Глобулин, связывающий половые стероиды, при остеосаркоме у мужчин тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат биологических наук Борисов, Дмитрий Александрович

• Борисов, Дмитрий Александрович
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Борисов, Дмитрий Александрович

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1.

ГЛОБУЛИН, СВЯЗЫВАЮЩИЙ ПОЛОВЫЕ СТЕРОИДЫ, СТЕРОИДНЫЕ ГОРМОНЫ И ИХ РЕЦЕПТОРЫ: ЗНАЧЕНИЕ ДЛЯ КОСТНОЙ СИСТЕМЫ В НОРМЕ И ПРИ РАЗВИТИИ ОПУХОЛЕЙ (обзор литературы).

1.1. ГЛОБУЛИН, СВЯЗЫВАЮЩИЙ ПОЛОВЫЕ СТЕРОИДЫ.

1.2. ДЕЙСТВИЕ СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ НА КЛЕТКУ.

1.3. ВЛИЯНИЕ ПОЛОВЫХ СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ НА ОПУХОЛИ КОСТНОЙ ТКАНИ - ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1.4. РЕЦЕПТОРНАЯ СИСТЕМА ПОЛОВЫХ СТЕРОИДОВ

В КОСТНОЙ ТКАНИ.

1.5. ПОЛОВЫЕ СТЕРОИДНЫЕ ГОРМОНЫ

И ОПУХОЛИ КОСТЕЙ ЧЕЛОВЕКА.

Глава 2.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Общая характеристика обследованных больных.

2.2. Лабораторные эндокринологические методы исследования.

2.2.1. Методы определения гормонов в сыворотке крови больных.

2.2.2. Методы определения основных белков крови, транспортирующих андрогены и эстрогены в сыворотке крови - глобулина, связывающего половые стероиды (ГСПС) и альбумина.

2.2.3. ОЧИСТКА РАДИОАКТИВНЫХ ПОЛОВЫХ СТЕРОИДОВ КАКЛИГАНДОВ.

2.2.4. Определение рецепторов андрогенов (РА) и эстрогенов (РЭ) в опухолях.

2.2.5. Метод определения простагландинов серии Е.

2.2.6. Метод определения кальмодулина.

2.2.7. Метод определения цАМФ.

2.2.8. Математический анализ результатов исследований.

ГЛАВА 3.

ОСОБЕННОСТИ И ВЗАИМОСВЯЗЬ ПРОДУКЦИИ ГСПС, ПОЛОВЫХ СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ В КРОВИ, их РЕЦЕПТОРОВ, ПРОСТАГЛАНДИНОВ СЕРИИ Е, цАМФ В ОПУХОЛИ У ПОДРОСТКОВ МУЖСКОГО ПОЛА, БОЛЬНЫХ

ОСТЕОСАРКОМОЙ И В КОНТРОЛЕ.

3.1. Особенности и взаимосвязь продукции ГСПС, половых стероидных гормонов и их рецепторов у подростков мужского пола, больных остеосаркомой и в контроле.

3.1.1. ГСПС в сыворотке крови больных остеосаркомой.

3.1.2. Общий тестостерон и ГСПС в сыворотке крови больных остеосаркомой.

3.1.3. Общий эстрадиол-17р и ГСПС в сыворотке крови больных остеосаркомой.

3.1.4. Уровни ГСПС в сыворотке крови больных остеосаркомой и рецепторы андрогенов и эстрогенов в опухоли.

3.1.5. уровни ГСПС в сыворотке крови больных остеосаркомой и рецепторы андрогенов в опухоли.

3.1.6. Уровни ГСПС и индексы свободных стероидов у больных остеосаркомой.

3.1.7. Уровни ГСПС в сыворотке крови больных остеосаркомой в зависимости от лечения.

3.1.9. Связь уровней ГСПС в сыворотке крови больных остеосаркомой с показателями кальмодулина в первичной опухоли.

3.1.10. Связь уровней ГСПС в сыворотке крови больных остеосаркомой с показателями безрецидивной выживаемости.

3.1.11. Связь уровней ГСПС и ЛГ в сыворотке крови больных остеосаркомой.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Глобулин, связывающий половые стероиды, при остеосаркоме у мужчин»

За последние годы отмечены успехи в лечении первичных опухолей костей, которые связаны с широким использованием адъ-ювантной и неоадъювантной химиотерапии в комплексном лечении костных сарком (Трапезников H.H. и соавт., 1986, 2001). Однако не у всех больных отмечается эффект от химиотерапии и это требует разработки методов, позволяющих оценить чувствительность опухоли к лечению. При этом, анализ клинической значимости биохимических показателей в лечении больных саркомами кости следует проводить с учетом морфологических критериев степени выраженности лечебного патоморфоза первичной опухоли, которые в настоящее время считаются наиболее важными факторами в оценке клинического течения и прогнозе этих заболеваний (Автандилов Г.Г., 1980; Кушлинский Н.Е. и соавт., 1995).

Известно, что половые стероидные гормоны принимают активное участие в регуляции нормального развития и функционирования костной системы, а также в механизмах бластомогенеза костей у человека и животных (Кушлинский Н.Е. и соавт., 1999; Adamson U. и соавт., 1980; Bianchi G. и соавт., 1989).

Интерес к метаболизму половых стероидов активизировался после открытия в 1971 г. глобулина, связывающего и транспортирующего половые стероиды — тестостерон и эстрадно л 17ß (West-phal U., 1976). В настоящее время глобулин, связывающий половые стероиды (ГСПС) считается основным транспортным белком в сыворотке крови для тестостерона и эстрадиола-17р. Белок синтезируется гепатоцитами и помимо транспортной функции служит буфером в поддержании на постоянном уровне биологически активной фракции половых стероидов в сыворотке крови. (Fortunati N., 1999). Фракция свободных стероидов крови считается биологически активной, поскольку в клетки-мишени проникают только свободные гормоны и вызывают в них ранние и поздние биологические ответы (Мейнуоринг У., 1976).

Уровни ГСПС в сыворотке крови, по всей вероятности, могут изменяться при лечении онкологических больных и на разных этапах опухолевой прогрессии. Поскольку в клетки-мишени проникают только свободные стероиды и стимулируют процессы их роста, активность воздействия их может зависеть от уровня относительной свободной фракции гормона в сыворотке крови больных. Отмечена обратная корреляционная зависимость между свободной фракцией половых стероидов в крови и концентрацией ГСПС. По мнению ряда авторов, уровень ГСПС считается более чувствительным показателем в оценке скрытой гиперэстрогенемии или гиперандрогенемии, чем определение содержания андрогенов и эстрогенов в сыворотке крови (Трапезников H.H. и соавт., 1996; Farnsworth W.S., 1996).

На основании вышеизложенного следует полагать, что от концентрации ГСПС может зависеть уровень фракции биологически активного стероида, а это может иметь значение в патогенезе новообразований кости и отразиться на течении опухолевого процесса.

Анализ литературы показывает, что в настоящее время проведено мало клинических исследований, посвященных изучению эндокринного статуса больных новообразованиями кости, хотя известно, что эти опухоли наиболее часто встречаются в пубертатном периоде, когда начинают активно функционировать половые железы (Кушлинский Н.Е., 1991; Frank G.R., 1995).

Изменение на современном этапе методологических подходов в оценке функционального состояния эндокринной системы, расширение представлений относительно механизмов действия половых стероидных гормонов, позволяет изменить взгляды на проблему гормоночувствительности опухоли, а также расширить спектр гор-монозависимых новообразований и арсенал различных видов эндокринной терапии у онкологических больных.

Следовательно, проведение подобного исследования, посвященного изучению глобулина, связывающего половые стероиды в сыворотке крови больных новообразованиями кости и свободных фракций половых стероидных гормонов (тестостерона и эстрадиола-17(3), позволит оценить роль этого белка в клиническом течении заболевания и, возможно, предложить новые критерии прогноза болезни.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ПЛАНИРУЕМОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

Цель исследования — сравнительное изучение концентрации глобулина, связывающего половые стероиды, и его связь с экспрессией в первичной опухоли простагландинов серии Е, тестостерона, цАМФ, рецепторов 5 а-дигидротестостерона и эстрадиола-17|3, а также с уровнями половых стероидных гормонов в сыворотке крови больных остеосаркомой для изучения их роли в прогнозе заболевания.

Достижение указанной цели требовало решения следующих задач:

1. Провести анализ данных сравнительного определения общей концентрации половых стероидных гормонов (тестостерона, эстрадиола-17(3) и глобулина, связывающего половые стероиды в сыворотке крови, больных остеосаркомой и в контроле.

2. Изучить уровни глобулина, связывающего половые стероиды, в крови больных с учетом основных клинических и мофрологических показателей заболевания.

3. Изучить особенности базальной секреции общего тестостерона и эстрадиола-17(3, глобулина, связывающего половые стероиды, у больных остеосаркомой кости с учетом вида опухоли, возраста и пола пациентов, морфологического варианта строения и степени дифференцировки опухоли, стадии заболевания.

4. Выявить зависимость между уровнем, частотой выявления рецепторов стероидных гормонов (5а-дигидротестостерона и эстрадиола-17(3) в первичной опухоли и концентрацией глобулина, связывающего половые стероиды, в крови больных остеосаркомой.

5. Выявить связь между уровнем глобулина, связывающего половые стероиды, цАМФ, простагландинами серии Е, рецепторами андрогенов и эстрогенов в опухоли и общим тестостероном и эстрадиолом-17|3 в сыворотке крови больных остеосаркомой и рецепторами стероидных гормонов в опухоли и их роли в оценке клинической значимости исследованных показателей.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЯ

В данном исследовании впервые будет представлен анализ корреляционной связи между уровнями глобулина, связывающего половые стероиды в крови и экспрессией простагландинов серии Е, цАМФ, РА и РЭ в опухоли у больных остеосаркомой, показана связь исследуемых показателей с клиническими и морфологическими критериями заболевания и его прогнозом.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа представляет большой научно-практический интерес для анализа роли глобулина, связывающего половые стероиды, стероидных гормонов (тестостерон, эстрадиол-17(В) и их рецепторов в патогенетических механизмах роста и метастазирования остеосар-комы, а также корреляционная связь исследуемых показателей с уровнями экспрессии простагландинов серии Е и цАМФ в прогнозе заболевания.

Результаты проведенного исследования, возможно, позволят дифференцированно подходить к выбору адекватных методов лечения и дадут новые критерии в определении прогноза метастазирования и эффективности лечения вышеуказанных заболеваний.

Апробация работы. Результаты диссертации доложены на VII Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2000г.).

Диссертационная работа апробирована на совместной научной конференции с участием хирургических отделений общей онкологии, отделения химиотерапии и комбинированного лечения злокачественных опухолей, хирургического отделения опухолей молочных желез, лаборатории клинической биохимии НИИ клинической онкологии и лаборатории биохимии опухолей НИИ канцерогенеза Рос

10 сийского онкологического научного центра им. Н.Н.Блохина РАМН 03 июля 2001 года.

Публикации. По теме диссертации опубликованы 3 научные работы.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, главы «Материалы и методы», главы собственных результатов исследования, обсуждения полученных результатов, выводов и указателя литературы. Список литературы включает 41 отечественных и 88 зарубежных источников. Диссертация иллюстрирована 5 таблицами и 35 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Борисов, Дмитрий Александрович

ВЫВОДЫ

1. Несмотря на широкие пределы колебания концентраций ГСПС в сыворотке крови практически здоровых (11-30 нмолъ/л) и больных остеосаркомой (18-60 нмоль/л) лиц мужского пола, обнаружено, что средние значения ГСПГ были ниже в группе больных первичной остеосаркомой кости по сравнению с группой контроля и эта закономерность сохранялась как во 2-м, так и 3-м десятилетиях жизни.

2. Самые низкие показатели ГСПС выявлены в сыворотке крови больных остеосаркомой при генерализации опухолевого процесса - обнаружении гематогенных метастазов в легких. Адъювантная химиотерапия адриамицином в течение 6 месяцев приводила к увеличению концентрации ГСПС в сыворотке крови пациентов до его значений в контроле.

3. Не зависимо от возраста, при анализе группы практически здоровых людей и общей группы больных остеосаркомой, не выявлено достоверной зависимости между уровнем ГСПС и концентрацией общего тестостерона и эстрадиола-17Р в сыворотке крови. Однако во втором десятилетии жизни у больных остеосаркомой обнаружена обратная связь между показателями ГСПС и общим тестостероном и прямая - между ГСПС и общим эстрадиолом-17(3.

4. Анализ взаимосвязи концентраций ГСПС в сыворотке крови с уровнями рецепторов стероидных гормонов (РА и РЭ) в остеосар-комах больных выявил следующую закономерность: между РА в первичной опухоли и содержанием ГСПС в сыворотке крови выявлена обратная зависимость, тогда как между РЭ и ГСПС - прямая зависимость.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Борисов, Дмитрий Александрович, 2001 год

1. Автандилов Г.Г. Введение в количественную патологическую морфологию. М. - Медицина. - 1980. - 216 С.

2. Бабкина Т.В., Дегтярь В.Г., Кушлинский Н.Е. и соавт. Активность основных ферментов метаболизма андрогенов в опухолях костей. Клиническая лабораторная диагностика.-1999.-№11.-С.28.

3. Бассалык Л.С. (ред.) Рецепторы стероидных гормонов в опухолях. М.: Медицина, 1987.-284C.

4. Бассалык Л.С., Кадагидзе З.Г., Кушлинский Н.Е. Простагландины и рак. Обзорная информация, ВНИИМИ, 1988.-70С.

5. Бассалык Л.С., Кушлинский Н.Е., Соловьев Ю.Н., Синюков П.А., Феденко А.Н., Еремин В.Л., Исследование рецепторов стероидных гормонов в остеогенных саркомах. Вопросы онкологии. -1989. - т 35. - №6. - с. 658-663.

6. Варфоломеев С.Д., Мевх Л.Г. Простагландины молекулярные регуляторы.-М.-Из-во МГУ.-1985.-307С.

7. Виноградова Т.П. Опухоли костей.-М.-Медицина.-1973.

8. Волков М.В. Болезни костей у детей.-М.-Медицина.-1985.

9. Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Активаторы плазминогена уро-киназного и тканевого типов и их ингибитор PAI-I в опухолях человека. БЭБМ.-2001 .-т.131,№1 .-с.81-87.

10. Гистологическая классификация костных опухолей.-ВОЗ.-Женева.-1974.

11. Дегтярь В.Г., Кушлинский Н.Е. За-стероиддегидрогеназа в тканях животных и человека. Биохимия.-2001.-т.66,№3.-с.318-331.

12. Дегтярь В.Г., Кушлинский Н.Е., Фарта Л.Я. Способ статистической обработки результатов определения рецепторов стероидных гормонов. Математические модели в эндокринологии и иммунологии. Каунас-Друскининкай. - 1985. - с. 37-39.

13. Дегтярь В.Г., Милосердое Ю.В., Кушлинский Н.Е. Количественная радиометрия ЗН.-андрогенов на пластинках с алюминиевой подложкой. Биоорганическая химия. - 1983. - т.9. - №10. - с. 14161421.

14. Дегтярь В.Г., Милосердое Ю.В., Кушлинский Н Е. Количественное определение белков в цитозольных фракциях тканей мишеней половых стероидов человека и крысы после осаждения протами-на сульфатом. Вопр. Мед. химии. 1984. - №1. - с. 122-126,

15. Дегтярь В.Г., Милосердое Ю.В. Кушлинский Н.Е. Метод количественного определения андрогенов при изучении метаболизма. -Вопр. Мед. химии. 1982. - №6. - с. 131-134.

16. Джеффкоут С.Л. Андрогены и антиандрогенная терапия. М. -Медицина. - 1985. - 230 С.

17. Дильман В.М. Эндокринологическая онкология.-Л.-Медицина.-1983.-408С.

18. Жуковский М. А. Нарушения полового развития.-М.-Медицина.-1989.-267 С.

19. Корницкий М.А. Влияние андрогенов на развитие опухолей костей в эексперименте. Вопросы онкологии. - 1974. - т.20. - №11. - с. 26-31.

20. Кушлинский Н.Е., Бассалык Л.С., Соловьев Ю.Н. и соавт. Половые стероидные гормоны и остеогенная саркома. Сообщение 2. Чувствительность остеогенной саркомы к андрогенам и эстрогенам. Вестник ОНЦ АМН СССР.-1999. - №2. - с. 31-36.

21. Кушлинский Н.Е., Бассалык Л.С., Соловьев Ю.Н. и соавт. Половые стероидные гормоны и остеогенная саркома. Сообщение 1. Гиперандрогения в патогенезе остеогенной саркомы. Вестник ОНЦ РАМН. - 1991. - №2. - с. 7-12.

22. Кушлинский Н.Е., Дегтярь В.Г., Бабкина И.В. и соавт. Опухоли костей и метаболизм андрогенов. Вестник ОНЦ им Н.Н.Юлохина РАМН.-1999.-№3.-с.З-12.

23. Кушлинский Н.Е., Костылева О.И., Радченко A.A. и соавт. Рецепторы эпидермального фактора роста и эстрогенов в первичных опухолях костей. БЭБМ.-1996.-№7.-с.78-82.

24. Кушлинский Н.Е., Соловьев Ю.Н. Простагландины серии Е в различных морфологических вариантах остеогенной саркомы и оценке степени лечебного патоморфоза опухоли // Архив патологии. -1995.-Т. 57, №5. С. 25-30.

25. Кушлинский Н.Е., Соловьев Ю.Н., Бабкина И.В. и соавт. Экспрессия ингибитора апоптоза растворимого Fas-антигена у больных со злокачественными и доброкачественными новообразованиями костей. Вестник PAMH.-2001.-№3.-c.3-8.

26. Кушлинский Н.Е., Соловьев Ю.Н., Трапезников H.H. Андрогены иаутокринные и паракринные регуляторы в механизмах опухолевого роста при остеосаркоме. Тезисы докладов «Второго Российского Конгресса по патофизиологии».-Москва.-2000.-е. 165-166.

27. Любимова Н.В., Кушлинский Н.Е. Маркеры костного ремоделиро-вания: общие представления и клиническое значение при поражении скелета у онкологических больных. Вопросы онкологии.-2001.-т.47,№2.-с.18-33.

28. Мейнуоринг У. Механизмы действия андрогенов. М. - Мир. -1976.-с. 224.

29. Милку Ш.М. Терапия эндокринных заболеваний.-Будапешт.-Медицина.-1969.

30. Розен В.Б., Смирнов А.Н. Рецепторы и стероидные гормоны. М. - Издательство МГУ - 1981. - 286С.

31. Сергеев П.В., Шимановский Н.Л. Рецепторы. М. - Медицина. -1987. - 397С.

32. Смирнова И.О., Соловьев Ю.Н. Гормональная решуляция костной ткани и опухоли скелета. Архив патологии. - 1986. - №1. -с. 82-86.

33. Тепермен Дж., Тепермен X. Физиология обмена и эндокринной системы. М.: Мир, 1989. 656 с.

34. Ткачук В.А. Введение в молекулярную эндокринологию. М. -Издательство МГУ. - 1983. - с. 88-89.

35. Трапезников H.H., Алиев М.Д., Мачак Г.Н. и соавт. Современные взгляды на проблему лечения остеосаркомы конечностей. «Высокие технологии в онкологии».-Материалы V Всероссийского съезда онкологов.-Казань.-2000.-т,3.-с.398-400.

36. Трапезников H.H., Еремина Л.А., Амирасланов А.Т. и соавт. Химиотерапия в лечении первичных злокачественных опухолей костей.-Тер.архив.-1988.-т.9,№9.-с. 132-136.

37. Трапезников Н.Н., Еремина Л.А., Амирасланов А.Т., Синюков П.А. Опухоли костей.-М.-Медицина.-1986.-303С.

38. Трапезников Н.Н., Кушлинский Н.Е., Соловьев Ю.Н., Алиев М.Д. Остеогенная саркома и андрогены. Бюлл. Экспер. Биол. Мед. -1996.-№10.-С625-629.

39. Юсифов А.И., Огнерубов Н.А., Кушлинский Н.Е. Роль протеаз в инвазии и метастазировании злокачественных опухолей. Активаторы и ингибиторы активаторов плазминогена. Сборник научных трудов «новое в онкологии», Воронеж, Выпуск 4.-1999.-с.301-327.

40. Ackerman Tr.RJ., Hamilton D.W. Testosterone metabolism in male rat epiphysis.-Calcif.Tissue Int.-1976.-Vol.20.-p.31-38.

41. Adamson U., Brostrom L.A., Efendic S., Hall K. Glucose tolerance growth hormone and somatomedine levels in osteosarcoma patients. Acta. Endocrinologica. - 1980. - Vol. 94. - p. 517-522.

42. Asselin J., Melancon R., Gordean Y. et al. Specific binding oh 3H.-methyltrienolone to both progestin and androgen binding components in human benign prostatic hypertrophy (BPH). J. Steroid Biochem. -1979.-Vol. 10.-p. 483-486.

43. AudiL., Carrascosa A., BallabrigaA. Androgen metabolism by human fetal epiphyseal cartilage and its chondrocytes in primary culture.-J. Clin. Endocrinol. Metab. 1984. - Vol.58.-p.919-825.

44. Avvakumov G.V., Muller Y.A., Hammond G.L., Steroid-binding Specificity of Human sex Hormone-binding Globulin Is Influenced by Occupancy of a Zinc-binding Site. The Journal of Biological Chemistry. -2000. - Vol. 275. - p. 25920-25925.

45. Bajetta E., Zzilembo N., Bichiasao E. et al. Steroidal aromatase inhibitors in elderly patients. Crit Rev Oncol Hematol.- 2000,- Vol. 33.p. 137-42.

46. Belinsky G.S. et al. Direct measurement of hormone-induced acidification in intact bone. J. Bone. Miner. Res. - 2000. - Mar. -15(3): 550-8

47. Bianchi G., Costantini SM Anserini P et al. Effects of gonadotropin-releasing hormone agonist on uterine fibroids and bone density. -Maturitas. 1989. - Vol. 11. - p. 179-185

48. Boonen S., Cheng XG, Nijs J. et al. Factors associated with cortical and trabecular bone loss as quantified by peripheral computed tomography (pQCT) at the ultradistal radius in aging women //Calciff.-Tissue-lnt. 1997. - v. 60, №2 - P. 164-170.

49. Bowler W.B. et al. Signaling in Human Osteoblasts by Extracellular Nucleotides. J. Biol. Chem. - 1999. - May. - 274 (20): 14315-24

50. Chamness G.C., Huff K.t McGuire W.L. Protamine precipitatedestro-gen receptor: a solid-phase ligand exchange assay. Steroids. -1975. -Vol. 112. - p. 284-289.

51. Chen Y.J. et al The response of camp and DNA synthesis in rat osteosarcoma cells to mechanically deformed culture. Procc. Natl. Sei. Counc. Repub. China. - 1999. - Jul. - 23(3): 114-9

52. Ciaccio M., Rivarola M., Belgorosky A. Decrease of serum sex hormone-binding globulin as a mark of androgen sensitivity. Correlation with clinical response. Acta Endocrinal. - 1989. - Vol. 120.- p.540.

53. Civitelli R. et al Single-cell analysis of cyclic AMP response to parathyroid hormone in osteosarcoma cells. J. Bone. Miner. Res.1994.-Sep.-9(9): 1407-17

54. Colston K.W., King R.J., Hayward J., Fraser D.I. et al. Estrogen receptors and human bone cells: immunocytochemical studies.-J.Bone Miner. Res. -1989. Vol.4.- p.625-630.

55. Compston J.E. Sex Steroids and Bone. Physiological Reviews. -2001. - Vol. 81. No.1.

56. Craft A.W., Rosen G., Arndt C. et al. Advances in the treatment of bone tumours. Oncology Review. - 1996. - Vol. 11. - No.6.

57. Dahlin D.C., Unni K.K. Bone tumors: general aspects and data on 8.542 cases; 4th ed. Spring-field I.L., Thomas Ch.C.-1986.

58. Donahue H.J. et al. Cell-to-cell communication in osteoblastic network cell line-dependent regulation of gap junction function. J. Bone. Miner. Res. - 1995. - Jun. - 10(6): 881-9

59. Drissi H et al Calcitonin gene-related peptide (CGRP) increases intracellular free Ca2+ concentrations but not cyclic AMP formation in CGRP receptor-positive osteosarcoma cells (OHS-4). Cytokine.1999.-Mar.-11(3): 200-7

60. Englebienne P. The serum steroid transport proteins: biochemistry and clinical significance. Mol Aspects Med 1984 - Vol. 7(4). - p. 313-96

61. Falahati-Nini A., Riggs B.-L, Atkinson E.J. et al. Relative contributions of testosterone and estrogen in regulating bone resorption and formation in normal elderly men. The Journal of Clinical Investigation.2000. -Vol. 106. -No. 12.

62. Farnsworth W.E. Roles of estrogen and SHBG in prostate physiology. Prostate. - 1996. - Vol.28. - p. 17-23.

63. Farnsworth W.S. Roles of estrogen and SHBG in prostatic physiology. -The Prostate. 1996. - Vol. 28. - p. 17-23.

64. Foresta C., Ruzza G., Mioni R. Osteoporosis and decline of gonadal function in the elderly male.-Hormone Res.-1984.-Vol.19.-p. 18-22.

65. Fortunati N. Sex hormone-binding globulin: not only a transport protein. What news is around the corner? J Endocrinol Invest. - 1999. -Vol.22.- p.223-34.

66. Frank G.R. The role of estrogen in pubertal skeletal physiology: epiphyseal maturation and mineralization of the skeleton.-Acta Paediatrica.-1995.-Vol 84.-p.627-630.

67. Fryer C.J., Kinyamu H.K., Rogatsky I., 'et al. Selective Activation of the Glucocorticoid Receptor by Steroid Antagonists in Human Breast Cancer and Osteosarcoma Cells. The Journal of Biological Chemistry. - 2000. - Vol.275, p.17771-17777.

68. Fukayama S., Tashjian A. Direct modulation by androgens of the response of human bone cells (SaOS) to human parathyroid hormone (PTH) and PTH-related protein. Endocrinology. - 1989. - Vol. 135. -p. 1789-1794.

69. Germain P., Egloff M., Kiefer H. Et al. Use of confocal microscopy to localize the SHBG interaction with human breast cancer cell lines a comparison with serum albumin interaction. //Cell-Mol-Biol-Noisy-le-grand. -1997. - v. 43, №4 - P. 501-508.

70. Gu W.X et al. Mutual Up-Regulation of Thyroid Hormones and Parathyroid Hormones Receptors in Rat Osteoblastic Osteosarcoma 17/2.8 Cells. Endocrinology. - 2000. - 142 (1): 157-164

71. Guise T.A., Mundy G.R. Cancer and Bone. Endocrine Reviews. -1998.- Vol.19.-p. 18-54.

72. Hammond G.L. Determinants of steroid hormone bioavailability. -Biochem Soc Trans 1997. - Vol. 25,- p.577-82.

73. Haraldson I., Nilson A. Potentiating and inhibiting effects of steroidhormones on the incedence of AOSR indioed osteosarcoma. Acta. Oncol. - 1988. - Vol. 27. - p. 293-398.

74. Henderson B., Feigelson H.S. Hormonal carcinogenesis.- Carcinogenesis.- 2000. Vol. 21. - p.427-433.

75. Hoekman K., Papapoulos S.E., Peters A.C.B. Characteristics and bisphos-phonate treatment of a patient with Juvenile osteoporosis.-J.Clin.Endocrinol.Metabol- 1985. Vol.61.-p.952-956.

76. Houmard J.A., McCulley C., Shinebarger M.H. et al. Effects of exercise training on plasma androgens in men. Horm Metab Res. -1994. -Vol. 26. - p.297-300.

77. Israels E.D., Israels L.G. The Cell Cycle. Stem Cells. 2001. - Vol 19.-p.88-91.

78. Jaffe R.B. Testosterone metabolism in target tissues: hypothalamic and pi-tuitrary tissues of the adult rat and human fetus, and the immature rat epiphy-sis.-Steroids. 1969. -Vol.l4.-p.483-489.

79. Johnston C.C., Hui S.L., Witt R.M. Early menopausal changes in bone mass and sex steroids.-J.Clin.Endocrinol. Metabol. 1985.-Vol.61.-p.905-911.

80. Joseph D.R., O'Brein D.A., Sullivan P.M. etal. Overexpression of an-drogen-binding protein/sex hormone-binding globulin in male transgenic mice: tissue distribution and phenotypic disorders. Biology of Reproduction. 1997. - Vol. 56. - p. 21-32.

81. Kanamori M, Matsui H, Yudoh K et al. Effects of dibutaril cyclic adenosine monophosphste nucleolar organizer regions and epidermal growth factor receptor of Dunn osteosarcoma cells. J. Exp. Clin. Cancer. Res. - 1997. - Jun. - 16(2): 135-9

82. Kapoor P., Luttrell B.M., Williams D., The free androgen index is not valid for adult males. J Steroid Biochem Mol Biol. 1993. - Vol. 45. p. 325-6.

83. Keely E.J., BelshamD.D., Wrogemann K. et al. Partial androgen in-sensitivity are all tissies equal? - Fértil Steril. - 1993. -Vol.60.p.366-8.

84. King R.J.B. Cancer Biology. Addition Wesley Longman Ltd., Edinburg Gate: 1996.-227 p. .

85. Komm B.S., Terpening C.M., Benz D.T. et al. Estrogen binding, receptors MRMA, and biologic response in osteoblast-like osteosarcoma cells.-Science.- 1988.-Vol.241.-N4861.-p.81-84.

86. Liesegang P., Romalo G., Sudman, Wolf L. et al. Human osteoblast-like cells contain specific, saturable, high affinity glucocorticoid, androgen, estrogen and 1,25-dihydroxycholecelciferol receptors. J. Androl. - 1994. - Vol. 15. - p. 194-199.

87. Lippmann M., Huff K. A demonstration of androgen and estrogen receptors in human breast cancer using a new protamine sulfate assays. Cancer (Philad.) 1976. - Vol. 38. - p. 868-874.

88. Lowry O.H., Rosebrough N.Y., Farr A.L. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem. - 1951. - Vol. 193. - p. 265-275.

89. Mackinston D., Mason R.M. Pharmacological actions of 17beta-oestradiol on articulage chondrocytes in the absence of oestrogen receptors. Biochim. Biophis. Acta. - 1988. - Vol. 964. - №3. - p. 295302.

90. Marshall R.W., Selby P.L., Chilvers D.C., Hodgkinson A. The effect ofethinyl oestradiol on calcium and bone metabolism in period postmenopausal vomen.-Horm.Metabol.Res. 1984.-Vol.l6.-p.97-99.

91. Meyer S., Brumm C., Stegner H.-E. et al. Intracellular sex hormone-binding globulin (SHBG) in normal and neoplastic breast tissue an additional marker for hormone dependency? //Exp. Clin. Endocrinology. -1994. - v. 102. - P. 334-340.

92. Murota S.J., Tamaoki B.J.Metabolism of progestrone and testosterone by chik embrio cartilage in vitro.-Biochim.Biophis.Acta. 1967.-Vol.137.-p.347-354.

93. Nakhla A.M., Leonard J., Hryb D.J. et al. Sex hormone-binding globulin receptor signal transduction proceeds via a G protein. Steroids. -1999.-Vol. 64.-p.213-6.

94. Partridge N.C. et al. The regulation and regulatory role of collagenase in bone. Crit. Rev. Eukaryot. Gene. Expr. - 1996. - 6(1): 15-27

95. Peters S., Dahmus M. A method of DNA quantitation measurement. -Eur. J. Cancer. 1981. - Vol. 17. - p. 495-601.

96. Pratt C.B. Treatment of osteosarcoma 1972-1997: an American perspective. Pediatr Hematol Oncol. - 1998. - Vol. 15.- p. 207-10.

97. Ribot C., Fromolliers F. Sexual steroids and bone tissue. Ann. Endocrinol. - 1995. - Vol. 56. - p. 49-55.

98. Rilling J.K., Worthman C.M., Campbell B.C. et al. Rations of plasma and salivary testosterone throughout puberty: production versus bioavailability. Steroids. -1996. - Vol. 61. - p.374-8.

99. Schwartz P.E., Naftolin F. Hormonal receptors and therapy. In: Practical Oncology. Berek J.S., Jacker N.F. (eds.). - Baltimare: William-Wilkins/-1989.-p. 589-610.

100. Schweikert H.M.,Wolf L.,Romalo G. Oestrogen formation from andros-tendione in human bone.- Clin. Endocrinol.-1995.-Vol. 43.-P.37-42.

101. Schweikert H.U., Rulf W., Niederle N.,Schafer H.E., Keek E,Kruck F. Testosterone metabolism in human bone.-Acta endocrinol.-1980. Vol.95.-p.258-264.

102. HO.Shono N., Kugino K., Yoshida S. et al. Bone mineral density by ultrasonic measurement in pre- and postmenopausal women relationship with sex hormones and nutritional status //Nippon-Eiseigaku-Zasshi. -1997. - v. 51, №4. - P. 755-762.

103. Siiteri P.K. Simberg N.H. Changing concepts of active androgens in blood. Clin Endocrinol Metab. - 1986. - Vol. 15. - p. 274-58.

104. Siiteri P.K., Murai J.T., Hammond G.L. et al. The serum transport of steroid hormones. Recent. Prog. Horm. Res. - 1982. - Vol. 38. - p. 457-510.

105. Silberberg N., Silberberg R. Steroid hormones and bone in the biochemistry and fhysiology of bone. New York: Academic Press.-1956.-6.624-668.

106. Simpson G.R., Dale E. Serum levels of phosphorus, magnesium and calcium in women utilizing combination oral or longacting injectable progestational contraceptives.- Fertil. Steril.-1972.-Vol.23.-p.326-330.

107. Slemenda C.W., LongcopeC., Zhou L. et al. Sex Steroids and Bone mass in Older Men. J Clin. Invest. - 1997. - Vol. 100. - p. 17551759.

108. Somjen D., Weisman Y., Harrell A., Berger E., Kay A.M. Direct and sex-specific stimulation by sex steroids of creatine kinase activity and DNA synthesis in rat bone. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. -1989. - Vol. 86.-p. 3361-3365.

109. Srivastava R.K., Srivastava A.R., Cho-Chung Y.S. Synergistic effects of 8-chlorocyclic-AMP and retinoic acid on induction of apoptosis in Ewing's sarcoma CHP-10. Clin. Cancer Res. - 1998. - Mar; 4(3): 755-61.

110. Takahashi Y., Corvol M.T., Sanz-Tsagris L., Rappaport R. Biologic effect of testosterone and dihydrotestosterone on rabbit chondrocytes in vitro.-Pediatr.Res.-1978.-p. 1091 (Abstract).

111. Tamaya T. Cellular biology of sex steroid and clinical implication. -Nipon. Naibunpi Gakkai. - Zasshi. - 1993. - Vol. 69. - p. 963-972.

112. Valero-Politi J. Fuentes-Arderiu X. Within-and between-subject biological variations of follitropirvHutropin, testosterone, and sex-hormone-binding globulin in men. Clin Chem. -1993. - Vol 39. -p. 1723-5.

113. Vanderschueren D. Androgens and Bone. //Calcif. Tissue. Int. 1995 -v. 56.-P. 341-346.

114. Watts C.K., Parker M.G., King R.G. //J. Steroid Biochem. 1989. ■ Vol. 34, №1-4. - P. 483-490.

115. Weiss Sh.W., Langloss V.M., Shmookler B.M.et al. Estrogen receptor protein in bone and soft tissue tumors.- Lab.Invest.-1986.-Vol.54.-p.689-694.

116. Westphal U. Steroid-protein interactions II. Monographs on Endocrinology 27. Springer-Verlag, New York, Heidelberg, Berlin, 1986.

117. Wheeler M.J. The determination of bio-available testosterone. //Ann Clin. Biochem. 1995. - v. 32. - P. 345-357.

118. Wold L.E., SpelsbergT., Jiang N., Sim F. Steroid receptors and giant cell tumor of bone.- Curr.Top.Phathol.- 1989.-Vol.80.-p. 153-164.

119. Young M., Nordin B. Effect of natural and artificial menopause on plasma and urinary calcium and phosphorus.- Lancet II.-1967.-p.l 18-120.

120. Zava D.T., Landrum B., Horwitz K.B., McGuire W.L. Androgen receptors assay with 3H.methyltrienolone (R1881) in the presence of progesterone receptors. Endocrinology. - 1979. - Vol. 104. - №4. - p. 1007-1012.