Усовершенствование системы лабораторной диагностики и профилактики гриппа птиц тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Виткова, Ольга Николаевна

• Виткова, Ольга Николаевна
• кандидат ветеринарных наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Виткова, Ольга Николаевна

Содержание.

Список сокращений.

Введение.

1. Обзор литературы.

2. Материалы и методы.

2.1. Материалы.

2.2. Приборное обеспечение и расходные материалы.

2.3. Методы исследований.

3. Результаты собственных исследований.

3.1. Анализ распространения вируса гриппа птиц типа А подтипа

H5N1b мире и на территории Российской Федерации.

3.2. Изучение клинических признаков и патологоанатомических изменении при гриппе у различных видов птиц. /и

3.3. Сравнительное изучение вирусологических, молекулярно-биологических (ПЦР), иммунохроматографических методов при детек- 32 ции высокопатогенного гриппа птиц в патматериале.

3.4. Изучение биологических и генетических свойств выделенных изолятов. ^

3.5. Сравнительное изучение серологических методов диагностики ^ гриппа птиц ИФА и

РТГА.

3.6. Изучение напряженности поствакцинального иммунитета к вирусу гриппа H5N1 у различных видов птиц.

3.7. Влияние иммуностимулирующих препаратов на эффективность ^ вакцинации против гриппа.

Обсуждение результатов.

Выводы.

Практические предложения.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Усовершенствование системы лабораторной диагностики и профилактики гриппа птиц»

Актуальность темы. Промышленное птицеводство - наиболее индустриально развитое направление сельского хозяйства, как в России, так и зарубежом. В нашей стране птица в большом количестве разводится в индивидуальных подворьях граждан, особенно в южных регионах Российской Федерации. Для интенсивного ведения птицеводства с высокой концентрацией птицепоголовья всегда были актуальными проблемы связанные с инфекционными заболеваниями.

В настоящее время во всем мире наибольшее беспокойство вызывает высоко патогенный грипп птиц (ВПГП) - болезнь, известная также под названием классическая чума птиц, вызываемая вирусами, относящимися к семейству Ог-tomyxovirdae, типу А. Наиболее восприимчивыми к вирусу гриппа являются куры и индейки. На протяжении последних десяти лет ситуация по гриппу птиц в мире значительно осложнилась. Значительные экономические потери имели место в промышленном птицеводстве различных стран. Только в 2005 г. потери в сельскохозяйственном секторе стран Азии оценивались приблизительно в 10 млрд. долларов. Ситуация по гриппу птиц значительно осложняется в связи с возросшей опасностью для человека, так общее количество, подтвержденных ВОЗ случаев заболеваний, вызванных вирусом гриппа A/H5N1 у людей, к 2009 г.,достигло 408 , из которых 255 случаев с летальным исходом.

Впервые вспышки гриппа птиц H5N1 были зарегистрированы в России в июле 2005 г., в Новосибирской области. По данным Россельхознадзора с 2005 г. по 2008 г., было зарегистрировано 179 очагов заболевания гриппом птиц H5N1 в 20 субъектах Российской Федерации и суммарные потери в птицеводстве составили более 2,8 млн. птиц.

Резервуаром гриппа птиц в природе является дикая водоплавающая птица. Сезонная миграция диких перелетных птиц способствует широкому распространению возбудителя инфекции. Несмотря на предпринятые в мире меры контролю над данным инфекционным заболеванием, вирус гриппа продолжает распространяться и вызывать вспышки среди домашних и диких видов птиц.

Существует потенциальный риск возникновения не только панзоотий, но и пандемий, в случае появления высоко патогенных для человека рекомбинант-ных штаммов, полученных в результате взаимодействия вирусов гриппа птиц, свиньи и человека.

В настоящее время в лабораторной диагностике гриппа птиц используются как классические методы, такие как: выделение вируса на куриных эмбрионах и реакция торможения гемагглютинации (РТГА), а также новые методы экспресс диагностики, включающие иммуноферментный анализ (ИФА), полимеразную цепную реакцию (ПНР) или полимеразную цепную реакцию в реальном времени, иммунохроматографические методы.

В нашей стране такие методы как ИФА и ПЦР стали активно использоваться с 2005 г., иммунохроматографический метод применяется крайне редко, так как используются импортные тесты-системы, не используются практически в лабораторной практике метод РДП (реакция диффузионной преципитации).

Методы экспресс диагностики (полимеразная цепная реакция (ПЦР) или полимеразная цепная реакция в реальном времени, иммунохроматографические методы) направлены на обнаружение вируса гриппа птиц типа А, а также подтипов Н5 и Н7 в исходном патологическом, биологическом материалах.

Метод иммуноферментного анализа используется для обнаружения антител к вирусам гриппа птиц типа А только у кур, в основном, в промышленных стадах. С 2006 г. в Российской Федерации проводится иммунизация птицы в индивидуальных подворьях граждан.

Используются вакцины двух биологических предприятий. Вакцина против гриппа птиц инактивированная эмульгированнная» производства ОАО «Покровский завод биопрепаратов» и ФЛУ ПРОТЕКТН5, производства ФГУТТ «Ставропольская биофабрика». Поствакцинальный иммунитет значительно различается и составляет в различных субъектах Федерации от 0% до 100%. В среднем напряженность поствакцинального иммунитета по России составила около 60% в 2006 г. и 40% - в 2007 г.

До настоящего времени единственным документом регламентирующим проведение лабораторных исследований по гриппу птиц являлся ГОСТ-25581-91 «Методы лабораторной диагностики гриппа», в котором не отражены методы исследований, такие как: РДП, ИФА и ПЦР, а также имеются расхождения по РТГА с Руководством МЭБ по стандартным диагностическим тестам и вакцинам и наставлением к диагностическим наборам по РТГА.

Отсутствие нормативно-методической документации по определению напряженности поствакцинального иммунитета, отсутствие рекомендаций по лабораторному мониторингу осложняет проведение лабораторно-диагностических работ по гриппу птиц в ветеринарных лабораториях нашей страны. Актуальным является разработка новых нормативных документов, учитывающих методы современной лабораторной диагностики гриппа птиц и порядка проведения мониторинговых исследований в целях усовершенствования системы лабораторной диагностики, а также большое значение имеет изучение возможности повышения поствакцинального иммунитета с использованием препаратов имммуномодуляторов (иммуностимуляторов).

Цель и задачи исследований. Целью исследований являлось усовершенствование системы лабораторной диагностики и профилактики гриппа птиц.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. провести анализ распространения вируса гриппа птиц типа А, подтипа H5N1 в мире (по данным МЭБ и ВОЗ) и на территории России (по данным

Россельхознадзора, отчетов ветеринарных лабораторий по мониторингу гриппа птиц в Российской Федерации) с 2000 по 2007 г.г.;

2. изучить клинические признаки и патологоанатомические изменения при гриппе у различных видов птиц;

3. провести сравнительное изучение вирусологических, молекулярно-биологических (ПЦР), иммунохроматографических методов при детекции высокопатогенного вируса гриппа птиц в патологическом материале;

4. изучить биологические и генетические свойства выделенных изолятов;

5. провести сравнительное изучение серологических методов исследований (РТГА и ИФА) в целях мониторинга высокопатогенного вируса гриппа птиц на территории Московской области;

6. изучить напряженность поствакцинального иммунитета к вирусу гриппа H5N1 у различных видов птиц;

7. изучить влияние препаратов-иммуностимуляторов (фоспринила и сальмозана) у кур (цыплята-бройлеры 40-60 дн. возраста) на напряженность поствакцинального иммунитета, при совместном их применении с вакциной против гриппа птиц инактивированной эмульгированной (ОАО «Покровский завод биопрепаратов»), изготовленной из эпизоотического штамма (H5N1).

Научная новизна. Впервые изучено распространение вируса гриппа птиц на территории Российской Федерации с 2000-2007 г.г.

Изучены биологические и генетические свойства выделенных изолятов высокопатогенного вируса гриппа птиц (10) при вспышках болезни на территории нашей страны.

Изучена напряженность поствакцинального иммунитета у птиц, иммунизированных в зонах риска инактивированными вакцинами против гриппа птиц на территории Российской Федерации.

Разработаны научно обоснованные схемы лабораторных исследований, позволяющие в 100% случаев диагностировать грипп в максимально короткие сроки, в течение суток.

Доказано иммуностимулирующее действие препаратов фоспренила и сальмозана у цыплят бройлеров при совместном их применении с инактивиро-ванной вакциной, что позволяет повысить напряженность поствакцинального иммунитета.

Практическая значимость.

Предложенные схемы исследований позволили упорядочить проведение лабораторного мониторинга гриппа птиц на территории Российской Федерации, что в свою очередь, дало возможность в большей степени контролировать распространение данной инфекции на территории нашей страны. В результате проведенных работ выделены новые изоляты вируса гриппа птиц подтипа H5N1, проведена их идентификация и генетический анализ. Внедрена система контроля напряженности поствакцинального иммунитета у вакцинированной против гриппа птицы в субъектах Российской Федерации. Разработан пакет нормативно-методической документации, необходимой для проведения лабораторных исследований в целях мониторинга гриппа птиц:

- «Методические рекомендации по лабораторному мониторингу гриппа птиц на территории Российской Федерации» (утверждены 17 ноября 2008 г. Россельхознадзором);

- «Методические указания по определению напряженности поствакцинального иммунитета к вирусу гриппа птиц в реакции торможения гемагглю-тинации (РТГА)» (утверждены ректором ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина 05.05.2009 г.);

- «Методические рекомендации по проведению лабораторных исследований на грипп птиц» (утверждены ректором ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина 05.05.2009 г.);

Установлено влияние иммуностимулирующих препаратов (фоспренила и сальмозана) на напряженность поствакцинального иммунитета к гриппу птиц после иммунизации инактивированной вакциной из штамма H5N1, изготовленной ОАО «Покровским заводом биопрепаратов».

Апробация результатов диссертации. Результаты работы доложены и обсуждены: на научно-практической конференции молодых ученых ФГОУ ВПО МГАВМиБ (г. Москва, 2005 г.); II международной конференции по болезням диких животных, г. Москва 2007 г.; международном семинаре по гриппу птиц, организованном МАГАТЭ, Вена, 2009 г.; курсах повышения квалификаций ФГУ ЦНМВЛ по теме: «Лабораторные методы диагностики гриппа птиц» и «Диагностика вирусных болезней птиц» 2005г., 2006 г., 2007 г.; семинарах руководителей и специалистов ветслужб, организованных НОУ «Межрегиональным учебно-нормативным центром ветеринарной службы», Сочи 2006 г.,2007 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 научных работ, в том числе 2 - в журналах рекомендованных ВАК Российской Федерации.

Основные положения и результаты, выносимые на защиту:

1. Результаты анализа распространения гриппа птиц на территории Российской Федерации по данным Россельхознадзора и результатам лабораторного мониторинга за период с 2000 по 2007 г.г., проведенного ветлаборатория-ми Российской Федерации.

2. Результаты клинических и патологоанатомических исследований при гриппе птиц.

3. Результаты сравнительных ПЦР, иммунохроматографического и вирусологического методов исследований.

4. Результаты сравнительных испытаний методов ИФА и РТГА.

5. Результаты анализа напряженности поствакцинального иммунитета гриппа птиц на территории Российской Федерации

6. Результаты изучения влияния иммуностимулирующих препаратов (фоспренила и сальмозана) на напряженность поствакцинального иммунитета к гриппу птиц после иммунизации инактивированной вакциной из штамма H5N1, изготовленной ОАО «Покровский завод биопрепаратов».

Объём и структура диссертации. Материалы диссертация изложены на 127 страницах машинописного текста и включают введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследований, собственные исследования, обсуждения полученных результатов, выводы практические предложения, список использованной литературы (103 источника из которых 50 отечественных и 53 иностранных). Работа содержит 22 таблицы, 34 рисунка, 41 страницу приложений.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Виткова, Ольга Николаевна

Выводы:

1. Проведен анализ распространения вируса гриппа типа А подтипа H5N1 в мире с 2000 по 2007 г.г., установлено, что вспышки гриппа (по данным МЭБ) регистрировались более чем в 50 странах. В реестре стран не благополучных по высокопатогенному гриппу H5N1 Россия занимает 7 место.

2. Изучено распространение высокопатогенного вируса гриппа птиц H5N1 на территории Российской Федерации. С 2005 г. в России выявлено 179 очагов в 20 субъектах, потери составили 2,8 млн. голов птицы. Генетический материал вируса гриппа H5N1 в ПЦР выявлен у кур в 67,6% случаев, у гусей -5,6% , у уток -1,9% ; в 20.6% случаев у дикой водоплавающей и птицы околоводного комплекса, в 43,8 % у синантропной птицы.

3. Антитела к вирусу гриппа Н5 в РТГА обнаружены: у диких видов птиц (водоплавающих и околоводного комплекса) - 81,5%; у домашней птицы -14,7%; у синантропной - 3,1%. Полученные данные свидетельствуют о том, что дикая, главным образом водоплавающая, птица является резервуаром вируса гриппа H5N1 в природе. Вспышки заболевания были связаны с миграционными путями перелетных птиц (исключение вспышки в Московском регионе).

4. При изучении клинических признаков и патологоанатомических изменений отмечали поражения характерные для высокопатогенного гриппа птиц: наблюдали множественные кровоизлияния, поражения во всех органах и тканях. У водоплавающей птицы впервые было зарегистрировано помутнение хрусталика (керато-коньюнктивит). Впервые заболеваемость и смертность наблюдалась как в стадах домашних, так и у диких водоплавающих птиц. Наблюдалось острое и сверхострое течение, летальность достигала 100%.

5. Сравнительными исследованиями патологического и биоматериала классическим вирусологическим методом (на куриных эмбрионах), ПЦР и иммунохроматографическим методами показаны высокая чувствительность и специфичность новых методов исследований, что доказало необходимость применения их в различных схемах: для проведения скрининговых (схема 1) и диагностических исследований (схема 2).

6. Показана высокая чувствительность различных видов культур клеток (фибробластов куриных эмбрионов, МДБК, СПЭВ и Таурус-1) без добавления трипсина к выделенным 10 изолятам вируса гриппа A/H5N1, 100% гибель куриных эмбрионов через 24-48 часов после заражения.

7. Проведено изучение генетических свойств выделенных изолятов. По основному молекулярному маркеру патогенности все они были отнесены к ВПВГП типа H5N1, показали высокую гомологию (>99%) с вирусами, изолированными от диких водоплавающих птиц во время эпизоотии на озере в провинции Цинхай.

8. Сравнительное изучение серологических методов исследований ИФА (новый метод) и РТГА, показало, что метод ИФА целесообразно применять при мониторинговых исследованиях в куроводческих хозяйствах на невак-цинированном поголовье, а РТГА для мониторинговых исследований других видов птиц и контроля напряженности поствакцинального иммунитета.

9. Показано, что поствакцинальный иммунитет у домашних птиц значительно колебался в различных населенных пунктах Российской Федерации от 0 до 100%. В среднем по России составлял около 60% в 2006 г. и около 40% в 2007 г. Наиболее напряженный иммунный ответ наблюдался у кур 66-67% и цесарок 30-88%; у уток, гусей, индеек, страусов и голубей он достигал значений: 25-26%, 13-30%, 4,5-28%, 40%, 0-9,9%, соответственно.

10. Показано, что иммуностимулирующие препараты фоспренил и сальмозан при совместном их применении с вакциной против гриппа птиц повысили у цыплят бройлеров титры поствакцинальных антител на 28 день после вакцинации в 3 раза.

11. На основании полученных результатов предложены схемы исследований, включающие современные методы лабораторной диагностики гриппа птиц, разработано 3 нормативных документа.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Ветеринарным лабораториям Российской Федерации предложены схемы лабораторной диагностики гриппа птиц, нормативные документы: «Методические рекомендации по лабораторному мониторингу гриппа птиц на территории Российской Федерации» (утверждены 17 ноября 2008 г. Россельхознадзором) «Методические указания по определению напряженности поствакцинального иммунитета к вирусу гриппа птиц в реакции торможения гемагглютинации», «Методические рекомендации по проведению лабораторных исследований на грипп птиц» (утверждены ректором ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина 05.05.2009 г.).

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Виткова, Ольга Николаевна, 2009 год

1. Бакулин В.А. Болезни птиц/ Бакулин В.А., СПб.: Искусство России, 2006-76-91 с.

2. Белоусова Р.В Ветеринарная вирусология/ Белоусова Р.В., Преображенская Э.А., Третьякова И.В. -М. Колос, 2007- 300 с.

3. Воронин Е.С. Насколько опасен грипп птиц для человека?/Е.С. Воронин// Сб. материалов научно-практической конференции-М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис 2007 г. -С.20.

4. Голубничкин В.П. Этиопатогенез, диагностики и профилактика смешанных вирусно-бактериальных инфекций птиц / В.П., Голубничкин В.П., Бир-манкот А.П., Малинивская Г.В. // Ветеринарная наука производству- 1985- №. 23, С 43-48.

5. Гулюкин М.И. Основные задачи борьбы с гриппом птиц/Гулюкин М.И., Грошева Г.А., Тихонова З.В.// Сб. материалов научно-практической кон-ференции-М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис 2007 г. - С.80.

6. Деева А.В., Применение фоспренила при острых вирусных инфекциях телят / Деева А.В., Т.Н. Ракова, Т.П. Лобова и др. // Ветеринария 2004-№ 6, С. 15-17.

7. Деева А.В., Применение фоспренила для профилактики и терапии при ТГС/ Деева А.В., Мищенко Н.К., Лобова Т.П. и др.// Ветеринария 2002-№2 , С. 12-15.

8. Деева А.В., Применение фоспренила. Механизмы повышения продуктивности, профилактического и терапевтического действия/ Деева А.В., Бе-лоусова Р.В., Данилов JI.JI. и др. //Ветеринария -2004- №11, С.9-13.

9. Дорошенко Е.М. Медицинские проблемы, требующие решения /Дорошенко Е.М.// Сб. материалов научно-практической конференции М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис - 2007 г. -С. 144.

10. Джавадов Э.Д. Возможности вакцинопрофилактики гриппа птиц/ Джавадов Э.Д.// Сб. материалов научно-практической конференции-М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис 2007 г. -С.55.

11. Дьяконов Е.В Эффективность мер борьбы с гриппом кур в птицеводстве/. Дьяконов Е.В., Родин Ю.В. Патология органов дыхания и пищеварения с/х животных.- М. 68-72 с.

12. Жилинская И.Н.Роль нейроминедазы в патогенезе гриппозной инфек-ции//Жилинская И.Н. и др.//Вопросы вирусологии 2003. -48, №2 - С.26-28.

13. Закомырдин А.А. Дезинфекция при гриппе птиц (Профилактика распространения гриппа птиц)/Закомырдин А.А.// Сб. материалов научно-практической конференции-М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис 2007 г. - С. 139.

14. Колбасов Д.В. Средства и методы лабораторной диагностики и профилактики гриппа птиц/Колбасов Д.В., Новиков Б.В., Кушнир А.Т., Зубаиров М.М.// Сб. материалов научно-практической конференции-М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис 2007 г. -С. 72.

15. Каверин Н.В. Межвидовая трансмиссия вирусов гриппа А и проблема пандемий/ Каверин, Н.В. Смирнов Ю.А.// Вопросы вирусологии 2003 - №2-С. 4-10.

16. Казарян А.С. Изучение некоторых биологических свойств изолятов вирусов гриппа , выделенных в Московской области и республике Тыва/ Казарян А.С., Луницын А.В. и др. // IV Международный ветеринарный конгресс по птицеводству -Москва, 2008. С. 105.

17. Лагуткин Н.А., Непредсказуемость гриппа А/ Лагуткин Н.А., Лутови-нов В. И.// Птицеводство-2001. №6 - С.27.

18. Львов Д.К. Изоляция вирусов гриппа А от диких птиц и ондатры в западной части Восточно Азиатского миграционного русла/ Львов Д.К. и др. //Вопросы вирусологии - 2001- №4 - С. 35

19. Львов Д.К. Причины и последствия проникновения на территорию России высокопатогенного вируса гриппа A/H5N1 /Львов Д.К. //Сб. материалов научно-практической конференции -М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис 2007 г. -С.46.

20. Маринина В.П.Эволюция рецепторной специфичности гемагглютинина вируса гриппа при передаче от уток к свиньям и людям/ Маринина В.П.//Вопросы вирусологии 2004 - 3- С.25-30.

21. Маркин М.А. Инактивация вирусов птичьего гриппа с помощью Бромосепта 50% раствор в присутствии 90% амниотических вод./Маркин М.А.// Сб. материалов научно-практической конференции-М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис 2007 г. -С.98.

22. Обухов И.Л. ПЦР тест-системы для диагностики гриппа птиц / Обухов, И.Л., Шипулин, Г.А., Яцышина С.Б., Смоленский В.И., Панин А.Н. // Ветеринария. 2006. -№ 7. - С. 25-30.

23. Онищенко Г.Г. Усиление надзора и контроля за гриппом как важнейший элемент подготовки к сезонным эпидемиям и очередной пандемии,/ Г.Г. Онищенко, O.K. Киселев, А.А. Соминина-М.: Роза мира, 2004 г.

24. Покровский В.И. Грипп птиц: реальность и угроза распространения инфекционной биокатострофы/ Покровский В.И.// Сб. материалов научно-практической конференции-М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис 2007 г. -С.51.

25. Рождественский И.К. Меры по профилактике гриппа птиц в Российской Федерации/ Рождественский И.К.// Сб. материалов научно-практической конференции-М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис 2007 г. -С.24-26.

26. Рослая Н.Г., Патогенность для цыплят вируса гриппа птиц, выделенного от диких птиц/Рослая Н.Г., Закстельская П.Я., Исаченко В.А. //Ветеринария 1976. - № 1, С. 46-47.

27. Самуйленко А.Я. Грипп кур / Самуйленко А.Я , Соловьева Б.В., Не-поклонова Е.А., Воронина Е.С. и другие. Инфекционная патология животных Т.1 М.: ИКЦ Академкнига, 2006 - 342 с.

28. Смоленский В.И. Изучение некоторых вопросов патогенности гриппа кур ГП6/С6. науч. трудов Московской ветеринарной академии 1974.Т.73, ч.2. - С.38-39.

29. Смоленский В.И. Патогенез гриппа у интактных кур/ Смоленский В.И., Осидзе Н.Г.//Ветеринария №8 - 1976.- С.52-56.

30. Сюрин В.Н. Об эпизоотологическом потенциале вируса гриппа птиц/ Сюрин В.Н., Осидзе Н.Г., Чистова Э.Я.//Ветеринария.-№8, С. 41-43.

31. Сюрин В.Н. Инфекция свиней, вызывная вирусом гриппа/ Сюрин В.Н., Смоленский В.И.//№8.-1976, с.52-56.

32. Талевич В. М. Эпизоотология гриппа птиц в Алтайском крае : Авто-реф. дис. канд. биол. наук: /Талевич В.М. Ленинградский ветинститут Ленинград, 1977 - 30 с.

33. Тихонова З.В. Развитие учений об инфекционных болезнях животных и птичьем гриппе: исторический аспект/ Тихонова З.В.- М. Юго-Восток-Сервис, 2006 -2 с.

34. Трофимов А.А. Профилактика гриппа птиц у мясных кур./Трофимов А.А.// Сб. материалов научно-практической конференции-М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис 2007 г. -С. 175.

35. Федоров И.Т. Чувствительность вируса гриппа А/Н5, изолированных от диких птиц на территории России, к арбидолу в культуре клеток MDCK/, Федоров И.Т., Ленева,И.А, Ямникова С.С., Львов Д.К., Глушков Р.Г., Шустер A.M.// Вопросы вирусологии 2005 -№5 - С.34

36. Федякина И.Т. Грипп остается непредсказуемой инфекцией/ Федя-кина И.Т., Петрова Е.С., Сургучева И.М.,. Власов Н.А,. Ямникова С.С // Десятый Московский Международный Конгресс Москва, 2002. - С. 93.

37. Циванюк М.А. Разработка конкурентного варианта ИФА для выявления антител к вирусу гриппа подтипа Н5 у различных видов птиц./ Циванюк

38. М.А., Луговская Н.Н., Мудрак Н.С. и другие // Ветеринарная патология.-2007.-№4-С.126-132.

39. Циванюк М.А. Выявление антител к вирусу гриппа типа А в сыворотках крови диких и домашних птиц/Циванюк М.А., Луговская Н.Н., Дрыгин

40. B.В.// 2-ой Международный Ветеринарный конгресс по птицеводству М.,2006,1. C.42-46.

41. Шабловская Е.А. Циркуляция вируса гриппа в птицеводческих хозяйствах/ Шабловская Е.А., Вороненко, А.Г.// Вопросы вирусологии. 1985 - № 3-С. 303-310

42. Шандала М.Г. Проблемы дезинфекционной профилактики гриппа птиц у людей/Шандала М.Г.// Сб. материалов научно-практической конферен-ции-М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис. 2007 г. -С.59.

43. Яковлев С.С. Эпизоотическая ситуация по гриппу птиц в Российской Федерации/ Яковлев С.С. //Сб. материалов научно-практической конфе-ренции-М.:ГУП «Юго-Восток-Сервис 2007 г. -С.

44. Branson W. R. Avian Viruses. Function and control/ Branson W. R.// Florida, Wingers Publishing Inc.-1995, 351-365.

45. Bright R.A. Impact of glycosylation on the immunogenicity of a DNA-based influenza H5 HA vaccine/ Bright R.A, Ross T.M., Subbarao K., Robinson H.L., Katza J.M.//Virology-2003.-Vol.308, №11- P. 270-278.

46. Brownlee G. G. The predicted antigenicity of the haemagglutinin of the 1918 Spanish influenza pandemic suggests an avian origin -. Soc. Lond. B, 2001.356, 1871-1876 p.

47. Calnek B. W. Diseases of Poultry Iowa State University Press, Ames, Iowa, USA, 1997, p. 583, 586, 592.

48. Carlton B.R. Avian disease manual / Carlton B.R , Bermudez A.J., Bou-lianne M. and other// 6 edition, American Association of Avian Pathologist, Athens, Georgia 2006, p. 15-18.

49. Cooper L.A. A Simple Restriction Fragment Length Polymorphism-Based Strategy That Can Distinguish the Internal Genes of Human H1N1, H3N2, and

50. H5N1 Influenza A Viruses,/Cooper L.A., Subbarao K.// Clinical Microbiology, -2000.- Vol. 38, №. 7 P. 2579-2583.

51. Englund L., Avian influenza A virus causing an outbreak of contagious interstitial pneumonia in mink / Englund L., Klingeborn B, Mejerland T//- Acta Vet Scand- 1986; 497-50 4p.

52. Eric С.J. Claas, Pandemic influenza is a zoonosis, as it requires introduction of avian-like gene segments in the human population/, Eric С.J. Claas// Veterinary Microbiology 2000- Vol. 74-№3 -P. 133-139.

53. Geraci J.R., Mass mortality of harbor seals: pneumonia associated with influenza A virus/ Geraci J.R. St., Aubin D.J., Barker I.K. and othre/Science 1982-№215-P. 31.

54. Guo Y. Characterization of a new avian-like influenza A virus from horses in China,/Guo Y., Wang , Kawaoka Y., // Virology -1992. №2 -P. 245-255.

55. Gao P. Biological Heterogeneity, Including Systemic Replication in Mice, of H5N1 Influenza A Virus Isolates from Humans in Hong Kong/ Gao P., Wa-tanabe S., Ito T. and other // Virology 1999-, Vol. 73, №. 4, P. 3184-3189.

56. Huchzermeyer F.W. Diseases of ostriches and other ratites/ Huchzer-meyer F.W. // Agricultural Research Council Onderstepoort Veterinary Institute, Pretoria-1998 -p. 154

57. Hatta M. The continued pandemic threat posed by avian influenza viruses in Hong Kong/ Hatta M. and Kawaoka Y.// Trends in Microbiology 2002 -Vol.10 -№7- P. 340-345

58. Hatta M. Molecular Basis for High Virulence of Hong Kong H5N1 Influenza A Viruses /Hatta M., Gao P., Halfmann P., Kawaoka Y.//Science—2001-Vol. 293, №9-P. 1840-1842

59. Hoffmann E. Characterization of the Influenza A Virus Gene Pool in Avian Species in Southern China: Was H6N1 a Derivative or a Precursor of H5N1/ Hoffmann E., Stech J., Leneva I., and other// Virology,- 2000, Vol. 74, No. 14-P. 6309-6315.

60. Horimoto T. Direct Reverse Transcriptase PCR To Determine Virulence Potential of Influenza A Viruses in Birds /Horimoto T. and Kawaoka Y.// Clinical Microbiology 1995.- Vol. 33, №. 3 -P. 748-751.

61. Ito Т., Molecular Basis for the Generation in Pigs of Influenza A Viruses with Pandemic Potential/ Ito Т., Nelson J. S., Couceiro S. and other// Virology,-1998, Vol. 72, №. 9,- P. 7367-7373

62. Kodihalli,S., DNA Vaccine Encoding Hemagglutinin Provides Protective Immunity against H5N1 Influenza Virus Infection in Mice /Kodihalli,S., Goto H., Kobasa D.L., Krauss S., Kawaoka, Y. and Webste R.G.// Virology,- 1999.- Vol. 73, № 3, P. 2094-2098.

63. Lipatov A.S. Neurovirulence in Mice of H5N1 Influenza Virus Genotypes Isolated from Hong Kong Poultry in 2001/Lipatov A.S., Krauss S., Guan Y., Peiris M., Rehg J.R., Perez Webster D.R.,// Virology, -. 2003, Vol. 77, №. 6- P. 38163823.

64. Leung F.C. Avian H5Nlis still an animal virus/ Leung F.C.// 15-th World veterinary poultry congress abstract book, Beijing -2007,- P. 118.

65. Lin Y. P Avian-to-human transmission of H9N2 subtype influenza A viruses: Relationship between H9N2 and H5N1 human isolates /Lin Y. P., Shaw M., Gregory V. and other//PNAS, 2000. vol. 97, №. 17, P. 9654-9658

66. Matrosovich M . The Surface Glycoproteins of H5 Influenza Viruses Isolated from Humans, Chickens, and Wild Aquatic Birds Have Distinguishable Properties/ Matrosovich M., Zhou N., Kawaoka Y, Webster R.// Virology 1999, Vol. 73, No. 2,-P. 1146-1155

67. Phuong Q. Do The biological and molecular effects of passage of H5N1 avian influenza virus in common mallard and chickens/ Phuong Q. Do//15-th World veterinary poultry congress abstract book, Beijing -2007.- P. 125.

68. Perdue M.L. Structural features of the avian influenza virus hemagglutinin that influence virulence/ Perdue M.L., Suarez D. L//Veterinary Microbiology -2000.-Vol. 74, № 13- P. 77-86

69. Quin P.J. Veterinary microbiology and microbial disease/Quin P.J., Mar-key B.K., Carter M.E. and other// Blackweell Publishing, USA-2005, P. 375-380.

70. Riberdy J.M. Protection against a Lethal Avian Influenza A Virus in a Mammalian System/Riberdy J.M., Flynn К J., Stech J. and other // Virology 1999. Vol. 73, No. 2, P. 1453-1459.

71. Rowe Т. Detection of Antibody to Avian Influenza A (H5N1) Virus in Human Serum by Using a Combination of Serologic Assays /Rowe Т., Abernathy R.A., Primmer J.H. and other//Clinical Microbiology- 1999.-Vol. 37, №. 4, P. 937943.

72. Ryan-Poirier K.A. Distinct glycoprotein inhibitors of influenza A vims in different animal sera/ Ryan-Poirier K.A., Kawaoka Y.//Virology 1991, vol.65. №4-P. 389-395.

73. Scholtissek C. Genetic relatedness of hemagglutinins of the HI subtype of influenza A viruses isolated from swine and birds/ Scholtissek C., Burger H., Bachmann P.A., Hannoun CM Virology -1983 №3- P. 129.

74. Sang H.S. Cross-Reactive, Cell-Mediated Immunity and Protection of Chickens from Lethal H5N1 Influenza Virus Infection in Hong Kong Poultry Markets /Sang H.S. Webster R.G.// Journal of Virology 2001, Vol. 75, № 6 - P. 2516-2525.

75. Smirnov Y. A. Influenza H5 virus escape mutants: immune protection and antibody production in mice/ Smirnov, Y.A.,. Gitelman A.K., Govorkova E.A.,. Lipatov A.S., Kaverin N.V.// Vims Research 99 -2004.-P. 205-208.

76. Spickler A.R. Emerging and Exotic Diseases of Animals/ Spickler A.R., Roth J.A.//3rd Edition, 2nd Printing, Athens, USA 2006- P.54.

77. Stallknecht E.D. Ecology and epidemiology of avian influenza vimses in wild bird populations: waterfowl, shorebirds, pelicans, cormorants, etc./ Stallknecht E.D- Proc. 4th International Symp. on Avian Influenza,- 1997, Athens, USA P. 6167.

78. Shortridgea K.F. Interspecies transmission of influenza vimses: H5N1 virus and a Hong Kong SAR perspective/ Shortridgea K.F., Gaob P., Guanc Y., and other// Veterinary Microbiology -2000- №5 P. 141-147.

79. Spackman E. Development of a Real-Time Reverse Transcriptase PCR Assay for Type A Influenza Vims and the Avian H5 and H7 Hemagglutinin Subtypes

80. Spackman E., Senne D.A., Myers T.J., Bulaga L.L., Garber L.P., Perdue M.L., Lohman K., Daum L.T., Suarez D.L// Clinical Microbiology, 2002. - Vol. 40, № 9,-P. 3256-3260.

81. Suarez D.L. Evolution of avian influenza viruses/Suarez D.L.// Veterinary Microbiology 2000- Vol.74 №3-P. 15-27.

82. Suarez D.L. Comparisons of Highly Virulent H5N1 Influenza A Viruses Isolated from Humans and Chickens from Hong Kong /Suarez D.L., Perdue M.L., Cox N., Rowe T, Bender C., Huang J, Swayne D.E// Virology, -. 1998.- Vol. 72, № 8, - P. 6678-6688.

83. Suarez D.L Immunology of avian influenza virus: a review/Suarez D.L., Schultz-Cherry S. // Developmental and Comparative Immunology 2000 - №4- P. 269-283.

84. Swayne D.E. Changing face of avian influenza ecology and control from wild birds to poultry and back again/ Swayne D.E. // 15-th World veterinary poultry congress abstract book, Beijing -2007.- P. 98-103.

85. Swayne D.E. Vaccines protect chickens against H5 highly pathogenic avian influenza in the face of genetic changes in field viruses over multiple years/ Swayne D.E., Perdue M.L., Beck J. R. and other//Veterinary Microbiology 2000- P. 165-172.

86. Takada A. Avirulent Avian Influenza Virus as a Vaccine Strain against a Potential Human Pandemic /Takada A., Kuboki N., Okazaki K. and other// Virology -. 1999,- Vol. 73, №. 10,- P. 8303-8307.

87. Toshihiro I. Generation of a Highly Pathogenic Avian Influenza A Virus from an Avirulent Field Isolate by Passaging in Chickens/ Toshihiro Ito, Hideo G., Yamamoto E. and other// Virology 2001.- Vol. 75, № 9,-P. 4439-4443.

88. Tumpey T.M. Characterization of a Highly Pathogenic H5N1 Avian Influenza A Virus Isolated from Duck Meat,/Tumpey T.M., Suarez D.L., Perkins L. E. L, Senne D.A. and other// Virology- 2002- Vol. 76, -№. 12, p. 6344-6355.

89. Webster R.G. Intestinal influenza: replication and characterization of influenza viruses in ducks/ Webster R.G., Yakhno M.A., Hinshaw V.S. and other// Virology 1978. Vol.84, P. 268-278.

90. Zitzow L.A. Pathogenesis of Avian Influenza A (H5N1) Viruses in Ferrets/,Zitzow L.A., Rowe Т., Morken Т., Wun-Ju Shieh,, Zaki S., and Jacqueline M. Katz// Virology 2002. -Vol. 76, №. 9-P. 4420-4429.

91. Zhou N.N. Rapid Evolution of H5N1 Influenza Viruses in Chickens in Hong Kong/ Zhou N.N, Kennedy F. Shortridge and other// Virology- 1999. Vol. 73, No. 4, p. 3366-3374.