Факторы оптимизации репродуцирования in vitro различных представителей рода Rosa L. тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.12, кандидат биологических наук Красильникова, Татьяна Анатольевна

• Красильникова, Татьяна Анатольевна
• кандидат биологических наук
• 1998

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Красильникова, Татьяна Анатольевна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ.

Сокращения

Глава L СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ЗНАНИЙ О ФАКТОРАХ ОПТИМИЗАЦИИ КЛОНАЛЬНОШ МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДА ROSA L

1.1. Развитие исследований по клональному микроразмножению многолетних древесных растений

1.2. Клональное микроразмножение роз: факторы, определяющие эффективность регенерации растений роз из изолированных апексов

1.2Л. Исходное материнское растение как донор экспяантов

1.2.2. Состав питательной среды

1.2.2.1. Углеводы

1.2.2.2. Витамины

1.2.2.3. Фитогормоны и регуляторы роста

1.2.3. Условия культивирования микропобегов

1.2.4. рИ среды

1.2.5. Факторы, способствующие укоренению микропобегов

1.2.6. Адаптация витрорастений в нестерильной среде

1.2.7. Оздоровление репродуцируемых растений от грибных, бактериальных и вирусных болезней методом культуры верхушечных меристем in vitro

1.2.8. Длительное поддержание коллекций репродуцируемых растений при пониженной температуре

Глава II. ОБЪЕКТЫ, МЕТОДЫ И УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

II. Í. Объекты исследований

11.1.1. Ботаническая характеристика рода Rosa L

ПЛ.2. Краткая ботаническая характеристика изученных видов и сортов

роз

II. 1.3. Выбор и подготовка маточных растений

11.2, Условия культивирования

II .2.1. Состав питательных сред

П.2.2. Температурные и световые условия культивирования

11.3. Методы исследований

11.3.1. Биометрическая характеристика репродуцируемых объектов

11.3.2. Оценка выживаемости репродуцируемых объектов

11.3.3. Количественное определение хлорофиллов а и b и суммы кароти-

11.3.4. Определение активности фотоассимиляции С02 репродуцируемыми

ОО ЪС1СТ£1МИ-<.- ■.*»«...»<,« i-..*»«» ..•..«.«г*««**«»*.*«.«.***»-*«»».* «».«*„« я ч s « я * д

ÍL3.5. Определение эндогенного содержания свободной индолилуксусной

кислоты в микропобегах роз методом "ELISA"

II .3.6. Оценка зимостойкости, роста и развития корнесобственкых витро-растений роз при их выращивании в открытом грунте

II.3.7. Статистическая обработка данных

Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

III,1. Введение в стерильную культуру и развитие на начальном этапе

IIL2. Собственно микроразмножение

111.3. Особенности развития микропобегов при высокой дозе БАЛ в питательной среде

111.4. Укоренение микропобегов

111.5. Оценка применимости цеолитов в составе субстратов на этапе адаптации витрорастений к нестерильной среде

111.6. Содержание фотосинтетических пигментов в репродуцируемых растениях

111.7. Активность фотоассимиляции ССЬ микропобегами, витрорастекия-ми и маточными растениями

111.8. Долговременное депонирование микропобегов роз in vitro при по-

Н13ЖСННОИ

111.9. Эндогенное содержание свободной индолилуксусной кислоты в МИКрОП öÖüFclX рОЗ ■..^.>>...u<>>>>>i>>>.i><ci<>>>c>><.>tI..I.>EIC3uM>>3E><c3:l:»Cii>M<:>I«>KBi>>^

ШЛО. Выращивание витрорастений с использованием светочувствительной пленки

III Л 1. Адаптация эфиромасличных роз в условиях in vivo

III Л 2. Особенности развития витрорастений и их жизнеспособность в условиях открытого грунта

Заключение

Рекомендации по практическому применению результатов исследований

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Факторы оптимизации репродуцирования in vitro различных представителей рода Rosa L.»

ВВЕДЕНИЕ

Г ■Ч

Актуальность темы. Экспериментальные работы по клональному микроразмножению многолетних травянистых и древесных растений интенсивно развиваются в течение четырех десятилетий. В результате этого в современной физиологии и биотехнологии растений возникла важная область самостоятельных исследований. Прежде всего решается целый комплекс новых фундаментальных проблем, имеющих общефизиологическое значение, таких, как: тотипотентность и гюлипотентность клеток меристем, специфические механизмы морфогенеза тканей и органов in vitro, интеграция гетеротрофного и автотрофного метаболизма в процессе репродуцирования растения, реювенилизация растительного организма, генетическая, эпигенетическая и онтогенетическая стабильность растений-регенерантов. Накопление новых знаний при решении этих проблем и разработка принципов осуществления цикла клонального микроразмножения придало этой области также и большую практическую значимость. Это обусловлено, в первую очередь, тем, что в процессе клонального микроразмножения возможно освобождение репродуцируемых растений от бактериальной, грибной и вирусной инфекции. Созданные технологии микроразмножения в большинстве случаев могут быть более рентабельными по сравнению с традиционными способами вегетативного или семенного размножения, и если они реализуются непрерывно в годичном цикле, могут обеспечить быстрое воспроизводство больших партий высококачественного посадочного материала. Искшочительную ценность технологии клонального микроразмножения представляют для поддержания биоразнообразия коллекций ботанических садов и сохранения генофонда растений, особенно в тех случаях, когда вид или сорт представлен в ограниченных экземплярах или когда ботанический объект находится под угрозой исчезновения.

К настоящему времени цикл клонального микроразмножения осуществлен с использованием более 400 видов растений. Особый интерес в качестве объекта клонального микроразмножения представляют розы, в связи с тем» что многие представители рода Rosa L. при введении в культуру iti vitro характеризуются низкой выживаемостью первичных эксплантов и низким коэффициентом микроразмножения. Род Rosa L, включает более 500 видов, поэтому изучение особенностей репродуцирования растений, относящихся к разным видам роз, представляет большой теоретический и практический интерес.

Цель и задачи исследований. Исходя из изложенного, целью наших исследований явилось изучение особенностей регенерации из изолированных апексов целостных растении разных представителей рода Rosa L., выявление благоприятных условий органогенеза на основных этапах цикла клонального микроразмножения.

В соответствии с этой целью были поставлены следующие задачи;

- изучить регенерационные способности первичных эксплантов роз на начальном этапе введения в культуру in vitro;

- определить наиболее благоприятный состав питательной среды дата инициации роста микропобегов роз и укоренения in vitro;

- выявить условия, обеспечивающие укоренение микропобегов эфи-ромасличных роз и осуществить полный цикл их клонального микроразмножения;

- изучить особенности пигментного аппарата и потенциальную способность фотоассимиляции ССЬ у репродуцируемых растений разных представителей рода Rosa L.;

- определить эндогенное содержание индолилуксусной кислоты с использованием иммуноферментного метода (ELISA) в микропобегах на этапах их роста и субкультивирования;

- изучить возможность долговременного депонирования in vitro микропобегов разных представителей рода Rosa L.;

- изучить особенности развития витрорастеннй и жизнеспособность при их адаптации в нестерильных условиях и при выращивании в открытом грунте.

Иаучная новизна. Изучены особенности репродуцирования растений в цикле клонального микроразмножения (ЦКМ) у представителей рода Rosa L., относящихся к диким видам и группам роз миниатюрных, чайноги бридных и флорибунда. Впервые осуществлен ЦКМ для трех сортов эфиромасличных роз. С?пределен благоприятный состав компонентов питательной среды на основных этапах ЦКМ для указанных представителей рода Rosa L., обеспечивающий получение качественных растений - реге-нерантов с высокой зимостойкостью и экорезистентностыо в период их активной вегетации.

Впервые изучены особенности пигментного аппарата и потенциальная активность фотоассимиляции С02 у репродуцируемых растений разных представителей рода Rosa L. Показано, что формирующийся in vitro фотосинтетический аппарат отличается пониженным уровнем содержания хлорофиллов и каротиноидов и низким отношением хл а / хл Ъ и высокой потенциальной активностью фотоассимиляции С02.

Впервые изучено эндогенное содержание индолилуксусной кислоты у микропобегов роз на этапах их роста и субкультивирования и показана генотипическая обусловленность уровня содержания ИУК в микропобегах разных представителей рода RosaL.

Показана возможность депонирования in vitro микропобегов роз в течение года без обновления питательной среды при определенном режи-

ме (1=+4°€, освещенность 500 лк) с сохранением их жизнеспособности от (50-85%) в зависимости от сорта и вида.

Практическая значимость. Разработанные варианты технологии кло-нального микроразмножения разных представителей рода Rosa L. могут быть использованы для поддержания биоразнообразия коллекций роз ботанических садов (особенно редких и исчезающих видов), сохранения их генофонда, интродукции и селекции новых форм, получения качественного посадочного материала, применяемого в декоративном садоводстве.

Установленная возможность использования цеолита в качестве добавок в составе субстратов на этапе адаптации регенерантов в нестерильной среде открывает перспективу их дальнейшего применения при клональном микроразмножении роз в промышленных масштабах.

Установленная возможность повышения жизнеспособности депонированных in vitro укорененных микропобегов с введением в питательную среду салициловой кислоты (i 0 мг/л) позволяет ее использовать в практике долговременного сохранения in vitro репродуцируемых растений.

Апробация результатов исследований. Материалы диссертации были представлены на VIII Всесоюзной конференции по регуляторам роста (Киев, 1989), на Всесоюзной выставке "НТП и передовой опыт в агропромышленном комплексе" (1989 г.), на V Всесоюзном симпозиуме "Основные направления научных исследований по интенсификации эфи-ромасличного производства" (Кишинев, 1990), на Всесоюзной научной конференции "Достижения биотехнологии - агро-промышленному комплексу" (Черновцы, 1991), на IV Международной конференции "Регуляторы роста и развития растений" (Москва, 1996), на конференции "Актуальные проблемы биотехнологии в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии" (Москва, 1996), на VII Международной

конференции "Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда" (Москва, 1997), на расширенных научных семинарах Лаборатории физиологии и биохимии растений ГБС РАН (1990-1993г., 1997-1998г.).

Публикации по теме диссертации. Материалы диссертации отражены в 1 í научных публикациях в российских и международных изданиях.

Структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (гл. I), изложения характеристик объектов исследования, условий проведения опытов и методов исследования (гл. II), главы с описанием результатов исследований и их обсуждением (гл. III), заключения, выводов и рекомендаций по практическому использованию результатов исследований. Работа изложена на 169 страницах, содержит 35 таблиц и 31 рисунок. Список литературы включает 105 работ отечественных авторов и 77 работ зарубежных исследователей.

Сокращения:

АБК - абсцизовая кислота БАП - 6-бензиламиыопурин ВР - витрорастение ГК - гибберелловая кислота ИМК - индолилмасляная кислота 21Р - изоленте!пшаденин ИУК - иидолилуксусная кислота КР - коэффициент размножения НУК - нафтилу!ссусная кислота П - побег

ЦКМ - цикл клонального микроразмножения ЭДДГА - этилендиаминдигидроксифенил ацетат ЭДТА - этилендиамингетрацетат

Обозначения садовой группы роз: ЧГ - чайно-гибридная группа Мин - миниатюрная группа Ф - группа флорибунда ЭМ - группа эфиромасличных роз

Заключение диссертации по теме «Физиология и биохимия растений», Красильникова, Татьяна Анатольевна

Выводы.

1. Закономерности органогенеза микропобегов и корнеобразования у представителей рода Rosa L. (дикие виды, декоративные и эфиромас-личные розы) в цикле клонального микроразмножения in vitro определяются видовыми и сортовыми особенностями генотипов, физиологическим состоянием материнского растения и почек, из которых изолируются эксплангы, составом питательной среды.

2. Впервые разработан вариант клонального микроразмножения in vitro эфиромасличных роз с использованием жидкой питательной среды, обеспечивавшей еолубилизацию оттекающих в базальную зону микропобегов фенольных соединений и эфирных масел, ингибирующих ризогенез репродуцируемых растений.

3. Показана возможность высокоэффективного укоренения микропобегов под действием ИМК, ливала, салициловой кислоты, а также изменения режима культивирования (t=40C) освещенность 500 лк). Выявлены оптимальные условия, обеспечивающие высокий уровень (86-91%) укоренения микропобегов сортов роз с желтой окраской цветков, которые при вегетативном размножении характеризуются очень низким уровнем укореняемости. Эти результаты свидетельствуют о видовой и сортовой специфике ризогенеза in vitro разных представителей рода Rosa L.

4. Изучены особенности формирования фотосинтетического аппарата у репродуцируемых растений роз. В процессе генезиса хлоренхимы листьев возможна редукция губчатой паренхимы, вследствие чего листья микропобегов и регенерантов характеризовались пониженным уровнем содержания хлорофиллов и каротиноидов, низким отношением хл. а / хл. b и высокой потенциальной активностью фотоассимиляции С02.

5. Определено эндогенное содержание ИУК у микропобегов роз на этапах их роста и субкультивирования. Показана генотипическая обусловленность уровня содержания ИУК в микропобегах разных представителей рода Rosa L.

6. Репродуцированные корнесобственные витрорастения роз (сорт Tornado) при их выращивании в полевых условиях проявили высокую зимостойкость («100% выживания) и устойчивость к неблагоприятным условиям на протяжении периода вегетации, хорошие регенерациоиные способности и высокие декоративные качества.

7. Процесс клонального микроразмножения in vitro обеспечивал высокую стабильность морфологических признаков регенерантов различных представителей рода Rosa L.

8. Показана возможность долговременного депонирования in vitro (при t=4°C, освещенности 500 лк с определенным составом среды) микропобегов роз в течение года с сохранением их способности к полному завершению цикла клонального микроразмножения. Введение в питательную среду салициловой кислоты на этапе укоренения способствовало лучшей сохранности укорененных витрорастений в течение 6 месяцев депонирования.

Рекомендации по практическому применению результатов исследований.

1. Разработанные варианты технологий клонального микроразмножения in vitro различных представителей рода Rosa L. (диких видов, группы флор и бунда, чаино-гибридных и миниатюрных роз) рекомендуются для использования при серийном воспроизводстве посадочного материала в целях поддержания биоразнообразия коллекций роз. применения в селекции и в декоративном садоводстве.

2. Цеолит может быть использован в качестве добавки при создании композиций субстрата для быстрого формирования корневой системы витрорастений роз на этапе их адаптации к нестерильной среде и получения стандартного материала.

3. Полученная в процессе клонального микроразмножения форма миниатюрной розы (с предварительным наименованием ГБС-197, рис. 31), обладающая рядом особых декоративных признаков» совместно с Отделом декоративных растений подготавливается для передачи в госсортоиспытание.

4. Пленка " полисвета н", использованная в качестве пленочного покрытия витрорастений на этапе их адаптации к нестерильной среде и в начальный период выращивания в полевых условиях, благоприятствует росту и развитию витрорастений и стимулирует их цветение. Пленка "полисветан" может быть использована для указанных целей при реализации клонального микроразмножения роз в производственных условиях. б)

Рис. 31. Сомаклональный вариант сорт ГБС-197: а) в закрытом грунте; б) в открытом грунте; в) маточное растение, сорт Pink Symphony след. стр.). в)

Заключение.

Физиология клонального микроразмножения многолетних травянистых и древесных растений с момента ее зарождения в начале шестидесятых годов на протяжении почти четырех десятилетий интенсивно развивается, обогащаясь новыми фундаментальными концепциями, выдвигая новые теоретические проблемы и воплощая накопленные знания во все более эффективную технологию воспроизводства оздоровленных растений - регенерантов. Непрерывно расширяется состав видов, сортов и жизненных форм растений, введенных в процесс клонального микроразмножения. На основании результатов изучения закономерностей морфогенеза, молекулярных и клеточных механизмов поддержания жизнеспособности репродуцируемых растений in vitro возникли два важнейших направления биологических исследований -долговременное депонирование и криоконсервация in vitro ботанических объектов (Дорошенко и др., 1994, 1997; Подвигина, 1997; Высоцкая, Мо-хамед, Бугенко, 1997; Мохамед, 1998; Кириченко и др. 1997).

Наши исследования физиологических факторов, определяющих процесс клонального микроразмножения роз, были начаты в 1989 году, когда основополагающие методические принципы клонального микроразмножения были сформулированы, а изучение регенерации древесных растений в процессе клонального микроразмножения только начиналось. Первые успешные опыты по введению в культуру in vitro ряда сортов декоративных роз показали, что разработка технологии клонального мнкроразмножения роз связана с преодолением целого ряда трудностей и ограничений (Высоцкий, Алехно, 1986). Они были обусловлены очень низким уровнем выживания первичных эксплантов и микропобегов, слабо выраженной способностью микропобегов к укоренению, высокими требованиями репродуцируемых растений на всех стадиях цикла клонального микроразмножения, а в особенности, на этапе адаптации вит

W V рорастении в нестерильной среде.

Наши исследования были прежде всего направлены на выяснение специфических требований разных видов и сортов к условиям существования in vilro на основных этапах цикла клонального микроразмножения. Полученные результаты свидетельствуют о сильновыраженной видовой и сортовой специфике требований исходных первичных эксплантов и репродуцируемых структур на последующих стадиях регенерации растений к составу питательной среды. Требования первичных эксплантов роз к составу питательной среды на первом этапе культивирования in vitro при этом определяются еще их физиологическим состоянием, что зависит от физиологического состояния материнского растения, возраста и состояния побега, от которого вычленяются первичные экспланты.

Указанные зависимости, в частности, детерминируются моментом вычленения почек в течение периода вегетации материнских растений. В начале восьмидесятых годов экспериментаторы придерживались мнения о том, что способность к регенерации у первичных эксплантов роз проявляется при их вычленении в апреле-мае. Нами было показано, что экспланты роз способны разв!гваться на питательной среде при их вычленении от материнских растений, произрастающих в открытом грунте, в течение всего периода вегетации растений. Но при этом у декоративных роз наибольшей жизнеспособностью обладают апексы, изолированные во [1-ой половине июня и июля. У диких видов роз наибольшей выживаемостью характеризовались экспланты, изолированные в 1-ой половине июля. При этом жизнеспособность эксплантов зависела от зоны побега, из которой вычленялись апексы. У декоративных и эфиромасличных роз наиболее жизнеспособными in vitro были экспланты, изолированные из почек средней и верхней зон побега, а у диких видов роз - из почек средней зоны побега. Можно полагать, что от локализации почек на побеге. характеризующихся разным возрастом, онтогенетическим и физиологическим состоянием соответствующей его зоны, зависит степень ювенильности и реактивности экспланта. Для нас представляется наиболее важным подчеркнуть тот факт, что у многолетнего древесного растения, как, например, у растения розы, независимо от возраста побега и его конкретной зоны вычленяемые экспланты имеют нулевой календарный возраст в силу того, что мернстематические клетки находятся на инициальном уровне своей функциональной дифференцировки. Поэтому возраст репродуцируемого растения отсчитывается от момента начала регенерации экспланта. Ювенильность и реактивность исходных эксплан-тов определяются многими факторами, такими, как содержание свободных нуклеотидов, функциональная активность ферментных комплексов, в частности, включающих фенилаланинаммиаклиазу и глицеральдегид фосфатдегидрогеназу и рядом других физиологических и биохимических признаков (Соис1ге1, Ьаргет, 1994). Мы исходили из представления о том, что наряду с этими факторами важнейшим условием, определяющим ювенильность и реактивность первичных эксплантов, от которого, в конечном итоге, зависит выживание экспланта и его воплощение в высоко жизнеспособный микропобег, является содержание эндогенных фитогормонов и других физиологически активных соединений в вычленяемых эксплантах. От этого зависят требования экспланта к содержанию фитогормонов и регуляторов роста в питательной среде, его реакция через проявление своей регенерационной способности на реальное их содержание в питательной среде на начальном этапе развития и опосредованно на содержание других компонентов в питательной среде.

Наши исследования показали, что индукция морфогенеза меристем декоративных роз зависит от содержания БАП и ГК в питательной среде. Экспланты диких видов роз проявили лучшую регенерационную способность при пониженных концентрациях цитокинина в питательной среде.

Это согласуется с данными, ранее полученными fChosh-khui, Sink (19S2). Нами установлено, что наиболее благоприятной для развития микропобегов роз является питательная Среда Мурасиге и Скуга (1962) с повышенным содержанием Са, Mg, Fe и Мп. Увеличение содержания макро- и микроэлементов в питательной среде позволяло обеспечить активный рост эксплантов и преодолеть хлороз листьев, характерный для репродуцируемых растений роз. Вместе с тем, введение в питательную среду кинетина, зеатина и изоленте пила денина не способствовало повышению регенерации первичных эксплантов и эффективности размножения микрокустов по сравнению с БАП. Гибберелловая кислота при оптимальной концентрации БАП в среде оказывала незначительное действие на рост мнкропобегов чайно-гпбридных роз при концентрации 1 -2 мг/л, у миниатюрных роз, роз группы флорибунда увеличение высоты микропобегов в среднем в 2 раза, у эфиромасличных роз в 5 раз было получено при концентрации ГК 2 мг/л.

Разные виды и сорта роз проявили специфические требования к условиям субкультивирования микропобегов. У диких видов размножение микропобегов происходило уже на 2-ом субкультивироваиип (при 0,4 мг/л БАП), а при концентрации БАП 1-3 мг/л на 3-ем субкультивировании был достигнут максимальный коэффициент размножения. У декоративных роз начало размножения микропобегов зависело от принадлежности к садовой группе. У миниатюрных роз и у группы флорибунда (при концентрации БАП 0,4 мг/л) размножение мнкропобегов происходило на 5-ом субкультивировании, а у чайно-гибридных и эфиромасличных роз на 6-ом субкультивировании. На 7-8ом субкультивированиях коэффициент размножения у изученных групп роз выравнивался, при этом у эфиромасличных роз он был ниже по сравнению с другими представителями рода Rosa L.

Способность микропобегов к укоренению в большой степени зависит от генотипа роз. У микропобегов R.acicularis и R.inultifiora рнзогенез микропобегов протекал успешно в создаваемых благоприятных условиях. Применение агаровой среды (1/2 среды М.С.) с добавлением активированного угля (0,5%) и предварительным замачиванием микропобегов в растворе ИМК (50 мг/л в течение 6 часов) позволило получить укореняемость микропобегов R.divina на уровне 59%. В то же время нами установлена склонность к витрификацин и апикальному некрозу у микропобегов R.divina.

Для инициации укоренения микропобегов эфиромасличных роз нами была использована жидкая питательная среда, что способствовало солубилизации эфирных масел и феиольных соединений, притекающих к основанию микропобегов и ингибирующих их ризогенез. Следует констатировать, что нами совместно с сотрудниками ВНИИЭК (Симферополь) впервые был осуществлен полный цикл клонального микроразмножения и получена партия растений - регеперантов трех промышленных сортов эфиромасличных роз (Украина, Лань и Радуга).

Растения - регенсранты всех изученных объектов (кроме R.divina) успешно прошли этап адаптации к нестерильным условиям. Введение цеолита в состав субстратов на этапе адаптации регенерантов к нестерильной среде позволяет обеспечить эффективное развитие корневой системы витрорастения и его подготовку к дальнейшему выращиванию в открытом фунте.

Корнесобственные витрорастения миниатюрных и чайно-гибрндных роз и сортов группы флорибунда проявили при выращиавнин в коллекции роз ГБС РАН и на территории экспериментального участка ЛФиБР в летний период высокую экорезистентность и декоративные качества, а в период зимовки высокую устойчивость к зимним стрессам.

При адаптации к существованию в условиях закрытого грунта оптимизация роста и цветения регенерантов роз может быть достигнута с использованием пленочного покрытия из пленки "полисветан".

Изучение физиологических характеристик у репродуцируемых растений роз позволило установить специфические особенности формирования фотосиитетического аппарата in vitro, которые проявляются в редуцированном состоянии губчатой паренхимы листьев, пониженных отношении хлорофшшы / каротиноиды и хлорофилл а / хлорофилл Ь. Это указывает на то, что становление системы фотосинтетических мембран в развивающихся хлоропластах листьев микропобегов и регенерантов характеризуется преимущественным развитием светособирающих комплексов фотосистем I и II и пониженным отношением пигментных фондов, локализованных в реакционных центрах по сравнению с фондами пигментов, локализованных в светособирающей антенне.

Результаты выполненных нами исследований и обобщение результатов других авторов позволяют констатировать, что из}^чение факторов оптимизации клонального микроразмножения роз выходит из этапа эмпирических экспериментальных поисков и может быть продолжено в дальнейшем с применением более эффективных подходов, включающих принцип предсказания и воспроизведения циклов воспроизводства вит-рорастений в определенном диапазоне коэффициента размножения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Красильникова, Татьяна Анатольевна, 1998 год

Список литературы.

1. Алехно Г.Д., Высоцкий В .А. Клональное микроразмножение роз. //Физиология и биохимия культурных растений, 1986.-т.18.-с.489-493.

2. Алехно Г.Д. Клональное микроразмножение промышленных сортов розы: Автореф.дис...канд.с.-х»наук. ML, 1986. 22 с,

3. Батукаев A.A., Шишхаева М.Г., Садаева М.А. Адаптация оздоровленных in vitro растений винограда на цеолитовых субстратах. //Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда: конф. Тез. докл. М., 1997.-c.377.

4. Бояркина И.С. Минеральное питание роз. М. Обзорная информация: Озеленение населенных мест. 1986.-вып. 1 (47).-50 с.

5. Бургутин А.Б. Микроклональное размножение растений винограда. Перевод растений в почвенную культуру. //Биология культивируемых клеток и биотехнология. Межд. конф. Новосибирск. 1988.-c.312.

6. Бутенко Р.Г. Применение метода культуры изолированных верхушечных почек для изучения процесса роста и органогенеза растений. //Физиология растений. М., 196ö.-7.-№ 6.-С.715-723.

7. Бугенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. М.: Наука, 1964.-272 с.

8. Бугенко Р.Г. Гормональная регуляция дифференцировки растительной клетки в культуре in vitro. //Рост и гормональная регуляция жизнедеятельности растений. Иркутск. 1974.-c.67-85.

9. Бутенко Р.Г. Экспериментальный морфогенез и дифференциация в культуре клеток растений. //Тимирязевское чтение XXXV, 1975.

10. Бугенко Р.Г. Культура клеток и тканей растений в практической генетике и селекции. Доклады ВАСХНИЛ. М.: Колос, l982.-c.5-7.

1 1. Бутенко Р.Г. Культура клеток растений и биотехнология. М.: Наука, 1986»

12. Бутенко Р.Г., Гусев MJB., Кнркин A.B. Биотехнология. Клеточная ин женерия. Высшая школа. 1987.-вьш.З.~с.132.

13. Бутенко F.F. Биология клетки и биотехнология. Сб. "Наука и человечество", 1987.-е. 151-169.

14. Бутенко Р.Г. Биотехнология растений: Культура клеток. М., 1989.-с.124-125.

15. Бутенко Р.Г. Биология культивируемых клеток и биотехнология растений. М.: Наука, 1991.-c.279.

16. Бутенко Р.Г. Молекулярно-кяеточная биология культивируемых in vitro клеток высших растений. //Тез. докл.-с.4.

17. Былов В.Н., Михайлов НЛ., Сурина ЕЛ. Розы. //'Итоги интродукции. М., Наука, 1988.-440 с.

18. Веретенников A.B., Землянухина O.A., Образцова Н.Е. Влияние фито-гормонов на культивирование меристем розы in vitro. - В кн.: Регуляторы роста и развития растений: Тез. докл. М.: Наука, 1997.-c.322.'

19. Вердеревская Т.Д., Кеглер X., Бивол Т.Ф. и др. Технология производства безвирусного посадочного материала плодовых, ягодных культур и винограда. М. 1989.-168 с.

20. Высоцкая О.Н. Длительное сохранение in vitro коллекции растений земляники. //Физиология растений. М., 1994.-т.41.-№ 6.-С.935-941.

21. Высоцкая О.Н., Мохамед А.И., Бутенко Р.Г. Криоконсервация меристем малины. //VII Межд. конф. "Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда". Тез. докл. Москва, 1997.-c.519.

22. Высоцкий В.А., Попов Ю.Г., Трушечкин В.Г. Регенерация изолированных мериетематических верхушек древесных растений in vitro. - В кн.; Плодоводство и ягодоводство Нечерноземной полосы. М., 1976,-т. 9.-с. 101-107.

23. Высоцкий В .А., Поликарпова Ф.Я., Трушечкин В.Г. Использование б-бензиламинопурина для размножения плодовых и ягодных культур. - В

кн.: Регуляторы роста и развития растений: Всесоюз. :конф. Тез, докл. Мл Наука, 3981.-с. 155-156.

24. Высоцкий В.А. Культура изолированных тканей и органов плодовых растений: Оздоровление и микроклональное размножение. //Сельскохоз. биология. М., 1983.-№ 7.-С.42-47.

25. Высоцкий В.А. Клональное микроразмножение растений. //Культура клеток и биотехнология. М.: Наука, 1986.-c.91-102.

26. Высоцкий В.А. О генетической стабильности при клональном микроразмножении плодовых и ягодных культур. //Сельскохоз. биология. М., 1995.5.-С.57-63.

27. Высоцкий В.А. Перспективы использования биотехнологических методов в садоводстве. //Актуальные проблемы биотехнологии в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии: конф. Тез. докл. М., 1996.-c.15.

28. Высоцкий В.А. Биотехнологические методы в системе производства оздоровленного посадочного материала и селекции плодовых и ягодных растений. //Дисс...доктора с.-х.наук. М., 1998.-321 с.

29. Гамбург К.З., Леонова Л .А. Гормональная автономность растительных клеток в изолированной культуре. Рост и гормональная регуляция жизнедеятельности растений. Иркутск: Сибир. ик-т физиологии и биохи мии растений СО АН СССР. 1974.-c.98.

30. Геринг X., Цоплауер К., Гоффман Б., Шинкер И. Влияние ауксина и красного света на корнеобразование у побегов березы. //Культура клеток растений и биология. М.: Наука, 1986.-е. 106-110.

31. Голодрига ПЛ., Зленко В А., Бутенко Р.Г., Левенко Б.А. Ускоренное размножение ценных генотипов винограда. //Садоводство. 1982.-№ 3.-

с.24-27.

32. Доспехов Б .А. Методика полевого опыта. М.: Агропромиздат, 1985.351 с.

* < ¿г

I J> J

33. Дорошенко HiL, Хохдова МЛ., Высоцкая Ö.H. Хранение коллекции винограда in vitro при пониженной температуре. //Виноград и вино России. 1994.~Jvfs 3.-С.24-27.

34. Дорошенко Н.П., Соколова Г.В. Способы создания коллекций генофонда винограда. //Тез. докл. VII Межд. конф. "Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда". Москва, 1997.-c.52I.

35. Зарубина МЛ., Гуева Н.И., Балашову H.H., Маслоброд СЛ., Игуменов В.А. Адаптивные реакции культурных растений на биотические и абиотические стрессы. //Сельскохоз. биология. М., 198S.-J40 20.-еЛ ! 1-117. •36. Иванова Л.И., Бумбеева Л.И., Федорова Н.К., Савельева ГЛ. Классификация роз, //III Межд, конф. "Цветоводство - сегодня и завтра". Тез. докл. Москва, 1998.-С.120-121.

37= Калинин Ф.Л., Саранцкая- В.В., Полищук В.Е. Методы культуры тканей в физиологии и биохимии растений. Киев, ! 980.-487 с. 38. Катаева Н.В. Гормональная регуляция микроклонального размножения растений. //Регуляция роста и развития растений. М.: Наука, 1981.-сЛ 50-151.

39., Катаева Н.В., Бутенко Р.Г. Принципы микроклонального размножения растений на примере герберы. //Изв. АН СССР, 1982.-№1. -с. 126-130.

40. Катаева Н.В., Бутенко Р.Г. Клональное микроразмножение растений. М.: Наука,' 1983.-95 с.

41. Катаева Н.В. Особенности микроразмножения трудно-укореняемых сортов яблони. //Сельскохоз. биология. М., 1986.-№ 4.-сЛ 8-20.

42. Катаева Н.В., Александрова И .Г., Драгавцева Е.В. Значение гормонов в формировании витрифицированных побегов яблони при микроразмножения. //Биология культивируемых клеток и биотехнология растений. М.: Наука, 1991.-е Л 89-192.

43. Кефели В.И. Рост растений и морфогеиез.//Физиология растений. М,5 1987.-т.34.-вып.4.-с.685-697.

44. Кефеяи В.И., Дмитриева ГА. Биотехнология, Пущино. 1989.- с.25~ 26.'

45. Киелем Ф., Калинина Е.Б., Хитрова Л.М., Мазин'В.В. Эшщщия пурпурная in vitro и in vivo. //VII Межд. конф. "Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда". Тез. докл. Москва, 1997.-с.429.

46. Кин Б.В., Митрофанова О .В., Клименко З.К. Совершенствование биотехнологических приемов микроразмножения розы садовой. //Проблемы дендрологии, садоводства и цветоводства: Межд. конф. Тез. докл. Ялта: Изд-е НБС. 1995.-c.57.

47. Кириченко Е.Б., Фернандо Ш.С., Кузьмина ТА., Катаева Н.В. Физиологические аспекты клонального микроразмножения эфиромасдичных роз. //V Всесоюзный симпозиум "Основные направления научных исследований по интенсификации эфиромасличного производства". Симферополь, 1990.-С.25-26.

48. Кириченко Е.Б., Кузьмина ТА., Катаева Н.В. Факторы оптимизации репродуцирования декоративных и эфиромасдичных роз in vitro. //Бюллетень Главного ботанического сада, 1991 .-т. 159,-с.б 1 -67.

49. Кириченко Е.Б., Кудрз А., Кузьмина ТА., Салланон Ю., Фернандо Ш.С., Котова Л.М. Клональное микроразмножение и физиологические особенности регенерантов древесных растений. //Тезисы докладов Всесоюзной конференции "Достижения биотехнологии - агропромышленному комплексу". Черновцы, 1991 .-т. 1 .-с.35.

50. Кириченко Е.Б., Фернандо Ш.С., Кузьмина ТА., Чернядьев И .И. Особенности органогенеза эфиромасдичных роз при клональном микроразмножении. //Бюллетень Главного ботанического сада, 1993.-t.167.-с.96-102.

51. Кириченко Б.Б., Кудрэ А., Салланон Ю., Фернандо Ш., Красилькнхо-ва ТА. и др. Оценка ювенильности эксшшнта и оптимизации

репродуцирования лекарственных растений, /ЛГезисы конференции "Актуальные проблемы биотехнологии в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии"» Москва, I996.-c.3B.

52. Кириченко Б,.Б., Кудрэ А., Салланон 10., Жену-Гуришон К., Краеиль-никова Т.А., Бидкжова Г.Ф. Клональное микроразмножение многолетних растений и долговременное сохранение их коллекции in vitro. //Тезисы докладов VII Международной конференции "Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда". Москва, 1997.-c.525.

53. Кожин A.B., Кравцов И.В., Скоробогатова Е.П. Действие тиамина и рибофлавина на рост- и развитие изолированных зародышей груши и яблони в условиях стерильной кулыуры. //Физиология растений. ! 973.-т.20.-вып.6.-е.! 285-1288.

54. Константинова Т.Н., Аксенова Н.П., Сергеева Л.И., Чайлахян М.Х. Взаимное влияние света и гормонов на регуляцию морфогенетических процессов в культуре in vitro. - В кн.: Культура клеток растений: 3 Всесо-юз. конф. Тез. докл. Абовян. 1976.-c.150.

55. Корнацкий С .А., Высоцкий В.А., Трушечкин В .Г. Проблемы клонаяь-ного размножения косточковых культур, //Достижения в плодоводстве в Нечерноземной зоне РСФСР: Сб. научи, тр. М., 1991.-е. 104-106.

56. Корнеева Т.В. Морфологические и биохимические изменения при культивировании in vitro ювенильных и зрелых побегов плюща обыкновенного. //Автореф.дис...канд.биол.наук. Москва, 1995.-23 с.

57. Красильникова Т.А., Кудрэ А., Салланон Ю., Кириченко Е.Б. Действие фитогормонов на пролиферацию эксплантов и укоренение мгасронобегов различных видов и сортов роз. //Тезисы докладов IV Международной конференции "Регуляторы роста и развития растений". Москва, 1996.-С.301-302.

58. Красильникова ТА., Федорова Н.К., Борисова Н.И., Кириченко Е.Б. Поддержание биоразнообразия коллекции роз с использованием физно»

логических и биотехнологических методов. //Тезисы докладов конференции "Цветоводство - сегодня и завтра". Москва, 1998.-е.!49-15L 59.. Кузнецова Т.А., Кириченко Е.Б. Стимуляция формирования побегов и корней регуляторами роста при клональном михроразмножении роз, //VIII Всесоюзная конференция по регуляторам роста. Киев, "Наукова Думка", 1989.-c.243.

60. Леонтьев-Орлов O.A. Разработка клонального микроразмножения яблони. //Автореф. дис...каид. с.-х. паук. М., 1986.-24 с.

61. Максимов В.Н. Многофакторный эксперимент в биологии. М.: Изд-во МГУ, 1980.-c.280.

62. Мелехов Е.И. Влияние 2,4-D на проводимость корней, поглощение воды и транспирацию. //Физиология растений. 1979.-т.26.-вып.5.-с. 1001 •• 1007.

63. Мещерякова Н.И., Бажанов В.Ф. Гормональная регуляция побегообразования в изолированой культуре апикальных меристем розы эфиромасличной. - В кн.: Регуляторы роста и развития растений: I Веесо-хоз„ конф. Тез. докл. М,: Наука, 19Вl.-сЛ66-167.

64. Морель Ж. Борьба с вирусными болезнями растений с помощью культивирования тканей. //Сельскохоз. биология. М., 1967.-2.-JNb 4.-C.622-628.

65. Мохамед А.И. Микроразмножение, длительное депонирование и криосохранение in vitro малины красной. Автореф.дис...какд.биол.наук.

М., 1998. 16 с.

66. Назаренко Л .Г. Роза эфиромасличная. Киев: Наукова Думка. 1978.196 с.

67. Назаренко Л .Г., Миньков Б .П., Мустяцэ Г.И., Мурин A.B. Кулыура эфиромасличной розы. Кишинев: Штиинца. 1983.-187 с.

68. Назаренко Л.Г. Селекция розы эфиромасличной. Симферополь, 1997.418 с.

69. Насимов А.З., Зленко В .А. Совершенствование способов адаптации растений винограда, размноженных методом in vitro. //Ускорение НТР в плодоводстве и виноградарстве и задачи молодых ученых: Научн. конф. Алма-Ата. 1987.-c.39.

70. Овчаров ICE. Витамины в жизни растений. М.: йзд-во АН СССР, 1955.-С.46-62.

71. Овчаров К.Е. Витамины в растениях. М.: Знание, 1958.-с. 15-17, 30.

72. Овчаров К.Е. Роль витаминов в жизни растений. М.: Изд-во АН СССР, 1962.-c.4~24.

73. Подвигина O.A., Знаменская В .В. и др. Депонирование сахарной свеклы в культуре in vitro. //Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда: Межд. конф. Тез. докл. М., 1997.-c.529.

74. Попов Ю.Г., Трушечкин В.Г. Получение растений земляники методом культуры изолированных верхушек побега. //Выращивание безвирусного посадочного материала плодовых и ягодных культур: Сб. научн. тр. М., 1972.-Т.5.-С. 137-146.

75. Попов Ю.Г. Ускоренное размножение земляники с помощью метода культуры мериетематической верхушки. //Сельскохоз. биология. М., 1977.-12.1 .-с.4'5-47.

76. Попов Ю.Г., Попова И.В., Мишина А.П. Применение метода культуры меристематичееких верхушек в селекции земляники. //Сельскохоз. биология. М., 1978.-т. 13.-№ 6.-С.916-919.

77. Попов Ю.Г., Высоцкий В.А. Культура стеблевых верхушек in vitro как метод ускоренного размножения плодовых и ягодных растений. //Вестник с.-х. науки, 1978.-М 4.-е. 124-127.

78. Попович ЕА.„, Гетко Н.В. Влияние'б-бензиламияопурина на эффективность клонального микроразмножёния декоративных роз.

//Регуляторы роста и развития растений: Межд. конф. Тез. докл. М., ! 997.-с.312.

79,. Протасова H.R. Светокультура как способ выявления потенциальной продуктивности растений,. //Физиология растений, М., !987.~т.34.~вьш.4.~ с.8 12-822.

80. Романов ГА. Природные цеолиты в сельском хозяйстве. //Агронром. комплекс России. 1989.-J4© 9.-С.28-29.

81. Романов ГА., Рябых Р.С., Байкова С .И, Опытно-промышленное испытание и использование природных цеолитов в агропромышленном комплексе РСФСР. //Перспектива применения цеолитсодержащих туфов Забайкалья. Чита. 1990.-е. 104-113.

82. Рыбалко JI.E. Экономическая характеристика производства безвпрус» ных мериклонов цветочных культур. //Биология клеток и биотехнология растений. М.: Наука, 1991.-С.227-232.

83. Сааков С .Г., Риекста ДА. Розы. Рига: Зинатне, 1973.-359 с.

84. Самсоиова О.Н., Трушечкин ВТ. Старение растений земляники Fragaria ananassa Duch. при хранении in vitro. //Новое в ягодоводстве Нечерноземья: Сб. научн. тр.НИЗИСНП. М., 1990.-С.35-44.

85. Самсонов С .К. Невидимые земледельцы. М.: Мысль. 1987.-е.! 71.

86. Сене Ж. Биотехнология: результаты и перспективы. //Биотехнология сельского хозяйства и развитие, апрель 1987.-c.4-7.

87.. Сафразбекян С А., Урманцева В.В., Катаева Н.В. Роль сахарозы в регуляции морфогенеза каперса in vitro. //Биология культивируемых клеток и биотехнология растений. М.: Наука, 1991 .-с.! 92-197.

88. Семенчин С.И., Мишуров В Л», Ромашко НЛ. Поддержание коллекции и размножение оздоровленных сортов картофеля in vitro. //Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда: Межд. конф. Тез. докл. М., 1997.-c.465.

89. Соколов СЛ. Деревья и кустарники СССР. M.-JL: йзд-во АН СССР. 1954.~c.6i 6-690.

90. Томшшн АЛ.» Упадышев М.Т. К вопросу об эффективности оздоровления растений малины красной от вируса мозаики резухи с использованием метода культуры меристем. //Ягодоводство в Нечерноземье; Сб. научн. тр. М., 1993.-С.25-29.

91. Трофимец Л.Н., Замотаев А.И., Варищев ЮЛ., Князева В .П. Ммму--ноферментный метод диагностики. //Защита растений. 1985.-№ 11 .-с.8-10.

92. Трушечкин В.Г., Высоцкий В.А., Леонтьев-Орлов O.A. Размножение клоповых подвоев яблони методом культуры ткани. //Сельекохоз. биология. 1982.-Ко 4.-С.455-457.

93. Туровская Н.И., Стрыгина О.В. Микроклокальное размножение малины. //Садоводство и виноградарство. 199ö.-Ke 8.-С.26-29.

94. Упадышев Мл. Клональное микроразмножение и особенности регенерации растений ежевики и малины черной in vitro. //Дне...канд. с.-х. наук. М., 1991.-21 Í с.

95. Холодова В.П. Рост и метаболизм углеводов в культуре ткани растений. //Культура клеток растений. М.: Наука, 1981 .-с. 17-37.

96. Хржановский В.Г. История классификации рода Rosa L.: К истории систематизирующей ботаники. //Сб. работ каф. ботаники ТСХА. 1958.-Т.1.-С.55-125.

97. Червякова О.Н. Вредность некоторых вирусов на Rosa и Sorbus. //Сб. научн. статей Бюллетеня ГБС РАИ. М.: Наука, 1993.-е.! 16-119.

98. Чернядьев И.И., Доман И .Г. Фотосинтез листьев шопина в зависимости от эффективности симбиоза растенкй с клубеньковыми растениями. //Изв. АН СССР. Сер. биол. 1974.-JNe 1 .-с. 134-139.

99. Шамина З.Б., Бутенко Р.Г., Загорска Н. Закономерности морфогенеза в культуре тканей диплоидного и полиплоидного табака. //ДАН СССР. 1971 .-т. 196.~№ 5.-С.219-222.

100. Шамйна З.Б. Генетика и цитология культуры ткани растений-регенерантов, культура изолированных органов, тканей и клеток растений. //Всесоюз. конф. Тез. докл. М.: Наука, 1976.-е.!29-135. 301. Шамина З.Б. Андрогенез и получение гаплоидов в культуре пыльников и микроспор. //Культура клеток растений. М.: Наука, 1981.-е. 124-125. 102. Шахова Г.И., Возна Л .И., Соловьева Е.Н. Использование разных форм цеолита в составе субстратов при выращивании тропических растений. //Сб. научн. статей Бюллетеня ГБС РАН. М.: Наука, 1997.-С.65-72. 303. Щелкунова С.Е. Изучение условий, способствующих регенераций растений малины из меристематических верхушек. //Дис..лсанд. биод. наук. М., 1972.-149 с.

104. Юзепчук С.В. Род Роза (шиповник) - Rosa L. //Флора СССР. М-Л.: Изд-воАН СССР, 194 L-T.10.-c.431-506.

105. Юсуфов А.Г. Культура изолированных листьев. М.: Наука, 1988.102 с.

106. Alderson P.G., Mckinless J., Rise R.P. Rooting of cultured rose shoots, //Acta Hortic. 1988.-vol. 226-p Л75-182.

107. Arnold N.P., Вши M.P,. Barthakur N.N., Cloutier D.C. A study of me effect of growth regulators and time of plantlet harvest on the in vitro midtipBcation rate of hardy and hybrid tea roses. //J.Hortic.Sci. 1992.- voI67.-p.727-735.

108. Begjji-Sallanon H. Contribution а Гetode de relations r^r; n:*!1*-'~ Iiybriqiie, pH mtracelJiiteire et morphogenese cliez le rosier cultr t и т ^ . DEA, Umversite Blaise Pascal. 1987.-37 p.

109. Begin-Sallanoii И., Coudrei A. et Gendxaiid M. Relations between pH intracellular, water relations and morphogenesis in rose plants in vitro. //BiolPlant. 1990.-voI32.-p.58-63.

110. BhatM.S. Micropropagation in rose. //Indian Hortic. 1992.-vol.37.-p. 17-19.

I1L Bmi G., Leva A.R.C., Nieese F.P. Rieerchs siiîla mcropxopagazkme clefla iose. //Riv. ortofiorofrait. 1983 .-vol.67.-p. 1-13.

112. Bjamason E.N., Hanger B.C., Morsai J.R., Cooper J.A, Production of prunus necrotic ring-spot virus-free roses by heat treatment and tissue-culture. //J. of Agricultural research. 1985.-vol.28.-1 L-p.151-156.

113. Bornman C.N., Vogelmann T.C. Effect of rigidity of gel medium on benzylacbnine-induced adventition bud formation and vitrification in vitro in Picea abies. /./Physiol. Plant. 1984.-vol.61.-p.505-512.

114. Boxus P. Rapid production of virus-free strawberry by in vitro culture. //Acta Horticultural. 1976 -v.66. -p .35-38.

115. Boxus P. Assainissement des arbres fruitiers et du fraisier par culture de meristèmes. //Parasitica 1984.-v.40.-p. 139-155..

116. Boyer N., Desbiez M.O., Hoffinger M.. Garpar Th. Effect of lithium on

imgmomorpïiogeiiesis m Bivona dioica. Ethylene production and sensitiving. //Plant Physiol. 1983-vol.72.-p.522-525.

117. Bressan P.H., Kim Y.J., Hydman S.E., Hasegawa P.M., Bressan R.A. Factors affecting in vitro propagation of rose. •//J.Amer.Soc.Hortic.Sci. 1982.-vol.107.-

p.979-990.

118. Capellades M,, Lemeur R., Debergh P.. Effects of sucrose on starch accumulation and rate of photosynthesis in Rosa cultured ill vitro. Plant thesis in Rosa cultured in vitro. Plant Cell, Tissue and Organ Culture. 1991 -vol.25.-p.21-26.

119. Chiysothemis G.-V. The effect of N2-benzyladenme, №-(D"-isopeme:n)d)5 adenine, zeatin and kinetin on in vitro shoot formation of rose cultivar Dr.Verfeage. //Aristotle Univ. of Thessatoniki. I993.--vo!.29.-p.47-58.

120. Chu. C.Y., Kighi S.L., Smith M.AL. Effect of liquid culte on the growth and development of miniature rose (Rosa chinensis Jacq. Minima). //Plait Cell, Tissue and Organ Culture. 1993.~voL32.~pJ29~334,

121. Davies D,R. Rapid propagation of roses ni vitro. //Sciliori. 1980.-vol.13.-p.385-389.

122. Douglas G.C., Rutledge C.B., Casey A.D. sad Richardson DU,S. Micropropagation of noxibuiida, ground cover and immature roses. //Plant Cell., Tissue and Organ Culture. 1989.-vol. 19.-p.55-64.

123. Gaky R. and Compan D. Growth and nutritional grapevine during in vitro long-term, storage. //Plant Cell, Tissue and Organ Culture. 1988.-113. -p.229~237

124. Gautheret R.J. Sur la culture d'extrémités de racines. //Compt.rend.Soc.BioI. 1932 .-v. 109.-p. 123 6-1238.

125. Gautheret R.J. Plant tissue culture: the history. //Proceeding of the 5th International Congress of plant tissue and cell culture. Tokyo. Japan. 1982.-p.7-12.

126. Genoud-Gourichon C., Salknon H., Coudret A. Effects of sucrose, agar, irradiance and CO? concentration dining the rooting phase on the acclimation of

Rosa hybrids plantlets to ex vitro conditions. /Miotosynthetica, 1996.-vol.32.-p.263-270.

127. Gina H., William E. Root production and plantlet development in tissus-cultored conifers. //Plant Cell, Tissue and Organ Culture. London: Kluwer Academic publishers. 1988.-vol. 14.-53.-p. 137.

128. Gizawy A.M. and F.ord-Hoyd. An in vitro method for the conservation and storage of garlic germplasm. //Plant. Cell, Tissue and Organ Culture. 1987-12.-

p. 147-150.

129. Graifenberg A. Culture "in vitro" of embryos and parts of achenes in Rosa canina. //Rev.Hort. i973.-vol.57.-p.374-380.

130. Hao-Ching Wang and Nancy A. Reichert.. In vitro propagation of Modem Roses. //Combined Proceedings Inter. Plant Propagatorts' Society. 1992.-vol.42.-p.398-401.

131. Hasegawa P.M. In vitro propagation of rose. //Hortscience. 1979.-vol.14,-p.610-612.

132. Hasegawa P.M. Factors affecting shoot and root initiation from cultured rose sliooi tips. ¡IJ.Pim.Qt.Soc.Hort.Sci. 1980.-vol. 105.-p.2I6-22G.

133. Koran I., Walker S.> Robert AV., Mottley J. and Sroipkins I Micropropagation of roses: the benefits of pruned mother-pkatleis at Stage II and greenhouse environment at Stage Hi. //J. of Hort.Science. I995.-vol.70.-15,-p.799-806.

134. Hyndman S.E., Hasegawa P.M., Bressan R.Á. Stimulation of root initiation from cultured rose shoots through the use of reduced concentrations of mineral salts. //Hort.Science. 1982.-vol.l7.-4.-p.82-83.

135. Ingue H., Kaícli Y. Calcium inhibits ion-stimulated stomatal opening in epidermal strips of commelina communis L. //J.Exp.Bot. 1987.-1186.-p. 142-149.

136. Kartha K.K. Production and indexing of disease-free plants. //Plant tissue culture audits agricultural application. London. 1986.-p.219-238.

137. Kevers C., Boyer N., Courduroux I.C. and. Gasper T. The influence of ethylene on proliferation and growth of rose shoot cultures. //Plant Cell, Tissue and Organ Culture. 1992.-128.-p. 175-181.

138. Khosh-Khui M. end Sink K.C. Micropropagation of new and old world rose species. //Horticultural Science. 1982a.-vol.57.-p.315-319.

139. K3iosh~Khui M. and Sink K.C. Rooting enhancement of Rosa hybrids for tissue culture propagation. //Scientia Horde. 1982b.-vol. 17-p.371-376.

140. Kirichenko E.B., Coudret A., Kuzmina T.A., Sallan.on H. Elaboration of physiologic^ principles of plant micropropagation and possibilities of its application. //Proceedings of IV international Conference of Enropesi-Mediteranean Division of the International Associations of Botanic Gardens. Tbilisi. Georgia. I99I.-p.37.

141. Kodandazamaiah J., Venkatatamarach C., Rao P.G., Rao K.N. Effects of B group vitamins on the endogenous cytokinin levels of cluster bean (Cyaniopsis tetraponolola). //Proc.Nat.Acad.Sci. (India). 1984.->54 (:2).-p .95-98.

142. KorbaaiM, and DoneEy J. Performance of micropropagaied. "Queen Elizabeth" Rose ibflowiag mechamca% induced strass. //Hort. Science. 1994.-vol.29.-5 l.-p.20-21,

143. Langford PJ, and Wamwright H. Effects of sucrose concentration on ilie photosynthetic ability of rose shoots in vitro., //Annals of Botany, i987.-voi.60-p.633-640.

144. Lichîhethaler H.K., WeËbum A.R. Detennination of total, and cliloropiiylls a. and b of leaf extracts in solvents. //Biochem.Soc.Transactions. 1983.-vol.603-p.591.

145. Marino G., Rosaii P. and Sagraii F. Storage of in vitro cultures of prunus root stocrs. //Plant Cell, Tissue and Organ Culture. 1985.-' 5.- p.73-78.

146. Martin C., Carre M., Veroy R. La multiplication végétative in vitro des végétaux ligneux cultivés: cas de Rosiers. //C.r.Acad.sci.D. 1981 .-vol.293.-p. î 75177.

147. Mederos S. end M.J.Rodriguez Emiqnez. In vitro propagation of "Golden Times" roses. Factors affecting sîioot tip and axillary bud growth and morphogenesis. //ActaHortic. 19S7.-voi.212.-p.619-624.

148. Mengel K., Kirkby E. A Principles of plant nutrition. - Bern. 197S.-p.423.

149. Morel G,, Martin C. Guerison de dalilias atteinte d'une maladie à virus. //Compt.Reîid A.cad.Scien. 1952.-v.235.-1 21.-p. 1324-1325.

150. Morel G. Morphogenesis of stem apical meristem cultivated in. vitro: application to clonal, propagation. //Phyiomorphology, i972.-voi.22.-i 3-4.- p.265-277.

151. MurasMge T. Plan!. propagation through tissue culture. //Ann.Rev.Plant.Physiol. 1974.-vol.26.-p. 135-136.

152. Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with, tobacco tissue culture. //PhysioLPlant. 1962.-vol. 15.-13.-p.473-497.

153, PecbE.L., Pires MJ.P. Tissue culture propagation of Mentha spp. by the use axillary buds. //Plant Cell Reports. 1986.-vol. 5.-p. 17-18.

154- Podwyszynska M., Olszewski T. Influence of gelling agents on shoot multiplication and the uptake of macroelements by in vitro culture of rose, cordyline andhomalomena. //Seieutia Horde. 1995,-vol.64,-p.77-84.

155. Podwyszynska M., Gabivszewska E. Direct rooting of the rose shoots propagated in vitro. //Theses И Intern. Symposium. Latvia. I996.-p.6I.

156. Rahman S.M., Hossain M., A.K.M.RafiuI Islam and O.IJoarder. Effects of media composition and culture conditions on in vitro rooting of rose. //Scieniia Hortic. 1992.~vol.52.-p. 163-169.

157. Ramaiah J.K., Redely K.B., Кггтап Pi. Uptake of major elements influenced by B-vitamins in green gram (Vigna radiata L.). /7Proc.Nat.Acad. Sex. (India). 1989.-vo.l.57.-! 3 -p.303-308.

158. Risk J.De, Huylenbroeck J .Van. Acclimatization of micropropagnfed roses in niulti-layer-cells: effect of different stage III conditions and C02 enrichment, -Med.Fac.Laiidbovw.lMv.Cent. 57/4a. 1992.-p. 1549-1552.

159. Roberts R.M, end. Chu M,С. In vitro propagation of "Forever Yours" rose. /Mort. Science. 1979.-voI.14.~p.608-610.

160. Salehi H. in vitro propagation of miniature rose cultivais. //M.S.Tliesis.Shiraz Univ. Shiraz, Iran. 1995.

161. Sallanon H., Coudret A. Flux d'eau entre vitro-plants et atmosphère en micropropagation. //C.R.Acad.Sei. Paris. 1990.-vol.310.-p.607-613.

162. Saïknon H., Laffray P., Coudret. A.. Ulixastructare and ftmctiom?ing of §д:.ог ceïl of in vitro cultured rose plants. //Plant Pïiysiol.Biocliem. 1991.-vol.29.-p.333-339,

163. Sallanon И. and Mariers Y. Influence of growth rooms humidity on die in vitro rose plants development. //Plant Cell, Tissue and Organ Culture. 1992.-voi.30.-p. 121-125.

164. Sállanos H.? Tort M., Coudiet A. The iiltrasíiucture of micropropagaied sod greenhouse rose plant stomata. //Plant Cell, Tissue and Organ Culture. 1993.-vol.32,-p.227-233.

165. SaHanon IT, Dinion B., Carrier P. and Chagvardieff P. Effects of CO? concentration and irradiance on growth and photosynthesis of Juglans regia plantlets grown in vitro. //Photosynthetica. 1995. - vol. 31(2). - p.241-249.

166. Saver A., Waither F., Preil W. Different suitability for m vitro propagation of rose eultivars. //Gartenbauwissenschaft 1985.~3T.5G, Bd.3. S.-p.133-138.

167. Selvapandiyan A., Subramani J., Bhatt P.N., Mehta A.R. A simple method for direct transplantation of cultured plants to the field. //Plant Sei. 1988.-vol.56.-5].-p.81-83.

168. Shajimia Z. Cytogenetic study of tissue culture of Haplopappus Gracilis. Mechanism of Mutation and Inducing factors. //Prpc. of the Symp. on the Mutational Process. Prague.-p.377-380.

169. Silva D.L.R., Heíhenngton AN., Mansfield T.A. Synergism betweens calcmm ions and abscise acid in preventing stomatai opening. //New Physiol. 1985-vol. 100.-l4.-p.473-482.

170. Skirvin R.M. and Chu M.C. In vitro propagation of "Forever Yours" rose; //HortScience. 1979,-vcL 14.-p.608-610.

17L Stushnoff C.? Fear C. In vitro research on temperate fruits. //ÏBPGR Advisory Committee on un vitro storage. Rome. 1985.-p. 13-15.

172. Tatiimo S., Ono R. Development of plant propagation method in Rose. //Bull.Fac.Agr., Saga Univ. 1994.-I77.-p. 17-26.

173. Tlieñer R. Einsatz der Gewebekutur zur Anrocht pathogsnfreien pflanzen Möglichkeiten und problem ihren Anwen dung. //Erwerbsobstbsu. 19S0.-vol.22,-p.226-231.

174. Van der Sehn, Caroline J.G. Van der Toom, Charlotte H. flanschten Cate and others. Importance of the iron chelate fonmila for mi.cropropagation of Rosa.

hybride L. "Moneyway", Plant Cell, Tissue and Organ Culture. 1994.-voL37.-p.73-

nn

is.

175. Voyiatzi C,. Voyiatris D.G., Tsiakmaki V. In vitro shoot proliferation on rates of rose c.v. (hybrid tea) 'Dr.Verhage", as affected by apical dominance regulating substances. //Sei. Horde. 1995. - vol 61,- 1 3/4.-p.241-249.

176. Wafkey D.G.Â., Cooper V.C., Crisp. P. The production of vims-free cauliflowers by tissue-culture. //The J. of Hort.Science. England, 1974.-vol.49.-l3.~ p. 273-27.5.

177. Wanas -W.H. In vitro storage of proliferated rooistock shoot-tip cultoes. //Âmiaîs Agric.Sci. Ain.Shams Univ. Cairo. 1992.-vol37.-12.-p.501-510.

178. Wang Hao-Ching and Nancy A. Reichert. In vitro propagation of Modern Roses. //Combined Proceedings Inter. Plant Propagators Society. 1992.-voi.42.-p.398-401.

179. Weib D.T., Elinn B.S., Georgis W. Micropropagation of eastern whale pine (Pinns strobus). //Can J.Forest Res. 1988.-vol. 18.-112.-p. 1570-1580.

180. White P.R. The cultivation, of animal and plant cells. //Ronald press. New York, 1963.-p.57-77.

181. Wickson M. and K.V.Tliimann. The antagonism. of auxin and kinetm in. spied dominance. //Physiol.Plant, 1958.-vol.lL-p,63-74.

182. Zeaslin N. and MJ.Tsujita. Response of miniature roses to supplejnentaoy illumination. I. Light intensity. //ScientiaHoitic, 1990.-vol.42.-p. 113-121.

Благодарности. Автор выражает глубокую благодарность научным сотрудникам ГБС РАН Н .К.Федоровой, Н.И.Борисовой (Отдел декоративных растений), Е.М.Немовой (Отдел дендрологии), д.б.н.ЛА.Бугаенко и д.б.н. Л.Г.Назарекко (Институт эфиромасличных растений ААНУ, Симферополь) и к.б.н. А.Б.Кириченко (Ботанический садАНРМ, Кишинев) за представление неходкого опытного материала.

Сердечную благодарность автор выражает к.б.н. Н.В.Катаевой (ИФР РАН), д-ру Ш.С.Фернандо (Институт кокосовых пальм, Коломбо, Шри Ланка), н.с. Г.Ф.Бидюковой и к.б.н. Л.В.Рунковой, а также проф. А.Кудрэ и д-ру Ю.Салланон (Университет Клермон Феррак I, Фракция) за содействие проведению научных исследований.

Особую благодарность автор хочет выразить член-корр. РАН Р.Г.Бутенко, д.с.-х.н. В .А .Высоцкому за проявленный интерес к работе и ценные советы при обсуждении результатов исследования.

Диссертант признателен коллективу Лаборатории физиологии и биохимии растений ГБС РАН за моральную поддержку и доброжелательное содействие в экспериментальной работе.

Диссертант благодарен научному руководителю д&н. ЕБЛСириченко за постоянное внимание и неизменную поддержку при выполнении диссертационной работы.

Диссертант выражает благодарность к.б.н. Л.М.Котовой за помощь в проведении исследований с использованием метода иммуноферменшого анализа, н.с. Л.Й.Возна за выполнение анализов по определению содержания элементов питания, рН в почвенных образцах.

Диссертант признателен сотрудникам фотолаборатории за выполнение фотоснимков.