Разработка и изготовление набора реагентов количественного определения эстрадиола 17-в в продуктах животного происхождения методом иммуноферментного анализа тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Белоусов, Александр Васильевич

• Белоусов, Александр Васильевич
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Белоусов, Александр Васильевич

Введение

1. Обзор литературы

1.1. Способы повышения молочной и мясной 8 продуктивности животных

1.1.1. Антибиотики

1.1.2. Гормональные препараты, применяемые в животноводстве

1.1.3. Характеристика эстрадиола-17(

1.2. Методы контроля остаточных гормонов в продуктах животного происхождения

2. Собственные исследования

2.1. Материалы и методы

2.2. Получение антител к эстрадиолу-17(3 35 2.2.1. Получение сывороток,содержащих антитела эстрадиола

2.2.2 Изучение чувствительности и специфичности антител к эстрадиолу

2.3. Разработка иммуноферментного метода количественного определения эстрадиола-17(3 в продуктах животного происхождения

2.3.1. Подбор оптимальной дозы антигена БСА-эстрадиол для конструирования набора иммуноферментного анализа

2.3.2. Получение пероксидазного коньюгата козьих антител к иммуноглобулинам класса в кролика

2.4 Отработка иммуноферментного метода количественного определения эстрадиола-17-в в продуктах животного происхождения

Разработка метода подготовки продуктов животного

2.4.1 происхождения для исследования на эстрадиол-170 Испытание разработанного набора и метода иммуноферментного анализа количественного ^

2.5. определения эстрадиола-17 в в продуктах животного происхождения в лабораторных условиях

2.6. Испытание разработанного набора иммуноферментного анализа для количественного определения эстрадиола- ^ 17р в продуктах животного происхождения в производственных условиях

3. Обсуждение результатов исследований

4. Выводы

5. Практические предложения

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка и изготовление набора реагентов количественного определения эстрадиола 17-в в продуктах животного происхождения методом иммуноферментного анализа»

Актуальность темы. В условиях возрастающей интенсификации сельскохозяйственного производства и сильной конкуренции, с целью увеличения привесов, отдельные мясопроизводители незаконно применяют различные химические стимуляторы роста, опасные для здоровья человека, такие как антибиотики, другие антимикробные средства, тиреостатики и различные гормональные препараты (76, 95, 97,104, 105, 106, 109, 110).

Проведенная в последнее время сертификация продуктов животного происхождения, а также кормов и кормовых добавок, производимых в России и ввозимых в Россию из-за рубежа, позволила в ряде случаев выявить и предупредить реализацию продуктов, которые могли бы нанести серьезный вред здоровью человека.

В связи с тем, что в России применяемые до настоящего времени инструментальные методы исследований трудоемки и дорогостоящи, контроль за содержанием остаточных количеств антибиотиков, тиреостатиков и гормонов осуществляется недостаточно полно и регулярно (40, 45).

В то же время в странах ЕЭС и США, наряду с такими инструментальными методами как газовая и жидкостная хроматография, хромато-масспекторометрия, для определения антибиотиков и гормонов широко используют иммуноферментные методы исследования, позволяющие осуществлять массовый мониторинг продуктов животного происхождения, кормов, кормовых добавок и животных в местах их выращивания.

Для осуществления постоянного мониторинга за наличием антибиотиков, тиреостатиков и гормонов в продуктах животного происхождения необходимо разработать новые отечественные методы, пригодные для скрининговых исследований. К таким методам следует отнести иммуноферментный анализ (ИФА), т.к. решением комиссии европейского сообщества 93/25 7/ЕЕС (197) утверждены методы, которые должны применяться для обнаружения остатков химических веществ, имеющих гормональное или тиреостатическое действие, куда включен и ИФА.

Арбитражными аналитическими методами, которые должны применяться подтверждения присутствия остатков химических веществ (за исключением тяжелых металлов и мышьяка) являются:

- иммуноферментный анализ;

- тонкослойная хроматография;

- жидкостная хроматография;

- газовая хроматография;

- масс-спектрометрия;

- спектрометрия.

Как показали научные исследования наиболее часто в пищевых продуктах выявляют повышенные концентрации эстрадиола-17|3.

В связи с этим мы поставили перед собой цель разработать иммуноферментный метод определения в пищевых продуктах эстрадиола-17(3.

Задачи исследований.

1. Получить антитела к эстрадиолу-17(3 и оценить их специфичность

2. Разработать на основе полученных антител ИФА определения эстрадиола 17(3 на основе полученных антител с чувствительностью, позволяющей определять гормон на уровне предельно допустимой концентрации (ПДК).

3. Разработать метод подготовки проб анализа на эстрадиол-17Р в разработанном варианте ИФА.

4. Провести оценку пригодности разработанного метода для количественного анализа эстрадиола-17(3 в различных продуктах животного происхождения.

5. Испытать метод в лабораторных условиях.

6. Испытать метод в производственных условиях.

7. Разработать нормативно-техническую документацию на определение эстрадиола-17 [3 в продуктах животного происхождения.

Научная новизна.

Впервые для ветеринарной практики разработаны набор реагентов и методику количественного определения эстрадиола-170 в различных продуктах животного происхождения, позволяющие определять гормон в концентрации до 0,05 мкг/кг.

Практическая значимость.

Результаты научно-исследовательских работ вошли в нормативно-техническую документацию:

1. ТУ 9388-004-54919320 «Набор для количественного определения эстрадиола-17(3 в продуктах животного происхождения методом иммуноферментного анализа (ИФА-АФ-эстр.).

2. Наставление по применению набора для количественного определения эстрадиола-17Р в продуктах животного происхождения методом иммуноферментного анализа (ИФА-АФ-эстр.), утверждённое Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 31.07.2001 г. № 13-5-02/0146.

3. Инструкция по изготовлению и контролю набора для определения эстрадиола-17Р в продуктах животного происхождения иммуноферментным методом.

Разработанный набор для определения эстрадиола-17(3 в пищевых продуктах применяется в ветеринарной практике в соответствии с указанием Главного госветинспектора Российской Федерации по организации надзора № 12-7-1/900 от 04.10.1999 г(103).

Апробация работы.

Материалы диссертации доложены и обсуждены на: 1. заседаниях ученого совета ВНИТИБП (1998-2001 г)

2. Всероссийской научно-производственной конференции «Разработка и освоение производства нового поколения лекарственных средств для животных и их применение в ветеринарной практике», Ставрополь 2000 г.

3. Всероссийский научно-практической конференции, посвященной 30-летию ВНИТИБП «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов», Щёлково 2000 г.

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 4 статьи, отчет по научно-исследовательской работе, нормативно-техническая документация на изготовление, контроль и применение диагностикума. Основные положения, выносимые на защиту: получение специфических компонентов для постановки иммуноферментного анализа; обработка условий постановки иммуноферментной тест-системы для обнаружения эстрадиола-17Р в различных биологических объектах; изучение чувствительности и специфичности разработанной тест-системы; апробация набора иммуноферментного определения эстрадиола-17(3 в продуктах животного происхождения.

Объём и структура диссертации.

Диссертационный материал изложен на 105 листах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения и приложения. Диссертация иллюстрирована 19 таблицами и 3 рисунками. Список литературы содержит 217 источников, в т.ч. 101 зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Белоусов, Александр Васильевич

4. Выводы

1. Антитела к эстрадиолу 17-в, получененные путем иммунизации кроликов самцов породы Шиншилла с титром от 1/20000 до 1/100000, обладали высокой специфичностью при их исследовании методом ИФА.

2. Разработан высокочувствительный и специфичный метод иммуноферментного анализа эстрадиола 17-в, который позволяет определять гормон на уровне ПДК (0,04 - 0,05 мг/кг).

3. Разработан метод подготовки проб продуктов животного происхождения с помощью оптимизации условий гомогенизации и экстракции для количественного определения эстрадиола 17-в методом ИФА.

4. Разработанный метод пригоден для количественного анализа эстрадиола 17-в в продуктах животного происхождения (мясо, жир, птица, рыба, яйца, кисломолочные продукты, сметана, сыры, масло коровье).

5. Разработанный и испытанный в лабораторных условиях метод ИФА для оценки наличия эстрадиола 17-в оказался высокоэффективным и пригодным для массового мониторинга продукции животного происхождения в производственных условиях.

6. Разработана и утверждена нормативно-техническая документация на определение эстрадиола 17-в в продуктах животного происхождения.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

В ветеринарнои практике предложен количественный метод оценки наличия эстрадиола 17-в в продуктах животного происхождения. Разработаны и внедрены: «Набор для количественного определения эстрадиола 17-в в продуктах животного происхождения методом иммуноферментного анализа (ИФА-АФ-ЭСТР) ТУ 9388-004-54919320-01; наставление по применению набора для количественного определения эстрадиола 17-в в продуктах животного происхождения методом иммунофермент ного анализа (ИФА-АФ-ЭСТР), утвержденное Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 31.07.201 г. № 13-5-02/0146.

Разработанный набор определения эстардиола 17-в в пищевых продуктах применяется в ветеринарной практике в соответствии с Указанием Главного государственного ветеринарного инспектора Российской Федерации по организации государственного ветеринарного надзора за содержанием гормональных стимуляторов роста и тиреостатиков в продукции животного происхождения № 12-7-1/900 от 04.10.99.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Белоусов, Александр Васильевич, 2002 год

1. Агафонов В.Н. Опыт применения антибиотиков при выращивании поросят. Научно-производственный бюллетень Института животноводства БССР, № 2. Изд. АН БССР, 1960.

2. Агафонов В.Н. Кормовые антибиотики при откорме свиней. "Свиноводство" № 9, 1982.

3. Агеев В.Н. Периодическое скармливание витаминов "Птицеводство" № 4. 1961.

4. Акопян В.М. Влияние технического биомицина на рост поросят. Бюллетень научно-технической информации Армянского института животноводства и ветеринарии. Ереван, 1959.

5. Аксенова Н.Ф., Масленников Ф.В. и Гаврилова O.A. Результаты применения кормовых антибиотиков. Результаты применения кормовых антибиотиков. "Ветеринария" № 12, 1959.

6. Аксенова Н.Ф. Применение антибиотиков в колхозах Московской области. "Ветеринария" № 7, 1957.

7. Акулова Н.С. Применение биомициновых препаратов в птицеводстве. Пленум по применению антибиотиков в животноводстве и ветеринарии, 1960.

8. Акулова Н.С. Изучение концентрации биомициновых препаратов в организме различных видов сельскохозяйственных животных и птицы. Пленум по применению антибиотиков в животноводстве и ветеринарии, 1960.

9. Акулова В.П. Гистологическая оценка действия на организм здоровых животных и птицы хлортетрациклиновых препаратов. Антибиотики в животноводстве и ветеринарии. Сельхозиздат. М., 1963.

10. Акулова Н.С. Эффективность отечественных и зарубежных антибиотиков в птицеводстве. Антибиотики в животноводстве и ветеринарии. М., 1963.

11. Александров И^Д. Использование пенецилина и биоветина как U стимуляторов роста телят. "Ветеринария" № 1, 1963.

12. Андриян Е.А. Результаты применения биовита-40 при выращивании поросят в племенном свиносовхозе им. Летвинова. Экономичные биомициновые препараты для животноводства. М., 1960.

13. Анисимов И.Н. Производство и применение кормовых антибиотиков в Донецкой области. Антибиотики в животноводстве и ветеринарии. М., 1963.

14. Барман Ш.А. Антибактериальные стимуляторы в питании уток. "Птицеводство" № 12, 1960.

15. Барсуков A.A. Использование антибиотиков при выращивании кроликов. Антибиотики в животноводстве и ветеринарии. М., 1963.

16. Бартли Е, Фаунштейн Ф. и др. Антибиотики при подкормке молочного скота. Антибиотики в сельском хозяйстве и пищевой промышленности, 1954.

17. Белоносов Н.И. Биомицино-витаминный концентрат в животноводстве. Иваново, кн. изд., 1962.

18. Бабичев В.Н. Нейроэндокринология пола. М., 1981.

19. Бекмухамедова З.У. Гормональная регуляция транспорта ионов. "Фан",1975.

20. Биохимия гормонов и гормональные регуляции/ под ред. H.A. Юдаева. М.,1976.

21. Белов А.Д. Лысенко Н.П. и Рогожина Л.В. Радиоиммунологические, иммуннорадиометрические, радиореценторные и радиоизотопные методы определения гормонов у животных/ учебное пособие М., 1988, стр. 84// под ред. акдемика ВАСХНИЛ А.Д.Белова.

22. Беркович Р.Д. и Изюмский Н.С. Кормобактерин стимулятор роста. "Ветеринария" № 7, 1962.

23. Бернсайд Д.Е., Грунер Р.К., Филипе П.Х. и Бостенд Г. Влияние кристаллического ауреомицина и витамина В 12 на использование свиньями протеина кормов. "Сельское хозяйство за рубежом" № 2. 1957.

24. Бернсайд Д.Е. Влияние конрмления ауремицином с перерывами свиней-откормочников. Антибиотики в сельском хозяйстве и пищевой промышленности. М., 1954.

25. Бомен В.Р., Хюнтер Д.Е. и Уолкер JI. Влияние пнтибтотиков и витаминов группы В на ягнят. "Сельское хозяйство за рубежом", вып. 6, 1957.

26. Борц И.Л. и Журба В.А. Влияние скармливания кормовых антибиотиков на рост им продуктивность откармливаемого молодняка свиней. Разведение, кормление и откорм свиней.

27. Борисов Д.В. Руководство по лабораторным занятиям по медицинской микробиологии, М., 1993.

28. Бочаров Д.А. Эффективность пенициллина и биомицина при мясном откорме свиней. Применение антибиотиков в животноводстве. М., 1959.

29. Буянов A.A. Эндокринные механизмы и совершенствование гормональной терипии при дисфункциях яичников: Автореф. дис. д-ра наук JL, 1986.

30. Бэйрд Д.Т. Яичник // Гормональная регуляция рзмножения у млекопитающих. М., Мир, 1987 С. 118-144.

31. Ветеринарные препараты. Справочник под ред. А.Д. Третьякова, М. Агропромиздат, 1988. с. 239-289.

32. Вундер П.А. Эндокринология пола. М., 1980.

33. Вундер П.А. Эндокинология пола и размножения. М., 1973.

34. Герольд М. и Белик Е. Технология производства антибиотиков для сельского хозяйства. Антибиотики. М., 1959.

35. Гинтовт В.Е. и Иванова Е.А. Опыт использования диэтилстильбэстрола при откорме цыплят. Труды Института генетики АН СССР, № 28, 1961.

36. Гормон-рецепторное взаимодействие. Молекулярные аспекты/ Под ред. Дж. Леви, М., 1979.

37. Гроллман А. Клиническая эндокринология и ее физиологические основы. М., 1969.1. Г .У оI

38. Грезин В.Ф. Антибиотики в животноводстве. Изд. "Московский рабочий", 1959.

39. Грезин В.Ф. Контроль за изготовлением антибиотиков, выпускаемых для животноводства, и апробации их. Антибиотики в животноводстве и ветеринарии. М., 1963.

40. Гусев A.A., Дрогин В.В. Совершенствование диагностической работы в ветеринарных лабораториях России. Современные аспекты патологии животных. Тез. докл. научно-практической конференции 23-25 ноября 1998, г. Владимир, с. 14-21.

41. Дегтярев В.И., Паракин В.К. и Лузянин Д.Х. Биогенные стимуляторы в животноводстве. Ростов, 1960.

42. Де Кретсер Д.М. Семенники // Гормональная регуляция размножения у млекопитающих. М., Мир, 1987. с. 100-117.

43. Джакс Т. Антибиотики в кормлении животных. М., 1959.

44. Джерн Дж. Антибиотики в кормлении свиней. "Сельское хозяйство за рубежом". № 5. 1956.

45. Кабак Я.М. Практикум по эндокринологии. 2-изд., доп. М.: Изд. Моск. ун-та, 1968., с. 276.

46. Кабанов В.А., Петров Р.В., Хаитов P.M. Исскуственные антигены и вакцинына основе непригодных полиэлектролитов. В. кн.: Иммунология. 1У--А ' " (

47. Киршенблат Я.Д. Практикум по эндокринологии. М.: Высш. школа, 1969, ^ с.256.

48. Комаров A.A., Панин А.Н. Определение ветеринарных препаратов в животноводческой продукции// Журнал ветеринария, 2002, №11, с. 40-43. \J

49. Колчев H.A. Влияние антибиотиков на яйценоскость уток. "Сельское хозяйство Поволжья" № 10, 1962.

50. Колчев H.A. Влияние скармливания жидкого и кристаллического геррамицина на яйценоскость уток. "Ветеринария" № 8, 1962.

51. Конокюк Г.Я. К вопросу изготовления кормовых антибиотиков для животноводства. Антибиотики в животноводстве и ветеринарии. М., 1963.

52. Коровенков А.И. Влияние подкожного введения диэтилстильбэстролл-пропионата на привесы быков-кастратов при их нагуле с подкормкой. Ученые записки Казанского ветеринарного института, т. 77, 1960.

53. Кульберг А.Я. Антииммуноглобулины. М.: Медицина, 1978. с.183.

54. Кульберг А.Я. Молекулярная иммунология. М.: Высшая школа, 1985.

55. Кульберг А.Я. Регуляция иммунного ответа. Медицина. М. 1986, с. 222.

56. Курцын И.Т. Гормоны пищеварительной системы. Медгиз, JL, 1962.

57. Леонов Н.И. и Первов Н.Г. Антибиотики в рационах молодняка крупного рогатого скота. "Молочное и мясное скотоводство" № 1, 1960.

58. Макрушин П.В. и Сибирев В.Ф. Влияние подкожных инъекций диэтилстильбэстрола на откорм крупного рогатого скота. Труды Саратовского зооветеринарного института, т. 11, 1962.

59. Меньшиков В.В. Методы клинической биохимии гормонов и медиаторов: Учеб.пособие., 2-е изд., пер. и доп. М.: 1 Моск. мед. ин-т, 1969., с. 160.

60. Методические указания по диагностики заболеваний с-х животных иммунноферментным методом. Под.ред. А.П.Гусева, А.Н.Панина. Владимир, 1998, с. 179.

61. Методические указания по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве. Утв. ГУВ Госагропрома СССР 1988.

62. Митюшев М.И., Степанов Г.С. Общие представления об эндокринных железах и гормонов. Физиология эндокринной системы. Л. Наука, 1979, с. 3-29.

63. Мицкевич М.С. Гормональные регуляции в энтогинезии животных. М. 1978.

64. Мейнуринг У. Механизм действия андрогенов. М. 1979.

65. Мозгов И.Е., Эссенсон М.К. и Николаев В.И. Влияние антибиотиков на поросят при длительном применении их в хозяйстве в качестве стимуляторов роста. Применение антибиотиков в животноводстве. М. 1959.

66. Мозгов И.Е. Биогенные стимуляторы роста животных. М. 1960.

67. Мозгов И.Е. Сравнительная оценка стимуляторов роста животных. Вестник сельскохозяйственной науки № 7, 1957.

68. Мозгов И.Е. Некоторые закономерности в действии стимуляторов роста на животных. Материалы 8 научной конференции по фармакологии. М. 1963.

69. Мозгов И.Е. Фармакологические стимуляторы в животноводстве. М. "Колос", 1964, с. 367.

70. Мозгов Е.И. Значение биогенных стимуляторов роста животных. Вестник с/х науки № 5, 1957.

71. Мозгов И.Е. Важные резервы увеличения производства мяса. "Свиноводство" № 5, 1960.

72. Нейфах A.A., Тимофеева М.Я. Проблемы регуляции в молекулярной биологии развития. М., 1978.

73. Новые методы иммуноанализа. Изд. "Мир". 1991, с. 279. Под. ред. доктора биологических наук А.М.Егорова.

74. Подучаева A.JI. Гормональные препараты в животноводстве. М. Россельхозиздат, 1979.

75. Петрухин И.В. Корма и кормовые добавки. /Справочник, М. Росагропромизд, 1989.

76. Петров Р.В., Хаитов P.M., Атауллаханов Р.И. Иммунногенетика и искусственные антигены. М. Медицина, 1983, с. 255.

77. Петров Р.В., Кабанов В.А., Хаитов P.M. и др. Способность конъюгатов бактериального полесахарида с синтетическими полеэлектролитами давать иммунизирующий эффект. Иммунология № 5, 1983, с.40-43.

78. Пожаров А.В., Войхонский B.JI. Современные лабораторные технологии. Биосенсоры: возможности пути развития. Интерлабмедика, 1995, №6, с.5.

79. Попов И.С. Антибиотики и эстрогенные препараты как стимуляторы роста и откорма. Известие ТСХА, вып. 6, 1957.

80. Потемкин В.В. Эндокринология. М. 1978.

81. Протасова Т.Н. Гормональная регуляция активности ферментов. М. 1975.

82. Радиоиммунологический метод гормонального контроля функционального состояния яичников у коров./ А.Д.Белов, А.С.Косенко и др. Возможности и перспективы радиоиммунологического анализа в животноводстве и ветеринарии/Ивановен. СХИ, 1985, с. 19-20.

83. Репродуктивная эндокринология. М. , Медицина, 1998, т. 1, с. 701.// Под редакцией академика РАМН И.И.Дедова.

84. Репродуктивная эндокринология. М. , Медицина, 1998, т.2, с. 430.// Под редакцией академика РАМН И.И. Дедова.

85. Резников А.А. Методы определения гормонов. Киев, Наукова думка, 1980. Розен В.Б., Смирнов А.Н. Рецепторы и стероидные гормоны. М. 1981.

86. Розен В.Б. Основы эндокринологии. М. Высшая школа, 1984, с. 336.

87. Рязанский М.П. Применение синестрола при откорме и нагуле волов. "Сельское хозяйство Поволжья" № 6, 1958.

88. Савченко О.Н. Гормоны яичника и гонадотропные гормоны. JT. Медицина, 1967, с. 270.

89. Савченко О.Н. Методы определения эстрогенов. В книге: Современные методы определения стероидных гормонов в биологических жидкостях. М. Медицина, 1968, с. 86-113.

90. Савченко О.Н., Степанов Г.С. Гормональная регуляция функции половых желез//Гормоны в животноводстве. М. Колос, 1977, с. 34-51.

91. Савченко О.Н., Степанов Г.С., Давыдов Г.У. и др. Стероидные гормоны при родовом стрессе у крупного рогатого скота// Онтогенетические и генетикоэволюционные аспекты нейроэндокринной регуляции стресса. Новосибирск, 1988, с. 163-165.

92. Селье Г. Очерки об адаптационном синдроме. М. 1960.

93. Скрябин Г.К. Применение антибиотиков в животноводстве. "Антибиотики" №2, 1957.

94. Славнов В.Н. Радиоизотопные и радиоиммунологические исследования функций эндокринных желез. Киев, Здоровья, 1978, с. 208.

95. Солнцев K.M. Антибиотики в кормлении сельскохозяйственных животных. Минск, 1960.

96. Солнцев K.M. Стимуляторы роста животных. 1963.

97. Степанов Г.С. Методические указания по диагностики, лечению, профилактике, акушерско-гинекологических болезней и ветеринарному контролю за воспроизводительной функцией коров/ Ред. Насонов Н.С. Воронеж, 1986, с. 31.

98. Сухих В.Ф. Ферментоиммунологический метод определения белковых гормонов в крови и биологических жидкостях. Пробл. эндокринологии, 1977, 23, № 6, с. 82-86.

99. Тангль X. Антибиотики при выращивании телят. "Животноводство" № 4, 1960.

100. Ткачук В.А. Введение в молекулярную эндокринологию, М. 1983. Физиология эндокринной системы. Руководство по физиологии/ под ред. Баранова В.Г., Лейбсона Л.Г., Митюшова М.И. и др. Л. 1979.

101. Указание по организации Государственного ветеринарного надзора за содержанием гормональных стимуляторов роста тиреостатиков в продуктахживотного происхождения. Утв. гл. гос.вет.инспектором России 04.10.99, № 127-1/900.

102. Федотов B.C. Антибиотики и биостимуляторы в животноводстве. Мурманск, 1961.

103. Филаксини А. Применение гормонов, гормоноподобных веществ и антибиотиков при выращивании мясных животных. "Сельское хозяйство за рубежом" № 9, 1957.

104. Физер Л., Физер М. Стероиды, (пер. с анг.) М. Мир, 1964, с. 984.

105. Хаданович И.В. Диэтилстильбэстрол как средство, повышающее привесы и мясную продуктивность у овец. Бюллетень научно-технической информации Всесоюзного научно-исследовательского института овцеводства и козоводства, №4, 1960.

106. Хенель X. и др. Скармливание цыплятам рационов с повышенными дозами тетрациклина. "Сельское хозяйство за рубежом" № 7, 1961.

107. Хип Р., Флинт А. Беременность// Гормональная регуляция размножения у млекопитающих /пер. с анг., ред. В.Б. Розен/ М. Мир, 1987, с. 193-244.

108. Чазов Е.И., Исаченков В.А. Эпифиз: место и роль в системе нейроэндокринной регуляции. М. 1974.

109. ЧипенсГ.И., Полевая Л.К., Веретенникова Н.И., Киркис А.Ю. Структура и функции низкомолекулярных пептидов. Рига, 1980.

110. Шамберев Ю.Н. Применение гормональных препаратов при откорме скота в США. "Сельское хозяйство за рубежом" , серия "Животноводство", № 11, 1963.

111. Эндорфины /под. ред. Е. Коста, М. Трабукки/ М. 1981.

112. Эскин И.А. Основы физиологии эндокринных желез. М. 1975.

113. Юдаев H.A. Химические методы определения стероидных гормонов в биологических жидкостях. М. Медгиз. 1961, с. 172.

114. Яровая Т.Н., Доценко В.А., Заболоцкий Н.И. //Методы разделения и анализа крови// лекции института усовершенствования врачей. М. 1982, с 3.

115. Assesment of potencial Risks to humau Health from hormone residues in bovine meat and meat products / Opinion of the Scientifis Committee on Veterinari Measures relating to public Yealth 30 aprel 1999.

116. Adiercreutz H, Gorbach SL, Goldin BR, Woods MN, Dwyer JT and Hamalainen E. Estrogen metabolism and excretion in oriental Caucasian women. J Nati Cancer Inst 1994; 86: 1076-1082.

117. Aizu-Yokota, E., Ichinoseki, K., and Sato Y. Microtubule disruption induced by estradiol in estrogen receptor-positive and -negative human breast cancer cell; lines. V Carcinogenesis 1994; 15:1875-1879.

118. Aizu-Yokota, Susaki A., Sato Y. Natural estrodens induce modulation microtubules in Chines hamsters v 79 cells in culture. Cancer Res 1995, v 55, p 18631868.

119. Ashby J., Fletcher K., Williams C., Odum J., Tinwell H., Xack of activiti of estradiol in rodent bone marrow micronuclens assays. Mutant Res 1997: v 395, p 8388.

120. Al-Afaleg AI. and Homeida AM.Immunopharmacol, Immunotoxicol 1998; 20; 315 -327.

121. Andersson AM, Skakkebaek NE. Exogenous exposure to natural sex steroid hormones: possible impact on human development and health. 1999; submitted for publication.

122. Anstead GM, Carlson KE, Katzenellenbogen JA. The estradiol pharmacophore: Ligand structure-estrbgen receptor binding affinity relationships and a model for the receptor binding site. Steroids 1997; 62: 268-303.

123. Andre F. // EuroResidue III Conference on Residues of Veterinary Drugs in Food. Veldhoven, The Netherlands. 1996.

124. Arkoi?.:J.et ah, Neisseria gonorrhea: vaginal clearance and its correlation with resistance to infection in subcutaneous chambers in orally immunized estradiol -primed mice. Vaccint 1997; 15: 1344- 1348.

125. Banerjee SK, Banerjee S, Li SA and Li JJ. Induction of chromosome aberrations in Syrian hamster renal cortical cells by various estrogens. Mutat Res 1994; 311: 191197.

126. Bernstein, L. The epidemiology of breast cancer. Women and Cancer 1998; 1: 713.

127. Bernstein, L., Ross, R. K., Pike, M. C., Brown, J. B., and Henderson, B. E. Hormone levels in older women: a study of post-menopausal breast cancer patients and healthy population controls. Br. J. Cancer 1990; 61: 298-302.

128. Bernstein, L., Yuan, J. M., and Ross, R. K., et al. Serum hormone levels in premenopausal Chinese women in Shanghai and white women in Los Angeles: results from two breast cancer case-control studies. Cancer Causes and Control 1990; 1: 51-58.

129. Berrino, F., Muti, P., and Micheli, A., et al. Serum sex hormone levels after menopause and subsequent breast cancer. J. Natl. Cancer Inst.1996; 88: 291-296.

130. Behl C., Widmann M., Trapp T., Holsboer. 17p-estradiol protects neurons from oxidative stress-induced cell death. Bichem Biophys. Res. Commun 1992, v.216, h 473-482.

131. Biegel L.B., Cook J.C., Hurft N.E., O'Connor J.C. Effects of 17|3-estradiol on serum Hormone concertrations and estrons cycle in female Grl: Cd BR rats: effects on parental and first generation rats. Toxicol Sci. 1988, v 44, h 143-154.

132. Bocchinfiiso, W. P., Couse, J. F., Hively, W. P., Varmus, H. E., and Korach, K. S. Hormonal signaling pathways in mammary glands of ERKO/WNT-1 mice. Proc. 80th Annual Meeting Endocr. Soc. 1998; p 5.

133. Boehnke WH and GaU, U. 1996; 35: 187-188 cited after Bridges, Doc 8/4/99 rev.l. 1999.

134. Borryc//Euroresidue II: Residues of Veterinari Drugs in Food. Veldhoven, Netherlanus, 1993.

135. Bujan L, Mieusset R, Audran F, Lumbroso S, Sultan С , Increased oestradiol level in seminal plasma in infertile men. Human Reprod. 1993; 8: 74-77.

136. Commission Decision 93/256/EEC // Official J. of the EC, LI 18/64-74. 1993.

137. Commission Decision 93/257 EEC // Official J. of the EC, LI 18/75-79. 1993.

138. Cutler GB The role of estrogen in bone growth and maturation during childhood and adolescence, J Steroid BiochemMolec Biol 1997; 61: 141-144.

139. Dhillon V.S., Dhillon J.K., Genotoxicity evalnation of estradiol. Mutat Res 1995, v 345, h 87-95.

140. Directive 96/23 EC of 29 april 1996 on measnres to monitor cevtain substances and residnes thereof in live animals and animal products and repealing Directives 85/358 EEC and 86/469 EEC and Decisions 89/187/EEC and 91/664/EEC.

141. Dunn TG, Kaltenbach CC, Koritnik DR, Turner DL and Niswender GD. Metabolites of estradiol-17 and estradiol-17-3-benzoate in bovine tissues. J Anim Sci 1977; 46:659-73.

142. Eckert, I. and Stopper, H. Genotoxic effects induced by p-oestradiol In Vitro. Toxicol In Vitro. 1996; 10: 637-642.

143. Feigelson, H. S., and Henderson, В. E. Estrogens and Breast cancer. Carcinogenesis V 1996; 17:2279-2284.

144. Food Safety and inspection service/2000FSIS National residue program, 1-144.

145. Giguere V, Tremblay A, Tremblay GB. Estrogen receptor p: Re-evaluation of estrogen and antiestrogen signaling. Steroids 1998; 63:335-339.

146. Ginsburg ES, Gao X, Shea BF, Barbieri RL. Half-life of estradiol in postmenopausal women. Gynecologic and Obstetric Investigation 1998; 45: 45-8.

147. Greenwald, P., Caputo, T. A., and Wolfgang, P. E. Endometrial cancer after menopausal use of estrogens. Obstet. Gynecol. 1977; 50: 239-243.

148. Gropp J. et al., 1975. FAO/WHO Symposium p 131 141.

149. Hahn BH. Systemic Lupus Erythematosus. In: Fauci AS et al. (Ed). Harrison's Principle of Internal Medicine. 14th edition. MacGraw-Hill, New-York, 1998, 18741880.

150. Han X and Liehr JG. DNA single strand breaks in the kidneys of Syrian hamsters treated with steroidal estrogens: hormone-induced free radical damage proceeding renal malignancy. Carcinogenesis 1994a :15: 997-1000.

151. Hayashi N, Hasegawa K, Komine A, Tanaka Y, McLachian JA, Barett JC and Tsutsui T Estrogen-induced cell transformation and DNA adduct formation in cultured Syrian hamster embryo cells. Mol Carcinogenesis 1996; 16: 149-156.

152. Heitzman R.J. Veterinary drug residues- residues in food producing Animals and their products: reference materials and Methods (Secon Edition) Oxford, UK Blackwell Scientific Publications, 1994.

153. Henderson, B. E., Ross, R. K., and Pike, M. C. Hormonal chemoprevention of cancer in women. Science 1993; 259: 633-638.

154. Henricks DM, Brandt RT Jr, Titgemeyer EC, Milton CT. Serum concentrations of trenbolone-17(3 and estradiol-17(3 and performance of heifers treated with trenbolone acetate, melengesterol acetate, or estradiol-17(3. J Anim Sci 1997; 75:2627-2633.

155. Highman B, Greenman DL, Norvell MJ, Farmer J, Shellenberger TE. Neoplastic and preneoplastic lesions induced in female C3H mice by diets containing diethylstilbestrol or 17p-estradiol. 1980.

156. Highman, B., Roth, S.I., and Greenman, D. L. Osseous changes and osteosarcomas in V mice continuously fed diets containing diethylstilbestrol or 17(3-estradiol. J Natl Cancer Inst 1987; 76:653-662.

157. Huseby, R. A. Demonstration of a direct carcinogenic effect of estradiol on Leydig cells of the mouse. Cancer Res. 1980; 40: 1006-1013.

158. IARC Overall evaluations of carcinogenicity: an updating of IARC Monographs Volumes 1 to 42. Supplement № 7. International Agency for Research on Cancer, Lyon, 1987.

159. Ichikawa T . A study on intratesticular aromatase activity in male infertility, Japan J Urology 1995; 86:940-948.

160. Inoh A, Kamiya K, Fujii Y, Yokoro K. Protective effects of progesterone andtamoxifen in estrogen-induced mammary carcinogenesis in ovariectomized W/Fu rats. Jpn J Cancer Res 1985; 76: 699-704.

161. Itoh S, Hirai T, Tutsuka Y, Takagi H, Tashiro Y, Wada K, Wakabayashi K, Shibutani S, Yoshizawa I. Identification of estrogen-modified nucleosides from calf thymus DNA reacted with 6-hydroxyestrogen-6-sulfates. ChemRes Toxicol 1998; 11: 1312-1318.

162. Ivie GW, Christopher RJ, Munger CE, Coppock CE. Fate and residues of 4-14CJestradiol-H after intramuscular injection into holstein steer calves. J Anim Sci 1986; 62: 681-90.

163. JECFA- Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives, Residues of some veterinary drugs in animals and foods. Food and Nutrition Paper №41. Food and Agriculture Organization of the United Nations, Roma 1998.

164. JECFA-Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives, Fifty-second meeting. Summary and Conclusions, Rome 2-11 February, 1999.

165. JECFA-WHO Evaluation of certain veterinary drugs residues in food. Thirty-second Report of the Joint FAO/WHO Expert Commitee on Pood Additives. WHO Technical Report Series 763, World Health Organization, Geneva 1988.

166. Jenster G. Cpactivators and corepressors as mediators of nuclear receptor function: An update. Molec Cell Endocrinol 1998; 43:1-7.

167. Katzenellenbogen BS. Estrogen receptors: Bioactivities and interactions with cell signaling pathways. Biol Reprod 1996; 54: 287-293.

168. Key TJA, Pike MC. The dose-effect relationship between "unopposed" estrogens and V endometrial mitotic rate: Its central role in explaining and predicting endometrial cancer risk. BrJ Cancer 1988; 57:205-212.

169. Kirkman H. Estrogen-induced tumors of the kidney. III. Growth characteristics in the Syrian hamster. Nati Cancer InstMonogr 1959; No. 1, 1-57.

170. Kuhnz W., Gansan C., Mahler M. Pharmacokinetics of estradiol, free and total estrone, in young women following single intrevenous and oral administration of 17-(3-estradiol. /Arzeimit-telforschung. 1993, v 43, h 966-973.

171. Li JJ, and Li SA. Estrogen carcinogenesis in Syrian hamster tissues: Role of metabolism. VedProc 1987; 46: 1858-1863.

172. Li J J, and Li SA. Estrogen carcinogenesis in the hamster kidney: A hormone-driven multistep process. Prog Clin Biol Res 1996; 394: 255-267.

173. Li JJ, Gonzalez S, Banerjee SS, Li SA. Estrogen carcinogenesis in the hamster kidney: Role of cytotoxicity and cell proliferation. Environ Health Perspect 1993; 101 (Suppl. 5): 259-264.

174. Liehr JG, Fang WF, Sirbasku DA, Ari-Ulubelen A. Carcinogenicity of catechol estrogens in Syrian hamsters. J Steroid Biochem 1986; 24: 353-356.

175. Lipschutz A, and Vargas L Jr. Structure and origin of uterine and extragenital fibroids induced experimentally in the guinea pig by prolonged administration of estrogens. Cancer Res 1994; 1: 236-248.

176. Lipsky E. Rheumatoid Arthritis. In: Fauci AS et al. (Ed). Harrison's Principle of Internal Medicine. 14th edition. MacGraw-Hill, New-York 1998; pp 1880-1888.

177. Markides CSA, Roy D and Liehr JG. Concentration dependence of prooxidant and v antioxidant properties of catecholestrogens. Arch Biochem Biophys 1998; 360: 105-112.

178. Martucci CP, Fishman J. P450 Enzymes of estrogen metabolism. Pharmac Ther 1993; 57: 237-259.

179. McLachlan JA, Wong A, Degen GH, Barrett JC. Morphological and neoplastic transformation of Syrian hamster embryo fibroblasts by diethylstilbestrol and its analogs. V Cancer Res 1982; 42: 3040-3045.

180. Meyer 0, Kahn MF. Lupus erythemateux dissemine. In: Kahn MF, Peltier AP, Meyer-0, Piette JC (Ed). Les Maladies Systemiques. 3e edition. Flammarion Medecine-Sciences, 1991 ; pp 239-424.

181. Meyer H.H.D. et al. GIT labor-Medicin, 1987. № 4.

182. Michael Baiter, «Scientific Cross-Claims Fiy in Continuing Beef War». «Сайенс», вып.284 (28 мая 1999 г.).

183. Michnovicz J.J., Bradlow H.I., Induction of estradiol metabolism by dietary indole-3-carbinol in Humans. J. Natl. Cancer Ynst. 1990, v 82, h 947-949.

184. Nagasawa H, Mori T, Nakajima Y. Longterm effects of progesterone or diethylstilbestrol with or without estrogen after maturity on mammary tumorigenesis in mice. Eur J Cancer 1980; 16: 1583-1589.

185. Nakoul K., Dehennin L., jondet M., Roder M. Profiles of plasma estrodent, progesterone and their metabolites after oral or vaginal alministration of estradiol or progesterone. Maturitas 1993, v 16, p 185-202.

186. Noble RL, Hochachka ВС, King D. Spontaneous and estrogen-produced tumors in Nb rats and their behavious after implantation. Cancer Res 1975; 35: 766-780.

187. Nutter LM, Wu Y-Y, Ngo EO, Sierra EE, Gutierrez PL, Abul-Hay YJ. An oquinone V form of estrogen produces free radicals in human breast cancer cells: Correlation with DNA damage. ChemRes Toxicol 1994; 7: 23-28.

188. Nutter LM, Ngo EO, Abul-Hay YJ. Characterization of DNA damage induced by 3,4-estrone-o-quinone in human cells. J Biol Chem 1991; 266: 16380-16386.

189. Pike М, Bernstein L, Spicer D. Exogenous hormones and breast cancer risk. In: Current Therapy in Oncology. Neiderhuber J. (Ed). St. Louis, В. C. Decker 1993; pp. 292-302.

190. Решение комиссии от 15 апреля 1993 г., утверждающее арбитражные методы и перечень национальных арбитражных лабораторий по обнаружению остатков химических веществ //Official Journal L 118, 14.05.1993, р 75-79. (93/257/ЕЕС).

191. Rajah ТТ Pento JT. The mutagenic potential of antiestrogens at the HPRT locus in V79 cells. Res Commun Molec Path Pharmacol 1995; 89: 85-92.

192. Rao PN, Purdy RH, Williams MC, Moore PH Jr, Goldzieher JW, Layne DS. Metabolites ofestradiol-17 in bovine liver: Identification of the 17-D-glucopyranoside ofestradiol-17. J Steroid Biochem 1979; 10: 179-185.

193. Richold M. The genotoxicity of trenbolone, a synthetic steroid. Arch. Toxicol 1988;61:249-258.

194. Sato Y, Aizu-Yokota E. Natural estrogens induce modulation of microtubules in Chinese v hamster V79 cells in culture. In: Hormonal Carcinogenesis (JJ Li, SA Li, JA Gustafsson, S Nandi, L I Sekely, Eds.), Springer-Verlag, New York 1996: pp. 454-457.

195. Sato Y, Sakakibara Y, Oda T, Aizu-Yokota E, Ichinoseki K. Effect ofestradiol and ethinylestradiol on microtubule distribution in Chinese hamster V79 cells. Chem Pharm \BuU 1992; 40: 182-184.

196. Schiffmann D, Hieber L, Schmuck G, Pechan R, Metzler M, Henschler D. Trenbolone induces micronucleus formation and neoplastic formation in Syrian hamster embryo fibroblasts but not in mouse C3H10T1/2 cells. Arch Toxicol 1988; 62: 49-53.

197. Schnitizler R, Foth J, Degen GH, Metzler M. Induction of micronuclei by stilbene-type and steroidal estrogens in Syrian hamster embryo and ovine senfmal vesicle cells in vitro. Mutat Res 1994; 311: 85-93.

198. Seegers JC, Aveling M-L, Van-Aswegen CH, Cross M, Koch F, Joubert WS. The / cytotoxic effects of estradiol- 17J3, catecholestradiols and methoxyestradiols on dividing MCF-7 and HeLa cells. J Steroid Biochem. 1989; 32: 797-809.

199. Shimizu H, Ross PK, Bernstein L, Pike MC, Henderson BE. Serum oestrogen levels in postmenopausal women: comparison of American whites and Japanese in Japan. Br J Cancer 1990; 62: 451-453.

200. Shull JD, Spady TJ, Snyder MC, Johansson SL, Pennington KL. Ovary intact, but not ovariectomized, female ACI rats treated with 17p-estradiol rapidly develop mammary carcinoma. Carcinogenesis 1997; 18: 1595-1601.

201. Siiteri PK, Nisker JA, Hammond GL. Hormonal basis of risk factors for breast and \J enodmetrail cancer. Hormones and Cancer In: S lacobelli, RJB King, HR Lindner, ME Lippman (Eds), New York, Raven Press 1980; pp. 499-505.

202. Thibodeau PA, Bissonnette N, Kocsis Bedard S, Hunting D, Paquette B. Induction by estrogens of methotrexate resistance in MCF-7 breast cancer cells. Carcinogenesis, 1998; 19: 1545-1552.

203. Toniolo PG, Levitz M, Zeleniuch-Jacquotte A, Banerjee S, Koenig KL et al. A Prospective study of endogenous estrogens and breast cancer in postmenopausal women. J Nati Cancer Inst 1995; 87: 190-197.

204. Tsutsui T, Suzuki N, Fukuda S, Sato M, Maizumi H, McLachlan JA and Barett J. 17P-Estradiol-induced cell transformation and aneuploidy of Syrian hamster embryo cells in culture. Carcinogenesis 1987; 11: 1715-1719.

205. Tsutsui T, Suzuki N, Maizumi H, Barrett JC. Aneuploidy induction in human fibroblasts: comparison with results in Syrian hamster fibroblasts. Mutation Research 1990; 240: 241-249.

206. Zimmermann H, Koytchev R, Mayer 0, Borner A, Mellinger U, Breitbarth H. Pharmacokinetics of orally administered estradiol valerate. Results of a single-dose crossover bioequivalence study in postmenopausal women. Arzeimittelforschung 1998;48:941-7.

207. ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "МЕДИЦИНА. АНАЛИТИКА. ВЕТЕРИНАРИЯ."93 8800 5000 Группа Р31

208. НАБОР ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭСТРАДИОЛА-17в В ПРОДУКТАХ ЖИВОТНОГО РОИСХОЖДЕНИЯ МЕТОДОМ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО1. АНАЛИЗА (ИФА-АФ- ЭСТР.)1. ТЕХНИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ1. ТУ 9388-004-54919320-011. Вводятся впервые

209. Без ограничения срока действия1. Срок введения: ""2001 г.1. ОГЛАСОВАНО:сгор Всероссий^ арственно^о дователье оля, стан, фикацйи ре ратов ^а:н.2001 г.

210. ТЕХНИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ ТУ 9388-004-54919320-011. РАЗРАБОТЧИКИ:

211. Генеральный директор ООО '^Медащййа.Аналитика.Ветеринария.»1. Матрешин" июля 20Й г.

212. Зам. Генерального директора по науке ООО

213. Медицина. Аналитика.Ветеринария.» С^Су^К^^ Н.Г. Матрешина" июля 2001 г.

214. Директор ГУ Центральной научно-методической ветеринарной лаборатории Депаотамента ветеоинаони Минсельхоза1. У- " июля 2001 г.июля 2Шг.1. А.В. Белоусов

215. МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА ОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

216. Стандарты эстрадиола-17в калиброванные,шетная или желтоватая прозрачная жидкость:андарт,содержащий. 0 нг/мл 1 флгандарт,содержащий ОД нг/мл 1 фл-андарт,содержащий 0,5 нг/мл 1 фландарт, содержащий 2,5 нг/мл 1 фл-андарт,содержащий 12,5 нг/мл 1 фл

217. Калиброванный раствор, содержащий 1 фл

218. ГЛАВНЫЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСПЕКТОР РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИл ^п СС-П Т О /срр,107139, Москва. Орликов пер. 1/11. Для телеграмм: Москза. Телекс: (095) 975 53 50

219. Требования по предупреждению попадания гормональных стимуляторов роста и тиреостатиков в продукцию животного происхождения

220. Перечень веществ запрещенных к использованию в качестве стимуляторов роста

221. КЛАССЫ СОЕДИНЕНИЙ ЗАПРЕЩЕННЫЕ ВЕЩЕСТВА

222. СТИЛЬБЕНЫ Диэтилстильбэстрол, диенэстрол, гексоэстрол

223. ТИРЕОСТАТИКИ Тиоурацил,метилтиоурацил, пропилтиоурацил, фенилтиоурацил, тапазол

224. СТЕРОИДЫ 17в-эстрадиол, тестостерон, прогестерон, нандролон, а-нортестостерон, метилтестостерон, тренболон, болденон, станозолол этинилэстрадиол, медроксипрогестерон, мегестрол

225. Любые другие вещества, относящиеся к классам стильбенов, тиреостатиков и стероидов

226. Производители, продавцы и покупатели гормональных стероидных препаратов обязаны 1нить журнал учета в течении 5 лет.1абораторный контроль