Применение иммунобиологических реакций при выведении лейкозоустойчивых кур тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Семенов, Олег Анатольевич

• Семенов, Олег Анатольевич
• кандидат ветеринарных наук
• 1983

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Семенов, Олег Анатольевич

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. АНАЖТИЧЕСКИЙ ОБЗОР.

2.1. Вирусы лейкоз-саркомного комплекса птиц, их биологические и морфологические свойства, данные эпизотологии Г.

2.2. Основные методы диагностики лейкоза птиц

2.3. Меры борьбы. Принципы селекции кур на устойчивость к лейкозу.

3. МАТЕРИМ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Оценка хозяйственно-полезных признаков,отбор и воспроизводство устойчивой к лейкозу подопытной птицы.

3.2. Титрование, пассаж и хранение вирусов cap -комы Рауса (ВСР).

3.3. Реакция нейтрализации на культуре фиброблас-тов эмбрионов кур.

3.4. Реакция связывания комплемента (РСК)

3.5.-Реакция хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона на введение ВСР.

3.6. Патоморфология лейкоза птиц

4. СОДЕРЖАНИЕ И РЕЗУЛЬТАТЫ ВЫПОЛНЕННОЙ РАБОТЫ

4.1. Изучение влияния лейкоз-саркомного комплекса на хозяйственно-полезные признаки кур

4.2. Иммунно-биологическая характеристика исходного стада кур.

4.3. Отбор, воспроизводство и результаты исследований первых трех поколений птицы, полученной от кур свободных от антител и вирусов лейкоз-саркомы.

4.4. Результаты селекции на устойчивость к лейкозу подопытной птицы в генерациях сРо по Fs и сравнительная оценка устойчивости к лейкозу восьми чистых линий из генофонда станции и опытной птицы, результаты испытаний гибридных сочетаний с участием подопытной линии кур.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Применение иммунобиологических реакций при выведении лейкозоустойчивых кур»

Существенное повышение благосостояния трудящихся определено решениями последних ХХУ и ХХУ1 съездов КПСС как общая ориентация хозяйственного развития страны на длительную перспективу . Оосбое внимание, как указывалось на майском и ноябрь -ском (1982) Пленумах ЦК КПСС, обращено на обеспечение беспере -бойного снабжения населения продуктами питания и удовлетворения в них растущего спроса советских людей [з] . В решении этой за -дачи значительное место отводится птицеводству.

Основным путем дальнейшего повышения производства продуктов птицеводства по-црежнему остается целый комплекс мероприятий, существенным звеном которого является профилактика и ликвидация инфекционных болезней. В связи с интенсивным развитием промышленного птицеводства особое значение приобретает изучение проблемы лейкоза птиц.

За рубежом и в нашей стране нет ни одной промышленной породы и линии кур,свободной от заражения вирусами группы лейкоза-саркомы. Лейкозы животных и птиц приобрели в настоящее время общебиологическое значение и рассматриваются во взаимной связи с проблемой лейкозов человека.

Если говорить об экономическом ущербе, то он складывается из ущерба в результате гибели птицы, снижения и полного прекращения яйцекладки, вынужденной браковки, утилизации тушек и органов с лейкозными изменениями, недополучения молодняка, затрат на орга -низацию мероприятий по борьбе с лейкозом птиц.

Не менее важной является проблема спонтанной контаминации готовых вакцинных препаратов онкогенными вирусами. В частности, это касается живых вакцин, получаемых на развивающихся куриных эмбрионах или на эмбриональных тканевных культурах. Указанные субстраты могут быть инфицированы вирусами лейкоза-саркомы, которые широко распространены в птицеводческих хозяйствах, поставляющих инкубационное яйцо и птицу биопромышленности и вирусоло -гическим лабораториям научно-исследовательских институтов.

История развития отрасли науки, называемой теперь онковирусологией, началась на заре нашего века. В I909-II г.г. естественная саркома кур в виде гомогената и супернатанта опухолевой ткани была пассирована на здоровых курах, взятых из тех же хозяйств. Несмотря на то, что за прошедший период изучению вирусов лейко -за и саркомы Рауса было посвящено большое количество работ, очень многие вопросы остались неразрешенными.

К настоящему времени намечены пути борьбы с болезнями лей -коз-саркомной группы в 2-х направлениях. Одно из них сводится к строжашему соблюдению ветеринарно-санитарных правил в птицехозяй-ствах, но эффективность такого метода оставляет желать лучшего.

Второй путь - выведение линий, устойчивых к лейкозу. Возможность создания таких линий доказана давно в камеральных опытах с применением патоморфологических методов исследования. В условиях племенных хозяйств этот путь борьбы с лейкозом птиц с исполь -) зованием современных, методов исследования изучается с 1975 года по Государственной тематике (проблема 0.69.05).

Как известно лейкоз птиц сопровождается виремией или антите-лоносительством. Наличие вирусов обнаруживают с помощью иммунологических реакций: РИФ и КоФАЛ-тестов, реакции непрямой гемагглю-тинации (РИГА), метода флюоресцирующих антител. Антителоноситель-ство наблюдается чаще у птицы,зараженной вирусами лейкоза-саркомы контактным путем. Для установления носителей антител применяют реакцию нейтрализации на различных моделях и латекс-тест.

Относительно удобным методом контроля устойчивости птицы к лейкозу явился ХАО-тест, при котором учитывают дискретные поражения, образующиеся на хориоаллантоисной оболочке куриного эмбриона после инокуляции в эту полость вируса саркомы Рауса (ВОР). В данном случае по реакции эмбрионов потомства на заражение ВСР судят об устойчивости или восприимчивости родителей к лейкозу.

Сложность.этой работы заключается еще и в том, что селекция на устойчивость должна вестись с учетом значительного количества хозяйственно-полезных признаков.

В связи с изложенным были поставлены на разрешение следующие задачи:

- изучить эпизоотическое состояние птицы по лейкозу в экспериментальном хозяйстве Казахской ЗОСП с учетом линий кур, возраста, пола, форм проявления лейкоза, влияния болезни на яичную продуктивность и анализом убытков, которые несет хозяйство, неблагополучное по этой болезни;

- определить распространенность вирусов лейкоза-саркомы и антител к Him среди кур разных линий и выяснить их серотипы;

- установить уровень генетического потенциала стада кур по устойчивости к заражению вирусами лейкоз-саркомной группы:,

- отобрать исходную группу кур, для селекции на устойчивость;

- получить три первых генерации подопытной птицы для проверки возможности и целесообразности ее селекции на устойчивость к лейкозу;

- получить последующие (F^ -pg) генерации кур, стойко пере -дающие потомству признак генетической устойчивости к лейкозу и высокие хозяйственно-полезные признаки;

- выяснить возможность использования наиболее устойчивой линии кур в цромышленных скрещиваниях.

Научная новизна. Впервые в Казахстане проведена оценка эпизоотической ситуации по лейкозу яичных кур 8 линий. В течение ряда лет испытан комплекс диагностических тестов при оценке птицы на устойчивость к лейкозу. Путем использования индивидуальной оценки кур по иммуно-биологическим реакциям и хозяйственно-полезным признакам, нами впервые получено шесть генераций подопытной птицы, отселекционированной на устойчивость к лейкозу. При этом усовершенствован метод заражения куриных эмбрионов вирусом саркомы Рауса (ХАО-тест).

Определена чуствительность к вирусам лейкоз-саркомного комплекса птиц 8 линий и 16 гибридных сочетаний высокопродуктивных кур яичного направления. Установлено превалирующее влияние отца в передаче генетической устойчивости к лейкозу.

Практическая ценность. Установлено широкое распространение лейкоза среди линейной и гибридной высокопродуктивной птицы, оп-реде^йо преимущественное распространение вирусов лейкоза-саркомы серологических подгрупп А и В. Промышленному птицеводству и биологической промышленности предлагается:

- для получения инкубационного яйца выведенная нами лейкозо-устойчивая птица линии Р (название условное);

- метод использования петухов этой линии в качестве отцовской формы при промышленном скрещивании.

Основные положения^выносимые на защиту: оценка эпизоотической ситуации по лейкозу среди линейной птицы КЗОСП; влияние названного заболевания на продуктивные качества кур; возможность применения комплекса тестов при отборе лейкозоустойчивой птицы; получение ряда генераций птицы генетически устойчивой к лейкозу.

Материалы исследований включены в методические рекомендации:

Селекция яичных кур на устойчивость к лейкозу и способы содержания японских перепелов используемых для получения инкубационных яиц и эмбрионов, свободных от специфических возбудителей", утвержденные отделением ветеринарии ВАСХНИЛ 14 марта 1982 года.

Работа выполнялась в лаборатории иммунной генетики Казахской зональной опытной станции по птицеводству и является час -тью исследований, предусмотренных государственной тематикой по заданию 07.18 проблемы 0.69.05. и тематическими планами научно-исследовательских работ станции на 1975-1982 г.г.

Выражаю свою искреннюю благодарность за помощь и поддержку в работе кандидату ветеринарных наук Б.Н.Пугай и младшим науч -ным сотрудникам Г.В.Черкащенко, А.А.Асылхановой.

2. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Семенов, Олег Анатольевич

6. ВЫВОДЫ

1. Лейкоз в подавляющем большинстве случаев лимфоидной формы, диагностирован по линиям и сочетаниям линий в пределах от 14 до 28$ от общего количества павшей птицы. Наиболее часто боль -ные лейкозом куры гибли в 210-240-дневном возрасте. В среднем больная лейкозом птица жила до 260-315 дней.

2. Из больных лейкозом кур 32$ не откладывали яйца, а 68$ откладывали от 42 до 86 штук за период жизни. Сибсы больных лейкозом кур занимали промежуточное положение: за продуктивный период они откладывали от 90 до 170 яиц.

3. Экономический ущерб с учетом потерь яйца и мяса в среднем на одну несужу составил 15,85 недополученных рубля.

4. Группо-специфический антиген вирусов лейкоза-саркомы при исследовании кур общепользовательного стада выявляли в среднем у 33$ исследованных сывороток. Антитела к вирусам лейкоза-саркомы подгруппы А находили у 31,5$ кур, подгруппы В у 63,1$. Антитела к вирусам подгрупп С и Д не обнаружены.

5. На основе проведенного комплекса исследований в хозяйстве выделили четыре эпизоотические категории птицы: (А+В+), (А-В+), (А+В-) и (А-В-).

6. Из 22 селекционных семей гетерогенной популяции, прошедших полный цикл испытаний отобрали исходную (I"q) группу кур и петухов, имеющую фенотип с/АВ.

7. На устойчивость к лейкозу отселекционировали шесть генераций подопытной птицы общим числом более семи тысяч голов. Количество кур носителей антигена вирусов лейкоза-саркомы снизили с 13,8 до 0,33$, носительство антител к тем же вирусам снизили по подгруппе А с 11,3$ до 0,13$, по подгруппе В - с 10,4 до 0,3$. Для определения устойчивости к лейкозу по потомству заразили около 25 тысяч эмбрионов, в трех последних генераци -ях неустойчивых к заражению ассоциированным вирусом саркомы Рауса кур, практически не было.

8. Генеалогический анализ причин восприимчивости по 2127 потомкам, подтвердил генетическую природу предрасположенности к лейкозу их родоначальников.

9. Проверка на сочетаемость по признаку устойчивости к лейкозу подтвердила положение о том, что гибриды, полученные с использованием отселекционированной нами линии в качестве отцовской значительно устойчивее к заражению вирусом саркомы Рауса, чем потомство обратных сочетаний.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖИМ

1. Промышленному птицеводству и биологической промышлен -ности предлагается полученная лейкозоустойчивая линия птицы, условно названная "Р", а также использования ее в качестве отцовской формы при промышленном скрещивании.

2. Рекомендуется при выведении лейкозоустойчивой птицы использовать серологические реакции - реакцию нейтрализации (РН) на фибробластах эмбрионов кур (ФЭК) и реакцию связывания комплемента (РСК) в сочетании с индивидуальной оценкой устойчивости по потомству (ХАО-тест) с учетом зоотехнических показателей.

3. Селекцию линий птицы на устойчивость к лейкозу предлагается вести в соответствии с разработанными нами в соавторстве с исполнителями задания 06.03. проблемы 0.69.05. государственной тематики НИР, методическими рекомендациями: "Селекция яичных кур на устойчивость к лейкозу и способы содержания японских перепелов используемых для получения инкубационных яиц и эмбрионов свободных от специфических возбудителей", утвержденные отделением ветеринарии ВАСХНИЛ 14 марта 1982 года.

Заключение

В течение четырех последних генераций мы в общей сложности получили более пяти тысяч голов взрослой подопытной птицы. Все куры и петухи,отобранные в селекционные гнезда были проверены иммунно-биологическими реакциями на отсутствие вирусов лейкоза-саркомы и антител к ним. Параллельно с двумя последними генерациями подопытных кур проверяли в качестве контроля для сравнения с подопытными устойчивость чистолинейной птицы из генофонда станции.

При испытании на сочетаемость по признаку устойчивости проверяли 16 гибридных сочетаний в прямых и обратных скрещиваниях. Опыт провели в двух повторностях. Всего за этот период при проверке устойчивости подопытной, контрольной и гибридной птицы заразили 16 тысяч куриных эмбрионов. На протяжении четы рех генераций проанализировали генеалогические данные 2127 потомков, прошедших полный цикл испытания и происходящих от 16 петухов родоначальников. В результате этой работы мы пришли к выводу о том, что:

1. Процент кур-носителей антител квирусам серологических подгрупп А и В в Fg составил 2,7; в поколении F g он снизился до 0,13 и 0,30$, соответственно. В контроле количество носителей антител к ВОР составляло 12-15$.

2. В среднем по линиям кур антителоносительство снизилось за этот же период с 2,5 до 0,33$, в контроле этот средний показатель составил 5-6$ от исследованной птицы.

3. На ранних стадиях селекции на устойчивость к лейкозу в потомстве F g выделяли от 2 до 4$ неустойчивой к заражению ВСР птицы. В двух последних генерациях (Fg и Fg) случаев появления неустойчивой к лейкозу птицы не было. Последнее говорило о возможности выведения линейной птицы генотипа с/АВ с высокими зоотехническими показателями, устоышшой^ лейкоз-саркомной инфекции и достаточно стойко передающей эти качества по наследству.

4. Генеалогический анализ нескольких поколений птицы, предрасположенной к заболеванию лейкозом,дополнительно подтвердил генетическую природу этой предрасположенности. В данном случае отрицательные качества предрасположенности к заболеванию лейкозом передавались от отца к сыну (дочери), внуку (внучке) и правнуку и по задачам селекции такая птица подлежала браковке.

5. Опыты по проверке птицы на сочетаемость позволили сделать вывод о том, что гибриды,полученные от отцовской формы селекционируемой нами линии, дали более устойчивое к заражению ВСР потомство, чем любые обратные оочетания.

5. ОБСУДЩШЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

Как известно, лейкоз птиц распространен чрезвычайно широ -ко: его регистрируют во всех странах с развитым птицеводством, практически во всех хозяйствах и среди кур всех пород и линий.

Неблагополучные хозяйства несут значительный ущерб вследствие падежа, снижения яйценоскости и полного прекращения ее, браковки и утилизации тушек вынужденно убитой птицы, проведения карантинных мероприятий.

Общебиологическое значение лейкоза состоит в том, что для производства вакцин как для животных, так и для человека биопромышленность использует эмбрионы кур, являющиеся потенциальными источниками онкогенных вирусов.

Материалы по эпизоотологии лейкоза в нашей стране говорят о широком распространении и увеличении заболеваемости среди птицы в племенных и промышленных хозяйствах (Глазман М.Г., [49] ; Мухамедшин P. A. [5l] ; Лох В. А., 54 ; Зеленский В.П., [il, 52].

Актуальнейшим вопросом науки и практики является разработка эффективных, прижизненных методов диагностики, профилактики и, главное, борьбы с лейкозо-саркомной группой болезней птиц. Кардинальной задачей данной работы было получение подопытной птицы, которая бы на протяжении ряда поколений давала отрица тельные результаты по комплексу имлунно-биологических тестов, 1 была устойчивой к названной инфекции, имела высокие хозяйственно-полезные признаки и могла быть использована при промышленном скрещивании.

На первом этапе нашей целью являлось изучение эпизоотического состояния птицы по лейкозу в экспериментальном хозяйстве Казахской ЗОСП. В наши задачи входило изучить распространение этого заболевания в отдельных линиях в динамике возрастов;расхить влияние лейкоза на яичную продуктивность; провести анализ убытков и вскрыть перспективы работы по выведению устойчивой к лейкозу птицы. Исследования по селекционируемой на устойчивость к лейкозу птице вели в сравнении с клинически здоровой одновоз-растной птицей, т.е. с контролями к каждой группе подопытной птицы.

Результаты проведенных исследований показали, что лейкоз среди павшей птицы диагностировали в среднем от 14 до 28$ случаев, что зависело от линий и сочетаний, а гибель птицы от лейкоза происходила в основном в период с 6 до 13- месячного возраста и наиболее часто па 7-8 месяце жизни. При этом в 99,5$ случаев исследованной птицы диагностировали лимфоидный лейкоз.

При изучении яйценоскости у больных лейкозом кур установили, что 32$ такой птицы не несутся совсем, остальные 68$ откла дывают от 42 до 86 штук яиц. Яйценоскость одновозрастной здоровой (контрольной)птицы составляла 190-195 яиц. Полные сестры (сибсы) занимали промежуточное положение, откладывая за тот же период в среднем 125-130 яиц.

При анализе динамики яйцекладки отметили, что она прекратилась с 5 по 7-8 месяцы (не превышая 10-12 яиц в месяц) в последующие месяцы наступал'резкий спад, до 5 и менее яиц в месяц; последнее яйцо больная курица несла в промежутке между 250300 днем жизни.

Экономический ущерб рассчитывали, исходя из стоимости недополученного яйца и мяса, и он составил в среднем 15,85 недополученных рубля на каждую больную несушку.

Полученные результаты, о сроках проявления болезни, падеже, распространенности и т.д. во многом совпадает с данными таких исследователей как Л.Г.Бурба, f47,50] ; И.И.Касьяненко [180]и др.

По данным ВНИВИП и ДальБИВИ экономический ущерб от этого заболевания составляет 25-75 тыс.рублей на каждые 100 тыс. кур-несушек (Зеленский В.П. [б7); Галиулина Р.В., [I8l] ). '

Конечной целью в изучении лейкоза, как и всякой другой болезни, является разработка действенных мер борьбы. Одним из основных условий решения этой задачи является наличие совер -шенных методов прижизненной диагностики заболевания. Использование современных методов позволяет удалять из стад носителей активного вируса и антител. Одновременно можно осуществлять поиск индивидумов,свободных от патогенного агента и устойчивых к нему.

Главное свойство вирусов лейкоз-саркомной группы, используемое в диагностике, является наличие у них общего группо-специфического (ГС) комплемент связывающего антигена.

R. 4 Ei I baloi,, 9), У о Cjt 28] заложили основы серологической классификации вирусов лейкоз-саркомной группы. С помощью реакции нейтрализации и метода флюоресцирующих антител они установили различия поверхностных антигенов. В настоящее время из -вестно шесть серологических подгрупп вирусов А,В,С,Д,Е и7 .

Поверхностные штаглыо-специфические антигены вирусов лейкоз-саркомной группы обуславливают наличие двух феноменов "дефектности" и интерференции. Природа этих явлений описана av\c\|.u^c\ [23] , [l47] ^ , Vo<yt [20,30] .

Наличие вируса в крови наблюдается, в основном, у птицы,зараженной конгенитально. Такая птица в течение жизни является ви-русонопителем (

Н. eJt &JL. [l7] ) и у нее можно обна -ружить вирус с помощью иммунологических реакций: РИФ, кофал, РИГА, метода флуоресцирующих антител.

Для диагностики антителоносительства применяются: реакция нейтрализации и латекс-тест ( b^-A^^t ^ , [бз] , КиАоиЦ,

84], HfcCcUa. С. [85] ).

Существуют многочисленные методы, приемы и тесты оценки при проведении работ над резистентной птицей. Каждый из них имеет свои преимущества и свои недостатки.

В своей работе антителоносительство мы определяли в реакции нейтрализации на вторичной культуре фибробластов кур, реакция связывания комплемента, с применением унифицированного диагности-кума отдела лейкоза ВНИВИП, служила для индикации группоспецифического (ГС) антигена вирусов лейкоза-саркомы. Оценка производителей по потомству на устойчивость к лейкозной инфекции производилась путем заражения эмбрионов на хорионаллантоисную оболочку оттитрованной дозой вируса саркомы Рауса (ХАО-тест).

Применяя на первом этапе вышеперечисленные реакции,мы ставили перед собой цель, определить генетический потенциал стада по устойчивости к лейкозу, выяснить групповую принадлежность вирусов в хозяйстве с учетом линий, пола и возраста птицы. Отоб -рать наиболее продуктивных и отрицательно реагирующих по реакциям кур, для формирования исходной группы.

При определении группо-специфического антигена нами было исследовано 1229 голов кур общего стада. Был отмечен довольно' большой (до 33) процент его распространенности с пиком подъема в самые продуктивные месяцы жизни.

При определении распространенности типоспецифических антител мы пришли к выводу, что антителоносительство имеет место в. хозяйстве, однако ни в одном случае не обнаружены антитела к подгруппам С и Д, к подгруппе В процент их выявления доходил до 63,1, а к подгруппе А до 31,5$. Полученные результаты подтверждают данные литературы о различиях в распространенности вирусов и антител к ним. ( Sou c^SUr-cU Vtaf^o Ц.^32],

Wvua P. oJb oJL. [26,27] XU*u,woV. A ol, [l8s] ).

При определении генетического потенциала стада по.устойчивости, четырьмя штаммами вируса было заражено 1269 эмбрионов. Различные особи по разному реагировали на введения вируса их потомству, но полученные результаты позволили сделать вывод о возможности выявления кур дающих устойчивое потомство к наиболее распространенным вирусам подгрупп А и В.

Таким образом нами было выделено четыре эпизоотические категории птицы: (А+В-), (А-В+), (А+В+) и (А-В-), где А - анти -тела, В - вирус.

По мнению некоторых исследователей куры отнесенные к категориям (А+В+), (А-В+) и (А+В-) считаются виремичными. Они, как правило, передают вирус через яйцо, а птица с наличием антител в крови не всегда передает вирус своему потомству( t-nvlv^o, V ?

MtЬо« Й- [57]).

Птица, которая не содержит в крови вирусы лейкоз-саркомной группы и антител к ним (А-В-), считается относительно устойчивой к заражению вирусами лейкоза-саркомы.

Последующие наши исследования были направлены на отбор исходной группы кур и петухов выше названной эпизоотической ка-' тегории.

Для проведения работы была выбрана гетерогенная популя -ция, полученная методом панмиксии из двенадцати исходных линий белого леггорна канадского, японского, немецкого и голландского происхождения. Исследовалось 22 селекционных семьи прошедших полный цикл испытаний за 475 дней жизни. Показатели продуктивности были следующими: половая зрелость - 165 дней; возраст снесения 52 г яйца - 210 дней; яйценоскость на среднюю несушку за 475 дней жизни 218 шт.; масса яйца в 360 дней - 60,3 г;сохранность - 91,7$. После проведения исследований исходная группа Fq была создана и сформирована в II гнезд, от которых в свою очередь было отведено потомство F j в два тУРа ~ всего III3 голов молодняка.

Вторым важным этапом нашей работы мы считали получение первых поколений подопытной птицы, которые бы относились к эпизоотической категории А-В-, давали устойчивое к инфицированию вирусами лейкоза-саркомы потомство и имели достаточно высокие хозяйственно-полезные признаки.

Как, например, считает авторитетный исследователь [l84j контроль за безлейкозным стадом должен производиться реакцией нейтрализации сывороток крови вирусом саркомы Рауса,они же должны проверяться на отсутствие контаминации их вирусами лейкоз-саркомной группы в интервалы между первой и последующими генерациями.Этим проверяют стадо на его непрерывное благо -получие по лейкозу.

В результате проведенной работы от Fq нами было получено два поколения Fj и Fg в общей сложности 2190 голов молодняка. Все поголовье кур,поставленных на испытание было исследовано на наличие ГС-антигена и антител, эмбрионы собранные от кур индивидуально проверялись в ХАО-тесте (всего заражено 4092 эмбриона), был сделан пробный генеалогический анализ.

Полученные по трем генерациям результаты позволили говорить о нижеследующем. Что направленная селекция на устойчивость целесообразна и дает результаты уже во втором поколении. При этом процент кур антигеноносителей снизился ко второму поколению с 13,8 до 2,4$, а антителоносительство с 11,3 до 0,8 - к вирусам подгруппы А и с 10,4 до 1,6$ подгруппы В. Более чем в десять раз снизилось количество кур дающих неустойчивые, по реакции хорио-аллантоисной оболочки, эмбрионы. Как уже говорилось,был прове -ден пробный генеалогический анализ с целью определения передачи признака генетической устойчивости к лейкозу. Оценка произ -водилась на основании результатов анализируемого скрещивания. Всего в двух поколениях от четырех родоначальников было получено 249 потомков. Был сделан вывод, что устойчивость к заражению потомства Г2 всегда выше если отцов и матерей (Fj) отбирали от лучших родителей (Fq), оцененных в свою очередь по потомству.

Как уже указывалось, основой для разработки вопроса о создании устойчивых к лейкозу кур является ряд положений, изложенных в работах отечественных и зарубежных ученых: В.П.Зеленский (174, 162, 14б] , Б.П.Вдовин с соавт. [l75] , ft. CWU [9l] , 1 •5peck.[92] и др. Многие из которых высказывают мысль о том, что при создании устойчивой к заболеванию линии, прежде всего необходимо обеспечить условия для заражения, а затем использовать лучшие методы селекции для ускорения процессов аккумуляции генов контролирующих резистентность.

В соответствии с этим, условия заражения птицы вирусами лейкоз-саркомной группы должно контролироваться специфическими тестами диагностики. Таким образом, разработка методики создания устойчивой к лейкозу птицы начинается с выбора наиболее простых и одновременно точных тестов определения ее резистентности к заражению вирусами лейкоза-саркомной группы.

Как показали вышеизложенные результаты, выбранная нами методика дала положительные результаты уже в первых поколениях подопытной птицы. Поэтому, как мы считаем, следующим важнейшим этапом нашей работы было получение последующих генераций генетически наследующих полученные признаки с одновременным сохранением высоких зоотехнических показателей.

В процессе проведения этой работы нами было получено четыре поколения ( с Fg noFg) подопытной птицы. Хозяйственно-полезные признаки последней шестой представлены в таблице 5.1.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Семенов, Олег Анатольевич, 1983 год

1. Материалы ХХУ съезда КПСС. ГЛ.: Политиздат, 1976, 256с.

2. Материалы ХХУТ съезда КПСС. М.: Политиздат, 1981, 223с.

3. Материаы майского (1982 г.) Пленума ЦК КПСС. М.: Правда, 1982, 94с.

4. Касьяненко И.И., Иванов В.П. Болезнь Марека. Минск, Урожай, 1969,,с.13-18.

5. Зильбер Л.А. Вирусо-генетическая теория возникновения опухолей. -М.: Наука, 1968, с.38-42.

6. Иагила'^ W. Ьгл^гъа^е Чмъ Uevwvtv\l>> с\г.П/ ^гллta>M, 98. bun^MfeMsa^1. ГИ-1Ф6.9.b. (^-^vvi/vi^toM tl• СДОЛЛЪ VC\<TACVHCH

7. Y^ cUrt. . X, ^rvaw^ptavx-Vo^lc v^ltели^лм \!л aru^v*. X^^^^0 ^^O-^e, ^ Vcxuaim E1.. Зеленский В.П., Лейкозы птиц. В кн.: Сельхоз. производство нечерноземной зоны. - 1967, 8, с.27-28.

8. Vi^^o^ , \<bbS; лм, e льч-26. *tw cV^WJtlcVlwoi-o "tW- djct^cAXou олао\ cwTvcwi ^^л-ЛгоЛ^-б , —28. ^ЖимЛк ¥v.,Vo<$jfc ^ллсгйо^ ^ ooflau ^иимуъ УЬиЖоэд^ЦЬО, у. ^VV.

9. Кузнецов O.K. Размножение в культуре ткани вирусов лейкозо-саркомного комплекса птиц по данным реакции иммунофлоресценции и биологического титрования. В кн.: Распространение, вирусологияи иммунология лейкозов человека и животных. Рига, 1970, с.269-275.

10. Voijt 9. CVCfu(XV\ Ллллллоги ^ЧчмА3I< katWcW WU*4^ Ho^tU. ^сцА^^Ц "U cxva OWTI

11. C\u ^tu-Wv^A Лсх^схлл-К /с^Л: CX^-VOCAOAMJVI wrlV^v С\\Л елл^bbooujte. I^XKVAIC^A32. itie- W. W. felot. л\ы\. ,33. Voc^t

12. CNNTI^W NrV^tAA^^ ^ (Ltw^vicb v^^tuktlov^orc Tktiu*^- W. fc\Aa<M/te, , eA .UuW. ©^ IMc^ ; ^ .34. СпдНеллЛеи ^eWtlc1. Члл-Лг-^) vw4

13. Mjt^v^ivu^ \лл "t^e, t^ldce-M. "Ьо ал-ллvua V\im/>,"36. ^(X^jLXj A cU^J^vULw^ ил. Лл^Лса^яДлХ-'Ц "to

14. ЧлаГО uAvjjtd Ц- ^ovhjl^LC

15. U, ijt^ara^tlow 4 o^ck ^НллЛi , Quaut t, fe 3-, 9. W м 14 ,

16. Бите П. Комплекс лейкозов птщ. Сель/хоз. за рубежом, 1965, 6, с.44-52.

17. V. vfe, v^w Wwo\AT OJUVA. ^оиДА^гл^

18. Зильбер Л.A., Крюкова Й.Н. Гемморагическая болезнь крыс,вызванная вирусом саркомы кур. Вопросы вирусологии, 1957, 4,с.239.

19. Бурба Л.Г. Влияние возраста и пола на заболеваемость кур лейкозом. Тр. ВИЭВ, И., 1966, т.32, с.219-223.

20. Глазман М.Г. Гемобласты (лейкозы) кур их диагностика и ме -роприятия. -Советская ветеринария, 1936, 7, с.66-70.

21. Глазман М.Г. К вопросу о прижизненной диагностике лейкоза у кур. Тр. ВИЭВ, М.: 1940, т.15,с.98-101.

22. Бурба Л.Г., Дьяконова Е.В. Распространение лейкоза среди взрослых кур. Тр.: ВИЭВ, М., 1962, т.26, с.30-41.

23. Мухамедшин Р.А. Лимфоидный лейкоз кур в совхозе "Остров".-Материалы по профилактике и лечению болезней с/х животных и птиц, Лениздат, 1966, с.268-271.

24. Зеленский В.П. Лейкозы птиц и борьба с ними. Минск, Уро^ жай, 1966.

25. Лох В.А. Распространение лейкозов кур в селекционном стаде.-Сб.тр. ВНИИБП "Болезни птиц", 1968, 5(16), с.8-13.

26. Лох В.А. Материалы о распространении лимфоидного лейкоза и меры борьбы с ним в селекционном стаде кур. Дис.канд. вет.наук. Л., 1969, 130с.oW^WaaT, CWfUv» ОЛЛЛ. ^GXA^

27. И., Ссчм&ИЛиъ f), j^.a^^lo.'v Х.Т&лг, ^oA-et-си oj, eovu^vvl ~

28. Vu^cW^e. \\4TW Wn cwriavt WWw^ covuplax1. U^-JIAJO.uVjOVv-b- C\V\diWlcm

29. Валихов А. Реферативный журнал "Инфекционные болезни животных, лейкозы и опухолевые заболевания, болезни невыясненной этиологии. М., 1981, II, с.45.

30. Воронин Е.С. Дзагуров С.Г., Смирнова Н.Е.Морозов К.В., Еле-каев К.А. Серологические исследования некоторых видов дикой и домашней птицы на распространенность инфекционных и онкогенных вирусов птиц. Вопросы вирусологии, 1970, 2,с.213-217.

31. Стенли В. Вирусы и рак. В кн.: Вирусы, рак, иммунитет. М., 1965, с.206-212.64. vowbWu^. f)^ p^vA Д^гл^яА ) . S.l,

32. MkocW T^jl гелиозе. ojj. ou tlxJL

33. Бурба Л.Г. Лейкозы птиц. В кн.: Лейкозы и злокачественные опухоли животных. - Колос, М., 1977,с.258

34. Зеленский В.П. Итоги пятилетней работы по проблеме лейкоза птиц. Сб.трудов ВНИИБП "Лейкоз птиц". Л., 1971, 8 (19), с.13-38.

35. Зеленский В,П,, Пирог П.П., Погребняк Л.Л. Некоторые гематологические показатели при миелобластозе и саркоме кур Сб.трудов ВНИИБП "Болезни птиц". Л., 1965,1 (12), с. 68-72.

36. Гребенкин В.А., Лейкоз. В кн.: Болезни птиц. Алма-Ата,Кай-нар, 1975, с.98-99.

37. Зеленский В.П. Экономический ущерб, наносимый лейкозами птицеводству. Материалы по профилактике и лечению больных с/х животных. Л., 1968.

38. Овчинникова Е., Ремпель И., Борисенко С. Экономические потериот лейкозо-саркомных заболеваний кур в промышленных хозяйствах У Красноярского края.-Сб.трудов СибНИВИ.Омск,1980, 37,c.I69-I7I.72. К1. Я. 11. U vmW to UA^tUou

39. Вдовин Б.П. Опыты по серодиагностике лейкоза кур.-В кн.: Распространение, вирусология и иммунология лейкозов человека и животных. Рига, 1970, с.81-86.- 121 74. Hp*c,. I75.^4 I.la^ ^,, a., ^чим ^W^lXuWfe^ow аиД

40. W УгтпллЛ 4 (Xvrlavi Ы-ЧиШ76 /^-белЛЛчл^ . ЧЬгк^Ъ Л рд2Сл|л.с CWAVC^AA» мл. LrnmaVH, ^bbau^ort

41. Парнес В.А., Левина Д.М. Метод флуоресцирующих антител для выявления вируса миелобластоза в гетерологических клеточных системах. IX Международный конгресс по микробиологии.М.,1966,с.534-53580. 2wau- бичладАёъ ^ ъЧ W йЧл

42. CtCU^AxAC^ O^VvVl^oAU'b UVwO% Vix^btb AjtNTe^Om cJvlti^vib.-CAwat Ч\Ч v\'W скwc\ \Лл V\ VO Wiil/Wii.ЛА^ ^ VlUt^t^ujl ,- ovv c^uavavv,84. fi^tlu H. dj- te.fi/ с\лло\ ^o Ъл^сЫсм wrl^l» с\\пяииуллоч. b*eW, 11-lb.

43. UtvcW 4V WUn^cWvA^eM cUb -TtVU^

44. Вдовин Б.II., Зеленский В.П., Попова Л.С. Препарат для индикации антител к вирусам лейкоза-саркомы. Тр. ВНИТИП,1979,48,с. I0I-I04.

45. Алыптейн А.Д. .Воронин Е.С.Декочихина Е.А. Различия междуштаммами вируса саркомы Рауса,выявляемые в опытах на куриных эмбрионах.-Материалы межинстит,научн.конф.памяти Тарасевича.М.,1965,"53

46. Кравченко А.Т., Альштейн А.Д., Воронин E.G. и др. О резистентности куриных эмбрионов к вирусу саркомы Рауса.-Вопросы вирусологии, 1967, 4, с.464-470.

47. Попова Л.С.,3арецкая Л., Зеленский В.П. Выявление и идентификация вируса лимфоидного лейкоза. Сб.трудов ВНИТИП, 1978,т.46, с. 124-127.91.tUlvtw> 1 WL, АЧ&>, V4' «ьо .92. vou JWuWvpАЛАл UuWtvtiWWvL

48. Зеленский В.П., Зарецкая Л.И., Овчинникова Е.А. и др. Иммунобиологическая характеристика чувствительности кур разных пород и линий к вирусам лейкоз-саркомной группы. Сб. трудов ВНИТИП, Загорск, 1979, т.48, с.96-101.

49. Франгулян К.Ш. Эпизоотология лейкоза в птицехозяиствах Ар -мянской ССР. Сб.тр. ВНИТИП, Загорск, 1979,т.48,с.105-Ш.

50. Шиков А., Цымбал В., Лутохин С. Обнаружение и идентификация вирусов лейкозо-саркомного комплекса кур с помощью серологических тестов. Ветеринария, Киев, 1979, вып.50:, с.55-58.

51. Шиков А.Т., Лутохин С.И., Красников Г.А. и др. Лейкозо-сар-комный комплекс у кур. Ветеринария, 1981, 8, с.42-43.

52. Pft^vit U.^Wlu^ ОИ \X\t (х^^ОСлсЛ^о^Ь

53. Нейдбайлик И.Н., Зеленский В.П., Вдовин Б.П., Попова Л.С., Оганесян В.А. Течение инфекции у цыплят, зараженных вирусами эри-тробластоза и саркомы Рауса. Сб.трудов ВНИТИП, 1978, т.46,с.119-123,.

54. Вдевин Б.П., Попова Л.С., Методы ранней диагностики лейкоза птицы. Сб.трудов ВНИТИП, Загорск, 1981, т.52, с.68-74.

55. Попова Л.С., Корнилова А.Г., Тюфекчиева М.Ф. Сравнительная оценка результатов экспресс-диагностики лейкоза птиц. Сб.трудов ВНИТИП, 1980, т.49,с.84-88.

56. Воронин Е.С. Основы получения живых вирусных вакцин свободных от онкогенных контаминантов. Обзорная информация,М.,1981,7.

57. Кузнецов O.K., Вагнер И.Ф. Выявление последствий контактов человека с некоторыми распространенными в природе инфекционными и онкогенными РНК содержащими вирусы у больных раком людей. - В кн.: Вирусы рака и лейкоза, 1978, с.101-102.

58. Воронин Е.С. К вопросу онкологической безопасности живых вирусных вакцин, применяемых в ветеринарии. Сб.научн.тр. Теоретические и практические вопросы лейкозов и злокачественных опухолей сельскохозяйственных животных. -М., 1979, т. 107, с.82-87.

59. Левина Д.М., Париес В.А. Вирусы в онкологии. Рига, Зинатис, 1966, с.241-2481. CVwlvAf^toVx Ьм^йЛЛ-Ъ

60. Быковский А.Ф., Клицунова Н.В. Строение необычных (минимальных) форм онкорновирусов типа А и С.-ДАН СССР, 1975, т.224,ч.1 с. 226-227.

61. НО. Бикорюков А.А., Шубин Н.С., Корнильева А.Г. и др. Распространение вирусов лейкоза саркомы среди диких голубей и горлиц.«Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии.Владимир,1976,т.I,с.198

62. I. Воронин Е.С. Вирус саркомы Рауса и лейкоз птиц (применение вируса саркомы Рауса для индикации возбудителей лейкоза и подбора безлейкозной биологической системы птиц.-Автореф.дисс.доктора биол. наук. М., 1974.

63. Шахин Ю.Х. Изучение распространения вирусов лейкозов птиц и чувствительности к ним некоторых линий и пород кур.-Автореф.дисс. канд.вет.наук. М., 1979.

64. Спатарь Ф.В. Изучение некоторых вопросов лейкозо-саркоматоз-ного комплекса птиц в Молдавской ССР. Автореф. дисс.канд.вет. наук. Минск, 1980.

65. Бергольц В.М., Еремеев B.C. Лейкозы человека. Онкология. Лейкозы у животных и человека. М., 1977, т.9, с.47-126.

66. Шишков В.П. Лейкозы животных (сельскохозяйственных и домашних). Онкология. Лейкозы у животных и человека. М., 1977,т.9,с. 6-42.

67. Бергольц В.М., Румянцев Н.В. Сравнительная патология и этиология лейкоза человека и животных. М., 1966.

68. Хохлова М.Ф. О связи лейкозов человека и животных. -В кн.: Лейкозы и злокачественные опухоли животных. М.,Колос,1977, 307с.дЛ, ,JJLtdl., ft £Ъ, Vb>, S>. U Ь -M>4 .

69. W-UAA<>vW ^Л.^Лсг^ТС» ф^илц^иЦ Mjiactccu^ afciid (cdjwtji <4 -^jtVA^wWvlk tu\мУиГ Ca^tWL, Л р.ЫоЧ W ,cVytkitw , -CoiMli \®>Ч$ ,VT ; .

70. Афанасьев Я. Вакцина против лейкоза птиц. По материалам патентного ведомства США. РЖ. Ветеринария, 1972,9, 39с.

71. Емельянов H.И.Способы деконтаминации куриных эмбрионов.

72. Авторское свидетельство № 555667. Приоритет от 29 декабря 1973 года.

73. Емельянов Н.И. Применение кинетического анализа при оптимизации режимов термообработки куриных яиц для инактивации вирусов-контаминантов (на примере вируса саркомы Рауса).-Автореф.дисс. канд.биол. наук. М., 1979.1. UwA Vv\ \\a\MW-C IvhWc^ r

74. Т-гэиЛ WL сиД Ut^AV^r,^,^ ^М '^ог. 132 ^utt^U^ (joA^I o\ wv 3„ JVvujtvr ,

75. NfeW. . Ub v (\\ ,9. 4 ®>S .

76. Хатт Ф. Генетика животных (перевод с английского под ред. док. биол. наук Я.Л.Глембоцкого. -М., 1969, 429с.134. t-e^ WotU o\- ил^ги^аииг. c^ 'to 1и 135. feztxnjl^., WuH .tvlM 4 o-vfvtxw ^^o^^W^Jif136.1. Poutbfl Ш , 5Ц <? M Mb •

77. Ъычяъ^^ к^чW, /VUvm^vIW* С. (awc\ V^^tlfnll^ ioiU (xvrW В^лкл^лЛ U dvuWu^-feu^ti^H^^^f.'llO-lJll.

78. Бамбергер К. Лейкоз кур и болезнь Марека.-Ветеринария,1969, 7, 105с.

79. Колесникова Л. Очередность проведения исследований в области болезней домашней птицы.-Птицеводство,1980, 11,35с.

80. Дубинин П.П., Глембоцкий Я.Л. Генетика популяций и селекция. М.,Наука, 1967, 591с.

81. Пенионжкевич Э.Э. Тезисы докладов Всесоюзного симпозиума "Генетические основы селекции и гибридизации сельскохозяйственной птицы". -М., ВАСХНИЛ, 1971, с.5-10.

82. Душкин В.А. Классификация безлейкозных стад кур. -Ветеринария, 1973, 8, с.59-60.

83. Сюрин В.Н., Фомина Н.Ф. Частная ветеринарная вирусология.-М., Колос, 1979, с.197-205.1.5?lU Р.jWelcpvvvevA ©^ CVILWA Ч^АЛ^Л^Л ^С ^wi^otol Ъм

84. Зеленский В.П., Бизюкина А.Н., Рачковская А.А. и др. Роль наследственных факторов в генезе лейкоза птиц. Ветеринария,1977, I, с.58-60.147.^uiovw У. ^Згл/иАьс. оолло| гл&Ь*. Яла. ^длЛ^Н ь V

85. СаНиеЛб у^'гм^еЛ cv -аиллг*,^ o|. covu-ea-

86. J^oclc^ |oa ^v-bv't^Vcv^<u. аллД tu слс^им. ojf•имЬ-ъуЯ 1ч|*с£1©м . JVvTvCvaa % уЛХСЛОь , \<*> t i ( 4, f \04 - \U.

87. Коваленко А., Столяренко В. Некоторые вопросы селекции птицы на устойчивость к лейкозу.- Сб.Птицеводство,Киев,1978,25,с.8-12.

88. Коваленко А.Г., Столяренко В.П., Ливощенко Л.П. Пути повышения устойчивости птицы к инфицированию онкорнавирусами.-Научно-тех-нический бюллетень. Харьков, 1977, с.38-41.

89. Коваленко А.Г., Столяренко В.П. Селекционные приемы повышения резистентности птицы к заболеванию лейкозо-саркоматозного комплекса. Сб. Птицеводство, Киев, 1980, 29, с.7-9.

90. Столяренко В.П. Сравнительная оценка чувствительности эмбрионов кур различных линий и пород к вирусу саркомы Рауса. ВНИТИП. Сб.работ молодых ученых. М., 1970, XI, с.497-502.

91. Столяренко В.П. Изучение устойчивости различных линий и пород кур к вирусам группы лейкозов птиц. Автореф. дисс. канд. вет. наук. Харьков, 1970, 18с.

92. Ливощенко Л.П. Использование реакции нейтрализации и зара -жения эмбрионов для определения резистентности птицы к онкорна -вирусам. Автореф. дисс. канд. вет. наук. Л., 1979, 20с.

93. Столяренко В., Ливощенко Л., Коваленко А. Результаты се -лекции кур на устойчивость к неоплазмам. Птицеводство, Киев, 1981, 32, с.31-35.

94. Зеленский В.П., Перова Г., Васильева Т. Оценка кур на устойчивость к лейкозу. Ветеринария, 1981, 3, с.40-41.

95. Умняшкин В.Т., Воробьев С.А., Варакина Р.И. и др. К вопро -су о генетической устойчивости кур к лейкозу.- Сб, трудов ВНИТИП, Загорск, 1980, 49, с.70-78.

96. Тулев I0.B. Экспресс-метод определения чувствительности птиц к онкорновирусам. Ветеринария, 1981, II, с.28-30.

97. Тулев Ю., Федорова С., Виэру Е. Определения фенотипа к онУкорнавирусам мясных кур. Экспресс-информация "Передовой научно-производственный опыт в птицеводстве". М., 1980,3, с.33-35.

98. Тулев Ю., Федорова С., Виэру Е. Постановка биологическойпробы при селекции мясных кур на повышенную резистентность клейкозу. Экспресс-информация "Передовой научно-производственный опыт в птицеводстве". М., 1980, 3, с.35-37.

99. Cvt/ti&u cl ем UJi-MttL Ц- ^ -Ее (М0\Л СХ\Г\0м tuw^OT^

100. OvWUioc^ Сди^-Ъ ^Ц^Ь/НД^.ЯЭД-ЪО^.o\A ч^ь^оц.'У.Л "tb l-oun, iWxtux. ^Ы^/) >

101. Vat. J/al Сажени ,1^1,40,5,1. ЧАЧМЛ , )Ht>,.

102. X70. Pv*uuv*o vw^cUa vu^VM C^xajeAVO плл^Иоилси, ojf.1. Л to1. ФьоХ* (€>5- fWj172. ^oocIwua U/. Tive JiMvf(лмс1 ^«иоЬ!^^ iu ^l&ctlcw |o<tvoL^^cxUCLL Iм Hie Wc*^

103. Пенионжкевич Э.Э., Альтштейн А.Д., Воронин E.C. и др. Разработка методов отбора кур русской белой породы по устойчивости их к лейкозу. Сб.тр. ВНИТИП, 1967, 32, с.28-32.

104. Зеленский В.П., Зарецкая 1.И., Рогинова 1.И. и др. О возможности разведения кур русской белой породы, свободных от контаминации вирусами лейкоза. Сб.тр. ВНИИБП, I., 1971, 8 (19),с.56-60.

105. Вдовин Б.П., Зеленский В.П., Грачев Б.Н. К вопросу серодиагностики лейкоза кур. Сб.тр. ВНИИБП. Л., 1971, 8(19), с.91-97.

106. Васюков А.И., Видикшис А.В., Исследование РСК (кофал-тестом) сывороток крови кур из некоторых птицехозяйств. Сб.тр. ВНИИБП.

107. Л., 1971, 8(19), C.I09-II3.

108. Raa^vv£ ^Aujttie. чхл^аисх 0} +0 JlA W 2, нл,

109. Зеленский В.П. Диагностика лейкоза птиц и болезни Марека и меры борьбы с ними в Англии. МСХ СССР, ВНИИТЭИСХ, М.,1971,22с.

110. Зеленский В.П., Бикоргоков Б.II., Вдовин Б.П. и др. Временное наставление по лабораторной диагностике лейкоза птиц.-МСХ СССР, Птицепром СССР, I., 1975, 32с.

111. Касьяненко Т.И. Опухоли органов кроветворения.-В кн.: Пато-лого-анатомическая диагностика болезней птиц. М.,Колос,1978, с.304-329.