Геномный полиморфизм Fusobacterium Necrophorum и оптимизация гнездовой ПЦР с целью усовершенствования диагностики некробактериоза животных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат биологических наук Юрик, София Антоновна

• Юрик, София Антоновна
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Юрик, София Антоновна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Характеристика возбудителя некробактериоза

1.1.1. Морфология Fusobacterium necrophorum

1.1.2. Культуральные и биохимические свойства

1.2. Диагностика некробактериоза

1.3. Полимеразная цепная реакция.

1.3.1. Выделение ДНК

1.3.2. Подбор праймеров

1.3.3. Постановка полимеразной цепной реакции

1.4. Гнездовая ПЦР (nested PCR)

1.5. Исследование геномного полиморфизма bRAPD-ПЦР

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Геномный полиморфизм Fusobacterium Necrophorum и оптимизация гнездовой ПЦР с целью усовершенствования диагностики некробактериоза животных»

Актуальность проблемы. Некробактериоз - инфекционное заболевание домашних животных, проявляющееся гнойно-некротическим поражением различных тканей и органов. Болезнь встречается у многих видов диких животных, болеет им также человек. Возбудитель заболевания - Fusobacterium necrophorum (Е.А. Бобылева, 1940; О.И. Соломаха, 1973; А.А. Самоловов, 1986; L.H. Hagelskjaer et al., 1998).

Болезнь распространена во многих странах Европы, Северной Америки, Южной Африки, в Австралии (A.L. Lundstrom, 1981; A.M. Russell et al., 1982). В нашей стране некробактериоз регистрируется почти повсеместно, наблюдается у разных видов животных, но чаще среди северных оленей и рогатого скота (В.М. Львов, 1971; О.И. Соломаха, 1972). Болезнь причиняет экономический ущерб за счет снижения многих показателей, в т.ч. молочной продуктивности на 5-25%, интенсивности роста на 25-40% (Ю.Г. Анакина, 1988).

Для профилактики заболевания особое значение имеет достоверный и своевременный диагноз. Для его постановки применяют многочисленные методы: эпизоотологический, клинический, бактериологический, биологический, патологоанатомическое вскрытие. В настоящее время наиболее чувствительным и специфичным признан метод, основанный на выявлении фрагментов генома возбудителя в биологическом материале с помощью полимеразной цепной реакции. Необходимо отметить, что этот метод позволяет обнаружить концентрацию возбудителя в несколько раз меньшую, чем при традиционном бактериологическом исследовании. Это часто приобретает определяющее значение при постановке диагноза, так как в гнойно-некротическом очаге присутствует ассоциация микроорганизмов, а непосредственно возбудитель заболевания Fusobacterium necrophorum находится в небольшом количестве.

ПЦР является методом прямого тестирования, позволяет избежать проблем, связанных с перекрестно-реагирующими антигенами, и интепритация его результатов не зависит от иммунологического состояния организма (U. Landegren et al., 1988; М.Ю. Аксенов, A.JI. Гинцбург, 1993; К.Т. Момыналиев, В.М. Говорун, 2000; Ю.А. Алтухов, Е.А. Салменкова, 2002; И.Ф. Жимулёв, 2006).

Приступая к разработке диагностической тест-системы мы столкнулись с тем, что в отечественной литературе не описано ни одного штамма Fusobacterium. О.И. Соломаха и соавт. (2000) в своих работах так же отмечали отсутствие эталонных штаммов-референтов подвидов Fusobacterium necrophorum.

Развитие молекулярной биологии и генной инженерии дало возможность создать методы, позволяющие оценивать генетическое разнообразие, устанавливать степень родства и выявлять индивидуальные особенности организма при анализе ДНК.

В настоящее время во всем мире широкое распространение получила технология полимеразной цепной реакции (ПЦР). Для выявления генетического полиморфизма у разных групп организмов она широко используется с короткими в 10-15 нп праймерами со «случайной», произвольно выбранной последовательностью - RAPD-анализ (random amplified polymorphic DNA) (С.А. Булат и соавт. 1992; И.А. Шагинян, А.Л. Гинцбург, 1995; J.G.K. Williams et al., 1993).

Метод RAPD-маркеров позволяет получать большое число маркеров, рассеянных по всему геному, поэтому такие маркеры удобны для построения генетических карт (Ю.П. Алтухов, Е.А. Салменкова, 2002) или карт сцепления с локусами количественных признаков, т.е. локусами хозяйственно важных свойств.

В нашей стране и за рубежом длительный поиск специфических препаратов в виде вакцин и гипериммунных сывороток не принес должного результата. В настоящее время имеются экспериментальные и принятые к применению вакцины против некробактериоза, которые в производственных условиях не всегда дают желаемый результат (А.А. Самоловов, С.В. Лопатин 2001; С.В. Лопатин, Т.М.Магерова, 2004).

А.С. Донченко, А.А. Самоловов (1998) высказали мнение, что создание при некробактериозе высокоэффективных вакцин традиционными методами маловероятно. В то время под традиционными методами понималось следующее. Выделение изолята в данном регионе, изучение его свойств, приготовление вакцины из монокультуры и применение ее в этом регионе. При использовании ее в других регионах она не оказывала должного профилактического эффекта.

Ряд отечественных исследователей (О.И. Соломаха и соавт., 2000; О.И. Соломаха, Л.В. Кириллов, 2001) сообщали, что в неудачах, которые долгое время сопутствовали работе по созданию специфических средств профилактики некробактериоза, имело немаловажное значение игнорирование авторами неоднородности эпизоотических штаммов Fusobacterium necrophomm.

Цель и задачи исследований. Цель работы — изучить геномный полиморфизм Fusobacterium necrophorum и усовершенствовать диагностику некробактериоза животных путем оптимизации условий проведения и модификации гнездовой ПЦР по выявлению Fusobacterium necrophorum subspecies necrophorum.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи: 1. Разработать RAPD-ПЦР и изучить геномный полиморфизм культур Fusobacterium necrophorum.

2. Усовершенствовать методику выделения геномной ДНК Fusobacterium necrophorum.

3. Оптимизировать условия проведения и модифицировать гнездовую ПЦР по выявлению Fusobacterium necrophorum subspecies necrophorum.

Научная новизна. Разработана RAPD-ПЦР и выявлено генетическое разнообразие культур Fusobacterium necrophorum. Усовершенствована методика выделения геномной ДНК и модифицирована диагностическая тест-система для выявления патогенных Fusobacterium necrophorum subspecies necrophorum. Оптимизированы условия проведения совмещенной гнездовой ПЦР.

Теоретическая и практическая значимость. Результаты исследований представляют теоретическую и практическую ценность, так как на основе разработанной RAPD-ПЦР проведено генетическое маркирование Fusobacterium necrophorum, оптимизированы условия проведения гнездовой ПЦР по выявлению Fusobacterium necrophorum subspecies necrophorum и разработана ее модификация путем совмещения двух реакций с наружными и внутренними праймерами в одной пробирке. Получен патент № 2203951 «Способ выявления jFusobacterium necrophorum в гнездовой ПЦР».

На основании результатов генетических исследований подтверждена принадлежность культур № 8 и № 12 к подвиду necrophorum. Культуры депонированы как штаммы Fusobacterium necrophorum subspecies necrophorum под номерами В-1075 и В-1076 от 08.09.2005. На одну из них получен патент № 2347806 «Штамм бактерий Fusobacterium necrophorum subspecies necrophorum для изготовления диагностических и профилактических препаратов против некробактериоза животных».

Апробация полученных результатов. Материалы диссертационной работы доложены на заседаниях Ученого совета ГНУ Института экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО РАСХН (г. Новосибирск, 2003-2009), международной научно-практической конференции

Современное состояние и актуальные проблемы развития ветеринарной науки и практики» (г. Алмааты, 2005), научно-практической конференции, посвященной 45-ю ГНЦ НИИ ветеринарии Восточной Сибири СО РАСХН «Состояние и перспективы ветеринарного благополучия Восточной Сибири» (Чита, 15-16 сент. 2008г), 8-й межрегиональной научно-практической конференции «Патология продуктивных и непродуктивных животных, рыб и птиц» (г. Омск, 2009).

Публикации результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 12 научных работ, в том числе 6 статей в научных журналах, рекомендованных ВАК Минобразования РФ («Сибирский вестник сельскохозяйственной науки», «Доклады Россельхозакадемии», «Ветеринарная патология»).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 110 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, приложения. Работа иллюстрирована 15 рисунками и 10 таблицами. Список литературы включает 208 источников, в том числе 110 зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов», Юрик, София Антоновна

4. ВЫВОДЫ

1. На основе RAPD-ПЦР разработано генетическое маркирование Fusobacterium necrophorum. Произвольные праймеры длиной в 10 н.п. со «случайной» нуклеотидной последовательностью, выбранные на основе нуклеотидной последовательности лейкотоксина Fusobacterium necrophorum штамма А25 в 12699 н.п., можно использовать в исследованиях по паспортизации культур.

2. С помощью праймеров № 18, 28, 36, 38 выявлены уровни полиморфизма внутривидовых генетических дистанций, свидетельствующие о неоднородности популяции Fusobacterium necrophorum циркулирующих у крупного рогатого скота на территории Западной Сибири. Уровень схожести культур находится в пределах от 0,11 до 0,67.

3. Выявленные в RAPD-ПЦР с помощью праймера № 38/1 высокие уровни полиморфизма внутривидовых генетических дистанций свидетельствуют о неоднородности популяции Fusobacterium necrophorum в Поволжье. Уровень схожести находится в пределах 0,30-0,95.

4. Выделение геномной ДНК Fusobacterium necrophorum, где основная депротеинизация осуществляется обработкой 10% СТАВ при +80°С в течение часа, позволило сократить время выделения с 24 ч до 5 ч и получать чистые от примеси белков препараты суммарной ДНК с соотношением D260/D280 равным 1,70-1,79.

5. В результате оптимизации условий проведения гнездовой ПЦР по выявлению Fusobacterium necrophorum subspecies necrophorum для повышения чувствительности и специфичности реакции изменены наружные и внутренние праймеры, в результате чего тестируемый наружный фрагмент увеличился с 546 до 558 н.п., а внутренний - со 187 до 289 н.п.

6. Модификация диагностической тест-системы для выявления патогенных Fusobacterium necrophorum subspecies necrophorum путем совмещения двух реакций с наружными и внутренними праймерами в одной пробирке позволила уменьшить время проведения реакции в 2 раза и снизить стоимость расходуемых реактивов в 1,8 раза.

7. Определена принадлежность культур № 8 и № 12 к подвиду necrophorum и подтверждена секвенированием генов транспозона, белка оболочки, топоизомеразы II (ДНК-гиразы), гемагглютинина и межгенной вставки (16S-23S лейкотоксина).

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Инструкция по применению тест-системы для выявления

Fusobacterium necrophorum subsp. necrophorum методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с помощью гнездовых праймеров и ТУ 9388-001-05095732-2006 (Свидетельство о государственной регистрации № ПВР-1-2.6/01846 от 20 февраля 2007 г.).

2. Инструкция по применению формол-эмульсионной вакцины против некробактериоза крупного рогатого скота и ТУ 9384-001-00492374-2008 (Свидетельство о государственной регистрации № ПВР-1-2.7/02055 от 06 июля 2008 г.).

3. Временная инструкция по применению тест-системы для выявления патогенных Fusobacterium necrophorum методом совмещенной гнездовой полимеразной цепной реакции {two in one nested PCR), утвержденная директором ГНУ ИЭВСиДВ СО РАСХН 07.06.2006.

4. Временная инструкция по применению тест-системы для генотипи-рования культур Fusobacterium necrophorum методом RAPD-ПЦР анализа, утвержденная директором ГНУ ИЭВСиДВ СО РАСХН 23.06.2006.

5. Методические рекомендации «Выявление патогенных Fusobacterium necrophorum методом совмещенной гнездовой полимеразной цепной реакции (two in one nested PCR)». Рассмотрены и утверждены подсекцией «Проблемы инфекционной патологии животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (протокол № 3 от 14 сентября 2006 г.).

6. Методические рекомендации «Применение RAPD-ПЦР анализа для молекулярно-генетического картирования культур Fusobacterium necrophorum». Рассмотрены и утверждены подсекцией «Проблемы инфекционной патологии животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (протокол №. 3 от 14 сентября 2006 г.)

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Юрик, София Антоновна, 2010 год

1. Алтухов, Ю.А. Полиморфизм ДНК в популяционной генетике / Ю.А. Алтухов, Е.А. Салменкова // Генетика. 2002. - Т.38. - № 9. - С. 1173-1195.

2. Алтухов, Ю.П. Генетические процессы в популяциях, 1-е изд. М.: Наука. -1983.-279 с.

3. Алтухов, Ю.П. Мономорфная видоспецифическая ДНК, выявляемая в полимеразной цепной реакции со случайными праймерами / Ю.П. Алтухов, А.Б. Абрамов//Генетика. -2000. Т. 36.-№ 12,- С. 1674-1681.

4. Алтухов, Ю.П. Внутривидовое генетическое разнообразие: мониторинг и принципы сохранения /Ю.П. Алтухов// Генетика. 1995. - Т. 31. - № 10. -С.1331-1357.

5. Алтухов, Ю.П. Наследственное биохимическое разнообразие в процессах эволюции и индивидуального развития /Ю.П. Алтухов, Л.И. Корочкин, Ю.Г. Рычков // Генетика. 1996. - Т. 32. - № 11. - С. 1450-1473.

6. Анакина, Ю.Г. Болезни конечностей рогатого скота в условиях интенсивной технологии/ Ю.Г. Анакина. М., 1988. - 50 с.

7. Андо, Т. Применение ферментов в исследовании работы генов / Перевод ГПНТБ СО АН/ Т. Андо// Новосибирск. 1982. - 37 с.

8. Балабанов, В.А. Некробактериоз животных/ В.А. Балабанов М.: Колос, 1971.- 136 с.

9. Балашова, И.А. Использование RAPD-метода для создания ДНК-маркеров к генам Vrn / И.А. Балашова, Ю.М. Сиволап, В.И. Файт, А.Ф.Стельмах// Цитология и генетика. 2001. - Т. 35. - № 2. - С. 49-53.

10. Бобылева, Е.А. Ускоренный метод биологической диагностики некробациллеза и выделения чистых культур Вас. necrophorus/ Е.А. Бобылева// Сборник работ молодых ученых в области ветеринарии. М. - 1940. - С. 148151.

11. Бреслер, С.Е. Молекулярная биология/ С.Е. Бреслер// JL: Наука. 1973. - С. 208-209.

12. Булат, С.А.Полимеразная цепная реакция с универсальными праймерами для изучения геномов / С.А. Булат, O.K. Кобаев, Н.В. Мироненко, Ф.М. Ибатулин, Л.А. Лучкина, А.В. Суслов // Генетика. 1992. - Т. 28. - № 5. - С. 19-27.

13. Вартапетян, А.Б. Полимеразная цепная реакция / А.Б. Вартапетян// Молекулярная биология. 1991. - Т. 25. - Вып. 4. - С. 926-936.

14. Вейнберг, М. Анаэробные микроорганизмы и их роль в патологии / М.Вейнберг, Б. Гинзбург. -М.: Гос. мед. изд-во, 1927. С. 316-325.

15. Голосов, И.М. Некробациллез северных оленей/ И.М. Голосов, Б.В.Маслухин. Норильск, 1969. - С. 7-78.

16. Гришаев, Н.Е. Биологическая диагностика некробациллеза /Н.Е. Гришаев, Д.П.Бахтин // Ветеринария. 1969. - № 7. - С. 37-38.

17. Гришаев, Н.Е. О выживаемости Bact. necrophorum на полужидком МППБ /Н.Е.Гришаев, Д.П. Бахтин // Инфекционные и незаразные болезнисельскохозяйственных животных/ Тр. Казахского НИВИ. Алма-Ата: Кайнар, 1971.-Т.14.-С. 411-413.

18. Девис, Р. Методы генетической инженерии. Генетика бактерий / Р. Девис, Д.Бодстайн, Дж. Рот// М.: Мир. 1984. - 176 с.

19. Донченко, А.С. Некробактериоз или копытная гниль /А.С. Донченко, А.А.Самоловов //Ветеринарная газета. 1998. - № 8. - С. 9.

20. Дубинин, Н.П. Экологическая генетика и эволюция / Н.П. Дубинин // Кишинёв: Штиинца. 1987. - С. 7- 49.

21. Жимулёв, И.Ф. Общая и молекулярная генетика /И.Ф. Жимулёв // Новосибирск.: Сибирское университетское издательство. 2006. - 395 с.

22. Забаровский, Е.Р. Альтернативные подходы к картированию и секвенированию генома / Е.Р. Забаровский // Молекулярная биология. 2001. -Т. 35.- №2.-С. 224-234.

23. Захаров, И.В. Диагностика некробактериоза лошадей методом РСК / И.В. Захаров // Ветеринария. 1949. - № 7. - С. 54-58.

24. Иванова, М.М. Современные методы ДНК-диагностики: Лекция / М.М. Иванова, В.Н. Лазарев, Р.В. Белоусова, Б.С. Народницкий // М.: МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, 1997. 20 с.

25. Ильина, Т.С. Структурная организация и механизмы перемещения генных кассет, кодирующих резистентность к антибиотикам, и факторы вирулентности бактерий /Т.С. Ильина //Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2001. -№ 1. - С. 3-12.

26. Каган, Ф.И. К биологии возбудителя некробациллеза северных оленей / Ф.И. Каган, Я.Р. Коваленко //Советская ветеринария. 1934. - № 7. - С.64-71.

27. Кайзер, К. Выделение высокомолекулярной хромосомной ДНК из клеток эукариот / К. Кайзер, Н. Мюррей // Клонирование ДНК. Методы/ Под ред. Д. Гловера. -М.: Мир, 1988. С. 59-61.

28. Караваев, Ю.Д. Терапия и специфическая профилактика при некробактериозе /Ю.Д. Караваев, И.Н. Семенова, А.К. Мироненко, JI.H. Зинина,

29. B.И. Тетеричев, И.Г. Мачахтыров//Ветеринария. — 1999. -№8.-С.11-12

30. Караваев, Ю.Д. Опыт борьбы с некробактериозом животных / Ю.Д. Караваев, И.Н. Семенова, Н.Б.Мельник, И.Г. Мачахтыров, М.А. Аникеев, А.К. Мироненко //Ветеринария. 2003. - № 7. - С.7-9.

31. Коваленко, Я.Р. Типовое отождествление возбудителя некробациллеза (Вас. necrophorus) / Я.Р. Коваленко// Тр. Гос. контрольного института вет. препаратов.- 1952. Т. 3.-С. 173-180.

32. Коваленко, Я.Р. Анаэробные инфекции сельскохозяйственных животных / Я.Р. Коваленко//М.: Сельхозгиз, 1954. С. 66-73, 167-222.

33. Козловский, Е.В. Иммунофлуоресцентный метод идентификации Bact. Necrophorum / Е.В. Козловский, О.И. Соломаха // Ветеринария. 1972 - № 4.1. C.102-104.

34. Корнберг, А. Синтез ДНК / А. Корнберг// М.: Мир, 1977. 359 с.

35. Краев, А.С. Методы изучения первичных структур нуклеиновых кислот / А.С. Краев, К.Г. Скрябин // Итоги науки и техники. Сер. Молекулярная биология/ ВИНИТИ.- М., 1980. Т. 12: Генетическая инженерия (методы).- Ч. 2.- С.141-197.

36. Краснобаев, А.К. К вопросу о сохраняемости лабораторных штаммов палочки некроза / А.К. Краснобаев, А.А. Тимофеева // Советская ветеринария, 1939.-№7.-С. 50.

37. Ландер, Э.С. Анализ с рестрикционными фрагментами/ Э.С. Ланд ер// Математические методы для анализа последовательностей ДНК/ Под ред. М.С. Уотермена. М.: Мир, 1999. - С. 63-84.

38. Лайшев, А.Х. Клинико-рентгенологическая картина некробациллезных поражений в области пальцев у северного оленя / А.Х. Лайшев // Матер. Всесоюз. межвуз. конф. по вопр. вет. хирургии. Л. - 1967. - С. 293-295.

39. Лайшев, А.Х. Некробактериоз северных оленей (этиология, патогенез, профилактика и лечение) / А.Х. Лайшев, Н.С. Семенов И Якутск: Якутское кн. изд-во. 1971. - С. 147.

40. Льюин, Б. Гены /Под ред. Г.П. Георгева. 1987. - С. 458-481.

41. Львов, В.М. Анаэробные инфекции и борьба с ними / В.М. Львов// Л.: Колос. 1971.-С. 48-60.

42. Мазин, А.В. Методы молекулярной генетики и генной инженерии / А.В. Мазин, К.Д. Кузнеделов, А.С. Краев и др,//Новосибирск: Наука. 1990. - С. 248.

43. Малышев, С.В. Молекулярные маркеры в генетическом картировании растений /С.В. Малышев, Н.А. Картель //Молекулярная биология. 1997. - Т. 31.-№ 2. - С. 197-208.

44. Маниатис, Т. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование / Т. Маниатис, Э. Фрич, Д. Сэмбрук // М.: Мир. 1984. - С. 480.

45. Маслухин, Б.В. Морфологические и физиологические особенности возбудителя некробактериоза северных оленей / Б.В. Маслухин, А. А. Пилипенко, Л.М. Борисова, А.Г. Маслухина // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. 1972. - № 2. - С. 66-69.

46. Маслухина, А.Г. Биологический метод получения чистой культуры Bact. necrophorum из органов и тканей экспериментально зараженных кроликов / А.Г.

47. Маслухина // Бюллетень науч.-технич. информации НИИСХ Крайнего Севера.-Норильск. 1974. -№ 7.- С. 15-16.

48. Межиева, З.Х. Влияние условий хранения и времени между пересевами на жизнеспособность культур F. necrophorum / З.Х. Межиева, О.И. Соломаха, Н.Н. Кружнов // Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии. 2000. - Вып.1. -С.10-16.

49. Межиева, З.Х. Испытание некоторых сред высушивания для стабилизации свойств F. necrophorum / З.Х. Межиева, О.И. Соломаха, Н.Н. Кружнов// Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии. -2000. -Вып.1. -С. 16-22.

50. Меныпенин, В.В. Питательные среды для промышленного культивирования F. necrophorum / В.В. Меныпенин, Е.Г. Лавченко, О.И. Соломаха, Е.И. Бондаренко // Ветеринария. 1997. - № 3. - С. 27-28.

51. Методические указания по лабораторной диагностике некробактериоза. (Утв. ГУВ Госагропрома СССР 1 июня 1987). М. - 1987.

52. Момыналиев, К.Т. Перспективы применения методов ДНК-диагностики в лабораторной службе / К.Т. Момыналиев, В.М. Говорун // Клиническая лабораторная диагностика. 2000. - № 4. - С. 25-32.

53. Муромцев, С.Н. В. necrophorum и его роль в патологии сельскохозяйственных животных / С.Н. Муромцев, Л.С. Новикова // Советская ветеринария. 1935. - №8. - С. 14-17.

54. Муромцев, С.Н. Копытная болезнь северных оленей / С.Н. Муромцев// Л.: Изд-во Главсевморпути. 1935. - 48 с.

55. Никоноров, П.Н. Зоогигиеническая и ветеринарная оценка технологических систем на скотоводческих комплексах / П.Н. Никоноров// Науч. техн. Бюллетень / ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние. - 1980. - Вып. 17. - С. 18-22.

56. Новак, Д.Д. О сущности эпизоотического процесса / Д.Д. Новак // Современные проблемы эпизоотологии». Материалы Междунар. науч. конфер., Краснообск 30 июня 2004 г. - Новосибирск . - 2004. - С.ЗЗ 1-335.

57. Определитель бактерий Берджи / Под редакцией Дж. Хоулта, Н. Крига, П.Снита и др. М.: Мир. - 1997. - Т.1. - С. 295-300, 328-330.

58. Патрушев, Л.И. Экспрессия генов / Л.И. Патрушев // М.: Наука. 2000. -527с.

59. Пилипенко, А.А. Об использовании серологических реакций при изучении некробактериоза / А.А. Пилипенко // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. 1974. - № 1. - С. 79-83.

60. Писаренко, Н.И. Подбор и изучение изменений питательных сред в процессе роста бактерии некроза / Н.И. Писаренко, А.А. Корзенкова, В.П. Шишова // Доклады ВАСХНИЛ. 1973. - № 10. - С. 35-37.

61. Приходько, Г.Г. Общий метод определения участков расщепления ДНК эндонуклеазами рестрикции / Г.Г. Приходько, С.Х. Дегтярев, Н.И. Речкунова // Биотехнология. 1990. - № 1. - С. 12-16.

62. Пушменков, Е.П. Реакция агглютинации в диагностике так называемой копытной болезни северных оленей / Е.П. Пушменков // Ветеринария. 1941. — № 1.-С. 19.

63. Ревнивых, А.Г. Копытная болезнь северных оленей и ее возбудитель //Сборник по оленеводству, тундровой ветеринарии и зоотехнике / А.Г. Ревнивых// М.: Изд-во "Власть Советов" при Президиуме ВЦИК. 1932. - С. 209-233.

64. Ревнивых, А.Г. Этиология так называемой "копытной болезни" северных оленей /А.Г. Ревнивых //Советская ветеринария. 1935. - № 8. - С. 18-24.

65. Ревнивых, А.Г. К вопросу этиологии, клиники и патогенеза летне-осенних заболеваний северных оленей / А.Г. Ревнивых // Советская ветеринария. 1940. -№2-3.-С. 59-65.

66. Ревнивых, А.Г. Аллергическая диагностика некробациллеза у северных оленей / А.Г. Ревнивых, З.А. Балабырдина // Вестник сельскохозяйственной науки. Ветеринария. М.: ОГИЗ: Сельхозгиз. - 1940. - Вып. 3. - С. 10-14.

67. Романова, Ю.М. Участие мобильных элементов в формировании свойств патогенных бактерий / Ю.М. Романова, A.JI. Гинцбург // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 1999. - № 2. - С. 22-29.

68. Саики, Р. Полимеразная цепная реакция / Р. Саики, У. Гиленстен, Г. Эрлих// Анализ генома. Методы/ Под ред. К. Дейвиса. М.: Мир. - 1990. - С. 176-190.

69. Самоловов, А.А. Диагностическая ценность культурально-биохимических свойств F. necrophorum / А.А. Самоловов // Диагностика болезней животных и профилактика их на фермах и комплексах/ Сб. науч. тр. ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние. Новосибирск. - 1984. - С. 53-58.

70. Самоловов, А.А. Совершенствование лабораторной диагностики некробакте-риоза / А.А. Самоловов // Ветеринария. 1986. - № 6. - С. 69-70.

71. Самоловов А.А. Некробактериоз крупного рогатого скота /А.А. Самоловов //-Новосибирск, 1998. 140 с.

72. Самоловов, А.А. Роль F. necrophorum в патологии человека / А.А. Самоловов // Научное обеспечение ветеринарных проблем в животноводстве: Сб. науч. тр. РАСХН. Сиб. отд-ние.ИЭВСиДВ Новосибирск. -2000. - С. 154-159.

73. Самоловов, А.А. Изучение и состояние проблемы некробактериоза северных оленей /А.А.Самоловов, В.П.Кечин, К.А.Лайшев // Новосибирск: Ревик-К. -2001.-178 с.

74. Самоловов, А.А. Некробактериоз крупного рогатого скота и пути решения проблемы /А.А. Самоловов, С.В. Лопатин // Аграрная Россия. 2001. - № 3. -С. 34-37.

75. Селедцов, И.А. Множественное выравнивание биополимеров основанное на поиске статистически значимых общих участков / И.А. Селедцов, Ю.И. Вульф, К.С. Макарова // Молекулярная биология. 1995. - Т. 29. - С. 1023-1039.

76. Созинов, А.А. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции / Созинов А.А // М.: Наука. 1985. - 272 с.

77. Соломаха, О.И. Обнаружение бактерий некроза в патологическом материале / О.И. Соломаха // Научно-технический бюллетень НИИСХ Крайнего Севера. -Норильск. 1972. - вып. 2 (5). - С. 22-23.

78. Соломаха, О.И. Серогруппы возбудителя некробактериоза / О.И. Соломаха // Научно-технический бюллетень НИИСХ Крайнего Севера. Норильск. - 1972. - вып. 2 (5). - С. 20-21.

79. Соломаха, О.И. Серологическая идентификация Bacterium necrophorum и обнаружение антител к ним в сыворотках крови северных оленей иммунофлуоресцирующим методом / Соломаха О.И.// Автореферат канд. вет. наук. -М. 1973.-16 с.

80. Соломаха, О.И. Получение люминисцентных сывороток против Bacterium necrophorum / О.И. Соломаха // Тр. НИИСХ Крайнего Севера. Норильск. -1974.-Т. 20.-С. 88-90.

81. Соломаха, О.И. Некоторые морфологические особенности Fusobacterium necrophorum / О.И. Соломаха, JI.B. Кириллов, И.Б. Павлова// Аграрная Россия. -2000. — № 3. — С.59-61.

82. Соломаха, О.И. Биотипы возбудителя некробактериоза и подбор штаммов для изготовления вакцины против некробактериоза животных / О.И. Соломаха, JI.B. Кириллов, Н.Н. Кружнов, Е.Г. Лавченко, З.М. Межнева // Аграрная Россия. -2000. -№ 3. С. 62-66.

83. Соломаха, О.И. Некробактериоз комплексное решение проблемы / О.И. Соломаха, Л.В. Кириллов //Аграрная Россия. - 2001. - № 3. - С. 38-41.

84. Тютиков, Ф.М. Некоторые вопросы микробиологии возбудителя некробактериоза северных оленей / Ф.М. Тютиков// Труды Магаданского Зонального НИИСХ Северо-Востока. 1973. - Вып. 2. - С. 51-58.

85. Хесин, Р,Б. Непостоянство генома / Р.Б. Хесин//М.: Наука. 1985. -С. 37-115.

86. Хузин, Д.А. Меры борьбы с некробактериозом крупного рогатого скота / Д.А. Хузин, Д.И. Александров // Ветеринарный врач. 2002. - № 1(9). - С.46-49.

87. Цыпанов, Д.М, Реакция оседания эритроцитов и формоловая реакция при некробациллезе северных оленей / Д.М. Цыпанов // Советская ветеринария. -1940.-№6.-С. 27-29.

88. Чан, В. Т.-В. Выделение нуклеиновых кислот из клинических образцов и клеточных культур / В. Т.-В. Чан// Молекулярная клиническая диагностика. Методы / Под ред. С. Херрингтона, Дж. Макги. М.: Мир. - 1999. - С. 302-328.

89. Черкасский, Б.Л. Некробациллез / Б.Л. Черкасский // Руководство по зоонозам/ Под ред. В.И. Покровского. Л.: Медицина. - 1983. - С. 189-191.

90. Шагинян, И. А. ПЦР-генетическое типирование патогенных микроорганизмов / И.А. Шагинян, А.Л. Гинцбург //Генетика. 1995. - Т. 31. -№5.-С. 600-610.

91. Шагинян, И.А. Геномный полиморфизм возбудителей бактериальных инфекций /И.А. Шагинян, А.Л. Гинцбург // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 1991. - № 12. - С. 3-9.

92. Шибата Д.К. Полимеразная цепная реакция и молекулярно-генетический анализ биоптатов / Д.К. Шибата// Молекулярная клиническая диагностика. Методы / Под ред. С. Херрингтона, Дж. Макги. М.: Мир. - 1999. - С. 395-427.

93. Шумилов М.Ф. Некробактериоз северных оленей. Состояние, рекомендации / М.Ф. Шумилов// Магадан: Кн. изд-во. 1973. - 55 с.

94. Amoako, К.К. Comparison of extracellular enzymes of Fusobacterium necrophorum subps. necrophorum and Fusobacterium necrophorum subsp. Funduliforme / K.K. Amoako, Y. Goto, T. Shinjo //J. Clin. Microbiol. 1993. -V.31. - № 8. - P. 2244-2247.

95. Amoako, K.K. Study on the factors affecting the hemolytic activity of Fusobacterium necrophorum / K.K. Amoako, Y. Goto, T. Shinjo // Vet. Microbiol. -1994. -V. 41. -№ 1-2. P. 11-18.

96. Arber, W. Promotion and Limitation of Genetic Exchange /W. Arber //Science. -1979.-V. 205.-P. 361-368.

97. Attwood G.T. Ammonia hyperproducing bacteria from New Zealand ruminants / G.T. Attwood, A.V. Klieve, D. Ouwerkerk // Appl. Environ. Microbiol. - 1998. -V.64. - №5.-P. 1796-1804.

98. Berg, J.N. Fusobacterium necrophorum and Bacteroides melaninogenicus as etiological agents of foot rot in cattle / J.N. Berg, R.W. Loan // Am. J. Veter. Res. -1975. V. 36. - № 8. - P. 1115-1122.

99. Berg, J.N. Identification of common antigens in ribosome-rich extracts from Fusobacterium necrophorum / J.N. Berg, J.W. Evans // Am. J. Veter. Res. 1985. -V. 46. - № l.-P. 127-131.

100. Berg, J. N. Studies of Fusobacterium necrophorum from bovine hepatic abscesses: biotypes, quantitation, virulence, and antibiotic susceptibility / Berg J. N. and Scanlan С. M. //Am. J. Vet. Res. 1982. - V. 43. - P. 1580-1586.

101. Bloch, W. A biochemical perspective of the polymerase chain reaction / Bloch W. //Biochemistry. 1991. -V. 30. -P. 2735-2747.

102. Brook, I. The relationship between Fusobacterium species and other flora in mixed infection /1. Brook, I J. Walker // Med. Microbiol. 1986. - V.21. - № 2. - P. 93-100.

103. Brosi, J. Compleye nucleotide sequence of a 23 S ribosomal RNA gene from E. coli / J. Brosi, T.J. Dull and M.F. Noller // PNAS USA. 1980. - V. 77. - № 1. - P. 201-204.

104. Brown, R. Phenotypic characteristics and lipopolysaccharides of human and animal isolates of Fusobacterium necrophorum / R. Brown, H.G. Lough, I.R. Poxton // J. Med. Microbial. 1997. - V.46. - № 10. - P. 873-878.

105. Cheetham, B.F. A role for bacteriophages in the evolution and transfer of bacterial virulence determinants / B.F. Cheetham, M.E. Katz //Mol. Microbiol. -1995.-Vol. 162.-P. 201-208.

106. Chen, J. Directed termination PCR: a one-step approach to mutation detection /J. Chen, P.D. Hebert //Nucl. Acid Res. 1998. - V.26. - № 6. - P. 1546-1554.

107. Clark, B.L. Studies into immunization of cattle against interdigital necrobacillosis/ B.L. Clark, D.L. Emery, D.J. Stewart et al.// Aust. Vet. J. 1986. V.63. -№ 4. - P. 107-110.

108. Coyle-Dennis, J.E. Biological and biochemical characteristics of Fusobacterium necrophorum leukocidin / J.E. Coyle-Dennis, L.H. Lauerman // Am. J. Vet. Res. -1978.-V. 39. -№ 11.-P. 1790-1793.

109. Fadl A.A., Analysis of Salmonella enteritidis isolates by arbitrarily primed PCR / Fadl A.A., Nguyen A.V., Khan M.I.// J. Clin. Microbiol. 1995. - V. 33. - P. 987-989.

110. Fifis, T. Evidence for phospholipase В activity in Fusobacterium necrophorum cultures and its association with hemolysin leucocidin activities / T. Fifis, Costopoulos C., Vaughan J.A. // Vet. Microbiol. 1996. - V. 49. - P. 219-233.

111. Fisher, S.G. DNA fragments differing by single base-pair substitutions are separated in denaturing gradient gels: Correspondence with melting theory / S.G. Fisher, L.S. Lerman //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1983. - V. 80. - P. 1579-1589.

112. Foglesong, M.A. Morphology of bacteriophage-like particles from Fusobacterium symbiosum / Foglesong M.A., Markovetz A J //J. Bacterid. 1974. - V. 119. - P. 325-329.

113. Foglesong, M.A. Pleomorphism of Fusobacteriua Isolated from the Cockroach Hindgut / M.A. Foglesong, D.L. Cruden and A.J. Markovetz //J. of Bacteriology. -1984. V. 158. - № 2. - P. 474-480.

114. Emery, D.L. Biochemical and functional properties of a leukocidin produced by several strains of Fusobacterium necrophorum / D.L. Emery, J.H. Dufty, B.L. Clark // Austral. Vet. J. 1984. - V.61. -№ 12. - P. 382-386.

115. Emery, D.L. Cultural characteristics and virulence of strains of Fusobacterium necrophorum isolated from the feet of cattle and sheep / Emery D.L., Vaughan J.A., Clark B.L., Dufty J. H., Stewart D.J.//Aust. Vet. J. 1985. - V. 62. - № 2. - P. 4346.

116. Emery, D.L. Generation of immunity against Fusobacterium necrophorum in mice inoculated with extracts containing leukotoxin / D.L. Emery, J.A. Vaughan // Vet. Microbiol. 1986. - V.12. - № 3. - P. 255-268.

117. Erlich, H.A. PCR-Technology / H.A. Erlich // Perkin-Elmer Cetus. 1993. - P. 234- 237.

118. Fales, W.H. Fluorescent antibody technique for identifying isolates of Sphaerophorus necrophorus of bovin hepatic absc ess origin / W.H. Fales, G.W., Teresa // Am. J. Vet. Res. 1972. - V. 33. - № 11. - P. 2323-2329.

119. Ferris, S. A megabase DNA electrophoresis system / S. Ferris, S. Freeby, P. Zoller // Amer. Biotechnol. Lab. 1989. - V. 7. - P. 36-42.

120. Forrester, LJ. Aggregation of platelets by Fusobacterium necrophorum / L.J. Forrester, B.J. Campbell, J.N. Berg, J.T. Barrett // J. Clin. Microbiol. 1985. - V. 22. -№2.-P. 245-249.

121. Garcia, M.M. Characterization of endotoxin from Fusobacterium necrophorum / Garcia M.M., Charlton K.M., McKay )K.A. //Infect. Immun. 1975. - V. 11. - P. 371-379.

122. Hagelskjaer, L.H. Humen necrobacillosis, with emphasis on Lemierre's syndrome / L.H. Hagelskjaer, J. Prag // Clin. Infec. Diseases. 2000. - V. 31. - № 9. - P. 524532.

123. Innis, M.A. PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications / M.A. Innis, D.H. Gelfand, J.J. Sninsky// San Diego: Academic Press. 1990. - P. 177-183.

124. Jeffreys, A.J. Hypervariable minisatellite regions in human DNA / A.J. Jeffreys, V. Wilson, S.L. Thein //Nature. 1985. - V. 314. - № 6006. - P. 67-73.

125. Jensen, R. Unexpected cross-reaction with Fusobacterium necrophorum in a PCR for detection of micoplasmas / R. Jensen, B. Bruun, B. Gabra-Hansen // J. Clin. Microbiol. 1999. - V. 37. - № 3. - P. 828-829.

126. Jin, J. Characterization of the 16S-23S rRNA intergenic spacer regions among strains of the Fusobacterium necrophorum cluster / J. Jin, D. Xu, W. Narongwanichgarn // J. Vet. Med. Sci. 2002. - V. 64. - № 3. - P. 273-276.

127. Jin, J. Phylogenetic Analysis of Fusobacterium necrophorum, Fusobacterium varium and Fusobacterium nucleatum Based on gyrB Gene Sequences / Jin J., Haga Т., Shinjo T. and Y. Goto // J. Vet. Med. Sci. 2004. - Vol. 66. - № 10. - P. 12431245.

128. Johnson, C.C. Cell-Wall-Defective Variants of Fusobacterium/ C.C. Johnson, H.M. Wexler, S.Becker, M. Garcia and S.M.Finegold// Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1989. - V. 15 - P. 369-372.

129. Joshi, С. P. RAPD (random amplified polimorphic DNA) analysis in based on interparietal genetic relationships among hexaploid wheats / C. P. Joshi, H.T. Nguyen // Plant. Sci. 1993. - Vol. 93. - P. 95-103.

130. Kanoe, M. Isolation of Fusobacterium necrophorum from bovine ruminal lesions / M. Kanoe, Y. Izuchi, M. Toda // Jpn. J. Vet. Sci. 1978. - V. 40. - № 3. - P. 275281.

131. Kanoe, M. Attempt to detect bovine antibody against Fusobacterium necrophorum by the agar gel double diffusion test / M. Kanoe, M. Toda // Japan. J. Veter. Sci. 1979. - V. 41. - № 2. - P. 97-102.

132. Kanoe, M. Adherence of Fusobacterium necrophorum to bovine ruminal cells /М. Kanoe, K. Iwaki //J. Med. Microbiol. 1987. - V. 23. - № 1. - P. 69-73.

133. Keohavong, P. Enzymatic amplification and characterization of large DNA fragments from genomic DNA / P. Keohavong C.C. Wang R.S. Cha W.G. Thilly // Gene. 1988. - V. 71. - P. 211-216.

134. Khorana, H.G. Total synthesis of the structural gene for the precursor of a tyrosine suppressor transfer RNA from E. coli /H.G. Khorana K.L. Agarval P. Besmer // J. Biol. Chem. 1976. - V.251. - P. 565-670.

135. Kim, H.S. Recombinant fragment assay for gene targetting based on the polymerase chain reaction / H.S. Kim, O. Smithies // Nucl. Acids Res. 1988. - V. 16.-P. 8887-8903.

136. Landegren, U. DNA diagnostics molecular techniques and automation / Landegren U., Kaiser R., Caskey C., Hood L. //Science. - 1988. - Vol. 242. - P. 229-237.

137. Langworth, B.I. Fusobacterium necrophorum: Its characteristics and role as an animal pathogen / Langworth B.I. //Bacteriology Rev. 1977. - V. 41. - P. 373-390.

138. Lechtenberg, K.F. Antimicrobial susceptibility of Fusobacterium necrophorum isolated from bovine hepatic abscess / K.F. Lechtenberg, T.G. Nagaraja, M.M. Chengappa // Am. J. Veter. Res. 1998. - V. 59. - № 1. - P. 44-47.

139. Lundstrom, A. The influence of bread, age, body weight and season on digital diseases and hoof size in dairy cows / A. Lundstrom // Zentralblatt fur Vetrinerkundizen.-1981.-V.28.- № 2.-P.141-152.

140. Manuel, M. G. Ultrastructure and Molecular Characterization Fusobacterium necrophorum Biovars / Manuel M. G., Becker S. A.W., Brian W.B., Berg J.N., Finegold S. //Can. J. Vet. Res. 1992. - V. 56. - P. 318-325.

141. Mazurier, S.I. RAPD analysis of Campylobacter isolates: DNA fingerprinting without the need to purify DNA / Mazurier S.I., Giessen A.V., Heuvelmen K. P. 162-164.

142. Mullis, К. Specific enzymatic amplification of DNA in vitro: the polimerase chain reaction / K. Mullis, F. Faloona, S. Scharf // Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 1986.-V. 51.-P. 263-273.

143. Narayanan, S.K. Cloning, sequencing, and expression of the leukotoxin gene from Fusobacterium necrophorum strain A25 / S.K. Narayanan, T.G. Nagaraja, M.M. Chengappa, G.C. Stewart // Infect. Immun. 2001. - V. 69. - № 9. - P. 5447-5455.

144. Narayanan, S.K. Leukotoxins of gram-negative bacteria /S.K. Narayanan, T.G. Nagaraja, M.M. Chengappa, G.C. Stewart // Vet. Microbiol. 2002. - V. 84. - № 4. -P. 337-356.

145. Narongwanichgarn, W. Differentiation of Fusobacterium necrophorum subspecies from bovin pathological lesions by RAPD-PCR / W. Narongwanichgarn, E. Kawaguchi, N. Misawa // Vet. Microb. 2001. - V. 82. - № 6. - P. 383-388.

146. Narongwanichgarn, W. Characterization of the 16S-23S rRNA Intergenic Spacer Regions amons Strains of the Fusobacterium necrophorum Claster / Narongwanichgarn W., Goto Y., Haga T. and Shinjo Т. //J. Vet. Mol.Sci. 2002. -Vol. 64.- №3.-P. 273-276.

147. Ochman, H. Amplification of flanking sequences by inverse PCR / H. Ochman, M.M. Medhora, D. Garza, D.L. Hartl // PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications. San Diego: Academic Press. - 1990. - P. 219-227.

148. Paabo, S. Polymerase chain reaction reveals cloning artefacts / S. Paabo, A.C. Wilson//Nature. 1988. -V. 334. - P. 387-388.

149. Paglia, G. PCR-based multiplex DNA fingerprinting for the analisis of conifer genomes /G. Paglia, M. Morgante // Mol.Breed. 1998. - V. 4. - P. 173-177.

150. Price, S.B. Studies on bacterial synergism in mice infected with Bacteroides intermedius and Fusobacterium necrophorum / S.B. Price, R.E. McCallum // J. Basic. Microbial. 1987. -V. 27. - № 7. - P. 377-386.

151. Resenchuk, S.M. Alignment service: creation and processing of alignments of sequences of unlimited length / S.M. Resenchuk, V.M. Blinov // Comput. Appl.Biosci. 1995. - № 11. - P. 7-11.

152. Rolfs, A. PCR topics: Use of polymerase chain reaction in genetic and infections diseases / A. Rolfs, H.C. Schumacher, P. Marx // Springer Verlag, 1993- P. 873880.

153. Rychlin, W. Optimization of the annealing temperature for DNA amplification in vitro / W. Rychlin, W.Y. Spencer, R.E. Rhoads // Nucleic Acids Res. 1990. - V. 18. -P. 6400-6414.

154. Saiki, R.K. Primer directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase / R.K. Saiki, D.H. Galfand, S. Stoffel // Science. -1988.-V. 239.-P. 487-491.

155. Saiki, R.K. Enzymatic Amplification of P-Globin Genomic Sequences and Restriction Site Analysis for Diagnosis of Sickle Cell Anemia / R.K. Saiki, S.Scharf, F. Fallona, K. Mullis, G. Horn //Science. 1985. - V. 230. - № 6. - P. 1350-1354.

156. Saginala, S. Effect of Fusobacterium necrophorum leukotoxoid vaccine on susceptibility to experimentally induced liver abscesses in cattle / S. Saginala, T.G. Nagaraja, K.F. Lechtenberg //J. Anim. Sci. 1997. - V. 75. - № 4. - P. 1160-1166.

157. Scanlan, C.M. Comparative in vitro leukotoxin production of three bovine strains of Fusobacterium necrophorum / C.M. Scanlan, J.N. Berg, W.H. Fales// Am. J, Vet. Res. 1982.-V. 43.- № 8.-P. 1329-1333.

158. Scanlan, C.M. Biochemical characterizationof leukotoxins of three bovine strains of Fusobacterium necrophorum / C.M. Scanlan, J.N. Berg, F.F. Campbell // Am. J. Vet. Res. 1986. - Vol. 47. - № 7. - P. 1422-1425.

159. Scanlan C.M. A semiquantitative enzyme method for identifying Fusobacterium necrophorum biovars A and В / C.M. Scanlan, A.H. Hoyumpa, P.C. Ainsworth // J. Vet. Diagn. Invest. 1992. - V. 4. - № 1. - P. 86-87.

160. Simon, P.C. Cultivation and maintenance anaerobic medium for aerobic incubation / P.C. Simon // Canad. J. Сотр. Med. 1974. - V. 38. - № 1. - P. 94-96.

161. Simon, P.C. A simple method for rapid identification of Sphaerophorus necrophorus isolates / P.C. Simon // Canad. J. Сотр. Med. 1975. - V. 39. - № 3. -P. 349-353.

162. Shinjo, T. Physiological and biochemical characteristics of Fusobacterium necrophorum biovar A and biovar В strains their deoxyribonucleic acid homology / Shinjo Т., Miyazato S. // Jpn. J. Vet. Sci. 1981. - V. 43. - P. 233-241.

163. Shinjo, T. Hydrophobicity of Fusobacterium necrophorum biovars A and В / T. Shinjo, Hazu H., Kiyoyama H. // FEMS Microbiol. Lett. 1987. - V. 48. - P. 243247.

164. Shinjo, T. Adherence of Fusobacterium necrophorum biovar A and В strains to erythrocytes and tissue culture cells / T. Shinjo, S. Miyazato, H. Kiyoyama // Ann. Inst. Pasteur. Microbiol. 1988. - V. 139. - № 4. - P. 453-460.

165. Shinjo, T. Recognition of biovar С of Fusobacterium necrophorum Moore and Holdeman as Fusobacterium pseudonecrophorum sp. nov., nom., rev / T. Shinjo, K. Hiraiwa, S. Miyazato // Int. Syst. Bacteriol. 1990. - V. 40. - № 1. - P. 71-73.

166. Shinjo, T. Comparison of haemolytic activity between Fusobacterium necrophorum, subps. necrophorum and Fusobacterium necrophorum, subsp.funduliforme in vitro and in vivo / T. Shinjo, N. Misawa, Y. Goto // AMPIS. 1996. -V. 104.-№ l.-P. 75-78.

167. Smith, G.R. Pathogenicity of Fusobacterium necrophorum biovar В / Smith, G.R. //Res. Vet. Sci. 1992. -V. 52. - P. 260-261.

168. Smith, G.R. Pathogenicity of Fusobacterium necrophorum strains from man and animals / G.R. Smith, E.A. Thornton // Epidemiol. Infect. 1993. - V. 110. - № 3. -P. 499-506.

169. Tan, Z.L. Factors affecting the leukotoxin activity of Fusobacterium necrophorum / Z.L. Tan, T.G. Nagaraja, M.M. Chengappa // Vet. Microbiol. 1992. - V. 32.- № i.p. 15-28.

170. Tan, Z.L. Biochemical and biological characterization of ruminal Fusobacterium necrophorum / Z.L. Tan, T.G. Nagaraja, M.M. Chengappa // FEMS Microbial. Lett. 1994. -V. 120. -№ 1-2. - P. 81-86.

171. Tan, Z.L. Biological and biochmical characterization of Fusobacterium necrophorum leukotoxin / Z.L. Tan, T.G. Nagaraja, M.M. Chengappa, J.S. Smith // Am. J. Vet. Res. 1994. - V. 55. - № 4. - P. 515-521.

172. Tan, Z.L. Selective enumeration of Fusobacterium necrophorum from the bovine rumen / Z.L. Tan, T.G. Nagaraja, M.M. Chengappa // Appl. Environ. Microbiol. -1994. V. 60. - № 4. - P. 1387-1389.

173. Tan, Z.L. Fusobacterium necrophorum infections: virulence factors, pathogenic mechanism, and control measures / Z.L. Tan, T.G. Nagaraja, M.M. Chengappa // Vet. Res. Commun. 1996. -V. 20. -№ 2. - P. 113-140.

174. Vos, P. AFLP: anew tehnique for DNA fingerprinting / P. Vos, R. Hogers, M. Bleeker, M. Rejans, T. van de Lee, M Homes, A. Fritjers, J. Pot, J. Peleman, M. Kuiper, M Zabeau //Nucl. Acids Res. 1995. - V. 23. - № 21. - P. 4407-4411.

175. Warner, J.F. Endotoxin from Fusobacterium necrophorum of bovine hepatic abscess origin / J.F. Warner, W.H. Fales, R.C. Sutherland, G.W. Teresa // Am. J. Vet. Res. 1975. - V. 36. - № 7. - P. 1015-1019.

176. Welch, J. Fingerprinting genomes using PCR with arbitary primers / J. Welch, M. Mc Clelland //Nucl. Acids Res. 1990. - Vol. 18. № 24. - P. 7213 -7218.

177. Werner, H. A serological study of strains belonging to Sphaerophorus necrophorus, Sphaerophorus varius, and Sphaerophorus freundii / H. Werner // Med. Microbiol. Immunol.-1972.-V. 157.-№4.-P. 315-324.

178. Williams, J.G.K. DNA polimorphisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers / J.G.K. Williams, A.R. Kubelik, K.J. Livan, K.J., Rafalski J.A., Tingey S.V. // Nucleic Acids Res. 1990. - V. 18. - № 22. - P. 6531-6535.

179. Williams, J.G.K. Genetic analysis using random amplified polymorphic DNA markers / J.G.K. Williams, M.K. Hanafey, J.A. Rafalski, S.V. Tongey // Nucl. Acids Res. 1990. - Vol. 18. - № 22. - P. 6531-6536.

180. Wong, C. Cloning a selected fragment from a human DNA «fingerprint»: isolstion of an extremely polymorphic minisatelite /С. Wong, W. Wilson, A.J. Jfereys, S.L. Thein //Nucl. Acid Res. 1986. - V. 14. - № 11. - P. 4605-4614.

181. Zhang, F. The two major subspecies of Fusobacterium necrophorum have distinct leukotoxin operon promoter regions / Nagaraja T.G., George D. and Stewart G.C// Vet. Microbiol.-2006.-Vol. 112.-№ 1.-P. 73-78.