Глюкоамилаза Aspergillus awamori 466: Выделение, иммобилизация и свойства тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Слепокурова, Юлия Ивановна

• Слепокурова, Юлия Ивановна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Слепокурова, Юлия Ивановна

Введение

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Илочники глкжоамишзы

1.2. Влияние некоторых факторов на биосинтез глкжоамишзы

1.3. Вьщелшие и очистка препаратов глкжоамишзы

1.4. Иммобилизация ферментов 15 1.4.1. Оюсобы и носители для иммобилизации ферментов 15 1.4.2 Иммобшжзованнью глкжоамишзы

1.5. Физико-химические свойства свободной и иммобилизованной глкжоамилсаз

1.5.1. Свойства нативной глкжоамишзы 20 1.5.2 Влияние иммобилизации на физико-химические свойства глкжоамишзы

1.6. ^пользование свободной и иммобилизованной глкжоамишз

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Глюкоамилаза Aspergillus awamori 466: Выделение, иммобилизация и свойства»

Актуальность работы Ферменты играют большую роль в технологии пищевых продуктов. В основе производства любого продукта лзжат либо биохимические, либо физико-химические процессы, либо эти процессы тесно взаимосвязаны Режимы хранения сырья, его качество и выход продукта определяются действием ферментов.

В энзимооюгии открытыми остаются вопросы, касающиеся необычайно высокой активности и специфичности действия ферментов, актуальными являются исследования биосинтеза, физико-химических свойств, механизма действия ферментов.

В настоящее время в связи с развитием биотехнологии представляет значительный интерес иммобилизация ферментов, сущность которой заключается в присоединении к инертной, нерастворимой полимерной матрице.

С этой точки зрения особый интерес представляет гидролитический фермент, глкжоамилаза (а-1,4:1,61шкжан-4,б-глкжогидролаза, КФ 3.2.1.3) - эк-зофермент, который осуществляет гидролиз в крахмале и олигосахаридах а-1,4- и а-1,6- глкжозидных связей. Использование ферментных препаратов глкжоамилазы в биотехнологии связано с подбором эффективных продуцентов фермента В решении данного вопроса перспективными являются микро-мицеты рода АБрег^Ит, которые обладают высокой биосинтешческой активностью и продуцируют экзогенную глкжоамилазу.

Настоящая работа выполнялась в соответствии с тематикой научных исследований кафедры микробиологии и биохимии Воронежской гскударствен-ной технологической академии по проблеме "Изыскание оптимальных условий микробного биосинтеза ферментов и исследование их фнзико - химических свойств". Данная проблема включена в координационный план РАН по программе "Микробиогогический синтез и научные основы микробиолэгического получения практически ценных веществ".

Шль и задачи исследования ль работы - выделение вькхжоспецифинного продуцента глкжоамилазы, получение активного ферментного препарата, иммобилизация и исследование физико-химических свойств свободной и иммобилизованной пжжоами-лаз.

Изсодя из цели были поставлены следующие задачи:

• отбор активного продуцента глкжоамишзы среди микромицегов;

• исследование условий биосинтеза глкжоамилазы и рационального режима культивирования продуцента;

• разработка эффективного метода выделения и очистки пжжоамшшы из экстракта при поверхностном культивировании продуцента;

• подбор оптимального метода и рациональных носителей для получения иммобилизованного фермента глюкоамилвзы;

• определение оптимальных условий для иммобилизации глкжоамишзы;

• выявление характера взаимодействия глкжоамилазы с функциональными группами носитежй,

• исследование некоторых физико-химических свойств свободной и иммобилизованной глкжоамилзз: рН- и температурного оптимума действия, рН - и термостабильносш фермента;

• идентификация функциональных групп активного центра глкжоамилазы;

• практическое использование препаратов нашвной и иммобилизованной глкжоамилазы

Научная новизна

Отобран микромицет Аярег&Ыз сматоп. 466 осущесгвлякхций эффективный биосинтез глкжоамилазы ГЪдобраны рациональные условия биосинтеза для поверхностного культивирования микромицета 7

Разработан способ получения препарата глкжоамилазы и предложена схема его очистки.

Наследована сорбционная иммобилизация глкжоамилазы на носителях различного типа Выявжиа возможность многократного использования иммобилизованной глкжоамилазы Показано использование ИЬС- спектроскопии для изучения процесса иммобилизации

Найдеяь1 оптамалшью рН и температура действия нативного и иммобилизованного ферментов. Ихждован процесс термической и кислотной инактивации для нативного и иммобилизованного ферментного препаратов глю-коамилазы

Показана целесообразность применения ферментного препарата как в свободной, так и в иммобилизованной форме в производстве некоторых хлебобулочных изделий.

Практическая значимость работы

Получен иммобилизованный ферментный препарат глкжоамилазы из Азрег^йш ашгтоп 466. Разработан комплексный улучшитесь для хлебобулочных изделий на основе ферментного препарата глкжоамилвзы, который прошел апробацию в АООТ «Хлебозавод № 2» г. Воронежа Предложена технологическая схема, по использованию иммобилизованной глкжоамилазы

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Слепокурова, Юлия Ивановна

выводы

1. Из микромгщетов рода Азрег&Иш и Шторгиз наиболее активным продуцентом глюкоамилззы является ^рег^гНш атзтоп 466.

2. С использованием математического шинирования эксперимента, разработаны рациональные условия эффекшвного биосинтеза глюкоамилззы при твердофазном культивировании микромицета: температура культивирования — 32 °С; продолжительность биосинтеза -72 ч; влажность питательной среды — 65 %: крахмалистость отрубей - 19 %.

3. Получен высокоактивный техническг-ш препарат глюкоамилззы Максимальная глюкоаштлазная активность проявляется при рН 5,0 и температуре 65 °С. С помощью методов ультрафильтрашш, осаждения, фракционирования, гельфильтрации получен вьюокоочищенный препарат глюкоамилазы с удельной активностью 690 едмг белка и степенью очистки 93,5. Молекулярная масса фермента 48 кДа

4. Сорбент Сшросорб МХДЭ-100 обладает высокой сорбционной способностью иммобилизации глюкоамилззы. При этом практически полностью сохраняется глюкоамнтазная активность и она составляет 2817 ед/'г сорбента

5. Практически полная иммобилизация осуществляется в течение 6 ч, при значении рН5,0, температуре 20 °С.

6. Температурный оптимум действия иммобилизованной глюкоамилазы лежит в пределах 65 - 72 °С, рНютимум в интервале 4,0 - 5,0, что позволяет расширить диапазон действия иммобилизованной формы по сравнению со свободной.

7. Выявлена возможность многократного использования иммобилизованной глюкоамилазы 20 оборотов замены субстрата привело к потере 50 % активности иммобилизованного фермента от исходной.

8. Профиль кривой активность глкжоамшвзы - рН, величина рК ионо-генных групп, фотоинакшвация фермента в присутствии мешленового синего, зависимость константы скорости фотоинактивации от рН дают основание счи

137 тать, что в акшвный центр фермента входит система кнрбоксилат - имидазо-жш.

9. Установлено, что инактивация фермента описывается уравнением реакции первого порядка. Расчет термодинамических параметров активированного комплекса позволил предположить, что в формировании белковой глобулы фермента важную роль играют гидрофобные взаимодействия. Глюкоа-милаза А амншоп 466 имеет достаточно высокую кислотную и термическую стабильность. Стабильность иммобилизованного фермента на порядок выше.

10. Проведенные исследования глкжоамилазы как в свободной, так и в иммобилизованной формах показали целесообразность применения ферментного препарата в производстве хлебобулочных изделий.

138

6.4. Заключение

Исследование кислотной и термической инактивации нативной и иммобилизованной глюкоамилазы А. ашгтоп 466 показало высокую кислотную и термическую стабильность иммобилизованной глюкоамилазы.

Полученные данные расчетов термодинамических характеристик процесса инактивации фермента дали представление о протекании этого процесса, позволили предположить, что в формировании белковой глобулы глюкоамилазы важную роль играют гидрофобные взаимодействия

Профиль кривой активности глюкоамилазы - рЦ величины рК расчет теплоты ионизации, фотоинактивация позволили предположить, что в активный центр глюкоамилазы входят карбоксильная и имидазольная группы

Установлено, что иммобилизация глюкоамилазы сорбционным способом приводит к повышению стабильности Глкжоамилаза иммобилизованная на сорбентах Стиросорб МХДЗ-100, КБ-4 и АМКБ-35 показала более высокую стабильность к концентрации ионов РГ при кислотной инактивации.

118

Рис. 6. 10. Зависимость К = ЯрН) при фотоокислении глкжоамишзы А а\штоп 466 при температуре: 20 °С - 1, 40 °С - 2.

ГЛАВА 7. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СВОЮДНЭЙ И

ИММОБИЛШОВАННЭЙ ГЛЮКОАМИЛАЗ В ПРОИЗВОДСТВЕ ХЛЕБОБУЛОЧНЬГХ ИЗДЕЛИЙ

Существенную роль в технологии хлеба играют ферменты, пивным образом амилазы и протеазы, влияющие на протекание биохимических и микробиологических процессов, при брожении теста Введение амилаз в количестве 0,02-0,04 % к массе муки способствует накоплению в тесте сбраживаемых углеводов вследствие гидролиза крахмала, что в конечном итоге обусловливает получение изделий с более ярко окрашенной коркой и более ароматных. Под действием амилаз накапливаются декстрины, что положительно сказывается на сохранении свежести изделий, повышается скорость брожения и увеличивается количество сахара в выпекаемом хлебе [3, 60].

7.1. Е^лбор компонентного состава комплексного улучшителя

В качестве активной части комплексного хлебопекарного улучшителя был использован высокоактивный технический препарат глюкоамилазы Его максимальная глкжоамишзная акшвность проявляется при рН 5,0 и температуре 65 °С Была выполнена предварительная серия опытов по определению эффективности действия препарата на ржаное, пшеничное тесто и заварку из ржаной муки. В тесто вводили ферментный препарат из расчета 8 единиц фермента на 1 г крахмащ, гидролиз крахмала осуществляли при 30-32 °С; отбор проб для определения редуцирующих Сахаров проводили через каждые 60 мин. Заварку готовили при соотношении муки ржаной обдирной и воды в массовых долях 1:2,5. Затем ее охлаждали до температуры 40-50 °С; вводили ферментный препарат из расчета 8 единиц фермента на 1 г крахмала Отбор проб проводили через каждые 60 мин

Результаты исследований в виде зависимостей накопления редуцирующих веществ от продолжительности процесса представлены на рис. 7.1. Максимальное накопление ред\адрукшшх веществ наблюдается в заварке из ржа

Рис. 7.1. Динамика накопления редуцирующих веществ под действием глкжоамишзы в: 1 — тесте из пшеничной муки; 2 — тесте из ржаной обдирной муки; 3 - завфке из ржаной обдирной муки 4 - контроль для ржаной муки, 5 - контроль дня пшеничной муки. С - содержание редуцирующих веществ, мг/г муки; х - продолжительность воздействия глюкоамилазы, мин ной обдирной муки - это результат предварительной обработки водой с температурой 94 ± 2 °С. Ь&именыдее накопление продуктов гидролиза крахмала, свидетельствует о целесообразности разработки комплексного улучшителя для изделия из пшеничной муки. йппа дальнейшая работа была основана на методических подходах к формированию состава комплексного улучшителя, принятых на фирме Ей. группы Кэрри-Великобритания [91].

Е^юранное направление использования комплексного улучшителя в производстве изделий из пшеничной муки обусловило состав комплексного улучшителя. Анализ источников научно-технической литературы по этому вопросу [89] показывает, что чаще всего помимо ферментных препаратов, это минеральные добавки, поверхностно-активные вещества, утучшители окислительного и восстановительного действия. Особенностью таких улучшителей является применение определенных сочетаний микроингредиентов различного принципа действия в оптимальных количествах, стабилизаторов и наполнителей.

ЕЬюор компонентного состава комплексного улучшителя (помимо ферментного препарата и наполнителя в виде морковно-паточного порошкообразного полуфабриката) основывался на принципах: доступности (как по стоимости, так и по существованию отечественного производства этого компонента), положительному влиянию ( или на структуру теста и качество хлеба, или на жизнедеятельность микрофлоры), безвредности (с точки зрения влияния на организм человека). Кроме того, были учтены известные исследования в этом направлении, а также рекомендации представителей французской фирма «Б. 1.Ьеза1&е».

В исследованиях были приняты следующие соли: фосфат кальция в дозировке 0,15 % к массе муки; фосфорнокислый аммоний - 0,15 %; сернокислый аммоний - 0,3 %; сернокислый магний - 0,55 %; хлористый калий - 0,55 %; сернокислое железо- 0,01 °/о. При выборе дозировок 'солей помимо рекомендаций [89], учитывали их оптимальное содержание для активной жизнедеятельносш дрожжевых клеток [3]. Однако в этой серии интересовало влияние выбранных минеральных солей на активность фермента

Замешивали тесто из муки, воды, раствора минеральной соли и ферментного препарата Термосташровали при 28-30 С. Через каждые 60 мин отбирали пробы теста, в которых определяли содержание глюкозы Параллельно анализировали контроль (без минеральных солей).

Результаты исследований представлены на рис. 7.2.

Анаше полученных - зависимостей показывает, что максимально положительное влияние на активность глкжоамилазы оказывает фосфорнокислый аммоний. Следует учесть миш^мальную (по сравнению с другими солями за исключением сернокислого железа) дозировку этой минеральной добавки 0,15 % к массе муки.

Фосфорнокислый аммоний известен как минеральная добавка в питательную среду при выращивании дрожжей Батагоптусез сегеуша [60], поэтому в случае ее введения в состав комплексного улучшителя можно ожидать его положительное влияние на жизнедеятельность дрожжей

В литературе встречаются сведения об отрицательном влиянии фосфорнокислого аммония на активность глкжоамилазы (снижение до-30-33 %) [90]. Однако в приведенном источнике нет достаточно полного описания самого ферментного препарата (продуцента, степени и способа очистки) и условий проведения эксперимента В связи с чем, сопоставить полученные результаты не представляется возможным.

Во внимание были приняты результаты наших исследований -фосфорнокислый аммоний введен в состав комплексного улучшителя.

Следукжцими компонентами комплексного улучшителя были выбраны окислители. К ним относятся аскорбиновая кислота, азодикарбонамид, перекись бромбеязоида, пероксид кальция, а в отдельных странах иодаты калия и кальция. Природы таких окислителей разная, неодинаковы их реакции взаимодействия с компонентами муки [90]. Однако, их объединяет конечный результат - улучшение структуры теста (белкового каркаса), особенно, если испольо

60

120

180

Рис. 7.2. Влияние различных солей на образование редуцирующих веществ: 1 - фосфат калия; 2 - фосфорнокислый аммоний; 3 -сернокислый аммоний; 4 - сульфат магния; 5 - хлорид калия; 6 - сернокислое железо; 7 - контроль. С - содержание редуцирующих веществ в тесте из пшеничной муки первого сорта, мг/г муки. зуется мука второй и третьей группы (слабая) по качеству клейковины Анализ разрешенных к применению в производстве хлебобулочных изделий окислителей показал, что наиболее доступным из них является аскорбиновая кислота Предпочтение этому компоненту отдано и с точки зрения возрастающего внимания к безвредным пищевым добавкам.

В серии экспериментов замеливали тесто из муки и воды с внесением предварительно растворенных фермента, фосфорнокислого аммония, минимального и максимального из рекомендуемых количеств аскорбиновой кислоты (0,01 и 0,005 % к массе муки). Контрольный образец готовили без окислителя. Тесто термосташровали при 28-30 °С. Каждые 60 мин отбирали пробы для определения содержания -в них, глюкозы Результаты эксперимента представлены на рис. 7.3. Графическая интерпретация полученных результатов позволяет выбрать в качестве компонента комплексного улучшителя аскорбиновую кислоту в дозировке 0,01 % к массе муки.

К сожалению, в работе не проведены исследования, по влиянию поверхностно-активных веществ на основную функциональную составляющую комплексного улучшителя, что связано с недоступностью компонентов этой направленности.

Таким образом, проведенная серия экспериментов позволила определить активную часть комплексного улучшителя: ферментный препарат глю-коамилаз, фосфорнокислый аммоний, аскорбиновая кислота В качестве наполнителя выбран морковно-паточный порошкообразный полуфабрикат. При этом доля активной части составляет 10% от массы комплексного улучпдггеля. Окончательный состав комплексного улучшителя в массовых долях: фермент глюкоамилазы- 4,5 %; фосфорнокислый аммоний - 5 %; аскорбиновая кислота - 0,5 %;

Морковно-паточный порошкообразный полуфабрикат - 90 %. С мг/r 108,7

78,7

48,7

0 60 120 ' 180

Рис. 7.3. Влияние различной дозировки аскорбиновой кислоты на образование редуцирующих веществ: 1 - аскорбиновая кислота (дозировка 0,01); 2 - аскорбиновая кислота (дозировка 0,0075) + фосфорнокислый аммоний; 3 - аскорбиновая кислота (дозировка. 0,005); 4 - контроль. С - содержание редуцирующих веществ в тесте го муки пшеничной первого сорта, мг/г муки.

7.2. Апробация комплексного у^чшигеля в лабораторных условиях

Для определения эффекптности действия разработанного улучшителя были исследованы процессы газообразования и кислотонакопления в тесте, а также определены качественные показатели готовых изделий. В серии экспериментов за основу была принята рецептура хлеба белого из пшеничной муки первого сорта Для сравнения параллельно готовили образца текста с внесением УКХ Амилокс-1 (Россия) и Волюмикс (Чехия). й>юор именно этих улуч-шителей основан на близких к нашим рекомендациям по использованию общих сведений о составе и- реальных с точки зрения практического использования ценах.

ГЬ сведению фирм производителей в состав АмилоксаЛ входят, аскорбиновая кислота, ферментные препараты амилолитического действия, соли аммония и натрия или кальция фосфорнокислые, наполнитель -пшеничная, соевая мука и крахмал В состав Волюмикса - пшеничная мука, солодовая мука, сухая сыворотка, аскорбиновая кислота, эмульгатор Е471. Рецептура образцов теста и параметры их приготовления приведены в табл. 7.1.

Результаты по газообразованиям и кислотонакоплению в образцах теста с различными УКХ представлены на рис. 7.4. и 7.5.

Анаше экспериментальных данных показывает интенсифбжацию основных биохимических процессов при внесении в тесто разработанного УКХ (Глюкоамилокс). Это можно связать как с накоплением продуктов гидролиза крахмала непосредственно: усвояемых дрожжевой и кислотообразующей микрофлорой, в отличие от известных УКХ, в состав которых входят амилаза Так и с активизацией жизнедеятельности микрофлоры при внесении азота и фосфора в виде фосфорнокислого аммония.

Рецептура и параметры приготовления теста

Сырье и технологические параметры приготовления Мука,кг Расход сырья и параметры приготовления теста с кошьйжсным улучшителем

Амилокс-1 0,7 Волюмикс 0,7 Глюкоамилокс 0,7

Дрожжи, кг 0,014 0,014 0,014

Соль пищевая, кг 0,0091 0,0091 0,0091

Кислотность теста конечная, не более, град 3,2 3,2 3 ">

Продолжительность брожения, мин 120-150

Температура начальная,^ 30-32

Результаты анализа полуфабрикатов полностью коррелировали с качественными характеристиками готовых изделий, полученных в лабораторных условиях (табл 7.2.).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Слепокурова, Юлия Ивановна, 2000 год

1. Адамсон А Физическая химия поверхностей.- М: Мир,- 1979,- 566 с.

2. Алешин АЕ, Голубев AM, Фирсов JIM Кристаллическая структура глюкоамилазы из A awamon X 100 //Молекулярная биология.- 1993.-Вып. 267,- №2,- С. 8-12.

3. Ауэрман ЛЯ. Технология хлебопекарного производства- Vi: Легкая и пищ. пром-сть.-1984,- 414 с.

4. Бекер ME Биотехнология микробного синтеза- Рига: Зинатне.- 1980.287 с.

5. Беккер З.Э. Физиология грибов и их практическое использование.- М: МГУ,- 1963,- 269 с.

6. Белозерский АП, Проскуряков МИ Практическое руководство по биохимии растений,- М: Советская наука-1951.- С. 37- 108.

7. Бенедицкий КМ, Яровенко В.Л Кинетика ферментативного гидролиза крахмала//Ферментная и спиртовая промышленность.- 1975.- № б.- С 39 -42.

8. Березин ИВ. Исследования в области ферментативного катализа и инженерной энзимологии.- М: Наука- 1990,- 384 с.

9. Березин ИВ., Мартинек К Основы физической химии ферментативного катализа-М: 1977.-280 с.

10. Биотехнология/Под ред. НС. Егорова, В. Д. Самушюва Инженерная эн-зимолошя. Т. 8.- М: Высшая школа-1987,- 144 с.

11. П.Бояринов А И, Кафаров В. В. Методы оптимизации в химической техно-логин.- М: Химия.- 1975.- 576 с.

12. Брухман Э.Э. Прикладная биохимия.- М: Легкая и пищ пром-сть.- 1981,-С. 113-121.

13. Буник В. И, Гамазкова B.C. О функциональной роле гистидиновых остатков а-кетоглутаратдегащрогеназы //Биохимия,- 1987.- Т. 52.- № 8.- С. 1235.

14. Введение в прикладную энзимолошю /Под рея. И В. Березина и К . Мар-тинека- М: Изд-во MГУ.- 1982- 384 с.

15. Вирник АД, Кильдеева HP., Красовская С.Б. Иммобилизация ферментов в структуре волокон и пленок в процессе их формирования //Биотехнология.- 1987,- Т. 3.- №5,- С. 602-610.

16. Войно ЛИ Образование амилолитических и протеолитических ферментов при поверхностном и глубинном культивировании.: Автореф. канд. дисс,- М- 1970,- 29 с.

17. Галич ИП Амилазымикроорганизмов.- Киев: Наука думка- 1987,- С. 160 -162

18. Галич ИП Хроматографическое исследование высокоочищенных препаратоь микробных а-амилаз и некоторых других глобулярных белков: Автореф. канд. диссер.- Киев.: Укр НИИНГИ- 1968,- 29с.

19. Грачев Ю.П Математические методы планирования экспериментов.- М: Пищевая пром-сгь- 1979.- 192 с.

20. Грачева ИМ Технология ферментных препаратов,- М: Пищевая пром-сгь,- 1975,- 392 с.

21. Грачева ИМ, Гернет MB. Пути синтеза и регуляции образования глюкоами."взы выделение и очистка ее,- В сб.: Микробиология.- М: Итоги науки и техники ВИНИТИ АН СССР.- 1978,- Т. 9.- С. 148 156.

22. Григорьев А И, Пруткова НМ, Митрофанова H Д. Исследование средних иминодиапетатов некоторых металлов методом инфракрасной спектроскопии //Докл АНСССР,- 1973,- Т. 161.- № 4.- С. 839 842.

23. Двадцатова Е.А Селекция и физиология питания Asp. oiyzae 3-9-15: Автореф. канд. дисс,- М: Ин-т микробиологии АН СССР.- 1961,- 32 с.

24. Двадцатова Е.А, Комарова Г. И, Воронцова H H Штамм Aspeigillus awamori Т-1-464 продуцент глкжоамилазы, используемой для осахарива-ния крахмалистого сырья: Ас. 753897 СССР//Б.И 1980.- №29.- с. 123.

25. Деникина Е.К. №кпюдов АД, Логинова Т.А Изучение и свойства иммобилизованного ферментного препарата с пептид азной активностью //Прикд биохимия и микробиология,- 1985,- Выл 2,- С. 177- 183.

26. Детерман Г. Гель-хроматография. М: Мир.- 1970,- 352 с.

27. Джиловян Л. Р., Лосякова Л С., Москвичева Э.П Подбор питательной среды для получения глюкоамилазы //Ферментная и спиртовая пром-сть.-1985.- Вып. 5.-С. 26-29.

28. Диксон М, Уэбб Э. Ферменты В 3 т.- М: Мир,- 1982,-1118 с.

29. Дикчювене А А, ГЪслякас ИИ, Дагене М.Н, Пауожжонас А Б. Определение количества белка, иммобилизованного на нерастворимом носителе //Методы биохимии /Матер. По II биохим. Съезду Лит. ССР,- Вильнюс: Главмикробиопром. 1976.- С. 5 - 9.

30. Добролинская Г.М Глюкоамилаза плесневого гриба A. awamori: Дис. канд. биолог, наук- М- 1961.

31. Дурмиппшзе СВ., Квеситадзе Г.И, КЪконашвили Г.Н Глюкоамилаза A awamori //Доклады АН СССР.- 1974.- Т. 217.- № 2,- С. 470.

32. Дятлова ИМ, Темкина В. Я., Попов К И Комплексы и комплексонаты металлов,- М: Хямия,- 1988,- 544 с.

33. Жакоб Ф., Моно Ж. Регуляция активности генов //Регуляторные механиз-мыклетки- М.: Наука, 1964.- С. 278- 286.

34. Жбанков Р.Г. Инфракрасные спектры и структура углеводов,- Минск: Наука и техника- 1972,- С. 27-43.

35. Жеребцов НА Амилолитические ферменты в пищевой промышленности.- М: Лекая и пищевая прм-стъ.- 1984,- 160 с.

36. Жеребцов НА Фракционирование и очистка ß-амилэзы солода //Приют биохимия и микробиологи,- 1965,- Т. 1.- Вып. 3,- С. 274 277.

37. Жеребцов НА, Корнеева О.С., Фараджева Е.Д. Ферменты Их роль в технологии пищевых продуктов,- Воронеж: Изд-во ВГУ.- 1999,- 120 с.

38. Жеребцов НА, Краюшкина Э.А, Авдеева З.К Исследование кинетики и механизма кислотной инактивации а-амилазы /Лэиохимия,- 1969.- Т. 34.-Вып.4.-С. 752-762.

39. Жеребцов НА, Пащенко Л.П, Житенева Т.Д Выделение и изучение свойств кислотоустойчивой а-амилазы АБр. а\уатоп //Приют биохимия и микробиология,- 1974,- Т. 10.- Вып. 2,- С. 236 241.

40. Жеребцов НА, Руадзе ИД, Яковлев АН О механизме кислотного и ферментативного гидролиза крахмала //Приют биохимия и микробиология,- 1995,- Т. 31,- №6,- С. 599 603.

41. Жеребцов НА. Забелина Л. Ф., Эктова АИ О механизме действия амилаз на глюкозидные связи грахмала //Биохимия.- 1976,- Т. 41.- Вып. 12,- С. 2119-2125.

42. Землянухин А А Малый практикум по биохимии:.- Воронеж Изд-во ВГУ,- 1985,- 128 с.

43. Зиновьева МЕ, Калачева НВ., Гамаюрова В. С. Методы иммобилизации глюкозоизомеразы//Биотехнология,- 1997,- №6,- С. 47-50.

44. Ивановская МГ., Копылов АМ, Останкина В.А Экспериментальные методы исследования белков и нуклеиновых кислэт.- М: Изд-во МГУ,-1985.-С. 46 47.

45. Иммобилизованные ферменты /Под ред. Березина ИВ., Клячко НЛ., Левашова А В.- М: Высшая школа- 1987.- Т. 7.- 159 с.

46. Иммобилизованные ферменты Современное состояние и перспективы /Подред. ИВ. Березина, В.К Антонова, К Мартинека- М: Изд-во МГУ.-1976,-Т. 1.2,-296 е., 358 с.

47. Кадушявичюс В.А, Суцжювене О.Ф., ГЪслякас ИИ Модифицирование неорганических носителей для синтеза биоспецифических сорбентов /УБиоорган. химия.- 1983.- Т. 9,- №8.- С. 1128- 1135.

48. Казанская А, Синявская Н, Кузнецова Л. Применение в хлебопечении новых функциональных добавок и нетрадиционного сырья //Хлебопродукты- 1993,- №3,- С 42-48.

49. Калинченко ЕА, ЛюбишжийГ.В. ¡Измерение глкжоамилазной активности с помощью рН-стата //Приют биохимия и микробиология.- 1992- Т. 28,-№2- С. 304-308.

50. Кафаров В.В., Перов В.Л., Мешалкин В.П Принципы математического моделирования химико-технологических систем,- М: Химия.- 1974,- 344 с.

51. Квеситадзе Г. И Селекция продуцентов и характеристика амилолитиче-ских ферментов грибов рода Азре^Ших. Автореф. докт. Дне,- М: Ин-т биохимии АН СССР,- 1980,- 35 с.

52. Квеситадзе Г.И., Воронцова НН, Гончарова О.Н, КЬридзе В.В., Двадца-това Е. А, Квачадзе Л.Л Экзогенные глюкоамилазы плесневых грибов рода АзкЪ^Шш //Прикладная биохимия и микробиология.- 1981,- Т. 17.-Вьш.4.- С. 569-574.

53. Келети Т. Основы ферментативной кинетики,- М: Мир,- 1990.- 350 с.

54. Кестнер А И ^мобилизованные ферменты //Успехи химии.- 1974.- Т. ХЫИ,- Вып. 8.- С. 1480- 1511.

55. Клочкова Т. А, Чикин Г. А. Смирнов В.Б. Ижиты носители биокатализатора в глюкозном производстве. Применение ионитов в промышленности и аналишческой химии //Тезисы докладов V всесоюзной конференции. -Воронеж.- 1981,- С. 134- 135.

56. Ковалева С. В., Дорожко А И, Коган З.С. Фотоокисление и модификация дютшпшрокарбонатом «биосинтетической» ¿-треониндегадрогеназы из пивных дрожжей Засскаготусес сагЬЬег^етя //Биохимия.- 1984,- Т. 49,-№8,-С. 1253-1261.

57. Ковалева Т. А, Селеменев В.Ф., Плохих АМ и др. Изучение некоторых свойств глюкоамилазы сорбционными и спектральными методами //Теория и практика сорбционных процессов.- Воронеж: ВГУ.- 1985.- № 17.-С. 58-61.

58. Коваленко Г,А, Ванина МП Иммобилизация ферментов на упкродми-неральных носителях. Некоторые закономерности адсорбционной иммобилизации ферментов //Биотехнология,- 1997,- № 4,- С. 3 12.

59. Коваленко Г.А, Соколовский В.Д. Двойная иммобилизация ферментов в неорганических матрицах //Биохимия.- 1987,- Т. 3,- №5,- С. 612 617.

60. КЬзьмина НП Биохимия хлебопечения.- М: Пищ. пром-сть,- 1978,- 278 с.

61. Коконагттили Г.Н Способы очистки и изучения свойств глюкоамилазы и а-амилазы плесневых грибов А. ашгпюп и А. отучает. Дис. Тбилиси Институт биохимии растений АН ГССР,- 1977.

62. Коновалов С.А Биосинтез ферментов микроорганизмами. М: Пищ пром-сть,- 1972,- 270 с.

63. Коршак В.В., Шгильман МИ Полимеры в процессах иммобилизации и модификация природных соединений,- М: Наука- 1984,- 260 с.

64. Котов В.Б., Гошев В.С. Производство и применение ферментных препаратов за рубежом.- М- 1973.- ОНТИТЭИмикробиопром.- 40 с.

65. Кочетов Г. А Практическое руководство по этимологии.- М: Наука -1980,- С 233 246.

66. Кочетов Г.А Тиминовые ферменты- М: Наука- 1978,- 74 с.

67. Крахмал и крахматюпродукты /Под ред. №хапетяна Л.А- М: Агропром-издат,- 1985.- 240 с.

68. Куликова А К. Чичуа В.Г., Церетели А К, Квеситадзе Г. И Очистка внутриклеточной инвертазы ЗассЬагогпусез 1гаш11Б //Приют биохимия и микробиология- 1986,- Т. 22.- №5,- С. 648 651.

69. Кулис Ю.Ю. Аналитические системы на основе иммобилизованных ферментов." Вильнюс: Мокслас.- 1981.- 200 с.

70. Лейднер К Кинетика органических реакций.- М: Мир,- 1966.- 187 с.

71. Ленинджер А Основы биохимии.- М: Мир,- 1985,- Т. 1.- С, 226- 269.

72. Ленинджер А Биохимия- М: Изд-во иностр. лит.- 1979,- 1048 с.

73. Лосева Л.П, Бендианишвили МВ., Шатилов В.Р., Шубин В.В., Крегович В. Л. Роль остатков гистидина к конститутивной НАД(Р>глутаматдегидрогеназе Chlorella pirenoiäosa 82 TЖюхимия.- 1986.- Т. 51.- № 5.-С. 840 849.

74. Макамиси К Инфракрасная спектроскопия и строение органических соединений,- М: Мир.- 1965.- 216 с.

75. Макаров МК, Ласкорин Б.Н, Годцобина В. А Синтез амфотерных ионов на основе поликонденсационных и полимеризационньк анионитов //ИЬнитыиионный обмен,- Л: Наука- 1970,- С. 27-32.

76. Мальцев ПН Технология бродильных производств.- М: Пищ. рпом-сть,-1980.- 560 с.

77. Маршнек К, Березин ИВ. Стабилизация ферментов ключевой фактор при внедрении биокатализа в практику //"Успехи химии.- 1980,- Т. 49.- С. 737 - 770.

78. Матвеева ИВ., Белявская ИГ. Пищевые добавки и хлебопекарные улуч-шители в производстве мучных из дели- М: МГЧПП- 1998,- 250 с.

79. Методы биохимического исследования растений /Под ред. Ермакова А ИЛ: Агропромиздат.- 1987,- 430 с.

80. Можаев В. В. Иммобилизация ферментов как новый подход к решению фундаментальных проблем энзимологии //Успехи биологической химии.-1983,-Т. 24,-С. 99-134.

81. Муронец В. И, Наградова НН Иммобилизованные олигоферменты- М: Hawa- 1984.- 208 с.

82. Неустроева КН, Голубев AM, Фирсов Л.М Влияние ферментативного и химического дегликозилирования на физико-химические свойства глюкоамилазы из Aspergillus awamori //Биохимия,- 1992,- № 4,- С. 12.

83. Неустроева КН, Фирсов ДМ Кислая протеиназа и множественность форм глюкоамилззы из Aspergillus awamori varX- 100 //Биохимия.- 1990.-№5,- С. 9-13.

84. Нечаев А П Пищевые добавки //'Пищевая промышленность. 1996. - № 6. -С. 12-14.

85. Орос Г.КХ Сеяеменев В.Ф., Хохлов В.Ю., Стукалов О.И, Сапожкова АН Механизм сорбции тРНК неионогенным сорбентом //Физическая химия, -1998,- Том 72,- № 5,- С. 926 932.

86. Панкратов АЯ., Антипова Л.В., Щуваева Г.П., Сванидзе СК Биосинтез ферментов грибами рода Ррсопус.- Воронеж: Изд-во ВГУ,-1993,- 184 с.

87. Пащенко Л.П, Зубченко А В., Жеребцов НА Влияние высокоосахарен-ных ферментативных гидролизатов на газообразовании при тестоведении //Изв-я вузов СССР. Пищевая технология,- 1976,- №6,- С. 45 46.

88. Пащенко Л.П, Зубченко А В., Жеребцов НА Применение ферментного препарата из Кг с1е1етаг для приготовления высокоосахаренных гидроли-загов ;/ХШ- 1974,- №2,- С. 16- 18.

89. Плевако ЕА Технология дрожжей.- М: Пищ. пром-стъ.- 1970,- 299 с.

90. Поландова Р. Д. Применение пищевых добавок в хлебопечении //Хлебопечение России- 1996.- № 1,- С. 10 11.

91. Поландова Р.Д., Турчанитова Т.П, Увайтхэст Б. Проблемы промышленного производства комплексных хлебопекарных улучпштелей //Хлебопечение России.- 1998,- №3,- С. 25 27.

92. Полторак О.М, Чухрай ЕС. Физико-химические основы ферментативного катализа- М: Высшая школа 1971,- С. 247 - 251.

93. Поляновский О.А Роль функциональных групп белка в ферментах.- М: Наука- 1964,- С. 101 121.

94. Путнам Ф. Денатурация белков.- В кн.: Белки.- М: Мир.- 1984,- 24 с.

95. Роуз Э. Химическая микробиология,- М: Мир,- 1971,- 294 с.

96. Рузинов Л.П Статистические метода оптимизации химико-технологических процессов,- М: Химия,- 1972.- 199 с.

97. Рухлядева АП, Полыгалина Г. В. Методы определения активности гидролитических ферментов. М: Легкая и пищевая пром-стъ.- 1981 — 288 с.

98. Рухлядова А П., Филатова Г. Г., Мереднегленко В. С. Справочник для работников лабораторш спиртовых заводов,-М: Пищевая пром-сть.- 1979.-С. 160-164.

99. Рыжжова В, Г., Фениксова Р. В. Получение высокоочищенной глюкоамилазы Aspergillus awamori //'Биохимия,- 1972,- Т. 37,- № 5,- С. 1019-1022.

100. Савельев АН, Сергеев В.Р., Фирсов JI.M Изучение активного центра глкжоамишзы из A awamori Х- 100 //Биохимия,- 1982.- Т. 47,- Ekm. 3,-С. 390 396.

101. Савельев АН, Сергеев В.Р., Фирсов JIM Изучение дополнительного субстратсвязьзвающего центра глюкоамилазы //Биохимия,- 1989,- Т. 54,-№10.-С. 1725-1731.

102. Савельев АН, Яковлева МФ., Фирсов Л.М Углеводный состав и некоторые свойства глюкоамилазы из A awamori //Биохимия,- 1984,- Т. 49.-вып. 11.-С. 1754-1760.

103. Сборник технологических инструюдий для производства хлеба и хлебобулочных гвделий.- М: Прейсьурашиздат. 1989,- 493 с.

104. Свишцов А А, Барсукова Т. К, Игтатов И А Новые возможности ультрафильтрации в биотехнологии: Обз. инф,- М: ЦБНТИ Минмедбиотехни-ка, 1987,- Вып. 5,- 32 с.

105. Семушин AM, Яковлев В.А, Иванова Е.В. ИК-спектры поглощения ионообменных материалов.- Л.: Химия,- 1989,- 96 с.

106. Синицин АН, Клибанов AM, Клесов А А, Мартинек К Зависимость стабильности глюкоамилазы от способа иммобилизации //Приют биохимия и микробиология.- 1978.- Т. XIV.- Вып. 2,- С. 236-242.

107. Смирнов ИН, Волжинский А И, Константинов В. А Рассчет и моделирование ионообменных реакторов,- Л: Химия,- 1984,- 224 с.

108. Сярейкайте И А, Герасимене Г. Б, Денис Г. И Выделение и характеристика внеклеточных а-глкжозидазы, инвертазы и глкжоамишзы из Aspergillus awamori //Прикл биохимия и микробиология.- 1989,- Том XXV-Вьш. 4.-С. 458-465.

109. Таджиев MX, Ибрагимов Ф, Рахимов ММ Иммобгшизация и стабилизация ферментов полимерами с функвдгональлными эпоксигруппами //Прикл. биохимия и микробиология.- 1978.- Т. 14.- № 5.- С. 703 708.

110. Ташмухомецова III С., Хасанов XT., Рахимов ММ Влияние удаления протеолишческих ферментов на очистку амилазы //Приклад, биохимия и микробиология.- 1995,- Т. 31,- № 3,- С. 272 274.

111. Тоддра Ф., Джонсон Н Иммобшшзация глюкоамилазы на пористых стеклянных волокнах //Технология и биотехнология,- 1987 Т. 40,- № 4,- С. 275 284.

112. Тохаязе З.В., Квачадзе JLJI, Квееитадзе Г.И. Влияние состава питательной среды на биосинтез кислотоустойчивой а-амилазы различными видами Aspergillus //Прикл биохимия и микробиология.- 1975,- Т. 11,- № 4,-С. 515.

113. Тривен М Иммобилизованные ферменты- М: Мир,- 1983,- 213 с.

114. Тройнина Т.И, Лифшиц Д.Б., Калашников ЕЯ. Влияние качества пшеничных отрубей на амилолитическую активность ферментных препаратов //Микробиология.- 1961.- Т. XXX- Вып. 3,- С. 540 544.

115. Уильяме В., Уилиамс X Физическая химия для биологов,- М: Мир,-1979,-600 с.

116. Уонг Д., Кеоней И, Демайн А Ферментация и технология ферментов.-М: Легкая и пищ. пром-тсь,- 1983,- 335 с.

117. Успехи биоорганического катализа /Под ред. ИВ. Березина, К Марти-нека- М: Изд-во МГУ,- 1979,- 285 с.

118. Феникаова Р. В., Кинзбурская Ф.М, Шилова А А Влияние состава питательной среды и способов выращивания на образование амилолитиче-ских ферментов из А. огшое //Науч. тр. ВНИИФС.- 1954.- Вып. 3,- С. 110 -127.

119. Фешжсова Р. В., Рыжакова В.Г. Влияние кислотности среды на образование амилолитических ферментов //Микробиология- 1970.- Вып. в.- С. 974-978.

120. Ферменты и иммобилшованные ферменты /'Под ред. АК Аренса- Рига: Авотс.- 1987,- С. 74-108.

121. Фертман Г.И, Шойхет МИ Химико-технологачесюЕЙ контроль спиртового и ликеро-водочного производства- М: Пищевая прм-стъ.- 1975.440 с.

122. Филатова Л.Н, ЦЬлякина МА, Егоров ЕВ. Кондиционирование и регенерация фосфорсодержащих сорбентов, используемых для получения особо чистых веществ .//Реактивы и особо чистые вещества- 1974.- Вып. 36.-С. 81-86.

123. Хиао К, Чен 3. Активность и термостабильностъ глюкоамилазы иммобилизованной диазотацией //Технология и биотехнология.- 1994.- № 5,- С. 681-684.

124. Хорлин А Я. Структура и функции активных центров ферментов,- М: Наука- 1974,- 36 с.

125. Шилова А А Амилолитические ферменты Л awamori и применение их в спиртовой промышленности: Автореф. дис. . канд. техн. наук- Воронеж- 1967,- 23 с.

126. Шмырева Ж.В., Клочкова АС., Крышка АЮ. Кятионит КБ-2П-05 как носитель глюкоамилазы //Теория и практика сорбционных процессов.-1983.-№16,-С, 55-57.

127. Зидус Л.Х Физико-химические исследования механизма инактивации ферментов //Биофизика- 1966,- Т. 2- Вып. 4,- С. 601 618.

128. Atkinson A The purification of microbial enzymes. Process Hodiern-1973.- № 8 P. 9.

129. Barton L.L., Georgi C.E., Lineback D.R. //Journal of Bacteriology.- 1972-V. 111.-P. 771.

130. Bendetskii KM, Yarovenko V.L., Sanatorova T.P. //Biokhimia- 1977,- V. 39.- P. 802

131. Bode HE. Uiited States Patent 3.- 1966.- V. 249,- p. 514.

132. Gorman J., Langlikke AF. Action of mold Enzyme in Starch Scarification //Cereal Chem.- 1948,- V. 125.- P. 190- 194.

133. Gorman, J. Uiited States Patent 3,- 1968,- P. 380, 891.

134. Davis B.J. Eies electrophoresis. 11. Method and application to human serum proteins //Ann. №4. Asad. Sei.- 1974,- Vol. 121,- P. 404-427.

135. Day D.F. Current Mcrobiology.- 1978,- № 1.- p. 181.

136. Dixon MM, Fogarty w.M Proceedings of the Society for General Microbiology.- 1975,-№2,-p. 80.

137. Dröper NR. "Ridge analysis" of Responce urfaces /Technometrics.- 1963.-№4- P. 3-18.

138. Durratriu V., Bulacovshi V., Constantinescu D. //Cellulose Chemistry and Technology.- 1969.- V. 13.-p. 391.

139. Edsall J. Protein. V. 1. ed. H Neurath, K Walley. Acad. Press.- 1958,- № 4.-P. 990.

140. Eggermont E. // J. Biochem- 1964,- Vol. 12,- №> 14,- P. 483.

141. Finch P., Leonard P.A Comparative studies on giucoamylases isolated from a strain of aspergillus Starke, 1978,- V. 30,- № 10.- P. 341.

142. Fleming I.D., Stone B.A //Hochem J., 1965,- V. 97.- P. 13.

143. Freedberg I.M, Levin Y., Kay CM //Biochemica et Biophysica Acta-1975,- V. 391,- P. 361.

144. Gillifand R B. //J. Inst. Brew.-1966,- Vol. 72- № 3,- P. 271.

145. Graesbeck C., Rase HF. Immobilized ghicoamvlase enzym sistem for continuous of dextrose//Ind. Eng. Chem. Prod. Res. Deveiop.- 1972.- № 11.- P. 74.

146. Hamauzu Z, Hromi K, Qno S. //Journal of Hochemistry, Tokyo.- 1965,-V. 57,- P. 39.

147. Hayashibara Co. British Patent 1,- 1969,- P. 268, 96.

148. Hayashida S., Kurasaki S., Nakao O. //Agric. Hoi. Chem- 1982.- V. 48,- № 1,-P. 83-89.

149. Hayashida S., Nomura T., Yoshino E., Hondo M //Agricultura and Biological Chemistry- 1976.- V. 40.- P. 141.

150. Hopkins RH, Kulka D. Archives of Biochemistry and Application.- 1957.-V. 69,- P. 45.

151. Jablonski E, Deluca M Properties and uses of immobilized light emitting ename systems from Beneckea harvegi //Qin. Chem- 1979,- V. 25,- № 9,- P. 1622-1627.

152. Karicka L.J., Green K Immobilized biolumminesceiit enzymes //Trends Analit. Chem- 1983.- V. 2.- № 1.- P. 244-247.

153. Kindle KL. Characteristics and production of thermostable a-amylase //'Appl. fiochem Biotechnol.- 1983,- V. 8,- P. 153-170.

154. King N.J. //Biochemical Journal.- 1967,- V. 105,- P. 577.

155. Kond Wei, 2 hou Hoi. // J. Chem Technol. and Biotechnol.- 1994.- V. 15.-№ 5.- P. 681 684.

156. Knruchima M, Sato J., Kitahara K //Journal of the Agricultural Chemical Society of Japan.- 1974,- V. 48,- P. 665.

157. Lilly M.D., Sharp AK The Kinetics of enzymes attached to -water insoluble polymers. The Chemical Engineer.- 1972,- N° 215,- P. 12-18.

158. Lineback D.R, Bauman W.E. Properties of glucoamylase from Aspergillus phoemcis.- Carbohyd. Res.- 1970,- V. 14,- P. 341.

159. Lowiy O.H, Rosebrough N.H, Forr A.L. Protein estimation with. Fo.in phenol reagent //J. Biol. Chem- 1951,- Vol. 193,- № 2,- P. 265 275.

160. Marmera D.J., Rowe KZ //Carbohyd. Res.- 1969,- Vol. 9,- № 14,- P. 444.

161. Marsh D.R, Lee Y.Y. Immobilized glucoamylase on prous glass. //Biotechnol. Biotng.- 1973,- № 15. P. 483 492.

162. Marshall J.J. In: Mechanisms of Saccharide Polymerization and Depolym-erization (J.J. Marshall, ed). //Academic Press, New York- 1980,- P. 119.

163. Mcdeary B. V., Anderson MA //Carbohydrate Research.- 1980.- V. 86,- P. 77.

164. Menchum ZD, Colvin MJ., Braymer HD. Chemical and phisicai studies of Neurospora crassa invortase. Molecular weight, amino acid and carbohydratecomposition and qiiatemary structure //Biochemistry'.- 1971,- V. 10.- № 2.- P. 326 332.

165. Mchelena V. V., Castillo F.J. Production of amylase by Aspergillus foetidus on rise flour medium and characteriation of the enzyme //J. Appl. Bacteriol.-1984.-V. 56,- P. 395-407.

166. Mtsue T., Saha B.C., Ueda S. //Journal of Applied Biochemistry.- 1979- V. 1,- P. 410.

167. Monta Y., Shimizu K, Ohga M //Agricultural and Biological Chemistry.-1966,- V. 30,- P. 114.

168. Moriyama S., Matsuno R, Nakanishi K. //Agricultural and Hological Chemistry.-1980,- V. 44.- P. 2763.

169. Murayama T., Ishilcawa T. //Journal of Bacteriology'.- 1973,- № 115,- P. 796.

170. Qno, S., Hromi, K. And Pfemauzu, Z I. //Jumal of Hodiemistryr. Tokyo1965.- V. 57,- P. 34.

171. Oteng Gvang K, Moulin G., Galzy P. Zeitschrift fur Allgemeine Mikrobiologie.- 1981,- V. 21,- P. 537.

172. Pazur J.H, Ando T. //Journal of Biological Chemistn.- 1959.- V. 234.- P.1966.

173. Pazur J.H, Knüll HR., Cepure A //Carbohydrate Research.- 1971.- V. 20.-P. 83.

174. Pazur J.H, Tommaga Y., Forsberg L.S. //Carbohydr. Res.- 1980.- V. 84,- P. 103-114.

175. Pestana F., Castillo F.J. Giucoamylase production by Aspergillus awamori on rise fluor nidium and partial characterization of the enzyme //Mircen J. App. microbiol. Hotechnol.- 1985,- V. 1,- № 3,- P. 225 237.

176. Phillips L.L., Caldwell ML. A study of the purification and properties of glucose forming amylase from Rh. delemar. Giucoamylase ill. Am Chem Soc.-1951,- V. 73,- P. 3559-3563.

177. Quader MA, Kausar T. //Pakistan Journal of Scientific and Industrial Research.- 1971,- V. 14,- p. 247

178. Rosevear A Immobilized biocatalysts-acritical review //J. Chem. Technol. Biotechnol.- 1984,- V. 34,- P. 127-150

179. Spenser Martins I., van Uden N. European Journal of Applied Microbiology and Biotechnology.- 1979,- V. 6.- P. 241.

180. Sukhumavasi J., Kato K //'Ferment. Technol.- 1978,- V. 56,- P. 279 288.

181. Svensson B., Larsen K, Svendsen I. //Carlsberg Res. Communs.- 1983,- V. 48,- P. 529-544.

182. Svensson B., Sierks MR //Biochem.- 1992. V. 5.- № 7. - P. 29 - 44.

183. Takahashi T., Inokuchi N. Irie M //Journal of Biochemistry, Tokyo.- 1981.-V. 89,- P. 125.

184. Taylor P.M, Napier E.J. Fleming I.D. //Carbohydrate Research.- 1978.- V. 61,- P. 301.

185. Ueda S. In: Mechanisms of Saccharide Polymerization and Dspolymeriza-tion (J. J. Marshall, ed.) //Academic Press, New York- 1980.- P. 55.

186. Underkofler, L.A, Denault, L.J., Hou, E.F. //Die Starke.- 1965.- V. 17,- P. 179.

187. Voitkova Lepshikova A, Kotskova - Kratokhilova A //Mcrobiologiya-1966,- V. 35,- P. 773.

188. Watanade K, Fukirnbara T. //Agricultural and Biological Chemistry.- 1973.-V. 37,- P. 2755.

189. Watanade K, Fukirnbara T. //Journal of Fermentation Technology.- 1965.-V. 43,- P. 690.

190. Weetal H. Immobilized Hochemicals and Affinity Chromatography //Ed. RB. Dunlap.- Plenum Press.- 1974,- V. 42,- P. 191 212.

191. Weetai H. Immobilized Hochenicals and Affinity Chromatography //Ed. RB. Dunlap.- Plenum Press.- 1974,- V. 42.- P. 191 212.

192. Winkler K., Ruttloff H, Zi elder F. //Zeitschnft fur Allgemeine Mkrobiolo-gie- 1919.- V. 19.- P. 517 577.153

193. Xiao Cha, Hi Zhou, Weili. //J. Chem Techno! and Biotechnol.- 1990.- V. 47,- № 2- P. 161 169.

194. Yamasaki Y., Suzuki Y. //Agricultural and Biological Chemistry.- 1978.- V. 42- P. 971.

195. Yamasaki Y., Suzuki Y., Oawa J. //Agricultural and Hological Chemistry.-1977,-V. 41,-P. 2149.

196. Yamasaki, Suzuki Y, Ozawa J. Three from of a-glycoidase and glucoamy-lase from Aspergillus awamori //Agric. Biol. Chem.- 1977,- V. 41.- № 11,-P.2149- 2161.

197. Yuen S. United States Patent 3.- 1974.- P. 793, 461.154