Стандартизация препарата "Элима" и его сырьевых источников, плодов рябины и листьев крапивы по содержанию флавоноидов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук Матющенко, Наталья Владимировна

• Матющенко, Наталья Владимировна
• кандидат фармацевтических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Матющенко, Наталья Владимировна

Введение.

ГЛАВА I. Характеристика флавоноидов с позиций их фармакологического действия и изменчивости содержания. Стандартизация лекарственного растительного сырья и фитопрепаратов по содержанию флавоноидов (обзор литературы).

1.1 Некоторые аспекты фармакологический активности флавоноидов

1.1.1. Антиоксидантная активность флавоноидов.

1.2. Изменчивость содержания флавоноидов в растениях и лекарственном растительном сырье под влиянием различных факторов.

1.3. Стандартизация лекарственного растительного сырья и препаратов по содержанию флавоноидов.

1.3.1. Фармакопейные методы обнаружения и количественного определения флавоноидов в лекарственном растительном сырье

1.3.2. Фармакопейные методы стандартизации фитопрепаратов по содержанию флавоноидов.

1.3.3. Практика и перспективы применения методов дифференциальной спектрофотометрии и ВЭЖХ для определения флавоноид-содержащих препаратов и сырья.

ГЛАВА II. Разработка методик количественного определения флавоноидов в препарате "Элима" и в его сырьевых источниках -плодах рябины и листьях крапивы.

2.1. Разработка методики количественного определения флавоноидов в препарате "Элима".

2.1.1. Изменение количественного содержания флавоноидов в процессе хранения препарата "Элима".

2.2. Разработка методики количественного определения флавоноидов в плодах рябины.

2.3. Разработка методики количественного определения флавоноидов в листьях крапивы.

ГЛАВА III. Сравнительный анализ содержания биологически активных веществ лекарственного растительного сырья викарного и официнального видов рябины и крапивы.

3.1. Сравнение биологически активных комплексов сырья рябины амурской и рябины обыкновенной.

3.2. Сравнение сырья крапивы узколистной и крапивы двудомной по содержанию флавоноидов и оксикоричных кислот.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Стандартизация препарата "Элима" и его сырьевых источников, плодов рябины и листьев крапивы по содержанию флавоноидов»

Актуальность темы. В Дальневосточном государственном медицинском университете разработан новый многокомпонентный препарат "Элима" на основе лекарственных растений Дальнего Востока. Решение задач стандартизации является необходимым условием для введения в практику нового лекарственного средства.

Наиболее объективна стандартизация фитопрепаратов по содержанию биологически активных веществ (БАВ), обеспечивающих фармакологическую активность. Согласно литературным и оригинальным данным элима и ее сырьевые источники содержат флавоноиды, которым свойственны такие фармакологические эффекты, как антиоксидантный и антигипоксантный. Это обстоятельство делает обоснованным определение содержания флавоноидов в препарате*.

Для стандартизации препаратов по содержанию флавоноидов применяются преимущественно такие методы анализа, как спектрофотометрия и хроматография. Спектрофотометрический метод достаточно прост в исполнении, является высокочувствительным, относительно недорогим, что делает его предпочтительным для использования при анализе в контрольно-аналитических лабораториях. Применение дифференциального варианта спектрофотометрии позволяет определять флавоноиды в присутствии сопутствующих веществ.

Одним из принципов современной стандартизации является сквозная стандартизация, при которой по содержанию одних и тех же веществ оценивается и сырье, и препарат на его основе. Поэтому разработка методик количественного определения флавоноидов в сырьевых источниках препарата - плодах рябины и листьях крапивы также представляется актуальной. Примечание. Основным сырьевым источником препарата "Элима" является элеутерококк, поэтому стандартизация препарата проводится также по содержанию элеутерозида В.

Следует подчеркнуть, что дальневосточные виды крапивы и рябины на сегодняшний день не являются официнальными, и введение их в соответствующие нормативные документы представляет важную задачу в масштабах региона и федерации в целом.

К вопросам стандартизации, в широком смысле этого слова, можно отнести также и изучение влияния различных факторов на количество действующих веществ в растениях. Определение динамики накопления веществ, изменений, происходящих в процессе сушки и хранения сырья, служит обоснованием для рекомендаций по заготовке и соответствующих разделов нормативных документов.

Таким образом, разработка методик количественного определения действующих веществ в препарате, введение в практику дополнительных источников сырья и оценка их качества, а также изучение влияния ряда факторов на содержание БАВ в сырьевых источниках является актуальной задачей в научном и практическом отношении.

Цель и задачи исследования. Цель исследований - разработка методик стандартизации препарата "Элима", листьев крапивы и плодов рябины по содержанию флавоноидов, а также обоснование введения в фармацевтическую практику викарных видов - крапивы узколистной и рябины амурской.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи: разработать методики количественного определения флавоноидов и обосновать нормативы их содержания в препарате, в плодах рябины и листьях крапивы;

- изучить изменчивость содержания флавоноидов в препарате "Элима" в процессе хранения;

- провести сравнительный анализ сырья рябины амурской и рябины обыкновенной по содержанию основных групп БАВ; провести сравнительный анализ сырья крапивы узколистной и крапивы двудомной по содержанию флавоноидов и оксикоричных кислот; оценить изменчивость химического состава плодов рябины и листьев крапивы под влиянием сушки, хранения и в зависимости от сроков сбора сырья.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтической науки. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научных исследований Дальневосточного государственного медицинского университета. Тема работы утверждена на заседании научно-плановой комиссии (протокол №4 от 25.12.2000 г.).

Научная новизна. На основании результатов исследований обоснованы методики количественного определения и нормативы содержания флавоноидов в препарате "Элима", плодах рябины и листьях крапивы. Определена изменчивость количества флавоноидов в препарате в процессе хранения.

Впервые проведен сравнительный анализ сырья рябины амурской и официнального вида по содержанию 7 групп БАВ и экстрактивным веществам. Проведено сравнение сырья викарного вида крапивы с официнальным по содержанию флавоноидов и оксикоричных кислот. Изучены УФ-спектры экстрактов викарных и официнальных видов рябины и крапивы.

Впервые проведено изучение влияния процесса созревания на содержание действующих веществ в плодах рябины амурской. Изучена динамика содержания флавоноидов и оксикоричных кислот в крапиве узколистной. Установлено влияние видов и режимов сушки на содержание БАВ в плодах рябины и листьях крапивы.

Практическая значимость работы. Методика определения количественного содержания флавоноидов в препарате "Элима" и норматив их содержания включены в ФСП 42-0281-1220-01 и внедрены в работу предприятия-изготовителя лекарственного средства.

Разработанные методики количественного определения и нормативы содержания флавоноидов в сырье рябины и крапивы предложены для включения в соответствующие фармакопейные статьи.

Показана равноценность сырья рябины амурской и р. обыкновенной, что обосновывает практическое использование дальневосточного вида наряду с европейским.

Даны рекомендации по срокам сбора сырья рябины амурской и крапивы узколистной. Рекомендованы оптимальные способы и режимы сушки плодов рябины и листьев крапивы.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы представлены на региональной научно-практической конференции "Клиническая фармакология на Дальнем Востоке" (Хабаровск, 29-30 мая 2001 г.); Международной научной конференции "Азиатско-тихоокеанский регион в глобальной политике, экономике и культуре XXI века" (Хабаровск, 22-23 сентября 2002 г.); Юбилейной 60-й научной конференции студентов и молодых ученых "Актуальные вопросы современной медицины" (Хабаровск, апрель 2003 г.); Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 65-летию Хабаровского края "Природные ресурсы Хабаровского края: проблемы науки и образования" (Хабаровск, 11-12 ноября 2003 г.); межкафедральной научной конференции ДВГМУ (Хабаровск, 29 декабря 2003 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 работ.

Основные положения, выносимые на защиту: обоснование методики количественного определения флавоноидов и норматива их содержания в препарате "Элима"; данные по изменчивости содержания флавоноидов в препарате в процессе хранения; обоснование методик количественного определения флавоноидов и нормативов их содержания в плодах рябины и листьях крапивы; результаты сравнительного анализа количественного содержания действующих веществ в сырье викарных и официнальных видов рябины и крапивы; данные по изменчивости содержания БАВ в плодах рябины амурской и крапивы узколистной под влиянием фенофаз, способов и режимов сушки сырья.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 130 страницах машинописного текста, иллюстрирована 21 рисунком и 35 таблицами. Результаты экспериментов обработаны статистически.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, трех глав экспериментальной работы, общих выводов, списка литературы и приложения. Список литературы включает 200 источников.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Матющенко, Наталья Владимировна

Общие выводы

1. Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в препарате "Элима". Установлен норматив содержания флавоноидов в препарате: в пересчете на рутин он должен составлять не менее 0,020%. Обоснован срок хранения препарата: с учетом изменчивости содержания флавоноидов - 2 года.

2. Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в плодах рябины. Обоснован норматив содержания флавоноидов в сырье рябины - не менее 0,08%.

3. Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в листьях крапивы. Обоснован норматив содержания флавоноидов в сырье крапивы — не менее 1,0%.

4. Установлено, что сырье рябины амурской и рябины обыкновенной статистически не различается по содержанию флавоноидов, каротиноидов, аскорбиновой кислоты, оксикоричных кислот, дубильных (окисляемых) веществ, общих липидов, экстрактивных веществ, извлекаемых водой и спиртом этиловым 70%.

5. Установлено, что сырье крапивы узколистной и крапивы двудомной не имеет достоверных различий по содержанию флавоноидов и оксикоричных кислот.

6. Определен характер изменений содержания действующих веществ в процессе созревания плодов рябины: наибольшей вариабельностью характеризуется содержание флавоноидов, оксикоричных кислот и дубильных (окисляемых) веществ. По совокупности критериев сбор плодов целесообразно проводить в период их зрелости.

7. Установлено, что способ сушки плодов рябины не оказывает значимого влияния на содержание флавоноидов. Показана предпочтительность различных способов сушки для сохранения отдельных групп БАВ.

8. Установлен характер динамики накопления флавоноидов и оксикоричных кислот в листьях крапивы узколистной: показано, что максимальное количество флавоноидов приходится на фазы бутонизации и плодоношения.

9. Установлено, что максимальное количество флавоноидов в сырье крапивы сохраняется при сушке в естественных условиях, предварительно отделенных листьев от стеблей и при инфракрасной сушке.

107

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Матющенко, Наталья Владимировна, 2005 год

1. Азнабаева, Ю.Г. Антиоксидантные свойства чайных напитков фирмы "Травы Башкирии" / Ю.Г. Азнабаева, Р.Р.Каспранский, Р.Р.Фархутдинов // Эфферентная терапия.- 2001.- Т.7, № 2.- С. 52-56.

2. Аккумуляция флавоноидов и аминокислот в надземных органах Lespedeza bicolor Turch. / В.С.Никитина, Е.В Кучеров, Г.Х.Галимова, Г.В. Шендель // Раст. ресурсы.- 2000 Т. 36, вып. 2.- С. 96-103.

3. Алюкина, JI.C. Флавоноиды рода Artemisia L. подрода Dracunculus (Bess.) Peterm. флоры Казахстана / JI.C. Алюкина, Т.В. Ряховская // Раст. ресурсы.- 1980.- Т. XVI, вып. 2.- С. 187-192.

4. Андреева, В.Ю. Разработка методики количественного определения флавоноидов в манжетке обыкновенной Alchemilla vulgaris L. S.L. / В.Ю. Андреева, Г.И. Калинкина // Химия растительного сырья 2000,- №1- 8588.

5. Антибактериальная активность извлечений из некоторых видов цветковых растений / В.А. Бандюкова, B.C. Череватый, И.И. Озимина и др.// Раст. ресурсы.- 1990.- Т. 26, вып. 2.- С. 169-178.

6. Антибактериальная активность флавоноидов некоторых видов цветковых растений / В.А. Бандюкова, B.C. Череватый, И.И. Озимина и др. // Раст. ресурсы.- 1987.- Т. 23, вып. 4.- С. 607-612.

7. Антиканцерогенные и противодиабетические свойства цветков Filipendula ulmara (L.) Maxim / В.Г. Беспалов, А.Ю. Лимаренко, А.С. Петров и др. // Раст. ресурсы.- 1993 Т. 29, вып. 1- С. 9-20.

8. Антиокислительная активность экстрактов водяники черной / Е.В. Ермилова, Т.В. Кадырова, Е.А. Краснов, С.И. Писарева и др. // Хим. фармац. журн.- 2000.-Т. 34, №11- С. 28-30.

9. Антиоксидантная активность некоторых растительных фенольных соединений / В.Н. Сыров, З.А. Хушбактова, В.М. Кукасов // Хим.-фармацевт.журн 1987.-Т. 21, № 1.- С. 59-62.

10. Антиоксидантная терапия растениями / В.Г. Колесова, В.А. Дадали, В.И. Лойко, В.А. Марченко // Эфферентная терапия 1996 - Т. 2, № 1С. 67-70.

11. Антиоксидантные свойства комплексного гепатопротекторного лекарственного препарата Силибохол / А.А. Лебедев, Е.А. Батаков, В.А. Куркин и др. // Раст. ресурсы,- 2001,- Т. 37, вып. 1- С. 69-75.

12. Ахтанова, Н.К. Исследование халкон-флаваноновых препаратов солодки голой методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Авто-реф. дисс. канд. фарм. наук.-М. , 1991.-24 с.

13. Бабаскин, B.C. Влияние суммы флавоноидов из клевера лугового на моторику тонкой кишки / B.C. Бабаскин, М.В. Киселевский // Фармация.— 1992.-Т. 41, № 6- С. 78-79.

14. Бабаскин, B.C. Клевера Европейской части России и их лекарственное применение: Автореф. дисс. д-ра фарм. наук М. , 1993- 52 с.

15. Багирова, В.А. Флавоноиды в гомеопатических настойках кратегус / В.А. Багирова, М.Н. Лякина, З.П. Костенникова // Фармация 2003 - Т. 31, №2.- С. 41-42.

16. Баева, В.М. Ботанико-фармакогностическое изучение иван-чая узколистного Chamaenerium anqustifolium (L.) Scop.: Автореф. дисс. канд. фарм. наук.-М, 1985 - 16 с.

17. Бандюкова, В.А. Динамика содержания и характеристика флавоноидов Lespedeza hedysaroides (Pall.) Kitag., произрастающей в Читинской области / В.А. Бандюкова, Л.И. Фомина // Раст. ресурсы 1990 - Т.26, вып. 4.-С. 545-549.

18. Барабой, В.А. Биологическое действие раститительных фенольных соединений / В.А. Барабой Киев, 1976 - 162 с.

19. Беликов, В.В. Аналитические исследования природных фенольных соединений и разработка методов их количественного определения: Авто-реф. дисс. д-ра. фарм. наук.-Харьков, 1990 36 с.

20. Беликов, В.В. Методы анализа флавоноидных соединений / В.В. Беликов, М.С. Шрайбер // Фармация.- 1970.- Т. 19, № 1.- С. 66-71.

21. Беликов, В.В. Применение ВЭЖХ в анализе флавоноидных препаратов / В.В. Беликов // Проблемы стандартизации и контроля качества лек. средств.- М, 1991. Т. 2, Ч. 2.- С. 14-15.

22. Большакова, И.В. Антиоксидантные свойства группы экстрактов лекарственных растений / И.В. Большакова, E.JI. Лозовская, И.И. Сапежинский // Биофизика.- 1998.- Т. 43, вып. 2.- С. 186-188.

23. Большакова, И.В. Антиоксидантные свойства ряда экстрактов лекарственных растений / И.В. Большакова, E.JI. Лозовская, И.И. Сапежинский // Биофизика.- 1997,- Т. 42, вып. 2,- С. 480-483.

24. Бубенчикова, В.И. Разработка показателей качества листьев земляники / В.И. Бубенчикова, И.Л. Дроздова // Фармация.- 2002 Т. 45, № 6 - С. 1618.

25. Бурлакова, Е.Б. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте / Е.Б. Бурлакова, А.В. Алесенко, Е.М. Молочкина и др.— М.: Наука, 1975.-214 с.

26. Васин, М.В. Средства профилактики и лечения лучевых поражений / М.В. Васин.- М., 2001.-312 с.

27. Влияние геохимических факторов на действующие вещества растений / Н.И. Гринкевич, И.А. Баландина, Г.Н. Бузук, Л.М. Молодожникова // Современные методы исследования лекарственных растений: Науч. тр. Ни-ИФ.-М. , 1983.-С. 144-151.

28. Влияние методов сушки и длительности провяливания на содержание флавоноидов в соцветиях пижмы / К.Л. Стуккей, Г.М. Терентиенко, М.Д. Тихонова и др. // Хим.-фармацевт. журн- 1981- Т. 15, № 10 С. 64-68.

29. Влияние некоторых биофлавоноидов на неферментативную антиокислительную защиту организма / И.Г. Сокольчик, В.К. Кухта, Т.С. Мо-розкина и др. // Здравоохранение Белоруссии 1992 - № 2 - С. 47-49.

30. Влияние экстрактов из стеблей Scutellaria baicalensis Georgi на эффективность химиотерапии экспериментальных опухолей / Т.Г. Разина, В.И. Литвиненко, Т.П. Попова, Е.Д. Гольдберг // Раст. ресурсы 1993 - Т. 29, вып. З.-С. 90-93.

31. Волхонская, Т.А. Влияние условий произрастания видов Bupleurum L. на содержание флавоноидов и активность расщепляющих их ферментов / Т.А. Волхонская // Раст. ресурсы,- 1984 Т. 20, вып. 1— С. 106-113.

32. Волхонская, Т.А. Сравнительное изучение флавонолов некоторых видов рода Bupleurum L. / Т.А. Волхонская, И.М. Красноборов, Е.П. Храмова // Раст. ресурсы.- 1996.- Т. 32, вып. 1-2,- С. 92-99.

33. Волхонская, Т.А. Фенольные соединения Pentaphylloides fruticosa (L.) О. Schwarz в природе и культуре / Т.А. Волхонская, Н.М. Шкель, В.М. Триль // Сибирский экологический журнал.- 1999 № 3 - С. 231236.

34. Воскресенский, О.Н. Ангиопротекторы / О.Н. Воскресенский, В.А. Туманов.-Киев: Здоров'я, 1982 120 с.

35. Воскресенский, О.Н. Биоантиоксиданты облигатные факторы питания / О.Н. Воскресенский, В.Н. Бобырев // Вопросы медицинской химии-1992,- Т. 38, №4.-С. 21-26.

36. Выделение, химический состав и гиполипидемическая активность суммы флавоноидов из Thermopsis altherniflora / З.А. Хушбактова, С.Х. Файзиева, В.Н. Сыров и др. // Хим.-фармацевт. журн 2001.-Т. 35, № 3.- С. 35-38.

37. Высочина, Г.И. Биохимические подходы к познанию биоразнообразия растительного мира / Г.И. Высочина // Сибирский экологический журнал.- 1999,-№ З.-С. 207-211.

38. Высочина, Г.И. Динамика содержания и компонентного состава флавоноидов Polygonum aviculare L. / Г.И. Высочина // Раст. ресурсы 1999Т. 35, вып. 3 - С. 56-61.

39. Высочина, Г.И. О таксоноспецифичности флавоноидного состава в роде Salix L. / Г.И. Высочина, Т.Н. Встовская // Сибирский экологический журнал.- 1999.- № 3.- С. 245-250.

40. Высочина, Г.И. Содержание суммы и некоторых основных флавоноидов в надземной части Polygonum aviculare L. , произрастающего в Сибири // Раст. Ресурсы / Г.И. Высочина.- 1998.- Т. 34, вып. 3 С. 47-55.

41. Гемореологические свойства экстрактов из некоторых растений, содержащих флавоноиды / М.Б. Плотников, А.А. Колтунов, О.И. Алиев и др. // Раст. ресурсы.- 1998,- Т. 34, вып. 1.- С. 87-91.

42. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комиссаренко, С.Е. Дмитрук Новосибирск: Изд-во "Наука", Сиб. отдел., 1990 - 333 с.

43. Гепатозащитные свойства полифенолов Maackia amurensis Rupr. Et Maxim при экспериментальной токсической патологии печени / А.И. Венгеровский, И.М. Седых, Т.В. Власова, А.С. Саратиков // Раст. ресурсы 1993Т. 29, вып. З.-С. 15-18.

44. Гордиенко, А.Д. Гепатопротекторный механизм действия флавоноидов / А.Д. Гордиенко // Фармация.- 1990.- Т. 39, № 3.- С. 75-78.

45. Государственная Фармакопея СССР- 11-е изд.- М.: Медицина, 1987-Вып. 1.- 333 с.

46. Государственная Фармакопея СССР- 11-е изд.- М.: Медицина, 1990-Вып. 2.- 400 с.

47. Действие антиоксидантов на кинетику цепного окисления липидов в ли-посомах / О.В. Васильева, О.Б. Любицкий, Г.И. Клебанов, Ю.А. Владимиров // Биологические мембраны 1998 - Т. 15, № 2 - С. 177-183.

48. Диквертин новое антиоксидантное и капилляропротекторное средство /

49. B.К. Колхир, Н.А. Тюкавкина, В .А. Быков и др. // Хим.-фармацевт. журн .-1995.-Т. 29, №9,-С. 61-64.

50. Дорожко, А.И. Хелатирующее и антирадикальное действие рутина в процессе перекисного окисления липидов микросом и липосом / А.И. Дорожко, А.В. Бродский, И.Б. Афанасьев // Биохимия 1988 - Т. 53, вып. 101. C. 1660-1666.

51. Дроздова, И.Л. Исследование фенольных соединений листьев лопуха большого (Arctium lappa L.) / И.Л. Дроздова, В.Н. Бубенчикова // Фармация 2003.- № 3С. 12-13.

52. Дроздова, И.Л. Фармакогностическое изучение некоторых представителей семейства мальвовых: Автореф. Дисс. канд. фарм. наук.- Курск, 2000.- 22 с.

53. Жанаева, Т.А. Флавонолрасщепляющие ферменты володушки золотистой / Т.А. Жанаева, В.Г. Минаева, М.Н. Запрометов // Физиология растений-1980.- Т. 12, вып. 6.- С. 625-631.

54. Жанаева, Т.А. Экстрактция флавонолов из свежих и высушенных листьев Bupleurum multinerve DC / Т.А. Жанаева, И.Е. Лобанова // Раст. ресурсы-1992.- Т. 28, вып. 4.- С. 60-62.

55. Загоскина, Н.В. Особенности формирования хлоропластов и накопление фенольных соединений в фитомикротрофных каллусных культурах чайного растения / Н.В. Загоскина, Г.А. Дубравина, М.Н. Запрометов // Физиология растений 2000 - Т. 47, № 4 - 537-543.

56. Иванова, Г.А. Химическая характеристика лапчатки прямостоячей, произрастающей в естественных условиях обитания и в интродукции на среднем и южном Урале: Автореф. дисс. канд. фарм. наук.- Пермь, 199616 с.

57. Изыскание радиопротекторов среди кетосоединений / Г.Г. Ватулина, С.А. Большакова, Т.Н. Тужилкова и др. // Хим. фармац. журн- 1985Т. 19, № 5.-С. 552-557.

58. Использование квантово-химических методов для обоснования антирадикального (ОН') действия полигидроксихалконов / Э.Т. Оганесян, Е.Г. Доркина, М.Р. Хочава и др. // Химико-фармацевт. журн. 2002 - Т. 36, № 12.-С. 21-25.

59. Кабиев, O.K. Природные фенолы перспективный класс противоопухолевых и радиопотенциирующих соединений / O.K. Кабиев, С.Б. Балмуха-нов.-М.: Медицина, 1975 - 189 с.

60. Кадырова, Р.Б. Флавоноидный состав некоторых сибирских видов Astragalus L. / Р.Б. Кадырова // Раст. ресурсы- 1989 Т. 25, вып. 4-С. 552-557.

61. Каминская, А.В. Фармакогностическое изучение калины Саржента: Авто-реф. дисс. канд. фарм. наук М. , 1995.- 22 с.

62. Киселева, А.В. Биологически активные вещества лекарственных растений Южной Сибири / А.В. Киселева, Т.А. Волхонская, В.Е. Киселев.- Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1991 136 с.

63. Количественное определение дигидрокверцетина методом ВЭЖХ / Н.А. Воскобойникова, JI.A. Остроухова, Ю.А. Колесник, В.А. Бабкин // Фармация.- 1992.- Т. 41, № 6.- С. 74.

64. Количественное определение силибина и суммы флаволигнанов в плодах Silibum marianum (L.) Gaertn. / В.А. Куркин, Г.Г. Запесочная, Е.В. Авдеева и др. // Раст. ресурсы 1996.- Т. 32, вып. 3.- С. 80-87.

65. Комиссаренко, Н.Ф. Антигрибковая активность некоторых природных флавоноидов, фуранохромонов, кумаринов и антрахинонов / Н.Ф. Комиссаренко, С.Е. Дмитрук, А.Н. Комиссаренко // Раст. ресурсы- 1991Т. 26, вып. 1.-С. 3-10.

66. Компанцева, Е.В. Идентификация и количественное определение флавоноидов в многокомпонентном лекарственном средстве кардиотонического действия / Е.В. Компанцева, А.Ю. Айрапетова // Фармация 2000- Т. 49, № 1.-С. 40-41.

67. Корепанова, Н.С. Фармакогностическое изучение пастушьей сумки обыкновенной: Автореф. дисс. канд. фарм. наук Пермь, 1999 - 17 с.

68. Костюк, В.А. Роль анион радикала кислорода в процессах ауто- и фото-сенсибилизированного окисления флавоноидов / В.А. Костюк, А.И. Пота-пович // Кислородные радикалы в химии и биологии Рига, 1988 - С. 4554.

69. Краткая химическая энциклопедия.- Т. 5, Т-Я М.: Советская энциклопедия, 1967.- 1184 стб.

70. Куркин, В.А. Расторопша пятнистая источник лекарственных средств (обзор) / В.А. Куркин // Химико-фармацевт. журн. - 2003 - Т. 37, № 4-С. 27-41.

71. Кушнерова, Н.Ф. Влияние комплексного полифенольного препарата Ка-прим на биохимические показатели печени крыс в хроническом эксперименте / Н.Ф. Кушнерова, В.Г. Спрыгин // Рас. ресурсы 2001 - Т. 37, вып. 2, С. 62-69.

72. Лавыгина, И.Е. Содержание биологически активных веществ в надземной части Hypericum scabrum L. и Н. elongatum Ledeb. (Узбекская ССР) / И.Е. Лавыгина // Раст. ресурсы 1988.-Т. 24, вып. 4.- С. 561-565.

73. Левента, А.И. Фармакогностическое исследование рододендрона Адамса, произрастающего в Восточной Сибири: Автореф. дисс. канд. фарм. наук,- Улан-Удэ, 1998.- 20 с.

74. Липкан, Г.Н. Изучение токсичности некоторых витаминных препаратов в эксперименте / Г.Н. Липкан // Фармакология и токсикология: Республиканский межведомств, сборник Вып. 7 - Киев: Здоров'я, 1972 - С. 128131.

75. Лозовская, Е.Л. Сравнительная эффективность некоторых препаратов как акцепторов супероксидных радикалов / Е.Л. Лозовская, И.И. Сапежин-ский//Биофизика 1993-Т. 38, вып. 1.-С. 31-36.

76. Лякина, М.Н. Определение содержания флавоноидов в препарате "Алек-тон" / М.Н. Лякина, Г.И. Российская, Н.Н. Дементьева // Фармацевтическая наука в решении вопросов лекарственного обеспечения: Науч. тр./ НИИФ.- М., 1998.- Т. XXXVII.- Ч. II.- С. 174-180.

77. Майстренко, Г.Г. Биологически активные вещества Scrophularia umbrosa в связи с условиями произрастания и возрастными особенностями / Г.Г. Майстренко, Т.А. Волхонская, И.М. Красноборов // Сибирский экологический журнал-2003-№ 1 — С. 119-122.

78. Манадилова, A.M. Противоопухолевая активность фенольных соединений полыни лессинговидной / A.M. Манадилова, P.M. Кунаева, Г.Г. Ушбаева // III Всесоюзн. конф. "Биоантиоксидант", Москва 27-29 июня 1989 г.: Тез. докл.- М., 1989.- Т. II.- С. 21-22.

79. Минаева, В.Г. Влияние температуры сушки на количество флавоноидов и активность флавонолрасщепляющих их ферментов в растениях володуш-ки / В.Г. Минаева, Т.А. Жанаева, Т.А. Волхонская // Изв. СО АН СССР.-1980.- Вып. 1, № 5.- С. 125-129.

80. Минаева, В.Г. Флавоноиды в онтогенезе и их практическое применение / В.Г. Минаева-Новосибирск.: Наука, Сиб. отд-ние, 1978 256 с.

81. Мосейчук, И.П. Конвафлавин как гепатопротектор и антиоксидант / И.П. Мосейчук // III Всесоюзн. конф. "Биоантиоксидант", Москва 27-29 июня 1989 г.: Тез. докл.- М., 1989.- Т. II.- С. 80-81.

82. Муравьева, Д.А. Разработка нормативно-технической документации на цветки мать-и-мачехи / Д.А. Муравьева, В.Н. Бубенчикова // Проблемы стандартизации и контроля качества лек. средств М, 1991. - Т. 1- С. 8586.

83. Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация / Под ред. проф. B.JI. Багировой, проф. В.А. Северцева Спб.: СпецЛит, 2001 - 223 с.

84. Никитина, B.C. Динамика содержания суммы флавоноидов в листьях и танидов в коре ветвей разнополых особей Salix triandra L. и S.acutifolia Willd. / B.C. Никитина, О.Э. Оразов // Раст. ресурсы- 2001 Т. 37, вып. 3 - С. 65-72.

85. Никитина, B.C. Поиск новых подходов в физиолого-биохимическом исследовании лекарственных растений / B.C. Никитина // Вестник Башкирского университета 2001 - № 2 (II).- С. 110-113.

86. Николаев, С.М. Растительные лекарственные препараты при повреждениях гепатобилиарной системы / С.М. Николаев.- Новосибирск: ВО "Наука" Сиб. издательская фирма, 1992 155 с.

87. Новые возможности ВЭЖХ в фармакопейном анализе / Г.И. Барам, Д.В. Рейхарт, Е.Д. Гольдберг и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2003 - Т. 135, № 1- С. 75-79.

88. Петриченко, В.М. Спектрофотометрический метод определения содержания флавоноидов в Brevipila Burn, et Gremei. / В.М. Петриченко, Т.В. Су-хинина, Н.С. Фурса // Раст. ресурсы.- 2002 Т. 38, вып. 2.- С. 104-109.

89. Петрова, В.П. Биохимия дикорастущих плодово-ягодных растений / В.П. Петрова Киев: Вища школа, 1986 - 236 с.

90. Петрова, В.П. Дикорастущие плоды и ягоды / В.П. Петрова М.: Лесная промышленность, 1987.-248 с.

91. Печерская, Л.Г. Идентификация и оценка качества лекарственного растительного сырья и фитопрепаратов методом круговой хроматографии в сочетании с микродиагностикой: Автореф. дисс. канд. фарм. наук — Пермь, 1997.-20 с.

92. Пименов, М.Г. Содержание флавонолов в некоторых видах рода Bupleurum L. / М.Г. Пименов, Т.А. Волхонская, Ю.В. Даушкевич // Раст. ресурсы.- 1992.-Т. 28, вып. 1.- С. 94-99.

93. Погодаева, Н.Н. , Содержание флавоноидных соединений в надземной части Aconitum baicalense Turcz. Ex Rapaics / Н.Н. Погодаева, Ц. Жапова, А.А. Семенов // Раст. ресурсы 1997 - Т. 33, вып. 1-2 - С. 85-87.

94. Полякова, JI.B. Изменчивость фенольных соединений у некоторых травянистых и древесных растений от межпопуляционного до внутрииндиви-дуального (эндогенного) уровня / JI.B. Полякова, Э.А. Ершова // Химия растительного сырья.-2000.-№ 1.-С. 121-129.

95. Н.Полякова, JI.B. Флавоноидный комплекс Astragalus austrosibiricus Schischk. в природных популяциях Алтая. Сообщение 2. Изменчивость в эколого-ценотических рядах сообществ / Полякова JI.B., Ершова Э.А. // Раст. ресурсы 19966.- Т. 32, вып.З.- С. 74-79.

96. Попов, Д.М. Контроль качества сырья и препаратов пустырника спектро-фотометрическим методом / Д.М. Попов, Е.В. Пащинская, Л.И. Коваленко // Фармация.- 1992.- Т. 41, № 4.- С. 27-31.

97. Правила сбора и сушки лекарственных растений (сборник инструкций).-М.: Медицина, 1985.- 328 с.

98. Природные антиоксиданты как гепатопротекторы / Н.Д. Бунятян, О.А. Герасимова, Т.С. Сахарова, Л.В. Яковлева // Эксперим. и клинич. фармакология,- 1999.- № 2 - С. 64-67.

99. Прокопенко, С.А. Природные антиоксиданты. Сообщение 3. Биологическая активность антиоксидантов и их применение в медицине /С.А. Прокопенко // Фармаком.- 1995.-№ 11-12.- С. 51-58.

100. Раал, А.Э. Фитохимическое изучение ромашки душистой в Эстонии: Ав-тореф. дисс. канд. фарм. наук-Л., 1989 18 с.

101. Радбиль, О.С. Свободные радикалы и заболевания органов пищеварения / О.С. Радбиль //Клиническая медицина- 1989 — № 3- С. 17-21.

102. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Hydrangeaceae-Haloragaceae- Л.: Наука, 1987326 с.

103. Решетникова, М.Д. Фармакогностическое изучение хвоща полевого: Автореф. дисс. канд. фарм. наук -Уфа, 1993- 17 с.

104. Руленко, И.А. Исследование фламина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Автореф. дисс. канд. фарм. наук.- М. , 1988 — 24 с.

105. Румянцева, Ж.Н. Поиски гепатопротекторов среди препаратов растительного происхождения / Ж.Н. Румянцева, Я.С. Гудивок // Раст. ресурсы— 1993.- Т. 29, вып. 1.- С. 88-97.

106. Рыжикова, М.А. Влияние лекарственных растений на процессы свободно-радикального окисления / М.А. Рыжикова, P.P. Фархутдинов, Ш.З. Заги-дуллин // Здравоохранение Башкоркостана 1998. - № 5-6 — С. 38-41.

107. Сайфутдинов, P.P. Влияние шлемника байкальского на энергетический метаболизм головного мозга крыс при гипоксии: Авто-реф. дисс. канд. мед. наук-Томск, 1997.-23 с.

108. Самылина, И.А. Изучение химического состава нефармакопейных видов боярышника и оценка их фармакологической активности / И.А. Самылина, Т.Л. Киселева // Фармация.- 1990.-Т. 39, № 1.- С. 12-18.

109. Самылина, И.А. Использование хлорида алюминия для определения суммы флавоноидов в цветках боярышника / И.А. Самылина, О.В. Евдокимова, М.В. Кашникова // Фармация.- 1994.- Т.43, № 6.- С. 42-45.

110. Самылина, И.А. Проблемы стандартизации лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных средств / И.А. Самылина // 1-й Межд. конгр. "Традиционная медицина и питание: теоретические и практические аспекты".- М., 1994- С. 203.

111. Сараф, А.С. Флавоноиды как потенциальные противоаллергические соединения (обзор) / А.С. Сараф, Э.Т. Оганесян // Хим.-фармацевт, журн-1991.-Т. 25, №2.-С. 4-8.

112. Сафонов, В.В. Спектрофотометрический метод определения содержания суммы флавоноидов в Caragana spinosa (L.) Vahl. ex Hornem. / В.В. Сафонов, Е.И. Саканян, E.E. Лесиовская // Раст. ресурсы 2000.- Т. 36, вып. 2.-С. 129-132.

113. Синтез и антиоксидантная активность изофлавонов, содержащих гидрофильные и липофильные заместители / В.Г. Пивоваренко, А.В. Туганова, Л.Ф. Осинская, Ю.Д. Холодова // Химико-фармацевт. журн. 1997 — Т. 33, № 3 - С. 14-18.

114. Скакун, Н.П. Сравнительная оценка гепатопротекторной, антиоксидант-ной и желчегонной активности флавоноидных препаратов / Н.П. Скакун, Н.Ю. Степанова// Врачебное дело.- 1988.-№ 12.- С. 52-54.

115. Смирнова, Л.П. Количественное определение суммы флавоноидов в желчегонном сборе / Л.П. Смирнова, Л.Н. Первых // Хим.-фарм. журн-1999.- Т. 33, №3.-С. 37-39.

116. Смирнова, Л.П. Количественное определение суммы флавоноидов в цветках бессмертника песчаного / Л.П. Смирнова, Л.Н. Первых // Хим.-фарм. журн.- 1998.- Т. 32, № 6.- С. 35-38.

117. Совершенствование анализа и технологии изготовления настоев шиповника, крапивы и рябины обыкновенной / Е.А. Приступа, Д.М. Попов, Д.М. Мухамеджанова и др.// Фармация 1994 - Т.43, № 2 - С. 31-34.

118. Совершенствование анализа и технологии настоев и отваров, содержащих флавоноиды / О.Г. Аносова, М.В. Колпакова, Н.И. Минникова и др.// Фармация.- 1994.- Т.43, № 1.- С. 30-34.

119. Содержание некоторых флавоноидных соединений и сирингина в отдельных частях Cirsium setosum (Willd.) Bess. / А.И. Сырчина, А.Л. Верещагин, Я.А. Кастыро и др. // Раст. ресурсы 2000 - Т. 36, вып. 2 - С. 73-79.

120. Соколова, С.М. Динамика накопления питательных веществ при созревании плодов рябины / С.М. Соколова, И.П. Петрова // Бюлл. Гл. Ботан. сада.- 1987.- Вып 143.- С. 47-50.

121. Сродство к биомембранам и некоторые особенности фармакокинетики соединений флавоноидной природы // Хим. фармац. журн- 1992.-Т. 26, №2.-С. 20-23.

122. Степанова, Т.А. Фармакогностическое изучение викарных видов лекарственных растений Дальнего Востока: Автореф. дисс. д-ра фарм. наук-М., 1998.- 52 с.

123. Структурно-функциональный анализ радиопротекторной и антиокислительной активности флавоноидов / Э.П. Кемертелидзе, В.Г. Цицишвили, М.Д. Алания, Т.Г. Сагареишвили // Химия природ, соединений 2000— № 1- С.42-46.

124. Стуккей, K.JI. Исследование сушки соцветий пижмы / K.J1. Стуккей, Г.М. Терентиенко // Хим.-фармацевт, журн.- 1983- Т. 17, № 11 — С. 1331-1334.

125. Супильникова, А.В. Качественный и количественный анализ лекарственного сырья и настойки полыни эстрагон / А.В. Супильникова // Фармация.- 2002.- № 3.- С. 11-14.

126. Сухомиров, Г.И. Что может дать наша тайга / Г.И Сухомиров — Хабаровск, 1986.- 224 с.

127. Теслов, Л.С. Сравнительное изучение флавоноидного состава видов рода Campanula L. ряда Glomeratae charadze из секции Campanula / Л.С. Те-слов // Раст. ресурсы 1995 - Т. 31, вып. 1.- С. 44-52.

128. Теслов, Л.С. Сравнительное изучение флавоноидного состава видов рода Campanula L. ряда Rapunculoides Charadze из секции Campanula / Л.С. Теслов // Раст. ресурсы,- 2000.- Т. 36, вып. 1- С. 3-17.

129. ТУ 64-4-72-88 Плод облепихи сухой.

130. Тюкавкина, Н.А. Актовая речь: «Биофлавоноиды: химия, пища, лекарства, здоровье» / Н.А Тюкавкина М. , 2002 - 56 с.

131. Тюкавкина, Н.А. Природные флавоноиды как пищевые антиоксиданты и биологически активные добавки / Н.А. Тюкавкина, И.А. Руленко, Ю.А. Колесник // Вопросы питания 1996 - № 2- С. 33-38.

132. Уланова, К.П. Содержание флавоноидов в надземной части Adonis amurensis Regel et Raddle в зависимости от сроков хранения / К.П. Уланова//Раст. ресурсы.- 1995-Т. 31, вып. 1.-С. 53-57.

133. Фархутдинов, P.P. Хемилюминесцентные методы исследования свобод-норадикального окисления в биологии и медицине / P.P. Фархутдинов,

134. B.А. Лиховских.- Уфа, 1995.- 90 с.

135. Флакозид эффективное растительное средство для лечения гепатитов вирусной и не вирусной этиологии, а также вирусных поражений кожи /

136. C.А. Вичканова, А.И. Багинская, Л.Д. Шипулина и др. // Химия, технология медицина: Тр. Всеросс. научн.-исслед. ин-та лекарственных и ароматических растений М. , 2000.- С. 316-323.

137. Фомичева, Е.А. Изучение компонентного состава флавоноидов и фенол-карбоновых кислот в гомеопатических настойках чистотела хроматогра-фическими методами. Сообщение 1 / Е.А. Фомичева, З.П. Костенникова // Фармация.- 2001.- № 3.- С. 17-19.

138. Фомичева, Е.А. Количественное определение флавоноидов в гомеопатической настойке чистотела методом спектрофотометрии. Сообщение 2 / Е.А. Фомичева, М.Н. Лякина, З.П. Костенникова // Фармация 2001. Т. 50, № 5.-С. 13-15.

139. ФС 42-1942-89 Корневище и корень элеутерококка колючего.

140. Хмелевский, Ю.В. Антиоксидантные витамины как адаптогены при ги-поксических состояниях миокарда / Ю.В. Хмелевский // III Всесоюзн.конф. "Биоантиоксидант", Москва 27-29 июня 1989 г.: Тез. докл.- М., 1989.-Т. II.-С. 162-163.

141. Храмова, Е.П. Исследование суточного ритма накопления флавонолов в интродуцированном пятилистнике кустарниковом / Е.П. Храмова // Тр. 1-й Всерос. конф. по ботан. ресурсоведению, Санкт-Петербург, 25-30 ноября 1996 г.- СПб., 1996.- С. 214-215.

142. Храмова, Е.П. Эколого-биохимические особенности пятилистника кустарникового при интродукции / Е.П. Храмова, Н.М. Шкель // Сибирский экологический журнал 1999 - № 3 - С. 237-243.

143. Чаузова, А.В. Разработка и стандартизация новых сборов "Сираток", "Седоспазмил" и "Трезлевтон": Автореф. дисс. канд. фарм. наук.- М., 2000.- 24 с.

144. Чемесова, И.И. Противоопухолевая активность флавоноидов некоторых видов Artemisia L. / И.И. Чемесова, JI.M. Беленовская, А.Н. Стуков // Раст. ресурсы.- 1987.-Т. 23, вып. 1.- С. 100-103.

145. Шалдаева, Т.М. Флавоноиды в онтогенезе Artemisia dracunculus L. , произрастающей в Сибири / Т.М. Шалдаева, Г.И. Высочина, Н.К. Шохина // Сибирский экологический журнал.- 2003- № 1- С. 63-70.

146. Шинкаренко, Ю.В. Состав и содержание флавоноидов в видах рода Myosotis L. (Boraginaceae Juss.) из разных мест произрастания / Ю.В. Шинкаренко // Сибирский экологический журнал 2003.- № 1С. 79-84.

147. Шнякина, Г.П. Фармакогностическое изучение зверобоев Дальнего Востока / Г.П. Шнякина, И.Н. Рябова, З.В. Скорзова // Ресурсоведческое и фармакогностическое изучение лекарственной флоры СССР: Науч. тр./ ВНИИФ.-М., 1987.- Т. XXV.- С.90-93.

148. Шохина Н.К. Внутри- и межпопуляционная изменчивость содержания биологически активных веществ в растениях Artemisia dracunculus L. / Н.К. Шохина, Г.И. Высочина, А.П. Долгих // Сибирский экологический журнал.- 1999.- № 3.- С. 257-260.

149. Шретер, А.И. Лекарственная флора Советского Дальнего Востока / А.И. Шретер М.: Медицина, 1975.- 328 с.

150. Юрьев, Д.В. Анализ флавонолгликозидов в препаратах и БАД на основе экстракта Ginkgo biloba / Д.В. Юрьев, К.И. Элл ер, А.П. Арзамасцев // Фармация.- 2003.- № 2.- С. 7-9.

151. American Herbal Pharmacopoeia. Astragalus Root / Editor Roy Upton.-Santa-Cruz, CA, 1999,- 23 p.

152. American Herbal Pharmacopoeia. St. John's Wort (Hypericum perforatum) / Editor Roy Upton Santa-Cruz, CA, 1997,- 32 p.

153. Arora, A. Structure-activity relationships for antioxidant activities of a series of flavonoids in a liposomal system / A. Arora, M.G. Nair, G.M. Strasburg // Free. Radic. Biol. Med.- 1998.- Vol. 24, No. 9.-1355-1363.

154. Ellmain-Wojtassek, M. Zwazki flawonoidowe w Urtica dioica L. / M. Ell-main-Wojtassek, W. Bylka, Z. Kowalewski // Herba pol 1986 - Vol. 32, No. 3-4.-Pp. 131-137.

155. Haquet, A.I. Superoxide scavenging properties of flavonoids in a non-enzymic system / A.I. Haquet, S. Manez, M. Alkaraz // Z. Natur-forsch .1990.- Bd. 45, No. 1-2.- S. 19-24.

156. Harborn, J.B. Plant Chemosystematics / J.B. Harborn, B.L. Turner.- London: Academic press, 1984.- 562 p.

157. In vitro immunomodulatory activity of flavonoid glycosides from Urtica dioica L. / P. Acbay, A.A. Basaran, U. Undeger, N. Basaran // Phytother Res.-2003.-Vol. 17, No l.-Pp. 34-37.

158. Inoue, T. Antiallergic effect of flavonoid glycosides obtained from Mentha piperita L. / T. Inoue, Y. Sugimoto, H. Masuda, C. Kamei // Biol. Pharm. Bull.- 2002.- Vol. 25, No. 2.- Pp. 256-259.

159. Larson, R.A. The antioxidants of higher plants / R.A. Larson // Phytochemis-try.- 1988.- Vol. 27, No. 4.- Pp. 969-978.

160. Lopez-Lazaco, M. Flavonoids as anticancer agents: structure-activity relationship study / M. Lopez-Lazaco, M. Akiyama // Curr. Med. Chem. Anti-Canc Agants.- 2000.- Vol. 2, No. 6.- Pp. 691-714.

161. Measurement of relative antioxidant activity of compounds: a methodological note / L. Mira, M. Silva, R. Rocha, C.F. Manso // Re-dox. Rep- 1999.-Vol. 4, No. 1-2.-Pp. 69-74.

162. Parmar, N.S. Current trends in flavonoid research / N.S. Parmar, M.N. Ghosh // Ind. J. Pharmac.- 1980.- Vol. 12, No 4.- Pp. 213-228.

163. Pietta, P.G. Flavonoids as antioxidants / P.G. Pietta // J. Nat. Prod.- 2000.-Vol. 63, No. 7.- Pp. 1035-1042.

164. Quantitative structure-activity relationship analysis of phenolic antioxidants / E.J. Lien, S. Ren, H.H. Bui, R. Wang // Free. Radic. Biol. Med.- 1999.-Vol. 26, No. 3-4.- Pp. 285-294.

165. Rice-Evans, C.A. Flavonoid antioxidants / C.A. Rice-Evans // Curr. Med. Chem.- 2001.- Vol. 8, No. 7.- Pp. 797-807.

166. Rice-Evans, С.A. Structure-antioxidant activity relationships of flavonoids and phenolic acids / C.A. Rice-Evans, N.J. Miller, G. Pa-ganga // Free Radic Biol Med 1996.- Vol. 20, No. 7.- Pp. 933-956.

167. Robak, J. Bioactivity of flavonoids / J. Robak, R.J. Gryglewski // Pol. J. Pharmacol.- 1996,- Vol. 48.- Pp. 555-564.

168. Thornhill, S.M. Natural treatment of perennial allergic rhinitis / S.M. Thorn-hill, A.M. Kelly // Altera. Med. Rev.- 2000.- Vol. 5, No. 5.- Pp. 448-454.