Физиолого-биохимическое исследование трансгенных растений табака, экспрессирующих бактериальные гены тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Мовсесян, Нина Рубеновна

• Мовсесян, Нина Рубеновна
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Мовсесян, Нина Рубеновна

Содержание

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Молекулярные механизмы устойчивости растений к атаке фитопатогенов 9 1.1.1 Локально индуцированные защитные ответы растений

1.1.2. Системная приобретенная резистетность (SAR)

1.1.3. Защитные белки растений (PR-белки)

1.1.4. Раневой ответ растений

1.1.5. Индуцированная системная устойчивость и другие защитные пути у растений

1.1.6. Существует ли общий путь активации разных защитных ответов?

1.2. Бета-глюканазы

1.2.1. (3-глюканазы растений

1.2.1.1. (3-1,3-глюканазы растений

1.2.1.2. (3-1,3-1,4-глюканазы растений

1.2.2. (3-глюканазы термофильных бактерий

1.2.2.1. Структурные особенности (3-1,3-глюканазы (ламинариназы) Thermotoga neapolitana

1.2.2.2. Структурные особенности (3-1,3-1,4-глюканазы (лихеназы) Clostridium thermocellum

1.2.3. Элиситоры защитных ответов растений

1.3. Диоксигеназы

1.3.1. Диоксигеназы растений

1.3.2. Диоксигеназы бактерий

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Морфологический, физиолого-биохимический и молекулярно-биологический анализ трансгенных растений табака, экспрессирующих бактериальный ген диоксигеназы

3.1.1. Морфологические характеристики трансгенных растений, экспрессирующих бактериальный ген диоксигеназы

3.1.2. Уровень фенольных соединений у трансгенных растений, экспрессирующих бактериальный ген диоксигеназы

3.1.3. Активность ферментов, участвующих в биосинтезе и деградации фенольных соединений, у трансгенных растений, экспрессирующих бактериальный ген диоксигеназы

3.1.4. Фотосинтетические пигменты трансгенных растений табака, экспрессирующих бактериальную диоксигеназу

3.1.5. Спектры основных и кислых полипептидов, экстрагированных из листьев трансгенных растений табака, экспрессирующих бактериальную диоксигеназу

3.2. Морфологический, физиолого-биохимический и молекулярно-биологический анализ трансгенных растений табака, экспрессирующих бактериальные гены (3-глюканаз

3.2.1. Морфологические характеристики трансгенных растений, экспрессирующих бактериальные гены [3-глюканаз

3.2.2. Физиолого-биохимические характеристики трансгенных растений, экспрессирующих бактериальные гены Р-глюканаз

3.2.2.1. Морфогенетический потенциал листовых эксплантов трансгенных растений различных линий

3.2.2.2. Фотосинтетические пигменты трансгенных растений табака, экспрессирующих бактериальные (3-глюканазы

3.2.2.3. Спектры основных и кислых полипептидов, экстрагированных из листьев трансгенных растений табака, экспрессирующих бактериальные (3-глюканазы 83 3.2.2.4. Антигрибная активность экстрактов различных линий трансгенных растений

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Физиолого-биохимическое исследование трансгенных растений табака, экспрессирующих бактериальные гены»

В процессе эволюции растения приобрели гибкую систему защиты от воздействия абиотических и биотических факторов внешней среды. Среди биотических стрессовых факторов, оказывающих влияние на растения, первое место, несомненно, занимают фитопатогены. Живые организмы способны приспосабливаться к меняющимся условиям окружающей среды, подключая различные механизмы адаптации или защиты. Существует три линии защиты растений от патогенов и вредителей. Первая линия представляет собой генетически наследуемые механизмы устойчивости, обеспечивающие конститутивную устойчивость растений к фитопатогенам. Вторая линия защиты активируется в непосредственной близости от места инфекции или поранения. В случае несовместимого взаимодействия между патогеном и растением возникает гиперчувствительный ответ (HR). При этом в месте поражения происходит некроз ткани, который препятствует дальнейшему распространению патогена. Как полагают, на этапе HR происходит и образование сигналов, активирующих защитные механизмы растения-хозяина. Развитие системной приобретенной устойчивости (SAR), заключающейся в повышении устойчивости пораженного растения к последующей атаке широким спектром фитопатогенов, представляет собой третий уровень защиты растения от фитопатогенов. Развитие SAR строго коррелирует с координированной экспрессией набора генов, которые кодируют, прежде всего, различные группы PR-белков.

Несмотря на обилие полученных результатов относительно защитных механизмов растений, отсутствует ясная картина ответа растения на различного рода стрессы, не ясны генетические механизмы защитных реакций и причины устойчивости растений к стрессовым факторам внешней среды. Проблемой является и "вычленение" ответной реакции инфицированного растения из двухкомпонентной системы хозяин-патоген. Пораженные ткани растения невозможно отделить от фитопатогена. В связи с этим проба, взятая для биохимического анализа, состоит не из однородной ткани больного растения, а из суммы двух взаимодействующих организмов. Это не позволяет точно выявлять соединения, связанные с защитной реакцией растений, а также выяснить механизм их действия.

Большую роль в установлении генетических механизмов устойчивости растений может сыграть изучение отдельных этапов стрессового ответа. С развитием технологии клонирования генов и переноса генов в растения появились новые возможности для изучения механизмов защитных реакций растений на модели трансгенных растений, которые экспрессируют гены стрессового ответа.

В качестве модели для изучения отдельных этапов метаболизма и защитной системы, а также для изучения соединений, участвующих в механизмах устойчивости растений, мы выбрали трансгенные растения табака, которые экспрессируют бактериальные гены, аналогичные генам стрессового ответа растений. Так, мы предположили, что экспрессия бактериального гена nahC из Pseudomonas putida, кодирующего диоксигеназу, в трансгенных растениях позволит моделировать стрессовый ответ на этапе "включения" гиперчувствительного ответа, а экспрессия в трансгенных растениях бактериальных генов, кодирующих р-глюканазы с высоким уровнем термоактивности, даст возможность изучать роль (3-глюканаз в защитном ответе и/или в процессах роста и развития растений.

Выбор гена nahC из Pseudomonas putida для создания модельных растений обусловлен тем, что недавно диоксигеназа обнаружена в растениях, где катализирует расщепление фенола, который, как предполагают авторы, запускает процесс клеточной смерти растений. Однако функции растительных диоксигеназ до конца не выяснены. Эти ферменты у большинства изученных видов растений имеют консервативную структуру и высокую степень гомологии с бактериальными диоксигеназами.

Выбор бактериальных генов термостабильных |3-глкжаназ для создания модельных растений обусловлен тем, что эти гены имеют ряд преимуществ по сравнению с генами глюканаз из других источников. Основные из них - высокая термостабильность и высокая удельная активность кодируемого ими продукта. Эти свойства позволят легко тестировать их ферментативную активность в растениях простыми и чувствительными методами. Обладая высоким температурным оптимумом (70°С), эти бактериальные бета-глюканазы в то же время сохраняет около 8% активности при 25°С, т.е. температуре нормального роста растений. Этот уровень активности сравним с активностью растительных бета-глюканаз, индуцированных патогенами, химическими реагентами или фитогормонами. Продукты гидролиза субстратов этими ферментами проанализированы и показано, что при различных сроках гидролиза образуются олигосахариды с различной длиной цепи.

Выбор трансгенных растений, экспрессирующих бактериальные гены (р-глюканаз и диоксигеназы), которые кодируют ферменты с активностями, аналогичными или близкими к растительным ферментам, основан на том, что экспрессия этих генов в растениях может имитировать стрессовый ответ в растениях. Эти растения будут важны для фундаментальной науки, поскольку позволят более точно определить функции растительных белков, проследить за работой единичных генов защитного ответа, оценить их влияние на другие гены защитной системы растений и, в итоге, получить дополнительные сведения о работе и принципах регуляции защитной системы растений в целом. В отношении практической значимости полученные трансгенные растения могут обладать повышенной устойчивостью к фитопатогенам, и растительные экспрессионные вектора могут быть рекомендованы для получения хозяйственно важных культур, устойчивых к фитопатогенам.

Цель нашего исследования: провести сравнительный физиолого-биохимический анализ трансгенных растений, которые экспрессируют бактериальные гены диоксигеназы и р-глюканаз. Исходя из цели работы, были поставлены следующие задачи:

1. Провести сравнительный морфологический и физиолого-биохимический анализ трансгенных растений табака, которые экспрессируют бактериальный ген, кодирующий диоксигеназу, а именно,

- провести анализ фенотипа трансгенных растений;

- определить суммарное содержание фенольных соединений;

- определить активность растительных ферментов, участвующих в метаболизме фенольных соединений;

- определить фотосинтетические пигменты трансгенных растений табака;

- провести сравнительный анализ спектров основных и кислых полипептидов, экстрагированных из листьев трансгенных растений табака;

- оценить антигрибную активность экстрактов из трансгенных растений.

2. Провести сравнительный морфологический и физиолого-биохимический анализ трансгенных растений табака, которые экспрессируют бактериальные гены, кодирующие термостабильные (3-глюканазы с различной субстратной специфичностью, а именно,

- провести анализ фенотипа трансгенных растений;

- оценить морфогенетический потенциал листовых эксплантов трансгенных растений;

- определить фотосинтетические пигменты трансгенных растений табака;

- провести сравнительный анализ спектров основных и кислых полипептидов, экстрагированных из листьев трансгенных растений табака;

- оценить антигрибную активность экстрактов из трансгенных растений.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Мовсесян, Нина Рубеновна

выводы

1. Экспрессия бактериального гена, который кодирует диоксигеназу, приводит к значительным изменениям фенотипа растений табака: замедленному росту, раннему цветению, хлорозу листьев, появлению темных некротических пятен на листовых пластинах.

2. Трансгенные растения табака, экспрессирующие бактериальную диоксигеназу, характеризуются повышенным содержанием фенольных кислот (в 3 раза, по сравнению с контролем), что коррелирует с увеличением активности ферментов, участвующих в биосинтезе (фенилаланинаммонийлиаза) и деградации (полифенолоксидаза) фенольных соединений.

3. Физиолого-биохимические особенности трансгенных растений табака, экспрессирующих бактериальную диоксигеназу, установленные в наших исследованиях, позволяют предложить эти трансгенные растения в качестве удобных и корректных моделей для изучения молекулярных механизмов защитных ответов растений на этапе включения гиперчувствительного ответа (HR).

4. Сравнительный анализ экспрессии двух бактериальных глюканаз с различной субстратной специфичностью показал, что экспрессия бактериального гена (3-1,3-1,4-глюканазы, в отличие от гена (3-1,3-глюканазы, не оказывает какого-либо существенного влияния на рост и развитие растений табака. Экспрессия бактериального гена (3-1,3-глюканазы приводит к изменению фитогормонального статуса и фотосинтетической активности у трансгенных растений табака.

5. Физиолого-биохимические особенности трансгенных растений, экспрессирующих бактериальный ген (3-1,3-глюканазы, дают основание рассматривать эти трансгенные растения как модели для изучения сложной взаимосвязи процессов фотосинтеза и эпигенеза, регулируемых фитогормонами.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, представленные результаты исследования позволяют заключить, что экспрессия бактериального гена, кодирующего диоксигеназу, приводит к необычному фенотипу трансгенных растений NahC линии, а именно, ярко выраженному хлорозу листьев, что коррелирует с сильной флуоресценцией листьев в УФ свете в области центральной жилки. При этом суммарное содержание фенольных кислот в листьях NahC растений табака в 3 раза выше, чем в листьях контрольных растений (94,51 и 33,18 мкг/г сырого веса, соответственно).

Полученные результаты позволили сделать следующее заключение: экспрессия бактериального гена, кодирующего диоксигеназу, привела к значительному увеличению уровня фенольных кислот в трансгенных растениях, что коррелирует с фенотипическими изменениями.

Увеличение уровня фенольных кислот оказало влияние на уровень активности ферментов, которые в качестве субстратов используют фенольные кислоты. Результаты экспериментов продемонстрировали, что у трансгенных NahC растений происходит активация ферментов, участвующих в биосинтезе (ФАЛ) и деградации (ПФО) фенольных соединений, и эти изменения коррелируют как с повышенным содержанием фенольных соединений, так и с фенотипическими изменениями этих растений (хлорозом листьев и свечением в УФ свете). Кроме этого, экспрессия бактериального гена, кодирующего диоксигеназу, привела к снижению как суммарного содержания хлорофиллов а и Ь, так и уровня каротиноидов, а также к активации синтеза ряда основных и кислых белков. Некоторые из них могут принадлежать к разным классам PR-белков. Следует отметить, что отмеченные выше изменения более ярко выражены у NahC трансгенных растений линии NahC9 и NahC 13, по сравнению с растениями линии NahC2, что, вероятно, связано с меньшей активностью бактериальной диоксигеназы у этой линии растений.

Полученные результаты по морфологическому и физиолого-биохимическому анализу трансгенных NahC растений позволяют сделать следующее заключение: фенотипические (хлороз листьев, наличие некротических пятен на листовых пластинах), а также физиолого-биохимические (увеличенное содержание фенольных кислоты, активация ферментов биосинтеза и деградации фенольных соединений, изменение пула кислых белков, возможно, защитных) особенности растений этой линии позволяют предложить использовать трансгенные NahC растения в качестве моделей для изучения молекулярных ответов растений на этапе включения гиперчувствительного ответа (HR), поскольку HR ассоциирован именно с такими фенотипическими и биохимическими проявлениями.

Результаты по экспрессии в растениях бактериальных генов, кодирующих р-глюканазы с различными субстратными специфичностями, позволяют предположить, что у трансгенных растений, экспрессирующих ген (3-1,3-глюканазы, изменен фитогормональный баланс в сторону увеличения уровня эндогенных ауксинов. Это предположение основано на данных о поведении листовых эксплантов трансгенных растений на средах, содержащих различные концентрации фитогормонов, а также на результатах по времени укоренения трансгенных растений, экспрессирующих ген р-1,3-глюканазы.

Проведенные эксперименты позволяют предложить использование трансгенных растений табака, экспрессирующие бактериальные гены (3-глюканаз, в качестве модели для дальнейших исследований взаимосвязи между экспрессией бактериальных (З-глюканаз и фитогормональным статусом трансгенных растений.

Результаты экспериментов по определению уровня фотосинтетических пигментов во всех линиях трансгенных растений, экспрессирующих бактериальные гены Р-глюканаз, показали, что у линий растений, экспрессирующих ген (3-1,3-глюканазы, отмечается снижение как суммарного содержания хлорофиллов а и Ь, так и уровня каротиноидов.

Представленные результаты дают основание рассматривать полученные трансгенные растения как модели для изучения сложной взаимозависимости процессов фотосинтеза и эпигенеза, регулируемых фитогормонами.

Сравнительный анализ полипептидных спектров основных белков, экстрагированных из листьев контрольных и трансгенных растений, экспрессирующих бактериальные гены (3-глюканаз, не выявил отличий, тогда как показано наличие одной дополнительной полипептидной полосы в спектрах кислых белков у растений, экспрессирующих р-1,3-глюканазу с лидерной последовательностью. Эти данные могут свидетельствовать о том, что экспрессия бактериального фермента приводит к активации экспрессии кислых белков растений, причем следует подчеркнуть, что в этом случае важным фактором является внеклеточная локализация фермента.

Способность экстрактов трансгенных растений ингибировать модельный фитопатоген Trichoderma lignorum является основанием использования полученных нами трансгенных растений, экспрессирующих гены (3-глюканаз термофильных бактерий с различной специфичностью, для моделирования отдельного этапа защитных ответов растений, а именно этапа, связанного с активацией гидролитических ферментов - Р-глюканаз.

Таким образом, экспрессия в растениях генов бактериального происхождения, которые кодируют ферменты с активностями, аналогичными или близкими к растительным ферментам, может имитировать действие растительных белков, что позволяет моделировать отдельные этапы метаболизма или защитного ответа. Трансгенные растения, экспрессирующие бактериальные гены, являются удобными и корректными моделями для изучения роли растительных ферментов с аналогичными функциями в процессах жизнедеятельности растений.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Мовсесян, Нина Рубеновна, 2001 год

1. Бутенко Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнология на их основе. М.: ФБК-Пресс,- 1999,- 160 с.

2. Гавриленко В.Ф., Ладыгина М.Е., Хандобина Л.М. Большой практикум по физиологии растений. Фотосинтез. Дыхание. Под ред. Б.А. Рубина,- М.: Высшая школа,- 1975,- С.194-196.

3. Кефели В.И. Рост растений// Под ред. М.Х.Чайлахяна,- 2-е изд., пепераб. и доп. -М.:Колос, 1984,- 175 с.

4. Кефели В.И. Физиологические основы конструирования габитуса растений// М.: Наука, 1994,- 269 с.

5. Кефели В.И. Фотоморфогенез, фотосинтез и рост как основа продуктивности растений// Пущино: ОНТИ ПНЦ АН СССР, 1991. 133 с.

6. Моисеева Н.А. Молекулярные и клеточные механизмы морфогенеза в культуре клеток растений// В кн. Биология культивируемых клеток и биотехнология растений (под ред. Р.Г.Бутенко). М.: Наука, 1991.- 280 с.

7. Мокроносов А.Т. Фотосинтетическая функция и целостность растительного организма,- М.: Наука. 1983. 356 с.

8. Мокроносов А.Т., Гавриленко В.Ф. Фотосинтез: физиолого-эколорические аспекты. М: Изд-во МГУ. 1992,- 320 с.

9. Монзави-Карбасси Б., Голденкова И.В., Кобец Н.С., Мусийчук К.А., Волкова Л.В., Пирузян Э.С. Гетерологичная экспрессия гена НсВ Clostridium thermocellum в протопластах табака \\ Генетика. 1997. - Т.ЗЗ, N7. - С.904-910.

10. Пирузян Э.С., Могутов М.А Великодворская Г.А., Зверлов В.В., Лаптев Д.А., Метт В.Л. Клонирование и некоторые свойства гена lihl, кодирующего новуюэндоглоканазу Clostridium thermocellum Ф7// Биотехнология,- 1990,- N4,- С. 1819.

11. Полевой В.В. Физиология растений. -1989,- М.: Высшая школа. 464 с.

12. Тарчевский И.А., Максютова Н.И., Яковлева В.Г. Влияние салициловой кислоты на синтез белков в проростках гороха // Физиология растений,- 1996.-Т.43, N5,-С.667-670.

13. Akiyama Т., Kaku Н., ShibuyaN. Purification and properties of a basic endo-l,3-beta-glucanase from rice (Oryza sativa L.). Plant Cell Physiol.- 1996,- V. 37,- N 5,- P.702-705.

14. Allan AC., Fluhr R. Two distinct sources of elicited reactive oxygen species in tobacco epidermal cells // Plant Cell. 1997,- V. 9. P. 1559-1572.

15. Anderson-Prouty A .J., Albersheim P. Host-pathogen interactions. VIII. Isolation of pathogen-synthesized fraction rich in glucan that elicits a defence response in pathogen's host//Plant Physiology.- 1975.-V.56. P.286-291.

16. Antoniw J.F., Ritter C.E., Pierpoint W.S., Van Loon L.C. The presence of pathogenesis-related proteins in callus of Xanthi-nc tabacco// Phytopathol.Z.- 1980,-V.101.- P.179-184.

17. Asselin A., Grenier J., Cote F. Light- influenced extracellular accumulation of b (pathogenesis- related) proteins in Nicotiana green tissue induced by various chemicals or prolonged floating on water // Can. J. Bot.- 1985,- V.63.- P. 1276-1283.

18. Baker C.J., Orlandi E.W. Active oxygen in plant pathogenesis // Annu. Rev. Phytopath.- 1995,- V.33.- P.299-321.

19. Baron С., Zambryski P.С. The plant response in pathogenesis, symbiosis, and wounding: variations on common theme? // Annu. Rev. Genetics.-1995.- V.29.-P. 107-129.

20. Bayer E.A., Chanzy H., Lamed R., Shoham Y. Cellulose, cellulases and cellulosomes. Current Opinion in Structural Biology. 1998. V.8. P.548-557.

21. Bednarel S. Y., Railhel N. V. Intracellular trafficking of secretory proteins// Plant Mol. Biol.- 1992,- V.20.- P.133-150.

22. Beerhues L., Kombrink E. Primary structure and expression of mRNAs encoding basic chitinase and 1,3-beta-glucanase in potato.// Plant Mol. Biol.- 1994,- V. 24.- N2,- P. 353-367.

23. Beguin P. Molecular biology of cellulose degradation// Annu. Rev. Microbiol.- 1990,-V.44.-P. 219-248.

24. Bent A.F. Plant disease resistance genes: function meets structure // Plant Cell. 1996.-V. 8. P. 1757- 1771.

25. Bestwick C.S., Brown I.R., Bennett M.H.R., Mansfield J.W. Localization of hydrogen peroxide accumulation during the hypersensitive reaction of Lettuce cells to Pseudomonas syringae pvphaseolicola И Plant Cell.- 1997. -V. 9. P. 209-221.

26. Bissonnette R.R., Echeverri F., Mahboudi A., Green D.R. Apoptotic cell death induced by c-myc is inhibited by bcl2 // Nature.- 1992,- V.359.- P.552-554.

27. Bohlmann H. The role of thionins in plant protection // Crit. Rev. Plant Sci.- 1994.-V.13.-P.1-16.

28. Bol J.F., Linthorst H.J.M., Cornellissen B.J.C. Plant pathogenesis- related proteins induced by virus infection // Annu. Rev. Phytopathol.- 1990,- V.28.- P.l 13-138.

29. Bol J.F., Van Kan J.A.L. The synthesis and possible functions of virus-induced proteins in plants // Microbiol. Sci.- 1988,- V.5.- P.47-52.

30. Boman H.G. Peptide antibiotics and their role in innate immunity // Annu. Rev. Immunol.- 1995,- V.13.- P.61-92.

31. Bonas U. hrp-genes of phytopathogenic bacteria // Curr. Top. Microbial. Immunol.-1994.-V. 192,- P.79-98.

32. Bowless D.J. Defense- related proteins in higher plants // Annu. Rev. Biochem.-1990,-V.59.- P.873- 907.

33. Bowling S., Guo A., Cao H., Gordon A.S., Klessig D., Dong X. A mutation in Arabidopsis that leads to constitutive expression of systemic acquired resistance // Plant Cell. -1994,- V. 6. P. 1845-1857.

34. Bradford M.M. A rapid sensitive method for the action of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding// Anal.Biochem.- 1976.-V.72,-P.248-254.

35. Bringar A.C., Stevens A., Fox J.E. Biosynthesis and degradation of a wheat embryo cytokinin-binding protein during embriogenesis and germination// Plant Phys., 1985. -V. 79,-P. 706-710.

36. Broekaert W.F., Terras F.R.G., Cammue B.P.A., Osborn R.W. Plant defensins: novel antimicrobial peptides as components of the host defense system // Plant Physiol.-1995,- V.108, N4,- P.1353-1358.

37. Broglie K., Chet I., Holliday M., Cressman R., Biddle P., Knowlton C., Mauvais C.J., Broglie R. Transgenic plants with enchanced resistance to the fungal pathogen Rhizoctonia solani // Science .-1991,- V.254.- P. 1194-1197.

38. Bronnenmeier K., Kern A., Liebl W. and Staudenbauer W. Purification of Thermotoga maritima enzymes for the degradation of cellulolytic materials// Applied and Enviromental Microbiology. 1995. V.61, N 4. - P.1399-1407.

39. Burton J., Wood S.G., Pedyczak A., Siemion I.Z. Conformational preferences of sequential fragments of the hinge region of human IgAl immunoglobulin molecule.// Biophys.Chem. -1989. -V.33. P. 39-45.

40. Candela M.E., Alcazar M.D., Espin A., Egea C., Almela L. Soluble phenolic acids in Capsicum annuum stems infected with Phytophthora capsici II Plant Pathology.-1995,-V.44.-P. 116-123.

41. Cao H. et al. Characterization of an Arabidopsis mutant that is nonresponsive to inducers of systemic acquired resistance I I Plant Cell.- 1994,- V.6. -P. 1583-1592.

42. Cao H., Glazebrook J., Clarke JD., et al. Arabidopsis NPR1 gene that controls Systemic Acquired Resistance encodes a novel protein containing ankyrin repeats // Cell.-1997. -V.88. -P.57-63.

43. Carr J.P., Klessig D.F. The pathogenesis- related proteins of plants. In J.K. Setlow,-ed, Genetic engineering: principles and methods. Plenum Press, new York.- 1989,-V.ll.-P. 65-109.

44. Castresana C., de Carvalho F., Gheysen G., Habets M., Inze D., van Montagu M. Tissue specific and pathogen-induced regulation of Nicotianaplumbaginifolia 3-1,3-glucanase gene// Plant Cell.-1991 .-V.2.- P. 1131-1143.

45. Chang M.M., Hadwiger L.A., Horovitz D. Molecular characterization of a pea beta-1,3- glucanase induced by Fusarium solani and chitosan challenge 11 Plant Molecular Biology.- 1992,- V.20, N4,- P.609-618.

46. Cline K., Albersheim P. Host-pathogen interactions. XVII. Hydrolysis of biologically active fungal glucans by enzyme isolated from soybean cells// Plant Physiol. -1981,-V. 68,-P. 221-228.

47. Cohen Y. Local and systemic control of Phytophthora infestans in tomato plants by DL-3-amino-n-butanoic acids //Phytopathology.- 1994a. -V.84. -P.55-59.

48. Cohen Y., Gisi U., Mosinger E. Systemic resistance of potato plants against Phytophthora infestans induced by unsaturated fatty acids // Physiological and Molecular Plant Pathology.- 1991.-V.38. -P.255-263.

49. Colilla F.J., Rocher A., Mendez E. Gamma- purothionins: amino acid sequence of two polypeptides of a new family of thinins from wheat endosperm // FEBS Lett.- 1990,-V.270.- P.191-194.

50. Collinge D.B., Kragh K.M., Mikkelsen J.D., Nielsen K.K., Rasmussen U., Vad K. Plant chitinases // Plant J., 1993,- V.3.- P.31- 40.

51. Creelman R.A., Mullet J.E. Biosynthesis and action of jasmonates in plants // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol.- 1997.-V.48.-P.425-449.

52. Cutt J.R., Harpster M.H., Dixon DC., Carr J.P., Dunsmuir P., Klessig D.F. Disease response to tobacco mosaic vims in transgenic tobacco plants that constitutively express the pathogenesis- related PR-lb gene // Virology.- 1989,- V.173.- P.89- 97.

53. De Loose M., Gheysen G., Tire C., Gielen J., Villarroel R., Genetello C., Van Montagu M., De Picker A., Inze D. The Extensin Signal Peptide Allows Secretion of a Heterologous Protein from Protoplasts// Gene.-1991. V.99. - P.95-100.

54. De Wit P.J.G.M., Spikman G. Evidence for the Occurrence of Race and Cultivar-Specific Elicitors of Necrosis in Intercellular Fluid of Compatible Interactions of Cladosporium fulvum and Tomato// Physiol Plant Pathol. -1982. -V.21. -P. 1-11.

55. Deblaere R, Reynaerts A, Hofte H, Hernalsteens JP, Leemans J, Van Montagu M. Vector for cloning in plant cells. Meth Enzymol.- 1987,- V.l53,- P.277-292.

56. Delaney Т., Friedrich L., Ryals J. Arabidopsis signal transduction mutant defective in chemically and biologically induced disease resistance// Proc.Natl.Acad.Sci.- 1995,-V.92.- P.6602-6606.

57. Delaney T.P. Genetic dissection of acquired resistance to disease // Plant Physiol. -1997. -V. 113. -P. 5-12.

58. Delaney T.P., Uknes S., Vernooij В., Friedrich L., Weymann K., Negrotto D., Gaffney Т., Gut Rella M., Kessmann H., Ward E., Ryals J.A. A central role of salicylic acid in plant disease resistance // Science. -1994. -V. 226. -P. 1247-1250.

59. Deroles S.C., Gardner R.C. Analysis of the T-DNA structure in a large number of transgenic petunias generated by Agrobacterium-mediated transformation// Plant Mol Biol. 1988b.- V. 11.- P.365-377.

60. Deroles S.C., Gardner R.C. Expression and inheritance of kanamycin resistance in a large number of transgenic petunias generated by Agrobacterium-modmtcd transformation// Plant Mol Biol. 1988 - V. 11.- P.355-364.

61. Dietrich A., Mayer J.E., Hahlbrock K. Fungal elicitor triggers rapid, transient, and specific protein phosphorylation in parsley cell suspension cultures // J. Biol. Chem.-1990,- V.265.- P.6360-6368.

62. Dietrich R.A., Delaney T.P., Uknes S.J., Ward E.R., Ryals J.A., Dangl J.L. Apabidopsis mutants simulating disease resistance response // Cell.- 1994,- V.77.-P. 565-577.

63. Dixon R.A., Lamb C.J. Molecular communication in interactions between plants and microbial pathogens // Annu.Rev.Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 1990. - V. 41. - P. 339-367.

64. Domingo C., Conejero V., Vera D. Genes encoding acidic and basic class 1П (3-1,3-glucanases are expressed in tomato plants upon viroid infection// Plant Mol. Biol. -1994. -V.14. P. 725-732.

65. E.S.Piruzian, B.Monzavi-Karbassi, N.S.Darbinian, I.V.Goldenkova, N.S.Kobets, A.V.Mochulsky. The use of thermoactive fS-glucanase gene from Clostridium thermocellum as a reporter gene in plants// Mol.Gen.Genet. 1998. - V.257. -P.561-567.

66. Ebel J., Mithofer A. Early events in the elicitation of plant defence// Planta. -1998. -V.206. P.335-348.

67. Enyedi A.J., Yalpani N., Silverman P., Raskin I. Signal molecules in systemic plant resistance to pathogens and pests // Cell. 1992. - V.70. - P. 879-886.

68. Felix G., Meins JF. Developmental and hormonal regulation of (3-1,3-glucanase in tobacco// Planta.- 1987,- V.172.- P.386-392.

69. Fincher G.B. and Stone B.A., Metabolism of noncellulolosic polysacharides// Encl Plant Physiol. New Series. 1981. - 13B. - P.68-132.

70. Fincher G.B. Molecular and cellular biology associated with endosperm mobilization in germinating cereal grains// Ann. Rev. Plant Physiol. Plant Mol Biol. 1989. -P.305-346.

71. Fire A. RNA-triggered gene silencing// Trends in Biotechnology. 1999,- V. 15, N 9,-P. 358-363.

72. Fischer W., Christ U., Baumgartner M., Erismann K.H., Mosinger E. Pathogenesis-related proteins of tomato. 2. Biochemical and immunological characterization // Physiol. Mol. Plant Pathol.- 1989,- V.35.- P.67- 83.

73. Flor H.H. Current status of the gene-for-gene concept // Annu. Rev. Phytopathol. -1971.-V. 9. -P. 275-296.

74. Fraser R.S.S. Evidence for the occurrence of the "pathogenesis-related" proteins in leaves healthy tobacco plants during flowering // Physiol. Plant Pathol.-1981,- V.19.-P.69-76.

75. Frey M., Chomet P., Glawischnig E. Analysis of a chemical plant defense mechanism in grasses // Science.- 1997.-V.277,- P.696-699.

76. Friedrich L. A benzothiadiathole derivate induces systemic acquired resistance in tobacco // Plant J.-1996.-V.10.-P.61-70.

77. Frye C.A., Innes R.W. An Arabidopsis mutant with enhanced resistance to powdery mildew//Plant Cell.- 1998,- V.10.- P.947-956.

78. Gaffney Т., Friedrich L., Vernooij В., Negrotto D., Nye G., Uknes S., Ward E., Kessmann H., Ryals J. Requirement of salicylic acid for the induction of systemic acquired resistance // Science. 1993. - V.261. - P. 754-756.

79. Gassab G.I., Varner J.E. Cell wall proteins// Ann. Rev. Plant Physiol, and Plant Mol. Biol.- 1988,- V. 39,- P.321-353.

80. Gheysen G., Inze D., Soetaert P., Van Montagu M., Castresana C. Sequence of a Nicotiana plumbaginifoUa beta(l,3)-glucanase gene encoding a vacuolar isoform// Nucleic Acids Res. 1990,- V.18, N22,- P.6685.

81. Gilbert H.J. and Hazlewood G.P. Bacterial cellulases and xylanases// J. of General Microbiology. 1993. - V. 139. - P.l87-194.

82. Gilbert H.J. and Hazlewood G.P. Bacterial cellulases and xylanases// J. of General Microbiology.- 1993,- V.139. P. 187-194.

83. Gilkes N.R., Henrissat В., Kilburn D.G., Miller R.C. and Warren R.A.J. Domains in microbial (3-1,4-glycanases: sequence conversation, function and enzyme families// Microbiol. Rev. 1991,- V. 55. P. 303-315.

84. Gilkes N.R., Kilburn D.G., Miller R.C. and Warren R.A.J. Structural and functional analysis of bacterial cellulase by proteolysis// J. Biol. Chem.- 1989,- V. 264,- P. 17802-17808.

85. Gilkes N.R., Warren R.A.J., Miller R.C. and Kilburn D.G. Precise excision of the cellulose binding domains from two Cellulomonas fimi cellulases by a homologousprotease and the effect on catalysis// J. Biol. Chem., 1988. V.263. - P. 10401-10407.

86. Glazebrook J., Zook M., Mert F. et al. Phytoalexin-deficient mutants of Arabidopsis reveal that PAD4 encodes a regulatory factor and that four PAD genes contribute to downy mildew resistance// Genetics.- 1997.-V.146.-P.381-392.

87. Gopalan S., He S.Y. Bacterial genes determining basic compatibility between plants and necrogenic bacteria // Plant Dis.- 1996.-P. 156-162.

88. Gorlach J. et al. Benzothiadiathole: a novel class of inducers of systemic acquired resistance in wheat// Plant Cell.- 1996.-V.8.- P.629-643.

89. Greenberg J.T., Ailan G., Klessig D.F., Ausubel F.M. Programmed cell death in plants: A pathogen-triggered response activated coordinately with multiple defense functions // Cell.- 1994,- V.77.- P.551-563.

90. He S.Y., Gopalan S., Wei W., Yuan J. Molecular biology of plant-bacterial interactions. In MSU-DOE Plant Research Laboratory. Thirtieth Annual Report. Michigan State University, USA.- 1995,- PP. 29-34.

91. He S.Y., Huang H.C., Collmer A. Pseudomonas syringae pv syringae 61 harpin Pss , a protein that is secreted via the Hrp pathway and elicits the hypersensitive response in plants // Cell.- 1993,- V.73.- P. 1255-1266.

92. Hedrick S.A., Bell J.N., Boiler Т., Lamb C.J. Chitinase cDNA cloning and mRNA induction by fungal elicitor, wounding and infection // Plant Physiol.- 1988,- V.86.-P. 182-186.

93. Helleboid S., Bauw G., Belingheri L., Vasseur J., Hilbert J.-L. Extracellular (3-1,3-glucanases are induced during early somatic embryogenesis in Cichorium// Planta. 1998. - V. 205. - P.56-63.

94. Hill C.P., Yee J., Selsted M.E., Eisenberg D. Crystal structure of defensin HNP-3, an amphiphilic dimer. Mechanism of membrane permeabilization // Science.-1991.-V.251.-P.1481- 1485.

95. Hinton DM., Pressey R. Glucanases in fruits and vegetables// J.Am.Soc.Hort Sci.- 1980,- V.105.- P.499-502.

96. Hlatt A., Cafferkey R., Bowdich K. Production of antibodies in transgenic plants// Nature.- 1989,- V.342.- P.76-79.

97. Hoj P.B., Hertman D.J., Morrice N.A., Doan D.N.P., Fincher G.B. Purification of (l,3)-(3-glucan endoglucanase isoenzyme II from germinated barley anddetermination of its primary structure from a cDNA clone// Plan Mol Biol. 1989. -V.13.-P. 31-42.

98. Hoj PB., Fincher GB. Molecular evolution of plant beta-glucan endohydrolases// Plant J.- 1995,- V.7, N3,- P.367-379.

99. Huang H.C., He S.Y., Bauer D.W., Collmer A. The Pseudomonas syringae pv syringae 61 hrpH product: an envelope protein required for elicitation of the hypersensitive response in plants // J. Bacteriol.-1992,- V.174.- P.6878- 6885.

100. Huber DJ., Nevins DJ. (3-D-Glucan hydrolase activity in Zea coleoptile cell walls// Plant Physiol.- 1980,- V.65.- P. 768-773.

101. Huber R., Langworthy Th.A., Konig H., Thomm M., Woese C., Sleytr U., Stetter K. Thermotoga maritima sp.nov. represents a new genus of unique extremely thermothilic eubacteria growing up to 90°C// Arch.Microbiol. 1986. - V. 144. - P. 324-333.

102. Hunt M., Ryals J. Systemic acquired resistance signal transduction // Crit Rev. Plant Sci. 1996. - V. 15. - P. 583-606.

103. Huub J.M., Linthorst Ph.D. Pathogenesis-related proteins of plants// Cri Rev in Plant Sci.-1991,-V. 10, N2,-P. 123-150.

104. Inze D., Van Montagu M. Oxidative stress in plants // Curr. Opin. Bacteriol. -1995.-V. 6.-P. 153- 158.

105. Iturriaga G., Jefferson R.A., Bevan M.W. Endoplasmic Reticulum Targeting and Glycosylation of Hybrid Proteins in Transgenic Tobacco// Plant Cell. 1989. - V.l. -P.381-390.

106. Joosten M.H.A.J., De Wit P.J.G.M. Identification of several pathogenesis-related proteins in tomato leaves inoculated with Cladosporium fulvum (syn. Fulvia fulva) as (3-1,3 glucanases and chitinases // Plant Physiol.- 1989.- V.89.- P.945- 951.

107. Joosten M.H.A.J., Vogelsang R., Cozijnsen T.J., Verberne M., De Wit P.J.G.M. The biotrophic fungus Cladosporium fulvum circimvents cf-4-mediated resistance by producing unstable AVR4 elicitors// Plant Cell. 1997. - V.9. - P.367-379.

108. Jung J.-L., Fritig В., Hahne G. Sunflower (Helianthus annuus L.) pathogenesis-related proteins // Plant Physiol.- 1993,- V. 101, N3,- P.873-880.

109. KaufFmann S., Legrand M., Geoffroy P., Fritig B. Biological function of pathogenesis-related proteins: four PR proteins of tobacco have l,3-|3-glucanase activity // EMBO J.- 1987,- V.6.- P.3209- 3212.

110. Kawaoka A., Kawamoto Т., Ohta H. et al. Wound-induced expression of horseradish peroxidase // Plant Cell Rep.-1994.-V.13.-P.149-154.

111. Keen N.T. Gene-for-gene complementarity in plant-pathogen interactions // Annu. Rev. Genet.- 1990,- V.24.- P.447-63.

112. Keen N.T. The molecular biology of disease resistance // Plant Molecular Biology. -1992. V. 19. - P. 109-122.

113. Kiem T.T.V., Toubart P., Cousson A., Darvill A.G., Golin D.J., Chelf P., Albersheim P. Manipulation of the morphogenetic pathway of tobacco explants by oligosacharins//Nature.- 1985,- V. 314. P. 615-617.

114. Kononowicz A.K., Nelson D.E., Singh N.K., Hasegawa P.M., Bressan R.A. Regulation of the osmotin gene promoter // Plant Cell.- 1992,- V.4.- P.513-524.

115. Kooter J.M., Matzke M.A., Meyer P. Listening to the silent genes: transgene silencing, gene regulation and pathogen control// Trends in Plant Science.-1999,- V.4, N 9,- P. 340-347.

116. Kozarov E., Kaliev A., Andrianov V., Piruzian E. Construction of plant expression vector active in prokaryotic cells// Dokl. Bulgarian Academy of Sciences.- 1988,-V.41.-N.9.- P.l 17-118.

117. Kuchitsu K., Kikuyama M., Shibuya N. N- acetylchito-oligosacharides, biotic elicitor for phytoalexin production, induce transient membrane depolarization in suspension- cultured rice cells // Protoplasma.- 1993,- V.174.- P.79-81.

118. La Rosa P.C., Chen Z., Nelson D.E., Singh N.K., Hasegawa P.M., Bressan R.A. Osmotin gene expression is posttranscriptionally regulated // Plant Physiol.- 1992,-V.100.- P.409-415.

119. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head bacteriophage T4// Nature.- 1970,- V.227.- P.680-685.

120. Lamb C., Dixon R.A. The oxidative burst in disease resistance // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 1997. - V.48. - P. 251-275.

121. Lamb C.J. Plant disease resistance genes in signal perception and transduction // Cell.- 1994,- V.76.- P.419-422.

122. Lawton К. et al. Benzothiadiathole induces disease resistance in Arabidopsis by activation of the systemic acquired resistance signal transduction pathway // Plant J.-1996.-V.10.-P.71-82.

123. Legrand M., Kauffmann S., Geoffrey P., Fritig B. Biological function of pathogenesis- related proteins: four tobacco pathogenesis- related proteins are chitinases // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1987.- V.84.- P.6750- 6754.

124. Leon J., Lawton M.A., Raskin I. Hydrogen peroxide stimulates salicylic acid biosynthesis in tobacco // Plant Physiol. 1995. - V. 108 - P. 1673-1678.

125. Lerbs S., Lerbs W., Klyachko N.L., Kulaeva O.N., Wollgiehn R, Parthier B. Gene expression in cytokinin- and light-mediated plastogenesis of Cucurbita cotyledons: ribulose-l,5-bisphosphatecarboxylase/oxygenase//Planta.-1984. V.162. -P.289-298.

126. Levine A., Pennell R.I., Alvarez M.E., Palmer R., Lamb C. Calcium-mediated apoptosis in a plant hypersensitive disease resistance response // Curr. Biol.- 1996. -V. 4. -P. 427-437.

127. Levine A., Tenhaken R., Dixon R, Lamb C. H202 from the oxidative burst orchestrates the plant hypersensitive disease resistance response // Cell.-1994,- V.79.-P.583- 593.

128. Liebl W., Stemplinger I., Ruile P. (1997) Properties and gene structure of the Thermotoga maritima alpha-amylase AmyA, a putative lipoprotein of a hyperthermophilic bacterium// J. Bacteriol. 1997. - V.179, N 3. - P. 941-948.

129. Linthorst H.J.M. Pathogenesis-related proteins of plants // Crit. Rev. Plant Sci.-1991,-V.10.- P.123- 150.

130. Linthorst H.J.M., Melchers L.S., Mayer A., van Roekel J.S.C., Cornelissen B.J.C., Bol J.F. Analysis of gene families encoding acidic and basic p-1,3-glucanases of tobacco// Proc.Natl Acad Sci USA.- 1990a.-V.87,- P. 8756-8760.

131. Linthorst H.J.M., Meuwissen R.L.J., Kauffmann S, Bol J.F. Constitutive expression of pathogenesis-related proteins PR-1, GRP, and PR-S in tobacco has no effect on virus infection // Plant Cell.- 1989,- V.l.- P.285- 291.

132. Litts J.C., Simmons C.R., Karrer E.E., Huang N., Rodriguez R.L. The isolation and characterization of a barley 1,3-1,4-p-glucanase gene// Eur J Biochem.- 1990,- V.-194.- P.831-838.

133. Liu D., Raghothama KG, Hasegawa P.M., Bressan R.A. Osmotin overexpression in potato delays development of disease symptoms // Proc. Natl. Acsd. Sci. USA.- 1994,- V.91.- P. 1888-1892.

134. Lotan Т., Ori N., Fluhr R. Pathogenesis-related proteins are developmentally regulated in tobacco flowers // Plant Cell.- 1989,- V.I.- P. 881-887.

135. Low P.S., Merida J.R. The oxidative burst in plant defense: Function and signal transduction//Physiol. Plant. 1996. V. 96. P. 532-542.

136. Lund P., Lee R.Y., Dunsmyir P. Bacterial chitinase is modified and secreted in transgenic tobacco// Plant Physiol.- 1989,- V.91.- 130-135.

137. Lyon G.D. Plant/pathogen interactions at the cellular level: A summary and model// 1999,- http:www.scri.sari.ac.uk/bpp/celltext.htm

138. Lyon G.D., Reglinski Т., Newton A.C. Novel disease control compounds: the potential to "immunize" plants against infection // Plant Pathology.- 1995,- V.44, N3.-P.407- 427.

139. MacKintosh C., Lyon G.D., MacKintosh R.W. // Plant J.-1994,- V.5.- P.137-147.

140. Mailhos C., Howard M.K., Latchman D.C. Heat shock proteins neuronal cells from programmed cell death by apoptosis // Neuroscience.- 1993,- V.55.- P.621-627.

141. Maleck K., Dietrich R.A. Defense on multiple fronts: how do plants cope with diverse enemies? // Trends in plant science.- 1999.-V.4, N6.-P.215-219.

142. Mansfield J.W., Hargneaves J.A., Boyle F.C. Phytoalexin production by live cells in broad bean leaves infected with Botrytis cinerea II Nature.- 1974,- V.252, N5481,-P.316-327.

143. Matern U., Kneusel R.E. Phenolic compounds in plant disease resistance // Phytoparasitica.- 1988,-V.16.-P. 153-170.

144. Matthysse A.G., Yarnall H., Boles S.B., McMahan S. A region of the Agrobacterium tumefaciens chromosome containing genes required for virulence and attachment to host cells// Biochimica et Biophysica Acta. 2000,- V. 1490,- P. 208212.

145. Mauch F., Staehelin LA. Functional implications of the subcellular localization of ethylene-induced chitinase and P-l,3-glucanase in bean leaves// Plant Cell.-1989.-V.1.-P.447-457.

146. Mehdy M.C. Active oxygen species in plant defense against pathogens // Plant Physiol. -1994. V. 105. - P. 467-472.

147. Memelink J., Linthorst H.J.M., Schilperoort R.A., Hoger J.H.C. Tobacco genes encoding acidic and basic isoforms of pathogenesis-related proteins display different expression patterns// Plant Mol Biol.-1990.- V. 14,- P. 119-126.

148. Metzler M.C., Cutt J.R., Klessig D.F. Isolation and characterization of gene encoding a PR-l-like protein from Arabidopsis thaliana II Plant Physiol.- 1991,-V.96, N1,- P.346-348.

149. Miller G.L., Blum R., Glenon W.E., Burton A.L. Measurment of carboxymethylcellulase activity// Anal Biochem. 1960. -V. 2,- P. 127-132.

150. Mittler R, Lam E. Identification, characterization, and purification of tobacco endonuclease activity induced upon hypersensitive response cell death // Plant Cell.-1995b.- V.7, N11.- P.1951-1962.

151. Mittler R., Shulaev V., Lam E. Coordinated activation of programmed cell death and defense mechanisms in transgenic tobacco plants expressing a bacterial proton pump // Plant Cell.- 1995a.- V.7.- P.29-42.

152. Mlodzianowski F., Gesela E. Effect of kinetin and chloranphenicol on chlorophyll synthesis and chloroplast development in detached lupine cotyledons under low light intensivity// Acta Soc Bot Poland. -1974,- XLIIL- P. 149-160.

153. Molina A., Hunt M.D., Ryals J.A. Impaired fungicide activity in plants blocked in disease resistance signal transduction // Plant Cell. 1998. - V. 10. - P. 1903-1914.

154. Moskalenko A.A., Karapetyan N.V. The structural role of caroteinoids in photosynthetic membranes//Z.Naturforsch.- 1996,- V. 51.- P. 763-771.

155. Mur LAJ., Naylor G., Warner SAJ. et al. Salicylic acid potentiates defense gene expression in tissue exhibiting acquired resistance to pathogen attack // Plant J.-1996.-V.9.-P.559-571.

156. Murashige Т., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture// Ibid.- 1962.-V.15.- P.473-497.

157. Napier R.M. & Venis M.A. Receptors for plant growth regulators: Recent advances// J. Plant Growth Regul. 1990,- V.9.- P. 113-126.

158. Neale AD., Wahleithner JA., Lund M., Bonnett HT., Kelly A., Meeks-Wargner DR., Peacock WJ., Dennis ES. Chitinase, p-1,3-glucanase, osmotin and extensin are expressed in tobacco explants during flower formation// Plant Cell.- 1990,- V.2.-P. 673-684

159. Nelson D.E., Raghothama K.G., Singh N.K., Hasegawa P.M., Bressan R.A. Analysis of structure and transcriptional activation of an osmotin gene // Plant Mol. Biol.- 1992,- V.19.- P.577-588.

160. Neuenschwander U., Lawton K., Ryals J. Systemic acquired resistance // Plant-microbe interactions. V.l/ Ed. Stancey G. and Keen N.T. New York: Chapman and Hall, 1996. P. 81-106.

161. Olsen O., Thomsen K.K., Weber J., Duus J.O., Svendsen I., Wegener C., von Wettstein D. Transplanting two unique beta-glucanase catalytic activities into one multienzyme, which forms glucose// Biotechnology (NY).- 1996.- V.l4, N 1. P. 7176.

162. Payane G., Waed E., Gaffney Т., Ahl-Goy P., Moyer M., Harper A., Meins F.Jr., Ryals J. Evidence for a third structural class of P-l,3-glucanase in tobacco// Plant Mol. Biol. 1990. - V.l5. - P.797-808.

163. Pennell R.I., Lamb C. Programmed cell death in plants // Plant Cell. 1997. -V. 9,-P. 1157-1168.

164. Pieterse C.M.J, et al. A novel signaling pathway controlling induced systemic resistance in Arabidopsis И Plant Cell.- 1998.- V.10.- P.1571-1580.

165. Pieterse C.M.J., vanWees S.C.M., Hoffland E. et al. Systemic resistance in Arabidopsis induced by biocontrol bacteria is independent of salicylic acid accumulation and pathogenesis-related gene expression // Plant Cell.- 1996,- V.8.-P. 1225-1237.

166. Prassad Т.К., Anderson M.D., Martin B.A., Stewart C.R. Evidence for chilling-induced oxidative stress in maize seedlings and a regulatory role for hydrogen peroxide // Plant Cell. 1994.- V. 6.- P. 65-74.

167. Renetl A., Colling C., Hahlbrock K., Nurnberger Т., Parker J.E., Studies on elicitor recognition and signal transduction in plant defense // J. Exp. Bot. (Suppl.).- 1993.-V.44.- P.257-268.

168. Richard L., Montserrat A., Hoebeke J., Meeks-Wagner D.R., Tran Than Van K. // Plant Physiol.-1992,- V.98.- P.337-342.

169. Rogers EE., Ausubel FM. Arabidopsis enhanced disease susceptibility mutants exhibit enhanced susceptibility to several bacterial pathogens and alterations of PR-1 gene expression // Plant Cell.-1997.-V.9.-P.305-316.

170. Rushton P. J., Somssich I.E. Transcriptional control of plant genes responsive to pathogens // Curr. Opin. Plant Biol.- 1998.-V.1.-P.311-315.

171. Ryals J., Uknes S., Ward E. Systemic acquired resistance // Plant Physiol.- 1994 -V.104.-P.1109-1112.

172. Ryals J., Weymann K., Lawton K. et al. The Arabidopsis NIM1 protein shows homology to the mammalian transcription factor inhibitor IkB // Plant Cell.- 1997,-V.9.-P.425-439.

173. Ryals J.A., Neuenschwander U.H., Willits M.G., Molina A., Steiner H-Y., Hunt M.D. Systemic acquired resistance // Plant Cell. -1996. V. 8. - P. 1809-1819.

174. Ryan C. Oligosaccharide signalling in plants// Ann. Rev.Cell Biol. 1987,- V.4.-P. 295-317.

175. Ryan C. Protease inhibitors in plants: genes for improving defenses against insects and pathogens //Annu. Rev. Phytopathol.- 1990.-V.28.-P.425-449.

176. Ryan C.A. The search for the proteinase inhibitor- inducing factor, PIIF // Plant Mol.Biol.- 1992,- V.19, N1,- P.123-133.

177. Ryerson D.E., Heath M.C. Cleavage of nuclear DNA into oligonucleosomal fragments during cell death induced by fungal infection or by abiotic treatments // Plant Cell.- 1996,- V.8, N3,- P.393-402.

178. Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T. Molecular cloning: A laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor NY. 1989.

179. Schimming S, Schwarz WH, Staudenbauer WL. Properties of a thermoactive (3-1,3-1,4-glucanase (lichenase) from Clostridium thermocellum expressed in Escherichia coliU Biochem Biophys Res Commun.- 1991,- V.177.- P.447-452.

180. Schimming S., Schwarz W.H., Staudenbauer W.L. Structure of the Clostridium thermocellum gene licB and the encoded (3-1,3-1,4-glucanase// Eur.J.Biochem.-1992,-V. 204,- P.13-19.

181. Schlumbaum A., Mauch F., Vogeli U., Boiler T. Plant chitinase inhibitors of fungal growth //Nature.- 1986,- V.324.- P. 365- 367.

182. Schwarz WH, Bronnenmeier K, Grabritz F, Staudenbauer WL. Activity staining of cellulose in polyacrilamide gels contaioning mixed linkage (3-glucans// Analytical Biochemistry.- 1987,- V.164.- P.72-77.

183. Shinshi H., Neuhaus J-M., Ryals J., Meins f. Structure of a tobacco endochitinase gene: evidence that different chitinase genes can arise by transposition of sequences encoding a cystein-rich domain // Plant Mol. Biol.- 1990,- V.14.- P.357- 368.

184. Simmons CR., Litts JC., Huang N., Rodriguez RL. Structure of rice (3-glucanase gene regulated by ethelene, cytokinin, wounding, salicylic acid and fungal elicitors// Plant Mol. Biol.- 1992,- V.18.-P.33-45.

185. Singh N.K., Nelson D.E., Kuhn D., Hasegawa P.M., Bressan R.A. Molecular cloning of osmotin and regulation of its expression by ABA and adaptation to low water potential // Plant Physiol.- 1989,- V.90.- P. 1096-1101.

186. Slakeski N., Baulcombe CC„ Devos KM, Ahluwalia В., Doan DNP, Fincher GB. Structure and tissue specific regulation of genes encoding barley (l,3;l,4-|3-glucan endohydrolases//Mol.Gen.Genet.- 1990,- V. 224,- P. 437-449.

187. Stichter L., Mauch-Mani B.N., Metraux J.P. Systemic acquired resistance // Annu. Rev. Phytopathol- 1997.-V.35.-P.235-270.

188. Stintzi A., Heitz Т., Prasad V., Wiedermann-Merdinoglu S., Kauffmann S., Geoffroy P., Legrand M., Fritig B. Plant "pathogenesis-related" proteins and their role in defense against pathogens // Biochimie.- 1993,- V.75.- P.687- 706.

189. Stuart I.M. , Loi L., Fincher G.B. Immunological comparison of (l-3,l-4)-(3-glucan endohydrolases in germinating cereals// J. Cereal Sci.- 1987,- V.6.- P.45-52.

190. Sutherland M. V. The generation of oxygen radicals during the host plant responses to infection // Physiol. Mol. Plant Pathol.-1991.- V.39.- P.79- 93.

191. Szybiak-Strozycka U., Lescure N., Cullimore J.V., Gamas P. A cDNA encoding a PR-l-like protein in the model legume Medicago truncatula // Plant Physiol.- 1995,-V.107, N1,- P.273-274.

192. Tague B.W., Chispeel M.I. The plant vacuolar protein, phytohemagglutinin is transported to the vacuole of transgenic yeast// J. Cell. Biol.- 1987,- V.105.- P.1971-1979.

193. Teather R.W., Wood P.J. Use of Congo Red Polysaccharide Interactions in Enumeration and Characterization of Cellulolytic Bacteria from the Bovine Rumen// Appl. Environ.Microbiol. - 1982. - V.43. - P.777-780.

194. Tenhaken R., Levine A., Brisson L.F., Dixon R.A., Lamb C. Function of the oxidative burst in hypersensitive disease resistance // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1995.-V. 92.-P. 4158-4163.

195. Tenhaken R., Rubel C. Salicylic acid is needed in hypersensitive cell death in soybean but does not act as s catalase inhibitor // Plant Physiol.-1997.-V.l 15.-P.291-298.

196. Teyssendier de la Serve В., Axelos M., Peaud-Lenoel C. Cytokinins modulate the expression of genes encoding the protein of the light-harvesting chlorophyll a/b complex//Plant Mol. Biol.- 1985. -V. 5,-P. 155-163.

197. Tomme P., Warren R.A.J, and Gilkes N.R. Cellulose Hydrolysis by Bacteria and Fungi// Advances in Microbial Physiology.- 1995. V. 37,- P. 1-81.

198. Topfer R, Matzeit V., Gronenborn В., Schell J., Steinbiss H.-H. A set of plant expression vectors for transcriptional and translational fusions// Nucleic Acids Research.- 1987,- V.15, N.14.-P.5890.

199. Van Lijsebettens M., Valvekens D. Tobacco Leaf Disk Infection with Agrobacterium tumefaciens/An EMBO Practical Course on Plant Molecular Biology, Gent, Belgium, 1987. P. 15-18.

200. Van Loon L.C. Pathogenesis-related proteins// Plant Mol. Biol. .- 1985,- V.4, PP. 111-116.

201. Van Loon L.C., Gerritsen Y.A.M., Ritter C.E. Identification, purification, and characterization of pathogenesis-related proteins from virus-infected Samsun NN tobacco leaves// Plant Mol. Biol. 1987. - V.9. - P.593-609.

202. Van Loon L.C., Pierpoint W.S., Boiler Т., Conejero V. Recommendations for naming plant pathogenesis-related proteins// Plant Mol. Biol.Reporter. 1994. -V.12. -P.245-264.

203. Van Loon L.C., Van Strien E.A. The families of pathogenesis-related proteins, their activities, and comparative analysis of PR-1 type proteins// Physiol, and Mol.Plant Pathology.-1999. -V.55. -P.85-97.

204. Van Parijs J., Broekaert W.F., Goldstein I.J., Peumans W.J. Hevein: an antifungal protein from rubber-tree (Hevea brasiliensis) latex // Planta.- 1991,- V. 183,- P.258-264.

205. Van Wees S.C.M., Pieterse C.M.J., Trijssenaar A. Differential induction of systemic resistance in Arabidopsis by biocontrol bacteria // Mol. Plant Microbe Interact.- 1997,- V.10.- P.716-724.

206. Varghese JN„ Garrett ТР., Colman PM., Chen L., Hoj PB., Fincher GB. Three-dimensional structures of two plant beta-glucan endohydrolases with distinct substrate specificities// Proc Natl Acad Sci.- 1994,- V.91, N7,- P.2785-2789.

207. Vaux D.L., Strasser A. The molecular biology of apoptosis // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1996.- V.93, N6,- P.2239-2244.

208. Verner K., Schatz G. Protein Translocation Across Membranes// Science. 1988. -V.241. - P.1307-1313.

209. Vidal S., Ponce de Leon I., Denecke J. et al. Salicylic acid and the plant pathogen Erwinia caratovora induce defense genes via antagonistic pathways // Plant J.- 1997,-V.l 1,- P.115-123.

210. Vigers A.J., Roberts W.K., Selitrennikoff C.P. A new family of plant antifungal proteins // Mol. Plant Microbe Interact.-1991,- V.4.- P.315-323.

211. Vigers A.J., Wiedemann S., Roberts W.K., Legrand M., Selitrennikoff C.P., Fritig B. Thaumatin-like pathogenesis-related proteins are antifungal // Plant Sci.- 1992,-V.83.- P.155-161.

212. Vitae A., Strum A., Bollim R. Regulation of process of plant glycoprotein in tha Goldi-complex: a compare study using Xenopus oocytes// Planta.- 1986,- V. 169.-P.108-116.

213. Vogelsang R., Barz W. Purification, characterization and differential hormonal regulation of a beta-l,3-glucanase and two chitinases from chickpea (Cicer arietinum I.)//Planta.- 1993,- V. 189, N 1.-P.60-69.

214. Vogelsang R., Barz W. Purification, characterization and differential hormonal regulation of a (3-1,3-glucanase and two chitinases from chickpea (Cicer arietinum L.) 11 Planta.- 1993,- V.189.- P.60-69.

215. WagifE.E., Coutts R.H.A. //Plant Sci. Lett.- 1981.-V.21.-P.61-69.

216. Walbot V., Hoisington D.A., Neuffer M.G. Disease lesion mimics in maize // Genetic engineering of plants. / Ed. Kosuge T. and Meredith C. New York: Plenum Publishing, 1983. P. 431-442.

217. Walter P., Lingappa V.P. Mechanism of protein translocation across the endoplasmatic reticulum membrane//Ann.Rev.Cell. Biol. 1986,- V.2.- P.499-516.

218. Wang X., Zaflan P., Choudhary M., Lawton M. The PR5K receptor protein kinase from Arabidopsis thaliana is structurally related to a family of plant defense proteins // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1996,- V.93.- P.2598-2602.

219. Ward E.R., Uknes S., Williams S.C., Dincher S.S., Wiederhold D.L., Alexander D.C., AhlGoy P., Metraux J.P., Ryals J.A. Coordinate gene activity in response to agents that induce systemic acquired resistance // Plant Cell.- 1991.-V.3.- P. 10851094.

220. Watanabe Т., Kasahara N., Aida K. and Tanaka H. Three N-terminal domains of (3-1,3-glucanase Al are involved in binding to insoluble (3-1,3-glucan// J. of Bacteriology. 1992,- V.174, N.I.- P.186-190.

221. Wei Z.M., Laby J.R., Zumoff C.H, Bauer D.W., He S.Y., Collmer A., Beer S.V. Harpin, elicitor of the hypersensitive response produced by the plant pathogen Erwinia amylovora II Science.-1992,- N251.- P.85-88.

222. Woloshuk C.P., Meulenhoff J.S., Sela-Buurlage M.B., Van den Elzen P.J.M., Cornellissen B.J.C. Pathogen-induced proteins with inhibitory activity toward Phytophthora infestans И Plant Cell.-1991.- V.3.- P.619-628.

223. Wu G., Shortt B.J., Lawrence E.B., Elaine E.B., Fitzsimmons K.C., Shah D.M. Disease resistance conferred by expression of a gene encoding H202-generating glucose oxidase in transgenic potato plants // Plant Cell. 1995. - V.l. - P. 13571368.

224. Wyllie A.H., Morris R.G., Smih A.L., Dunlop D. Chromatin cleavage in apoptosis: Association with condensed chromatin morphology and dependence on macromolecular synthesis // J. Pathol.- 1984,- V.142.- P.67-77.

225. Xu P., Wang J., Fincher GB. Evolution and differential expression of the 1,3-beta-gluccan endohydrolase-encoding gene family in barley, Hordeum vulgare// Gene.- 1992.- V.l 20, N2,- P. 157-165.

226. Yalpani N., Leon J., Lawton M.A., Raskin I. Pathway of salicylic acid biosynthesis in healthy and virus-inoculated tobacco // Plant Physiol.-1993.- V.103.- P.315-321.116

227. Zhu В., Chen T.H.H., Li P.H. Activation of two osmotin-like protein genes by abiotic stimuli and fungal pathogen in transgenic potato plants // Plant Physiol.-1995b.-V.108.-P.929-937.

228. Zhu В., Chen T.H.H., Li P.H. Expression of an ABA-responsive osmotin-like gene during the induction of freezing tolerance in Solanum commersonii I I Plant Mol. Biol.-1993.-V.21.- P.729-735.