin-4 expression in colon carcinomas // Pathol Res Pract. - 2011. - 207(5). - P. 285-9.

51. Esteller, M., et al. Analysis of adenomatous polyposis coli promoter hypermethylation in human cancer // Cancer Res. - 2000. - 60(16). - P. 4366-71.

52. Fabbro, M., et al. BARD1 induces BRCA1 intranuclear foci formation by increasing RING-dependent BRCA1 nuclear import and inhibiting BRCA1 nuclear export // J Biol Chem. - 2002. - 277(24). - P. 21315-24.

53. Fanali, C., et al. Cancer stem cells in colorectal cancer from pathogenesis to therapy: controversies and perspectives // World J Gastroenterol. - 2014. - 20(4).

- P. 923-42.

54. Fang, X., et al. ChIP-seq and functional analysis of the SOX2 gene in colorectal cancers // Omics. - 2010. - 14(4). - P. 369-84.

55. Fedyanin, M., et al. Role of Stem Cells in Colorectal Cancer Progression and Prognostic and Predictive Characteristics of Stem Cell Markers in Colorectal Cancer // Curr Stem Cell Res Ther. - 2017. - 12(1). - P. 19-30.

56. Femia, A.P., et al. Expression of LGR-5, MSI-1 and DCAMKL-1, putative stem cell markers, in the early phases of 1,2-dimethylhydrazine-induced rat colon carcinogenesis: correlation with nuclear beta-catenin // BMC Cancer. - 2013. -13. - P. 48.

57. Femia, A.P., et al. Gene expression profile and genomic alterations in colonic tumours induced by 1,2-dimethylhydrazine (DMH) in rats // BMC Cancer. -2010. - 10. - P. 194.

58. Ferlay, J., et al. Cancer incidence and mortality patterns in Europe: estimates for 40 countries in 2012 // Eur J Cancer. - 2013. - 49(6). - P. 1374-403.

59. French, A.D., et al. PKC and PKA phosphorylation affect the subcellular localization of claudin-1 in melanoma cells // Int J Med Sci. - 2009. - 6(2). - P. 93-101.

60. Fujimori, Y., et al. An assessment of the diagnostic criteria for sessile serrated adenoma/polyps: SSA/Ps using image processing software analysis for Ki67 immunohistochemistry // Diagn Pathol. - 2012. - 7. - P. 59.

61. Gangemi, R., et al. Cancer stem cells: a new paradigm for understanding tumor growth and progression and drug resistance // Curr Med Chem. - 2009. - 16(14).

- P. 1688-703.

62. Georgescu, C.V., et al. Correlations of proliferation markers, p53 expression and histological findings in colorectal carcinoma // J Gastrointestin Liver Dis. - 2007.

- 16(2). - P. 133-9.

63

64

65

66

67

68

69

70

71

72

73

74

75

76

77

Gotte, M., et al. Increased expression of the adult stem cell marker Musashi-1 in endometriosis and endometrial carcinoma // J Pathol. - 2008. - 215(3). - P. 31729.

Grone, J., et al. Differential expression of genes encoding tight junction proteins in colorectal cancer: frequent dysregulation of claudin-1, -8 and -12 // Int J Colorectal Dis. - 2007. - 22(6). - P. 651-9.

Hamilton, S.R., Bosman F.T., Boffetta P. et al, Carcinoma of the colon and rectum, in WHO Classification of Tumours Pathology and genetics Tumours of the digestive system, / C.F. Bozman FT, Hruban RH, et al., Editor. - 2010. -Lyon. - P. 134-146.

Hanson, C.A. and Miller J.R. Non-traditional roles for the Adenomatous Polyposis Coli (APC) tumor suppressor protein // Gene. - 2005. - 361. - P. 1-12. Harada, N., et al. Introduction of antisense CD44S CDNA down-regulates expression of overall CD44 isoforms and inhibits tumor growth and metastasis in highly metastatic colon carcinoma cells // Int J Cancer. - 2001. - 91(1). - P. 6775.

Hartsock, A. and Nelson W.J. Adherens and tight junctions: structure, function and connections to the actin cytoskeleton // Biochim Biophys Acta. - 2008. -1778(3). - P. 660-9.

Hawkins, N.J. and Ward R.L. Sporadic colorectal cancers with microsatellite instability and their possible origin in hyperplastic polyps and serrated adenomas // J Natl Cancer Inst. - 2001. - 93(17). - P. 1307-13.

He, E.Y., et al. The molecular characteristics of colonic neoplasms in serrated polyposis: a systematic review and meta-analysis // J Pathol Clin Res. - 2016. -2(3). - P. 127-37.

Holczbauer, A., et al. Distinct claudin expression profiles of hepatocellular carcinoma and metastatic colorectal and pancreatic carcinomas // J Histochem Cytochem. - 2013. - 61(4). - P. 294-305.

Hou, T., et al. Putative stem cell markers in cervical squamous cell carcinoma are correlated with poor clinical outcome // BMC Cancer. - 2015. - 15. - P. 785. Hough, C.D., et al. Large-scale serial analysis of gene expression reveals genes differentially expressed in ovarian cancer // Cancer Res. - 2000. - 60(22). - P. 6281-7.

Hsu, K.H., et al. Clinical implication and mitotic effect of CD44 cleavage in relation to osteopontin/CD44 interaction and dysregulated cell cycle protein in gastrointestinal stromal tumor // Ann Surg Oncol. - 2010. - 17(8). - P. 2199-212. Huh, J.W., et al. Expression of standard CD44 in human colorectal carcinoma: association with prognosis // Pathol Int. - 2009. - 59(4). - P. 241-6. Huo, Q., et al. Claudin-1 protein is a major factor involved in the tumorigenesis of colorectal cancer // Anticancer Res. - 2009. - 29(3). - P. 851-7. Jian, Y., et al. Delocalized Claudin-1 promotes metastasis of human osteosarcoma cells // Biochem Biophys Res Commun. - 2015. - 466(3). - P. 35661.

78

79

80

81

82

83

84

85

86

87

88

89

90

91

92

93

Jiang, L., et al. Prognostic and clinical significance of claudin-1 in colorectal cancer: A systemic review and meta-analysis // Int J Surg. - 2017. - 39. - P. 214220.

Jiao, Y.F., et al. Serrated adenoma of the colorectum undergoes a proliferation versus differentiation process: new conceptual interpretation of morphogenesis // Oncology. - 2008. - 74(3-4). - P. 127-34.

Joyce, T., et al. A molecular signature for oncogenic BRAF in human colon cancer cells is revealed by microarray analysis // Curr Cancer Drug Targets. -2012. - 12(7). - P. 873-98.

Jung, A., et al. The invasion front of human colorectal adenocarcinomas shows co-localization of nuclear beta-catenin, cyclin D1, and p16INK4A and is a region of low proliferation // Am J Pathol. - 2001. - 159(5). - P. 1613-7. Juniku-Shkololli, A., et al. Expression of Immunohistochemical Markers of Progression in Pre-cancerous and Cancerous Human Colon: Correlation with Serum Vitamin D Levels // Anticancer Res. - 2015. - 35(3). - P. 1513-20. Kalimuthu, S.N., Chelliah A., and Chetty R. From traditional serrated adenoma to tubulovillous adenoma and beyond // World J Gastrointest Oncol. - 2016. -8(12). - P. 805-809.

Kausalya, P.J., Phua D.C., and Hunziker W. Association of ARVCF with zonula occludens (ZO)-1 and ZO-2: binding to PDZ-domain proteins and cell-cell adhesion regulate plasma membrane and nuclear localization of ARVCF // Mol Biol Cell. - 2004. - 15(12). - P. 5503-15.

Kinugasa, T., et al. Claudins regulate the intestinal barrier in response to immune mediators // Gastroenterology. - 2000. - 118(6). - P. 1001-11. Kominsky, S.L., et al. Clostridium perfringens enterotoxin elicits rapid and specific cytolysis of breast carcinoma cells mediated through tight junction proteins claudin 3 and 4 // Am J Pathol. - 2004. - 164(5). - P. 1627-33. Kosunen, A., et al. CD44 expression and its relationship with MMP-9, clinicopathological factors and survival in oral squamous cell carcinoma // Oral Oncol. - 2007. - 43(1). - P. 51-9.

Kuang, R.G., et al. Expression and significance of Musashi-1 in gastric cancer and precancerous lesions // World J Gastroenterol. - 2013. - 19(39). - P. 663744.

Lakatos, G., et al. The behavior of matrix metalloproteinase-9 in lymphocytic colitis, collagenous colitis and ulcerative colitis // Pathol Oncol Res. - 2012. -18(1). - P. 85-91.

Lal-Nag, M. and Morin P.J. The claudins // Genome Biol. - 2009. - 10(8). - P. 235.

Landy, J., et al. Tight junctions in inflammatory bowel diseases and inflammatory bowel disease associated colorectal cancer // World J Gastroenterol. - 2016. -22(11). - P. 3117-26.

Langner, C. Serrated and non-serrated precursor lesions of colorectal cancer // Dig Dis. - 2015. - 33(1). - P. 28-37.

Leggett, B. and Whitehall V. Role of the serrated pathway in colorectal cancer pathogenesis // Gastroenterology. - 2010. - 138(6). - P. 2088-100.

94. Li, D., et al. Msi-1 is a predictor of survival and a novel therapeutic target in colon cancer // Ann Surg Oncol. - 2011. - 18(7). - P. 2074-83.

95. Li, X., et al. Prognostic value of CD44 expression in renal cell carcinoma: a systematic review and meta-analysis // Sci Rep. - 2015. - 5. - P. 13157.

96. Long, H., et al. Expression of Clostridium perfringens enterotoxin receptors claudin-3 and claudin-4 in prostate cancer epithelium // Cancer Res. - 2001. -61(21). - P. 7878-81.

97. Longacre, T.A. and Fenoglio-Preiser C.M. Mixed hyperplastic adenomatous polyps/serrated adenomas. A distinct form of colorectal neoplasia // Am J Surg Pathol. - 1990. - 14(6). - P. 524-37.

98. Lu, S., et al. Claudin expression in high-grade invasive ductal carcinoma of the breast: correlation with the molecular subtype // Mod Pathol. - 2013. - 26(4). - P. 485-95.

99. Ma, L., et al. Prognostic value of Musashi-1 in endometrioid adenocarcinoma // Int J Clin Exp Pathol. - 2015. - 8(5). - P. 4564-72.

100. Ma, Y.H., et al. Expression of stem cell markers in human astrocytomas of different WHO grades // J Neurooncol. - 2008. - 86(1). - P. 31-45.

101. Matsui, W.H. Cancer stem cell signaling pathways // Medicine (Baltimore). -2016. - 95(1 Suppl 1). - P. S8-s19.

102. Matsuoka, T., et al. Cluster analysis of claudin-1 and -4, E-cadherin, and beta-catenin expression in colorectal cancers // J Surg Oncol. - 2011. - 103(7). - P. 674-86.

103. Mees, S.T., et al. Expression of tight and adherens junction proteins in ulcerative colitis associated colorectal carcinoma: upregulation of claudin-1, claudin-3, claudin-4, and beta-catenin // Int J Colorectal Dis. - 2009. - 24(4). - P. 361-8.

104. Michl, P., et al. Claudin-4 expression decreases invasiveness and metastatic potential of pancreatic cancer // Cancer Res. - 2003. - 63(19). - P. 6265-71.

105. Mikami, T., et al. Invasive behavior of ulcerative colitis-associated carcinoma is related to reduced expression of CD44 extracellular domain: comparison with sporadic colon carcinoma // Diagn Pathol. - 2011. - 6. - P. 30.

106. Miletti-Gonzalez, K.E., et al. Identification of function for CD44 intracytoplasmic domain (CD44-ICD): modulation of matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) transcription via novel promoter response element // J Biol Chem. -2012. - 287(23). - P. 18995-9007.

107. Miwa, N., et al. Involvement of claudin-1 in the beta-catenin/Tcf signaling pathway and its frequent upregulation in human colorectal cancers // Oncol Res. -2001. - 12(11-12). - P. 469-76.

108. Mogoanta, S.S., et al. Colorectal cancer - clinical and morphological aspects // Rom J Morphol Embryol. - 2014. - 55(1). - P. 103-10.

109. Mohammadi, M., et al. The stem cell marker CD133 is highly expressed in sessile serrated adenoma and its borderline variant compared with hyperplastic polyp // J Clin Pathol. - 2013. - 66(5). - P. 403-8.

110. Moussata, D., et al. Endoscopic and histologic characteristics of serrated lesions // World J Gastroenterol. - 2015. - 21(10). - P. 2896-904.

111

112

113

114

115

116

117

118

119

120

121

122

123

124

125

126

127

128

Murayama, M., et al. Musashi-1 suppresses expression of Paneth cell-specific genes in human intestinal epithelial cells // J Gastroenterol. - 2009. - 44(3). - P. 173-82.

Nagano, O. and Saya H. Mechanism and biological significance of CD44 cleavage // Cancer Sci. - 2004. - 95(12). - P. 930-5.

Nakagawa, S., et al. Expression of CLDN1 in colorectal cancer: a novel marker for prognosis // Int J Oncol. - 2011. - 39(4). - P. 791-6.

Nakano, A., et al. Expression of the Neural RNA-binding protein Musashi1 in pediatric brain tumors // Pediatr Neurosurg. - 2007. - 43(4). - P. 279-84. Niessen, C.M. Tight junctions/adherens junctions: basic structure and function // J Invest Dermatol. - 2007. - 127(11). - P. 2525-32.

Nishimura, S., et al. Expression of Musashi-1 in human normal colon crypt cells: a possible stem cell marker of human colon epithelium // Dig Dis Sci. - 2003. -48(8). - P. 1523-9.

Okamoto, I., et al. Proteolytic cleavage of the CD44 adhesion molecule in multiple human tumors // Am J Pathol. - 2002. - 160(2). - P. 441-7. Okamoto, K., et al. Clinicopathological characteristics of serrated polyps as precursors to colorectal cancer: Current status and management // J Gastroenterol Hepatol. - 2017. - 32(2). - P. 358-367.

Osanai, M., et al. Claudins in cancer: bench to bedside // Pflugers Arch. - 2017. -469(1). - P. 55-67.

Oshima, C.T., Iriya K., and Forones N.M. Ki-67 as a prognostic marker in colorectal cancer but not in gastric cancer // Neoplasma. - 2005. - 52(5). - P. 420-4.

Peitzsch, C., et al. Cancer stem cells: the root of tumor recurrence and metastasis // Semin Cancer Biol. - 2017. -.

Pino, M.S. and Chung D.C. The chromosomal instability pathway in colon cancer // Gastroenterology. - 2010. - 138(6). - P. 2059-72.

Potten, C.S., et al. Identification of a putative intestinal stem cell and early lineage marker; musashi-1 // Differentiation. - 2003. - 71(1). - P. 28-41. Puglisi, M.A., et al. Colon cancer stem cells: controversies and perspectives // World J Gastroenterol. - 2013. - 19(20). - P. 2997-3006.

Rabinsky, E.F., et al. Overexpressed Claudin-1 Can Be Visualized Endoscopically in Colonic Adenomas In Vivo // Cell Mol Gastroenterol Hepatol. - 2016. - 2(2). - P. 222-237.

Rangel, L.B., et al. Tight junction proteins claudin-3 and claudin-4 are frequently overexpressed in ovarian cancer but not in ovarian cystadenomas // Clin Cancer Res. - 2003. - 9(7). - P. 2567-75.

Reichert, M., Muller T., and Hunziker W. The PDZ domains of zonula occludens-1 induce an epithelial to mesenchymal transition of Madin-Darby canine kidney I cells. Evidence for a role of beta-catenin/Tcf/Lef signaling // J Biol Chem. - 2000. - 275(13). - P. 9492-500.

Reilly, J.F. and Maher P.A. Importin beta-mediated nuclear import of fibroblast growth factor receptor: role in cell proliferation // J Cell Biol. - 2001. - 152(6). -P. 1307-12.

129

130

131

132

133

134

135

136

137

138

139

140

141

142

143

144

145

146

Resnick, M.B., et al. Claudin-1 is a strong prognostic indicator in stage II colonic cancer: a tissue microarray study // Mod Pathol. - 2005. - 18(4). - P. 511-8. Rich, J.N. Cancer stem cells: understanding tumor hierarchy and heterogeneity // Medicine (Baltimore). - 2016. - 95(1 Suppl 1). - P. S2-7. Ropponen, K.M., et al. Expression of CD44 and variant proteins in human colorectal cancer and its relevance for prognosis // Scand J Gastroenterol. - 1998.

- 33(3). - P. 301-9.

Rubio, C.A. Three Pathways of Colonic Carcinogenesis in Rats // Anticancer Res.

- 2017. - 37(1). - P. 15-20.

Safaee Ardekani, G., et al. The prognostic value of BRAF mutation in colorectal cancer and melanoma: a systematic review and meta-analysis // PLoS One. -2012. - 7(10). - P. e47054.

Seigel, G.M., et al. Human embryonic and neuronal stem cell markers in retinoblastoma // Mol Vis. - 2007. - 13. - P. 823-32.

Sheehan, G.M., et al. Loss of claudins-1 and -7 and expression of claudins-3 and -4 correlate with prognostic variables in prostatic adenocarcinomas // Hum Pathol.

- 2007. - 38(4). - P. 564-9.

Shibutani, M., et al. Low expression of claudin-1 and presence of poorly-differentiated tumor clusters correlate with poor prognosis in colorectal cancer // Anticancer Res. - 2013. - 33(8). - P. 3301-6.

Shih, I.M., et al. Top-down morphogenesis of colorectal tumors // Proc Natl Acad Sci U S A. - 2001. - 98(5). - P. 2640-5.

Singh, A.B., Sharma A., and Dhawan P. Claudin family of proteins and cancer: an overview // J Oncol. - 2010. - 2010. - P. 541957.

Singh, A.B., Uppada S.B., and Dhawan P. Claudin proteins, outside-in signaling, and carcinogenesis // Pflugers Arch. - 2017. - 469(1). - P. 69-75. Singh, R., et al. Sessile serrated adenoma/polyps: Where are we at in 2016? // World J Gastroenterol. - 2016. - 22(34). - P. 7754-9.

Sneath, R.J. and Mangham D.C. The normal structure and function of CD44 and its role in neoplasia // Mol Pathol. - 1998. - 51(4). - P. 191-200. Snover D, A.D., Burt RW, Odze RD et al. , Serrated polyps of the colon and rectum and serrated ("hyperplastic") polyposis, in WHO Classification of Tumours Pathology and genetics Tumours of the digestive system, / C.F. Bozman FT, Hruban RH, et al., Editor. - 2010. -IARC Press: Lyon. - P. 160-165. Snover, D.C. Update on the serrated pathway to colorectal carcinoma // Hum Pathol. - 2011. - 42(1). - P. 1-10.

Soler, A.P., et al. Increased tight junctional permeability is associated with the development of colon cancer // Carcinogenesis. - 1999. - 20(8). - P. 1425-31. Song, L. and Li Y. The Role of Stem Cell DNA Methylation in Colorectal Carcinogenesis // Stem Cell Rev. - 2016. - 12(5). - P. 573-583. Subramaniam, V., et al. CD44 regulates cell migration in human colon cancer cells via Lyn kinase and AKT phosphorylation // Exp Mol Pathol. - 2007. -83(2). - P. 207-15.

147. Sugahara, K.N., et al. Tumor cells enhance their own CD44 cleavage and motility by generating hyaluronan fragments // J Biol Chem. - 2006. - 281(9). - P. 58618.

148. Suren, D., et al. Loss of tight junction proteins (Claudin 1, 4, and 7) correlates with aggressive behavior in colorectal carcinoma // Med Sci Monit. - 2014. - 20.

- P. 1255-62.

149. Szylberg, L., et al. Serrated polyps and their alternative pathway to the colorectal cancer: a systematic review // Gastroenterol Res Pract. - 2015. - 2015. - P. 573814.

150. Takayama, T., et al. Analysis of K-ras, APC, and beta-catenin in aberrant crypt foci in sporadic adenoma, cancer, and familial adenomatous polyposis // Gastroenterology. - 2001. - 121(3). - P. 599-611.

151. Takehara, M., et al. Effect of claudin expression on paracellular permeability, migration and invasion of colonic cancer cells // Biol Pharm Bull. - 2009. -32(5). - P. 825-31.

152. Tang, W., et al. Dysregulation of Claudin family genes in colorectal cancer in a Chinese population // Biofactors. - 2011. - 37(1). - P. 65-73.

153. Taniguchi, H., et al. Cancer stem cells in human gastrointestinal cancer // Cancer Sci. - 2016. - 107(11). - P. 1556-1562.

154. Todaro, M., et al. Colon cancer stem cells: promise of targeted therapy // Gastroenterology. - 2010. - 138(6). - P. 2151-62.

155. Todd, M.C., et al. Overexpression and delocalization of claudin-3 protein in MCF-7 and MDA-MB-415 breast cancer cell lines // Oncol Lett. - 2015. - 10(1).

- P. 156-162.

156. Torlakovic, E.E., et al. Sessile serrated adenoma (SSA) vs. traditional serrated adenoma (TSA) // Am J Surg Pathol. - 2008. - 32(1). - P. 21-9.

157. Torres-Flores, J.M. and Arias C.F. Tight Junctions Go Viral! // Viruses. - 2015. -7(9). - P. 5145-54.

158. Trapasso, S. and Allegra E. Role of CD44 as a marker of cancer stem cells in head and neck cancer // Biologics. - 2012. - 6. - P. 379-83.

159. Vermeulen, L., et al. Single-cell cloning of colon cancer stem cells reveals a multi-lineage differentiation capacity // Proc Natl Acad Sci US A. - 2008. -105(36). - P. 13427-32.

160. Victoria, H.S., et al. Claudin 1 and Claudin 7 Gene Polymorphisms and Protein Derangement are Unrelated to the Growth Pattern and Tumor Volume of Colon Carcinoma // Int J Biomed Sci. - 2010. - 6(2). - P. 96-102.

161. Vogelstein, B., et al. Genetic alterations during colorectal-tumor development // N Engl J Med. - 1988. - 319(9). - P. 525-32.

162. Vries, R.G., Huch M., and Clevers H. Stem cells and cancer of the stomach and intestine // Mol Oncol. - 2010. - 4(5). - P. 373-84.

163. Wang, J.Y., et al. Silibinin suppresses the maintenance of colorectal cancer stemlike cells by inhibiting PP2A/AKT/mTOR pathways // J Cell Biochem. - 2012. -113(5). - P. 1733-43.

164. Weber, C.R., et al. Claudin-1 and claudin-2 expression is elevated in inflammatory bowel disease and may contribute to early neoplastic transformation // Lab Invest. - 2008. - 88(10). - P. 1110-20.

165. Weisenberger, D.J., et al. CpG island methylator phenotype underlies sporadic microsatellite instability and is tightly associated with BRAF mutation in colorectal cancer // Nat Genet. - 2006. - 38(7). - P. 787-93.

166. Wong, N.A. and Pignatelli M. Beta-catenin--a linchpin in colorectal carcinogenesis? // Am J Pathol. - 2002. - 160(2). - P. 389-401.

167. Yang, H.M., et al. Molecular and histologic considerations in the assessment of serrated polyps // Arch Pathol Lab Med. - 2015. - 139(6). - P. 730-41.

168. Yang, M., Liu P., and Huang P. Cancer stem cells, metabolism, and therapeutic significance // Tumour Biol. - 2016. - 37(5). - P. 5735-42.

169. Yoshida, T., et al. Decreased expression of claudin-1 in rectal cancer: a factor for recurrence and poor prognosis // Anticancer Res. - 2011. - 31(7). - P. 2517-25.

170. Yu, T., et al. Higher expression patterns of the intestinal stem cell markers Musashi-1 and hairy and enhancer of split 1 and their correspondence with proliferation patterns in the mouse jejunum // Med Sci Monit. - 2010. - 16(2). -P. Br68-74.

171. Zeilstra, J., et al. Deletion of the WNT target and cancer stem cell marker CD44 in Apc(Min/+) mice attenuates intestinal tumorigenesis // Cancer Res. - 2008. -68(10). - P. 3655-61.