Функциональная активность перитонеальных макрофагов при остром панкреатите тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат биологических наук Уханова, Ирина Юрьевна

• Уханова, Ирина Юрьевна
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Уханова, Ирина Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ

РАЗДЕЛ I. Обзор литературы.

1. Роль макрофагов в иммунном гомеостазе.

2. Роль системы моноцитов-макрофагов в развитии острого панкреа- 31 тита

РАЗДЕЛ II. Собственные исследования

3. Материал и методы исследования

4. Состояние функциональной активности перитонеальных макрофа- 48 гов у больных с легким течением острого панкреатита

5. Изменение функциональной активности перитонеальных макрофа- 59 гов у больных с тяжелым течением острого панкреатита.

6. Сравнительная оценка функциональной активности перитонеаль- 67 ных макрофагов в зависимости от тяжести течения острого панкреатита.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Функциональная активность перитонеальных макрофагов при остром панкреатите»

В настоящее время взгляды на патогенетические особенности многих хирургических заболеваний, в том числе острого панкреатита (ОП), претерпели существенные изменения (Винник Ю.С., 2006, 2009; Савельев B.C., 2007). Если до 1992 года основной причиной развития ОП считали протоко-вую гипертензию с забросом желчи в главный панкреатический проток, следствием которой были активация ферментов поджелудочной железы (ПЖ) и развитие ОП, что вписывалось в рамки теории общего канала (Ople E.L., 1901), то в современной медицине патогенез ОП принято рассматривать с позиции синдрома системной воспалительной реакции (Савельев B.C., 2000, 2007; Bone R.C., 1997; Root R.K., 1999).

Воспалительная реакция, возникающая при большинстве патологических состояний, является унифицированной для всего организма в целом, а ее обеспечение и поддержание происходит за счет клеток лимфоцитов, моноцитов/макрофагов, нейтрофилов и во многом зависит от их функционального состояния (Тарасенко B.C., 2000; Трухан А.Д., 2000). Известно, что ключевой клеткой, инициатором воспаления, играющей значительную роль в развитии врожденных и адаптивных форм иммунного ответа, процессах ре-паративной регенерации при ОП, является система моноцитов/макрофагов, основная функция которой не только фагоцитоз, но и продукция большого числа биологически активных соединений (Караулов A.B., 2008; Хаитов P.M., 2009; Ярилин A.A., 2010). В ряде клинико-экспериментальных работ активно обсуждается роль нарушений функциональной активности нейрофи-лов при ОП (Анишева Т.Н., 2005; Локтионов А.Л., 2006; Пехов Д.А., 2006), но эти клетки выполняют эффекторные функции, так как они узкоспециализированны и не являются регуляторами иммунного ответа. Кроме того, системные нарушения иммунитета и функции иммунокомпетентных клеток зачастую не отражают патологических изменений, протекающих локально (Шабанов В.В., 2003; Земсков A.M., 2008). Немаловажен и тот факт, что выраженное супрессирующее влияние на формирование системного иммунитета оказывают фармакологические препараты, используемые в составе традиционной фармакотерапии, особенно химиотерапевтические антибактериальные средства (Лазарев А.И., 1998; Хмелевская Ю.В., 2002; Прокопенко Л.Г., 2004; Чуева Т.В., 2005). В то же время данных о влиянии этих препаратов на факторы местного иммунитета практически нет. Все эти факты и обусловливают повышенный интерес исследователей к функции одной из ключевых клеток в регуляции иммунитета — системе моноцитов/макрофагов и, в частности, к функции перитонеальных макрофагов при ОП.

Цель — установить нарушения функциональной активности перитонеальных макрофагов в зависимости от тяжести течения острого панкреатита.

Задачи:

1. Оценить фагоцитарную; кислородзависимую и кислороднезависи-мую активность перитонеальных макрофагов в зависимости от тяжести острого панкреатита.

2. Изучить спонтанную и стимулированную способность перитонеальных макрофагов к продукции цитокинов in vitro при легком и тяжелом течении острого панкреатита.

3. Выявить состояние процессов перекисного окисления липидов на местном уровне (в брюшной полости) и антиоксидантную активность перитонеальных макрофагов.

4. Провести оценку корригирующих эффектов традиционной фармакотерапии на фагоцитарную, кислородзависимую, кислороднезависимую активность, спонтанную и стимулированную цитокинпродуцирующую способность перитонеальных макрофагов, оксидантные показатели в зависимости от тяжести течения острого панкреатита.

5. Установить показатели функциональной активности перитонеальных макрофагов, позволяющие оценить тяжесть течения и эффективность традиционного лечения острого панкреатита.

Научная новизна. Впервые установлены различия функциональной активности перитонеальных макрофагов в зависимости от тяжести острого панкреатита. Выявлено снижение фагоцитарной и повышение метаболической активности перитонеальных макрофагов при легком и снижение этих показателей при тяжелом течении заболевания. Установлено значительное повышение спонтанной и стимулированной способности перитонеальных макрофагов к продукции про- и противовоспалительных цитокинов, иммуно-регуляторного ИЛ-2, ИФа, ИФу, рецепторного антагониста к ИЛ-1 (3, процессов перекисного окисления липидов, активности каталазы и супероксиддис-мутазы, снижение концентрации стабильных метаболитов оксида азота при тяжелом, по сравнению с легким течением острого панкреатита. Традиционная фармакотерапия частично нормализует нарушения функциональной активности перитонеальных макрофагов при легком, в меньшей степени при тяжелом остром панкреатите.

Практическая значимость. Обоснована необходимость коррекции функциональной активности перитонеальных макрофагов, особенно при тяжелом остром панкреатите. Выявленные различия функциональной активности перитонеальных макрофагов позволяют судить о степени тяжести патологического процесса при остром панкреатите. Определены лабораторные показатели, имеющие наибольшее диагностическое значение в оценке тяжести течения и эффективности проводимого лечения при данной патологии.

Разработанные рекомендации внедрены в работу МУЗ ГБ № 4 г. Курска и ГУЗ «Белгородская областная клиническая больница Святителя Иоаса-фа».

Материалы диссертации вошли в учебные рабочие программы и используются в лекционных курсах и на практических занятиях кафедр Российского, Курского, Самарского, Волгоградского государственных медицинских университетов и Воронежской государственной медицинской академии им. H.H. Бурденко.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Установлены характер и направленность изменения функционально-метаболической активности перитонеальных макрофагов у лиц с легким и тяжелым острым панкреатитом.

2. Выявлено снижение фагоцитарной и повышение метаболической активности перитонеальных макрофагов при легком и снижение этих показателей при тяжелом течении заболевания.

3. Обоснована необходимость коррекции функциональной активности перитонеальных макрофагов, в особенности при тяжелых формах острого панкреатита.,

4. Определены наиболее информативные показатели функциональной активности перитонеальных макрофагов при остром панкреатите, позволяющие прогнозировать тяжесть течения и оценивать эффективность лечения заболевания.

Апробация работы. Апробация работы проведена на совместном заседании кафедр клинической иммунологии и аллергологии, микробиологии, биохимии, фармакологии, хирургических болезней № 2 Курского государственного медицинского университета (2010).

Основные положения диссертации представлены на научных конференциях Курского государственного медицинского университета: III Всероссийской конференции молодых ученых, организованной Воронежской государственной академией им. H.H. Бурденко и Курским государственным медицинским университетом (2009), IV Международной научной конференции молодых ученых-медиков (2010), Международной конференции физиологии и патологии иммунной системы, IV Международной конференции по иммунотерапии (Москва, 2008), VII съезде аллергологов и иммунологов СНГ (Москва, 2009), XVI Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2009), X Международном конгрессе «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии» (Москва, 2009), XIV Международном конгрессе по реабилитации в медицине и иммунореабилитации (Израиль, Тель-Авив, 2009), XV Международном конгрессе по реабилитации в медицине и иммунореабилитации (ОАЭ, Дубай, 2010).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 13 работ в центральной и местной печати, в том числе 9 в изданиях, рекомендованных ВАК для публикаций материалов докторских и кандидатских диссертаций.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 111 стр. машинописного текста, иллюстрирована 10 таблицами и 12 рисунками, состоит из введения, обзора литературы (2 главы), описания методов исследования, изложения собственных результатов (3 главы), заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя, включающего 100 отечественных и 81 иностранный источник.

Заключение диссертации по теме «Клиническая иммунология, аллергология», Уханова, Ирина Юрьевна

ВЫВОДЫ.

1. У больных с легким течением острого панкреатита установлено угнетение фагоцитарной и повышение кислородзависимой и кислороднезави-симой активности перитонеальных макрофагов, тогда как при тяжелом течении заболевания обнаружено более выраженное угнетение фагоцитарной и снижение метаболической активности данных клеток.

2. При легких формах острого панкреатита, в большей степени при тяжелых, повышается спонтанная и стимулированная способность перитонеальных макрофагов к продукции про- и противовоспалительных цитокинов, иммунорегуляторного ИЛ-2, ИФа, ИФу, рецепторного антагониста к ИЛ-1(3.

3. Вне зависимости от тяжести острого панкреатита повышается активность процессов перекисного окисления липидов, каталазы и супероксид-дисмутазы, содержание стабильных метаболитов оксида азота при легком течении повышается, а при тяжелом — снижается.

4. Традиционная фармакотерапия в послеоперационном периоде нормализует при легком течении заболевания - 22,8%, а при тяжелом — 2,5% показателей функциональной, цитокинпродуцирующей и антиоксидантной активности перитонеальных макрофагов.

5. Наиболее диагностически значимыми показателями функциональной активности перитонеальных макрофагов при остром панкреатите являются: спонтанная продукция ИЛ-1(3, ИЛ-8, ИЛ-4, стимулированная продукция ИЛ-1(3, ИЛ-10, С4-компонента комплемента.

Практические рекомендации.

1. Для оценки тяжести течения и эффективности лечения острого панкреатита исследовать способность к спонтанной продукции перитонеальны-ми макрофагами ИЛ-1 (3, ИЛ-8, ИЛ-4 и к стимулированной продукции ИЛ-1(3, ИЛ-10, С4-компонента комплемента.

2. Использовать в учебном процессе медицинских вузов знания о характере и степени нарушений функциональной активности перитонеальных макрофагов в зависимости от степени тяжести острого панкреатита.

3. Рекомендовать в клинических исследованиях разработку способов фармакологической и нефармакологической коррекции нарушений функционально-метаболической активности перитонеальных макрофагов при легком, в особенности, при тяжелом течении острого панкреатита.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Уханова, Ирина Юрьевна, 2011 год

1. Абдоминальный сепсис, возможности антибактериальной и иммуно-корригирующей терапии / Б.С. Брискин, H.H. Хачатрян, З.И. Савченко и др. // Хирургия. 2002. - №4. - С.69-74.

2. Абросимова, О.В. Участие лектина Paenibacillus polymyxa в процессах киллинга бактерий в макрофагах / О.В. Абросимова, Е.И. Тихомирова, JI.B. Карпунина // Журн. микробиол., эпидем. и иммунобиол. 2008. -№ 6. - С. 82-84.

3. Аксенова, О.Н. Влияние модификаторов ФИ-цикла на апоптоз перито-неальных макрофагов / О.Н. Аксенова, В.А. Трофимов, Т.Н. Лычкина // Бюл. эксперим. биол. и медицины. 2004. - №6. - С.45-47.

4. Активация мононуклеаров крови человека липополисахаридами разного состава / C.B. Зубова, Е.В. Волошина, Н.И. Косякова и др. // Мед. иммунология. 2010. - Т. 12, № 4-5. - С.405-408.

5. Активность глутатионредуктазы в нейтрофилах у больных муковисце-дозом / А.Е. Кратнов, П.П. Потапов, A.B. Власова и др. // Клин. лаб. диагностика. 2005. - №2. - С.33-36.

6. Огородниклва, Т.Л. Альвеолярные макрофаги: изменение популяцион-ного состава при экспериментальном воздействии / Т.Л. Огородникова // Вестн. новых мед. технологий. 2010. - T.XVII, №2. - С.62-63.

7. Анишева, Т.Н. Применение препаратов-производных нуклеиновых кислот в лечении острого панкреатита: автореф. дис. . канд. мед. наук / Т.Н. Анишева. Курск, 2005. — 23 с.

8. Анцупова, B.C. Эффективность локальной иммунокоррекции в комплексном лечении спаечных процессов органов малого таза: автореф. дис. . канд. мед. наук / B.C. Анцупова. Курск, 2006. - 23 с.

9. Балаклеец, E.H. Роль белков нейтрофильных лейкоцитов в развитии острого панкреатита / E.H. Балаклеец, А.Н. Лищенко, A.A. Славинский // Вестн. хирург, гастроэнтерологии. — 2010. №3. - С.88.

10. Бердюгина, О.В. Использование лабораторных тестов в оценке воспалительной реакции / О.В, Бердюгина, К.А. Бердюгин // Фундаментальные исследования. 2004. - №4. - С.103-104.

11. Бизунок, Н. А. Влияние цитоактивных агентов на НАДФ-оксидазную генерацию активных форм кислорода в макрофагах / H.A. Бизунок, Б.В. Дубовик // Рецепт: науч.-практ. журн. для фармацевтов и врачей. -2006.-№ 1. С.36-39.

12. Винник, Ю.С. Эффективность применения глутоксима в комплексном лечении больных острым панкреатитом / Ю.С. Винник, Г.В. Булыгин, С.С. Дунаевская // Сиб. мед. обозрение. 2002. - №2. - С.29-32.

13. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на цитокиновую активность макрофагов и нейтрофилов in vitro при фагоцитозе бактерий / Е.И. Тихомирова, Е.С. Тучина, Д.В. Рудик и др. // Мед. иммуноллшия. -2007.-Т. 9, №2-3.-С. 165.

14. Влияние стимуляторов макрофагов на развитие селективной депрессии макрофагов печени in vitro / М.А. Дергунова, Т.А. Короленко, С.Я. Жа-наева, Т.В. Алексеенко // Эксперим. и клинич. фармакология. — 2010. — Т. 73, №11.-С. 22-24.

15. Возлюбленный, Е.И. Цитокинотерапия в комплексном лечении острого гнойного деструктивного панкреатита у хирургических больных / Е.И. Возлюбленный, P.A. Беловолова, Д.Е. Возлюбленный // Цитокины и воспаление. 2010. - Т.9, №4. - С.71-72.

16. Вторичный аутоиммунный синдром и иммуномодулирующая лимфо-тропная терапия при остром панкреатите / О.В. Зайратьянц, C.B. Колобов, И.В. Ярема, В.П. Шевченко // Арх. патологии. 2002. - Т.64, №6. -С. 51-56.

17. Выбор метода хирургического лечения острого деструктивного панкреатита / Д.Ю. Семенов, JI.B. Поташов, В.В. Васильев и др. // Вестн. хирургии. 2004. - Т. 163, №6. - С.39-42.

18. Генерация оксида азота лейкоцитами периферической крови в норме и при патологии / П.П. Голиков, Н.Ю. Николаева, В.И. Картавенко и др. // Патол. физиология и эксперим. терапия. 2003. - №4. — С. 11-13.

19. Гублер, Е.В. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях / Е.В. Гублер, A.A. Генкин. JL: Медицина, 1973.- 103 с.

20. Действие модуляторов активности мевалонатного биохимического пути на реактивность макрофагов при экспериментальном нефросклерозе / Я. Ш. Шварц, С.Н. Белогородцев, П.Н. Филимонов, Г.В. Селедцова // Мед. иммунология. 2009. - Т. 11, № 6. - С. 499-508.

21. Демьянов, A.B. Диагностическая ценность исследования уровней цито-кинов в клинической практике / A.B. Демьянов, А.Ю. Котов, A.C. Сим-бирцев // Цитокины и воспаление. 2003. - Т.2, №3. — С.20-35.

22. Динамика некоторых показателей перекисного окисления липидов у больных острым панкреатитом / С.И. Леонович, М.Ю. Ревтович, В'.Н. Чумаков и др. // Белорус, мед. журн. 2003. - № 2. - С. 52-54.

23. Железникова, Г.Ф. Роль гамма-интерферона в иммунопатогенезе инфекций / Г.Ф. Железникова // Клинич. лаб. диагностика. 2008. - №4. -С.3-7.

24. Завада, Н.В. Хирургический сепсис / Н.В. Завада, Ю.М. Гаин, С.А. Алексеев. Минск: Новое знание, 2003. - 237 с.

25. Зависимая-SP-D регуляция метаболизма NO в перитонеальных макрофагах, стимулированных липополисахаридами / E.H. Аточина-Вассерман, Е.В. Абрамова, Я. Томер и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2009. - Т. 147, № 4. - С. 395-400.

26. Земсков, А. М. Дополнительные аспекты оценки иммунного статуса / A.M. Земсков, В.М. Земсков // Клинич. лаб. диагностика. 1994. - № 5. -С.91 -98.

27. Земсков, А. М. Эффективность иммунокоррекции при многократном применении / A.M. Земсков, В.М. Земсков, В.А. Платонова // Между-нар. журн. иммунореабилитации. 1995. - № 1. - С. 191.

28. Земсков, A.M. Клиническая иммунология: учебник для вузов / A.M. Земсков, В.М. Земсков, A.B. Караулов. М.: ГЭОТ АР-Медиа, 2008. -432 с.

29. Земсков, A.M. Методы оценки эффективности иммунокоррекции / A.M. Земсков, В.М. Земсков, С.Д. Полякова // Журн. микробиологии. -1997.-№1.-С.52.1. N Л

30. Зинкин, В.Ю. Способ оценки кислородзависимого метаболизма ней-трофильных гранулоцитов человека /В.Ю. Зинкин, В.Г. Годков // Кли-нич. и лаб. диагностика. 2004. - №2. - С.27-31.

31. Зубова, С.Т. Молекулярные механизмы действия фактора некроза опухоли и трансформирующего фактора роста в процессе ответа макрофагов на активацию / С.Т. Зубова, В.Б. Окулов // Иммунология. — 2001. -№5.-С. 18-22.

32. Иванов, Ю.В. Эффективность мексидола при остром панкреатите / Ю.В. Иванов, С.М. Чудных, А.Г. Мозгалин // Клинич. медицина. — 2002. №9. - С.44-46.

33. Иванова, Н.Г. Оценка прогностических шкал при панкреонекрозе / Н.Г. Иванова // Фундаментальные исследования. 2004. - №2. - С.133-135.

34. Изменение некоторых иммунологических показателей при панкреонекрозе и их коррекция / В.Л. Аверкиев, B.C. Тарасенко, Т.В. Латышева и др. // Хирургия. 2003. - №5. - С.31-34.

35. Ильин, Д.А. Сравнительная оценка функциональной и интергантивной активности макрофагов и лаброцитов в генотипически различных культурах перитонеальных клеток / Д.А. Ильин, С.А. Архипов // VII Все-рос. конф. по патологии клетки. М., 2005. - С.56-57.

36. Иммуномодулирующая активность макролидов в условиях острого экспериментального панкреатита / Ю.В. Хмелевская, А.И. Конопля,

37. Ю.В. Лунева, E.H. Конопля // Материалы 2-ой междунар. конф. «Клиiнические исследования лекарственных средств» (20-22 нояб. 2002 г.,

38. Москва). М., 2002. - С. 178-179.

39. Караулов, A.B. Клиническая иммунология и аллергология: учеб. пособие / A.B. Караулов. М.: МИА, 2002. - 651 с.

40. Кетлинский, С.А. Цитокины / С.А. Кетлинский, A.C. Симбирцев. -СПб, 2008. 552 с.' \

41. Клиническая иммунология и аллергология. Краткий справочник: учеб. пособие / A.M. Земсков, В.М. Земсков, A.B. Караулов, JT.A. Новикова. -Воронеж: ВГУ, 1997. 169 с.

42. Козлов, В.А. Клеточный геном в патогенезе основных заболеваний человека (атеросклероз, аутоиммунные заболевания, рак) / В.А. Козлов // Мед. иммунология. 2010. - Т. 12, №4-5. - С. 285-296.

43. Конопля, А.И. Взаимосвязь структуры и функции эритроцитов с иммунным гомеостазом / А.И. Конопля. — Курск: КГМУ, 2008. — 40 с.

44. Коррекция коагулянтной и протеолитической активности фагоцитов у больных панкреонекрозом / Е.А. Цеймах, В.А. Бомбизо, А.Д. Меликсе-тян и др. // Анналы хирургии. — 2010. №5. — С.

45. Костюк, В.А. Простой и чувствительный метод определения суперок-сиддисмутазы, основанный на реакции окисления кверцетина / В.А. Костюк, А.Н. Потапов, Ж.В. Ковалева // Вопр. мед. химии. 1990. - № 2. - С.88-91.

46. Лабораторная диагностика инфицированного панкреоневроза / С.В. Михайлусов, Е.В. Моисеенкова, H.A. Смирнова // Клинич. лаб. диагностика. 2010. - №11. - С.3-7.

47. Лазарев, А.И. Фармакологическая коррекция иммуностимулирующего действия некоторых антибиотиков: автореф. дис. . д-ра мед. наук / А.И. Лазарев. М.,1998. - 38 с.

48. Леонович, С.И. Критерии полноты выздоровления больных деструктивным панкреатитом / С.И. Леонович, М.Ю. Ревтович / МатериалыN