Циклодекстрин глюканотрансферазы с альфа- и бета-специфичностями и сравнительный анализ их структуры тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Бикбулатова, Светлана Магнитовна

• Бикбулатова, Светлана Магнитовна
• кандидат биологических наук
• 1998

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Бикбулатова, Светлана Магнитовна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.•.] 1

1.1. Циклодекстрины и их свойства.

1.1.1. Структура молекул циклодекстринов.

1.1.2. Комплексы включения цикло декстринов.

1.1.3. Применение цикл о декстринов.

1.2. Фермент циклодекстрин глюканотрансфераза. Свойства и механизм действия.

1.2.1. Продуценты циклодекстрин глюканотрансфераз.

1.2.2. Ферментативное действие ЦГТаз.

1.2.2.1. Межмолекулярное трансгликозилирование.

1.2.2.2. Внутримолекулярное трансгликозилирование.

1.2.2.3. Гидролиз.

1.2.3. Рентгеноструктурный анализ ЦГТаз.

1.2.3.1. Доменная организация. Активные центры.

1.2.3.2. Рентгеноструктурный анализ ЦГТаз в связанной форме.

1.2.4. Клонирование и секвенирование генов ЦГТаз.

Глава 2. Объект и методы исследований.51

2.1. Штаммы бактерий Paenibacillus macerans ИБ-7 и Bacillus sp. 6.6.3.

2.1.1. Выделение и очистка ДНК Paenibacillus macerans и Bacillus sp.

2.2. Получение геномных библиотек ДНК Paenibacillus macerans и Bacillus sp. в фаговом векторе EMBL 3.

2.3. Скрининг библиотеки генов Paenibacillus macerans и Bacillus sp.

2.4. Определение ос- и ß-ЦГТазной активности.•.

2.5. Выделение и очистка плазмидной ДНК.

2.6. Субклонирование фрагментов ДНК, содержащих гены а- и ß-ЦГТаз в векторе pBluescript II SK(-).

2.7. Высокоэффективная жидкостная хроматография циклодекстринов.

2.8. Расщепление ДНК рестриктазами.

2.9. Рестриктазное картирование и разработка стратегии секвенирования.

2.10. Электрофорез фрагментов ДНК в агарозных гелях.

2.11. Элюция фрагментов ДНК из агарозного геля.

2.12. Подготовка компетентных клеток.

2.13. Трансформация компетентных клеток E.coli плазмидной ДНК.

2.14. Получение одноцепочечной ДНК.

2.15. Тетра/окта стратегия секвенирования.

2.16. Секвенирование ДНК.

2.17. Компьютерный анализ нуклеотидных последовательностей генов а- и ß-ЦГТаз и аминокислотных последовательностей кодируемых ими ферментов.

2.18. Реактивы и материалы.

Глава 3. Результаты исследований и их обсуждение.71

3.1. Создание геномных библиотек микроорганизмов Paenibacillus macerans ИБ-7 и Bacillus sp. 6.6.3. и идентификация в них функционально-активных генов, кодирующих а- и ß-ЦГТазы.

3.2. Разработка стратегии секвенирования и определение нуклеотидных последовательностей клонированных фрагментов ДНК Paenibacillus macerans ИБ-7 и Bacillus sp. 6.6.3.

3.3. Анализ нуклеотидной последовательности генов а- и ß-ЦГТаз Paenibacillus macerans ИБ-7 и Bacillus sp. 6.6.3.

3.4. Сравнительный анализ кодирующей области генов ЦГТаз.

3.5. Анализ аминокислотного состава а- и ß-ЦГТаз Paenibacillus macerans ИБ-7 и Bacillus sp. 6.6.3.

3.6. Анализ фланкирующих областей генов ЦГТаз.

3.7. Анализ лидерных пептидов ЦГТаз.

3.8. Анализ доменов ЦГТаз.

3.9. Особенности аминокислотных последовательностей а- и ß-ЦГТаз.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Циклодекстрин глюканотрансферазы с альфа- и бета-специфичностями и сравнительный анализ их структуры»

Актуальность темы. Циклодекстрин глюканотрансфераза (ЦГТаза; 1,4-ос-глюканотрансфераза, циклизующая, КФ 2.4.1.19) - это фермент, катализирующий реакцию превращения линейных цепей крахмала в особые соединения, так называемые циклические декстрины , которые представляют собой замкнутые в кольца остатки глюкозы. Известны три типа циклодекстринов: a-, ß- и у-, состоящие из 6-ти, 7-ми и 8-ми остатков глюкозы, соответственно. Циклодекстрины известны более ста лет и весьма интересны в практическом отношении. Привлекательность их заключается в способности циклодекстринов образовывать комплексы включения с широким рядом органических молекул подходящего размера, что позволяет существенно улучшать физико-химические характеристики последних, а также обеспечивает особые преимущества для включенных в комплекс молекул. Написаны целые книги, ряд обзоров, бесчисленное множество статей по циклодекстринам, получено около 2-х миллионов патентов на их использование, раз в два года в разных странах проводятся регулярные международные симпозиумы по циклодекстринам. Сфера их применения чрезвычайно широка и продолжает увеличиваться. Они используются в фармацевтической, пищевой, парфюмерной, химической промышленности, в сельском хозяйстве, биотехнологии и в других отраслях, а также в научных исследованиях химического и биологического профиля.

Если в начале изучения циклодекстринов их получали при простом бактериальном расщеплении крахмала, то впоследствии были выделены, очищены и изучены ферменты, названные циклодекстрин глюкано-трансферазами (ЦГТазами), которые и превращают крахмал в столь своеобразные кольца. Эти ферменты были обнаружены в почвенных микроорганизмах, преимущественно рода Bacillus, причем у разных штаммов они несколько отличались специфичностью своего действия, 8 превращая крахмал в смесь всех трех циклодекстринов в различных пропорциях.

Химический синтез циклодекстринов довольно сложен, поэтому их получают исключительно конверсией крахмала под действием ЦГТаз, однако стоимость получаемых циклодекстринов пока еще достаточно высока. По этой причине ведется активный поиск штаммов-продуцентов ЦГТаз, а также клонирование и секвенирование их генов с тем, чтобы в будущем с помощью генной и белковой инженерии получить, во-первых, штаммы-суперпродуценты ЦГТаз, во-вторых, сконструировать высокоспецифичные по отношению к конечному продукту ферменты.

Для выяснения механизма действия ЦГТаз были предприняты значительные усилия по очистке ферментов, обладающих разной специфичностью, из различных штаммов. Так, были выяснены температурные и рН-оптимумы и другие необходимые условия работы этих ферментов. Было определено содержание аминокислотных остатков у отдельных ЦГТаз. Однако, знание состава аминокислот не позволяло построить ни первичную, ни вторичную, ни третичную структуры ЦГТаз, что крайне необходимо для понимания особенностей механизма их действия. И только с развитием методов молекулярной биологии стало возможным клонирование генов ЦГТаз в фаговых или плазмидных векторах в микроорганизмах родов Escherichia, Bacillus и дальнейшее исследование этих генов и кодируемых ими ферментов.

В настоящее время ЦГТазы выделены из большого числа различных микроорганизмов, однако клонировано всего 19 генов ЦГТаз. Для них определены последовательности нуклеотидов и на их основе предсказаны аминокислотные последовательности ЦГТаз. С помощью рентгено-структурного анализа для некоторых ЦГТаз построены модели их третичной структуры. Показано, что эти ферменты имеют характерную доменную организацию. 9

Предпринимаются также попытки создать химерные и мутантные конструкции ЦГТаз с измененной специфичностью действия для выявления доменов и отдельных аминокислот, ответственных за специфичность действия фермента, связывание с субстратом, за разрезание углеводной цепи, ее последующее сращивание и др.

В настоящее время имеющиеся сведения еше не позволяют приступить к целенаправленному созданию ферментов с желаемыми свойствами. В связи с этим, необходимо дальнейшее изучение этих уникальных ферментов. Таким образом, клонирование и секвенирование генов ЦГТаз, а также подробный сравнительный анализ кодируемых ими белков является актуальной научной проблемой.

Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы заключалась в изучении структурных различий бациллярных ферментов а- и ß-ЦГТаз для выявления особенностей их организации и влияния последней на специфичность действия изучаемых ферментов.

Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Создание геномных библиотек штаммов микроорганизмов Paenibacillus macerans ИБ-7 и Bacillus sp. 6.6.3. в векторах на основе фага лямбда.

2. Идентификация в данных клонотеках функционально-активных генов а-и ß-ЦГТаз.

3. Определение нуклеотидных последовательностей клонированных фрагментов ДНК и выведение на их основе аминокислотных последовательностей а- и ß-ЦГТаз.

4. Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей генов ЦГТаз и аминокислотных последовательностей кодируемых ими ферментов, обладающих различной специфичностью действия, с привлечением данных по некоторым другим ЦГТазам для выявления консервативных и дивергировавших участков в молекулах ЦГТаз.

10

5. Выявление особенностей эволюционирования структуры ЦГТаз и их генов у микроорганизмов, продуцирующих данные ферменты. Научная новизна и практическая значимость. Впервые клонированы фрагменты ДНК, содержащие гены а- и ß-циклодекстрин глюканотрансфераз, продуцирующих следующее соотношение a-, ß- и у-циклодекстринов (в %): для а-ЦГТазы 65:25:10, для ß-ЦГТазы 6:83:11, что отличает их от ранее клонированных генов ЦГТаз.

Впервые выявлены различия в структуре а-и ß-специфичных ЦГТаз, выражающиеся в заменах и инсерциях отдельных аминокислот и их блоков в высококонсервативных функционально-значимых участках молекулы ферментов.

На основе гомологии аминокислотных последовательностей всех известных ЦГТаз построено филогенетическое древо, наиболее полно отражающее их родственные отношения, и приведены доказательства существования достаточно обособленных групп микроорганизмов-продуцентов ЦГТаз. Показано, что все сравниваемые a-, ß- и у-ЦГТазы из микроорганизмов родов Bacillus, Paenibacillus, Brevibacillus и Thermoanaerobacter имеют одного общего предка и являются результатом дивергенции, тогда как происхождение ЦГТазы Klebsiella pneumoniae имеет независимый и в то же время конвергентный характер.

Полученные нами результаты расширяют представление об организации и эволюции структуры генов циклодекстрин глюканотрансфераз, а также способствуют более полному пониманию различий в функционировании данных ферментов. Они могут быть использованы в исследованиях по конструированию ферментов ЦГТаз с заданными свойствами.

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на Международной конференции биохимического общества РАН, посвященной памяти академика А.Е. Браунштейна (Санкт-Петербург,

11

1992); на конференции молодых ученых УНЦ РАН (Уфа, 1994) и Международной конференции «Микробное разнообразие: состояние, стратегия сохранения, экологические проблемы» (Пермь, 1996). Публикации♦ Основные результаты диссертации изложены в трех печатных работах, а также депонированы в международных банках данных The EMBL Nucleotide Sequence DataBase, GenBank и SWISS PROT. Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (глава 1), описания объектов и методов исследования (глава 2), результатов исследования и их обсуждения (глава 3), заключения, выводов и списка цитированной литературы, включающей 165 названий, в том числе 152 работы иностранных авторов. Работа изложена на 146 страницах и содержит 40 рисунков и 9 таблиц.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Бикбулатова, Светлана Магнитовна

ВЫВОДЫ;

1. В векторах на основе фага лямбда в бактерии E.coli созданы геномные библиотеки двух видов бацилл - Paenibacillus macerans ИБ-7 и Bacillus sp. 6.6.3.; в них идентифицированы полноразмерные функционально-активные гены циклодекстрин глюканотрансфераз, характеризующихся а- и ß-специфичностью, и проведено их субклонирование в плазмидных векторах.

2. Показано, что специфичность действия ферментов, продуцируемых рекомбинантными плазмидами, несущими полноразмерные функционально-активные гены а- и ß-ЦГТаз Р.macerans ИБ-7 и Bacillus sp. 6.6.3., по сравнению с выделенными из природных штаммов, не меняется.

3. Установлено, что полные нуклеотидные последовательности клонированных фрагментов ДНК, содержащих гены а- и ß-ЦГТаз Р.macerans ИБ-7 и Bacillus sp. 6.6.3., вместе с фланкирующими участками имеют протяженность 3025 и 2489 пн, соответственно.

4. В секвенированных фрагментах ДНК Р.macerans ИБ-7 и Bacillus sp. 6.6.3. обнаружены открытые рамки считывания: для гена а-ЦГТазы -протяженностью 2142 пн, кодирующая полипептид размером 714 аминокислотных остатков; для гена ß-ЦГТазы - 2154 пн, кодирующая полипептид размером 718 аминокислотных остатков.

5. Идентифицированы участки, кодирующие лидерные пептиды, длиной 27 аминокислотных остатков для а-ЦГТазы и 34 аминокислотных остатка для ß-ЦГТазы. Размер зрелой а-ЦГТазы составляет 687 аминокислот с молекулярной массой около 74 кДа. Размер зрелой ß-ЦГТазы составляет 684 аминокислоты с молекулярной массой около 74,5 кДа.

128

6. Показано, что уровень гомологии аминокислотных последовательностей лидерных пептидов ЦГТаз может служить критерием внутривидового родства сравниваемых групп микроорганизмов-продуцентов ЦГТаз.

7. Показано существование обособленных групп микроорганизмов-продуцентов ЦГТаз. Все сравниваемые a-, ß- и у-ЦГТазы из микроорганизмов родов Bacillus, Paenibacillus, Brevibacillus и Thermoanaerobacter имеют одного общего предка и являются результатом дивергенции, тогда как происхождение а-ЦГТазы Klebsiella pneumoniae имеет независимый и в то же время конвергентный характер.

8 . Наиболее существенные отличия первичной структуры между а- и ß-специфичными ЦГТазами выявлены в AI- и А2-субдоменах. В А1-субдомене а-ЦГТаз, по сравнению со сходной областью ß-ЦГТаз, характерна замена двух остатков цистеина на аргинин и на фенилаланин. В А2-субдомене а-ЦГТазы выявлены специфичные замены, а также инсерции ряда аминокислот и/или их блоков в высококонсервативных функционально-важных участках.

129

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Фермент циклодекстрин глюканотрансфераза, уникальность которого состоит в способности образовывать особые соединения, а. именно, циклодекстрины трех различных видов, имеет большое практическое значение. В связи с этим, ЦГТаза является объектом всесторонних исследований. Ко времени начала нашей работы были клонированы и определены нуклеотидные последовательности около десятка генов ЦГТаз с различной специфичностью. В настоящее время их число не превышает двадцати (вместе с изученными нами). Некоторые работы посвящены исследованиям влияния доменов, отдельных областей, а также каталитически активных аминокислот на специфичность действия фермента и другие его функции. Вместе с тем, имеющиеся сведения еще не позволяют приступить к целенаправленному созданию ферментов с желаемыми свойствами, в частности, высокоспецифичных по отношению к конечному продукту, что существенно снизило бы затраты на очистку и, соответственно, уменьшило стоимость цикл о декстринов.

В связи с этим, значительный интерес представлял сравнительный анализ структурных особенностей генов бациллярных ЦГТаз с различной специфичностью действия и выявление особенностей их организации, чему и посвящена наша работа. Необходимо отметить, что большинство исследователей (за исключением одной из лабораторий в Японии) имело в своем распоряжении не более одного клонированного штамма-продуцента ЦГТаз с разной специфичностью действия. В нашей лаборатории в векторах на основе фага лямбда в бактерии E.coli созданы геномные библиотеки двух видов бацилл - P.macerans и Bacillus sp. При скрининге этих библиотек выявлены и изолированы гены ЦГТаз, характеризующихся а- и ß-специфичностью действия. Определены полные нуклеотидные последовательности этих генов вместе с фланкирующими участками общей протяженностью более 5,5 тпн и зарегистрированы в международных

124 банках данных The EMBL Nucleotide DataBase Sequence, GenBank и SWISS

PROT.

Компьютерным анализом в секвенированных фрагментах нами были обнаружены открытые рамки считывания протяженностью 2142 пн, кодирующая полипептид размером 714 аминокислотных остатков для а-ЦГТазы и 2154 пн, кодирующая полипептид размером 718 аминокислотных остатков для ß-ЦГТазы. Были также идентифицированы участки, кодирующие лидерные пептиды, длиной 27 аминокислотных остатков для а-ЦГТазы и 34 аминокислотных остатка для ß-ЦГТазы. Определены молекулярные массы зрелой а-ЦГТазы P.macerans ИБ-7 и ß-ЦГТазы Bacillus sp. в.63., которые хорошо согласуются с ранее опубликованными данными. Лидерный пептид а-ЦГТазы P.macerans ИБ-7, сохраняя общий принцип организации, существенно отличается от такового у ß-ЦГТазы Bacillus sp. 6.6.3. Исходя из анализа аминокислотных последовательностей лидерных пептидов различных ЦГТаз предположено, что в силу своей низкой консервативности, они могут служить достаточно четким критерием внутривидового родства микроорганизмов-продуцентов ЦГТаз.

Проведенный в нашей работе анализ кодирующей области генов ЦГТаз P.macerans ИБ-7 и Bacillus sp. 6.6.3. продемонстрировал высокий уровень гомологии сравниваемых генов а-ЦГТаз (99,6%) и несколько более низкий - генов ß-ЦГТаз (91,0%). Уровень гомологии кодирующей области генов ЦГТаз с различной специфичностью (а и ß) не превышает 62-64%. Потриплетный анализ замен отдельных нуклеотидов в различных положениях кодонов генов а- и ß-ЦГТаз, приводящих к замене аминокислот, выявил, что наибольшее их количество приходится на замену первого-третьего нуклеотида, а также одновременную замену всех нуклеотидов кодонов.

Отдельный интерес представлял сравнительный анализ фланкирующих областей, прилегающих к генам ЦГТаз, в гораздо меньшей

125 степени подверженных давлению эволюционного отбора и имеющих более высокую степень дивергенции. При сравнении фланкирующих областей генов а-ЦГТаз секвенированного нами фрагмента ДНК P.macerans ИБ-7 с другими известными генами ЦГТаз B.macerans, обнаружено практически полное их совпадение, сопоставимое с уровнем гомологии (99,6%) кодирующих областей, что и следовало ожидать для близкородственных видов. При сравнении же 5'-фланкирующего участка гена [3-ЦГТазы Bacillus sp. 6.6.3. с генами ß-ЦГТаз внутри одной группы (В. licheniformis, Bacillus sp. ckl04 и В. circulans 8) было выявлено существенное расхождение в уровнях гомологии по сравнению с таковой кодирующих областей.

Был проанализирован также аминокислотный состав обеих исследованных ЦГТаз, выведенный на основе определенных нами нуклеотидных последовательностей. При этом установлено полное отсутствие остатков цистеина у а-ЦГТазы P.macerans ИБ-7 и низкое его содержание у ß-ЦГТазы Bacillus sp. 6.6.3.

Интересно было также сопоставить уровни гомологии всей молекулы различных ЦГТаз и их отдельных доменов, что позволило выявить некоторые закономерности. Так, для всего зрелого фермента характерно наличие 118 инвариантных аминокислот, присущих всем сравниваемым ЦГТазам. При этом, около 20% из них приходится на долю глицина. Наиболее высокой гомологией характеризуются А- и В-домены. В группе ß-специфичных ЦГТаз уровень гомологии всей длины молекулы варьирует от 97,7 до 59,8%), тогда как а-ЦГТаза P.macerans имеет более высокий уровень гомологии (66,4%) по сравнению с ß-ЦГТазой Bacillus sp. 6.6.3. Менее гомологична из них у-ЦГТаза Bacillus sp. DSM5850. Крайне низкий общий уровень гомологии характерен для ЦГТазы K.pneumoniae, однако, у нее все же имеются определенные участки с достаточно высоким уровнем гомологии, что, вероятно, может свидетельствовать о конвергентном

126 характере ее эволюции. На основе гомологии аминокислотных последовательностей зрелых ЦГТаз нами было построено филогенетического древо различных видов и штаммов микроорганизмов родов Bacillus, Paenibacillus, Brevibacillus, Thermoanaerobacter и Klebsiella, отражающее их родственные отношения.

Проведенный в нашей работе сравнительный анализ особенностей первичной структуры ос- и ß-ЦГТаз позволил выявить их специфические различия, наиболее существенные из которых обнаруживаются в А-домене. В А1-субдомене ß-ЦГТазы Bacillus sp. 6.6.3. и остальных ß-ЦГТазах локализованы два остатка цистеина, тогда как у а-ЦГТазы P.macerans ИБ-7, как и у большинства других а-ЦГТаз, они заменены в одном случае на аргинин и в другом - на фенилаланин. Поскольку цистеин участвует в образовании дисульфидных мостиков, то его отсутствие может привести к отличающейся конформации данной области молекул а-ЦГТаз. Большинство специфичных замен ряда аминокислот выявляются в высококонсервативных функционально-важных участках А2-субдомена. В то же время, в довольно вариабельных участках, но прилегающих к высококонсервативным (что может косвенно свидетельствовать об их влиянии на специфичность действия фермента), обнаруживаются характерные для а-специфичных ЦГТаз блоки аминокислот, отсутствующие в ß-ЦГТазах.

Таким образом, сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей генов а- и ß-ЦГТаз, а также аминокислотных последовательностей кодируемых ими ферментов, позволил выявить специфические закономерности их структурной организации, которые выражаются как в существовании высокогомологичных участков, так и в заменах нуклеотидов и аминокислот, что позволяет приблизиться к более полному пониманию структурных особенностей ферментов циклодекстрин глюканотрансфераз и их влиянию на специфичность действия фермента.

127

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Бикбулатова, Светлана Магнитовна, 1998 год

1. Абелян В. А., Адамян М.О., Абелян JI.A., Балаян A.M., Африкян Э.К. Новая цикломальтодекстрин глюканотрансфераза из галофильных бактерий // Биохимия. 1995. - Т. 60, вып. 6. - С. 891-897.

2. Абелян В. А., Адамян М.О., Абелян JI.A. Модель действия цикломальтодекстрин глюканотрансферазы галофильных бацилл // Биохимия. 1995а. - Т. 60, вып. 6, - С. 898-904.

3. Грачева И.М., Гернет М.В. Биохимические и физико-химические свойства амилаз и циклизующих ферментов, механизм образования циклодекстринов // Итоги науки и техники. Сер. Микробиология. 1988. -Т. 20. - С. 53-96.

4. Дихтярев С.И., Штейнгарт М.В., Чайка JI.A. Медико биологические характеристики циклодекстринов и применение их в медицине // Итоги науки и техники. Сер. Микробиология. - 1988. - Т. 20. - С. 97-136.

5. Егоров Н.С., Кестнер А.И., Вокк P.A. История исследования циклодекстринов, свойства и область их применения // Итоги науки и техники. Сер. Микробиология. 1988. - Т. 20. - С. 4-52.

6. Егоров Н.С., Грачева И.М., Ботвинко И.В., Кушакова Е.Е. Микроорганизмы продуценты циклизующих ферментов, амилаз и гликозилтрансфераз, особенности их культивирования // Итоги, науки и техники. Сер. Микробиология. - 1988. - Т. 21, часть II. - С. 3-73.

7. Кестнер А.И., Пальм Т.Б. Применение циклодекстринов в биотехнологии и пищевой промышленности // Итоги науки и техники. Сер. Микробиология. 1988. - Т. 21, часть II. - С. 128-157.

8. Логинов О.Н. Физиолого-биохимические свойства представителей вида Bacillus macerans продуцентов ЦГТазы: Дис. . канд. биол. наук. -Уфа, 1990.- 107 с.130

9. Паппель К.Э., Дихтярев СИ., Сугробова Н.П. Особенности получения циклодекстринов и образование комплексов включения // Итоги науки и техники. Сер. Микробиология. 1988. - Т. 21, часть II. - С. 74-127.

10. У санов Н.Г., Логинов О.Н., Мелентьев А.И. Синтез циклодекстрин глюканотрансфераз микроорганизмами, утилизирующими циклодекстрины в качестве единственного источника углерода // Доклады Академии наук СССР.- 1990.-Т. 310, №6.-С. 1489-1492.

11. Усанов Н.Г., Логинов О.Н., Мелентьев А.И. Способ выделения бактерий Bacillus macerans из почв // Патент SU N. 1703681 AI. 1990.

12. Усанов Н.Г., Логинов О.Н., Мелентьев А.И. Штамм бактерий Bacillus sp. продуцент ß-циклодекстрин глюканотрансферазы // Патент SU N.1738852. - 1993.

13. Чемерис A.B., Ахунов Э.Д., Куликов А.М., Вахитов В.А. Прогрессивная тетра/окта стратегия секвенирования протяженных фрагментов ДНК // Тез. международной конференции, посвященной памяти ак. A.A. Баева. Москва, 1996. - С. 134.

14. Abe S., Nagamine Y., Omichi К., Ikenaka Т. Investigation of the active site of Bacillus macerans cyclodextrin glycosyltransferase by use of modified maltooligosaccharides II J. Biochem. 1991. - V. 110. - P. 756-761.

15. Allenza Р., Clifft C.G., Morrell M.J. Novel Bacillus and Pseudomonas for manufacturing cyclodextrin glycosyltransferase II U.S. Patent Appl. N. 5008195. -1991.

16. Bender H. Cyclodextrin-glucanotransferase von Klebsiella pneumoniae. 1. Synthese, reinigung und eigenschaften des enzyms von К pneumoniae M5al II Arch. Microbiol. 1977.-V. 111. - P. 271-282.

17. Bender H. Enzymology of the cyclodextrins // In: Proceedings of the First International Symposium on Cyclodextrins (Szejtli J., Ed.). Dordrecht, Reidel Publishing Company. - 1982. - P. 77-87.

18. Bender H. Studies of the inhibition by malto-oligosaccharides of the cyclisation reaction catalyzed by the cyclodextrin glycosyltransferase from Klebsiella pneumoniae M5al with glycogen // Carbohydr. Res. 1985. - V. 135. -P. 291-302.

19. Bender H. Production, characterization and application of cyclodextrins // In: Advances in Biotechnological Processes (Mizrahi A., Ed.). New York, Liss Incorporation. - 1986. - P. 31-71.

20. Bender H. Molecular structure and reaction mechanism of cyclodextrin glycosyltransferases // In: Minutes of the Fifth International Symposium of Cyclodextrins (Duchene D., Ed.). Dordrecht, Kluwer Academic Publishers. -1990a.-P. 39-45.

21. Bender H. On the role of histidine residues in cyclodextrin glycosyltransferase: chemical modification with diethylpyrocarbonate // Carbohydr. Res. 1991. - V. 209. - P. 145-153.132

22. Binder F, Huber O, Bock A. Cyclodextrin-glycosyltransferase from Klebsiella pneumoniae strain M5al: cloning, nucleotide sequence and expression // Gene. 1986. - V. 47. - P. 269-277.

23. Boocock G, Camilleri P. (3-cyclodextrin inclusion complex of mevinphos // J. Agriculture and Food Chem. 1985. - V. 33, N.6. - P. 1032-1034.

24. Bovetto L.J, Villette J.R, Fontaine I.F, Sicard P.J, Bouquelet S.J-L. Cyclomaltodextrin glucanotransferase from Bacillus circulans E 192. II. Action patterns // Biotechnol. Appl. Biochem. 1992.89rniojim - V. 15. - P. 59-68.

25. Clewel D.B, Helinski D.R. Supercoiled circular DNA-protein complex in E.coli: purification and induced conversion to an open circular DNA form // Proc. Natl. Acad. USA. 1969. - V. 62, N. 4. - P. 1159-1166.

26. Chung K.H.S, Im S.H.I, Song S.K.S, Lee K.M.L., Kwak H.S.K., Lee S.Y.L. Cyclodextrin glycosyltransferase of Bacillus sp. ckl04 and its structural gene / Dep. in GenBank. Accession number L25256. - 1993.

27. DePinto J.A, Campbell L.L. Formation and degradation of cyclic dextrins by intracellular enzymes of Bacillus macerans // Science. 1964. - V. 146. -P. 1064-1066.

28. DePinto J.A, Campbell L.L. Purification and properties of the cyclodextrinase of Bacillus macerans // Biochemistry. 1968. - V. 7. - P. 121-125.

29. Duchene D. Cyclodextrins and their industrial uses. Edition de Sante, Paris. -1987.-439 pp.

30. Farber G.K, Petsko G.A. The evolution of a/(3 barrel enzymes // TIBS. -1990.-V. 15.-P. 228-234.

31. French D. The Schardinger dextrins // Adv.Carbohydr. Chem. 1957. -V. 12.-P. 189-261.

32. French D, Levine M.L, Norberg E, Pazur J.H, Wild M.G. Studies on Schardinger dextrins. VIII. Cosubstrate specificity in coupling reactions of Macerans-Amylase // J. Am. Chem. Soc. 1954. - V. 76. - P. 2387-2390.133

33. Fujita Y., Tsubouchi H., Inagi Y., Tomita K., Ozaki A., Nakanishi K. Purification and properties of cyclodexrin glycosyltransferase from Bacillus sp. Al-6 // J. Ferment. Bioeng. 1990. - Y. 70. - P. 150-154.

34. Fujiwara S., Kakihara H., Sakaguchi K., Imanaka T. Analysis of mutation in cyclodextrin glucanotransferase from Bacillus stearothermophilus which affect cyclization characteristics and thermostability // J. Bacteriol. 1992a. - V. 174. -P. 7478-7481.

35. Graham D.E. The isolation of high molecular weight DNA from whole organisms or large tissue masses // Anal. Biochem. 1978. - V. 78. - P. 673-678.

36. Haga K., Harata K., Nakamura A., Yamane K. Crystallization and preliminary X-ray studies of cyclodextrin glucanotransferase from alkalophilic Bacillus sp. 1011 //J. Mol. Biol. 1994.-V. 237. - P. 163-164.

37. Hamada H., Saito K., Mikuni K., Kuwahara N., Takahashi H. Cyclodextrin inclusion complex of taxol, and method for its production and its use // Patent USAN. 5684169.- 1997.

38. Hatae S., Nakashima K. Whitening cosmetic // Patent USA N. 4847074.1989.

39. Hicks K.B., Gerald M., Seib P.A. Process for preserving raw fruit and vegetable juices using cyclodextrins and compositions thereof // Patent USA N. 4975293. 1990.134

40. Hill D.E., Aldape R., Rozzell J.D. Nucleotide sequence of a cyclodextrin glycosyltransferase gene, cgtA, from Bacillus licheniformis II Nucl. Acids Res. -1990.-V. 18.-P. 199.

41. Hirai H., Toshima N., Venoyama S. Inclusion complex formation of y-cyclodextrin. One host two guests complexation with water - soluble dyes in ground state // Bull. Chemical Society of Japan. - 1985. - V. 58, N. 4. - P. 11561164.

42. Hofmann B.E., Bender H., Schulz G.E. Three-dimensional structure of cyclodextrin glycosyltransferase from Bacillus circulans at 3.4 A resolution // J. Mol. Biol. 1989. - V. 209. - P. 793-800.

43. Hokse H. Analysis of cyclodextrins by high-performance liquid chromatography // J.Chromatogr. 1980. - V. 189. - P. 98-100.

44. Horikoshi K. Enzymology and molecular genetics of CD-forming enzymes // In: Proceedings of the Fourth International Symposium on Cyclodextrins (Huber O., Szejtli J., Eds). Dordrecht, Kluwer Academic Publishers. - 1988. - P. 7-17.

45. Horikoshi K. Cyclomaltodextrin glucanotransferase, process for its preparation and novel microorganism useful for the process // Eur. Patent Appl. N. 327 099. 1989.

46. Jalonen H., Heikkila T.M., Kangas L.V., Lammintausta R.A. Drag formulations for parenteral use // Patent USA N. 5571534. 1996.

47. Janecec S. New conserved amino asid region of a-amylase in the third loop of their (b6 OJIAMs-barrel domains // Biochem. J. 1992. - V. 288. - P. 1069-1075.

48. Janecec S., Svensson B., Henrissat B. Domain evolution in the a-amylase family // J. Molecular Evolution. 1997.- V. 45. - P. 322-331.135

49. Jeang C.-l., Lin Y.-W. Evidens for the presens of essetional histidines on cyclodextrin glucanotransferase from Bacillus macerans II Biotechnol. Appl. Biochem. 1994. - V. 19. - P. 85-92.

50. Jespersen H.M., MacGregor E.A., Sierks M.R., Svensson B. Comparison of the domain-level organization of starch hydrolases and related enzymes // Biochem. J. 1991. - V. 280. - P. 51-55.

51. Joergensen S.T., Starnes R.L., Amemiya K., Jorgensen P.L. Thermostable cyclodextrin glycosyltransferase from Thermoanaerobacter sp.: cloning, nucleotide sequence and expression in Escherichia coli / Dep. in GenBanlc. -1997. Accession number Z35484.

52. Kaneko T., Hamamoto T., Horikoshi K. Molecular cloning and nucleotide sequence of the cyclomaltodextrin glucanotransferase gene from the alkalophilic Bacillus sp. strain no. 38-2 // J. Gen. Microbiol. 1988. - V. 134. - P. 97-105.

53. Kaneko T., Kudo T., Horikoshi K. Comparison of CD compositions produced by chimeric CGTases // Agric. Biol. Chem. 1990. - V. 54, N. 1. -P. 197-201.

54. Kaneko T., Yoshida M., Yamamoto M., Nakamura N., Horikoshi K. Production of cyclodextrins by simultaneous action of two CGTases from three strains of Bacillus II Starch/Starke 1990a. - V. 42. - P. 277-281.

55. Karatani H. Effects of cyclodextrin on enhancement for chemiluminescence of the luminol related compound // Chem.Lett. 1986. - V. 3.- P. 377-380.

56. Kato T., Horikoshi K. A new y-cyclodextrin forming enzyme produced by Bacillus sub til is No. 313 //J. Jpn. Soc. Starch Sei. 1986. -V. 33. - P. 137-143.

57. Kato T., Horikoshi K. Cloning and expression of the Bacillus subtilis No. 313. y-cyclodextrin forming CGTase gene in Escherichia coli II Agric. Biol. Chem.- 1986a.-V. 50. -P. 2161-2162.

58. Kim M., Sohn C.B., Oh T.K. Cyclodextrin glycosyltransferase of Brevibacillus brevis CD162 and its structural gene / Dep. in GenBank. 1998. -Accession number AF011388.

59. Kimura K., Takano T., Yamane K. Molecular cloning of the ß-cyclodextrin synthetase gene from an alkalophilic Bacillus and its expression in Escherichia coli and Bacillus subtilis II Appl. Microbiol. Biotechnol. 1987. - V. 26. - P. 149-153.

60. Kimura K., Kataoka S., Ishii Y., Takano T., Yamane K. Nucleotide sequence of the ß-cyclodextrin glucanotransferase gene of alkalophilic Bacillus sp. II Bacteriol. 1987a. -V. 169. - P. 4399-4402.

61. Kitahata S. Cyclodextrin glucanotransferase. / Handbook of Amylases and Related Enzymes (The Amylase Research Society in Japan, Ed.). Oxford, Pergamon Press. - 1988. - P. 154-164.

62. Kitahata S., Okada S. Action of cyclodextrin glycosyltransferase from Bacillus megaterium strain no.5 on starch // Agric. Biol. Chem. 1974. - V. 38. -P. 2413-2417.137

63. Kitahata S., Okada S. Studies on cyclodextrin gly cosy transferase. IV. Enzymatic synthesis of 3-O-a-D-glucopyranosyl-L-sorbose and 4-0-oc-D-glucopyranosyl-D-xylose using cyclodextrin glycosyltransferase // J. Biochem-1976.-V. 79. P. 641-648.

64. Kitahata S., Okada S. Comparison of action of cyclodextrin glucanotransferase from Bacillus megaterium, B. circulans, B. stearothermophilus and B. macerans //J. Jap.Soc. Starch Sci. 1982. - V. 29. - P. 13-18.

65. Kitahata S., Tsuyama N., Okada S. Purification and some properties of cyclodextrin glycosyltransferase from a strain of Bacillus species II Agric. Biol. Chem. 1974. - V. 38. - P. 387-393.

66. Kitahata S., Okada S., Fukui T. Acceptor specificity of the transglycosylation catalyzed by cyclodextrin glycosyltransferase // Agric. Biol. Chem. 1978. - V. 42. - P. 2369-2374.

67. Klein C., Schulz G.E. Structure of cyclodextrin glycosyltransferase refined at 2.0 A resolution // J. Mol. Biol. 1991. - V. 217. - P. 737-750.

68. Klein C., Hollender J., Bender H., Schulz G.E. Catalytic center of cyclodextrin glycosyltransferase derived from X-ray structure analysis combined with site-directed mutagenesis // Biochemistry. 1992. - V. 31. - P. 8740-8746.

69. Konig M. Substituted cyclodextrins and process for chromatographic separation of chiral organic compounds // Patent USA N. 5198429. 1993.

70. Kobayashi S., Kainuma K., Suzuki S. Purification and some properties of Bacillus macerans cyclodextrin glycosyltransferase // Carbohydr. Res.-1978. -V. 61.-P. 229-238.

71. Kubota M., Mikami B., Tsujisaka Y., Morita Y. Crystallization of and preliminary crystallographic data for Bacillus stearothermophilus cyclodextrin138glucanotransferase // J. Biochem. 1988. - V. 104. - P. 12-13.

72. Kubota M., Matsuura Y., Sakai S., Katsube Y. Crystal structure of cyclodextrin glucanotransferase from Bacillus stearothermophilus // Protein Eng. -1990. -V. 3. P. 328-329.

73. MacGregor E.A. Relationships between structure and activity in the a-amylase family of starch-metabolising enzymes // Starch/Starke. 1993. - V. 45. - P. 232-237.

74. Makela M.J. Biotechnological production of cyclodextrins. Academic Diss. Dep. of Biochem. University of Turku. Finland. 1990. - 59 pp.139

75. Makela M, Mattsson P, Schinina M.E, Korpela T. Purification and properties of cyclomaltodextrin glucanotransferase from an. alkalophilic Bacillus //Biotechnol. Appl. Biochem. 1988. - V. 10. - P. 414-427.

76. Matsuda H, Ito K, Taki A, Uejima O. Cosmetic composition containing inclusion product with hydroxyalkylated cyclodextrin // Patent USA N. 5447920. 1995.

77. Matsuura Y, Kusunoki M, Harada W, Kakudo M. Structure and possible catalytic residues of TAKA-amylase A // J. Biochem.-1984. V. 95. - P.697-702.

78. Mattsson P. The structure-function relationships of cyclomaltodextrin glucanotransferase from Basillus circulans var. alkalophilus / Turun Yliopisto, Turku. 1994.-P. 1-74.

79. Mattsson P, Pohjalainen T, Korpela T. Chemical modification of cyclomaltodextrin glucanotransferase from Basillus circulans var. alkalophilus // Biochim. Biophys Acta. 1992. - V. 1122. - P. 33-40.

80. Mazomenos B., Moustakali-Mavridis I. Inclusion complexes of cyclodextrin and their use in slow release formulations for attracting insects // Patent USA N. 5650160. 1997.

81. Molecular cloning and nucleotide sequence of the y-cyclomaltodextrin glucanotransferase gene from Basillus sp. DSM5850 / Dep. in GenBank. Patent WO 9114770-A/l. - 1993.

82. Mori S, Hirose S., Oya T, Kitahata S. Purification and properties of cyclodextrin glucanotransferase from Brevibacterium sp. No 9605 // Biosci. Biotech. Biochem. 1994.-V. 58, N. 11. - P. 1968-1972.

83. Mori S, Goto M, Mase T, Matsuura A, Oya T, Kitahata S. Reaction conditions for the production of y-cyclodextrin by cyclodextrin glucanotransferase from Brevibacterium sp. No 9605 // Biosci. Biotech. Biochem. 1995. - V. 59, N. 6. - P. 1012-1015.

84. Nakajiama A. A study of the system of pyrene and |3-cyclodextrin in aqueous solution utilizing the intensity enhancement phenomenon // Spectrochim Acta. Part A. 1983. -V. 39 A,N. 10. - P. 913-915.140

85. Nakamura N., Horikoski K. Purification and properties of cyclodextrin glycosyltransferase of an alkalophilic Bacillus sp. // Agric. Biol. Chem. 1976a.- V. 40. P. 935-941.

86. Nakamura N., Horikoski K. Purification and properties of neutral-cyclodextrin glycosyltransferase of an alkalophilic Bacillus sp. // Agric. Biol. Chem. 1976b. - V. 40. - P. 1785-1791.

87. Nakamura N., Horikoski K. Characterization of acid-cyclodextrin glycosyltransferase of an alkalophilic Bacillus sp. //Agric. Biol. Chem. 1976c.- V. 40. P. 1647-1648.

88. Nohr R.S., MacDonald J.G. Ink for ink jet printers. // Patent USA N. 5681380. 1997.

89. Pitha M. Pharmaceutical preparations containing cyclodextrin derivatives // Patent USA N. 4727064. 1988.

90. Pongsawasdi P., Yagisawa M. Screening and identification of a cyclomalto-dextrin glucanotransferase-producing bacteria // J. Ferment. Technol. 1987. -V. 65. - P.463-467.

91. Richardson J.S. The anatomy and taxonomy of protein structures // Adv. Protein Chem. 1981. - V. 34. - P. 167-339.

92. Saenger W. Cyclodextrin inclusion compounds in research and industry // Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1980. - V. 19. - P. 344-362.

93. Sakai S., Kubota M., Yamamoto K., Nakada T., Torigoe K., Ando O., Sugimoto T. Cloning of cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) genes from Bacillus stearothermophilus and Bacillus macerans //Denpun Kagaku 1987. -V. 34. - P. 140-147.

94. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular cloning: A laboratory manual, 2nd edn. 1989. - Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York, Cold Spring Harbor.

95. Sanger F., Nicklen S., Coulson A.R. DNA sequencing with chain-termination inhibitors // Proc. Nat. Acad. Sci. 1977. - V. 74. - P. 5463-5467.

96. Sato M., Yagi Y., Nagano H., Ishikura T. Determination of CGTase from Bacillus ohbensis and its optimum pH using HPLC // Agric. Biol. Chem. 1985. -V. 49.-P. 1189-1191.

97. Sato M., Yagi Y. Properties of CGTases from three types of Bacillus and production of cyclodextrins by the enzymes // ACS Symp. Ser. 1991. - V. 458. -P. 125-137.

98. Schardinger F. Bacillus macerans, ein aceton bildender Rottebacillus // Zbl. Bacteriol. Parasitenkunde. 1904. - V. 14. - P. 772-775.142

99. Schmid G. Cyclodextrin glycosyltransferase production: yield enhancement by overexpression of cloned genes // Trends. Biotechnol. 1989.1. V. 7. P. 244-248.

100. Schwimmer S., Garibaldi A.J. Further studies of the production, purification and properties of the Schardinger dextrinogenase of Bacillus macerans II Cereal Chem. 1952. - V. 29, N. 1. - P. 108-122.

101. Sealey P.G., Southern E.M. Gel electrophoresis of DNA / Gel electrophoresis of nucleic acids. A practical approach. IRL Press, Oxford. -1982. - P. 39-76.

102. Shaw P.E., Tatum J.N., Wilson C.W. Improved flavor of naval orange and grapefruit juices by removal of bitter components with cyclodextrin polymer // J. Agri. Food Chem. 1984. - V. 32. - P. 832-836.

103. Shibanai I., Horikoshi K., Nakamura A. Fragrant synthetic resin product and method of producing the same // Patent USA N. 4356115. 1981.

104. Shiosaka M. Cyclodextrin-glycosiltransferase und Verfahren zu ihrer herstellung // Germ. Patent N. 2 447 132. 1975.

105. Sin K.A., Nakamura A., Kobayashi K., Masaki H., Uozumi T. Cloning and sequencing of a cyclodextrin glucanotransferase gene from Bacillus ohbensis and its expression in Escherichia coli II Appl. Microbiol. Biotech.-1991. V. 35. -P. 600-605.

106. Sin K.A., Nakamura A., Masaki H., Matsuura Y., Uozumi T. Replacement of an amino acid residue of cyclodextrin glucanotransferase of Bacillus ohbensis143doubles the production of y-cyclodextrin // J. Biotechnol.-1994. V. 32. - P. 283288.

107. Singleton R.J., Middaugh C.R., MacElroy R.D. Comparison of proteins from thermophilic sources in terms of structural parameters inferred from amino acid composition // Int. J. Peptide Protein Res. 1977. - V. 10, N. 1. - P. 39-50.

108. Starnes R.L. Industrial potential of cyclodextrin glycosyltransferase // Cereal Foods World. 1990. - V. 35. - P. 1094-1099.

109. Starnes R.L., Flint V.M. Thermostable cyclodextrin glycosyltransferase from the genus Clostridium // In: Minutes of the Sixth International Symposium on Cyclodextrins (Hedges A.R., Ed.). Paris, Editions de Sante. - 1992. - P. 3945.

110. Stavn A., Granum P.E. Purification and physicochemical properties of an extracellular cycloamylose (cyclodextrin) glucanotransferase from Bacillus macerans //Carbohydr. Res. 1979. - V. 75. - P. 243-250.

111. Svensson B. Regional distant sequence homology between amylases, a-glucosidases and transglucanosylases // FEBS Lett. 1988. - V. 230. - P. 72-76.

112. Svensson B. Protein engineering in the a-amylase family: catalytic mechanism, substrate specificity, and stability // Plant Mol. Biol. 1994. - V. 25. -P. 141-157.144

113. Svensson B, Jespersen H, Sierks M.R, MacGregor E.A. Sequence homology between putative raw-starch binding domains from different starch-degrading enzymes // Biochem. J. 1989. - V. 264. - P. 309-311.

114. Sugimoto T., Kubota M, Sakai S. // Patent UK N. 2169902, P31835.1993.

115. Szejtli J. Cyclodextrins and their inclusion complexes. Budapest. Akademiai Kiado. 1982. - 296 pp.

116. Szejtli J. Cyclodextrins: a new group of industrial basic materials // Nahrung. 1985. - V. 29, N. 9. - P. 911-924.

117. Szejtli J. The metabolism, toxicity and biological effects of cyclodextrins / Cyclodextrins and their industrial uses. Paris. 1987. - P. 173-182.

118. Szejtli J. Cyclodextrin technology. Dordrecht, Kluwer Academic Publishers. 1988. -450 pp.

119. Szejtli J, Szente L., Banky-Elod E. Molecular encapsulation of volatile, easily oxidisable labile flavour substances by cyclodextrins // Acta Chimica Academiae Scientiarum Hungaricae. 1979. - V. 101, N. 1-2. - P. 27-46.

120. Szente L, Szejtli J. Molecular encapsulation of natural and synthetic coffee flavor with beta-cyclodextrin // J. Food Sci. 1986. - V. 51, N. 4. -P. 1024-1027.

121. Szokonya L, Dallas P.S, Budai M.Z, Denes M.J, Marton F, Marton G. Removel of solvent vapours from air by absorption in aqueous solution of beta -cyclodextrin // Hungarian J. Industrial Chem. 1984. - V. 12, N. 2. - P. 185-191.

122. Takano T, Fukuda M, Monma M, Kobayashi S, Kainuma K,, Yamane K. Molecular cloning, DNA nucleotide sequencing and expression in Bacillus macerans cyclodextrin glycosyltransferase gene // J. Bacteriol. 1986. - V. 166. -P. 1118-1122.

123. Takano T, Miyauchi A, Takagi H, Kadowaki K, Yamane K, Kobayashi S. Expression of the cyclodextrin glucanotransferase gene of Bacillus macerans in Bacillus brevis //Biosci. Biotech. Biochem. 1992. - V. 56. - P. 808-809.145

124. Terada Y., Yanase M., Tacata H., Tacata T., Ocada S. Cyclodextrins are not the major cyclic a-1,4-glucans produced by the initial action of cyclodextrin glucanotransferase on amylase // J. Biol. Chem. 1997. - V. 272, N. 25. - P.15729-15733.

125. Thoma I.A., Stewart L. Starch: Chemistry and technology fundamental aspects // L. Acad.Press. 1965. - V 1. - P. 209-249.

126. Tilden E.B., Hudson C.S. The conversion of starch to crystalline dextrins by the action of a new type of amylase separated from the culture of Aerobacillus macerans // J.Amer.Chem Soc. 1939. - V. 63. - P. 2900-2902.

127. Tilden E.B., Hudson C.S. Preparation and properties of the amylases produced by Bacillus macerans and Bacillus polymyxa // J. Bacteriol. — 1942. -V. 43.-P. 527-544.

128. Tomita K., Tanaka T., Fujita Y., Nakanishi K. Some factors affecting the formation of y-cyclodextrin using cyclodextrin glycosyltransferase from Bacillus sp. AL-6 // J. Ferment. Bioeng. 1990. - V. 70. - P. 190-192.

129. Vandamme E.J., Declercq C., Debonne I. Dynamics of the Bacillus circulans var. alkalophilus cyclodextrin-glucosyltransferase fermentation // In: Proceedings of the Third European Congress on Biotechnology. Weinheim, Verlag-Chemie. -1984.-P. 327-332.

130. Villiers M.A. Sur la fermentation de la fecule par laction du ferment butyrique // Comptes Rendus Hendomadaires des Seances de L'Academio des Sciences. 1891.-V. 112,N. 10. - P. 536-538.

131. Wilson E.J., Schoch T.J., Hudson C.S. The action of Bacillus macerans amylase on the fractions from starch // J.Amer.Chem.Soc. 1943. - V.65, N. 7. -P. 1380-1382.146

132. Yagi Y., Kouno K., Inui T. A process for producing cyclodextrins // Eur Patent Appl. N. 17 242. 1980.

133. Yagi Y., Sato ML, Ishikure T. Comparison of CGTases from Bacillus ohhensis, Bacillus macerans and Bacillus circulans and production of cyclodextrins using these CGTases // J. Jpn. Soc. Starch Sci. 1986. - V. 33, N. 2.-P. 144-151.

134. Yu E.K.C., Aoki H., Mizawa M. Specific alpha-cyclodextrin production by a novel thermostable cyclodextrin glycosyltransferase // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1988. - V. 28. - P. 377-379.

135. Zsadon B., Otta K.H., Tudos F., Szejtli J. Separation of cyclodextrins by high performance liquid chromatography // J. Chromatogr. 1977. - V. 172. -P. 490-492.