«Фармакогностическое исследование тополя белого (Populus alba L.)» тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Косенко Анна Александровна

• Косенко Анна Александровна
• кандидат наук
• 2024

Оглавление диссертации кандидат наук Косенко Анна Александровна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ИССЛЕДОВАНИЙ ТОПОЛЯ БЕЛОГО (POPULUS ALBA L (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Систематическое положение тополя белого

1.2. Тополь белый как представитель рода Populus L

1.3. Ареал тополя белого

1.4. Химический состав листьев, почек, коры Populus alba L

1.5. Современные данные о лекарственном растительном сырье тополя белого

1.6. Применение тополя белого

1.6.1. Практическое общехозяйственное применение тополя белого

1.6.2. Применение тополя белого в народной медицине

1.6.3. Применение тополя белого в отечественной и зарубежной медицине

1.7. Исследования сырья и препаратов видов рода Populus

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика объектов исследования, используемых в процессе написания научно-исследовательской работы

2.2. Методы исследования

2.2.1. Методики морфолого-анатомического анализа

2.2.2. Химические методы анализа

2.2.3. Хроматографические методы анализа

2.2.4. Физико-химические методы анализа

2.2.5. Технологические методы

2.2.6. Фармакологические методы анализа

2.2.7. Микробиологические методы анализа

ГЛАВА 3. МОРФОЛОГО-АНАТОМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЛИСТЬЕВ И КОРЫ ТОПОЛЯ БЕЛОГО

3.1. Морфологическая характеристика листьев тополя белого

3.2. Анатомическое строение листовой пластинки листьев тополя белого

3.3. Петиолярная анатомия листьев тополя белого

3.4. Морфолого-анатомическое исследование коры тополя белого

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 4. ВЫДЕЛЕНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ВЕЩЕСТВ ИЗ ЛИСТЬЕВ ТОПОЛЯ БЕЛОГО

4.1. Выделение индивидуальных веществ из листьев тополя белого

4.1.1. Исследование фракций, содержащих индивидуальные вещества, выделенные из листьев тополя белого

4.1.2. Идентификация выделенных веществ и их характеристики

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА ПОДХОДОВ К СТАНДАРТИЗАЦИИ ЛИСТЬЕВ, МНОГОЛЕТНЕЙ

КОРЫ И ПОЧЕК ТОПОЛЯ БЕЛОГО POPULUSALBA L

5.1. Разработка методик качественного анализа ЛРС тополя белого

5.1.1. Анализ водно-спиртовых извлечений сырья представителей рода Populus L. методом тонкослойной хроматографии

5.1.2. УФ-спектроскопия

5.1.3. Разработка методик качественного анализа методом ТСХ и УФ-спектроскопии

5.1.4. Разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в листьях тополя белого

5.1.5. Определение содержания салицина в листьях тополя белого методом ВЭЖХ

5.1.6. Разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в почках тополя белого методом дифференциальной спектрофотометрии

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НАСТОЕК И ГУСТОГО ЭКСТРАКТА ИЗ СЫРЬЯ ТОПОЛЯ БЕЛОГО, А ТАКЖЕ ИНДИВИДУАЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ НИХ

6.1. Изучение диуретической активности густых экстрактов тополя белого

6.2 Изучение безопасности густых эксрактов на острую токсичность

6.3. Изучение нейротропной активности выделенных веществ из листьев тополя белого -салицина и изокверцитрина

6.4. Изучение антимикробной активности экспериментальных экстракционных препаратов, на основе листьев и почек тополя белого

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Приложение 1. Патент на изобретение Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях тополя белого

Приложение 2. Акты внедрения результатов диссертационной работы

Приложение 3. Методика количественного определения суммы флавоноидов в листьях тополя белого

Приложение 4. Методика количественного определения суммы флавоноидов в почках тополя белого

Приложение 5. Проект фармакопейной статьи на новый вид лекарственного растительного сырья «Тополя белого листья»

Введение диссертации (часть автореферата) на тему ««Фармакогностическое исследование тополя белого (Populus alba L.)»»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Согласно приказу Министерства здравоохранения Российской Федерации № 66 от 13 февраля 2013 года «Стратегия лекарственного обеспечения населения Российской Федерации до 2025 года» и утвержденной распоряжением Правительства Российской Федерации «Стратегии развития фармацевтической промышленности Российской Федерации на период до 2030 года», основной задачей является создание и производство отечественной фармацевтической продукции, что позволит решить проблему импортозамещения в сфере лекарственного обеспечения. Важным аспектом данной Стратегии является также разработка оригинальных конкурентоспособных лекарственных средств (ЛС), повышение экспорта российской фармацевтической продукции, исследование новых активных компонентов и их источников с целью научного обоснования создания инновационных и эффективных ЛС.

Современная фармацевтическая промышленность широко применяет лекарственные растения для производства различных препаратов, которые эффективны при многих заболеваниях и имеют минимальное количество побочных эффектов.

На данный момент одним из важных направлений в фармацевтике является исследование новых потенциально эффективных растений с целью разработки лекарств. В числе таких растений можно выделить представителей рода Тополь (Рори\т L.) семейства 8аИсасеав. В настоящее время в Государственную фармакопею РФ XIV издания (ФС.2.5.0042.15) включены почки тополя пяти видов - тополя черного, тополя канадского, тополя душистого, тополя лавролистного и тополя бальзамического (Куприянова Е.А., 2020). Почки вышеперечисленных видов тополя содержат в качестве основных действующих веществ флавоноиды и фенилпропаноиды, которые обусловливают антимикробные и противогрибковые свойства. Кроме того, в этом отношении представляют интерес листья, побеги и кора видов рода Тополь, которые обладают антимикробными свойствами, обусловленными фенольными соединениями, а также другие виды тополя (Бакулин В.Т., 2012; Браславский В.Б., 2012; Куприянова Е.А., 2020). Одним из перспективных видов

является тополь белый (Populus alba L.), широко произрастающий и культивируемый на территории Российской Федерации.

Тополь белый и лекарственные препараты на основе этого растения не зарегистрированы в России. Однако в литературе описаны фармакологические свойства сырья тополя белого, такие как антимикробное действие, способность ускорять заживление ран и антиоксидантная активность (Tawfeek N. et al., 2019). Известно также, что тополь белый содержит такие биологически активные соединения (БАС), как флавоноиды, фенилпропаноиды, простые фенолы, дубильные вещества, витамины (каротиноиды), которые могут оказывать благотворное воздействие на организм человека. В этой связи актуальной также является разработка методик качественного и количественного анализа различных видов сырья тополя белого.

Интерес к тополям также обусловлен разнообразием их сортовых форм, однако научные исследования, проведенные до настоящего времени, не охватывают всего разнообразия. Сравнительный анализ различных частей тополя поможет выявить наиболее перспективные виды сырья для изучения их с точки зрения содержания химических групп действующих веществ, которые воздействуют на биологические процессы и функции в организме человека.

Степень разработанности темы. На сегодняшний день в Государственной Фармакопее Российской Федерации содержатся пять представителей рода Populus L. Однако следует отметить, что Populus alba L. не является официальным растением и не включен в данную редакцию.

Исследования химического состава сырья тополя белого в основном посвящены изучению БАС в коре тополя белого (Бакулин В.Т., 2012) и групповому изучению состава листьев (Исаева Е.В., 2016). Основными группами действующих веществ в сырье названы флавоноиды, фенилпропаноиды, простые фенолы. Сравнительно недавно зарубежными учеными из листьев тополя белого выделен целый ряд флавоноидов (нарингенин, аромадендрин, кемпферол, кверцетин, изорамнети-3-О-рутинозид), фенилпропаноидов (метиловый эфир и-кумаровой кислоты, градидентатин), простых фенолов (протокатеховая кислота, салициловый эфир, тремулоидин, 2-О-ацетилсалицин, салицин) (Tawfeek N. et al., 2019).

Ранее исследователями из России и за рубежом были установлены антиоксидантные, ранозаживляющие и антимикробные свойства листьев и коры тополя белого в контексте их фармакологических характеристик (Бакулин В.Т., 2012; Kuchukhidze J. et al., 2011; Faizi S. et al., 2011; Tawfeek N. et al., 2019). Исследуются противоопухолевые свойства и возможность медицинского применения экстрактов тополя в офтальмологической и стоматологической практике (Stanciauskaite М. и др., 2021). Таким образом, данные виды растительного сырья открывает огромные возможности для разработки новаторских лекарственных препаратов. Это подразумевает необходимость сравнительного исследования химического состава листьев, почек и коры тополя, разработки методик качественного и количественного анализа данного сырья, выявления БАС и определения их фармакологической активности, а также определения безопасности потенциальных препаратов.

Цель работы и основные задачи исследования. Цель настоящей диссертационной работы - фармакогностическое изучение различных видов сырья тополя белого (Populus alba L.) в плане обоснования использования их в качестве источника новых лекарственных растительных препаратов

Нами был поставлен ряд задач, необходимых для достижения цели диссертационной работы:

1. Проведение морфолого-анатомического исследования листьев и коры тополя белого.

2. Сравнительное фитохимическое изучение листьев, почек, коры тополя белого

3. Изучение химического состава листьев тополя белого.

4 Разработка методик качественного анализа листьев тополя белого.

5. Разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в листьях Populus alba L. методом дифференциальной спектрофотометрии.

6. Разработка методики количественного определения салицина в листьях тополя белого методом ВЭЖХ.

7. Разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в почках тополя белого методом дифференциальной спектрофотометрии.

8. Изучение биологической активности настоек и густых экстрактов из сырья тополя белого.

9. Установление значений показателей качества листьев тополя белого для проекта фармакопейной статьи (ФС) на новый вид ЛРС «Тополя белого листья» (для включения в ГФ РФ).

Научная новизна. Методами световой и люминесцентной микроскопии были внимательно выявлены и исследованы характерные анатомические и гистологические характеристики листовых пластинок белого тополя. Впервые описано морфолого-анатомическое строение коры тополя белого как перспективного ЛРС данного вида растения.

В процессе изучения химического состава листьев тополя белого наряду с известным для данного сырья салицином (глюкозид салицилового спирта) впервые выделены б'-О-кофеоил-салицин, изокверцитрин (З-О-Р-Э-глюкопиранозид кверцетина), З-О-Р-Э-глюкопиранозид изорамнетина и пирокатехин. Следует отметить, что 6'-О-кофеоил-салицин является новым природным соединением. Спектральные свойства каждого из указанных соединений были исследованы и описаны с помощью спектров 1Н-ЯМР и 13С-ЯМР, а также данных УФ-спектроскопии и масс-спектрометрии.

Впервые были разработаны методики проведения ТСХ-анализа листьев тополя белого, исследования количественного содержания флавоноидов в листьях тополя белого в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье, а также изучения количественного содержания салицина в листьях тополя белого. Также была разработана методика количественного анализа суммы флавоноидов в почках тополя белого в пересчете на кверцетин и абсолютно сухое сырье.

Полученный патент Российской Федерации (№ 2814635) подтверждает научную новизну основной диссертационной работы. (Приложение № 1).

Теоретическая и практическая значимость. В ходе проведения анатомо-гистологического анализа, включающего применение световой и флуоресцентной микроскопии, была обнаружена серия ключевых диагностических признаков, представляющих высшую значимость в диагностике белых тополей листьев: крупная центральная жилка сильно выступающая с нижней стороны листа; наличие гиподермы с верхней стороны листа в области центральной жилки; дорзовентральное строение листовой пластинки с двурядным столбчатым мезофиллом; толстостенные клетки верхнего эпидермиса с выраженной кутикулой; особенность проводящих пучков центральной жилки, представленная тремя коллатеральными пучками (два округлых симметричных с верхней стороны листа и один крупный С-образный); обильное опушение нижнего эпидермиса из простых одноклеточных сильно извилистых волосков.

Впервые описано морфолого-анатомическое строение коры тополя белого как перспективного ЛРС данного вида растения. К наиболее диагностичным признакам коры относятся: однородный пробковый слой с глянцевой продольной морщинистостью с поверхности; наличие зернистого протопласта в клетках основной паренхимы коры; наличие мелких зерен крахмала в клетках сердцевинных лучей; склеренхима с кристаллоносной обкладкой из ромбических и призматических кристаллов.

Из листьев тополя белого выделены 5 индивидуальных соединений, относящиеся к флавоноидам - изокверцитрин, 3-О-Р-О-глюкопиранозид изорамнетин, простым фенолам - салицин, 1,2 дигидроксибензол (пирокатехин) и фенилпропаноидам (6'-О-кофеоил-салицин. Изокверцитрин, 3-О-Р^-глюкопиранозид изорамнетина и пирокатехин впервые описаны для листьев тополя белого, а 6'-О-кофеоил-салицин является новым природным соединением.

Для густых экстрактов из сырья тополя белого подтверждена диуретическая активность. Исследована безопасность на острую токсичность. Для выделенных веществ - салицина и изокверцитрина подтверждена нейротропная активность.

Для настоек из листьев и почек тополя белого подтверждена антимикробная активность.

Внедрение результатов исследования. Результаты диссертационного исследования интегрированы в образовательные и научно-исследовательские процессы кафедр Института фармации Самарского государственного медицинского университета (акты внедрения от 21.12.2023 г.). Кроме того, разработанные методики анализа листьев и почек Populus alba L. апробированы и используются в производственных процессах на предприятиях ЗАО «Самаралектравы», ГБУЗ «Центр контроля качества лекарственных средств Самарской области» (акты внедрения от 21.12.2022 г. и 26.12.2023 г.) (Приложение № 2).

Личный вклад автора. Автор диссертационной работы был ответственен за все исследования, проведенные лично. В результате анатомо-гистологического анализа были обнаружены характерные особенности тканей белых тополей, впервые описана анатомия их листовых петиолей. Также было проведено фитохимическое исследование листьев, при котором было выделено и идентифицировано пять отдельных соединений из изученного материала.

Компонентный состав листьев белых тополей был подробно изучен. Были разработаны методики качественного и количественного анализа для данного вида сырья, а также проведено сравнительное исследование содержания групп активных веществ в сырье Populus alba L.

Был произведен густой экстракт из листьев, почек и коры белого тополя, для которого были проведены эксперименты для определения фармакологической активности. Были исследованы выделенные из листьев тополя глюкозид салицин и флавоноид изокверцитрин на наличие нейротропной активности.

Также был разработан проект фармакопейной статьи на новый вид лекарственного растительного сырья «Тополя белого листья».

Связь задач исследования с планами научно-исследовательских работ.

Данная диссертационная работа была успешно выполнена, с учетом плана проведения научных исследований, предложенного Самарским государственным медицинским университетом. Конкретно, данная работа соответствовала теме исследования,

называемой "Химико-фармацевтические, биотехнологические, фармакологические и организационно-экономические исследования по разработке, анализу и применению фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов" (регистрационный номер: АААА-А19-119051490148-7, дата регистрации: 14.05.2019 г.). В ходе выполнения работы были изучены различные аспекты указанной темы, включая химические, фармацевтические, биотехнологические, фармакологические и организационно-экономические аспекты.

Методология и методы исследования. Методология данной диссертационной работы основывается на тщательном и детальном анализе, а также систематизации научных исследований, связанных с фармакогностическим изучением различных органов тополя белого. Важной частью работы являлась оценка актуальности и степени разработанности, выбранной темы исследования.

В ходе работы была определена цель исследования, сформулированы задачи, необходимые для ее достижения, разработан план выполнения диссертационного исследования, а также выбраны объекты и методы исследования.

Объектом данного исследования служили листья, почки и кора тополя белого, культивируемого в Самарской области. Сырье было собрано вблизи поселка Алексеевка в Самарской области. Для исследования использовались как цельные, так и измельченные виды сырья, а также водно-спиртовые экстракты из них. Методы исследования включали цифровую и люминесцентную микроскопию, различные виды хроматографии (тонкослойная, колоночная, высокоэффективная жидкостная), УФ-спектрометрию, масс-спектрометрию, ядерного магнитного резонанса (ЯМР), а также фармакологические методы.

Математическую обработку полученных данных проводили с использованием программного обеспечения, согласно Государственной фармакопее Российской Федерации XIV издания.

Степень достоверности научных положений. Методология исследования основана на обширном экспериментальном материале, полученном с применением

современных методов исследования, правильной обработке информации и использовании актуальных и проверенных источников. Результаты исследований были обработаны с применением математических методов анализа данных.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Основные положения, описанные в диссертационном исследовании, соответствуют паспорту научной специальности 3.4.2. Фармацевтическая химия, фармакогнозия (фармацевтические науки) по следующим направлениям исследования:

- «Формулирование и развитие принципов стандартизации и установление нормативов качества, обеспечивающих терапевтическую активность и безопасность лекарственных средств»;

- «Разработка новых, совершенствование, унификация и валидация существующих методов контроля качества лекарственных средств на этапах их разработки, производства и потребления»;

- «Изучение химического состава лекарственного растительного сырья, установление строения, идентификация природных соединений, разработка методов выделения, стандартизации и контроля качества лекарственного растительного сырья и лекарственных форм на его основе».

Основные положения, выдвигаемые на защиту:

1. Результаты морфолого-анатомического исследования листьев и коры тополя белого.

2. Результаты сравнительного фитохимического изучения листьев, почек, коры тополя белого.

3. Результаты исследования компонентного состава листьев тополя белого, в том числе выделение и идентификация индивидуальных соединений.

4. Данные исследования по разработке подходов к качественному анализу листьев тополя белого методом тонкослойной хроматографии.

5. Результаты разработки методики количественного содержания суммы флавоноидов в листьях тополя белого (Populus alba L.) в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье.

6. Результаты разработки методики количественного содержания салицина в листьях тополя белого методом ВЭЖХ.

7. Результаты разработки методики количественного содержания суммы флавоноидов в почках тополя белого методом дифференциальной спектрофотометрии в пересчете на кверцетин.

8. Результаты исследования биологической активности густого экстракта, настоек тополя белого и индивидуальных веществ, выделенных из листьев.

9. Результаты подготовки проекта фармакопейной статьи «Тополя белого листья».

Публикации. Соискатель имеет 15 опубликованных работ, из них по теме диссертации 5 работ; в том числе 2 статьи - в журналах, включенных ВАК в перечень рецензируемых научных изданий, из которых 1 статья в журнале, включенным в МБД. Получен 1 патент РФ на изобретение №2814635: «Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях тополя белого».

Апробация работы. Полученные в результате диссертационного исследования данные были представлены на симпозиумах, научных и научно-практических конференциях различных уровней (областного, всероссийского и международного): Научно-практическая конференция с международным участием «Аспирантские чтения» (г. Самара, 2022;2023 гг.); Международные научные конференции «Современные тенденции развития технологий здоровьесбережения» (г. Москва «ВИЛАР», 2022 г.); Научно-практическая конференция с международным участием «Актуальные проблемы химической безопасности в сфере фармацевтической и медицинской науки и практики», посвященная 50-летию кафедры токсикологической химии (г. Пермь, 2022 г.); Всероссийская научно-практическая онлайн-конференция с международным участием «Современные проблемы фармации» (г. Самара, 2022;2023

Объем и структура работы. Общий объем диссертационной работы составляет 157 страниц машинописного текста, на которых изложены ход и результаты исследования. В ее структуре содержатся 22 таблицы и 65 рисунков. Работа включает в себя введение, литературный обзор, объекты и методы исследования, четыре главы, представляющих результаты исследований, выводы и заключение, список литературы, состоящий из 145 источников, из которых 29 - на иностранном языке, а также приложение.

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ИССЛЕДОВАНИЙ ТОПОЛЯ

БЕЛОГО (POPUL US ALBA L (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

Современный мир придает все большее значение применению фитопрепаратов как средства профилактики и лечения всевозможных заболеваний. Данная тенденция прежде всего связана с тем, что в растительных препаратах, обладающих схожестью с организмом человека, содержится обширный комплекс биологически активных веществ, обеспечивающий хорошую переносимость и дающий широкий спектр терапевтического действия. Исследование растительных объектов является важным направлением в данной области.

Для полноценной оценки современных данных о применении тополя белого (Populus alba L.) в фармацевтической практике требуется провести сбор актуальной информации об этом растении. Тополь белый в течение всей истории был широко использован как в научной медицине России и других стран, так и среди народных методов лечения.

1.1. Систематическое положение тополя белого

Тополь белый (тополь серебристый) Populus alba L., семейство Ивовые -Salicaceae, род Populus L. [1, 33, 34, 63, 69].

«Исходя из различных источников, известно, что в семействе ивовые (Salicaceae) насчитывается примерно 57 родов и около 700 видов, которые в основном произрастают в умеренном климате Северного полушария. [1, 33, 34, 63, 66, 69, 84]. Современная информация подтверждает присутствие около 47 видов тополя на территории России в естественных климатических условиях. Кроме того, ранее внедрено более 15 видов данного растения» [1, 69, 111].

По некоторым данным, происхождение родового латинского названия Populus неоднозначно. Существуют две версии: 1) латинское слово "populus" (народ) может указывать на широкое распространение дерева и связано с тем, что оно часто выращивалось в местах народных собраний; 2) греческое слово "pallo" (трясти, дрожать) относится к постоянным колебаниям листьев дерева. Видовое название

""alba" (белый) связано с цветом коры, который отличает данный вид тополя от других [101].

1.2. Тополь белый как представитель рода Populus L.

Наиболее интересным объектом для исследования являются такие виды рода Populus как: черный тополь (Populus nigra L.), канадский тополь (Populus deltoides Marsh.), душистый тополь (Populus suaveolens Fisch.), лавролистный тополь (Populus laurifolia Ledeb.) и бальзамический тополь (Populus balsamifera L.). Эти виды тополя также включены в фармакопею. В 14 издании Государственной фармакопеи Российской Федерации приведена фармакопейная статья, посвященная почкам упомянутых видов тополя (ФС.2.5.0042.15).

В настоящий момент растительное сырье тополя белого не является официнальным и его качество не регламентируется нормативной документацией отечественной фармакопеи или других стран.

Тополь белый или тополь серебристый - Populus alba L.- это словно величественное дерево, возвышающееся на высоту от 18 до 35 метров, с широко раскинутой кроной, своего рода небоскреб в мире природы [1, 55, 69]. Его жизнь идет течением веков, простираясь на протяжении 300-400 лет. [105]. Однако, то, что делает это дерево самобытным и уникальным, - это его толстый и высокий ствол, который отмечен светлым оттенком, а также широкой пирамидальной или округлой кроной, начинающаяся низко от земли. Из-за широкой кроны, ствол кажется коротким. В высоту вырастает до 1,5-2,5 метров. [34, 105] (рис. 1).

Рисунок 1 - Тополь белый (Popuhis alba L.): Обозначения: 1 - общий вид; 2 -

J " WWWNÄrVWWWWWW» ' 7

цветущая ветвь с женскими (?) и мужскими (<$) цветками; 3 - побег с почками; 4 -

лист

Молодые ветки тополя белого имеют серо-зеленый цвет коры с гладкой поверхностью, а у молодых побегов она покрыта беловатым войлоком. Старая кора имеет темно-серый или черный оттенок с глубокими трещинами [33].

Листья тополя белого могут быть плотными и иметь различные формы: на побегах они могут быть дельтовидными или состоять из 3-5 лопастей, а на ветвях — более мелкими, овальными или яйцевидными. Размеры листьев тополя белого варьируют в длину от 4 до 12 см и в ширину от 2,5 до 10 см; сверху они темно-зеленые, гладкие, а снизу покрыты серебристым войлоком. Черешки листьев короткие, цилиндрические и покрыты опушением. Листья тополя распускаются весной (часто в марте-апреле). Молодые листья серебристые (с обеих сторон беловойлочные). Осенью окрашиваются в лимонно-жёлтый, но большая часть листьев опадает зелёными даже в конце октября [55].

Почки мелкие, до 0,5 см длиной, яйцевидные, не клейкие, на старых побегах голые и блестящие, на молодых — опушены [36].

Корневая система мощная, глубокая и разветвлённая, обеспечивает высокую ветроустойчивость; поверхностные корни образуют много корневых отпрысков [2].

Мужские серёжки — висячие, толстые, 3-7 см длиной, красновато-буроватые, тычинок 8-9. Женские сережки достигают длины 10-12 см и сохраняют эту длину во время цветения. Рыльца имеют желтоватый или беловатый оттенок, а околоцветник является перепончатым. Характерной особенностью являются два рыльца розово-красного цвета. Плоды представлены коробочками без опушения. Опыляются ветром. Цветение в апреле-мае (до или одновременно с распусканием листьев) [1, 26, 33].

Белые тополи обладают уникальными плодами, которые можно описать как узкояйцевидные или конусовидные удлинённые коробочки. Первоначально они имеют ярко-зеленый цвет и не имеют никаких покровов. Однако со временем эти плоды приобретают светло-коричневый оттенок, а их форма раскрывается, разделяясь на 2-4 отдельных створки и освобождают много мелких грушевидных семян с шелковистыми тонкими и длинными волосками возле основания. Созревают в июне [35, 55].

1.3. Ареал тополя белого

Тополь белый - растение, распространенное на таких территориях, как Европа, Западная, Средняя и Малая Азия, Северная Африка, а также Средиземноморские острова [48, 124, 139, 144]. Заграничные исследователи заметили, что на востоке Северной Америке и в Канаде, тополь белый широко распространен, и при этом является исходным видом для этих регионов [127, 135]. В России чаще всего он встречается на юге: Крым , Кавказ и Средняя Азия [112, 113]. Естественная территория распространения на севере проходит через такие города как: Минск, Могилев, Тамбов, Казань и Тобольск, а также северная граница Сибирской лесостепи. Белый тополь, выращенный искусственно встречается в Архангельске, на нижней Волге. Также он формирует речные леса в поймах рек Урал, Кубань, Дон, и в южных реках Западной Сибири [1, 2, 114] (рис.2).

Растение произрастает в прибрежных лесах и у долин крупных рек, что связано с экологическими и биологическими особенностями [9, 10, 47, 70, 88, 92, 111]. Иностранные исследователи отмечают, что изначально распространение тополя белого происходило из речных и прибрежных лесов степной зоны [131, 137].

Наиболее подходящая среда для белого тополя - легкие суглинистые почвы с высоким уровнем грунтовых вод. Регулярное поступление влаги (затопление на 1-2 месяца), отсутствие застоя грунтовых вод, рыхлая почва и высокое содержание в ней питательных веществ обеспечивают быстрый и уверенный рост тополя [75, 91, 100, 112, 114].

Рисунок 2 - Регионы распространения тополя белого на территории России. -.-.- ареат обитания тополя белого

Тополь белый занесен в Красную книгу Самарской области [109].

1.4. Химический состав листьев, почек, коры Populus alba L.

Сырье белого тополя обладает богатым химическим составом, где преобладают соединения фенольной природы. В коре белого тополя содержатся дубильные вещества, катехины, протопектины и пектины, фенилпропаноиды, которые делают ее ценным источником биологически активных веществ [7].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Косенко Анна Александровна, 2024 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абаимов, В.Ф. Дендрология: учебное пособие для студентов высших учебных заведений, обучающихся по специальности "Лесное хозяйство". - 3-е изд., перераб. - Москва. Академия, 2009. - С. 221-224.

2. Абрамчук, A.B. Общие сведения о древесных растениях / A.B. Абрамчук // Учебное пособие. Екатеринбург, - 2012. 72 с.

3. Альбенский, A.B. Культура тополей / A.B. Альбенский. - М.: Государственное лесотехническое издательство, 1946. - 44 с.

4. Ахметова, С.Б., Шмырева, Д.Ю. Доклиническое изучение эфирного масла тополя бальзамического // в сборнике: Современная фармация: проблемы и перспективы развития материалы V межрегиональной научно-практической конференции с международным участием. ГБОУ ВПО СОГМА Минздрава России; под редакцией Ф.Н. Бидаровой. - 2015. - С. 392-395.

5. Базарнова, Н.Г. Изменение содержания целлюлозы и лигнина в древесине тополя белого {Р.alba) в пределах ствола дерева / Н.Г. Базарнова, В.Т. Бакулин, А.Н. Хардыкайнен // Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья: Материалы V Всероссийской конференции с международным участием. - Барнаул, 2012. - С. 24-25.

6. Бакулин, В.Т. Особенности анатомического строения древесины тополя белого, произрастающего в Западной Сибири / В.Т. Бакулин // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Естественные науки. - 2012. - № 3 (122). - С. 5-14.

7. Бакулин, В.Т. Содержание биологически активных веществ в коре Populus alba L. / В.Т. Бакулин, Т. А. Кукушкина, Г.И. Высочина // Вестник Новосибирского государственного университета. Серия: Биология, клиническая медицина. - 2012. - Т. 10, № 4. - С. 83-88.

8. Бакулин, В.Т., Чиндяева, Л.Н., Цыбуля, Н.В. Антимикробная активность листьев тополей и ив (Salicaceae) в Сибири // Проблемы региональной экологии. - 2010. - № 6. - С. 60-64.

9. Бельгард, A.JI. Лесная растительность Юго-Востока УССР. / A.JI. Бельтард. - Киев: Издательство киевского государственного университета им. Т.Г. Шевченко. 1950. - 264 с.

10. Белькевич, П.М. Ведение лесного хозяйства в пойменных лесах степного Придонья / П.М. Белькевич // Сборник научных работ, выпуск 2. - Ростов-на- Дону: Ростовское книжное издательство, 1963. - С. 36-42.

11. Бессчетнова, H.H. Дифференциация пылезадерживающей способности кроны тополей / H.H. Бессчетнова, П.В. Бессчетнов // Известия высших учебных заведений. Лесной журнал. - 2021. - № 5(383). - С. 48-64.

12. Бессчетнова, H.H. Содержание и баланс запасных веществ в тканях побегов тополей в Нижегородском Поволжье / H.H. Бессчетнова, В.П. Бессчетнов, П.В. Бессчетнов // Известия Санкт-Петербургской лесотехнической академии. - 2020. - № 232. - С. 92-104.

13. Бессчетнов, П.В. Видоспецифичность тополей по содержанию жиров в тканях побегов / П.В. Бессчетнов, H.H. Бессчетнова // Вестник Нижегородской государственной сельскохозяйственной академии. -2020. -№3(27). -С. 13-23.

14. Бессчетнов, П.В. Корреляция параметров листового аппарата тополей в условиях городских посадок / П.В. Бессчетнов, H.H. Бессчетнова // Вестник Казанского государственного аграрного университета. — 2018. — Т. 13, № 1(48).-С. 5-10.

15. Бессчетнов, П.В. Специфика содержания крахмала в тканях побегов разных видов тополей / П.В. Бессчетнов, H.H. Бессчетнова // Вестник Нижегородской государственной сельскохозяйственной академии. -2020. - № 2(26). - С. 23-34.

16. Браславский, В.Б. Антимикробная активность экстрактов и эфирных масел почек некоторых видов Populus L./ В.Б. Браславский, В.А. Куркин, И.П. Жданов // Растительные ресурсы. - 1991. - Т. 27, вып.2. - С. 77-81.

17. Браславский, В.Б. Исследование химического состава некоторых видов тополя (Populus L.) / дис. ... канд. фармац. наук: 15.00.02 / Браславский Валерий Борисович. - М., 1994. - 130 с.

18. Браславский, В.Б. Исследование спектральных характеристик флавоноидов тополя и прополиса / В.Б. Браславский // Современная фармацевтическая наука и практика: традиции, инновации, приоритеты. -Самара: Офорт; ГОУ ВПО СамГМУ Минздравсоцразвития России, 2011.

- С. 99-101

19. Браславский, Н.В. Исследование источника лекарственных средств-прополиса / Н.В. Браславский // Аспирантские чтения - 2011. - Самара: ГБОУ ВПО СамГМУ Минздрава РФ, 2011. - С. 296-298.

20. Браславский, В.Б. Сравнительное химическое исследование некоторых видов и гибридных форм Populus L., культивируемых в Сибири / В.Б. Браславский, В.А. Куркин, В.Т. Бакулин // Растительные ресурсы. - 1993.

- Т. 29, вып.4. - С. 77-81.

21. Бухарина, И.Л. Динамика активности медьсодержащих ферментов в листьях древесных растений в условиях крупного промышленного центра (Среднее Поволжье) / И.Л. Бухарина, А.М. Кузьмина, П.А. Кузьмин // Растительные ресурсы. - 2018. - Т. 54, вып. 2. - С. 280-289.

22. Валягина, Е.Т. Деревья и кустарники Средней полосы Европейской части России [Текст]: Иллюстрир. определитель / Е.Т. Валягина-Малютина. -Санкт-Петербург: Спец. лит., 1998. - 111 с., [253] с. ил.

23. Верещагин В. И., Соболевская К. А., Якубова А. И. Полезные растения Западной Сибири. М.; Л., 1959. - С. 350.

24. Влияние оксида графена на растения-регенеранты гибрида тополь белыйхосина / Н.С. Стрекалова, О.В. Захарова, П.А. Баранчиков, А.А. Гусев // Лесотехнический журнал. - 2021. - Т. 11, № 2(42). - С. 35-47.

25. Воронков, А.В., Муравьева, Н.А., Дьякова, И.Н. Изучение влияния пиностробина на поведенческую активность и эмоциональный статус

животных на фоне интенсивных физических и психоэмоциональных нагрузок // Фармация и фармакология. - 2014. - № 1. - С. 42 - 46.

26. Воронкова, М.С. Особенности состава и содержания фенольных соединений в листьях Populus alba L., P. trémula L. и P. x canescens (Ait.) Sm / М.С. Воронкова, Е.В. Банаев, С.В. Шишкин, A.A. Эрст // Сибирский лесной журнал. - 2019. - № 5. - С. 90-98.

27. Выращивание посадочного материала тополя белого (Populus alba L.) на основе коллекции in vitro и оценка его себестоимости / О.С. Машкина, Т.М. Табацкая, С.С. Морковина, Е.А. Панявина // Лесотехнический журнал. - 2016. - Т. 6, № 1(21). - С. 28-44.

28. Государственная Фармакопея Российской Федерации. XIII издание / МЗ РФ. - Москва, 2015. - Т. 3. - С. 657 - 663.

29. Государственная Фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Т. 1 / Москва, 2018. - 1814 с. [Электронный ресурс] / URL:

http : //resource.rucml .ru/feml/pharmacopia/14_1/HTML/index.html_-

25.11.2022

30. Государственная Фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Т. 2 / Москва, 2018. - 1448 с. [Электронный ресурс] / URL:

http : //resource.rucml .ru/feml/pharmacopia/14_2/HTML/index.html_-

25.11.2022

31. Государственная Фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Т. 3 / Москва, 2018. - 1925 с. [Электронный ресурс] / URL:

http : //resource.rucml .ru/feml/pharmacopia/14_3/HTML/index.html_-

25.11.2022

32. Государственная Фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Т. 4 / Москва, 2018. - 1832 с. [Электронный ресурс] / URL: http : //resource.rucml .ru/feml/pharmacopia/14_4/HTML/index.html -25.11.2022

33. Гусев, A.A. Использование наночастиц оксидов металлов для стерилизации тканей эксплантов в ходе микроклонального размножения

гибрида тополя белого и осины / А.А. Гусев, Е.О. Колесникова, Н.А. Евтушенко // Актуальные направления научных исследований XXI века: теория и практика. - 2018. - Т. 6, № 7(43).

34. Дендрология. Изд. 2-е, доп. Шиманюк А.П. «Лесная промышленность», 1974. - 264 с.

35. Дендрология: краткий курс лекций для студентов I курса специальности (направления подготовки) 35.03.01 «Лесное дело» / Сост.: Г.Н.Заигралова // ФГБОУ ПО «Саратовский ГАУ». - Саратов, 2016. - 77 с.

36. Ермолова, А.С. Взаимосвязь таксационных показателей насаждений тополя белого и их санитарного состояния / А.С. Ермолова // Вестник Московского государственного университета леса - Лесной вестник. -2016. Т. 20, № 5. - С. 219-225.

37. Ермолова, А.С. Состояние, рост и ресурсный потенциал насаждений тополя белого в поймах рек степного Придонья.: автореф. дис. ... канд. сельскохозяйственных наук. Пушкино, 2016. - 24 с.

38. Золотницкая С. Я. Лекарственные ресурсы флоры Армении. Ереван, 1965. Т. 2. - 372 с.

39. Ива, тополь и прополис в медицине и фармации: монография / В.Б. Браславский. - Самара: ООО «Офорт»; ГБОУ ВПО СамГМУ Минздравсоцразвития России, 2012. - 116 с.

40. Изучение генетического разнообразия сортообразцов тополя (Populus L.) на основе SSR-маркеров / Т.П. Федулова, А.М. Кондратьева, П.М. Евлаков, И.И. Марчук // Лесотехнический журнал. - 2016. - Т. 6, №2 4(24). - С. 105-111.

41. Ионова, В.А. Фитохимическое исследование растительных экстрактов из почек и листьев Populus nigra L. / В.А. Ионова, Е.Е. Батырханов, Н.М. Имашева, Е.В. Щепетова // Естественные науки. - 2013. - №21 (42). - С. 99104.

42. Индивидуальная изменчивость морфологических характеристик листового аппарата особей тополя белого / П.В. Бессчетнов // Материалы

конференции для обучающихся и молодых ученых «Рост и воспроизводство научных кадров в сельском и лесном хозяйствах». -2020. С. 86-92.

43. Исаева, Е.В. Биологическая активность экстрактов и эфирных масел почек тополя бальзамического Красноярского края / Е.В. Исаева, Г.А. Ложкина, Ю.А. Литовка, Т.В. Рязанова // Химия растительного сырья. -2008. - № 1. - С. 67-72.

44. Исаева, Е.В. Групповой химический состав листьев тополя / Е.В. Исаева, Т.В. Рязанова, Л.В. Гаврилова // Stiences of Europe. - 2016, № 8 (8). - С. 116-121.

45. Исаева, Е.В. Комплексная переработка вегетативной части тополя бальзамического с получением биологически активных продуктов: дис. ... докт. технич. наук: 05.21.03 / Исаева Елена Владимировна. -Красноярск, 2008. - 381 с.

46. Калюта, Е.В., Мальцев, М.И., Шепелева, О.В., Исаева, Е.В. Изучение биологической активности экстрактов тополя бальзамического Populus balzamifera // В сборнике: Технологии и оборудование химической, биотехнологической и пищевой промышленности Материалы IX Всероссийской научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых с международным участием. - 2016. - С. 345-348.

47. Киселева, Т.Л. Лекарственные растения в мировой медицинской практике: государственное регулирование номенклатуры и качества / Т.Л. Киселева, Ю.А. Смирнова. - М.: Издательство Профессиональной ассоциации натуротерапевтов, 2009. - 295 с.

48. Ковда, В.А. Почвы бассейна реки Дона / В.А. Ковда, А.А. Роде // Почвы СССР. Европейская часть СССР. Т. 3. Почвы лесостепных и степных областей. -М. - Л.: Издательство академии наук СССР, 1939. - С. 129179.

49. Колесников, А.И. Декоративная дендрология / А.И. Колесников. - М.: Лесная промышленность, 1974. - 701 с.

50. Колпиков, М. В. Лесоводство с дендрологией: изд-е 3-е доп. и перераб. / М.В. Колпиков - М.-Л.: Гослесбумиздат, 1954. - 495 с.

51. Кондакова, И.А. Изучение безвредности водно-спиртовых эмульсий прополиса, почек тополя и сосны / И.А. Кондакова, Ю.В. Ломова, П.А. Злобин // Успехи современного естествознания. - 2014. - № 9 (часть 1) -С. 68-69

52. Костина, М.В. Природа чешуй в семействе БаИсасвав / М.В. Костина // Ботанический журнал. - 2012. - № 5. - С. 583-592.

53. Кузнецов, П.В. Именные (цветные) реакции в фармацевтическом и химико-токсикологическом функциональном анализе: учебное пособие / П.В. Кузнецов. - Кемерово: АИ «Кузбассвузиздат», 2016. - 167 с.

54. Куприянова, Е.А. Антимикробная активность настоек почек и побегов тополя черного / Е.А. Куприянова, В.А. Куркин, В.М. Рыжов, А.В. Лямин, О.В. Кондратенко, А.В. Помогайбин, В.Б. Браславский // Фармация. -2019. - Т. 68, № 3. - С. 44-48.

55. Куприянова, Е.А. Изучение состава фенольных соединений листьев тополя черного / Е.А. Куприянова, В.А. Куркин // Аспирантский вестник Поволжья. - 2019. - № 5-6. - С. 128-134.

56. Куприянова, Е.А. Сравнительное фармакогностическое исследование представителей рода Тополь (Рори1ш Ь.): Дис. ...канд. фарм. наук.-. Самара, 2020. - 209 с.

57. Куркина, А.В. Флавоноиды фармакопейных растений: монография / А.В. Куркина. - Самара: ООО «Офорт», ГБОУ ВПО СамГМУ Минздравсоцразвития России, 2012. - 290 с.

58. Куркин, В.А. Актуальные вопросы совершенствования стандратизации лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов, содержащих фенольные соединения // Современные наукоемкие технологии. - 2016. - № 8. - С. 247-250.

59. Куркин, В.А. Исследование химического состава почек Populus balsamifera L. методом ВЭЖХ / В.А. Куркин, В.Б. Браславский, Г.Г. Запесочная // Растительные ресурсы. - 1993. - Т. 29, вып. 3. - С. 85-90.

60. Куркин, В.А. Компоненты листьев Populus nigra / В.А. Куркин, Е.А. Куприянова, Е.Д. Даева, В.И. Каденцев // Химия природных соединений. - 2020. - № 1. - С. 120-121.

61. Куркин, В.А. Растения семейства ивовых - перспективный источник новых антимикробных, противовоспалительных и тонизирующих лекарственных средств / В.А. Куркин, В.Б. Браславский, Г.Г. Запесочная, И.П. Балмасова, В.Т. Бакулин, И.П. Жданов и др. // Поиск, разработка и внедрение новых лекарственных средств и организационных форм фармацевтической деятельности: Материалы международной научной конференции. - Томск, 2000. - С. 42-43.

62. Куркин, В.А. Стандартизация сырья и препаратов тополя и прополиса / В.А. Куркин, Г.Г. Запесочная, В.Б. Браславский // Фармация. - 2009. Т. 57, № 4. - С. 53-56.

63. Куркин, В.А. Сравнительное исследование диуретической активности водно-спиртовых извлечений лекарственных растений, содержащих флавоноиды / В.А. Куркин, Е.Н. Зайцева, А.В. Куркина, А.В. Дубищев, О.Е. Правдивцева // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2015. Т. 159. - № 3. - С. 348-352.

64. Куркин, В.А. Флавоноиды почек Populus balsamirefa / В.А. Куркин, Г.Г. Запесочная, В,Б. Браславский // Химия природ. соединений.- 1990. -№ 2. - С. 272-273.

65. Куркин, В.А. Флавоноиды почек Populus deltoides / В.А. Куркин, Г.Г. Запесочная, В.Б. Браславский, В.О. Толкачев // Химия природ. соединений. - 1990. - № 4. - С. 694-695.

66. Куркин, В.А. Влияние фитопрепаратов, содержащих фенилпропаноиды, на физическую работоспособность животных / В.А. Куркин, А.В. Дубищев, Г.Г. Запесочная, И.Н. Титова, В.Б. Браславский, О.Е.

Правдивцева, В.Н. Ежков, Е.В. Авдеева, Е.С. Петрова, И.Ю. Климова // Химико-фармацевтический журнал. - 2006. - Т. 40, № 3. - С. 30-31.

67. Ларин, И.В. Кормовые растения сенокосов и пастбищ СССР. T.I - М.: Государственное издательство сельскохозяйственной литературы, 1950.

- 688 с.

68. Латыпова, А.А. Методические особенности исследования биологии и экологии тополя белого / А.А. Латыпова, И.Р. Кагарманов // Bulletin of Udmurt University. Series Biology. Earth Sciences. - 2012. - №2 4. - С. 34-40.

69. Лобанова, И.Ю. Фитохимическое и технологическое исследование листьев осины обыкновенной: дисс. ... канд. фармац. наук: 14.04.01, 14.04.02 / Лобанова Ирина Юрьевна. - Пермь, 2012. - 228 с.

70. Маевский, П.Ф. Флора средней полосы европейской части России. 11-е изд. - М.: Товарищество научных изданий КМК, 2014. - 217 с.

71. Максаева, Л.Д. Почвенные условия пойм Среднего Дона / Л.Д. Максаева, О.А. Чемикосова, Т.В. Вифлянцева // Бюллетень ВНИАЛМИ. Выпуск 1(40). 1983. -1983. - С. 46-48.

72. Максутбекова, Г.Т. Оценка физиологических показателей растений рода Populus в аридных условиях Жезказгана / Г.Т. Максутбекова // Вестник Карагандинского университета. Серия: Биология. Медицина. География.

- 2020. - Т. 100, № 4. - С. 66-71.

73. Мамаев, С.А. Деревья и кустарники Среднего Урала. Справочник определитель / С.А. Мамаев, А.П. Кожевников - Екатеринбург: Изд-во «Сократ», 2006. - 272 с.

74. Масленникова, К.А., Конюхова, О.М., Канарский, А.В. Фенолгликозиды растений семейства Salicaceae // Вестник Казанского технологического университета. - 2014. - С. 383-386.

75. Машкина, О.В. Испытание триплоидных гибридов тополя в условиях Воронежской области // Сибирский лесной журнал. -2016. - № 5. С. 7280.

76. Медведева, Е.Ю. Биолого-экологические особенности роста и размножения гибридных тополей в городе Екатеринбурге: Дис. ...канд. сельхоз. наук.-. Екатеринбург, 2015. -210 с.

77. Минина, С.А. Химия и технология фитопрепаратов: учебное пособие. -2-е изд., перераб. и доп. / С.А. Минина, И.Е. Каухова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 560 с.

78. Молекулярно-генетический анализ размноженных in vitro клонов Populus alba L. и Populus trémula L. с использованием микросателлитных маркеров / Т.А. Гродецкая, О.Ю. Баранов, С.Г. Ржевский [и др.] // Лесотехнический журнал. - 2021. - Т. 11, № 3(43). - С. 16-30.

79. Молекулярно-генетическая и цитогенетическая оценка перспективных гибридов и размноженных in vitro клонов тополя и осины / О.С. Машкина, Т.П. Федулова, Т.М. Табацкая [и др.] // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. -2016. - № 2. - С. 60-69.

80. Морфологические и биохимические особенности Populus х canescens в природных популяциях Алтайского края / Е.В. Банаев, С.В. Шишкин, М.С. Воронкова [и др.] // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. - 2017. - № 8(154). - С. 90-97.

81. Новосельцева, Т.В. Анксиолитическая активность пиностробина в условиях экспериментальной иммунодепрессии / Т.В. Новосельцева, И.Н. Тюренков, Е.Б. Хлебцова, Э.Т. Оганесян, Л.И. Бутенко, Л.Н. Моисеенкова // Здоровье и образование в XXI веке. - М., 2012. - Т. 14. - № 4. - С. 341342.

82. Новосельцева, Т.В. Психотропные и иммунотропные свойства пиностробина на фоне иммунодепрессии / Т.В. Новосельцева, Э.Т. Оганесян, И.Н. Тюренков, Е.Б. Хлебцова, Е.И. Кондратенко, Л.И. Бутенко, О.С. Евсеева // Фармация. - 2011. - № 7. - С. 43-45.

83. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Методические указания. МУК 4.2.1890-04 // Клиническая

микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2004. - Т.6, № 4. - С. 306-359

84. Патент РФ № 2134584 МКИ7 А61К35/78 на изобретение «Способ получения иммуномодулирующего препарата «Настойка эхинацеи пурпурной» / Куркин В.А. [и др.]; заявитель и патентообладатель СамГМУ. - Бюл. № 23 от 20.08.99.

85. Патент РФ № 2135201, на изобретение «Способ получения настойки тополя для лечения гнойно-воспалительных заболеваний мягких тканей» / Куркин В.А., Браславский В.Б., Запесочная Г.Г., Правдивцева О.Е., Жданов И.П., Косякин В.А., Ткаченко А.А. - А 61 К 35/78. Бюл. № 3 от 27.08.1998 г. - 6 с.

86. Пашкова, Т.М. Влияние настоек лекарственных трав, обладающих антиоксидантной активностью, на антилизоцимную активность Klebsiella pneumoniae // Успехи современного естествознания. - 2007. - № 7. - С. 48.

87. Паутов, А.А. Нодальная анатомия почечных покровов у тополей / А. А. Паутов, Ю. О. Сапач, Е. Г. Крылова // Ботанический журнал. - 2012. - № 5. - С. 577-583.

88. Попова, Н.С. Быстрорастущие породы в поймах рек степной зоны / Н.С. Попова // Быстрорастущие и хозяйственно ценные породы (разведение и использование). Материалы научно-методического совещания. - М.: Издательство Министерства сельского хозяйства СССР, 1958. - С.150-163.

89. Правдивцева, О.Е. Фармакогностическое исследование по созданию антимикробных и противовоспалительных средств на основе некоторых видов рода Populus L.: автореф. дис. ... канд.фарм. наук. Москва, 2001. -24 с.

90. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Paeoniaceae - Thymelaeaceae. Л.: Наука, 1986. С. 105-114.

91. Редько, Г.И. Биология и культура тополей / Г.И. Редько. - Л.: Издательство Ленинградского университета, 1975. - 175 с.

92. Романенко, В.Р. Классификация площадей лесного фонда поймы Среднего Дона / В.Р. Романенко // Бюллетень ВНИАЛМИ. Выпуск 1(40). Волгоград, - 1983. - . 56.

93. Самылина, И.А. Фармакогнозия. Атлас: учебное пособие в 2-х томах / И.А. Самылина, О.Г. Аносова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. - Т.2. - С. 384.

94. Сенцов М.Ф. Сравнительное исследование компонентного состава почек некоторых видов Рори\т Ь. методом ВЭЖХ / М.Ф. Сенцов, В.Б. Браславский, В.А. Куркин, Г.Г. Запесочная, В.Т. Бакулин, О.Е. Правдивцева // Растительные ресурсы. - 1997. - Т. 33, вып. 2. - С. 51-55.

95. Сергиевская, Е.В. Систематика высших растений / Е.В. Сергиевская. -Практический курс: - СПб.,1998. - С. 280.

96. Сиволапов, А.И. Системы селекции тополей в связи с системами их размножения / А.И. Сиволапов, В.А. Сиволапов // Актуальные направления научных исследований XXI века: теория и практика. - 2020. - Т. 8, № 1(48). - С. 144-149.

97. Томошевич, М.А. Патогенная микобиота листьев рода Рори\т Ь. в ландшафтных объектах крупных городов Сибири / М.А. Томошевич, И.Г. Воробьева // Вестник НГАУ (Новосибирский государственный аграрный университет). - 2016. - № 1(38). - С. 42-51.

98. Турецкова, В.Ф., Лобанова, И.Ю., Рассыпнова, С.С., Талыкова, Н.М. Осина обыкновенная как перспективный источник получения препаратов противоязвенного и противовоспалительного действия // Бюллетень сибирской медицины. - 2011. - № 5. - С. 106 - 111.

99. Турчин, Т.Я. Ход роста чистых и смешанных насаждений тополя белого в пойме Дона / Т.Я. Турчин, А.С. Завгородняя // Лесоведение. - 2013. - №2 1. - С. 23-29.

100. Уиттекер, Р.Х. Сообщества и экосистемы / Р.Х. Уиттекер. - М.: Мир, 1981. -328 с.

101. Фармакогнозия: Учебник для студентов фармац. вузов - Изд. 5-е, перераб. и доп. / В.А. Куркин. - Самара: ООО «Офорт», ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, 2020. - С. 372-377.

102. Фитотерапия с основами клинической фармакологии: Справочник / под ред. академика РАМН В.Г. Кукеса - М.: Медицина, 1999. - С. 70.

103. ФС 42-0073-01. Пиностробин - стандартный образец (5-Гидрокси-7-метокси-2-фенилхроман-4-он) / Котельников Г.П., Быков В.А., Арзамасцев А.П., Багирова В.Л., Куркин В.А., Браславский В.Б, Запесочная Г.Г. - М.: Фармакопейный государственный комитет МЗРФ, 2001. - 5 с.

104. ФСП 42-0329168201. Тополя почки, «ангро»/ Захаркин Н.И., Багирова В.Л., Куркин В.А., Браславский В.Б, Запесочная Г.Г. и др. - М., МЗРФ, 2001. - 12 с.

105. Флора СССР Т.5 // Под ред. Комарова В.Л. - С. 21-26, 216-242.

106. Царев, А.П. Рост тополей в орошаемых условиях Астраханской полупустыни на буграх Бэра / А.П. Царев, В.А. Царев, Р.П. Царева // Актуальные проблемы лесного комплекса. - 2021. - № 59. - С. 90-93.

107. Цыбуля, Н.В. Антимикробная активность масляных экстрактов почек некоторых видов и форм тополя / Н.В. Цыбуля, Ю.Л. Якимова, В.Т. Бакулин // Вестник ИРГСХА. - 2011. - № 44. - С. 136-140.

108. Шабанова, Е.А. Влияние модификаций состава питательных сред на эффективность длительного хранения in vitro клонов тополя и осины / Е.А. Шабанова, Н.И. Внукова, О.С. Машкина // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. -2020. - № 1. - С. 42-49.

109. Шаронова, И.В. Ботанико-зоологические исследования на территории Самарской области, в том числе материалы о распространении видов растений и животных, внесенных в региональную Красную книгу. Сообщение 1. Алексеевский, Большеглушицкий, Большечерниговский, Борский и Елховский районы Самарской области / И.В. Шаронова, А.С.

Курочкин // Самарская Лука: проблемы региональной и глобальной экологии. 2015. - Т. 24, № 1. - С. 38-97.

110. Шаршунова, М. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии / М. Шаршунова, В. Шварц, Ч. Михалец. - М.: Мир, 1980. - Т. 1, 2. - С. 20.

111. Шаталов, В.Г. Пойменные леса / В.Г. Шаталов, И.В. Трещевский, И.В. Якимов. - М.: Лесная промышленность, 1984. - 158 с.

112. Щепотьев, Ф. Л. Быстрорастущие древесные породы / Ф.Л. Щепотьев, Ф.А. Павленко. - М.: Издательство с.-х. литературы, 1962. - 375 с.

113. Щепотьев, Ф.Л. Дендрология / Ф.Л. Щепотьев. - М.: Гослесбумиздат, 1949. -335 с.

114. Эйзенрейх, Х. Быстрорастущие древесные породы / Х. Эйзенрейх. - М.: Издательство иностранной литературы, 1959. - 508 с.

115. Энциклопедический словарь лекарственных растений и продуктов животного происхождения: учебное пособие / под ред. Г.П. Яковлева, К.Ф. Блиновой -Спб: Специальная литература, 1999. - С. 276-277.

116. Эрст, А.А. Получение межвидовых гибридов (Populus alba х P. bolleana) х P. x canescens с использованием культуры in vitro / А.А. Эрст, С.В. Шишкин, М.С. Воронкова // Сибирский лесной журнал. - 2019. - № 2. -С. 45-52.

117. Abbruzzese, G. Leaf morphological plasticity and stomatal conductance in three Populus alba L. genotypes subjected to salt stress / G. Abbruzzese, I. Beritognolo, R. Muleo, M. Piazzai, M. Sabatti, G.S. Mugnozza, E. Kuzminsky // Environmental and Experimental Botany. - 2009. - Vol. 66, Issue 3. - P. 381-388.

118. Adekenov, S.M. Development of the composition and technology of a new dental gel with anti-inflammatory and antimicrobial action / S.M. Adekenov, A.N. Zhabayeva, K.I. Itzhanova // Eurasian Chemico-Technological Journal. -2022. - Vol. 22, No. 2. - P. 117-122.

119. Akkola, E.K. Bioassay-guided isolation and characterization of wound healer compounds from Morus nigra L. (Moraceae) / E.K. Akkola, I. Süntara, H. Kele§b, E. Sezika, G. Gürlerc // Rec. Nat. Prod. - 2015. - Vol. 9, No. 4. - P. 484-495.

120. Bibi, T. Ethnomedicinal uses of plants in the treatment of paediatric geohelminth infections in Kalat district of Northern Balochistan, Pakistan / T. Bibi et al. // Journal of Ethnopharmacology. - 2016. - P. 176-186.

121. Belkhodja, Hamza. Chemical composition and properties of essential oil of Rosmarinus officinalis and Populus alba / Hamza Belkhodja, Boumediene Meddah, Aicha Tir Touil et al. // World journal of pharmacy and pharmaceutical sciences. - 2016. -Vol. 5, No. 9. - P. 108-119.

122. Casey Sayre, L. Pre-Clinical Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Characterization of Selected Chiral Flavonoids: Pinocembrin and Pinostrobin / L. Casey Sayre, Samaa Alrushaid, E. Stephanie Martinez et al. // Journal of Pharmaceutical Sciences. - 2015. - Vol. 18, No. 4. - P. 368-395.

123. Egger, K. Sur la presence de galangine, pinocembrine et izalpinine dans les bourgeons de Populus nigra L. var italica / K. Egger, M. Tissut // Comptes rendus, Serie C. - 1968. - Vol. 267. - P. 1329-1332.

124. Glass, William. Populus alba--white poplar/ In: Randall, John M.; Marinelli, Janet, eds.// Invasive plants: Weeds of the global garden. -1996. Handbook № 149. Brooklyn, NY: Brooklyn Botanic Garden: 39.

125. Hage, S. Bioprofiling of Salicaceae bud extracts through high-performance hin-layer chromatography hyphenated to biochemical, microbiological and chemical detections / S. Hage, G.E. Morlock // Journal of Chromatography A. - 2017. - P. 201-211.

126. Kis, B. Recent advances regarding the phytochemical and therapeutic uses of Populus nigra L. Buds / B. Kis, S. Avram, Pavel IZ et al. // Plants (Basel). -2020. - Vol. 9, No. 11. - P. 1464. DOI: 10.3390/plants9111464

127. Kuchukhidze, J. Antioxidant polyphenols from Populus alba growing in Georgia / J. Kuchukhidze, M. Jokhadze, T. Murtazashvili, V. Mshvildadze // Georgian Medical News. - 2011. - No. 10 (199). - P. 94-97.

128. Little, Elbert L. Sixty trees from foreign lands. Agricultural Handbook. -1961.

- No. 212. Washington, DC: U.S. Department of Agriculture. - P. 30.

129. Mulyaningsih, S. Antibacterial activity of essential oils from Eucalyptus and of selected components against multidrug-resistant bacterial pathogens / S. Mulyaningsih, F. Sporer, J. Reichling, M.Wink // Pharm Biol. - 2011. - Vol. 49, No. 9. - P. 893-899.

130. Nassima, B. Antimicrobial and antibiofilm activities of phenolic compounds extracted from Populus nigra and Populus alba buds (Algeria) / B. Nassima, B. Nassima, K. Riadh // Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences. - 2019.

- Vol. 55, e18114.

131. Onodi, Gabor; Kertesz, Miklos; Botta-Dukat, Zoltan; Altbacker, Vilmos Grazing effects on vegetation composition and on the spread of fire on open sandgrasslands // Arid Land Research and Management. - 2008. - Vol. 22(4). P. 273-285.

132. Poblocka-Olech, L. Antiinflammatory and antioxidative effects of the buds from different species of Populus in human gingival Ebroblast cells: role of bioflavanones / L. Poblocka-Olech, I. Inkielewicz-Stepniak, M. Krauze-Baranowska // Phytomedicine. - 2019. - Vol. 56. - P. 1-9.

133. Poblocka-Olech, L. TLC determination of some flavanones in the buds of different genus Populus species and hybrids / L. Poblocka-Olech, P. Migas, M. Krauze-Baranowska // Acta Pharm. - 2018. - Vol. 68, No. 2. - P. 199-210.

134. Roland, A.E.; Smith, E.C. The flora of Nova Scotia. Halifax, NS: Nova Scotia Museum. - 1969. - P. 746.

135. Stanciauskaite, M. Ophthalmic insitu gels with balsam poplar buds extract: formulation, rheological characterization, and quality evaluation / M. Stanciauskaite, M. Marksa, L. Ivanauskas et al. // Pharmaceutics. - 2021. -Vol. 13, No.7. - P. 953. DOI: 10.3390/pharmaceutics13070953

136. Siebel, Henk N.; Bouwma, Irene M. The occurrence of herbs and woody ju veniles in a hardwood floodplain forest in relation to flooding and light / Henk N. Siebel, Irene M. Bouwma // Journal of Vegetation Science. -1998. - No 9(5). - P. 623-630.

137. Singh, S. Acacetin and pinostrobin as a promising inhibitor of cancer-associated protein kinases / S. Singh, A. Meena, S. Luqman, A. Meena // Food. Chem. Toxicol. - 2021. - Vol. 151. P. 112091.

138. Spies, Thomas Allen. The occurrence, morphology, and reproductive biologyof natural hybrids of Populus alba in southeastern Michigan. Ann Arbor, MI: Univer- sity of Michigan, School of Natural Resources. - 1978. - P. 125. Thesis.

139. Tawfeek, N. Phenolic Compounds from Populus alba L. and Salix subserrata Willd. (Salicaceae) Counteract Oxidative Stress in Caenorhabditis elegans / N. Tawfeek, M. Sobeh et al. // Molecules. - 2019. - Vol. 24. P. 1999.

140. Tohidpour, A. Antibacterial effect of essential oils from two medicinal plants against Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) / A. Tohidpour, M. Sattari, R. Omidbaigi, A. Yadegar, J. Nazemi // Phytomedicine. - 2010. -Vol. 17, No. 2. - P. 142-145.

141. Vardar-Unlu, G. Composition and in vitro antimicrobial activity of Populus buds and poplar-type propolis / G. Vardar-Unlu, S. Silici, M. Unlu // World Journal of Microbiology and Biotechnology. - 2008. - Vol. 24, No. 7. - P. 10111017.

142. Wang, Z.S. Phylogeny reconstruction and hybrid analysis of Populus (Salicaceae) based on nucleotide sequences of multiple single-copy nuclear genes and plastid fragments / Z.S. Wang, S.H. Du., S. Dayanandan, D.S. Wang, Y.F Zeng, J.G. Zhang // PLoS ONE. - 2014. - Vol. 9. - P. e103645.

143. Weber, Ewald Invasive plant species of the world: a reference guide to environmental weeds. Cambridge, MA: CABI Publishing. - 2003. - P. 548.

144. Wollenweber, E. Die lipophilen flavonoide des knospenols von Populus nigra / E. Wollenweber, K. Egger // Phytochemistry. - 1971. - Vol. 10. - P. 225 - 226.

145. Wollenweber, E. A novel caffeic acid derivatives and other constituents of Populus buds excretion and propolis (bee-glue) / E. Wollenweber, U. Asarawa, D. Scnillo // Z. Naturforschung. 1987. - Vol. 42, No. 9/10. - P. 1030-1034.

ПРИЛОЖЕНИЯ

Приложение 1. Патент на изобретение Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях тополя белого

Приложение 2. Акты внедрения результатов диссертационной работы

"Утверждаю"

Проректор по научной работе ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, лауреат премии Правительства РФ, доктф у<юицин£ких наук, профессор } ; И.Л. Давыдкин

- Ж- -

Ша!({ ШгЦ^ 1)511

2023 г.

о внедрении результатов дисс^.тши«»»"'« работы Косенко Анны Александровны «Фармакогностич^е исеДеЛоваиие тополя белого XX на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

по специальности 3.4.2. Фармацевтическая химия, фармакогнозия

(фармацевтические науки) на кафедре фармакогнозии с ботаникои и основами фитотерапии ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России

Комиссия в составе сотрудников кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии: зав. кафедрой, д.фарм.н., профессора Куркина В.А., профессора кафедры, д.фарм.н., доцента Правдивцевой O.E., доцента кафедры, к.фарм.н., доцента Рыжова В.М. подтверждает использование материалов диссертационного исследования Косенко A.A., посвященного изучению вопросов фотохимической и морфолого-анатомической диагностики, обоснованию подходов к стандартизации лекарственного сырья и препаратов на основе листьев тополя белого СPopulus alba L.) в учебном процессе при проведении практических занятий со студентами и ординаторами, а также в научно-исследовательской работе. Внедренные результаты способствуют повышению объективности стандартизации лекарственного растительного сырья.

Члены комиссии:

Зав. кафедрой фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии д. фарм. н., профессор

Профессор кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии д. фарм. н., доцент

Доцент кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии к. фарм. н., доцент

В.А. Куркин

O.E. Правдивцева

В.М. Рыжов

Проректор по научной работе ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, лауреатлремии Правительства РФ, доктор медицинских наук, профессор Л^;И.Л. Давыдкин тШь, 2023 г.

Ни

о внедрении результатов дМ^^ионн^ЩЬты Косенко Анны Александровны «Фармакогнбсшческое исследование тополя белого (Populus alba L.)» на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

по специальности 3.4.2. Фармацевтическая химия, фармакогнозия (фармацевтические науки) в научно-образовательном центре «Фармация» Ф1 ЬОУ

ВО СамГМУ Минздрава России

Комиссия в составе сотрудников научно-образовательного центра «Фармация» (НОЦ «Фармация»): директора, д.фарм.н. Рязановой Т.К., главного специалиста, к.фарм.н. Жданова Д.А., главного специалиста Соколовой И.В. подтверждает использование материалов диссертационного исследования Косенко Анны Александровны, посвященного определению диагностических признаков, изучению химического состава с использованием современных инструментальных методов анализа и обоснованию подходов к стандартизации лекарственного растительного сырья тополя белого {Populus alba L.), в научно-исследовательской работе по изучению лекарственного растительного сырья, содержащего флавоноиды.

Внедренные результаты способствуют повышению объективности стандартизации лекарственных препаратов на основе лекарственного растительного сырья тополя белого.

Члены комиссии: Директор НОЦ «Фармация», д. фарм. н.

Главный специалист НОЦ «Фармация», к. фарм. н.

Главный специалист НОЦ «Фармация»

-1

Т.К. Рязанова

Д.А. Жданов

И.В. Соколова

Проректор по научной работе ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, лауреат премии Правительства РФ, доктор уедиЬинскр наук, профессор / М.Л. Давыдкин

«2/ V2023 г.

АКТ

■тг-ь \ ' - лй 1 ?" « :: / '1

о внедрении результатов диссертационной ^рабе^

Косенко Анны Александровны ^

(.Povulus alba L )» на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук по Специальности 3.4.2. Фармацевтическая химия, фармакогнозия (фармацевтические науки) н^ кафедре фармацевтической технологии с курсом биотехнологии ФГБОУ ВО

СамГМУ Минздрава России

Комиссия в составе сотрудников кафедры фармацевтической технологии с курсом биотехнологий: зав. кафедрой, д.фарм.н., доцента Куркиной A.B., профессора кафедры, д.фарм.н., профессора Первушкина C.B., доцента кафедры, к.фарм.н., доцента Климовой Л.Д., подтверждает использование материалов научно-исследовательской работы Косенко A.A., посвященной изучению химического состава и обоснованию использования в медицине лекарственного растительного сырья и лекарственных препаратов на основе сырья тополя белого (.Populus alba L.), в учебном процессе при проведении практических занятий со студентами, а также в научно-исследовательской работе в области технологических исследований по производству лекарственных

препаратов на основе данного растения.

Используемые при этом результаты изучения химического состава, а также разработанные подходы к стандартизации сырья являются методической и методологической основой для научного обоснования ресурсосберегающих технологий.

Члены комиссии:

Зав. кафедрой фармацевтической технологии с курсом биотехнологий д. фарм. н., доцент

Профессор кафедры фармацевтической технологии с курсом биотехнологий д. фарм. н., профессор

Доцент кафедры фармацевтической технологии с курсом биотехнологий к. фарм. н., доцент

A.B. Куркина

.В. Первушкин

Л.Д. Климова

Проректор по научной работе ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, лауреат премии Правительства РФ, доктор медацед^их наук, профессор Л4 I • Давыдкин

" 2023 г.

АКТ

Js ■ 'Г i

о внедрении результатов Ди'^Ф^^^Ш^™ .

Косенко Анны Александровны <<ФармакогностидеС^«Д0вание тополя белого (PopZ Zl» на соискание ученой степени кайДида^фармацевтических наук по специальности 3.4.2. Фармацевтическая химия, фармакогнозия (фармацевтические науки) на кафедре химии Института фармации ФГБОУ ВО

СамГМУ Минздрава России

Комиссия в составе сотрудников кафедры химии Института фармации: зав. кафедрой, д.фарм.н., доцента Воронина A.B., доцента кафедры, к.хим.н., доцента Шариповой С.Х., доцента кафедры, к.биол.н., доцента Расцветовой Н.В. подтверждает использование материалов диссертационного исследования Косенко A.A., посвященного изучению химического состава, определению диагностических признаков и обоснованию подходов к стандартизации лекарственного растительного сырья тополя белого (.Populus alba L.) в учебном процессе при проведении практических занятий со студентами, а также в научно-исследовательской работе в области изучения лекарственного растительного сырья,

содержащего флавоноиды.

Внедренные результаты способствуют повышению объективности стандартизации лекарственных препаратов на основе лекарственного растительного сырья тополя белого.

Члены комиссии:

Зав. кафедрой химии Института фармации, д. фарм. н., доцент

Доцент кафедры химии Института фармации, к. хим. н., доцент

Доцент кафедры химии Института фармации, к. биол. н., доцент

A.B. Воронин С.Х. Шарипова t/Hbf/ H.B. Расцветова

«Центр контроля качества лекарственных средств . ;ч Самарской области»

[ьник ГБУЗ

О.В. ОСИПОВА _2023 г.

АКТ

о внедрении результатов диссертационной работы Косенко Анны Александровны «Фармакогностическое исследование тополя белого (Populus alba L.)» на соискание

ученой степени кандидата фармацевтических наук по специальности 3.4.2. Фармацевтическая химия, фармакогнозия (фармацевтические науки) в ГБУЗ «Центр контроля качества лекарственных средств Самарской области»

Комиссия в составе сотрудников ГБУЗ «Центр контроля качества лекарственных средств Самарской области»: заместителя начальника центра Жнякиной JI.E., провизора-аналитика Черняевой H.A., провизора-аналитика Шарымовой O.A.., подтверждает использование материалов диссертационного исследования Косенко A.A., посвященного фармакогностическому исследованию тополя белого при анализе лекарственного растительного сырья и препаратов на его основе. Разработанные методики качественного и количественного анализа апробированы в процессе работы Центра. В основе разработанных методик лежат методологические подходы, предусматривающие использование ТСХ, ВЭЖХ и УФ-спектроскопии в присутствии СО салицина, рутина. Методики определения подлинности сырья и препаратов на основе сырья листьев тополя белого, а также методики определения суммы флавоноидов в данном виде сырья воспроизводимы и удобны в работе.

Таким образом, внедрение результатов диссертационного исследования Косенко A.A. будет способствовать повышению объективности стандартизации растительного сырья листьев тополя белого, а также лекарственных растительных препаратов на основе данного вида сырья. Члены комиссии:

Заместитель начальника ГБУЗ «Центр контроля качества лекарственных средств Самарской области»,

кандидат фармацевтических наук

Провизор-аналитик ГБУЗ «Центр контроля качества лекарственных средств Самарской области»

H.A. ЧЕРНЯЕВА

Провизор-аналитик ГБУЗ «Центр контроля качества лекарственных средств Самарской области»

O.A. ШАРЫМОВА

443070, г. Самара, ул. Партизанская, д. 33

Приложение 3. Методика количественного определения суммы флавоноидов в листьях тополя белого

Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм. Около 1 г измельченного сырья (точная навеска) помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 30 мл 80 % этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на тарированных весах с точностью до ±0,01. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 90 мин. Затем ее охлаждают в течение 30 мин, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр (красная полоса) (испытуемый раствор А).

1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 2 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96 % концентрации (испытуемый раствор Б).

Оптическую плотность испытуемого раствора Б измеряют через 40 мин на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1 мл раствора А, доведенный спиртом 96 % до метки в мерной колбе вместимостью 50 мл.

Примечание: Приготовление раствора стандартного образца рутина. Около 0,025 г (точная навеска) рутина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 30 мл спирта 70% концентрации при нагревании на водяной бане. После охлаждения содержимого колбы до комнатной температуры доводят объем раствора спиртом этиловым 70% концентрации до метки (раствор А рутина). 1 мл раствора А рутина помещают в мерную колбу на 25 мл, прибавляют 2 мл 3% спиртового раствора алюминия (III) хлорида и доводят объем раствора до метки спиртом 96 % концентрации (испытуемый раствор Б рутина). Измеряют оптическую плотность раствора Б на спектрофотометре при длине волны 410 нм. В качестве раствора сравнения используют раствор, который готовят следующим образом: 1 мл раствора А

рутина помещают в мерную колбу на 25 мл и доводят объем раствора до метки спиртом 96 % концентрации (раствор сравнения Б рутина).

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

Б *т0 * 30 * 50 * 1 * 100 * 100

х =-

Б0*т * 50 * 25 * (100 - Ж)

где В - оптическая плотность испытуемого раствора;

Во - оптическая плотность раствора СО рутина;

т - масса сырья, г;

то - масса СО рутина, г;

Ж - потеря в массе при высушивании, %.

При условиях, когда отсутствует стандартный образец рутина, целесообразно использовать теоретическое значение удельного показателя поглощения, равное 220.

Б * 30 * 50 * 100

х =

т * 220 * (100 — Ш) где В - оптическая плотность испытуемого раствора; т - масса сырья, г; то - масса СО рутина, г;

1%

220 - удельный показатель поглощения (Е1 см ) СО рутина при 410 нм; Ж - потеря в массе при высушивании, %.

Приложение 4. Методика количественного определения суммы флавоноидов в почках тополя белого

Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3 мм. Около 1 г измельченного сырья (точная навеска) помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 30 мл 90 % этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на тарированных весах с точностью до ±0,01. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 60 мин. Затем колбу охлаждают в течение 30 мин, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр (красная полоса).

1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 2 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96 % концентрации (испытуемый раствор Б).

Оптическую плотность испытуемого раствора Б измеряют через 40 мин на спектрофотометре при длине волны 430 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1 мл раствора А, доведенный спиртом 96 % до метки в мерной колбе вместимостью 50 мл.

Примечание: Приготовление раствора квeрцетина. Около 0,0050 г (точная навеска) кверцетита помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 96% этиловом спирте, доводят объем раствора до метки (раствор А кверцетина). 1 мл раствора А кверцетина помещают в мерную колбу на 25 мл, прибавляют 2 мл 3% спиртового раствора aлюминия (III) хлорида и доводят объем раствора до метки спиртом 96 % концентрации (испытуемый раствор Б кверцетина). Измеряют оптическую плотность раствора Б на спектрофотометре при длине волны 430 нм. В качестве раствора сравнения используют раствор, который готовят следующим образом: 1 мл раствора А кверцетина помещают в мерную колбу на 25 мл и доводят объем раствора до метки спиртом 96 % концентрации (раствор сравнения Б кверцетина).

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на кверцетин и абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

Б*т0* 30 * 50 * 1 * 100 * 100

х =-

Б0*т* 25 * 25 * (100 — Ж)

где В - оптическая плотность испытуемого раствора;

Во - оптическая плотность раствора СО кверцетина;

т - масса сырья, г;

то - масса СО кверцетина, г;

Ж - потеря в массе при высушивании, %.

В случае отсутствия стандартного образца кверцетина целесообразно использовать теоретическое значение удельного показателя поглощения - 789.

Б * 30 * 50 * 100

х =

т * 789 * (100 — Ж) где В - оптическая плотность испытуемого раствора; т - масса сырья, г;

1% ' 1см

789 - удельный показатель поглощения (Е1см) кверцетина при 430 нм; Ж - потеря в массе при высушивании, %.

Приложение 5. Проект фармакопейной статьи на новый вид лекарственного растительного сырья «Тополя белого листья»

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

УТВЕРЖДАЮ

Директор Центра фармакопеи и международного сотрудничества

ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения», доктор фармацевтических наук, профессор

Е.И. САКАНЯН

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Организация-разработчик: Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения

Российской Федерации_

Тополя белого ФС.2.5.

листья Вводится впервые

Populus alba folia

Срок введения установлен с «_»__20_г.

до «_»_20_г

Собранные в конце мая и начале июня и высушенные листья дикорастущих и культивируемых деревьев тополя белого - Populus alba L., сем. Ивовых — Salicaceae.

ИЗДАНИЕ ОФИЦИАЛЬНОЕ ПЕРЕПЕЧАТКА ВОСПРЕЩЕНА

Собранные в конце мая и начале июня и высушенные листья дикорастущих и культивируемых деревьев тополя белого - Populus alba L., сем. Ивовых - Salicaceae

ПОДЛИННОСТЬ

Внешние признаки. Сырье изучается невооруженным глазом, с помощью лупы (х10) в соответствии с разделом «Методы анализа лекарственного растительного сырья» (ГФ РФ XIV издания).

Цельное сырье. Цельные или частично измельченные листья, простые, черешковые. Листовая пластика 3—5 пальчато-лопастная. Размер листьев на побегах варьирует от 4 до 12 см в длину, и от 2,5 до 10 см в ширину, яйцевидно,

реже яйцевидно - округлой формы.

Листья с верхней стороны тёмно-зелёные, глянцевые, блестящие, снизу серебристо-серые или беловойлочные за счет густого опушения. Запах слабый. Вкус водного извлечения слабо-горьковатый.

Измельченное сырье. Кусочки листовой пластины, черешков и прилистников различной формы и размера, проходящие сквозь сито диаметром 1 мм, цвет кусочков листьев с верхней стороны темно-зеленый и с нижней - серебристо-серый.

Микроскопические признаки. Цельное сырье. Сырье исследуется с помощью микроскопа (10х, 40х, ЮОх) в соответствии с разделом «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» (ГФ РФ XIV издания).

Цельное, измельченное сырье.

При рассмотрении основной листовой пластинки на поперечном сечении хорошо заметно деление мезофилла на столбчатый и губчатый типы. Степень развитости разных типов мезофилла примерно равна.

В верхней стороне листовой пластинки локализован столбчатый мезофил, представленный двумя плотными рядами вытянутых овальных

клеток. В области вторичных пучков под верхним эпидермисом

встречаются области колленхимы.

При рассмотрении с поверхности, верхний эпидермис листовой

пластинки представлен однообразными многоугольными клеткам с заметно утолщенными клеточными стенками. В клеточных стенках слабо заметны простые поры. При ближайшем рассмотрении в протопластах клеток заметны ядра другие органоиды, включая хлоропласты не диагностируются абаксиальной (нижней) стороны в области отгиба венчика опушение трихомами в основном локализовано по краю лепестков венчика. Основная поверхность отгиба венчика не опушена и покрыта тонкостенными эпидермальными клетками овальной формы с большим количеством жирных капель красно-оранжевого цвета в протопласте.

Основные диагностические признаки вида тополя белого заключаются в очертании базальной, медиальной и апикальной части; развитием проводящей системы черешка, представленной локунной структурой концентрически расположенных коллатеральных пучков с почти центрофлоэмными пучками в центре группы. Кристаллические включения в виде призматических кристаллов и звездчатых друз ромбовидной формы и центральной полостью. Войлочное опушение поверхности черешка, сложенное из простых сильно

переплетённых кроющих трихом.

Черешок листа тополя белого, как и листовая пластинка обильно

войлочно опушена.

Г - Клетки верхней эпидермы (хЮОО)

Д - Верхний и нижний эпидермисы листовой

пластинки на поперечном сечении (увеличение х400)

В - Вторичная жилка дорзовентральной листовой пластинки (х400)

Е - Строение проводящей системы центральной жилки (увеличение х400)

А - Поперечное сечение Б - Уголковая колленхима

листовой пластинки в адаксиальной стороны листа

области центральной жилки (х400) (хЮО).

Рис. 1. Микроскопические признаки листьев тополя белого

Определение основных групп биологически активных веществ: 1. УФ-спектроскопия

Испытуемый раствор, приготовленный как указано в разделе «Количественное определение» имеет максимум для дифференциальной кривой поглощения при длине волны 414±2 нм (рис. 2 и 3).

Рис. 2. Кривая поглощения УФ-спектров раствора водно-спиртового извлечения из листьев тополя белого: 1 - исходный раствор; 2 - в присутствии А1С1з

и

1.75 1.5 1 25

075 05

200 250 300

АЬмЛапсе

Рис. 3. Дифференциальная кривая поглощения УФ-спектров раствора водно-спиртового извлечения из листьев тополя белого

2. Тонкослойная хроматография

Извлечение наносили на предварительно активированные хроматографические пластинки «Сорбфил-ПТСХ-АФ-Ф-УФ» или «Сорбфил-ПТСХ-П-А-УФ». На линию старта аналитической хроматографической пластики со слоем силикагеля наносят 20 мкл испытуемого раствора и параллельно 5 мкл растворов стандартных образцов (СО) рутина.

Пластинку с нанесенными пробами сушат при комнатной температуре в течение 5 минут, помещают в камеру, предварительно насыщенную не менее 60 минут смесью растворителей хлороформ - этиловый спирт - вода (25:18:2) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителя пройдет около 80-90 % длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителя, обрабатывают 3% спиртовым раствором алюминия хлорида, сушат в сушильном шкафу при

температуре 100-105 °С в течение 3-5 мин и просматривают в УФ-свете при

длине волны 366 нм.

На хроматограмме должно обнаруживаться доминирующее пятно с

величиной Rs около 1,3 (З-О^-О-глюкопиранозид изорамнетина)

относительно СО рутина). Допускается наличие других пятен меньшей

интенсивности свечения.

Приготовление раствора стандартного образца рутина: Около 0,005 г рутина растворяют в 10 мл спирта 96% и перемешивают (раствор стандартного образца рутина).

ИСПЫТАНИЯ Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 14%. Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 12%. Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 3 %. Измельченность сырья.

Цельное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, - не более 5%.

Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито размером 5 мм, -не более 5% частиц, проходящих сквозь сито с отверстием размером 0,5 мм, - не более 5%.

Посторонние примеси.

Ветки, части соцветий, почки. Цельное, измельченное сырье: не более

5%.

Сырье, изменившее окраску. Цельное, -измельченное сырье: не более 5% Органическая примесь. Цельное сырье - не более 0,5%. Минеральная примесь. Цельное сырье - не более 0,5 %.

Тяжелые металлы. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (ГФ РФ XIV издания).

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (ГФ РФ XIV издания).

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (ГФ РФ XIV издания).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота» (ГФ РФ XIV издания).

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье: суммы флавоноидов в пересчете на рутин не менее 1,3 %.

Сумма флавоноидов.

Аналитическую пробу сырья тополя белого измельчают до размера частиц 2 мм. Около 1 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 30 мл 80% этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на тарирных весах с точностью до ± 0,01. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 90 минут. Затем колбу закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение остужают в течение 30 минут и фильтруют через фильтр с красной полосой (извлечение из цветков).

Испытуемый раствор для анализа суммы флавоноидов готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 2 мл 3% спиртового раствора

алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки 96% этиловым спиртом

(испытуемый раствор).

Раствор сравнения готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу на 25 мл, доводят объем раствора до метки 96% этиловым спиртом (раствор сравнения).

Измерение оптической плотности проводят при длине волны 410 нм через 30 минут после приготовления всех растворов.

Содержание суммы флавоноидов (X в процентах) в пересчете на рутин

и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:

В * 30 * 50 * 100

X =

т * 220 * (100 - ИО'

где:

£> - оптическая плотность испытуемого раствора; т - масса сырья, г;

1%

220 - удельный показатель поглощения (Е1см) стандартного образца рутина при 410 нм;

IV- потеря в массе при высушивании в процентах. Хранение. В защищенном от света месте.

Проректор по научной работе ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, лауреат премии Правительства РФ, доктор медицинских наук, профессор «

Заведующий кафедрой фармацевтической технологии с курсом биотехнологий ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, доктор фармацевтических наук, доцент

И..Ц. Давыдкин 2023 г.

А.В. Куркина 2023г.

»

Очный аспирант кафедры фармацевтической технологии с курсом биотехнологий ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России « »

ШУал. Косенко 2023г.