Фармакогностическое изучение боярышника алма-атинского (Crataegus almaatensis Pojark.) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Жалалова Надира Бегим Курсановна

• Жалалова Надира Бегим Курсановна
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Жалалова Надира Бегим Курсановна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Ботанико - фармакогностическая характеристика боярышника алма-атинского Crataegus almaatensis Pojark

1.2. Современное состояние изучения химического состава

и биологических свойств рода Crataegus

1.3. Стандартизация лекарственного растительного сырья боярышников

в мировой практике

1.4. Фармакологические свойства различных видов боярышников

в мировой практике

ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО ГЛАВЕ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Методы макро - и микроскопического анализа

2.2.2. Методы определения доброкачественности

2.2.3. Методы фитохимического анализа

2.2.3.1. Методы качественного анализа биологически активных веществ

2.2.3.2. Методы количественного анализа биологически активных веществ

2.2.4. Методы исследований биологической активности

2.2.5. Методы статистической обработки результатов исследований

ГЛАВА 3. МОРФОЛОГО-АНАТОМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СЫРЬЯ БОЯРЫШНИКА АЛМА-АТИНСКОГО (CRATAEGUS

ALMAATENSIS POJARK. )

3.1. Морфологическое исследование сырья боярышника алма-атинского

3.2. Анатомическое исследование С. almaatensis

3.3. Анатомическое исследование измельченных побегов С. almaatensis

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 4. ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ОСНОВНЫХ ГРУПП БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ (CRATAEGUS ALMAATENSIS POJARK.)

4.1. Исследование химического состава С. almaatensis

4.1.1. Качественный анализ биологически активных веществ побегов

С.almaatensis

4.1.2. Количественный анализ биологически активных веществ побегов

С. almaatensis

4.2. Определение числовых показателей побегов С. almaatensis

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 5. ИССЛЕДОВАНИЯ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ ПОБЕГОВ БОЯРЫШНИКА АЛМА-АТИНСКОГО (CRATAEGUS ALMAATENSIS POJARK.)

5.1. Разработка методики качественного анализа побегов С. almaatensis

5.2. Разработка методики количественного определения побегов

С.almaatensis

5.3. Валидация методики количественного определения

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 6. ИССЛЕДОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ПОБЕГОВ БОЯРЫШНИКА АЛМА-АТИНСКОГО (CRATAEGUS ALMAATENSIS POJARK.)

6.1. Определение острой токсичности побегов С. almaatensis

6.2. Определение антиоксидантной активности С. almaatensis

6.3 Определение антикоагуляционной активности плодов и побегов

С. almaatensis

6.4 Определение антиагрегационной активности плодов и побегов

С. almaatensis

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакогностическое изучение боярышника алма-атинского (Crataegus almaatensis Pojark.)»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Расширение ассортимента лекарственных средств с использованием отечественной сырьевой базы является одной из актуальных задач современной фармации. Возможным решением данной задачи является внедрение в практику новых видов уже изученного рода и новых видов лекарственного растительного сырья известных растений. В настоящее время на территории Российской Федерации разрешены к применению 12 видов боярышника. Официнальными видами сырья являются цветки и плоды [27]. Ценность препаратов боярышника заключается в том, что они содержат большое количество биологически активных веществ, влияющих на сердечно-сосудистую систему, усиливающих кровообращение в венечных сосудах сердца, участвующих в окислительно-восстановительных процессах, обладающих способностью уменьшать проницаемость и ломкость капилляров. Цветки и плоды боярышника применяют при функциональных нарушениях сердечно-сосудистой деятельности [40, 48, 53, 56, 66].

Существующая сырьевая база боярышников в России не отвечает запросам фармацевтической промышленности [128]. Поэтому одним из перспективных и развивающихся направлений современной медицины и фармации является введение в практику нового вида уже изученного рода и нового вида сырья боярышника - побегов. За рубежом изучают листья боярышника для качественной замены или совместного использования наравне с плодами и цветками. Побеги боярышника включены в Европейскую, Французскую, Немецкую, Швейцарскую, Британскую и Американскую травяную фармакопеи [149, 151, 174, 176].

На этапе обоснования использования побегов в качестве лекарственного растительного сырья (ЛРС) наиболее наукоемкими этапами являются изучение химического состава, решение вопросов стандартизации и обоснование путей рационального использования сырья для получения лекарственных препаратов (Шретер А.И., 2002; Самылина И. А., Баландина И.А., 2004; Киселева Т. Л., 2007).

В качестве источников сырья боярышника практически не затронуты виды Среднеазиатской флоры, к которым относятся боярышник дарвазский, боярышник Бретшнейдера, боярышник зеленоплодный, боярышник перисто-надрезанный и боярышник алма-атинский, сырьевая база которых представлена очень хорошо. Поэтому исследование одного из этих видов, а именно, боярышника алма-атинского является актуальным [55, 60].

Степень разработанности темы. На сегодняшний день опубликовано достаточно большое количество отечественных и зарубежных фундаментальных исследований, посвященных вопросам фармакогностического изучения новых видов лекарственного растительного сырья (Самылина И. А. 1987, Куркин В.А. 2014 Фурса Н.С. 1987, Челомбитько В.А. 1994, Плеханова Т.И. 2002, Ханина М.А. 2015, Бубенчикова В.Н. 1991, Даргаева Т.Д., Багиро-ва В.Л. 2007, Беликов В.В. 1991, Георгиевский В.П. 1990, Гончаров Н.Ф. 2008, Потанина О.Г. 2003, Киселева Т.Л. 1987, Хасанова С.Р. 2011 и др.). Изучению фармакологических свойств боярышников посвящены научные исследования Гусейнова Д. Я. 1982, Самылиной И. А. 1990, Куркина В. А. 2013, Евдокимовой О. В. 1999 и др. В последнее десятилетие учеными повышенное внимание уделялось изучению таких видов, как боярышник кроваво-красный, боярышник точечный, боярышник понтийский, боярышник кавказский, боярышник Арнольда и др.

Анализ монографий и периодической литературы по теме диссертации показал, что научные публикации по исследованию химического состава и биологических свойств боярышника алма-атинского носят фрагментарный характер (Куркин В. А.).

Таким образом, недостаточная степень научной разработанности, несомненная практическая значимость для отечественной фармации и медицины обусловили выбор темы диссертационного исследования и определили его цель.

Цель работы и основные задачи исследования. Целью наших исследований явилось фармакогностическое изучение боярышника алма-

атинского, произрастающего на территории Республики Кыргызстан, в качестве нового вида лекарственного растительного сырья.

Для реализации поставленной цели предстояло решить следующие задачи:

- провести морфолого-анатомические исследование побегов боярышника алма-атинского, выявить их анатомо-диагностические признаки;

- провести фитохимический анализ побегов боярышника алма-атинского;

- изучить биологические свойства побегов боярышника алма-атинского;

- определить числовые показатели боярышника алма-атинского;

- разработать проект фармакопейной статьи «Боярышника алма-атинского побеги».

Научная новизна. Впервые проведено морфолого-анатомическое исследование побегов боярышника алма-атинского.

Впервые определены числовые показатели побегов боярышника алма-атинского и установлены их допустимые пределы.

С использованием современных физико-химических методов анализа (ТСХ, ВЭЖХ/МС, ГХ/МС, спектрофотомерия) изучен состав биологически активных веществ побегов боярышника алма-атинского. Методом ТСХ обнаружены впервые витексин, гиперозид, кофейная и хлорогеновая кислоты. Методом ВЭЖХ/МС впервые обнаружены и идентифицированы 4 фенольных соединения (нарингин, 4-кумаровая кислота, кофейная кислота и антоцианин) и гликозид тетрагидроксид стирола. Методом ГХ/МС установлено присутствие 39 соединений, из них идентифицированы 18 соединений, относящихся, в основном, к насыщенным углеводородам - эйкозан, гексадекан, нонаде-кан, гексатриаконтан (более 73%). Также обнаружены ненасыщенные углеводороды (1-нонакозен), жирные кислоты (пальмитиновая и линоленовая кислоты), летучие фенольные соединения (2,3 -дигидро - 3,5 - дигидрокси - 6 -метил - 4Н - пиран - 4 - он, пирокатехин, дигидробензофуран, гидрохинон, феруловая кислота, хинная кислота), компоненты эфирного масла (а-терпинен, пентадеканаль, линалоол оксид, анисовая кислота, неролидола

эпоксиацетат, неролидол). В составе липофильной фракции С. а1таа1ет\8 установлено присутствие дитерпеновых соединений (фитол) и фитостеринов (5-ситостерол). С использованием метода хроматографии в тонком слое сорбента установлен качественный состав моносахаридов полисахаридного комплекса.

Проведено исследование основных групп биологически активных веществ: флавоноидов, дубильных веществ, аскорбиновой кислоты, полисахаридов и сапонинов в побегах и плодах С. а1таа1вт18.

Разработаны методики качественного анализа и количественного определения флавоноидов для стандартизации побегов С. а1таа1вт18.

Определена острая токсичность, установлены антиоксидантная, анти-коагуляционная и антиагрегантная активности побегов С. а1таа1вт18.

Разработан проект фармакопейной статьи «Боярышника алма-атинского побеги».

Теоретическая и практическая значимость результатов исследования.

Результаты теоретических и практических исследований показали возможность дальнейшего изучения побегов боярышника алма-атинского в качестве ЛРС с целью внедрения их в медицинскую практику. На основании проведенных исследований разработан проект фармакопейной статьи «Боярышника алма-атинского побеги». Результаты исследований внедрены в работу ООО «Травы Башкирии», в учебный процесс кафедры фармакогнозии с курсом ботаники и основ фитотерапии, фармацевтической химии с курсами аналитической и токсикологической химии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России.

Методология и методы исследований. Методология построена на информационном поиске и анализе литературных данных по теме диссертационных исследований, а также на получении собственных экспериментальных данных и их анализу.

В качестве основных методов физического, химического и физико-химического анализа использованы методы ТСХ, ВЭЖХ/МС, ГХ/МС, спек-трофотометрии, титриметрии, гравиметрии. Анатомические исследования проводились с применением микроскопов «Минимед-501» и «Микровизор» с вмонтированной цифровой камерой.

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научных исследований ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России по проблеме «Изыскание и изучение новых лекарственных средств». Номер госрегистрации АААА-А20-200011090030-9.

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты морфологического и анатомо-диагностического исследования побегов боярышника алма-атинского;

- результаты качественного анализа побегов боярышника алма-атинского;

- результаты количественного определения биологически активных веществ побегов боярышника алма-атинского;

- результаты разработки методик стандартизации и определения показателей качества побегов боярышника алма-атинского;

- результаты определения биологической активности побегов боярышника алма-атинского.

Степень достоверности. Степень достоверности результатов исследований определяется достаточным объёмом выборок исследования. Статистическую обработку результатов исследования проводили с применением программ «^аЙБЙса 10.0». Различия между группами считались статистически значимыми при доверительной вероятности менее 0,05. Достоверность различий между выборками определялась по параметрическому 1-критерию Стьюдента и непараметрическому и-критерию Манна - Уитни. Для разработанных методик стандартизации проведена валидация [17, 86].

Апробация результатов. Основные положения диссертационной работы обсуждены и доложены на конференциях Российских и международных

уровней: «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины - 2018» (Волгоград, 2018 г.), научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора А. И. Шретера «Перспективы лекарственного растениеводства» (Москва, ВИЛАР, 2018 г.), VII Всероссийской научно-практической конференции (Санкт-Петербург, 2019 г.), VIII международной научно-практической конференции «Беликовские чтения» (Пятигорск, 2019 г.), 74 международной научно-практической конференции студентов и молодых ученных «Актуальные проблемы современной медицины и фармации-2020» (г. Минск, 2020 г.), международной научно-практической конференции «Наука и образование в современном мире», посвященной 175-летию Абая (г. Алмата, 2020 г.).

Публикации. Опубликовано 14 работ, из которых 3 статьи в журналах, рекомендуемых ВАК и 1 статья в международной базе данных (Scopus).

Внедрение результатов исследования. Результаты диссертационной работы внедрены в работу ООО «Травы Башкирии», в учебный процесс кафедр фармакогнозии с курсом ботаники и основ фитотерапии, фармацевтической химии с курсами аналитической и токсикологической химии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России.

Личный вклад автора. Все приведенные экспериментальные результаты диссертационного исследования получены самим автором.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Основные положения, изложенные в данной работе, соответствуют паспорту научной специальности 3.4.2 - Фармацевтическая химия, фармакогнозия (фармацевтические науки) пункту 2 - «Формулирование и развитие принципов стандартизации и установление нормативов качества, обеспечивающих терапевтическую активность и безопасность лекарственных средств»; пункту 3 - «Разработка новых, совершенствование, унификация и валидация существующих методов контроля качества лекарственных средств на этапах их разработки, производства и потребления»; пункту 5 - «Изучение вопросов рационального использования ресурсов лекарственного растительного сырья

с учетом влияния различных факторов на накопление биологически активных веществ в сырье» и пункту 6 - «Изучение химического состава лекарственного растительного сырья, установление строения, идентификация природных соединений, разработка методов выделения, стандартизации и контроля качества лекарственного растительного сырья и лекарственных форм на его основе».

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 146 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы «Объекты и методы исследования», экспериментальных глав, выводов, списка литературы и приложений, 40 таблиц, 51 рисунка. Список литературы включает 177 библиографических источников, из которых 35 иностранных.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Ботанико-фармакогностическая характеристика боярышника алма-атинского Crataegus almaatensis Pojark.

Боярышник алма-атинский (лат. Crataegus almaatensis) - вид рода Боярышник (Crataegus) семейства Розовые (Rosaceae). Родина - Средняя Азия. Известен в культуре в Западной Европе и США, на территории России культивируется в южных районах Западной Сибири и почти по всей территории Европейской части [57, 96].

На родине боярышник алма-атинский произрастает по каменистым склонам гор Памиро-Алая и Тань-Шаня (Кыргызстан). Встречается на осве-щённых участках по склонам гор и на дне ущелий на высоте 1200 -1900 м над уровнем моря, в зарослях кустарников и с лиственными древесными породами [104].

Боярышник алма-атинский - дерево высотой до 4-5 м с низко опущенной широкой шатровидной кроной, иногда растёт кустообразно. Кора ствола и старых ветвей тёмно-коричневая или коричнево-серая; ветки - коричневые, тёмно-пурпурно-бурые или вишневые, блестящие; побеги - гладкие, бежевого цвета, голые. Колючки - почти отсутствуют (рис.1) [46, 64, 104, 117].

Рисунок 1 - Боярышник алма-атинский (Crataegus almaatensis Pojark.)

Листья яйцевидные или эллиптически-яйцевидные, длиной 4-6 и шириной 3-4 см. Основание листа - клиновидное, цельнокрайнее. Листовая пластинка с неглубокими лопастями, зубчатыми по краю. Молодые листья -темно-зеленые, не густо опушенные, у старых листьев опушение сохраняется снизу, в углах жилок [140].

Черешки длиной 1-3 см. Прилистники крупные, особенно на длинных побегах, широко-серповидные, гребенчато-зубчатые, долго остающиеся на побегах [104]. Соцветия рыхлые, сложные щитки, многоцветковые, голые, диаметром 5-7 (до 9) см. Цветки розового или белого цвета, объединены в соцветия по 8 штук диаметром 1,3-1,8 см, с белыми лепестками. Чашелистики треугольные, острые, при плодах отогнутые, пурпурно-красные; тычинок 20, с беловато-желтыми пыльниками; столбиков 3-5 [98, 104, 113].

Плоды боярышника меняют цвет от красно-пурпурно-чёрного до сине-черного, почти шаровидные, диаметром до 13 мм, слабо точечные, блестящие с сочной мякотью. Косточки в числе 2-3, светло-коричневые, слегка трёхгранные, длиной 5-6 мм, шириной около 3 мм, почти гладкие или слабо вдавленные с боков и килевидные с брюшной стороны [71, 140].

Цветёт в июне. Плодоносит в сентябре.

1.2. Современное состояние изучения химического состава и биологических свойств рода Crataegus

Растения рода Crataegus обладают широким спектром биологической активности, особенно кардиотонической. Это обусловлено наличием в них комплекса биологически активных веществ. Это - флавоноиды, тритерпено-вые сапонины, каротиноиды, дубильные вещества, антоцианы, органические кислоты, сахара, пектины, и жирные масла [14, 18, 20, 21, 39, 47, 52, 62, 68, 116, 131, 158]. Исследованием химического состава различных видов боярышников занимаются ученые таких стран, как Украина, Белоруссия, Литва, Германия, Россия и др. [25, 67, 72, 99, 106, 125, 135, 136, 143, 157, 159].

В сырье боярышников установлено свыше 150 веществ. Это - кароти-

ноиды, дубильные вещества, жирные масла, пектины, монотерпеноиды, три-терпеновые и флавоноидные гликозиды, холин, сахара, витамины, стероиды, сесквитерпеноиды, лигнаны, гидроксициннамическая кислота, органические кислоты и азотсодержащие вещества, флаванокумарины кратегусины А и B [39, 52, 70, 74, 81, 100, 116, 131, 134, 142, 156].

Из полифенолов определены эпикатехин, процианидин B2, B5, C1, гипе-розид, изокверцетин и хлорогеновая кислота [69, 104, 105, 121, 128, 135, 138, 141, 156]. В плодах Crataegus определены ß-ситостерол-3-O-ß-D-глюкопиранозид, лупеол, ß-ситостерол, бетулин, бетулиновая, олеаноловая кислоты, хризин [16]. Разновидности боярышника также содержат эфирное масло, органические кислоты - лимонную, олеаноловую, урсоловую, кратегу-совую, кофейную и хлорогеновую [16, 19, 141].

Плоды боярышника содержат углеводы - глюкозу (2,02 мг/г), фруктозу (2,21 мг/г), сахарозу (0,23 мг/г), арабинозу (1,82 мг/г), ксилозу (3,88 мг/г), маннозу (4,25 мг/г), галактозу (1,31 мг/г) [22, 62, 66, 81, 103, 104, 116].

В последнее время более активно изучаются культивируемые в России североамериканские виды боярышников [19, 21, 38]. Также изучен химический состав липофильной фракции, полученной из шрота плодов боярышника однопестичного, отогнуточашелистикового, алтайского, Арнольда, вееровидного с целью его использования в качестве дополнительного сырьевого источника получения биологически активных веществ [47, 52, 116].

В пыльце боярышника однопестичного идентифицированы флавонолг-ликозиды: 8-метоксикемпферол-3-неогесперидозид и 8-метоксикемпферол-3-глюкозид, 8-метоксикемпферол и кемпферол-3-неогесперидозид [143].

В побегах, листьях, цветках, плодах боярышника однопестичного установлено из флавоноидов присутствие витексин-2-О-рамнозида, витексина, гиперозида, рутина, кверцетина [38, 152, 157, 175]. Присутствуют ксантин, 5-гидроксиауранетин, апигенин, кемпферол, кверцетин, 7 - глюкозид апигени-на, 3-галактозид кемпферола, гиперозид, витексин, 4Л- рамнозид витексина, 4Л- рутинозид витексина, а также (-) и (+) эпикатехины [27, 78, 104, 116].

Таблица 1 - Химическая структура некоторых флавоноидов и фенолкарбоновых кислот относящиеся к роду Crataegus

№ Название вещества Структурная формула Вид боярышника

Флавоноиды

1. Витексин г^о- Боярышник кроваво-красный, мелколистный, Максимовича, [65, 66, 103, 158].

2. Витексин-2-О-рамнозид Боярышник однопе-стичный [103].

4. Гиперозид "«¿с Боярышник кроваво-красный, зеленомяс-ный, мягковатый, Максимовича, отогнуточа-шелистиковый, пижмо-листный, однолистный, алтайский [66, 103, 111, 128, 158, 159].

5. Рутин Боярышник кроваво-красный, пятипестичый [66, 103, 104, 128, 139].

Продолжение таблицы 1

№

Название вещества

Структурная формула

Вид боярышника

6.

Кверцетин

Боярышник кроваво-красный, однолистный, даурский, отогнуточа-шелистиковый, одно-пестичный, мелколистный [66, 103, 104, 158].

7.

Кверцетрин

Боярышник кроваво-красный, отогнуточа-шелистиковый, мелколистный [66, 103, 104, 158].

Апигенин

Боярышник пижмо-листный, отогнуточа-шелистиковый [103, 104, 159].

11.

Кемпферол

Боярышник пижмо-листный, однопестич-ный [103, 104, 159].

12.

Апигенин 7 глюкозид

Боярышник пижмо-листный [103, 104, 159].

Продолжение таблицы 1

17

№

Название вещества

Структурная формула

Вид боярышника

Фенолкарбоновые кислоты

1.

Хлорогеновая кислота(3-кофеилхинная

кислота

Боярышник кроваво-красный, мягковатый, отогнуточашелистико-вый [66, 103, 104].

Кофейная кислота (3,4-диоксикорич-ная кислота)

Боярышник кроваво-красный, мягковатый [66, 103, 104, 128, 134, 136].

4

Урсоловая кислота

Боярышник мягковатый, колючий [4, 103, 104, 134].

5.

Олеаноловая кислота

Боярышник мягковатый, колючий [66, 104, 134].

6.

4-О-р-О- глю-копиранозид п - кумаровой кислоты

Боярышник отогнуто-чашелистиковый, од-нопестичный [128].

Продолжение таблицы 1

№ Название вещества Структурная формула Вид боярышника

7. 3-O-p-D- глю- копиранозид эргостерина Боярышник однопе-стичный, колючий [66, 103].

1.3. Стандартизация лекарственного растительного сырья боярышников

в мировой практике

В России официнальными видами лекарственного растительного сырья из боярышника являются «Боярышника плоды - Crataegi fructus» и «Боярышника цветки - Crataegi flores» [27]. Побеги (цветки, стебли и листья) боярышника включены в Европейскую, Французскую, Немецкую, Швейцарскую, Британскую фармакопеи и Американскую травяные фармакопеи. Листья боярышника применяются в медицине Франции, Бельгии, Польши, Германии, Болгарии, Израиля [148, 149, 151, 159, 163, 171, 174, 176].

В фармакопеях России, Америки, Европы, Британии и Белоруссии используются различные методы для стандартизации вышеперечисленных видов сырья боярышника, которые представлены в таблице 2.

Таблица 2 - Нормативная документация и методы анализа на лекарственное растительное сырье боярышников

ЛРС Фармакопея Производящие растения Методы качественного анализа Определение основных групп биологически активных веществ

«Боярышника плоды» Crataegi fructus гфхгу боярышника сглаженного - C. laevigata (Poir.) DC. (боярышника колючего - C. oxyacantha sensu Pojark.), боярышника Королькова - С. korolkovii L., Henry, боярышника желтого - С. chlorocarpa Lenne et C. koch (боярышника алтайского - C. altaica (Lond.) Lange), боярышника даурского - С. dahurica Koehne ex Schneid., боярышника однопестичного - С. monogina Jacq., боярышника германского - С. alemanniensis Cin., боярышника пятипестичного - С. pentagyna Waldst. et Kit., боярышника восточно-балтийского - С. orientobaltica Cin., боярышника отогнуточашели-стикового - С. curvisepala Lindm., боярышника курземско-го - С. х curonica Cin., боярышника даугавского - С. х dunensis Cin. [28]. Подтверждается присутствие гиперо-зида методом ТСХ в системе метанол-хлороформ (8:2) восходящим способом в присутствии государственный СО гиперозида [27]. Определяется методом спектрофо-тометрии после предварительного выделения и очистки суммы фла-воноидов на гиперозид - методом колоночной хроматографии [27].

«Боярышника цветки» Crataegi flores ГФ XIV боярышника кроваво-красного -C. sanguinea Pall.; боярышника сглаженного - С. laevigata (Poir.) DC. (боярышни- Подтверждается присутствие гиперо-зида методом ТСХ в системе метанол-хлороформ (8:2) восходящим способом в присутствии государ- Определяется методом спектрофо-тометрии на СО гиперозида после предварительного выделения и очистки методом ТСХ [27].

ка колючего - С. oxyacantha sensu Pojark.); боярышника Королькова - С. korolkowii L. Henry; боярышника [алтайского - С. altaica (Loud.) Lange]; боярышника желтого - С. chlorocarpa Lenne et С. Koch; боярышника даурского - С. dahurica Koehne ex Schneid.; боярышника однопестичного - С. monogyna Jacq.; боярышника германского - С. alemanniensis Cin.; боярышника восточно-балтийского - С. orientobaltica Cin.; боярышника отогнуточашели-стикового - С. curvisepala Lindm.; боярышника курземско-го - С. Х curonica Cin.; боярышника даугавского - С. Х dunensis Cin.; боярышника пятипестичного - С. pentagyna Waldst. et Kit. [28]. ственный СО гиперозида [27].

«Боярышника листья с цветками -Hawthorn leaf with flower» Американская травяная фармакопея боярышник однопестичный - С. monogyna Jacq., боярышник сглаженный - С. laevigata (Poir.) DC. (боярышник колючий - С. oxyacantha L.) Методом ТСХ метанольного извлечения сырья в системе этилацетат-вода-ЛУК-МК (10:2,6:1,1:1,1) восходящим способом подтверждается присутствие рутина, хлорогеновой кислоты, гиперозида и витексина (проводится в присутствии раствора стандартных веществ). Пятна проявляются метанольным раствором 2-аминоэтил дифенилбората и метанольным раствором полиэтиленгли- Методом ВЭЖХ определяется содержание в листьях с цветками боярышника двух групп флавонои-дов: флавон-С-гликозидов в пересчете на витексин и флавон-О-гликозидов в пересчете на гиперо-зид [174].

коля-4000. После высушивания пятна просматриваются в УФ-свете: рутин -оранжевое пятно, Rf=0,3; хлорогено-вая кислота - светло-голубая флуоресценция, Rf =0,4; гиперозид - желтовато-оранжевое, Rf =0,55; витексин - желтовато-зеленое, Rf =0,65; витек-син-2-рамнозид - желтовато-зеленое, Rf =0,35; спиреозид - светло-голубая флуоресценция, Rf =0,6; кофейная кислота - светло-голубая флуоресценция, Rf =0,9. Качественный анализ флавоноидов проводится методом ВЭЖХ. Относительное время удерживания для основных пиков на хроматограмме: 1,53- для ацетилвитексин-2''-О-рамнозида, 1,0 - для витексина, 0,73 -для изовитексина, 0,67 - витексин-2^-О-рамнозида. Время удерживания для хлорогеновой кислоты, витекси-на, рутина и гиперозида определяется по соответствию пикам на хромато-грамме раствора сравнения (используется тот же, что и для ТСХ) [ 174].

«Боярышника листья и цветки - Howthorn leaf and flower» Европейская фармакопея Британская фармакопея Белорусская фармакопея боярышник однопестичный - С. monogyna Jacq., боярышник сглаженный - С. laevigata (Poir.) DC. боярышник колючий - С. oxy-acantha L. боярышник пятипестичный - С. pentagyna Waldst. et Kit., боярышник черный - C. nigra Методом ТСХ в системе муравьиная кислота - вода - метилэтилкетон -этилацетат (10:10:30:50) восходящим способом подтверждается присутствие гиперозида и хлорогеновой кислоты в присутствии свидетелей. Пятна проявляются после обработки раствором аминоэтилового эфира дифенилкарбоновой кислоты в мета- Количественное содержание суммы флавоноидов в пересчете на гипе-розид: определяется методом дифференциальной спектрофотометрии путем добавления к этанольному извлечению смеси борной и щавелевой кислот в безводной муравьиной кислоте (оптическая плотность измеряется через 30 минут при

Waldst. et Kit. боярышник аза-роль - C. azarolus L. ноле и раствором макрогола-400 в метаноле, а затем пластинку просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм (гиперозид - желтовато-оранжевая флуоресценция, хлоро-геновая кислота - светло-голубая) [25, 149, 176]. длине волны 410 нм) [25, 149, 176].

«Боярышника листья - Folia Crataegi» Белорусская фармакопея боярышник кроваво-красный -C. sanguínea Pall.; боярышник сглаженный - С. laevígata (Poir.) DC. (боярышник колючий - С. oxyacantha sensu Pojark.). Качественные реакции на флавонои-ды (по реакции взаимодействия спиртового экстракта листьев со спиртовым раствором алюминия хлорида - зеленовато-желтое окрашивание) и процианидины (появление после нагревания красного окрашивания при добавлении раствора кислоты хлористоводородной в бутаноле и раствора железоаммоний-ных квасцов) [25]. Спектрофотометрически определяется две группы веществ: флавоно-иды в пересчете на рутин и проци-анидины в пересчете на цианидина хлорид. Определение флавоноидов проводится после реакции ком-плексообразования с раствором алюминия хлорида в присутствии буферного раствора. Определение процианидинов - после реакции с раствором железоаммониевых квасцов в присутствии бутанольно-го раствора хлористоводородной кислоты [25].

1.4. Фармакологические свойства различных видов боярышников

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Жалалова Надира Бегим Курсановна, 2022 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абу Али Ибн Сина (Авиценна). Канон врачебной науки / Абу Али Ибн Сина (Авиценна). - Ташкент: Фан, 1996. - Т. 2. - 494 с.

2. Амирдовлат, А. Ненужное для неучей / А. Амирдовлат. - М.: Наука, 1990. -880 с.

3. Ананьина, Н.А. Полисахариды клубней георгины простой (Dahlia single L.) / Н.А. Ананьина, О.А. Андреева, Э.Т. Оганесян // Химия растительного сырья. - 2008. - № 2. - С. 135-136.

4. Арзамасцев, А.П. Фармакопейный анализ / А.П. Арзамасцев. - М.: Медицина, 1971. - 240 с.

5. Ахрем, А.А. Тонкослойная хроматография / А.А. Ахрем, А.И. Кузнецова. -М.: Наука, 1995. - 175 с.

6. Беликов, В.Г. Фармацевтическая химия. Общая фармацевтическая химия / В.Г. Беликов. - М.: Высшая школа, 1993. - 432 с.

7. Беляков, К.В. Методологические подходы к определению биологически активных веществ в лекарственном растительном сырье спектрофотометрическим методом / К.В. Беляков. - М.: Мега Принт, 2004. -186 с.

8. Биомедицинский анализ флавоноидных соединений методом высокоэффективной жидкостной хроматографии / Н.А. Тюкавкина, С.К. Еремин, Ю.А. Колесник [и др.] // Тезисы Четвертого Всесоюзного симпозиума по феноль-ным соединениям. - Ташкент: Фан, 1982. - С. 78-79.

9. Бируни, А.Р. Фармакогнозия в медицине / А.Р. Бируни. - Ташкент: Фан, 1973. - 1120 с.

10. Валидация методики количественного определения флавоноидов в побегах Crataegus almaatensis Pojark / Н.К. Жалалова, С.Р. Хасанова, Н.В. Кудашки-на [и др.] // Башкирский химический журнал. - 2021. - Т. 41, № 2. - С. 39-40.

11. Винник, Ю.С. Клинические аспекты применения хемилюминесцентного анализа / Ю.С. Винник, О.В. Перьянова, О.В. Теплякова // Сибирский медицинский журнал. - 2004. - Т. 46, № 5. - С. 11-16.

12. Влияние водных извлечений из некоторых лекарственных растений на процессы свободно-радикального окисления / М.А. Рыжикова, Р.Р. Фархутди-нова, С.В. Сибиряк, Ш.З. Загудиллин // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 1999. - Т. 62, № 2. - С. 36-38.

13. Влияние некоторых видов лекарственного растительного сырья на систему гемостаза in vitro / Э.Х. Галиахметова, Л.И. Баширова, Н.К. Жалалова [и др.] // Традиционная медицина. - 2021. - № 1 (64). - С. 38-42.

14. Гайнетдинова, А.А. Исследование содержания аскорбиновой кислоты и дубильных веществ в побегах боярышника алма-атинского (Crataegus almaatensis Pojark.) / А.А. Гайнетдинова, Н.К. Жалалова // Вестник Башкирского государственного медицинского университета. - 2019. - № 4. - С. 973974.

15. Гайнетдинова, А.А. Морфологическое и анатомо-диагностическое исследование сырья боярышника алма-атинского (Crataegus almaatensis Pojark.) / А.А. Гайнетдинова, Н.К. Жалалова, С.Р. Хасанова // Вестник ЮжноКазахстанской медицинской академии. - 2019. - Т. 87, № 3. - С. 105-107.

16. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В.П. Георгиевский, П.Ф. Комиссаренко, С.Е. Дмитрук. — Новосибирск: Наука, 1990. — 333 с.

17. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. - М.: Бином, 1999. -459 с.

18. Гончаров, А.Г. Исследование растительного полисахаридного комплекса / А.Г. Гончаров, Т.И. Исакова, Л.Д. Халеева // Актуальные вопросы поиска и технологии лекарств. - Харьков, 1981. - С. 139.

19. Гончаров, Н.Ф. Изучение эфирных масел цветков североамериканских видов боярышников / Н.Ф. Гончаров // Кубанский научный медицинский вестник. - 2008. - № 5 (104). - С. 52-55.

20. Гончаров, Н.Ф. Сравнительное изучение гидроксикоричных кислот и фла-воноидных соединений плодов некоторых видов Crataegus L. / Н.Ф. Гончаров // Кубанский научный медицинский вестник. - 2008. - № 5 (104). - С. 4952.

21. Гончаров, Н.Ф. Фенольные соединения североамериканских видов рода боярышник / Н.Ф. Гончаров, А.М. Ковалева, А.Н. Комиссаренко // Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова. - 2008. - Т. 16, № 3. - С. 150-155.

22. Горин, А.Г. Получение и фитохимическое исследование полисахаридов из лекарственных растений / А.Г. Горин // Всероссийский съезд фармацевтов. -Свердловск, 1975. - С. 313-314.

23. ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. - М.: Госстандарт, 2002. - 28 с.

24. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. - М.: Госстандарт, 2002. - 44 с.

25. Государственная фармакопея Республики Беларусь: Контроль качества вспомогательных веществ и лекарственного растительного сырья - УП «Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении». - Молодечно: Победа, 2008. - Т. 2. - 472 с.

26. Государственная Фармакопея Российской Федерации XIV изд. [Электронный ресурс] / Федеральная электронная медицинская библиотека, 2018. - Т. 1 - Режим доступа: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php. - (дата обращения: 15.01.2019).

27. Государственная Фармакопея Российской Федерации. XIV изд. [Электронный ресурс] / Федеральная электронная медицинская библиотека, 2018. - Т.

2 - Режим доступа: http : //femb.ru/femb/pharmacopea. php. - (дата обращения: 15.01.2019).

28. Государственная Фармакопея Российской Федерации. XIV изд. [Электронный ресурс] / Федеральная электронная медицинская библиотека, 2018. - Т.

3 - Режим доступа: http : //femb .ru/femb/pharmacopea. php. - (дата обращения: 15.01.2019).

29. Государственная Фармакопея Российской Федерации. XIV изд. [Электронный ресурс] / Федеральная электронная медицинская библиотека, 2018. - Т.

4 - Режим доступа: http : //femb .ru/femb/pharmacopea. php. - (дата обращения: 15.01.2019).

30. Государственная фармакопея СССР. Вып. 1: Общие методы анализа / МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1989. - 336 с.

31. Государственная фармакопея СССР. Вып. 2: Общие методы анализа / Лекарственное растительное сырье. - МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1989. - 400 с.

32. Гринкевич, Н.И. Химический анализ лекарственных растений / Н.И. Грин-кевич, Л.Н. Сафронич. - М.: Высшая школа, 1983. - 176 с.

33. Губанов, И.А. Дикорастущие полезные растения СССР / И.А. Губанов, И.Л. Крылова, В.Л. Тихонова. - М.: Мысль, 1976. - 360 с.

34. Гусейнов, Д.Я. Фармакология боярышника / Д.Я. Гусейнов. - Баку: Азер-нешр, 1985. - 154 с.

35.Деканосидзе, Г.Е. Биологическая роль, распространение и химическое строение тритерпеновых гликозидов / Г.Е. Деканосидзе, В.Я. Чирва, Т.В. Серги-енко. - Тбилиси. Мецниереба, 1984. — 348 с.

36. Диуретическая и антидепрессантная активность густого экстракта боярышника кроваво-красного / В.А. Куркин, А.В. Куркина, Е.Н. Зайцева [и др.] // Бюллетень сибирской медицины. - 2015. - № 14 (3). - С. 18-22.

37. Долгова, А.А. Практикум по фармакогнозии / А.А. Долгова, Е.Я. Ладыгина - М.: Москва, 1966. - 182 с.

38. Евдокимова, О.В. О перспективном виде лекарственного растительного сырья - побегах боярышника / О.В. Евдокимова, И.А. Самылина, М.В. Кашни-кова // Фармация. - 1994. - Т. 43, № 4. - C. 28-30.

39. Евдокимова, О.В. Определение содержания суммы фосфолипидов и каро-тиноидов в плодах некоторых видов боярышника (Crataegus L.) / О.В. Евдокимова, И.А. Самылина, О.В. Нестерова // Фармация. - 1992. - Т. 41, № 6. - С. 70-72.

40. Евдокимова, О.В. Фармакологическое действие препаратов боярышника / О.В. Евдокимова // Современные проблемы фармацевтической науки и практики: научные труды ВНИИФ. - 1999. - Т. 38, Ч. 2. - С. 205-212.

41. Жалалова, Н.К. Исследование липофильной фракции из побегов боярышника алма-атинского (Crataegus almaatensis Pojark.) / Н.К. Жалалова, К.И. Еникеева, П.А. Андресова // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: материалы 76-й международной научно-практической конференции молодых ученых и студентов. - Волгоград: ВолгГМУ, 2018. - С. 407.

42. Жалалова, Н.К. Разработка методики количественного определения флаво-ноидов в побегах боярышника алма-атинского (Crataegus almaatensis Pojark.) / Н.К. Жалалова, С.Р. Хасанова, Н.В. Кудашкина // Башкирский химический журнал. - 2021. - Т. 28, № 1. - С. 83-89.

43. Журавлева, Л.А. Антиоксидантные свойства пирокатехина и его производных / Л.А. Журавлева, Г.А. Усманова, В.Н. Ушкалова // Современные проблемы науки и образования. - 2009. - № 3. - С. 45-49.

44. Загоскина, Н.В. Биофлавоноиды высших растений — биологически активные вещества для фармацевтической и пищевой промышленности / Н.В. Загоскина // Материалы IV Российской научно-практической конференции. -М.: РАЕН, 2007. - С. 99.

45. Захидов, Х. Канзи шифо: сокровищница лечебных средств / Х. Захидов. -Душанбе: Ирфон, 1991. - 719 с.

46. Зейналов, Ю.М. Биоэкологические особенности среднеазиатских видов боярышника в условиях Апшерона: дис. ... канд. биол. наук: 03.00.05 / Зейналов Юсиф Мухтар оглы. - Баку, 1984. - 268 с.

47. Зинченко, Л.А. Изучение промышленных отходов фармацевтического производства как дополнительных источников биологически активных соединений: (на примере шрота плодов боярышника и шрота листьев мяты): авто-реф. дис. ... канд. фарм. наук: 15.00.02 / Зинченко Лариса Александровна. -Пятигорск, 2007. - 23 с.

48. Изучение антиаритмической активности листьев Crataegus sanguínea (Rosaceae) / С.В. Трофимова, Н.Ж. Басченко, Т.А. Сапожникова [и др.] // Медицинский вестник Башкортостана. - 2011. - Т. 6, № 2. - С. 299-302.

49. Изучение антиоксидантной активности боярышника алма-атинского / А.А. Гайнетдинова, Н.К. Жалалова, П.А. Андресова [и др.] // Вестник Башкирского государственного медицинского университета. - 2019. - № 4. - С. 47-50.

50. Изучение кардиопротективных свойств листьев боярышника кроваво-красного и сбора «Кардиофит» / С.Р. Хасанова, С.В Трофимова, А.П. Потанина [и др.]. // Медицинский вестник Башкортостана. - 2012. - Т. 7, № 5. -С. 112-114.

51. Изучение нейротропной активности новых лекарственных препаратов зверобоя травы / В.А. Куркин, А.В. Дубищев, О.Е. Правдивцева [и др.] // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. - 2009. - Т. 11, № 1 (6). - С. 1300-1303.

52. Изучение состава липофильных соединений представителей рода боярышник / Н.Ф. Гончаров, И.В. Михайлов, Н.Н. Гончаров, Е.В. Терешонок // Фундаментальные исследования. - 2014. - № 11 (2). - С. 357-361.

53. Изучение специфической антиаритмической активности препаратов боярышника / Н.В. Каверина, З.П. Сеннова, И.А. Самылина [и др.] // Фармация. - 1988. - № 6. - С. 33-36.

54. Йорданов, Д. Фитотерапия. Лечение лекарственными травами / Д. Йорданов, П. Николов, А. Бойчинов - София: Медицина и физкультура. - 1972. -347 с.

55. Капранов, В. Мудрость веков / В. Капранов, Р. Хашим. - Душанбе: Ир-фон, 1984. - Т. 3. - 304 с.

56. Кароматов, И.Дж. Перспективы применения в кардиологической и общеврачебной практике лекарственного растения боярышник / И.Дж. Кароматов, М. Давлатова, М.К. Амонов // Биология и интегративная медицина. -2017. - Т. 1, № 1. - С. 251-276.

57. Коропачинский, И.Ю. Древесные растения Азиатской России / И.Ю. Коро-пачинский, Н.Т. Встовская. - Н.: СО РАН, 2002. - 707 с.

58. Кочетков, Н.К. Химия биологических активных природных соединений / Н.К. Кочетков. - М.: Мир, 1970. - 378 с.

59. Кочетков, Н.К. Химия углеводов / Н.К. Кочетков. - М.: Химия, 1967. - 672 с.

60. Краткие итоги интродукции древесных растений азиатской флоры в Дендрарии Ботанического сада-института МарГТУ / О.Н. Вахотина, С.В. Муха-метова, С.М. Лазарева [и др.] // Проблемы современной дендрологии: материалы международной научной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения член-корреспонденты АН СССР П.И. Лапина - М.: Товарищество научных изданий КМК, 2009. - С. 65-69.

61. Круглякова, А.А. Бета-ситостерин: свойства, подходы к количественному определению / А.А. Круглякова, Г.В. Раменская // Вестник Национального медико-хирургического Центра им. Н.И. Пирогова. - 2016. - Т. 11, № 4. - С. 35-38.

62. Кудашкина, Н.В. Исследование полисахаридов в побегах боярышника алма-атинского (Crataegus almaatensis Pojark.) / Н.В. Кудашкина, С.Р. Хасанова Н.К. Жалалова // Инновации в здоровье нации: материалы VII всероссийской

научно-практической конференции с международным участием. - Санкт-Петербург, 2019. - С. 252-254.

63. Кудашкина, Н.В. Фитохимический анализ: учебное пособие по фармакогнозии для студентов. / Н.В. Кудашкина, С.Р. Хасанова, С.А. Мещерякова. -Уфа: ГОУ ВПО БГМУ РОСЗДРАВа, 2007. - 281с.

64. Куминов, Е.П. Нетрадиционные садовые культуры / Е.П. Куминов. - М.: АСТ, 2003. - 256 с.

65. Куркин, В.А. Исследование по разработке методики стандартизации листьев боярышника кроваво-красного / В.А. Куркин, Т.В. Морозова, О.Е. Прав-дивцева // Химия растительного сырья. - 2017. - № 3. - С. 169-173.

66. Куркин В.А. Основы фитотерапии: учебник / В.А. Куркин - Самара: Офорт, 2020. - 963 с.

67. Куркин, В.А. Сравнительное фитохимическое и микробиологическое исследование жидких экстрактов из плодов боярышника кроваво-красного и боярышника полумягкого / В.А. Куркин, Т.В. Морозова, И.Х. Шайхутдинов // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2019. -№ 4. - С. 3-6.

68. Куркин, В.А. Фенольные соединения как критерий подлинности и качества лекарственного растительного сырья и фитопрепаратов / В.А. Куркин, Е.В. Авдеева, А.В. Куркина // Традиционная медицина. - 2014. - № 4. - С. 39-42.

69. Куркин, В.А. Флавоноиды как биологически активные соединения лекарственных растений / В.А. Куркин, А.В. Куркина, Е.В. Авдеева // Фундаментальные исследования. - 2013. - Т. 9, № 11. - С. 1897-1907.

70. Куркина, А.В. Флавоноиды фармакопейных растений: монография / А.В. Куркина - Самара: Офорт, 2012. - 290 с.

71. Лазьков, Г.А. Кадастр флоры Кыргызстана / Г.А. Лазьков, Б.А. Султанова // Сосудистые растения. - Бишкек, 2014. - 126 с.

72. Лобанова, А.А. Исследование биологически активных флавоноидов в экстрактах из растительного сырья / А.А. Лобанова, В.В. Будаева, Г.В. Сакович // Химия растительного сырья. - 2004. - № 1. - С. 47-52.

73. Ляхова, Н.С. Влияние фракций из плодов боярышника на мозговой кровоток / Н.С. Ляхова, А.В. Арльт, М.Н. Ивашев // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сборник научных трудов. -Пятигорск, 2005. - С. 378-379.

74. Маликова, М.Х. Изучение пектинов некоторых диких яблок / М.Х. Малико-ва, Д.А. Рахимов, Э.Л. Кристаллович // Химия природных соединений. -1998. - № 3. - С. 355-357.

75. Мартюшова, Е.Г. Сравнение анатомического строения побегов евроазиатских и североамериканских боярышников / Е.Г. Мартюшова // Научно-практический журнал «Вестник ИрГСХА». - 2011. - № 44. - С. 82-87.

76. Машковский, А.П. Валидация аналитических методов / А.П. Машковский // Сборник трудов. - Москва, 2002. - С. 26-30.

77. Миронов, А.Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / А.Н. Миронов. Н.Д. Бунатян. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.

78. Морозова, Е.И. Лекарственные свойства и применение боярышника, облепихи и шиповника // Е.И. Морозова - Донецк, 2006. - 240 с.

79. Морфолого-анатомическое исследование листьев боярышника алма-атинского (Crataegus almaatensis Pojark.) / А.А. Гайнетдинова, Н.К. Жалало-ва, Н.В. Кудашкина, С.Р. Хасанова // Материалы международной научно-практической конференции. - Республика Казахстан, 2018. - С. 123.

80. Морфолого-анатомическое исследование цветков боярышника алма-атинского (Crataegus almaatensis Pojark.) / А.А. Гайнетдинова, Н.К. Жалало-ва, Н.В. Кудашкина, С.Р. Хасанова // Гаммермановские чтения: сборник трудов. - Санкт-Петербург, 2019. - С. 72-74.

81. Омариева, Л.В. Боярышники Дагестана - ценный источник биологически активных веществ / Л.В. Омариева, Т.А. Исригова // Научный журнал КубГАУ. - 2016. - Т. 2, № 116. - С. 1-10.

82. Основные принципы проведения валидации на фармацевтическом производстве // В.В. Береговых, Н.В. Пятигорская, В.В. Беляев [и др.]. - М.: Русский врач, 2005. - С. 73-97.

83. Особенности экспрессии Р-селектина и агрегации тромбоцитов под действием лекарственных препаратов / А.Л. Ураков, А.В. Самородов, Ф.Х. Ка-милов [и др.] // Фармация. - 2017. - Т. 66, № 3. - С. 43-46.

84. ОФС.1.5.3.0008.15 Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах [Электронный ресурс] // Федеральная электронная медицинская библиотека, 2018. - Режим доступа: https://farmakopeia/ofs.1.5.3.0008.15.html

85. ОФС.1.2.1.1.0003.15 Спектрофотометрия в УФ и видимой областях [Электронный ресурс] // Федеральная электронная медицинская библиотека, 2018. - Режим доступа: https://farmakopeia/ofs.1.2.1.1.0003.15.html

86. ОФС 1.1.0013.15 Статистическая обработка результатов химического эксперимента [Электронный ресурс] // Федеральная электронная медицинская библиотека, 2018. - Режим доступа: https: //farmakopeia/ofs .1.1.0013.15. html

87. ОФС.1.5.3.0003.15 Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов [Электронный ресурс] // Федеральная электронная медицинская библиотека, 2018. - Режим доступа: https: //farmakopeia/ofs.1.5.3.0003.15.html

88. Пат. RU 2 144 674 C1 Российская Федерация. МПК 51, G 01 N 33/50, 33/68. Способ определения антиоксидантной активности супероксиддисмутазы и химических соединений / Сирота Т.В.; заявитель и патентообладатель ГУ-НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН. - № 99103192/14; заявл. 24.02.1999; опубл. 20.01.2000. Бюл. № 2. - 16 с.

89. Пат. RU 2 519 769 C1 Российская Федерация. МПК A61K 36/80, B01D 11/02. Средство, обладающее противоопухолевым и иммуномодулирующим действием / Н.В. Полуконова, Н.А. Наволокин, Н.А. Дурнова [и др.]; заявители и патентообладатели Н.В. Полуконова, Н.А. Наволокин. - № 2013112710/15; заявл. 21.03.2013; опубл. 20.06.2014. Бюл. № 17. - 12 с.

90. Пат. RU 2 698 325 C1 Российская Федерация. МПК A61K 36/734 A61P 7/10. Сок из свежих плодов боярышника мягковатого, обладающий диуретической активностью / В.А. Куркин, Е.Н. Зайцева, О.Е. Правдивцева, И.Х. Шайхутдинов.; заявитель и патентообладатель ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России. - № 2019114928; заявл. 15.05.2019; опубл. 26.08.2019. Бюл. № 24. - 5 с.

91. Пашинский, В.Г. Лечение травами / В.Г. Пашинский. - Ленинград: Наука, 1990. - 144 с.

92. Пашинский, В.Г. Растения в терапии и профилактике болезней / В.Г. Пашинский. - Томск: Том. Ун-та, 1989. - 208 с.

93. Плотников, М.Б. Антиагрегантная и гемореологическая активность комплекса ацетилсалициловой кислоты и диквертина при спонтанной артериальной гипертензии у крыс / М.Б. Плотников, О.И. Алиев, А.В. Ямкин // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2002. - Т. 51, № 1 -С. 35-37.

94. Позднякова, Т.А. Изучение тритерпеновых соединений астрагала белосте-бельного (Аstragalus Albicaulis DC) / Т.А. Позднякова, Р.А. Бубенчиков // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2016. -Т. 19, № 12. - С. 24-27.

95. Полирегионарная агрегатометрия крови пациентов с острым тромбозом, как потенциальная модель доклинических исследований новых корректоров системы гемостаза ex vivo / А.Л. Ураков, А.В. Самородов, Ф.Х. Камилов, Ф.А. Халиуллин // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. - 2017. - Т. 16, № 1 (61). - С. 65-71.

96. Полякова, Л.И. Особенности роста и оценка перспективности интродуциро-ванных видов Crataegus L. / Л.И. Полякова // Итоги интродукции растений. -Ростов на Дону, 1986. - С. 67-69.

97. Потанина, О.Г. Оценка доброкачественности лекарственного растительного сырья с учетом диагностически значимых признаков / О.Г. Потанина, И.А. Самылина // Фармация. - 2003. - № 4. - С. 12-14.

98. Практикум по фармакогнозии: уч. пособие для студ. вузов / В.Н. Ковалев, Н.В. Попова, В.С. Кисличенко [и др.]. - Харьков: НФаУ; Золотые страницы, 2003. - 512 с.

99. Применение метода ВЭЖХ для экспертизы и стандартизации лекарственного растительного сырья «Боярышника цветки» / Н.П. Антонова, Е.П. Шефер, Н.Е. Семенова [и др.] // Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. - 2019. - Т. 9, № 3 - С. 177-183.

100. Природные флавоноиды / Д.Ю. Корулькин, Ж.А. Абилов, Р.А. Музычки-на, Г.А. Толстиков - Новосибирск: Тео, 2007. - 232 с.

101. Проект ОФС 42-0113-09. Валидация аналитических методик. - Москва, 2009.

102. Проект ОФС 42-0087-08. Потеря в массе при высушивании. - Москва, 2008.

103. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность / А.Л. Буданцев, Л.М. Беленовская, Н.А. Медведева [и др.]. - М.: СПб.: Товарищество научных изданий КМК, 2009. - Т. 2. - С. 191-197.

104. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование / О.Д. Барнауло, Г.А. Кузнецова, Л.И. Медведева [и др.]. -Ленинград: Наука, 1987. - Т. 3. - 326 с.

105. Родионова, Т.В. Сравнительная количественная оценка содержания фла-воноидов в растительном сырье боярышника кроваво-красного / Т.В. Родионова, О.М. Хишова // Вестник фармации. - 2008. - Т. 39, № 1 - С.15-18.

106. Родионова, Т.В. Стандартизация листьев боярышника / Т.В. Родионова, О.М. Хишова // Вестник фармации. - 2008. - Т. 40, № 2 - С. 70-78.

107. Руководство по валидации методик анализа лекарственных средств / В.Л. Багирова, А.И. Гризодуб, Т.Х. Чибиляев [и др.]; под ред. Н.В. Юргеля А.Л. Младенцева, А.В. Бурдейна [и др.]. - Москва, 2007. - 48 с.

108. Самородов, А.В. Поиск новых азотсодержащих гетероциклических соединений, влияющих на систему гемостаза: дис. ... канд. мед. наук: 14.03.06 / Самородов Александр Владимирович. - Уфа, 2012. - 142 с.

109. Самылина, И.А. Боярышник (CRATAEGUS): возможности медицинского применения / И.А. Самылина, А.А. Сорокина, Н.В. Пятигорская // Фармате-ка. - 2010. - № 8. - С. 83-85.

110. Самылина, И.А. Использование хлорида алюминия для определения суммы флавоноидов в цветках боярышника / И.А. Самылина, О.В. Евдокимова, М.В. Кашникова // Фармация. - 1994. - № 6. - С. 42-45.

111. Самылина, И.А. О фармакологической активности препаратов боярышника / И.А. Самылина // Фармация. - 1990. - № 2. - C. 63-65.

112. Самылина, И.А. Фармакогнозия: Атлас: учебное пособие / И.А. Самылина, О.Г. Аносова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. - Т. 1. - 188 с.

113. Самылина, И.А. Фармакогностическое изучение некоторых представителей рода боярышник / И.А. Самылина, Т.Л. Киселева // Сборник научных трудов ВНИИФ «Ресурсоведческое изучение лекарственной флоры СССР». - 1987. - Т. 25. - С. 75-78.

114. Сергунова, Е.В. Сравнительный анализ состава настоек матричных гомеопатических из свежих, замороженных и высушенных плодов / Е.В. Сер-гунова // Фармация. - 2017. - Т. 66, № 1. - С. 9-13.

115. Сирота, Т.В. Стандартизация и регуляция скорости супероксидгенериру-ющей реакции автоокисления адреналина, используемой для определения про/антиоксидантных свойств различных материалов / Т.В. Сирота // Биомедицинская химия. - 2016. - Т. 62, № 6. - С. 650-655.

116. Содержание БАВ в плодах некоторых представителей видов рода Crataegus L. / В.Н. Сорокопудов, С.А. Бакшутов, Н.И. Мячикова И.А. Навальнева // Химия растительного сырья. - 2011. - № 4. - С. 335-336.

117. Соколов, С.Я. Деревья и кустарники СССР: дикорастущие, культивируемые и перспективные для интродукции / С.Я. Соколов. - М.: АН СССР, 1954. - Т. 3. - 872 с.

118. Соколов, С.Я. Справочник по лекарственным растениям (Фитотерапия) / С.Я. Соколов, И.Г. Замотаев. - М.: Медицина, 1988. - 458 с.

119. Сравнительная оценка антиаритмической активности настоек боярышника, полученных различными способами / С.С. Лазуко, А.А. Красильников, Г.А. Хуткина [и др.] // Вестник фармации. - 2009. - Т. 44, № 2. - С. 55-64.

120. Сравнительная оценка влияния настоек боярышника, полученных различными способами, на электрическую активность миокарда у кроликов / С.С. Лазуко, А.А. Красильников, Г.А. Хуткина [и др.] // Вестник фармации. - 2008. - Т. 39, № 1. - С. 48-52.

121. Сравнительный анализ фенольных соединений представителей подклассов дилленииды, розиды и астериды / Н.С. Фурса, Н.К. Вавилова, А.В. Деготь [и др.] // Тезисы докладов Пятого Всесоюзного симпозиума по феноль-ным соединениям. - Таллин, 1987. - С. 116-117.

122. Сравнительный анализ химического состава липофильных фракций побегов трех видов боярышников / С.Р. Хасанова, Н.В. Кудашкина, В.А. Гусако-ва, Н.К. Жалалова // Химия растительного сырья. - 2021. - № 4. - С. 373380.

123. Сравнительное исследование диуретической активности водно-спиртовых извлечений лекарственных растений, содержащих флавоноиды / В.А. Куркин, Е.Н. Зайцева, А.В. Куркина [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2015. - Т. 159, № 3. - С. 348-352.

124. Сравнительное фитохимическое и микробиологическое исследование жидких экстрактов из плодов боярышника кроваво-красного и боярышника

полумягкого / В.А. Куркин, Т.В. Морозова, И.Х. Шайхутдинов [и др.] // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2019. - Т. 22, № 4. - С. 3-6.

125. Стандартизация густого экстракта из плодов боярышника / Ф. Хажжар, С.В. Горяинов, О.Г. Потанина, Р.А. Абрамович // Современные тенденции развития технологий здоровьесбережения - М.: ВИЛАР, 2019. - С. 335-343.

126. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов (полисахариды) / Б.Н. Степаненко. - M.: Высшая школа, 1978. - 256 с.

127. Суслина, З.А. Антитромботическая терапия в ангионеврологии / З.А. Суслина, М.М. Танашян - М.: Медицинская книга, 2004. - 107 с.

128. Трофимова, С.В. Фармакогностическое изучение листьев боярышника кроваво-красного Сrаtaegus sanguinea Pall. из флоры Башкортостана: дис. ... канд. фарм. наук: 14.04.02 / Трофимова Светлана Валерьевна - Уфа, 2014. -165 с.

129. Тюкавкина, Н.А. Использование ВЭЖХ в области фенольных соединений / Н.А. Тюкавкина // Тезисы докладов Пятого Всесоюзного симпозиума по фенольным соединениям. - Таллин, 1987. - С. 112-113.

130. Фармакологические и фармакотерапевтические свойства боярышника (Crataegus oxyacantha) / С.В. Сулейманова, М.Г. Абакаров, К.Ш. Ханахме-дова, Р. М. Маллаева // Успехи современной науки и образования. - 2017. -Т. 4, № 3. - С. 28-33.

131. Флавоноиды: биохимия, биофизика, медицина / Ю.С. Тараховский, Ю.А. Ким, Б.С. Абдрасилов, Е.Н. Музафаров - Пущино, 2013. - 310 с.

132. Федин, А.И. Обзор клинических рекомендаций лечения и профилактики ишемического инсульта / А.И. Федин, К.Р. Бадалян // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. - 2019. - Т. 119, № 8 - С. 91-96.

133. Фигуровский, Н.Л. Ассортимент лекарственных растений в русских фар-макопеях XVIII и XIX вв. / Н.Л. Фигуровский, А.В. Голованова // Аптечное дело. - 1959. - Т. 8, № 5. - С. 76-81.

134. Хасанова, С.Р. Изучение компонентного состава липофильной фракции побегов боярышника мягковатого, интродуцированного в условиях Республики Башкортостан / С.Р. Хасанова, Н.В. Кудашкина, В.А. Гусакова // Научный и инновационный потенциал развития производства, переработки и применения эфиромасличных и лекарственных растений: сборник материалов Международной научно-практической конференции. - Симферополь, 2019. - С. 293-296.

135. Хасанова, С.Р. Определение флавоноидного состава листьев боярышника кроваво-красного из флоры РБ методом ВЭЖХ / С.Р. Хасанова, С.В. Трофимова, Н.В. Кудашкина // Современная медицина и фармацевтика: анализ и перспективы развития. - М.: Спутник, 2013. - С. 36.

136. Хасанова, С.Р. Разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в растительном сборе «Кардиофит» / С.Р. Хасанова, А.П. Потанина, Н.В. Кудашкина // Башкирский химический журнал. - 2013. - Т. 20, № 3. - С. 60-62.

137. Хишова, О.М. Изучение острой токсичности и переносимости комбинированного фитопрепарата на основе валерианы, пустырника и боярышника / О.М. Хишова // Рецепт. - 2015. - № 2 (100). - С. 129-136.

138. Хишова, О.М. Количественное определение процианидинов плодов боярышника / О.М. Хишова, Г.Н. Бузук // Химико-фармацевтический журнал. - 2006. - Т. 40, № 2. - С. 20-21.

139. Хишова, О.М. Сравнительная количественная оценка содержания флавоноидов в растительном сырье боярышника кроваво-красного / О.М. Хишова, Т.В. Родионова // Вестник фармации. - 2008. - Т. 39, № 1. - С. 15.

140. Цвелев, Н.Н. Флоры европейской части СССР / Н.Н. Цвелев - СПб.: Мир и семья: СПХФА, 2001. - Т. 10. - 610 с.

141. Цицин, Н.В. Атлас лекарственных растений СССР / Н.В. Цицин. - М.: Госкомиздат, 1962. - 711 с.

142. Шашкина, М.Я. Каротиноиды как основа для создания лечебно-профилактических средств. / М.Я. Шашкина, П.К. Шашкин, А.В. Сергеев // Российский биотерапевтический журнал. - 2009. - Т. 4, № 8. - С. 91-98.

143. 8-Methoxykaempferol 3-neohesperidoside and other flavonoids from bee pollen of Crataegus monogyna / J. Dauguet, M. Bert, J. Dolley [et al.] // Phytochem-istry. - 1993. - Vol. 33, № 6. - P. 1503-1505.

144. Antiaging effects of the mixture of Panax ginseng and Crataegus pinnatifida in human dermal fibroblasts and healthy human skin / E. Hwang, S.Y. Park, C.S. Yin [et al.] // Chemistry, Medicine. - 2017. - Vol. 41, № 1. - Р. 69-77.

145. Antioxidant activities of Crataegus monogyna extracts / T. Bahorun, F. Trotin, J. Pommery [et al.] // Planta Med. - 1994. - Vol. 60, № 4. - Р. 323 - 328.

146. Assessment of extracts of Helichrysum arenarium, Crataegus monogyna, Sam-bucus nigra in photoprotective UVA and UVB; photostability in cosmetic emulsions / A. Jarzycka, A. Lewinska, R. Gancarz, K.A. Wilk // Photochemistry and photobiology. - 2013. - Vol. 128. - Р. 50-57.

147. Blesken, R. Crataegus in cardiology / R. Blesken. - Fortschr Med. - 1992. -Vol. 110, № 15. - P. 290-292.

148. Braun, R. Standardzulassungen for Fertigarzneimittel / R. Braun. - Deutscher Apotheker Verlag, 1997. - 2928 p.

149. British Pharmacopeia 2009 / British Pharmacopoeia Commission. - London: Crown Copyright, 2009. - 10952 p.

150. Crataegus orientalis associated multiorgan hyper - sensitivity reaction and acute renal failure / M. Horoz, E. Gok, G. Genctoy [et al.] // Internal Medicine. -2008. - Vol. 47, № 23. - Р. 2039-2042.

151. European Pharmacopeia 6.0 / European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare. - Strasbourg: Council of Europe, Strasbourg, 2007. — 1129 p.

152. Free radical-scavenging activities of Crataegus monogyna extracts / J. Berna-toniene, R. Masteikova, D. Majiene [et al.] // Medicina (Kaunas). - 2008. - Vol. 44, № 9. - P. 706-712.

153. Hawthorn Polyphenol Extract Inhibits UVB-Induced Skin Photoaging by Regulating MMP Expression and Type I Procollagen Production in Mice / S. Liu, L. You, Y. Zhao, X. Chang. - Agricultural and Food Chemistry. - 2018. - Vol. 66, № 32. - P. 8537-8546.

154. In vitro screening of Crataegus succulenta extracts for free radical scavenging and 15-lipoxygenase inhibitory activities / C.F. Bedreag, A. Trifan, A. Vasincu [et al.] // Rev. Med. Chir. Soc. Med. Nat. Ia§i. - 2014. -Vol. 118, № 2. - P. 544-550.

155. Jakstas, V. Research of the amounts of flavonoids accumulated in the buds of single-styled hawthorn / V. Jakstas, V. Janulis, J. Labokas // Medicina (Kaunas, Lithuania). - 2004. - Vol. 40, № 8. - P. 750-752.

156. Kazuma, K. Crataegusins A and B, New Flavanocoumarins from the Dried Fruits of Crataegus pinnatifida var. major (Rosaceae) / K. Kazuma, Y. Isobe, H. Asahina // Natural Product Communications. - 2016. - Vol. 11, № 7. - P. 965969.

157. Khokhlova, K. Chromatographic characterization on flavonoids and triterpenes of leaves and flowers of 15 crataegus L. species / K. Khokhlova, O. Zdoryk, L. Vyshnevska // Natural Product Research. - 2018. - Vol. 34, № 7. - P. 1-6.

158. Melikoglu, G. Flavonoids of Crataegus Microphylla / G. Melikoglu, L. Biti§, A. Mericli // Natural Product Research. - 2004. - Vol. 18, № 3. - P. 211-213.

159. Mericli, A. Flavonoids of Crataegus tanacetifolia (Lam.) Pers. (Rosaceae) an endemic species from Turkey / A. Mericli, K. Ergezen // Sci Pharm. - 1994. -Vol. 62, № 3. - P. 277-281.

160. Miettinen, T.A. Non-nutritive bioactive constituents of plants / T.A. Miettinen, H. Gylling // Phytosterols. Vitamin and Nutrition Research. - 2003. - Vol. 73, № 2. - P. 95-100.

161. Mina, K. Chung. Howthorn leaf with flower / K. Chung Mina // Cardiology in Review. - 2004. - Vol. 12, № 2. - P. 73-80.

162. Neurologically Potent Molecules from Crataegus oxyacantha; Isolation, Anticholinesterase Inhibition, and Molecular Docking / M. Ali, S. Muhammad, M.R. Shah [et al.] // Frontiers in Pharmacology. - 2017. - P. 327.

163. Oguzhan, C. Mediterranean Hawthorn Fruit (Crataegus) Species and Potential Usage / C. Oguzhan // The Mediterranean Diet. - 2015. - P. 621-628.

164. Philip, C.C. N-3 Fatty acids and cardiovascular disease: evidence explained and mechanisms explored / C.C. Philip // Clinical Science. - Great Britain: Pub-Med, 2004. - Vol. 107, № 1. - P. 383-393.

165. Polyphenol contents and antioxidant activities of extracts from flowers of two Crataegus azarolus L. varieties / R. Bahri-Sahloul, S. Ammar, R.B. Fredj [et al.] // Pakistan Journal of Biological Sciences. - 2009. - Vol. 12, № 9. - P. 660-668.

166. Polyphenolic Composition of Crataegus monogyna / S.F. Nabavi, S. Habtema-riam, T. Ahmed [et al.] // Nutrients. - 2015. - Vol. 7, № 9. - P. 7708-7728.

167. Polyphenolic profile and biological activity of Chinese hawthorn (Crataegus pinnatifida BUNGE) fruits / T. Jurikova, J. Sochor, O. Rop, J. Mlcek // Molecules. - 2012. - Vol. 17, № 12. - P. 14490-14509.

168. Radioprotective effects of Hawthorn against genotoxicity induced by gamma irradiation in human blood lymphocytes / S.J. Hosseinimehr, A. Mahmoudzadeh, M. Azadbakht, S. Akhlaghpoor // Radiation and Environmental Biophysics. -2009. - Vol. 48, № 1. - P. 95-98.

169. Radioprotective effects of hawthorn fruit extract against gamma irradiation in mouse bone marrow cells / S.J. Hosseinimehr, M. Azadbakht, S.M. Mousavi, A. Mahmoudzadeh // Journal of Radiation Research. - 2007. - Vol. 48, № 1. - P. 6368.

170. Research of the amounts of flavonoids accumulated in the crude drug of single-styled hawthorn / V. Jakstas, V. Janulis, J. Labokas, S. Kazlauskas // Medicina (Kaunas, Lithuania). - 2003. - Vol. 39, № 2. - P. 45-49.

171. Sydora, N.V. The study of the carbohydrate composition of hawthorn fruits / N.V. Sydora, A.M. Kovalyova, V.K. Iakovenko // BicHHK ^apMa^i. - 2018. - №

3. - P. 14-18.

172. Synergistic interactions of polyphenols and their effect on antiradical potential / S. Aslam, N. Jahan, K.U. Rahman, F. Zafar // Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences. - 2017. - Vol. 30, № 4. - P. 1297-1304.

173. The comparison of anti-oxidative kinetics in vitro of the fluid extract from maidenhair tree, motherwort, and hawthorn / J. Bernatoniene, A. Kucinskaite, R. Masteikova, Z. Kalveniene // Acta Poloniae Pharmaceutica. - 2009. - Vol. 66, №

4. - p. 415-421.

174. United States Pharmacopoeia (USP 32 - NF 27). - 2009.

175. Vitexin inhibits inflammation in murine ovalbumin-induced allergic asthma / C.L. Venturini, A. Macho, K. Arunachalam, D. A. Tavares de Almeida // Biomed-icine & pharmacotherapy. - 2018. - № 97. - P. 143-151.

176. WHO Monographs on Selected Medicinal Plants / World Health Organization. - Geneva, 2004. - Vol. 2. - P. 142-145.

177. Wu, J. Crataegus pinnatifida: chemical constituents, pharmacology, and potential applications / J. Wu, W. Peng, Q.H. Zhou // Molecules. - 2014. - Vol. 19, № 2. - P. 1685-1712.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

АОА - антиоксидантная активность БАВ - биологически активные вещества БАД - биологически активная добавка БХ - бумажная хроматография ВАК - Высшая Аттестационная Комиссия ВРПС - водорастворимые полисахариды

ВЭЖХ/МС — высокоэффективная жидкостная хроматография масс-спектрометрия

ГОСТ - Государственный отраслевой стандарт

ГСО - Государственный стандартный образец

ГФ - Государственная Фармакопея

ГХ/МС - газовая хроматография масс-спектрометрия

ДЗП - диагностически-значимые признаки

ЛРС - лекарственное растительное сырье

ЛУК - ледяная уксусная кислота

МК - муравьиная кислота

ОФС — общая фармакопейная статья

ПДК - предельно допустимая концентрация

ПОЛ - перекисное окисление липидов

РСО - рабочий стандартный образец

РФ - Российская Федерация

СФ - спектрофотометр

ТСХ - тонкослойная хроматография

УФ - ультрафиолетовый

ФС - фармакопейная статья

ПРИЛОЖЕНИЕ

Приложение 1

ООО «ТРАВЫ БАШКИРИИ»

Яуаплылыгы сиклэнгэн йэ.мкгиэтэ 450095 Башкортостан Республика!™,], бфе к Глазов ур.,1/3 Тел. [phone] e-mail: [e-mail]. www.ufafito.ru

Общество с ограниченной ответственностью 450095, Республика Башкортостан, г.Уфа ул .Глазове кая,1 /3 Тел. [phone] e-mail: ufafitoigjufamai 1 ,щ. www.ufafito.ru

ИНН 0275000936 КПП 027201001 ОКПО 26795008 ОГРН 1020202359649

/

УТВЕРЖДАЮ

\

Генеральный директор ОС"^ авы Башкирии» A.A. Иванов «.» _2021 г

2021 г

V

АКТ

О внедрении результатов диссертационной работы Жалаловой Надиры Бегнм Курсановиы «Фармакогностическое изучение боярышника алма-атинского

Crataegus almaatemis Pojark.» на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук по специальности 3.4.2 - «Фармацевтическая химия, фармакогнозия» (фармацевтические науки) в работу ООО «Травы Башкирии»

Комиссия в составе главного технолога Елеминой Натальи Евгеньевны, заведующего производством Цаплиной Людмилы Александровны, заведующего лабораторией Веселовой Оксаны Михайловны подтверждает использование материалов диссертационного исследования Жалаловой Н.К., посвященного изучению возможностей использования боярышника алма-атинского в качестве сырья для получения побегов боярышника в работе ООО «Травы Башкирии».

Полученные автором результаты качественного и количественного анализа используются с целью определения качества лекарственного растительного сырья. Методики являются экспрессными, точными, нетрудоемкими и достоверными.

Внедрение результатов диссертационных исследований Жалаловой Н.К. способствует повышению объективности анализа лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов.

Члены комиссии:

1. Главный технолог

ООО «Травы Башкирии»

2. Заведующий производством ООО «Травы Башкирии»

3. Заведующий лабораторией ООО «Травы Башкирии»

Елемина Н.Е.

Цаплина Л.А.

« »

2021 г.

Приложение 5

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

УТВЕРЖДАЮ

_Ф.И.О.

" " г.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Боярышника алма-атинского побеги Crataegi almaatensis cormi

ФС 42-XXXX-XX

Вводится впервые

Срок введения установлен « » 20 года

Срок действия до

« »

20 года

Настоящая фармакопейная статья распространяется на побеги заготовленные в фазу цветения c дикорастущего дерева боярышника алма-атинского - Crataegus almaatensis Pojark., семейства розоцветные - Rosaceae. Применяемые в качестве антиаритмического, антиагрегантного и антиоксидантного лекарственного средства.

ИЗДАНИЕ ОФИЦИАЛЬНОЕ ПЕРЕПЕЧАТКА ВОСПРЕЩЕНА

Показатели Методы анализа Нормы

Внешние признаки ОФС.1.5.1.0002.15, ГФ-XIV (т.2), визуально (с помощью лупы и микроскопа), огранолептически Цвет ветвей коричневые, листьев - зеленый, цветков - белый. Запах слабый. Вкус водного извлечения слабогорьковатый.

Микроскопия ОФС.1.5.3.0003.15. ГФ-XIV (т.2) Xарактерные диагностически значимые признаки побеги боярышника

Качественные реакции Цветная реакция со спиртовым раствором алюминия хлорида (III) Желто-зеленое окрашивание (флавоноиды)

ТСХ: «система этилаце-тат-муравьиная кислота-вода (14:3:3)», проявитель 5% раствор алюминия хлорида, стандартные образцы - витексин, гиперо-зид Соответствует ФС

Числовые показатели: Содержание суммы фла-воноидов в пересчете на витексин ДЗП Влажность Золы общей Золы, нерастворимой в 10 % растворе кислоты хлористоводородной Органическая примесь Дифференциальная спек-трофотометрия Микродиагностический ОФС.1.5.3.0007.15, ГФ-XIV (т.2) ГФ-ХГ, вып.2 ОФС.1.5.3.0005.15, ГФ-XIV (т.2) ОФС.1.5.3.0004.15, ГФ-XIV (т.2) не менее 1,0% не менее 30% не более 11% не более 4,0% не более 1,0 % не более 1,0%

Минеральная примесь Измельченность: частиц, не проходящих сквозь сито ё=5 мм частиц, проходящих сквозь сито d=0,5 мм ОФС.1.5.3.0004.15, ГФ-XIV (т.2) ОФС.1.5.3.0004.15, ГФ-XIV (т.2) ОФС.1.5.3.0004.15, ГФ-XIV (т.2) не более 1,0% не более 1,0% не более 4,0%

Микробиологическая чистота ОФС 42-0016-04, ОФС 42-0067-07, ГФ XII (т.1) Категория 4А

Радиологическая чистота СанПиН 2.3.2.1078-01 п.п.1.6.10, ОФС.1.5.3.0001.15, ГФ-XIV (т.2) Радионуклиды отсутствуют

Тяжелые металлы и мышьяк ОФС.1.5.3.0009.15 ГФ^^ (т.2) Тяжелые металлы и мышьяк отсутствуют

Упаковка ОФС 1.1.0025.18. ГФ^^ том 1. Цельное сырье упаковывается по 15 кг в мешки бумажные многослойные; в мешки, полипропиленовые из пропилена окрашенного.

Xранение ОФС.1.1.0011.15 ГФ ГФ-XIV том 1. В сухом, защищенном от света месте, при температуре не выше 25°С

Срок годности 3 года

ПОДЛИННОСТЬ

Внешние признаки. Сырье исследуют невооруженным глазом, с помощью лупы (10х) или стереомикроскопа (16х, 20х, 40х) в соответствии с разделом «Методы анализа лекарственного растительного сырья» (ГФ РФ XIV издания).

Целъное сырье: Смесь олиственных побегов, листьев и цветков. Листья простые, черешковые (черешок 1-2 см, серо-зеленый), обратнояйцевидные, ромбовидной формы. Зубцы начинаются от половины листа. Основание клиновидное, верхушка заостренная. Размеры листа: 3-4 см в длину, 3 см в ширину. Цветки собраны в щитовидные соцветия по 9-16 цветков. Цвет листьев зеленый, сверху - темно-зеленые, снизу - несколько бледнее; венчик желто-белый.

Запах слабый. Вкус водного извлечения слабо-горьковатый.

Измельченное сырье: кусочки ветвей, листьев, цветков, проходящих сквозь сито 5 мм. Цвет ветвей коричневый, листьев - зеленый, цветков - белый. Запах слабый. Вкус водного извлечения слабо-горьковатый.

Порошок: темно-зеленого цвета проходящий сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Проводят в соответствии с указаниями ОФС «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов» (ГФ РФ XIV издания).

Из аналитической пробы готовят препараты по методике приготовления микропрепаратов из цельного сырья согласно ГФ XIV издания. Цельное, измельченное сырье. Эпидермис верхней стороны листа представлен слегка извилистый, с ярко-выраженной складчатостью кутикулы (рис. 1); нижний эпидермис с более извилистыми клетками, устьица крупные, встречаются на обеих сторонах листовой пластинки (преимущественно на нижней стороне) (рис. 2). Устьичный аппарат аномоцитного типа. Волоски простые, одноклеточные, тонкостенные, у основания образуют розетку из клеток (рис. 3). Обнаружено большое количество друз оксалата кальция, особенно по жилкам листовой пластинки (рис. 4).

Рисунок 1 - Фрагмент эпидермиса верхней стороны листа (1 -складчатость кутикулы). Увел. 20x10.

Рисунок 2 - Фрагмент нижнего эпидермиса листа боярышника алма-атинского: устьичный аппарат аномоцитного типа. Увел. 40x10.

щШт

Рисунок 3 - Фрагмент эпидермиса листа (1 - простые волоски, 2 - розетка клеток в основании волоска). Увел. 40x10.

Рисунок 4 - Фрагмент листа (1 -друзы оксалата кальция вдоль жилки). Увел. 40x10.

1

Клетки черешка продолговато-удлиненные, с чётковидными утолщениями. Устьица на черешке крупные, устьичный аппарат аномоцитного типа. Волоски простые, одноклеточные, тонкостенные (рис. 5,6).

Рисунок 5 - Фрагмент черешка листа Рисунок 6 - Фрагмент черешка ли-тонкостенный, одноклеточный, про- ста (1-устьица, 2 - продолговато-

Анатомо-микродиагностические признаки цветков: клетки эпидермиса венчика продолговато-удлиненные, прямостенные, со складчатостью кутикулы, также встречаются сосочковидные клетки. Устьица крупные, с аномоцитным типом устьичного аппарата. Некоторые клетки содержат коричневое содержимое. Имеются округлые железки (рис. 7, 8). Клетки эпидермиса чашелистика продолговатые, многоугольные, со складчатостью кутикулы. Устьица крупные, с аномоцитным типом устьичного аппарата (рис. 9). Имеются крупные друзы оксалата кальция. Волоски одноклеточные, простые, толстостенные, в местах прикрепления клетки эпидермиса содержат бурое содержимое. На поверхности встречаются железки круглой формы на ножке.

2

/

стой волосок. Увел. 20x10.

удлиненные клетки). Увел. 20x10.

Рисунок 7 - Фрагмент эпидермиса цветков (1 - аномоцитный устьич-ный аппарат, 2 - клетки с коричневым содержимым). Увел. 40x10.

Рисунок 9 - Фрагмент эпидермиса чашелистика (1 - устьице, 2 - многоугольные клетки). Увел. 40x10.

Рисунок 8 - Фрагмент эпидермиса венчика (1 - сосочковидные клетки). Увел. 40x10.

Рисунок 10 - Фрагмент эпидермиса цветков. (1 - друзы оксалата кальция, 2 - простые волоски). Увел. 40x10.

Порошок. При микроскопическом анализе измельченного сырья были обнаружены практически все диагностические признаки, установленные при микроскопии цельного сырья, которые представлены на (рис. 11 - 15).

•к».*

- ....^ г) --

.Ж

в

Рисунок 11, 12 - Фрагмент листа С. а1таМет1з. Увел. 40x10.

Рисунок 13, 14 - Фрагменты микроскопии порошка побегов С. almaaten-sis. Увел. 40x10.

6

2

3

7

5

1 - устьичный аппарат ано-моцитного типа; 2 - друзы оксалата кальция; 3 - простые волоски; 4 - складчатость кутикулы; 5 - многоугольные клетки; 6 - железки; 7 - место прикрепления волоска.

Рисунок 15 - фрагмент эпидермиса нижней стороны листа С. а1шаМвт18. Увел. 40x10.

Определение основных групп биологически активных веществ Качественные реакции. К 1 мл извлечения, полученного, согласно методике, описанной в разделе "Количественное определение", прибавляют 2 мл 1% раствора алюминия хлорида в 95% спирте и 10 мл 95% спирта; раствор окрашивается в желтый цвет (флавоноиды)

Тонкослойная хроматография. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 1,0 г помещают в коническую колбу на 100 мл, прибавляют 30 мл спирта 70%, нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 минут. После охлаждения до комнатной температуры полученное извлечение фильтруют через бумажный фильтр (испытуемый раствор).

На линию старта «пластинки Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ» капилляром наносят 0,02 мл испытуемого раствора и по 0,02 мл 0,05% растворов (СО) хло-рогеновой кислоты, гиперозида, витексина и кофейной кислоты. Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе, затем помещают в предварительно насыщенную смесью растворителей камеру, и хроматографируют вос-

ходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 10 см, пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 минут. После проявления пластинки 5% спиртовым раствором алюминия хлорида происходит изменение окраски пятен. При просмотре хроматограммы в УФ-свете при длине волны 365 нм обнаруживаются 7 пятен, 3 зоны адсорбции желто-зеленой окраски, по которой можно предположить наличие флавоноидов и 4 зоны сине-голубого цвета, предположительно относящиеся к оксикоричным кислотам из которых предположительно с ЯТ около 0,47 хлорогеновая кислота, с ЯТ около 0,63 гиперозид, с ЯТ около 0,77 витексин, с ЯТ около 0,92 кофейная кислота.

Примечание:

1. Подготовка пластинок. Пластинки Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ» вырезают размером 14^5 см, наносят линию старта на расстоянии 1 см от края и перед использованием активируют в сушильном шкафу при 100-105°С в течение 1 часа.

2. Приготовление системы растворителей для хроматографирования. Для проведения ТСХ-анализа рекомендуется система растворителей: этилацетат -муравьиная кислота-вода (14:3:3). Система используется свежеприготовленная. Насыщение камеры для хроматографирования системой растворителей в течение 1 часа.

3. Приготовление раствора проявителя. 5,4 г алюминия хлорида 6-водного растворяют в 80 мл 95% этилового спирта в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, доводят этиловым спиртом до метки, перемешивают.

4. Приготовление растворов сравнения.

Растворы гиперозида и витексина: около 0,05 г (точная навеска) раствора (СО), предварительно высушенного при температуре 100-105°С в течение 3 часов, растворяют в 85 мл 95% этилового спирта в мерной колбе вместимостью 1 00 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, доводят этиловым спиртом до метки и перемешивают. Срок годности раствора 1 мес.

Раствор кофейной кислоты: около 0,05 г (точная навеска) раствора (СО) растворяют в 95% этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят до метки. Срок годности раствора 1 мес.

Раствор хлорогеновой кислоты: около 0,05 г (точная навеска) раствора (СО) растворяют в 95% этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят до метки.

С—5 С-) с—э С->

БА ХК Гип Вит кк

Рисунок 16 - схема хроматограммы извлечения побегов боярышника алма-атинского и стандартных образцов в системе: этилацетат - муравьиная кислота - вода (14:3:3)

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье и порошок - не более 12%. Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье и порошок - не более 4%. Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 1%.

Измельченность сырья. Для цельного сырья - частиц, не проходящих через сито 5 мм, не более 1%; частиц, прошедших через сито 0,5 мм, не более 1%; для измельченного сырья - частиц, не прошедших через сито 5 мм, не более 1%; частиц, проходящих через сито 0,5 мм, не более 4%; для порошка - частиц, непрошедших через сито 2 мм, не более 4%; частиц, проходящих через сито 0,5 мм, не более 3%, Посторонние примеси.

Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок - не более 1%.

Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок - не более 1%.

Тяжелые металлы. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (ГФ РФ XIV издания). Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (ГФ РФ XIV издания).

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (ГФ РФ XIV издания). Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота» (ГФ РФ XIV издания).

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное: суммы флавоно-идов в пересчете на витексин, не менее 1,0%.

Аналитическую пробу сырья побегов боярышника алма-атинского измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 1 мм. Около 1 г (точная навеска) сырья помещают в мерную колбу вместимостью 200-250 мл, прибавляют 200 мл 70% этилового спирта, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 45 мин. Затем полученное извлечение осторожно фильтруют через бумажный складчатый фильтр в мерную колбу на 200-250 мл, избегая попадания частиц сырья в воронку. Полученное извлечение доводят в мерной колбе до 200 мл (раствор

A).

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 3 мл раствора А, прибавляют 2 мл 2% раствора хлорида алюминия, добавляют 0,1 мл 30% раствора уксусной кислоты и доводят раствор до метки 95% этиловым спиртом (раствор

B). Через 30 минут измеряют оптическую активность раствора на спектрофотометре при длине 396±2 нм в кювете толщиной слоя 1 см. В качестве раствора

сравнения в мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 3 мл раствора А, 0,1 мл 30% уксусной кислоты и доводят 95% этиловым спиртом до метки.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора (СО) витексина: 1 мл спиртового раствора (СО) витексина помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 мл 2% раствора хлорида алюминия в 95%-м этиловом спирте, доводят объем раствора 95%-м этиловым спиртом до метки и перемешивают. Измерения проводят аналогично испытуемому раствору.

Содержания суммы флавоноидов (Х) в пересчете на витексин и абсолютно сухое сырье (в%) вычисляют по формулам (1) и (2):

При использовании стандартного образца витексина

„ 0*200*25*100*100 , ч

^ =-;-г- (1); где;

Э - оптическая плотность исследуемого раствора. Э0 - оптическая плотность раствора СО витексина. С0 - содержание витексина в спектрофотометрируемой пробе в граммах. т - масса сырья в граммах;

потеря в массе при высушивании сырья в процентах.

При использовании удельного показателя поглощения витексина

0*200*25*100 У = - ПЛ- ГПР

1. Приготовление раствора стандартного образца раствора (СО) витек около 0,0006 г (точная навеска) растворили на 6 мл 95% этилового спирта.

2. Приготовление 2% спиртового раствора алюминия хлорида: - 3,6 г алюминия хлорида 6-водного растворяют (ГОСТ 3759-75); растворяют в 40 мл 95% этилового спирта в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора 95% спиртом до метки. Срок годности раствора при хранении в колбе с притертой пробкой 6 мес.

Упаковка. Цельное сырье упаковывается по 15 кг в мешки бумажные многослойные, в мешки полипропиленовые из пропилена для окрашенных лекарственных средств или пищевых продуктов; по 20 кг в мешки тканевые продуктовые. На мешки наклеивают этикетку из бумаги этикеточной, бумаги писчей по ГОСТР 59425-2021 и ОФС.1.1.0019.15.

Маркировка. На этикетке указывают: название лекарственного средства на русском и латинском языках, масса 15 кг, влажность 10%, регистрационный номер, номер серии, срок годности, условия хранении, условия отпуска, способ применения и дозы, «Продукция прошла радиационный контроль», штриховой код. Маркировка транспортной тары в соответствии с ГОСТ 14192-96.

Хранение. В соответствии с ГОСТ 59425-2021 и ОФС.1.1.0011.15 ГФ XIV том 1. В сухом защищённом от света месте. Не фасованное сырье в хорошо проветриваемом помещении.

Срок годности. 3 года.

Фармакологическая группа. Кардиотоническое, антиаритмическое, спазмолитическое, антиагрегантное, антиоксидантное средство.

Ректор Башкирского государственного медицинского университета

В.Н. Павлов 20 г.