Функциональные аспекты роли гена swiss cheese в организме Drosophila melanogaster тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Мелентьев Павел Алексеевич

• Мелентьев Павел Алексеевич
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Мелентьев Павел Алексеевич

1.1. Актуальность темы исследования

1.2. Степень разработанности темы исследования (обзор литературы)

1.2.1. Общая характеристика гена яшя и его ортологов

1.2.2. Биохимические свойства белка SWS/PNPLA6 и их регуляция

1.2.3. Клеточные процессы, зависимые от функции SWS/PNPLA6

1.2.4. Роль SWS/PNPLA6 в дифференцировке

1.2.5. Особенности экспрессии и роль гена яшя у дрозофилы

1.2.6. Роль гена Рпр1а6 у рыбы

1.2.7. Роль гена РЫРЬЛб у курицы

1.2.8. Роль гена Рпр1а6 у крысы

1.2.9. Особенности экспрессии и роль гена Рпр1а6 у мыши

1.2.10. Особенности экспрессии и роль гена РЫРЬЛб у человека

1.2.11. Функциональная гетерогенность мутаций в гене РИРЬЛб человека

1.2.12. Современное состояние проблемы

1.3. Цель и задачи

1.4. Научная новизна

1.5. Теоретическая и практическая значимость работы

1.6. Положения, выносимые на защиту

1.7. Степень достоверности и апробация результатов

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Линии ОгояорИНа melanogaster

2.2. Условия постановки скрещиваний и содержания мух

2.3. Препарирование особей и конфокальная микроскопия гистологических препаратов

2.4. Анализ количества транскриптов с помощью количественной ПЦР

2.5. Анализ генотипических классов в первом поколении и оценка летальности куколок

2.6. Оценка плодовитости мух и жизнеспособности эмбрионов в первом поколении потомства

2.7. Изучение параметров полового поведения самцов

2.8. Определение подвижности сперматозоидов

2.9. Анализ продолжительности жизни мух

2.10. Анализ обучаемости и памяти мух

2.11. Анализ локомоторной активности мух в тесте на отрицательный геотаксис

2.12. Анализ морфологии мозга

2.13. Анализ распределения липидных капель в мозге

2.14. Анализ распределения липидных капель в семенниках

2.15. Сравнительный анализ относительного количества перекиси водорода и окисленного

глутатиона в клетках мозга

2.16. Подготовка органов или частей тела для биохимического анализа

2.17. Оценка общего количества активных форм кислорода

2.18. Оценка количества АТФ

2.19. Оценка количества триацилглицеридов

2.20. Анализ транскриптома

2.21. Анализ протеома

2.22. Статистический анализ данных

3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1. Анализ распределения экспрессии гена sws в онтогенезе Drosophila melanogaster

3.2. Анализ используемой системы подавления экспрессии гена sws

3.3. Изучение влияния гена sws на жизнеспособность особей Drosophila melanogaster

3.4. Исследование плодовитости и фертильности особей с дисфункцией гена sws

3.5. Анализ последствий подавления экспрессии гена sws во всех клетках у имаго

3.6. Анализ последствий подавления экспрессии гена sws в нейронах

3.7. Анализ роли некоторых генов, экспрессия которых изменяется при подавлении экспрессии sws в нейронах, в проявлении sws-ассоциированных фенотипов

3.8. Анализ протеома в головах особей-мутантов sws1

3.8.1. Анализ функций белков, уровень которых увеличен у мутантов sws1 по сравнению с контролем

3.8.2. Анализ функций белков, уровень которых уменьшен у мутантов sws1 по сравнению с контролем

3.9. Анализ последствий подавления экспрессии гена sws в глии

3.9.1. Анализ последствий подавления экспрессии гена sws во всех глиальных клетках

3.9.2. Анализ последствий подавления экспрессии гена sws в периневральной глии

3.9.3. Анализ последствий подавления экспрессии гена sws в субпериневральной глии

3.9.4. Анализ последствий подавления экспрессии гена sws одновременно в глии кортекса ЦНС и обёртывающей глии ПНС

4. ОБСУЖДЕНИЕ

5. ВЫВОДЫ

6. СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

7. СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Функциональные аспекты роли гена swiss cheese в организме Drosophila melanogaster»

1.1. Актуальность темы исследования

Плодовые мушки рода Drosophila уже более ста лет плодотворно используются в генетике в качестве модельного объекта. Считается, что впервые на возможность использования дрозофил в лабораторной практике указал в начале 1901 году Уильям Касл, заметивший удобство и простоту быстрого размножения этих животных на кусочках бродящих бананов [Керкис, 1977], хотя существуют более ранние публикации, затрагивающие изучение дрозофил [Ashburner et al., 2004, c.1]. Тем не менее, введение дрозофилы в лабораторную культуру американскими исследователями Уильямом Каслом, Уильямом Мёнкхаусом, Фрэнком Лютцом, и, наконец, Томасом Морганом ознаменовало начало её пути в качестве важнейшего модельного объекта в генетическом эксперименте [Sturtevant, 1965; Kohler, 1993]. Установление схемы наследования аллельных проявлений признака [Morgan, 1910], доказательство кроссинговера на стадии четырёх нитей [Bridges, 1916], обнаружение хиазменной и хроматидной интерференции [Sturtevant, 1915; Muller, 1916], выявление нерасхождения хромосом [Bridges, 1916], составление первых генетических [Sturtevant, 1913], цитологических [Painter, 1934] и цитогенетических [Bridges, 1935; Lewis, 1942] карт хромосом, формирование хромосомной теории наследственности [Morgan et al., 1915], открытие множественного аллелизма [Morgan, 1911], делимости гена [Dubinin, 1933], эффекта положения [Sturtevant, 1925] и мозаицизма [Morgan, 1914], обнаружение мутагенных эффектов ионизирующего излучения [Muller, 1930] и химических веществ [Auerbach & Robson, 1944] — все эти результаты были впервые получены в исследованиях на дрозофиле. Благодаря изучению плодовых мушек выяснилось, что приспособленность популяции обусловлена генетическим полиморфизмом [Четвериков, 1926; Dobzhansky & Sturtevant, 1938; Dobzhansky, 1946; Dubinin & Tinyakov, 1946; Dubinin, 1947; Dobzhansky & Levene, 1948; Lewontin, 1957; Lewontin & Hubby, 1966]. Генетические варианты, способствующие увеличению приспособленности, поддерживаются разными типами отбора и сохраняются в популяции [Dobzhansky, 1946; Dobzhansky & Levene, 1948]. Открыто явление отбора, зависимого от частот генотипов [Ehrman, 1968; Лучникова, 1978], а также дрейф генов [Дубинин, 1931; Wright, 1931, 1970]. Полученные данные о генетической структуре популяций и динамике её изменения стали экспериментальной основой для понимания закономерностей микроэволюционного процесса [Lewontin, 1973; Mueller et al., 1985; Anderson, 1989; Casillas & Barbadilla, 2017]. Ещё одно направление исследований дрозофил позволило проследить природу определения позиционной информации в развитии и идентифицировать гены транскрипционных факторов, протеинкиназ, сигнальных молекул и их рецепторов, регулирующих морфогенез и

дифференцировку [Lewis, 1978; Nüsslein-Volhard & Wieschaus, 1980; Wieschaus et al., 1984; Anderson et al., 1985; Karch et al., 1985; Lehmann & Nüsslein-Volhard, 1986; Geisler et al., 1992; Wieschaus & Nüsslein-Volhard, 2016]. Выявленные гены оказались эволюционно-консервативными [Lewis, 2004]. В частности, открытый у Drosophila melanogaster комплекс гомеозисных генов стал подтверждением теории о возникновении новых генов путём дупликации [Bridges, 1935; Lewis, 2003]. Были заложены механистические основы биологии развития многоклеточных организмов, заключающиеся в закономерном распределении морфогенов в пространстве, образовании специфических градиентов их концентраций и последовательном запуске регулируемых каскадов дифференцировки клеток [Wieschaus & Nüsslein-Volhard, 2016]. Эксперименты на дрозофилах определили становление и развитие многих аспектов физиологической генетики. Например, удалось установить два ключевых сигнально-эффекторных каскада, определяющих врождённый иммунитет, ответственный за распознавание микотических и бактериальных лигандов и запуск синтеза антимикробных пептидов у животных [Wicker et al., 1990; Dimarcq et al., 1994; Fehlbaum et al., 1994; Lemaitre et al., 1995, 1996, 1997; Lemaitre & Hoffmann, 2007; Ferrandon et al., 2007]. Был выявлен и расшифрован молекулярный механизм управления циркадными ритмами, заключающийся в суточных колебаниях концентрации определённых мРНК за счёт самоконтролируемой обратной регуляции транскрипции соответствующих генов и свето-зависимой протеасомной деградации соответствующих белков [Konopka & Benzer, 1971; Bargiello et al., 1984; Reddy et al., 1984; Hardin et al., 1990, 1992; Vosshall et al., 1994; Emery et al., 1998, 2000; Guo et al., 2016; Patke et al., 2020]. Плодовая мушка обусловила формирование нейрогенетики: были идентифицированы разнообразные гены, функционирующие в нервной системе и определяющие поведенческие признаки [Benzer, 1967; Hotta & Benzer, 1970; Heisenberg & Bohl, 1979; Heisenberg, 1980; Coombe & Heisenberg, 1986].

Успех генетики дрозофилы был определён рядом преимуществ данного модельного объекта. Короткий жизненный цикл и высокая плодовитость (наряду с экономичностью и компактностью разведения культур) оказались чрезвычайно удобными для изучения наследуемости признаков. Наличие политенных хромосом в слюнных железах способствовало цитогенетическому картированию локусов, дополняя рекомбинационные карты [Painter, 1934]. Овипозиция, внематеринский эмбриогенез и метамерное строение особей благоприятствовали изучению генетики развития [Nüsslein-Volhard & Wieschaus, 1980]. Мозаицизм позволил выявлять роль генов в определённых частях организма [Hotta & Benzer, 1970]. Разнообразный репертуар признаков (как поведенческих, так и морфологических) способствовал лёгкому обнаружению множества мутаций (и соответствующих наследственных факторов). Именно

последний факт является основополагающим в плодотворности генетических экспериментов на дрозофиле. И несмотря на постоянное совершенствование методического арсенала, получение мутантов (сперва - спонтанных, затем - индуцированных) ознаменовывало начало любой генетической работы с плодовой мушкой в догеномную эпоху, почти целый век. Геном Drosophila melanogaster был расшифрован в 2000 году [Adams et al., 2000], и с тех пор так называемая «обратная генетика» практически полностью заняла место классической «прямой». Сегодня едва ли не любая биологическая проблема может быть решена с помощью экспериментов с дрозофилой. Этот объект является моделью в изучении эволюции геномов, физиологии организма, молекулярной биологии клеток, механизмов дифференцировки, симбиотических взаимоотношений хозяина с микробиомом, и прочего, и прочего, и прочего... В XXI веке дрозофила стала чрезвычайно популярным объектом в биомедицинских исследованиях. Разработаны и изучаются модели инфекционных, онкологических, репродуктивных, метаболических, мышечных, сердечно-сосудистых, нейропатологических заболеваний, мушек используют в токсикологических, нутрициологических и фармакологических скринингах. Особо следует отметить тенденцию распространения нейробиологических работ на дрозофиле в последние два десятилетия (масштаб которых мы приблизительно оценили в рамках 15-20% от всех исследований Drosophila spp. в этот период согласно библиографической базе данных PubMed). Это связано с несколькими факторами: (1) увеличением частоты нейродегенеративных заболеваний из-за увеличения продолжительности жизни населения в развитых странах, (2) относительной простотой и одновременно достаточной сложностью нервной системы дрозофилы, (3) широчайшим разнообразием доступных методических подходов при использовании дрозофилы. Ещё одно значимое преимущество изучения дрозофилы в подобных исследованиях определяется относительно короткой продолжительностью жизни имаго, благодаря чему успешно проводятся многочисленные работы по анализу генетики и физиологии старения и продолжительности жизни. Учитывая рост актуальности изучения нейродегенеративных заболеваний, а также тот факт, что вероятность их развития повышается с возрастом, дрозофила является превосходной моделью, позволяющей в короткие сроки исследовать зависимые от возраста явления. Важно, что исследования этого модельного объекта могут быть проведены на разных уровнях: от молекулярного до организменного, что особенно ценно для биомедицинских работ.

Настоящая работа посвящена исследованию некоторых функциональных аспектов роли одного из 13968 кодирующих белки генов1 Drosophila melanogaster, открытого благодаря изучению мутантов с нейродегенеративным фенотипом [Kretzschmar et al., 1997], полученных в

1 https://metazoa.ensembl.org/Drosophila_melanogaster/Info/Annotation/ - дата обращения 15.11.2021

скрининге [Heisenberg & Bohl, 1979]. Именно фенотип и определил название гена swiss cheese (сокращённо sws): головной синганглий (мозг) мушек на гистологических срезах морфологически напоминал дольки швейцарского дырявого сыра [Kretzschmar et al., 1997]. Вскоре, после расшифровки первых геномов, выяснилось, что ген имеет фрагмент, кодирующий эволюционно-консервативный домен, встречающийся в белках про- и эукариот, в том числе человека [Lush et al., 1998; Moser et al., 2000]. В случаях дисфункции белка, кодируемого ортологом sws у человека, наблюдаются определённые нейропатологии [Rainier et al., 2008; Synofzik et al., 2014; Topaloglu et al., 2014; Hufnagel et al., 2015; Kmoch et al., 2015]. При этом нейропатия возникает со временем и прогрессирует с возрастом. Эти факты определили наш интерес в изучении роли гена sws в нервной системе Drosophila melanogaster. Для этого мы создали и охарактеризовали модель подавления функции кодируемого sws белка посредством нокдауна, вызванного интерференцией РНК. И попытались дифференцировать вклад нейронов и глии в фенотипы, ассоциированные с дисфункцией sws на основании анализа различных признаков: продолжительности жизни, локомоторной активности, морфологии мозга, количества различных молекулярных маркеров, экспрессии генов. Полученные в результате этого исследования данные позволили предложить гипотетическую схему молекулярных событий в клетке, происходящих при sws-ассоциированной нейродегенеративной патологии, и определить некоторые признаки, контролируемые нормальной экспрессией гена sws в разных типах клеток нервной системы.

Кроме того, до проведения нашей работы не было найдено достаточных причин, обусловливающих эволюционную консервативность гена sws. Поэтому мы охарактеризовали профиль экспрессии этого гена в онтогенезе, изучили жизнеспособность и плодовитость мутантов по гену sws, и выяснили, что сохранение нормальной функции гена обеспечивает приспособленность особей Drosophila melanogaster.

Таким образом, настоящее исследование посвящено изучению различных аспектов жизнедеятельности Drosophila melanogaster, находящихся под контролем гена sws.

1.2.Степень разработанности темы исследования (обзор литературы)

Подробное описание достижений в исследованиях гена sws и его ортологов, известных до получения нами приведённых в настоящей работе результатов, отражено в нашем обзоре [Melentev et al., 2021a]. В этом разделе приведены ключевые выдержки, обобщающие имеющиеся на сегодняшний день данные, с некоторыми дополнениями.

1.2.1. Общая характеристика гена sws и его ортологов

Ген sws Drosophila melanogaster является эволюционно консервативным, и его ортологи найдены у различных видов от бактерий до человека [Lush et al., 1998; Moser et al., 2000]. Гомология этих генов определяется фрагментами ДНК, кодирующими так называемый пататин-подобный лизофосфолипазный (эстеразный) домен. Поэтому одно из названий белка-ортолога SWS у человека и некоторых других животных - PNPLA6 (patatin-like lysophospholipase domain containing 6).

Кроме эстеразного домена в структуре белка SWS есть нуклеотид-связывающий домен, взаимодействующий с циклическими нуклеотидмонофосфатами. В ортологичных белках у дрозофилы, человека, мыши и большинства других Metazoa в этом домене находится три участка связывания нуклеотидмонофосфатов. Структура этого домена более вариабельна при сравнении ортологов SWS у других видов, у некоторых бактерий он вовсе отсутствует (Рисунок 1).

Белок SWS имеет трансмембранный участок, заякоривающий SWS в клеточной мембране или в мембране эндоплазматического ретикулума (ЭР) [Mühlig-Versen et al., 2005; Bettencourt da Cruz et al., 2008; Kmoch et al., 2015]. Длинный С-концевой фрагмент белка, содержащий эстеразный и нуклеотид-связывающий домены, обращён в цитоплазму.

Сходство первичной структуры эстеразных доменов SWS дрозофилы и PNPLA6 человека составляет 61% [Topaloglu et al., 2014], но этого оказывается достаточно для функциональной взаимозаменяемости соответствующих генов в экспериментах [Mühlig-Versen et al., 2005; Sujkovski et al., 2015].

Рисунок 1. А — общая информация о цитогенетическом положении гена sws, длине известных транскриптов и изоформ белка. Б - структура известных изоформ белка SWS у дрозофилы; указаны названия, основные структурные элементы и аминокислотная длина изоформ. В - названия генов-ортологов sws у разных видов, структура канонических изоформ соответствующих белков и их длина в аминокислотах. Под трансмембранными,

нуклеотид-связывающими и эстеразными участками указано их аминокислотное положение в белке.

1.2.2. Биохимические свойства белка SWS/PNPLA6 и их регуляция

In vitro, эстеразный домен PNPLA6 человека расщепляет фосфолипиды, лизофосфолипиды и моноацилглицериды, высвобождая жирные кислоты [van Tienhoven et al., 2002]. Одним из субстратов SWS/PNPLA6 in vivo является фосфатидилхолин (ФХ), расщепляемый до глицерофосфохолина и двух молекул жирных кислот [Mühlig-Versen et al., 2005; Sunderhaus et al., 2019a]. Это означает, что SWS выполняет функции фосфолипазы Б, расщепляющей фосфолипиды по сайтам А1 и А2.

Мутантная линия дрозофилы sws1, у которой вследствие мутации c.[C1616A] появляется преждевременный нонсенс-кодон (Ser375* приводит к значительному укорочению белка и потере большей части нуклеотид-связывающего и полному отсутствию эстеразного домена), характеризуется повышенным содержанием ФХ [Mühlig-Versen et al., 2005], а также моно- и полиненасыщенных форм ФХ, и различных форм лизо-ФХ [Sunderhaus et al., 2019a]. Мухи с гиперэкспрессией sws дикого типа, напротив, имеют сниженный уровень ФХ по сравнению с особями линии дикого типа CantonS [Mühlig-Versen et al., 2005].

Биохимическая активность SWS/PNPLA6 может быть ингибирована воздействием ряда фосфорорганических соединений, содержащих пятивалентный фосфор [Richardson, 2020a,b]. Способность органофосфатов ингибировать SWS/PNPLA6 используется для определения эстеразной активности2 белка в лизатах различных биологических образцов. Для этого в лабораторных условиях используют субстрат - фениловый эфир пентановой кислоты (фенилвалерат) - который расщепляется SWS/PNPLA6 до фенола, концентрацию которого определяют колориметрически [Johnson, 1969; Richardson, 2020a].

Нуклеотид-связывающий домен SWS структурно похож на фрагмент регуляторной субъединицы R1a протеинкиназы А (PKa) дрозофилы и человека и способен связываться с каталитической субъединицей C3 протеинкиназы PKa дрозофилы, но не с другими субъединицами (С1 и С2) [Bettencourt da Cruz et al., 2008]. Показано, что белок PKaC3 мало похож на другие известные субъединицы (С1 и С2), и отсутствие его активности у мутантных Drosophila

2 Далее под «эстеразной активностью» будем подразумевать биохимически определяемую активность SWS/PNPLA6 и других подобных ферментов, способных расщеплять фенилвалерат при отсутствии SWS/PNPLA6-специфичного («нейротоксичного») органофосфатного ингибитора (мипафокса), но в присутствии ингибитора ацетилхолинэстеразы (параоксона) [Johnson, 1969].

melanogaster не может быть компенсировано, например, экспрессией PKA-C1 [Cassar et al., 2018]. По-видимому, SWS рекрутирует PKaC3 к мембранам компартментов клетки, обращённым в цитоплазму, и ингибирует эту каталитическую субъединицу [Bettencourt da Cruz et al., 2008].

Функциональные нарушения SWS могут приводить к невозможности его связывания c каталитическими субъединицами PKaC3, в результате чего последние становятся, как предполагают, конститутивно активными, что способствует развитию нейродегенерации у мух [Bettencourt da Cruz et al., 2008]. Однако нокдаун гена PKA-C3 у дрозофилы тоже способствует нейродегенерации у имаго [Wentzell et al., 2014].

Вероятно, нуклеотид-связывающий домен при определённых условиях может влиять на эстеразную активность белка. Изменение структуры нуклеотид-связывающего домена ведёт к снижению эстеразной активности SWS [Sujkovski et al., 2015]. Однако эстеразная активность PNPLA6 человека не зависит ни от присутствия нуклеотид-связывающего домена, ни от цАМФ [Li et al., 2003].

Ингибирование эстеразной активности SWS/PNPLA6 с помощью органофосфатов значительно снижает активность протеинкиназы А in vivo. Существует предположение, что органофосфаты способны не только ингибировать эстеразную активность SWS/PNPLA6, связывая активный центр, но ещё они приводят к удержанию PKaC3, ингибируя её [Wentzell et al., 2014].

Одним из факторов активации PNPLA6 человека является бета-субъединица G-белка (Gß2), которая способна физически взаимодействовать с C-концевым фрагментом PNPLA6 и стимулировать его эстеразную активность. Уменьшение уровня Gß2 снижает эстеразную активность, но не влияет на количество белка PNPLA6 [Chen et al., 2007a]. Физиологическим механизмом подавления активности PNPLA6 может являться активация протеинкиназы С, приводящая к уменьшению уровня мРНК PNPLA6 за счёт ингибирования транскрипции гена [Chen et al., 2007b]. Одним из факторов, регулирующих транскрипцию Pnpla6 у мыши, является белок TonEBP/OREBP [Gallazzini et al., 2006].

В структуре белков SWS/PNPLA6 найден мотив, характерный для сайтов убиквитинилирования (у дрозофилы в структуре SWS он занимает аминокислотные позиции 304-312: RVLFTALRN; у человека в структуре PNPLA6 он занимает аминокислотные позиции 276-284: RVTFLALHN). По-видимому, этот мотив отвечает за протеасомную деградацию белка [Chang & Wu, 2010]. Период полужизни Pnpla6 в клетках мыши составляет 20 часов [Gallazzini et al., 2006].

1.2.3. Клеточные процессы, зависимые от функции SWS/PNPLA6

По-видимому, в норме SWS/PNPLA6 весьма важен для регуляции внутриклеточных процессов, обеспечивающих стабильность мембран клетки и органелл. Подавление эстеразной активности PNPLA6 ведёт к изменению профиля ионных токов через мембрану липосом [Forshaw et al., 2001].

Дополнительная экспрессия различных вариантов SWS/PNPLA6 в клетках приводит к образованию тубулообразных выпячиваний ЭР [Li et al., 2003; Zaccheo et al., 2004]. Также было замечено, что у дрозофил-мутантов sws1 с возрастом менялась форма ЭР в нейронах [MühligVersen et al., 2005].

Эстеразный домен сам по себе способен взаимодействовать с липидными каплями (или их предшественниками) - специализированными органеллами, накапливающими в своём составе липиды, в первую очередь, триацилглицериды, и имеющими фосфолипидную оболочку. Нуклеотид-связывающий домен ингибирует связывание эстеразного домена с липидными каплями, поэтому полноценный PNPLA6 человека находится в мембране ЭР и не способен взаимодействовать с липидными каплями. Отсутствие первого ведёт к тому, что белок остаётся на поверхности ЭР, но собирается в небольшие скопления рядом с липидными каплями или их предшественниками, формирующимися на мембране ЭР [Chang et al., 2019].

Дисфункция гена sws у дрозофилы сопровождается активацией экспрессии транскрипционного фактора XBP1, который отвечает за стресс-реакцию ЭР посредством активации деградации белков, шаперонов, ферментов синтеза липидов. Искусственное усиление такой реакции смягчает поведенческие и нейродегенеративные нарушения, характерные для мутантов sws1 [Sunderhaus et al., 2019a].

Изменение экспрессии гена sws влияет на митохондрии. У особей с гиперэкспрессией sws в нейронах обнаружено нарушение формы и распределения митохондрий в этих клетках [Wentzell et al., 2014]. Напротив, у мутантов sws1 не замечено подобных изменений [Mühlig-Versen et al., 2005]. Однако, у личинок-мутантов sws1, так же, как и у личинок с нокдауном sws в нейронах, в пресинаптических окончаниях нейромышечных соединений заметно падал сигнал флуоресцентно-меченных митохондрий [Ryabova et al., 2018]. Подавление экспрессии sws в нейронах вызвало увеличение количества митохондрий в аксонах периферических нервов и изменение формы этих органелл, что может быть связано с их стрессовой реакцией [Melentev et al., 2021b].

1.2.4. Роль SWS/PNPLA6 в дифференцировке

Нормальная активность PNPLA6 человека может быть необходима для дифференцировки клеток [Pamies et al., 2014a,b]. Например, подавление активности PNPLA6 в клеточных культурах эмбриональной карциномы человека, направленных на дифференцировку в клетки нервной ткани с помощью ретиноевой кислоты, приводило к уменьшению ветвления отростков и сокращению их длины, снижению электрофизиологической активности клеток. Вдобавок изменялась экспрессия множества генов, контролирующих метаболизм фосфолипидов, морфогенез и дифференцировку, организацию цитоскелета [Pamies et al., 2014a]. Клетки нейробластомы человека выживают при подавлении активности PNPLA6 и способны формировать отростки при обработке ретиноевой кислотой. Однако, дополнительный синтез PNPLA6 способствует усиленному росту отростков нервных клеток [Chang et al., 2005a,b]. Показано, что при дифференцировке нервных клеток экспрессия PNPLA6 возрастает [Pamies et al., 2014a]. По-видимому, PNPLA6 важен не только для обеспечения жизнеспособности некоторых клеточных линий, но и для их дифференцировки [Sogorb et al, 2016]. Тем не менее, некоторые нейроны способны к образованию нормальных отростков и дифференцировке даже при нокауте гена PNPLA6 [Li et al., 2005].

1.2.5. Особенности экспрессии и роль гена sws у дрозофилы

Известно три транскрипта гена sws. Два из них (sws-RA и sws-RC, длина 5571 нуклеотидов, образуются вследствие альтернативного сплайсинга) появляются на стадиях эмбриона 1-3 в большом количестве, затем к стадии личинки третьего возраста их уровень падает. У имаго эти транскрипты обнаружены как в теле, так и в голове. Третий транскрипт (sws-RB, длина 1928 нуклеотидов, образуется вследствие альтернативной точки старта транскрипции, не кодирует нуклеотид-связывающий домен) появляется только у имаго в головах. В теле и в ходе развития от яйца до куколки он не был обнаружен [Hasan, 1990].

Исследование экспрессии sws с помощью транскриптомных методов показало, что транскрипты sws можно обнаружить на всех стадиях онтогенеза особей. Наибольший уровень мРНК sws найден в первые часы развития эмбриона и у взрослых особей. Низкая экспрессия sws характерна для слюнных желёз личинок, умеренный уровень экспрессии наблюдается в пищеварительной системе личинок и имаго, высокая экспрессия происходит в головах особей вне зависимости от их возраста, и очень высокий уровень транскриптов sws обнаружен в семенниках и жировом теле имаго3.

3 http://flybase.org/reports/FBgn0003656; https://motif.mvls.gla.ac.uk/FlyAtlas2 - дата обращения 01.10.2021

Хорошо охарактеризована экспрессия sws в нервной системе. У личинок третьего возраста sws проявляет себя в нейронах и в глиальных клетках, особенно заметна активность промотора гена в поверхностной глии (периневральной и/или субпериневральной) [Ryabova et al., 2021]. Белок обнаружен в аксонах нейронов и в глиальных клетках, их окружающих, а также в нейромышечных окончаниях. Дисфункция sws влияет на нейромышечные окончания: они начинают сильнее ветвиться (увеличивается число сателлитных бутонов), и становятся менее функциональными (уменьшается число активных синаптических зон) [Ryabova et al., 2018].

В мозге имаго Drosophila melanogaster ген экспрессируется повсеместно в первые дни жизни, но с возрастом экспрессия остаётся только в крупных клетках [Mühlig-Versen et al., 2005]. Кроме того, экспрессия sws обнаружена в фоторецепторных клетках [Kmoch et al., 2015].

Показано, что функция гена sws у имаго важна для жизнеспособности нейронов [Kretzschmar et al., 1997; Mühlig-Versen et al., 2005], а также для обеспечения нормальной структуры глиальных клеток [Kretzschmar et al., 1997; Mühlig-Versen et al., 2005; Dutta et al., 2016; Ryabova et al., 2021].

У мутантных по гену sws имаго в первые дни жизни мозг не отличается от нормы, однако на пятый-шестой день жизни мух в их мозге обнаруживаются полости, их число и размер растёт с возрастом. Образование полостей вызвано апоптотической гибелью нейронов [Kretzschmar et al., 1997] вследствие потери активности SWS именно в этих клетках [Mühlig-Versen et al., 2005]. Дисфункция sws ведёт также к прогрессирующей с возрастом дегенерации фасеток [Kmoch et al., 2015]. Ингибирование активности SWS с помощью нейротоксичного органофосфата вызывает заметное сокращение длины отростков нейронов в первичной культуре, прямо пропорционально зависящее от дозы токсина [Wentzell et al., 2014]. Нейродегенеративные изменения, наблюдаемые у мутантов sws7, удаётся предотвратить, используя таурурсодеоксихолевую кислоту (TUDCA), производное одной из жёлчных кислот. TUDCA оказывает противоапоптотическое действие, предотвращая активацию каспазы-3, высвобождение Bax и цитохрома C [Sunderhaus et al., 2019a].

Помимо нейронов, белок SWS найден в разных типах глии: пограничной глии между кортексом и нейропилем в протоцеребруме, фенестрированной (периневральной) и сателлитной (кортексной) глии ламины, глии нейропиля медуллы [Mühlig-Versen et al., 2005]. Экспрессия sws хорошо выявляется в поверхностной (периневральной и/или субпериневральной) глии у имаго в центральной и периферической нервной системе (ЦНС и ПНС, соответственно), также в обёртывающей глии ПНС. В глии кортекса ЦНС сигнал, свидетельствующий об экспрессии гена, не был замечен [Ryabova et al., 2021].

Потеря функции sws в глиальных клетках, обёртывающих нейроны, приводит к тому, что они образуют аберрантные мембранные структуры и множественные слои, покрывающие нейроны

[Кге128сЬшаг й а1., 1997; МиЬ^-Уегееп е! а1., 2005]. Подавление экспрессии шэ во всех глиальных клетках вызывает их апоптоз не позднее второго дня жизни имаго. Наиболее интенсивно погибают глиальные клетки, окружающие глазные доли. В меньшей степени падает число эпителиальных (астроцитоподобных) глиальных клеток. При этом в глазных долях образуются полости, наиболее заметные в кортексе ламины, на границе между ретиной и ламиной. Количество полостей увеличивается с возрастом имаго, однако число глиальных клеток при этом уже не меняется [Бийа е! а1., 2016].

К нейродегенеративным изменениям приводит подавление экспрессии шэ в отдельных типах глии, а именно в субпериневральной или обёртывающей глии ЦНС, но не в астроцитоподобной или кортексной. При нокдауне шэ в субпериневральной глии образовывались крупные аберрантные мембранные структуры (преимущественно в ламине) [Бийа е! а1., 2016]. Нокдаун шэ в этом типе глии приводит к нарушению структуры клеточного слоя, образуемого субпериневральной глией, у молодых имаго. Показано, что у мух с нокдауном гена шэ в субпериневральной глии число ядер этих клеток приблизительно на 70% меньше, чем у нормальных особей [ЯуаЬоуа е! а1., 2021].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Мелентьев Павел Алексеевич, 2022 год

7. СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1) Дубинин, Н.П., 1931. Генетико-автоматические процессы и их значение для механизма органической эволюции. Журнал экспериментальной биологии. 7(5-6), c.463-479.

2) Керкис Ю.Я., 1977. Проблемы генетики в исследованиях на дрозофиле. Под. ред. В.В. Хвостовой, Л.И. Корочикна, М.Д. Голубовского. Новосибирск: Наука, Сибир. отд., с.4-6.

3) Лучникова, Е.М., 1978. Регуляция численности и структуры популяции у дрозофилы. Под. ред. В.В.Хвостовой, М.Д. Голубовского, Л.И. Корочикна. Дрозофила в экспериментальной генетике. Новосибирск: Наука, Сибир. отд., с. 171—196.

4) Нужный Е.П., Абрамычева Н.Ю., Федотова Н.Ю. и др., 2020. РКРЬА6-ассоциированные атаксии в России: описание двух клинических случаев. Нервные болезни. 1, с.46-51.

5) Четвериков С.С., 1926. О некоторых моментах эволюционного процесса с точки зрения современной генетики. Журнал экспериментальной биологии. Сер. А., 2(1), с.3-54.

6) Adams, E.M. and Wolfner, M.F., 2007. Seminal proteins but not sperm induce morphological changes in the Drosophila melanogaster female reproductive tract during sperm storage. Journal of insect physiology, 53(4), pp.319—331.

7) Adams, M.D., Celniker, S.E., Holt, R.A., et al., 2000. The genome sequence of Drosophila melanogaster. Science, 287(5461), pp.2185-2195.

8) Ahmed, N., Liu, Y., Chen, H., Yang, P., et al., 2017. Novel cellular evidence of lipophagy within the Sertoli cells during spermatogenesis in the turtle. Aging (Albany NY), 9(1), p.41.

9) Akassoglou, K., Malester, B., Xu, J., Tessarollo, L., et al., 2004. Brain-specific deletion of neuropathy target esterase/swiss cheese results in neurodegeneration. Proceedings of the National Academy of Sciences, 101(14), pp.5075-5080.

10) Alves-Bezerra, M., Majerowicz, D., Grillo, L.A., et al., 2010. Serotonin regulates an acyl-CoA-binding protein (ACBP) gene expression in the midgut of Rhodnius prolixus. Insect biochemistry and molecular biology, 40(2), pp.119-125.

11) Andersen, J.M., R0nning, P.O., Herning, H., et al., 2016. Fatty acid composition of spermatozoa is associated with BMI and with semen quality. Andrology, 4(5), pp.857-865.

12) Anderson, K.V., Jürgens, G. and Nüsslein-Volhard, C., 1985. Establishment of dorsal-ventral polarity in the Drosophila embryo: genetic studies on the role of the Toll gene product. Cell, 42(3), pp.779-789.

13) Anderson, W.W., 1989. Selection in natural and experimental populations of Drosophila pseudoobscura. Genome, 31(1), pp.239-245.

14) Angelova, P.R., 2021. Sources and triggers of oxidative damage in neurodegeneration. Free Radical Biology and Medicine, 173, pp.52—63.

15) Aring, C.D., 1942. The systemic nervous affinity of triorthocresyl phosphate (Jamaica ginger palsy). Brain, 65(1), pp.34-47.

16) Arrese, E.L. and Soulages, J.L., 2010. Insect fat body: energy, metabolism, and regulation. Annual review of entomology, 55, pp.207-225.

17) Ashburner M., Golic K., Hawley S., 2004. Drosophila: A Laboratory Handbook. Second Edition. Cold Spring Harbor (New York): Cold Spring Harbor Laboratory Press.

18) Atorino, L., Silvestri, L., Koppen, M., et al., 2003. Loss of m-AAA protease in mitochondria causes complex I deficiency and increased sensitivity to oxidative stress in hereditary spastic paraplegia. The Journal of cell biology, 163(4), pp.777-787.

19) Auerbach, C. and Robson, J.M., 1944. Production of mutations by allyl isothiocyanate. Nature, 154(3898), pp.81-81.

20) Avila, F.W., Cohen, A.B., Ameerudeen, F.S., et al., 2015. Retention of ejaculate by Drosophila melanogaster females requires the male-derived mating plug protein PEBme. Genetics, 200(4), pp.1171-1179.

21) Awasaki, T., Lai, S.L., Ito, K. and Lee, T., 2008. Organization and postembryonic development of glial cells in the adult central brain of Drosophila. Journal of Neuroscience, 25(51), pp.13742-13753.

22) Awofala, A.A., Davies, J.A. and Jones, S., 2012. Functional roles for redox genes in ethanol sensitivity in Drosophila. Functional & integrative genomics, 12(2), pp.305-315.

23) Ayyub, C., Paranjape, J., Rodrigues, V. and Siddiqi, O., 1990. Genetics of olfactory behavior in Drosophila melanogaster. Journal of neurogenetics, 6(4), pp.243-262.

24) Bailey, A.P., Koster, G., Guillermier, C., et al., 2015. Antioxidant role for lipid droplets in a stem cell niche of Drosophila. Cell, 163(2), pp.340-353.

25) Banerjee, S., Pillai, A.M., Paik, R., et al., 2006. Axonal ensheathment and septate junction formation in the peripheral nervous system of Drosophila. Journal of neuroscience, 26(12), pp.3319-3329.

26) Bargiello, T.A., Jackson, F.R. and Young, M.W., 1984. Restoration of circadian behavioural rhythms by gene transfer in Drosophila. Nature, 312(5996), pp.752-754.

27) Beller, M., Riedel, D., Jansch, L., et al., 2006. Characterization of the Drosophila Lipid Droplet Subproteome. Molecular & Cellular Proteomics, 5(6), pp.1082-1094.

28) Benzer, S., 1967. Behavioral mutants of Drosophila isolated by countercurrent distribution. Proceedings of the National Academy of Sciences, 58(3), p.1112.

29) Bernecic, N.C., Zhang, M., Gadella, B.M., et al., 2019. BODIPY-cholesterol can be reliably used to monitor cholesterol efflux from capacitating mammalian spermatozoa. Scientific reports, 9(1), pp.112.

30) Bernecic, N.C., Gadella, B.M., de Graaf, S.P. and Leahy, T., 2020. Synergism between albumin, bicarbonate and cAMP upregulation for cholesterol efflux from ram sperm. Reproduction, 160(2), pp.269-280.

31) Bertoncin, D., Russolo, A., Caroldi, S. and Lotti, M., 1985. Neuropathy target esterase in human lymphocytes. Archives of Environmental Health: An International Journal, 40(3), pp.139-144.

32) Bettencourt da Cruz, A., Wentzell, J. and Kretzschmar, D., 2008. Swiss Cheese, a protein involved in progressive neurodegeneration, acts as a noncanonical regulatory subunit for PKA-C3. Journal of Neuroscience, 25(43), pp.10885-10892.

33) Billeter, J.C., Rideout, E.J., Dornan, A.J. and Goodwin, S.F., 2006. Control of male sexual behavior in Drosophila by the sex determination pathway. Current biology, 16(17), pp.R766-R776.

34) Biyasheva, A., Do, T.V., Lu, Y., et al., 2001. Glue secretion in the Drosophila salivary gland: a model for steroid-regulated exocytosis. Developmental biology, 231(1), pp.234-251.

35) Blackstone, C., 2018. Converging cellular themes for the hereditary spastic paraplegias. Current opinion in neurobiology, 51, pp.139-146.

36) Bogevik, A.S., Hayman, E.S., Bjerke, M.T., et al., 2020. Phospholipid and LC-PUFA metabolism in Atlantic salmon (Salmo salar) testes during sexual maturation. PloS one, 15(5), p.e0233322.

37) Boguenet, M., Bocca, C., Bouet, P.E., et al., 2020. Metabolomic signature of the seminal plasma in men with severe oligoasthenospermia. Andrology, 8(6), pp.1859-1866.

38) Bohannon-Stewart, A., Kelley, G., Kimathi, B., et al., 2014. Expression of potential regulatory genes in abdominal adipose tissue of broiler chickens during early development. Genetics research international, 2014, p.318304.

39) Böhme, M.A., McCarthy, A.W., Blaum, N., et al., 2021. Glial Synaptobrevin mediates peripheral nerve insulation, neural metabolic supply, and is required for motor function. Glia, 69(8), pp.18971915.

40) Boucher, R.J. and Gibberd, F.B., 1969. Familial ataxia, hypogonadism and retinal degeneration. Acta neurologica Scandinavica, 45(4), pp.507-510.

41) Boutet, E., El Mourabit, H., Prot, M., et al., 2009. Seipin deficiency alters fatty acid A9 desaturation and lipid droplet formation in Berardinelli-Seip congenital lipodystrophy. Biochimie, 91(6), pp.796803.

42) Bowen, P., Ferguson-Smith, M.A., Mosier, D., et al., 1965. The Laurence-Moon syndrome: association with hypogonadotrophic hypogonadism and sex-chromosome aneuploidy. Archives of internal medicine, 116(4), pp.598-604.

43) Brand, A.H. and Perrimon, N., 1993. Targeted gene expression as a means of altering cell fates and generating dominant phenotypes. Development, 118(2), pp.401-415.

44) Brekk, O.R., Honey, J.R., Lee, S., et al., 2020. Cell type-specific lipid storage changes in Parkinson's disease patient brains are recapitulated by experimental glycolipid disturbance. Proceedings of the National Academy of Sciences, 117(44), pp.27646-27654.

45) Bridges, C.B., 1916. Non-disjunction as proof of the chromosome theory of heredity (concluded). Genetics, 1(2), p.107.

46) Bridges, C.B., 1935. Salivary chromosome maps: with a key to the banding of the chromosomes of Drosophila melanogaster. Journal of Heredity, 26(2), pp.60-64.

47) Burton, M., Rose, T.M., F^rgeman, N.J. and Knudsen, J., 2005. Evolution of the acyl-CoA binding protein (ACBP). Biochemical Journal, 392(2), pp.299-307.

48) Cabirol-Pol, M.J., Khalil, B., Rival, T., et al., 2018. Glial lipid droplets and neurodegeneration in a Drosophila model of complex I deficiency. Glia, 66(4), pp.874-888.

49) Caccin, P., Rossetto, O. and Montecucco, C., 2009. Neurotoxicity of inverted-cone shaped lipids. Neurotoxicology, 30(2), pp.174-181.

50) Campos-Ortega, J.A. and Hartenstein, V., 1997. The embryonic development of Drosophila melanogaster. Springer-VerlagBerlin Heidelberg.

51) Casari, G., De Fusco, M., Ciarmatori, S., et al., 1998. Spastic paraplegia and OXPHOS impairment caused by mutations in paraplegin, a nuclear-encoded mitochondrial metalloprotease. Cell, 93(6), pp.973-983.

52) Casida, J.E., Nomura, D.K., Vose, S.C. and Fujioka, K., 2008. Organophosphate-sensitive lipases modulate brain lysophospholipids, ether lipids and endocannabinoids. Chemico-biological interactions, 175(1-3), pp.355-364.

53) Casillas, S. and Barbadilla, A., 2017. Molecular population genetics. Genetics, 205(3), pp.10031035.

54) Cassar, M., Sunderhaus, E., Wentzell, J.S., et al., 2018. The PKA-C3 catalytic subunit is required in two pairs of interneurons for successful mating of Drosophila. Scientific reports, 5(1), pp.1-8.

55) Cavanagh, J.B., 1954. The toxic effects of tri-ortho-cresyl phosphate on the nervous system: an experimental study in hens. Journal of neurology, neurosurgery, and psychiatry, 17(3), p.163.

56) Cerolini, S., Kelso, K.A., Noble, R.C., et al., 1997. Relationship between spermatozoan lipid composition and fertility during aging of chickens. Biology of Reproduction, 57(5), pp.976-980.

57) Chang, P.A., Chen, R. and Wu, Y.J., 2005a. Reduction of neuropathy target esterase does not affect neuronal differentiation, but moderate expression induces neuronal differentiation in human neuroblastoma (SK-N-SH) cell line. Molecular brain research, 141(1), pp.30-38.

58) Chang, P.A., Wu, Y.J., Chen, R., et al., 2005b. Inhibition of neuropathy target esterase expressing by antisense RNA does not affect neural differentiation in human neuroblastoma (SK-N-SH) cell line. Molecular and cellular biochemistry, 272(1), pp.47-54.

59) Chang, P.A. and Wu, Y.J., 2010. Neuropathy target esterase: an essential enzyme for neural development and axonal maintenance. The international journal of biochemistry & cell biology, 42(5), pp.573-575.

60) Chang, P.A., Long, D.X., Wu, Y.J., et al., 2009. Identification and characterization of chicken neuropathy target esterase. Gene, 435(1-2), pp.45-52.

61) Chang, P., He, L., Wang, Y., et al., 2019. Characterization of the interaction of neuropathy target esterase with the endoplasmic reticulum and lipid droplets. Biomolecules, 9(12), p.848.

62) Chaudhuri, P., Smith, A.H., Putta, P., et al., 2021. P110a and P1105 catalytic subunits of PI3 kinase regulate lysophosphatidylcholine-induced TRPC6 externalization. American Journal of Physiology - Cell Physiology, 320(5), pp.C731-C741.

63) Chen, R., Chang, P.A., Long, D.X., et al., 2007a. Down-regulation of neuropathy target esterase by protein kinase C activation with PMA stimulation. Molecular and cellular biochemistry, 302(1), pp.179-185.

64) Chen, R., Chang, P.A., Long, D.X., et al., 2007b. G protein ß2 subunit interacts directly with neuropathy target esterase and regulates its activity. The internationaljournal of biochemistry & cell biology, 39(1), pp.124-132.

65) Chen, J.X., Xu, L.L., Mei, J.H., et al., 2012. Involvement of neuropathy target esterase in tri-ortho-cresyl phosphate-induced testicular spermatogenesis failure and growth inhibition of spermatogonial stem cells in mice. Toxicology letters, 211(1), pp.54-61.

66) Chen, H., Huang, Y., Yang, P., et al., 2020. Autophagy enhances lipid droplet development during spermiogenesis in Chinese soft-shelled turtle, Pelodiscus sinensis. Theriogenology, 147, pp.154-165.

67) Chernomordik, L.V., Vogel, S.S., Sokoloff, A., et al., 1993. Lysolipids reversibly inhibit Ca2+-, GTP-and pH-dependent fusion of biological membranes. Febs Letters, 318(1), pp.71-76.

68) Chiang, A.C.Y., Yang, H. and Yamashita, Y.M., 2017. spict, a cyst cell-specific gene, regulates starvation-induced spermatogonial cell death in the Drosophila testis. Scientific reports, 7(1), pp.113.

69) Chiang, Y.N., Tan, K.J., Chung, H., et al., 2016. Steroid hormone signaling is essential for pheromone production and oenocyte survival. PLoS genetics, 12(6), p.e1006126.

70) Chiurchiu, V., Orlacchio, A. and Maccarrone, M., 2016. Is modulation of oxidative stress an answer? The state of the art of redox therapeutic actions in neurodegenerative diseases. Oxidative medicine and cellular longevity, 2016, p. 7909380.

71) Christensen, K.E. and MacKenzie, R.E., 2008. Mitochondrial methylenetetrahydrofolate dehydrogenase, methenyltetrahydrofolate cyclohydrolase, and formyltetrahydrofolate synthetases. Vitamins & Hormones, 79, pp.393-410.

72) Cohen, E., Sawyer, J.K., Peterson, N.G., et al., 2020. Physiology, development, and disease modeling in the Drosophila excretory system. Genetics, 214(2), pp.235-264.

73) Colles, S.M. and Chisolm, G.M., 2000. Lysophosphatidylcholine-induced cellular injury in cultured fibroblasts involves oxidative events. Journal of Lipid Research, 41(8), pp. 1188-1198.

74) Colombani, J. and Andersen, D.S., 2020. The Drosophila gut: a gatekeeper and coordinator of organism fitness and physiology. Wiley Interdisciplinary Reviews: Developmental Biology, 9(6), p.e378.

75) Comuzzie, A.G., Cole, S.A., Laston, S.L., et al., 2012. Novel genetic loci identified for the pathophysiology of childhood obesity in the Hispanic population. PloS one, 7(12), p.e51954.

76) Coombe, P.E. and Heisenberg, M., 1986. The structural brain mutant Vacuolar medulla of Drosophila melanogaster with specific behavioral defects and cell degeneration in the adult. Journal of neurogenetics, 3(3), pp.135-158.

77) Coutelier, M., Hammer, M.B., Stevanin, G., et al., 2018. Efficacy of exome-targeted capture sequencing to detect mutations in known cerebellar ataxia genes. JAMA neurology, 75(5), pp.591599.

78) Dabral, D. and Coorssen, J.R., 2019. Arachidonic acid and lysophosphatidylcholine inhibit multiple late steps of regulated exocytosis. Biochemical and biophysical research communications, 515(2), pp.261-267.

79) D'Amore, A., Tessa, A., Casali, C., et al., 2018. Next generation molecular diagnosis of hereditary spastic paraplegias: an Italian cross-sectional study. Frontiers in neurology, 9, p.981.

80) Das, U.N., 2006a. Essential fatty acids: biochemistry, physiology and pathology. Biotechnology Journal: Healthcare Nutrition Technology, 1(4), pp.420-439.

81) Das, U.N., 2006b. Essential fatty acids - a review. Current pharmaceutical biotechnology, 7(6), pp.467-482.

82) de Souza, P.V.S., de Rezende Pinto, W.B.V., de Rezende Batistella, G.N., et al., 2017. Hereditary spastic paraplegia: clinical and genetic hallmarks. The Cerebellum, 16(2), pp.525-551.

83) Deik, A., Johannes, B., Rucker, J.C., et al., 2014. Compound heterozygous PNPLA6 mutations cause Boucher-Neuhauser syndrome with late-onset ataxia. Journal of neurology, 261(12), pp.2411-2423.

84) Demarco, R.S. and Jones, D.L., 2019. Mitochondrial fission regulates germ cell differentiation by suppressing ROS-mediated activation of Epidermal Growth Factor Signaling in the Drosophila larval testis. Scientific reports, 9(1), pp.1-10.

85) Demarco, R.S. and Jones, D.L., 2020. EGFR signaling promotes basal autophagy for lipid homeostasis and somatic stem cell maintenance in the Drosophila testis. Autophagy, 16(6), pp.11451147.

86) Demarco, R.S., Eikenes, A.H., Haglund, K. and Jones, D.L., 2014. Investigating spermatogenesis in Drosophila melanogaster. Methods, 68(1), pp.218-227.

87) Demarco, R.S., Uyemura, B.S., D'Alterio, C. and Jones, D.L., 2019. Mitochondrial fusion regulates lipid homeostasis and stem cell maintenance in the Drosophila testis. Nature cell biology, 21(6), pp.710-720.

88) Demarco, R.S., Uyemura, B.S. and Jones, D.L., 2020. EGFR signaling stimulates autophagy to regulate stem cell maintenance and lipid homeostasis in the Drosophila testis. Cell reports, 30(4), pp.1101-1116.

89) Demerec, M., 1950. Biology of drosophila. New York: John Wiley and Sons, Inc.

90) DeNaro, B.B., Dhrami-Gavazi, E., Rubaltelli, D.M., et al., 2018. Chorioretinal changes in a genetically confirmed case of Boucher-Neuhauser syndrome. Retinal cases & brief reports, 15(2), pp.179-184.

91) Denton, K.R., Lei, L., Grenier, J., et al., 2014. Loss of spastin function results in disease-specific axonal defects in human pluripotent stem cell-based models of hereditary spastic paraplegia. Stem cells, 32(2), pp.414-423.

92) Desalvo, M.K., Mayer, N., Mayer, F. and Bainton, R.J., 2011. Physiologic and anatomic characterization of the brain surface glia barrier of Drosophila. Glia, 59(9), pp.1322-1340.

93) Dhara, M., Martinez, M.M., Makke, M., et al., 2020. Synergistic actions of v-SNARE transmembrane domains and membrane-curvature modifying lipids in neurotransmitter release. Elife, 9, p.e55152.

94) Dimarqc, J.L., Hoffmann, D., Meister, M., et al., 1994. Characterization and transcriptional profiles of a Drosophila gene encoding an insect defensin: a study in insect immunity. European Journal of Biochemistry, 221(1), pp.201-209.

95) Dobzhansky, T. and Sturtevant, A.H., 1938. Inversions in the chromosomes of Drosophila pseudoobscura. Genetics, 23(1), p.28.

96) Dobzhansky, T., 1946. Genetics of natural populations. XIII. Recombination and variability in populations of Drosophila pseudoobscura. Genetics, 31(3), p.269.

97) Dobzhansky, T. and Levene, H., 1948. Genetics of natural populations. XVII. Proof of operation of natural selection in wild populations of Drosophila pseudoobscura. Genetics, 33(6), p.537.

98) Dogan, M., Eroz, R. and Ozturk, E., 2021. Chorioretinal dystrophy, hypogonadotropic hypogonadism, and cerebellar ataxia: Boucher-Neuhauser syndrome due to a homozygous (c. 3524C> G (p. Ser1175Cys)) variant in PNPLA6 gene. Ophthalmic Genetics, 42(3), pp.276-282.

99) Dow, J.A., Krause, S.A. and Herzyk, P., 2021. Updates on ion and water transport by the Malpighian tubule. Current Opinion in Insect Science, 47, pp.31-37.

100) Dubinin, N.P., 1933. Step-allelomorphism in Drosophila melanogaster. Journal of Genetics, 27(3), pp.443-464.

101) Dubinin, N.P. and Tiniakov, G.G., 1946. Inversion gradients and natural selection in ecological races of Drosophila funebris. Genetics, 31(6), p.537.

102) Dubinin, N.P., 1947. Work of Soviet biologists: theoretical genetics. Science, 105(2718), pp.109112.

103) Dudek, B.R. and Richardson, R.J., 1982. Evidence for the existence of neurotoxic esterase in neural and lymphatic tissue of the adult hen. Biochemical pharmacology, 31(6), pp.1117-1121.

104) Dutta, S., Rieche, F., Eckl, N., et al., 2016. Glial expression of Swiss cheese (SWS), the Drosophila orthologue of neuropathy target esterase (NTE), is required for neuronal ensheathment and function. Disease models & mechanisms, 9(3), pp.283-294.

105) Eastman, S.W., Yassaee, M. and Bieniasz, P.D., 2009. A role for ubiquitin ligases and Spartin/SPG20 in lipid droplet turnover. Journal of Cell Biology, 154(6), pp.881-894.

106) Ehrman, L., 1968. Frequency dependence of mating success in Drosophila pseudoobscura. Genetics Research, 11(2), pp.135-140.

107) El-Fawal, H.A. and McCain, W.C., 2008. Antibodies to neural proteins in organophosphorus-induced delayed neuropathy (OPIDN) and its amelioration. Neurotoxicology and teratology, 30(3), pp.161-166.

108) Emekli, A.S., Samanci, B., §im§ir, G., et al., 2021. A novel PNPLA6 mutation in a Turkish family with intractable Holmes tremor and spastic ataxia. Neurological Sciences, 42(4), pp.1535-1539.

109) Emery, P., So, W.V., Kaneko, M., et al., 1998. CRY, a Drosophila clock and light-regulated cryptochrome, is a major contributor to circadian rhythm resetting and photosensitivity. Cell, 95(5), pp.669-679.

110) Emery, P., Stanewsky, R., Helfrich-Forster, C., et al., 2000. Drosophila CRY is a deep brain circadian photoreceptor. Neuron, 26(2), pp.493-504.

111) Escoffier, J., Jemel, I., Tanemoto, A., et al., 2010. Group X phospholipase A2 is released during sperm acrosome reaction and controls fertility outcome in mice. The Journal of clinical investigation, 120(5), pp.1415-1428.

112) Fabian, L., Wei, H.C., Rollins, J., et al., 2010. Phosphatidylinositol 4, 5-bisphosphate directs spermatid cell polarity and exocyst localization in Drosophila. Molecular biology of the cell, 21(9), pp.1546-1555.

113) Fabrizio, J.J., Rollins, J., Bazinet, C.W., et al., 2020. Tubulin-binding cofactor E-like (TBCEL), the protein product of the mulet gene, is required in the germline for the regulation of inter-flagellar microtubule dynamics during spermatid individualization. Biology open, 9(2), p.bio049080.

114) Farkas, R., 2015. Apocrine secretion: new insights into an old phenomenon. Biochimica Et Biophysica Acta (BBA) - General Subjects, 1850(9), pp.1740-1750.

115) Fehlbaum, P., Bulet, P., Michaut, L., et al., 1994. Insect immunity. Septic injury of Drosophila induces the synthesis of a potent antifungal peptide with sequence homology to plant antifungal peptides. Journal of Biological Chemistry, 269(52), pp.33159-33163.

116) Fernandez Da Silva, J.F., Alves, J.V., Silva-Neto, J.A., et al., 2021. Lysophosphatidylcholine induces oxidative stress in human endothelial cells via NOX5 activation-implications in atherosclerosis. Clinical Science, 135(15), pp.1845-1858.

117) Fernández-Murray, J.P. and McMaster, C.R., 2007. Phosphatidylcholine synthesis and its catabolism by yeast neuropathy target esterase 1. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular and Cell Biology of Lipids, 1771(3), pp.331-336.

118) Ferrandon, D., Imler, J.L., Hetru, C. and Hoffmann, J.A., 2007. The Drosophila systemic immune response: sensing and signalling during bacterial and fungal infections. Nature reviews immunology, 7(11), pp.862-874.

119) Ferreirinha, F., Quattrini, A., Pirozzi, M., et al., 2004. Axonal degeneration in paraplegin-deficient mice is associated with abnormal mitochondria and impairment of axonal transport. The Journal of clinical investigation, 113(2), pp.231-242.

120) Field, M.S., Kamynina, E., Watkins, D., et al., 2015. Human mutations in methylenetetrahydrofolate dehydrogenase 1 impair nuclear de novo thymidylate biosynthesis. Proceedings of the National Academy of Sciences, 112(2), pp.400-405.

121) Findlay, G.D., Yi, X., MacCoss, M.J. and Swanson, W.J., 2008. Proteomics reveals novel Drosophila seminal fluid proteins transferred at mating. PLoS biology, 6(7), p.e178.

122) Fink, J.K., 2013. Hereditary spastic paraplegia: clinico-pathologic features and emerging molecular mechanisms. Acta neuropathologica, 126(3), pp.307-328.

123) Fogel, B.L., Lee, H., Deignan, J.L., et al., 2014. Exome sequencing in the clinical diagnosis of sporadic or familial cerebellar ataxia. JAMA neurology, 71(10), pp.1237-1246.

124) Forshaw, P.J., Atkins, J., Ray, D.E. and Glynn, P., 2001. The catalytic domain of human neuropathy target esterase mediates an organophosphate-sensitive ionic conductance across liposome membranes. Journal of neurochemistry, 79(2), pp.400-406.

125) Furland, N.E., Luquez, J.M., Oresti, G.M. and Aveldaño, M.I., 2011. Mild testicular hyperthermia transiently increases lipid droplet accumulation and modifies sphingolipid and glycerophospholipid acyl chains in the rat testis. Lipids, 46(5), pp.443-454.

126) Gallazzini, M., Ferraris, J.D., Kunin, M., et al., 2006. Neuropathy target esterase catalyzes osmoprotective renal synthesis of glycerophosphocholine in response to high NaCl. Proceedings of the National Academy of Sciences, 103(41), pp.15260-15265.

127) Gautam, M., Jara, J.H., Sekerkova, G., et al., 2016. Absence of alsin function leads to corticospinal motor neuron vulnerability via novel disease mechanisms. Human molecular genetics, 25(6), pp.1074-1087.

128) Geisler, R., Bergmann, A., Hiromi, Y. and Nüsslein-Volhard, C., 1992. cactus, a gene involved in dorsoventral pattern formation of Drosophila, is related to the IkB gene family of vertebrates. Cell, 77(4), pp.613-621.

129) Geltinger, F., Schartel, L., Wiederstein, M., et al., 2020. Friend or Foe: Lipid Droplets as Organelles for Protein and Lipid Storage in Cellular Stress Response, Aging and Disease. Molecules, 25(21), p.5053.

130) Giansanti, M.G. and Fuller, M.T., 2012. What Drosophila spermatocytes tell us about the mechanisms underlying cytokinesis. Cytoskeleton, 69(11), pp.869-881.

131) Girard, V., Goubard, V., Querenet, M., et al., 2020. Spen modulates lipid droplet content in adult Drosophila glial cells and protects against paraquat toxicity. Scientific reports, 70(1), pp.1-10.

132) Girard, V., Jollivet, F., Knittelfelder, O., et al., 2021. Abnormal accumulation of lipid droplets in neurons induces the conversion of alpha-Synuclein to proteolytic resistant forms in a Drosophila model of Parkinson's disease. PLoSgenetics, 77(11), p.e1009921.

133) Glander, H.J., Schiller, J., Süss, R., et al., 2002. Deterioration of spermatozoal plasma membrane is associated with an increase of sperm lyso-phosphatidylcholines. Andrologia, 34(6), pp.360-366.

134) Glynn, P., 2005. Neuropathy target esterase and phospholipid deacylation. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular and Cell Biology of Lipids, 7736(2), pp.87-93.

135) Greiner, A.J., Richardson, R.J., Worden, R.M. and Ofoli, R.Y., 2010. Influence of lysophospholipid hydrolysis by the catalytic domain of neuropathy target esterase on the fluidity of bilayer lipid membranes. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Biomembranes, 7798(8), pp.15331539.

136) Gücüyener, K., Pinarli, F.G., Erba§, D., et al., 2010. Is oxidative damage in operation in patients with hereditary spastic paraparesis? Brain and Development, 32(2), pp.130-136.

137) Guo, F., Yu, J., Jung, H.J., Abruzzi, K.C., et al., 2016. Circadian neuron feedback controls the Drosophila sleep-activity profile. Nature, 536(7616), pp.292-297.

138) Guo, R. and Reinhardt, K., 2020. Dietary polyunsaturated fatty acids affect volume and metabolism of Drosophila melanogaster sperm. Journal of Evolutionary Biology, 33(4), pp.544-550.

139) Guo, X., Lv, J. and Xi, R., 2021. The Specification and Function of Enteroendocrine Cells in Drosophila and Mammals: A Comparative Review. The FEBS Journal.

140) Hale, B.J., Fernandez, R.F., Kim, S.Q., et al., 2019. Acyl-CoA synthetase 6 enriches seminiferous tubules with the ro-3 fatty acid docosahexaenoic acid and is required for male fertility in the mouse. Journal of Biological Chemistry, 294(39), pp.14394-14405.

141) Hardin, P.E., Hall, J.C. and Rosbash, M., 1990. Feedback of the Drosophilaperiod gene product on circadian cycling of its messenger RNA levels. Nature, 343(6258), pp.536-540.

142) Hardin, P.E., Hall, J.C. and Rosbash, M., 1992. Circadian oscillations in period gene mRNA levels are transcriptionally regulated. Proceedings of the National Academy of Sciences, 89(24), pp.11711-11715.

143) Hartenshtein, V., 1988. Development of Drosophila larval sensory organs: spatiotemporal pattern of sensory neurones, peripheral axonal pathways and sensilla differentiation. Development, 102(4), pp.869-886.

144) Hasan, G., 1990. Molecular cloning of an olfactory gene from Drosophila melanogaster. Proceedings of the National Academy of Sciences, 87(22), pp.9037-9041.

145) Hashimoto, Y., Shirane, M., Matsuzaki, F., et al., 2014. Protrudin regulates endoplasmic reticulum morphology and function associated with the pathogenesis of hereditary spastic paraplegia. Journal of Biological Chemistry, 289(19), pp.12946-12961.

146) Häsler, S., Vallis, Y., Jolin, H.E., et al., 2014. GRAF1a is a brain-specific protein that promotes lipid droplet clustering and growth, and is enriched at lipid droplet junctions. Journal of cell science, 127(21), pp.4602-4619.

147) Heier, C. and Kühnlein, R.P., 2018. Triacylglycerol metabolism in Drosophila melanogaster. Genetics, 210(4), pp.1163-1184.

148) Heier, C., Knittelfelder, O., Hofbauer, H.F., et al., 2021. Hormone-sensitive lipase couples intergenerational sterol metabolism to reproductive success. Elife, 10, p.e63252.

149) Hein, N.D., Rainier, S.R., Richardson, R.J. and Fink, J.K., 2010. Motor neuron disease due to neuropathy target esterase mutation: enzyme analysis of fibroblasts from human subjects yields insights into pathogenesis. Toxicology letters, 199(1), pp.1-5.

150) Heisenberg, M., 1980. Mutants of brain structure and function: what is the significance of the mushroom bodies for behavior? In Development and neurobiology of Drosophila (pp. 373-390). Springer, Boston, MA.

151) Heisenberg, M.A.K.B. and Böhl, K., 1979. Isolation of anatomical brain mutants of Drosophila by histological means. Zeitschrift für Naturforschung C, 34(1-2), pp.143-147.

152) Hermo, L., Chung, S., Gregory, M., et al., 2008. Alterations in the testis of hormone sensitive lipase-deficient mice is associated with decreased sperm counts, sperm motility, and fertility. Molecular Reproduction and Development: Incorporating Gamete Research, 75(4), pp.565-577.

153) Holmes, G., 1908. A form of familial degeneration of the cerebellum. Brain, 30(4), pp.466-489.

154) Hopkins, B.R., Avila, F.W. and Wolfner, M.F., 2018. Insect male reproductive glands and their products. Encyclopedia of Reproduction, 6, p.137e144.

155) Hopkins, B.R., Sepil, I., Bonham, S., et al., 2019. BMP signaling inhibition in Drosophila secondary cells remodels the seminal proteome and self and rival ejaculate functions. Proceedings of the National Academy of Sciences, 116(49), pp.24719-24728.

156) Hosseini, B., Nourmohamadi, M., Hajipour, S., et al., 2019. The effect of omega-3 fatty acids, EPA, and/or DHA on male infertility: a systematic review and meta-analysis. Journal of dietary supplements, 16(2), pp.245-256.

157) Hotta, Y. and Benzer, S., 1970. Genetic dissection of the Drosophila nervous system by means of mosaics. Proceedings of the National Academy of Sciences, 67(3), pp. 1156-1163.

158) Hudson, A.G., Parrott, B.B., Qian, Y. and Schulz, C., 2013. A temporal signature of epidermal growth factor signaling regulates the differentiation of germline cells in testes of Drosophila melanogaster. PloS one, 5(8), p.e70678.

159) Hufnagel, R.B., Arno, G., Hein, N.D., et al., 2015. Neuropathy target esterase impairments cause Oliver-McFarlane and Laurence-Moon syndromes. Journal of medical genetics, 52(2), pp.85-94.

160) Inloes, J.M., Hsu, K.L., Dix, M.M., et al., 2014. The hereditary spastic paraplegia-related enzyme DDHD2 is a principal brain triglyceride lipase. Proceedings of the National Academy of Sciences, 111(41), pp.14924-14929.

161) Inloes, J.M., Kiosses, W.B., Wang, H., et al., 2018. Functional contribution of the spastic paraplegia-related triglyceride hydrolase DDHD2 to the formation and content of lipid droplets. Biochemistry, 57(5), pp.827-838.

162) Inoue, H., Baba, T., Sato, S., et al., 2012. Roles of SAM and DDHD domains in mammalian intracellular phospholipase A1 KIAA0725p. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Cell Research, 1523(4), pp.930-939.

163) Ioannou, M.S., Jackson, J., Sheu, S.H. et al., 2019. Neuron-astrocyte metabolic coupling protects against activity-induced fatty acid toxicity. Cell, 177(6), pp.1522-1535.

164) Islam, A., Kagawa, Y., Miyazaki, H., et al., 2019. FABP7 protects astrocytes against ROS toxicity via lipid droplet formation. Molecular neurobiology, 56(8), pp.5763-5779.

165) Ismaeel, S. and Qadri, A., 2021. ATP Release Drives Inflammation with Lysophosphatidylcholine. ImmunoHorizons, 5(4), pp.219-233.

166) Jarc, E. and Petan, T., 2019. Lipid droplets and the management of cellular stress. The Yale journal of biology and medicine, 92(3), p.435.

167) Jin, Y., Tan, Y., Chen, L., et al., 2018. Reactive oxygen species induces lipid droplet accumulation in HepG2 cells by increasing perilipin 2 expression. Internationaljournal of molecular sciences, 19(11), p.3445.

168) Johnson, M.K., 1969. The delayed neurotoxic effect of some organophosphorus compounds. Identification of the phosphorylation site as an esterase. Biochemical Journal, 114(4), pp.711-717.

169) Johnson, M.K., 1970. Organophosphorus and other inhibitors of brainneurotoxic esterase'and the development of delayed neurotoxicity in hens. Biochemical Journal, 720(3), p.523.

170) Johnson, M.K., 1975. The delayed neuropathy caused by some organophosphorus esters: mechanism and challenge. CRC Critical Reviews in toxicology, 3(3), pp.289-316.

171) Johnson, M.K., 1990. Organophosphates and delayed neuropathy—is NTE alive and well? Toxicology and applied pharmacology, 702(3), pp.385-399.

172) Jung, A., Hollmann, M. and Schäfer, M.A., 2007. The fatty acid elongase NOA is necessary for viability and has a somatic role in Drosophila sperm development. Journal of cell science, 720(16), pp.2924-2934.

173) Kamalesh, K., Scher, N., Biton, T., et al., 2021. Exocytosis by vesicle crumpling maintains apical membrane homeostasis during exocrine secretion. Developmental cell, 56(11), pp.1603-1616.

174) Karch, F., Weiffenbach, B., Peifer, M., et al., 1985. The abdominal region of the bithorax complex. In Genes, Development and Cancer (pp. 303-332). Springer, Boston, MA.

175) Khateeb, S., Flusser, H., Ofir, R., et al., 2006. PLA2G6 mutation underlies infantile neuroaxonal dystrophy. The American Journal of Human Genetics, 79(5), pp.942-948.

176) Kiger, A.A., White-Cooper, H. and Fuller, M.T., 2000. Somatic support cells restrict germline stem cell self-renewal and promote differentiation. Nature, 407(6805), pp.750-754.

177) Kim, J., Chung, Y.D., Park, D.Y., et al., 2003. A TRPV family ion channel required for hearing in Drosophila. Nature, 424(6944), pp.81-84.

178) Kim, Y.J., Bartalska, K., Audsley, N., et al., 2010. MIPs are ancestral ligands for the sex peptide receptor. Proceedings of the National Academy of Sciences, 707(14), pp.6520-6525.

179) Kinghorn, K.J., Castillo-Quan, J.I., Bartolome, F., et al., 2015. Loss of PLA2G6 leads to elevated mitochondrial lipid peroxidation and mitochondrial dysfunction. Brain, 738(7), pp.1801-1816.

180) Kinghorn, K.J. and Castillo-Quan, J.I., 2016. Mitochondrial dysfunction and defects in lipid homeostasis as therapeutic targets in neurodegeneration with brain iron accumulation. Rare Diseases, 4(1), pp.1801-1816.

181) Kis, V., Barti, B., Lippai, M. and Sass, M., 2015. Specialized cortex glial cells accumulate lipid droplets in Drosophila melanogaster. PLoS One, 70(7), p.e0131250.

182) Kishta, O., Adeeko, A., Li, D., Luu, T., et al., 2007. In utero exposure to tributyltin chloride differentially alters male and female fetal gonad morphology and gene expression profiles in the Sprague-Dawley rat. Reproductive Toxicology, 23(1), pp.1-11.

183) Klemm, R.W., Norton, J.P., Cole, R.A., et al., 2013. A conserved role for atlastin GTPases in regulating lipid droplet size. Cell reports, 3(5), pp.1465-1475.

184) Kmoch, S., Majewski, J., Ramamurthy, V., et al., 2015. Mutations in PNPLA6 are linked to photoreceptor degeneration and various forms of childhood blindness. Nature communications, 6(1), pp.1-10.

185) Knoll-Gellida, A., Dubrana, L.E., Bourcier, L.M., et al., 2021. Hyperactivity and Seizure Induced by Tricresyl Phosphate Are Isomer Specific and Not Linked to Phenyl Valerate-Neuropathy Target Esterase Activity Inhibition in Zebrafish. Toxicological Sciences, 180(1), pp.160-174.

186) Koh, K., Kobayashi, F., Miwa, M., et al., 2015. Novel mutations in the PNPLA6 gene in Boucher-Neuhäuser syndrome. Journal of human genetics, 60(4), pp.217-220.

187) Kohler, R.E., 1993. Drosophila: A life in the laboratory. Journal of the History of Biology, pp.281-310.

188) Konno, T., Melo, E.P., Chambers, J.E. and Avezov, E., 2021. Intracellular Sources of ROS/H2O2 in Health and Neurodegeneration: Spotlight on Endoplasmic Reticulum. Cells, 10(2), p.233.

189) Konopka, R.J. and Benzer, S., 1971. Clock mutants of Drosophila melanogaster. Proceedings of the National Academy of Sciences, 68(9), pp.2112-2116.

190) Kottmeier, R., Bittern, J., Schoofs, A., et al., 2020. Wrapping glia regulates neuronal signaling speed and precision in the peripheral nervous system of Drosophila. Nature communications, 11(1), pp.1-17.

191) Kremer, M.C., Jung, C., Batelli, S., et al., 2017. The glia of the adult Drosophila nervous system. Glia, 65(4), pp.606-638.

192) Kretzschmar, D., Hasan, G., Sharma, S., et al., 1997. The swiss cheese mutant causes glial hyperwrapping and brain degeneration in Drosophila. Journal of Neuroscience, 17(19), pp.74257432.

193) Kuang, W., Zhang, J., Lan, Z., et al., 2021. SLC22A14 is a mitochondrial riboflavin transporter required for sperm oxidative phosphorylation and male fertility. Cell reports, 35(3), p.109025.

194) Kubli, E., 2003. Sex-peptides: seminal peptides of the Drosophila male. Cellular andMolecular Life Sciences CMLS, 60(8), pp.1689-1704.

195) Kuramoto, K., Okamura, T., Yamaguchi, T., et al., 2012. Perilipin 5, a Lipid Droplet-binding Protein, Protects Heart from Oxidative Burden by Sequestering Fatty Acid from Excessive Oxidation. Journal of Biological Chemistry, 287(28), pp.23852-23863.

196) Lagarrigue, M., Lavigne, R., Guével, B., et al., 2020. Spatial segmentation and metabolite annotation involved in sperm maturation in the rat epididymis by MALDI imaging mass spectrometry. Journal of Mass Spectrometry, 55(12), p.e4633.

197) Lanfray, D., Caron, A., Roy, M.C., et al., 2016. Involvement of the Acyl-CoA binding domain containing 7 in the control of food intake and energy expenditure in mice. Elife, 5, p.e11742.

198) Langdahl, J.H., Frederiksen, A.L., Nguyen, N., et al., 2017. Boucher Neuhauser Syndrome-a rare cause of inherited hypogonadotropic hypogonadism. A case of two adult siblings with two novel mutations in PNPLA6. European journal of medical genetics, 60(2), pp.105-109.

199) Laurence, J.Z., Moon R.C. 1866. Four cases of retinitis pigmentosa occurring in the same family, and accompanied by general imperfections of development. Ophthalmol Rev, 2, pp.32-41.

200) Leahy, T. and Gadella, B.M., 2015. New insights into the regulation of cholesterol efflux from the sperm membrane. Asian Journal of Andrology, 17(4), p.561.

201) Lehmann, R. and Nusslein-Volhard, C., 1986. Abdominal segmentation, pole cell formation, and embryonic polarity require the localized activity of oskar, a maternal gene in Drosophila. Cell, 47(1), pp.141-152.

202) Lemaitre, B., Kromer-Metzger, E., Michaut, L., et al., 1995. A recessive mutation, immune deficiency (imd), defines two distinct control pathways in the Drosophila host defense. Proceedings of the National Academy of Sciences, 92(21), pp.9465-9469.

203) Lemaitre, B., Nicolas, E., Michaut, L., et al., 1996. The dorsoventral regulatory gene cassette spatzle/Toll/cactus controls the potent antifungal response in Drosophila adults. Cell, 56(6), pp.973983.

204) Lemaitre, B., Reichhart, J.M. and Hoffmann, J.A., 1997. Drosophila host defense: differential induction of antimicrobial peptide genes after infection by various classes of microorganisms. Proceedings of the National Academy of Sciences, 94(26), pp.14614-14619.

205) Lemaitre, B. and Hoffmann, J., 2007. The host defense of Drosophila melanogaster. Annu. Rev. Immunol., 25, pp.697-743.

206) Lenzi, A., Gandini, L., Maresca, V., et al., 2000. Fatty acid composition of spermatozoa and immature germ cells. Molecular human reproduction, 6(3), pp.226-231.

207) Lewis, E.B., 1942. A genetic and cytological analysis of a tandem duplication and its included loci in Drosophila melanogaster. Doctoral dissertation, California Institute of Technology.

208) Lewis, E.B., 1978. A gene complex controlling segmentation in Drosophila. Genes, development and cancer, pp.205-217.

209) Lewis, E.B., 2003. C.B. Bridges' repeat hypothesis and the nature of the gene. Genetics, 164(2), pp.427-431.

210) Lewis, E.B., 2004. Developmental genetics of drosophila. Annals of the New York Academy of Sciences, 1035(1), pp.94-97.

211) Lewontin, R.C., 1957. The adaptations of populations to varying environments. In Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology (Vol. 22, pp. 395-408). Cold Spring Harbor Laboratory Press.

212) Lewontin, R.C. and Hubby, J.L., 1966. A molecular approach to the study of genic heterozygosity in natural populations. II. Amount of variation and degree of heterozygosity in natural populations of Drosophilapseudoobscura. Genetics, 54(2), p.595.

213) Lewontin, R.C., 1973. Population genetics. Annual review of genetics, 7(1), pp.1-17.

214) Li, Y., Dinsdale, D. and Glynn, P., 2003. Protein domains, catalytic activity, and subcellular distribution of neuropathy target esterase in mammalian cells. Journal of Biological Chemistry, 278(10), pp.8820-8825.

215) Li, Z., Szurek, P.F., Jiang, C., Pao, A., et al., 2005. Neuronal differentiation of NTE-deficient embryonic stem cells. Biochemical and biophysical research communications, 330(4), pp.11031109.

216) Li, H.M., Sun, L.I.J.I.E., Mittapalli, O., et al., 2009. Transcriptional signatures in response to wheat germ agglutinin and starvation in Drosophila melanogaster larval midgut. Insect molecular biology, 78(1), pp.21-31.

217) Li, N., Sancak, Y., Frasor, J. and Atilla-Gokcumen, G.E., 2018. A protective role for triacylglycerols during apoptosis. Biochemistry, 57(1), pp.72-80.

218) Li, S., Yu, X. and Feng, Q., 2019. Fat body biology in the last decade. Annual review of entomology, 64, pp.315-333.

219) Limber, E.R., Bresnick, G.H., Lebovitz, R.M., et al., 1989. Spinocerebellar ataxia, hypogonadotropic hypogonadism, and choroidal dystrophy (Boucher-Neuhauser syndrome. American journal of medical genetics, 33(3), pp.409-414.

220) Limmer, S., Weiler, A., Volkenhoff, A., et al., 2014. The Drosophila blood-brain barrier: development and function of a glial endothelium. Frontiers in neuroscience, 8, p.365.

221) Lisbjerg, K., Andersen, M.K., Bertelsen, M., et al., 2021. Oliver McFarlane syndrome: two new cases and a review of the literature. Ophthalmic Genetics, pp.1-10.

222) Liu, H. and Kubli, E., 2003. Sex-peptide is the molecular basis of the sperm effect in Drosophila melanogaster. Proceedings of the National Academy of Sciences, 700(17), pp.9929-9933.

223) Liu, L., MacKenzie, K.R., Putluri, N., et al., 2017. The glia-neuron lactate shuttle and elevated ROS promote lipid synthesis in neurons and lipid droplet accumulation in glia via APOE/D. Cell metabolism, 26(5), pp.719-737.

224) Liu, L., Zhang, K., Sandoval, H., et al., 2015. Glial lipid droplets and ROS induced by mitochondrial defects promote neurodegeneration. Cell, 760(1-2), pp.177-190.

225) Liu, F., Ji, Y., Li, G., et al., 2020. Identification of Oliver-McFarlane syndrome caused by novel compound heterozygous variants of PNPLA6. Gene, 767, p.145027.

226) Liu, T., Wang, X., Guo, F., et al., 2021. Lysophosphatidylcholine induces apoptosis and inflammatory damage in brain microvascular endothelial cells via GPR4-mediated NLRP3 inflammasome activation. Toxicology in Vitro, 77, p.105227.

227) Locci, S., Bianchi, S., Tessa, A., et al., 2021. Gordon Holmes syndrome caused by two novel mutations in the PNPLA6 gene. Clinical Neurology and Neurosurgery, p.106763.

228) Lotti, M. and Johnson, M.K., 1978. Neurotoxicity of organophosphorus pesticides: predictions can be based on in vitro studies with hen and human enzymes. Archives of toxicology, 47(3), pp.215221.

229) Lotti, M., Wei, E.T., Spear, R.C. and Becker, C.E., 1985. Neurotoxic esterase in rooster testis. Toxicology and applied pharmacology, 77(1), pp.175-180.

230) Lotti, M., 1992. The pathogenesis of organophosphate polyneuropathy. Critical reviews in toxicology, 27(6), pp.465-487.

231) Lush, M.J., Li, Y., Read, D.J., et al., 1998. Neuropathy target esterase and a homologous Drosophila neurodegeneration-associated mutant protein contain a novel domain conserved from bacteria to man. Biochemical Journal, 332(1), pp.1-4.

232) Magnoni, R., Palmfeldt, J., Hansen, J., et al., 2014. The Hsp60 folding machinery is crucial for manganese superoxide dismutase folding and function. Free radical research, 48(2), pp.168-179.

233) Makki, R., Cinnamon, E. and Gould, A.P., 2014. The development and functions of oenocytes. Annual review of entomology, 59, pp.405-425.

234) Makuloluwa, A.K., Dodeja, R., Georgiou, M., et al., 2020. Oliver McFarlane syndrome and choroidal neovascularisation: a case report. Ophthalmic Genetics, 47(5), pp.451-456.

235) Maroni, M. and Bleecker, M.L., 1986. Neuropathy target esterase in human lymphocytes and platelets. Journal of applied toxicology, 6(1), pp.1-7.

236) Marschallinger, J., Iram, T., Zardeneta, M., et al., 2020. Lipid-droplet-accumulating microglia represent a dysfunctional and proinflammatory state in the aging brain. Nature neuroscience, 23(2), pp.194-208.

237) Maruyama, T., Baba, T., Maemoto, Y., et al., 2018. Loss of DDHD2, whose mutation causes spastic paraplegia, promotes reactive oxygen species generation and apoptosis. Cell death & disease, 9(8), pp.1-15.

238) Masaki, H., Kim, N., Nakamura, H., et al., 2017. Long-chain fatty acid triglyceride (TG) metabolism disorder impairs male fertility: a study using adipose triglyceride lipase deficient mice. MHR: Basic science of reproductive medicine, 23(7), pp.452-460.

239) McFerrin, J., Patton, B.L., Sunderhaus, ER. and Kretzschmar, D., 2017. NTE/PNPLA6 is expressed in mature Schwann cells and is required for glial ensheathment of Remak fibers. Glia, 65(5), pp.804-816.

240) Megighian, A., Rigoni, M., Caccin, P., et al., 2007. A lysolecithin/fatty acid mixture promotes and then blocks neurotransmitter release at the Drosophila melanogaster larval neuromuscular junction. Neuroscience letters, 416(1), pp.6-11.

241) Melentev, P.A., Agranovich, O.E. and Sarantseva, S.V., 2020. Human diseases associated with NTE gene. Ecological genetics, 18(2), pp.229-242.

242) Melentev, P.A., Ryabova, E.V. and Sarantseva, S.V., 2021a. A Private History of Neurogenetics: The swiss cheese Gene and Its Orthologs. Russian Journal of Genetics, 57(10), pp.1115-1130.

243) Melentev, P.A., Ryabova, E.V., Surina, N.V., et al., 2021b. Loss of swiss cheese in Neurons Contributes to Neurodegeneration with Mitochondria Abnormalities, Reactive Oxygen Species Acceleration and Accumulation of Lipid Droplets in Drosophila Brain. International journal of molecular sciences, 22(15), p.8275.

244) Melentev, P.A., Sharapenkov, E.G., Surina, N.V., et al., 2022. Drosophila Lysophospholipase Gene swiss cheese Is Required for Survival and Reproduction. Insects, 13(1), p.14.

245) Menevse, E., Sevinc, R., Dursunoglu, D., et al., 2020. How does seminal plasma fatty-acid binding protein-9 level change in infertile males? Physiology International, 107(3), pp.419-430.

246) Milano, A., Gesualdi, N.M., Teperino, R., et al., 2005. Oxidative DNA damage and activation of c-Jun N-terminal kinase pathway in fibroblasts from patients with hereditary spastic paraplegia. Cellular and molecular neurobiology, 25(8), pp.1245-1254.

247) Milewska, M. and Byrne, P.C., 2015. Different expression levels of spartin cause broad spectrum of cellular consequences in human neuroblastoma cells. Cell biology international, 39(9), pp.10071015.

248) Moretto, A., Lotti, M., Sabri, M.I. and Spencer, P.S., 1987. Progressive deficit of retrograde axonal transport is associated with the pathogenesis of di-n-butyl dichlorvos axonopathy. Journal of neurochemistry, 49(5), pp.1515-1522.

249) Morgan, T.H., 1910. Sex limited inheritance in Drosophila. Science, 32(812), pp.120-122.

250) Morgan, T.H., 1911. The origin of five mutations in eye color in Drosophila and their modes of inheritance. Science, 33(849), pp.534-537.

251) Morgan, T.H., 1914. Mosaics and gynandromorphs in Drosophila. Proceedings of The Society for Experimental Biology and Medicine, 11(6), pp.171 -172.

252) Morgan, S., Sturtevant H., Muller H., Bridges C., 1915. The mechanism of Mendelian heredity. New York: Henry Holt & Co.

253) Morgan, N.V., Westaway, S.K., Morton, J.E., et al., 2006. PLA2G6, encoding a phospholipase A2, is mutated in neurodegenerative disorders with high brain iron. Nature genetics, 38(7), pp.752754.

254) Moser, M., Stempfl, T., Li, Y., et al., 2000. Cloning and expression of the murine sws/NTE gene. Mechanisms of development, 90(2), pp.279-282.

255) Moser, M., Li, Y., Vaupel, K., Kretzschmar, D., et al., 2004. Placental failure and impaired vasculogenesis result in embryonic lethality for neuropathy target esterase-deficient mice. Molecular and Cellular Biology, 24(4), pp.1667-1679.

256) Mueller, L.D., Barr, L.G. and Ayala, F.J., 1985. Natural selection vs. random drift: evidence from temporal variation in allele frequencies in nature. Genetics, 777(3), pp.517-554.

257) Mühlig-Versen, M., Da Cruz, A.B., Tschäpe, J.A., et al., 2005. Loss of Swiss cheese/neuropathy target esterase activity causes disruption of phosphatidylcholine homeostasis and neuronal and glial death in adult Drosophila. Journal of Neuroscience, 25(11), pp.2865-2873.

258) Muller, H.J., 1916. The mechanism of crossing-over. The American Naturalist, 50(592), pp.193221.

259) Muller, H.J., 1930. Types of visible variations induced by X-rays in Drosophila. Journal of genetics, 22(3), pp.299-334.

260) Munder, P.G., Modolell, M., Andreesen, R., et al., 1979. Lysophosphatidylcholine (lysolecithin) and its synthetic analogues. Immune modulating and other biologic effects. In Springer Seminars in Immunopathology (Vol. 2, No. 2, pp. 187-203), Springer-Verlag.

261) Murphy, D.J., 2001. The biogenesis and functions of lipid bodies in animals, plants and microorganisms. Progress in lipid research, 40(5), pp.325-438.

262) Nanda, S. and Tapaswi, P.K., 1995. Biochemical, neuropathological and behavioral studies in hens induced by acute exposure of tri-ortho-cresyl phosphate. International Journal of Neuroscience, 82(3-4), pp.243-254.

263) Nanetti, L., Di Bella, D., Magri, S., et al., 2022. Multifaceted and Age-Dependent Phenotypes Associated with Biallelic PNPLA6 Gene Variants: Eight Novel Cases and Review of the Literature. Frontiers in neurology, 72, p.793547.

264) Napoli, B., Gumeni, S., Forgiarini, A., et al., 2019. Naringenin ameliorates Drosophila ReepA hereditary spastic paraplegia-linked phenotypes. Frontiers in neuroscience, 73, p.1202.

265) Narzt, M.S., Pils, V., Kremslehner, C., et al., 2021. Epilipidomics of Senescent Dermal Fibroblasts Identify Lysophosphatidylcholines as Pleiotropic Senescence-Associated Secretory Phenotype (SASP) Factors. Journal of Investigative Dermatology, 747(4), pp.993-1006.

266) Navarro, J.A., Ohmann, E., Sanchez, D., et al., 2010. Altered lipid metabolism in a Drosophila model of Friedreich's ataxia. Human Molecular Genetics, 79(14), pp.2828-2840.

267) Neuhäuser, G. and Opitz, J.M., 1975. Autosomal recessive syndrome of cerebellar ataxia and hypogonadotropic hypogonadism. Clinical genetics, 7(5), pp.426-434.

268) Nguyen, T.B., Louie, S.M., Daniele, J.R., et al., 2017. DGAT1-dependent lipid droplet biogenesis protects mitochondrial function during starvation-induced autophagy. Developmental cell, 42(1), pp.9-21.

269) Nimptsch, A., Pyttel, S., Paasch, U., et al., 2014. A MALDI MS investigation of the lysophosphatidylcholine/phosphatidylcholine ratio in human spermatozoa and erythrocytes as a useful fertility marker. Lipids, 49(3), pp.287-293.

270) Nolan, J.P. and Hammerstedt, R.H., 1997. Regulation of membrane stability and the acrosome reaction in mammalian sperm. The FASEB journal, 77(8), pp.670-682.

271) Nusslein-Volhard, C. and Wieschaus, E., 1980. Mutations affecting segment number and polarity in Drosophila. Nature, 287(5785), pp.795-801.

272) O'Neil, E., Serrano, L., Scoles, D., et al., 2019. Detailed retinal phenotype of Boucher-Neuhauser syndrome associated with mutations in PNPLA6 mimicking choroideremia. Ophthalmic genetics, 40(3), pp.267-275.

273) Oborna, I., Wojewodka, G., De Sanctis, J.B., et al., 2010. Increased lipid peroxidation and abnormal fatty acid profiles in seminal and blood plasma of normozoospermic males from infertile couples. Human reproduction, 25(2), pp.308-316.

274) Oliver, G.L. and McFarlane, D.C., 1965. Congenital trichomegaly: with associated pigmentary degeneration of the retina, dwarfism, and mental retardation. Archives of Ophthalmology, 74(2), pp.169-171.

275) O'Sullivan, N.C., Jahn, T.R., Reid, E. and O'Kane, C.J., 2012. Reticulon-like-1, the Drosophila orthologue of the hereditary spastic paraplegia gene reticulon 2, is required for organization of endoplasmic reticulum and of distal motor axons. Human molecular genetics, 27(15), pp.3356-3365.

276) Ottiger, M., Soller, M., Stocker, R.F. and Kubli, E., 2000. Binding sites of Drosophila melanogaster sex peptide pheromones. Journal of neurobiology, 44(1), pp.57-71.

277) Padilla, S. and Veronesi, B., 1985. The relationship between neurological damage and neurotoxic esterase inhibition in rats acutely exposed to tri-ortho-cresyl phosphate. Toxicology and applied pharmacology, 78(1), pp.78-87.

278) Paillamanque, J., Sanchez-Tusie, A., Carmona, E.M., et al., 2017. Arachidonic acid triggers [Ca2+]i increases in rat round spermatids by a likely GPR activation, ERK signalling and ER/acidic compartments Ca2+ release. PLoS One, 72(2), p.e0172128.

279) Painter, T.S., 1934. A new method for the study of chromosome aberrations and the plotting of chromosome maps in Drosophila melanogaster. Genetics, 79(3), p.175.

280) Pamies, D., Reig, J.A., Vilanova, E. and Sogorb, M.A., 2010. Expression of neuropathy target esterase in mouse embryonic stem cells during differentiation. Archives of toxicology, 84(6), pp.481491.

281) Pamies, D., Bal-Price, A., Fabbri, M., et al., 2014a. Silencing of PNPLA6, the neuropathy target esterase (NTE) codifying gene, alters neurodifferentiation of human embryonal carcinoma stem cells (NT2). Neuroscience, 287, pp.54-67.

282) Pamies, D., Sogorb, M.A., Fabbri, M., et al., 2014b. Genomic and phenotypic alterations of the neuronal-like cells derived from human embryonal carcinoma stem cells (NT2) caused by exposure to organophosphorus compounds paraoxon and mipafox. International journal of molecular sciences, 75(1), pp.905-926.

283) Pamies, D., Vilanova, E. and Sogorb, M.A., 2014c. Functional pathways altered after silencing Pnpla6 (the codifying gene of neuropathy target esterase) in mouse embryonic stem cells under differentiation. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Animal, 50(3), pp.261-273.

284) Panov, A., Orynbayeva, Z., Vavilin, V. and Lyakhovich, V., 2014. Fatty acids in energy metabolism of the central nervous system. BioMed research international, 2074, p.472459.

285) Papadopoulos, C., Orso, G., Mancuso, G., et al., 2015. Spastin binds to lipid droplets and affects lipid metabolism. PLoS genetics, 77(4), p.e1005149.

286) Park, H., Kim, J., Shin, C. and Lee, S., 2021. Intersection between Redox Homeostasis and Autophagy: Valuable Insights into Neurodegeneration. Antioxidants, 70(5), p.694.

287) Patke, A., Young, M.W. and Axelrod, S., 2020. Molecular mechanisms and physiological importance of circadian rhythms. Nature reviews Molecular cell biology, 27(2), pp.67-84.

288) Patsi, O., De Beaufort, C., Kerschen, P., et al., 2018. A new PNPLA6 mutation presenting as Oliver McFarlane syndrome. Journal of the neurological sciences, 392, pp.1-2.

289) Patton, S.E., O'Callaghan, J.P., Miller, D.B. and Abou-Donia, M.B., 1983. Effect of oral administration of tri-o-cresyl phosphate on in vitro phosphorylation of membrane and cytosolic proteins from chicken brain. Journal of neurochemistry, 47(3), pp.897-901.

290) Patton, S.E., Lapadula, D.M. and Abou-Donia, M.B., 1985. Comparison of endogenous phosphorylation of hen and rat spinal cord proteins and partial characterization of optimal phosphorylation conditions for hen spinal cord. Neurochemistry international, 7(1), pp.111-123.

291) Patton, M.A., Harding, A.E. and Baraitser, M., 1986. Congenital trichomegaly, pigmentary retinal degeneration, and short stature. American journal of ophthalmology, 707(4), pp.490-491.

292) Petan, T., Jarc, E. and Jusovic, M., 2018. Lipid droplets in cancer: guardians of fat in a stressful world. Molecules, 23(8), p.1941.

293) Prince, E., Kroeger, B., Gligorov, D., et al., 2019. Rab-mediated trafficking in the secondary cells of Drosophila male accessory glands and its role in fecundity. Traffic, 20(2), pp.137-151.

294) Pyttel, S., Zschörnig, K., Nimptsch, A., et al., 2012. Enhanced lysophosphatidylcholine and sphingomyelin contents are characteristic of spermatozoa from obese men—A MALDI mass spectrometric study. Chemistry and physics of lipids, 765(8), pp.861-865.

295) Pyttel, S., Nimptsch, A., Böttger, J., et al., 2014. Changes of murine sperm phospholipid composition during epididymal maturation determined by MALDI-TOF mass spectrometry. Theriogenology, 82(3), pp.396-402.

296) Quinton, R., Barnett, P., Coskeran, P. and Bouloux, P.M.G., 1999. Gordon Holmes spinocerebellar ataxia: a gonadotrophin deficiency syndrome resistant to treatment with pulsatile gonadotrophin-releasing hormone. Clinical endocrinology, 51(4), pp.525-529.

297) Radyuk, S.N., Gambini, J., Borras, C., et al., 2012. Age-dependent changes in the transcription profile of long-lived Drosophila over-expressing glutamate cysteine ligase. Mechanisms of ageing and development, 133(6), pp.401-413.

298) Rainier, S., Bui, M., Mark, E., et al., 2008. Neuropathy target esterase gene mutations cause motor neuron disease. The American Journal of Human Genetics, 82(3), pp.780-785.

299) Rainier, S., Albers, J.W., Dyck, P.J., et al., 2011. Motor neuron disease due to neuropathy target esterase gene mutation: clinical features of the index families. Muscle & nerve, 43(1), pp.19-25.

300) Rajan, A., Housden, B.E., Wirtz-Peitz, F., et al., 2017. A mechanism coupling systemic energy sensing to adipokine secretion. Developmental cell, 43(1), pp.83-98.

301) Randall, J.C., Yano, B.L. and Richardson, R.J., 1997. Potentiation of organophosphorus compound-induced delayed neurotoxicity (OPIDN) in the central and peripheral nervous system of the adult hen: distribution of axonal lesions. Journal of toxicology and environmental health, 51(6), pp.571-590.

302) Read, D.J., Li, Y., Chao, M.V., et al., 2009. Neuropathy target esterase is required for adult vertebrate axon maintenance. Journal of Neuroscience, 29(37), pp. 11594-11600.

303) Read, D.J., Li, Y., Chao, M.V., et al., 2010. Organophosphates induce distal axonal damage, but not brain oedema, by inactivating neuropathy target esterase. Toxicology and appliedpharmacology, 245(1), pp.108-115.

304) Reddy, P., Zehring, W.A., Wheeler, D.A., et al., 1984. Molecular analysis of the period locus in Drosophila melanogaster and identification of a transcript involved in biological rhythms. Cell, 38(3), pp.701-710.

305) Regueira, M., Gorga, A., Rindone, G.M., et al., 2018. Apoptotic germ cells regulate Sertoli cell lipid storage and fatty acid oxidation. Reproduction, 156(6), pp.515-525.

306) Renne, M.F. and Hariri, H., 2021. Lipid Droplet-Organelle Contact Sites as Hubs for Fatty Acid Metabolism, Trafficking, and Metabolic Channeling. Frontiers in Cell and Developmental Biology, p.2433.

307) Renvoise, B., Malone, B., Falgairolle, M., et al., 2016. Reep1 null mice reveal a converging role for hereditary spastic paraplegia proteins in lipid droplet regulation. Human molecular genetics, 25(23), pp.5111-5125.

308) Retterstol, K., Haugen, T.B., Tran, T.N. and Christophersen, B.O., 2001. Studies on the metabolism of essential fatty acids in isolated human testicular cells. Reproduction, 121(6), pp.881887.

309) Rexhepaj, A., Liu, H., Peng, J., et al., 2003. The sex-peptide DUP99B is expressed in the male ejaculatory duct and in the cardia of both sexes. European journal of biochemistry, 270(21), pp.43064314.

310) Richardson, R.J., Davis, C.S. and Johnson, M.K., 1979. Subcellular distribution of marker enzymes and of neurotoxic esterase in adult hen brain. Journal of neurochemistry, 32(2), pp.607615.

311) Richardson, R.J., Fink, J.K., Glynn, P., et al., 2020a. Neuropathy target esterase (NTE/PNPLA6) and organophosphorus compound-induced delayed neurotoxicity (OPIDN). In Advances in Neurotoxicology (Vol. 4, pp. 1-78). Academic Press.

312) Richardson, R.J., Fink, J.K., Worden, R.M., et al., 2020b. Neuropathy target esterase as a biomarker and biosensor of delayed neuropathic agents. In Handbook of Toxicology of Chemical Warfare Agents (pp. 1005-1025). Academic Press.

313) Robertson, D.G., Schwab, B.W., Sills, R.D., et al., 1987. Electrophysiologic changes following treatment with organophosphorus-induced delayed neuropathy-producing agents in the adult hen. Toxicology and applied pharmacology, 87(3), pp.420-429.

314) Romano, G., Appocher, C., Scorzeto, M., et al., 2015. Glial TDP-43 regulates axon wrapping, GluRIIA clustering and fly motility by autonomous and non-autonomous mechanisms. Human molecular genetics, 24(21), pp.6134-6145.

315) Roqueta-Rivera, M., Stroud, C.K., Haschek, W.M., et al., 2010. Docosahexaenoic acid supplementation fully restores fertility and spermatogenesis in male delta-6 desaturase-null mice. Journal of lipid research, 51(2), pp.360-367.

316) Rump, R., Hamel, B.C., Pinckers, A.J. and Van Dop, P.A., 1997. Two sibs with chorioretinal dystrophy, hypogonadotrophic hypogonadism, and cerebellar ataxia: Boucher-Neuhäuser syndrome. Journal of medical genetics, 34(9), pp.767-771.

317) Ryabova, E., Matiytsiv, N., Trush, O., et al., 2018. Swiss cheese, Drosophila ortholog of hereditary spastic paraplegia gene NTE, maintains neuromuscular junction development and microtubule network. In: Drosophila Melanogaster — Model for Recent Advances in Genetics and Therapeutics; Perveen, F.K., Ed.; IntechOpen: London, UK.

318) Ryabova, E.V., Melentev, P.A., Komissarov, A.E., et al., 2021. Morpho-Functional Consequences of Swiss Cheese Knockdown in Glia of Drosophila melanogaster. Cells, 10(3), p.529.

319) Safarinejad, M.R., Hosseini, S.Y., Dadkhah, F. and Asgari, M.A., 2010. Relationship of omega-3 and omega-6 fatty acids with semen characteristics, and anti-oxidant status of seminal plasma: a comparison between fertile and infertile men. Clinical nutrition, 29(1), pp.100-105.

320) Salgado, P., Carvalho, R., Brandao, A.F., et al., 2019. Gordon Holmes syndrome due to compound heterozygosity of two new PNPLA6 variants-A diagnostic challenge. Eneurologicalsci, 74, pp.9-12.

321) Salo, V.T., Holtta-Vuori, M. and Ikonen, E., 2020. Seipin-mediated contacts as gatekeepers of lipid flux at the endoplasmic reticulum-lipid droplet nexus. Contact, 3, p.2515256420945820.

322) Saudan, P., Hauck, K., Soller, M., et al., 2002. Ductus ejaculatorius peptide 99B (DUP99B), a novel Drosophila melanogaster sex-peptide pheromone. European Journal of Biochemistry, 269(3), pp.989-997.

323) Schonfeld, P. and Reiser, G., 2013. Why does brain metabolism not favor burning of fatty acids to provide energy? - Reflections on disadvantages of the use of free fatty acids as fuel for brain. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism, 33(10), pp.1493-1499.

324) Schonfeld, P. and Reiser, G., 2021. How the brain fights fatty acids' toxicity. Neurochemistry International, p.105050.

325) Schulz, C., Wood, C.G., Jones, D.L., et al., 2002. Signaling from germ cells mediated by the rhomboid homolog stet organizes encapsulation by somatic support cells. Development, 729(19), pp. 4523-4534.

326) Schuurs-Hoeijmakers, J.H., Geraghty, M.T., Kamsteeg, E.J., et al., 2012. Mutations in DDHD2, encoding an intracellular phospholipase A1, cause a recessive form of complex hereditary spastic paraplegia. The American Journal of Human Genetics, 97(6), pp.1073-1081.

327) Sen, K., Finau, M. and Ghosh, P., 2020. Bi-allelic variants in PNPLA6 possibly associated with Parkinsonian features in addition to spastic paraplegia phenotype. Journal of Neurology, 267(9), pp.2749-2753.

328) Shimabukuro, M.K., Langhi, L.G.P., Cordeiro, I., et al., 2016. Lipid-laden cells differentially distributed in the aging brain are functionally active and correspond to distinct phenotypes. Scientific reports, 6(1), pp.1-12.

329) Shin, L., Wang, S., Lee, J.S., et al., 2012. Lysophosphatidylcholine inhibits membrane-associated SNARE complex disassembly. Journal of cellular and molecular medicine, 76(8), pp.1701-1708.

330) Shin, M., Momb, J. and Appling, D.R., 2017. Human mitochondrial MTHFD2 is a dual redox cofactor-specific methylenetetrahydrofolate dehydrogenase/methenyltetrahydrofolate cyclohydrolase. Cancer & metabolism, 5(1), pp.1-6.

331) Smith, M.I. and Elvove, E., 1930. Pharmacological and chemical studies of the cause of so-called ginger paralysis: a preliminary report. Public Health Reports (7896-7970), pp.1703-1716.

332) Smith, M.I., 1930. The pharmacological action of certain phenol esters, with special reference to the etiology of so-called ginger paralysis (second report). Public Health Reports (1896-1970), pp.2509-2524.

333) Smith, M.I. and Lillie, R.D., 1931. The histopathology of triorthocresyl phosphate poisoning: The etiology of so-called ginger paralysis (third report). Archives of Neurology & Psychiatry, 26(5), pp.976-992.

334) Smolic, T., Tavcar, P., Horvat, A., et al., 2021. Astrocytes in stress accumulate lipid droplets. Glia, 69(6), pp.1540-1562.

335) Sogorb, M.A., Pamies, D., Estevan, C., et al., 2016. Roles of NTE protein and encoding gene in development and neurodevelopmental toxicity. Chemico-biological interactions, 259, pp.352-357.

336) Somkuti, S.G., Lapadula, D.M., Chapin, R.E., et al., 1987a. Testicular toxicity following oral administration of tri-o-cresyl phosphate (TOCP) in roosters. Toxicology letters, 37(3), pp.279-290.

337) Somkuti, S.G., Lapadula, D.M., Chapin, R.E., et al., 1987b. Reproductive tract lesions resulting from subchronic administration (63 days) of tri-o-cresyl phosphate in male rats. Toxicology and applied pharmacology, 89(1), pp.49-63.

338) Somkuti, S.G., Tilson, H.A., Brown, H.R., et al., 1988. Lack of delayed neurotoxic effect after tri-o-cresyl phosphate treatment in male Fischer 344 rats: Biochemical, neurobehavioral and neuropathological studies. Toxicological Sciences, 10(2), pp.199-205.

339) Song, F., Yan, Y., Zhao, X., et al., 2009. Neurofilaments degradation as an early molecular event in tri-ortho-cresyl phosphate (TOCP) induced delayed neuropathy. Toxicology, 258(2-3), pp.94-100.

340) Song, F., Zou, C., Han, X., et al., 2012. Reduction of retrograde axonal transport associated-proteins motor proteins, dynein and dynactin in the spinal cord and cerebral cortex of hens by tri-ortho-cresyl phosphate (TOCP). Neurochemistry international, 60(2), pp.99-104.

341) Song, Y., Wang, M., Mao, F., et al., 2013. Knockdown of Pnpla6 protein results in motor neuron defects in zebrafish. Disease models & mechanisms, 6(2), pp.404-413.

342) Song, M.H., Gupta, A., Kim, H.O. and Oh, K., 2021. Lysophosphatidylcholine aggravates contact hypersensitivity by promoting neutrophil infiltration and IL17 expression. BMB reports, 54(4), p.203.

343) Stoffel, W., Schmidt-Soltau, I., Binczek, E., et al., 2020. Dietary ro3-and ^-Polyunsaturated fatty acids reconstitute fertility of Juvenile and adult Fads2-Deficient mice. Molecular metabolism, 36, p.100974.

344) Stork, T., Engelen, D., Krudewig, A., et al., 2008. Organization and function of the blood-brain barrier in Drosophila. Journal of Neuroscience, 28(3), pp.587-597.

345) Sturtevant, A.H., 1913. The linear arrangement of six sex-linked factors in Drosophila, as shown by their mode of association. Journal of experimental zoology, 14(1), pp.43-59.

346) Sturtevant, A.H., 1915. The behavior of the chromosomes as studied through linkage. Zeitschrift für induktive Abstammungs-und Vererbungslehre, 13(1), pp.234-287.

347) Sturtevant, A.H., 1925. The effects of unequal crossing over at the bar locus in Drosophila. Genetics, 10(2), p.117.

348) Sturtevant, A.H., 1965. A history of genetics. New York: Harper and Row.

349) Sujkowski, A., Rainier, S., Fink, J.K. and Wessells, R.J., 2015. Delayed induction of human NTE (PNPLA6) rescues neurodegeneration and mobility defects of Drosophila swiss cheese (sws) mutants. PLoS One, 10(12), p.e0145356.

350) Sunderhaus, E.R., Law, A.D. and Kretzschmar, D., 2019a. ER responses play a key role in Swiss-Cheese/Neuropathy Target Esterase-associated neurodegeneration. Neurobiology of disease, 130, p.104520.

351) Sunderhaus, E.R., Law, A.D. and Kretzschmar, D., 2019b. Disease-associated PNPLA6 mutations maintain partial functions when analyzed in Drosophila. Frontiers in neuroscience, 13, p.1207.

352) Synofzik, M., Gonzalez, M.A., Lourenco, C.M., et al., 2014. PNPLA6 mutations cause Boucher-Neuhäuser and Gordon Holmes syndromes as part of a broad neurodegenerative spectrum. Brain, 137(1), pp.69-77.

353) Szafer-Glusman, E., Giansanti, M.G., Nishihama, R., et al., 2008. A role for very-long-chain fatty acids in furrow ingression during cytokinesis in Drosophila spermatocytes. Current Biology, 18(18), pp.1426-1431.

354) Szymanski, K.M., Binns, D., Bartz, R., et al., 2007. The lipodystrophy protein seipin is found at endoplasmic reticulum lipid droplet junctions and is important for droplet morphology. Proceedings of the National Academy of Sciences, 104(52), pp.20890-20895.

355) Tadepalle, N. and Rugarli, E.I., 2021. Lipid Droplets in the Pathogenesis of Hereditary Spastic Paraplegia. Frontiers in Molecular Biosciences, 8, p.400.

356) Tarnutzer, A.A., Gerth-Kahlert, C., Timmann, D., et al., 2015. Boucher-Neuhäuser syndrome: cerebellar degeneration, chorioretinal dystrophy and hypogonadotropic hypogonadism: two novel cases and a review of 40 cases from the literature. Journal of neurology, 262(1), pp.194-202.

357) Tavilani, H., Doosti, M., Abdi, K., et al., 2006. Decreased polyunsaturated and increased saturated fatty acid concentration in spermatozoa from asthenozoospermic males as compared with normozoospermic males. Andrologia, 38(5), pp.173-178.

358) Teive, H.A.G., Camargo, C.H.F., Sato, M.T., et al., 2018. Different cerebellar ataxia phenotypes associated with mutations of the PNPLA6 gene in Brazilian patients with recessive ataxias. The Cerebellum, 17(3), pp.380-385.

359) Tesson, C., Nawara, M., Salih, M.A., et al., 2012. Alteration of fatty-acid-metabolizing enzymes affects mitochondrial form and function in hereditary spastic paraplegia. The American Journal of Human Genetics, 91(6), pp.1051-1064.

360) Thevenet, J., De Marchi, U., Domingo, J.S., et al., 2016. Medium-chain fatty acids inhibit mitochondrial metabolism in astrocytes promoting astrocyte-neuron lactate and ketone body shuttle systems. The FASEB Journal, 30(5), pp.1913-1926.

361) Topaloglu, A.K., Lomniczi, A., Kretzschmar, D., et al., 2014. Loss-of-function mutations in PNPLA6 encoding neuropathy target esterase underlie pubertal failure and neurological deficits in Gordon Holmes syndrome. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism, 99(10), pp.E2067-E2075.

362) Toprak, U., Hegedus, D., Dogan, C. and Güney, G., 2020. A journey into the world of insect lipid metabolism. Archives of insect biochemistry and physiology, 104(2), p.e21682.

363) Tran, J., Brenner, T.J. and DiNardo, S., 2000. Somatic control over the germline stem cell lineage during Drosophila spermatogenesis. Nature, 407(6805), pp.754-757.

364) Van Den Brink, D.M., Cubizolle, A., Chatelain, G., et al., 2018. Physiological and pathological roles of FATP-mediated lipid droplets in Drosophila and mice retina. PLoS genetics, 14(9), p.e1007627.

365) van Tienhoven, M., Atkins, J., Li, Y. and Glynn, P., 2002. Human neuropathy target esterase catalyzes hydrolysis of membrane lipids. Journal of Biological Chemistry, 277(23), pp.2094220948.

366) Veronesi, B., 1984. A rodent model of organophosphorus-induced delayed neuropathy: distribution of central (spinal cord) and peripheral nerve damage. Neuropathology and applied neurobiology, 10(5), pp.357-368.

367) Vogel, S.S., Leikina, E.A. and Chernomordik, L.V., 1993. Lysophosphatidylcholine reversibly arrests exocytosis and viral fusion at a stage between triggering and membrane merger. Journal of Biological Chemistry, 268(34), pp.25764-25768.

368) Vose, S.C., Fujioka, K., Gulevich, A.G., et al., 2008. Cellular function of neuropathy target esterase in lysophosphatidylcholine action. Toxicology and applied pharmacology, 232(3), pp.376383.

369) Vosshall, L.B., Price, J.L., Sehgal, A., et al., 1994. Block in nuclear localization of period protein by a second clock mutation, timeless. Science, 263(5153), pp.1606-1609.

370) Wali, G., Sutharsan, R., Fan, Y., et al., 2016. Mechanism of impaired microtubule-dependent peroxisome trafficking and oxidative stress in SPAST-mutated cells from patients with Hereditary Spastic Paraplegia. Scientific reports, 6(1), pp.1-14.

371) Wali, G., Liyanage, E., Blair, N.F., et al., 2020. Oxidative stress-induced axon fragmentation is a consequence of reduced axonal transport in hereditary spastic paraplegia SPAST patient neurons. Frontiers in neuroscience, 14, p.401.

372) Wang, H., Wang, H., Xiong, W., et al., 2006. Evaluation on the phagocytosis of apoptotic spermatogenic cells by Sertoli cells in vitro through detecting lipid droplet formation by Oil Red O staining. Reproduction, 132(3), pp.485-492.

373) Wang, B., Yu, Y., Wei, L. and Zhang, Y., 2020. Inhibition of ER stress improves progressive motor deficits in a REEPl-null mouse model of hereditary spastic paraplegia. Biology open, 9(9), p.bio054296.

374) Weaver, L.N. and Drummond-Barbosa, D., 2018. Maintenance of proper germline stem cell number requires adipocyte collagen in adult Drosophila females. Genetics, 209(4), pp.1155-1166.

375) Wentzell, J.S., Cassar, M. and Kretzschmar, D., 2014. Organophosphate-induced changes in the PKA regulatory function of Swiss Cheese/NTE lead to behavioral deficits and neurodegeneration. PLoS One, 9(2), p.e87526.

376) Wicker, C., Reichhart, J.M., Hoffmann, D., et al., 1990. Insect immunity. Characterization of a Drosophila cDNA encoding a novel member of the diptericin family of immune peptides. Journal of Biological Chemistry, 265(36), pp.22493-22498.

377) Wieschaus, E., Nusslein-Volhard, C. and Kluding, H., 1984. Krüppel, a gene whose activity is required early in the zygotic genome for normal embryonic segmentation. Developmental biology, 104(1), pp.172-186.

378) Wieschaus, E. and Nüsslein-Volhard, C., 2016. The Heidelberg screen for pattern mutants of Drosophila: a personal account. Annual Review of Cell and Developmental Biology, 32, pp.1-46.

379) Wiethoff, S., Bettencourt, C., Paudel, R., et al., 2017. Pure cerebellar ataxia with homozygous mutations in the PNPLA6 gene. The Cerebellum, 16(1), pp.262-267.

380) Williams, D.G., 1983. Intramolecular group transfer is a characteristic of neurotoxic esterase and is independent of the tissue source of the enzyme. A comparison of the aging behaviour of di-isopropyl phosphorofluoridate-labelled proteins in brain, spinal cord, liver, kidney and spleen from hen and in human placenta. Biochemical Journal, 209(3), pp.817-829.

381) Wilson, R.H., Lai, C.Q., Lyman, R.F. and Mackay, T.F., 2013. Genomic response to selection for postponed senescence in Drosophila. Mechanisms of ageing and development, 134(3-4), pp.7988.

382) Wilson, C., Leiblich, A., Goberdhan, D.C.I. and Hamdy, F., 2017. The Drosophila accessory gland as a model for prostate cancer and other pathologies. Current topics in developmental biology, 121, pp.339-375.

383) Winrow, C.J., Hemming, M.L., Allen, D.M., et al., 2003. Loss of neuropathy target esterase in mice links organophosphate exposure to hyperactivity. Nature genetics, 33(4), pp.477-485.

384) Wolins, N.E., Brasaemle, D.L. and Bickel, P.E., 2006. A proposed model of fat packaging by exchangeable lipid droplet proteins. FEBS letters, 580(23), pp.5484-5491.

385) Wong, J.T., Tran, K., Pierce, G.N., et al., 1998. Lysophosphatidylcholine stimulates the release of arachidonic acid in human endothelial cells. Journal of Biological Chemistry, 273(12), pp.68306836.

386) Wright, S., 1931. Evolution in Mendelian populations. Genetics, 76(2), p.97.

387) Wright, S., 1970. Random drift and the shifting balance theory of evolution. In Mathematical topics in population genetics (pp. 1-31). Springer, Berlin, Heidelberg.

388) Wu, S., Sun, Z., Zhu, T., et al., 2021. Novel variants in PNPLA6 causing syndromic retinal dystrophy. Experimental Eye Research, 202, p.108327.

389) Xie, M., Yang, D., Matoney, L. and Yan, B., 2003. Rat NTE-related esterase is a membrane-associated protein, hydrolyzes phenyl valerate, and interacts with diisopropylfluorophosphate through a serine catalytic machinery. Archives of biochemistry and biophysics, 476(2), pp.137-146.

390) Xin, X., Zeng, T., Dou, D.D., et al., 2011. Changes of mitochondrial ultrastructures and function in central nervous tissue of hens treated with tri-ortho-cresyl phosphate (TOCP). Human & experimental toxicology, 30(8), pp.1062-1072.

391) Xu, L.L., Liu, M L., Wang, J.L., et al., 2016a. Saligenin cyclic-o-tolyl phosphate (SCOTP) induces autophagy of rat spermatogonial stem cells. Reproductive Toxicology, 60, pp.62-68.

392) Xu, L.L., Long, C.Y., Wang, J.L., et al., 2016b. Involvement of oxidative stress in tri-ortho-cresyl phosphate-induced liver injury in male mice. Human & experimental toxicology, 35(10), pp.1093-1101.

393) Yagi, T., Ito, D., Nihei, Y., et al., 2011. N88S seipin mutant transgenic mice develop features of seipinopathy/BSCL2-related motor neuron disease via endoplasmic reticulum stress. Human molecular genetics, 20(19), pp.3831-3840.

394) Yamazaki, R., Osanai, Y., Kouki, T., et al., 2021. Macroscopic detection of demyelinated lesions in mouse PNS with neutral red dye. Scientific reports, 77(1), pp.1-11.

395) Yoon, G., Baskin, B., Tarnopolsky, M., et al., 2013. Autosomal recessive hereditary spastic paraplegia—clinical and genetic characteristics of a well-defined cohort. Neurogenetics, 74(3), pp.181-188.

396) Zaccheo, O., Dinsdale, D., Meacock, P.A. and Glynn, P., 2004. Neuropathy target esterase and its yeast homologue degrade phosphatidylcholine to glycerophosphocholine in living cells. Journal of Biological Chemistry, 279(23), pp.24024-24033.

397) Zanetti, S.R., de los Ángeles Monclus, M., Rensetti, D.E., et al., 2010. Differential involvement of rat sperm choline glycerophospholipids and sphingomyelin in capacitation and the acrosomal reaction. Biochimie, 92(12), pp.1886-1894.

398) Zhang, L.P., Wang, Q.S., Guo, X., et al., 2007. Time-dependent changes of lipid peroxidation and antioxidative status in nerve tissues of hens treated with tri-ortho-cresyl phosphate (TOCP). Toxicology, 239(1-2), pp.45-52.

399) Zhao, J., Matthies, D.S., Botzolakis, E.J., et al., 2008. Hereditary spastic paraplegia-associated mutations in the NIPA1 gene and its Caenorhabditis elegans homolog trigger neural degeneration in vitro and in vivo through a gain-of-function mechanism. Journal of Neuroscience, 28(51), pp.1393813951.