Фармакогностическое изучение болиголова пятнистого (Сonium maculatum L.) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат наук Булгаков Тимур Вилюрович

• Булгаков Тимур Вилюрович
• кандидат наук
• 2019

Оглавление диссертации кандидат наук Булгаков Тимур Вилюрович

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава I. Обзор литературы

Современное состояние исследований по изучению болиголова пятнистого Сотым шаеиШиш L

1.1.Общая морфолого-ботаническая характеристика семейства зонтич- 14 ных и рода Conium

1.2. Морфологическая характеристика болиголова пятнистого (Сотит 15 шаеиШиш L.)

1.3. Химический состав болиголова пятнистого (Сотит шаеиШиш L.)

1.4. Сведения о биологических свойствах соединений, содержащихся в 21 болиголове пятнистом

1.5. Применение болиголова пятнистого и препаратов на его основе в 30 народной и официальной медицине

1.6. Токсикологическая характеристика болиголова пятнистого

Заключение по главе

Глава II. Объекты и методы исследования

2.1. Объекты исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Определение подлинности и доброкачественности сырья

2.2.2. Методы фитохимического анализа

2.3. Методы биологических исследований

2.4.Статистическая обработка результатов исследования 52 Глава III. Морфолого-анатомическое исследование травы болиголова 54 пятнистого (Conium maculatum L.)

3.1. Морфологическое исследование травы болиголова пятнистого

3.2. Анатомическое исследование травы болиголова пятнистого

3.3. Изучение анатомического строения травы болиголова пятнистого 71 при измельчении

Выводы к главе III

Глава IV. Фитохимическое исследование травы болиголова пятнистого 76 (Сотит таеиШит Ь)

4.1. Качественный анализ травы болиголова пятнистого

4.2. Определение содержания основных групп биологически активных 88 веществ в траве болиголова пятнистого

4.2.1. Алкалоиды

4.2.2. Флавоноиды

4.2.3. Фенолкарбоновые кислоты

4.2.4. Аскорбиновая кислота

4.2.5. Свободные органические кислоты

4.2.6. Сапонины

4.2.7. Кумарины

4.2.8. Каротиноиды

4.2.9. Полисахариды

4.2.10. Эфирное масло

4.2.11. Элементный и аминокислотный состав 104 Выводы к главе IV 109 Глава V. Разработка параметров стандартизации травы болиголова пятнисто- 110 го (Сотит таеиШит Ь)

5.1. Определение параметров доброкачественности травы болиголова 110 пятнистого

5.2. Разработка критериев подлинности и количественного содержания дей- 111 ствующих веществ болиголова пятнистого

5.3. Исследование микробиологической чистоты, содержание пестицидов, 126 тяжелых металлов и радионуклидов в траве болиголова пятнистого

5.4. Определение сроков годности травы болиголова пятнистого 129 Выводы к главе V 132 Глава VI. Изучение биологических свойств болиголова пятнистого 133 6.1. Изучение противовоспалительной активности настоя из травы боли-

голова пятнистого

6.2. Изучение антибактериальной активности травы болиголова пятни- 134 стого

6.3. Определение антиоксидантной активности травы болиголова пятни- 135 стого

6.4. Изучение иммунотропных свойств водорастворимых полисахаридов 139 из травы болиголова пятнистого

Выводы к главе VI

Общие выводы

Список литературы

Приложение

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АДФ - аденозиндифосфат; АлАт - аланинаминотрансфераза;

АМРА-рецептор - рецептор а-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовой кислоты;

NMDA-рецептор - рецептор рецептор глутамата, селективно связывающий NN

метил-D-аспартат;

АОА - антиоксидантная активность;

АТФ - аденозинтрифосфат;

БАВ - биологически активные вещества;

БАС - биологически активные соединения;

БХ - бумажная хроматография;

ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения;

ВФС - Временная фармакопейная статья;

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография;

ГХ - газовая хроматография;

ГСО - государственный стандартный образец;

ГФ IX - Государственная фармакопея IX издания;

ГФ XI - Государственная фармакопея XI издания;

ГФ XII - Государственная фармакопея XII издания;

ГФ XIII - Государственная фармакопея XIII издания;

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота;

ЖКТ - желудочно-кишечный тракт;

ЗН - злокачественные новообразования;

ИК-свет - инфракрасный свет;

ЛРС - лекарственное растительное сырье;

МАИР - Международное агентство по исследованию рака;

МБР - модификаторы биологических реакций;

НАДФ - никотинамидадениндинуклнотидфосфат;

ОКК - оксикоричные кислоты;

ОС - окружающая среда;

ПС - полисахариды;

РСО - рабочий стандартный образец;

ТСХ - тонкослойная хроматография;

ТУ - технические условия;

УФ-свет - ультрафиолетовый свет;

ЦНС - центральная нервная система;

ВС - видимый свет;

ФС - фармакопейная статья;

ФСП - фармакопейный стандарт предприятия;

ЭМ - эфирные масла.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакогностическое изучение болиголова пятнистого (Сonium maculatum L.)»

ВВЕДЕНИЕ

В течение многих десятилетий злокачественные новообразования занимают второе место (после сердечно - сосудистых заболеваний) среди основных причин смертности. Повышенное внимание к онкологии обусловлены устойчивой тенденцией роста заболеваемости во всем мире, которая и в обозримом будущем продолжит нарастать, что объясняется рядом объективных и субъективных причин - старением населения, экологическими, экономическими и другими факторами [68].

В 2016 г. в Российской Федерации впервые было выявлено 599 348 случаев злокачественных новообразований (в том числе 273 585 и 325 763 у пациентов мужского и женского пола соответственно). Прирост данного показателя по сравнению с 2015 г. составил 1,7% [68].

Лекарственная терапия онкологических заболеваний на определенных стадиях развития болезни зачастую является единственным способом лечения пациентов [170]. В последние десятилетия в связи с новыми открытиями в генетике, молекулярной биологии, биотехнологии и др. в развитии терапии злокачественных новообразований произошел значительный прогресс. Однако недостаточная эффективность фармакотерапии онкозаболеваний является причиной усиленных поисков противоопухолевых агентов. Перспективным считается поиск препаратов природного происхождения, так как именно этот путь дает реальную возможность выявить вещества с новыми механизмами действия [29, 43, 46]. В онкологии используют биологически активные соединения, которые обладают прямым цито-токсическим воздействием (таксаны, винкоалкалоиды, подофиллотоксины и пр.) и вещества, действующие на опухолевый процесс опосредовано, путем активации защитных сил организма, так называемые модификаторы биологических реакций (МБР). К МБР относятся иммуномодуляторы различных механизмов действия и происхождения, цитокины и пр. Применение МБР в онкологии на сегодняшний день расширяется, так как эти препараты улучшают результаты большого количества видов специфического лечения онкологических больных, в том числе один

из основных показателей эффективности терапии - качество жизни пациента [133, 164].

В настоящее время лекарственное растительное сырье является источником получения более трети лекарственных соединений различной направленности действия и большинства биодобавок к пище. Поэтому одной из важнейших задач фармации является поиск и создание новых фитопрепаратов из растительного сырья. Особое внимание следует уделять изучению растений, которые составляют местную флору, что даст возможность значительно увеличить сырьевую базу и позволит уменьшить цену готового фитопрепарата.

Одним из растений, обладающим противоопухолевыми свойствами [7] и повсеместно встречающимся на территории Российской Федерации, является болиголов пятнистый (Сотит таеиШит L.), относящийся к семейству зонтичных (Apiaceае).

Имеются данные о применении болиголова пятнистого в народной медицине для лечения различных онкологических заболеваний, в частности, рака молочной и предстательной железы, рака кожи и др. Помимо выраженного противоопухолевого действия болиголов обладает ранозаживляющими, иммуномодули-рующими, обезболивающими и противосудорожными свойствами [25, 92, 100].

Болиголов пятнистый входил в первые четыре издания фармакопей России, но так как это растение очень токсично, был впоследствии исключен из медицинской практики. Однако, болиголов пятнистый является официальным в ряде стран Западной Европы и Южной Америки.

На сегодняшний день болиголов пятнистый используется, в основном, врачами-гомеопатами в качестве гомеопатического средства в виде препарата «Ко-ниум-плюс» и настойки [138, 154].

В настоящее время на болиголов пятнистый в Российской Федерации отсутствует нормативная документация, что делает невозможным его применение. Поэтому актуальным является всестороннее исследование свойств болиголова пятнистого (фитохимическое и фармакологическое).

Степень разработанности темы исследования. Исследования травы болиголова пятнистого относятся к 50-60 г.г. XX в. (Налегатская А.В., Генри Т.А., Bowman W.C., Sanghvi I.S.). В настоящее время отдельные работы (Орлов Б.Н., Гелашвили Д.Б., Ибрагимов А.К., Зданевич Е.В., Белодубровская Г.А., Зориков П.С., Лагутина Т.В., Попова Е.В. и др.), посвященные изучению фармакологических свойств болиголова пятнистого, фитохимического состава некоторых групп БАВ и морфолого-анатомических признаков растения.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось фарма-когностическое изучение болиголова пятнистого как перспективного лекарственного растительного сырья для введения в научную медицину.

Чтобы реализовать поставленную цель, необходимо было решить следующие задачи:

- обобщить данные по современным исследованиям болиголова пятнистого Conium maculatum L;

- провести морфолого-анатомическое исследование травы болиголова пятнистого;

- провести фитохимическое исследование травы болиголова пятнистого;

- провести изучение биологических свойств (противовоспалительных, ан-тиоксидантных, антибактериальных, иммунотропных) травы болиголова пятнистого;

- определить числовые показатели и нормы качества травы болиголова пятнистого;

- разработать проект фармакопейной статьи «Болиголова пятнистого трава».

Научная новизна

Получены научно обоснованные данные по составу биологически активных веществ травы болиголова пятнистого с использованием современных физико-химических методов анализа (УФ-спектроскопия, ТСХ, фотоэлектроколоримет-рия, атомно-абсорбционная спектроскопия, газовая хроматография и др.). Показа-

но присутствие в сырье алкалоидов, флавоноидов, полисахаридов, органических и оксикоричных кислот, витаминов и сапонинов. Дана количественная оценка и качественная характеристика действующих веществ. Впервые с использованием метода ГX/МС изучен качественный состав эфирных масел травы болиголова пятнистого. Установлено, что в составе эфирного масла болиголова пятнистого из 72 идентифицированных компонентов преобладают сесквитерпеновые углеводороды. Впервые установлен качественный состав моносахаридов полисахаридного комплекса травы болиголова пятнистого. Предложен модифицированный метод количественной оценки полисахаридов в качестве дополнительного метода стандартизации сырья болиголова пятнистого.

Предложены показатели, характеризующие содержание БАВ в траве болиголова пятнистого (содержание алкалоидов и полисахаридов). Разработана методика спектрофотометрического определения алкалоидов в пересчете на кониин. Экспериментально показано наличие антибактериального, антиоксидантного и иммунотропного действия извлечений из травы болиголова пятнистого.

Впервые описана микроскопия цветков и выявлены новые анатомо-диагностические признаки листьев болиголова пятнистого. Разработан показатель качества для стандартизации травы болиголова пятнистого на основе выявленных диагностически-значимых признаков сырья.

Теоретическая значимость исследования. Использование современных физико-химических методов анализа позволило получить новую информацию о составе биологически активных веществ болиголова пятнистого. Разработанные комплексы испытаний для подтверждения подлинности травы болиголова пятнистого и методики количественного определения в сырье суммы алкалоидов и полисахаридов могут использоваться для идентификации и оценки качества сырья. Результаты изучения антиоксидантной активности могут быть учтены в дальнейших фармакологических исследованиях для расширения области применения сырья и препаратов на основе травы болиголова пятнистого.

Практическая значимость.

Полученные уточненные данные по анатомическому строению травы болиголова пятнистого и содержанию биологически активных веществ использованы при разработке проекта ФС «Болиголова пятнистого трава». Полученные экспериментальные данные могут служить основой для разработки новых лекарственных средств из травы болиголова пятнистого.

Основные положения, выносимые на защиту:

• результаты морфологического и анатомо-диагностического исследования травы болиголова пятнистого;

• результаты изучения химического состава травы болиголова пятнистого;

• результаты разработки методик стандартизации травы болиголова пятнистого;

• результаты изучения биологической активности настоя из травы болиголова пятнистого.

Методология и методы исследования. Методология исследования основана на анализе литературных данных, оценке степени изученности и актуальности темы исследования. При выполнении работы были использованы методы: макроскопический, микроскопический, ТСХ, спектрофотомерия, титриметрия, гравиметрия, атомно - абсорбционная спектроскопия, хромато-масс-спектроскопия, газовая хроматография. Разработанные методики валидировали согласно ОФС ГФ XIII изд. «Валидация фармакопейных методик» (ОФС.1.1.0012.15). Статистическую обработку результатов проводили в соответствии с ГФ XIII (ОФС.1.1.0013.15), и с помощью компьютерной программы Statistica 7,0.

Достоверность научных положений и выводов. Полученные результаты и сделанные выводы основаны на достаточном количестве экспериментальных исследований. В работе использовано современное сертифицированное оборудование, разработанные методики валидированы. Научные положения, выводы и практические рекомендации обоснованы и логически вытекают из результатов эксперимента. В работе использован достаточный объем литературных источников, как отечественных, так и иностранных авторов.

Апробация и публикация результатов исследования. Основные положения диссертационной работы обсуждены и докладывались на конференции ученых РБ с международным участием «Научный прорыв-2009» (г. Уфа, 2009 г.), Все-украинской научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием (г. Запорожье, 2013), научно-методической конференции «Гаммермановские чтения - 2014» (Санкт-Петербург, 2014), второй научно-практической конференции аспирантов и молодых ученых «Молодые ученые и фармация XXI века» (Москва, ВИЛАР, 2014), 74-ой научно-практической конференции молодых ученых и студентов (г. Запорожье, 2014), международной конференции практических фитотерапевтов «Здоровье нации - основа государственной безопасности» Уфа, 2015, XII научно-практической конференции молодых ученых и студентов ТГМУ имени Абуали ибни Сино, посвященной году молодежи Душанбе, 2017).

Личный вклад автора. Автору принадлежит ведущая роль в выборе направления исследования, постановке целей и задач, экспериментальной работе, статистической обработке результатов и анализе полученных данных. Вклад автора является определяющим на всех этапах проводимого исследования. В работах, проводимых в соавторстве, автор принимал непосредственное участие в экспериментальной и аналитической работе, в научном обосновании и обобщении полученных результатов. Диссертация и автореферат написаны автором лично.

Внедрение результатов исследования. Результаты изучения вопросов качественного и количественного анализа лекарственных препаратов группы пиридина, состава биологически активных веществ травы болиголова пятнистого, характеристик подлинности сырья, предложенная методика спектрофотометрического определения алкалоидов в пересчете на кониин использованы в учебном процессе кафедр фармацевтической химии с курсами аналитической и токсикологической химии, фармакогнозии с курсом ботаники и основ фитотерапии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России (акты от 10.01.2018). Результаты, которые были получены при выполнении диссертации, вошли в учебное пособие для студентов, интернов, практических врачей «Фитотерапия при заболеваниях кожи».

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Научные положения диссертационной работы соответствуют формуле специальности 14.04.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия, пунктам 3 и 6 паспорта специальности фармацевтическая химия, фармакогнозия.

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научных исследований БГМУ по проблеме «Фармакология и фармация». Номер госрегистрации 01200507996.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 170 страницах компьютерного текста и включает в себя введение, обзор литературы, описание объектов и методов исследований, шесть экспериментальных глав, выводы, библиографический указатель и приложения. Библиографический указатель состоит из 181 источника, 24 из которых иностранных авторов. Работа иллюстрирована 58 таблицами и 54 рисунками.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 16 научных работ, в том числе 6 статей в изданиях, рекомендуемых Высшей аттестационной комиссией при Минобрнауки России.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Современное состояние исследований по изучению болиголова пятнистого Сотит тасиШШт Ь. 1.1. Общая морфолого-ботаническая характеристика семейства зонтичных и рода Свтыт Ь.

Семейство зонтичные - Apiaceae или Umbellifer-ae относится к порядку Зонтикоцветные - Apiales,

подклассу Розиды - Rosidae в классе Двудол Рис l. l. 1. Болиголов пятнистый Magnoliopsida (Dicotylédones) отдела Покрытосеменные растения - Magnoliophyta (Angiospermae) [132].

Семейство зонтичные принадлежит к числу наиболее крупных и наиболее значимых в хозяйственном отношении семейств цветковых растений. Оно включает до 400 родов и 3500 видов, распространенных почти по всему Земному шару, особенно в умеренно-теплых и субтропических областях северного полушария Большинство представителей зонтичных - многолетние травы [54].

Стебли растений, относящихся к семейству зонтичных, имеют полые междоузлия, листья зонтичных простые, сильно рассеченные на узкие доли. Как правило, основание листа расширено и образует влагалище, охватывающее стебель. Мелкие цветки собраны в сложные зонтики. Плоды и стебли имеют секреторные каналы, содержащие смолистые вещества и эфирные масла. Плод - вислоплодник, состоящий из двух мерикарпиев, в которых содержится по одному семени. В ме-зокарпии имеются секреторные эфиромасличные каналы [132].

Семейство зонтичных включает род Conium, к которому относится один вид - болиголов пятнистый (Conium maculatum L.) (рис.1.1.1), произрастающий на территории России. Помимо этого, отмечены ещё 6 видов, которые являются узкими эндемиками Южной Африки [76]. Отличием болиголова пятнистого от

большинства представителей семейства зонтичные является содержание в нем алкалоида - кониина.

Растения рода Сотым представляют собой двулетние голые, травянистые растения с веретеновидным корнем. Стебли прямостоячие, полые, ветвящиеся, в верхней части с супротивными или мутовчатыми ветвями. Листья трижды - четырежды перисторассеченные; первичные сегменты на хорошо развитых черешках; конечные сегменты ланцетные или яйцевидно - ланцетные, глубоко надрезанные. Зонтики сложные, собранные в метельчатое общее соцветие; листочки обертки короткие, яйцевидно - ланцетные или их нет; оберточки односторонние, из ланцетно - яйцевидных, сросшихся основаниями листочков. Зубцы чашечки незаметные; лепестки белые, обратносердцевидные или обратнояйцевидные, с загнутой внутрь верхушкой; подстолбия короткоконические; стилодии короткие, отогнутые. Плоды голые, гладкие или мелкобугорчатые, яйцевидные, сжатые с боков, с хрящеватыми волнистыми ребрами и морщинистыми ложбинками; секреторные канальцы в зрелых плодах незаметные; эндосперм с комиссуральной стороны с узкой глубокой выемкой [104, 108].

1.2. Морфологическая характеристика болиголова пятнистого

(Свтит таеиЬаШт Ь.)

Представителем рода Сотыт является болиголов пятнистый (Сотыт тас-ыШыт Ь.). Болиголов широко распространен в нашей стране. Ареал его распространения занимает территории Средней Азии, Кавказа, Западной Сибири, Дальнего Востока [36]. Растение также встречается в Западной Европе и Северной Америке. Растет преимущественно, как сорняк на пустырях, полях, огородах, вдоль дорог, вблизи рек и озер (рис. 1.2.1). Культивируется болиголов пятнистый в Германии, Франции, Венгрии [76].

Рис. 1.2.1. Фотография внешнего вида болиголова пятнистого Болиголов пятнистый представляет собой двулетнее травянистое растение. Стебель высотой до 1,5 м, мелкобороздчатый, совершенно голый, полый, ветвистый, особенно в верхней части; с сизым налетом в нижней и средней частях и с темно-красными пятнами (рис.1.2.2). Верхние листья на влагалищных широкопленчатых черешках, нижние - на длинных черешках, которые в основании расширены во влагалище; соединение со стеблем - полустеблеобъемлющее.

Рис. 1.2.2. Стебель болиголова пятнистого с темно-красными пятнами

16

Листовая пластинка у верхних листьев трижды перистая, длиной 20 - 40 см и шириной 15 - 30 см, у нижних - четырежды перистая, 30 - 70 см длиной и 20 -60 см шириной. Листочки 1-го и 2-го порядка на черешках. У верхних листьев листочки 3-го порядка сидячие, продолговато-яйцевидные длиной 1,5 - 2 см глубоко рассечённые на яйцевидно-ланцетовидные заостренные дольки с 1 - 3 парами острых зубцов, направленных к верхушкам долек.

Соцветие шишковидно - метельчатое. Многочисленные зонтики 5 - 25 см в поперечнике, боковые зонтики не превышают центрального по размерам. Лучи зонтика редко шероховатые с внутренней стороны. Обвертка из ланцетных, длин-нозаостренных, отвороченных книзу узкопленчатых по краям листочков. Зонтики 1-1,5 см длиной в поперечнике с 15 - 20 лучами. Обверточка односторонняя из 2 -3 широколанцетных сросшихся в основании листочков (рис.1.2.3).

Рис. 1.2.3. Соцветия болиголова пятнистого Плод - широкояйцевидный вислоплодник - имеет округлояйцевидную форму с извилистыми ребрами (рис. 1.2.4).

тЛ

Рис. 1.2.4. Плоды болиголова пятнистого

Корень болиголова пятнистого стержневой, конусовидный, деревянистый [36, 99].

Всё растение ядовито. При разламывании стеблей и растирании листьев ощущается характерный «мышиный» запах, не присущий больше ни одному представителю семейства зонтичных.

1.3. Химический состав болиголова пятнистого (Свишт таеыЬаШт Ь.)

Первая наиболее полная характеристика химического состава болиголова пятнистого была приведена М.Г. Пименовым и Ю.Е. Скляром (1988 г.) в справочнике «Растительные ресурсы СССР».

В соответствии с этой характеристикой и другими данными можно отметить следующее - во всех органах болиголова пятнистого содержатся алкалоиды группы пиридина. Наиболее известным и сильнодействующим алкалоидом является кониин, который был впервые открыт Гезеке в 1827 году в вытяжке из болиголова крапчатого. В 1881 году Гофманом было осуществлено выделение алкалоида кониина и в последующем установлено его строение. Кониин оказался первым алкалоидом, который удалось получить синтетическим путем (в 1886 году,

Липпе) что, несомненно, послужило очень важным открытием для науки и медицины того времени [74, 150].

Наиболее подробно качественный состав алкалоидов исследован для плодов, в которых обнаружены кониин, у-коницеин, К-метилкониин, конгидрин, псевдоконгидрин, конгидрон, К-метилпсевдоконгидрин, 2-метилпиперидин. Есть данные о наличии алкалоидов в других органах растения - кониина и у- коницеина в корнях, листьях, стеблях, цветках; К-метилкониина в цветках, конгидрина и N метилпсевдоконгидрина в листьях и стеблях. Наиболее высокое количество алкалоидов обнаружено в незрелых (зеленых) плодах (до 3,6%), а наиболее низкое - в стеблях и листьях [30, 113, 148, 163, 166, 167, 168].

Содержание алкалоидов в различных частях растения зависит от фазы вегетации и условий его произрастания. В корнях, стеблях и листьях содержание алкалоидов постепенно уменьшается до следовых количеств в течение периода вегетации. В бутонах и цветках алкалоидов значительно выше. По мере созревания плодов их количество уменьшается [85, 161]. Интересно, что болиголов пятнистый в горных районах Армении вообще не содержит алкалоидов [60].

Изменение состава алкалоидов болиголова пятнистого на различных стадиях развития представлено в таблице 1.3.1. [166].

Таблица 1.3.1. - Изменение состава алкалоидов болиголова пятнистого на

различных стадиях развития

Содержание алкалоидов, %

Стадия вегетации / у- № Общее со-

орган растения конице- Кониин Конгидрин метил держание

ин кониин алкалоидов

1-ый год

Проростки 0,15 - 0,02 - 0,17

Листья 0,29 Следы 0,03 - 0,32

Корни 0,01 Следы - - 0,01

Осень 1-го года

Листья 0,42 0,21 - - 0,63

Боковые корни 0,08 0,03 - - 0,12

Стержневой корень 0,08 0,04 - - 0,12

2-ой год

Листья 0,86 0,06 0,02 - 0,94

Цветки 0,75 0,20 - 0,09 1,04

Молодые плоды 0,36 0,42 - 0,25 1,03

Сформировавшиеся плоды 0,01 0,21 - 0,85 1,07

Кроме алкалоидов в болиголове содержатся полиацетиленовые соединения (фалькаринон - в корнях и надземной части растения; дигидрофалькаринон, фалькаринолон - в корнях; (7) - фалькаринол - в соцветиях), азотистые соединения (в плодах). Помимо вышеприведенных составляющих, в соцветиях, плодах и листьях болиголова крапчатого присутствует эфирное масло (наибольшее количество эфирного масла обнаружено в листьях - 0,1%), включающее в свой состав монотерпеноиды и сесквитерпеноиды (в - мирцен, в - фелландрен, в - кубебен, в

- кариофиллен, 5 - кадинен, в - бизаболен и др. в листьях и соцветиях; в листьях

- транс - сабиненгидрат; в соцветиях - аромадендрен, сафрональ, каларен, а - пи-нен, в - пинен, цедрол и др.; мирцен в плодах), дитерпеноиды (фитол в листьях и соцветиях), ароматические соединения (производные бензола - стирен в листьях и соцветиях). В листьях и соцветиях болиголова крапчатого были найдены алифатические углеводороды, спирты, альдегиды и кетоны (генэйкозан, (7) - 3 - гексен

- 1 -ол в листьях и соцветиях; гексадеканаль, (Е) - 3 - гексен - 1 - ол, (Е) - 2 -гексеналь в листьях; тридекан, нонадекан, трикозан, октадеканол, нонаналь, гек-санол, октанол и др. в соцветиях). В плодах обнаружено жирное масло, состоящее из линолевой, линоленовой, олеиновой, стеариновой, пальмитиновой, петрозели-новой (свыше 50%), петрозелидиновой кислот (количество жирного масла составляет 18%); в плодах и соцветиях присутствуют производные жирных кислот (гек-

20

силоктаноат, октилоктаноат, 2 - фенилэтилоктаноат и др. в соцветиях; (7) - 3 -гексенилацетат в листьях и соцветиях). Листья и цветки богаты аскорбиновой кислотой, а листья - каротином [26, 60, 61, 114].

В сырье болиголова пятнистого содержатся различные фенольные соединения. Во всех частях растения, кроме цветков, обнаружены кумарины, из которых методом ВЭЖХ идентифицированы и подтверждены ксантотоксин и бергаптен. Наибольшее количество кумаринов отмечено в плодах - до 0,5% [91, 94, 95, 107].

В корнях найдена кофейная кислота. Во всех частях растения, кроме корней, присутствуют флавоноиды: в листьях и соцветиях - кверцетин, диосмин, лю-теолин; в листьях и плодах - гесперидин; в соцветиях - кемпферол; в плодах - 7 -рутинозид лютеолина. В стеблях и плодах обнаружены антоцианы - цианидины. В свежем соке растения были найдены дубильные вещества, которые не обнаруживаются после высушивания [114].

Известно, что в траве и плодах содержатся фенолкарбоновые кислоты, в частности изоферуловая и кофейная. Сапонины обнаружены в траве, плодах, цветках болиголова пятнистого.

Содержание в сырье болиголова пятнистого целого комплекса биологически активных соединений с различной химической структурой (фенольные соединения, алкалоиды и др.), предполагает широту и многогранность фармакоте-рапевтических эффектов.

1.4. Сведения о биологических свойствах соединений, содержащихся

в болиголове пятнистом Алкалоиды

Алкалоиды в большинстве своем являются ингибиторами митоза. Они широко применяются при опухолях яичка, раке легкого, раке молочной железы, опухолях головы и шеи, меланоме, раке яичников и немелкоклеточном раке легкого [22].

Считается, что именно антимитотическая активность алкалоидов лежит в основе противоопухолевого действия болиголова пятнистого.

К средствам, у которых антимитотическая активность обусловлена преимущественно действием на микротрубочки клеток, относят новую группу алкалоидов — таксаны. В отличие от винкаалкалоидов, тормозящих образование ми-тозного веретена, таксаны, связываясь со свободным тубулином, повышают скорость и степень его полимеризации, стимулируют сборку и стабилизацию сформировавшихся микротрубочек, препятствуют деполимеризации тубулина и распаду микротрубочек. Таксаны нарушают последующее функционирование клетки при митозе (М-фаза) и в интерфазе [90].

Применение болиголова в терапии онкозаболеваний основано на способности алкалоида пиперидинового ряда - кониина замедлять процесс деления клеток [66]. Причем происходит это более мягко, чем у других химических веществ растительного происхождения (у алкалоидов безвременника - колхицина и колхами-на), и не повреждает здоровые клетки [78].

Механизм противоопухолевого действия травы болиголова заключается в следующем - алкалоид кониин в роли сильнейшего антигена, попадая в кровь, провоцирует определенные иммунные реакции (образование плазматических клеток Т-лимфоцитами и макрофагами), вследствие чего происходит образование антител, которые входят в состав иммуноглобулинов. Антитела, уничтожив антиген, одновременно уничтожают и опухолевые клетки во всем организме, причем наиболее эффективно - свободные клетки, которые характерны для лейкозов и метастазирующих опухолей [111].

Известно также, что кониин оказывает подобное никотину действие [102], сокращает изолированный отрезок кишечника и матки морской свинки, вызывает блокирование депрессорной реакции при раздражении блуждающего нерва [160], снижает мышечную чувствительность к ацетилхолину [97].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Булгаков Тимур Вилюрович, 2019 год

Список литературы

1. Арзамасцев, Е.В. Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств / Е.В. Арзамасцев, Т.А. Гуськова, С.С. Ли-берман // Ведомости фармакологического комитета. - 1998. - № 1. - С. 27-32.

2. Ахрем, А.А. Тонкослойная хроматография / А.А. Ахрем, А.И. Кузнецова. - М.: Изд-во «Наука», 1995. - 175 с.

3. Ахметьянова, А.Р. Оценка уровня антиоксидантной активности перспективных дикорастущих и культивируемых лекарственных растений Республики Башкортостан / А.Р.Ахметьянова, Т.В.Булгаков, Э.Х.Галиахметова [и др.] // Медицинский вестник Башкортостана. - 2016. - Т.11, №4 (64). - С. 68-71.

4. Ахметьянова, А.Р. Аминокислотный состав извлечений из лекарственного растительного сырья, полученных различными растворителями / А.Р.Ахметьянова, Р.Р.Файзуллина, Т.В.Булгаков [и др.] // Медицинский вестник Башкортостана. -2016. - Т.11, №5 (65). - С. 64-67.

5. Бандюкова, В.А. Тонкослойная хроматография флавоноидов / В.А.Бандюкова. -Пятигорск, 1977. - 57 с.

6. Бакуридзе, А.Д. Иммуномодуляторы растительного происхождения (обзор) /

A.Д.Бакуридзе // Химико-фармацевтический журнал - № 8 - 1993. - С. 43-47.

7. Балицкий, К.П. Лекарственные растения в терапии злокачественных опухолей / К.П. Балицкий, А.А. Воронцова, А.М. Карпухина. Киев: Здоровье, 1966. - 230 с.

8. Балмуханов, С.Б. Растительные полифенолы как потенциально активные противоопухолевые и радиомодифицирующие соединения / С.Б. Балмуханов, О.К. Набиев // Биохимические аспекты филогении высших растений. М.: Наука, 1981. -125 с.

9. Банникова, Т.А. Краткое руководство по гомеопатии / Т.А.Банникова. - М.: Медицина, 1992. - С. 69.

10. Бандюкова, В.А. Фенолокислоты растений, их эфиры и гликозиды /

B.А.Бандюкова // Химия природных соединений. - 1983.- № 3. - С. 263-273.

11. Барабой, В.А. Растительные фенолы и здоровье человека / В.А.Барабой. - М.: Медицина, 1984. - 160 с.

12. Бейли, Н. Математика в биологии и медицине / Н.Бейли. - М.: Мир, 1970. -326 с.

13. Беленький, М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / М.Л.Беленький. - Ленинград: Мед. лит., - 1963. - 81с.

14. Беликов, В.В. Описание изобретения к авторскому свидетельству «Способ количественного определения флавоноидов в растительном сырье» / В.В. Беликов, Н.Т. Колесник // 1989. - SU 1507394. А1

15. Блажевич, Н.В. Показатели специфического и неспецифического иммунитета при различной обеспеченности крыс витаминами Е / Н.В.Блажевич, К.Д. Плеци-тый, В.Б.Спиричев // Вопросы медицинской химии. - 1981. - № 5. - С. 669-672.

16. Боровиков, В.П. Статистический анализ и обработка данных в среде Windows /

B.П. Боровиков, И.П. Боровиков. - М.: Информационно-издательский дом Фи-линъ, 1997. - 608 с.

17. Булгаков, Т.В. Исследование полисахаридов травы болиголова пятнистого Conium maculatum L./ Т.В.Булгаков, Н.В.Кудашкина, С.Р. Хасанова и [др.] // Традиционная медицина. - 2015. - Т.43, № 4. - С.56-59.

18. Булгаков, Т.В. Фитохимическое изучение антоцианов в траве болиголова пятнистого флоры Башкортостана / Т.В.Булгаков, Н.В.Кудашкина // Вестник молодых ученых Республики Башкортостан, №1. - Уфа, 2012. - С. 43-47.

19. Булгаков, Т.В. Анатомическая характеристика листьев болиголова пятнистого флоры Башкортостана / Т.В.Булгаков // Вестник Пермской государственной академии, №4. - Пермь, 2007. - С. 284-287.

20. Булгаков, Т.В. Фитохимическое исследование травы болиголова пятнистого Conium maculatum L / Т.В.Булгаков // Материалы XII научно-практической конференции молодых ученых и студентов ТГМУ имени Абуали ибни Сино с международным участием, посвященной году молодежи Душанбе 28 апреля 2017 г. -

C.288.

21. Булгаков, Т.В. Биологические свойства болиголова пятнистого / Т.В.Булгаков, Т.Р.Низамутдинов, А.В.Пушкарев, [и др.]. // «Современные аспекты медицины и

фармации - 2013» // Всеукраинск. научно-практическая конф. молодых ученых и студентов с междунар.участ. - Запорожье, 2013. - С. 203.

22. Бычков, М.Б. Мелкоклеточный рак легкого: некоторые итоги и перспективы / М.Б.Бычков // Материалы третьей ежегодной рос.онколог. конф. - Спб., 1999. - С. 33-36.

23. Васильченко, Е.А. Регулирующее влияние флавоноидов на обменные процессы / Е.А.Васильченко // Фармакология: состояния и перспективы исследований. 16 съезд фармакологов, Украинская ССР 25-26 сент. - Харьков, 1990. - 45 с.

24. Ветров, П.П. Определение содержания липофильных веществ и суммы каро-тиноидов в растительном сырье / П.П. Ветров, С.В. Гарная // Химико-фармацевтический журнал. - 1989. - №3. - С. 34-38.

25. Волосянко, М.И. Традиционные и естественные методы предупреждения и лечения рака / М.И.Волосянко. - М.: Аквариум, 1994 - 688 с.

26. Ворошилов, В.Н. Поиски нового лекарственного сырья / В.Н.Ворошилов. -М.: Сельхозгиз, 1941. - С. 256.

27. Вульф, Е.В. Мировые ресурсы полезных растений / Е.В.Вульф, О.Ф.Малеева. -Л.: Наука, 1969. - 568 с.

28. Галиахметова, Э.Х. Изучение качественного состава листьев лимонника китайского и травы болиголова пятнистого методом ВЭЖХ в сочетании с масс-спектрометрией / Э.Х.Галиахметова, Т.В.Булгаков, С.Р.Хасанова [и др.] // Традиционная медицина. - 2016. №2 (45). - С.44-47.

29. Гаман, А.В. Определение противоопухолевой активности препаратов растительного происхождения / А.В.Гаман, К.В.Яременко // Проблемы освоения лекарственных ресурсов Сибири и Дальнего Востока. - Новосибирск: СО АМН СССР, 1983. - С.173-181.

30. Генри, Т.А. Химия растительных алкалоидов / Под ред. В.М. Родионова и Н.С. Вульфсона. Пер. с англ. - М.: Государственнное издательство химической литературы, 1956. - 904 с.

31. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комиссаренко, С.Е. Дмитрук. - Новосибирск: Наука, 1990. - 333 с.

32. Гергардт, А. Гомеопатия, практическое руководство / А. Гергардт. - М.: «Двойная звезда», 1993. - 69 с.

33. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. - М.: Бином, 1999. -459 с.

34. Гольдберг, Е.Д., Дыгай, А.М., Шахов, В.П. Методы культуры ткани в гематологии / Е.Д. Гольдберг, А.М. Дыгай, В.П. Шахов. - Томск: Изд-во Том. гос. ун-та, 1992. - 264 с.

35. Гончаров, А.И. Исследование растительного полисахаридного комплекса / А.И. Гончаров, Г.И. Исанова, Л.И. Халеева // Актуальные вопросы поиска и технологии лекарств. - Харьков, 1981. - 238 с.

36. Горовой, П.Г. Зонтичные Приморья и Приамурья. Систематический обзор, географическое распространение. Количественный химический состав / П.Г.Горовой. - М.; Л.: Наука, 1966. - 296 с.

37. ГОСТ 6077-80. Сырье лекарственное растительное. Упаковка, маркировка, транспортирование и хранение, 1999.

38. Государственная фармакопея СССР, 11-е изд. - Вып.1. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. - М.: Медицина, 1987. - 336 с.

39. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье // МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1989. -400 с.

40. Государственная фармакопея Российской Федерации: ГФ. Ч. 1. - 12 изд. -Москва: Науч. центр экспертизы средств мед. применения, 2008. - 704 с.

41. Государственная фармакопея Российской Федерации. Режим доступа: http: // pharmacopoeia. ru/ gosudarstvennaya—farmakopeya-XIII-onlrne-gf- 13-online/.

42. Гранникова, Т.А. Краткое руководство по гомеопатии / Т.А. Гранникова. - М.: «Медицина», 1992. - 69 с.

43. Грибель, Н.В. Противометастатический эффект подорожника, полыни, алоэ, почек березы, бефунгина / Н.В.Грибель // Актуальные проблемы фармакологии и поиска новых лекарственных препаратов. - Томск, 1984. - Т.1. - С. 119-124.

44. Гринкевич, Н.И. Химический анализ лекарственных растений / Под ред. проф. Н.И. Гринкевич, доц. Л.Н. Сафронич. - М.: Высшая школа. 1974. - 74 с.

45. Гусынин, И.А. Токсикология ядовитых растений. Фитотоксикология / И.А.Гусынин. - М.: Сельхозиздат, 1947. - 264 с.

46 Давыдов, М.И. Энциклопедия клинической онкологии / М.И.Давыдов. - М.: РЛС-2004. - 1536 с.

47. Данилец, М.Г., Гурьев, А.М., Бельская, Н.В. Макрофаги как фармакологическая мишень для регуляции баланса Th1/Th2 / М.Г. Данилец, А.М. Гурьев, Н.В.Бельская [и др.] // Бюлл. эксперим. биол. и медицины. - 2008. Прил. № 2. - С. 63-68.

48. Данилец, М.Г., Гурьев, А.М., Бельская, Н.В. Влияние растительных полисахаридов на NO-синтазу и аргиназу макрофагов мыши / М.Г. Данилец, А.М. Гурьев, Н.В.Бельская [и др.] // Вестник Уральской медицинской академической науки. -2009. - № 2 (25). - С. 49-50.

49. Данилец, М.Г., Бельский, Ю.П., Гурьев, А.М. Влияние полисахаридов из растительного сырья на Th1 -зависимый иммунный ответ (скрининговое исследование) / М.Г. Данилец, Ю.П. Бельский, А.М. Гурьев [и др.] // «Экспериментальная и клиническая фармакология». - 2010. - Том 73. - № 6. - С. 19-22.

50. Даргаева, Т.Д. Изучение фенольных соединений и элементного состава травы фиалки двуцветковой (Viola biflora L.), произрастающей в Восточной Сибири / Т.Д. Даргаева, О.П. Сайбель, А.М. Мартынов [и др.] // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2009. - № 4. - С.58-60.

51. Денакосидзе, Д.Е. Биологическая роль, распространение и химическое строение тритепеновых гликозидов / Д.Е. Денакосидзе, В.А. Чирва, Т.В. Сергиенко. -Тбилиси, 1984. - 349 с.

52. Денисова, М.Н. Определение содержания дубильных веществ в цветках и плодах некоторых представителей рода Crataegus L. / М.Н.Денисова // Ресурсоведче-

ское и фитохимическое изучение лекарственной флоры СССР: науч. тр. - М., 1991. - Т. 29. - С. 136-144.

53. Егуткин, Н.Л. Определение содержания йода в ламинарии и бальзаме «Ламинария с травами» производства ООО «Травы Башкирии» / Н.Л. Егуткин, Н.Л. Груздева, Р.Г. Фархутдинов // Здравоохранение Башкортостана. - 2003. - № 4. Спец. выпуск. - С. 57-64.

54. Еленевский, А.Г., Соловьева М.П., Тихомиров В.Н. Ботаника. Систематика высших или наземных растений. Издание 3-е. - М.: Академия, 2004. - 432 с. 55.Зайцева, М.М. Влияние зверобоя обыкновенного на ЖКТ / М.М.Зайцева // Здравоохранение Беларуси. - 1966. -№ 5. - С. 23-25.

56. Запрометов, М.Н. Основы биохимии фенольных соединений / М.Н.Запрометов. - . М.: Высшая школа, 1974. - 214 с.

57. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения и методы их исследования / М.Н.Запрометов // Биохимические методы в физиологии растений. - М.: Наука, 1971. - С. 185-207.

58. Заркуа, Т.Г. Количественное определение тритерпеновых сапонинов в многокомпонентной растительной композиции / Т.Г. Заркуа, Д.М. Попов, А.Д. Баку-ридзе // Современные аспекты изучения лекарственных растений: научные труды ВНИИФ. - Москва, 1995. - Т. 34. - С.177-180.

59. Зарубина, И.В. Антиоксидантная активность эфиромасличных растений в модельных системах in vitro / И.В. Зарубина, О.П. Миронова, А.В. Смирнов // Вопросы биологической медицины и фармацевтической химии. - 2001.- №1. - С.51-

60.

60. Зданевич, Е.В. Conium maculatum. Химический состав, полезные и вредные свойства / Е.В. Зданевич, Г.А. Белодубровская // Растительные ресурсы. Вып.2. -Т.33.- 1997. - С. 108-113.

61. Зданевич, Е.В. Стандартизация сырья болиголова пятнистого / Е.В. Зданевич, Г.А. Белодубровская // Современные состояния и перспективы научных исследований в области фармации. Самара, 1996. - С.130.

62.Зданевич, Е.В. Изучение видового состава растений, используемых в го-

меопатии, из числа официнальных / Е.В. Зданевич, Г.А. Белодубровская // Традиционная медицина: теоретические и практические аспекты: Материалы II научного конгресса. - Чебоксары, 1996. - С. 73.

63. Зеликман, Т.Я. Гомеопатия в системе фармакотерапии / Т.Я. Зеликман, С.И. Ялкут. - Киев: Здоровье, 1994. - 79 с.

64. Золотницкая, С.Я. Лекарственные ресурсы флоры Армении / С.Я.Золотницкая. - Ереван: Из-во АН Армянской ССР, 1965. Т. 2. - 372 с.

65.Золотов, Ю.А. Очерки аналитической химии/ Ю.А. Золотов. - М., 1977. - 368 с.

66. Зориков, П.С. Ядовитые растения леса / П.С. Зориков. - Владивосток: Даль-наука, 2005. - 120 с.

67. Измеров Н.Ф. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии / Н.Ф. Измеров, И.В. Санодский, К.К. Сидоров. - М., 1977. - 240 с.

68. Каприн, А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В. Злокачественные новообразования в России в 2015 году / А.Д.Каприн, В.В.Старинский, Г.В.Петрова. - М.: МНИОИ им. П.А. Герцена, филиал ФГБУ «НМИРЦ» Минздрава России. - 2017. -250 с.

69. Клышев, Л.К. Флавоноиды растений / Л.К. Клышев, В.А. Бандюкова, Л.С. Алюшина. - Алма-Ата: Наука, 1978. - 220 с.

70. Ковалев, В.Н. Практикум по фармакогнозии: учеб. пособие для студ. вузов / В.Н. Ковалев [и др.]. - Харьков: Изд-во НФаУ; Золотые страницы; МТК-Книга. -2004. - 512 с.

71. Коломиец, А.А., Выделение комплекса полисахаридов каштана конского и изучение его химического состава / А.А. Коломиец, В.А. Соболева, О.С. Даньке-вич // Провизор. - 2009. - № 16 - С. 20-25.

72. Крамаренко, В.Ф. Токсикологическая химия / В.Ф.Крамаренко. - Киев: Выща школа. - 1989. - 447 с.

73. Краснов, Е.А. Выделение и анализ природных биологически активных веществ / Е.А. Краснов, Т.П. Березовская, Н.В. Алексеюк. - Томск, 1987. - 185 с.

74. Кретович, В.Л. Биохимия растений / В.Л.Кретович. - М.: Высшая школа. -1986. - 503с.

75. Кудашкина, Н.В. Фитохимический анализ: учеб. пособие по фармакогнозии для студентов. / Н.В. Кудашкина, С.Р. Хасанова, С.А. Мещерякова. - Уфа: Издательство ГОУ ВПО БГМУ РОСЗДРАВа, 2007. - 281 с.

76. Курбонов, А.Р. Зонтичные (Umbelliferae) Северного Таджикистана (Курамин-ский хребет, Моголтау, долина Сырдарьи): дис...кандидата биол.н.: 03.02.01 / Курбонов А.Р. - Душанбе, 2017. - 255 с.

77. Кузнецова, Г.А. Природные кумарины и фурокумарины / Г.А. Кузнецова. - Л.: Наука, 1967. - 247 с.

78. Лагутина, Т.В. Лечение травами онкологических заболеваний / Т.В. Лагутина.

- М.: Изд-во «Рипол Классик». - 2010. - 64 с.

79. Ладыгина, Е.Я. Химический анализ лекарственных растений / Е.Я. Ладыгина, Л.Н. Сафронич, В.Э. Отряшенкова [и др.]. М.: Высшая школа. -1983. - 176 с.

80. Лазарев, А.Ф. Влияние смесей белковых композитарных сухих (СБКС) Нут-ринор Дисона показатели белкового обмена у больных с опухолями головы и шеи / А.Ф.Лазарев, О.М.Галкина, И.В.Вихлянов // Сибирский онкологический журнал.

- 2012. - № 1. - С.91-92.

81. Лазарева, Д.Н. Стимуляторы иммунитета / Д.Н. Лазарева, Е.Н. Алехин. - М.: Медицина, 1985. - С. 3-14.

82. Ларькина, М.С. Изучение динамики накопления фенолкарбоновых кислот в надземной части василька шероховатого / М.С. Ларькина, Т.В. Кадырова, Е.В. Ермилова // Химия растительного сырья. - 2008. - №3. - С. 71-74.

83. Лемина, Е.Ю. Центральный компонент в механизме болеутоляющего действия нестероидных противовоспалительных средств / Е.Ю. Лемина, В.В. Чурюканов // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 1995. Т. 58. - № 4. - С. 59-62.

84. Лидак, М.Ю. Витамин А и синтетические ретиноиды в иммунологии и онкологии / М.Ю. Лидак, К.Д. Плецитый. - Рига: Зинатене. - 1984. - 127 с.

85. Ловкова М.Я. Биосинтез и метаболизм алкалоидов в растениях / М.Я.Ловкова. -. М.: Наука, 1981 - 171 с.

86. Лукьянчук, В.Д. Антигипоксанты: состояние и перспективы / В.Д. Лукъянчук, Л.В. Савченкова // Экспериментальная и клиническая фармакология. — 1998. - № 4. - С. 72-79.

87. Макаренко, Н.Г. Антимикробная активность эфирных масел некоторых лекарственных растений / Н.Г.Макаренко //Изв.АН СССР. Сиб.отд-ние. Сер.биол.наук. 1970. - № 5, вып. 1. - С. 85-89.

88. Македонов, Г.П. Способ стимулирования апоптоза / Г.П. Македонов, Л.В. Цховребова. 2008 - Патент на изобретение №2340349.

89. Максютина, Н.П. Поиск противовоспалительных средств и иммуностимуляторов среди растительных полифенолов, терпеноидов, полисахаридов / Н.П. Максютина, А.П. Дуплищева [и др.]. // Повышение качества лекарственной помощи амбулаторным и стационарным больным на основе ускорения научно- технического прогресса в свете решений 27-го съезда. - Казань. - 1986. - 428 с.

90. Машковский, М.Д. Лекарственные средства / М.Д.Машковский. - М.: Новая волна, 2000. - т.2. - С. 431-434.

91. Мелкумян, И. С. Зонтичные из флоры Армении как источник физиологически активных веществ / И. С. Мелкумян, А.А.Мурадян, Н.Л.Григорян //Тр.Бот.ин -та АН Арм.ССР. -1970. - Т.17. - С. 129-135.

92. Минаева, В.Г. Лекарственные растения Сибири / В.Г.Минаева. - Издание 4-ое. Новосибирск, 1990. - 272 с.

93. Муравьева, Д.А. Фармакогнозия / Д.А.Муравьева. - М.: Медицина, 1981. - 656 с.

94. Мурадян, А.А. Виды зонтичных флоры Армении как продуценты кумарино-вых соединений / А.А.Мурадян // Тр. Бот. ин-та АН Арм. ССР. - 1970. - Т. XVII. - С. 136-144.

95. Мурадян А.А. Некоторые представители сем. Ар1аееае флоры Армении как источники кумариновых соединений // Автореф. дисс. на соискание ученой степени кандидата биологических наук (094). Ереван, 1971.

96. Нагимова, Г.М. Изучение противовоспалительной активности препаратов болиголова Сотым шаеиШиш Ь. / Г.М.Нагимова, Н.Н.Макарова, Т.В.Булгаков [и

др.]. // Молодые ученые и фармация XXI века. - Москва, ВИЛАР. - 2014. - С.218-220.

97. Налегатская, А. В. О холинолитических и холиномиметических эффектах ко-ниина / А.В. Налегатская // Фармакология и токсикология. - 1953. - № 2. - С. 1517.

98. Низамутдинов, Т.Р. Изучение биологических свойств настоя и экстракта из болиголова пятнистого (Сотым шаеиШиш Ь.) / Т.Р.Низамутдинов, Т.В.Булгаков, Г.М.Нагимова [и др.]. // Медицинский вестник Башкортостана. - 2013. - № 1 (Приложение). - С. 88-91.

99. Никитин, А.А. Анатомический атлас полезных и некоторых ядовитых растений. // А.А. Никитин, И.А. Панкова. Л.: Наука, 1982. - 768 с.

100. Носаль М.А. Лекарственные растения и способы их применения в народе / М.А. Носаль, И.М. Носаль. Л., 1991. - 240 с.

101. Нэш, Б.Б. Руководство по терапевтической гомеопатии / Б. Б. Нэш. - М.: Атлас. - 1993. - 184 с.

102. Орлов, Б. Н. Ядовитые животные и растения СССР / Б.Н. Орлов, Д. Б Гела-швили, А. К. Ибрагимов. - М.: Высшая школа, 1990. - 273 с.

103. ОСТ 91500.05.001-00. Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения.

104.Остроумова, Т.А. Разнообразие микроморфологии волосков и эмергенцев на плодах зонтичных (ЦтЬе1^егае) и его таксономическое значение / Т.А. Остроумова, М.Г. Пименов, У.А.Украинская // Бот.журнал. - 2010. - т. 95. - № 9. - С. 1219-1231.

105. Остроумова, Т.А. Типы устьиц листьев у представителей семейства Apiaceae / Т.А. Остроумова // Бот.журнал. -1987. - т. 72. - № 11. - С. 1479-1488.

106. Пашкова, Г.В. Ренгенофлуоресцентный анализ молока и основанных на нем продуктов / Г.В. Пашкова // Аналитика и контроль. - 2010. - Т.14, № 1. - С. 4-15.

107. Пименов, М.Г. Исследование зонтичных Закавказья и Крыма на наличие ку-маринов / М.Г.Пименов, В.В.Вандышев, Г.К.Никонов // Лекарственные растения. - 1969. - Т. XV. - С. 126-139.

108. Пименов, М.Г. Зонтичные (ЦГшЬеШГегае) России / М.Г.Пименов, Т.А.Остроумова . - Издательство: Товарищество научных изданий КМК - 2012. - 484 с.

109. Плецитый, К.Д. Иммунитет и витамин А. / К.Д.Плецитый // Вопросы питания. - 1978. - № 2. - С. 39-46.

110. Плецитый, К.Д. Роль аскорбиновой кислоты в регуляции иммунологических реакций / К.Д.Плецитый // Вопросы питания. - 1979. - № 4. - С. 18-27.

111. Попова, Е.В. Автореферат: Фармакологические свойства извлечений из болиголова пятнистого. Томск, 2008.

112. Потанина, О.Г. Оценка доброкачественности лекарственного растительного сырья с учетом диагностически значимых признаков / О.Г. Потанина, И.А. Самы-лина // Фармация. - 2003. - № 4. - С. 12-14.

113. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование. Сем. Rutaceae - Elaeagnaceae. Л.: Наука, 1988. - 357 с.

114. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Т. 3. Семейства БаЬасеае - Ар1асе-ае. М.: Товарищество научных изданий КМК, 2010. - 601 с.

115. Рид, С. Дж.Б. Электронно-зондовый микроанализ / С. Дж.Б. Рид. - М.: Мир, 1979 - 423 с.

116. Рудаков, И.А. Основные пути дальнейшего развития гомеопатии в России / И.А. Рудаков, Л.М. Ильенко // Традиционная медицина: теоретические и практические аспекты. Тезисы докладов научного конгресса 21-23 мая 1996 года, г. Чебоксары. /. - Чебоксары, 1996. - 190 с.

117. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М., 2000. - С. 234.

118. Рыжикова, М.А. Влияние водных извлечений из некоторых лекарственных растений на процессы свободно-радикального окисления. / М.А. Рыжикова [и др.] // Экспериментальная и клиническая фармакология. -1999. - Т.62, № 2. - С. 36-38.

119. Самородова-Бианки, Г.Б. Антоцианы некоторых культурных растений / Г.Б.Самородова-Бианки // Физиология растений. - Т. 9. - Вып.5. - 1962. - 560 с.

120. Самородова-Бианки, Г.Б. Хроматография на бумаге антоцианов и флавонои-дов / Г.Б.Самородова-Бианки // Физиология растения. - Т. 11. - Вып.3. - 1964. -544 с.

121. Самылина, И.А. Фармакогнозия. Атлас. Том 1. Общая часть. Термины и техника микроскопического анализа в фармакогнозии: Учебное пособие. / И.А. Самылина, О.Г. Аносова. - Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2007. - 192 с.

122. Сараф, А.С. Флавоноиды как потенциальные противоаллергические соединения / А.С. Сараф, Э.Т. Оганесян // Химико-фармацевтический журнал. — 1991.-№ 2. - С. 4-8.

123.Сафина, Л.К. О содержании кумаринов в некоторых видах зонтичных юга и юго-востока Казахстана / Л.К. Сафина, Л.Е. Гусак // Тр. Ин-та ботаники АН Каз-ССР. - 1978. - Т 38. - С. 72-76.

124. Семенов, А.А. Природные противоопухолевые соединения / А.А. Семенов. -М.: Медицина, 1979. - 218 с.

125. Сергеев, А.В. Разработка лекарственных средств на основе каротиноидов для коррекции иммунодефицитных состояний / А.В. Сергеев, Б.С. Утемов, С.А. Коростелев [и др.] // Человек и лекарство: тезисы докладов 2-го Российского национального конгресса. - М.: 1995. - С. 143-144.

126. Сирота, Т.В. Способ определения антиоксидантной активности супероксид-дисмутазы и химических соединений / Т.В. Сирота. - Заявка №99103192 (003673), приоритет от 24.02.1999.

127. Скляревский, Л.Я. Ядовитые растения / Л.Я.Скляревский.- М.: Медицина, 1967. - С. 27-30.

128. Соболева, В. А. Выделение комплекса полисахаридов каштана конского и изучение его химического состава / В.А. Соболева, В.Н. Чушенко, А.А. Коломи-ец, О.С. Данькевич // Провизор. - 2009. - № 16. - С.21-24.

129. Соколов, С.Н. Справочник по лекарственным растениям (Фитотерапия) / С.Н. Соколов, И.Г. Замотаев. М.: Медицина, 1988. - 458 с.

130. Степаненко, Б. Н. Химия и биохимия углеводов (полисахариды) / Б.Н. Степа-ненко. — М.: Высш. школа, 1978. - 256 с.

131. Стефанов, О.В. Мiжнароднi стандарта експериментального вивчення безпеч-ност речовин / О.В. Стефанов, О.1. Коваленко // Совр. пробл. токсикол. - 1998. -№ 1. - С. 12-14.

132. Тахтаджян, А.Л. Система магнолиофитов / А.Л.Тахтаджян. - Л.: Наука, 1987. - 439 с.

133. Трещалина, Е.М. Противоопухолевая активность веществ природного происхождения / Е. М.Трещалина. - М.: Медицина, 2005. - С. 53-54.

134. Тринус, Ф.П. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению нестероидных противовоспалительных фармакологических веществ / Ф.П.Тринус, Б.М.Клебанов, В.И.Кондратюк. - М.: Минздрав СССР, 1983. - 16 с.

135. Трофимова, С.В. Изучение компонентного состав эфирных масел листьев Crataegus sanguinea Ра11.и травы Conium maculatum L. из флоры Башкортостана / С.В. Трофимова, Т. В.Булгаков, С.Р. Хасанова [и др.]. // Башкирский химический журнал. - 2013. - Т.21, № 2. - С. 104 - 107.

136. Турищев, С. Н. Основы фитотерапии / С.Н.Турищев. - М., 1999. - 128 с.

137. Турова, А.Д. Биологическая активность полисахаридов растительного происхождения. / А.Д. Турова, А.С. Гладких // Фармакология и токсикология, 1965. - Т. 28. - с. 498.

138. Фаррингтон, Э.А. Гомеопатическая клиническая фармакология. Киев: "Колос" и "ИТЭМ", 1992. - 600 с.

139. Фигуровский, Н.Л. Ассортимент лекарственных растений в русских фарма-копеях XVIII и XIX вв. / Н.Л. Фигуровский, А.В. Голованова // Аптечное дело. -1959. - Т.ШП. - № 5. - С. 76-81.

140. Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению фармакологических веществ / Р.У.Хабриев - Медицина, 2005. - 832 с.

141. Хайс, И.М. Хроматография на бумаге / Под ред. И.М. Хайс, К.М. Мацек. -М.: Изд-во иностр. лит-ры, 1962. - 851 с.

142. Харборн, Дж. Б. Фенольные соединения Хроматография: практическое приложение метода / Дж.Б. Харборн. - М.: 1986. - С. 242-276.

143. Харкевич, Д.А. Фармакология / Д.А.Харкевич. - М.: «ГЭОТАР медицина», 1999. - 664 с.

144. Хасанова, С.Р. Определение содержания йода в некоторых дикорастущих и культивируемых лекарственных растениях Республики Башкортостан и в сборах / С.Р. Хасанова, Н.В. Кудашкина С.В. Трофимова [и др.]// Традиционная медицина. - 2011. - №5. - С. 294 - 297.

145. Хасанова, С.Р. Исследование аминокислотного состава некоторых дикорастущих растений из флоры Республики Башкортостан / С.Р.Хасанова, Н.В.Кудашкина, С.В. Трофимова [и др.]. // Башкирский химический журнал. -2013. - Т.20, №1. - С. 108-110.

146. Хасанова, С.Р. Экспериментально-теоретическое обоснование создания и стандартизации лекарственных растительных препаратов с антиоксидантной активностью: дис...доктора фарм.н.: 14.04.02 / Хасанова С.Р. - Самара, 2016. - 362 с.

147. Хмелевский Ю.В. Витамины и возраст человека / Ю.В. Хмелевский, Н.Б. По-березина. - Киев: Наукова думка, 1990. - 165 с.

148. Ходжиматов, М. Содержание и качественный состав биологически активных веществ в Conium maculatum L. / М. Ходжиматов, С. Бобохаджаева. // Известия АН Таджикской ССР, отд. Биол.наук. - 1976. № 2. - с. 81-86.

149. Шаретт, Ж. Практическое гомеопатическое лекарствоведение / Ж.Шаретт. Пер. с франц. - СПб.: Политехника, 1992. - 270 с.

150. Швайкова, М.Д. Токсикологическая химия / М.Д.Швайкова. - М.: Медицина, 1975. - 376 с.

151. Шишкин, Б.К. Род Conium L. - Омег, Болиголов / Б.К.Шишкин. - Флора СССР. - М.; Л. - Изд-во АН СССР, 1950. - Т. 16. - с. 225-226.

152. Шматков, Д.А. Определение суммы фенолкарбоновых кислот в корнях лопуха большого (Arctium lappa L.) / Д.А.Шматков // Фармация на современном этапе - проблемы и достижения: науч.тр. - М., 2000. - Т. 39. - Ч. II. - С. 174-178.

153. Шретер, Г.К. Лекарственные растения и растительное сырье, включенные в отечественные фармакопеи / Г.К.Шретер. - М.: Медицина, 1972. - 119 с.

154. Штигеле А. Гомеопатическое лекарствоведение / Пер. с нем. М.: Терра, 1994. - 430 с.

155. Чернов, Ю. Н. Полифенольные соединения: структура, свойства и прикладные аспекты применения / Ю.Н.Чернов, А.В.Бузлама, Ю.М. Дронова // Фармате-ка. 2004. - № 8. - С. 43-48.

156. Яковлев, А. И. Сравнительная характеристика полисахаридных составов и иммунобиологических свойств водорастворимых полисахаридов соцветий и листьев мать-и-мачехи / А. И. Яковлев, А.И. Конопля // Вторая респ.конф. по мед.бот. - Киев: Наук.думка, 1988. - с. 328-329.

157. Яковлева, Е.А. Использование растительных гетерополисахаридов для коррекции иммунного ответа при действии на организм вибрации / Е.А. Яковлева, А.Н. Яковлев, Л.Г. Прокопенко // Фармакология и токсикология. - 1971. Т. 53. - № 6. - с. 43.

158. Bitter, T., Muir, H.M. A modified uronic acid carbazole reaction / T. Bitter, H.M. Muir // Anal. Biochem. - 1962. - Vol. 4. - pp. 330-334.

159. Bloch, Enid. «Hemlock Poisoning and the Death of Socrates: Did Plato Tell the Truth?». Journal of the International Plato Society (1). — 2001.

160. Bowman, W.C., Sanghvi, I.S. Pharmacological action of hemlook (Conium macu-latum) alkaloids / W.C. Bowman, I.S. Sanghvi // J. Pharmacy and Pharmacol. 1963. -Vol. 15. - pp. 1-25.

161. Cheeke, P.R. Piperidine Alkaloids of Poison Hemlock (Conium maculatum) / P.R. Cheeke // Toxicants of plant origin: Alkaloids. - Vol. I. - Florida, 1989.- pp. 110-132.

162. Cheng, A., Wan, F., Wang, J. Macrophage immunomodulatory activity of polysaccharides isolated from Glycyrrhiza uralensis fish / A. Cheng, F. Wan, J. Wang. et al. // Int. Immunopharmacol. - 2008. - Vol. 8.- № 1. - pp. 43-50.

163. Clarks isolation and identification of druds / Second Edition. Edited by A.C.Moffatt. Pharmaceutical press: London, 1986. - T. 1. - р. 508.

164. Gorbunova, V.A., Bychkov M.B., Perevodchikova N. I. et al. - Recent advancer in chemotherapy - Proc. Of the 18 Int. Congress of Chemotherapy - Stockholm - 1993 - pp. 991-992.

165. Green, L.C., Wagner, D.A., Glogowski, J. Analysis of nitrate, nitrite and [15N] nitrite in biological fluids / L.C. Green, D.A. Wagner, J. Glogowski et al. // Anal. Bio-chem. - 1982. - Vol. 126. - pp. 131-143.

166. Cromwell, B.T. The separation, micro-estimation and distribution of the alkaloids of Hemlocr (Conium maculatum L) // Biochem. J. - 1956. - Vol. 64. - pp. 259-271.

167. Fairbairn, J.M., Ali, A.A.E.R. The alkaloids of Hemlock (Conium maculatum L.) // Phytochemistry. - 1968. - Vol. 7 - № 9. - pp. 1596 - 1597.

168. Fairbairn, J.M., Ali, A.A.E.R. The alkaloids of Hemlock (Conium maculatum L.) -IV. Isotopic studies of the bound forms of alkaloids in the plant // Phytochemistry. -1969. - Vol.7 - № 9. - pp. 1599 - 1603.

170. Friedman, H. S., Petros, W. P., Friedman, A. H. Irinotecan therapy in adults with recurrent or progressive malignant glioma / H. S. Friedman, W. P. Petros, A. H. Friedman et al. // J. Clin. Oncol. - 1999. - Vol. 17. - pp. 1516-1525.

171. Kayser, O., Masihi, K.N., Kiderlen, A.F. Natural products and synthetic compounds as immunomodulators / O. Kayser, K.N. Masihi, A.F. Kiderlen // Expert Rev. Anti. Infect. 2003. № 1. pp. 319-35.

172. Lee, S.T., Green, B.T., Welch, K.D. Stereoselective potencies and relative toxicities of coniine enantiomers / S.T. Lee, B.T. Green, K.D. Welch et al. // Chem. Res. Toxicol. - 2008. - Vol. 21, Is. 10. - pp. 2061-2064.

173. Mondal, J., Panigrahi, A. K., Khuda-Bukhsh A.R. Anticancer potential Conium maculatum extracxt against cancer cells in vitro: Drag-DNA interaction and its ability to induse apoptosis through ROS generation // J. Mondal, A. K. Panigrahi, A.R. Khuda-Bukhsh // Pharmacogn. Mag. - 2014. - Vol. 10, Is. 39. - pp. 524-533.

174. Paulsen, B.S. Plant polysaccharides with immunostimulatory activities / B.S. Paulsen // Curr. Org. Chem. - 2001. - Vol. 5. - pp. 939-950.

175. Ramon, G. (1926). Procedes pour accroitre la production des antitoxins. Ann. Inst. Pasteur (Paris). 40, 1 -10.

176. Rizzi, D. Clinical spectrum of accidental hemlock poisoning: neurotoxic manifestations rhabdomyolysis and acute tubular necrosis / D. Rizzi, C.Basile, A.Di Maggio et al. // Nehprol. Dial.Transpl. - 1991.- Vol. 6. Is.12. - pp. 939-943.

177. Schepetkin, I.A., Quinn, M.T. Botanical polysaccharides: macrophage immunomodulation and therapeutic potential / I.A. Schepetkin, M.T. Quinn // Int. Im-munopharmacol. - 2006. - Vol. 6. - pp. 317-333.

178. Stingele, F., Corthesy, B., Kusy, N. Zwitterionic polysaccharides stimulate T cells with no preferential V{beta} usage and promote anergy, resulting in protection against experimental abscess formation / F. Stingele, B. Corthesy, N. Kusy et al. // J. Immunol. - 2004. - Vol. 172. - pp. 1483-1490.

179. Teratology. // JuL - 48(1), 1993.-p. 59-64.

180. Torel, J., Chillard, J., Gillard, P. Antioxidant activity of flavonoids and reactivity with peroxyd radical / J. Torel, J. Chiliard, P. Gillard // Phytochemistry. 1986. - Vol. 25. - pp. 338-385.

181. Wasser, S.P. Medicinal mushrooms as a source of anti-tumor and Immunomodulating polysaccharides / S.P. Wasser // Appl. Microbiol. Biotechnol. -2002. - Vol. 60. - pp. 258-274.

Приложения

Приложение 1

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

УВЕРЖДАЮ

_Ф.И.О.

« » г.

Государственный стандарт качества лекарственного сырья Фармакопейная статья Башкирский государственный медицинский университет

^пИ maculati ИегЬа

Болиголова пятнистого Трава

ФС 42-ХХХ-ХХХХХ-ХХ Вводится впервые

Срок введения установлен

с «_»_20_г.

до «_»_20 г.

ИЗДАНИЕ ОФИЦИАЛЬНОЕ ПЕРЕПЕЧАТКА ВОСПРЕЩЕНА

ФС 42- с.2

Показатели каче- Методы испыта- Нормы

ства ния

1 2 3

Внешние признаки Визуальный (с помо- Соответствует ФС

щью микроскопа и лу-

пы), органолептиче-

ский, ГФ XIII

Микроскопия ГФ XIII Соответствует ФС

Качественные реакции Микрокристаллическая Соответствует ФС

реакция с реактивом

Драгендорфа

Снятие спектра при

длине волны 270 нм

Числовые показатели:

Содержание алкалоидов Спектрофотометрия Не менее 0,2%

Содержание полисахари- Гравиметрия Не менее 13%

дов Микродиагностический не менее 12%

ДЗП ГФ XIII не более 1 0%

Влажность ГФ XIII не более 1 2%

Золы общей ГФ XIII не более 1,0%

Органическая примесь ГФ ХШ не более 0,5%

Минеральная примесь ГФ XIII

Измельченность: не более 10%

частиц, не проходящих

сквозь сито ё=7 мм не более 4%

частиц, проходящих

сквозь сито ё=0,5 мм

Микробиологическая чистота ГФ XII, ст.32 Соответствует категории 4А

Упаковка Цельное сырье упаковывается по 15 кг в мешки бумажные многослойные; в мешки полипропиленовые из пропилена окрашенного; по 20 кг в мешки тканевые продуктовые.

Маркировка Соответствует ФС

Транспортирование

Хранение В сухом, защищенном от света месте, при температуре не выше 25°С

Срок годности 3 года

Внешние признаки. Цельное сырье. Смесь цельных или частично измельченных листьев, стеблей и соцветий. Стебли мелкоборздчатые, с сизым налетом в нижней и средней частях и с красно-бурыми пятнами. Листья влагалищные с широкопленчатыми черешками, триждыперистые. Листочки 1-го и 2-го порядка на черешках, листочки 3-го порядка сидячие, продолговато-яйцевидные, глубоко-рассеченные на яйцевидно-ланцетовидные заостренные дольки с 1-3 парами острых зубцов, направленных к верхушкам долек. Соцветие шишковидно- метельчатое. Зонтики многочисленные 5-20 см в поперечнике, боковые зонтики не превышают центрального. Лучи зонтика голые или по внутренней стороне редко шероховатые. Обвертка из ланцентных длиннозаостренных, снаружи мелкошероховатых и отвороченных книзу листочков, по краям узкопленчатых. Основание листочков обвертки и оснований лучей зонтика опушено. Зонтики 1-1,5

см длиной в поперечнике с 15-20 голыми или шероховатыми лучами. Обверточка

166

односторонняя из 2-3 широколанцетных в основании сросшихся листочков. Запах неприятный

Измельченное сырье. Кусочки листьев, стеблей и соцветий, проходящее сквозь сито с отверстиями 7 мм. Запах неприятный.

Микроскопия травы. При рассмотрении травы установлено, что клетки верхнего эпидермиса листьев слабоизвилистые, округлые, большей частью изодиа-метрические с тонкими стенками и тонкоскладчатой кутикулой. Устьичный аппарат с преобладанием аномоцитного типа, клетки эпидермиса зубцов листа, мелкие, есть небольшие погруженные устьица. Клетки нижнего эпидермиса извилистые, вокруг устьиц кутикула с радиальной складчатостью. Клетки эпидермиса зубцов листа крупные, разной формы. Встречаются вместилища и головчатые волоски, а также канальцы, содержащие эфирные масла. При окрашивании раствором судана III содержимое вместилищ, волосков и канальцев окрашивается в оранжевый цвет. Клетки эпидермиса стебля продольно вытянутые, могут быть изодиамет-ричными. В стебле имеются вертикальные секреторные каналы. Клетки эпидермиса цветков болиголова пятнистого имеют разную форму, от округлых, изодиа-метричных до вытянутых. В толще эпидермы видны секреторные каналы.

Качественные реакции

25,0 травы болиголова пятнистого поместить в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 300 мл, подщелочить 20% раствором карбоната натрия. Производить перегонку под вакуумом на ротационном испарителе, собирая дистиллят в 5% раствор хлористоводородной кислоты. Дистиллят подщелочить и трехкратно извлечь эфиром сумму оснований алкалоидов. Извлечение концентрировать. На предметное стекло нанести каплю раствора, эфир испарить при комнатной температуре, остаток растворить в 1 капле 0,01н раствора хлористоводородной кислоты и нанести каплю раствора иодида висмута в иодиде калия (реактив Драгендорфа). Предметное стекло поместить во влажную камеру, через некоторое время, используя микроскоп, наблюдать оранжевые кристаллы в виде ромбов и параллелограммов, сростки из них, характерные для йод-висмутата ко-ниина.

Далее полученное эфирное извлечение подвергают отгонке, остаток растворяют в 0,2н растворе серной кислоты. Измеряют оптическую плотность на спектрофотометре СФ-46 при 240-285 нм. Должен наблюдаться максимум поглощения при 270 нм (рис.1.).

0.44,-.-.-.-.-1-.-■-.-.-1-.-.-.-.-

0.38 -■-■-■-■-1-■-■-■-■-1-■-■-■-■-

260.00 270.00 20О .ОО 290.00

н м.

Рис.1. УФ-спектр извлечения из травы кониина Числовые показатели. Цельное сырье. Содержание алкалоидов - не менее 0,2%, содержание полисахаридов - не менее 13%; ДЗП - не менее 12%, влажность не более 10%; зола общая - не более 12%; содержание примесей органических - не более 1% и минеральных - не более 0,5%; содержание частиц, не проходящих сквозь сито d=7 мм - не более 10% и частиц, проходящих сквозь сито d=0,5 мм -не более 4%.

Измельченное сырье. Содержание алкалоидов - не менее 0,2%, содержание полисахаридов - не менее 13%; ДЗП - не менее 12%, влажность не более 10%; зола общая - не более 1 2%; содержание примесей органических - не более 1 % и минеральных - не более 0,5%; содержание частиц, не проходящих сквозь сито d=7

мм - не более 10% и частиц, проходящих сквозь сито d=0,5 мм - не более 4%.

168

Количественное определение. Аналитическую пробу травы болиголова пятнистого измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 1 мм. Около 0,5 г (точная навеска) сырья помещают в колбу термостойкого стекла со шлифом вместимостью 200-250 мл, прибавляют 50 мл 95 % этилового спирта, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 часа. Затем полученное извлечение осторожно фильтруют через бумажный складчатый фильтр в мерную колбу на 50 мл, избегая попадания частиц сырья в воронку. Полученное извлечение доводят в мерной колбе до 50 мл (раствор А).

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2 мл раствора А и доводят раствор до метки 95% этиловым спиртом (раствор В). Измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 270 нм в кювете толщиной слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют 95 % раствор этилового спирта.

Содержание суммы алкалоидов (Х) в пересчете на кониин и абсолютно сухое сырье (в %) вычисляют по формуле:

Бх50х25х100

Х= , где

Ех т х 2х (100 -

Э - оптическая плотность анализируемого раствора (раствор В); Е - удельный показатель поглощения кониина, равный 3025; т - навеска сырья в граммах; W - потеря в массе сырья при высушивании, %.

Содержание алкалоидов в траве болиголова пятнистого: не менее 0,2%.

Количественное определение. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 10 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 100 мл воды, колбу присоединяют к обратному холодильнику и экстрагируют трижды на кипящей водяной бане при перемешивании в течение 15 минут. Извлечения каждый раз фильтруют через тканевый фильтр и

169

объединяют. Водные извлечения центрифугируют с частотой вращения 5000 оборотов в минуту в течение 10 минут и декантируют в мерную колбу вместимостью 500 мл через 5 слоев марли, вложенной в стеклянную воронку диаметром 66 мм, предварительно смоченной водой. Фильтры промывают водой и доводят объем раствора до метки (раствор А). 25 мл раствора А помещают в центрифужную пробирку, прибавляют 75 мл 95% спирта, перемешивают, подогревают на водяной бане при 60°С в течение 5 минут. Через 30 минут содержимое центрифугируют с частотой вращения 5000 оборотов в минуту в течение 30 минут. Надоса-дочную жидкость фильтруют под вакуумом при остаточном давлении 13-16 кПА через высушенный до постоянной массы при температуре 100-105°С стеклянный фильтр ПОР-16 диаметром 40 мм. Затем осадок количественно переносят на тот же фильтр и промывают 15 мл смеси 95% спирта и воды (3:1). Фильтр с осадком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре 100-105°С до постоянной массы. Содержание полисахаридов в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(М2-М1) • 500 -100 -100 " М • 25 • (100 - м>) , где

М1 - масса фильтра, г;

М2 - масса фильтра с осадком, г;

М - масса сырья, г;

w - потеря в массе при высушивании сырья, %.

Содержание полисахаридов в траве болиголова пятнистого: не менее 13%.

Микробиологическая чистота. Испытания проводят в соответствии со ст.32 ГФ XII «Микробиологическая чистота». Трава болиголова пятнистого соответствуют категории 4А.

Упаковка. Цельное сырье упаковывается согласно ОФС. 1.1.001915 Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов.

Транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС. 1.1.001915 Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья

и лекарственных растительных препаратов.

Хранение. В соответствии с ОФС. 1.1.0011.15 Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов. Срок хранения. 3 года.