Разработка иммунореагентов для реакции непрямой гемагглютинации, их применение в диагностике и изучении эпизоотологии фасциолеза крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.19, кандидат ветеринарных наук Золоткова, Татьяна Сергеевна

• Золоткова, Татьяна Сергеевна
• кандидат ветеринарных наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Золоткова, Татьяна Сергеевна

ВВЕДЕНИЕ

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Экономический ущерб, распространение и особенности эпизоотического процесса при фасциолезе

1.2. Клинические и гематологические показатели, иммунологический и биохимический статус животных при острой и хронической формах фасциолеза

1.3. Лабораторные методы диагностики фасциолеза животных и их модификации

1.4. Комплексные лечебно-профилактические мероприятия при фасциолезе животных 28 И. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1. Распространение и особенности эпизоотологии фасциолеза крупного рогатого скота в Костромской области

2.2.2. Сезонная динамика фасциолеза крупного рогатого скота в хозяйствах Костромской области

2.2.3. Возрастная динамика фасциолеза крупного рогатого скота в хозяйствах Костромской области

2.2.4. Распространение и особенности эпизоотологии фасциолеза крупного рогатого скота в АОЗТ "Боровиковское"

2.2.4.1. Влияние природно-климатических факторов на интенсивность эпизоотического процесса при фасциолезе крупного рогатого скота в АОЗТ "Боровиковское"

2.2.4.2. Сезонная динамика фасциолеза крупного рогатого скота в АОЗТ "Боровиковское"

2.2.5. Гематологические и биохимические показатели при острой и хронической формах фасциолеза крупного рогатого скота

2.2.6. Разработка иммунореагентов для реакции непрямой гемагглюти-нации, их применение в диагностике и изучении эпизоотологии фасциолеза крупного рогатого скота

2.2.6.1. Получение экскреторно-секреторных, соматических антигенов Fasciola hepatica для реакции непрямой гемагглютинации (РИГА)

2.2.6.2. Определение специфичности фасциоловых антигенных препаратов, чувствительности (информативности) РИГА

2.2.6.3. Сопоставление результатов серологического, гельминтоовоско-пического и послеубойного исследований крупного рогатого скота на фасциолез

2.2.7. Аллергическая диагностика фасциолеза крупного рогатого скота

2.2.8. Сравнительная эффективность фенбендазола и альбендазола при фасциолезе крупного рогатого скота

2.2.8.1. Результаты применения фебамела при фасциолезе крупного рогатого скота в АОЗТ "Боровиковское"

2.2.8.2. Результаты применения альбамела при фасциолезе крупного рогатого скота в АОЗТ "Боровиковское" 86 III. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ 89 ВЫВОДЫ 102 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 104 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка иммунореагентов для реакции непрямой гемагглютинации, их применение в диагностике и изучении эпизоотологии фасциолеза крупного рогатого скота»

Среди гельминтозов сельскохозяйственных животных фасциолез является одним из экономически значимых и представляет часть экологической проблемы не только Российской Федерации, но и других регионов мира, где возрастает интенсивность вредоносного воздействия паразитических червей на природу.

Экономический ущерб при фасциолезе складывается из снижения молочной и мясной продуктивности животных, вынужденного убоя, выбраковки пораженной гельминтами печени; отмечаются аборты, теряется племенная ценность, ухудшается качество молочной и мясной продукции, уменьшается ее энергетическая ценность.

Информация о широком распространении фасциолеза среди крупного рогатого скота и овец подробно представлена в работах отечественных и зарубежных исследователей (Х.С. Абдуллаев, 1995; В.В. Горохов и др., 1997; В.В. Горчаков, 1997; Ю.С. Докторов и др., 1999; А.В. Зубов, М.Ш. Акбаев, 2001; D.A. Armstrong, 1982; N. Maingi, S.N. Mathenge, 1995; F.Lucchese et al., 1996; M.S. Mas-Coma et al., 1999).

Фасциолез жвачных животных широко распространен в разных природно-климатических зонах Российской Федерации и других стран мира.

Значительное распространение болезни обусловлено повсеместным расселением промежуточного хозяина фасциолы обыкновенной - моллюска малого прудовика, который является ведущим звеном в циркуляции трематод.

Сложившаяся эпизоотическая ситуация подтверждает необходимость проведения комплексных оздоровительных и профилактических мероприятий при фасциолезе животных.

Своевременная и достоверная диагностика является важным звеном профилактики. Используемые в ветеринарной практике лабораторные методы исследований не позволяют объективно оценить эпизоотическую ситуацию. С помощью метода последовательных промываний и различных модификаций гельминтоово-скопии яйца фасциол выявляют в фекалиях 45-50 % зараженных животных (Г.А. Котельников, 1984). В период миграции ювенильных форм фасциол установить диагноз с использованием общепринятых методов прижизненного исследования не представляется возможным.

Поэтому практическое значение имеет разработка и применение иммуноди-агностических тестов, которые весьма эффективны при диагностике фасциолеза. В последние два десятилетия в Российской Федерации и за рубежом достаточно широко апробированы и используются для выявления гельминтозов серологические методы: РДПАГ, РИГА, ИФА, ПЦР и др. Ряд тестов применяется и для диагностики трематодозов - фасциолеза, описторхоза, шистосомоза. Антигены приготавливают из различных компонентов трематод.

В качестве иммунодиагностического теста для выявления животных, зараженных Fasciola hepatica, сотрудниками ВИГИС (В.В.Клименко, 1997 и др.) предложена реакция диффузионной преципитации в агаровом геле (РДПАГ); метод рекомендуется использовать для распознавания острой формы фасциолеза.

Однако выполненные в этом направлении изыскания в Российской Федерации не многочисленны.

Следует уделять внимание разработке иммунореагентов и иммунодиагности-ческих тестов на основе доступного и недорогого сырья с условием небольшой трудоемкости, простоты постановки, высокой чувствительности (информативности) методов.

Важно также учитывать возможность адаптации получаемых диагностических препаратов для рутинных (общепринятых) серологических методов, так как одной из задач является одновременное исследование на фасциолез большого количества животных за непродолжительный период времени. При этом отсутствует необходимость повышения квалификации, дополнительного обучения врачей-серологов.

Не менее значимым для ветеринарной практики является аллергический метод диагностики фасциолеза. Длительно сохраняющаяся после переболевания в острой форме сенсибилизация тканей экскреторно-секреторными антигенами F. hepatica обусловливает стимулирование клеточных факторов иммунитета, что подтверждает возможность применения внутрикожной аллергической пробы. В пользу использования аллергической диагностики при фасциолезе свидетельствует высокий уровень эозинофилии и IgE в острый период.

Попытки отечественных исследователей получить отвечающий необходимым требованиям аллергический препарат принесли разноречивые, но обнадеживающие результаты. Последующие исследования в этом направлении перспективны.

Методы серологической и аллергической диагностики должны применяться комплексно, планомерно в острый и хронический периоды фасциолеза, а полученные результаты эпизоотологического мониторинга необходимо рассматривать как важный этап оздоровительных и профилактических мероприятий.

Цель и задачи исследований. Разработать антигенные иммунореагенты (на основе экскреторно-секреторных компонентов Fasciola hepatica) для реакции непрямой гемагглютинации, провести сероэпизоотологический мониторинг и изучить распространение, особенности эпизоотологии фасциолеза крупного рогатого скота в Костромской области.

Для выполнения цели потребовалось:

1. Осуществить ретроспективный анализ эпизоотической ситуации по фас-циолезу крупного рогатого скота в Костромской области.

2. Разработать и адаптировать для реакции непрямой гемагглютинации (РИГА) иммунореагенты на основе экскреторно-секреторных компонентов Fasciola hepatica.

3. Установить возможность использования РИГА для диагностики фасциолеза и изучить рабочие титры антигенов, специфичность полученных диагностику-мов и чувствительность метода.

4. Апробировать экскреторно-секреторные антигенные фракции Fasciola hepatica в качестве препарата для аллергической диагностики фасциолеза крупного рогатого скота.

5. Провести сероэпизоотологические исследования крупного рогатого скота в хозяйствах Костромской области, выяснить показатели экстенсивности инвазии, чувствительность (информативность) РИГА при острой и хронической формах фасциолеза.

6. На основании серологических исследований изучить возрастные аспекты и уточнить сезонную динамику фасциолеза крупного рогатого скота в хозяйствах Костромской области.

7. Сопоставить результаты гельминтоовоскопического, серологического, аллергического и послеубойного исследования на фасциолез и определить эффективность (диагностическую ценность) разработанных методов диагностики.

Научная новизна.

Впервые подробно изучены распространение, сезонная динамика фасциолеза крупного рогатого скота в 9 районах Костромской области, а также представлены данные по зависимости экстенсивности инвазии Fasciola hepatica от возраста животных.

Разработаны параметры приготовления экскреторно-секреторных и соматических антигенов F.hepatica для реакции непрямой гемагглютинации (РНГА).

Установлена возможность применения РНГА с использованием разработанных иммунореагентов для диагностики фасциолеза крупного рогатого скота.

Показаны высокая специфичность антигенных фасциоловых иммунореагентов и оптимальная чувствительность (информативность) РНГА.

Проведена широкая апробация РНГА при фасциолезе крупного рогатого скота; выяснена диагностическая ценность метода и высокая вероятность подтверждения диагноза в острый и хронический периоды болезни (92-97%).

Впервые предлагается оценивать положительные серологические реакции у / коров, в печени которых не выявлены половозрелые фасциолы, как результат кле-точно-гуморального иммунного ответа, обусловленного сенсибилизацией тканей животных экскреторно-секреторными антигенами Fasciola hepatica.

Сопоставление результатов серологического и послеубойного исследований ( крупного рогатого скота на фасциолез позволило установить четкую корреляцию. Положительные результаты РНГА отмечены у дегельминтизированных животных, в печени которых фасциолы не выявлены, но установлены патологические изменения, свойственные фасциолезу.

При использовании серологического метода диагностики в комплексе с аллергическим установлена степень сенсибилизации животных специфическими антигенами F.hepatica (преимущественно в острый период болезни).

Практическое значение работы.

Эпизоотологический мониторинг при фасциолезе (изучение динамики, интенсивности эпизоотического процесса и эпизоотологической географии) позволяет своевременно, на регламентированной основе осуществлять комплекс оздоровительных и лечебно-профилактических мероприятий.

Разработаны оптимальные параметры получения иммунореагентов для РНГА при диагностике фасциолеза.

Использование серологических методов диагностики является важным для определения состояния сенсибилизации тканей животных экскреторно-секреторными компонентами фасциол при отсутствии последних в желчных ходах печени (острая форма фасциолеза и период после дегельминтизации).

Получены данные, на основании которых можно устанавливать конкретные сроки и кратность диагностических исследований на фасциолез в осенний, зимний и весенний сезоны года. Эффективность лечебно-профилактических обработок следует выяснять на основании изучения динамики снижения титров антител к Fasciola hepatica после дегельминтизации животных. При этом важным является учет особенностей динамики эпизоотического процесса при фасциолезе в различных регионах Российской Федерации.

Зарегистрирована высокая достоверность и информативность внутрикожной аллергической пробы при острой форме фасциолеза в результате специфических клеточных реакций (выраженной сенсибилизации тканей животных экскреторно-секреторными антигенами ювенильных форм Fasciola hepatica).

На защиту выносятся следующие положения:

1. Распространение, сезонная динамика, зависимость экстенсивности инвазии от возраста при фасциолезе крупного рогатого скота в Костромской области.

2. Разработка иммунореагентов для реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) при фасциолезе крупного рогатого скота.

3. Изучение специфичности экскреторно-секреторных антигенов Fasciola hepatica, а также чувствительности РНГА при фасциолезе.

4. Апробация РНГА при фасциолезе крупного рогатого скота в хозяйствах Костромской области и определение ее диагностической ценности.

5. Сопоставление результатов РНГА, аллергической внутрикожной пробы, гельминтоовоскопического и послеубойного исследований на фасциолез крупного рогатого скота.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Паразитология», Золоткова, Татьяна Сергеевна

ВЫВОДЫ

1. На основании ветеринарной отчетности фасциолез у крупного рогатого скота зарегистрирован в 9 районах Костромской области. Максимальные показатели экстенсивности инвазии - в Антроповском (75%) и Солигаличском районах (51%).

2. Ретроспективный анализ эпизоотической ситуации по фасциолезу крупного рогатого скота в районах Костромской области за 1991-1996 годы позволил установить двухвершинную кривую эпизоотического процесса с пиками в 1992 и

1995 годах.

3. Эпизоотологический мониторинг по фасциолезу крупного рогатого скота с 1997 по 2001 г.г., в том числе на основании результатов гельминтоовоскопическо-го, сероэпизоотологического, аллергического и послеубойного исследований, подтверждает тенденцию увеличения заболеваемости (средние показатели ЭИ в

1996 г. - 17.7%, 1999 г. - 22,8%).

4. Возрастная динамика при фасциолезе крупного рогатого скота характеризуется постепенным повышением экстенсивности инвазии с возрастом животных (коровы - 74,8%, телки 18-20 мес. - 10,4%, бычки 12 мес. - 14,8%). Средние показатели ИИ (количество экземпляров половозрелых фасциол) у животных различных половозрастных групп: коровы - 60, нетели и телки случного возраста - 30-35, молодняк 12 мес. - 1-2.

5. В Центральном районе Нечерноземной зоны Российской Федерации (в Костромской области) наблюдается характерная сезонная динамика эпизоотического процесса при фасциолезе крупного рогатого скота: максимальные показатели ЭИ (45-47%) - в ноябре - декабре, средние (21-29% и 16-22%) - зимой и весной, невысокие - в августе и сентябре (8-12%).

6. Интенсивность эпизоотического процесса при фасциолезе крупного рогатого скота более высокая в хозяйствах, пастбища которых расположены вблизи стариц, заводей, небольших водоемов с плотностью популяций моллюсковлимнеид 3-5 экз./м2. Зараженность последних партенитами в летний сезон составляет от 2,7 до 5,4%.

7. Для диагностики фасциолеза крупного рогатого скота показана возможность применения РИГА с экскреторно-секреторными (ЭСФАГ) и соматическими (СФАГ) антигенами Fasciola hepatica.

7.1. Установлены следующие рабочие титры и параметры активности антигенов. ЭСФАГ: рабочий титр - 1:40, активность - 1:1280. СФАГ: рабочий титр -1:5, активность - 1:320.

7.2. Иммунологический скрининг в гомологичной и гетерологичной системах между антигенами F.hepatica и Paramphistomum sp. (1:40), а также отдаленными по систематическом}' положению Toxoplasma (0) и Sarcocystis (0) позволил выяснить специфичность изучаемых иммунореагентов. Диагностический титр при исследовании на фасциолез крупного рогатого скота в РИГА - 1:160.

7.3. Чувствительность (информативность) РИГА при фасциолезе крупного рогатого скота составляет от 82,6 до 95,5-96 %.

7.4. На основании широкого сероэпизоотологического мониторинга в комплексе с послеубойными исследованиями в хозяйствах Костромской области при фасциолезе крупного рогатого скота подтверждена высокая диагностическая ценность и эффективность РНГА, оптимальное соотношение специфичности и чувствительности.

7.5. Серологический скрининг при помощи РНГА является достоверным как при острой, так и хронической формах фасциолеза крупного рогатого скота. В РНГА средние уровни титров антител при острой форме фасциолеза на 1-2 разведения выше (1:640), чем при хронической (1:160 - 1:320).

7.6. Положительные результаты серологического исследования отмечены у дегельминтизированных животных, в печени которых фасциолы не выявлены, но установлены патологические изменения, свойственные фасциолезу. Показатели серопозитивности, сохраняющиеся продолжительный период времени (4-8 недель) обусловлены сенсибилизацией тканей животных экскреторно-секреторными антигенами Fasciola hepatica.

8. Аллергический метод диагностики фасциолеза крупного рогатого скота менее информативен, чем РНГА (50-70 %) и может использоваться как дополнительный или альтернативный для контроля эффективности дегельминтизации при острой форме.

9. Антгельминтные препараты бензимидазолового ряда фебамел (фенбенда-зол) и альбамел (альбендазол) обладают невысокой экстенсэффективностью при фасциолезе - 76 и 50 %, соответственно. Для оптимального регулирования эпизоотического процесса при фасциолезе вышеназванные препараты не пригодны.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. После широкой апробации в хозяйствах Российской Федерации и утверждения нормативно-технической документации на диагностический набор (в ВГНКИ) серологический метод диагностики фасциолеза - РНГА рекомендуется использовать для сероэпизоотологического мониторинга. Постановку РНГА на фасциолез следует осуществлять в областных и межрайонных ветеринарных лабораториях. Комплектацшо лабораторий диагностикумами (фасциоловыми антигенами и другими иммунореагентами) проводит организация - изготовитель (КГСХА). Реакцию непрямой гемагглютинации с экскреторно-секреторными антигенами Fasciola hepatica (диагностический титр 1:160) рекомендуется применять как в острый, так и хронический периоды фасциолеза.

2. Серологические исследования необходимо проводить в конце пастбищного периода (октябрь), затем после дегельминтизации (январь - апрель).

В конце лета и осенью рекомендуется дегельминтизировать только положительно реагирующих в РНГА животных.

Контроль эффективности дегельминтизации следует осуществлять через 30 и 60 дней комплексно с использованием гельмитоовоскопического, серологического и аллергического методов диагностики. Последний применяют параллельно с серологическим или как альтернативный.

Первично положительно реагирующих в РНГА животных обрабатывают ант-гельминтными препаратами, эффективными против ювенильных форм фасциол фазинекс, ацемидофен, клозантел, некоторые рафоксаниды). Вторично положительно реагирующих (через вышеуказанные сроки) необходимо дегельминтизи-ровать повторно, используя антгельминтные препараты против половозрелых фасциол.

Конкретные сроки диагностических исследований в зимний и весенний сезоны следует определять на основании детального изучения динамики снижения титров антител к Fasciola hepatica после дегельминтизации животных. При этом важным является учет особенностей динамики эпизоотического процесса при фасциолезе в различных регионах Российской Федерации.

На основании уровней титров антител при хронической форме фасциолеза и продолжительности периода серопозитивности (4-8 недель) у дегельминтизиро-ванных животных проводят повторную дегельминтизацию положительно реагирующих.

С целью подтверждения достоверности серологических исследований на фасциолез при помощи реакции непрямой гемагглютинации следует проводить контрольный убой среди положительно реагирующих животных с низкими показателями продуктивности.

3. Аллергический метод диагностики рекомендуется использовать для выявления острой формы фасциолеза в летний (июль - август) и осенний (сентябрь -октябрь) сезоны - для уточнения сроков дегельминтизации животных. Аллерген вводят внутрикожно, в среднюю треть шеи. Результаты оценивают через 40-60 мин. Утолщение кожной складки на 5 мм и более свидетельствует о положительной реакции на фасциолез.

4. С целью осуществления достоверного эпизоотологического мониторинга острую форму фасциолеза рекомендуется диагностировать комплексно - на основании серологического (РНГА), аллергического, копроовоскопического и периодических контрольных послеубойных исследований.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Золоткова, Татьяна Сергеевна, 2002 год

1. Абдулмагомедов С.А., Шахмалов В.М. К вопросу эпизоотологии тремато-дозов крупного рогатого скота в Дагестане// Материалы докл. науч. конф. «Актуальные вопросы теоретической и прикладной трематодологии и цестодологии». РАСХН, ВИГИС. М., 1997. - С.4.

2. Абрамов В.Е. Теоретическое обоснование создания новых препаративных форм альбендазола и клозантела для борьбы с эндо- и эктопаразитами сельскохозяйственных животных// Автореф. дисс. докт. вет. наук. С.-Петербург, 1999. - 46 с.

3. Азимов З.А. Обнаружение адолескариев фасциол// Ветеринария. М., Колос, 1985. - № 4,- С.42-43.

4. Архипов И.А., Веселова Т.П. Эффективность куприхола при трематодозах жвачных животных// Ветеринария. М., Колос, 1992. - № 3,- С.30.

5. Архипов И.А. Проблемы и перспективы создания новых лекарственных форм антгельминтиков и эндэктоцидов для животных// Материалы докладов науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». РАСХН, ВИГИС. -М„ 1999. С.14-16.

6. Архипов И.А., Меланич Н.М., Кошеваров Н.И Эффективность антитрема при фасциолезе и парамфистомозе крупного рогатого скота'/ Ветеринария. ML Колос, 2001. -№ 2. -С.27-29.

7. Атаев A.M., Адильханова Т.Х., Канаев М.С. Распространение и динамика фасциолеза крупного рогатого скота в равнинной зоне Дагестана// Сб. науч. тр. Дагестанского научно-исслед. вет. института. Махачкала, 1984. - В. 16 - С.40-51.

8. Атаев A.M. Особенности эпизоотического процесса при фасциолезе животных// Ветеринария. М., Колос, 1991. - № 10. - С.44-47.

9. Атаев A.M. Экологические основы терапии и профилактики фасциолеза животных// Ветеринария. М., Колос, 1994. -№11,- С.28-30.

10. Атаев A.M. Взаимоотношение фасциол и их хозяев в Юго-восточном регионе Северного Кавказа// Материалы докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». РАСХН, ВИГИС. М., 2001. - С. 16-17.

11. Беэр О.А., Ройтман В.А. Роль теоретической паразитологии в прикладных паразитологических исследованиях// Материалы докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». РАСХН, ВИГИС. М., 2001. -С.32-34.

12. Биггиров A.M., Сохроков З.А. Факторы становления пастбищных популяций фасциол//Ветеринарный вестник. М, 1999. -№ 1. - С. 118-120.

13. Бочарова М.М., Галазов В.И. Распределение фасциолы обыкновенной в популяциях различных хозяев// Материалы докл. науч. конф. «Актуальные вопросы теоретической и прикладной трематодологии и цестодологии». РАСХН, ВИГИС. М., 1997а. - С.27-29.

14. Буриев К.А. Динамика инвазированности моллюсков личиночными формами фасциол в хозяйствах Ферганской долины// Материалы докл. науч. конф. «Возбудители и переносчики паразитов и меры борьбы с ними». Самарканд. 1988. - С.43.

15. Веселова Т.П., Доронина М.В , Савченко Н.Н. Динамика накопления гек-сихола-С в фасциолах// Ветеринария. М., Колос, 1986. - № 12. - С.45.

16. Вишняускас А.Ю., Василевич Е.Н., Химиопрофилактика фасциолеза овец// Ветеринария. М., Колос, 1983. - № 2. - С.46.

17. Волков А.Х. Методы и средства борьбы с ассоциативными инвазионными болезнями крупного рогатого скота// Автореф. дисс. док. вет. наук. Иваново, 2001. - 46 с.

18. Гаджиев Я.Г., Алиев А.А., Препараты против преимагинальных форм Fasciola gigantica// Ветеринария. М., Колос, 1983. - № 4. - С.37-38.

19. Гаджиев Я.Г. Распространение фасциолеза в зависимости от категории хозяйств.// Материалы науч. конф. «Исследования по гельминтологии в Азербайджане». Баку, 1984. - С.23-24.

20. Гаджиев Я.Г., Гараев В.Х. Урсовермит при фасциолезе овец// Ветеринария. М., Колос, 1986. - № 2. - С.47.

21. Гариев Б.Г. Эпизоотология фасциолеза овец при отгонном животноводстве// Тезисы докладов. Съезд Всесоюзного общества гельминтологов. Тбилиси, 1986. - С.32.

22. Горохов В.В. Эпизоотический процесс при фасциолезе// Ветеринария. -М., Колос. 1986. № 6. - С.38-43.

23. Горохов В.В. Фасциолез как экологическая проблема// Ветеринария. М., Колос, 2000. -№3. - С.8.

24. Горохов В.В., Войтюк ВН. Требоганова Н.В. Эпизоотическая ситуация но трематодозам в Московском регионе// Материалы докл. науч. конф. «Актуальные вопросы теоретической и прикладной трематодологии и цестодологии». РАСХН, ВИГИС. М., 1997. - С.43-45.

25. Горчаков В.В. Возможность ограничения численности малого прудовика в каналах мелиоративной сети// Тезисы докладов. Съезд Всесоюзного общества гельминтологов. Тбилиси, 1986а. - С.43-44.

26. Горчаков В.В. Поиск комплексного подхода биологического ограничения численности малого прудовика// Тезисы докладов. Съезд Всесоюзного общества гельминтологов. Тбилиси, 19866. - С.37.

27. Горчаков В В. К прогнозированию фасциолеза в Нечерноземной зоне Российской Федерации// Тез. докл. Всерос. симп. «Роль гельминтол. школы в развитии паразитол.». М., 1997. - С.1 5.

28. Дарченкова Н.Н. Использование карт районирования и структуры нозоа-реала в повышении эффективности борьбы с биогельминтозами// Материалы докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». РАСХН, ВИГИС. М., 2001. - С.74.

29. Даугалиева Э.Х., Курочкина К.Г. Иммунопрофилактика гельминтозов сельскохозяйственных животных// Материалы докл. науч. конф. «Актуальные вопросы теоретической и прикладной трематодологии и цестодологии». РАСХН ВИГИС. М., 1997. - С.50-51.

30. Демидов П.В. Гельминтозы животных. М., Агропромиздат. - 1985. - 236с.

31. Зубов А.В. Влияние трематод на количественный и качественный состав инфузорий преджелудков и сравнительная эффективность антгельминтиков при фасциолезе и парамфистомозе крупного рогатого скота// Автореф. канд. вет. наук. М., 2002. - 16 с.

32. Клименко В.В., Белозеров С.II. Диагностическая эффективность очищенного антигена протеиназы F.hepatica в иммуноферментной реакции при фасциолезе овец//Бюл. Всесоюз. ин-та гельминтологии. - М., 1986. - В.44. - С.31-38.

33. Котельников Г.А. Гельминтологические исследования животных и окружающей среды. М. Колос, 1984. - С. 19-21.

34. Кузьмичев В.В. Качество мяса животных при фасциолезе в зависимости от сроков инвазии и дегельминтизации// Материалы докл. науч. конф. «Актуальные вопросы теоретической и прикладной трематодологии и цестодологии» РАСХН, ВИГИС. М., 1997. - С.79-80.

35. Мовсесян С.О., Чубарян Ф.А. Экологические основы профилактики тре-матодозов животных/'/' Ветеринария. М., Колос. 199 1. - № 12. - С.30-3 1.

36. Мякин В.А. Комплексная терапия при фасциолезе крупного рогатого скота// Материалы докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». РАСХН, ВИГИС. М, 2001. - С. 166-167.

37. Нурхаметов Х.Г., Байматов В Н. Функциональное состояние печени овец после дегельминтизации при фасциолезе// Ветеринария. М., Колос. 1996 - №5, С. 36-39.

38. Петров Ю.Ф., Сазанов A.M., Шестеринина Е. М. Рекомендации по профилактике фасциолеза в хозяйствах Нечерноземной зоны. М., 1985. - С.5.

39. Петров Ю.Ф., Абалихин Б.Г. , Кузьмичев В.В. Борьба с фасциолезом и парамфистоматидозами в условиях мелиорации земель Центрального Нечерноземья РСФСР// Тезисы докладов национальной конференции. Иваново. 1986 -С.73-74.

40. Петров Ю.Ф., Абалихин Б.Г. Эффективность различных систем противо-фасциолезных мероприятий// Материалы науч. конф. ИСХИ «Онтогенез, профилактика и лечение болезней с.-х. животных». Иваново, 1993. - С. 97-99.

41. Полуэктова П.Ф. Изучение иммуноглобулинов при экспериментальном фасциолезе овец// Труды Всесоюзн. института гельминтологии. М., 1983. - В.26 - С.107-113.

42. Полуэктова П.Ф. Роль иммуноглобулинов Ig G1 и Ig G2 в реакции гиперчувствительности немедленного типа при фасциолезе// Сб. науч. трудов «Проблемы ветеринарной иммунологии». М., 1985,- С. 177-180.

43. Пушкарев А.С. Патогенез при спонтанном фасциолезе крупного рогатого скота// Сб. науч. трудов «Экологическая паразитология». Иваново, 1998а. - С.35-36.

44. Пушкарев А.С. Опыт лечения фасциолеза крупного рогатого скота// Сб. науч. трудов «Экологическая паразитология». Иваново, 19986. - С.32-33.

45. Пушкарев А.С. Действие дисалара на иммунобиологическую реактивность при фасциолезе КРС и овец// Ветеринария. М., Колос, 1999. - № 1. - С.28-30.

46. Рехвиашвили Э.И. Эколого-эпизоотологический анализ трематодозов жвачных животных в условиях юга России// Сб. науч. трудов «Экологическая паразитология». Иваново, 1998. - С.36-37.

47. Рехвиашвили Э.И. Особенности иммунологического статуса у крупного рогатого скота при спонтанном фасциолезе и дикроцелиозе// Сб. науч. трудов «Паразитарные и ассоциированные болезни животных и их профилактика». -Иваново, 1997а. С.58-59.

48. Рехвиашвили Э.И. Применение полиоксидония для коррекции иммунной системы овец после дегельминтизации против фасциолеза// Сб. науч. трудов «Паразитарные и ассоциированные болезни животных и их профилактика». Иваново, 19976. - С.60-61.

49. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Минск, Вышэйшая школа, 1973. - 320 с.

50. Садчиков С.Ю. Влияние F.hepatica на некоторые физиологические показатели коров при хроническом фасциолезе// Труды Моск. гос. акад. вет. мед. и био-технол. М., 1998. - С.104-106.

51. Сазанов A.M. О таксономической структуре вида Fasciola hepatica L., 1758//Материалы науч. конф. «Актуальные вопросы теоретической и прикладной трематодологии и цестодологии». РАСХН, ВИГИС. М., 1997. - С. 129-131.

52. Сазанов A.M. Стратегия и тактика дегельминтизации животных против фасциолеза// Материалы докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями», РАСХН, ВИГИС. М., 2001. - С.233-235.

53. Сафиуллин Р.Т., Вечеркин А.С. Эффективность левацида при фасциолезе коров и овец// Материалы науч. конф. «Актуальные вопросы теоретической и прикладной трематодологии и цестодологии». РАСХН, ВИГИС. М., 1997. -С.140-141.

54. Сафиуллин Р.Т., Бурмистров Е.Н., Волков А.Х. Сантел высокоэффективный препарат при паразитарных болезнях крупного рогатого скота// Ветеринария. - М., Колос, 1999. - № 5. - С.33-35.

55. Сивков Г.С., Домацкий В.Н., Федоров 10.В., Листишенко А.А., Иванова А.А. Эпизоотология фасциолеза крупного рогатого скота в Тюменской области// Ветеринария. М., Колос, 2000. - № 2. - С.28-29.

56. Сковронский Р.В., Угрин И.Н. Выявление биотопов малого прудовика// Ветеринария. М., Колос, 1984. - № 6,- С.45.

57. Субботин Т.Ф., Карелин С.Т. Эпизоотология, течение и лечение при фасциолезе овец// Ветеринария. М., Колос, 1979. - 8. - С.46.

58. Тернопольская Л.Д. Изменчивость F.hepatica Г, 1758 у разных хозяев/'7 Бюл. Всесоюз. инст. гельминтол. М., Колос, 1984. - В.38. - С.47-51.

59. Филиппов В.В. Эпизоотология гельминтозов животных. М., Колос. 1988. - 227 с.

60. Читиашвили Б.Г., Садатерашвили Ю.Ф., Зурабишвили Д.З., Нануашвили Л.Г Фасциолоцидная активность препаратов ГЗ-048, ГЗ-042// Ветеринария. М., Колос, 1998. - № 4. - С.36-37.

61. Чобанян А.Г. Влияние эхинококкозной инвазии на зараженность фасцио-лами и дикроцелиумами рогатого скота// Тезисы докл. II Всесоюзного съезда па-разитоценологов. Киев, 1983. - С.367-368.

62. Шакиев Е.Ш. Солдатченко A.M. Мероприятия при фасциолезе // Ветеринария. М. Колос, 1980. -№ 10. - С.36-38.

63. Шекотуров В.Л. Эпизоотология фасциолеза крупного рогатого скота в хозяйствах Вологодской области// Материалы науч. конф. «Профилактика и лечение болезней с.-х. животных». Вологда, 1986. - С.31-32.

64. Шемякова С.А. Антгельминтная эффективность тетраксихола при фасциолезе и влияние его на организм и продуктивность жвачных.// Материалы науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». М., 1999 а. -С. 309.

65. Шемякова С.А. Иммунокоррегирующая терапия при фасциолезе крупного рогатого скота/7 Автореф. канд. вет. наук. М., 1999 б. - 26 с.

66. Шипшев Б.М. Эпизоотология фасциолеза жвачных животных в Кабардино-Балкарской республике и совершенствование мер борьбы с ним// Автореф. канд. вет. наук. Иваново, 1998. - 23 с.

67. Шульц Р.С. Гельминтозы овец и крупного рогатого скота. М., Сельхоз-гиз., 1959. - С.178.

68. Яворский И.П. О заселении личинками фасциолы малых прудовиков и пастбищных биоценозов в западных областях УССР// Тезисы докл. И Всесоюзного съезда паразитоценологов. Киев, 1983. - С.386-387.

69. Abbas M.K., Altaif K.I. Studies on experimental ovine fascioliasis due to F.gigantica:gematological and serum protein changes// Helmintologia. 1990. - V.27, № 3. - P.173-182.

70. Alonso J.M.,Garcia M.J.A. Fascioliasis humana con presentation atipica у grave. Tratamiento con triclabendasol// Enferm. mfec. у microbiol. clin. 1998. - V.16, № 1. - P.28-30.

71. Altaif K.I. Factors affeoting infectivity and development of larval stages of the liver fluke F.gigantica in the snails L. auncularia complex // Helmintologia. 1989. -V.26, № 3. - P.211-218.

72. Anon D. Hiver flukes cause economic losses// Idano Fanner Stockman. 1986. -103, № 1. - P.7.

73. Antras V., Mage C., Collet J.P. Efficacite du Closantel injectable sur F infestation naturelle des bovms par Fasciola hepatica//' Rev. med. vet. 1997. - 148, № 10. - P.777-780.

74. Armstrong D.A. The economic impact of fascioliasis// World congress on diseases of cattle. Amsterdam. 07-10.09.1982. H85-2057. Proceedings. 1982. - V.2.-P.1113-1117.

75. Ayadi A., Rachid B.M.S. Etudes epidemiologiques sur in foyer de distomatose a F.hepatica dans les oasis de Tozeur (Tumsie)//Bull. Soc.fi". parasitol. 1993. - 11. - № 2. - P.217-222.

76. Ayadi A., Mam F., Said B.M. Etat actuel de la fasciolose en Tunisie// Bull. Soc. fr. parasitol. 1997. - 15, № 1. - P.27-32.

77. Bossaert K., Louneux J.F., Losson В., Peters J. Modelisation du cycle de F.hepatica en Belgiaue a partir de parametres climatiques//Ann. Med.vet. 1999. - 143. -№3. - P.201-211.

78. Bossaert K., Alonso M.J.M. Identificationet caractensation partielle dune gene de F.hepatica d'interet diagnostique potential. Ann.med.vet. - 2000. - 144, № 3. -P. 165-171.

79. Boulard С., Bourry M. Compavasion de la detection des foyers de fasciolose par test ELISA sur lactoserum et serum et par coproscopie/У Ann. Rech. veter. 1985. -16, 4. - P.363-368.

80. Bulgin M.S., Anderson B.C., Hall R.F., Lang B.Z. Serum gamma glutamyl-transpeptidase activity in cattle with induced fascioliasis// Rec. in veter Sc. 1984. - 37, 2. -P.167-171.

81. Cadel S., Barbier D., Duhamel C. A propos de 18 cas de fasciolose humaine recenses en Nonnandie 1994-1995// Bull.Soc.fr.parasitol. 1996. - 14, № 1. - P.39-43.

82. Carlier Y. F.hepatica// Rev.Assoc. Beige technol. lab. 1993. - 20, № 4,- P. 211-212.

83. Cawdery M.J.H. Review of he economic importans of fascioliasis in sheep and cattle/ Irish veter news. 1984. - 9. - P. 14-22.

84. Chiper N., Lordanova P. Effect of constant magnetic field on the development of Fasciola hepaticain the snail host// Докл. Бълг. АН. 1994. - 47, № 10.-P. 1 11-1 1 3.

85. Czaphcki С., De Keyser H. A propos d'une enzootie de distomatose porcine// Ann. Med. Veter.- 1984.-128, 3. P.221-224.

86. Esteban M.M. Garcia V.Z. Aislamiento e identification in situ de antigenos de F. htpatica.Vet.Med.- 1994,- 25, № 3. P.267-271.

87. Gomes C., Blanco J.R. Biliary aspiration after administration of intra venous cholecystokmin for the diagnosis of hepatobiliary Fascioliasis/'' Clin. Infec. Diseases.-1998,- 26, №4,- p. Ю09-1010.

88. Gundlach J.L., Kowski S. Immunologiczne aspekty fasciolozy ovviec// Med. weter. 1985. - 41, №4. - p. 199-201.

89. I Gundlach J.L., Kowski S. Zmiany poziomu wybranych skladnikow mineral-nych surowicach cielat v przebiegu doswiadczalnej mwazji i superinwazji F.hepatica// Med. Veter. 1988. - 44, № 3. - P. 160-165.

90. Haroun E.M., Gadm H. Stadies on naturally-occurmg ovine fascioliasis m the Sudan// J. Helmmthol.-1986 60, 1,- P.47-53.

91. Hernandez S., Martinez-Cruz M.S. Experimental fasciolosis in goats: clinical pathology and humoral response//6lh Eur. Multicolloq. Parasitol. Programme and Abstr. The Hague. - 1992. -P.221.

92. Hillyer G.V., Sanchez Z. Immunodiagnosis of bovine fascioliasis by enzyme-linked immunosorbent assay and immunoprecipitation methods// J. Parasitol. 1985. -71, №4. - P. 449-454.

93. Hillyer G.V., Serrano A. Fractionation of F.hepatica tegument antigens and their application to the serodiagnosis of experimental fascioliasis by the enzymelmced immunosorbent assay/7 J.Helmmthol. 1986. - 60, 3. - P. 173-178.

94. Hoover R.S., Lmcolus D., Hall R.F., Wescott R. Seasonal transmission of F. Hepatica to cattle m northwestern United States// J. Am. Veter. Med. Assn. 1984. -184, 6. - C.695-698.

95. Kawano J., Yamomoto H.A simplified method for preparation of antigens of Japanese Fasciola sp. for double immunodiffusion// Japan J. Veter.Sc. 1985. - 47, № 4. -P.611-616.

96. Kodama K. Fascioliasis humanus: fasciolas of bitionoli and prasikvanteli// Kansenshogaku zasshi. J.Jap.Assoc. Infec. Diseases. - 1997. - 71, № 1. - P. 1162-1 167.

97. Larramendy R., Pedroso M. Evaluacion lmmunologica de reacciones cruzadas de un antigeno de F.hepatica con otros helmintos gastrointestinales del bovino// Rev. Salud. Annri. 1984.- 6, 3. - S.373-382.

98. Larramendy R., Pedroso M. Deteccion de anticuerpos a F.hepatica en terneros infestados experimente// Rev. Salud anim. 1985. - 7, 2. - S.13 1-140.

99. Lucchese F., Tribouley I., Lejoly-Boisseau H. La distomatose humaine a Fasciola hepatica de la France// Bull. Soc. Fr. parasitol. 1996. - I 5, 1. - P.47-56.

100. Mage C., Rondelaud D. Reflexions sur la prevention de la fasciolose en France// Doss. Elevage. 1983. - 5, 2. - P.21-30.

101. Mage C. Frequence de F.hepatica influence des penodes d'examens coproscopiques et de la conduite de paturage selon la climatologue// Rev. Med. Veter. -1989. 140, №44. - P.297-301.

102. Mage C., Thibault D. Nouvelles donnes sur les botes intermediares de F.hepatica;7 Rev. Med. veter. 1989. - 140, № 2. - P. 129-133.

103. Maingi N., Mathenge S.N. Acute fatal fascioliasis in sheep in kmangop dis-trinct of Kenya. Bull. Anim. Health and Prod. Aff. 1995. - 43. № 1. - P.21-27.

104. Malone J.В., Loyacano A.F., Hugh-Jones M.E., Corcum K.C. A three-year study on sesonal transmission and control of F.hepatica of cattle in Louisiana// Prevent. Veter. Med. 1984. - 3, 2. - P.l31-141.

105. Malone J.В., Todd J. Diagnosis of fasciola infections by detection of antigens in feces or intestinal content// Board of Supervisors of Louisiana state University and Agricutural and Mechanical college. 1997. - № 7, 29053.

106. Marrero C.A.R., Santiago N. Evaluation of lmmimodiagnostic antigens in the excretory-secretory products of F. hepatica // J. Parasitol. 1988. - 74, № 4. - P.646-652.

107. Mas-Coma M.S., Esteban J.G., Bargues M.D. Epidemiology of human fascio-liasis :A review and proposed new clasification// Bull. World health Organ. 1999. - 77, № 4. - P.340-346.

108. Morilla A C., Paniagua R.Comparison of dot enzyme- lmced immunosorbent assay (DOT-ELISA), PHT, and TIA in the diagnosis of natural of experimental F.hepatica infections m sheep// Veter. Parasitol. 1989. - 30, № 3. - P. 197-203.

109. Pelaez M.P, Sampaio S. Etude des antigenes et anticorps circulants dans la fas-ciolose ammale par les techniques d'unmunoelectrodiffnsion et de micro-ELISA// Bull. Acad. Veter. Fr. 1988. - 61, №2. - P. 155-164.

110. Pfister K. Role of IgE in fasciohasis// Prev. Veter.Med. 1984. - 2, 1-4. -P.359-370.

111. Rapic D., Dzakula W. Efficacy of tnclobendasole against F.hepatica in naturally infected sheep// Veter. Arh. 1984. -54, 1 - P. 13-18.

112. Reed M.B., Spithill T.W., Stugnell R.A., Panaccio M. F.hepatica: stage-specific expression of novel gene sequences as identified by differential display// Exp. Parasitol. 1998. - 89, № 2. - P.169-179.

113. Rondelaud D., Vignoles P., Dreyfuss G. Fasciola hepatica Linne: Les carac-tenstiques de Г infestation chez Limnaea truncatula Muller en relation avec son age lors de Г exposition// Bull. Soc. fir. parasitol. 1997. - 15,32. - P. 177-184.

114. Ruiz-Navarette M.A., Monlla A. Characterisation of somatic and excretory-secretory antigens of a dult flukes recognized by infected scheep. Rev. latinoamer. mi-crobiol. 1993. -35, № 3. - P. 301-307.

115. Said В., Dorchies P. Fasciolose ovine: etude de 1 anemie et de la proteinemie an cours d'une infestation naturelle et apres traitement// Rev. Med. Veter. 1986. - 137, 8-9. - P. 611-615.

116. Salma A.R.M., O' Reilly K.L., Malone J.B. Evaluation of diagnostic monoclonal antibody-based capture enzyme-linced immunosorbent assay for detection of a 26 to 28 led F.hepatica coproantigen in cattle// Amer.J.Vet. Res. 1998. - 59, № 5. - P.533-537.

117. Samani F., Mahmoud O.M. Serum enzyme activity and bilirubin concentration in sheep experimentally infected with F. gigantica// J.сотр.Pathol. 1985. - 95, 4. - P. 499-503.

118. Santiago N., Hillyer G.V.Antibody profiles by EITB and ELISA of cattle and sheep infected with F. hepatica//J. Parasitol. 1988. - 74, № 5. - P. 810-818.

119. Scheldrake R.F., Husband A.J. Transport of serum IgA into bile of sheep infected with F.hepatica// Veter. Immunopathol. 1988. - 18, № 1. - P. 29-39.

120. Schwacha H., Kenchel M. F.gigantica in the common bile duct: Diagnosis by ERCP // Endoscopy. 1996. - 28, № 3. - P. 323.

121. Senola H. Changes in agar-gel precipitating antibody titer and chnicobiochemi-call fmdinggs on dairly cows naturally infected with Fasciola sp.// J.Japan veter. Med. Assn. 1985. - 38, 1. - P. 21-26'.

122. Sexton J.L., Wilce M.C.J. Vaccination of sheep against F.hepatica with gluta-tion-S transferase : identification and mapping of antibody epitopes on a three- sedimen-tional model of the antigen// J.Immunol. 1994. - 152, № 4. - P. 1961-1872.

123. Shimizu A., Hirooka S. Precipitin response of rabbits infected with F.sp. after treatment with rafoxanide// Sc. Rep. Fac. Agr., Kobe Univ. 1985. - 16, 2. - P. 559-562.

124. Tahir El H., Hillyer G.V. Resistance to fascioliasis a review// Veter. Parasitol.- 1986.- 20, 1-3. P.63-93.

125. Tanya V.N., Ogunrinade A.F. Precipitin antibodies in natyral fascioliasis// Rev. Elevage. Med. veter. 1984. - 37, 1. - P. 26-29.

126. Vesely L., Birei J., Cobra J. Blood count in lambs with subclinical fasciolosis// 6-th Eur. Multicolloq. Parasitol., The Hague, Sept. 7-11, 1992. Programme and Abstr. -The Hague. 1992. - P. 220.

127. Wang В., Chen L., Мао X. Cell mediated immunological reaction by water buffalos and goats infected with F.hepatica// Clun. J. Vet. Sci. 1998. - 18, № 6. - P.566-568.

128. Wang K., Xu L., Gao D., Peng M. Connection of infection by F.hepatica to number of mastocytes in mucose of bileary ducts by ruminants.Xiumu shouvi Xuebao . Acta vet.et zootech. Sin. 1996. - 27, №3. - P.265-268.

129. Watanabe К., Hasegawa M. An outbreac of intrauterine infection with Fasciola sp. in cattle//J.Japan Veter.Med. Assn. 1988. - 41, № 10. - P. 714-719.

130. Wedrychowiec H., Turner K. Local antibody responses in the bile and faeces of sheep infected with F.hepatica// Res. in veter. Sc. 1984. - 36, 1. - P. 44-51.

131. Wescott R.B., Farrell C.J., Shen D.T. Diagnosis of naturally occurmg F.hepatica infections in cattle with an enzyme-linced immunosorbent assay// Am. J. Veter. Res. 1984.- 45, 1. - P. 178-179.

132. Wijffels G.L., Salvatore L., Dosen M. Vaccination of sheep with purified cysteine proteinases of F.hepatica decreases worm recundity. Exp.Parasitol. 1994. - 78, № 2. - P. 132-148.

133. Wyckoff J.H., Bradley R.E. Diagnosis of F. hepatica infection in beef calves by plasma enzyme analysis// Am. J. Veter. Res. 1985. - 46, № 5. - P. 1015-1019.

134. Wyckoff J.H., Bradley R.E. An optimized enzyme-linked immunosorbent assay for quantitative diagnosis of bovine fascioliasis// J. Parasitol. 1986. - 72, 3. - P.439-444.

135. Yang Q., Mao W.H. Plasmaaspartate aminotransferase (AST), glutamate degi-drogenase (GLDH) and gammaglutamyltranspeptidase (GOT) activities in water buffaloes with experimental subclinical fascioliasis. Veter. Parasitol. 1998. - V.78, № 2.