Устойчивость медоносных пчел к микозам в условиях техногенеза районов нефтедобычи Республики Татарстан тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.05, кандидат наук Назарова Надежда Петровна

• Назарова Надежда Петровна
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Назарова Надежда Петровна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Факторы негативного воздействия на жизнедеятельность

медоносных пчел

1.2 Эколого-географическая характеристика районов нефтегазового техногенеза Республики Татарстан

1.3 Характеристика основных микозов

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2. Материалы и методы исследования

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Изучение эпизоотической ситуации по микозам пчел

в районах нефтедобычи РТ

3.2 Изучение гигиенической активности пчел

3.3 Определение степени контаминации меда спорами возбудителей микозов

3.4 Концентрация приоритетных поллютантов в почве

и медоносных растениях

3.5 Концентрация тяжелых металлов в продуктах пчеловодства

и организме пчел

3.6 Аккумуляция и миграция тяжелых металлов в системе

«почва - растение - цветочная пыльца - пчела - мед»

3.7 Корреляция техногенного воздействия и степени

пораженности пасек микозами

3.8 Кластерный анализ районов техногенеза РТ по уровню полиметаллической контаминации медоносных пчел

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

ВЫВОДЫ

Список сокращений

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

ПРИЛОЖЕНИЯ

ПРИЛОЖЕНИЕ

ПРИЛОЖЕНИЕ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Устойчивость медоносных пчел к микозам в условиях техногенеза районов нефтедобычи Республики Татарстан»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. В условиях нефтегазового техногенеза происходит существенное нарушения экологического равновесия, что способствует загрязнению почв, почвенного грунта, снижению продуктивности почвенного покрова, загрязнению растительности, продуктов животноводства солями тяжелых металлов (ТМ) (Ильязов Р.Г., Шакиров Ф.Х., 2006).

На сегодняшний день известно множество научных работ, посвященных исследованиям ТМ в водных экоситемах (Степанова Н.Ю., Латыпова В.З., 2005; Никитин О.В., Латыпова В.З., Шагидуллин Р.Р., Поздняков С.Р. 2011; Еськова М.Д., 2012), почве (Кабата-Пендиас А., 1989; Авдеева Т.С., Плотникова А.В., Портнова А.В., 2011; Губейдуллина З.Н., Починова Т.В., Дежаткина С.В., 2012; Зулкарнаев А.Б., Ильбулова Г.Р., Семенова И.Н., Суюндуков Я.Т., 2011), растениях (Шарифзянов Р.Б, Давыдова О.А., Климов Е.С., 2009; Валеева Г.Р, Латыпова В.З., Винокурова Р.И., Иванова Е.Р., 2012), организме млекопитающих (Чеботарева Е.Г., Бородуллин В.Б., Горошинская И.А., 2006), птиц (Лысенко М.А., 2011), моллюсков (Гаджирамазанова А.Г., Расулов Ш.А., 2011) и др.

Экотоксиканты, в результате многофакторного загрязнения экосистем накапливаются в почве и передаются по пищевой цепи из почвы через растения, организм медоносных пчел в конечное звено цепи - мед (Туктарова Ю.В., 2013). Схожая миграция практически всех поллютантов негативно отражается на качестве продуктов пчеловодства. Распространение и миграция токсикантов в медоносные растения, пчелопродукты (Pohorecka 1994), организм взрослых пчел, куколок ^НшМ Z., Gzzedozryki 1995) изучались многими

исследователями. Наиболее обстоятельные работы в этой области принадлежат исследованиям Р.А. Кадирова (1999), Е.К. Еськова (2005, 2008, 2011, 2012, 2013), В.И. Лебедева, Е.А. Мурашовой (2003), Л.А. Осинцевой (2004, 2005, 2007, 2010, 2011), В.И. Коркиной (2009), С.А. Пашаян (2012), М.Д. Еськовой (2012) и других авторов.

Проникая в организм медоносных пчел, экотоксиканты могут образовывать токсичные метаболиты и вызывать развитие болезней (Еськов Е.К., Ярошевич Г.С., Еськова М.Д., Кострова Г.А., Ракипова Г.М., 2008; Гробов О.Ф, Смирнов А.М., Попов Е.Т., 1987; Туктаров В.Р., 2001; Пашаян С.А., 2006; Коркина В.И., 2009; Корж В.Н., 2010).

В настоящее время серьезной проблемой в отрасли пчеловодства являются микозные болезни пчелиных семей: аскосфероз, меланоз, кандидамикоз, аспергиллез. Данные заболевания приводят к ослаблению пчелиных семей на пасеках, снижению способности пчел к медосбору и опылению, и гибели пчелосемей (Гробов О.Ф, Смирнов А.М., Попов Е.Т., 1987; Гнездин А.П., Акчурин М.М., Бахтиярова С.М., 2005; Попов А.А. , Мукминов М.Н., Курбанов И.В., Салимов Т.М., 2005; Негматов А.А., 2006; Аликин Ю.С., Афиногенов А.З., Батуев Ю. М., 2009).

Так, в Удмуртии процент семей, пораженных аскосферозом, составил около 30-40%, в Татарстане - до 9-20%, в Башкортостане - до 14,2 -5,9%, Марий Эл -до 1,1-23% , в Республике Мордовия - до 9,4 - 13,7%, в Нижегородской области -до 3,6-13% (Шишко А.А., 2006).

Р.Т. Клочко, С.Н. Луганский (2011), Н.И.Кривцов (2011), сообщают о том, что синдром массовой гибели медоносных пчел, распространяющийся на пасеках, скорее всего, результат воздействия многих факторов: варроатоз, вирус деформации крыла, переносимый клещом варроа, хронический паралич, филаментовироз, акарапидоз, нозематоз, критидиоз, аскосфероз, амебиоз, браулез, европейский гнилец, а также пестициды, генетически модифицированные растения-медоносы и т.д.

По данным В.И. Лебедева, Л.В. Прокофьевой (2012) в 26 регионах РФ допущена убыль пчелиных семей. Так в Ставропольском крае количество пчелиных семей сократилось на 25 тысяч семей (33%). В Воронежской области их численность сократилась почти на 7 тысяч (9%), в Краснодарском крае - на 14 тысяч (9%), в Республике Башкортостан потеряно около 5 тысяч (2%).

Исследование медоносных ресурсов на присутствие поллютантов с использованием метода апимониторинга на территории Российской Федерации осуществлялось в Краснодарском крае (Морева Л.Я., 2008; Ефименко А.А., Морева Л.Я. 2012), Новосибирской (Коркина В.И., 2009; Осинцева Л.А., 2010), Новгородской областях (Соловьев В.В., 2003), Республике Башкортостан (Туктаров В.Р., 2001; Ишемгулов А.М., 2005; Туктарова Ю.В., 2013) и в других регионах. Следует подчеркнуть, что для экосистемы каждого региона характерен специфичный уровень техногенной нагрузки и экологического риска.

В связи с этим исследование и разработка способов улучшения развития пчелиных семей в условиях экологически неблагополучных районов для защиты и повышения резистентности пчел к микозам, их профилактики становится ключевой проблемой.

Недостаток информации о закономерностях аккумуляции поллютантов в звеньях пищевой цепи медоносных пчел, влияния контаминации организма пчел, продуктов пчеловодства поллютантами на характер проявления болезней микозной этиологии на фоне высокой техногенной нагрузки обуславливает необходимость проведения обширных исследований состояния организма медоносных пчел, их среды обитания, изменчивости их организации в динамике адаптации к техногенным изменениям в окружающей среде, степени их восприимчивости к патогенам.

В условиях техногенеза нефтедобывающих районов Республики Татарстан (РТ) исследования эпизоотической ситуации по микозным болезням пчел, степени загрязнения системы почва-растение-пыльца-пчела-мед ТМ, уровня отрицательного воздействия данных поллютантов на резистентность пчел к микозам не проводились. Важность рассматриваемой проблемы и недостаточная информация исследовательских работ в этой области наметили цель наших исследований: оценка устойчивости медоносных пчел к основным микозам: аскосфероз, аспергиллез, меланоз и кандидамикоз в условиях полиметаллического загрязнения.

Для реализации цели исследований были поставлены следующие задачи:

1. Определить состав возбудителей микозов на пасеках районов нефтедобычи РТ;

2. Изучить механизмы естественной резистентности медоносных пчел к микозам;

3. Провести качественный и количественный анализ содержания и накопление тяжелых металлов в почве, растениях, пчелах и продуктах пчеловодства;

4. Изучить механизм миграции тяжелых металлов в системе почва-растение-пыльца-пчела-мед;

5. Установить зависимость степени пораженности микозами пасек от уровня техногенеза территорий.

Научная новизна и ценность работы. Впервые на основе результатов исследования дана комплексная оценка эпизоотологической ситуации по микозам на пасеках районов нефтедобычи РТ. С помощью метода масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой проведен качественный и количественный анализ содержания и накопления тяжелых металлов в системе почва - растение - пыльца - пчела - мед. Изучен механизм миграции ТМ в системе почва.. .мед; определен наиболее загрязненный участок системы. С использованием корреляционного метода Спирмена установлена зависимость степени пораженности микозами пасек от уровня контаминации пчел тяжелыми металлами в районах нефтедобычи РТ. Построена карта-схема территорий районов нефтедобычи РТ, отображающая географически локализованные кластеры по уровню контаминации пчел ТМ и развития микозных заболеваний.

Теоретическая и практическая значимость исследования.

Получены данные о количественном содержании металлов в пчелах и продуктах пчеловодства. Проведен анализ полиметаллического загрязнения пчел на пасеках с высоким, средним и низким уровнями заболеваемости аскосферозом. Выявленные превышенные значения ПДК ТМ в пыльце и меде данных районов

важно учитывать при анализа эпизоотологической ситуации, для последующей разработки способов улучшения развития пчелосемей и повышения резистентности пчел к микозам.

На основании полученных данных разработаны «Методические рекомендации по определению массовой доли тяжелых металлов (Cd, Pb, Zn, Fe, М, Cu) в цветочной пыльце, меде и организме пчел методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой» (Утверждены учебно-методической комиссией Института экологии и природопользования КФУ, протокол № 11 от 15.12. 2014).

Положения, выносимые на защиту

Проведенные исследования и полученные результаты позволяют вынести на защиту следующие основные положения диссертационной работы:

1. Анализ эпизоотической ситуации по микозам пчел в районах нефтедобычи РТ.

2. Аккумуляция и миграция тяжелых металлов в системе почва...мед.

3. Корреляционная зависимость между заболеваниями микозами и уровнем контаминации пчел поллютантами.

4. Кластерный анализ районов нефтедобычи РТ по степени контаминации пчел поллютантами.

Степень достоверности и апробации результатов

Апробация работы осуществлялась посредством поэтапного представления результатов исследования на третьей международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии, медицины и нанотехнологий» (Ростов-на-Дону, 2009), первой международной научно-практической конференции «Наука и современность - 2010» (Новосибирск, 2010); втором симпозиуме стран СНГ по перепончатокрылым насекомым (Санкт-Петербург, 2010); второй международной научно-практической конференции «Экологическая безопасность и устойчивое развитие территорий» (Чебоксары, 2012); международной научно-практической конференции «Глобализация: исторические предпосылки, эволюция и перспективы для человечества» (Москва, 2012); второй

всероссийской научно-практической конференции с международным участием, посвященной 100-летию со дня рождения заслуженного деятеля науки РСФСР и Башкирской АССР, доктора ветеринарных наук, профессора Аюпова Хамита Валеевича «Современные достижения ветеринарной медицины и биологии - в сельскохозяйственное производство» (Уфа, 2014), итоговых конференциях ФГАОУ ВПО КФУ (Казань, 2011, 2012, 2014).

Публикации

Основные материалы диссертации изложены в 19 печатных работах, в том числе в 3 публикациях в изданиях, определенных перечнем ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, их обсуждения, выводов и списка цитируемой литературы, приложений. Список литературы включает 229 наименований, в том числе 25 на иностранных языках. Работа изложена на 1 49 страницах машинописного текста, содержит 24 таблицы и 22 рисунка. Приложение содержит 10 таблиц, 7 рисунков.

Автор выражает благодарность за оказание консультативной помощи в работе над диссертацией:

Кандидату географических наук, доценту кафедры прикладной экологии Института экологии и природопользования ФГАОУ ВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет Никитину Олегу Владимировичу;

Инженеру кафедры прикладной экологии Института экологии и природопользования ФГАОУ ВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет Ежковой Марине Николаевне.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Факторы негативного воздействия на жизнедеятельность

медоносных пчел

Существенными экологическими проблемами, которые продолжают вносить вклад в деградацию естественных экосистем, являются вырубка лесов, распашка степей, нефтяные разливы, загрязнение водных объектов, атмосферного воздуха, истощение природных ресурсов (Иванов А.В., 1997), изменение климата (Газеев Н.Х., 1996; Петросян В.С., 2005; Черноголовый В.В., 2008; Суворин А.В., 2013).

В результате растущего антропогенного прессинга на окружающую среду происходит сокращение кормовых угодий пчел, а вместе с тем и снижение резистентности медоносных пчел, что благоприятствует прогрессированию заболеваний в различных формах (Ишемгулов А.М., 2005; Пичушкин И.С., Пичушкин С.И., Мордвинова Е.И., 2005; Кашина Г.В., Кашин А.С., 2007; Гаева Д.В., 2008; Кашина Г.В., 2009; Пашаян С.А., 2010; 2012).

По данным Ф.А. Лаврехина, С.В. Панковой (1983) закономерности деятельности пчелиной семьи зависят от физиологического состояния внутренних органов пчел, биологического состояния самой семьи и от внешних факторов. Так, А.З. Злотиным (1990) отмечено, что в зоне медеплавильных заводов в штате Монтана (США) остаточные количества мышьяка, свинца и меди вызывали продолжительное сокращение популяций пчел; лишь 5 - 10% семей доживали до весны.

По данным А.П. Гнездина, М.М. Акчурина, С.М. Бахтияровой (2005) также в зонах медеплавильных алюминиевых заводов были зафиксированы случаи массовой гибели пчел, где губительными для пчел оказались медь, цинк, мышьяк, фтор, а также случай одновременной внезапной гибели 50 семей из-за выброса формальдегида на одном из производств. Авторами отмечено, что пчелы плохо

переносят наличие оксида серы (IV), который активно поглощается многими медоносами.

Н. Кокорев, Б. Чернов (2008) указывают на то, защитные свойства пчел достаточно сильно снижает мед, собранный на территории промышленных районов. Ю.В. Туктаровой, Р.Г. Фархутдиновым (2013) отмечено, что негативные реакции в организме пчел, в конечном итоге приводящие к угнетению их процессов жизнедеятельности, могут вызвать окись углерода и оксиды азота.

Медоносная пчела эмпатично реагирует на самые незначительные изменения окружающей среды. К тому же антропогенная трансформация окружающей среды становится причиной ослабления пчелиных семей, сокращения их продуктивности, опылительной активности, гибели и исчезновения многих популяций медоносных пчел (Буренин Н.Л., Котова Г.Н., 1994; Макаров Ю.И, Светлов А.А., Чертяникова Т.Л., Призова Т.Н., Гончарова М.В., Якушева Г.Н.,1995; Гробов О.Ф., Сычев М.М., 1998; Гнездин А.П., Акчурин М.М., Бахтиярова С.М., 2005; Саттаров В.Н., 2011; Соловьева Л.Ф., 2012).

Довольно серьезный урон пчелы испытывают при проникновении в улей большой восковой моли (Gallería melonella), малой восковой моли (Achroea grisella), шершня (Vespa crabo), клеща варроа якобсони (Varroa jacobsoni), акараписа вуди (Acarapis woodi), из млекопитающих - лесной мыши (Apodemus sylwaticus), домовой мыши (Mus musculus), полевой мыши (Apodemus agrarius), землеройки-белозубки (Sorex araneus), землеройки-беззубки^гех minutus), способствуя ослаблению пчелиных семей, и гибели их весной. (Кашина Г.В., Баранов А.Ю., Зозуля А.Л., 1992; Сычев М.М., 1995; Мукминов М.Н., Смирнов А.М., 2008; Комлацкий В.И., 2009; Клочко Р.Т., Луганский С.Н., Котова А.А., 2012). М.В. Бакалова (2011) сообщает, что к ослаблению пчелиной семьи может привести увеличение численности таких симбионтов, как муравьи, осы, клещи варроа, восковые моли, способные ослабить только ту систему, на которую изначально влиял какой-то дестабилизирующий фактор (ослабленное воспроизводящее звено (матка), пониженный инстинкт очистки, развитие при

неблагоприятных погодных условиях).

О возможности заражения пчел такими заболеваниями, как аскосфероз и аспергиллез посредством проникновения в улей уховерток (Dermaptera), сообщает С.В. Петрович (1989). По словам А.В. Суворина (2013) муравьи, разграбив слабые пчелиные семьи, могут привести к их слету. Данные сведения подтвердаются исследованиями М.Н. Мукминова, А.М. Смирнова, Д.Г. Вакиловой, (2007).

Э.В. Кузьмина (1999) сообщает о том, что неблагоприятные факторы внешней среды изменяют кислотно-щелочное равновесие в содержимом кишечника пчел, что способствует снижению устойчивости их организма к ассоциативным заболеваниям. J.M. Bonmatin, P.A. Marchand, R. Charvet, I. Moineau, E.R. Bengsch, M.E. Colin (2005) сообщают, что пестициды, внесенные в почву, могут контактировать с медоносными пчелами через нектар или пыльцу обработанных растений. А.А. Деркач (2009) отмечает, что неоникотиноиды являются высокотоксичными для медоносных пчел как при поступлении в организм с кормом, так и при аппликации их на покровы насекомых.

Однако, кроме пестицидов, в пыльцу и мед могут проникать споры плесневых грибов, возбудители сальмонеллеза, дизентерии, кишечная палочка и даже споры ботулинической палочки, поскольку пчелы слизывают сладкие выделения червецов, тли, листоблошки на листьях, посещают навозные кучи, открытые выгребные ямы в поиске органических веществ и недостающих им минеральных солей (Buchmann S.L.,1987; Филиппов П.И., Бутов А.Г., 1991; Шламмер Г., 2005).

При недостатке белка в гнездах семей у пчел-кормилиц снижается активность глоточных желез (И.Е. Перельсон, 1962), выделяющих маточное молочко, что приводит к резкому уменьшению количества выращиваемого расплода, приводя к белковому голоданию из-за истощения организма, снижению уровня жизни пчел (Малаю А., 1979; Сотников А.Н., 2008). По данным В.Р.Туктарова (2001), в пчелиных семьях, в кормах которых содержались соли ТМ, матки имели меньшую массу, а также зарегистрированы особи с

недоразвитыми крыльями и ножками. Автор подчеркивает, что слабые семьи и семьи пчел, в кормах которых, содержались токсичные соединения, откладывали в ячейку с 2-3 дневными личинками значительно меньше корма, чем сильные.

Накопление в организме таких экотоксикантов, как свинец и кадмий, в организме пчел нарушает процесс их физиологического старения, что выражается в ускорении возрастной динамики изменения массы разных отделов тела (Еськов Е.К., Ярошевич Г.С., Еськова М.Д., Кострова Г.А., Ракипова Г.М., 2008). Определяющими факторами неблагоприятного воздействия на жизнедеятельность семей пчёл являются: техногенные загрязнения окружающей среды промышленными выбросами предприятий - ТМ и токсичными соединениями, химическими веществами, радионуклидами и другими агентами; химические загрязнения энтомофильных растений пестицидами; химические ветеринарно-санитарные средства, применяемые на пасеках и непосредственно в ульях с пчелами (Клочко Р.Т., Луганский С.Н., 2011).

В.В. Калинихиным (2012) сообщается о том, что продолжительность жизни пчел, работающих на рапсе, на 5-7 дней короче, чем на других медоносах, в связи с тем, что рапсовый мед быстро кристаллизуется.

А.А.Дубникова (2007) отмечает, что под влиянием грибковых инфекций в организме пчел нарушается процесс усвоения белковых веществ, ослабевает иммунная защита пчел. К тому же, как подчеркивает автор, восприимчивость пчелиных семей к заболеваниям обусловлена скоростью и полнотой санитарной очистки гнезд, в том числе и от больных и погибших от инфекционных заболеваний пчелиных особей. Рядом исследователей отмечено, что пчелы, предрасположенные к быстрой санитарной очистке гнезда представляют собой устойчивых к аскосферозу особей (Соловьева Л.Ф., 2001; Попов А.А., Мукминов М.Н., Курбанов И.В., Салимов Т.М., 2005; Кокорев Н., Чернов Б., 2008).

По данным А.М. Смирнова, Р.Т. Клочко, С.Н. Луганского (2000), предрасполагающими факторами в развитии заболеваний являются резкие колебания температуры и повышенная влажность воздуха. Аналогичные сведения

приводят Ю.С. Аликин, А.З. Афиногенов, Ю.М. Батуев (2009), подчеркивая, что устойчивость пчел к болезням зависит от силы семьи, обеспеченности кормами и наличия медосбора в природе. По данным А.В. Суворина (2013) на количество пчелиных семей и качество медосбора также могут оказывать воздействие сокращение площадей дикорастущих и сорных растений, которые в отличие от культурных медоносов цветут постоянно, сменяя один вид другим цветущим видом и тем самым не разрывают взяточный период.

На медоносных пчел, как важную составляющую часть биогеоценозов, оказывают влияние такие внешние факторы среды, как атмосфера, солнечная радиация, температура, влажность, ветер, состояние медоносной растительности и т.д. (Еськов Е.К., 1995; Черевко Ю.А., Черевко Л.Д., Бойценюк Л.И., Кочетов А.С., 2006; Кокорев Н.Д., Чернов Б., 2009). Исследования Т.П. Голевой, Я.Я.Тыньо (2010) подтвердили, что стремительные и внезапные скачки температуры и относительной влажности между днем и ночью обуславливает расход дополнительной энергии пчел для поддержания стабильного состояния в гнезде. Л.Я. Морева, М.А. Козуб (2011) установили, что некачественный мед и загрязненные источники воды на фоне лета 2010 г с аномально высокими температурами способствовали развитию, как незаразных, так и заразных заболеваний медоносных пчел. По мнению А.П. Корж, В.Е. Кирюшина (2012) на медоносную пчелу наибольшее воздействие оказывает температура и влажность как в условия среды II порядка (за пределами ульев), так и в среде I порядка (в улье), полностью контролируемой насекомыми.

По мнению Л.А Осинцевой, В.И. Полянской (2011) в дни с благоприятной погодой увеличивается интенсивность лета пчел, что положительно отражается на пыльцевой продуктивности пчелиных семей, и как следствие на их силе. По мнению И.Н. Мадебейкина, И.И. Мадебейкина (2012), увеличившаяся облачность нашей планеты в результате глобального потепления способствует росту числа пасмурных дней, отрицательно сказывающихся на летной деятельности пчел.

Серьезным барьером в эволюции современного пчеловодства являются

инфекционные и инвазионные заболевания пчел, в частности аспергиллез и аскосфероз пчел. Кроме указанных заболеваний определенную роль в патологии пчел играют меланоз и кандидамикоз (Жуков А.А., 1995; Клочко Р.Т., Малиновская Л.С., Игнатьева Г.И., Сохликов А.Б., 1996; Мукминов М.Н., Смирнов А.М., 2008; Шишко А.А., 2006). А.А. Негматов (2006), Г.В. Кашина (2009) отмечают, что, несмотря на проводимые лечебно-профилактические мероприятия, варроатоз, аскосфероз, аспергиллез, гнильцовые и вирусные болезни, а также вредители пчел продолжают носить значительный экономический ущерб пчеловодству.

С.А. Пашаян, К.А. Сидорова (2010) указывают о положительной корреляции между степенью пораженности пчелиных семей возбудителями таких болезней как варроатоз, нозематоз, аскосфероз, гнильцовые болезни и экологической нагрузкой.

Я.Я. Тыньо (2010) сообщает, о том, что нарушение условий в среде обитания пчелиных семей на фоне стимуляции патогенов болезней пчел способствует уменьшению сопротивляемости пчелиных семей и становится предпосылкой для инфекционных болезней. Так, бесконтрольное применение химических препаратов при лечении медоносных пчел еще больше ослабляет их иммунную систему, способствует возникновению дисбактериоза кишечной микрофлоры у пчел, нарушает обменные процессы, стимулирует развитие грибковых заболеваний и нередко приводит к гибели пчел (Соловьева Л.Ф., 2001; Баньковский Д.Б., 2007; Кокорев Н., Чернов Б., 2008; Коркина В.И., 2009; Морева Л.Я., Цуркан М.С., Абрамчук А.В., 2008; Шишканов Д.В., 2008; Богомолов К.В., Яранкин В.В., 2011).

С миграцией пестицидов (Саттаров В.Н., Борисов И.М., Шарипов Р.А., Биглова Л.Ф., 2011) и других стойких органических загрязнителей в биосфере и накоплением их в трофической цепях пчел (Илларионов А.И., 1996) связывают массовую гибель пчелиных семей в разных регионах мира (Кайгородов Р.В., Леготкина Г.И., Хисматуллин Р.Г., 2011; Соловьева Л.Ф., 2012).

По данным М.А. Лучко, А.Н. Сотникова (2012) гибель пчелиного расплода вызывают бактерии, вирусы, грибы и клещи варроа. Результаты исследований В.И. Масленниковой, Т.П. Голевой (2012) показали, что клещи варроа являются одним из ключевых факторов способствующих развитию аскосфероза, особенно при низкой резистентности пчел.

По информации, О.Ф. Гробова, Р.Т. Клочко (2004); А.М. Смирнова, Р.Т. Клочко, О.Ф. Гробова (2005) в последние годы международная общественность предъявляет повышенные требования к продуктам питания. Специальной Европейской комиссией по меду разработаны отдельные положения по продуктам пчеловодства, которые четко регламентируют наличие патогенных микроорганизмов и остаточных количеств ветеринарных препаратов, применяемых, в том числе и при микозах пчел.

Кроме того, пчелиные семьи могут быть использованы в качестве модели развития инфекционного процесса, что важно при разработке микробиометода борьбы с вредными насекомыми (Злотин А.З., 1990). Медоносные пчелы и пчелопродукты могут применяться как биоиндикаторы загрязнения окружающей среды (Joney K.C., 1987; Туктаров В.Р., 1995-99; Туктаров В.Р., Мишуковская Г.С., 2002; Бондарева Н.В., 2005;). Однако, по данным Л.А. Осинцевой (2004), мед не может служить модельным образцом для мониторинга экосистем в связи с тем, что при переработке нектара в мед пчелы аккумулируют в себе большинство несвойственных нектару элементов, и большая часть ТМ, пестицидов и других средств химизации накапливается в растительных тканях и с нектаром не выделяется.

C. Pratt, R. Sikorski (1983); В. Madras-Majewska, Z. Jasinski, (2003) сообщают о том, что в организме пчел аккумулируется большое количество свинца. По мере удаления от автотрассы содержание свинца уменьшается. По данным анализов пыльцы, полученной в различных по степени загрязнения промышленными и транспортными отходами местах, содержание свинца, кадмия в ней превышало допустимую норму, независимо от места получения, в то время

как на содержание нитратов и нитритов не сказывалось близкое сосредоточение комбината по производству азотных удобрений (РоИогеска K., 1994). Исследованиями К. Валнер (2004) выявлены концентрации варроацидов в меде, превышающих допустимые значения.

У медоносной пчелы с допустимым уровнем присутствия ТМ эффективно работают клеточные защитные механизмы, выраженные числом гемоцитов, участвующих в очистке полости тела, и фагоцитарным индексом. Бактерицидная активность лизоцима гемолимфы не различается в куколках, полученных с пасек, на которых мед содержал различные концентрации меди, никеля, хрома, цинка, свинца, марганца. Для изучения влияния внешних загрязнителей на работу защитной системы медоносной пчелы необходимо исследовать их действие на рабочих особей (Glinski Z., Gzzedozryki K., 1995). По словам L. Bornus (1995), в организме пчел обнаруживались кадмия - 6 - 20 мкг/кг, свинца - 145 - 590 мкг/кг.

Исследованиями В.В. Власенко, В.Ф. Розанова (1996) показано, что

137 134

наибольшая концентрация , Cs содержится в меде и пчелиной обножке, полученных с клевера. Меньше всего загрязнены радиоцезием мед и обножка, полученные с рапса и белой акации. М.Л. Алексемицер, Л.И. Бондарчук, В.П. Кубайчук (1997) сообщают о том, что наиболее широким спектром загрязняющих радионуклидов и высокими уровнями их активности характеризуется прополис, более низкими - пчелиная обножка.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Назарова Надежда Петровна, 2015 год

■г ©

Л^иогорск Уу

(^Бутульма

Уруссу

Октябрьшй

Нурпат

Челно-Вершины

1 Альметьевск™ район, с. Нолинка

2 Альметьевск™ район, с. Кузайюшо

3 Альметьевск™ район, с. Д. Ямаши

4 Азнакаевский район, с. Агерзе

5 Азнакаевский район с. Маняус

6 Азнакаевский район, с. Елга-баш

7 Бугульминскнй район с. Коногорово

Бугульминскнй район п.г.т. Карабаш

9 Бугульминскнй район, с. Луночарский

110 За™скии район с. Гульюшо

И За™ский район с. Савалеево

12 Заинский район, с. Тюгеевка

113 Лениногорскнй район, с. Федотовка

14 Лендоогорский район с. Тнмяшево

НЛениногорский район, с. Ивановка

ИНовошешминскнй район, с. БкагериноЕка

^|Новошешм™ский район, с. Череыуховское

118 1? Новошешминский район, с. Шахмайкнно

Черемшанский район, с. Ибраево-Каргали

20 Черемшанский район с. Ивашюто

21 Черемшанский район, с.Мал ал Чегодайка

22 Бернеуслонскнй район, с. Воробьевка

23 Вернеуслонскнй район с. Верхний У слон

24 Бернеуслонскнй район, с. Сеитово

Рисунок 20 - Карта-схема среднегодового уровня техногенного воздействия на медоносных пчел по кластерам районов РТ за 2010-2013 гг

На карте-схеме отмечены области пасек, которые были распределены географически по концентрации металлов в пчелах в условиях техногенно нагруженных районов. Территории с высоким уровнем техногенной нагрузки (по концентрации металлов теле пчел) расположены в правой части, области с низкой степенью нагрузки - в левой. Как видно из рисунка, территории относящиеся к I и II кластерам сгруппированы в пределах одного района. В III кластер вошли пасеки

№8, №11и №13, которые сосредоточены в пределах трех районов. Территории V и VI кластеров удалены от областей с высоким уровнем полиметаллического загрязнения.

Таким образом, анализ распределения пасечных территорий в пределах 6 кластеров позволяет констатировать, что в большей их части наблюдается увеличение техногенного воздействия, что негативно может отразиться на устойчивость пчел к микозам.

По степени пораженности пасек микозными заболеваниями и уровнем полиметаллического загрязнения пчел была составлена карта-схема (Рисунок 21).

Рисунок 21 - Уровень заболеваемости пчел микозами в условиях техногенеза районов нефтедобычи РТ (Альметьевский район: 1 - с. Нолинка, 2 -с. Кузайкино, 3 - с. Ямаши; Азнакаевский район: 4 - с. Агерзе, 5 - с. Маянус, 6 -Елга-баш; Бугульминский район: 7 - с. Коногоровка, 8 - п.г.т. Карабаш, 9 - д.

Луночарский; Заинский район: 10 - с. Гулькино, 11 - с. Савалеево, 12 - с. Тюгеевка; Лениногорский район: 13 - с. Федотовка, 14 - с. Тимяшево, 15 - с. Ивановка; Новошешминский район: 16 - с. Екатериновка, 17 - с. Черемуховское, 18 - с. Шахмайкино; Черемшанский район: 19 - с. Ибраево-Каргали, 20 - с. Ивашкино, 21 - с. Малая Чегодайка)

На основании данных эпизоотологической ситуации по микозам выявлено, что наибольшее количество пчелосемей было поражено аскосферозом. В зависимости от процентного количества пораженных пчелосемей аскосферозом выделены пасечные территории с высоким, средним и низким уровнем заболеваемости. Высокий уровень заболеваемости пчел аскосферозом (<10,80%) отмечен на территориях, относимых к I кластеру (1 - с. Нолинка, 3 - с. Ямаши, 7 -с. Коногоровка, 9 - д. Луночарский) и III кластеру (8 - п.г.т. Карабаш). Средний уровень заболеваемости (7,65 - 10,80 %) также отмечен в I кластере, однако, только на одной пасеке (2 - с. Кузайкино), в III (11 - с. Савалеево, 13 - с. Федотовка), IV (10 - с. Гулькино, 12 - с. Тюгеевка) и V кластерах (14 - с. Тимяшево, 15 - с. Ивановка). Территории с уровнем заболеваемости ниже 7,65% отмечены во II (4 - с. Агерзе, 5 - с. Маянус, 6 - с. Елга-баш), IV (18 - с. Шахмайкино) и V кластерах (16 - с. Екатериновка, 17 - с. Черемуховское, 19 - с. Ибраево-Каргали, 20 - с. Ивашкино, 21 - с. Малая Чегодайка).

Следует отметить, что пасеки, на которых выявлены высокие уровни поражения пчелосемей аскосферозом, сосредоточены на территориях с наибольшим показателем полиметаллического загрязнения медоносных пчел. Пасеки со средним уровнем заболеваемости аскосферозом сосредоточены на территориях с различной степенью экологического неблагополучия (I, III, IV и V кластеры). Пасечные территории с минимальными показателями контаминации пчел поллютантами, были сгруппированы в областях с низким уровнем заболевания пчел аскосферозом.

Для выявления значимости различий полиметаллического загрязнения пчел важным на наш взгляд, являлось проведение анализа в кластерах. Результаты расчета представлены на рисунке 22.

а) е/

Рисунок 22 - Статистическое положение кластеров по содержанию металлов (а - железо, б - кадмий, в - медь, г - никель, д - свинец, е - цинк)

Статистический анализ показателей металлов по населенным пунктам районам показал, что концентрация данных поллютантов значимо различается. Так, увеличение концентрации железа значимо различалось в III и IV кластерах относительно VI. Выявлены значимые различия по содержанию железа между II и IV кластерами. Контаминация пчел кадмием значимо возрастала в 4 -х кластерах (I, II, III, IV) относительно VI кластера, что приводило к развитию микозов на данных пасеках.

Концентрация меди значимо снижалась относительно I кластера во II, III, IV, V и VI кластерах. Содержание никеля значимо увеличивалось во II кластере, относительно III, IV, V и VI кластеров. Уровень свинца статистически значимо увеличивался во всех кластерах, кроме IV. Концентрация цинка значимо отличалась во всех кластерах относительно VI кластеров.

Следовательно, для учета влияния концентрации поллютантов на устойчивость пчел к микозам, необходимо учитывать территориальный фактор.

Увеличение числа микозных (грибковых) болезней пчел связано с рядом экологических и экономических факторов (Блинов Н.В., 2002).

Вопросу изучения характера проявления микозных болезней, методов диагностики, условий выживаемости возбудителя, а также разработки средств и методов борьбы с ним, к настоящему времени уделено достаточно серьезное внимание, чему свидетельствуют многочисленные работы отечественных и зарубежных исследователей (Зенухина Н.З., Гуськов В.В., 1997; Жуков А.А., 1995; Morse R.A., 1997; Блинов Н.В., 2002).

Устойчивости медоносных пчел к микозным заболеваниям в техногенеза в районах нефтедобычи РТ до недавнего времени должного внимания не уделялось.

В ходе проведенных исследований были определены стационарно неблагополучные по микозам пасеки.

По нашему предположению причиной такого положения является, расположение пасек вблизи автодорог, нефтяных объектов, отсутствие надлежащего контроля, низкая медопродуктивность в результате формирования блокирующего антициклона в фазу главного медосбора, отсутствие эффективных средств лечения и профилактики микозных заболеваний пчелиных семей, возникновение резкого иммунодефицита пчел на фоне высокой антропогенно-техногенной нагрузки.

По мнению Л. Ф. Соловьевой (2001); А.А. Попова, М.Н. Мукминова, И.В.Курбанова, Т.М. Салимова (2005) одним из главных факторов устойчивости пчелиных семей к заболеваниям расплода, является гигиеническое поведение пчел. В подтверждении выше сказанному проведено изучение механизмов естественной резистентности пчел в условно-загрязненных районах. В ходе изучения механизмов естественной резистентности пчел к микозам были выявлены группы с низким показателем гигиенической активности. К данной категории были отнесены пчелосемьи Альметьевского, Бугульминского и

Заинского и Лениногорского районов, так как пчелы данных экспериментальных групп затрачивали больше времени для удаления погибших личинок.

В наших исследованиях с помощью метода ПЦР были выделены два вида возбудителей аспергиллеза A. flavus, A. fumigatus. Полученные данные согласуются с работами М.Н. Мукминова, Л.И. Зайнуллина (2004), М.Н. Мукминова, А.М. Смирнова (2008).

Проведен анализ особенностей проявления микозов в районах нефтедобычи РТ. Определены неблагополучные по микозам пасеки Альметьевского, Бугульминского, Лениногорского, Заинского районов. По нашему предположению подобное явление обусловлено резким снижением устойчивости пчел к данным заболеваниям в связи с отсутствием цветения медоносов в фазу главного медосбора на фоне аномального лета 2010 г., и высокой техногенной нагрузкой, сформировавшейся на территории пасек нефтедобывающих районов РТ. Полученные данные согласуются с работами Е.К. Еськова (1995), Н. Кокорева, Б. Чернова (2004), Ю.А. Черевко, Л.Д. Черевко, Л.И. Бойценюк, А.С. Кочетова (2006), Л.Я. Моревой, М.А. Козуб (2011).

Посредством масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой количественно и качественно было проанализировано содержание ТМ в системе почва - растение - цветочная пыльца - пчелы - мед.

Анализ полученных результатов свидетельствовал о том, что в 1 -м районе (Альметьевский) происходило увеличение контаминации почвы кадмием и медью. Выраженная контаминация почв свинцом была свойственна для Азнакаевского района. В пробах Бугульминского района отмечено увеличение загрязнения почвы железом, медью, свинцом. В пробах Заинского района максимальный уровень ТМ приходился на медь, свинец и цинк. В 5-м районе (Лениногорском) был зарегистрирован высокий уровень загрязнения почв железом. В 6-м (Новошешминском) и 7-м (Черемшанском) пробах загрязнения почв ТМ не было ярко выражено. Изучение характера аккумуляции ТМ растениями показал, что наибольшие концентрации характерны для таких

металлов, как цинк, свинец, никель и медь, что согласуется с данными Е.К. Еськова, М.Д. Еськовой, Н.П. Коротковой, Г.С. Ярошевича (2011). Значения ТМ в цветочной пыльце в пробах Альметьевского района также возрастали относительно проб Лениногорского, Новошешминского и Верхнеуслонского районов. Высокие уровни аккумуляции характерны для меди, железа и цинка, и менее яркое увеличение характерно для свинца и кадмия, что вероятно связано с разной степенью интенсивности распространения данных поллютантов в пределах 15-50 км от техногенного центра. В пробах цветочной пыльцы Альметьевского района показатель меди составил 15,7±0,48 мг/кг, вместо допустимых 10 мг/кг. Довольно высоких значений достигал уровень цинка в пыльце Альметьевского, Азнакаевского, Бугульминского, Заинского, Черемшанского, Новошешминского районов, что согласуется с данными. Полученные показатели растущего уровня кадмия, меди, цинка, свинца, в организме пчел Альметьевского, Бугульминского, Азнакаевского, Заинского районах, согласуются с данными L. Leita, G.Muhlbachova, S.Cesco, R. Barbattini , C. Mondini (1996), В.И. Лебедева, Е.А. Мурашовой (2003), Л.А. Скребневой, Ф.С. Билалова, М.Н. Мукминова, В.З. Латыповой, И.С. Григорьевой (2012).

Полученные данные позволяют констатировать, что содержание ТМ в растениях-медоносах ниже, чем в почве, а в организме пчел ниже, чем в растениях-медоносах, что согласуется с данными Л.Г. Кодесь, Н.В. Бычковой (2010). Анализ данных по контаминации проб ТМ указывает на то, что в пробах меда с территорий Альметьевского района отмечалось превышение ПДК по свинцу и кадмию, в пробах меда с территорий Бугульминского района регистрировалось превышение ПДК по свинцу. Однако, в меде с территорий других районов, содержание ТМ не превысило допустимых пределов, так как пасеки были удалены от автодорог, и нефтяных объектов, что согласуется с данными Н. Кокорева, Б. Чернова (2008), А.А. Жукова, А.М. Биттрирова (2010), Ю.В. Туктаровой, Р.Г. Фахрутдинова (2010), Л. Я. Моревой, А.А. Ефименко (2011), И.И. Ковальчук (2012).

Следовательно, в исследуемых районах РТ в результате интенсивного техногенеза отмечается контаминация почвы, растений, пыльцы, организма пчел и меда ТМ.

Для изучения механизма миграции химических элементов, был рассчитан КН ТМ для каждого участка системы почва-растение-пыльца-пчела-мед.

Эффект кумуляции во всех районах выявлен в участке растение - пчела.

КН железа в участке «растение-пчела» в пробах Альметьевского района составил 1,06; в пробах Азнакаевского, Бугульминского, Новошешеминского районов показатель КН=1,3, в пробах Заинского района КН=1,8, в пробах Лениногорского района КН=1,2, в пробах Черемшанского района КН составил, как и в контроле 1,4. Из полученных результатов видно, что КН больше единицы, что свидетельствует о высокой доли аккумуляции железа пчелами. Такой же эффект аккумуляции выявлен по кадмию, меди, свинцу и цинку, который в некоторых пробах был значительно выше, чем в контроле. На основании полученных данных, можно констатировать, что содержание ТМ в меде в несколько раз ниже, чем в пыльце, в цветочной пыльце ниже чем в растениях-медоносах, а в растениях-медоносах несколько меньше, чем в почве, на которой они росли.

Для того чтобы определить какое количество поллютанта, содержащегося в почве переходит в мед был рассчитан КПВ ТМ. КПВ в пробах Альметьевского района составил 8,4%, в пробах Азнакаевского, Заинского районов КПВ=6,6%, в пробах Бугульминского района - 7,6%, в пробах Лениногорского района КПВ=7,7%, Новошешминского района - КПВ=6,5%, в пробах Черемшанского района КПВ составил 5,7%. Во всех исследуемых пробах показатели КПВ превышали контрольных значений (3,2%). Однако наибольший процент аккумуляции ТМ характерен для проб Альметьевского, Лениногорского, Бугульминского районов.

На основании полученных данных о степени аккумуляции организма пчел поллютантов и степени пораженности пасек микозами произведен расчет

ранговой корреляции Спирмена. В результате исследований выявлены умеренная, заметная и высокая зависимость между показателями. Высокая корреляция отмечена между значениями аскосфероза и цинка. Заметная зависимость заболеваемости пчел аскосферозом отмечена при содержании в их теле меди и кадмия. Развитие аспергиллеза, меланоза и кандидамикоза обусловлено контаминацией пчел свинцом, так как между показателями установлена заметная корреляция.

На основании группировки полученных данных методом Варда проводилась кластеризация условно-загрязненных территорий нефтедобычи. По результатам кластеризации (по содержанию металлов в теле пчел и поражению микозами) было выделено 6 кластеров (областей), которые локализованы географически. На основе кластерного анализа была построена карта-схема с расположением условно-загрязненных муниципальных образований по кластерам. I и II кластеры объединили территории с наибольшим уровнем техногенеза. III и IV кластеры включали в себя районы со средним уровнем загрязнения металлами. Территории, вошедшие в V и VI кластеры, характеризовались минимальным уровнем загрязнения металлами.

Корреляционный анализ по уровню заболеваемости пчел аскосферозом и полиметаллического загрязнения организма пчел по кластерам позволил установить, что высокий уровень заболеваемости характерен для территорий, относимых I (4 пасеки) и III кластерам (1 пасека). Средний уровень заболеваемости характерен для I (1 пасека), III (2 пасеки), IV (2 пасеки) и V кластеров (2 пасеки). Территории с низким уровнем заболеваемости отмечены во II (3 пасеки), IV (1 пасека) и V кластерах (5 пасек).

В результате полученных данных о корреляции грибковых болезней пчел и уровня контаминации их организма ТМ, можно предположить, что аккумуляция ТМ в организме пчел отрицательно сказывается на их резистентности к данным болезням, снижает их продуктивность, а также ухудшает качество продукции пчел, что согласуется с данными С.А. Пашаян (2006); С.А. Пашаян, К.А.

Сидоровой (2010); Л.Я. Моревой, М.А. Козуб (2011).

Следует помнить, что эффективность защиты пчел от инфекционных болезней в районах с высокой степенью техногенной нагрузки обусловлена своевременными и верно подобранными общеоздоровительными мероприятиями.

Таким образом, выполненные нами теоретические и практические исследования позволили решить поставленную перед нами задачу - изучить устойчивость медоносных пчел к микозам в условиях техногенеза районов нефтедобычи РТ и выявить возможные причины проявления болезней пчел микозной этиологии. Результаты наших исследований доказывают, что в районах с высокой техногенной нагрузкой развитие микозных болезней прогрессировало в связи с высокой аккумуляцией организмом пчел таких химических элементов, как медь, кадмий, свинец и цинк и низкой гигиенической активностью.

Нами выявлено, что устойчивость медоносных пчел к микозам снижается в районах с наивысшей техногенной нагрузкой. ТМ являются одним из ключевых факторов запускающих механизм снижения резистентности медоносных пчел к микозным заболеваниям, в особенности к аскосферозу и аспергиллезу. В связи с этим нами был изучен механизм миграции металлов в системе почва - растения -цветочная пыльца (обножка) - медоносные пчелы - мед и выявлен наиболее уязвимый компонент данной системы - медоносная пчела.

При высокой степени контаминации организма пчел ТМ происходили снижение защитных барьеров и миграция ТМ в избыточном количестве в мед. Мед, содержащий в своем составе высокие дозы ТМ, и являющийся основным источником углеводов для взрослых пчел и расплода, ослаблял их иммунную систему. Цветочная пыльца, являясь исходным продуктом для получения пчелами перги, основного источника белка, также была подвержена контаминации ТМ, мигрирующих из почвы и растений-медоносов. Возникающий синергетический эффект действия ТМ способствовал таким образом, ослаблению устойчивости медоносных пчел к заболеваниям.

1. Определен видовой состав возбудителей микозов на пасеках районов нефтедобычи РТ, при этом в районах с высокой долей техногенного воздействия (Альметьевский, Бугульминский и Лениногорский) в большинстве случаев регистрировались аскосфероз (степень пораженности: 13,9 %, 11,6%, 8,6%) и аспергиллез (11,8%, 4,5%, 9,3% соответственно), значительно меньшую долю составляли меланоз и кандидамикоз. В районах со средней техногенной нагрузкой (Заинский, Азнакаевский и Новошешминский районы) характер проявления заболеваний менее выражен, однако и в них зафиксирована прогрессивная динамика распространения микозов.

2. Содержание меди в цветочной пыльце (обножке) Альметьевского района (15,7±0,48 мг/кг) превышало ПДК в 1,6 раза. Концентрация других ТМ в пыльце превышала показатели контрольного (условно чистого) Верхне-услонского района, в Альметьевском, Азнакаевском, Бугульминском и Заинском районах. Аккумуляция ТМ в производимом пчелами меде было ниже, чем в организме медоносных пчел, что указывает на их значительные фильтрационные способности. Концентрация ТМ в меде достигала высоких значений относительно контроля в пробах меда Азнакаевского, Заинского, Лениногорского районах. Превышения ПДК свинца (1,3 мг/кг) и кадмия (0,05 мг/кг) выявлены в пробах меда Альметьевского района. По свинцу отмечалось превышение ПДК в пробах меда Бугульминского района (1,13 мг/кг).

3. Анализ контаминации системы «почва - растения - цветочная пыльца (обножка) - медоносные пчелы - мед» отражает влияние техногенной нагрузки на качество среды обитания и жизнедеятельность медоносных пчел. Установлено, что в почвах всех исследуемых районов относительно контроля коэффициент загрязнения железом, меди, свинца, никеля превышал единицу. Наивысшие показатели уровня ТМ в почве зарегистрированы на пасеках Альметьевского (по железу, кадмию, меди, никелю, цинку), Азнакаевского (по железу, меди, никелю,

свинцу), Бугульминского (по железу, меди, никелю, цинку), Лениногорского (по железу, кадмию, никелю) районов.

4. Определение коэффициента накопления (КН) в каждом участке системы почва - растения - цветочная пыльца - медоносные пчелы - мед показало, что аккумуляция ТМ происходит в организме пчел. Значение КН в данном звене превышало единицу. Накопление ТМ в теле пчел наблюдалась во всех пробах.

5. Установленный коэффициент перехода вещества (КПВ) из начального участка системы в конечный показал, что в пробах 1-го района достаточно высоким был транзит меди, свинца, цинка и никеля, соответственно 11,7%,7,2%, 16,4%, 10,1%. В пробах 2-го района высоких значений достиг КПВ меди и цинка, соответственно 14,2% и 16,4%. В пробах 3-го района был достаточно высоким КПВ меди (13,9%), никеля (7,8%) и цинка (17,1%). В 4-м районе КПВ меди составил 12,3%, свинца - 2,33%, цинка - 11,2%. В 5-м, 6-м и 7-м районах достаточно высоким был КПВ цинка и меди. В 8-м районе КПВ цинка составил 10,1%.

6. Для заболеваемости пчел микозами выявлена статистически значимая корреляция между содержанием в организме пчел железа ^=0,40), меди ^=0,52), кадмия ^=0,47 - 0,65), никеля ^=0,44), свинца ^=0,41 - 0,57) и цинка ^=0,37 -0,80). При анализе данных об уровнях загрязнения системы «почва...мед» ТМ, а также активности санитарного поведения пчел в исследуемых районах установлено, что загрязнение среды обитания пчел поллютантами способствует значительному снижению резистентности к микозным болезням.

7. С использованием непараметрического метода условно-загрязненные районы нефтедобычи распределены по 6 кластерам, локализованным географически; построена карта-схема размещения пасек в условно-загрязненных районах нефтедобычи.

ТМ - тяжелые металлы

ПДК - Предельно-допустимая концентрация

ЛОС -летучие органические соединения

М.Р. - муниципальный район

РТ - Республика Татарстан

РФ - Российская Федерация

НИИ - научно-исследовательский институт

НГДУ - нефтегазодобывающее управление

ООО - общество с ограниченной ответственностью

ОАО - открытое акционерное общество

ICP-MS - масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой ПЦР - полимеразная цепная реакция

РАСХН - Российская академия сельскохозяйственных наук

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ТАЕ буфер- трис-ацетатный буфер

НПО - научно-производственное объединение

К(П)ФУ - Казанский (Приволжский) федеральный университет

КН - коэффициент накопления

КНср - среднее значение коэффициента накопления

КПВ - коэффициент перехода вещества

1. Авдеева, Т.С. Оценка экологического состояния почв, подверженных техногенным нагрузкам / Т.С. Авдеева, А.В. Плотникова, А.В. Портнова // Материалы XVI международной экологической студенческой конференции «Экология России и сопредельных территорий. Новосибирский гос. ун-т. -Новосибирск, 2011. - С. 27-28.

2. Агаева, Е.З. Этноботанические исследования по применению растений при болезнях медоносных пчел Азербайджана / Е.З. Агаева, С.Д. Ибадуллаева // Вестник Московского государственного областного университета. Серия Естественные науки. - 2013. - №1. - С. 5-9.

3. Алексеенко, Ф.М. Справочник по болезням и вредителям пчел / Ф.М. Алексеенко, В.А. Ревенок, М.А. Чепурко. — 2-е изд., перераб. и доп. — К.: Урожай, 1991. — С. 240

4. Алексемицер, М.Л. Продукты пчеловодства - биоиндикаторы / М.Л. Алексемицер, Л.И. Бондарчук, В.П. Кубайчук // Пчеловодство. - 1997. - №3. - С. 6 - 7.

5. Аликин, Ю.С. Благополучие пчел в современных условиях / Ю. С. Аликин, А.З. Афиногенов, Ю. М. Батуев // Пчеловодство. - 2009. - № 3. - С. 24

6. Альметьевская энциклопедия: Т.1: Природа Юго-Востока Республики Татарстан / О. В. Бакин, Е.Г. Барачугов, Ф.Г. Бурганов, Р.М. Сабиров, И.Г. Кадошникова. - Казань: Рухият, 2006. - 632 С.

7. Бакалова, М.В. Апиофильные нидиколоценозы медоносной пчелы Apis mellifera mellifera в заповеднике «Шульган-Таш» : дис. ... канд. биол. наук: 03.00.16 / Бакалова Марина Викторовна. - Иргизлы, 2011. - 172 С.

8. Белоногов, А.П. Причины эпизоотии аскосфероза / А.П. Белоногов, Н.К. Исакова, С.В. Новичихин // Пчеловодство. 2003. - №5. - С. 15-16.

9. Биктемирова, Р.Г. Экологическая ситуация как фактор риска формирования онкрологической заболеваемости в Республике Татарстан / Р.Г. Биктемирова, И.Г. Гатауллин, Г.Х. Михеева // Вектор науки Тольяттинского государственного университета. - 2012. - №1. - С.23-25.

10. Билай, В.И. Аспергиллы / В.И. Билай, Э.З. Коваль. - Киев : Наукова думка, 1988. - 220 с.

11. Блинов, Н.В. Изыскание новых экологически безопасных средств борьбы с аскосферозом пчел : дис. ... канд. вет. наук : 16.00.06 / Блинов Николай Валерьевич. - М., 2002. - 131 с.

12. Богомолов, К.В. Коллапс пчелиных семей. Болезни пчел / К.В. Богомолов, В.В. Яранкин. - Рязань: Рязанская областная типография, 2011. - 96 с.

13. Болотский, Е.Н. Пчелы в окружении микробов / Е.Н. Болотский, В.М. Бахир, А.Н. Кожемякин // Пчеловодство. - 2002. - №3. - С. 23 - 26.

14. Бондарева, Н.В. Использование медоносных пчел как биоиндикаторов загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами / Н.В. Бондарева // Фундаментальные исследования. - 2005. - №10. - С. 76 - 77.

15. Бубнов, Ю.П. Проблемы экологической безопасности нефтедобывающих регионов и задачи мониторинга геологической среды / Ю.П. Бубнов, М.В. Кожевникова // Георесурсы. - 2002. - №2. - С. 6 - 8.

16. Буренин, Н.Л. Пчеловодство / Н.Л. Буренин, Г.Н. Котова. - 3 изд. - М.: Колос, 1994. —279 с.

17. Валеева, Г.Р. О некоторых факторах накопления химических элементов растениями / Г.Р. Валеева, В.З. Латыпова, Р.И. Винокурова, Е.Р.Иванова // Юг России : экология, развитие. - 2012. - № 2. - С. 63-72.

18. Валнер, К. Остаточные вещества и их ограничения в пчелопродуктах / К. Валнер // Пчеловодный вестник. - 2004. - №12. - С.11.

19. Вансович, О.С. Оценка уровня нефтяного загрязнения почв при экологическом нормировании : дис. ... канд. биол. наук: 03.00.16 / Вансович Ольга Сергеевна. - М., 2009. - 239 с.

20. Варламова, С.И. Экологическая безопасность и проблемы предприятий машиностроения / С.И. Варламова, И.С. Варламова, Е.С. Климов // Успехи современного естествознания. - 2005. - № 6. - с. 79 - 80.

21. Василевский, Н.М. Эпизоотическое состояние пчеловодства по инфекционным и инвазионным болезням пчел в Республике Татарстан / Н.М. Василевский, С.М. Домолазов // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2011. - № 205. - С. 36 - 40.

22. Власенко, В.В. Загрязнение меда и пчелиной обножки 137,134Сб / В.В. Власенко, В.Ф.Розанов // Пасека. - 1996. -№8. - С. 25

23. Высоцкая, Е.А. Анализ миграции тяжелых металлов в почвах и биологической продукции придорожных агроценозов Воронежской области / Е.А. Высоцкая // Перспективы науки. - 2013. - №3(42). - С. 98 - 100.

24. Гаджирамазанова, А.Г. Наземные моллюски как биоиндикаторы загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами / А.Г. Гаджирамазанова, Ш.А. Расулов // Материалы XVI международной экологической студенческой конференции «Экология России и сопредельных территорий. Новосибирский гос. ун-т. - 2011. - С. 33.

25. Гаева, Д.В. Влияние аномальных условий среды на жизнеспособность пчел / Д.В. Гаева // Вестник Балтийского федерального университета им. И. Канта. -2008. - №1. - с. 62-65.

26. Галеев, К.А. Гигиеническая оценка риска здоровья населения в условиях антропотехногенной нагрузки в нефтяном регионе Республики Татарстан : дис. ... док. мед. наук : 14.00.07 / Галеев Камиль Аюпович. - Казань, 2003. - 283 с.

27. Гилемханов, М.И. Биологическое и хозяйственное обоснование использования цеолита и ферроцина в молочном животноводстве : дис. ... канд. биол. Наук : 03.00.32 / Гилемханов Марат Ильдарханович. - Казань, 2009. - 190 с.

28. Гнездин, А.П. Пчелы биоиндикаторы окружающей среды / А.П. Гнездин, М.М. Акчурин, С.М. Бахтиярова // Пчеловодный вестник. - 2005. - №9. - С. 5.

29. Голдовская, Л.Ф. Химия окружающей среды / Л.Ф. Голдовская. - 3-е изд. -

М.: Мир; БИНОМ. Лаборатория знаний, 2008. - 295 с.

30. Голева, Т.П. Воздействие патогенов культуры огурца на резистентность пчелиных семей в теплице / Т.П. Голева, Я.Я. Тыньо // Пчеловодство. - 2010. -№9. - С.12-14.

31. ГОСТ 17.4.3.01-83 (СТ СЭВ 3847-82) «Охрана природы. Почвы. Общие требования к отбору проб».

32. ГОСТ Р52097 - 2003. Продукты пчеловодства. Минерализация проб для определения токсичных элементов. - М.: ИПК Изд-во стандартов, 2003. - 7с.

33. Государственный доклад о состоянии природных ресурсов и об охране окружающей среды Республики Татарстан в 2012 г. - Казань. - Заман, 2012. - 502 с.

34. Гробов, О.Ф. Болезни и вредители медоносных пчел / О.Ф. Гробов, А.М. Смирнов, Е.Т. Попов. - М.: Агропромиздат, 1987. - 335 с.

35. Гробов, О.Ф. Опасные болезни и вредители пчел / О.Ф. Гробов, Л.Н. Гузева, З.Э. Родионова, Т.В. Коновалова, Ю.М. Батуев. - М.: Нива России, 1992. - 159 с.

36. Гробов, О.Ф. Биологический способ профилактики заразных болезней / О.Ф. Гробов, М.М. Сычев // Пчеловодство. - 1998. - №5. - С. 28.

37. Гробов, О.Ф. Критерий оценки меда и продуктов пчеловодства - требования ВТО / О.Ф. Клочко, Р.Т. Клочко // Пчеловодство. - 2004. - №4. - С. 5 - 7.

38. Губейдуллина, З.М. Экологические свойства почвы как фактор, влияющий на качество животноводческой продукциии/ З.М. Губейдуллина, Т.В. Починова, С.В. Дежаткина // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. - 2012. - № 4. - С.39.

39. Деркач, А.А. Токсичность и степень опасности инсектицидов группы неоникотиноидов для медоносной пчелы : дис. ... канд. с-х. наук: 06.01.11 / Деркач Андрей Александрович. - Воронеж, 2009. - 156 с.

40. Дубникова, А.А. Изыскание новых экологически безопасных средств и методов борьбы с аспергиллезом пчел : дис. ... канд. биол. наук : 16.00.06 / Дубникова Анна Александровна. - М., 2007. - 141 с.

41. Жанзаков, А.А. Проблемы экологической реабилитации территорий, загрязненных нефтепродуктами / А.А.Жанзаков // Горный информационно-аналитический билютень (научно-технический журнал). - 2006. -№8. - С. 194 -197.

42. Жуков, А.А. Биологические свойства гриба Ascosphaera apis и меры борьбы с аскосферозом пчел : дис. ... канд. биол. наук : 16.00.06 / Аслан Ахиедович Жуков. - М., 1995. - 110 с.

43. Жуков, А.А. Содержание тяжелых металлов в продуктах пчеловодства в районе Тырныаузского горно-обогатительного комбината / А.А. Жуков, А.М. Биттиров // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. -2010. - № 1. - С. 41-49.

44. Ежкова, А.М. Биогеоценоз системы «почва-растение-животное» в различных техногенных зонах Республики Татарстан и коррекция ее местными бентонитами : дис. ... док. биол. наук : 16.00.06 / Ежкова Асия Мазетдиновна. -Казань, 2006. - 397 с.

45. Емельянов, В.Е. Решение экологических проблем автотранспорта / В.Е. Емельянов // Экология и промышленность России. - 2005. - № 4. - С.36-37.

46. Еськов, Е.К. Экология медоносной пчелы / Е.К. Еськов. - Рязань: Русское слово. - 1995. - 392 с.

47. Еськов, Е.К. Аккумуляция тяжелых металлов в теле пчел / Е.К. Еськов, Г.С.Ярошевич, М.Д. Еськова, Г.А. Кострова, Г.М. Ракипова // Пчеловодство. -2008. - № 2. - C. 14 - 16.

48. Еськов, Е.К. Накопление свинца и кадмия медоносной растительностью / Е.К. Еськов, М.Д. Еськова, Н.П. Короткова, Г.С. Ярошевич // Пчеловодство. -2011. - №8. - С.6 - 8.

49. Еськов, Е.К. Неравномерность аккумуляции свинца и кадмия в теле пчел / Е.К. Еськов, М.Д. Еськова // Пчеловодство. - 2012. - №10. - С. 7 - 8.

50. Еськов, Е.К. Содержание свинца в теле взрослых и развивающихся пчел, потреблявших корм, загрязненный этим элементом / Е.К. Еськов, М.Д. Еськова, С.Е. Спасик // Аграрная Россия. - 2013. -№4. - С. 34 - 36.

51. Еськова, М.Д. Химическое загрязнение водоемов на селитебных территориях / М.Д. Еськова // Пчеловодство. - 2010. -№9. - С. 8 - 10.

52. Ефименко, А.А. Избирательность медоносных растений к аккумулированию тяжелых металлов и радионуклидов / А.А. Ефименко, Л.Я. Морева // Пчеловодство. - 2012. - №10. - С. 6 - 7.

53. Захаров, А.В. Оценка воздействия нефти и нефтепродуктов на агроценозы Центрального Черноземья и приемы их восстановления : дис. ... канд. с-х. наук : 03.00.16 / Захаров Алексей Владимирович. - Воронеж, 2009. - 136 с.

54. Зулкарнаев, А.Б. Тяжелые металлы в почвах города Сибай / А.Б. Зулкарнаев, Г.Р. Ильбулова, И.Н. Семенова, Я.Т. Суюндуков // Аграрная наука. - 2011. -№4. -С. 10 - 11.

55. Зверев, В. Основы экологии и проблемы в ее развитии / В.Зверев. - М.: по заказу Министерства природных ресурсов и экологии Российской Федерации, 2010. - 400 с.

56. Звягина, А.П. Ветеринарно-санитарная оценка качества и безопасности меда Центрального-Черноземного региона : дис. ... к.вет.наук : 06.02.05 / Звягина Анастасия Петровна. - Воронеж, 2010. - 183 с.

57. Зенухина, Н.З. Борьба с аскосферозом / Н.З. Зенухина, В.В. Гуськов // Пчеловодство. - 1997. - №3. - С. 29.

58. Злотин, А.З. Все о пчелах / А.З. Злотин. - Киев : Наук. думка, 1990. - 168 с.

59. Иванов, А.В. Гигиена окружающей среды и здоровье населения в нефтедобывающих районах : дис. ... док. мед. наук : 14.00.07 / Иванов Анатолий Васильевич. - М., 1997. - 338 с.

60. Илларионов, А.И. Токсическое действие пестицидов на медоносную пчелу и факторы его определяющие / А.И. Илларионов // Агрохимия. - 1996. -№7. - С. 94 - 118.

61. Ильин В.Б. Тяжелые металлы в окружающей среде / В.Б. Ильин, М.Д. Степанова. - М.: Изд-во МГУ, 1986. - С. 80 - 85 .

62. Ильязов, Р.Г. Агроэкологическая безопасность Республики Татарстан / Р.Г. Ильязов, Ф.Х. Шакиров, Л.П. Зарипова // Материалы международного симпозиума: Агроэкологическая безопасность в условиях техногенеза, 2006. -4.II. - С. 67 - 74.

63. Ильязов, Р.Г. Адаптация агроэкосферы к условиям техногенеза / Р.Г. Ильязов, Ф.Х. Шакиров, Б.С. Пристер [и др.]. - Казань : Фэн Академии наук РТ, 2006. - 664 с.

64. Ильязов, Р.Г. Проблемы адаптации ароэкосферы к условиям техногенеза / Р.Г. Ильязов, Ф.Х. Шакиров // Сборник научных докладов международного симпозума : Агроэкологическая безопасность в условиях техногенеза. - Казань : Меддок, 2006. - ч.1. - С. 29 - 41.

65. Ильязов, Р.Г. Адаптация агроэкосферы к условиям техногенеза / Р.Г. Ильязов, Ф.Х. Шакиров, Б.С. Пристер. - Казань : Изд-во «Фэн» Академии наук РТ, 2006 . - 664 с.

66. Ишемгулов, А.М. Научное обоснование рационального использования биологических ресурсов Южного Урала для производства и переработки продукции пчеловодства : дис. ... док. биол. наук : 03.00.32 / Ишемгулов Амир Миниахметович. - Уфа, 2005. - 414 с.

67. Кабата-Пендиас, А. Микроэлементы в почвах и растениях / А. Кабата-Пендиас. - М.: Мир, 1989. - 243 с.

68. Кадиров, Р.А. Пчелы как индикаторы загрязнения окружающей среды некоторыми поллютантами : дис. ... канд. биол. наук : 16.00.06 / Кадиров Руслан Адиль оглы. - М., 1999. - 113 с.

69. Кайгородов, Р.В. Контроль остаточных количеств пестицидов в продуктах пчеловодства / Р.В. Кайгородов, Г.И.Леготкина, Р.Г. Хисматуллин // Пчеловодство. - 2011. - №1. - С. 6 - 8.

70. Калашникова, М.В. Изучение химического состава организма пчел в пригородных пасек / М.В. Калашникова, К.А. Сидорова, С.А. Пашаян, А.А. Матвеева // Фундаментальные исследования. - 2013. - № 10-9. - С. 1983-1986.

71. Калинихин, В.В. Рапсовый мед / В.В. Калинихин // Пчеловодство. - 2012. -№6. - С. 57.

72. Капустина, О.А. Факторы патогенности грибов рода Candida и возможность их регуляции эфирными маслами / О.А. Капустина, О.Л. Карташова // Биллютень Оренбургского научного центра УРО РАН. - 2013. - № 1. - С. 1 - 10.

73. Кашина, Г.В. Экологические аспекты методов борьбы с восковой молью в пчеловодстве / Г.В. Кашина, А.Ю. Баранов, А.Л. Зозуля // Фармакологические и токсикологические аспекты применения лекарственных веществ в животноводстве. Сб. начн. тр. - 1992. - С. 147 -1 48.

74. Кашина, Г.В. Исследования антропогенно-экологического воздействия на биологические аспекты развития медоносных пчел / Г.В. Кашина, А.С. Кашин // Вестник Красноярского государственного аграрного университета (Красноярск). -2007. - № 2. - С. 203 - 205.

75. Кашина, Г.В. Эколого-токсикологические основы системы защиты медоносных пчел от болезней и вредителей : дис ... док. биол. наук: 03.00.16 / Кашина Галина Васильевна. - Красноярск, 2009. - 499 с.

76. Клочко, Р.Т. Аспергиллез пчел / Р.Т. Клочко, Л.С. Малиновская, Г.И. Игнатьева, А.Б. Сохликов // Пчеловодство. - 1996. - № 1. - С. 24 - 26.

77. Клочко, Р.Т. Болезни пчел на пасеках России / Р.Т. Клочко, С.Н. Луганский // Пчеловодство. - 2001. - №7. - С. 30 - 32.

78. Клочко, Р.Т. Лечение пчел от различных заболеваний / Р.Т. Клочко, С.Н. Луганский // Пчеловодство. - 2006. -№1. - С. 14 - 16.

79. Клочко, Р.Т. Болезни пчел: проблемы и решения / Р.Т. Клочко, С.Н. Луганский // Пчеловодство. - 2011. - №9. - С. 28 - 31.

80. Клочко, Р.Т. Большая восковая моль / Р.Т. Клочко, С.Н. Луганский, А.А. Котова // Пчеловодство. - 2012. - №2. - С. 24 - 26.

81. Ковальчук, И.И. Содержание тяжелых металлов в организме пчел и их продукции / И.И. Ковальчук // Пчеловодство. - 2012. - № 2. -. С. 6 - 7.

82. Кодесь, Л.Г. Миграция тяжелых металлов в продуктах пчеловодства / Л.Г. Кодесь, Н.В. Бычкова // Пчеловодство. - 2010. - №3. - С. 53 - 54.

83. Кокорев, Н.Д. Избранные практические советы. Пчела. Болезни и вредители / Н.Д. Кокорев, Б. Чернов. - М.: ТИД Континент - Пресс, 2008. - 352 с.

84. Кокорев, Н.Д. Лечебно-профилактические мероприятия на пасеке / Н.Д. Кокорев, Б. Чернов. - М.: Континенталь - Книга, ТИД Континент - Пресс, 2009. -64 с.

85. Комлацкий, В.И. Влияние генотипа медоносных пчел на качество меда / В.И. Комлацкий, С.А. Плотников // Политематический сетевой электронный научный журнал Курбанского государственного аграрного университета. - 2005. - № 14. - С. 210 - 233.

86. Комлацкий, В.И. Пчеловодство / В.И. Комлацкий, С.В.Логинов, С.А. Плотников. - Ростов н/Д:Феникс, 2009. - 397 с.

87. Корж, В.Н. Рациональное практическое пчеловодство (серия): Книга 1. Внешние условия и жизнедеятельность пчел / В.Н. Корж. - Харьков: ЭДЭНА, 2010. - 188 с.

88. Корж, А.П. Значение абиотических факторов для медоносной пчелы / А.П. Корж, В.Е. Кирюшин // Пчеловодство. - 2012. - №10. - С. 15 - 16.

89. Коркина, В.И. Пыльцевая обножка медоносных пчел как индикатор в апимониторинге загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами : дис. ... канд. биол. наук : 03.00.16 / Коркина Валентина Игоревна. - Новосибирск, 2009. -157 с.

90. Кривцов, Н.И. Пчеловодство России: состояние и место в мире / Н.И. Кривцов // Достижения науки и техники АПК. - 2011. - №9. - с. 15 - 16.

91. Кузьмина, Э.В. Физиологические, биохимические и этологические изменения у медоносной пчелы при ассоциативных заболеваниях: дис. ... док. биол. наук : 03.00.19 / Кузьмина Эмма Викторовна. - Тюмень, 1999. - 273 с.

92. Кузнецов, А.Ф. Ветеринарная микология / А.Ф. Кузнецов. - СПб.: Лань, -2001. - 416 с.

93. Куликов, Ю.Н. Содержание русских пчел. Серия Успешное пчеловодство / Ю.Н. Куликов. - Обнинск: Титул, 1995. - 112 с.

94. Лаврехин, Ф.А. Биология медоносной пчелы / Ф.А. Лаврехин, С.В. Панкова. - 3-е изд., перераб. и доп. - М.: Колос, 1983. - 303 с.

95. Лебедев, В.И. Экологическая чистота продуктов пчеловодства / В.И. Лебедев, Е.А.Мурашова // Пчеловодство. - 2003. - №4.- С. 42-44.

96. Лебедев, В.И. Требования к технологии содержания семей и производства продукции пчеловодства / В.И. Лебедев, Р.Г.Набиуллин // Пчеловодство. - 2009. -№2. - С. 48.

97. Лебедев, В.И. Росстат о состоянии пчеловодства / В.И. Лебедев, Л.В. Прокофьева // Пчеловодство. - 2012. - №5. - С.3-5.

98. Лысенко, М.А. Снижение тяжелых металлов в органах и тканях птицы / М.А. Лысенко // Птицеводство. - 2011. - № 2. - С. 27-28.

99. Лучко, М.А. Болезни расплода пчел / М.А. Лучко, А.Н. Сотников // Ветеринария. - 2012. - №6. - С. 9-14.

100. Мадебейкин, И.Н. Глобальное потепление и пчелы / И.Н.Мадебейкин, И.И. Мадебейкин // Пчеловодство. - 2012. - №8. - С. 10 - 12.

101. Майстренко, В.Н. Эколого-аналитический мониторинг стойких органических загрязнителей / В.Н. Майстренко, Н.А. Клюев. - М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2009. - 233 с.

102. Макаров, Ю.И. Тяжелые металлы в теле пчел и продуктах пчеловодства [Биоиндикация состояния внешней среды] / Ю.И. Макаров, А.А. Светлов, Т.Л. Чертяникова, Т.Н. Призова, М.В. Гончарова, Г.Н. Якушева // Пчеловодство. -1995. - №2. - С. 22-23.

103. Максимов, В.В. Влияние техногенных загрязнений на состояние пчел и продуктов пчеловодства : дис. ... канд. биол. наук : 06.02.04 / Максимов Виктор Васильевич. - М., 2002. - 142 с.

104. Малаю, А. Интенсификация производства меда / А. Малаю. - М.: Колос. -1979. - 176 с.

105. Масленникова, В.И. Эпизоотологический мониторинг основных заразных болезней пчел на пасеках тепличных хозяйств Московской области / В.И. Масленникова, Т.П. Голева // Российский ветеринарный журнал. - 2011. - №1. -С. 22.

106. Масленникова, В.И. Эпизоотический процесс аскосфероза пчел при разной степени поражения пчелиных семей клещом варроа в условиях теплиц / В.И. Масленникова, Т.П. Голева // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. - 2012. - №3. - С. 25 - 26.

107. Мирзоев, Д.М. Результаты экспериментального заражения пчел аскосферозом / Д.М. Мирзоев, А.А. Негматов, Ф.Д. Хасанов // Доклады Таджикской Академии сельскохозяйственных наук. - 2012. - №2 (32). -С. 54 - 57.

108. Морева, Л.Я. Болезни медоносных пчел на пасеках Краснодарского края / Л.Я. Морева, М.С. Цуркан, А.В. Абрамчук // Ветеринария Кубани. - 2008. - № 4. - С. 28 - 30.

109. Морева, Л.Я. Медоносная пчела - индикатор состояния окружающей среды / Л.Я. Морева, А.А. Ефименко // Пчеловодство. - 2011. - №9. - С. 12-13.

110. Морева, Л.Я. Заболевание пчел в жаркое лето / Л.Я. Морева, М.А. Козуб // Пчеловодство. - 2011. - №3. - С. 26 - 27.

111. Мукминов, М.Н. Изыскание новых дезинфицирующих средств при аспергиллезе пчел / М.Н. Мукминов, В.С. Угрюмова, А.В. Иванов, О.В. Угрюмов // Ветеринарный врач. - 2001. - № 3(7). - С. 59 - 65.

112. Мукминов М.Н. Индикация возбудителей аспергиллеза пчел методом ПЦР / М.Н. Мукминов, Л.И. Зайнуллин // Вестник Российской Академии Сельскохозяйственных наук. - 2004. - № 5. - С. 61 - 63.

113. Мукминов, М.Н. Препарат ВЭСП и гигиеническое поведение пчел / М.Н. Мукминов, В.Т. Какпаков // Пчеловодство. - 2005. - №2. - С. 28 - 29.

114. Мукминов, М.Н. Роль насекомых-паразитов пчелиных гнезд в патогенезе

микозов пчел / М.Н. Мукминов, А.М. Смирнов, Д.Г. Вакилова // Вестник Российской Академии Сельскохозяйственных наук. - 2007. - № 6. - С. 65 - 66.

115. Мукминов, М.Н. Интегрированная система профилактики микозов пчел и борьбы с ними / М.Н. Мукминов, А.М. Смирнов // Вестник Российской Академии Сельскохозяйственных наук. - 2008. - № 2. - С. 74 - 77.

116. Мустафин, М.Р. Все о Татарстане (экономико-географический справочник) / М.Р. Мустафин, Р.Г. Хузеев. - Казань.: Тат. кн. изд-во. - 1994. - с. 12.

117. Наджафов, Н.И. Аскосфероз пчелиных семей / Н.И. Наджафов // Ветеринарная медицина. - 2010. -№ 2010-2. - С. 58 - 60.

118. Назарова, Н.П. Корреляция негативного воздействия техногенных выбросов и эпизоотического благополучия пчелопасек / Н.П.Назарова, М.Н. Мукминов // Современные проблемы и перспективы сохранения медоносных пчел и некоторые аспекты развития и внедрения школьного пчеловодства: Материалы I Международной заочной конференция: Сборник научных трудов / Под научной редакцией д.б.н., В.Н. Саттарова. - Уфа: Изд-во БГПУ, 2013. - 88 с.

119. Назарова, Н.П. Гигиеническое поведение пчел как фактор устойчивости к микозам / Н.П. Назарова // Научно-практический журнал «Приволжский научный вестник», Ижевск, 2014. - №3(31). - С. 11 - 13.

120. Назарова, Н.П. Факторы, влияющие на интенсивность эпизоотического процесса при микозах пчел / Н.П. Назарова, М.Н. Мукминов // Материалы второй всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Современные достижения ветеринарной медицины и биологии - в сельскохозяйственное производство» - Уфа: Башкирский ГАУ, 2014. - С. 305 -309.

121. Наумкин, В.П. Биомониторинг медоносных растений и продуктов пчеловодства / В.П. Наумкин // Пчеловодство. - 2012. - №3. - С. 6 - 7.

122. Негматов, А.А. Аскосфероз пчел в Таджикистане : дис. ... канд. вет. нак : 16.00.03 / Негматов Абдукодир Абдулвахобович. - Душанбе, 2006. - 109 с.

123. Никитин, О.В. Геоэкологический мониторинг излучины реки Казанка как фактора химического загрязнения Куйбышевского водохранилища / О.В. Никитин, В.З. Латыпова, Р.Р. Шагидуллин, С.Р. Поздняков // Георесурсы. - 2011. Т.38 . - № 2. - С. 27 - 30.

124. Огурцов, А.Ф. Болезни и лечение пчел. Диагностика. Профилактика болезней. Борьба с вредителями и хищниками пчел / А.Ф. Огурцов. - М.: Аквариум-Принт, 2008. - 128 с.

125. Ожередова, Н.А. Наиболее распространенные условно-патогенные и патогенные виды кандид и их влияние на живой организм / Н.А. Ожередова, А.Н. Кононов, В.И. Заерко, Е.В. Светлакова, В.В. Михайленко // Современные проблемы науки и образования. - 2012. - № 2. - С. 1 - 5.

126. Омаров, Ш.М. Продукты пчеловодства и экосистема / Ш.М. Омаров, А.Ш. Омаров // Апитерапия сегодня - с биологической аптекой пчел в XXI век: материалы Межд.науч.-практ. конф. по апитерапии, 2000. - БГАУ. - С. 174 - 176.

127. Омаров, Ш.М. Продукты пчеловодства как индикатор качества экосистемы / Ш.М. Омаров, М.Г. Атаев, З.Ш. Магомедова // Вестник Международной академии наук (русская секция). - 2008. - №2. - С. 16 - 19.

128. Осинцева, Л.А. Пчелиная обножка - индикатор состояния окружающей среды / Л.А. Осинцева // Пчеловодство. - 2004. -№3. - С. 10 - 11.

129. Осинцева, Л.А. Микобионты пыльцевой обножки медоносных пчел / Л.А. Осинцева, Г.П. Чекрыга, О.В. Соловьева // Вестник Новосибирского государственного аграрного университета. - 2005. - №3. - С. 99 - 105.

130. Осинцева, Л.А. Содержание санитарно-значимых микроэлементов в пыльцевой обножке / Л.А. Осинцева, К.Я. Мотовилов, О.В. Соловьева // Агрохимия. - 2007. - № 2. - С. 49 - 54.

131. Осинцева, Л.А. Накопление тяжелых металлов в продуктах пчеловодства / Л.А. Осинцева, К.Я. Мотовилов, В.И. Коркина // Сельскохозяйственная биология. - 2010. - № 2. - С. 88 - 90.

132. Осинцева Л.А. Факторы, определяющие эффективность использования

биологичексих ресурсов пчелиной семьи при получении пыльцевой обножки / Л.А. Осинцева, В.И. Полянская // Вестник Новосибирского государственного аграрного университета. - 2011. - №18. - Т. 2. - С. 72 - 75.

133. Павлович, С.А. Микробиология с вирусологией и иммунологией / С.А. Павлович. - 3-е изд. испр. - Минск : Вышейшая школа. - 2013. - 799 с.

134. Пашаян, С.А. Свойства миграции тяжелых металлов / С.А. Пашаян // Пчеловодство. - 2006. - №9. - С. 12 - 13.

135. Пашаян, С.А. Поллютанты в сотах / С.А. Пашаян // Пчеловодство. - 2009. -№10. - С. 10 - 11.

136. Пашаян, С.А. Воздействие экологических факторов на степень распространения заразных болезней пчел / С.А. Пашаян, К.А. Сидорова // Аграрный вестник Урала. - 2010. - № 12(79). - С. 30 - 31.

137. Пашаян, С.А. Эколого-биологические основы, определяющие резистентность пчел к заболеваниям : дис. ... док. биол. наук : 03.02.14 / Пашаян Сусанна Арестовна. - Тюмень, 2012. - 307 с.

138. Петрович, С.В. Микозы животных / С. В. Петрович. - М.: Росагропромиздат, 1989. - 135 с.

139. Переведенцев, Ю.П. Климат и окружающая среда Приволжского федерального округа / Ю.П. Переведенцев, В.В. Соколов, Э.П. Наумов. - Казань: Казан. ун-т, 2013. - 274 с.

140. Перельсон, И.Е. Аминокислотный состав пыльцы некоторых медоносов и пыльценосов / И.Е. Перельсон // Бюллетень Главного ботанического сада АН СССР. - 1962. - Вып.46. - С. 69 - 74.

141. Петросян, В.С. «Химические бумеранги» - глобальная экологическая проблема / В.С. Петросян // Экология и промышленность России. - 2005. - № 6. -С. 19 - 23.

142. Пидопличко, Н.М. Грибы - паразиты культуральных растений, определитель. т. 2 / Н.М. Пидопличко. - Киев: Наукова думка, 1977. - 229 с.

143. Пичушкин, И.С. Экологическая чистота продуктов пчеловодства Камчатки / И.С. Пичушкин, С.И. Пичушкин, Е.И. Мордвинова // Пчеловодство. - 2005. - № 6. - С. 16 - 17.

144. Полтев, В.И. Болезни и вредители пчел с основами микробиологии / В.И. Полтев, Е.В. Нешатаева. - М., 1977. - 192 с.

145. Полтев, В.И. Болезни и вредители пчел / В.И. Полтев, Е.В. Нешатаев. - М.: Колос, 1984. - 175с.

146. Попков, Н.Ф. Характерные признаки и время проявления болезней расплода пчел / Н.Ф. Попков // Пчеловодство. - 2001. - №1. С. 26 - 27.

147. Попов, А.А. Проблемы экологии и патологии медоносных пчел в Республике Татарстан / А.А. Попов, М.Н. Мукминов, И.В.Курбанов, Т.М. Салимов // Филология и культура. - 2005. - № 4. - С. 182 - 187.

148. Русакова, Т.М. Исследование токсических элементов в продуктах пчеловодства / Т.М. Русакова, Л.А. Бурмистрова, Л.В. Репникова [и др.] // Пчеловодство. - 2006. - №9. - С. 10 - 13.

149. Русакова, Т.М. Новый метод определения антибиотиков в меде / Т.М. Русакова, Е.Ю. Балашова, Е.В. Александрова [и др.] // Пчеловодство. - 2012. -№7. - С. 49 - 51.

150. Сазанков, Д.И. Поведение подвижных форм кадмия и меди в гумусном горизонте почв реперных участков Таштыпского района Республики Хакасия / Д.И. Сазанков, О.Л. Захарова // Материалы XVI международной экологической студенческой конференции «Экология России и сопредельных территорий». Новосибирский гос. ун-т. Новосибирск, 2011. - С. 30 - 31.

151. СанПин 2.3.2.1078-01 «Гигиенические требования к безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов».

152. СанПин 42-123-4089-86 «Предельно допустимые концентрации тяжелых металлов и мышьяка в продовольственном сырье и пищевых продуктах».

153. Саттаров, В.Н. Морфология медоносных пчел Apis mellifera L. и стратегия сохранения их в Республике Башкортостан : дис.... док. биол. наук : 06.02.01/ Саттаров Венер Нуруллович. - Уфа, 2011. - С. 395.

154. Саттаров, В.Н. Влияние пестицидов на медоносных пчел / В.Н. Саттаров, И.М. Борисов, Р.А. Шарипов, Л.Ф. Биглова // Пчеловодство. - 2011. - №4. - С. 7 -9.

155. Саттаров, В.Н. Влияние стационарных источников экотоксикантов на среду обитания медоносных пчел в Республике Башкортостан / В.Н. Саттаров, В.Р. Туктаров, И.М. Борисов [и др.] // Пчеловодство. - 2011. - №2. - С.8 - 9.

156. Серебряков, Е.В. Кандидамикоз животных / Е.В. Серебряков // Ветеринария с.-х. животных. - 2006. -№5. - С. 25 - 29.

157. Скребнева, Л.А. Особенности аккумуляции тяжелых металлов в медоносных пчелах различных временных генераций / Л.А. Скребнева, Ф.С. Билалов, М.Н. Мукминов, В.З. Латыпова, И.С. Григорьева // Ученые записки казанского университета, 2012. - Т. 154, кн.1. - С. 133-145.

158. Смирнов, А.М. Ветеринарно-санитарные мероприятия на пасеках / А.М. Смирнов, Р.Т. Клочко, С.Н. Луганский // Ветеринария. - 2000. - №8. - С. 3 - 5.

159. Смирнов, А.М. Требования Европейской комиссии к продуктам пчеловодства / А.М. Смирнов, Р.Т. Клочко, О.Ф. Гробов // Ветеринария. - 2005. -№ 3. - С. 3 - 7.

160. Смирнов, А.М. Обеспечение ветеринарно-санитарного благополучия животноводства на территориях загрязненных тяжелыми металлами и радионуклидами / А.М. Смирнов // Сборник научных докладов международного симпозума: Агроэкологическая безопасность в условиях техногенеза. -Казань: Меддок, 2006. - ч.1. - С. 56 - 62.

161. Сокольский, С.С. Качество продукции пчел и окружающая среда / С.С. Сокольский, Е.М. Любимов, Л.А. Бурмистров, Т.М. Русакова, В.М. Мартынова, М.Н. Харитонова // Пчеловодство. - 2012. - №9. - с. 48 - 50.

162. Соловьев, В.В. Особенности получения экологически безопасной продукции

пчеловодства в условиях Новгородской области : дис. ... канд. биол. наук : 03.00.16 / Соловьев Владимир Викторович. - Москва, 2003.-136 с.

163. Соловьева, Л.Ф. Источники возбудителя аскосфероза / Л.Ф. Соловьева // Пчеловодство. - 2001. - №8. - С. 21- 22.

164. Соловьева, Л.Ф. Защитить пчел от отравления пестицидами / Л.Ф. Соловьева // Защита и карантин растений. - М. - 2012. - С. 53-54.

165. Сотников, А.Н. Дефицит белка в организме пчел - основная причина их гибели / А.Н. Сотников // Пчеловодство. - 2008. - № 9. - с. 42 - 44.

166. Спесивцева, Н.А. Микозы и микотоксикозы / Н.А. Спесивцева. - М.: Колос. 1964. - с. 10.

167. Степанова, Н.Ю. Механизмы детоксикации тяжелых металлов в компонентах водной экосистемы Куйбышевского водохранилища / Н.Ю. Степанова, В.З. Латыпова // Ученые записки Казанского университета. Серия: Естественные науки. - 2005. - Т.147. - №3. - С. 18-26.

168. Суворин, А.В. Пчелы и пасека: опыт, советы, рекомендации / А.В. Суворин. - Изд. 9-е, стер. - Ростов н/Д : Феникс, 2013. - 286 с.

169. Сунгаттулин Р.Х. Моделирование природных и техногенных систем промышленно-урбанизированных регионов (на примере Республики Татарстан) : дис. ... док. геол.-минерал.наук : 25.00.36 / Сунгатуллин Рафаэль Харисович. -Екатринбург, 2010. - 374 с.

170. Сычев, М.М. Грибковые болезни пчел : профилактика и меры борьбы / М.М.Сычев // Пчеловодство. - 1995. - № 3. - С. 19-22.

171. Тарасов, Е.Я. Эффективное пчеловодство. Все о домашнем пчеловодстве / Е.Я. Тарасов. - Ростов н/Д: Владис, М.: РИПОЛ Классик, 2007. - 640 с.

172. Туктаров, В.Р. Экологические проблемы пчеловодства в промышленных районах Башкортостана / В.Р. Туктаров // Сборник научных трудов. Всероссийское НИИ вет.сан.гигиены и экологии. - 1995-99. - С. 117 - 120.

173. Туктаров, В.Р. Влияние антропогенных поллютантов (свинца, кадмия, железа, цинка, меди, ртути) на медоносных пчел в экологически кризисных

районах Башкортостана и разработка средств и способов их лечения : дис. ... док. биол. наук: 16.00.06 / Туктаров Варис Рафкатович. - М., 2001. - 289 с.

174. Туктаров, В.Р. Пчеловодство и проблемы охраны окружающей среды / В.Р. Туктаров, Г.С. Мишуковская // Апитерапия сегодня : Материалы международной научно-практической конференции по апитерапии. - Рязань, 2002. - С. 198 - 200.

175. Туктарова, Ю.В. Автомобильное загрязнение и качество продуктов пчел / Ю.В. Туктарова, Р.Г. Фархутдинов // Пчеловодство. - 2010. - №4. - С. 10 - 11.

176. Туктарова Ю.В. Экологическая оценка миграций веществ в трофической цепи «почв - растение - пчела - мед» / Ю.В. Туктарова, Р.Г. Фархутдинов // Вестник БГАУ. - 2012. - №4. - С. 58 - 59.

177. Туктарова, Ю.В. Оценка генетической дифференциации пчел, находящихся в различных условиях автотранспортного загрязнения / Ю.В. Туктарова, Р.Г. Фархутдинов // Вестник Башкирского государственного аграрного университета. - 2013. - № 2 (26). - с. 65 - 68.

178. Тухбатуллина, А.Б. Факторы и условия социально-экономического развития малых и средних городов (на примере города Альметьевск) / А.Б. Тухбатуллина // Вестник ТИСБИ. - 2013. - №4(56). - С. 159 - 170.

179. Тыньо, Я.Я. Влияние санитарно-гигиенического режима теплиц на состояние пчелиных семей и способы стабилизации их резистентности в экстремальных условиях : дис. ... канд. биол. наук : 06.02.05 / Тыньо Ярослав Ярославович. - М., 2010. - 133 с.

180. Федоров, В.Д. Экология и продукты пчеловодства / В.Д. Федоров // Пчеловодство. - 1995. - № 5. - С. 8 - 11.

181. Фархутдинов, Р.Г. Применение фитопрепарата для повышения продуктивности пчелосемей при аскосферозе / Р.Г. Фархутдинов, В.М. Шафикова // Фундаментальные основы научно-технической модернизации АПК (ФОНТиТМ-АПК-2013). Материалы Всероссийской научно-практической конференции. - 2013. - С. 472 - 476.

182. Филиппов, П.И. Природы дар бесценный : Мёд и другие продукты

пчеловодства в питании и медицине / П.И. Филиппов, А.Г. Бутов. - Ставрополь : Кн. изд-во, 1991. - 158 с.

183. Харитонов, Н.Н. Влияние различных факторов на устойчивость пчел к заболеваниям / Н.Н. Харитонов // Пчеловодство. - 2012. - №4. - с. 24 - 27.

184. Хмельницкая, И.И. Грибы рода Aspergillus Mich: Распространение, синтез индольных алкалоидов : дисс. ... канд. биол. наук : 03.00.24 / Хмельницкая Ирина Игоревна. - М., 2003. - 179 с.

185. Хомич, Ю.С. Оценка влияние температурного режима инкубации на адгезивную способность изолятов грибов рода Candida выделенных из различных экологических ниш / Ю.С. Хомич, А.Л. Бурмистрова, Н.Е. Самышкина, А.В. Седова // Успехи современного естествознания. - 2010. - № 9. - С. 102-104.

186. Чеботарева, Е.Г. Влияние солей тяжелых металлов на активность биохимических показателей сыворотки крови белых беспородных мышей / Е.Г. Чеботарева, В.Б. Бородуллин, И.А. Горошинская // Известия высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион. Серия : Естественные науки. - 2006. - № 6. -С. 44-46.

187. Чекрыга, Г.П. Факторы формирования микобиоты пыльцевой обножки медоносных пчел : дис. ... канд. биол. наук : 03.00.16 / Чекрыга Галина Петровна. - Красноярск, 2006. - 201 с.

188. Черевко, Ю.А. Пчеловодство / Ю.А. Черевко, Л.Д. Черевко, Л.И. Бойценюк, А.С. Кочетов. - М.: Колосс, 2006. - 296 с.

189. Черноголовый, В.В. Современные экологические проблемы и ноосферное сознание / В.В.Черноголовый // Вестник Башкирского университета. - 2008. -Т.13. - №1. - С. 138 - 141.

190. Чернышов, С.Е. Болезни пчел Алтайского края / С.Е. Чернышов // Вестник Алтайского государственного аграрного университета (Барнаул). - 2003. - № 1. -Т.9. - С. 166-169.

191. Шарифзянов, Р.Б. Экологическая оценка загрязнения древесных насаждений тяжелыми металлами / Р.Б. Шарифзянов, О.А. Давыдова, Е.С.

Климов // Успехи современного естествознания. - 2009. - №3. - С. 53.

192. Шашурина, Е.А. Экологический мониторинг территорий и миграция цезия -137 в цепи почва-продукты пчеловодства / Е.А.Шашурина, Ю.В. Доронкин, Е.И. Лупова // Ученые записки Петрозаводского государственного университета. Серия : Естественные и технические науки. - 2011. - № 2. - С. 21 - 23.

193. Шевченко, Е.В. Выделение возбудителя аскосфероза пчел и изучение его культурально-морфологических свойств / Е.В. Шевченко // Современные проблемы науки и образования. - Издательский Дом «Академия Естествознания» (Пенза). - 2012. - № 4. - С. 375.

194. Шишканов, Д.В. Влияние акарицидов, применяемых при варроатозе пчел, на биологию и этологию пчелиных маток: дис. ... канд. биол. наук: 16.00.06 / Шишканов Дмитрий Васильевич. - М., 2008. - 151 с.

195. Шишко, А.А. Изыскание средств санации и дезинфекции при аскосферозе пчел : дис. ... канд. биол. наук : 03.00.07, 16.00.04 / Шишко Алексей Альфредович. - Казань, 2006. - 145 с.

196. Шламмер, Г. Натуральное пчеловодство, натуральный мед : критический подход к пчеловодству и меду / Г. Шламмер; пер. с нем. М. Беляева. - М.: АСТ: Астрель, 2005. - 127 с.

197. Экспертиза продуктов пчеловодства. Качество и безопасность [Текст]: Учеб.-справ. пособие / Е.Б. Ивашевская, В.И. Лебедев, О.А. Рязанова, В.М. Позняковский; под общ.ред. В.М. Позняковского. - Новосибирск: Сиб.унив.изд-во, 2007. - 208 с.

198. Ягин, В.В. Влияние тяжелых металлов / В.В. Ягин, О.С. Гладышева, Д.А. Хомутов // Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского (Нижний Новгород). - 2013. - №6 (1). - С. 129 - 132.

199. Bogdanov, S. Minerals in honey : environmental, geographical and botanical aspects / S. Bogdanov, M. Haldimann , W. Luginbuhl, P. Gallmann // J.Apicult.Res. Bee World. - 2007.-V.46, № 4. - P. 269-275.

200. Bonmatin, J.M. Quantification of Imidacloprid Uptake in Maize Crops/ J.M. Bonmatin, P.A. Marchand, R. Charvet, I. Moineau, E.R. Bengsch, M.E. Colin // Agricultural and Food Chemistry. - 2005. - V.53. - №13. - P. 5336 - 5341.

201. Borchert, A. Krankheiten der Honigbiene / A. Borchert: Richard Schoets. -1950. -P. 243.

202. Bornus, L. Poisoning by lead in industrial areas / L. Bornus // 25 Int. Congress Grenoble. Apimondia. Becarest. - 1975. - P. 417.

203. Buchmann, S.L. The ecology of oil flowers and their bees / S.L. Buchmann // California. - 1987. - V. 18 - P. 343 - 369.

204. Cowen, L.E. Population genomics of drug resistance in Candida albicans / L.E. Cowen, A. Nantel, M.S.Whiteway, D.Y.Thomas, D. C. Tessier, L.M.Kohn, J.B. Anderson // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2002. - V.99. - №14.- P. 9284 - 9289.

205. Eriksson, O. Outline of the Ascomycetes. Sustema Ascomycetum / O. Eriksson, D. Hawksworth. - 1984. - 4:1-79 p.

206. Fassatiova, F. Plisne a vlaknite houby u technike microbiologil / F.Fassatiova. -Praga: SNTL, 1979. -236 p.

207. Gilliam, M. Hygienic behavior of honey bees in relation to chalkbrood disease / M.Gilliam, S.Taber, G.V.Richardson // Apidologie. 1983. - № 14. - P. 29-39.

208. Glinski, Z. Cellular defence reactions in the honeybee in enviromment non-polluted withheavy metals / Z. Glinski, K.Gzzedozryki // Ann UMCS. DD. - 1995. № 50. - P.131 - 137.

209. Hale, P.J., Menapase, D.M. Effect of time and temperature on the viability of Ascosphaera apis / P.J. Hale, D.M. Menapase // J. Invertebrate Pathol. 1980. - V. 36. -№ 3. - P. 429-430.

210. Joney, K.C. Honey as indicator of heavy metal contamination / K.C. Joney // Water Air Soil Pollut. - 1987. - V.33. - № 1/2. - P. 143 - 149.

211. Leita, L. Investigation of the use of honey bessand honey bee products to assess heafy metals contaminations / L. Leita, G.Muhlbachova, S.Cesco, R. Barbattini , C. Mondini // Environ Monit and Assess. - 1996. - V.43. - №1. - P.1 - 9.

212. Madras-Majewska, B. Lead content of bees, brood and bee products from different regions of Poland / B. Madras-Majewska, Z. Jasinski // Apic. Sc. - 2003. -V. 47. - № 2. - P. 47 - 55.

213. Minh, V. The chemical composition of honey produced by Apis dorsata / V. Minh, B.Mendoza // J. apic Res. - 1971. - Vol. 10. - № 2. - P. 91 - 97.

214. Pandolfini T. Nikel toxicity and peroxdative activity in seedlings of Triticum / T. Pandolfini, R. Gabrielli, C. Comparini // Pand Cell and Environ. - 1992. - V. 15. - P. 719 - 725.

215. Pohorecka, K. Zaniecrycrczenia pytku w naturalnum srodowisku / K. Pohorecka// Pazczelarstwo. - 1994. - № 45. - №8. - P.5 - 6.

216. Raes, H. Distribution, accumulation and depuration of administered lead in adult honeybees / H. Raes, R. Cornelis, U. Rzeznik // Sci. Total Environ. - 1992. - V.113. -№ 3. - P. 269 - 279.

217. Raper, K.B., Fennell, D.I. The genus Aspergillus / K.B. Raper, D.I. Fennell. -Baltimore: Williams, Wilkins Co., USA. - 1965. - 686 p.

218. Roussy, L. Nouvelle contribution a Tetude du Pericystis apis Agent pathogene d'une mycose mortelle pour les larvas d'Apis mellifera (L) / L. Roussy // La Gazette Apicola 1962. - V.63. - №662. - P. 101 - 105.

219. Samsinakova, A. Harahsimo Effects of some antimycotics and desinfectans on the Ascosphaera apis Maassen fungus in vitro / A. Samsinakova, R. Kalalova // Zeitschrift fur Angewandte Entomologye. - 1977. - V 84. - P. 225 - 232.

220. Terzic, L. Honey bee poisoning caused by arsenic from copper smelter smoke / L.Terzic, V. Terzic // Acta Vet. - 1984. - V. 34. - № 1. - P. 54 - 62.

221. Turi, K. Determination of biochemical characteristics of Ascophaera apis / K.Turi, Cs. Doboliy, E. Szabai, Zs. Szel // Euroconference on Molekular Mechanismus of

Disease Tolerance in honeybees. Shedyle and Summaries. Kralupy near Prague. - 2000. - Р. 17 - 19.

222. Zhelyazkova, I. Changes in the quantity of metals in the heamolimph of worker bees fed micro-element containing sugar solution / I. Zhelyazkova, K. Gurgulova // Uludag Bee J.-2004.-V.4. - № 2. - P. 77 - 80.

223. Аналитическая информация Министерства экологии и природных ресурсов по Республике Татарстан по Азнакаевскому муниципальному району [Электронный ресурс] / Министерство экологии и природных ресурсов Республики Татарстан.URL:http://eco.tatarstan.ru/rus/file/pub/pub_67861.pdf (дата обращения: 15.12.2014).

224. Аналитическая информация Министерства экологии и природных ресурсов по Республике Татарстан по Альметьевскому муниципальному району [Электронный ресурс] / Министерство экологии и природных ресурсов Республики Татарстан. URL: http://eco.tatarstan.ru/rus/file/pub/pub_107659.pdf (дата обращения: 15.12.2014).

225. Аналитическая информация Министерства экологии и природных ресурсов по Республике Татарстан по Заинскому муниципальному району [Электронный ресурс] / Министерство экологии и природных ресурсов Республики Татарстан. URL:http://eco.tatarstan.ru/rus/file/pub/pub_107686.pdf (дата обращения:15.12.2014).

226. Аналитическая информация Министерства экологии и природных ресурсов по Республике Татарстан по Лениногорскому муниципальному району [Электронный ресурс] / Министерство экологии и природных ресурсов Республики Татарстан. URL: http://eco.tatarstan.ru/rus/file/pub/pub_262252.rar (дата обращения: 15.12.2014).

227. Аналитическая информация Министерства экологии и природных ресурсов по Республике Татарстан по Новошешминскому муниципальному району [Электронный ресурс] / Министерство экологии и природных ресурсов Республики Татарстан. URL: http://eco.tatarstan.ru/rus/file/pub/pub_67865.pdf (дата обращения: 15.12.2014).

228. Аналитическая информация Министерства экологии и природных ресурсов по Республике Татарстан по Черемшанскому муниципальному району [Электронный ресурс] / Министерство экологии и природных ресурсов Республики Татарстан. URL:http://eco.tatarstan.ru/rus/file/pub/pub_107672.pdf (дата обращения: 15.12.2014).

229. Назарова, Н.П. Аккумуляция токсикантов в организме пчел и меде в условиях экологически кризисных районов Республики Татарстан [Электронный ресурс] / Н.П. Назарова // «Живые и биокосные системы». - 2014. - №8; URL: http:// www.jbks.ru/archive/issue-8/article-1 (дата обращения: 27.12.2014).

ПРИЛОЖБНИЯ

Министерство образования и науки Российской Федерации ФГАОУ ВПО «Казанский (Приволжский) федеральный университет» Институт экологии и природопользования

УТВЕРЖДАЮ Директор

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ но определению массовой доли тяжелых металлов (СМ, РЬ, Ъп, Ре, N1, Си) в цветочной пыльце, меде и организме пчел методом масс-епектрометрии с индуктивно связанной плазмой

Казань 2014

Методические рекомендации разработаны в ФГАОУ ВПО «Казанский (Приволжский) федеральный университет» (соискатель Назарова Н.П., аспирант Ндайишимийе Э.В., доцент Никитин О.В., инженер Ежкова М.Н., доцент Шуралев Э.А.).

Рецензент:

старший научный сотрудник Федерального центра токсикологической, радиационной и биологической безопасности («ФЦТРБ-ВНИВИ», г. Казань), к.б.н. Валиуллин Л.Р.

Методические рекомендации рассмотрены и одобрены методической комиссией Института экологии и природопользования

Протокол № 11 от 15. 12. 2014 г.

учебно-

Актуальность определения контаминантов в различных компонентах экосистемы увеличивается в связи с ухудшением экологической ситуации во многих городах на фоне функционирования промышленных предприятий, увеличения доли автотранспорта, инфраструктуры ресурсодобывающих предприятий и т.д. При чрезмерном накоплении в почвенном субстрате тяжелые металлы способны переходить в растения, цветочную пыльцу, в избытке аккумулироваться в организме пчел, а затем попасть в мед [3].

На сегодняшний день разработано значительное количество методов идентификации загрязняющих веществ в почве, растениях, продуктах пчеловодства и пр., характеризующихся высокой селективностью, низким пределом обнаружения, высокой надежностью результатов. Однако существуют и ряд ограничений, связанных со сложностью приготовления стандартных растворов для калибровки, продолжительными процессами подготовки и анализа проб, сложностью детектирования низких содержаний элементов в анализируемых пробах, искажением результатов идентификации содержащихся загрязнителей в результате протекания нежелательных химических реакций.

Все сказанное обуславливает необходимость разработки новых подходов качественного и количественного анализа содержания тяжелых металлов в таких матрицах, как цветочная пыльца, мед и пчелы. В последнее время к традиционным методам идентификации тяжелых металлов, основанных на детектировании излучения или поглощения энергии атомами, добавились новые, более простые методы, основанные на детектировании отдельных ионов.

Достоинством ЮР-МБ метода (масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой) является экспрессивность измерений, простота градуирования, многоэлементного определения компонента [1, 2].

1. Общие положения

1.1. Метод 1СР-МБ относится к одному из самых чувствительных и экспрессных методов анализа элементов и изотопов, обладает ультранизким пределом обнаружения элементов (0,1-0,001 мкг/л).

1.2. Метод базируется на использовании высокотемпературной плазмы, которая вызывает разложение сложных соединений на отдельные элементы пробы. В качестве исследуемого материала могут использоваться различные объекты окружающей среды. В связи, с чем применяется в медицине, пищевой промышленности, металлургии для анализа драгоценных металлов, урановых руд и др.

1.3. Метод 1СР-МБ характеризуется высокой скоростью анализа, так как время анализа каждого образца пробы составляет в среднем 2-3 минуты. Метод позволяет обнаружить в пробе одновременно около сотни химических элементов. В сутки метод позволяет проанализировать около 300 образцов. Для проведения 1СР-МБ анализа достаточно 3-5 мл анализируемой пробы [2].

2. Сущность метода 1СР-М8

2.1. 1СР-МБ - это высокочувствительная технология с использованием индуктивно-связанной плазмы, применяемая для определения присутствующих в низких концентрациях элементов в анализируемых образцах проб.

2.2. Анализируемый раствор пробы посредством перистальтического насоса подается в распылитель, в котором потоком аргона превращается в аэрозоль. Аэрозоль через центральный канал плазменной горелки попадает в плазму, где под воздействием высокой температуры (7000-8000°К) соединения, содержащиеся в пробе диссоциируют на атомы, которые впоследствии ионизируются на положительно заряженные ионы. Последние проходят через систему ионной оптики в детектор (масс-спектрометр), где происходит фильтрация ионов по массе и детектирование интенсивности ионного потока. Ионы сортируются в соответствии с их коэффициентом «масса/заряд».

2.3. Индуктивно связанная плазма формируется в горелке, так называемом факеле 1СР, представляющим собой концентрические кварцевые трубки. Между двумя кварцевыми трубками проходят потоки аргона, которые за счет подаваемой электрической искры взаимодействуют с радиочастотным полем катушки. Анализируемые образцы проходят через плазму в виде капель жидкости (аэрозоля), испаряются и распадаются на атомы. По мере прохождения атомов плазма обеспечивает их дополнительной энергией, и они испускают электрон, превращаясь в однозарядный ион, который выходит из плазмы и поступает в область интерфейса.

2.4. Интерфейс - система, обеспечивающая доступ ионов генерируемых плазмой и с системой ионных линз. Пробоотборный конус (самплер) находящийся в непосредственном контакте с плазмой расположен за зоной плазмы. Пройдя через самплер, газо-ионный поток поступает в промежуточную камеру, где он расширяется, охлаждается и рассеивается, а его центральная часть поступает в конус скиммера, расположенного в нескольких миллиметрах за самплером. Через отверстие в конусе скиммера проходит только ионный поток. Область между конусами откачивается механическим насосом до давления в несколько Торр. За скиммером расположена вакуумная система масс-спектрометра.

2.5. Вакуумная система. Создание высокого вакуума необходимо для обеспечения беспрепятственного преодоления ионами расстояния между интерфейсом и масс-спектрометром. Вакуум обеспечивается за счет турбомолекулярного и механического насосов. Механический насос, напрямую связанный с промежуточной камерой интерфейса, удаляет избыток газо-ионного потока. Турбомолекулярный насос необходим для снижения давления в камере.

2.6. Квадруполь. Сепарация ионов. Квадрупольный масс-спектрометр состоит из 4 стержней, работает таким образом, что только одна масса может пройти через него в детектор. В квадруполе устанавливается соответствующая комбинация электрических напряжений, радиочастот, которая позволяет ионам с

избранным соотношением массы и заряда проходить через стержни квадруполя. Квадруполь обладает высокой скоростью сканирования и позволяет в каждый отрезок времени проходить через стержни только ионам с одним определенным коэффициентом «масса/заряд»

2.7. Детектор. Масс-фильтрация. Ионы, выходящие из масс-спектрометра, сталкиваются активной поверхностью детектора и генерируют измеримый электронный сигнал. Ион, попадая на активную поверхность детектора (пластины - диноды), вызывает эмиссию электронов. По мере движения от динода к диноду количество электронов увеличивается. Коллектор детектора, поглощая электроны, генерирует импульсы. Система, подсчитывая импульсы, считает ионы [4].

3. Приборы и реактивы

3.1. Приборы:

- Весы аналитические электронные с пределом допускаемой погрешности ±0,0005 г, отвечающие требованиям весы лабораторные общего назначения ГОСТ 24104.

- Дозаторы жидкости ручные или электронные автоматические с одноразовыми наконечниками емкостью 0,5 - 10 мкл, 50 - 200 мкл и 200 - 1000 мкл, обеспечивающие суммарную погрешность дозирования на уровне +/- 1%.

- Цилиндры фторопластовые (PTFE, Viton™, Teflon™, PFA), емкостью 20 мл, ГОСТ 1770-74.

- Микроволновая печь минерализатор MARS 5, фирмы GEM, США с комплектом реакционных ячеек XP-1500 Plus&OMNI.

- Колба КН-2-250-34 ТХС по ГОСТ 25336.

- Фильтры бумажные обеззоленные, синяя лента по ТУ 6-09-1678.

- Колбы конические вместимостью 100 см3 по ГОСТ 25336.

- Стакан химический вместимостью 150 см3 по ГОСТ 25336.

- Цилиндр мерный вместимостью 100 см по ГОСТ 1770.

- Цилиндр мерный вместимостью 50 см по ГОСТ 1770.

- Колбы мерные 2-50-2, 2-100-2, 2-200-2, 2-500-2, 2-1000-2 по ГОСТ 1770.

- Пипетки на 1,0; 5,0; 10,0; 25,0 см3 по ГОСТ 29227.

- Стеклянные воронки по ГОСТ 25336.

3.2. Реактивы:

- Кислота азотная ос.ч. -33-5 по ТУ-6-03-366.

- Перекись водорода ос.ч.- 8-4 по ТУ-6-02-570.

- Вода бидистиллированная ос.ч. - 27-5 по ТУ-6-09-2502.

- Аргон газообразный высокой чистоты по ГОСТ 10157-79.

4. Порядок подготовки к измерениям

При подготовке к выполнению измерений выполняют следующие работы: подготовку посуды, приготовление растворов, подготовку проб и прибора для анализа к работе.

4.1. Используемую для пробоподготовки посуду тщательно промывают раствором азотной кислоты с молярной концентрацией 1 М и трижды ополаскивают бидистиллированной водой.

4.2. Прибор для анализа подготавливают к работе в соответствии с руководством по эксплуатации прибора.

4.3. Отбор и подготовка проб

- Отбор проб цветочной пыльцы осуществляют с помощью навесного пыльцеуловителя. При сборе пыльцы учитывают критерии ГОСТ 28887-90 «Пыльца цветочная (обножка)» и СанПиН 2.3.2.1078-01. Лотки с собранной пыльцой помещают в сушильный шкаф, где пыльца высушивается при температуре 38-41°С и влажности не более 12,5%.

- Отбор проб сотового меда осуществляют с каждой пятой рамки. В верхней части рамки вырезают кусок сота с медом размером 5*5 см, мед отделяют фильтрованием через марлю.

- Отбор проб пчел. Живых пчел стряхивают с рамок, вынутых из ульев, в большие полиэтиленовые пакеты. До анализа пакеты с пчелами хранят в морозильной камере при температуре -18°С.

4.3.1. Подготовка проб

Разложение проб проводят с использованием микроволновой печи минерализатора MARS 5 на валовое содержание химических элементов в пробе.

4.4. Метод микроволнового разложения обеспечивает следующие преимущества:

- высокую производительность разложения;

- более полное окисление органической матрицы практически любых биосубстратов;

- существенное уменьшение потерь летучих элементов при разложении.