Влияние мелатонина на химический мутагенез и канцерогенез тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат биологических наук Мусатов, Сергей Александрович

• Мусатов, Сергей Александрович
• кандидат биологических наук
• 1998

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Мусатов, Сергей Александрович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Общие закономерности химического мутагенеза и канцерогенеза.—

1.2. Лекарственные мутагенез и канцерогенез.

1.3. Антимутагенез.

1.3.1. Общие закономерности действия антимутагенов.—

1.3.2 Антимутагенное действие антиоксидантов.

1.3.3. Эффекты антиоксидантов на тестируемые мутагены

1.4. Мелатонин.

1.4.1. Роль в организме.—

1.4.2. Влияние мелатонина на опухолевый рост.

1.4.2.1. Эффекты in vivo.—

1.4.2.2. Эффекты in vitro.

1.4.3. Роль мелатонина как антиоксиданта.

1.4.4. Антимутагенное действие мелатонина.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.

2.1 Механизмы действия и канцерогенные эффекты тестируемых мутагенов.—

2.1.1. 7,12-диметилбенз(а)антрацен (ДМБА).—

2.1.2. Бензо(а)пирен (БП).

2.1.3. 2-аминофлюорен (АФ).—

2.1.4. 1,2-диметилгидразин (ДМГ).

2.1.5. Циклофосфан (ЦФ).—

2.1.6. Блеомицин (БЛМ).

2.1.7. 4-нитрохинолин-К-оксид (НХО).

2.1.8. 2,4,7-тринитро-9-флюоренон (ТНФ).—

-32.1.9. 9-аминоакридин (АА).—

2.1.10. К-нитрозо-М-метилмочевина (НММ).—

2.1.11. Азид натрия (АН).

2.1.12. Митомицин С (ММС).—

2.2. Тест на индукцию хромосомных аберраций (ХА) в клетках костного мозга мышей.

2.2.1. Характеристика теста.—

2.2.2. Тестируемые вещества.—

2.2.3. Проведение эксперимента.

2.3. Тест на индукцию аномалий головок спермиев (АГС) у мышей

2.3.1. Характеристика теста.—

2.3.2. Тестируемые вещества.—

2.3.3. Проведение эксперимента.—

2.4. Тест Эймса.

2.4.1. Характеристика теста.—

2.4.2. Тестируемые вещества

2.4.3. Индикаторные штаммы.

2.4.4. Подготовка питательных сред и растворов.—

2.4.5. Проверка индикаторных штаммов на соответствие генотипу.

2.4.6. Проведение эксперимента.

2.5. Тест ДНК-комет.

2.5.1. Описание метода.—

2.5.2. Тестируемые вещества.

2.5.3. Проведение эксперимента.—

2.6. Изучение влияния мелатонина на противоопухолевые эффекты ЦФ и НММ.

2.6.1. Использованные препараты.—

-42.6.2. Проведение эксперимента.—

2.7. Изучение влияния мелатонина на канцерогенез, индуцированный ДМГ у крыс.

2.7.1. Использованные препараты.—

2.7.2. Проведение эксперимента.—

2.8. Изучение влияния мелатонина на канцерогенез, индуцированный НММ у крыс.

2.8.1. Использованные препараты.—

2.8.2. Проведение эксперимента.—

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ.

3.1. Тест на хромосомные аберрации (ХА) в клетках костного мозга мышей.—

3.2. Тест на аномалии головок спермиев (АГС) у мышей.

3.3. Тест Эймса.—

3.4. Тест ДНК-комет.

3.5. Влияние мелатонина на противоопухолевые эффекты

ЦФ и НММ.

3.6. Влияние мелатонина на канцерогенез, индуцированный ДМГ у крыс.

3.7. Влияние мелатонина. на канцерогенез, индуцированный НММ у крыс.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние мелатонина на химический мутагенез и канцерогенез»

Работа посвящена актуальной проблеме - модификации мутагенного и канцерогенного действия лекарственных препаратов. Для многих медицинских препаратов, прежде всего цитостатиков, установлен один из их побочных эффектов - мутагенность. У пациентов, подвергавшихся химиотерапии, при поражении соматических клеток этот эффект может быть одной из причин возникновения злокачественных новообразований, при поражении половых клеток возможно появление врожденных аномалий у потомства больного (Бочков, Чеботарев, 1989). Вместе с тем, от использования препаратов-мутагенов порой невозможно отказаться по жизненным показаниям. Это диктует необходимость разработки методов снижения их мутагенности в отношении нормальных клеток при сохранении их терапевтического (в случае цитостатиков - противоопухолевого) эффекта.

В качестве возможных модификаторов мутагенеза и канцерогенеза большой интерес представляет группа антиоксидантов, которые часто рассматриваются как универсальные протекторы (Порошенко, 1995). Среди них большое внимание в последнее время привлекает индольный гормон эпифиза мелатонин. В настоящее время его считают самым мощным из эндогенных антиоксидантов, способным как непосредственно улавливать свободные радикалы, так и активировать естественную антиоксидантную систему клетки (Reiter et al., 1995). Эти его свойства, сочетающиеся с легкостью проникновения во все ткани и клеточные компартменты, позволяют рассматривать его в качестве перспективного антимутагена. Вместе с тем, вопрос о влиянии мелатонина на мутагенность препаратов практически не изучен. Лишь в последние годы появились единичные работы о снижении им генотоксического эффекта отдельных соединений (цисплатина, сафрола и yf

§ x дихромата калия) (Koratkar et al., 1992; Tan et al., 1994; Susa et al., 1997), -но комплексный подход к изучению влияния мелатонина на мутагенез с использованием веществ с разными механизмами действия (требующими и не требующими метаболической активации, действующими с образованием свободных радикалов и без них, и т. д.) и разных тест-систем не применялся. В то же время, именно такой подход позволяет судить о механизме модифицирующего действия самого мелатонина.

Для мелатонина была давно известна высокая противоопухолевая активность (Анисимов, 1973; Blask, 1993), которая объясняется его способностью подавлять пролиферацию клеток и стимулировать иммунную систему (Brzezinski, 1997; Panzer, Yiljoen, 1997). Однако, изучение его влияния на опухолевый рост in vivo проводилось, в основном, на моделях перевиваемых опухолей (Blask, 1993), а из индуцированных опухолей - на моделях канцерогенеза, вызванного действием 7,12-диметилбенз(а)антрацена (ДМБА) и N-нитрозометилмочевины (НММ) (Tamarkin et al., 1981; Blask et al., 1991). В связи с этим, для выявления закономерностей онкостатического действия мелатонина интерес представляет исследование его влияние на большем количестве моделей, в которых использовались бы канцерогены с разными механизмами действия и органной специфичностью.

В последнее время мелатонин все шире стали применять в химиотерапии опухолей, как изолированно, так и в сочетании с другими противоопухолевыми препаратами (интерлейкином-2, тамоксифеном) (Lissoni et al., 1995; Lissoni et al., 1996). Это неизбежно приводит к постановке проблемы изучения комбинированного использования мелатонина и цитостатиков. Такие данные в литературе отсутствуют. Вместе с тем, мутагенный и онкостатический эффекты цитостатиков являются результатом прямого или опосредованного повреждающего действия на генотип клетки, поэтому можно ожидать, что снижение мутагенности препарата отразится на его противоопухолевом эффекте.

Цель и задачи исследования Цель исследования состояла в оценке модифицирующего влияния мелатонина на мутагенный, противоопухолевый и канцерогенный эффекты цитостатиков, а также других известных мутагенов и канцерогенов с разными механизмами действия.

В задачи исследования входило:

1. Изучение модифицирующего влияния мелатонина на мутагенность циклофосфана (ЦФ), НММ и 1,2-диметилгидразина (ДМГ) in vivo в тестах на индукцию хромосомных аберраций (ХА) в клетках костного мозга и аномалий головок спермиев (АГС) у мышей.

2. Изучение действия мелатонина на мутагенность блеомицина (БЛМ), НММ, митомицина С (ММС), ДМБА, бензо(а)пирена (БП), 2-аминофлюорена (АФ), ДМГ, 4-нитрохинолин-1Ч-оксида (НХО), 2,4,7-тринитро-9-флюоренона (ТНФ), 9-аминоакридина (АА) и азида натрия (АН) in vitro в тесте Эймса на штаммах Salmonella typhimurium ТА 97, ТА 98, ТА 100 и ТА 102.

3. Анализ эффекта мелатонина на кластогенность ЦФ, БЛМ, НММ, ММС, ДМБА и БП in vitro методом ДНК-комет на овоцитах китайского хомячка СНОК1.

4. Оценка влияния мелатонина на противоопухолевые эффекты ЦФ и НММ с использованием карциномы Эрлиха мышей.

5. Изучение модифицирующего действия мелатонина на моделях индуцированного ДМГ и НММ канцерогенеза у крыс.

Научная новизна полученных результатов Впервые обнаружено, что мелатонин, не обладая мутагенным действием в физиологических концентрациях, эффективно снижает мутагенность и кластогенность ряда противоопухолевых препаратов и других химических веществ с различными механизмами действия как в соматических, так и в половых клетках. Показано, что при этом использование мелатонина в комбинации с цитостатиками не отражается на их терапевтическом (онкостатическом) эффекте.

Впервые продемонстрирована способность мелатонина тормозить развитие аденокарцином толстой кишки, индуцированных ДМГ у крыс.

В экспериментах впервые обнаружен кластогенный эффект мелатонина в супрафизиологических концентрациях в овоцитах китайского хомячка. Обнаружена также способность мелатонина усиливать мутагенное действие противоопухолевого антибиотика ММС в тесте Эймса и его кластогенность в тесте ДНК-комет.

Научно-практическая ценность работы Полученные в результате исследований данные об отсутствии у мелатонина мутагенной активности и его способности снижать генотоксичность противоопухолевых препаратов при сохранении их терапевтической эффективности позволяют рекомендовать мелатонин для сочетанного применения с препаратами-мутагенами при химиотерапии опухолей для защиты -'соматических, так и половых клеток.

Учитывая, однако, кластогенный эффект высоких концентраций мелатонина необходимо с осторожностью относиться к применению его больших доз в клинической практике. Далее, в связи с обнаруженным его комутагенным действием в отношении ММС, использованию мелатонина в составе комбинированной терапии должно предшествовать тестирование его влияния на мутагенность новых препаратов.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Мусатов, Сергей Александрович

выводы

1. Мелатонин в физиологических концентрациях не обладает мутагенной активностью, однако в высоких, супрафизиологических концентрациях он индуцирует разрывы ДНК in vitro.

2. Мелатонин эффективно снижает мутагенность промутагенов ЦФ и ДМГ и прямого мутагена НММ в соматических клетках (в тесте на ХА в клетках костного мозга) и в половых клетках (в тесте на АГС) мышей in vivo.

3. Мелатонин обладает антимутагенной активностью в тесте Эймса только в отношении промутагенов (ДМБА, БП, АФ, ДМГ, БЛМ) и не влияет на эффекты прямых мутагенов (НХНО, ТНФ, АА, НММ, АН) не зависимо от типа вызываемых ими повреждений ДНК.

4. Мелатонин подавляет кластогенную активность как промутагенов (ДМБА, БП, ЦФ, БЛМ), так и прямого кластогена НММ в овоцитах китайского хомячка СНОК1 в тесте ДНК-комет.

5. Мелатонин значительно и пропорционально дозе усиливает мутагенность противоопухолевого антибиотика ММС у бактерий, и его кластогенность в клетках СНОК1.

6. Снижение мутагенности цитостатиков ЦФ и НММ под влиянием мелатонина не уменьшает их противоопухолевую эффективность в отношении солидного штамма карциномы Эрлиха у мышей.

7. Мелатонин, введенный крысам на стадиях инициации и промоции канцерогенеза, индуцированного ДМГ, и на стадии инициации канцерогенеза, индуцированного НММ, тормозит развитие злокачественных новообразований.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Мусатов, Сергей Александрович, 1998 год

1. Алекперов У.К. Антимутагенез. М: Наука, 1984.- 100 с.

2. Анисимов В.Н., Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., Дильман В.М. Сопоставление противоопухолевой активности экстрактов эпифиза, гипоталамуса, мелатонина и сигетина у мышей с перевиваемым раком молочной железы // Вопр. онкол.- 1973.- Т. 19, N 10.- С. 99-101.

3. Анисимов В.Н., Reiter R.J. Функция эпифиза при раке и старении // Вопр. онкол.- 1990.- Т.36.- С. 259-268.

4. Анисимов В. Н., Жукова О. В. Циркадианные вариации канцерогенеза, индуцируемого у крыс N-нитрозометилмочевиной // Эксперим. онкол.- 1994.- Т. 16.- С. 123-127.

5. Ахундова Д.Д. Изучение цитогенетической активности некоторых витаминов как возможных элементов естественной системы антимутагенов: Дис. . канд. биол. наук. Баку: Гос. ун-т, 1974. -24 с.

6. Бобринев Е.В., Ревазова Ю.А. Статистический анализ и планирование экспериментов в тесте на индукцию аномальных спермиев у мышей // Генетика. 1985. - Т. XXI, N 1. - С. 54-59.

7. Боговский П.А. Роль профессиональных факторов в этиологии рака: оценки и перспектива // Эксперим. и клин, онкол.- Вып. 4.- Таллин.-1981.-С. 5-14.

8. Бочков H. П., Чеботарев А. Н. Наследственность человека и мутагены внешней среды. М: Медицина, 1989.- 272 с.

9. Васильев C.B., Аспиз М.Е., Старосвятская H.A., Болтавская H.H., Ершова Ю.А., Чернов В.А. Влияние мелатонина на митотическое деление нормальных и опухолевых клеток и рост опухолей. Черноголовка, 1980. Т. 1. С. 226-228.

10. И. Васильева C.B., Давниченко Л.С., Кондратьев Ю.С., Скавронская А.Г. Структурные изменения, индуцированные N-нитрозометилмочевиной // Докл. АН СССР.- 1977.- Т. 235, N 5.-С. 1186-1188.

11. Васильева С. В., Давниченко Л. С., Луцкова Е. В., Рапопорт И. А. Репарационный эффект генетически активного природногоосоединения n-аминобензойной кислоты в опыте с N-нитрозометилмочевиной // Докл. АН СССР.- 1979.- Т. 247, N 1,-С. 226-230.

12. Воробьева Л. И., Чердинцева Т. А., Аверьянов А. А., Абилев С. К. Антимутагенное действие супероксиддисмутазы на индуцированные азидом натрия и нитрозогуанидином мутагенез у Salmonella typhimurium ТА 1535 // Генетика.- 1993.- Т. 29, N 5.- С. 760-767.

13. Воронова О. Л., Пашинский В. Г. Фармакологическая коррекция цитогенетического эффекта циклофосфана // Вопр. онкол.- 1991.Т. 37, N 2,-С. 233-235.

14. Горбачева Л. Б., Кукушкина Г. В. Механизм действия противоопухолевых соединений из класса N-замещенных нитрозомочевин. //Экспер. онкол.- 1981.- Т. 3, N 6.- С. 21-28.

15. Дементьева Н. П. Нитрозометилмочевина в клинической химиотерапии злокачественных опухолей. // Вопр. онкол.- 1988.Т. 34, N2.-С. 8-17.

16. Дикун П.П. Влияние внешней среды на возникновение и развитие опухолей // Общая онкология / Под ред. Н. П. Напалкова.- Л.: Медицина, 1989.- С. 87-118.

17. Жукова О. В., Анисимов В. Н. Влияние световой депривации на канцерогенез, индуцированный N-нитрозометилмочевиной у самок крыс // Вопр. онкол.- 1994.- Т. 40, N 1-3.- С. 71 75.

18. Захидов С. Т., Паранюшкина Л. П., Хода А. X. Махран, Эль-Саед Каем Абдель-Хади, Голиченков В. А. Влияние химических мутагенов на сперматогенез млекопитающих. Цитогенетический анализ. // Изв. АН. Серия биол.- 1994,- N 3.- С. 353-362.

19. Захидов С. Т., Маршак Т. Л., Смирнова О. Б., Паранюшкина Л. П. Модифицирующие цитогенетические эффекты госсипола и его производных. // Изв. АН. Серия биол.- 1994.- N 4.- С. 694-700.

20. Калинина Л. М., Сардарли Г. М., Алекперов У. К. Антимутагенный эффект альфа-токоферола на частоту генных мутаций у Salmonella // Генейтика.- 1979.- Т. 15, N 10.- С. 1880-1882.

21. Лекявичус Р. К., Журков В. С., Ревазова Ю. А. Аномалии головок спермиев как тест-метод для оценки активности мутагенов среды.-Вильнюс: Макслас, 1983.- 12 с.

22. Лобашев М.Е. Физиологическая гипотеза мутационного процесса // Исследования по генетике/ Л.: ЛГУ, 1976.- С. 3.

23. Митрофанов Ю.А. Индуцированная изменчивость хромосом эукариот. М., Наука. - 1994. - 140 с.- 10826. Михеев В. С., Того Е. Ф., Сивенков Э. С. Эффект иммобилизации анальгина в поливиниловом спирте на мутагенность у мышей //

24. Генетика.- 1993.- Т. 29, N 5.- С. 785-790.1. ГУ

25. Напалков Н. И., Анисимов В. Н., Князев П. Г., Лихачев А. Я. Современные представления о механизмах канцерогенеза // Общая онкология / Под ред. Н. П. Напалкова.- Л.: Медицина, 1989.1. С. 28-51.

26. Нерсесян А.К. Чувствительность цитогенетическихтестов in vivo, используемых при изучении канцерогенных для человека химических агентов//Экспер. онкол.-1991. Т. 13, N 6. - С. 7-11.

27. Никольс У. Цитогенетические методы анализа мутагенности // Генетические последствия загрязнения окружающей среды.- М.: Наука, 1977. -101 с.

28. Новиков С.Н., Цапыгина Р.И., Даев Е.В., Того Е.Ф. Влияние природных соединений биогенного происхождения на поведение и генеративную функцию самцов домовой мыши {Mus musculus) // Докл. АН СССР. 1982. - Т. 262, N 3. - С. 746-748.

29. Плисс Г. Б. Канцерогенные агенты и современные механизмы о механизмах их действия // Общая онкология / Под ред. Н. П. Напалкова.- Л.: Медицина, 1989.- С. 52-86.

30. Порошенко Г. Г. Антимутагены: подходы к классификации и перспективы поиска активных соединений // Вестн. Росс. АМН.-1995.-N 1.-С. 38-41.

31. Романенко В. И. Мелатонин как возможный эндогенный лейкозогенный (бластомогенный) агент // Гематол. и трансфузиол.-1983.-N. 2.-С. 47-50.

32. Селезнева Т. Г., Корман Н. Г. Анализ хромосом соматических клеток больных, леченых противоопухолевыми препаратами // Генетика.- 1973.-Т. 9, N 12.-С. 112-118.

33. Серебряный А. М., Сальникова Л. Е., Бахитова Л. М., Пашин Ю. В. Специфичность действия М-нитрозо^-метилмочевины и связь ее мутагенной активности с карбамоилирующими свойствами. // Генетика.- 1988.- Т. 24, N 10.- С. 1786-1793.

34. Середенин С. Б., Дурнев А. Д., Ведерников А. А. Влияние эмоционального стресса на частоту хромосомных аберраций в клетках костного мозга мышей // Бюл. эксперим. биол. и мед.- 1980.-N7.- С. 91.

35. Фридович И. Радикалы кислорода, пероксид водорода и токсичность кислорода. В кн.: Свободные радикалы в биологии. М: Изд-во Мир, 1979.- С. 272-299.

36. Худолей В.В. Модификация мутагенеза и антиканцерогенез // Вестник РАМН. 1993. - N 1. - С. 34-40.

37. Чернышева М. П. Гормоны животных. Введение в физиологическую эндокринологию. С.-Петербург: Глаголь, 1995.- 296 с.

38. Шеридан В. Млекопитающие в качестве систем для обнаружения мутагенной активности загрязнителей окружающей среды // Генетические последствия загрязнения окружающей среды. / М., 1977.-С. 95-101.

39. Abe М., Reiter R. J., Orhii P. H., Нага М., Poeggeler В., Barlow-Walden L. R. Inhibitory effect of melatonin on cataract formation in newborn rats: Evidence of an antioxidative role for melatonin // J. Pineal. Res.-1994.-Vol. 17.- P. 94-100.

40. Ames B.N., Durston W.E., Yamasaki E., Lee F.D. Carcinogens are mutagens: A simple test system combining liver homogenates for activation and bacteria for detection // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.- 1973.-Vol. 70, N8.-P. 2281-2285.

41. Amonkar A. J., Nagabhushan M., D'Souza А.У., Bhide S. У. Hydroxychavicol: a new phenolic antimutagen from betel leaf // Food Chem. Toxicol.- 1986.- Vol. 24, N 12.- P. 1321-1324.

42. Anderson D., Yu T. W., Phillips B. J., Schmezer P. The effect of various antioxidants and other modifying agents on oxygen-radical-generated DNA damage in human lymphocytes in the COMET assay // Mutat. Res.- 1994.- Vol. 307, N 1.- P. 261-271.

43. Anderson D., Basaran N., Blowers S. D., Edwards A. J. The effect of antioxidants on bleomycin treatment in vitro and in vivo genotoxicity assays // Mutat. Res.- 1995.- Vol. 329, N 1.- P. 37-47.

44. Anderson D., Bishop J.B., Garner R.C., Ostrosky-Wegman P., Selby P.B. Cyclophosphamide: review of its mutagenicity for an assessment of potential germ cell risks // Mutat. Res.- 1995.- Vol. 330, N 1-2.-P. 115-181.

45. Arenaz P., Hallberg L., Mancillas F., Gutierrez G., Garcia S. Sodium azide mutagenesis in mammals: inability of mammalian cells to convert azide to a mutagenic intermediate // Mutat. Res.- 1989.- Vol. 227, N 1,-P. 63-67.

46. Aubert C., Janiaud P., Lecalvez J. Effect of pinealectomy and melatonin on mammary tumor growth in Sprague-Dawley rats under different conditions of lighting // J. Neural Transmiss.- 1980.- Vol. 47, N2.-P. 121-130.

47. Barlow-Walden L.R., Reiter R.J., Abe M., Pablos M., Menendez-Pelaez A., Chen L.-D., Poeggeler B. Melatonin stimulates brain glutathione peroxidase activity // Eurochem. Int.- 1995.- Vol. 26, N 5.- P. 497-502.

48. Bartsch C., Bartsch H., Lippert T.H. The pineal gland and cancer: facts, hypotheses and perspectives// The Cancer J.- 1992.- Vol.5.- P. 194-199.

49. Beland F.A., Dooley K.L. Sheldon W.G., Delongchamp R.R. Circadian variation in the induction of intestinal tumors by N-methyl-N-nitrosourea in male C57BL/6N mice // Natl. Cancer Inst.- 1980.- Vol. 80.- P. 325-330.

50. Benedict W.F., Bacer M.S., Haroun L., Choi E., Ames B. Mutagenicity of cancer chemotherapeutic agens in the Salmonella / Microsome test // Cancer Res.- 1977.- Vol. 37.- P. 2209-2213.

51. Blask D. E., Hill S. M. Oncostatic signals by the pineal gland and melatonin in the control of breast cancer // Neuroendocrinol. Lett.- 1987.-Vol. 9, N 5.- P. 291.

52. Block J. B., Dietrich M.F., Tsunokai R. Inhibition of adriamycin and mitomycin C mutagenesis by menadione // Proc. Am. Assoc. Cancer Res.-1986.-Vol. 27.- P. 307.

53. Bolognesi C., Ognio E., Ferreri-Santi L., Rossi L. Modulation of DNA damage by vitamin A in developing Sprague-Dawley rats // Anticancer Res.- 1992.- Vol. 12, N 5.- P. 1587-1591.

54. Bubenik G.A., Niles L.P., Pang S.F., Pentney P.J. Diurnal variation and binding characteristics of melatonin in the mouse braine and gastrointestinal tissues // Comp. Biochem. Physiol.- 1993.- Vol. 104 C.-P. 221-224.

55. Busk L., Sjostrom B., Ahlborg U. G. Effects of vitamin A on cyclophosphamide mutagenicity in vitro (Ames test) and in vivo (mouse micronucleus test) // Food. Chem. Toxicol.- 1984.- Vol. 22, N 9.-P. 725-730.

56. Cagnoli C. M., Atabay C., Kharlamova E., Manev E. Melatonin protects neurons from singlet oxigen-induced apoptosis // J. Pineal Res.- 1995.-Yol. 18.-P. 222-226.

57. Callagan B.D. The long-term effect of pinealectomy on the crypts of the rat gastrointestinal tract//J. Pineal. Res.- 1995.-Vol. 18.-191-196.

58. Calle L.M., Sullivan P.D., Nettleman M.D., Ocasio I.J., Blazyk J., Jollick J. Antioxidants and the mutagenicity of benzo(a)pyrene and some derivatives // Bioch. Biophys. Res. Commun.- 1978.- Vol. 85, N 1.-P. 351-356.

59. Casado A., Torre R., Lopez-Fernandez M.E., Carrascosa D., Casado M.C., Ramizer M. Y. Superoxid dismutase and catalase bloodlevels in patient with malignant diseases // Cancer Lett.- 1995.- Vol. 93.-P. 187-192.

60. Chulasiri M., Bunyapraphatsara N., Moongkarndi P. Mutagenicity and antimutagenicity of hispidulin and hortensin, the flavonoids from MillingtoniahortensisL. //Environ. Mol. Mutagen.- 1992.- Vol. 20, N 4.1. P. 307-312.

61. Cos S., Blask D. E., Lemus-Wilson A., Hill A. B. Effects of melatonin on cell cycle kinetics and "aestrogen-rescue" of MCF-7 human brest cancer cells in culture//J. Pineal Res.- 1991.- Vol. 8.- P. 21-24.

62. Cos S., Blask D. E. Melatonin modulates growth factor activity in MCF-7 human brest cancer cells // J. Pineal Res.- 1994.- Vol. 17.P. 25-32.

63. Costa E.J.X., Harzer Lopes R., Lamy-Freund M.T. Permeability of pure lipid bilayers to melatonin//J. Pineal. Res.- 1995.- Vol. 19.- P. 123-126.

64. Cummings J., Spanswick V.J., Smyth, J.F. Re-evaluation of the molecular pharmacology of mitomycin C // Eur. J. Cancer.- 1995.- Vol. 31 A.-P. 1928-1933.

65. Curbenell F., Eul I., Anselstetter V., Hameister H., Seidel H. I., Kreja L. Trisomy 15 as a regular finding in chemically induced murine T-cell leukemogenesis // Int. J. Cancer.- 1987.- Vol. 39, N 4.- P. 534-537.

66. DeM6o M.P., Merono S., DeBaille A.D., Botta A., Laget M., Guiraud H., Dumenil G. Monitoring exposure of hospital personnel handling cytostatic drugs and contaminated materials // Int. Arch. Occup. Environ. Health.-1995.-Vol. 66.- P. 363-368.

67. Dobos M., Fekete G., Schuler D. Chromosome instubility during immunsuppressive treatment// Pediat. Res.- 1976.-Vol. 10, N 5.- P. 556.

68. Doroshow J. H. Role of hydrogen peroxide and hydroxyl radical formation in the killing of Ehrlich tumor cells by anticancer quinones // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A.- 1986.- Vol. 83, N 12.- P. 4514-4518.

69. Druckrey H., Freussmann R., Matzkies F., Ivankovic S. Selective Erzeugung von Darmkrebs bei Ratten durch 1,2-Dimethylhydrazin // Naturwissenschaften.- 1967,- Vol. 54.- P. 285-286.

70. El-Domeiri A.A.H., Das Gupta T.K. reversal by melatonin of the effect of pinealectomy on tumor growth // Cancer Res.- 1973.- Vol. 33, N 11.-P. 2830-2833.

71. Fahl E., Scarpelli D.G., Gill K. Relationship between benzo(a)pyrene-induced DNA base modification and frequency of reverse mutation in mutant strains of Salmonella typhimurium // Cancer Res.- 1981.- Vol. 41.-P. 3400-3406.

72. Frank A. A., Collier J. M., Forsyth C. S., Zeng W., Stoner G. D. Ellagic acid embryoprotection in vitro: distribution and effects on DNA adduct formation // Teratology.- 1993.- Vol. 47, N 4.- P. 275-280.

73. Frederick K.A., Babish J.G. In vitro activation of the promutagens 2-acetamidofluorene, cyclophosphamide and 7,12-dimethylbenzanthracene by constitutive ferret and rat hepatic S-9 fraction // Toxicol.- 1984.-Vol. 31.- P. 73-86.

74. Grover I. S., Bala S. Studies on antimutagenic effects of guava (Psidium guajava) in Salmonella typhimurium // Mutat. Res.- 1993.- Vol. 300, N 1.-P. 1-3.

75. Guttenplan J. B. Mechanisms of inhibition by ascorbate of microbial mutagenesis induced by N-nitroso compounds // Cancer Res.- 1978.-Vol. 38, N7.- P. 2018-2022.

76. Habs M., Schmahl D. Carcinogenicity of bleomycin sulfate and peplomycine sulfate after repeated subcutaneous application to rats // Oncology.- 1984.- Vol. 41.- P. 114-119.

77. Hamilton T., Sneddon A. Environmental light and DMBA-induced rat mammary tumors // Br. J. Surg.- 1968.- Vol. 55, N1.- P. 76.

78. Hill S.M, Blask D.E. Effects of the pineal hormone melatonin on the proliferation and morphological characteristics of human breast cancer cells (MCF-7) in culture // Cancer Res.- 1988.- Vol. 48, P. 6121-6126.

79. Huang C.C., Hsueh J.L., Chen, Batt T.R. Retinol (vitamin A) inhibits sister chromatid exchanges and cell cycle delay by cyclophosphamide and aflatoxin Bi in Chinese hamster V79 cells // Carcinogenesis.- 1982.-Vol. 3.- P. 1-5.

80. IARC Monographs on the evaluation of the carcinogenic risk of chemicals to humans // Polynuclear Aromatic Compounds. Part 1: Chemical, Environmental and Experimenal Data. Lyon.- 1983.- Vol. 32.-P. 211-224.

81. Ip C., Thompson H., Ganther H. Activity of triphenylselenonium chloride in mammary cancer prevention // Carcinogenesis.- 1994.-Vol. 15, N 2.- P. 2879-2882.

82. Jackson J.H. Potential molecular mechanisms of oxidant-induced carcinogenesis // Env. Healf. Perspect.- 1994.- Vol. 102, Suppl. 10.-P. 155-157.

83. Jacoby R.F., Alexander R.J., Raicht R.F., Brasitus T.A. K-ras oncogene mutations in rat colon tumors induced by N-methyl-N-nitrosourea // Carcinogenesis.- 1992.- Vol. 13, N 1.- P. 45 49.

84. Kerklaan P.R.M., Bouter S., Mohn G.R. Factors influencing the mutagenic activity of the colon carcinogen 1,2-dimethylhydrazine in S. typhimurium strain TA 1535 in vitro I I Carcinogenesis.- 1984.- Vol. 5, N 4.- P. 467-472.

85. Koratkar R., Vasudha A., Ramesh G., Padma M., Das U.N. Effect of melatonin on cis-platinum induced genetic damage to the bone marrow cells of mice // Med. Sci. Res.- 1992.- Vol. 20.- 179-180.

86. Kothari L.S., Shah P. N., Mhatre M. C. Pineal ablation in varying photoperiods and the incidence of 9,10-dimethyl-l,2-benzanthracene induced mammary cancer in rats // Cancer Lett.- 1984.- Vol. 22, N 1.-P. 99-102.

87. Kothari A., Borges A., Kothari L. S. Chemoprevention by melatonin and combined melatonintamoxifen therapy of second generation nitroso-methylureainduced mammary tumours in rats // Eur. J. Cancer Prev.-1995.-Vol. 4, N6.- P. 497-500.

88. Laidlaw S.A., Dietrich M.F., Lamtenzan M.P., Vargas H.I., Block J.B., Kopple J.D. Antimutagenic effects of taurine in a bacterial assay system // Cancer Res.- 1989.- Vol. 49.- P. 6600-6604.

89. Lawley P. D., Martin C. N. Molecular machanisms in alkylation mutagenesis // Biochem. J.- 1975.- Vol. 156.- P. 85-90.

90. Lemus-Wilson A., Kelly P. A., Blask D. E. Melatonin blocks the stimulatory effects of prolactin on human brest cancer cell growth in culture // Br. J. of Cancer.- 1995.-Vol. 72.- P. 1435-1440.

91. Levin D.E., Hollstein M., Cristman M.F., Schwiers E.A., Ames B. A new Salmonella tester strain (TA 102) with A-T base pair at the site of mutation detects oxidative mutagens // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.- 1982.-Vol. 79.- P. 7445-7449.

92. Lewin D. I. Researchers cycle down the path to elicudating melatonin's rhythms // J. Nih. Res.- 1996.- Vol. 8.- P. 45-49.

93. L'Hermite-Baleriaux M., de Launoit Y. Is melatonin really an in vitro inhibitor of human breast cancer cell proliferation? letter. // In Vitro Cell Dev. Biol.- 1992.- Vol. 28A, N 9-10.- P. 583-584.

94. Lin T.P., Guzman R.C., Osborn R.C., Thordarson G., Nandi S. Role of endocrine, autocrine, and paracrine interactions in the development of mammary hyperplasia in Wnt-1 transgenic mice // Cancer Res.- 1992.-Vol. 52, N 16.- P. 4413-4419.

95. Lissoni P., Barni S., Tancini G., Rovelli F., Ardizzoia A., Conti A., Maestroni G.J.M. A study of the mechanisms involved in the immunostimulatory action of the pineal hormone in cancer patients // Oncology.- 1993.- Vol. 50, N 6.- P. 399-402.

96. Maestroni G.J.M. The immunoneuroendocrine role of melatonin // J. Pineal Res.- 1993.- Vol. 14.- P. 1-10.

97. Mahmutoglu I., Kappus H. Redox cycling of bleomycin-Fe(III) by an NADP-dependent enzyme, and DNA damage in isolated rat liver nuclei // Biochem. Pharmacol.- 1987.- Vol. 36.- P. 3667-3671.

98. Marks D.I., Fox R.M. DNA damage, poly (ADP-ribosyl)ation and apoptotic cell death as a potential common pathway of cytotoxic drug action // Biochem. Pharmac.-1991.- Vol. 42, N 10.- P. 1859-1867.

99. Maron D.M., Ames B.N. Revised methods for the Salmonella mutagenicity test // Handbook of Mutagenicity Test Procedures / Eds.: Kilbey B.J., Legator M.S., Nochols W., Ramel C.- Amsterdam, Oxford, New York: Elsevier Science Publishers, 1984.- P. 93-140.

100. McKelvey-Martin Y.J., Green M.H.L., Schmezer P., Pool-Zobel B.L., De Meo M.P., Collins A. The single cell gel electrophoresis assay (comet assay): A European review // Mutat. Res.- 1993.-Vol. 288.- P. 47-63.

101. Miller E. C., Miller J. A. Mechanisms of chemical carcinogens: nature of proximate carcinogens and interaction with macromolecules // Pharmacol. Rev.- 1966.- Vol. 18.- P. 805-838.

102. Miller K. Clastogenic effects of bleomycin, cyclophosphamide, and ethylmethanesulfonate on resting and proliferating human B- and T-lymphocytes // Mutat. Res.-1991.- Vol. 251, N 2.- P. 241-251.

103. Mironov N.M., Bleicher F., Martel-Planche G., Montesano R. Nonrandom distribution of 06-methylguanine in H-ras gene sequence from DNA modified with N-methyl-N-nitrosourea // Mutat. Res.- 1993.-Vol. 288, N2.-P. 197-205.

104. Molis T.M., Spriggs L.L., Hill S.M. Modulation of estrogen receptor mRNA expression by melatonin in MCF-7 human breast cancer cells // Mol. Endocrinol.- 1994.- Vol. 8.- P. 1681-1690.

105. Molis T.M., Spriggs L.L., Jupiter Y., Hill S.M. Melatonin modulation of estrogen-regulated proteins, growth factors, and proto-oncogenes in human breast cancer // J. Pineal Res.- 1995.- Vol. 18, N 2.- P. 93-103.

106. Morales R.P., Garsia R.M.C. In vitro effect chlorophyllin on gamma-ray induced sister chromatid exchange in murine bone marrow cells // Mutat. Res. 1994. - Vol. 320, N 4.- P. 329-334.

107. Mudry M.D., Carballo M., Labal de Yineusa M., Cid G.M., Larripa I. Mutagenic bioassay in sertain pharmacological drugs: III Metronidazole (MTZ) // Mutat. Res.- 1994.- Vol. 305, N 2.- P. 127-132.

108. Nagabhushan M., Amonkar A. J., D'Souza A. V., Bhide S. V. Nonmutagenicity of betel leaf and its antimutagenic action against environmental mutagens//Neoplasma.- 1987.- Vol. 34, N 2.- P. 159-167.

109. Nagabhushan M., Amonkar A. J., Nair U. J., D'Souza A. V., Bhide S. Y. Hydroxychavicol: a new anti-nitrosating phenolic compound from betel leaf// Mutagenesis.- 1989.- Vol. 4, N 3.- P. 200-204.

110. Neale S., Solt A.K. The efect of ascorbic acid on the aminenitrite and nitrosamine mutagenicity in bacteria injected inti mice // Chem.-Biol. Interact. 1981. - Vol. 35, N 2. - P. 199.

111. Negishi T., Nakamoto H., Kitamura A., Itome C., Shiotani T., Hayatsu H. Inhibitory activity of chlorophyllin on the genotoxity of carcinogens in drosophilla // Cancer Lett.- 1994.- Vol. 83, N 1-2.-P. 157-164.

112. Neville S., Arendt J., Ioannides C. A study of the mutagenisity of melatonin and 6-hydroxymelatonin // J. Pineal Res.- 1989.- Vol. 6.-P. 73-76.

113. Oud J.L., Reutlinger A.H.H. Chromosome behavior during early meiotic prophase of mouse primary spermatocytes // Chromosoma.- 1981.-Vol. 83. P. 395-407.

114. Panzer A., Viljoen M. The validity of melatonin as an oncostatic agent // J. Pineal. Res.- 1997.- Vol. 22.- P. 184-202.

115. Pegg A.E. Inhibition of the alkylation of nucleic acids and of metabolism of 1,2-dimethylhydrazine by aminoacetonitrile // Chem.-Biol. Interact.-1978.-Vol. 23.- 273-279.

116. Peryt B., Szymczyk T., Lesca P. Mechanism of antimutagenicity of wheat sprout extracts // Mutat. Res.- 1992.- Vol. 269, N 2.- P. 201-215.

117. Pierrefiche G., Topall G., Courboin G., Henriet I., Laborit H. Antioxidant activity of melatonin in mice // Res. Commun. Chem.Pathol. Pharmacol.- 1993.- Vol. 80.- P. 211-223.

118. Poeggeler B., Baize I., Hardeland R., Lerchl A. Pineal hormone melatonin oscillates also in the dinoflagellate Gonyaulax polyedra // Naturwissenschaften.-1991.- Vol. 78,- P. 268-269.

119. Povirk L.F., Austin M.J.F. Genotoxicity of bleomycin // Mutat. Res.-1991.-Vol. 257.- P. 127-143.

120. Pozharisski K.M., Likhachev A.J., Klimashevski V.F., Shaposhnikov J.D. Experimental intestinal cancer research with special reference to human pathology// Adv. Cancer Res.- 1979.- Vol. 30.- 165-237.

121. Pydyn E., Ataya K.M. Effect of cyclophosphamide on mouse oocyte in vitro fertilization and cleavage: recovery // Reprod. Toxicol.- 1991.-Vol. 5, N 1. P. 73-78.

122. Qin S., Huang C. C. Effect of retinoids on carcinogen-induced mutagenesis in Salmonella tester strains // Mutat. Res.- 1985.- Vol. 142, N3.-P. 115-120.

123. Reiter R. J. The pineal and its hormones in the control of reproduction in mammals // Endocr. Res.- 1980.-Vol. 1.- P. 109-131.

124. Reiter R. J. Pineal melatonin: Cell biology of its synthesis and of its physiological interactions // Endocrine Rev.- 1991.- Vol. 12.- P. 151-180.

125. Reiter R. J. Interactions of the pineal hormone melatonin with oxygen-centered free radicals: a brief review // Brazilian J. Med. Biol. Res.- 1993.-Vol. 26, N 11.- P. 1141-1155.

126. Reiter R. J., Poeggeler B., Tan D. X., Chen L. D., Manchester L. C., Guerrero J. M. Antioxidant capacity of melatonin: a novel action not requiring a receptor // Neuroendocrinol. Lett.- 1993.- Vol. 15, N 1+2.-P. 103-116.

127. Reiter, R.J. Functional Pleiotropy of the neurohormone melatonin: Antioxidant protection and neuroendocrine regulation // Frontiers Neuroendocrinol.- 1995.-Vol. 16.- P. 383-415.

128. Reiter R.J., Melchiorri D., Sewerinek E. et al. A review of the evidence supporting melatonin's role as an antioxidant // J.Pineal Res.- 1995.-Yol. 18.- P. 1-11.

129. Reiter R. J., Oh Ch.-S., Fujimory O. Melatonin. Its intracellular and genomic actions // Trends Endocrinol. Metab.- 1996.- Vol. 7.P. 22-27.

130. Rilley H. P., Hoff V. J. Cromosome breakage in Tulaghia violacca by radiation and chemical //Nucleus.- I960.- Vol. 3.- P. 1-18.

131. Salim A.S. The permissive role of oxygen-derived free radicals in the development of colonic cancer in the rat. A new theory for carcinogenesis // Int. J. Cancer.- 1993.- Vol. 53.- P. 1031-1035.

132. Salvadori D.M., Ribeiro L.R., Oliveira M.D., Pereira C.A., Becak W. Beta-carotene as a modulator of chromosomal aberrations induced in mouse bone marrow cells // Environ, and Molecul. Mutagenesis.- 1992.-Vol. 20, N 3. P. 206-210.

133. Salvadori D.M., Ribeiro L.R., Natorajan A.A. Effect of beta-carotene on clastogenic effects of mitomycin C, methylmetanesulfonate and bleomycin in Chinese hamster ovary cells // Mutagenesis.- 1994,- Vol. 9, N 1.-P. 53-57.

134. Schleicher R.L., Fallon M.T., Austin G.E., Zheng M., Zhang M., Dillehay D.L., Collins D.C. Intravenous vs. intraprostatic administration of N-methyl-N-nitrosourea to induce prostate cancer in rats // Prostate.- 1996.- Vol. 28, N 1.- P. 32-43.

135. Shah P. N., Mhatre M.C., Kothari L. S. Effect of melatonin on mammary carcinogenesis in intact and pinealectomized rats in varying photoperiods // Cancer Res.- 1984.- Vol. 44, N 8.- P. 3403-3407.

136. Speit G., Hartmann A. The contribution of excision repair to the DNA effects seen in the alkaline single cell gel test (comet assay) // Mutagenesis.-1995.- Vol. 10, N 6.- P. 555-559.

137. Subramanian A., Kothari L. S. Suppressive effect by melatonin on different phases of 9,10-dimethyl-l,2-benzanthracene (DMBA)-induced rat mammary gland carcinogenesis //Anticancer Drugs.- 1991.- Vol. 2, N3.-P. 297-303.

138. Sukumar S., Notario V., Martin-Zanca D., Barbacid M. Induction of mammary carcinomas in rats by nitroso-mathylurea involves malignant activation of H-ras 1 locus by single point mutation // Nature.- 1983.-Vol. 306.- P. 658-661.

139. Tamarkin L., Cohen M., Roselle D., Reichert C., Lippman M., Chabner B. Melatonin ihibition and pinealectomy enchancement of 7,12-dimethylbenz(a)antracene-induced mammary tumors in rat // Cancer Res.- 1981.- Vol. 41, N 11.- P. 4432-4436.

140. Tan D. X., Chen L. D., Poeggeler B., Manchester L. C., Reiter R. J. Melatonin: a potent, endogenous gidroxyl radical scavenge // Endocr. J.-1993.-Vol. 1.- P. 57-60.

141. Tan D. X., Poeggeler B., Reiter R. J., Chen L. D., Manchester L. C., Barlow-Walden L. R. The pineal hormone melatonin inhibits DNA-adduct formation induced by the chemical carcinogen safrole in vivo // Cancer Lett. -1993.- Vol. 70.- P. 65-71.

142. Tanaka T., Kojima T., Kawamori T., Mori H. Chemoprevention of digestive organs carcinogenesis by natural product protocatechuic acid // Cancer.- 1995.- Vol. 75, N 6.- P. 1433-1439.

143. Tomasi A., Abano E., Botti B., Yannini V. Detection of free radicals intermediates in the oxidative metabolism of carcinogenic hydrazine derivatives // Toxicol. Pathol.- 1987.- Vol. 15, N 2.- P. 178- 183.

144. Torigoe T., Arisawa M., Itoh S., Fujiu M., Maruyama H.B. Antimutagenic chalcones: antagonizing the mutagenicity of benzo(a)pyrene on Salmonella typhimurium // Bioch. Biophys. Res. Commun.- 1983.- Vol. 112, N 3.- P. 833 842.

145. Tsai S.Y., Dunn D.M., Pence B.C. Colonic anti-oxidant status during dimethylhydrazine carcinogenesis: Effect of type and amount of dietary fat // FASEB J.- 1992.- Vol. 6.- A1395.

146. Tudek B., Peryt B., Miloszewska J., Szymczyk T., Przybyszewska M., Janik P. The effect of wheat sprout extract on benzo(a)pyrene and 7,12-dimethylbenz(a)anthracene activity // Neoplasma.- 1988.- Vol. 35, N5.- P. 515-523.

147. Turusov V. S., Mohr U. Eds.: Pathology of tumours in laboratory animals. Vol. I. Tumours of the rat. Second ed., IARC Sci. Publ. N 99: Lyon: IARC, 1990.

148. Vijayalaxmi, Reiter R. J., Meltz M. L. Melatonin protects human blood lymphocytes from radiation-induced chromosome damage // Mutat. Res.-1995,- Vol. 346, N L- P. 23-31.

149. Wang Z.Y., Agarwal R., Zhou Z. C., Bickers D. R., Mukhtar H. Antimutagenic and antitumorigenic activities of nordihydroguaiaretic acid // Mutat. Res.- 1991.- Vol. 261, N 3.- P. 153-162.

150. Wattenberg L.W. Inhibition of dimethylhydrazine-induced neoplasia of the large intestine by disulfiram // J. Natl. Cancer Inst.- 1975.- Yol. 54.-P. 1005-1006.

151. Wattenberg L. W., Coccia J. B., Galbraith A. R. Inhibition of carcinogen-induced pulmonary and mammary carcinogenesis by chalcone administered subsequent to carcinogen exposure // Cancer Lett.- 1994.-Vol. 83, N 1-2.- P. 165-169.

152. Weinberg R.A. The action of oncogens inthe cytoplasm and nucleus // Science.- 1985.- Vol. 230.- P. 770-776.

153. Welsh C.W. Host factors affecting the growth of carcinogen-induced rat mammary carcinomas: a review and tribute to Charles Benton Huggins // Cancer Res.- 1985.- Vol. 45, N 8.- P. 3415-3443.

154. Wiebecke B., Lóhrs U., Gimmy J., Eder M. Erzeugung von darmtumoren bei Maüsen durch 1,2-Dimethylhydrazin // Z. Ges. Exp. Med.- 1969.-Vol. 149. P. 277-278.

155. Wyrobek A.J., Bruce W.R. Chemical induction of sperm abnormalilies in mice // Proc. Natl. Acad. Sci.- 1975.- Vol. 72, N 11.- P. 4425-4429.

156. Zarbl H., Sukumar S., Arthur A. V., Martin-Zanca D., Barbacid M. Direct mutagenesis of Ha-ras-1 oncogenes by N-nitroso-N-metylurea during initiation of mammary carcinogenesis in rats // Nature.- 1985.-Vol. 315.-P. 382-387.