Разработка и внедрение в клиническую практику специализированного фотометра с набором реагентов для количественного анализа общего белка в моче тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 05.11.17, кандидат технических наук Ким, Юрий Вячеславович

• Ким, Юрий Вячеславович
• кандидат технических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат технических наук Ким, Юрий Вячеславович

Перечень обозначений и сокращений.

Введение.

Глава I. Методы и средства анализа концентрации белка в моче.

1.1. Биологический объект исследования - белок в моче.

1.2. Методы определения белка в моче.

1.3. Основы метода взаимодействия комплекса красителя пирогаллоловый красный и молибдата натрия с белком.

1.4. Обоснование актуальности создания нового отечественного набора реагентов.

1.5. Физические основы функционирования биохимических фотометров.

1.6. Обоснование актуальности разработки анализатора концентрации общего белка в моче.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка и внедрение в клиническую практику специализированного фотометра с набором реагентов для количественного анализа общего белка в моче»

Заболевания почек - одни из самых распространенных недугов современного человека [1]. Ухудшающаяся экологическая обстановка в крупных городах, где проживает большая часть населения развитых стран, неправильное питание, вода низкого качества, нездоровый образ жизни и каждодневные стрессовые нагрузки - все это способствует быстрому росту числа людей, подверженных болезням мочевыделительной системы. К ним относятся сахарный диабет [2, 3], различные нефротические синдромы [1], которые в значительной степени влияют на состояние всего организма в целом [3-5].

По официальным данным отдела медицинской статистики и информатики МЗ и CP РФ на 01.01.2003 г. насчитывалось по обращаемости 2182408 больных 1 и 2 типом сахарного диабета. Фактическое же количество больных только сахарным диабетом в России в 3-4 раза выше, исходя из данных эпидемиологических обследований, проводимых в различных регионах страны.

Более 70% людей, имеющих болезни почек, не догадываются об этом. Зачастую, врачи способны поставить диагноз и назначить необходимое лечение тогда, когда заболевание приобретает тяжелую форму [2].

Существует несколько причин, из-за которых выявление патологии почек на ранних стадиях существенно усложнено, а зачастую невозможно.

Во-первых, многие популярные аналитические методы, как, например, метод с применением сульфосалициловой кислоты для преципитации белка в моче (ССК-метод), используемые сегодня в отечественной медицине, не позволяют выявлять малое содержание биологических веществ, являющихся надежными показателями работоспособности почек, например, таких как белок в моче. Эти методы также не позволяют корректно отслеживать изменение содержания этих биологических веществ в организме пациента.

Во-вторых, в подавляющем большинстве клинико-диагностических лабораторий (КДЛ), занимающихся исследованием мочи - основного результата деятельности почек, не используется современное высокопроизводительное и точное аналитическое оборудование [6].

В-третьих, крайне тяжелое экономическое положение отечественного здравоохранения не позволяет кардинально изменить сложившуюся ситуацию теми аналитическими средствами (оборудованием и методами), которыми обладает в настоящий момент.

Поиском решения проблемы диагностики почечных патологий активно занимаются исследователи во многих развитых странах, таких как Япония, США, Великобритания, Франция, Германия, Швеция, Южная Корея. Сегодня разработано и внедряется в зарубежную медицинскую практику большое количество новых, более современных методов диагностики про-теинурии - основного показателя нарушения работы почек, и мочевыдели-тельной системы в целом.

Для российского здравоохранения актуальным становится вопрос выбора приемлемого метода анализа белка в моче, а также выбора оборудования, удовлетворяющего условиям реализации этого метода.

Данная работа посвящена решению задач создания доступного по цене оборудования и набора реагентов, разработки методических указаний, с помощью которых любая КДЛ могла бы наиболее эффективно на сегодняшний день выполнять необходимое количество анализов содержания общего белка в моче (ОБМ).

Структура работы следующая:

В главе 1 представлен исторический обзор методов определения белка в моче, дана их классификация. Согласно сформулированным требованиям к современному методу анализа ОБМ наиболее оптимальным является метод, основанный на взаимодействии комплекса красителя пирогаллоловый красный и молибдата натрия с молекулами белка (ПГК-метод). В главе представлены основы этого метода и на основе анализа существующих реагентов с красителем пирогаллоловым красным (ПГК-реагентов) обоснована актуальность создания и внедрения в лабораторную практику нового набора реагентов. Далее рассмотрены физические основы функционирования биохимических анализаторов, на основе проведенного сравнения существующих фотометров и сформулированных требований обоснована актуальность разработки и внедрения в клиническую лабораторную практику специализированного фотометра для количественного анализа ОБМ. На основании общих выводов поставлена задача на разработку специализированного фотометра с набором реагентов для выполнения анализов ОБМ.

В главе 2 изложены результаты исследований характеристик созданного набора реагентов с целью дальнейшей разработки специализированного фотометра для анализа содержания ОБМ с его применением. Представлены методические аспекты определения концентрации ОБМ с применением исследованного набора реагентов. В завершении главы представлены результаты сравнительных исследований его характеристик и характеристик наборов реагентов других производителей, позволяющие заключить, что рассматриваемый набор реагентов не уступает по качеству импортным аналогам.

В главе 3 изложено решение задачи разработки и подготовки к серийному производству специализированного биохимического фотометра для выполнения количественных анализов концентрации ОБМ с применением исследованного набора реагентов, в том числе представлено решение задачи разработки и оптимизации измерительной части (оптической ячейки) фотометра, описан процесс выбора и конструирования основных узлов прибора при соответствующих ограничениях к ним, основанных на требованиях, изложенных в главе 1. Представлена блок-схема работы фотометра. Описаны его программные средства.

В главе 4 представлены результаты технических и медицинских испытаний фотометра и набора реагентов, проведенных соответствующими государственными испытательными учреждениями РФ. Приведены результаты сравнительных исследований применимости разработанной системы для выполнения анализа ОБМ в клинической практике, выявившие его значительные преимущества над повсеместно используемыми методами и оборудованием для выполнения данного вида анализа.

В заключении сделан вывод, о том, что поставленные задачи в данной работе выполнены, что подтверждают положительные заключения, полученные при испытаниях в сторонних организациях (соответствующие документы представлены в Приложениях к данной работе).

Данная работа защищает следующие положения:

1. Математическая модель определения концентрации белка в биопробе фотометрическим методом с помощью двухволновой методики анализа, позволяющая численно выбрать оптимальные параметры светодиодов, используемых в качестве источников излучения, и оценить возможные погрешности при фотометрировании.

2. Разработка фотометра, обладающего существенно низкой стоимостью в сравнении с существующими прототипами благодаря использованию в нем светодиодов с параметрами, выбранными с учетом результатов математического моделирования и экспериментальных данных; а также обладающего значительной производительностью за счет оптимизации конструкции и алгоритма работы для анализа с помощью созданного и исследованного набора реагентов.

3. Результаты исследований и технология производства набора реагентов, с улучшенными потребительскими характеристиками в сравнении с импортными аналогами, и обладающего более низкой стоимостью.

4. Результаты испытаний и внедрения разработанного оборудования для выполнения количественных анализов концентрации ОБМ в лабораторную практику отечественного здравоохранения.

Заключение диссертации по теме «Приборы, системы и изделия медицинского назначения», Ким, Юрий Вячеславович

4.3. Общие выводы

Решена задача по подготовке и проведению технических и медицинских испытаний набора реагентов, описанного в главе 2, и фотометра, описанного в главе 3. На основании положительных результатов испытаний они рекомендованы к промышленному производству и разрешены для применения в медицинской практике (per. удостов. № ФС 032а2004/1190-04 и № ФС 022а2004/1115-05, соответственно).

Показано, что разработанная аналитическая система: специализированный фотометр с набором реагентов - обладает явными преимуществами перед распространенными сегодня в КДЛ средствами анализов ОБМ, такими как ССК-метод и методы «сухой химии».

Учитывая результаты данной главы и результаты сравнительных исследований разработанного набора реагентов с аналогами других производителей, представленные в разд. 2.6.2 главы 2, можно утверждать, что разработанный фотометр с набором реагентов является наиболее эффективным (и по стоимости, и по потребительским параметрам) среди средств для выполнения анализов ОБМ, предлагаемых на российском рынке медицинской лабораторной техники.

Заключение

Цель работы заключалась в разработке и подготовке к серийному производству фотометра с набором реагентов и создании методики количественного определения концентрации ОБМ.

Перечень выполненных задач следующий:

1. Дано решение проблемы диагностики протеинурии, позволяющее улучшить качество, упростить рутинные процедуры и повысить производительность труда в КДЛ при выполнении данного вида анализов с существенным снижением их стоимости в сравнении с унифицированными в КДЛ методами.

2. Создан и исследован набор реагентов для количественного определения концентрации ОБМ с улучшенными аналитическими характеристиками в сравнении с импортными аналогами, такими как наборы «Total protein UC FS» (DiaSys, Германия) и «Fluitest USP» (Biocon Diagnostik, Германия).

3. Построена математическая модель, описывающая процедуру измерения проб, приготовленных с помощью исследованного набора реагентов, и расчета концентрации ОБМ, позволившая разработать требуемую конструкцию фотометра.

4. Выбрана численным моделированием оптимальная разрядность АЦП, рассчитаны точность и область линейности определения концентрации ОБМ, выбраны оптимальные параметры источников излучения и оптимизирована процедура настройки фотометров.

5. Разработана конструкция измерительной ячейки фотометра, эффективно выбраны и разработаны такие узлы и элементы фотометра, как микроконтроллер, корпус, индикатор, клавиатура, схема питания, которые позволили сконструировать фотометр, удовлетворяющий требованиям КДЛ к анализу ОБМ.

6. Разработаны программные средства фотометра, позволившие упростить выполнение анализов ОБМ, сделать его интуитивно-понятным для пользователя.

7. Разработан и подготовлен к серийному производству фотометр ФБС-01-1-«Микролаб-600» с набором реагентов для количественного определения белка в моче «Юни-Тест-БМ». Фотометр (per. удостов. № ФС 022а2004/1115-05) и набор реагентов (per. удостов. № ФС 032а2004/1190-04) внедрены в производство (выпущено более 170 фотометров и более 1100 наборов реагентов) и внедрены в широкую клиническую практику.

Широкое применение разработанного фотометра с набором реагентов в практике отечественных КДЛ позволит решить следующие задачи здравоохранения страны:

1. Улучшение качества диагностики протеинурии в медицинских учреждениях за счет повышения точности определения концентрации ОБМ с помощью данного фотометра с набором реагентов и стандартизация методики проведения анализов ОБМ (методический эффект).

2. Увеличение производительности КДЛ за счет повышения скорости и качества проведения анализов ОБМ с помощью данного оборудования (технический эффект).

3. Снижение финансовых затрат на выполнение анализов ОБМ за счет невысокой стоимости фотометра с набором реагентов, что позволит создать более благоприятную экономическую ситуацию для отечественной медицины (экономический эффект).

4. Рост доверия специалистов (врачей, лаборантов) к результатам анализов ОБМ с помощью данного оборудования как следствие выполнения п. 1 (социальный эффект).

Оценка потребности здравоохранения РФ в фотометрах ФБС-01-1-«Микролаб-600» для количественного определения концентрации ОБМ составляет не менее 5 тыс. штук.

В заключение автор выражает глубокую благодарность и признательность к.ф.-м.н. Шибанову А.Н. за научное руководство и поддержку в работе, а также за помощь в организации исследовательской работы и разработки представленного оборудования с набором реагентов. Также автор выражает искреннюю благодарность к.ф.-м.н. Свистову А.Е. за помощь, оказанную при разработке математических моделей, описанных в работе, и помощь при подготовке диссертации в целом, а также сотрудников компаний ЗАО «А/О Юнимед» и ООО «Эйлитон» за содействие.

Автор благодарит д.т.н. Беняева Н.Е. и д.ф.-м.н., профессора Сели-щева С.В. за согласие оппонировать данную работу на защите.

Список литературы диссертационного исследования кандидат технических наук Ким, Юрий Вячеславович, 2005 год

1. Юрьева Э.А., Длин В.В. Диагностический справочник нефролога // М.: Изд-во «Оверлей». 2002. - 96 е.;

2. Шестакова М.В. И РМЖ. 1998. - Т. 6. — № 12.-С.14-18;

3. Gerstein Н.С. et al. // JAMA. 2001. - Vol. 286. - P.421-426;

4. AnavekarN. et al. //N. Engl. J. Med. 2004. - Vol. 351. - P. 1285-1295;

5. Go A. et al.// N.Engl. J. Med. -2004. -Vol. 351.- P.1296-1303;

6. Щетникович K.A. II Лаб. 2002. - №2. - C.20-21;

7. Наточин Ю.В. Физиология почки // Л. 1972. - С.83-115;

8. Арутюнян В.М., Багдасарян А.С. Нефротический синдром // Ер.: Изд-во «Айастан». 1997. - 287 е.;

9. Чиж А.С., Петров С.А., Ящиковская Г.А. и др. Нефрология в терапевтической практике. 3-е изд-е, доп. // Под ред. А.С. Чижа. Минск: Изд-во «Высшая школа». - 1998. - 557 е.;

10. Clinical guide to laboratory tests. 3rd ed. // Edited by Tietz N.W. USA: W.B. Saunders Company. - 1995. - P.520;

11. Медицинские лабораторные технологии и диагностика: Справочник // Под ред. А.И. Карпищенко. — СПб: Изд-во «Интермедика». 2002. -С.155-177. -408 е.;

12. Назаренко Г.И., Кишкун А.А. Клиническая оценка лабораторных исследований. 2-е изд., стереотипное // М.: Изд-во «Медицина». 2002. -С.69-79, 121, 129-131, 199-205,208.-544 е.;

13. Серов В.В., Пальцев М.А., Мухин Н.А. и др. // Тер. архив. 1992. - № 6. -С.5-10;

14. Ратнер М.Я. Болезни почек. Справочник терапевта // Под ред. Ф.И. Комарова. Минск: Изд-во «Беларусь». - 1983. - С. 160-184;

15. Dilena В. A., Penberthy L.A., Fraser C.G. I I Clin. Chem. 1983. - Vol. 29. -P.553-557;

16. Карягина И.Ю., Слепышева B.B., Козлов A.B. И Кл. лаб. диагн. 1996. -№ 6. - С.27-28;

17. Sapan С. V., LundbladR.L., Price N.C. II Biotechnol. Appl. Biochem. 1999. -Vol. 29.-P.99-108;

18. Шмелева В.Г. Химия белков и ферментов. Текст лекций // СПб: СпбТИ. 1992.-С.4-37;

19. Kjeldahl J. И Z. anal. Chem. 1883. - Vol. 22. - P.366;

20. Kjeldahl J. II Compt.-rend. trav. Lab. Carlsberg. 1883. - Vol. 2. - P. 1;

21. Kjeldahl J. I/ Compt.-rend. trav. Lab. Carlsberg. 1888. - Vol. 2. - P. 197;

22. Hiller A., Plazin J., Van Slyke D.D. II J. Biol. Chem. 1948. - Vol. 176. -P.1401-1420;

23. Vickery H.B. II Yale J. Biol, and Med. 1946. - Vol. 18.-P.473;

24. Friedrich A. II Mikrochemie. 1933. - Vol. 13. - P.91;

25. Bradstreet R.B. II Chem. Rev. 1940. Vol. 27. - P.331;

26. BrandE., Kassell ВSaidel L.J. II J. Clin. Invest. 1944. - Vol. 23. - P.437;

27. Brand E. // Ann. New York Acad. Sc. 1946. - Vol. 47. - P. 187;

28. Brand E., Edsall J. Т. II Stanford University. 1947. - Vol. 16. - P.223;

29. WuH. II J. Biol. Chem. 1921. - Vol. 51.-P.33-39;

30. Kingsbury F.B., Clark C.P., Williams G., Post A.L. И J. Lab. and Clin. Med. -1926.-Vol. 11.-P.981-989;

31. Robinson H. W., Hogden C.G. // J. Biol. Chem. 1941. - Vol. 140. - P.853;

32. Beckman W. W. et al. // J. Biol. Chem. 1943. - Vol. 148. - P.247-248;

33. Hiller A., GreifR.L., Beckman W.W. И J. Biol. Chem. 1949. - Vol. 176. -P.1421-1429;

34. Lowry O.H. et al. // J. Biol. Chem. 1951. - Vol. 193.-P.265-275;

35. Амелин В.Г., Иванов В.М., Золотое Ю.А. Химические тест-методы анализа // М.: Изд-во «Едиториал УРСС». 2002. - С.268-282;

36. Ким Ю.В., Шибанов А.Н. II Клин. лаб. диагн. 2004. - № 8. - С.10-15;

37. Алътшулер Б.Ю., Раков С.С., Ткачев Г.А. II Вопр. мед. химии. 2001. -№ 4. - С.426-438;

38. Nakamura J., Yakata М. II Clin. Chem. 1982. - Vol. 28 (11). - P.2294-2296;

39. Nishi H.H., ElinRJ.II Clin. Chem. 1985.-Vol. 31.-P.1377-1380;

40. Chambers R.E., Bullock D.G., Whicher J.T\ II Ann. Clin. Biochem. 1991. -Vol. 28 (Pt. 5).-P.467-473;

41. Миронов O.JI. Химический состав почечных камней и фракционный состав белков сыворотки крови и мочи. Автореферат диссертации на соискание ученой степени к.х.н. // Донецк: ИФОХУ им.Л.М. Литвиненко АН Украинской ССР. 1991. - 10 е.;

42. Ким Ю.В., Потехин О.Е., Токар М.И., Шибанов А.Н. II Лаб. мед. 2003. -№ 6. - С.94-98;

43. Folirt О., Denis W. И J. Biol. Chem. 1914. - Vol. 18. - Р.273-276;

44. Albanese А.А., Irby V., Saur В. II J. Biol. Chem. 1946. - Vol. 166. - P.231-237;

45. Shiba K.S. et al. // Clin. Chem. 1985. - Vol. 31.- P. 1215-1218;

46. GerbautL., Macart M. II Clin. Chem. 1986. - Vol. 32. - P.353-355;

47. Chaturvedi S., Jain N., Bhatia A. II Indian J. Pathol. Microbiol. 2001. -Vol. 44 (4). -P.399-401;

48. Базарный В.В., Мазеин Д.А. II Вестник Обл. клин, больницы №1 г. Екатеринбург. 2002. - № 4. - С.45-47;

49. Пупкова В.И. и др. // Новости «Вектор-Бест». 2003. - № 4 (30). - С.7-Ю;

50. Shriever Я, Gambino S.P. II Am. J. Clin. Pathol. 1965. - Vol. 44. - P.667-672;

51. Ebina S., Nagai Y. II Clin. Chem. 1979. - Vol. 25. - P.247-251;

52. Muir A., Hensley W.J. II Clin. Chim. Acta. 1978. - Vol. 90 (3). - P.231-239;

53. Yosselson-Superstine S., Sinai Y. I I J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1986. -Vol. 24 (1). -P.103-106;

54. BeibyJ.P., O'Leary B.A. II Clin. Chem. 1990. - Vol. 36. - P.565-567;

55. Kaplan I. V., Levinson S.S. II Clin. Chem. 1999. - Vol. 45. - P.417-419;

56. ShepardM.D., Penberthy L.A. II Clin. Chem. 1987. - Vol. 33. -P.792-795;

57. SaiferA., GersenftidN. И Clin. Chem. 1964.-Vol. 2.-P.321-334;

58. McElderry L.A. et al. // Clin. Chem. 1982. - Vol. 28. - P.356-360;

59. Shepard M.D., Whiting M.J. II Ann. Clin. Biochem. 1992. - Vol. 29 (4). -P.411-417;

60. Iwata J., Nishikase О. И Clin. Chem. 1979. - Vol. 25 (7). - P. 1317-1319;

61. Fontaine M. et al. // Ann. Biol. Clin. (Paris). 1987. - Vol. 45 (5). - P.519-526;

62. Van Straalen J.P. et al. // Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1995. -Vol.33 (5).-P.315-322;

63. MacartM. et al. // Ann. Biol. Clin. (Paris). 1994. - Vol. 52 (5). - P.355-360;

64. Eppel G.A. et al. // Clin. Biochem. 2000. - Vol. 33. - P.487-494;

65. Flachaire E. et al. // Clin. Chem. 1983. - Vol. 29. - P.343-345;

66. GuobingX. et al. // J. Clin. Lab. Anal. 2001. - Vol. 15 (4).-P.161-164;

67. Rising M.M., Johnson C.A. II J. Biol. Chem. 1928. - Vol. 80. - P.709-722;

68. Wiedemann G. И J. Prakt. Chem. 1847. - Vol. 42. - P.225;

69. Wiedemann G. И Ann. Chem. 1848. - Vol. 68. - P.323;

70. Wiedemann G. И J. Prakt. Chem. 1848. - Vol. 43. - P.271;

71. Ritthausen H. II J. Prakt. Chem. 1873. - Vol. 7. - P.361;

72. SchiffH. II Ber. Chem. Ges. 1896. - Vol. 29. - P.298;

73. SchiffH. И Ann. Chem. 1898. - Vol. 299. - P.236;

74. SchiffH. II Ann. Chem. 1901. - Vol. 319. - P.287;

75. SchiffH И Ann. Chem. 1907. - Vol. 352. - P.73;

76. LeyH., Werner F.ll Ber. Chem. Ges. 1905. -Vol. 38.-P.2199;

77. Ley H., Werner F. II Ber. Chem. Ges. 1907. - Vol. 40. - P.705;

78. Ley H., Werner F. II Ber. Chem. Ges. 1913. - Vol. 46. - P.4042;

79. Tschugaeff L. И Ber. Chem. Ges. 1905. - Vol. 38. - P.2899;

80. Tschugaeff L. //Ber. Chem. Ges. 1906. - Vol. 39. - P.3190;

81. Tschugaeff L. II Ber. Chem. Ges. 1907. - Vol. 40. - P. 1973;

82. Fischer E. Untersuchungen uber Amino-sauren, Polypeptide und Proteine // German. 1906;

83. Riegler E. IIZ. anal. Chem. 1914. - Vol. 53. - P.242;

84. Hiller A. II Proc. Soc. Exp. Biol, and Med. 1926. - Vol. 24. - P.385;

85. Price J. W. II Proc. Am. Soc. Biol. Chem. 1941. - Vol. 140.-P.54;

86. Lehmann J. //Nord. Med. 1945. - Vol. 25. - P.604;

87. Gornall A.G., Bardawill C.J., David M.M. II J. Biol. Chem. 1949. - Vol. 177.-P.751-766;

88. Goren M.P., LiJ.T. // Clin. Chem. 1986. - Vol. 32. - P.386-388;

89. Goshev I, Nedkov P. II Anal. Biochem. 1979. - Vol. 95. - P.340-343;

90. Doumas В. T. et al. // Clin. Chem. -1981.- Vol. 27. P. 1642-1650;

91. Barnes D.B. II Clin. Chem. 1985. - Vol. 31.- P.2018-2019;

92. Serra S., Morgante L. 11 Boll. Soc. Ital. Biol. Sper. 1980. - Vol. 56 (2). -P.160-165;

93. Orsonneau J.L. et al. // Clin. Chem. 1983. - Vol. 35. - P.2233-2236;

94. Watanabe N. et al. // Clin. Chem. 1986. - Vol. 32. - P.1551-1554;

95. Borovansky J., Melezinek I., Budesninska A. II Anal. Biochem. 1986. - Vol. 159. -P.249-252;

96. Lim C. W. et al. // Pathology. 1990. - Vol. 22. - P.89-92;

97. Folin O., LooneyJ.M. //J. Biol. Chem. 1922. - Vol. 41. -P.421;

98. LooneyJ.M. //J. Biol. Chem. 1926.-Vol. 59.-P.519;

99. Folin O., Ciocalteu V. И J. Biol. Chem. 1927. - Vol. 73. - P.627-650;

100. Chou S.-C., Goldstein A. II Biochem. J. 1960. - Vol. 75. - P.109-115;

101. Peterson G.L. И Anal. Biochem. 1977. - Vol. 83. -P.346-356; m.WuA.E., Wu J.C., HerpA. II Biochem. J. - 1978. - Vol. 175.-P.47-51; 104. Berg D. H. И Anal. Biochem. - 1971. - Vol. 42. - P.505-508;

102. Herd J.К. 11 Anal. Biochem. -1971. Vol. 44. - P.404-410;

103. Lo C., Stelson H. II Anal. Biochem. 1972. - Vol. 45. - P.331-336;

104. Geiger P. J., Bessman S.P. // Anal. Biochem. 1972. - Vol. 49. - P.467-473;

105. Ross E., Shatz G. II Anal. Biochem. 1973. - Vol. 54. - P.304-306;

106. Едрева E., Чолакова H. II Физиол. раст. 1975. - № 22. - C.204-207;

107. Peterson G.L. II Anal. Biochem. 1979. - Vol. 100. - P.201-220;

108. Smith J.L. II Proc. Okla. Acad. Sci. 1982. - Vol. 62. - P.80-83;

109. Peterson G.L. II Methods Enzymol. 1983. - Vol. 91. - P.95-119;113 .DulleyJ.R., Grieve P.A. II Anal. Biochem. 1975. -Vol. 64. - P.l 36-140; WA.Bensadoun A., Weinstein D. II Anal. Biochem. - 1976. - Vol. 70. - P.241-245;

110. Hartree E.F. II Anal. Biochem. 1972. - Vol. 48. - P.422-427;

111. Lieu P.L., Rebel G. II Anal. Biochem. 1991. - Vol. 192. - P.215-218;

112. Ml. Dunn M.J., Harris E.L., Angal S. Protein determination of total protein concentration. Protein Purification Methods // Oxford: IRL Press. 1992;

113. PriceN.C. Proteins, Labfax // Oxford: Academic Press. 1996;

114. Ким Ю.В., Шибанов A.H. II Клин. лаб. диагн. 2004. - №10. - С.3-7;

115. Гаспаров B.C., Дегтярь В.Г. И Биохимия. 1994. - № 59 (6). - С.763-777;

116. Fazekas de St. Groth S., Webster R.G., Datyner A. II Biochim. Biophys. Acta. 1963. - Vol. 71. -P.377-391;

117. Bradford MM. II Anal. Biochem. 1976. - Vol. 72. - P.248-254;

118. Pesce M.A., Strande C.S. II Clin. Chem. 1973. - Vol. 19 (11). - P.1265-1273;

119. Pinnell A.E, Northam B.E. И Clin Chem. 1978. - Vol. 24 (1). - P.80-86;

120. Westgard J.O., Poquette M.A. // Clin. Chem. 1972. - Vol. 18 (7). - P.647-653;

121. Schosinsky K.H. et al. // Clin Chem. 1987. - Vol. 33 (2 Pt 1). - P.223-226; Ul.Fujita Y., Mori I., Kitano S. II Bunseki Kagaku. - 1983. - Vol. 32. - P.379386;

122. Ш.Шишкин C.C. II Вопр. мед. химии. 1982. -№ 28 (5). - С. 134-141;

123. Gustafsson J.E. II Clin. Chem. 1978. - Vol. 24 (2). - P.369-373;

124. Speicher C.E. et al. // Am. J. Clin. Pathol. 1978. - Vol. 69 (3). - P.347-350;131 .HeickH.M. et al.//Clin Biochem. 1980.-Vol. 13 (2).-P.81-83;

125. Joern W.A., SchmoelL. И Clin. Chem. 1981. - Vol. 27.-P. 1305;

126. LaskyF.D. et al. // Clin. Biochem. 1985. - Vol. 18 (5). - P.290-296;

127. Koupparis M.A. et al. // Clin. Chim. Acta. 1985. - Vol. 149 (2-3). - P.225-235;

128. Lynch R.M., Sellers T.S., Gosset K.A. II Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. -1996. Vol. 34 (7). - P.569-571;13e.Sedmak J.J., Grossberg S.E. II Anal. Biochem. 1977. - Vol. 79. - P.544-552;

129. Vatassery G.T. et al. // Clin. Biochem. 1980. - Vol. 13 (2). - P.78-80;

130. Van Wilgenburg M.G. et al. // J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1981. -Vol. 19. — P.301-304;

131. Keay G., DoxeyD.L. II Vet Res. Commun. 1984. - Vol. 8 (1). -P.25-32;

132. Tal M, Silberstein A., Nusser E. II J. Biol. Chem. 1985. - Vol. 260. -P.9976-9980;

133. De Moreno M.R., Smith J.F., Smith R. V. II J. Pharm. Sci. 1986. - Vol. 75. -P.907-911;

134. Fountoulakis M., Juranville J.F., Manneberg M. II J. Biochem. Biophys. Methods. 1992. - Vol. 24. - P.265-274;

135. Congdon R.W., Muth G.W., Splittgerber A.G. II Anal. Biochem. 1993. -Vol. 213. - P.407-413;

136. Chial H.J., Splittgerber A.G. II Anal. Biochem. 1993. - Vol. 213. - P.362-369;

137. Atherton B.A. et al. // Anal. Biochem. 1996. - Vol. 233. - P.160-168;14e.LottJ.A. et al. // Clin. Chem. 1983. - Vol. 29. - P.1946-1950;

138. Ramakers J.M. II Clin. Chem. 1984. - Vol. 20 (8). - P. 1433-1434;

139. Lever M., Walmsley T.A. II Clin. Chim. Acta. 1978. - Vol. 83 (3). - P.279-285;

140. ReedS.M., Northcote D.H. II Anal. Biochem. 1981. - Vol. 116. - P.53-64;

141. Walsh R.L., Need A.G., Coles M.E. II Clin. Chim. Acta. 1983. -Vol. 130 (l).-P.l 1-23;

142. Marshall Т., Williams KM. II J. Biochem. Biophys. Methods. 1986. -Vol. 13 (3). - P. 145-50;

143. Wilsott D.K, Lott J.A. II Clin. Chem. 1987. - Vol. 33. - P.2100-2106;153 .Friedenauer S., Berlet H.H. II Anal. Biochem. 1989. - Vol. 178. - P.263-268;

144. Jung K, Nickel E. II Clin Chem. 1989.-Vol. 35 (2).-P.336-337;

145. Stoschek СМ. II Anal. Biochem. 1990. - Vol. 184. - P.l 11-116;

146. Zor Т., Selinger Z. II Anal. Biochem. 1996. - Vol. 236. - P.302-308;

147. Pugia M.J. Reduction of background interferences in the molybdate-dye protein assay // United States Patent No. 5399498. 1995;

148. Иванов B.M., Ким Ю.В., Мамедова A.M. и др. Способ количественного определения белка в биологических жидкостях // Заявка на изобр. по сущ. № 2004109212/15 (010164). G01N33/493. - 2004;

149. Pugia М. et al. // Clin. Chim. Acta. 2002. - Vol. 326 (1-2). - P. 177-183;

150. Harrison N.A. И Br. J. Urol. 1989. - Vol. 63 (2). - P.202-208;

151. Gilbert R.E., Akdeniz A., Jerums G. II Aust. N. Z. J. Med. 1992. -Vol. 22 (4). - P.334-337;

152. Newman D.J. et al. // Clin. Nephrol. 1995. - Vol. 43 (2). - P. 104-109;

153. Ralston S.H. et al. // Ann. Rheum. Dis. 1988. - Vol. 47 (9). - P. 759-763;

154. BangstadHJ. II Diabetes Care. 1991. - Vol. 14(11).- P. 1094-1097;

155. Jury D.R. et al. //Ann. Clin. Biochem. 1992. - Vol. 29 (Pt. 1). -P.96-100;

156. Spooren P.F., Lekkerkerker J.F., Vermes I. II Diabetes Res. Clin. Pract. -1992.-Vol. 18 (2). -P.83-87;

157. Schaufelberger H. et al. // Schweiz. Med. Wochenschr. 1992. -Vol. 122 (16).-P.576-581;

158. URiSCAN Urine Strip. Urinalysis dip and read strips for visual or instrumental use // YEONGDONG Diagnostics, Korea. 2001;

159. Meyer N.L. et al. // Am. J. Obstet. Gynecol. 1994. - Vol. 170 (1 Pt 1). -P.137-141;

160. Brown M.A., Buddie M.L. И Aust. N. Z. J. Obstet. Gynaecol. 1995. -Vol. 35 (4). - P.366-369;

161. Minetti E.E. et al. // Nephrol. Dial. Transplant. 1997. - Vol. 12 (1). - P.78-80;

162. Solanas Prats J.V. et al. // Aten. Primaria. 1998. - Vol. 22 (10). - P.631-635;

163. Ml. Marshall S.M., Shearing P.A., Alberti KG. II Clin. Chem. 1992. -Vol. 38 (4). -P.588-591;

164. Gossain V.V. et al. // Arch. Pathol. Lab. Med. 1996. - Vol. 120 (11). -P.1015-1018;

165. Beer J.H. et al. // BMJ. 1996. - Vol. 313 (7048). - P.25;

166. Wilson P. et al. // BMJ. 1996. - Vol. 313 (7063). - P. 1009-1010;

167. Heidelberger M., Kendall F.E. И J. Exp. Med. 1929. - Vol. 50. - P.809;

168. Goettsch E., Kendall F.E. II J. Biol. Chem. 1935. - Vol. 109. - P.221;

169. Goettsch E., Reeves E.B. II J. Biol. Chem. 1936. - Vol. 15. - P.173;

170. Goettsch E., Lyttle J.D. II J. Biol. Chem. 1940. - Vol. 19. - P.9;

171. Kabat E.A., Mayer M.M. Experimental. Immunochemistry // Springfield. -1948;

172. Kunkel G.H., Ward S.M. II J. Biol. Chem. 1950. - Vol. 182. - P.597-604;

173. Whicher J.T., Price C.P., Spencer К. И Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. — 1983. — Vol. 18 (3). -P.213-260;

174. Watts G., RoweD. II Clin. Chem. 1986. - Vol. 32 (8). -P.1544-1548;l%9.Paloheimo L. et al. // J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1987. - Vol. 25 (12). -P.889-892;

175. Le Bricon Т. И Ann. Biol. Clin. (Paris). 2002. - Vol. 60 (5). - P.525-540;19 l.ZagerR.A.II Invest. Urol. 1980. -Vol. 17 (6). - P.526-528;

176. Tillyer C.R. et al. // J. Clin. Pathol. 1991. - Vol. 44. - P.466-471;m.Priem F. et al. // Clin. Chem. 1999. - Vol. 45. - P.567-568;

177. Twyman S.J. et al. // Clin. Chim. Acta. 2000. - Vol. 297 (1-2). - P.155-161;

178. Cambiaso C.L. et al. // Clin. Chem. 1988. - Vol. 34 (2). - P.416-418;

179. Phillipou G. et al. // Clin. Chem. 1989. - Vol. 35 (3). - P.456-458;

180. Инструкция по применению набора реагентов для колориметрического определения белка в моче и спинно-мозговой жидкости с пирогаллоло-вым красным «Белок-ПГК-Ново» // Новосибирск: ЗАО «Вектор-Бест». -2003.- 1 е.;

181. Total Protein UC FS. Diagnostic reagent for quantative in vitro determination of total protein in urine or cerebrospinal fluid on photometric systems. Instruction // DiaSys Diagnostic Systems GmbH, Germany. 2003.

182. Иванов B.M., Мамедова A.M. II Вестн. Моск. Ун-та. Сер. 2. Химия. -2002. Т. 23. - № 3. - С. 167-171;

183. Клиническая лабораторная аналитика. Том 1. Основы клинического лабораторного анализа // Под ред. В.В. Меньшикова. М.: Агат-Мед. -2002. - 860 с.

184. Бугер П. Оптический трактат о градации света // пер. с франц. -М.: Гостехиздат. 1950;

185. Овчинников М.М., Подгорный Т.Н. II Клин. лаб. диагн. 2004. - № 3. -С. 16-21;

186. Руководство по эксплуатации Спектрофотометры СФ-2000, СФ-2000-01, СФ-2000-02 // СПб: АОЗТ «ОКБ Спектр». -2001.-34 е.;

187. Пакет программного обеспечения СФ-2000 (программа общего назначения). Руководство по эксплуатации // СПб: АОЗТ «ОКБ Спектр». -2001.-23 е.;

188. Инструкция пользователя к дозатору механическому поршневому Biohit Proline // СПб: ООО «Биохит». -2004;

189. Руководство по эксплуатации одноканальной пипетки переменного объема KOJIOP // СПб: ЗАО «Термо Электрон». 2004. - 1 е.;

190. Fluitest Ultra-Sensitive Proteins (Pirogallol-red Method). Instruction // Biocon Diagnostik GmbH, Germany. 2003;

191. Берг А., Дин П. Светодиоды // Пер. с англ. под ред. А.Э. Юновича. -М.: Изд-во «Мир». 1979. - С.27-51;

192. Коган JI.M. Полупроводниковые светоизлучающие диоды // М.: Изд-во «Энергоатомиздат». 1983. - С.98-135;

193. Data Sheet. ОРТЮ1. Monolithic Photodiode And Single-Supply Transim-pedance Amplifier // Burr-Brown Corp., USA. 1994. -P.l 1.

194. Franke G., Salvati M., Sommer R. G. Composition and device for urinary protein assay and method of using the same / United States Patent # 5326707. -1994;

195. Smith C.E. et al. Simple spectrophotometric technique for quantifying amelogenin against BSA based on pyrogallol red // The 32nd Annual Meeting and Exhibition of the AADR. San Antonio, Texas, USA. - 12-15.03.2003;

196. Le Bricon et al. // Clin Chem. 1998. - Vol. 44. - P.l 191-1197;

197. Технические условия на набор реагентов для определения белка в моче «Юни-Тест-БМ» 9398-001-59879815-2004 // 2005. 22 е.;

198. Инструкция по применению набора реагентов для определения белка в моче «Юни-Тест-БМ» // М.: ООО «Эйлитон». 2005. - 5 е.;

199. Технические условия на фотометры биохимические специализированные ФБС-01 9443-005-59879815-2004 // 2005. 25 е.;

200. Руководство по эксплуатации фотометров биохимических специализированных ФБС-01 -1-«Микролаб-600» ЭФБС 944300.300 РЭ //

201. М.: ООО «Эйлитон». 2005. - 21 с.